可以将ATP的细胞表面受体分成促代谢型(P2Y/P2U)和离子型 (P2X)两类。促代谢型属于G蛋白偶联受体超家族，具有七个跨膜片 段。离子型成员(P2X1-P2X6)是配体门控型离子通道，目前其被认为是 每个亚基具有两个跨膜结构域的多亚基蛋白质(Buell等，Europ.J. Neurosci.8：2221(1996))。P2Z受体以三种主要方式区别于其它P2受 体(Buisman等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 85：7988(1988)；Cockcroft 等，Nature 279：541(1979)；Steinberg等J.Biol.Chem.262：3118 (1987))。第一，P2Z受体的活化不仅产生内向离子电流，而且导致细 胞透化。第二，3′-O-(4-苯甲酰基)苯甲酰基ATP(BZATP)为最有效的 激动剂，而ATP自身具有的效能相当低。第三，反应受到胞外镁离子 强烈抑制，这被解释为表明ATP4-是有效的激动剂(DiVirgilio， Immunol.Today 16：524(1995))。
已经从大鼠cDNA文库中分离了P2X受体家族中的第7个成员， 并且当在人胚胎肾(HEK293)细胞中表达时，其表现出上述三种特性 (Surprenant等，Science 272：735(1996))。该受体(rP2X7)由此相当于 P2Z受体。rP2X7在结构上与P2X家族中的其它成员相关，但它具有 更长的胞质C-末端结构域(在相应的同源性区域内具有35-40％氨基酸 同一性，而与其它受体中的27-20个氨基酸相比，在rP2X7受体中的 C-末端为239个氨基酸长度)。rP2X7受体作为可透过小阳离子的通道 和作为溶细胞孔起作用。就其它P2X受体而言，短暂应用ATP(1-2s) 暂时地开放了通道。反复或长时间应用激动剂导致细胞透化，降低胞 外镁浓度，强化了这种作用。rP2X7独特的C-末端结构域是细胞透化 和ATP裂解作用所需的(Suprenant等，Science 272：735(1996))。
P2Z/rP2X7受体涉及在人T淋巴细胞促有丝分裂刺激中以及多核 巨细胞形成中细胞毒性T淋巴细胞对抗原呈递细胞的裂解(Blanchard 等，Blood 85：3173(1995)；Falzoni等，J.Clin.Invest.95：1207(1995)； Baricolrdi等，Blood 87：682(1996))。在啮齿动物与人之间存在一定 的功能性差异(Hickman等，Blood 84：2452(1994))。目前已经克隆了 人巨噬细胞P2X7受体(P2X7)并且测定了其功能特性(Rassendren等， J.Biol.Chem.272：5482(1997)。当与大鼠P2X7受体比较时，人P2X7 受体中引起的阳离子选择性电流需要较高浓度的激动剂，更可通过除 去胞外镁离子而得到强化，并且在除去激动剂时更快地校正。嵌合分 子的表达表明，在大鼠与人P2X7受体之间的某些差异可以通过交换受 体蛋白各自的C-末端结构域而得到校正。
据报导某些化合物作为P2X7拮抗剂起作用。例如，WO99/29660 和WO99/29661中公开了某些金刚烷衍生物，其表现出在治疗类风湿 性关节炎和银屑病中具有治疗功效的P2X7拮抗活性。类似地， WO99/29686公开了某些杂环衍生物，其为P2X7受体拮抗剂并且可用 作免疫抑制剂和治疗类风湿性关节炎、哮喘、脓毒性休克和动脉粥样 硬化。最后，WO00/71529中公开了某些表现出免疫抑制活性的被取 代的苯基化合物。通过引用将本文所述的所有参考文献完整地并入本 文。
因此，对治疗剂和相应的药物组合物和相关的治疗方法存在需 求，它们致力于在原因上与异常P2X7活性相关的病症并且趋向于执行 和满足本发明所涉及的需求。

公开了作为治疗剂的式I-XIj的化合物及其药物组合物，其适用 于治疗哺乳动物中与P2X7受体不正常或异常活性相关的病症，该病症 包括炎症介导的病症，诸如(但不限于)关节炎，心肌梗死；治疗和预 防疼痛综合征(急性和慢性的[神经性的])，创伤性脑损伤，急性脊髓损 伤，神经变性病症，炎性肠病和免疫功能障碍，诸如自身免疫性障碍。
现已发现，本发明化合物能够调节P2X7受体的活性。该发现产 生了具有治疗价值的新化合物。还产生了含有本发明化合物作为活性 组分的药物组合物并且导致其在治疗、预防或改善哺乳动物的多种病 症中的应用，所述的病症诸如但不限于各种起源或病因的炎症(例如 类风湿性关节炎)，心脏血管疾病，炎性肠病，急性、慢性炎症和神 经性疼痛，牙痛和头痛(诸如偏头痛、丛集性头痛和紧张性头痛)和其 它原因上涉及炎症或免疫功能障碍的病症。
本发明的化合物还可用于治疗炎性疼痛和相关的痛觉过敏和异 常性疼痛。它们还可用于治疗神经性疼痛和相关的痛觉过敏和异常性 疼痛(例如三叉神经痛或带状疱疹神经痛，糖尿病性神经病，灼性神经 痛，交感维持性疼痛和传入神经阻滞综合征，诸如臂丛撕脱伤)。本发 明的化合物还可用作抗炎药，用于治疗关节炎，并作为用于治疗如下 病症的药剂：帕金森病，眼色素层炎，哮喘，心肌梗死，创伤性脑损 伤，脊髓损伤，神经变性病症，炎性肠病和自身免疫性障碍，肾障碍， 肥胖，进食障碍，癌症，精神分裂症，癫痫，睡眠障碍，认知，抑郁 症，焦虑，血压，脂质紊乱和动脉粥样硬化。
一方面，本发明提供化合物，该化合物可以是双环杂芳基化合物 并且能够调节体内P2X7受体的活性。另一方面，本发明的化合物能够 拮抗(阻抑或抑制)P2X7受体的活性且由此治疗那些原因上涉及异常 P2X7活性的有代表性的病症。
本发明的化合物可以表现出低毒性，良好的吸收性，良好的半衰 期，良好的溶解度，低蛋白质结合亲和力，低药物-药物相互作用，对 HERG通道低的抑制活性，低QT延长和良好的代谢稳定性。
因此，在本发明的第一方面，公开了能够调节体内P2X7受体活 性的化合物，它们具有式Ia或Ib：

其中
W是CR4；Z是CR4；
L1是单键，或C1-C2亚烷基，其未被取代或被烷基、氧代或羟基 烷基取代；
R1选自被取代的或未被取代的3-13元环烷基和被取代的或未被 取代的芳基；
R2’是H或Me；
R3选自羟基、氨基、烷基氨基和被取代的或未被取代的杂环烷基； 条件是当R3是羟基、氨基或烷基氨基时，那么L1不是键；
各R4独立地选自H、被取代的或未被取代的烷基、被取代的或 未被取代的烷氧基、氰基、被取代的或未被取代的环烷基、被取代的 或未被取代的环杂烷基、卤素和羟基；
R5选自被取代的或未被取代的烷基、被取代的或未被取代的烷氧 基、氰基、被取代的或未被取代的环烷基、被取代的或未被取代的环 杂烷基、卤素和羟基；
或其药学上可接受的盐、溶剂合物或前药；
及其立体异构体、同位素变体和互变异构体。
在关于式I化合物的另一个实施方案中，L1是-CH2CH2-。
在关于式I化合物的另一个实施方案中，L1是C2亚烷基，其被 选自Me、i-Bu和羟基甲基的基团取代。
在关于式I化合物的另一个实施方案中，R1是被取代的或未被取 代的芳基。在一个特殊的实施方案中，R1是被取代的苯基。
在关于式I化合物的另一个实施方案中，R1是被取代的或未被取 代的金刚烷基。
在关于式I化合物的另一个实施方案中，R1是被取代的或未被取 代的环丙基、环戊基、环己基或环庚基。
在一个实施方案中，就式I的化合物而言，R2’是H或Me。在另 一个实施方案中，R2’是H。
在关于式I化合物的另一个实施方案中，R3是-OH。在另一个实 施方案中，R3是NH2。在还另一个实施方案中，R3是被取代的氨基。
另一方面，本发明提供了包含本发明化合物和药用载体、赋形剂 或稀释剂的药物组合物。在本发明的该方面中，所述药物组合物可以 包含本文所述化合物中的一种或多种。此外，可用于本文公开的药物 组合物和治疗方法的本发明化合物在制备和使用时均是药学上可接受 的。
在本发明的另一个方面，本发明提供了治疗易患有或患有本文所 列出的那些病症中的病症的哺乳动物的方法，所述的病症特别是诸如 可能与例如以下病症相关的这类病症：炎症，诸如类风湿性关节炎， 骨关节炎，眼色素层炎，哮喘，心肌梗死，创伤性脑损伤；脓毒性休 克，动脉粥样硬化，慢性阻塞性肺疾病(COPD)，急性脊髓损伤，炎性 肠病和免疫功能障碍，包括自身免疫性疾病，该方法包括给予有效量 的上文所述药物组合物中的一种或多种。
在治疗方面的还另一种方法中，本发明提供了治疗易患有或患有 病症的哺乳动物的方法，所述的病症在原因上涉及异常P2X7受体活 性，并且例如产生疼痛反应或涉及感觉神经基础活性维持中的失衡。 本发明的胺化合物具有作为用于治疗各种起源或病因的疼痛的止痛药 的应用，所述疼痛例如急性、炎性疼痛(诸如与骨关节炎和类风湿性关 节炎相关的疼痛)；各种神经性疼痛综合征(诸如疱疹后神经痛，三叉 神经痛，反射性交感神经营养不良，糖尿病性神经病，格-巴 (Guillian-Barre)综合征，纤维肌痛，幻肢痛，乳房切除术后疼痛， 周围神经病，HIV神经病和化疗-诱发的神经病和其它医源性神经病)； 内脏痛(诸如与胃食管反流病，肠易激综合征，炎性肠病，胰腺炎和各 种妇科和泌尿科病症相关的内脏痛)，牙痛和头痛(诸如偏头痛、丛集 性头痛和紧张性头痛)。
在治疗方面的另外方法中，本发明提供了治疗易患有或患有病症 的哺乳动物的方法，所述的病症在原因上涉及P2X7受体的异常活性， 诸如神经变性疾病和病症，包括，例如帕金森病，多发性硬化；由神 经炎症介导的疾病和病症或导致神经炎症的疾病或病症，诸如，例如 创伤性脑损伤和脑炎；中枢介导的神经精神疾病和障碍，诸如，例如 抑郁症躁狂症，双相性精神疾病，焦虑，精神分裂症，进食障碍，睡 眠障碍和认知障碍；癫痫和癫痫发作症；前列腺，膀胱和肠功能障碍， 诸如，例如尿失禁，排尿犹豫，直肠超敏反应，大便失禁，良性前列 腺肥大和炎性肠病；呼吸和气道疾病和障碍，诸如，例如过敏性鼻炎， 哮喘和反应性气道病和慢性阻塞性肺病；由炎症介导或导致炎症的疾 病和障碍，诸如，例如类风湿性关节炎和骨关节炎，心肌梗死，各种 自身免疫性疾病和障碍，眼色素层炎和动脉粥样硬化；痒/瘙痒，诸如， 例如银屑病；肥胖；脂质障碍；癌症；血压；脊髓损伤；以及心血管 障碍和肾障碍，该方法包括给予有效治疗病症或预防病症的量的上文 所述药物组合物中的一种或多种。
在其它的方面，本发明提供了合成本发明化合物的方法，在下文 中公开了有代表性的合成方案和途径。
因此，本发明的主要目的在于提供一系列新的化合物，它们可以 改变P2X7受体的活性且由此防止或治疗任何原因上可能与之相关的 疾病。
本发明的另一个目的在于提供一系列可以治疗或缓解疾病或其 症状，诸如疼痛和炎症的化合物，所述的疾病在原因上可能与P2X7 受体的活化相关。
本发明的还一个目的在于提供药物组合物，它们在治疗或预防多 种疾病状态中是有效的，所述疾病状态包括与中枢神经系统相关的疾 病，心血管病症，慢性阻塞性肺疾病(COPD)，炎性肠病，类风湿性关 节炎，骨关节炎和其它存在炎性成分的疾病。
除了上述治疗方法以外，本发明延伸至本发明任意化合物用于制 备药物或作为药物的用途(可以给予所述药物用于所述治疗)，并且 延伸至用于所公开和说明的治疗的所述化合物。
考虑到随后的详细描述，其它目的和优点对本领域技术人员而言 是显而易见的。
发明详述
定义
打算使下列术语具有下文所述的含义并且这些术语在理解本法 本发明的说明和想要的范围中是有用的。
在描述所述化合物、包含该化合物的药物组合物和使用该化合物 和组合物的方法时，除非另有说明，下列术语具有下述含义。还应该 理解，当在本文中使用术语“基团”和“原子团”时，可以将它们认为是 可互换的。
本文中可能使用冠词“a”和“an”以指一个或指一个以上(即至少 一个)该定冠词的语法对象。举例来说，“类似物”意指一个或一个以上 类似物。
“酰基”意指基团-C(O)R20，其中，R20为如本文所定义的氢、烷 基，环烷基，环杂烷基，芳基，芳基烷基，杂烷基，杂芳基，杂芳基 烷基。有代表性的实例包括，但不限于甲酰基，乙酰基，环己基羰基， 环己基甲基羰基，苯甲酰基，苄基羰基等。
“酰氨基”意指基团-NR21C(O)R22，其中R21为如本文定义的氢、 烷基，环烷基，环杂烷基，芳基，芳基烷基，杂烷基，杂芳基，杂芳 基烷基且R22为氢、烷基，烷氧基，环烷基，环杂烷基，芳基，芳基 烷基，杂烷基，杂芳基或杂芳基烷基。有代表性的实例包括，但不限 于甲酰氨基，乙酰氨基，环己基羰基氨基，环己基甲基-羰基氨基，苯 甲酰氨基，苄基羰基氨基等。
“酰氧基”意指基团-OC(O)R23，其中R23为氢、烷基、芳基或环 烷基。
“被取代的链烯基”包括本文“被取代的”的定义中所述的那些基 团，且特别是指具有1个或多个取代基，例如1-5个取代基且特别是 1-3个取代基的链烯基，所述的取代基选自酰基、酰氨基、酰氧基、 烷氧基、被取代的烷氧基、烷氧羰基、烷氧羰基氨基、氨基、被取代 的氨基、氨基羰基、氨基羰基氨基、氨基羰基氧基、芳基、芳氧基、 叠氮基、羧基、氰基、环烷基、被取代的环烷基、卤素、羟基、酮基、 硝基、硫代烷氧基、被取代的硫代烷氧基、硫代芳氧基、硫代酮基、 巯基、烷基-S(O)-、芳基-S(O)-、烷基-S(O)2-和芳基-S(O)2-。
“烷氧基”意指基团-OR24，其中R24为烷基。示例性的烷氧基包 括甲氧基，乙氧基，正-丙氧基，异丙氧基，正-丁氧基和庚氧基。特 殊的烷氧基是低级烷氧基，即具有1至6个碳原子的烷氧基。
“被取代的烷氧基”包括本文“被取代的”的定义中所述的那些基 团，且特别意指具有1个或多个取代基，例如1-5个取代基且特别是 1-3个取代基的烷氧基，所述的取代基选自酰基、酰氨基、酰氧基、 烷氧基、被取代的烷氧基、烷氧羰基、烷氧羰基氨基、氨基、被取代 的氨基、氨基羰基、氨基羰基氨基、氨基羰基氧基、芳基、芳氧基、 叠氮基、羧基、氰基、环烷基、被取代的环烷基、卤素、杂芳基、羟 基、酮基、硝基、硫代烷氧基、被取代的硫代烷氧基、硫代芳氧基、 硫代酮基、巯基、烷基-S(O)-、芳基-S(O)-、烷基-S(O)2-和芳基-S(O)2-。
“烷氧羰基氨基”意指基团-NR25C(O)OR26，其中R25为氢、烷基、 芳基或环烷基，并且R26为烷基或环烷基。
“烷基”意指一价饱和烷基，特别是具有至多约11个碳原子的一 价饱和烷基，更特别具有1-8个碳原子的低级烷基，且还更特别是具 有1-6个碳原子的低级烷基。烃链可以为直链或支链。该术语由如下 基团举例说明：诸如甲基，乙基，正-丙基，异丙基，正-丁基，异-丁 基，叔-丁基，正-己基，正-辛基，叔-辛基等。术语“低级烷基”意指具 有1-6个碳原子的烷基。
“被取代的烷基”包括本文“被取代的”的定义中所述的那些基团， 且特别意指具有1个或多个取代基，例如1-5个取代基且特别是1- 3个取代基的烷基，所述的取代基选自酰基、酰氨基、酰氧基、烷氧 基、被取代的烷氧基、烷氧羰基、烷氧羰基氨基、氨基、被取代的氨 基、氨基羰基、氨基羰基氨基、氨基羰基氧基、芳基、芳氧基、叠氮 基、羧基、氰基、环烷基、被取代的环烷基、卤素、羟基、杂芳基、 酮基、硝基、硫代烷氧基、被取代的硫代烷氧基、硫代芳氧基、硫代 酮基、巯基、烷基-S(O)-、芳基-S(O)-、烷基-S(O)2-和芳基-S(O)2-。
“亚烷基”意指二价饱和烯烃基团，其具有1-11个碳原子，更具 特别地具有1-6个碳原子，其可以为直链或支链的。该术语以如下基 团为典型：诸如亚甲基(-CH2-)，亚乙基(-CH2CH2-)，亚丙基异构体(例 如-CH2CH2CH2-和-CH(CH3)CH2-)等。
“被取代的亚烷基”包括本文“被取代的”的定义中所述的那些基 团，且特别意指具有1个或多个取代基，例如1-5个取代基且特别是 1-3个取代基的亚烷基，所述的取代基选自酰基、酰氨基、酰氧基、 烷氧基、被取代的烷氧基、烷氧羰基、烷氧羰基氨基、氨基、被取代 的氨基、氨基羰基、氨基-羰基氨基、氨基羰基氧基、芳基、芳氧基、 叠氮基、羧基、氰基、卤素、羟基、酮基、硝基、硫代烷氧基、被取 代的硫代烷氧基、硫代芳氧基、硫代酮基、巯基、烷基-S(O)-、芳基 -S(O)-、烷基-S(O)2-和芳基-S(O)2-。
“链烯基”意指优选具有2-11个碳原子，特别是具有2-8个碳 原子且更特别是具有2-6个碳原子的一价烯族不饱和烃基，它们可以 为直链或支链的，并且具有至少1个，特别具有1-2个烯族不饱和位 置。具体的烯基包括乙烯基(-CH＝CH2)，正-丙烯基(-CH2CH＝CH2)， 异丙烯基(-C(CH3)＝CH2)，乙烯基和被取代的乙烯基等。
“亚烯基”意指特别具有至多约11个碳原子，更特别具有2-6个 碳原子的二价烯族不饱和烃基，它们可以为直链或支链的，并且具有 至少1个，特别具有1-2个烯族不饱和位置。该术语以如下基团为典 型：诸如亚乙烯基(-CH＝CH-)，亚丙烯基异构体(例如-CH＝CHCH2-和 -C(CH3)＝CH-和-CH＝C(CH3)-)等。
“炔基”意指特别具有2-11个碳原子，更特别具有2-6个碳原 子的炔属或炔族不饱和烃基，它们可以为直链或支链的，并且具有至 少1个，特别具有1-2个炔基不饱和位置。炔基的具体非限制性实例 包括炔属的，乙炔基(-C≡CH)，炔丙基(-CH2C≡CH)等。
“被取代的炔基”包括本文“被取代的”的定义中所述的那些基团， 且特别意指具有1个或多个取代基，例如1-5个取代基且特别是1- 3个取代基的炔基，所述的取代基选自酰基、酰氨基、酰氧基、烷氧 基、被取代的烷氧基、烷氧羰基、烷氧羰基氨基、氨基、被取代的氨 基、氨基羰基、氨基羰基氨基、氨基羰基氧基、芳基、芳氧基、叠氮 基、羧基、氰基、环烷基、被取代的环烷基、卤素、羟基、酮基、硝 基、硫代烷氧基、被取代的硫代烷氧基、硫代芳氧基、硫代酮基、巯 基、烷基-S(O)-、芳基-S(O)-、烷基-S(O)2-和芳基-S(O)2-。
本文所用的“烷酰基”或“酰基”意指基团R27-C(O)-，其中R27是如 上述定义的氢或烷基。
“芳基”意指通过从母体芳族环系的单一碳原子上除去一个氢原 子而衍生的一价芳族烃基。芳基可以是单环或双环的稠合环结构，其 中所述环中的至少一个是芳族环结构，该芳族环结构特别含有6个碳 原子。典型的芳基包括，但不限于衍生自如下的基团：醋蒽烯，苊， 醋菲烯(acephenanthrylene)，蒽，甘菊环，苯，草屈，晕苯，荧蒽， 芴，并六苯，己芬，hexalene，不对称引达省(as-indacene)，对称引达 省(s-indacene)，茚满，茚，萘，并八苯，octaphene，octalene，卵苯， 戊-2，4-二烯，戊省，并环戊二烯，二苯并菲，二萘嵌苯，非那烯，菲， 苉，七曜烯，芘，皮蒽，玉红省，苯并菲，三萘等。特别地，芳基包 含6-14个碳原子。特别地，芳基可以包含6个碳原子。示例性的芳 基包括苯基和茚满-1-酮。
“被取代的芳基”包括本文“被取代的”的定义中所述的那些基团， 且特别意指可以任选被1个或多个取代基，例如1-5个取代基且特别 是1-3个取代基取代的芳基，所述的取代基选自酰基、酰氨基、酰氧 基、链烯基、被取代的烯基、烷氧基、被取代的烷氧基，烷氧羰基， 烷基、被取代的烷基，炔基、被取代的炔基，氨基、被取代的氨基、 氨基羰基、氨基羰基氨基、氨基羰基氧基、芳基、芳氧基、叠氮基、 羧基、氰基、环烷基、被取代的环烷基、卤素、羟基、硝基、硫代烷 氧基、被取代的硫代烷氧基、硫代芳氧基、巯基、烷基-S(O)-、芳基 -S(O)-、烷基-S(O)2-和芳基-S(O)2-。
“稠合芳基”意指在其环碳中有两个与第二个芳基环或脂族环共 有的芳基。
“烷芳基”意指如上述定义地被一个或多个烷基取代的上述定义 的芳基。
“芳烷基”或“芳基烷基”意指如上述定义地被一个或多个芳基取 代的上述定义的烷基。
“芳氧基”意指-O-芳基，其中“芳基”如上述所定义。
“烷氨基”意指基团烷基-NR28R29，其中R28和R29各自独立地选 自氢和烷基。
“芳基氨基”意指基团芳基-NR30R31，其中R30和R31各自独立地 选自氢，芳基和杂芳基。
“烷氧基氨基”意指基团-N(H)OR32，其中R32表示如本文定义的 烷基或环烷基。
“烷氧羰基”意指基团-C(O)-烷氧基，其中烷氧基如本文所定义。
“烷基芳基氨基”意指基团-NR33R34，其中R33表示烷基或环烷基 和R34为如本文定义的芳基。
“烷基磺酰基”意指基团-S(O)2R35，其中R35为如本文定义的烷基 或环烷基。有代表性的实例包括，但不限于甲基磺酰基，乙基磺酰基， 丙基磺酰基，丁基磺酰基等。
“烷基亚磺酰基”意指基团-S(O)R35，其中R35为如本文定义的烷 基或环烷基。有代表性的实例包括，但不限于甲基亚磺酰基，乙基亚 磺酰基，丙基亚磺酰基，丁基亚磺酰基等。
“烷硫基”意指基团-SR35，其中R35为如本文定义的可以任选如本 文定义地被取代的烷基或环烷基。有代表性的实例包括，但不限于甲 硫基，乙硫基，丙硫基，丁硫基等。
“氨基”意指基团-NH2。
“被取代的氨基”包括本文“被取代的”的定义中所述的那些基 团，且特别意指基团-N(R36)2，其中R36各自独立地选自氢、烷基、被 取代的烷基、链烯基、被取代的链烯基、炔基、被取代的炔基、芳基、 环烷基、被取代的环烷基，并且其中两个R基团连接形成亚烷基。当 两个R基团均为氢时，-N(R36)2为氨基。
“氨基羰基”意指基团-C(O)NR37R37，其中R37各自独立地为氢、 烷基，芳基和环烷基或其中R37基团连接形成亚烷基。
“氨基羰基氨基”意指基团-NR38C(O)NR38R38，其中R38各自独立 地为氢、烷基、芳基或环烷基或其中两个R基团连接形成亚烷基。
“氨基羰基氧基”意指基团-OC(O)NR39R39，其中R39各自独立地 为氢、烷基、芳基或环烷基或其中R基团连接形成亚烷基。
“芳基烷氧基”意指-O-芳基烷基，其中芳基烷基如本文所定义。
“芳基氨基”意指基团-NHR40，其中R40表示如本文定义的芳基。
“芳氧羰基”意指基团-C(O)-O-芳基，其中芳基如本文所定义。
“芳基磺酰基”意指基团-S(O)2R41，其中R41为如本文所定义的芳 基或杂芳基。
“叠氮基”意指基团-N3。
“双环芳基”意指通过从母体双环芳族环系的单一碳原子上除去 一个氢原子衍生的一价芳族烃基。典型的双环芳基包括，但不限于衍 生自茚满，茚，萘，四氢萘等的基团。特别地，芳基包含8-11个碳 原子。
“双环杂芳基”意指通过从母体双环芳族环系的单一碳原子上除 去一个氢原子衍生的一价双环杂芳族烃基。典型的双环杂芳基包括， 但不限于衍生自如下的基团：苯并呋喃，苯并咪唑，苯并吲唑，苯并 二噁烷，色烯，色满，噌啉，酞嗪，吲哚，二氢吲哚，吲嗪，异苯并 呋喃，异色烯，异吲哚，异二氢吲哚，异喹啉，苯并噻唑，苯并噁唑， 萘啶，苯并噁二唑，蝶啶，嘌呤，苯并吡喃，苯并吡嗪，吡啶并嘧啶， 喹唑啉，喹啉，喹嗪，喹喔啉，苯并吗啡烷，四氢异喹啉，四氢喹啉 等。优选地，双环杂芳基为9-11元双环杂芳基，其中特别优选5-10 元杂芳基。具体的双环杂芳基为衍生自苯并噻吩，苯并呋喃，苯并噻 唑，吲哚，喹啉，异喹啉，苯并咪唑，苯并噁唑和苯并二噁烷的那些。
“氨基甲酰基”意指基团-C(O)N(R42)2，其中R42各自独立地为如 本文定义的氢、烷基、环烷基或芳基，其可以任选如本文定义地被取 代。在特殊的实施方案中，该术语“氨基甲酰基”是指-C(O)-NH2。在 可替代的实施方案中，“氨基甲酰基低级烷基”意指基团NH2CO-低级 烷基-。特别的氨基甲酰基低级烷基包括氨基甲酰基乙基和氨基甲酰基 甲基。
“羧基”意指基团-C(O)OH。
“羧基氨基”意指基团-N(H)C(O)OH。
“本发明的化合物”和等效的表述意指涵盖上文所述的化合物，尤 其是根据本文所陈述和/或描述的所述式中任一式的化合物，当上下文 如此允许时，该表述包括前药、药学上可接受的盐和溶剂合物，例如， 水合物。相似地，当上下文如此允许时，对中间体的提及，不管它们 本身是否被要求保护，意指涵盖它们的盐和溶剂合物。
“环烷基烷基”是指基团，其中用环烷基替代烷基的氢原子。典型 的环烷基烷基包括，但不限于，环丙基甲基，环丁基甲基，环戊基甲 基，环己基甲基，环庚基甲基，环辛基甲基，环丙基乙基，环丁基乙 基，环戊基乙基，环己基乙基，环庚基乙基，和环辛基乙基等。
“杂环烷基烷基”是指基团，其中用杂环烷基替代烷基的氢原子。 典型的杂环烷基烷基包括，但不限于，吡咯烷基甲基，哌啶基甲基， 哌嗪基甲基，吗啉基甲基，吡咯烷基乙基，哌啶基乙基，哌嗪基乙基， 吗啉基乙基等。
“卤代”或“卤素”意指氟(F)、氯(Cl)、溴(Br)或碘(I)。
“氢”在取代基上下文中意指所述化合物位置上存在-H，并且还包 括其同位素氘。
“低级烷酰基氨基”意指具有有机官能团R-CO-的氨基，其中R 表示低级烷基。
“低级烷氧基”意指线性烷基链中1至6碳原子，其可以是直链的 或支化的，并且其与氧原子结合。
“低级烷基磺酰胺”是指式-SO2NR＊R＊的磺酰胺的低级烷基酰胺， 其中R＊是氢或低级烷基，并且至少一个R＊是低级烷基。
“环烷基”意指具有3至约10个碳原子并且具有单环或多个稠合 环(包括稠合和桥连环系)的环状烃基，它们任选可以被1-3个烷基 取代。作为实例，这类环烷基包括：单环结构，诸如环丙基，环丁基， 环戊基，环辛基，1-甲基环丙基，2-甲基环戊基，2-甲基环辛基等；以 及多环结构，诸如金刚烷基等。具体的环烷基具有4至7个碳环成员， 例如环丙基，环丁基，环戊基，环己基和环庚基。
“被取代的环烷基”包括本文“被取代的”的定义中所述的那些基 团，且特别意指基具有1个或多个取代基，例如1-5个取代基且特别 是1-3个取代基的环烷基，所述的取代基选自酰基、酰氨基、酰氧基、 烷氧基、被取代的烷氧基、烷氧羰基、烷氧羰基氨基、氨基、被取代 的氨基、氨基羰基、氨基羰基氨基、氨基羰基氧基、芳基、芳氧基、 叠氮基、羧基、氰基、环烷基、被取代的环烷基、卤素、羟基、酮基、 硝基、硫代烷氧基、被取代的硫代烷氧基、硫代芳氧基、硫代酮基、 巯基、烷基-S(O)-、芳基-S(O)-、烷基-S(O)2-和芳基-S(O)2-。
“环烷氧基”意指基团-OR43，其中R43为环烷基。作为实例，这 类环烷氧基包括环戊氧基，环己氧基等。
“环烯基”意指具有3-10个碳原子并且具有单环或多个稠合环 (包括稠合和桥连环系)并且具有至少一个且特别是1-2个烯族不饱 和位置的环状烃基。作为实例，这类环烯基可以包括单环结构，诸如 环己烯基，环戊烯基，环丙烯基等。
“被取代的环烯基”包括本文“被取代的”的定义中所述的那些基 团，且特别意指基具有1个或多个取代基，例如1-5个取代基且特别 是1-3个取代基的环烯基，所述的取代基选自酰基、酰氨基、酰氧基、 烷氧基、被取代的烷氧基、烷氧羰基、烷氧羰基氨基、氨基、被取代 的氨基、氨基羰基、氨基羰基氨基、氨基羰基氧基、芳基、芳氧基、 叠氮基、羧基、氰基、环烷基、被取代的环烷基、卤素、羟基、酮基、 硝基、硫代烷氧基、被取代的硫代烷氧基、硫代芳氧基、硫代酮基、 巯基、烷基-S(O)-、芳基-S(O)-、烷基-S(O)2-和芳基-S(O)2-。
“稠合环烯基”意指其环碳原子中的两个与第二个脂族或芳族环 共有并且其烯族不饱和位置影响环烯基环的芳香性的环烯基。
“氰氧基”意指基团-OCN。
“氰基”意指基团-CN。
“二烷氨基”意指基团-NR44R45，其中R44和R45独立地表示如本 文定义的烷基、被取代的烷基、芳基、被取代的芳基、环烷基、被取 代的环烷基、环杂烷基、被取代的环杂烷基、杂芳基或被取代的杂芳 基。
“乙烯基”意指取代或未被取代的-(C＝C)-。
“亚乙基”意指取代或未被取代的-(C-C)-。
“乙炔基”意指-(C≡C)-。
“卤素”或“卤素”意指氟、氯、溴和碘。优选的卤素基团为氟或氯。
“羟基”意指基团-OH。
“硝基”意指基团-NO2。
“被取代的”意指基团，其中一个或多个氢原子各自独立地被相同 或不同取代基替代。典型的取代基包括，但不限于-X，-R46，-O-，＝O， -OR46，-SR46，-S-，＝S，-NR46R47，＝NR46，-CX3，-CF3，-CN，-OCN， -SCN，-NO，-NO2，＝N2，-N3，-S(O)2O-，-S(O)2OH，-S(O)2R46，-OS(O2)O-， -OS(O)2R46，-P(O)(O-)2，-P(O)(OR46)(O-)，-OP(O)(OR46)(OR47)， -C(O)R46，-C(S)R46，-C(O)OR46，-C(O)NR46R47，-C(O)O-、-C(S)OR46， -NR48C(O)NR46R47，-NR48C(S)NR46R47，-NR49C(NR48)NR46R47 和-C(NR48)NR46R47，其中各X独立地为卤素；R46，R47，R48和R49 各自独立地为氢、烷基、被取代的烷基、芳基、被取代的芳基、芳基 烷基、被取代的烷基、环烷基、被取代的烷基、环杂烷基、被取代的 环杂烷基、杂烷基、被取代的杂烷基、杂芳基、被取代的杂芳基、杂 芳基烷基、被取代的杂芳基烷基、-NR50R51、-C(O)R50或-S(O)2R50或 任选R50和R51与它们连接的原子共同构成环杂烷基或被取代的环杂 烷基环；且R50和R51独立地为氢、烷基、被取代的烷基、芳基、被取 代的烷基、芳基烷基、被取代的烷基、环烷基、被取代的烷基、环杂 烷基、被取代的环杂烷基、杂烷基、被取代的杂烷基、杂芳基、被取 代的杂芳基、杂芳基烷基或被取代的杂芳基烷基。
有代表性的被取代的芳基的实例包括如下：

