一种二硫代氨基甲酸酯类农药的快速检测方法
阅读：137发布：2023-01-21
专利汇可以提供一种二硫代氨基甲酸酯类农药的快速检测方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 公开了一种农产品中二硫代 氨 基 甲酸 酯类 农药 的检测方法，包括：1）将待测农产品与 有机 溶剂 、第一盐包、第二盐包混合，使得二硫代氨基甲酸酯类农药进入 有机溶剂 中，经过萃取、过滤或者离心，得到澄清的液体检测样品，第一盐包用于破坏农产品细胞结构，第二盐包用于吸收农产品中的 水 分；2）将SERS基底的活性区域浸于液体检测样品中预定时间，使二硫代氨基甲酸酯类农药分子被 吸附 或者抓取到SERS基底表面；3）将步骤（2）所得SERS基底干燥后进行拉曼检测；本发明在检测准确度高且检测灵敏度高、检出下限低的前提下能够兼具操作简单、成本低的优点。，下面是一种二硫代氨基甲酸酯类农药的快速检测方法专利的具体信息内容。
1.一种农产品中二硫代氨基甲酸酯类农药的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括以下步骤：
1）将待测农产品与有机溶剂、第一盐包、第二盐包混合，使得二硫代氨基甲酸酯类农药进入所述有机溶剂中，经过萃取、过滤或者离心，得到澄清的液体检测样品，所述第一盐包用于破坏农产品细胞结构，所述第二盐包用于吸收农产品中的水分；
2）将SERS基底的活性区域浸于步骤（1）所得的所述液体检测样品中预定时间，使二硫代氨基甲酸酯类农药分子被吸附或者抓取到SERS基底表面；
3）将步骤（2）所得SERS基底干燥后进行拉曼检测。
2.根据权利要求1所述的农产品中二硫代氨基甲酸酯类农药的检测方法，其特征在于，所述第一盐包包括硝酸盐、碳酸盐、硅酸盐、醋酸盐、磷酸盐、卤化盐中的一种或其任意组合。
3.根据权利要求2所述的农产品中二硫代氨基甲酸酯类农药的检测方法，其特征在于，所述第二盐包包括硫酸钠、氯化钙、氯化镁中的一种或其任意组合。
4.根据权利要求3所述的农产品中二硫代氨基甲酸酯类农药的检测方法，其特征在于，所述有机溶剂选自乙酸乙酯、乙腈、二甲亚砜、二甲基甲酰胺和二甲基乙酰胺中的一种或其任意组合。
5.根据权利要求1所述的农产品中二硫代氨基甲酸酯类农药的检测方法，其特征在于，所述检测方法还包括将所述液体检测样品进行纯化的步骤，所述纯化包括将所述液体检测样品进行干燥和/或采用填料进行吸附，然后加入醇类极性溶剂和/或醚类极性溶剂，制成用于拉曼检测的样品。
6.根据权利要求5所述的农产品中二硫代氨基甲酸酯类农药的检测方法，其特征在于，所述醇类极性溶剂为甲醇和/或乙醇；和/或，所述醚类极性溶剂包括乙二醇单甲醚和/或叔丁基单甲醚；和/或，所述填料为选自C18填料、PSA填料、石墨化碳、氧化铝和PEP填料中的一种或其任意组合。
7.根据权利要求1-6中任一项权利要求所述的农产品中二硫代氨基甲酸酯类农药的检测方法，其特征在于，所述SERS基底由贵金属溶胶干燥制成。
8.根据权利要求1-6中任一项权利要求所述的农产品中二硫代氨基甲酸酯类农药的检测方法，其特征在于，所述SERS基底包括基片和设置在所述基片上的贵金属纳米粒子或贵金属层。
9.根据权利要求1-6中任一项权利要求所述的农产品中二硫代氨基甲酸酯类农药的检测方法，其特征在于，所述SERS基底包括具有多个凹坑的基片和自组装在所述凹坑内的贵金属纳米粒子簇。
10.根据权利要求9所述的农产品中二硫代氨基甲酸酯类农药的检测方法，其特征在于，所述凹坑的直径为50nm 500nm，所述凹坑之间的间距为5nm 50nm，所述贵金属纳米粒子~ ~
簇中贵金属纳米粒子个数为3 15个，每个贵金属纳米粒子的粒径为30nm 120nm。
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一种二硫代氨基甲酸酯类农药的快速检测方法
