技术领域
[0001] 本
发明属于兽药制剂制备技术,具体涉及用泊洛沙姆407和油性介质为载体,制备含阿维菌素类药物的兽用长效注射剂。
背景技术
[0002] 泊洛沙姆为聚
氧乙烯-聚氧丙烯醚类共聚物,此类
聚合物有多种规格,其中泊洛沙姆407(以下简称P407)的
水溶液具有“随
温度升高由溶胶向凝胶转化的特性”,一定浓度的P407水溶液一般在30℃以上即发生胶凝,据此特性,P407被用于缓释注射剂的制备,该制剂被称之为原位胶凝制剂。含P407的原位胶凝注射剂注入体内后,在体温的作用下,一般在1分钟左右,即由溶胶转变为凝胶(半固体),药物被包裹在凝胶中,从而减缓了释药速率,使药效维持时间延长。文献和
专利公开的含P407的原位胶凝注射剂,其制剂的
溶剂为水,制剂中P407的浓度要达到20%以上才会有较好的缓释作用;在制剂中加入一定量的甲基
纤维素、羧甲基
纤维素钠、高取代羟丙基纤维素(H-HPC)或羟丙基甲基纤维素(HPMC)等阻滞剂,可增强缓释作用,但会导致制剂
粘度升高,使注射更加困难。
[0003] P407也是一种
水溶性很好的非离子
表面活性剂,更多的是被用于制备乳剂、乳膏剂、水性栓剂、滴丸剂等;P407也被作为难溶药物(水溶性很差的药物)的分散载体,用于制备
固溶体,已公开的用P407制备的固溶体,多是用于内服制剂的制备。
[0004] 本发明不同于已公开的技术,本发明是将药物与P407(或与P407和纤维素醚类)组成固溶体或其它形式的载药微粒(如附聚体),并用油性介质(十四烷酸异丙酯,以下简称IPM;注射用
植物油)替代水来制备含P407载药微粒的油质注射剂。本制剂注入动物皮下或肌内,载药微粒在“突破”油相
接触体液(水)后,借助于P407“吸水(体液)”或吸水溶胀(在HPMC或H-HPC存在时),“粘聚”在一起,在
注射部位形成高浓度与高粘度的、并具有“
生物粘附性”(在HPMC或H-HPC存在时)的半固体团
块,药物被包裹在团块中,从而有效的延长了释药时间。并且由于P407的分散作用,使难溶药物释药较完全,从而提高了疏水性药物的生物利用度,减少了注射部位药物残留。
[0005] 本发明涉及的药物为阿维菌素类药物,包括伊维菌素Ivermectin、阿维菌素Avermectin、乙酰胺基阿维菌素Eprinomectin、多拉菌素Doramectin、美贝霉素肟Milbemycin Oxime、莫西菌素Moxidectin。本实验显示,阿维菌素类药物都能与P407或与P407/HPMC(或H-HPC)组合成载药微粒,并分散于油性介质中,制备出优秀的缓释注射剂。以上阿维菌素类药物在兽医临床主要用于防治猪、
牛、羊等动物的
线虫病和体
外寄生虫病,它们的“性状、药理和用途”等在《兽药手册》(朱模忠主编,化学工业出版社,2002年7月第
1版,第167-174页)和公开文献中均有记载和描述。含阿维菌素类药物的市售注射剂,多数是用
有机溶剂(如1,2-丙二醇、N-甲基吡咯烷
酮、甲
醛缩甘油等)或人工合成的油酯类化合物为溶媒制备的溶液型制剂;文献或专利公开的含阿维菌素类药物的注射剂有溶液型制剂、混悬型制剂、乳剂、有含微球或微囊或含不同缓释载体(如聚乙烯吡咯烷酮、聚乳酸、丙交酯-乙交酯共聚物、乙酸异丁酸
蔗糖酯、氢化
蓖麻油、蓖麻油等)的长效注射剂。但含阿维菌素类药物/P407载药微粒或含阿维菌素类药物/P407/HPMC(或H-HPC)载药微粒的油质长效注射剂未见报道。
发明内容
[0006] 在本制剂中,药物与P407或药物与P407和HPMC(或H-HPC)组成载药微粒,并以载药微粒状态悬浮于油性介质中,因此,本制剂即不同于以水为介质含P407的原位胶凝制剂,也不同于传统的油质注射剂。本发明制剂组成和制备方法如下:
[0007] 制剂组成:本制剂主要由阿维菌素类药物、P407和油性介质组成。每升注射剂中含阿维菌素类药物25-100g、P40725-100g、油性介质加至1升。
[0008] 所述的阿维菌素类药物包括:伊维菌素Ivermectin、阿维菌素Avermectin、乙酰胺基阿维菌素Eprinomectin、多拉菌素Doramectin、美贝霉素肟Milbemycin Oxime、莫西菌素Moxidectin。这些阿维菌素类药物均已商品化,在《中国兽药典》和兽药手册及相关文献中均可查到。