在这些式中，R52和R53之一可以为氢且R52和R53中的至少一个 各自独立地选自烷基，链烯基，炔基，环杂烷基，烷酰基，烷氧基， 芳氧基，杂芳氧基，烷氨基，芳基氨基，杂芳基氨基，NR54COR55， NR54SOR55，NR54SO2R57，COO烷基，COO芳基，CONR54R55， CONR54OR55，NR54R55，SO2NR54R55，S-烷基，S-烷基，SO烷基， SO2烷基，S芳基，SO芳基，SO2芳基；或R52和R53可以连接成5- 8个原子的环状的环(饱和或不饱和的)，其任选包含一个或多个选自 N，O或S的杂原子。R54，R55和R56独立地为氢，烷基，链烯基，炔 基，全氟烷基，环烷基，环杂烷基、芳基、被取代的芳基、杂芳基、 被取代的或杂烷基等。
“杂”在用于描述化合物或存在于化合物上的基团时意指在该化 合物或基团上的一个或多个碳原子被氮、氧或硫原子替代。杂可以应 用于上述的任意烃基，诸如烷基，例如杂烷基，环烷基，例如环杂烷 基，芳基，例如杂芳基，环烯基，杂环烯基等，它们具有1-5个且尤 其是1-3个杂原子。
“杂芳基”意指通过从母体杂芳族环系的单一原子上除去一个氢 原子衍生的一价杂芳族基团。杂芳基可以是单环基团(在这种情况下， 它通常是5至7元环，更通常是5或6元环)，或者杂芳基可以是双 环杂芳基，尤其是稠合的环系，其包括2个稠合的5元环、稠合的5 和6元环，或2个稠合的6元环，其中杂芳基包括稠合的环，所述环 的至少一个应包含杂原子并且至少一个所述的环应该是芳香性的(在 相同的环中可以满足，也可以不满足上述两个条件)。例如，杂芳基 可以是5元或6元单环，其可以含有至多约4个杂原子，该杂原子通 常选自氮、硫和氧。通常，杂芳基环含有至多4个杂原子，更通常含 有至多3个杂原子，更通常至多2个杂原子，例如一个杂原子。在一 个实施方案中，杂芳基环含有至少一个环氮原子。杂芳基环中的氮原 子可以是碱性的(例如在咪唑或吡啶中)，或基本上是非碱性的(例 如吲哚或吡咯氮)。通常，杂芳基中存在的碱性氮原子的数目(包括 该环的任何氨基取代基)将小于5。典型的杂芳基包括，但不限于衍 生自如下的基团：吖啶，砷杂茚，咔唑，β-咔啉，色满，色烯，噌啉， 呋喃，咪唑，吲唑，吲哚，二氢吲哚，吲嗪，异苯并呋喃，异色烯， 异吲哚，异二氢吲哚，异喹啉，异噻唑，异噁唑，萘啶，噁二唑，噁唑， 萘嵌间二氮杂苯，菲啶，菲咯啉，吩嗪，酞嗪，蝶啶，嘌呤，吡喃， 吡嗪，吡唑，哒嗪，吡啶，嘧啶，吡咯，吡咯嗪(pyrrolizine)，喹 唑啉，喹啉，喹嗪，喹喔啉，四唑，噻二唑，噻唑，噻吩，三唑，呫 吨等。优选杂芳基为5-15元杂芳基，其中特别优选5-10元杂芳基。 具体的杂芳基为那些衍生自噻吩，吡咯，苯并噻吩，苯并呋喃，吲哚， 吡啶，喹啉，咪唑，噁唑和吡嗪的基团。尤其是，五元杂芳基的实例 包括但不限于吡咯、呋喃、噻吩、咪唑、呋咱、噁唑、噁二唑、噁三唑、 异噁唑、噻唑、异噻唑、吡唑、三唑和四唑基团。尤其是，六元杂芳 基的实例包括但不限于吡啶、吡嗪、哒嗪、嘧啶和三嗪。
有代表性的杂芳基的实例包括如下：

其中各个Y选自羰基，N，NR58，O和S；且R58独立地为氢、烷基， 环烷基，环杂烷基，芳基，杂芳基，杂烷基等。
本文所用的术语“环杂烷基”意指稳定的杂环非芳族环和稠合环， 其包含一个或多个独立地选自N，O和S的杂原子。稠合杂环系可以 包括碳环并且仅要求包括一个杂环。杂环的实例包括，但不限于哌嗪 基，高哌嗪基，哌啶基和吗啉基并且如下列例证性实例中所示：

其中各个X选自CR58，CR582，NR58，O和S；且Y各自选自NR58， O和S；且R58独立地为氢，烷基，环烷基，环杂烷基，芳基，杂芳 基，杂烷基等。这些环杂烷基环可以任选被一个或多个基团取代，所 述的基团选自酰基、酰氨基、酰氧基、烷氧基、被取代的烷氧基、烷 氧羰基、烷氧羰基氨基、氨基、被取代的氨基、氨基羰基、氨基羰基 氨基、氨基羰基氧基、芳基、芳氧基、叠氮基、羧基、氰基、环烷基、 被取代的环烷基、卤素、羟基、酮基、硝基、硫代烷氧基、被取代的 硫代烷氧基、硫代芳氧基、硫代酮基、巯基、烷基-S(O)-、芳基-S(O)-、 烷基-S(O)2-和芳基-S(O)2-。取代基团包括例如提供内酰胺和脲衍生物 的羰基或硫代羰基。
有代表性的环杂烯基的实例包括如下基团：

其中各个X选自CR58，CR582，NR58，O和S；且Y各自选自羰基， N，NR58，O和S；且R58独立地为氢、烷基，环烷基，环杂烷基，芳 基，杂芳基，杂烷基等。
具有杂原子的包含取代的有代表性的芳基的实例包括如下：

其中各个X选自CR582，NR58，O和S；且Y各自选自羰基，NR58， O和S；且R58独立地为氢、烷基，环烷基，环杂烷基，芳基，杂芳 基，杂烷基等。
“杂取代基”意指包含卤素，O，S或N原子的官能团，它可以作 为R4C基团中的R4存在，其作为直接位于本文提供的化合物的W或 Z上的取代基存在，或可以作为本发明化合物中存在的“被取代的”芳 基和脂族基团中的取代基存在。杂取代基的实例包括：
-卤素，
-NO2，-NH2，-NHR59，-N(R59)2，
-NRCOR，-NR59SOR59，-NR59SO2R59，OH、CN，
-CO2H，
-R59-OH，-O-R59，-COOR59，
-CON(R59)2，-CONROR59，
-SO3H，-R59-S，-SO2N(R59)2，
-S(O)R59，-S(O)2R59
其中各个R59独立地为芳基或脂族基团，其任选被取代。在包含R59 基团的杂取代基中，优选具有如本文定义的芳基和烷基R59基团的那 些。优选的杂取代基为上文所列举的那些。
“氢键供体”基团意指含O-H或N-H官能团的基团。“氢键供体” 基团的实例包括-OH，-NH2和-NH-R59a且其中R59a为烷基，环烷基， 酰基，芳基或杂芳基。
“二羟基磷酰基”意指基团-PO(OH)2。
“被取代的二羟基磷酰基”包括本文“被取代的”的定义中所述的 那些基团，且特别意指二羟基磷酰基，其中羟基之一或两个被取代。 合适的取代基如下文详细描述。
“氨基羟基磷酰基”意指基团-PO(OH)NH2。
“被取代的氨基羟基磷酰基”包括本文“被取代的”的定义中所述 的那些基团，且特别意指氨基羟基磷酰基，其中氨基被一个或两个取 代基取代。合适的取代基如下文详细描述。在某些实施方案中，羟基 也可以被取代。
“含氮的杂环烷基”基团意指4至7元非芳香族环状基团，其含有 至少一个氮原子，例如，但不限于，吗啉，哌啶(例如2-哌啶基，3- 哌啶基和4-哌啶基)，吡咯烷(例如2-吡咯烷基和3-吡咯烷基)，氮杂环 丁烷，吡咯烷酮，咪唑啉，咪唑烷酮，2-吡唑啉，吡唑烷，哌嗪和N- 烷基哌嗪类，例如N-甲基哌嗪。具体的实例包括氮杂环丁烷、哌啶酮 和哌嗪酮。
“硫烷基”意指基团HS-。“被取代的硫烷基”意指诸如RS-这类基 团，其中R为本文所述的任意取代基。尤其是，R是被取代的或未被 取代的烷基、被取代的或未被取代的芳基、或被取代的或未被取代的 杂芳基。
“亚磺酰基”是指二价基团-S(O)-。“被取代的亚磺酰基”是指基团 例如-SOR61a，其中R61a是本文中所述的任意取代基。尤其是，R61a是 被取代的或未被取代的烷基、被取代的或未被取代的芳基、或被取代 的或未被取代的杂芳基。
“氨基磺酰基”或“磺酰胺”是指基团H2N(O2)S-，并且“被取代的 氨基磺酰基”或“被取代的磺酰胺”是指基团例如R622N(O2)S-，其中各 R62独立地是本文中所述的任意取代基。
“磺酰基”意指二价基团-S(O2)-。“被取代的磺酰基”意指诸如 -S(O2)R61这类基团，其中R61为本文所述的任意取代基。尤其是，R61 是被取代的或未被取代的烷基、或被取代的或未被取代的芳基。
“氨基磺酰基”或“磺酰胺”意指基团H2N(O2)S-，且“被取代的氨基 磺酰基”“被取代的磺酰胺”意指诸如R622N(O2)S-这类基团，其中R62 各自独立地为本文所述的任意取代基。
“磺酰胺”是指含有化学基团-SO2NH2的化合物的基团。
“砜”意指基团-SO2R63。在特殊的实施方案中，R63选自低级烷基， 烷基，芳基和杂芳基。
“磺基”或“磺酸”是指基团例如-SO3H。
“被取代的磺基”或“磺酸酯”是指基团例如-SO3R61b，其中R61b是 被取代的或未被取代的烷基、或被取代的或未被取代的芳基。
“硫代烷氧基”意指基团-SR60，其中R60为烷基。
“被取代的硫代烷氧基”包括本文“被取代的”的定义中所述的那 些基团，且特别意指具有1个或多个取代基，例如1-5个取代基且 特别是1-3个取代基的硫代烷氧基，所述的取代基选自酰基、酰氨基、 酰氧基、烷氧基、被取代的烷氧基、烷氧羰基、烷氧羰基氨基、氨基、 被取代的氨基、氨基羰基、氨基羰基氨基、氨基羰基氧基、芳基、芳 氧基、叠氮基、羧基、氰基、环烷基、被取代的环烷基、卤素、羟基、 酮基、硝基、硫代烷氧基、被取代的硫代烷氧基、硫代芳氧基、硫代 酮基、巯基、烷基-S(O)-、芳基-S(O)-、烷基-S(O)2-和芳基-S(O)2-。
“硫代芳氧基”意指基团-SR64，其中R64为芳基。
“硫代酮基”意指基团＝S。
“巯基”意指基团-SH。
有机合成领域普通技术人员将认识到，在稳定的化学上可行的杂 环(无论其为芳族，还是非芳族)中的最大杂原子数均由环的大小， 不饱和度以及杂原子的化合价来决定。一般而言，杂环可以具有1-4 个杂原子，只要该杂环是化学上可行和稳定的。
“药学上可接受的”意指得到联邦或国家政府管理机构批准或列 入在美国药典或其它一般公认的用于动物且更具体地说是人的药典 中。
“药学上可接受的介质”意指与本发明化合物一起给予的稀释剂， 佐剂，赋形剂或载体。
“药学上可接受的盐”意指本发明化合物的无毒的、无机酸和有机 酸加成盐以及碱加成盐，尤其是，它们是药学上可接受的并且具有母 体化合物的所需药理学活性。这些盐可以在适用于本发明化合物中的 化合物的最后分离和纯化中原位制备。这类盐包括：(1)与无机酸或与 有机酸形成的酸加成盐，所述的无机酸诸如盐酸，氢溴酸，硫酸，硝 酸，磷酸等；所述的有机酸诸如乙酸，丙酸，己酸，环戊丙酸，乙醇 酸，丙酮酸，乳酸，丙二酸，琥珀酸，苹果酸，马来酸，富马酸，酒 石酸，柠檬酸，苯甲酸，3-(4-羟基苯甲酰基)苯甲酸，肉桂酸，扁桃酸， 甲磺酸，乙磺酸，1，2-乙-二磺酸，2-羟基乙磺酸，苯磺酸，4-氯苯磺 酸，2-萘磺酸，4-甲苯磺酸，樟脑磺酸，4-甲基双环[2.2.2]-辛-2-烯-1- 羧酸，葡庚糖酸，3-苯基丙酸，三甲基乙酸，叔丁基乙酸，十二烷基 硫酸，葡糖酸，谷氨酸，羟基萘甲酸，水杨酸，硬脂酸，粘康酸等； 或(2)在存在于母体化合物上的酸性质子被金属离子，例如碱金属离 子，碱土金属离子或铝离子取代时形成的盐；或与有机碱形成的配位 化合物，所述的有机碱诸如乙醇胺，二乙醇胺，三乙醇胺，N-甲基葡 糖胺等。仅作为实例，盐进一步包括钠盐，钾盐，钙盐，镁盐，铵盐， 四烷基铵盐等；且当化合物包含碱性官能团时，所述盐为无毒性的有 机或无机酸的盐，诸如盐酸盐，氢溴酸盐，酒石酸盐，甲磺酸盐，乙 酸盐，马来酸盐，草酸盐等。术语“药学上可接受的阳离子”意指酸性 官能团的无毒性可接受的阳离子的抗衡离子。这类阳离子以钠，钾， 钙，镁，铵，四烷基铵阳离子等为典型。
“前药”意指化合物(包括本发明化合物的衍生物)，它们具有可 裂解基团并且通过溶剂分解或在生理条件下变成在体内具有药物活性 的本发明化合物。这类实例包括但不限于胆碱酯衍生物等，N-烷基吗 啉酯类等。
“溶剂合物”意指适用于本发明化合物中的化合物与一个或多个 溶剂分子的物理结合。该物理结合包括氢键。在某些情况下，例如当 一个或多个溶剂分子结合在结晶固体的晶格中时，所述溶剂合物能够 分离。“溶剂合物”包括溶液相和可离析的溶剂合物。例如，本发明的 化合物可以制备成结晶形式并且可以使它们溶剂化或水化。例如，本 发明的化合物可以制备成结晶形式并且可以使它们溶剂化或水化。合 适的溶剂合物包括药学上可接受的溶剂合物，诸如水合物并且进一步 包括化学计算量的溶剂合物和非化学计算量的溶剂合物。常规的溶剂 包括水，乙醇，乙酸等，因此，代表性的溶剂合物包括水合物、乙醇 合物和甲醇合物。
“受试者”包括人和非人哺乳动物。术语“人”、“患者”和“受试者” 在本文中可以互换使用。
“治疗有效量”意指化合物被给予受试者用于治疗疾病时足以实 现对该疾病的所述治疗的量。“治疗有效量”可以根据化合物，疾病及 其严重性和所治疗受试者的年龄，体重等的不同而改变。
本发明化合物的其它衍生物呈其酸和酸衍生物形式时具有活性， 但呈酸敏感性形式时通常提供溶解度、组织相容性或在哺乳动物生物 体中延缓释放的优势(参见Bundgard，H.，Design of Prodrugs，pp. 7-9，21-24，Elsevier，Amsterdam 1985)。前药包括本领域技术人员 众所周知的酸性衍生物，诸如，例如通过使母体酸与合适的醇反应制 备的酯类或通过使母体酸化合物与取代或未被取代的胺反应制备的酰 胺类或酸酐类或混合酸酐类。衍生自存在于本发明化合物侧基上的酸 性基团的简单的脂族或芳族酯类，酰胺类和酸酐类为优选的前药。在 某些情况中，理想的是制备双酯型前药，诸如(酰氧基)烷基酯类或((烷 氧羰基)氧基)烷基酯类。特别是，本发明化合物的C1-C8烷基，C2-C8 链烯基，芳基，C7-C12被取代的芳基和C7-C12芳基烷基酯类。
“同位素变体”意指在构成这类化合物的原子的一个或多个上包 含非天然比例的同位素的化合物。例如，化合物的“同位素变体”可以 包含一个或多个非放射性同位素，诸如，例如氘(2H或D)，碳-13(13C)， 氮-15(15N)等。可以理解在制备这类同位素被取代的化合物中，如果存 在，那么下列原子可以改变，使得，例如任意的氢可以为2H/D，任意 的碳可以为13C或任意的氮可以为15N，并且在本领域技术人员技能范 围内可以测定这类原子的存在和布局。同样，本发明可以包括使用放 射性同位素制备同位素变体，在这种情况中，例如，其中所得化合物 可以用于药物和/或底物组织分布研究。放射性同位素氚，即3H和碳 -14，即14C因其易于掺入和简便的检测方式而特别适用于该目的。此 外，可以制备这类化合物，它们被正电子发射同位素，诸如11C，18F， 15O和13N取代并且可以用于研究底物受体占有率的正电子发射体层 摄影(PET)研究。打算将本申请提供的化合物的所有同位素变体(无 论是放射性的还是非放射性的)均包括在本发明的范围内。
还应理解，具有相同分子式，而性质或其原子键合顺序或其空间 排列不同的化合物称作“异构体”。在其原子空间排列上不同的异构体 称作“立体异构体”。
彼此为非镜像的立体异构体称作“非对映体”且彼此为不能重叠 的镜像的那些称作“对映体”。当化合物具有一个不对称中心时，例如 它键合4个不同的基团，可能存在一对对映体。对映体的特征在于其 不对称中心的绝对构型并且根据Cahn和Prelog的R-和S-排序规则描 述或通过分子旋转偏振光面的形式描述并且命名为右旋或左旋(即，分 别为(+)或(-)-异构体)。手性化合物可以作为单个对映体或作为其混合 物存在。包含等比例对映体的混合物称作“外消旋混合物”。
在本文中使用时，纯对映体化合物基本上不含该化合物的其它对 映体或立体异构体(即，以对映体过量的形式存在)。换句话说，“S”型 的化合物基本上不含该化合物的“R”型，并且因此是相对于“R”型的对 映体过量。术语“对映体纯的”或“纯对映体”表示该化合物包含大于 75％重量，大于80％重量，大于85％重量，大于90％重量，大于91％ 重量，大于92％重量，大于93％重量，大于94％重量，大于95％重 量，大于96％重量，大于97％重量，大于98％重量，大于98.5％重 量，大于99％重量，大于99.2％重量，大于99.5％重量，大于99.6％ 重量，大于99.7％重量，大于99.8％重量或大于99.9％重量的所述对 映体。在特定的实施方案中，所述重量基于所述化合物的所有对映体 或立体异构体的总重量。
在本文中使用时，并且除非另有说明，术语“对映体纯的R-化合 物”是指至少约80％重量的R-化合物和至多约20％重量的S-化合物， 至少约90％重量的R-化合物和至多约10％重量的S-化合物，至少约 95％重量的R-化合物和至多约5％重量的S-化合物，至少约99％重量 的R-化合物和至多约1％重量的S-化合物，至少约99.9％重量的R- 化合物或至多约0.1％重量的S-化合物。在特定的实施方案中，所述 重量基于化合物的总重量。
在本文中使用时，并且除非另有说明，术语“对映体纯的S-化合 物”或“S-化合物”是指至少约80％重量的S-化合物并且至多约20％重 量的R-化合物，至少约90％重量的S-化合物并且至多约10％重量的 R-化合物，至少约95％重量的S-化合物并且至多约5％重量的R-化合 物，至少约99％重量的S-化合物并且至多约1％重量的R-化合物或至 少约99.9％重量的S-化合物并且至多约0.1％重量的R-化合物。在特 定的实施方案中，所述重量基于化合物的总重量。
在本申请提供的组合物中，对映体纯的化合物或其药学上可接受 的盐、溶剂合物、水合物或前药可以与其它活性或无活性成分一起存 在。例如，包含对映体纯的R-化合物的药物组合物可以包含，例如， 约90％赋形剂和约10％对映体纯的R-化合物。在特定的实施方案中， 在该组合物中的所述对映体纯的R-化合物，例如，包含，至少约95％ 重量的R-化合物并且至多约5％重量的S-化合物，以该化合物的总重 量计。例如，包含对映体纯的S-化合物的药物组合物可以包含，例如， 约90％赋形剂和约10％对映体纯的S-化合物。在特定的实施方案中， 该组合物中的所述对映体纯的S-化合物可以，例如，包含，至少约95％ 重量的S-化合物并且至多约5％重量的R-化合物，以该化合物的总重 量计。在特定的实施方案中，可以将活性成分与很少的赋形剂或载体 一起配制，或不加赋形剂或载体配制。
“互变异构体”是指化合物，该化合物是特定化合物结构的可互换 形式，并且它们在氢原子和电子移位方面不同。因此，两种结构可以 通过π电子和原子(通常是H)的运动处于平衡中。例如，烯醇和酮是 互变异构体，因为通过用酸或碱处理可以使它们快速相互转化。互变 异构现象的另一个实例是苯基硝基甲烷的酸型形式和硝基形式，同样 可以用酸或碱处理形成它们。
互变异构形式可能与目的化合物的最佳化学反应性和生物活性 的获得有关。
本发明的化合物可以具有一个或多个不对称中心；这类化合物由 此可以作为单独的(R)-或(S)-立体异构体或作为其混合物产生。除非另 作陈述，否则本说明书和权利要求中具体化合物的描述或命名意指包 括其单独的对映体和混合物，外消旋物等。用于测定立体化学和分离 立体异构体的方法为本领域众所周知的。
“预防”意指为预防疾病而采取的措施。
“预防”或“预防”意指降低患疾病或病症的风险(即使得所述疾病 的临床症状中的至少一种不在可能接触或易感该病的受试者中发生， 并且也不经历或表现出该病的症状)。
在一个实施方案中，“治疗”或“治疗”任何疾病或病症意指改善该 病或病症(即阻止或减缓该病或其至少一种其临床症状的发展)。在另 一个实施方案中，“治疗”或“治疗”意指改善至少一种无法被受试者辨 别的物理参数。在另一个实施方案中，“治疗”或“治疗”意指在物理方 面(例如可辨别的症状的稳定化)，在生理方面(例如物理参数的稳定化) 或在它们两者的方面调节疾病或病症。在另一个实施方案中，“治疗” 或“治疗”意指延缓疾病或病症发作。
“治疗有效量”意指引发受试者的生物学反应或医学反应的药物 或药用物质的量，所述受试者正被医疗医生或其他临床医师研究。所 述“治疗有效量”可以根据化合物、疾病及其严重性和被治疗的受试者 的年龄、体重等而变化。
所述化合物
本发明提供可用于预防和/或治疗哺乳动物中宽范围的病症的化 合物，所述的病症与P2X7受体活性异常相关，其中有类风湿性关节炎， 帕金森病，眼色素层炎，哮喘，心血管病症诸如心肌梗死；治疗和预 防疼痛综合征(急性和慢性的或神经性的)，创伤性脑损伤，急性脊髓 损伤，神经变性病症，炎性肠病和免疫功能障碍，诸如自身免疫性疾 病或病症。
在本发明的第一个方面，公开了能够调节体内P2X7受体活性的 化合物，该化合物具有式Ia或Ib：

其中
W是CR4；Z是CR4；
L1是单键，或C1-C2亚烷基，其未被取代或被烷基、氧代或羟基 烷基取代；
R1选自被取代的或未被取代的3-13元环烷基和被取代的或未被 取代的芳基；
R2’是H或Me；
R3选自羟基、氨基、烷基氨基和被取代的或未被取代的杂环烷基； 条件是当R3是羟基、氨基或烷基氨基时，那么L1不是键；
各R4独立地选自H、被取代的或未被取代的烷基、被取代的或 未被取代的烷氧基、氰基、被取代的或未被取代的环烷基、被取代的 或未被取代的环杂烷基、卤素和羟基；
R5选自被取代的或未被取代的烷基、被取代的或未被取代的烷氧 基、氰基、被取代的或未被取代的环烷基、被取代的或未被取代的环 杂烷基、卤素和羟基；
或其药学上可接受的盐、溶剂合物或前药；
及其立体异构体、同位素变体和互变异构体。
在一个实施方案中，所述化合物是根据式Ia的化合物：