技术领域
背景技术
[0002] 二硫代氨基甲酸酯类农药是一种广泛应用于农作物的杀虫剂，可以与含巯基（-SH）的酶类以及菌类细胞的辅酶相互作用进而达到杀虫的目的。尽管该化合物的毒性较低，但水果蔬菜中应用该类化合物仍然存在着潜在的环境污染问题以及影响人类的健康，例如会刺激人体皮肤和黏膜，其衍生产物有致癌及导致人体畸形的可能性，因此，目前都会对农作物中残留的二硫代氨基甲酸酯类农药进行检测以判断是否符合国家或国际标准。
[0003] 现有技术中检测二硫代氨基甲酸酯类农药的方法包括：比色法，高效液相色谱方法等；例如顶空进样-气相色谱法(如SN/T0157-1992进出口水果中二硫代氨基甲酸酯类农药残留的检测)及紫外分光比色法(如福建农林大学食品科学学院王家颖、王丹红等茶叶等农产品中二硫代氨基甲酸酯类农药残留快速检测方法的研究)，然而气相色谱法所需仪器较昂贵，紫外分光比色法的原理都是把二硫代氨基甲酸酯类农药分解成二硫化碳，通过二硫化碳与显色剂反应来定性定量分析，但在实际检测过程中发现此方法会有假阳性出现，另外有些颜色较深的食品在前处理时会把颜色带到接收管中，干扰了正常分析。
[0004] 又如中国发明CN102269696A，其公开了一种二硫代氨基甲酸酯类农药残留的检测方法，包括：对于大白菜、萝卜等十字花科作物，取50-100g样品加水加热微沸15-25分钟；对于紫苏等颜色较深的样品进行蒸馏提取；同时配制工作曲线进行比色分析。此专利虽然在一定程度上解决了比色方法出现假阳性的问题，但实际操作仍然较繁琐，检测出结果速度慢，成本较高，不利于对水果蔬菜含有的二硫代氨基甲酸酯类农药进行快速检测。
[0005] 因此，本领域的技术人员亟待寻求一种灵敏的技术去快速检测存在于水果、蔬菜残存的二硫代氨基甲酸酯类农药。
发明内容
[0006] 本发明所要解决的技术问题是克服现有技术中的不足，提供一种新的快速检测二硫代氨基甲酸酯类农药的方法，其在检测准确度高且检测灵敏度高、检出下限低的前提下能够兼具操作简单、成本低的优点。
[0007] 为解决以上技术问题，本发明采取的技术方案如下：一种农产品中二硫代氨基甲酸酯类农药的检测方法，所述检测方法包括以下步骤：
1）将待测农产品与有机溶剂、第一盐包、第二盐包混合，使得二硫代氨基甲酸酯类农药进入所述有机溶剂中，经过萃取、过滤或者离心，得到澄清的液体检测样品，所述第一盐包用于破坏农产品细胞结构，所述第二盐包用于吸收农产品中的水分；
2）将SERS基底的活性区域浸于步骤（1）所得的所述液体检测样品中预定时间，使二硫代氨基甲酸酯类农药分子被吸附或者抓取到SERS基底表面；
3）将步骤（2）所得SERS基底干燥后进行拉曼检测。
1）将待测农产品与有机溶剂、第一盐包、第二盐包混合，使得二硫代氨基甲酸酯类农药进入所述有机溶剂中，经过萃取、过滤或者离心，得到澄清的液体检测样品，所述第一盐包用于破坏农产品细胞结构，所述第二盐包用于吸收农产品中的水分；
2）将SERS基底的活性区域浸于步骤（1）所得的所述液体检测样品中预定时间，使二硫代氨基甲酸酯类农药分子被吸附或者抓取到SERS基底表面；
3）将步骤（2）所得SERS基底干燥后进行拉曼检测。
[0008] 根据本发明的一些优选方面，所述农产品是蔬菜、水果、作物，具体可以为香蕉、火龙果、芒果、苹果、梨、黄瓜、番茄、鲜玉米、大豆等。
[0012] 根据本发明的一些具体且优选的方面，所述有机溶剂选自乙酸乙酯、乙腈、二甲亚砜、二甲基甲酰胺和二甲基乙酰胺中的一种或其任意组合。
[0013] 根据本发明的一些优选方面，步骤（1）中，所述第一盐包与所述待测农产品的投料质量比为0.004-40∶1，优选地，所述第一盐包与所述待测农产品的投料质量比为0.01-30∶1，更优选地，所述第一盐包与所述待测农产品的投料质量比为0.1-20∶1，进一步优选地，所述第一盐包与所述待测农产品的投料质量比为0.1-10∶1。