[0009] 所述的油性介质为IPM、或注射用
大豆油或玉米油或茶籽油。
[0010] 在以上所述的每升注射剂中还可加入20-70g HPMC或H-HPC,HPMC或H-HPC需与P407组合成固溶体或与P407和阿维菌素类药物一起组成载药微粒,才能用于本制剂的制备。H-HPC在甲醇、
乙醇等低沸点有机溶剂中有很好的溶解性,阿维菌素类药物在这些低沸点有机溶剂中同样有很好的溶解性,这是H-HPC、P407、阿维菌素类药物三者能够组成一体,制备成载药微粒的重要
基础。
[0011] H-HPC和HPMC无毒、无药理作用,在生理活性上表现出极端惰性。HPMC、H-HPC或P407在IPM等油性介质中不溶,因此,将H-HPC或HPMC与P407组成微粒,即使以较高的浓度分散于油性介质中,也不会使制剂粘度明显升高,但含高浓度H-HPC或HPMC的载药微粒在注射部能吸水溶胀,形成高粘度的团块,高粘度的团块具有更强的阻滞(减缓)药物释放的作用,因此,根据要求,在载药微粒中添加适量的H-HPC和HPMC可达到预期的缓释效果。
[0012] 阿维菌素类药物在本制剂中以载药微粒状态存在,载药微粒是由阿维菌素类药物与P407组成,或与P407/H-HPC(或与P407/HPMC)组成。
[0013] 在阿维菌素类药物与P407组成的载药微粒中,其重量比为1∶0.5-1,载药微粒在制剂中的重量/体积百分比含量为5-20%,余量为油性介质。
[0014] 在阿维菌素类药物与P407和HPMC组成的载药微粒中,阿维菌素类药物、P407、HPMC三者的重量比为1∶0.5-1∶0.3-0.7,载药微粒在制剂中的重量/体积百分比含量为5.5-20%,优选的重量/体积百分比含量为8-16%,余量为油性介质。
[0015] 在阿维菌素类药物/P407/H-HPC组成的载药微粒中,阿维菌素类药物、P407、H-HPC三者的重量比为1∶0.5-1∶0.3-0.7,载药微粒在制剂中的重量/体积百分比含量为5.5-20%,优选的重量/体积百分比含量为8-16%,余量为油性介质。
[0016] 制备方法:归纳起来主要有以下两种。
[0017] (1)在加热条件下,将阿维菌素类药物与P407、或阿维菌素类药物与P407和HPMC、或阿维菌素类药物与P407和H-HPC一起用低沸点溶剂溶解,然后减压蒸馏,除去低沸点溶剂,得阿维菌素类药物/P407固溶体或阿维菌素类药物/P407/HPMC固溶体或阿维菌素类药物/P407/H-HPC固溶体;将制备的固溶体
粉碎过40目筛,得载药微粒;将载药微粒分散于部分油性介质中,用胶体磨
研磨至粒径小于100μm,再用砂磨机研磨至粒径小于20μm,加入剩余介质至终体积,用高剪切均质机在5000-10000rpm下进一步均质化即得本制剂。
[0018] (2)将阿维菌素类药物和P407或阿维菌素类药物和固溶体(P407/HPMC或P407/H-HPC)分散于部分油性介质中,用胶体磨和砂磨机研磨至粒径小于20μm,加入剩余介质,用高剪切均质机均质化即得本制剂。
[0019] P407/H-HPC或P407/HPMC固溶体制备:在加热条件下,将HPMC或H-HPC和P407溶于甲醇或溶于80%乙醇溶液中,混匀,在搅拌下减压除去溶剂即得。
[0020] 本制剂制备过程需在无菌条件下进行,研磨时物料温度不可超过40℃,制剂中固体微粒的粒径应小于20μm,以小于10μm较合适。
[0021] 本制剂特点归纳如下:
[0022] 本药剂释药过程不同于以水为介质的原位胶凝制剂,也不同于传统的油剂,主要不同之处是存在载药微粒“突破”油相与体液接触并吸水溶胀形成高粘度团块过程。
[0023] 将适量的H-HPC或HPMC与P407组成固溶体颗粒,分散于油相中,解决了单纯用H-HPC(或HPMC)包裹药物很难研磨成细微颗粒(小于20μm)的技术难题,同时保留了H-HPC和HPMC具有吸水溶胀,形成高粘度团块的特性。含药“团块”粘附于注射部位组织中,有利于药物更好的吸收,并且保证了一定程度的缓释效果,这是本剂具有生物利用度高,又有长效作用的基础。