在另一个实施方案中，所述化合物是根据式Ib的化合物：

在关于Ia-Ib的一个实施方案中，R5选自烷基、被取代的烷基、 环烷基、被取代的环烷基和卤素。在一个特殊的实施方案中，R5选自 Me、环丙基、Cl、F和CF3。
在关于Ia-Ib的一个实施方案中，R5是Me。
在关于Ia-Ib的一个实施方案中，R5是CF3。
在关于Ia-Ib的一个实施方案中，R5是F。
在关于Ia-Ib的一个实施方案中，R5是Cl。
在关于Ia-Ib的一个实施方案中，R5是环丙基。
在关于式Ia或Ib化合物的另一个实施方案中，L1是-CH2CH2-。
在关于式Ia或Ib化合物的另一个实施方案中，L1是C2亚烷基， 其被选自Me、i-Bu和羟基甲基的基团取代。
在关于式Ia或Ib化合物的另一个实施方案中，L1是 -CH2C(Me)H-、-CH2CMe2-、-CH2C(i-Pr)H-、-CH2C(i-Bu)H-、 -CH2C(CH2OH)H-或-C(Me)HCH2-。
在关于式Ia或Ib化合物的另一个实施方案中，R1是被取代的或 未被取代的芳基。在一个特殊的实施方案中，R1是被取代的苯基。
在关于式Ia或Ib化合物的另一个实施方案中，R1是被取代的或 未被取代的金刚烷基。
在关于式Ia或Ib化合物的另一个实施方案中，R1是被取代的或 未被取代的环丙基、环戊基、环己基或环庚基。
在关于式Ia或Ib化合物的另一个实施方案中，R1是被取代的或 未被取代的螺[2.5]辛基或螺[3.5]壬基。
在关于式Ia或Ib化合物的另一个实施方案中，R1是二氟取代的 螺[2.5]辛基或二氟取代的螺[3.5]壬基。
在关于式Ia或Ib化合物的另一个实施方案中，R1是

在关于式Ia或Ib化合物的一个实施方案中，R2’是H或Me。在 另一个实施方案中，R2’是H。
在关于式Ia或Ib化合物的另一个实施方案中，L1不是键，并且 R3是-OH。在另一个实施方案中，L1不是键，并且R3是NH2。在还 另一个实施方案中，L1不是键，并且R3是被取代的氨基。
在关于Ia-Ib的一个实施方案中，所述化合物是根据式IIa或IIb 的化合物：

其中
W、Z、L1、R2’、R3、R4和R5如关于式Ia-Ib所定义；
各R4a独立地选自H、被取代的或未被取代的烷基、被取代的或 未被取代的酰基、被取代的或未被取代的酰基氨基、被取代的或未被 取代的烷基氨基、被取代的或未被取代的烷硫基、被取代的或未被取 代的烷氧基、被取代的或未被取代的烷氧羰基、被取代的或未被取代 的烷基芳基氨基、被取代的或未被取代的芳基烷氧基、被取代的或未 被取代的氨基、被取代的或未被取代的芳基、被取代的或未被取代的 芳基烷基、磺基、被取代的磺基、被取代的磺酰基、被取代的亚磺酰 基、被取代的硫烷基、被取代的或未被取代的氨基磺酰基、被取代的 或未被取代的烷基磺酰基、被取代的或未被取代的芳基磺酰基、叠氮 基、被取代的或未被取代的氨基甲酰基、羧基、氰基、被取代的或未 被取代的环烷基、被取代的或未被取代的环杂烷基、被取代的或未被 取代的二烷基氨基、卤素、杂芳氧基、被取代的或未被取代的杂芳基、 被取代的或未被取代的杂烷基、羟基、硝基和巯基；并且m选自0-5；
或其药学上可接受的盐、溶剂合物或前药；
及其立体异构体、同位素变体和互变异构体。
在关于式IIa或IIb的一个实施方案中，m是1、2或3。
在关于式IIa或IIb的一个实施方案中，m是1。
在关于式IIa或IIb的一个实施方案中，m是2。
在关于式IIa或IIb的一个实施方案中，各R4a是H。
在关于式IIa或IIb的一个实施方案中，各R4a独立地选自被取 代的或未被取代的烷基、卤素、CN、烷氧基、被取代的磺酰基、磺基、 被取代的磺基、被取代的或未被取代的苯基、或被取代的或未被取代 的杂芳基。
在关于式IIa或IIb的一个实施方案中，各R4a独立地选自被取 代的或未被取代的烷基和卤素。
在关于式IIa或IIb的一个实施方案中，m是2；并且各R4a独立 地选自被取代的或未被取代的烷基和卤素。
在关于式IIa或IIb的一个实施方案中，各R4a独立地选自Me、 Et、Ph、Cl、F、Br、CN、OH、OMe、OEt、OPh、COPh、CF3、 CHF2、OCF3、i-Pr、i-Bu、t-Bu、SMe、CH＝CH-CO2H、SOMe、 SO2Me、SO3H、SO3Me和吡啶基。
在关于式IIa或IIb的一个实施方案中，m是2；并且各R4a独立 地选自Me、Et、Ph、Cl、F、Br、CN、OH、OMe、OEt、OPh、 COPh、CF3、CHF2、OCF3、i-Pr、i-Bu、t-Bu、SMe、 CH＝CH-CO2H、SOMe、SO2Me、SO3H、SO3Me和吡啶基。
在关于式IIa或IIb的一个实施方案中，m是2；并且各R4a独立 地选自Me、Et、Cl、F、CF3和CHF2。
在关于式IIa或IIb的一个实施方案中，m是2；并且各R4a独立 地选自Me、Cl、F和CF3。
在关于式IIa或IIb的一个实施方案中，m是2；并且各R4a独立 地选自Cl、F和CF3。
在关于式Ia-Ib的一个实施方案中，所述化合物是根据式IIIa或 IIIb的化合物：

其中
W、Z、L1、R2’、R3、R4和R5如关于式Ia-Ib所定义；
Cy是金刚烷基、环己基或环庚基；m是0、1、2或3；并且各 R4b独立地选自H、C1-C4烷基、卤素和羟基；或当m是＞2，并且R4b 中的两个独立地是烷基时，那么它们结合在一起形成3-7原子的环烷 基环；
或其药学上可接受的盐、溶剂合物或前药；
及其立体异构体、同位素变体和互变异构体。
在关于式IIIa或IIIb的一个实施方案中，Cy是金刚烷基。
在关于式IIIa或IIIb的一个实施方案中，Cy是环庚基。
在关于式IIIa或IIIb的一个实施方案中，Cy是环己基。
在关于式IIIa或IIIb的一个实施方案中，m是0、1、2或3。
在关于式IIIa或IIIb的一个实施方案中，m是0。
在关于式IIIa或IIIb的一个实施方案中，m是1。
在关于式IIIa或IIIb的一个实施方案中，各R4b是H。
在关于式IIIa或IIIb的一个实施方案中，各R4b选自Me、Et、 Cl、F、OH、CF3、i-Pr、i-Bu和t-Bu。
在关于式IIIa或IIIb的一个实施方案中，m是1；并且R4b选自 C1-C4烷基、卤素和羟基。
在关于式IIIa或IIIb的一个实施方案中，m是1；并且R4b是 Me、Et或CF3。
在关于式IIIa或IIIb的一个实施方案中，m是1；并且R4b是 Me或Et。
在关于式IIIa或IIIb的一个实施方案中，m是1；并且R4b是 Cl或F。
在关于式IIIa或IIIb的一个实施方案中，m是1；并且R4b是 OH。
在关于式Ia-IIIb的一个实施方案中，R1选自

在关于式Ia-IIIb的一个实施方案中，W是CH。
在关于式Ia-IIIb的一个实施方案中，Z是CH。
在关于式Ia-IIIb的一个实施方案中，W和Z各自是CH。
在关于式Ia-IIIb的一个实施方案中，各R4独立地选自Me、 Et、Ph、Cl、F、Br、CN、OH、OMe、OEt、OPh、COPh、CF3、 CHF2、OCF3、i-Pr、i-Bu、t-Bu、SMe、CH＝CH-CO2H、SOMe、 SO2Me、SO3H、SO3Me和吡啶基。
在关于式Ia-IIIb的一个实施方案中，各R4独立地选自Me、Et、 CF3、CHF2、i-Pr、i-Bu和t-Bu。
在关于式Ia-IIIb的一个实施方案中，各R4独立地选自Cl和F。
在关于式Ia-IIIb的一个实施方案中，各R4独立地选自OH、 OMe、OEt、OPh和OCF3。
在关于式Ia-IIIb的一个实施方案中，各R4独立地选自SMe、 SOMe、SO2Me、SO3H和SO3Me。
在关于式Ia-IIIb的一个实施方案中，W是CR4并且R4选自 Me、Et、Ph、Cl、F、Br、CN、OH、OMe、OEt、OPh、COPh、 CF3、CHF2、OCF3、i-Pr、i-Bu、t-Bu、SMe、CH＝CH-CO2H、 SOMe、SO2Me、SO3H、SO3Me和吡啶基。
在关于式Ia-IIIb的一个实施方案中，Z是CR4并且R4选自Me、 Et、Ph、Cl、F、Br、CN、OH、OMe、OEt、OPh、COPh、CF3、 CHF2、OCF3、i-Pr、i-Bu、t-Bu、SMe、CH＝CH-CO2H、SOMe、 SO2Me、SO3H、SO3Me和吡啶基。
在关于式Ia-IIIb的一个实施方案中，W是CR4并且R4选自 Me、Et、Ph、Cl、F、Br、CN、OH、OMe、OEt、OPh、COPh、 CF3、CHF2、OCF3、i-Pr、i-Bu、t-Bu、SMe、CH＝CH-CO2H、 SOMe、SO2Me、SO3H、SO3Me和吡啶基；以及Z是CH。
在关于式Ia-IIIb的一个实施方案中，Z是CR4并且R4选自Me、 Et、Ph、Cl、F、Br、CN、OH、OMe、OEt、OPh、COPh、CF3、 CHF2、OCF3、i-Pr、i-Bu、t-Bu、SMe、CH＝CH-CO2H、SOMe、 SO2Me、SO3H、SO3Me和吡啶基；以及W是CH。
在关于式Ia-IIIb化合物的一个实施方案中，R2’是H或Me。在 另一个实施方案中，R2’是H。在另一个实施方案中，R2’是Me。
在关于式Ia-IIIb的一个实施方案中，R3选自羟基、氨基和烷基 氨基。
在关于式Ia-IIIb的一个实施方案中，R3是被取代的或未被取代 的杂环烷基。
在关于式Ia-IIIb的一个实施方案中，所述基团-L1-R3选自

在关于式Ia-IIIb的一个实施方案中，所述基团-L1-R3选自

在关于式Ia-IIIb的一个实施方案中，所述基团-L1-R3选自

在关于式Ia-IIIb的一个实施方案中，所述基团-L1-R3选自

其中R3a是OH、NHMe或NH2。
在本文中出现时，可以从用结构描述所述基团-L1-R3。在该情况 下，下图中显示的较长的键旨在表示在L1-R3基团及其与核心结构的 连接点之间的键。例如，当-L1-R3是
时，
它通过较长的键与核结构连接，并且得到的结构为下文关于示例 性的式Ic或Id所述：

包含-L1-R3基团的给出的分子的具体结构和构象可以变化，并且 提供前面的描述是为举例说明而不以限制为目的，以及为了满足实现 本发明的最佳实施方式的要求。
在一个实施方案中，R3a是OH。在另一个实施方案中，R3a是 NHMe。在还另一个实施方案中，R3a是NH2。
在关于式Ia的一个实施方案中，所述化合物是根据式IVa、 IVb、IVc、IVd、IVe、IVf、IVg或IVh的化合物：

其中各R4a独立地选自氢、烷基、被取代的烷基、被取代的或未 被取代的烷氧基、氰基、卤素和羟基；并且m选自0-5；并且R5选自 烷基、环烷基或卤素。
在关于式Ib的一个实施方案中，所述化合物是根据式Va、 Vb、Vc、Vd、Ve、Vf、Vg、Vh、Vi或Vj的化合物：

其中各R4a独立地选自氢、烷基、被取代的烷基、被取代的或未 被取代的烷氧基、氰基、卤素和羟基；并且m选自0-5；并且R5选自 烷基、环烷基或卤素。
在关于式Ia的一个实施方案中，所述化合物是根据式VIa、 VIb、VIc、VId、VIe、VIf、VIg、VIh、VIi或VIj的化合物：

其中各R4a独立地选自氢、烷基、被取代的烷基、被取代的或未被取 代的烷氧基、氰基、卤素和羟基；并且m选自0-5；并且R5选自烷基、 环烷基或卤素。
在关于式Ib的一个实施方案中，所述化合物是根据式VIIa、 VIIb、VIIc、VIId、VIIe、VIIf、VIIg、VIIh、VIIi或VIIj的化合 物：

其中各R4a独立地选自氢、烷基、被取代的烷基、被取代的或未 被取代的烷氧基、氰基、卤素和羟基；并且m选自0-5；并且R5选自 烷基、环烷基或卤素。
在关于式IVa-VIIj的一个实施方案中，m是5并且各R4a是H。
在关于式IVa-VIIj的一个实施方案中，m是1或2。
在关于式IVa-VIIj的一个实施方案中，m是2。
在关于式IVa-VIIj的一个实施方案中，各R4a独立地选自烷基、 被取代的烷基、被取代的或未被取代的烷氧基、氰基、卤素和羟基。
在关于式IVa-VIIj的一个实施方案中，m是1；并且R4a选自烷 基、被取代的烷基、被取代的或未被取代的烷氧基、氰基、卤素和羟 基。
在关于式IVa-VIIj的一个实施方案中，m是1；并且R4a选自烷 基和被取代的烷基。
在关于式IVa-VIIj的一个实施方案中，m是1；并且R4a选自 Me、Et、i-Pr和CF3。
在关于式IVa-VIIj的一个实施方案中，m是1；并且R4a是卤素。 在另一个实施方案中，R4a是Cl。在还另一个实施方案中，R4a是F。
在关于式IVa-VIIj的一个实施方案中，m是2；并且各R4a选自 烷基、被取代的烷基、被取代的或未被取代的烷氧基、氰基、卤素和 羟基。
在关于式IVa-VIIj的一个实施方案中，各R4a独立地选自被取代 的或未被取代的烷基和卤素。
在关于式IVa-VIIj的一个实施方案中，m是2；并且各R4a独立 地选自被取代的或未被取代的烷基和卤素。
在关于式IVa-VIIj的一个实施方案中，m是2；并且各R4a独立 地选自Me、Et、Cl、F、Br、CN、OH、OMe、OEt、OPh、CF3、 CHF2、OCF3、i-Pr、i-Bu和t-Bu。
在关于式IVa-VIIj的一个实施方案中，m是2；并且各R4a独立 地选自Me、Et、Cl、F、CF3和CHF2。
在关于式IVa-VIIj的一个实施方案中，m是2；并且各R4a独立 地选自Me、Cl、F和CF3。
在关于式IVa-VIIj的一个实施方案中，m是2；并且各R4a独立 地选自Cl、F和CF3。
在关于式IVa-VIIj的一个实施方案中，m是1并且R4a是CF3。
在关于式IVa-VIIj的一个实施方案中，m是2，一个R4a是F或 Cl；并且另一个R4a是CF3。
在关于式IVa-VIIj的一个实施方案中，m是2，一个R4a是F； 并且另一个R4a是CF3。
在关于式IVa-VIIj的一个实施方案中，m是2，一个R4a是Cl； 并且另一个R4a是CF3。
在关于式IVa-VIIj的一个实施方案中，m是2并且各R4a独立地 选自F和Cl。
在关于式IVa-VIIj的一个实施方案中，m是2，一个R4a是F； 并且另一个R4a是F。
在关于式IVa-VIIj的一个实施方案中，m是2，一个R4a是Cl； 并且另一个R4a是Cl。
在关于式IVa-VIIj的一个实施方案中，m是2，一个R4a是F； 并且另一个R4a是Cl。
在关于式Ia的一个实施方案中，所述化合物是根据式VIIIa、 VIIIb、VIIIc、VIIId、VIIIe、VIIIf、VIIIg或VIIIh的化合物：

其中各R4b独立地选自H、Me、Cl、F和OH；并且m选自1-3； 并且R5选自烷基、环烷基或卤素。
在关于式Ib的一个实施方案中，所述化合物是根据式IXa、 IXb、IXc、IXd、IXe、IXf、IXg或IXh的化合物：

其中各R4b独立地选自H、Me、Cl、F和OH；并且m选自1-3； 并且R5选自烷基、环烷基或卤素。
在关于式Ia的一个实施方案中，所述化合物是根据式Xa、Xb、 Xc、Xd、Xe、Xf、Xg、Xh、Xi或Xj的化合物：

其中各R4b独立地选自H、Me、Cl、F和OH；并且m选自1-3； 并且R5选自烷基、环烷基或卤素。
在关于式Ib的一个实施方案中，所述化合物是根据式XIa、 XIb、XIc、XId、XIe、XIf、XIg、XIh、XIi或XIj的化合物：

其中各R4b独立地选自H、Me、Cl、F和OH；并且m选自1-3； 并且R5选自烷基、环烷基或卤素。
在关于式VIIIa-XIj的一个实施方案中，m是1或2。
在关于式VIIIa-XIj的一个实施方案中，m是2。
在关于式VIIIa-XIj的一个实施方案中，R4b是H。
在关于式VIIIa-XIj的一个实施方案中，m是1并且R4b选自Me、 F和OH。
在关于式VIIIa-XIj的一个实施方案中，m是1并且R4b是1-OH 或4-F。
在关于式VIIIa-XIj的一个实施方案中，m是2并且各R4b选自 Me、F和OH。
在关于式VIIIa-XIj的一个实施方案中，m是2，一个R4b是3-F 并且另一个是3-F。
在关于式VIIIa-XIj的一个实施方案中，m是2，一个R4b是4-F 并且另一个是4-F。
在关于式VIIIa-XIj的一个实施方案中，m是2并且R4b是3，3- 或4，4-二F。
在关于式VIIIa-XIj的一个实施方案中，m是2，一个R4b是1-OH 并且另一个是4-F。
在关于式VIIIa-XIj的一个实施方案中，m是3并且R4b选自Me、 F和OH。
在关于式VIIIa-XIj的一个实施方案中，m是3；一个R4b是1-OH； 以及余下的是4，4-二F或3，3-二F。
在关于式VIIIa-XIj的一个实施方案中，m是3；一个R4b是1-OH； 另外两个是烷基。在另一个实施方案中，所述两个烷基结合在一起形 成被取代的或未被取代的环丙基或环丁基环。
在关于式VIIIa-XIj的一个实施方案中，

被
替代。
在关于式I-XIj的一个实施方案中，R5选自烷基、被取代的烷基、 环烷基、被取代的环烷基和卤素。在一个特殊的实施方案中，R5选自 Me、环丙基、Cl、F和CF3。
在关于式I-XIj的一个实施方案中，R5是烷基。
在关于式I-XIj的一个实施方案中，R5是被取代的烷基。
在关于式I-XIj的一个实施方案中，R5是环烷基。
在关于式I-XIj的一个实施方案中，R5是被取代的环烷基。
在关于式I-XIj的一个实施方案中，R5是卤素。
在关于式I-XIj的一个实施方案中，R5是Me。
在关于式I-XIj的一个实施方案中，R5是CF3。
在关于式I-XIj的一个实施方案中，R5是F。
在关于式I-XIj的一个实施方案中，R5是Cl。
在关于式I-XIj的一个实施方案中，R5是环丙基。
在关于式I-XIj的一个实施方案中，R5是被取代的环丙基。
在关于Ia-Ib的一个实施方案中，所述化合物选自表1中举例的 化合物。
在关于Ia-Ib的一个实施方案中，所述化合物不是：
N-[6-氯-2-(2-羟基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-基]-2-(3，4-二 氯-苯基)-乙酰胺；
(R)-2-[5-(2-金刚烷-1-基-乙酰基氨基)-6-氯-1-氧代-1H-异喹啉-2- 基]-丙酰胺；
(R)-2-{6-氯-1-氧代-5-[2-(4-三氟甲基-苯基)-乙酰基氨基]-1H-异 喹啉-2-基}-丙酰胺；
(R)-2-{6-氯-5-[(S)-2-(4-氯-苯基)-丙酰基氨基]-1-氧代-1H-异喹啉 -2-基}-丙酰胺；
(R)-2-{6-氯-5-[2-(2-氟-3-三氟甲基-苯基)-乙酰基氨基]-1-氧代 -1H-异喹啉-2-基}-丙酰胺；
(R)-2-{6-氯-5-[2-(4-氯-2-氟-苯基)-乙酰基氨基]-1-氧代-1H-异喹 啉-2-基}-丙酰胺
(R)-2-{6-甲氧基-1-氧代-5-[2-(4-三氟甲基-苯基)-乙酰基氨 基]-1H-异喹啉-2-基}-丙酰胺；
(S)-2-{6-氯-1-氧代-5-[2-(4-三氟甲基-苯基)-乙酰基氨基]-1H-异喹 啉-2-基}-丙酰胺
2-(3-氟-4-三氟甲基-苯基)-N-[2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-6-甲氧 基-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-基]-乙酰胺；
N-[6-氯-2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5- 基]-2-(4-三氟甲基-苯基)-乙酰胺；
N-[6-氯-2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5- 基]-2-(3-氟-4-三氟甲基-苯基)-乙酰胺；
N-[6-氯-2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5- 基]-2-(3，4-二氯-苯基)-乙酰胺；
N-[6-氯-2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5- 基]-2-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-乙酰胺；
N-[6-氯-2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5- 基]-2-(2-氟-4-三氟甲基-苯基)-乙酰胺；
2-(4-氯-3-氟-苯基)-N-[6-氯-2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-1-氧代 -1，2-二氢-异喹啉-5-基]-乙酰胺；
N-[6-氯-2-(2-羟基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-基]-2-(3-氟 -4-三氟甲基-苯基)-乙酰胺；
N-[6-环丙基-2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉 -5-基]-2-(3-氟-4-三氟甲基-苯基)-乙酰胺；
2-(2-氟-3-三氟甲基-苯基)-N-[2-(2-羟基-乙基)-6-(2-羟基-乙基氨 基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-基]-乙酰胺；
N-[6-氯-2-(2-羟基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-基]-2-(4-氟 -3-三氟甲基-苯基)-乙酰胺；
N-[6-氯-2-(2-羟基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-基]-2-(2-氟 -3-三氟甲基-苯基)-乙酰胺；
2-(3-氟-4-三氟甲基-苯基)-N-[2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-6-甲基 -1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-基]-乙酰胺；
2-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-N-[2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-6-甲基 -1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-基]-乙酰胺；
2-(2-氟-3-三氟甲基-苯基)-N-[2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-6-甲基 -1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-基]-乙酰胺；
2-(2-氟-3-三氟甲基-苯基)-N-[2-(2-羟基-乙基)-6-甲基-1-氧代-1，2- 二氢-异喹啉-5-基]-乙酰胺；
N-[2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-6-甲基-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉 -5-基]-2-(4-三氟甲基-苯基)-乙酰胺；
2-(4-氯-3-氟-苯基)-N-[2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-6-甲基-1-氧代 -1，2-二氢-异喹啉-5-基]-乙酰胺；
2-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-N-[2-(2-羟基-乙基)-6-甲基-1-氧代-1，2- 二氢-异喹啉-5-基]-乙酰胺；
2-(3-氟-4-三氟甲基-苯基)-N-[2-(2-羟基-乙基)-6-甲基-1-氧代-1，2- 二氢-异喹啉-5-基]-乙酰胺；
2-(3-氟-4-三氟甲基-苯基)-N-((S)-6-甲基-1-氧代-2-吡咯烷-3-基 -1，2-二氢-异喹啉-5-基)-乙酰胺；或者
2-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-N-((S)-6-甲基-1-氧代-2-吡咯烷-3-基 -1，2-二氢-异喹啉-5-基)-乙酰胺。
在关于Ia-Ib的一个实施方案中，所述化合物选自：
N-[6-氯-2-(2-羟基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-基]-2-(3，4-二 氯-苯基)-乙酰胺；
(R)-2-[5-(2-金刚烷-1-基-乙酰基氨基)-6-氯-1-氧代-1H-异喹啉-2- 基]-丙酰胺；
(R)-2-{6-氯-1-氧代-5-[2-(4-三氟甲基-苯基)-乙酰基氨基]-1H-异 喹啉-2-基}-丙酰胺；
(R)-2-{6-氯-5-[(S)-2-(4-氯-苯基)-丙酰基氨基]-1-氧代-1H-异喹啉 -2-基}-丙酰胺；
(R)-2-{6-氯-5-[2-(2-氟-3-三氟甲基-苯基)-乙酰基氨基]-1-氧代 -1H-异喹啉-2-基}-丙酰胺；
(R)-2-{6-氯-5-[2-(4-氯-2-氟-苯基)-乙酰基氨基]-1-氧代-1H-异喹 啉-2-基}-丙酰胺
(R)-2-{6-甲氧基-1-氧代-5-[2-(4-三氟甲基-苯基)-乙酰基氨 基]-1H-异喹啉-2-基}-丙酰胺；
(S)-2-{6-氯-1-氧代-5-[2-(4-三氟甲基-苯基)-乙酰基氨基]-1H-异喹 啉-2-基}-丙酰胺
2-(3-氟-4-三氟甲基-苯基)-N-[2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-6-甲氧 基-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-基]-乙酰胺；
N-[6-氯-2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5- 基]-2-(4-三氟甲基-苯基)-乙酰胺；
N-[6-氯-2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5- 基]-2-(3-氟-4-三氟甲基-苯基)-乙酰胺；
N-[6-氯-2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5- 基]-2-(3，4-二氯-苯基)-乙酰胺；
N-[6-氯-2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5- 基]-2-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-乙酰胺；
N-[6-氯-2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5- 基]-2-(2-氟-4-三氟甲基-苯基)-乙酰胺；
2-(4-氯-3-氟-苯基)-N-[6-氯-2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-1-氧代 -1，2-二氢-异喹啉-5-基]-乙酰胺；
N-[6-氯-2-(2-羟基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-基]-2-(3-氟 -4-三氟甲基-苯基)-乙酰胺；
N-[6-环丙基-2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉 -5-基]-2-(3-氟-4-三氟甲基-苯基)-乙酰胺；
2-(2-氟-3-三氟甲基-苯基)-N-[2-(2-羟基-乙基)-6-(2-羟基-乙基氨 基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-基]-乙酰胺；
N-[6-氯-2-(2-羟基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-基]-2-(4-氟 -3-三氟甲基-苯基)-乙酰胺；
N-[6-氯-2-(2-羟基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-基]-2-(2-氟 -3-三氟甲基-苯基)-乙酰胺；
2-(3-氟-4-三氟甲基-苯基)-N-[2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-6-甲基 -1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-基]-乙酰胺；
2-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-N-[2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-6-甲基 -1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-基]-乙酰胺；
2-(2-氟-3-三氟甲基-苯基)-N-[2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-6-甲基 -1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-基]-乙酰胺；
2-(2-氟-3-三氟甲基-苯基)-N-[2-(2-羟基-乙基)-6-甲基-1-氧代-1，2- 二氢-异喹啉-5-基]-乙酰胺；
N-[2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-6-甲基-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉 -5-基]-2-(4-三氟甲基-苯基)-乙酰胺；
2-(4-氯-3-氟-苯基)-N-[2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-6-甲基-1-氧代 -1，2-二氢-异喹啉-5-基]-乙酰胺；
2-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-N-[2-(2-羟基-乙基)-6-甲基-1-氧代-1，2- 二氢-异喹啉-5-基]-乙酰胺；
2-(3-氟-4-三氟甲基-苯基)-N-[2-(2-羟基-乙基)-6-甲基-1-氧代-1，2- 二氢-异喹啉-5-基]-乙酰胺；
2-(3-氟-4-三氟甲基-苯基)-N-((S)-6-甲基-1-氧代-2-吡咯烷-3-基 -1，2-二氢-异喹啉-5-基)-乙酰胺；以及
2-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-N-((S)-6-甲基-1-氧代-2-吡咯烷-3-基 -1，2-二氢-异喹啉-5-基)-乙酰胺。
在关于Ia-Ib的一个实施方案中，所述化合物选自：
2-金刚烷-1-基-N-[2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-6-甲基-1-氧代-1，2- 二氢-异喹啉-5-基]-乙酰胺；
2-环庚基-N-[2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-6-甲基-1-氧代-1，2-二氢 -异喹啉-5-基]-乙酰胺；
2-(3-氟-4-三氟甲基-苯基)-N-[2-((S)-2-羟基-1-甲基-乙基)-6-甲基 -1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-基]-乙酰胺；
N-[6-氯-2-((S)-2-羟基-1-甲基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5- 基]-2-(3-氟-4-三氟甲基-苯基)-乙酰胺；
N-[2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-6-甲基-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉 -5-基]-2-(3-三氟甲基-苯基)-乙酰胺；
N-[6-氯-2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5- 基]-2-环庚基-乙酰胺；
2-(1-羟基-环庚基)-N-[2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-6-甲基-1-氧代 -1，2-二氢-异喹啉-5-基]-乙酰胺；
2-(3-氟-4-三氟甲基-苯基)-N-[6-甲基-2-(2-甲基氨基-乙基)-1-氧代 -1，2-二氢-异喹啉-5-基]-乙酰胺；
N-[6-氯-2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5- 基]-2-(3-三氟甲基-苯基)-乙酰胺；
2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-6-甲基-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-甲 酸3-氟-4-三氟甲基-苯甲酰胺；
6-氯-2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-甲酸 3-氟-4-三氟甲基-苯甲酰胺；
2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-6-甲基-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-甲 酸3-三氟甲基-苯甲酰胺；
6-氯-2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-甲酸 (6-三氟甲基-吡啶-3-基甲基)-酰胺；
6-氯-2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-甲酸 3-三氟甲基-苯甲酰胺；
6-氯-2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-甲酸 4-氯-3-氟-苯甲酰胺；
6-氯-2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-甲酸 2-三氟甲基-苯甲酰胺；
6-氯-2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-甲酸 (1-羟基-环庚基甲基)-酰胺；
6-氯-2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-甲酸 环庚基甲基-酰胺；
2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-6-甲基-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-甲 酸环庚基甲基-酰胺；
2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-6-甲基-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-甲 酸4-氯-3-氟-苯甲酰胺；
(R)-2-{5-[2-(3-氟-4-三氟甲基-苯基)-乙酰基氨基]-6-甲基-1-氧代 -1H-异喹啉-2-基}-丙酰胺；
2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-6-甲基-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-甲 酸(1-羟基-环庚基甲基)-酰胺；
6-氯-2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-甲酸 (2-羟基-双环[2.2.1]庚-2-基甲基)-酰胺；
6-氯-2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-甲酸 (1-羟基-4，4-二甲基-环己基甲基)-酰胺；
6-氯-2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-甲酸 (1-羟基-3，3-二甲基-环己基甲基)-酰胺；
6-氯-2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-甲酸 (1-羟基-4-三氟甲基-环己基甲基)-酰胺；
6-氯-2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-甲酸 (1-羟基-环己基甲基)-酰胺；
N-[2-((R)-2-氨基-1-甲基-乙基)-6-甲基-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉 -5-基]-2-(3-氟-4-三氟甲基-苯基)-乙酰胺；
2-(3-氟-4-三氟甲基-苯基)-N-[6-甲基-2-((R)-1-甲基-2-甲基氨基- 乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-基]-乙酰胺；
2-(3-氟-4-三氟甲基-苯基)-N-[6-甲基-2-((R)-1-甲基-2-哌嗪-1-基- 乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-基]-乙酰胺；
6-氯-2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-甲酸 (4，4-二氟-环己基甲基)-酰胺；
2-(3-氟-4-三氟甲基-苯基)-N-[2-(2-羟基-1-羟基甲基-乙基)-6-甲基 -1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-基]-乙酰胺；
6-氯-2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-甲酸 (6-羟基-螺[2.5]辛-6-基甲基)-酰胺；以及
2-(3-氟-4-三氟甲基-苯基)-N-{2-[(R)-2-(3-羟基-氮杂环丁烷-1- 基)-1-甲基-乙基]-6-甲基-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-基}-乙酰胺。
在关于Ia-Ib的一个实施方案中，所述化合物选自


在某些方面中，本发明提供了上述式的化合物的前药和衍生物。 前药为本发明化合物的衍生物，它们具有可通过代谢方式被裂解的基 团并且通过溶剂分解或在生理条件下成为在体内具有药物活性的本发 明的化合物。这类实例包括但不限于胆碱酯衍生物等，N-烷基吗啉酯 类等。
本发明化合物的其它衍生物在其酸和酸衍生物形式中具有活性， 而酸敏感性形式通常提供在哺乳动物生物体中溶解性、组织相容性或 延迟释放的优点(参见，Bundgard，H.，Design of Prodrugs，pp. 7-9，21-24，Elsevier，Amsterdam 1985)。前药包括本领域技术人员 众所周知的酸衍生物，诸如，例如通过使母体酸与合适的醇反应制备 的酯类或通过使母体酸化合物与取代或未被取代的胺或酸酐或混合酸 酐类反应制备的酰胺类。衍生自本发明化合物侧链上的酸性基团的简 单脂族或芳族酯类、酰胺类和酸酐类为优选的前药。在某些情况中， 理想的是制备双酯型前药，诸如(酰氧基)烷基酯类或((烷氧羰基)氧基) 烷基酯类。优选本发明化合物的C1-C8烷基，C2-C8链烯基，芳基， C7-C12被取代的芳基和C7-C12芳基烷基酯类。
药物组合物
当作为药物使用时，一般以药物组合物的形式给予本发明的化合 物。可以按照制药领域众所周知的方式制备这类组合物并且所述组合 物包含至少一种活性化合物。
一般而言，以药物有效量给予本发明的化合物。由临床医师根据 相关情况确定实际给予的化合物的用量，所述情况包括所治疗的病症， 选择的给药途径，实际给予的化合物，个体患者的年龄，体重和反应， 患者症状的严重性等。
可以通过各种途径给予本发明的药物组合物，所述途径包括口 服，直肠，透皮，皮下，静脉内，肌内和鼻内。根据预期递送途径的 不同，优选将本发明的化合物配制成可注射或口服组合物或用于透皮 给药的软膏，洗剂或贴剂。
口服给药用组合物可以采取本体液体溶液或混悬液或本体散剂 的形式。然而，更常见的是将组合物制成单位剂型以有利于精确给药。 术语“单位剂型”意指适合于作为用于人体受试者和其它哺乳动物的单 位剂量的物理分散单位，每个单位包含计算的以产生所需治疗作用的 预定量的活性物质与合适的药物赋形剂。典型的单位剂型包括液体组 合物的预填充、预测定的安瓿或注射器或就固体组合物而言为丸剂， 片剂，胶囊等。在这类组合物中，呋喃磺酸化合物通常为最少量的成 分(约0.1至约50％重量或优选约1至约40％重量)，剩余的为有助于 形成所需剂型的各种媒介物或载体和加工助剂。
适合于口服给药的液体剂型可以包括含有缓冲剂，悬浮剂和分散 剂，着色剂，矫味剂等的合适的水性或非水媒介物。固体剂型可以包 括，例如下列组分或具有类似性质的化合物中的任一种：粘合剂，诸 如微晶纤维素，黄蓍胶或明胶；赋形剂，诸如淀粉或乳糖，崩解剂， 诸如藻酸，Primogel或玉米淀粉；滑润剂，诸如硬脂酸镁；助流剂， 诸如胶态二氧化硅；甜味剂，诸如蔗糖或糖精；或矫味剂，诸如薄荷， 水杨酸甲酯或橙矫味剂。
可注射组合物一般基于可注射的无菌盐水或磷酸缓冲盐水或其 它本领域公知的可注射载体。如上所述，在这类组合物中的活性化合 物一般为少量成分，通常在约0.05-10％重量，其余为可注射载体等。
一般将透皮组合物配制成局部用软膏或霜剂，其通常包含用量在 约0.01至约20％重量，优选约0.1至约20％重量，优选约0.1至约10％ 重量且更优选约0.5至约15％重量的活性组分。当配制成软膏时，一 般将活性组分与石蜡或与水混溶的软膏剂基质合并。可选择地，例如， 可以使用水包油型霜剂基质将活性组分配制成霜剂。这类透皮制剂为 本领域众所周知的并且一般包括其它的组分以便促进活性组分或制剂 稳定透皮。所有这类公知的透皮制剂和组分均包括在本发明范围内。
还可以通过透皮装置给予本发明的化合物。因此，可以使用固体 基质变体或储器或多孔膜型的贴剂进行透皮给药。
上述用于可口服给药的，可注射的或可局部给药的组合物的成分 仅为代表性的。其它物质和加工技术等描述在Remington′s The Sicence and Practice of Pharmacy的第8部分，第21版，2005，出版 商：Lippincott Williams & Wilkins中，通过引用将该文献并入本文。
还可以以缓释形式或由缓释递药系统给予本发明的化合物。有代 表性的缓释材料的描述可以在Remington′s Pharmaceutical Sciences 中找到。
下列制剂实施例例证了根据本发明制备的有代表性的药物组合 物。然而，本发明并不限于下列药物组合物。
制剂1-片剂
按照约1∶2的重量比将本发明的化合物与干明胶粘合剂混合成干 粉。加入少量硬脂酸镁作为润滑剂。用压片机将该混合物制成240-270 mg片剂(80-90mg活性化合物/片)。
制剂2-胶囊
按照约1∶1的重量比将本发明的化合物与淀粉稀释剂混合成干 粉。将该混合物填充入250mg胶囊(125mg活性化合物/胶囊)。
制剂3-液体
掺合本发明的化合物(125mg)，蔗糖(1.75g)和黄原胶(4mg)，将 所产生的混合物混合，通过10目美国筛且然后与预先制备的微晶纤维 素和羧甲基纤维素钠(11∶89，50mg)在水中的溶液混合。用水稀释苯 甲酸钠(10mg)，矫味剂和着色剂并且在搅拌下加入。然后加入足量的 水至产生5mL总体积。
制剂4-片剂
按照约1∶2的重量比将本发明的化合物与干明胶粘合剂混合成干 粉。加入少量硬脂酸镁作为润滑剂。用压片机将该混合物制成450-900 mg片剂(150-300mg活性化合物)。
制剂5-注射剂
将本发明的化合物溶于或悬浮于缓冲的无菌盐水可注射含水介 质中至浓度约为5mg/ml。
制剂6-局部用制剂
在约75℃下熔化十八烷醇(250g)和白凡士林(250g)且然后加入 本发明化合物(50g)，对羟基苯甲酸甲酯(0.25g)，对羟基苯甲酸丙酯 (0.15g)，十二烷基硫酸钠(10g)和丙二醇(120g)溶于水(约370g)的混 合物并且将所得混合物搅拌至它凝结。
治疗方法
本发明的化合物用作治疗原因上涉及或归因于P2X7受体异常活 性的哺乳动物病症的治疗剂。因此，本发明的化合物和药物组合物用 作预防和/或治疗哺乳动物(包括人)的自身免疫性，炎性和心血管病症 的治疗剂。因此，如上文所述，本发明在其范围内包括并意欲包括所 述治疗方法、用于这类方法的化合物以及这类化合物在制备适用于这 类方法的药物中的用途。
在治疗方面的一种方法中，本发明提供了治疗易患有或患有与关 节炎，眼色素层炎，哮喘，心肌梗死，创伤性脑损伤，急性脊髓损伤， 炎性肠病和自身免疫性疾病相关的病症的哺乳动物的方法，该方法包 括给予有效量的一种或多种如上所述的药物组合物。
在治疗方面的另一种方法中，本发明提供了治疗易患有或患有产 生疼痛反应或涉及感觉神经基础活性维持失调的病症的哺乳动物的方 法。本发明的胺类具有作为治疗各种起源或病因的疼痛的止痛药的应 用，所述的疼痛例如：急性，炎性疼痛(诸如与骨关节炎和类风湿性关 节炎相关的疼痛)；各种神经性疼痛综合征(诸如疱疹后神经痛，三叉 神经痛，反射性交感神经营养不良，糖尿病性神经病，格-巴综合征， 纤维肌痛，幻肢痛，乳腺切除后疼痛，周围神经病，HIV神经病和化 疗诱发的和其它医源性神经病)；内脏痛(诸如与胃食管返流疾病，肠 易激综合征，炎性肠病，胰腺炎和各种妇科和泌尿科障碍相关的内脏 痛)，牙痛和头痛(诸如偏头痛、丛集性头痛和紧张性头痛)。
在治疗方面的其它方法中，本发明提供了治疗易患有或患有神经 变性疾病和障碍的哺乳动物的方法，所说的神经变性疾病和障碍诸如， 例如帕金森病，多发性硬化；由神经炎症介导的疾病和障碍或导致神 经炎症的疾病或障碍，诸如，例如创伤性脑损伤和脑炎；中枢介导的 神经精神疾病和障碍，诸如，例如躁狂性抑郁，双相性精神疾病，焦 虑，精神分裂症，进食障碍，睡眠障碍和认知障碍；癫痫和癫痫发作 症；前列腺，膀胱和肠功能障碍，诸如，例如尿失禁，排尿犹豫，直 肠超敏反应，大便失禁，良性前列腺肥大和炎性肠病；呼吸和气道疾 病和障碍，诸如，例如过敏性鼻炎，哮喘和反应性气道病和慢性阻塞 性肺疾病；由炎症介导或导致炎症的疾病和障碍，诸如，例如类风湿 性关节炎和骨关节炎，心肌梗死，各种自身免疫性疾病和障碍，眼色 素层炎和动脉粥样硬化；痒/瘙痒，诸如，例如银屑病；肥胖；脂质障 碍；癌症；血压；脊髓损伤；以及肾障碍；该方法包括给予有效治疗 病症或预防病症用量的一种或多种如上所述的药物组合物。
作为本发明的另一个方面，提供了本发明化合物作为尤其是治疗 或预防上述病症和疾病的药物的应用。还提供了本发明化合物在制备 用于治疗或预防上述病症和疾病中的一种的药物中的应用。
注射剂量水平在约0.1mg/kg/小时-至少10mg/kg/小时，总计约 1至约120小时且尤其是24-96小时。还可以给予约0.1mg/kg至约 10mg/kg或更高剂量的前负荷推注以便达到足够的稳态水平。对40 -80kg的人类患者而言，预计最大总剂量不会超过约2g/天。
为了预防和/或治疗长期的病症，诸如神经变性和自身免疫性病 症，治疗方案通常延长多个月或多年，因此，就患者的便利性和耐受 性而言优选口服给药。就口服给药而言，每天1-5次且尤其是2-4 次且一般是三次口服剂量为有代表性的方案。使用这些给药模式，每 种剂量提供了约0.01至约20mg/kg的本发明化合物，优选的剂量各 自提供了约0.1至约10mg/kg且尤其是约1至约5mg/kg。
一般选择透皮剂量以便提供类似于使用注射剂量获得的或低于 其获得的血液水平。
当用于预防神经变性，自身免疫性或炎性病症发作时，对处于发 生该病症风险中的患者给予本发明的化合物，一般根据临床医师的建 议并且在其监督下进行，其剂量水平如上所述。处于发生特定病症风 险中的患者一般包括具有该病症家族史的那些或已经通过遗传测试或 筛选鉴定为特别易于发展该病症的那些患者。
可以将本发明的化合物作为单一活性剂给药或将它们与其它活 性剂联合给药，包括表现出相同或类似治疗活性并且确定为可安全和 有效地进行这类联合给药的其它化合物。
一般合成操作
由易于可得到的原料，使用下列一般方法和操作制备本发明的双 环杂芳基化合物。可以理解，尽管指定典型或优选方法条件(即反应温 度，时间，反应剂摩尔比，溶剂，压力等)，但是除非另作陈述，否则 也可以使用其它方法条件。最佳反应条件可以根据所用特定反应剂或 溶剂的不同而改变，但这类条件可以由本领域技术人员通过常规的最 佳操作确定。
另外，正如本领域技术人员显而易见的，常规的保护基是防止某 些官能团发生不需要的反应所必需的。对用于特定官能团的合适的保 护基的选择和以及用于保护和脱保护的合适条件的选择为本领域众所 周知的。例如，大量保护基及其引入和除去描述在T.W.Greene和 P.G.M.Wuts，Protecting Groups in Organic Synthesis，第二版，Wiley， New York，1991及其所引述的参考文献中。
下列方案详细描述了有关上文已经列出的有代表性的双环杂芳 基化合物的制备。有机合成领域普通技术人员可以由公知或商业可获 得的原料和试剂制备本发明的化合物。
中间体的合成
中间体1
(E)-2-(2-(二甲氨基)-乙烯基)-3-硝基苯甲酸甲酯

在115℃，将2-甲基-3-硝基苯甲酸甲酯(5.0g，25.6mmol)和 N，N-二甲基甲酰胺二甲基乙缩醛(9.18g，77mmol)在N，N-二甲基甲酰 胺(30mL)中的混合物搅拌17小时。在减压下除去挥发物，产生 (E)-2-(2-(二甲氨基)-乙烯基)-3-硝基苯甲酸甲酯，为棕色油。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ7.68(m，2H)，7.07(t，J＝7.5Hz 1H)，6.32(d，J＝13.5Hz，1H)，5.65(d，J＝13.5Hz，1H)，3.85(s， 3H)，2.82(s，6H)。
中间体2
5-硝基-1H-异色烯-1-酮

(E)-2-(2-(二甲氨基)乙烯基)-3-硝基苯甲酸甲酯溶于乙酸乙酯(200 mL)，并添加硅胶(200g)。将得到的悬浮液在室温搅拌1小时。将乙 酸乙酯溶液过滤。用乙酸乙酯(2×150mL)洗涤硅胶，蒸发合并的有机 物并在减压下干燥，产生5-硝基-1H-异色烯-1-酮(4.0g，21.0mmol， 两步后82％)，为棕色固体。
MS m/z＝192.1(M+H)+。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.62(d，J＝7.8Hz，1H)，8.47(d， J＝8.1Hz，1H)，7.65(m，1H)，7.42(d，J＝6.3Hz，1H)，7.36(d， J＝6.3Hz，1H)。
可以在McDonald，M.C.等人British J.Pharmacol.2000，130， 843中找到另外的信息，通过引用将其并入本文。
中间体3
5-氨基-1H-异色烯-1-酮

将氯化锡(II)二水合物(41.9g，185.7mmol)添加到5-硝基-1H-异 色烯-1-酮(7.1g，37.1mmol)在无水四氢呋喃(120mL)中的搅拌的溶液 中。在室温搅拌反应混合物18小时。用乙酸乙酯(400mL)稀释得到的 混合物并用饱和的碳酸氢钠水溶液处理至pH＝10。添加水(100mL)并 分离层。用乙酸乙酯(2×150mL)萃取水相并将合并的有机部分用硫酸 钠干燥，过滤并蒸发，产生5-氨基-1H-异色烯-1-酮(5.8g，36.0mmol， 97％)，为黄色固体。
MS m/z＝162.3(M+H)+。
1H-NMR(300MHz，CD3OD)δ7.52(d，J＝7.8Hz，1H)，7.32(d， J＝5.7Hz，1H)，7.27(t，J＝7.8Hz，1H)，7.07(d，J＝7.8Hz，1H)， 6.80(d，J＝5.7Hz，1H)。
可以在Lee，B.S.等人J.Org.Chem.2004，69，3319中找到另 外的信息，通过引用将其并入本文。
中间体4
6-甲基-5-硝基-1H-异色烯-1-酮：

a.(E)-2-(5-硝基-1-氧代-1H-异色烯-6-基)乙酸叔丁酯
在圆底烧瓶中装入叔丁醇钾(4.4g，0.039mol)和N，N-二甲基甲酰 胺(30mL，0.4mol)，在-20℃在40分钟期间缓慢地添加乙酸，氯-，1，1- 二甲基乙酯(2.5mL，0.017mol)和5-硝基-异色烯-1-酮(3.00g，0.0157 mol)在N，N-二甲基甲酰胺(5mL，0.06mol)中的溶液，并在相同温度 下将反应搅拌另外45分钟。将反应混合物倾入4ml盐酸和80mL水 中，用二氯甲烷萃取，用盐水洗涤并用硫酸钠干燥。在减压下除去溶 剂并通过急骤色谱法纯化残余物，得到产物，为浅色粘稠的油。
MS m/z＝306.4(M+H)。
b.6-甲基-5-硝基-1H-异色烯-1-酮
在微波瓶中装入2-(5-硝基-1-氧代-1H-异色烯-6-基)乙酸叔丁酯 (800.0mg，0.002620mol)、三氟乙酸(2mL，0.02mol)。在100℃使 混合物经受微波20分钟。在减压下除去三氟乙酸，将残余物置于微波 管中，添加喹啉(2mL，0.02mol)并在120℃加热20分钟。添加乙酸 乙酯(50mL)并用10mL 6N盐酸洗涤。用乙酸乙酯(50mL)萃取盐酸 层，将合并的有机层用水、盐水洗涤并干燥。在减压下除去溶剂，通 过急骤色谱法纯化棕色固体残余物，产生纯产物，为白色固体。
MS m/z＝206.4(M+H)
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.29(d，J＝8.19Hz，1H)， 7.71-7.69(m，2H)，6.57(d，J＝6.02Hz，1H)，2.45(s，3H)。
可替代地，在-20℃向叔丁醇钾(8.72g，0.0777mol)在N，N-二 甲基甲酰胺(250mL，3.2mol)中的溶液中添加乙酸、氯-，1，1-二甲基乙 酯(4.335g，0.02878mol)和5-硝基-1H-异色烯-1-酮(5.0g，0.026mol) 在N，N-二甲基甲酰胺(50mL，0.6mol)中的混合物。1小时后，将反应 倾倒在盐酸(16mL)和水(35mL)上。将水溶液用二氯甲烷萃取，用盐 水洗涤，用硫酸镁干燥，并在减压下浓缩。用三氟乙酸(35mL，0.45mol) 处理残余物0.5小时并在减压下除去。在50℃将残余物与碳酸钾(6.98 g，0.0505mol)一起在N，N-二甲基甲酰胺(200mL，2mol)中搅拌1小 时。将反应冷却并加入1N盐酸(262mL)，用二氯甲烷(80mL×3)萃 取，用盐水洗涤并用硫酸镁干燥。在减压下除去溶剂并通过急骤色谱 法纯化混合物，得到标题化合物，为黄色固体。
中间体5
6-环丙基-5-硝基-1H-异色烯-1-酮

a.6-溴-5-硝基-1H-异色烯-1-酮
在压力管(150mL)中装入4-溴-2-甲基-3-硝基苯甲酸甲酯(2.1g， 0.0077mol)、1，1-二甲氧基-N，N-二甲基甲胺(3.6mL，0.027mol)和 N，N-二甲基甲酰胺(5mL，0.06mol)。在120℃将混合物加热20小 时。在减压下除去溶剂并将残余物溶于乙酸乙酯(100mL，1mol)。然 后添加硅胶(20g，0.3mol)并在室温将反应搅拌12小时。过滤反应物， 除去溶剂并通过急骤色谱法纯化残余物，得到期望的产物。MS m/z＝271.2(M+H)。
b.6-环丙基-5-硝基-1H-异色烯-1-酮
在微波瓶中装入6-溴-5-硝基-1H-异色烯-1-酮(500.00mg， 0.0018516mol)、环丙基硼酸(206.8mg，0.002407mol)、乙酸钯(21 mg，0.000092mol)、三环己基膦(52mg，0.00018mol)、磷酸钾(1376 mg，0.006481mol)、甲苯(10mL，0.09mol)和水。在100℃使用微 波照射将混合物加热30分钟。然后用水稀释反应混合物并用乙酸乙酯 萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，干燥并蒸发。通过急骤色谱法纯 化得到的残余物，得到产物。没有进一步纯化，原样使用该产物，用 于合成本发明的6-环丙基化合物。
MS m/z＝232.3(M+H)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ：8.22(d，J＝8.63Hz，1H)， 7.69(d，J＝5.85Hz，1H)，7.33(d，J＝8.47Hz，1H)，6.51(d， J＝6.05Hz，1H)，1.96-1.89(m，1H)，1.19-1.14(m，2H)0.97-0.93 (m，2H)。
中间体6
6-氯-5-硝基-1H-异色烯-1-酮

a.4-氯-2-甲基-3-硝基苯甲酸
在圆底烧瓶中装入4-氯-2-甲基苯甲酸(200mg，0.001mol)和硫酸 (1mL，0.02mol)。在-20℃添加发烟硝酸(0.05mL，0.001mol)，在 70℃将反应搅拌1小时并倾入冰冷的水中，此时2-硝基化合物和4- 硝基化合物的混合物沉淀出来。将沉淀物过滤并溶于乙酸乙酯(30 mL)，用饱和的碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤，并用硫酸钠干燥。将溶 剂减少至1/4体积，由此不需要的异构体沉淀出来。将沉淀物过滤并干 燥滤液，得到异构体的1∶1混合物，为白色固体。
MS m/z＝214.5(M-H)。
b.甲基4-氯-2-甲基-3-硝基苯甲酸酯
在圆底烧瓶中装入4-氯-2-甲基-3-硝基苯甲酸(11.00g，0.05102 mol)和甲醇(110mL，2.7mol)。在0℃添加亚硫酰氯(4.5mL，0.061mol) 并在75℃将反应加热3小时。在减压下除去溶剂，将残余物溶于乙 酸乙酯(300mL)并用碳酸氢钠水溶液、水和盐水洗涤。合并有机萃取 物，用硫酸钠干燥并除去溶剂，得到相应的酯。
MS m/z＝230.3(M+H)。
c.6-氯-5-硝基-1H-异色烯-1-酮
压力管装入甲基4-氯-2-甲基-3-硝基苯甲酸酯(13g，57mmol)、 N，N-二甲基甲酰胺(10mL，200mmol)和1，1-二甲氧基-N，N-二甲基甲 胺(26.5mL，200mmol)。在120℃将反应加热20小时。除去溶剂， 将得到的棕色残余物溶于乙酸乙酯(600mL，6000mmol)并添加 130-270目60A硅胶(500g，6000mmol)。用机械搅拌器将反应搅拌8 小时。过滤反应物，用乙酸乙酯(400mL)洗涤。合并有机物并在减压 下除去溶剂。通过急骤色谱法纯化残余物，产生所期望的产物。
MS m/z＝226.2(M+H)。
1H NMR(400MHz；DMSO-d6)δ8.35(d，J＝8.63Hz，1H)， 7.95(d，J＝8.63Hz，1H)，7.76(d，J＝5.91Hz，1H)，6.61(d，J＝6.04 Hz，1H)。
中间体7
4，4-(二氟环己基)甲胺盐酸盐

在0℃将(4，4-二氟环己基)甲基氨基甲酸叔丁酯(0.43g，0.0016 mol)和1，4-二氧杂环己烷(4mL，0.02mol)中的4M氯化氢搅拌1小时， 然后在室温搅拌过夜。在真空下除去溶剂，将残余物用乙醚洗涤，过 滤并风干，得到期望的产物，为灰白色的固体(292mg，收率91％)。
1H NMR(400MHz，CD3OD，)δ2.86(d，J＝7.0Hz，2H)，2.13-2.06 (m，2H)，1.88-1.72(m，5H)，1.39-1.28(m，2H)。
中间体8
1-(氨基甲基)-4，4-二甲基环己醇

4，4-二甲基-1-(硝基甲基)环己醇(10)：
向钠(0.2g，0.009mol)和乙醇(5mL，0.08mol)的混合物中逐滴 添加硝基甲烷(0.77g，0.013mol)和4，4-二甲基-环己酮(1g，0.008mol) 在乙醇(1mL)中的溶液。在室温将混合物搅拌4小时。添加乙酸(2mL) 和水(10mL)并在减压下浓缩混合物。将残余物溶于乙酸乙酯(200 mL)，用盐水(30mL×3)洗涤，用硫酸钠干燥，并通过急骤色谱法纯 化，得到所期望的产物，为澄清的油。(1.5g，90％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ4.44(s，2H)，1.61-1.56(m，6H)， 1.27-1.23(m，2H)，0.97(s，3H)，0.91(s，3H)。
1-(氨基甲基)-4，4-二甲基环己醇(11)：
在室温，在氢气(1atm)下将4，4-二甲基-1-(硝基甲基)环己醇(1.5 g，0.0072mol)和氢氧化钯(0.1g，0.0001mol)在甲醇(50mL，1mol) 中的混合物搅拌过夜。将混合物过滤并浓缩，得到期望的产物，为澄 清的油。(1.08g，95％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3，)δ3.49(s，2H)，1.56-1.36(m，6H)， 1.22-1.20(m，2H)，0.95(s，3H)，0.88(s，3H)
中间体9
6-(氨基甲基)螺[2.5]辛-6-醇盐酸盐

8-亚甲基-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷
将无水苯(50mL，0.6mol)中的1，4-二氧杂螺[4.5]癸-8-酮(21g， 0.13mol)添加到亚乙基三苯基膦烷[由甲基亚磺酰钠和溴化甲基三苯 基磷鎓(106g，0.291mol)在二甲亚砜(600mL，8mol)中制备]中。在 室温将混合物搅拌过夜并倾入含有乙醚(500mL)和水(500mL)的分液 漏斗。将有机层分离并用乙醚(2×500mL)萃取水相。将合并的乙醚层 用水(500mL)和盐水(500mL)洗涤，并干燥。在减压下除去溶剂并通过 急骤色谱法纯化残余物，得到期望的产物(18.0g，85％)。
螺[2.5]辛-6-酮
在250mL装配有回流冷凝器的圆底烧瓶中装入锌-铜偶 (zinc-copper couple)(6.5g，0.05mol)和乙醚(100mL)。添加碘(0.42g， 0.00165mol)并搅拌直到棕色消失。添加二碘甲烷(26.56g，0.09915mol) 并回流加热2小时。添加溶于乙醚(50ml)的8-亚甲基-1，4-二氧杂螺[4.5] 癸烷(10g，0.06mol)，并将混合物回流加热过夜。添加附加部分的二 碘甲烷(26.56g，0.09915mol)、锌-铜偶(6.5g，0.05mol)和碘(0.42g， 0.00165mol)并在回流下继续反应过夜。将反应混合物冷却至室温，过 滤，并用乙醚(100mL)冲洗沉淀物。合并的乙醚溶液置于500mL圆底 烧瓶中，添加1N盐酸(200mL)并在室温搅拌1小时。分离层并用乙醚 (2×200mL)萃取水层。干燥合并的有机层并在减压下浓缩。通过急骤 色谱法纯化残余物，得到期望的产物。(4.6g50％)。
6-(硝基甲基)螺[2.5]辛-6-醇
在室温，向甲醇钠(14mL)在甲醇(10mL)中的4M溶液中添加螺 [2.5]辛-6-酮(4.6g，0.031mol)和硝基甲烷(2.3mL，0.042mol)在甲醇 (20mL)中的溶液并搅拌过夜。用乙酸(4.5mL)和水(50mL)淬灭反应并 在减压下除去挥发物。用二氯甲烷(2×50mL)萃取残余物，并将合并 的萃取物干燥，过滤并蒸发。通过急骤色谱法纯化残余物，得到期望 的产物(3.2g，52％)。
6-(氨基甲基)螺[2.5]辛-6-醇盐酸盐
将6-(硝基甲基)螺[2.5]辛-6-醇(1.5g，0.0077mol)溶于乙酸乙酯 (30mL，0.3mol)，并添加10％碳上钯(2g)。在氢气(40～50psi)下将混 合物搅拌过夜。过滤混合物并在减压下除去挥发物。将残余物溶于二 氯甲烷(3ml)并添加在乙醚(6mL)中的2M氯化氢。将固体过滤并用 10mL的(二氯甲烷∶Et2O＝1∶4)冲洗，并干燥，得到期望的胺，为白 色固体。(1.0g，60％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ：7.91(br，3H)，4.85(s，1H)， 2.75(br，2H)，1.69-1.66(m，2H)，1.59-1.54(m，2H)，1.47-1.42(m， 2H)，0.94-0.91(m，2H)，0.25-0.19(m，4H)。
中间体10
(制备5-碘衍生物的一般合成方法)

2-(-L1-R3)-5-硝基异喹啉-6-(R5)-1(2H)-酮
将5-硝基-异色烯-1-酮衍生物(0.005mol)和R3-L1-NH2(0.02mol) 在甲醇(20mL，0.5mol)中回流2小时。在减压下除去挥发物，并通过 急骤色谱法纯化残余物，得到硝基中间体，为固体。
b.5-氨基-2-(-L1-R3)-6-(R5)-异喹啉-1(2H)-酮
在圆底烧瓶中装入上述5-硝基异喹啉-1(2H)酮衍生物(0.074 mol)、乙醇(500mL，8mol)并在85℃加热溶液。添加水(150mL， 8.3mol)中的氯化铵(50g，0.9mol)，接着分两批添加铁(20g，0.3mol)。 将反应搅拌1小时，倾倒在二氯甲烷(200mL)上并萃取。在减压下除 去溶剂，得到期望的产物。
可替代地，在室温将5-硝基异喹啉-1(2H)-酮衍生物(0.0022mol) 和二氯化锡二水合物(2g，0.009mol)在四氢呋喃(20mL，0.2mol)中 搅拌过夜。在减压下除去挥发物并将残余物溶于甲醇，倾倒在碱性氧 化铝垫上并浓缩，得到期望的产物。
c.2-(-L1-R3)-6-(R5)-5-碘-2H-异喹啉-1-酮
在35℃，将氨基异喹啉-1(2H)-酮衍生物(0.002mol)添加到亚硝 酸钠(0.5g，0.008mol)在二甲亚砜(10mL，0.1mol)中的溶液，接着添 加二甲亚砜(10mL，0.1mol)中的含水碘化氢(2mL，0.02mol)。在35℃ 将反应混合物搅拌1小时，冷却至室温并用饱和的碳酸钠水溶液中和。 用二氯甲烷(3×20mL)萃取混合物，将合并的萃取物用盐水洗涤并干 燥。在减压下除去溶剂并通过急骤色谱法纯化残余物，得到期望的碘 代中间体。
可替代地，在0℃向亚硝酸钠(1g，0.02mol)、六甲基二硅烷(3 g，0.02mol)、碘(5g，0.02mol)和氯化苄基三乙铵(0.3g，0.001mol) 在四氯化碳(100mL，1mol)中的溶液中添加氨基异喹啉-1(2H)-酮衍 生物(0.0070mol)在二氯甲烷(3mL，0.05mol)中的溶液。在相同温度 下将混合物搅拌40分钟，然后温热至室温过夜。通过急骤色谱法纯化 混合物，得到期望的碘代中间体。
中间体11
(R)-2-(5-氨基-6-氯-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯

(R)-2-(1-羟基丙-2-基)-5-硝基异喹啉-1(2H)-酮：
在250mL圆底烧瓶中装入5-硝基-异色烯-1-酮(40g，0.2mol)、 (2R)-2-氨基丙-1-醇(18g，0.24mol)、三乙胺(100mL，0.7mol)和甲醇 (500mL，10mol)并在88℃将反应加热1.5小时。在冷却反应时产物 沉淀出来并过滤，得到产物，为黄色固体。(17.3g，40％收率)。
(R)-2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯：
在室温，将(R)-2-(1-羟基丙-2-基)-5-硝基异喹啉-1(2H)-酮(19g， 0.073mol)、乙酸酐(10g，0.1mol)、三乙胺(30g，0.3mol)、4，4-二甲 氨基吡啶(200mg，0.002mol)和二氯甲烷(500mL，8mol)搅拌过 夜。在减压下除去溶剂并通过急骤色谱法纯化残余物，得到标题化合 物，为黄色油(21g，100％收率)。
(R)-2-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯：
在圆底烧瓶中装入(R)-2-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙 酸酯(24g，0.074mol)、乙醇(500mL，8mol)，并在85℃加热。添 加水(150mL，8.3mol)中的氯化铵(50g，0.9mol)，接着分两批添加 铁(20g，0.3mol)。将反应搅拌1小时，倾倒在二氯甲烷(200mL)上并 萃取。在减压下除去溶剂，得到所期望的产物，为红色的油(19g， 100％)。
(R)-2-(5-氨基-6-氯-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯：
在60℃，在50分钟内向乙酸(R)-2-(5-氨基-1-氧代-1H-异喹啉-2- 基)-丙基酯(20g，0.07mol)在四氯化碳(400mL，4mol)中的溶液中添 加N-氯琥珀酰亚胺(11g，0.082mol)在N，N-二甲基甲酰胺(140mL， 1.8mol)中的溶液。在60℃将混合物搅拌另外15分钟。将冷却的混 合物用二氯甲烷(400mL)稀释，用碳酸氢钠(100mL×3)洗涤，并在减 压下浓缩。通过急骤色谱法纯化混合物，得到所期望的产物，为棕色 油。
中间体12
(R)-2-(5-氨基-6-甲基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯：

(R)-2-(1-羟基丙-2-基)-6-甲基-5-硝基异喹啉-1(2H)-酮：
在圆底烧瓶中装入叔丁醇钾(3.62g，0.0322mol)和N，N-二甲基甲 酰胺(100mL，1mol)，在-20℃，在8分钟期间，逐滴添加乙酸、氯 -，1，1-二甲基乙酯(1.3mL，0.0089mol)和(R)-2-(1-羟基丙-2-基)-5-硝基 异喹啉-1(2H)-酮(2.00g，0.00806mol)在N，N-二甲基甲酰胺(20mL， 0.2mol)中的溶液，并在相同温度下将反应搅拌另外45分钟。将反应 混合物倾倒在4ml盐酸和80mL水上，并用二氯甲烷萃取，用盐水 洗涤并干燥。在减压下除去溶剂并在没有纯化的情况下将残余物用于 下面的反应(比例为3∶1的两种异构体)。用三氟乙酸(10mL，0.1mol) 处理残余物30分钟并在减压下将三氟乙酸除去。在50℃将残余物与 碳酸钾(2.2g，0.016mol)一起在N，N-二甲基甲酰胺(10mL)中搅拌1 小时。反应混合物冷却并用乙酸乙酯(400mL)稀释，用6N盐酸(50mL ×4)和盐水(50mL×2)洗涤，并干燥。在减压下除去挥发物并通过柱色 谱法纯化残余物，得到产物，为黄色固体。
MS m/z＝263.2(M+H)。
(R)-2-(6-甲基-5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯：
向(R)-2-(1-羟基丙-2-基)-6-甲基-5-硝基异喹啉-1(2H)-酮(4.8g， 0.018mol)在二氯甲烷(100mL，2mol)中的溶液中添加乙酸酐(7g， 0.07mol)、三乙胺(10g，0.1mol)和4-二甲氨基吡啶(20mg，0.0002 mol)。在室温将混合物搅拌1小时，用1N盐酸和盐水洗涤，并干燥。 在减压下除去挥发物并通过柱色谱法纯化残余物，得到黄棕色的油。
MS m/z＝305.2(M+H)。
1H NMR(400MHz，CDCl3，)δ8.47(d，J＝8.3Hz，1H)，7.39 (d，J＝8.3Hz，1H)，7.23(d，J＝7.9Hz，1H)，6.44(d，J＝7.8 Hz，1H)，5.42-5.38(m，1H)，4.33-4.31(m，2H)，2.49(s，3H)， 2.00(s，3H)，1.46(d，J＝7.2Hz，3H)。
(R)-2-(5-氨基-6-甲基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯：
在圆底烧瓶中装入(R)-2-(6-甲基-5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基) 丙基乙酸酯(3.4g，0.010mol)、乙醇(60mL，1mol)，并在85℃加热 溶液。添加氯化铵(6g，0.1mol)的水(15mL，0.83mol)溶液，接着分 两批添加铁(2g，0.04mol)。将反应搅拌1小时，倾倒在二氯甲烷(200 mL)上并萃取。在减压下除去溶剂并通过急骤色谱法纯化残余物，得 到期望的产物，为淡黄色的油。
MS m/z＝275.2(M+H)。
1H NMR(400MHz，CDCl3，)δ7.84(d，J＝8.1Hz，1H)，7.22 (d，J＝8.2Hz，1H)，7.09(d，J＝7.8Hz，1H)，6.47(d，J＝7.8 Hz，1H)，5.48-5.45(m，1H)，4.37-4.29(m，2H)，2.31(s，3H)， 2.00(s，3H)，1.44(d，J＝7.1Hz，3H)
制备本发明化合物的一般合成方法
方法1

在0℃，向适合的酸(0.003mol)在二氯甲烷(5mL，0.08mol)中的 溶液中添加草酰氯(0.3mL，0.003mol)和一滴N，N-二甲基甲酰胺。在 所述温度下将反应搅拌1小时。在减压下除去溶剂并在氮气下干燥。 将残余物溶于二氯甲烷(5mL，0.08mol)并添加到5-氨基-异喹诺酮衍 生物(0.0016mol)在二氯甲烷(5mL，0.08mol)和N，N-二甲基甲酰胺(2 mL，0.02mol)中的溶液中。将反应混合物搅拌2小时。在减压下除去 溶剂，将残余物溶于1∶3异丙醇/氯仿中并用1N盐酸洗涤。在减压下 除去溶剂并通过急骤色谱法纯化残余物，得到期望的产物。
方法2

在5mL工艺瓶中装入5-碘-1-氧代异喹啉衍生物(0.0009mol)、 适合的胺(0.0018mol)、六羰基合钼(500mg，0.002mol)、乙酸钯(15mg， 0.000067mol)、1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一-7-烯(500mg，0.003mol) 和1，4-二氧杂环己烷(4mL，0.04mol)。在空气下将所述瓶密封，在 110℃搅拌1小时，并冷却至室温。将混合物浓缩，溶于少量的二氯 甲烷中，通过急骤色谱法纯化，得到期望的产物。
代表性的合成方法
方法A
化合物2
(R)-2-(6-氯-1-氧代-5-(2-金刚烷基乙酰氨基)异喹啉-2(1H)-基)丙 酰胺

a.(R)-2-(6-氯-5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酰胺
向6-氯-5-硝基-1H-异色烯-1-酮(950mg，0.0042mol)在甲醇(30 mL，0.7mol)中的溶液中添加三乙胺(0.64mL，0.0046mol)和(R)-2- 氨基丙酰胺盐酸盐(0.58g，0.0046mol)。将反应加热至55℃过夜，并 在减压下除去溶剂。通过急骤色谱法纯化残余物，得到产物，为淡黄 色的固体。
MS m/z＝296.4(M+H)。
b.(R)-2-(5-氨基-6-氯-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酰胺
向(R)-2-(6-氯-5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酰胺(120mg， 0.00040mol)在乙醇(4mL，0.07mol)中的溶液中添加水(4mL，0.2 mol)中的氯化铵(200mg，0.004mol)。在85℃加热反应并间隔5分 钟分两批添加铁(90mg，0.002mol)。将反应搅拌30分钟，添加乙酸 乙酯并倾析。在减压下除去溶剂，得到产物，为黄色固体。
MS m/z＝265.5(M+H)。
c.(R)-2-(6-氯-1-氧代-5-(2-金刚烷基乙酰氨基)异喹啉-2(1H)-基) 丙酰胺
在0℃，向1-金刚烷乙酸(600mg，0.003mol)在二氯甲烷(5mL， 0.08mol)中的溶液中添加草酰氯(0.3mL，0.003mol)和一滴N，N-二甲 基甲酰胺。在所述温度下将反应搅拌1小时。在减压下除去溶剂并在 氮气下干燥。将残余物再溶于二氯甲烷(5mL，0.08mol)，添加到 (R)-2-(5-氨基-6-氯-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酰胺(420mg，0.0016mol) 在二氯甲烷(5mL，0.08mol)和N，N-二甲基甲酰胺(2mL，0.02mol) 中的溶液中，并搅拌2小时。在减压下除去溶剂，将残余物溶于1∶3 异丙醇/氯仿中并用1N盐酸洗涤。在减压下除去溶剂并通过急骤色谱 法纯化残余物，得到产物，为灰白色的固体。
MS m/z＝442.2(M+H)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ：9.75(s，1H)，8.13(d，J＝8.48 Hz，1H)，7.67(s，1H)，7.59(d，J＝8.48Hz，1H)，7.54(d，J＝7.79Hz， 1H)，7.25(s，1H)，6.49(d，J＝7.7Hz，1H)，5.48-5.43(q，J＝7.20Hz， 1H)，2.19(s，2H)，1.97(bs，3H)，1.72-1.61(m，12H)，1.54(d，J＝ 8.67Hz，3H)。
方法B
化合物7
(R)-2-{6-甲氧基-1-氧代-5-[2-(4-三氟甲基-苯基)-乙酰基氨 基]-1H-异喹啉-2-基}-丙酰胺

a.(R)-2-(5-氨基-6-甲氧基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酰胺
在氢气(1atm)下，将(R)-2-(6-甲氧基-5-硝基-1-氧代异喹啉 -2(1H)-基)丙酰胺(200mg，0.0007mol)、甲醇(20mL，0.5mol)和炭上 钯，10％重量(21mg，0.00017mol)的混合物搅拌3小时。用硅藻土过 滤反应混合物并除去溶剂，得到产物，为棕色固体。
MS m/z＝263.3(M+H)。
b.(R)-2-(6-甲氧基-1-氧代-5-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰氨基)异 喹啉-2(1H)-基)丙酰胺
在室温，将(R)-2-(5-氨基-6-甲氧基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酰 胺(98.34mg，0.0003764mol)、2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸(115.2mg， 0.0005646mol)、N，N-二异丙基乙胺(163.9μL，0.0009409mol)、 N，N，N’，N’-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐(357.8 mg，0.0009409mol)和N，N-二甲基甲酰胺(2mL，0.02mol)的混合物 搅拌过夜。在减压下除去溶剂并通过反相制备型HPLC纯化残余物， 得到产物，为淡黄色固体。
MS m/z＝448.3(M+H)。
1H NMR(400MHz；DMSO-d6)δ9.71(s，1H)，8.17(d， J＝8.87Hz，1H)，7.74(d，J＝7.76Hz，2H)，7.62(d，J＝7.76Hz， 2H)，7.34-7.29(m，2H)，7.20(s，1H)，6.28(d，J＝8.48Hz，1H)， 5.45(q，J＝7.07Hz，1H)，3.90(s，3H)，3.84(s，2H)，1.49(d， J＝7.39Hz，3H)。
方法C
化合物8
(S)-2-{6-氯-1-氧代-5-[2-(4-三氟甲基-苯基)-乙酰基氨基]-1H-异喹 啉-2-基}-丙酰胺

a.(S)-2-(6-氯-5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酰胺
在60℃，将6-氯-5-硝基-1H-异色烯-1-酮(230mg，0.00102mol)、 (S)-2-氨基丙酰胺盐酸盐(127mg，0.00102mol)、三乙胺(142μL， 0.00102mol)和甲醇(20mL，0.5mol)的混合物搅拌3小时。在减压下 除去溶剂并通过急骤色谱法纯化残余物，得到产物，为黄色固体。
MS m/z＝262.3(M+H)。
b.(S)-2-(5-氨基-6-氯-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酰胺
在85℃，加热(S)-2-(6-氯-5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酰胺 (201mg，0.000679mol)、乙醇(10mL，0.2mol)、氯化铵(363.03mg， 0.0067868mol)和水(10mL，0.6mol)的混合物。间隔2分钟分三批添 加铁(152mg，0.00271mol)，并在所述温度下将反应搅拌1小时。将 混合物倾倒在二氯甲烷(150mL)上并分离层。将有机层用盐水洗涤， 干燥并在减压下除去溶剂，得到产物，为淡黄色固体。
MS m/z＝232.5(M+H)。
c.(S)-2-(6-氯-1-氧代-5-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰氨基)异喹啉 -2(1H)-基)丙酰胺
在60℃，将(S)-2-(5-氨基-6-氯-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙酰胺 (100.0mg，0.0003764mol)、2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸(115.2mg， 0.0005646mol)、N，N-二异丙基乙胺(163.9μL，0.0009409mol)、 N，N，N’，N’-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐(357.8 mg，0.0009409mol)和N，N-二甲基甲酰胺(2mL，0.02mol)的混合物 搅拌3天。在减压下除去溶剂并通过反相制备型HPLC纯化残余物， 得到产物，为淡黄色的固体。
MS m/z＝452.1(M+H)。
1H NMR(400MHz；DMSO-d6.)δ10.21(s，1H)，8.15(d， J＝8.68Hz，1H)，7.74(d，J＝7.76Hz，2H)，7.66-7.58(m，4H)， 7.49(d，J＝7.95Hz，1H)，7.25(s，1H)，6.43(d，J＝7.50Hz，1H)， 5.47-5.42(q，J＝7.07Hz，1H)，3.90(s，2H)，1.53(d，J＝7.39Hz， 3H)。
方法D
化合物11
N-[6-氯-2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5- 基]-2-(3-氟-4-三氟甲基-苯基)-乙酰胺

a.(R)-2-(6-氯-5-(2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙酰氨基)-1-氧代 异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯
在小瓶中装入(R)-2-(5-氨基-6-氯-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙 酸酯(160mg，0.00054mol)、二氯甲烷(10mL，0.2mol)、2-(3-氟-4-(三 氟甲基)苯基)乙酸(145mg，0.000651mol)、N，N，N’，N’-四甲基-O-(7- 氮杂苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐(413mg，0.00108mol)和N，N-二 异丙基乙胺(0.189mL，0.00108mol)，并在40℃搅拌2天。在减压下 除去溶剂并通过急骤色谱法纯化残余物，得到产物，为无色的油。
MS m/z＝499.3(M+H)
b.(R)-N-(6-氯-2-(1-羟基丙-2-基)-1-氧代-1，2-二氢异喹啉-5- 基)-2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙酰胺
在圆底烧瓶中装入(R)-2-(6-氯-5-(2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙酰 氨基)-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯(1.200g，0.002406mol)、碳 酸钾(0.997g，0.00722mol)和甲醇(20mL，0.5mol)和2滴水。在室温 将反应搅拌1小时，用硫酸钠过滤并用甲醇洗涤。在减压下除去溶剂 并通过急骤色谱法纯化残余物，得到产物，为白色固体。
MS m/z＝457.3(M+H)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ10.20(s，1H)，8.17(d， J＝8.54Hz，1H)，7.79(t，J＝8.21Hz，1H)，7.60(d，J＝8.87Hz， 1H)，7.56-7.51(m，2H)，7.45(d，J＝8.54Hz，1H)，6.44(d，J＝7.90 Hz，1H)，5.03-4.99(m，1H)，4.94(t，J＝5.21Hz，1H)，3.94(s， 2H)，3.68-3.56(m，2H)，1.28(d，J＝7.51Hz，3H)。
方法E
化合物13
N-[6-氯-2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5- 基]-2-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-乙酰胺

a.(R)-6-氯-2-(1-羟基丙-2-基)-5-硝基异喹啉-1(2H)-酮
在微波瓶中装入6-氯-5-硝基-1H-异色烯-1-酮(80.0mg，0.000355 mol)、(2R)-2-氨基丙-1-醇(29mg，0.00039mol)、三乙胺(0.15mL， 0.0011mol)和甲醇(4mL，0.1mol)，并在100℃在微波照射下加热 30分钟。在减压下除去溶剂并通过急骤色谱法纯化残余物，得到期望 的产物，为淡黄色固体。
MS m/z＝283.2(M+H)。
1H NMR (400MHz；DMSO-d6)δ8.43(d，J＝8.86Hz，1H)， 7.80(d，J＝8.86Hz，1H)，7.75(d，J＝7.98Hz，1H)，6.36(d，J＝7.09 Hz，1H)，5.03-4.86(m，2H)，3.63-3.52(m，2H)，1.30(d， J＝7.0Hz，3H)。
b.(R)-2-(6-氯-5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯
在45℃，将(R)-6-氯-2-(1-羟基丙-2-基)-5-硝基异喹啉-1(2H)-酮 (750.0mg，0.002653mol)、乙酸酐(0.325mL，0.00345mol)、吡啶 (0.322mL，0.00398mol)和二氯甲烷(20mL，0.3mol)的混合物加热 过夜。在减压下除去溶剂并干燥，得到产物，为粘稠黄色的油。
MS m/z＝325.4(M+H)。
1H NMR(400MHz；DMSO-d6)δ8.42(d，J＝8.61Hz，1H)， 7.47(d，J＝8.61Hz，1H)，7.23(d，J＝8.6Hz，1H)，6.29(d，J＝8.03 Hz，1H)，5.34-5.29(m，1H)，4.28-4.20(m，2H)，1.94(s，3H)， 1.40(d，J＝6.96Hz，3H)。
c.(R)-2-(5-氨基-6-氯-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯
在圆底烧瓶中装入(R)-2-(6-氯-5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙 基乙酸酯(160.0mg，0.0004927mol)和乙醇(7mL，0.1mol)，并在85℃ 加热反应。添加水(7mL，0.4mol)中的氯化铵(264mg，0.00493mol)， 接着分两批添加铁(110mg，0.0020mol)。在所述温度下将反应搅拌一 小时。然后将反应混合物倾倒在二氯甲烷(60mL)上并萃取。将萃取物 用盐水洗涤，干燥并在减压下除去溶剂，得到产物，为无色固体。
MS m/z＝295.5(M+H)。
d。(R)-2-(6-氯-5-(2-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)乙酰氨基)-1-氧代异 喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯
在反应瓶中装入(R)-2-(5-氨基-6-氯-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基 乙酸酯(210mg，0.00071mol)、2-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)乙酸(300 mg，0.001mol)、N，N，N’，N’-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲鎓六 氟磷酸盐(600mg，0.002mol)、N，N-二异丙基乙胺(600μL，0.003mol) 并在50℃搅拌5天。在减压下除去溶剂并通过急骤色谱法纯化残余 物，得到产物，为淡黄色的油。
MS m/z＝499.3(M+H)。
e。(R)-N-(6-氯-2-(1-羟基丙-2-基)-1-氧代-1，2-二氢异喹啉-5- 基)-2-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)乙酰胺
在圆底烧瓶中装入(R)-2-(6-氯-5-(2-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)乙酰 氨基)-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯(250mg，0.00050mol)、碳 酸钾(100mg，0.00075mol)和甲醇(8mL，0.2mol)和2滴水。在室温 将反应搅拌30分钟。将反应混合物过滤并用甲醇洗涤。在减压下除去 溶剂并通过反相制备型HPLC纯化残余物，得到产物，为灰白色固体。
MS m/z＝457.4(M+1)。
1H NMR(400MHz；DMSO-d6)δ10.17(s，1H)，8.16(d， J＝8.85Hz，1H)，7.82(d，J＝7.76Hz，1H)，7.72-7.74(m，1H)， 7.59(d，J＝8.84Hz，1H)，7.54-7.49(m，2H)，6.42(d，J＝7.50Hz， 1H)，5.03-4.93(m，2H)，3.90(s，2H)，3.66-3.56(m，2H)，1.28(d， J＝7.63Hz，3H)。
方法F
化合物17
N-[6-环丙基-2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉 -5-基]-2-(3-氟-4-三氟甲基-苯基)-乙酰胺

a.(R)-2-(6-环丙基-5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯
在圆底烧瓶中装入(R)-6-环丙基-2-(1-羟基丙-2-基)-5-硝基异喹啉 -1(2H)-酮(30mg，0.0001mol)、乙酸酐(0.015mL，0.00016mol)、吡 啶(0.015mL，0.00019mol)和二氯甲烷(4mL，0.06mol)，并在室温搅 拌过夜。在减压下除去溶剂并在没有纯化的情况下将产物继续用于下 一步。
MS m/z＝331.5(M+H)。
b.(R)-2-(5-氨基-6-环丙基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯
在圆底烧瓶中装入(R)-2-(6-环丙基-5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)- 基)丙基乙酸酯(28mg，0.000085mol)、乙醇(10mL，0.2mol)并添加 炭上钯，10％重量(1.0mg，0.0000085mol)。将所述烧瓶抽真空，用 氢气冲洗两次并将反应在氢气(1atm)下搅拌2小时。用硅藻土过滤反 应并除去溶剂，得到产物。
MS m/z＝301.2(M+H)。
c.(R)-2-(6-环丙基-5-(2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙酰氨基)-1-氧 代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯
在反应瓶中装入(R)-2-(5-氨基-6-环丙基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基) 丙基乙酸酯(23.0mg，0.0000766mol)、2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙酸 (26mg，0.00011mol)、N，N，N’，N’-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲 鎓六氟磷酸盐(73mg，0.00019mol)、N，N-二异丙基乙胺(33μL，0.00019 mol)和二氯甲烷(2mL，0.03mol)并在40℃将反应搅拌过夜。在减压 下除去溶剂并通过急骤色谱法纯化残余物，得到产物，为淡黄色的固 体。
MS m/z＝505.3(M+H)。
d。(R)-N-(6-环丙基-2-(1-羟基丙-2-基)-1-氧代-1，2-二氢异喹啉-5- 基)-2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙酰胺
在圆底烧瓶中装入(R)-2-(6-环丙基-5-(2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基) 乙酰氨基)-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯(23mg，0.000046mol)、 碳酸钾(9.4mg，0.000068mol)和甲醇(2mL，0.05mol)和2滴水并将 反应搅拌30分钟。用硅藻土过滤反应混合物并在减压下除去溶剂。通 过反相制备型HPLC纯化残余物，得到产物。
MS m/z＝463.5(M+H)。
H NMR(400MHz；丙酮-d6)δ9.02(s，1H)，8.03(d，J＝8.15 Hz，1H)，7.61(t，J＝7.52Hz，1H)，7.42(d，J＝5.01Hz，1H)，7.39 (s，1H)，7.24(d，J＝7.52Hz，1H)，6.91(d，J＝8.15Hz，1H)，6.36 (d，J＝8.15Hz，1H)，4.99-4.97(m，1H)，3.93(s，2H)，3.68-3.64 (m，2H)，2.04-1.94(m，1H)，1.24(d，J＝7.32Hz，3H)，0.81-0.77 (m，2H)，0.60-0.56(m，2H)。
方法G
化合物18
2-(2-氟-3-三氟甲基-苯基)-N-[2-(2-羟基-乙基)-6-(2-羟基-乙基氨 基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-基]-乙酰胺

a.2-(2-(2-乙酰氧基乙基)-5-硝基-1-氧代-1，2-二氢异喹啉-6-基氨 基)乙酸乙酯
在圆底烧瓶中装入2-(2-羟基乙基)-6-(2-羟基乙基氨基)-5-硝基异 喹啉-1(2H)-酮(300.0mg，0.0010mol)、乙酸酐(0.24mL，0.0026mol)、 吡啶(0.33mL，0.0041mol)和二氯甲烷(10mL，0.2mol)并在45℃加 热过夜。在减压下除去溶剂，得到产物，在没有进一步纯化的情况下， 将其用于下一反应。
MS m/z＝378.2(M+H)。
b.乙酸2-[6-(2-乙酰氧基-乙基氨基)-5-氨基-1-氧代-1H-异喹啉-2- 基]-乙酯
在85℃，添加2-(2-(2-乙酰氧基乙基)-5-硝基-1-氧代-1，2-二氢异 喹啉-6-基氨基)乙基乙酸酯(350mg，0.00093mol)、乙醇(20mL，0.3 mol)、氯化铵(496.1mg，0.009275mol)和水(10mL，0.6mol)的混合 物。间隔5分钟分两批添加铁(207mg，0.00371mol)，并在所述温度 下搅拌1小时。然后将反应混合物倾倒在二氯甲烷(100mL)上并分离 层。将有机层用盐水洗涤并干燥。在减压下除去溶剂并在没有纯化的 情况下将产物用于下一步。
MS m/z＝348.5(M+H)。
c.2-(2-(2-乙酰氧基乙基)-5-(2-(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)乙酰氨 基)-1-氧代-1，2-二氢异喹啉-6-基氨基)乙基乙酸酯
在反应瓶中装入乙酸2-[6-(2-乙酰氧基-乙基氨基)-5-氨基-1-氧 代-1H-异喹啉-2-基]-乙酯(100.00mg，0.00028788mol)、2-(2-氟-3-(三 氟甲基)苯基)乙酸(76.74mg，0.0003454mol)、N，N，N’，N’-四甲基-O-(7- 氮杂苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐(274mg，0.000720mol)、N，N-二 异丙基乙胺(0.125mL，0.000720mol)和二氯甲烷(3mL，0.05 mol)。在40℃将反应加热5小时。在减压下除去溶剂并通过急骤色谱 法纯化残余物，得到产物，为灰白色的固体。
MS m/z＝552.3(M+H)。
d.2-(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)-N-(2-(2-羟基乙基)-6-(2-羟基乙基氨 基)-1-氧代-1，2-二氢异喹啉-5-基)乙酰胺
在圆底烧瓶中装入2-(2-(2-乙酰氧基乙基)-5-(2-(2-氟-3-(三氟甲基) 苯基)乙酰氨基)-1-氧代-1，2-二氢异喹啉-6-基氨基)乙基乙酸酯(120 mg，0.00022mol)、碳酸钾(45mg，0.00033mol)和甲醇(3mL，0.07mol) 和2滴水。在室温将反应搅拌30分钟，用硫酸钠过滤，并在减压下除 去溶剂。通过急骤色谱法纯化残余物，得到产物，为白色固体。
MS m/z＝468.4(M+H)。
1H NMR(400MHz；DMSO-d6)δ9.45(s，1H)，7.98(d， J＝8.95Hz，1H)，7.79(t，J＝7.45Hz，1H)，7.70(t，J＝7.09Hz， 1H)，7.40(t，J＝7.83Hz，1H)，7.22(d，J＝7.83Hz，1H)，6.91(d， J＝9.08Hz，1H)，6.16(d，J＝7.73Hz，1H)，5.64(t，J＝5.72Hz， 1H)，4.84(t，J＝5.33Hz，1H)，4.76(t，J＝5.48Hz，1H)，3.96(s， 2H)，3.91(t，J＝5.27Hz，2H)，3.62-3.53(m，4H)，3.27(q，J＝6.15 Hz，2H)。
方法H
化合物19
N-[6-氯-2-(2-羟基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-基]-2-(4-氟 -3-三氟甲基-苯基)-乙酰胺

a.6-氯-2-(2-羟基乙基)-5-硝基异喹啉-1(2H)-酮
在微波瓶中装入6-氯-5-硝基-1H-异色烯-1-酮(1.0g，0.00443 mol)、乙醇胺(0.401mL，0.00665mol)、三乙胺(1.24mL，0.00886mol) 和甲醇(30mL，0.7mol)并在100℃使反应经受微波照射1小时。在 减压下除去溶剂并通过急骤色谱法纯化残余物，得到产物，为黄色固 体。MS m/z＝269.4(M+H)。1H NMR(400MHz；CDCl3)δ8.41(d， J＝8.56Hz，1H)，7.52(d，J＝8.56Hz，1H)，7.33(d，J＝8.4Hz，1H)， 6.31(d，J＝8.56Hz，1H)，4.17(t，J＝44.88Hz，2H)，3.99(t，J＝5.11 Hz，2H)，2.55(bs，1H)。
b.2-(6-氯-5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)乙基乙酸酯
在圆底烧瓶中装入6-氯-2-(2-羟基乙基)-5-硝基异喹啉-1(2H)-酮 (400.0mg，0.00149mol)、乙酸酐(0.21mL，0.0022mol)、吡啶(0.18mL， 0.0022mol)和二氯甲烷(20mL，0.2mol)并在室温将反应搅拌过夜。在 减压下除去溶剂，得到产物，为黄色固体。
MS m/z＝311.3(M+H)。
c.2-(5-氨基-6-氯-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)乙基乙酸酯
在85℃，在圆底烧瓶中装入2-(6-氯-5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)- 基)乙基乙酸酯(450.00mg，0.0014484mol)、乙醇(20mL，0.3mol)并 添加水(10mL，0.6mol)中的氯化铵(774.8mg，0.01448mol)，接着 分两批添加铁(324mg，0.00579mol)。在所述温度下将反应搅拌45 分钟然后倾倒在二氯甲烷(200mL)上并萃取。在减压下除去溶剂，得 到纯产物，为淡黄色固体。
MS m/z＝281.3(M+H)
d.2-(6-氯-5-(2-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)乙酰氨基)-1-氧代异喹啉 -2(1H)-基)乙基乙酸酯
在反应瓶中装入2-(5-氨基-6-氯-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)乙基乙 酸酯(60.0mg，0.000214mol)、2-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)乙酸(57.0 mg，0.000256mol)、N，N，N’，N’-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲鎓 六氟磷酸盐(203mg，0.000534mol)、N，N-二异丙基乙胺(0.093mL， 0.00053mol)和二氯甲烷(3mL，0.05mol)，并在45℃将反应混合物 搅拌4天。在减压下除去溶剂并通过急骤色谱法纯化残余物，得到产 物，为淡黄色固体。
MS m/z＝485.2(M+H)
e.N-(6-氯-2-(2-羟基乙基)-1-氧代-1，2-二氢异喹啉-5-基)-2-(4-氟 -3-(三氟甲基)苯基)乙酰胺
在圆底烧瓶中装入2-(6-氯-5-(2-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)乙酰氨 基)-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)乙基乙酸酯(80.0mg，0.000165mol)、碳 酸钾(34.2mg，0.000248mol)、甲醇和2滴水并在室温将反应搅拌20 分钟。将反应用硫酸钠和硅藻土过滤并用甲醇洗涤。在减压下除去溶 剂并通过反相制备型HPLC纯化残余物，得到产物，为浅黄色固体。
MS m/z＝443.3(M+H)
1H NMR(400MHz；DMSO-d6)δ10.18(s，1H)，8.15(d， J＝8.81Hz，1H)，7.82(d，J＝6.7Hz，1H)，7.77-7.74(m，1H)，7.59 (d，J＝8.81Hz，1H)，7.52(t，J＝9.52Hz，1H)，7.46(d，J＝7.40 Hz，1H)，6.40(d，J＝7.59Hz，1H)，4.88(t，J＝5.0Hz，1H)，4.00 (t，J＝5.55Hz，2H)，3.89(s，2H)，3.65(q，J＝5.55Hz，2H)。
方法I
化合物21
N-[6-甲基-2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉 -5-基]-2-(3-氟-4-三氟甲基-苯基)-乙酰胺

a.(R)-2-(1-羟基丙-2-基)-6-甲基-5-硝基异喹啉-1(2H)-酮
在圆底烧瓶中装入6-甲基-5-硝基-1H-异色烯-1-酮(260.00mg， 0.0012673mol)、(2R)-2-氨基丙-1-醇(143mg，0.00190mol)、三乙胺(1.6 mL，0.011mol)和甲醇(5mL，0.1mol)并在80℃将反应加热过夜。在 减压下除去溶剂并通过急骤色谱法纯化残余物，得到产物，为淡黄色 固体。
MS m/z＝263.4(M+H)。
b.(R)-2-(6-甲基-5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯
在室温，将(R)-2-(1-羟基丙-2-基)-6-甲基-5-硝基异喹啉-1(2H)-酮 (100.0mg，0.0003813mol)、吡啶(0.062mL，0.00076mol)、乙酸酐 (0.0432mL，0.000458mol)和二氯甲烷(5mL，0.08mol)的混合物搅 拌过夜。在减压下除去溶剂，在真空下将得到的产物(黄色油)干燥并 在没有任何纯化的情况下用于下一步。
MS m/z＝305.4(M+H)。
c.(R)-2-(5-氨基-6-甲基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯
在圆底烧瓶中装入(R)-2-(6-甲基-5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基) 丙基乙酸酯(110.0mg，0.0003615mol)和乙醇(10mL，0.2mol)并在 85℃加热。添加水(2mL，0.1mol)中的氯化铵(193.4mg，0.003615 mol)，接着分两批添加铁(80.7mg，0.00144mol)。在相同温度下将得 到的混合物搅拌30分钟。将反应倾倒在二氯甲烷(50mL)上并萃取， 用盐水洗涤并干燥。在减压下除去溶剂，得到产物，为油。
MS m/z＝275.4(M+H)。
d.(R)-2-(5-(2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙酰氨基)-6-甲基-1-氧代 异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯
在圆底烧瓶中装入(R)-2-(5-氨基-6-甲基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基) 丙基乙酸酯(175mg，0.000638mol)、2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙酸 (210mg，0.00096mol)、N，N，N’，N’-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基) 脲鎓六氟磷酸盐(610mg，0.0016mol)、N，N-二异丙基乙胺(0.28mL， 0.0016mol)和N，N-二甲基甲酰胺(8mL，0.1mol)。在45℃将反应混 合物搅拌24小时。用水萃取反应并用乙酸乙酯萃取，用碳酸氢钠、盐 水洗涤，并干燥。在减压下除去溶剂并通过急骤色谱法纯化残余物， 得到产物，为淡黄色的油。
MS m/z＝479.3(M+H)
e.(R)-2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-N-(2-(1-羟基丙-2-基)-6-甲基-1- 氧代-1，2-二氢异喹啉-5-基)乙酰胺
在圆底烧瓶中装入(R)-2-(5-(2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙酰氨 基)-6-甲基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯(300.00mg，0.62704 mmol)、碳酸钾(260mg，0.0019mol)、甲醇(20mL，0.4mol)和2滴 水。在室温将反应搅拌20分钟。用水萃取反应并用乙酸乙酯萃取，用 碳酸氢钠、盐水洗涤，并干燥。在减压下除去溶剂，得到产物，为淡 黄色固体。
MS m/z＝437.5(M+H)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ9.91(s，1H)，8.07(d， J＝8.45Hz，1H)，7.79(t，J＝7.85Hz，1H)，7.53(d，J＝12.68Hz， 1H)，7.45(d，J＝7.85Hz，2H)，7.37(d，J＝8.45Hz，1H)，6.44(d， J＝7.66Hz，1H)，5.05-5.00(m，1H)，4.93(t，J＝5.66Hz，1H)，3.92 (s，2H)，3.67-3.51(m，2H)，2.22(s，3H)，1.28(d，J＝7.51Hz， 3H)。
方法J
化合物29
2-(3-氟-4-三氟甲基-苯基)-N-((S)-6-甲基-1-氧代-2-吡咯烷-3-基 -1，2-二氢-异喹啉-5-基)-乙酰胺

a.(S)-3-(5-氨基-6-甲基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)吡咯烷-1-甲酸叔 丁酯
在85℃，在圆底烧瓶中装入(S)-叔丁基3-(6-甲基-5-硝基-1-氧代 异喹啉-2(1H)-基)吡咯烷-1-甲酸酯(500.0mg，0.001339mol)、乙醇(5 mL，0.08mol)并添加水(3mL，0.2mol)中的氯化铵(716.3mg， 0.01339mol)。分批添加铁(299mg，0.00536mol)并在所述温度下搅拌 30分钟，倾倒在二氯甲烷(50mL)上并萃取。在减压下除去溶剂，得 到纯产物，为淡黄色的固体。
b.(S)-叔丁基3-(5-(2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙酰氨基)-6-甲基 -1-氧代异喹啉-2(1H)-基)吡咯烷-1-甲酸酯
向反应瓶中装入(S)-叔丁基3-(5-氨基-6-甲基-1-氧代异喹啉 -2(1H)-基)吡咯烷-1-甲酸酯(150.00mg，0.043678mmol)、2-(3-氟 -4-(三氟甲基)苯基)乙酸(116.4mg，0.05241mmol)、N，N，N’，N’-四甲基 -O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐(420mg，1.1mmol)、N，N- 二异丙基乙胺(0.19mL，1.1mmol)和N，N-二甲基甲酰胺(2mL，20 mmol)并在45℃将反应搅拌过夜。在减压下除去溶剂并通过急骤色 谱法纯化残余物，得到产物，为淡黄色黄色油。
c.(S)-2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-N-(6-甲基-1-氧代-2-(吡咯烷-3- 基)-1，2-二氢异喹啉-5-基)乙酰胺
在圆底烧瓶中装入(S)-3-(5-(2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙酰氨 基)-6-甲基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(100.0mg， 0.0001826mol)、二氯甲烷(3mL，0.05mol)，添加乙醚(4mL)中的2M 盐酸并在45℃将反应搅拌3小时。在减压下除去溶剂并通过反相制 备型HPLC纯化残余物，得到产物，为白色固体。
MS m/z＝448.3(M+H)
1H NMR(400MHz；DMSO-d6)δ9.92(s，1H)，8.08(d，J＝8.79 Hz，1H)，7.79(t，J＝8.16Hz，1H)，7.55-7.51(m，2H)，7.44(d， J＝8.16Hz，1H)，7.38(d，J＝8.79Hz，1H)，6.49(d，J＝6.90Hz， 1H)，5.34-5.31(m，1H)，3.92(s，2H)，3.14-3.05(m，2H)， 2.90-2.78(m，2H)，2.22(s，3H)，2.22-2.19(m，1H)，2.00-1.98 (m，1H)，1.72-1.68(m，1H)。
方法K
化合物31
2-金刚烷-1-基-N-[2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-6-甲基-1-氧代-1，2- 二氢-异喹啉-5-基]-乙酰胺

a.乙酸(R)-2-[5-(2-金刚烷-1-基-乙酰基氨基)-6-甲基-1-氧代-1H- 异喹啉-2-基]-丙酯。
在圆底烧瓶中装入(R)-2-(5-氨基-6-甲基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基) 丙基乙酸酯(150.0mg，0.0005468mol)、1-金刚烷乙酸(127mg， 0.000656mol)、N，N，N’，N’-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲鎓六氟 磷酸盐(520mg，0.00137mol)、N，N-二异丙基乙胺(0.238mL，0.00137 mol)、N，N-二甲基甲酰胺(3mL，0.04mol)、二氯甲烷(10mL，0.2mol) 并在45℃将反应搅拌3天。在减压下除去溶剂并通过反相制备型 HPLC纯化残余物，得到产物，为白色固体。
b.(R)-2-金刚烷基-N-(2-(1-羟基丙-2-基)-6-甲基-1-氧代-1，2-二氢 异喹啉-5-基)乙酰胺。
在圆底烧瓶中装入乙酸(R)-2-[5-(2-金刚烷-1-基-乙酰基氨基)-6- 甲基-1-氧代-1H-异喹啉-2-基]-丙基酯(120.00mg，0.26633mmol)、碳 酸钾(110.00mg，0.000799mol)、甲醇(10mL，0.3mol)和几滴甲醇。 在室温将反应混合物搅拌1小时。过滤混合物并在减压下除去溶剂。 残余物用(氯仿∶IPA 3∶1)萃取并在减压下除去溶剂，得到产物，为 淡黄色固体。
MS m/z＝409.5(M+H)
1H NMR(400MHz；DMSO-d6)δ9.50(s，1H)，8.06(d， J＝8.54Hz，1H)，7.48(d，J＝7.93Hz，1H)，7.37(d，J＝7.93Hz， 1H)，6.49(d，J＝8.54Hz，1H)，5.05-5.00(m，1H)，4.94(bs， 1H)，3.64-3.59(m，2H)，2.28(s，3H)，2.18(s，2H)，1.97(m， 3H)，1.71-1.61(m，12H)，1.27(d，J＝7.06，3H)。
方法L
化合物32
2-环庚基-N-[2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-6-甲基-1-氧代-1，2-二氢- 异喹啉-5-基]-乙酰胺

a.(R)-2-(5-(2-环庚基乙酰氨基)-6-甲基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基) 丙基乙酸酯
在圆底烧瓶中装入(R)-2-(5-氨基-6-甲基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基) 丙基乙酸酯(150.00mg，0.054682mmol)、N，N，N’，N’-四甲基-O-(7-氮 杂苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐(520.00mg，0.00137mol)、N，N-二 异丙基乙胺(0.238mL，0.00137mol)、N，N-二甲基甲酰胺(3mL，0.04 mol)、二氯甲烷(10mL，0.2mol)。在45℃将反应混合物搅拌3天。 添加水并用乙酸乙酯萃取。分离乙酸乙酯层并在减压下除去溶剂。通 过急骤色谱法纯化残余物，得到产物，为白色固体。
b.(R)-2-环庚基-N-(2-(1-羟基丙-2-基)-6-甲基-1-氧代-1，2-二氢异 喹啉-5-基)乙酰胺
在圆底烧瓶中装入(R)-2-(5-(2-环庚基乙酰氨基)-6-甲基-1-氧代异 喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯(180.0mg，0.0004363mol)、碳酸钾(180mg， 0.0013mol)、甲醇(15mL，0.37mol)和几滴水。在室温将反应混合物 搅拌1小时。在减压下除去溶剂，将水添加到残余物中，用(氯仿∶IPA，3∶ 1)萃取，在减压下除去溶剂并通过反相制备型HPLC纯化残余物，得 到产物，为白色固体。
MS  m/z＝371.3(M+H)
1H NMR(400MHz；DMSO-d6)δ9.57(s，1H)，8.06(d， J＝8.33Hz，1H)，7.47(d，J＝7.95Hz，1H)，7.37(d，J＝8.71Hz， 1H)，6.44(d，J＝7.96Hz，1H)，5.08-5.05(m，1H)，4.93(t，J＝5.43 Hz，1H)，3.67-3.55(m，2H)，2.33(d，J＝7.42Hz，2H)，2.26(s， 3H)，2.05(m，1H)，1.81-1.76(m，2H)，1.66-1.41(m，8H)， 1.34-1.31(m，2H)，1.27(d，J＝6.97，3H)。
方法M
化合物33
(S)-2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-N-(2-(1-羟基丙-2-基)-6-甲基-1-氧 代-1，2-二氢异喹啉-5-基)乙酰胺

在圆底烧瓶中装入(S)-2-(5-(2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-乙酰氨 基)-6-甲基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯(200.00mg，0.41803 mmol)、碳酸钾(173mg，0.00125mol)、甲醇(15mL，0.37mol)和几 滴水。在室温将反应搅拌1小时。将反应混合物过滤并在减压下除去 溶剂。残余物用IPA∶氯仿，1∶3萃取，用水洗涤并在减压下除去溶 剂。通过反相制备型HPLC纯化残余物，产生期望的化合物，为淡橙 色固体。
MS m/z＝437.5(M+H)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ9.92(s，1H)，8.07(d， J＝8.33Hz，1H)，7.79(t，J＝7.64Hz，1H)，7.53(d，J＝13.20Hz， 1H)，7.45(d，J＝7.64Hz，2H)，7.37(d，J＝8.33Hz，1H)，6.44(d， J＝8,33Hz，1H)，5.04-5.00(m，1H)，4.93(t，J＝5.25Hz，1H)，3.92 (s，2H)，3.67-3.55(m，2H)，2.22(s，3H)，1.27(d，J＝7.47Hz， 3H)。
方法N
化合物37
2-(1-羟基-环庚基)-N-[2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-6-甲基-1-氧代 -1，2-二氢-异喹啉-5-基]-乙酰胺

a.(R)-2-(5-(2-(1-羟基环庚基)乙酰氨基)-6-甲基-1-氧代异喹啉 -2(1H)-基)丙基乙酸酯
在圆底烧瓶中装入(R)-2-(5-氨基-6-甲基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基) 丙基乙酸酯(100.00mg，0.36454mmol)、2-(1-羟基环庚基)乙酸(75.3 mg，0.437mmol)、N，N，N’，N’-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲鎓六 氟磷酸盐(346mg，0.911mmol)、N，N-二异丙基乙胺(0.159mL，0.911 mmol)、N，N-二甲基甲酰胺(2mL，30mmol)和二氯甲烷(8mL，100 mmol)。在室温将反应混合物搅拌过夜。在减压下除去溶剂并在没有 进一步纯化的情况下将残余物继续用于下一步。
b.(R)-2-(1-羟基环庚基)-N-(2-(1-羟基丙-2-基)-6-甲基-1-氧代-1，2- 二氢异喹啉-5-基)乙酰胺
在圆底烧瓶中装入(R)-2-(5-(2-(1-羟基环庚基)乙酰氨基)-6-甲基 -1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯(100.00mg，0.14mmol)、碳酸钾 (58.0mg，0.000420mol)和甲醇(4mL，0.1mol)并在室温将反应混合 物搅拌1小时。在减压下除去溶剂并通过反相制备型HPLC纯化残余 物，得到产物。
MS m/z＝387.4(M+H)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ8.44(s，1H)，7.95(d， J＝8.3875Hz，1H)，7.06-7.04(m，2H)，6.34(d，J＝7.74Hz，1H)， 5.10-5.06(m，1H)，3.80-3.67(m，2H)，3.47(s，1H)，2.59(s， 2H)，2.21(s，3H)，1.87-1.39(m，13H)，1.33(d，J＝7.10Hz，3H)
方法O
化合物38
2-(3-氟-4-三氟甲基-苯基)-N-[6-甲基-2-(2-甲基氨基-乙基)-1-氧代 -1，2-二氢-异喹啉-5-基]-乙酰胺

a.(2-(6-甲基-5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)乙基)氨基甲酸叔丁 基甲酯
在微波瓶中装入6-甲基-5-硝基-1H-异色烯-1-酮(270mg，0.0012 mol)、叔丁基2-氨基乙基甲基氨基甲酸酯(400mg，0.002mol)、三乙 胺(0.6mL，0.005mol)和甲醇(5mL，0.1mol)并在100℃将反应加热 1.5小时。在减压下除去溶剂并通过急骤色谱法纯化残余物，得到期望 的产物，为棕色油。
MS m/z＝362.0(M+H)+。
b.2-(5-氨基-6-甲基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)乙基(甲基)氨基甲酸 叔丁酯
在圆底烧瓶中装入(2-(6-甲基-5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)乙 基)氨基甲酸叔丁基甲酯(110mg，0.00031mol)和乙醇(5mL，0.08 mol)，并在85℃加热溶液。添加水(2mL，0.09mol)中的氯化铵(300 mg，0.006mol)，接着分两批添加铁(200mg，0.003mol)。将反应搅 拌1小时，倾倒在二氯甲烷(200mL)上并萃取。在减压下除去溶剂并 通过急骤色谱法纯化残余物，得到期望的产物，为黄色的油。
MS m/z＝332.2(M+H)+。
c.2-(5-(2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙酰氨基)-6-甲基-1-氧代异喹 啉-2(1H)-基)乙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯
在反应瓶中装入2-(5-氨基-6-甲基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)乙基 (甲基)氨基甲酸叔丁酯(150mg，0.00041mol)、2-(3-氟-4-(三氟甲基) 苯基)乙酸(200mg，0.0009mol)、N，N，N’，N’-四甲基-O-(7-氮杂苯并三 唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐(700mg，0.002mol)、N，N-二异丙基乙胺(0.3 mL，0.002mol)、N，N-二甲基甲酰胺(4mL，0.05mol)并在45℃将反 应搅拌过夜。然后用水淬灭反应，用温的乙酸乙酯萃取，并在减压下 除去溶剂。通过急骤色谱法，然后通过反相制备型HPLC纯化残余物， 得到产物，为灰白色的固体。
MS m/z＝536.3(M+H)+。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.13(d，J＝8.3Hz，1H)，7.63 (t，J＝7.8Hz，1H)，7.37-7.35(m，3H)，7.14(d，J＝7.6Hz， 1H)，6.46(d，J＝7.4Hz，1H)，4.07-4.02(m，2H)，3.86(s，2H)， 3.62-3.57(m，2H)，2.23(s，3H)，1.96(s，3H)，0.98(s，9H)。
d.2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-N-(6-甲基-2-(2-(甲基氨基)乙基)-1- 氧代-1，2-二氢异喹啉-5-基)乙酰胺
将2-(5-(2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙酰氨基)-6-甲基-1-氧代异喹 啉-2(1H)-基)乙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(79mg，0.00015mol)溶于甲醇 (3mL，0.07mol)，并添加3N盐酸(1mL)。在室温将混合物搅拌过夜。 添加附加的2mL 3N盐酸和3mL浓盐酸，并在室温将混合物搅拌过 夜。在减压下除去挥发物并通过急骤色谱法，然后通过反相制备型 HPLC纯化残余物，得到期望的产物，为白色固体。
MS m/z＝436.1(M+H)+。
1H NMR(400MHz CD3OD)δ8.21(d，J＝8.3Hz，1H)，7.72 (t，J＝7.9Hz，1H)，7.47-7.44(m，3H)，7.36(d，J＝7.6Hz，1H)， 6.57(d，J＝7.6Hz，1H)，4.16(t，J＝6.5Hz，2H)，3.96(s，2H)， 2.94(t，J＝6.5Hz，2H)，2.42(s，3H)，2.32(s，3H)。
方法P
化合物40
2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-6-甲基-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-甲 酸3-氟-4-三氟甲基-苯甲酰胺

a.(R)-N-(3-氟-4-(三氟甲基)苄基)-2-(1-羟基丙-2-基)-6-甲基-1-氧 代-1，2-二氢异喹啉-5-甲酰胺
在圆底烧瓶中装入(R)-2-(5-(3-氟-4-(三氟甲基)苄基-氨基甲酰 基)-6-甲基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯(0.47g，0.00093mol)、 碳酸钾(0.22g，0.0016mol)和甲醇(100mL，2mol)。在室温将反应搅 拌1小时。在减压下除去溶剂并通过反相HPLC纯化残余物，得到期 望的产物，为灰白色固体。
MS m/z＝437.3(M+H)+。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.29(d，J＝8.3Hz，1H)， 7.74(t，J＝7.5Hz，1H)，7.51-7.42(m，4H)，6.55(d，J＝7.8Hz， 1H)，5.21-5.16(m，1H)，4.72(s，2H)，3.86-3.76(m，2H)，2.46 (s，3H)，1.42(d，J＝7.0Hz，3H)。
方法Q
化合物41
6-氯-2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-甲酸 3-氟-4-三氟甲基-苯甲酰胺

a.(R)-2-(6-氯-5-碘-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯
在0℃，向亚硝酸钠(1g，0.02mol)、六甲基二硅烷(3g，0.02 mol)、碘(5g，0.02mol)和氯化苄基三乙铵(0.3g，0.001mol)在四氯化 碳(100mL，1mol)中的溶液中添加(R)-2-(5-氨基-6-氯-1-氧代异喹啉 -2(1H)-基)丙基乙酸酯(2.3g，0.0070mol)在二氯甲烷(3mL，0.05mol) 中的溶液。在相同温度下将混合物搅拌40分钟，然后温热至室温过夜。 通过急骤色谱法纯化混合物，得到所期望的产物，为棕色油。
MS m/z＝406.0(M+H)+。
b.(R)-2-(6-氯-5-(3-氟-4-(三氟甲基)苄基氨基甲酰基)-1-氧代异喹 啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯
在5mL工艺瓶中装入(R)-2-(6-氯-5-碘-1-氧代异喹啉-2(1H)-基) 丙基乙酸酯(200mg，0.0005mol)、3-氟-4-三氟甲基-苄基胺(200mg， 0.0009mol)、六羰基合钼(100mg，0.0005mol)、乙酸钯(10mg，0.00005 mol)、1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一-7-烯(300mg，0.002mol)和1，4-二氧 杂环己烷(3mL，0.04mol)。在空气下将所述瓶密封并在110℃暴露 于微波照射15分钟，冷却至室温，并浓缩。通过急骤色谱法纯化残 余物，得到所期望的产物，为澄清的油。
MS m/z＝499.5(M+H)+。
1H NMR(400MHz，CDCl3，δ8.38(d，J＝8.6Hz，1H)，7.63 (t，J＝7.8Hz，1H)，7.44(d，J＝8.7Hz，1H)，7.33-7.30(m， 2H)，7.20(d，J＝7.8Hz，1H)，6.51(d，J＝7.8Hz，1H)，6.50-6.36 (m，1H)，5.43-5.38(m，1H)，4.78(d，J＝6.3Hz，2H)，4.32-4.30 (m，2H)，2.01(s，3H)，1.45(d，J＝7.2Hz，3H)。
c.(R)-6-氯-N-(3-氟-4-(三氟甲基)苄基)-2-(1-羟基丙-2-基)-1-氧代 -1，2-二氢异喹啉-5-甲酰胺
在圆底烧瓶中装入(R)-2-(6-氯-5-(3-氟-4-(三氟甲基)苄基氨基甲 酰基)-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯(120mg，0.00022mol)、碳 酸钾(100mg，0.0007mol)和甲醇(7mL，0.2mol)。在室温将反应搅拌 1小时。在减压下除去溶剂并通过反相制备型HPLC纯化残余物，得 到期望的产物，为白色固体。
MS m/z＝457.2(M+H)+。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.38(d，J＝8.7Hz，1H)，7.73 (t，J＝8.0Hz，1H)，7.59(d，J＝8.0Hz，2H)，7.48-7.44(m， 2H)，6.55(d，J＝7.7Hz，1H)，5.21-5.16(m，1H)，4.74(s，2H)， 3.86-3.77(m，2H)，1.42(d，J＝7.0Hz，3H)。
方法R
化合物47
6-氯-2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-甲酸 (1-羟基-环庚基甲基)-酰胺

a.(R)-6-氯-N-((1-羟基环庚基)甲基)-2-(1-羟基丙-2-基)-1-氧代 -1，2-二氢-异喹啉-5-甲酰胺
在室温，将(R)-2-(6-氯-5-((1-羟基环庚基)甲基氨基甲酰基)-1-氧 代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯(620mg，0.0012mol)和碳酸钾(300 mg，0.002mol)在甲醇(50mL，1mol)中的混合物搅拌1小时。将混合 物浓缩，并通过反相制备型HPLC，然后通过急骤色谱法纯化残余物， 得到期望的产物，为白色固体。
MS m/z＝387.5(M+H)+。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.36(d，J＝8.7Hz，1H)，7.44 (d，J＝8.7Hz，1H)，7.26(d，J＝7.7Hz，1H)，6.61(d，J＝7.8 Hz，1H)，6.33(br，1H)，5.18-5.12(m，1H)，3.92(dd，J＝3.8， 11.7Hz，1H)，3.84(dd，J＝4.6，11.4Hz，1H)，3.55(d，J＝6.0 Hz，2H)，2.09-1.49(m，12H)，1.45(d，J＝7.2Hz，3H)。
方法S
化合物53
6-氯-2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-甲酸 (2-羟基-双环[2.2.1]庚-2-基甲基)-酰胺

a.6-氯-N-((2-羟基双环[2.2.1]庚-2-基)甲基)-2-((R)-1-羟基丙-2- 基)-1-氧代-1，2-二氢异喹啉-5-甲酰胺
在室温，将(2R)-2-(6-氯-5-((2-羟基双环[2.2.1]庚-2-基)甲基氨基 甲酰基)-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯(31mg，0.000042mol)和 碳酸钾(23mg，0.00017mol)在甲醇(3mL，0.07mol)中的混合物搅拌 1小时并浓缩。通过反相制备型HPLC，然后通过急骤色谱法纯化残 余物，得到白色固体。
MS m/z＝405.3(M+H)+。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.36(d，J＝8.6Hz，1H)， 7.62-7.57(m，2H)，6.69(d，J＝7.7Hz，1H)，5.21-5.16(m，1H)， 3.86-3.77(m，2H)，3.54(dd，J＝16.9，25.9Hz，2H)，2.33-2.25 (m，2H)，2.07-2.04(m，1H)，1.93-1.91(m，1H)，1.84-1.60(m， 2H)，1.43-1.39(m，6H)，1.18-1.15(m，2H)。
方法T
化合物54
(R)-6-氯-N-((1-羟基-4，4-二甲基环己基)甲基)-2-(1-羟基丙-2- 基)-1-氧代-1，2-二氢异喹啉-5-甲酰胺

a.(R)-6-氯-N-((1-羟基-4，4-二甲基环己基)甲基)-2-(1-羟基丙-2- 基)-1-氧代-1，2-二氢异喹啉-5-甲酰胺(14b)
按照与用于(R)-2-(6-氯-5-((4，4-二氟环己基)甲基氨基甲酰基)-1- 氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯(18b，参见化合物61)的相同的合成 方法，合成了本化合物。
MS m/z＝463.2(M+H)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.20(d，J＝8.7Hz，1H)，7.31(d， J＝8.7Hz，1H)，7.18(d，J＝7.8Hz，1H)，6.70(br，1H)，6.59(d， J＝7.8Hz，1H)，5.48-5.40(m，1H)，4.31-4.28(m，2H)，3.59-3.57(m， 2H)，2.01(s，3H)，1.67-1.20(m，14H)，0.85(d，J＝7.2Hz，3H)。
b.(R)-6-氯-N-((1-羟基-4，4-二甲基环己基)甲基)-2-(1-羟基丙- 2-基)-1-氧代-1，2-二氢异喹啉-5-甲酰胺(14c)
按照与用于(R)-6-氯-N-((4，4-二氟环己基)甲基)-2-(1-羟基丙-2- 基)-1-氧代-1，2-二氢异喹啉-5-甲酰胺(18c，参见化合物61)的相同的合 成方法，合成了本化合物。
MS m/z＝421.4(M+H)。
1H NMR(，400MHz，CD3OD)δ8.24(d，J＝8.7Hz，1H)，7.46(d， J＝7.5Hz，2H)，6.55(d，J＝7.8Hz，1H)，5.09-5.04(m，1H)，3.75-3.65 (m，2H)，3.38(s，2H)，1.64-1.57(m，2H)，1.50-1.44(m，4H)，1.30 (d，J＝7.0Hz，3H)，1.19-1.14(m，2H)，0.85(d，J＝7.2Hz，6H)。
方法U
化合物56
6-氯-2-((R)-2-羟基-1-甲基-乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-甲酸 (1-羟基-4-三氟甲基-环己基甲基)-酰胺

a.(R)-6-氯-N-((1-羟基-4-(三氟甲基)环己基)甲基)-2-(1-羟基丙-2- 基)-1-氧代-1，2-二氢异喹啉-5-甲酰胺
在室温，将(R)-2-(6-氯-5-((1-羟基-4-(三氟甲基)环己基)甲基氨基 甲酰基)-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯(76mg，0.00014mol)和碳 酸钾(20mg，0.0001mol)在甲醇(6mL，0.1mol)在室温)中的混合物搅 拌1小时并浓缩。通过反相制备型HPLC纯化残余物，得到白色固体。
MS m/z＝461.2(M+H)+。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.62(t，J＝5.3Hz，1H)， 8.22(d，J＝9.1Hz，1H)，7.60(d，J＝7.8Hz，1H)，7.54(d，J＝8.7 Hz，1H)，6.43(d，J＝7.6Hz，1H)，5.04-5.02(m，1H)，4.96(t，J ＝5.3Hz，1H)，4.41(s，1H)，3.66-3.58(m，2H)，3.30(d，J＝6.1 Hz，2H)，2.32(br，1H)，1.70-1.60(m，6H)，1.48-1.44(m，2H)， 1.27(d，J＝6.9Hz，3H)。
方法V
化合物58
(R)-N-(2-(1-氨基丙-2-基)-6-甲基-1-氧代-1，2-二氢异喹啉-5- 基)-2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙酰胺

a.(R)-N-(2-(1-叠氮丙-2-基)-6-甲基-1-氧代-1，2-二氢异喹啉-5- 基)-2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙酰胺(2)
在氮气下，将(R)-2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-N-(2-(1-羟基丙-2- 基)-6-甲基-1-氧代-1，2-二氢异喹啉-5-基)乙酰胺(0.5g，0.001mol)在二 氯甲烷(20mL，0.3mol)和甲苯(10mL，0.09mol)中的溶液冷却至0℃ 并用二苯基膦酸叠氮化物(600mg，0.002mol)处理，接着用1，8-二氮 杂双环[5.4.0]十一-7-烯(0.3g，0.002mol)处理。在0℃将混合物搅拌 2小时，然后让其温热至室温并搅拌过夜。将混合物浓缩并用水(50mL) 和乙酸乙酯(100mL)处理残余物。分离有机层，用盐水洗涤，干燥并 蒸发。通过急骤色谱法纯化残余物，得到所期望的产物，为澄清的油 (0.48g，收率90％)。
MS m/z＝462.3(M+H)。
1H NMR(，400MHz DMSO-d6)δ9.94(s，1H)，8.08(d，J＝8.2 Hz，1H)，7.80(t，J＝8.0Hz，1H)，7.55-7.49(m，2H)，7.45(d，J＝ 8.0Hz，1H)，7.40(d，J＝8.3Hz，1H)，6.50(d，J＝7.8Hz，1H)， 5.20-5.15(m，1H)，3.92(s，2H)，3.77-3.66(m，2H)，2.23(s，3H)， 1.34(d，J＝7.0Hz，3H)。
b.(R)-N-(2-(1-氨基丙-2-基)-6-甲基-1-氧代-1，2-二氢异喹啉-5- 基)-2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙酰胺(3)
在85℃，加热(R)-N-(2-(1-叠氮丙-2-基)-6-甲基-1-氧代-1，2-二氢 异喹啉-5-基)-2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙酰胺(0.6g，0.001mol)在乙 醇(50mL，0.8mol)中的溶液。添加氯化铵(0.6g，0.01mol)在水(15mL， 0.83mol)中的溶液，接着添加铁粉(0.6g，0.01mol)。在相同温度下将 混合物搅拌3小时，倾倒在二氯甲烷(200mL)上并萃取。通过反相 HPLC纯化残余物，得到期望的产物，为白色的固体(232mg，收率 50％)。
MS m/z＝437.2(M+H)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.92(s，1H)，8.07(d，J＝8.3 Hz，1H)，7.79(t，J＝8.4Hz，1H)，7.53(d，J＝11.9Hz，1H)，7.46-7.42 (m，2H)，7.37(d，J＝8.4Hz，1H)，6.46(d，J＝7.5Hz，1H)，4.93-4.90 (m，1H)，3.92(s，2H)，2.80(d，J＝7.1Hz，2H)，2.22(s，3H)，1.27 (d，J＝6.92，3H)。
方法W
化合物59
2-(3-氟-4-三氟甲基-苯基)-N-[6-甲基-2-((R)-1-甲基-2-甲基氨基- 乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-基]-乙酰胺

a.(R)-2-(5-(2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙酰氨基)-6-甲基-1-氧代 异喹啉-2(1H)-基)丙基甲磺酸酯
将三乙胺(0.2g，0.002mol)添加到(R)-2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯 基)-N-(2-(1-羟基丙-2-基)-6-甲基-1-氧代-1，2-二氢异喹啉-5-基)乙酰胺 (0.5g，0.001mol)、甲磺酰氯(0.16g，0.0014mol)和4-二甲氨基吡啶 (10mg，0.0001mol)在二氯甲烷(10mL，0.2mol)中的溶液中。在室 温将混合物搅拌过夜。在减压下除去挥发物并通过急骤色谱法纯化混 合物，得到期望的产物，为白色固体。
b.(R)-N-(2-(1-(烯丙基(甲基)氨基)丙-2-基)-6-甲基-1-氧代-1，2-二 氢异喹啉-5-基)-2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙酰胺
在室温，将(R)-2-(5-(2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙酰氨基)-6-甲基 -1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基甲磺酸酯(100mg，0.0002mol)、N-甲基 丙-2-烯-1-胺(30mg，0.4mmol)、三乙胺(200mg，0.002mol)和二氯甲 烷(6mL，0.09mol)的混合物搅拌过夜。在减压下除去挥发物并通过 反相制备型HPLC纯化混合物，得到期望的产物，为白色固体。
MS m/z＝490.0(M+H)
1H NMR(，400MHz DMSO-d6)δ9.91(s，1H)，8.07(d，J＝8.2 Hz，1H)，7.80(t，J＝8.0Hz，1H)，7.53(d，J＝12Hz，1H)， 7.46-7.36(m，3H)，6.47(d，J＝7.7Hz，1H)，5.80-5.60(m，1H)， 5.14-5.10(m，1H)，5.07-5.04(m，2H)，3.93(s，2H)，2.99-2.76 (m，3H)，2.44-2.39(m，1H)，2.22(s，3H)，2.11(s，3H)，1.26 (d，J＝6.8Hz，3H)。
c.(R)-2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-N-(6-甲基-2-(1-(甲基氨基)丙-2- 基)-1-氧代-1，2-二氢异喹啉-5-基)乙酰胺
在氩气下，将(R)-N-(2-(1-(烯丙基(甲基)氨基)丙-2-基)-6-甲基-1- 氧代-1，2-二氢异喹啉-5-基)-2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙酰胺(56mg， 0.00011mol)在二氯甲烷(2.5mL，0.039mol)中的溶液添加到1，3-二甲 基巴比妥酸(60mg，0.0004mol)和四(三苯基膦)钯(0)(1mg， 0.000001mol)中。在室温将混合物搅拌4小时，通过急骤色谱法，然 后通过反相制备型HPLC纯化，得到期望的产物，为白色固体。
MS m/z＝450.4(M+H)
1H NMR(400MHz DMSO-d6)δ9.92(s，1H)，8.07(d，J＝ 8.2Hz，1H)，7.80(t，J＝8.1Hz，1H)，7.53(d，J＝12.3Hz， 1H)，7.46-7.43(m，2H)，7.37(d，J＝8.3Hz，1H)，6.46(d，J＝7.7 Hz，1H)，5.15-5.12(m，1H)，3.92(s，2H)，2.92-2.76(m，2H)， 2.27(s，3H)，2.23(s，3H)，1.29(d，J＝7.0Hz，3H)。
方法X
化合物60
2-(3-氟-4-三氟甲基-苯基)-N-[6-甲基-2-((R)-1-甲基-2-哌嗪-1-基- 乙基)-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-基]-乙酰胺

a.(R)-4-(2-(5-(2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙酰氨基)-6-甲基-1-氧 代异喹啉-2(1H)-基)丙基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
在室温，将(R)-2-(5-(2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙酰氨基)-6-甲 基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基甲磺酸酯(100mg，0.0002mol)、1-哌 嗪甲酸叔丁酯(100mg，0.0006mol)、三乙胺(200mg，0.002mol)和二 氯甲烷(6mL，0.09mol)的混合物搅拌过夜。在减压下除去溶剂并通过 急骤色谱法纯化残余物，得到期望的产物，为淡黄色油(100mg，60％)。
MS m/z＝605.7(M+H)
b.(R)-2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-N-(6-甲基-1-氧代-2-(1-(哌嗪-1- 基)丙-2-基)-1，2-二氢异喹啉-5-基)乙酰胺
在0℃，向(R)-叔丁基4-(2-(5-(2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙酰氨 基)-6-甲基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基)哌嗪-1-甲酸酯(100mg， 0.0002mol)在甲醇(6mL，0.1mol)中的溶液中添加1，4-二氧杂环己烷 (6mL，0.02mol)中的4M氯化氢。在室温将混合物搅拌过夜。在减压 下除去挥发物并通过反相制备型HPLC纯化残余物，得到期望的产物， 为白色固体。
MS m/z＝505.2(M+H)
1H NMR(400MHz DMSO-d6)δ9.91(s，1H)，8.07(d，J＝ 8.1Hz，1H)，7.80(t，J＝7.9Hz，1H)，7.54(d，J＝12.6Hz， 1H)，7.45(d，J＝7.8Hz，2H)，7.37(d，J＝8.Hz，1H)，6.46(d，J ＝7.6Hz，1H)，5.26-5.20(m，1H)，3.93(s，2H)，2.72-2.67(m， 1H)，2.52-2.32(m，8H)，2.22(br，5H)，1.27(d，J＝6.8Hz， 3H)。
方法Y
化合物61
(R)-6-氯-N-((4，4-二氟环己基)甲基)-2-(1-羟基丙-2-基)-1-氧代 -1，2-二氢异喹啉-5-甲酰胺

a.(R)-2-(6-氯-5-((4，4-二氟环己基)甲基氨基甲酰基)-1-氧代异喹 啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯(18b)
在5mL工艺瓶中装入(R)-2-(6-氯-5-碘-1-氧代异喹啉-2(1H)-基) 丙基乙酸酯(18a)(400mg，0.0009mol)、(4，4-二氟环己基)甲胺盐酸盐 (150mg，0.00081mol)、六羰基合钼(500mg，0.002mol)、乙酸钯(15 mg，0.000067mol)、1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一-7-烯(500mg，0.003 mol)和1，4-二氧杂环己烷(4mL，0.04mol)。在空气下将所述瓶密封， 在110℃搅拌1小时并冷却至室温。将混合物浓缩并通过急骤色谱法 纯化，得到所期望的产物，为黄色的油。(143mg，37％)。
MS m/z＝455.4(M+H)
b.(R)-6-氯-N-((4，4-二氟环己基)甲基)-2-(1-羟基丙-2-基)-1-氧代 -1，2-二氢异-喹啉-5-甲酰胺(18c)
在室温，将(R)-2-(6-氯-5-((4，4-二氟环己基)甲基氨基甲酰基)-1- 氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯(140mg，0.00029mol)和碳酸钾(140 mg，0.0010mol)在甲醇(6mL，0.1mol)中搅拌1小时，浓缩，通过反 相制备型HPLC纯化，得到所期望的产物，为白色固体。(77mg，63％)。
MS m/z＝413.1(M+H)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.76(t，J＝5.7Hz，1H)，8.23 (dd，J＝0.6，8.6Hz，1H)，7.60(d，J＝7.7Hz，1H)，7.55(d，J＝8.7 Hz，1H)，6.33(d，J＝7.8Hz，1H)，5.05-5.01(m，1H)，4.96(br， 1H)，3.67-3.58(m，2H)，3.23(t，J＝6.2Hz，2H)，2.04-2.02(m，2H)， 1.86-1.74(m，5H)，1.30-1.27(m，5H)。
方法Z
化合物63
6-氯-2-((R)-1-羟基丙-2-基)-N-((6-羟基螺[2.5]辛-6-基)甲基)-1-氧 代-1，2-二氢异喹啉-5-甲酰胺

在室温，将(2R)-2-(6-氯-5-((6-羟基螺[2.5]辛-6-基)甲基氨基甲酰 基)-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基乙酸酯(130mg，0.00029mol)和碳酸 钾(140mg，0.0010mol)在甲醇(6mL，0.1mol)中搅拌1小时，浓缩， 并通过反相制备型HPLC纯化，得到期望的产物，为白色固体。
MS m/z＝419.5(M+H)
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.60(t，J＝6.12Hz，1H)， 8.22(d，J＝8.6Hz，1H)，7.59(d，J＝7.8Hz，1H)，7.54(d，J＝ 8.7Hz，1H)，6.44(d，J＝7.7Hz，1H)，5.04-5.01(m，1H)， 4.98-4.95(m，1H)，4.29(s，1H)，3.67-3.56(m，2H)，3.33(d，J＝ 6.12Hz，2H)，1.78-1.73(m，2H)，1.65-1.50(m，4H)，1.28(d，J＝ 7.0Hz，3H)，0.98-0.90(m，2H)，0.26-0.15(m，4H)。
方法AA1
化合物64
2-(3-氟-4-三氟甲基-苯基)-N-{2-[(R)-2-(3-羟基-氮杂环丁烷-1- 基)-1-甲基-乙基]-6-甲基-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-5-基}-乙酰胺

在室温，将(R)-2-(5-(2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙酰氨基)-6-甲基 -1-氧代异喹啉-2(1H)-基)丙基甲磺酸酯(100mg，0.2mmol)、3-羟基氮 杂环丁烷盐酸盐(120mg，1.1mmol)、三乙胺(200mg，2mmol)和二 氯甲烷(1mL，20mmol)的溶液搅拌过夜。除去挥发物并通过反相制 备型HPLC纯化残余物，得到期望的产物，为白色固体。
MS m/z＝491.7(M+H)
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.91(s，1H)，8.06(d，J＝8.3 Hz，1H)，7.80(t，J＝7.9Hz，1H)，7.53(d，J＝11.9Hz，1H)，7.46-7.36 (m，3H)，6.44(d，J＝7.8Hz，1H)，5.20(d，J＝6.5Hz，1H)，4.94 (br，1H)，4.05-4.01(m，1H)，3.92(s，2H)，3.45-3.43(m，1H)，2.81-2.48 (m，4H)，2.22(s，3H)，1.25(d，J＝6.9Hz，3H)。
实施例1
P2X7受体在巨噬细胞-衍生细胞系和在分离的巨噬细胞培养物中 强力表达，所述细胞系包括但不限于，J774(小鼠巨噬细胞系，美国 典型培养物保藏中心(ATCC)，Rockville，MD，ATCC TIB-67)，P388 (小鼠细胞系，ATCC CCL-46)，P815(小鼠肥大细胞肥大细胞瘤-衍生 的品系，ATCC TIB-64)，THP-1(人单核细胞-衍生的细胞系，ATCC TIB202)和U937(来源于组织细胞淋巴瘤可诱导至单核细胞分化的人 细胞系，ATCC CRL-1593.2)。使用如下所述的操作分离人或非-人的 动物巨噬细胞。
P2Z/P2X7受体的特征在于调整通道开放，例如离子流和/或评价 孔形成，包括监测在天然表达该受体的细胞中染料吸收或细胞裂解。 化合物，诸如ATP，2′和3′-(O)-(4-苯甲酰基苯甲酰基)ATP(BzATP) 影响这些细胞质膜中的孔形成，特别是在低胞外二价离子浓度下的形 成(Buisman等Proc.Natl.Acad.Sci.USA 85：7988(1988)；Zambon 等Cell.Immunol 156：458(1994)；Hickman等Blood 84：2452 (1994))。可以观察到大分子大小的染料(包括普罗匹定(propidium)染 料YO-PRO-1)在细胞记录过程中进入巨噬细胞-衍生的细胞系 (Hickman等Blood 84：2452(1994)；Wiley等Br J Pharmacol 112：946 (1994)；Steinberg等J Biol Chem 262：8884(1987))。还可以监测溴化 乙锭(一种荧光DNA探针)，其中可以观察到胞内DNA-结合的溴化乙 锭荧光增加。重组大鼠或人rP2X7在细胞(包括HEK293细胞和非洲爪 蟾属(Xenopus)卵母细胞)中的表达根据完整细胞记录和YO-PRO-1 荧光证实了流入和孔形成(Suprenant等Science 272：735(1996)； Rassendren等J Biol Chem 272：5482(1997))。
可以测试本发明化合物对P2X7受体的拮抗剂活性。进行的测试 包括并且选自：(i)电生理实验；(ii)YO-PRO1荧光；(iii)溴化乙锭荧 光；以及(iv)IL-1β从刺激的巨噬细胞中释放，包括如下所述的内容。 可以在动物模型中体内测试化合物，所述模型包括炎症模型(例如爪水 肿模型，胶原蛋白-诱导的关节炎，MS的EAE模型)。
人巨噬细胞的分离
如Blanchard等所述制备单核细胞-衍生的人或非-人的动物巨噬 细胞培养物(Blanchard等J Cell Biochem 57：452(1995)；Blanchard 等J Immunol 147：2579(1991))。简言之，从获自健康志愿者的白细胞 浓缩物中分离单核细胞。将白细胞悬浮于含20％血清(人的用于人体 细胞)，2mM谷氨酰胺，5mM HEPES和100μg/ml链霉素的RPMI 1460 培养基(Life Techologies，Inc.)。使细胞粘附培养瓶1-2小时，此后洗 涤掉非粘附性细胞。在该培养基+干扰素-γ(人的用于人体细胞)(1000 个单位/ml)中将粘附细胞培养7-14天。通过用冷磷酸缓冲盐水采用移 液管从培养瓶中回收巨噬细胞并且在玻璃盖玻片上铺板以便随后进行 12-24小时的电生理学实验或其它实验。
实施例2
电生理学实验
使用EPC9膜片钳放大器和脉冲获取程序(HEKA，Lambrecht， 德国)进行全细胞记录。全细胞记录获自细胞，例如J774A.1细胞 (American Type Culture Collection，Rockville，MD，ATCC TIB-67))； 用速流U形管递送系统将激动剂施用1-3秒的期间[E.M.Fenwick， A.Marty，E.Neher，J.Physiol，(伦敦)331，577(1982)]。内部吸移 溶液为140mM天冬氨酸铯或天冬氨酸钾，20mM NaCl，10mM EGTA和5mM Hepes；标准外部溶液为145mM NaCl，2mM KCl， 2mM CaCl2，1mM MgCl2，10mM Hepes和12mM葡萄糖。低二价 外部溶液为标称不含镁的含0.3mM CaCl2。在低二价溶液中，通过记 录作为在8分钟间隔施用1秒激动剂响应的电流，构建浓度-响应曲 线，其中在每次施用前提供标准外部溶液6分钟。该方案对防止持续 内向电流发生是必不可少的。
通过施用ATP(300μM)或BzATP(30μM)(对照)或测试化合物获 得反转电位(Erev)，同时使膜保持在不同电位或通过施加-120至30或 50mV  的变速电压保持膜。由Erev通过根据 α＝([145/exp(ErevFIRT)]-20)/140(其中F为法拉第，R为气体常数且T 为绝对温度)，首先计算内(i)和外(o)部浓度[Na]1＝20mM，[Na]o＝145 mM，[K]o＝0mM和[K]1＝140mM的α(＝PNa/PK′其中P为渗透率) 计算渗透比。在[X]o＝145mM，[Na]1＝20mM，[K]1＝140mM和[Na]o ＝[K]o＝[X]1＝0mM时，由Px/PNa＝[(exp)ErevF/RT]](20+140α))/145 计算其它Px/PNa值。按大小次序，X为铯，甲胺，三(羟甲基)-氨基甲 烷，四乙基铵和N-甲基-D-葡糖胺。内标溶液还包含10mM EGTA和 5mM Hepes。外标溶液还包含10mM葡萄糖和标准或低浓度的二价 阳离子；如果需要，使用HCl、组胺酸或Hepes将pH维持在7.3，并 且所有溶液的摩尔渗透压浓度均为295-315。
实施例3
YO-PRO1荧光
使用用于显微荧光测定的光电子成像(IDEA)系统(Photonics， Planegg，德国)。将盖玻片放置在Zeiss Axiovert 100或相当的倒置显 微镜台上并且使用40X Fluor物镜在油浸法中观测。在3-6分钟电生 理记录过程中将YO-PRO-1(10μM；Molecular Probes，Eugene，OR) 加入到表面灌流流体中，此后转换成低二价溶液并且在转回到标准二 价溶液时洗涤掉，此后开启荧光灯并且使用异硫氰酸荧光素滤器检查 细胞。使用491/509nm激发/发射波长测定YO-PRO1荧光。在使用 YO-PRO1和不同浓度的对照品ATP，BzATP或测试化合物的连续表 面灌流(2ml/min)过程中，在5-20秒间隔获得影像。对每次实验而言， 对10-20个单个细胞获得YO-PRO1荧光的时程且然后求平均值以便 获得平均荧光信号。将结果表示为在3分钟时rP2X7的平均信号并且 在10分钟的信号用于P2X7和人巨噬细胞。所有实验均在室温下进行。
实施例4
溴化乙锭
通过监测孔形成时进入表达P2X7受体的细胞的溴化乙锭，测试 本发明的化合物对P2X7受体的拮抗剂活性。本试验在96-孔平底微量 滴定板中进行，所述的孔填充了250μl测试溶液，其包含200μl表达 P2X7的细胞(例如THP-1细胞，J774细胞等)(2.5×106个细胞/ml)的混 悬液，该混悬液包含10-4M溴化乙锭，25μl含10-5M BzATP的高钾 缓冲溶液和25μl含测试化合物的高钾缓冲溶液。给平板覆盖塑料布 并且在37℃下孵育1小时。然后在Perkin-Elmer荧光平板读取器中 读取平板，激发光520nm，发射光595nm，狭缝宽：Ex 15nm，EM 20 nm。为了比较目的，BzATP(P2X7受体激动剂)和吡哆醛5-磷酸酯(P2X7 受体激动剂)作为对照品，单独用于本试验中。根据获得的读数，计算 各测试化合物的pIC50数值，该数值为将BzATP激动剂活性降低50％ 所必需的测试化合物浓度的负对数。
实施例5
IL-1β释放
本实施例表示本发明化合物作为P2X7-介导的IL-1β从人巨噬细 胞中释放的抑制剂功效的测试，所述的人巨噬细胞由阿尔茨海默β淀 粉样蛋白肽1-42激活。
细胞分离
如下从外周血单核细胞(PBMC)中分离单核细胞。使全血在 Histopak 1077-1柱(Sigma Biochemicals)上直接分层并且以800xg离心 15分钟。将细胞PBMC带取出，放入新鲜的50ml培养管中并且用洗 涤缓冲液(磷酸缓冲盐水，pH 7.4，其包含2mM EDTA和5mg/ml BSA) 按照1∶1稀释，随后以800xg离心5分钟。然后通过依次将细胞沉淀 重新悬浮于洗涤缓冲液中并且以600xg离心5分钟，洗涤细胞。重复 洗涤过程，直到上清液不含有污染性血小板(一般5-6次洗涤)。然后 通过使用包含针对非-单核细胞的抗体的单核细胞分离试剂盒 (Miltenyi Biotec，Inc.)，使细胞在磁性柱上运行以除去抗体-结合的细 胞并且透过单核细胞体积收集流量进行负选择，从PBMC中纯化单核 细胞。用洗涤缓冲液将单核细胞洗涤一次并且在100μl不含血清的 RPMI 1640中以100,000个细胞/孔接种在96-孔平板中并且在37℃下 和5％CO2/95％O2加湿组织培养箱中孵育1小时。1小时后，用100μl 完全培养基(RPMI 1640，10％人血清-AB型(热灭活的)，25mM HEPES，2mM谷氨酰胺，青霉素和链霉素各50U/ml)替代上述培养 基并且孵育过夜(16小时)。
给药方案
第2天，在不存在或存在人β淀粉样蛋白1-42肽(5μM)下用100 μl新鲜完全培养基取代该培养基并且在37℃下和5％CO2/95％O2加 湿组织培养箱中孵育5小时。然后取出培养基并且弃去。用包含1mM CaCl2的Hanks缓冲盐水(HBSS)将各孔洗涤一次，随后添加80μl本 发明的HBSS/CaCl2抑制性化合物(10x在HBSS/CaCl2中的储备溶液， 终浓度为23nM和206nM)并且在组织培养箱中孵育15分钟，随后添 加10μl HBSS/CaCl2或10μl苯甲酰基ATP(BzATP；3mM在HBSS/ CaCl2中的储备溶液，终浓度300μM)并且在组织培养箱中再孵育30 分钟。然后取出培养基，放入新的96-孔平板，储存在-70℃下，直到 通过ELISA(来自R&D Systems)定量IL-1β含量。用HBSS/CaCl2将 细胞洗涤一次，随后使用100μl冰冷裂解缓冲液(100mM Tris，pH 7.6， 1％Triton X-100和来自Roche Biochemicals，Inc的1片/30ml完全 TM蛋白酶抑制剂)裂解细胞。将细胞裂解物储存在-70℃下，直到通过 ELISA定量IL-1β。
实施例6
体内动物模型
A.本实施例例证了本发明化合物在治疗多发性硬化中的功效。
如本文所述，实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型用于证实这 种功效。在该模型中使用如下操作。
动物
8周龄的SJL/J雌性小鼠获自Jackson Laboratories。
抗原
髓鞘蛋白脂蛋白(PLP 139-151)(HSLGKWLGHPDKF)(Cat# H-2478)获自BACHEM，Bioscience，Inc.，3700Horizon Dr.，King of Prussia，Pa.19406，1-610-239-0300(电话)，1-610-239-0800(传 真)。
弗氏完全佐剂H37Ra[1mg/ml结核分枝杆菌(Mycobacterium Tuberculosis)H37Ra]获自Difco 1-800-521-0851(Cat#3114-60-5， 6×10ml)。
结核分枝杆菌还获自Difco，1-800-521-0851(Cat#3114-33-8， 6×100mg)。
百日咳毒素
百日咳杆菌(Bordetella Pertussis)，(含PBS和乳糖的冻干粉) 获自List Biological Laboratories，1-408-866-6363(Product#180，50 μg)。
EAE在小鼠中的诱导
将PLP139-151肽溶于H2O∶PBS(1∶1)溶液至浓度为7.5 mg/10ml(就75μg PLP/组而言)并且用补充了40mg/10ml热-灭活的结 核分枝杆菌H37Ra的等体积的CFA乳化。给小鼠在腹侧皮下注射0.2 ml肽乳剂(每侧0.1ml)。在同一天和72小时后，给小鼠分别静脉内注 射100％35ng和50ng在盐水中的百日咳杆菌毒素。
临床评价
0级：正常
0.5级：部分跛行尾(limp tail)
1级：完全跛行尾
2级：翻正反射受损
2.5级：翻正反射延缓(并非弱至足以达到3级)。
3级：部分后肢肢体麻痹
3.5级：一条腿完全麻痹，而一条腿部分麻痹
4级：后肢完全肢体麻痹
4.5级：腿完全麻痹和垂死
5级：因EAE死亡
EAE的临床过程
急性期：首次临床发作(10-18天)
消退：临床发作后的临床改善期；特征在于在急性期或疾病恶化 峰值评分后至少2天的临床评分减小(＞＝1级)。
恶化：在获得消退后至少2天的临床评分至少为1级的增加。
一般预计使用本发明化合物治疗的动物在临床评分方面表现出 改善。
B.本实施例例证了一种方案，该方案使用动物模型，测定本发 明化合物治疗中风的功效。
使体重为280-320g的雄性Sprague Dawley大鼠(Charles River) 自由摄食和饮水并且在用于实验前进行最少4天的环境适应。在手术 前一天，在3:00pm，开始禁食用于研究的所有大鼠，但可自由饮水。 在手术前，对每只大鼠称重。最初用5％异氟烷(Aerrane，Fort Dodge) 以及30％O2、70％N2O诱导大鼠，持续2-5分钟。然后将大鼠放在 循环水-热垫上并且使鼻锥体自主吸入麻醉剂气体。使异氟烷减至2％。 插入直肠探针并且将体温维持在36.5-37.5℃。在所有手术部位修剪毛 发且然后使用聚维酮碘擦拭这些区域。
手术操作
将颞肌探针放入右侧颞肌并且监测″脑″温。在大鼠上胸腔实施颈 部正中切口。对胸乳突肌，二腹肌和胸骨舌骨肌谨慎进行解剖，分离 和收缩以暴露右颈总、内、外动脉。使用5-0号丝缝线分离右颈总动 脉。在手术过程中，释放缝线以便每隔2-4分钟进行一次再灌注。还 分离右颈外动脉和上甲状腺动脉并且烧灼上甲状腺动脉，同时将颈外 动脉在远端用5-0号丝缝线结扎。将另一5-0号丝缝线在颈外动脉周 围松弛结扎。分离枕动脉，结扎和切开。分离颈内动脉。
由于颈总动脉和颈外动脉固定，所以将动脉瘤夹放置在颈内动脉 上。在颈外动脉远端做小切口。然后将涂敷了聚-L-赖氨酸的3-0尼龙 缝线插入颈外动脉并且向上插入颈总动脉。现在将颈外动脉周围松弛 结扎的5-0丝缝线围绕丝线逐步扎紧。然后切开颈外动脉并且用丝线 旋转颈外动脉剩余段，使得该丝线插入颈内动脉，其插入长度取决于 重量和大鼠品种。在Sprague Dawley大鼠中，将单丝插入18-19mm(体 重＜300gm的大鼠：18mm；体重≥300gm的大鼠：19mm)有效阻断 了流至大脑中动脉的血流。
给颈外静脉插PE 50套管，以便静脉内给予化合物。将套管在预 先修剪的颈背上外插并且在合适的位置缝合。用缝合线封闭伤口。给 右股动脉插导管，以便在手术过程中进行血液气体和葡萄糖测定。
在插入单丝缝合线后2小时，用与最初使用相同的麻醉剂组合再 麻醉大鼠并且将其放回到异氟烷浓度降至2％的鼻锥体中。重新开放 颈部切口以暴露颈外动脉。通过从颈动脉中完全拉出管腔内缝合线恢 复血流。然后使用3-0丝线在中断的缝线中封闭切口。
化合物给药
对5组15只动物实施上述方法。在MCAo后不同时间期限内输 注(静脉内)不同剂量的化合物(剂量响应)。在MCAo后不同时间间隔 开始的预定的时间期间内输注预定的浓度。媒介物-治疗的对照组通常 接受0.9ml/hr输注。同时试验阳性对照化合物。
神经学试验
在手术前，在局部缺血发作后2小时和局部缺血后24小时进行 一组神经学试验。为检验上体姿势设计姿势反射试验，此时将大鼠通 过尾在平面上悬垂。正常大鼠伸展整体并且两前肢与平面相对。具有 梗塞形成的大鼠始终弯曲对侧肢体并且表现出身体旋转的体征。大鼠 对使用手指双肩后缓慢侧向推动起反应。正常大鼠可以抵抗这类推动， 而具有梗塞形成的大鼠不会。伸出的前肢放置对视觉和触觉刺激起反 应。动物由身体支撑，使侧或背侧前爪表面与工作台相对放置。重复 本试验，但此时会阻碍大鼠视线。
在每次实验完成时，使用异氟烷(5％)深度麻醉所有动物，断头处 死并且取出脑，用氯化四唑以组织学方式验证局部缺血损害的程度和 位置。
C.本实施例使用2，4-二硝基苯磺酸(DNBS)诱导的远端结肠炎 模型(炎性肠病模型)例证了本发明化合物的抗炎活性。
测试物质和给药模式
将本发明的化合物溶于2％吐温80在蒸馏水中的媒介物，以便 以50mg/kg的剂量进行口服给药，或溶于2％吐温80和0.9％NaCl 的媒介物以便以30mg/kg的剂量进行腹膜内注射。将该剂量每日给予 一次，连续7天。给药体积为10ml/kg。在第2天给药后2小时用DNBS 刺激。
动物
在这些研究中，雄性Wistar，Long Evans大鼠由MDS Panlabs Taiwan，Ltd.的动物育种中心提供并且可以使用由台湾实验动物繁殖 研究中心(National Laboratory Animals Breeding Research center) (NALBRC，台湾)提供的Balb/cByJ来源的雄性小鼠(体重为20±2 gms)。6只动物的空间分配可以为45×23×15cm。在使用前，在MDS Panlabs Taiwan实验室中，使动物寄居在笼(Allentown Caging，Allentown，N.J.08501，USA)中的正压隔离器内( Mode：Nu-605，气流速度50±5ft/min，HEPA Filter)并且维持在受控 温度(22℃-24℃)和湿度(60％-80％)环境中，进行12小时光照黑暗循环 持续至少1周。允许大鼠自由食用使用标准实验室大鼠食物(Fwusow Industry Co.，Limited，Taiwan)和自来水。在此项工作的所有方面， 包括寄居，实验和动物处置均可以按照涉及动物的生化研究的国际指 导原则进行(CIOMS Publication No.ISBN 9290360194，1985)。
化学物质
DNBS获自TCI，Tokyo，日本，乙醇来自Merck，德国且柳氮 磺胺吡啶购自Sigma，USA。
仪器
电子天平(Tanita，1140型，日本)，电子天平(Sartorius， R160P，德国)，玻璃注射器(2ml，Mitsuba，日本)，大鼠口腔用针 头，皮下针头(25G×1″TOP Corporation，日本)，不锈钢剪刀 (Klappenclear，德国)，不锈钢钳(Klappenclear，德国)。
方法
使用体重为180±20gms的3只Wistar来源的雄性大鼠组。通过 结肠内滴注DNBS(2，4-二硝基苯磺酸，在0.5ml 30％乙醇中30mg)诱 发远端结肠炎，此后，通过插管缓慢注射2ml空气以确保溶液保留在 结肠中。通过口服(PO)给予50mg/kg剂量或通过腹膜内(IP)给予30 mg/kg剂量的测试物质，每日一次，连续7天。在第2天给药后2小 时，将DNBS滴注入每只动物的远端结肠。仅使用媒介物治疗对照组 并且将柳氮磺吡啶(300mg/kg，PO)用作对照活性剂。使动物禁食24 小时，此后和最终治疗后24小时进行DNBS刺激。此时处死它们并 且取出各自结肠且称重。在实验过程中，每日记录存在的腹泻。当在 取出结肠前打开腹腔时，注意到结肠与其它器官之间存在粘连。在称 重结肠后，观察并且也关注结肠溃疡的程度。然后对每只动物按照下 列公式计算结肠与体重之比：结肠(g)/体重(BW)x100％。媒介物-对照 品+DNBS组相对于媒介物-对照组的比例的″净″增加用作与测试物质 治疗组比较的基础值，并且表示为炎症减轻％。每一测试物质治疗组 相对于″净″媒介物+DNBS治疗组的″净″结肠-体重比下降为30％或 30％以上(30％)被视为有意义。
D.本实施例使用角叉菜胶诱导的爪水肿模型(炎症模型，角叉菜 胶)例证了本发明化合物的抗炎活性。
测试物质和给药模式
将本发明的化合物溶于2％吐温80/0.9％NaCl的媒介物，并且 在使用角叉菜胶(1％0.1ml/爪)刺激前30分钟，通过腹膜内，以30 mg/kg的剂量给药。给药体积为10ml/kg。
动物
按照上述实施例中所述的操作调理动物。
化学物质
角叉菜胶获自TCI，日本；无热原盐水来自Astar，Taiwan；且 阿司匹林购自ICN BioMedicals，USA。
仪器
玻璃注射器(1ml和2ml Mitsuba，日本)，皮下针头 24Gx1″(Top Corporation，日本)，器官充满度测量器#7150(UGO Basile，Italy)和25mm直径水池，#7157(UGO Basile，Italy)。
方法
在右侧后爪注射角叉菜胶(0.1ml的1％混悬液，足底内)后30分 钟，通过IP对3只Long Evans来源的雄性过夜禁食的体重为150±20 gms的大鼠的组给予测试物质(实施例)(30mg/kg)。在角叉菜胶给药后 3小时，使用器官充满度测量器(Ugo Basile Cat.#7150)与水池(25mm 直径，Cat.#7157)记录作为炎症量度的后爪水肿。后爪水肿减少30％ 或30％以上(≥30％)表示显著的急性抗炎活性。
E.本实施例使用发生单克隆抗体(mAb)II型胶原蛋白诱导的 关节炎的Balb/c小鼠模型例证了本发明化合物的抗炎活性。
测试物质和给药模式
将本发明的化合物以50或30的剂量溶于2％吐温80/0.9％NaCl 的媒介物并且在注射胶原蛋白的单克隆抗体后通过口服(50mg/kg)或 腹膜内以30mg/kg给药，每日一次，连续3天。给药体积为20ml/kg。
动物
按照上述实施例中所述的操作对动物施加条件。
化学物质
脂多糖获自Sigma，USA；吲哚美辛来自Sigma，USA； Arthrogen-CIA.TM.单克隆抗体D8，F10，DI-2G和A2获自IBL，日 本；磷酸缓冲盐水购自Sigma，USA；且吐温80来自Wako，日本。
仪器
器官充满度测量器(Ugo Basile，意大利)和水池(Ugo Basile，意 大利)。
方法
5只6-8周龄的Balb/cByJ小鼠品种的组用于对II型胶原蛋白+ 脂多糖(LPS)起反应的单克隆抗体(mAbs)诱导关节炎。通过静脉内给 予动物4种不同mabs的组合，在第0天时总计4mg/小鼠，随后在 72小时后(第3天)静脉内给予25μg LPS。从第3天开始，LPS给药 后1小时给予50mg/kg(PO)或30mg/kg(IP)的ML-659和媒介物(2％ 吐温80/0.9％NaCl，PO)以及阳性对照吲哚美辛3mg/kg(PO)，每日 一次，连续3天。器官充满度测量器(Ugo Basile Cat#7150)与水池(12 mm直径)用于测定在第0，5，7，10，14和17天时两后爪体积的增 加。通过下式计算体积增加的抑制百分比：
抑制(％)：[1-(Tn-To)/(Cn-Co)]x100
其中：
Co(Cn)：在媒介物对照组中的第0天的体积(第n天)
To(Tn)：在测试化合物治疗组中的第0天的体积(第n天)
两后爪水肿均减轻30％以上被视为有意义。
实施例7
神经性疼痛模型
本实施例使用单神经性疼痛的坐骨神经结扎模型例证了本发明 化合物的止痛活性。
测试系统
使用称重为250-300gm的成年雄性Sprague Dawley(SD)大鼠 (Charles River Laboratories，San Diego，CA)。对动物室进行12小 时光照-黑暗循环(从7:00 A.M.到7:00 P.M)的人工光照，可自由饮水 和取食。将动物随机分组。
模型诱导
坐骨神经结扎(SNL，Seltzer′s模型)：
在使用戊巴比妥(50mg/kg，i.p.)和无菌技术麻醉下，通过按照 Seltzer的方法(1990)紧密结扎总坐骨神经的选择部分产生选择性神经 损伤。简言之，在皮肤切开后暴露高位大腿水平的左侧坐骨神经，并 且在接近转节的位点钝性分离肌肉，恰远离后二头肌半腱神经从总坐 骨神经分支的点。然后使用精细镊，通过将神经外膜夹在其背面，谨 慎不要将神经压迫在下面的结构上而将该神经固定在该位置上。将8-0 号硅-处理的丝缝线通过3/8弯曲的、逆转切开术用小型针头插入所述 神经并且紧密结扎，使得神经的背侧1/3-1/2被截留在结扎处。分层缝 合肌肉并且用创伤夹封闭皮肤。然后将动物放回到其寄居笼中。将表 现出术后神经缺陷或难以梳理的(grooming)大鼠从实验中排除。
仪器
下列仪器用于本研究：von Frey丝组合(Touch-test Sensory Evaluator，North Coast Medical Inc.，Morgan Hill，CA)。
统计学方法：
在每种实验平均值中，分别使用平均值，平均值的标准误差和未 配对双尾t-检验函数，应用Microsoft计算平均值(SEM)的标准 误差和统计学显著性。使用用于单因素或双因素方差分析(ANOVA) 功能的Prism(GraphPad Software Inc.，San Diego，CA)测定各实验 之间观察到的效果的统计学显著性。使用0.95的置信限和0.05的显著 性水平进行统计学分析。
实施例8
孔形成
以200,000个细胞/孔的浓度将THP-1细胞(ATCC Cat# 285-IF-100)在96孔平板中铺板并且使其在含10％FBS，100IU/mL 青霉素，100ug/mL链霉素，100ng/mL LPS和100ng/mL IFN-γ的 RPMI-1640培养基(ATCC Cat#30-2001)中分化16小时。在分化后， 在含100IU/mL青霉素，100ug/mL链霉素的RPMI-1640培养基中用 适当浓度的所关注的化合物将细胞预处理30分钟。然后用含5uM Yo-Pro 1(Molecular Probes Cat#Y3603)和适当浓度的所关注的化合 物的测定缓冲液(20mM HEPES，10mM d-葡萄糖，118mM NMDG， 5mM KCl，0.4mM CaCl2)替代预处理培养基并且将细胞再孵育10分 钟。然后加入2′，3′-O-(4-苯甲酰基苯甲酰基)-腺苷5′-三磷酸(Sigma Aldrich Cat#B6396)至终浓度为40uM并且使用Tecan Safire平板读 取器，在491/509激发光/发射光，每隔1分钟测定一次荧光读数，持 续50分钟。在本次过程中将温度维持在37℃。将药物处理和未处理 的细胞的背景调节的荧光水平用于计算抑制百分比。
实施例9
IL-1β释放测定
将THP-1细胞(ATCC Cat#285-IF-100)以200,000个细胞/孔的 浓度放入96孔平板并且使其在含10％FBS，100IU/mL青霉素，100 ug/mL链霉素，100ng/mL LPS和100ng/mL IFN-γ的RPMI-1640培 养基(ATCC Cat#30-2001)中分化16小时。在分化后，在含100IU/mL 青霉素，100ug/mL链霉素和100ng/mL新鲜LPS的RPMI-1640培 养基中将细胞再处理2小时。然后用适当浓度的所关注的化合物在含 100IU/mL青霉素，100ug/mL链霉素的RPMI培养基中将细胞预处 理30分钟。在预处理后，加入2′，3′-O-(4-苯甲酰基苯甲酰基)-腺苷5′- 三磷酸(Sigma Aldrich Cat#B6396)至终浓度为250uM并且将细胞再 孵育45分钟。然后收集30uL细胞上清液并且通过ELISA(R&D系统 Cat.#HSLB50)，按照制造商的说明，使用Tecan Safire平板读取器 测定IL-1β水平。将药物处理和未处理的细胞的背景调节的IL-1β水 平用于计算抑制百分比。
实施例10
钙内向通量试验
以50,000细胞/孔的密度，将稳定表达人P2X7的1321N1细胞 (ECACC#86030402)在96孔板中铺板，在DMEM w/o酚红 (MediaTech#17-205-CV)+10％FBS，100IU/mL青霉素，100 ug/mL链霉素，2mM L-丙酰基-L-谷氨酰胺(MediaTech#25-015-CV) 和500ug/mL的G418中持续24小时。使用BD钙测定试剂盒(BD BioImaging Systems#80500-311)和FLIPRtetra荧光成像板读取器分子 装置)，检测钙内向通量。简言之，将100uL的DMSO添加到染料管 中。制备1X染料装载溶液，其含有10mL HBSS/HEPES(980mL的 Hanks平衡盐溶液(Invitrogen#14025-126)+20mL的1M HEPES (Invitrogen#15630-080))，500uL信号增强剂，100uL的250mM丙 磺舒和5uL重构的染料。从细胞中除去培养基并将100uL染料装载 混合物添加到每孔中，在5％CO2培养箱中在37℃持续60分钟，接 着在室温10分钟。在每孔中，将目的化合物的HBSS/HEPES溶液添 加至期望的浓度，持续30分钟。化合物预处理后，在每孔中，将激动 剂2′，3′-O-(4-苯甲酰苯甲酰基)-腺苷5′-三磷酸的HBSS/HEPES溶液添 加至130uM的终浓度。添加激动剂前20秒和添加激动剂后280秒期 间每1秒钟测定每孔的荧光读数。将药物处理的细胞相对不经药物处 理的细胞的背景调节的Max-Min值用于计算％抑制。
实施例11
人全血Il-1β释放试验
将人全血收集在BD血浆vacutainer管中，该管喷雾涂敷了150 USP单位肝素钠(BD#367874)。将150uL全血等分入Costar 96孔测 定板(Corning，Inc.#3795)的孔中。将含LPS(EMD#437625)的RPMI 1640培养基(含有25mM HEPES(Mediatech#10-041-CV))添加至 最终浓度为200ng/mL并且在5％CO2培养箱中，在37℃，将血孵育 1小时30分钟。将含目的化合物的RPMI 1640培养基(含25mM HEPES)添加至期望的浓度并在5％CO2培养箱中，在37℃，再将血 孵育30分钟。在25mM HEPES(Invitrogen#15630)中制备ATP (Sigma  #A6559)并用氢氧化钠将pH调节至7.0。化合物预处理后， 将ATP添加到全血中至最终浓度为2.5mM，然后在5％CO2培养箱 中，在37℃，将血孵育45分钟。然后以1000g将所述板旋转2分钟 并收集血浆。使用Tecan Safire板读数器，根据制造商的推荐，通过 ELISA(R&D系统Cat.#HSLB50)测定血浆IL-1β水平。将药物处理 的和未经药物处理的血的背景调节的IL-1β水平用于计算百分比抑 制。
除了上面例证的化合物以外，使用上述操作和合成方法，或通过 上述方法的常规修改，和相应的原料、适合的试剂和本领域技术人员 已知的纯化方法，还制备了本发明的各种其它化合物。因此，下表1 中列出了所制备的化合物以及它们的分析数据。
提供本申请中所述合成和生物实施例的目的是为了例证本发明， 但不以任何方式来限定本发明的范围。在实施例中，所有的温度均为 摄氏度(除非另作陈述)。在下表中提供了按照本发明制备的化合物与 其生物活性数据。按照上文所述的方法进行这些有代表性的化合物的 合成。
本发明的示例性化合物
根据本文描述的合成方法，例如，方法A-AA1已经或者能够制 备下列化合物。测试了表1中所列的化合物在本文所述细胞模型中的 活性。具体地说，用不同量的实验化合物预处理细胞并且根据实施例 9中所述的方法测定释放的IL-1β。进行测量并且通过使用GraphPad Prism软件(GraphPad Software，Inc)，将所述数据拟合成四参数逻 辑方程测定下表1中呈现的IC50值。可以用下式表示所述方程：
Y＝Bottom+(Top-Bottom)/(1+10^((LogEC50-X)＊Hill斜率))
其中X是浓度的对数，Y是响应并且Y开始于Bottom并且以S 形状达到Top。
表1：示例性化合物的IL-1βIC50值














人肝微粒体(HLM)中的半衰期
将试验化合物(1μM)与3.3mM MgCl2和0.78mg/mL HLM (HL101)一起在100mM磷酸钾缓冲液(pH 7.4)中在37℃在96-深孔板 上孵育。将反应混合物分成两组，非-P450组和P450组。仅将NADPH 添加到P450组的反应混合物中。在0、10、30和60分钟时间点，收 集P450组的等分样品，其中0分钟时间点表示将NADPH加入P450 组的反应混合物的时间。在-10和65分钟时间点，收集非-P450组的 等分样品。用含有内标的乙腈溶液萃取收集的等分试样。在离心机 (2000rpm，15分钟)中将沉淀的蛋白质旋转下来。通过LC/MS/MS系 统测量上清液中的所述化合物浓度。
通过将化合物/内标的峰面积比的自然对数对时间作图，获得半 衰期值。通过所述点最佳拟合线的斜率得到代谢速率(k)。使用下列方 程将其转化成半衰期值：
半衰期＝ln 2/k
下表2中列出了实验的结果和相应的T1/2值。
表2：示例性化合物的以小时表示的T-半衰期
  ID   半衰期   (hr)   2   0.8   3   3.3   5   1.2   10   3.2   11   1.6   12   0.9   13   1.0   15   1.3   16   3.7   19   1.1   21   1.5   22   0.7   23   1.4   25   4.6   26   1.6
  ID   半衰期   (hr)   28   3.7   29   3.5   40   2.6   41   3.0   42   0.8   44   1.1   45   1.6   47   0.4   49   0.3   51   1.3   54   0.3   56   0.7   65   0.62   68   0.65
化合物在大鼠静脉内和口服给药后的药代动力学评价
在实验开始前，使雄性Sprague-Dawley大鼠适应至少24小时。 在适应期过程中，所有动物可自由取食和饮水。然而，在实验开始前 至少12小时，从动物笼中取出食物，但不取出水。在实验的前3小时 过程中，动物仅接受自由饮水。对至少3只动物各自测试静脉内和口 服剂量。就静脉内制剂而言，将化合物溶于3％二甲亚砜(0.25-1 mg/mL)，40％PEG 400和剩余百分比的40％Captisol在水(w/v)中的 混合物。在给药前称重动物。测定的体重用于计算每只动物的给药体 积。
给药体积(mL/kg)＝1mg/kg/制剂浓度(mg/mL)。
在制剂浓度低于0.5mg/mL的情况中，给药体积约为2mL/kg。
就口服制剂而言，将本发明的化合物悬浮(0.5-0.75mg/mL)于 5％的10％吐温80在水(v/v)中和95％的0.5％甲基纤维素在水(w/v) 中的混合物中。一般通过口腔管饲法按照与IV相同的给药体积配方 对PO大鼠给药，以便获得1-5mg/kg的剂量水平。就IV给药而言， 在给药后2，5，15，30，60，120，180，300，480和1440分钟时通 过颈静脉导管采集血样(使用预肝素化的注射器)。就PO给药而言，在 给药前和在给药后5，15，30，60，120，180，300，480和1440分钟 时通过颈静脉导管采集血样(使用预肝素化的注射器)。在每一时间点 从动物获得约250uL血液。补充等体积的0.9％生理盐水以防止脱水。 将全血样品保持在冰上至离心为止。然后在4℃下以14,000rpm将血 样离心10分钟并且将上部血浆层转入清洁小瓶且储存在-80℃下。然 后通过液相色谱法-串联质谱法分析所得血浆样品。在测定血浆样品和 给药溶液后，绘制血浆浓度-时间曲线。将血浆暴露量计算为外推至时 间无穷大的浓度-时间曲线下的面积(AUCinf)。求AUCinf的平均值并且 将各动物的口服生物利用度(％F)计算为：
AUCinf(PO)/AUCinf(IV)，归一化至其相应剂量水平。
将％F报道为口服给予特定水平的本发明化合物的所有动物中的 平均％F。
下表3中列出了被测试化合物的％F值。为表3的目的，各化合 物的口服生物利用度表示如下：
“+”      0-25％F
“++”     26-50％F
“+++”    51-75％F
“++++”   ＞75％F
表3：示例性化合物的口服生物利用度
  ID   口服生物利用度   F(％)   2   +   3   ++   5   +   10   ++++   11   ++++   12   ++   13   +++   15   +++   16   ++++   19   +   21   +++   22   ++   23   ++   25   ++
  ID   口服生物利用度   F(％)   26   +++   28   ++   29   +   40   ++   41   ++   42   ++   44   ++   45   ++   47   ++   49   +   51   +   54   ++   56   ++
血浆蛋白结合
分别在人和大鼠血浆中测定了本发明化合物的血浆蛋白结合。在 DMSO溶液中制备被测试化合物的储备溶液，浓度为1mg/mL。将该 储备溶液混入空白血浆，得到最终化合物浓度1μg/mL，用于测试。平 衡透析(平衡透析仪-96TM MWCO 5K道尔顿，Harvard Apparatus) 方法用于测试目的。
将混入了化合物的血浆(1μg/mL)和磷酸盐缓冲液(0.1M，pH 7.4)，各200μl，分别加入96-孔平衡透析仪中膜的对侧。将透析仪板 覆盖并在37℃在8-板转子培养箱(Big Shot III 8-板转子，Harvard Apparatus)中孵育过夜(16小时)。分别从血浆隔室和缓冲液隔室中取 等分试样(100μL)。通过将相同体积的空白血浆加入取自缓冲液隔室 的样品并将相同体积的磷酸盐缓冲液加入来自血浆隔室的样品，消除 基质效应。通过使用常规(3∶1)蛋白沉淀萃取程序(含有内标的乙腈)， 萃取样品。上清液用于LC/MS/MS分析。可以通过使用下列方法计算 血浆-蛋白结合的百分比：
％游离的＝[游离药物/总药物]＊100＝[(峰面积)缓冲液/(峰面积)血 浆]＊100
％结合的＝100-％游离的。
在下表4中列出了被测试化合物的％血浆蛋白结合值(结合的)。 为表4的目的，各化合物的血浆蛋白结合表示如下：
“＊”        ＞90％
“＊＊”      76-90％
“＊＊＊”    51-75％
表4：示例性化合物的血浆蛋白结合
  ID   人血浆蛋白   结合(％)   10   ＊   11   ＊   13   ＊   16   ＊   19   ＊   21   ＊   22   ＊   23   ＊   25   ＊＊   26   ＊＊   28   ＊
  ID   人血浆蛋白   结合(％)   40   ＊＊   41   ＊   42   ＊   56   ＊＊＊   61   ＊＊   63   ＊＊＊   64   ＊＊   65   ＊＊＊   67   ＊＊   68   ＊＊＊
本领域技术人员可以根据上述描述，对本发明的组合物和方法进 行各种变型和改变。本申请意欲包括所有这类属于待批权利要求范围 内的变型。
将本申请中引述的所有公开文献，包括但不限于专利和专利申请 通过引用并入本文，就如同将所述的每篇公开文献各自特别和分别完 整地通过引用并入本文。
本申请中所给出的和描述的至少一些本发明化合物的化学名称 可能通过使用商业上可获得的化学命名软件程序在自动的基础上产 生，并且没有独立地校验。执行该功能的代表性软件包括Open Eye Software，Inc.销售的Lexichem命名工具和MDL，Inc.销售的Autonom Software工具。在所示化学名称和所描绘的结构不同的情况下，以所 描绘的结构为准。
使用/DRAW生成了本文所示的化学结构。出现在本文结 构中碳、氧或氮原子上的任意开放化学价表示存在氢原子。在结构中 存在手性中心但没有显示该手性中心的具体立体化学的情况下，该结 构涵盖与该手性结构有关的两种对映体。