[0014] 根据本发明的一些优选方面，步骤（1）中，所述第二盐包与所述待测农产品的投料质量比为0.008-80∶1，优选地，所述第二盐包与所述待测农产品的投料质量比为0.01-50∶1，更优选地，所述第二盐包与所述待测农产品的投料质量比为0.1-30∶1，进一步优选地，所述第二盐包与所述待测农产品的投料质量比为0.2-10∶1。
[0015] 根据本发明的一些优选方面，所述检测方法还包括将所述液体检测样品进行纯化的步骤，所述纯化包括将所述液体检测样品进行干燥和/或采用填料进行吸附，然后加入醇类极性溶剂和/或醚类极性溶剂，制成用于拉曼检测的样品。
[0016] 根据本发明的一些具体且优选的方面，所述醇类极性溶剂为甲醇和/或乙醇。
[0017] 根据本发明的一些具体且优选的方面，所述醚类极性溶剂包括乙二醇单甲醚和/或叔丁基单甲醚。
[0019] 根据本发明的一些具体且优选的方面，所述检测方法还包括绘制农产品中不同种类二硫代氨基甲酸酯类农药的特征峰强度与加标浓度之间的标准曲线。
[0020] 根据本发明的一个具体方面，所述福美双、福美锌表面增强拉曼光谱的特征峰为-1 -1 -1 -1933cm ，1138cm ，1370cm ，1497cm ，水果蔬菜中加标不同浓度的福美双，其特征峰强度与加标浓度成正比，绘制标准曲线后可用于水果蔬菜中福美双的定量分析。
[0021] 根据本发明的一个具体方面，所述的代森联表面增强拉曼光谱的特征峰为491cm-1，1228cm-1，1280cm-1，1316m-1，1442cm-1，1529cm-1，水果蔬菜中加标不同浓度的代森联，其特征峰强度与加标浓度成正比，绘制标准曲线后可用于水果蔬菜中代森联的定量分析。
[0022] 根据本发明的一个具体方面，所述的丙森锌表面增强拉曼光谱的特征峰为471cm-1，1472cm-1，水果蔬菜中加标不同浓度的丙森锌，其特征峰强度与加标浓度成正比，绘制标准曲线后可用于水果蔬菜中丙森锌的定量分析。
[0023] 根据本发明的一些优选方面，所述SERS基底由贵金属溶胶干燥制成。
[0024] 根据本发明的一些优选方面，所述SERS基底包括基片和设置在所述基片上的贵金属纳米粒子或贵金属层。
[0025] 根据本发明的一些优选方面，所述SERS基底包括具有多个凹坑的基片和自组装在所述凹坑内的贵金属纳米粒子簇。可采用纳米压印、等离子刻蚀、紫外刻蚀、化学蚀刻、激光蚀刻、机械钻孔、机械冲压或电化学法制取凹坑。
[0027] 根据本发明的一些具体方面，贵金属包括金、银等；贵金属纳米粒子簇由多个贵金属纳米粒子组成；贵金属纳米粒子即贵金属材质的纳米粒子；贵金属层由贵金属通过涂覆或浸润等方式形成。
[0028] 根据本发明的一些具体方面，柠檬酸盐可以为柠檬酸钠等。
[0029] 根据本发明的一些具体方面，所述自组装的方法包括将含有纳米粒子的分散液滴加、旋涂、打印、注射或喷涂到所述的基片表面，或者，将所述的基片表面浸入所述的纳米粒子的分散液中，通过挥发去除所述的分散液的溶剂。
[0030] 上述浸入的方式有多种，例如，将基片全部浸入分散液中，取出基片，进行溶剂的挥发；或者，将基片的表面浸入分散液中，取出基片进行溶剂的挥发；或者，在基片表面滴加一层分散液，然后进行溶剂的挥发。上述旋涂是指通过设备将分散液旋转涂抹在所述基片表面。
[0031] 根据本发明的一些优选方面，所述基片上的多个所述凹坑在各自所具有的尺寸、形状，以及所述凹坑之间的间距、所述的多个凹坑的排列方式中存在至少一个不同。
[0032] 根据本发明的一些优选方面，所述基片上的多个所述凹坑在各自所具有的尺寸、形状、相邻两个所述凹坑之间的间距和所述的多个凹坑的排列方式中的一个或多个上呈规律性变化。
[0033] 根据本发明的一些优选方面，所述基片上的任意两个所述凹坑的尺寸相差在0-1000nm，形状相同，任意相邻两个所述凹坑之间的间距相差在0-500nm；其中，所述凹坑的尺寸包括凹坑的直径、凹坑的深度。
[0034] 根据本发明的一些优选方面，所述凹坑的直径为50nm 500nm，所述凹坑之间的间~距为5nm 50nm，所述贵金属纳米粒子簇中贵金属纳米粒子个数为3 15个，每个贵金属纳米~ ~
粒子的粒径为30nm 120nm。
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粒子的粒径为30nm 120nm。
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[0035] 根据本发明的一些优选方面，所述凹坑的深度为90-10000nm。
[0036] 根据本发明的一些优选方面，所述基片的上表面积为4-400mm2；更优选地，所述基片的上表面积为16-100mm2；进一步优选地，所述基片的上表面积为16-36mm2。
[0037] 根据本发明的一些具体方面，所述基片为硅、玻璃、PDMS、PMMA、Al、氧化铝或其他基底。
[0038] 本发明中，所述凹坑之间的间距是指相邻二个凹坑之间的最小间隔距离，更具体指的是一个凹坑上边缘上的任意点与相邻的一个凹坑上边缘上的任意点之间存在的多个距离中最小的距离；凹坑的直径指的是凹坑上边缘上的任意两点之间的多个距离中的最大的距离。
[0039] 根据本发明的一些优选方面，所述SERS基底为疏水型SERS基底。本发明中，疏水型SERS基底中采用的疏水修饰方法可以采用本领域常用的疏水修饰方法。
[0040] 本发明中，SERS基底（表面增强拉曼散射基底），其可以在分子水平上给出分子的结构信息，因此，可以根据分子吸附于金属表面振动信息辨别出化合物浓度。
[0041] 由于以上技术方案的采用，本发明与现有技术相比具有如下优点：本发明针对现有农产品中二硫代氨基甲酸酯类农药提取和检测方法所存在的不足，创新地提出利用表面增强拉曼光谱来检测，同时又针对现有技术中表面增强拉曼的检测要求，设计相应的快速前处理步骤，从而形成一个快速有效的SERS解决方案，是实际应用的一个难点的问题，创新地提出采用第一盐包、第二盐包快速提取检测样品等步骤，解决了农产品尤其是水果蔬菜中复杂基质的干扰，没有农产品常规拉曼的影响，具有步骤简单、分析时间短、选择性良好、不需要大型仪器、满足国标限量要求、可实现现场食品中二硫代氨基甲酸酯类农药的快速准确检测等优点，其能够在检测准确度高且检测灵敏度高、检出下限低的前提下兼具操作简单、成本低的优点，尤其是检出下限可低至0.01mg/kg。
附图说明
附图说明
[0042] 为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其它的附图；图1为本发明提出的检测方法中福美双的标准品，代森联，丙森锌的标准品表面增强拉曼光谱图；★：福美双；☆：代森联；▲：丙森锌。
[0043] 图2为本发明提出的检测方法中红心火龙果加标0.5mg/L福美双的表面增强拉曼光谱图；图3为本发明提出的检测方法中香蕉加标1mg/L代森联的表面增强拉曼光谱图；
图4为本发明提出的检测方法中梨加标双组分农药其中福美双0.25ppm，不同浓度的代森联（A 5ppm），（B 2.5ppm），（C 0.5ppm）。★：福美双；☆：代森联的表面增强拉曼光谱图；
图5为本发明提出的检测方法芒果中不同福美双浓度与1370cm-1峰强关系图；
图6 为本发明制备的SERS基底Ⅰ的SEM图；
图7 为本发明制备的SERS基底Ⅱ的SEM图；
图8 为本发明制备的SERS基底III 的SEM图；
图9为本发明制备的SERS基底Ⅳ的结构示意图。
图4为本发明提出的检测方法中梨加标双组分农药其中福美双0.25ppm，不同浓度的代森联（A 5ppm），（B 2.5ppm），（C 0.5ppm）。★：福美双；☆：代森联的表面增强拉曼光谱图；
图5为本发明提出的检测方法芒果中不同福美双浓度与1370cm-1峰强关系图；
图6 为本发明制备的SERS基底Ⅰ的SEM图；
图7 为本发明制备的SERS基底Ⅱ的SEM图；
图8 为本发明制备的SERS基底III 的SEM图；
图9为本发明制备的SERS基底Ⅳ的结构示意图。
具体实施方式
[0044] 以下结合具体实施例对上述方案做进一步说明；应理解，这些实施例是用于说明本发明的基本原理、主要特征和优点，而本发明不受以下实施例的范围限制；实施例中采用的实施条件可以根据具体要求做进一步调整，未注明的实施条件通常为常规实验中的条件。
[0045] 下述实施例中，如无特殊说明，所有的原料均来自于商购或者通过本领域的常规方法制备而得。
[0046] 纳米银溶胶的制备：于100 mL 三颈烧瓶中加入质量浓度为1% 硝酸银水溶液1mL 并稀释到100ml；将此溶液加热至沸，在不断回流和剧烈搅拌下加入浓度为1% 的柠檬酸钠溶液。溶液逐渐由无色转变为淡蓝色。变色后开始计时，搅拌条件下保持体系沸腾状态15 min，随后自然冷却至室温，得到银溶胶。
[0047] 纳米金溶胶的制备：于100 mL 三颈烧瓶中加入质量浓度为1%的氯金酸水溶液1mL 并稀释到100ml；将此溶液加热至沸，在不断回流和剧烈搅拌下加入浓度为1% 的柠檬酸钠溶液。溶液逐渐由淡黄转变为酒红色。变色后开始计时，搅拌条件下保持体系沸腾状态15 min，随后自然冷却至室温，得到金溶胶，调节加入柠檬酸钠的量可以调节Au的粒径。
[0048] 纳米溶胶自组装：将载玻片切割成2cm*2cm的方形芯片，用洗涤剂清洗干净，N2吹干。之后用O2等离子体清洗机处理5min。之后在5%的3-氨丙基三乙氧基硅烷的水溶液中浸泡1min后，用超纯水冲洗2次，N2吹干。放置于银溶胶中3h，取出后大量水清洗，得到SERS基底Ⅰ，如图6所示。
[0049] 纳米溶胶自组装：将纳米压印带有规则孔洞的芯片0.4cm*0.4cm的方形芯片，其孔径为100nm，孔深为
60nm，间距为90nm。用洗涤剂清洗干净，N2吹干。之后用O2等离子体清洗机处理5min。之后浸泡在金溶胶中3h，取出后大量水清洗，得到SERS基底Ⅱ，如图7所示。
60nm，间距为90nm。用洗涤剂清洗干净，N2吹干。之后用O2等离子体清洗机处理5min。之后浸泡在金溶胶中3h，取出后大量水清洗，得到SERS基底Ⅱ，如图7所示。
[0050] 将纳米压印带有规则孔洞的芯片0.4cm*0.4cm的方形芯片，其孔径为500nm，孔深为200nm，间距为450nm。用洗涤剂清洗干净，N2吹干。之后用O2等离子体清洗机处理5min。之后浸泡在金溶胶中3h，取出后大量水清洗，得到SERS基底III，如图8所示。
[0051] 实施例1本例提出的一种农产品中二硫代氨基甲酸酯类农药的检测方法，包括以下步骤：
1，称取10g红心火龙果粉碎（福美双，0.5mg/L），加入10ml乙腈溶液，加入2.5g的氯化钠固体，震荡2min，加入5g无水硫酸钠充分震荡样品3min，5000rpm离心5min；
2，取上层溶液（即乙腈溶剂相）于试管中，氮气吹干；
3，取200μL甲醇于上述试管中，振荡数次作为待测液；
4，将SERS基底I浸泡在上述150μL待测液中，浸泡10min后，取出用乙醇清洗后晾干，用拉曼光谱仪进行测试。得到如图2的表面增强拉曼光谱。
1，称取10g红心火龙果粉碎（福美双，0.5mg/L），加入10ml乙腈溶液，加入2.5g的氯化钠固体，震荡2min，加入5g无水硫酸钠充分震荡样品3min，5000rpm离心5min；
2，取上层溶液（即乙腈溶剂相）于试管中，氮气吹干；
3，取200μL甲醇于上述试管中，振荡数次作为待测液；
4，将SERS基底I浸泡在上述150μL待测液中，浸泡10min后，取出用乙醇清洗后晾干，用拉曼光谱仪进行测试。得到如图2的表面增强拉曼光谱。
[0052] 实施例2本例提出的一种农产品中二硫代氨基甲酸酯类农药的检测方法，包括以下步骤：
1，称取10g香蕉粉碎（代森联，1mg/L），加入10ml乙腈溶液，加入2.0g的氯化钾固体，震荡2min，加入4g无水硫酸镁再次充分震荡样品3min，5000rpm离心5min；
2，取上层溶液（即乙腈溶剂相）2mL过滤后，作为待测液；
3，将SERS基底II浸泡在上述200μL待测液中，浸泡10min后，取出用乙醇清洗后晾干，用拉曼光谱仪进行测试。得到如图3的表面增强拉曼光谱。
1，称取10g香蕉粉碎（代森联，1mg/L），加入10ml乙腈溶液，加入2.0g的氯化钾固体，震荡2min，加入4g无水硫酸镁再次充分震荡样品3min，5000rpm离心5min；
2，取上层溶液（即乙腈溶剂相）2mL过滤后，作为待测液；
3，将SERS基底II浸泡在上述200μL待测液中，浸泡10min后，取出用乙醇清洗后晾干，用拉曼光谱仪进行测试。得到如图3的表面增强拉曼光谱。
[0053] 实施例3本例提出的一种农产品中二硫代氨基甲酸酯类农药的检测方法，包括以下步骤：
1，称取三份香蕉各10g粉碎（其中A：福美双0.25mg/L，代森联5mg/L；B：福美双0.25mg/L，代森联2.5mg/L；C：福美双0.25mg/L，代森联0.5mg/L），加入10ml乙腈溶液，加入2.0g的硝酸钾固体，震荡2min，加入4g无水氯化钙再次充分震荡样品3min，5000rpm离心5min；
2，取上层溶液（即乙腈溶剂相）2mL过滤后，作为待测液；
3，将SERS基底III浸泡在上述200μL待测液中，浸泡10min后，取出用乙醇清洗后晾干，用拉曼光谱仪进行测试。得到如图4的表面增强拉曼光谱，均可以清楚看到两者混合物的拉曼光谱。
1，称取三份香蕉各10g粉碎（其中A：福美双0.25mg/L，代森联5mg/L；B：福美双0.25mg/L，代森联2.5mg/L；C：福美双0.25mg/L，代森联0.5mg/L），加入10ml乙腈溶液，加入2.0g的硝酸钾固体，震荡2min，加入4g无水氯化钙再次充分震荡样品3min，5000rpm离心5min；
2，取上层溶液（即乙腈溶剂相）2mL过滤后，作为待测液；
3，将SERS基底III浸泡在上述200μL待测液中，浸泡10min后，取出用乙醇清洗后晾干，用拉曼光谱仪进行测试。得到如图4的表面增强拉曼光谱，均可以清楚看到两者混合物的拉曼光谱。
[0054] 实施例4本例提出的一种农产品中二硫代氨基甲酸酯类农药的检测方法，包括以下步骤：
1，称取10g芒果（分别加标0mg/L，0.5mg/L，1mg/L，5mg/L，10mg/L）于离心管中，加入
10ml乙腈溶液，加入2.0g的硝酸钾固体，震荡2min左右，加入4g无水氯化钙再次充分震荡样品3min左右，5000rpm离心5min。
1，称取10g芒果（分别加标0mg/L，0.5mg/L，1mg/L，5mg/L，10mg/L）于离心管中，加入
10ml乙腈溶液，加入2.0g的硝酸钾固体，震荡2min左右，加入4g无水氯化钙再次充分震荡样品3min左右，5000rpm离心5min。
[0055] 2，取上层溶液（即乙腈溶剂相）3mL过滤后，作为待测液；3，将SERS基底II浸泡在上述180μL待测液中，浸泡10min后，取出用乙醇清洗后晾干，用拉曼光谱仪进行测试；
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4，选取1370cm 处的谱峰强度作线性，如附图5，其拟合方程为y=28123-3950x，拟合优度R2=0.97811。
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4，选取1370cm 处的谱峰强度作线性，如附图5，其拟合方程为y=28123-3950x，拟合优度R2=0.97811。
[0056] 实施例5SERS基底的制备：用化学刻蚀方法制备凹坑，1：使用电子束刻蚀等手段，在硅或其他衬底上加工出所需要的结构作为模板；2：图样的转移，在待加工的材料表面涂上光刻胶，然后将模板压在其表面，采用加压的方式使图案转移到光刻胶上；3：基片的加工，用紫外光使光刻胶固化，移开模板后，用刻蚀液将上一步未完全去除的光刻胶刻蚀掉，露出待加工材料表面，然后使用化学刻蚀的方法进行加工，完成后去除全部光刻胶，最终得到高精度带有的凹坑的基片，用洗涤剂清洗干净，N2吹干，之后用O2等离子体清洗机处理5min，再浸泡在按照上述纳米金溶胶的制备方法制成的金溶胶中2h，取出后大量水清洗，得到SERS基底Ⅳ，得到的结构如图9所示。此SERS基底Ⅳ具有较高的SERS活性，可用于SERS痕量检测。
[0057] 上述制备的SERS基底Ⅳ避免了现有技术中均一性SERS基底仅能针对单一物质作用的缺陷，具体为无法在未知物质种类以及微含量下进行快速检测、催化等操作；采用具有变化的SERS基底，赋予了本例SERS基底具有匹配范围宽、普适性强的优点，使其能够同时具有对多种物质进行催化、检测、降解等功能，极大地降低了工作量以及成本。尤其适用于未知浓度且可能含量很低的农产品中含有的二硫代氨基甲酸酯类农药的检测中，农产品可以是蔬菜、水果、作物，具体可以为香蕉、火龙果、芒果、苹果、梨、黄瓜、番茄、鲜玉米、大豆等。具体可如下：本例提出的一种农产品中二硫代氨基甲酸酯类农药的检测方法，包括以下步骤：
1，称取三份香蕉各10g粉碎（其中A：福美双0.25mg/L，代森联5mg/L；B：福美双0.25mg/L，代森联2.5mg/L；C：福美双0.25mg/L，代森联0.5mg/L），加入10ml乙腈溶液，加入2.0g的硝酸钾固体，震荡2min，加入4g无水氯化钙再次充分震荡样品3min，5000rpm离心5min；
2，取上层溶液（即乙腈溶剂相）2mL过滤后，作为待测液；
3，将上述制备的SERS基底Ⅳ浸泡在上述200μL待测液中，浸泡10min后，取出用乙醇清洗后晾干，用拉曼光谱仪进行测试。结果显示均可以清楚看到两者混合物的拉曼光谱，检测速度快，适应性强。
1，称取三份香蕉各10g粉碎（其中A：福美双0.25mg/L，代森联5mg/L；B：福美双0.25mg/L，代森联2.5mg/L；C：福美双0.25mg/L，代森联0.5mg/L），加入10ml乙腈溶液，加入2.0g的硝酸钾固体，震荡2min，加入4g无水氯化钙再次充分震荡样品3min，5000rpm离心5min；
2，取上层溶液（即乙腈溶剂相）2mL过滤后，作为待测液；
3，将上述制备的SERS基底Ⅳ浸泡在上述200μL待测液中，浸泡10min后，取出用乙醇清洗后晾干，用拉曼光谱仪进行测试。结果显示均可以清楚看到两者混合物的拉曼光谱，检测速度快，适应性强。
[0058] 上述方法利用表面增强拉曼光谱，解决了农产品尤其是水果蔬菜中复杂基质的干扰，没有农产品常规拉曼的影响，具有步骤简单、分析时间短、选择性良好、不需要大型仪器、满足国标限量要求、可实现现场食品中二硫代氨基甲酸酯类农药的快速准确检测等优点，其能够在检测准确度高且检测灵敏度高、检出下限低的前提下兼具操作简单、成本低的优点。
[0059] 上述实施例只为说明本发明的技术构思及特点，其目的在于让熟悉此项技术的人士能够了解本发明的内容并据以实施，并不能以此限制本发明的保护范围，凡根据本发明精神实质所作的等效变化或修饰，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
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