[0024] 阿维菌素类药物几乎不溶于水,将阿维菌素类药物与P407组成固溶体应用,可减少注射位点药物残留量。
[0025] 用油性介质替代水制备含P407的缓释注射剂,可减少P407的用量,P407用量在5-10%时,制剂就有很好的缓释作用。以水为溶剂制备含P407的原位胶凝注射剂,P407的用量要达到20~45%,制剂才能显示出很好的缓释作用。目前国产P407价格较贵(医用级在160~200元/kg),因此,P407在制剂中用量越多,制备成本越高,不利于在兽医领域推广应用。
具体实施方式
[0027] 制剂组成:伊维菌素60g、P40750g、H-HMC45g、IPM加至1升。
[0028] 制备方法:(1)将P407于60-70℃融化,加入H-HMC混匀后加入约100ml甲醇,待H-HMC溶解后,加入伊维菌素,充分混匀,待伊维菌素溶解后,减压蒸馏,除净甲醇,冷却,
固化后粉碎,过40目筛,得含伊维菌素的载药微粒。(2)将载药微粒分散于部分IPM中,过胶体磨研磨至粒径小于50μm,进一步用砂磨机研磨,研至粒径小于20μm,加入剩余介质,用高剪切均质机在约5000rpm条件下,经多次均质化后,制得粒径小于20μm的伊维菌素注射剂。
[0029] 实施例2、制备3%阿维菌素注射剂
[0030] 制剂组成:阿维菌素30g、P40730g,注射用大豆油加至1升。
[0031] 制备方法:(1)将P407于60-70℃融化,加入阿维菌素和相当于阿维菌素4-5倍量的乙醇,充分混匀,使之溶解,冷却,固化后自然干燥,粉碎,过40目筛,得含阿维菌素的载药微粒。(2)将载药微粒分散于部分大豆油中,过胶体磨研磨至粒径小于100μm,进一步用砂磨机研磨,研至粒径小于20μm,加入剩余介质,用高剪切均质机在约5000rpm条件下,经多次均质化后,制得粒径小于20μm的阿维菌素注射剂。
[0032] 实施例3、制备9%乙酰胺基阿维菌素注射剂
[0033] 制剂组成:乙酰胺基阿维菌素90g、P40790g,注射用玉米油加至1升。
[0034] 制备方法:(1)将P407于60-70℃融化,加入乙酰胺基阿维菌素和相当于乙酰胺基阿维菌素3-5倍量的乙醇,回流溶解,减压蒸馏除去乙醇,冷却固化后粉碎,过40目筛,得含乙酰胺基阿维菌素的载药微粒。(2)将载药微粒分散于部分玉米油中,过胶体磨研磨至粒径小于100μm,进一步用砂磨机研磨,研至粒径小于20μm,加入剩余介质,用高剪切均质机在约5000rpm条件下,经多次均质化后,制得粒径小于20μm的乙酰胺基阿维菌素注射剂。
[0035] 实施例4、制备5%多拉菌素注射剂
[0036] 制剂组成:每100ml注射剂中含多拉菌素5g、P407/HPMC(2∶1)固溶体10g、茶籽油加至终体积。
[0037] 制备方法:将多拉菌素和固溶体分散于部分茶籽油中,用胶体磨和砂磨机研磨至粒径小于20μm,加入剩余介质,用高剪切均质机均质化即得本制剂。
[0038] 实施例5、8%乙酰胺基阿维菌素注射剂
[0039] 制剂包括乙酰胺基阿维菌素载药微粒160g,它是由80g乙酰胺基阿维菌素、45g泊洛沙姆407、35g HPMC组成;IPM加至1升。
[0040] 实施例6、8%伊维菌素注射剂
[0041] 制剂包括伊维菌素载药微粒160g,它是由80g伊维菌素、45g泊洛沙姆407、35g HPMC组成;IPM加至1升。
[0042] 实施例7、8%伊维菌素注射剂
[0043] 制剂包括伊维菌素载药微粒120g,它是由80g伊维菌素、40g泊洛沙姆407组成;IPM加至1升。
[0044] 实施例8、实施例1制剂和对比制剂在
绵羊体内的血药浓度测定
[0045] 对比制剂组成:对比制剂含伊维菌素超微颗粒6%、P4075%、H-HMC4.5%,注射用水加至100%。
[0046] 试验动物分组和试验结果:选健康绵羊10只,分成2组,每组5只,颈部皮下分别注射实施例1制剂和对比制剂,
给药剂量为1.2mg/kg b.w.,按时
采血,分离
血浆,并将同组同一时间的血浆样品混合后用乙腈提取,经离心、
净化(C18柱)、浓缩、衍生化等过程,制得检测样品,采用HPLC(
荧光检测仪)测定样品中伊维菌素含量。检测结果如下表所示: