治疗神经发育疾病和障碍的方法
阅读：552发布：2020-05-15
专利汇可以提供治疗神经发育疾病和障碍的方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 大体涉及用于 治疗 和/或 预防 神经性 疾病 和障碍的方法，该方法包括施用反式10‑HDA。特别地，本发明的方法可用于治疗和/或预防 哺乳动物 中的获得性或进行性 神经发育障碍 和病况。更特别地，本文教导了用于治疗和/或预防疾病和障碍如孤独症谱系障碍的方法。，下面是治疗神经发育疾病和障碍的方法专利的具体信息内容。
1.一种用于治疗和/或预防中枢神经系统的疾病或障碍的方法，该方法包括向有需要的哺乳动物施用有效量的反式10-羟基-2-癸烯酸或其药学上可接受的盐。
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述疾病或障碍为神经发育疾病或障碍。
3.根据权利要求1或权利要求2所述的方法，其中所述疾病或障碍为获得性神经发育疾病或障碍、先天性神经发育疾病或障碍，或相关病况。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其中所述疾病或障碍为孤独症谱系障碍。
5.根据权利要求4所述的方法，其中所述孤独症谱系障碍选自自闭性障碍、Asperger障碍、儿童期瓦解性障碍和待分类的广泛性发育障碍以及Rett综合征。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的方法，其中所述反式10-羟基-2-癸烯酸或其药学上可接受的盐作为组合物施用。
7.根据权利要求6所述的方法，其中所述组合物包含蜂王浆、蜂王浆提取物或来源于蜂王浆的组合物。
8.根据权利要求1-7中任一项所述的方法，其中所述反式10-羟基-2-癸烯酸或其药学上可接受的盐以在0.01至6000mg/天、0.1至5000mg/天、1至4000mg/天、10至3000mg/天、100至2000mg/天、500至1500mg/天范围内的剂量施用。
9.根据权利要求1-8中任一项所述的方法，其中所述反式10-羟基-2-癸烯酸或其药学上可接受的盐以选自0.5mg/天、1mg/天、5mg/天、10mg/天、50mg/天、100mg/天、250mg/天、
500mg/天、750mg/天、1000mg/天、1500mg/天和2000mg/天的剂量施用。
10.根据权利要求1-9中任一项所述的方法，其中所述哺乳动物为人类。
11.一种用于治疗和/或预防中枢神经系统的疾病或障碍的方法，该方法包括向有需要的哺乳动物施用有效量的蜂王浆或蜂王浆提取物，其中所述蜂王浆或其提取物包含反式
10-羟基-2-癸烯酸。
12.反式10-羟基-2-癸烯酸或其药学上可接受的盐在制备用于治疗或预防神经发育疾病或障碍的药物中的用途。
13.根据权利要求12所述的用途，其中所述疾病或障碍为孤独症谱系障碍。
14.根据权利要求13所述的用途，其中所述孤独症谱系障碍选自自闭性障碍、Asperger障碍、儿童期瓦解性障碍和待分类的广泛性发育障碍以及Rett综合征。
15.根据权利要求12-14中任一项所述的用途，其中所述药物包含蜂王浆、蜂王浆提取物，或来源于蜂王浆。
16.蜂王浆或蜂王浆提取物在制备用于治疗和/或预防神经或神经变性疾病或障碍的药物中的用途，其中所述蜂王浆或其提取物包含反式10-羟基-2-癸烯酸。
17.反式10-羟基-2-癸烯酸或其药学上可接受的盐，其用于治疗和/或预防神经发育疾病或障碍。
18.用于根据权利要求17所述的用途的反式10-羟基-2-癸烯酸或其药学上可接受的盐，其中所述疾病或障碍选自自闭性障碍、Asperger障碍、儿童期瓦解性障碍和待分类的广泛性发育障碍以及Rett综合征。
19.用于治疗和/或预防神经发育疾病或障碍的蜂王浆或蜂王浆提取物，其中所述蜂王浆或其提取物包含反式10-羟基-2-癸烯酸。
20.一种包含反式10-羟基-2-癸烯酸或其药学上可接受的盐的组合物，其用于治疗和/或预防神经发育疾病或障碍。
21.根据权利要求20所述的组合物，其中所述疾病或障碍选自自闭性障碍、Asperger障碍、儿童期瓦解性障碍和待分类的广泛性发育障碍以及Rett综合征。
22.一种用于治疗和/或预防神经发育疾病或障碍的治疗剂，其中该治疗剂为反式10-羟基-2-癸烯酸或其药学上可接受的盐。
23.用于根据权利要求22所述的用途的治疗剂，其中所述疾病或障碍选自自闭性障碍、Asperger障碍、儿童期瓦解性障碍和待分类的广泛性发育障碍以及Rett综合征。
治疗神经发育疾病和障碍的方法
技术领域
[0001] 本发明大体涉及用于治疗和/或预防神经性疾病和障碍的方法。特别地，本发明的方法在哺乳动物的获得性或进行性神经发育障碍和病况的治疗和/或预防中尤其有用。更特别地，本文教导了用于治疗和/或预防疾病和障碍如孤独症谱系障碍(autism spectrum disorders)的方法。
背景技术
[0002] 神经性疾病和障碍代表潜在使人衰弱的病况并可影响所有年龄段的人。这样的疾病可以是获得性或先天性的。神经发育障碍表示以脑或中枢神经系统的生长和发育受损为特征的一部分障碍。它们与广泛不同程度的困难相关，这些困难对于个体可能具有重大的精神、情绪、身体和经济后果。
[0003] 获得性神经性疾病或障碍可能是创伤性的，即，其中外力导致对脑的损伤；或由例如感染、疾病、毒性、氧或葡萄糖剥夺导致的损伤。先天性神经障碍通常在出生时或出生前便存在，并且可能是遗传异常、宫内环境、形态发生错误、感染或染色体异常的结果。神经发育障碍可以是获得性或先天性的。根据本发明的神经发育疾病或障碍可包括，例如，孤独症谱系障碍。
[0004] 孤独症谱系障碍(ASD)是复杂的一组散发性和家族性发育障碍，其影响1/150的出生人数，并且以异常的社会互动、沟通障碍、社交障碍，以及行为、兴趣或活动的限制性、重复性模式为特征。ASD包括孤独症、自闭性障碍、Asperger障碍、儿童期瓦解性障碍(Childhood Disintegrative Disorder)和待分类的广泛性发育障碍(Pervasive Developmental Disorder-Not Otherwise Specified，PDD-NOS)以及Rett综合征。对ASD的病因学了解很少，并且还没有鉴定出单一的具体病因。然而，某些危险因素被认为有助于ASD的发展，包括遗传学、产前和围产期因素、神经解剖学异常和环境因素。例如，遗传基础通过单卵(MZ)双胞胎中大于70％的一致性和与群体相比在同胞中提高的风险得到证明。
[0005] 孤独症谱系障碍是高度可变的神经发育障碍；不是由单一症状区分，而是由通常在婴儿期或儿童期首次出现的多种特有症状区分。相关症状可在六个月龄之后开始出现，在大约两岁或三岁形成，并持续整个成年期。
[0006] ASD在男性中比在女性中更常见，比例为约5.5:1。令人惊讶的是，唯一的性连锁ASD相关基因神经配蛋白3的突变在ASD患者中是罕见的，并且迄今为止还没有在ASD连锁或GWAS研究中鉴定出其他性连锁基因。然而，两性脑表达CYP19A1(编码芳香化酶，即合成雌激素的酶)基因远离15q23-q25 7处的提示性ASD连锁仅19Mb。最近，据报道在ASD患者中芳香化酶的表达降低。此外，已经报道CYP19A1是与阅读、讲话和语言有关的人类认知功能的候选基因。
[0007] 迄今为止，还没有ASD的治愈方法，并且尚未确定单一、有效的治疗。当前针对孤独症谱系障碍的治疗旨在提高生活质量和功能独立性，以及减少相关缺陷和家庭痛苦。在某些情况下，教育或行为治疗可改善功能并降低症状严重程度。除行为治疗之外，当行为治疗失败时已不同程度成功地使用多种不同的药物特定地减少了妨碍社会融合和功能的ASD症状。这样的药物包括精神药物、抗惊厥药、抗抑郁药、兴奋剂和抗精神病药。然而，ASD患者经常非典型地响应于药物，或处方药物可能具有其他不良副作用。已知没有减轻或逆转ASD的核心症状如社交和沟通障碍的单一药物。
[0010] 因此，仍然需要开发治疗和/或预防神经发育障碍如ASD的新的治疗剂或方法。
发明内容
[0011] 本申请的申请人惊讶地发现，10-HAD、包含10-羟基-2-癸烯酸(10-HDA)的组合物及其药学上可接受的盐提供了用于治疗和/或预防中枢神经系统的疾病或障碍，尤其是神经发育障碍如孤独症谱系障碍的有效疗法。
[0013] 这与具有以下结构的顺式或(Z)10-HDA的结构形成对比：
[0015] 在本发明的一个方面，提供了用于治疗和/或预防中枢神经系统的疾病或障碍的方法，该方法包括向有需要的哺乳动物施用有效量的10-羟基-2-癸烯酸或其药学上可接受的盐。
[0016] 在一个或多个实施方案中，所述中枢神经系统疾病或障碍可以是神经发育疾病或障碍，包括获得性神经发育疾病或障碍、先天性神经发育疾病或障碍或相关病况。
[0017] 与本发明相关的疾病或障碍的实例包括：孤独症谱系障碍，胎儿酒精谱系障碍，包括发育性协调障碍、刻板运动障碍和抽动障碍(包括Tourette综合征)在内的运动障碍，诸如引起脑性瘫痪、沟通、讲话和语言障碍的那些损伤的先天性损伤，遗传性障碍如脆性X综合征、唐氏综合征，以及注意缺陷多动障碍。
[0018] 在一个或多个实施方案中，所述神经发育障碍可以是孤独症谱系障碍，尤其是选自自闭性障碍、Asperger障碍、儿童期瓦解性障碍和待分类的广泛性发育障碍以及Rett综合征的孤独症谱系障碍。
[0019] 在其他方面，根据本发明的10-羟基-2-癸烯酸或其药学上可接受的盐可作为组合物施用。例如，所述组合物可包含蜂王浆、蜂王浆提取物，或来源于蜂王浆的组合物。
[0020] 在其他方面，本发明提供了10-羟基-2-癸烯酸或其药学上可接受的盐在制备用于治疗和/或预防包括ASD在内的神经发育疾病或障碍的药物中的用途。
[0021] 除非另有定义，否则本文使用的所有技术和科学术语均具有与本发明所属领域的普通技术人员通常所理解的含义相同的含义。
[0023] 图1：BPA和10-HDA对人类成神经细胞瘤SH-SY5Y细胞中的芳香化酶表达的影响。在正常情况下，SH-SY5Y细胞表达芳香化酶，芳香化酶是内质网中的膜结合蛋白，并且通过免疫组织化学而表现为最终分布于细胞内的绿色点状染色。在25μg/L双酚A的存在下，芳香化酶变为聚集体。双酚A的影响可通过添加10HDA来改善。(a)+0μg/L BPA(媒介物)——芳香化酶的清晰染色(绿色)在细胞质中且沿着神经突均匀分布，呈微小的“点”。许多健康细胞均匀地分布在盖玻片的表面区域上。B-微管蛋白(红色)在整个细胞质和神经突中高度表达。(b)+25μg/L BPA——一些细胞群体开始失去它们的神经突(黄色箭头)。在大多数失去了它们的神经突的细胞中还观察到了β-微管蛋白表达的降低。芳香化酶聚集体开始在这些失去了它们的神经突(asterix)的细胞中形成。(c)+25μg/L BPA+1mM 10HDA——观察到良好的神经突生长和在整个细胞质中均匀的芳香化酶分布。10HDA的添加改善了BPA对芳香化酶的表达模式和神经突的影响。
[0024] 图2：暴露于BPA的雄性ArKO小鼠的孤独症样行为。A.社会互动研究；B.超声波发声；C.雄性理毛(grooming)频率；D.雄性理毛持续时间；E.进行转轮活动；和F.对暴露于BPA的后代的社会互动研究。
[0025] 图3：BPA暴露对子宫内芳香化酶-GFP阳性神经元的影响，通过标准体视学方法计数。
[0026] 图4：10-HDA对暴露于BPA的小鼠的影响的社会互动和电生理学/树突长度研究。A.向断奶后的暴露于BPA的雄性小鼠每日注射10-HDA；B.撤销10-HDA处理后3个月；C.在最初撤销之后，随后再施用10-HDA；D.在3周10-HDA处理之后，在暴露于BPA的雄性后代中观察到过度理毛；E.在对照、BPA和BPE+10-HDA处理的小鼠的内侧杏仁核中神经元的电阻；以及F.在对照、BPA和BPE+10-HDA处理的小鼠中神经元的基底树突长度。
[0027] 图5-图9：BPA和10-HDA对雄性小鼠胚胎的原代皮层细胞培养的影响的体外分析。
[0028] 图10：条形图显示了顺式和反式10-HDA在保护NSC-34细胞免受毒性BPA暴露方面的活性的比较，其中DMSO表示仅暴露于DMSO媒介物的细胞，而-ve表示在不存在10-HDA时暴露于BPA的阴性对照细胞。
具体实施方式
[0029] 本发明涉及治疗中枢神经系统的疾病或障碍的方法，该方法包括向有需要的哺乳动物施用有效量的10-HDA。
[0030] 本发明的方法有利地减轻神经性障碍的核心症状，尤其是与神经发育障碍如ASD相关的症状。在一些方面，本发明的方法有利地减轻孤独症症状，例如，社会互动缺陷的严重程度。
[0031] 尽管可以在预防意义上施用所述化合物，但优选所述人需要这样的治疗。
[0032] 提及的“神经发育病况”、“神经发育障碍”或“神经发育疾病”可互换使用，并且应被理解为提及以基于神经学的认知、情绪和行为障碍为特征的病况。
[0033] 在一个实施方案中，所述神经发育病况是以包括孤独症在内的ASD的一种或多种症状为特征的病况。
[0034] 如本文所用的术语孤独症谱系障碍(ASD)对于本领域技术人员是清楚的，并且其包括自闭性障碍、Asperger障碍、儿童期瓦解性障碍和待分类的广泛性发育障碍(PDD-NOS)以及Rett综合征，如2013年5月出版的精神病诊断与统计手册5(DSM-5)中所定义的。精神病诊断与统计手册5通过三个关键诊断标准的存在概括了ASD的诊断：a)社会功能受损：从社会群体中退出或逃避；
b)交流缺陷：包括无法进行讲话，使用刻板的或延迟的模仿言语，和难以维持谈话；以及
c)重复刻板的行为：过度且多余的活动。
b)交流缺陷：包括无法进行讲话，使用刻板的或延迟的模仿言语，和难以维持谈话；以及
c)重复刻板的行为：过度且多余的活动。
[0035] 提及“ASD特有的症状”应理解为提及可在患有ASD的个体中发生的任何一种或多种症状。这些症状可能在整个病程中是明显的，或它们可能仅短暂或周期性地明显。例如，个体可响应于特定环境诱因或应激源而表现出严重的社会功能受损。还应当理解，所有患有ASD的个体可能不一定都表现出主题症状。例如，一些个体可能具有沟通缺陷，诸如无法进行讲话。然而，针对本发明的目的，任何这样的症状(不论有多少ASD患者曾经实际上表现出给定的症状)均被该定义所涵盖。本发明不限于任何一种理论或作用方式，最常与ASD相关的症状包括社会功能受损和交流缺陷。
[0036] ASD特有的社会功能受损的实例包括但不限于：·12月龄时对叫名字没有回应；
·回避目光接触；
·更喜欢独自玩耍；
·不与他人分享兴趣；
·只为了达到期望目标而互动；
·具有单调或不适当的面部表情；
·不理解个人空间界限；
·回避或抗拒身体接触；
·在痛苦时不能被他人安慰；或
·难以理解他人的感受或谈论自己的感受。
·回避目光接触；
·更喜欢独自玩耍；
·不与他人分享兴趣；
·只为了达到期望目标而互动；
·具有单调或不适当的面部表情；
·不理解个人空间界限；
·回避或抗拒身体接触；
·在痛苦时不能被他人安慰；或
·难以理解他人的感受或谈论自己的感受。
[0037] ASD特有的沟通缺陷的实例包括但不限于：·延迟的讲话和语言技能；
·反复重复词或短语(模仿言语)；
·颠倒代词(例如，说“你”而不是“我”)；
·给出与问题无关的回答；
·不指示或对指示没有反应；
·很少或不使用手势(例如，不挥手再见)；
·以单调、机器人般的或唱歌的声音讲话；
·不玩假扮(例如，不假装“喂”玩偶)；或
·不理解笑话、讽刺或戏弄。
·反复重复词或短语(模仿言语)；
·颠倒代词(例如，说“你”而不是“我”)；
·给出与问题无关的回答；
·不指示或对指示没有反应；
·很少或不使用手势(例如，不挥手再见)；
·以单调、机器人般的或唱歌的声音讲话；
·不玩假扮(例如，不假装“喂”玩偶)；或
·不理解笑话、讽刺或戏弄。
[0038] 关于重复的动作，其包括可反复重复的活动。它们可包括身体的一部分或整个身体或甚至物体或玩具。例如，患有ASD的人可能花大量时间重复拍打他们的手臂或从一边摇摆到另一边。他们可能重复地开灯和关灯或旋转玩具汽车的车轮。这些类型的活动被描述为自我刺激(或称为“stimming”)。
[0039] 患有ASD的人通常在例常中茁壮成长。在一天的正常模式中的变化可能令患有ASD的个体非常心烦意乱。他们可能“失去控制”和“崩溃”或发怒，尤其是在环境不熟悉的情况下。
[0040] 患有ASD的个体可开展可能被认为是不寻常或不必要的日常活动。例如，患有ASD的个体可能试图向他或她走过的建筑物的每扇窗户内察看，或可能总想要从头到尾观看视频，包括预告片和片尾字幕。偏离这些类型的日常活动可能引起严重的挫折和发怒。
[0041] 除了在ASD患者之间关于他们表现出哪些症状可以有显著变化的事实之外，还应理解存在也以这些症状中的一种或多种为特征的其他神经发育病况和障碍。例如，ASD患者表现的社交缺陷和沟通困难通常也在患有胎儿酒精谱系障碍或唐氏综合征的患者中观察到。因此，提及以ASD特有的一种或多种症状为特征的病况应理解为提及以存在这些症状中的一种或多种为特征的任何神经发育病况。
[0042] 在一个实施方案中，所述病况为以ASD的一种或多种症状为特征的病况。
[0043] 在另一个实施方案中，所述病况为孤独症。
[0044] 本发明部分地基于芳香化酶表达在ASD患者中降低的最近报道。鉴于此，并且不希望受理论约束，假定芳香化酶敲除小鼠(ArKO)模型可表现出反映ASD的一些关键诊断行为和症状(包括例如ASD样行为障碍)的行为表型。本发明人已经证明，正常功能的芳香化酶的缺少将促成雄性芳香化酶敲除小鼠(ArKO)中的ASD样行为障碍，这与在人类群体中观察到的ASD在男性中比在女性中更常见是一致的。
[0045] 使用雄性ArKO小鼠表现出的行为表型作为进一步比较研究的基础。特别地，本发明人还调查了环境暴露于在聚碳酸酯塑料和环氧树脂的制备中使用的双酚A(BPA)在随后的孤独症样行为发展中的作用。为此，表现出ASD样特征的ArKO小鼠提供了调查暴露于BPA的影响的比较手段。
[0046] 如本文所用的术语“哺乳动物”包括人类、灵长类、家畜动物(例如，马、牛、羊、猪、驴)、实验室实验动物(例如，小鼠、大鼠、豚鼠)、玩赏动物(例如，狗、猫)和圈养野生动物(例如，袋鼠、鹿、狐狸)。优选地，该哺乳动物是人类。
[0047] 对于上述病况中的某些病况，很显然本发明的方法可以预防性使用以及用于缓解急性症状。因此，本文提及的“治疗”等应被理解为包括这样的预防性处理，以及急性病况的处理。
[0048] 如本文所用的术语“指示”表示受试者与呈现出或可能呈现出相同的或相似的临床表现或对治疗的响应的一组或一群受试者的紧密关联或联系。例如，ASD的临床表现被ASD的症状所涵盖。
[0049] 本领域技术人员将熟悉施用传统抗精神病和抗抑郁药物的困难，包括在观察到抗抑郁作用之前的停滞期和在治疗初期的高度的焦虑。因此，在某些实施方案中，可以设想本文所述的10-HDA、药学上可接受的盐或包含10-HDA的组合物可作为传统药物的替代品或替代物施用于有需要的人。在其他实施方案中，可以设想10-HDA、药学上可接受的盐或包含10-HDA的组合物可作为传统药物的补充物或辅助物施用于有需要的受试者。在其他实施方案中，可以设想10-HDA或包含10-HDA的组合物或其药学上可接受的盐可在没有辅助治疗的情况下施用于有需要的人。在其他实施方案中，可以设想10-HDA、包含10-HDA的组合物或其药学上可接受的盐可与行为或认知治疗联合或作为行为或认知治疗的辅助施用于有需要的人。
[0050] 用10-HDA、包含10-HDA的组合物或药学上可接受的盐替代传统药物可能是有利的，特别是在传统药物与一种或多种不良反应(例如，嗜睡、震颤、焦虑、自杀意念等)相关的情况下。药物的实例是本领域技术人员已知的，并且包括但不限于，选择性5-羟色胺再吸收抑制剂(SSRI)、抗精神病药、抗抑郁药、锂(lithium)和其他情绪稳定剂。
[0051] 在其他实施方案中，将本发明化合物连同传统药物一起施用于有需要的受试者持续离散的一段时间，以解决诸如精神异常、抑郁或焦虑等症状，其中选择中断采用本发明提取物和分离的化合物的治疗，同时继续进行传统治疗。在其他实施方案中，有需要的人可在治疗期期间采用本文所述的化合物和一种或多种传统药物进行治疗(依次或联合施用)。这样的联合治疗在例如需要附加的或协同的治疗效果的情况下可能特别有用。
[0052] 关于障碍或疾病的“治疗”或“处理”是指减轻或消除该障碍或疾病的病因和/或影响。如本文所用的术语“治疗”和“处理”是指由施用一种或多种治疗(例如，一种或多种治疗剂，如本发明的化合物或组合物)而产生的病况的进展、严重性和/或持续时间的减少或改善，或所述病况的一种或多种症状(例如，一种或多种可辨别的症状)的改善(即，“处理”而非“治愈”该病况)。在特定的实施方案中，术语“治疗”和“处理”是指改善本文所述病况的至少一个可测量的物理参数。在其他实施方案中，术语“治疗”和“处理”是指通过例如稳定可辨别的症状在身体上，或通过例如稳定物理参数在生理上，或通过这两者抑制本文所述病况的进展。
[0053] 所需的治疗活性或效果通常将取决于被治疗的病况。例如，在受试者正在治疗精神分裂症的情况下，该治疗效果可以是精神分裂症的至少一种临床症状的减少，该临床症状包括但不限于焦虑、自杀想法、认知障碍、食欲不振、情绪不好和/或不活动。在受试者正在治疗ASD的情况下，治疗效果可以是ASD的至少一种临床症状的减轻，包括但不限于社会功能受损、刻板症、重复行为和沟通缺陷的减轻。
[0054] 如本文所用的术语“防止”和“预防”指预先施用药物以避免或预先阻止疾病或障碍的一种或多种症状的出现。医学领域普通技术人员认识到术语“预防”不是绝对性术语。在医学领域它被理解为指药物的预防性施用，以大幅减少病况的可能性或严重性或该病况的症状，并且这是本公开内容中预期的意义。如本领域的标准文本Physician’s Desk Reference中所用的，关于障碍或疾病的术语“防止”、“预防”和“阻止”是指在疾病或障碍完全显现之前避免该疾病或障碍的病因、影响、症状或进展。
[0055] 本发明的化合物以治疗有效量施用于有需要的人。在一些实施方案中，治疗有效量是在治疗上有效的量或在预防上有效的量。如本文所用的术语“在治疗上有效的量”意指在组织、系统、动物或人类中引起研究者、兽医、医师或其他临床医生所寻找的生物或药物反应的活性化合物的量。待施用的化合物的治疗上有效的量将取决于这样的考虑因素，并且是改善、治愈或治疗该疾病或障碍或其一种或多种症状所必需的最小量。术语“在预防上有效的量”是指在预防或大幅减小获得疾病或障碍的可能性，或在获得疾病或障碍前减小该疾病或障碍的严重程度，或在症状发展前减小其一种或多种症状的严重程度方面有效的量。大体上，预防措施分为初级预防(预防疾病或症状的发展)和二级预防(据此，疾病或症状已经发展，并且保护患者避免该过程的恶化)。
[0056] 如本文所用的，术语“有效量”涉及当根据所需的给药方案施用时提供所需的治疗活性的化合物的量。给药可以以数分钟、数小时、数天、数周、数月或数年的间隔进行或在这些时间段中的任意一个内连续进行。合适的剂量在每剂量约0.1ng/kg体重至100g/kg体重的范围内。该剂量可以在每剂量1μg至10g/kg体重的范围内，诸如在每剂量1mg至1000mg/kg体重的范围内。在一个实施方案中，该剂量可以在每剂量1mg至500mg/kg体重的范围内。在另一个实施方案中，该剂量可以在每剂量1mg至250mg/kg体重的范围内。在又一个实施方案中，该剂量可以在每剂量1mg至200mg/kg体重的范围内，诸如高达每剂量50mg/kg体重。
[0057] 关于本发明的化合物、组合物或制剂的术语“施用”或“给药”意指将该化合物引入需要治疗的动物的系统中。当本发明的化合物与一种或多种其他活性剂联合提供时，“施用”及其变化形式分别被理解为包括同时和/或依次引入该化合物和其他活性剂。
[0058] 在某些实施方案中，用于向70kg的成人每天施用一次或多次的化合物的有效量可包括每单位剂型约0.0001mg至约4000mg、约0.0001mg至约3000mg、约0.0001mg至约200mg、约0.001mg至约1500mg、约0.01mg至约1000mg、约0.1mg至约1000mg、约1mg至约1000mg、约1mg至约100mg、约10mg至约1000mg或约100mg至约1000mg化合物。
[0059] 在某些实施方案中，本发明的提取物和/或化合物可为足以每天一次或多次递送每天约0.001mg/kg至约100mg/kg、约0.01mg/kg至约50mg/kg、约0.1mg/kg至约40mg/kg、约0.5mg/kg至约30mg/kg、约0.01mg/kg至约10mg/kg、约0.1mg/kg至约10mg/kg和约1mg/kg至约25mg/kg受试者体重的剂量水平，以获得期望的治疗效果。
[0060] 合适的剂量和给药方案可由主治医师确定，并可取决于被治疗的具体病况、病况的严重程度以及受试者的大体年龄、健康和体重。应当理解，如本文所述的剂量范围提供了对向成人施用提供的药物组合物的指导。向例如儿童或青少年施用的量可由执业医师或本领域技术人员确定，并可低于施用于成人的量或与之相同。
[0061] 本发明的化合物可以以单剂量或一系列剂量施用。虽然可单独施用该化合物，但在一些实施方案中使其呈现为组合物可能是优选的，优选呈现为药物组合物。这样的组合物的配制是本领域技术人员公知的。这样的组合物可包含任何合适的载体、稀释剂或赋形剂。这些包括所有的常规溶剂、分散介质、填充剂、固体载体、包衣材料、抗真菌剂和抗细菌剂、皮肤渗透剂、表面活性剂、等渗剂和吸收剂等。应当理解，本发明的组合物还可包含其他补充的生理活性剂。
[0062] 本发明的化合物和相关的药物组合物可与一种或多种附加的治疗剂一起用于联合治疗。对于与多于一种活性剂的联合治疗，在该活性剂为独立剂量制剂的情况下，这些活性剂可单独地或联合施用。此外，一种成分的施用可在其他药剂施用之前、之后或与之同时进行。
[0063] 当与其他药剂共同施用时，例如，当与另一种抗精神病、抗惊厥或抗抑郁药物共同施用时，第二种药剂的“有效量”将取决于使用的药物的类型。批准的药剂的合适剂量是已知的，并可由本领域技术人员根据受试者的病况，被治疗的病况的类型以及使用的化合物、提取物或组合物的量进行调节。在没有明确记录量的情况下，应假设有效量。例如，本文所述的化合物可以以约0.01至约10,000mg/kg体重/天、约0.01至约5000mg/kg体重/天、约0.01至约3000mg/kg体重/天、约0.01至约1000mg/kg体重/天、约0.01至约500mg/kg体重/天、约0.01至约300mg/kg体重/天、约0.01至约100mg/kg体重/天的剂量范围施用于受试者。
[0064] 如本文所用的短语“联合治疗”应理解为指采用如本文所述的10-HDA、包含10-HDA的组合物或其药学上可接受的盐的第一量和附加的合适治疗剂的第二量施用有效量。
[0065] 在某些实施方案中，10-HDA或如本文所述的包含10-HDA的组合物或其药学上可接受的盐以及附加的治疗剂分别以有效量(即，分别以单独施用时在治疗上有效的量)施用。在其他实施方案中，10-HDA或如本文所述的包含10-HDA的组合物或其药学上可接受的盐以及该附加的治疗剂分别以单独不提供治疗效果的量(亚治疗剂量)施用。在其他实施方案中，10-HDA或如本文所述的包含10-HDA的组合物或其药学上可接受的盐可以以有效量施用，而该附加的治疗剂以亚治疗剂量施用。在其他实施方案中，10-HDA或如本文所述的包含
10-HDA的组合物或其药学上可接受的盐可以以亚治疗剂量施用，而该附加的治疗剂以有效量施用。
10-HDA的组合物或其药学上可接受的盐可以以亚治疗剂量施用，而该附加的治疗剂以有效量施用。
[0066] 如本文所用的，术语“联合”或“共同施用”可互换使用，以指使用多于一种治疗(例如，一种或多种预防剂和/或治疗剂)。该术语的使用不限制向有需要的人施用治疗(例如，预防剂和/或治疗剂)的顺序。
[0067] 共同施用包括以基本同时的方式施用第一量和第二量的治疗化合物，诸如以单个药物组合物的形式，例如，以具有第一量和第二量的固定比例的胶囊或片剂的形式，或以各自的多个、单独的胶囊或片剂的形式。此外，这样的共同施用还包括按顺序方式以任意次序使用各种化合物。当共同施用包括单独施用第一量的10-HDA或如本文所述的包含10-HDA的组合物或其药学上可接受的盐，和第二量的附加治疗剂时，它们施用的时间足够接近，以具有期望的治疗效果。例如，可产生期望的治疗效果的每次施用之间的时间段可在数分钟到数小时的范围内，并且可通过考虑各种化合物的性质如效力、溶解度、生物利用度、血浆半衰期和动力学特性来确定。例如，10-HDA或如本文所述的包含10-HDA的组合物或其药学上可接受的盐与第二治疗剂可以彼此在约24小时内、彼此在约16小时内、彼此在约8小时内、彼此在约4小时内、彼此在约1小时内或彼此在约30分钟内以任何顺序施用。
[0068] 根据本发明的10-HDA或包含10-HDA的组合物或其药学上可接受的盐可以通过任何途径施用，包括肠内(例如，口服)、肠胃外、静脉内、肌内、动脉内、髓内、鞘内、皮下、心室内、经皮、皮内、直肠、阴道内、腹膜内、局部(如通过粉末、软膏、乳膏和/或滴剂)、粘膜、鼻、颊、舌下；通过气管内灌注、支气管灌注和/或吸入；和/或作为口腔喷雾剂、鼻腔喷雾剂和/或气雾剂。特别地，预期的途径为口服施用，静脉内施用(例如，全身静脉内注射)，经由血液和/或淋巴供给的局部施用和/或直接施用于感染部位。通常，最适当的施用途径将取决于多种因素，包括药剂的性质(例如，其在胃肠道环境中的稳定性)和/或受试者的状况(例如，该受试者是否能够忍受口服施用)。在特定的实施方案中，口服施用本发明的10-HDA或包含10-HDA的组合物。
[0069] 达到有效量所需的化合物的准确量将根据例如受试者的物种、年龄和一般情况，副作用或病症的严重程度，具体化合物的特性，施用方式等在受试者之间变化。所需的剂量可每天递送三次、每天递送两次，每天递送一次，每隔一天、每三天、每周、每两周、每三周或每四周递送一次。在某些实施方案中，所需的剂量可使用多种施用(例如，两种、三种、四种、五种、六种、七种、八种、九种、十种、十一种、十二种、十三种、十四种或更多种施用)进行递送。
[0070] 当使用载体时，该载体必须在与组合物的其他成分相容并对受试者无害的意义上是药学上“可接受的”。组合物包括适合于口服、直肠、鼻、局部(包括颊和舌下)、阴道或肠胃外(包括皮下、肌内、静脉内和皮内)施用的那些组合物。该组合物可方便地呈现为单位剂型，并可通过药学领域中的任何公知的方法制备。这样的方法包括使活性成分与构成一种或多种助剂的载体结合的步骤。通常，通过使活性成分与液体载体或细分的固体载体或这两种载体均匀且紧密地结合并随后在必要时将产物成形来制备组合物。
[0071] 药学上可接受的赋形剂包括适合于所需的特定剂型的任何和所有的溶剂、稀释剂或其他液体媒介物、分散剂、悬浮助剂、表面活性剂、等渗剂、增稠剂或乳化剂、防腐剂、固体粘合剂、润滑剂等。药物组合物药剂的配制和/或制备的一般考虑因素可见于例如Remington’s Pharmaceutical Sciences，第十六版，E.W.Martin(Mack Publishing Co.,Easton,Pa.,1980)和Remington:The Science and Practice of Pharmacy，第21版(Lippincott Williams&Wilkins,2005)。
[0072] 本文所述的药物组合物可通过药理学领域中已知的任何方法来制备。通常，这样的制备方法包括使本发明的化合物(“活性成分”)与载体和/或一种或多种其他助剂结合，并随后在必要和/或需要时将该产物成形和/或包装成需要的单剂量或多剂量单位的步骤。
[0073] 药物组合物可成批地、以单一单位剂量和/或以多个单一单位剂量的方式制备、包装和/或销售。如本文所用的“单位剂量”是包含活性成分的预定量的药物组合物的离散量。该活性成分的量通常等于将施用于受试者的活性成分的剂量，和/或该剂量的适当分数，例如，该剂量的一半或三分之一。
[0074] 本发明的药物组合物中的活性成分、药学上可接受的赋形剂和/或任何附加成分的相对量将根据被治疗的受试者的特性、大小和/或状况，并进一步根据施用该组合物的途径而变化。举例来说，该组合物可包含0.1％至100％(w/w)的活性成分。
[0075] 在一些实施方案中，当本发明的10-HDA用于口服施用时，可将其制备成各自包含预定量的活性成分的离散单元如胶囊、小袋或片剂；制备成粉末或颗粒剂；制备成水性或非水性液体形式的溶液或悬浮液；或制备成水包油液体乳液或油包水液体乳液。该10-HDA也可以呈现为丸剂、药糖剂或糊剂。
[0076] 在一些实施方案中，当10-HDA被配制成片剂时，该片剂可通过任选地与一种或多种助剂一起压制或模制来制备。压制的片剂可通过在合适的机器中压制任选地与粘合剂(例如，惰性稀释剂、防腐剂、崩解剂(例如，羧基乙酸淀粉钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、交联羧甲基纤维素钠)、表面活性剂或分散剂混合的自由流动形式(诸如粉末或颗粒剂)的活性成分来制备。模塑的片剂可通过在合适的机器中模塑采用惰性液体稀释剂润湿的粉末状化合物的混合物来制备。该片剂可以任选地进行包衣或刻痕，并可使用例如不同比例的羟丙基甲基纤维素配制为提供其中活性成分的缓慢或控制释放，以提供所需的释放谱。片剂可以任选地设置有肠溶衣，以在除了胃以外的肠的部分中提供释放。
[0077] 在一些实施方案中，本发明的10-HDA或包含10-HDA的组合物可以是具有一种或多种赋形剂的微胶囊化形式。片剂、糖衣丸、胶囊、丸剂和颗粒剂的固体剂型可采用包衣和壳如肠溶衣、控释包衣和药物配制领域公知的其他包衣来制备。在这样的固体剂型中，活性成分可与至少一种惰性稀释剂如蔗糖、乳糖或淀粉混合。按照常规，这样的剂型可包含除了惰性稀释剂以外的附加物质，例如，压片润滑剂和其他压片助剂，诸如硬脂酸镁和微晶纤维素。在胶囊、片剂和丸剂的情况下，该剂型可包含缓冲剂。该剂型可以任选地包含乳浊剂，并可具有某种组成使得该剂型仅在或优先在肠道的某个部分任选以延迟的方式释放活性成分。可使用的嵌入组分的实例包括聚合物质和蜡。
[0078] 在一些实施方案中，当本发明的10-HDA将作为用于口服和肠胃外施用的液体剂型施用时，这样的剂型可包括药学上可接受的乳液、微乳液、溶液、悬浮液、糖浆剂和酏剂。除了活性成分之外，该液体剂型还可包含本领域常用的惰性稀释剂，例如，水或其他溶剂、增溶剂和乳化剂，诸如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1,3-丁二醇、二甲基甲酰胺、油(例如，棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油)、甘油、四氢糠醇、聚乙二醇和脱水山梨糖醇的脂肪酸酯及其混合物。除了惰性稀释剂之外，口服组合物还可包含佐剂，诸如润湿剂、乳化剂和悬浮剂、甜味剂、调味剂和增香剂。在针对肠胃外施用的某些实施方案中，将本发明的10-HDA与增溶剂如CremophorTM、醇、油、改性油、二醇、聚山梨醇酯、环糊精、聚合物及其混合物混合。
[0079] 在一些实施方案中，当本发明的10-HDA或包含10-HDA的组合物将局部施用于口腔时，合适的剂型可包括在调味基质(通常是蔗糖和阿拉伯树胶或黄蓍胶)中包含活性成分的锭剂；在惰性基质如明胶和甘油或蔗糖和阿拉伯树胶中包含活性成分的糖果锭剂；以及在合适的液体载体中包含活性成分的漱口剂。
[0080] 在一些实施方案中，当本发明的10-HDA或包含10-HDA的组合物将局部施用于皮肤时，合适的剂型可包括将提取物或组分化合物溶解或悬浮于任何合适的载体或基质中，并且可以为洗剂、凝胶、乳膏、糊剂、软膏等形式。合适的载体包括矿物油、丙二醇、聚氧乙烯、聚氧丙烯、乳化蜡、脱水山梨糖醇单硬脂酸酯、聚山梨醇酯60、十六烷基酯蜡、鲸蜡硬脂醇、2-辛基十二烷醇、苯甲醇和水。经皮贴剂也可用于施用本发明的提取物或组分化合物。
[0081] 在一些实施方案中，本发明的10-HDA或包含10-HDA的组合物用于直肠施用，合适的剂型可包括具有包含例如可可脂、甘油、明胶或聚乙二醇的合适基质的栓剂。
[0082] 在一些实施方案中，当本发明的10-HDA或包含10-HDA的组合物用于阴道施用时，合适的剂型可包括阴道栓、棉塞、乳膏、凝胶、糊剂、泡沫或喷雾制剂，其除了活性成分之外还包含此类本领域已知的合适的载体。
[0083] 在一些实施方案中，当本发明的10-HDA或包含10-HDA的组合物用于肠胃外施用时，合适的剂型可包括水性和非水性的等渗无菌注射溶液，其可包含抗氧化剂、缓冲剂、杀菌剂和使该组合物与预期受体的血液等渗的溶质；以及水性和非水性的无菌悬浮液，其可包含悬浮剂和增稠剂。该化合物可呈现在单剂量或多剂量的密封容器，例如，安瓿和小瓶中，并可储存于冷冻干燥(冻干)的条件下，只需要在即将使用前添加无菌液体载体，例如注射用水。临时的注射溶液和悬浮液可由先前所述类型的无菌粉末、颗粒剂和片剂来制备。可注射的制剂可以是在无毒的肠胃外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液、悬浮液或乳液，例如，如在1,3-丁二醇中的溶液。可使用的可接受的媒介物和溶剂为水、林格溶液(Ringer’s solution)，U.S.P.和等渗氯化钠溶液。此外，无菌的固定油通常用作溶剂或悬浮介质。为此，可使用任何温和的固定油，包括合成的甘油单酯或甘油二酯。此外，脂肪酸如油酸用于注射剂的制备。可注射的制剂可例如通过经细菌截留过滤器的过滤，或通过并入可在使用前溶解或分散在无菌水或其他无菌可注射介质中的无菌固体组合物形式的灭菌剂进行灭菌。
[0084] 在某些实施方案中，单位剂量组合物为包含活性成分的如上文所述的每日剂量或单位、每日亚剂量，或其适当分数剂量的那些组合物。
[0085] 应当理解，除了活性剂10-HDA之外，本发明的包含10-HDA的组合物还可包含与讨论的组合物类型有关的本领域常规的其他试剂，例如，适合于口服施用的那些组合物可包含其他试剂如粘合剂、甜味剂、增稠剂、调味剂、崩解剂、包衣剂、防腐剂、润滑剂和/或延时剂。合适的甜味剂包括蔗糖、乳糖、葡萄糖、阿斯巴甜或糖精。合适的崩解剂包括玉米淀粉、甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、黄原胶、膨润土、海藻酸或琼脂。合适的调味剂包括薄荷油、冬青油、樱桃、橘子或覆盆子调味剂。合适的包衣剂包括丙烯酸和/或甲基丙烯酸的聚合物或共聚物和/或它们的酯、蜡、脂肪醇、玉米醇溶蛋白、虫胶或谷蛋白。合适的防腐剂包括苯甲酸钠、维生素E、α-生育酚、抗坏血酸、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯或亚硫酸氢钠。合适的润滑剂包括硬脂酸镁、硬脂酸、油酸钠、氯化钠或滑石。合适的延时剂包括单硬脂酸甘油酯或双硬脂酸甘油酯。
[0086] 如本文使用的短语“药学上可接受的盐”是指提供的化合物的药学上可接受的有机或无机盐。对于在药物中的使用，所提供的化合物的盐将为药学上可接受的盐。然而，其他的盐也可用于制备提供的化合物或其药学上可接受的盐。药学上可接受的盐是本领域公知的。例如，Berge等人在J.Pharm.Sci.(1977)66:1–19中详细描述了药学上可接受的盐，该文献通过引用而全文并入本文。药学上可接受的盐涉及包含另一种分子如乙酸根离子、琥珀酸根离子或其他反荷离子。该反荷离子可以是稳定母体化合物上的电荷的任何有机或无机部分。此外，药学上可接受的盐可在其结构中具有多于一个带电荷原子。当母体药物中存在多个带电荷原子时，其药学上可接受的盐将具有多个反荷离子，并且这些可以是相同反荷离子或不同反荷离子的若干实例。因此，药学上可接受的盐可具有在母体化合物中的一个或多个带电荷原子和/或一个或多个反荷离子。
[0087] 本文所述的化合物的药学上可接受的盐包括来源于合适的无机酸和有机酸和碱的那些盐。在一些实施方案中，该盐可在该化合物的最终分离和纯化过程中原位制备。在其他实施方案中，该盐可在单独的合成步骤中由该化合物的游离形式制备。
[0088] 当提供的化合物是酸性的或包含足够酸性的生物电子等排体时，合适的“药学上可接受的盐”是指由药学上可接受的无毒碱(包括无机碱和有机碱)制备的盐。来源于无机碱的盐包括铝、铵、钙、铜、铁、亚铁、锂、镁、锰盐、亚锰、钾、钠、锌盐等。特定的实施方案包括铵、钙、镁、钾和钠盐。来源于药学上可接受的有机无毒碱的盐包括以下物质的盐：伯、仲和叔胺，取代胺(包括天然存在的取代胺)、环胺和碱性离子交换树脂，诸如精氨酸、甜菜碱、咖啡因、胆碱、N,N'-二苄基乙二胺、二乙胺、2-二乙氨基乙醇、2-二甲氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基吗啉、N-乙基哌啶、还原葡萄糖胺、葡糖胺、组氨酸、海巴明(hydrabamine)、异丙胺、赖氨酸、甲基还原葡萄糖胺、吗啉、哌嗪、哌啶、聚胺树脂、普鲁卡因、嘌呤、可可碱、三乙胺、三甲胺、三丙胺、氨丁三醇等。也包括季铵盐如N+(C1-4烷基)4。
[0089] Berge等人,"Pharmaceutical Salts,"J.Pharm.Sci.,1977:66:1-19更充分地描述了上述药学上可接受的盐和其他典型的药学上可接受的盐的制备。
[0090] 本文所述的10-HDA或包含10-HDA的组合物的制剂可包含在试剂盒中。该试剂盒可包含单或多剂量的两种或更多种药剂(每种药剂均单独包装或配制)，或者单或多剂量的两种或更多种药剂(组合包装或配制)。因此，一种或多种药剂可存在于第一容器中，并且该试剂盒可以任选地在第二容器中包含一种或多种药剂。将一个或多个容器放入包装内，并且该包装可以任选地包含施用或剂量说明。试剂盒可包含附加的组分，诸如注射器或用于施用药剂的其他工具，以及稀释剂或用于配制的其他工具。因此，该试剂盒可包含：a)包含本文所述的化合物和药学上可接受的载体、媒介物或稀释剂的药物组合物；和b)容器或包装。该试剂盒可任选地包含描述在本文所述的一种或多种方法中使用该药物组合物(例如，预防或治疗本文所述的一种或多种疾病和障碍)的方法的说明。该试剂盒可任选地包含第二药物组合物，该第二药物组合物包含本文所述的用于共同治疗用途的一种或多种附加的药剂、药学上可接受的载体、媒介物或稀释剂。该试剂盒中包含的含有10-HDA的药物组合物和第二药物组合物可任选地组合在同一药物组合物中。
[0091] 试剂盒包含用于容纳该药物组合物的容器或包装，并且还可包含分开的容器，诸如分开的瓶或分开的箔包。该容器可以是例如纸盒或纸板盒、玻璃或塑料瓶或罐、可再密封袋(例如，容纳片剂的“补充物”以放入不同容器中)，或具有根据治疗方案从包装挤出的单独剂量的泡罩包装。多于一个容器可共同使用单个包装以销售单一剂型是可行的。例如，片剂可包含在瓶内，该瓶继而包含在盒内。
[0092] 试剂盒的一个实例是所谓的泡罩包装。泡罩包装是在包装工业中公知的，并广泛用于药物单位剂型(片剂、胶囊等)的包装。泡罩包装通常由覆盖有优选透明塑料材料的箔的相对刚性材料的薄片构成。在包装过程中，在塑料箔中形成凹部。该凹部具有待包装的单独片剂或胶囊的大小和形状，或可具有容纳待包装的多个片剂和/或胶囊的大小和形状。然后，将该片剂或胶囊相应地放入凹部，并将相对刚性材料的薄片抵靠塑料箔在该箔与凹部形成的方向相对的面上密封。由此，该片剂或胶囊根据需要单独密封或共同密封在塑料箔与薄片之间的凹部。薄片的强度优选使得可通过在凹部上手动施加压力，由此在该凹部位置的薄片中形成开口而从泡罩包装中取出片剂或胶囊。随后可将该片剂或胶囊经由所述开口取出。
[0093] 可能需要提供包含医生、药剂师或受试者关于该药物将何时服用的信息和/或说明的书面记忆辅助工具。“每日剂量”可以是将在给定日使用的单个片剂或胶囊或若干个片剂或胶囊。当试剂盒包含单独的组合物时，该试剂盒的一种或多种组合物的每日剂量可由一个片剂或胶囊组成，而该试剂盒的另一种或多种组合物的每日剂量可由若干个片剂或胶囊组成。试剂盒可采取分配器的形式，该分配器被设计为将每日剂量按照其预期使用的顺序一次一个地分配。该分配器可配备有记忆辅助装置，以便进一步促进对方案的依从性。这样的记忆辅助装置的一个实例是机械计数器，其指示已经分配的每日剂量的数目。这样的记忆辅助装置的另一个实例是与液晶读出器或例如读出上一次使用每日剂量的日期和/或提醒受试者何时使用下一剂量的可听到的提示信号耦合的、电池供电的微芯片存储器。
[0094] 应当理解，作为10-HDA的前药的任何化合物也在本发明的范围和精神内。术语“前药”以其最广泛的含义使用，并且包括在体内转化为本发明的化合物的那些衍生物。本领域技术人员将容易想到这样的衍生物。
[0095] 此外，认识到10-HDA可以为游离化合物或溶剂化物(例如，水合物)的晶体形式，并且这两种形式均在本发明的范围内。溶剂化的方法是本领域内普遍所知的。
[0096] 进一步认识到，根据其结构，根据本发明的10-HDA能够经历互变异构。因此，本发明的10-HDA的所有可能的互变异构体都落在本发明的范围和精神内。
[0097] 如本文所用的术语“来源于”应被用来指示特定的整体或一组整体源自指定种类，但不一定直接从该指定来源获得。例如，应当理解10-HDA可源自蜂王浆，但不一定直接从该指定来源获得。此外，除非上下文另有明确说明，否则如本文所使用的单数形式“一个”、“一种”以及“该”包括复数指代物。
[0098] 本领域技术人员将意识到，本文所述的发明除了具体描述的那些以外还可以发生变化和修改。应当理解，本文所述的发明包含所有这样的变化和修改。本发明还包含本说明书中单独或共同提及或指示的所有这样的步骤、特征、方法、组合物和化合物，以及所述步骤或特征中的任何两个或更多个的任何和所有组合。
[0099] 在整篇说明书和随附的权利要求书中，除非上下文另有要求，否则词语“包含”及其变化形式如“包含”和“包括”将被理解为暗示包含所述整体或步骤或一组整体或步骤，但不排除任何其他整体或步骤或一组整体或步骤。
[0101] 在95％空气和5％CO2的加湿气氛中，将人类成神经细胞瘤SHY-SY-5Y细胞于37℃下在补充有10％热灭活的胎牛血清、1％青霉素和1％L-谷氨酰胺的Dulbecco改良的Eagle培养基中培养。可使用对芳香化酶具有特异性的抗体，通过免疫组织化学来检测芳香化酶在这些细胞中的定位。在正常情况下，芳香化酶由于是内质网中的膜结合蛋白而表现为在整个细胞中的点状染色。在25μg/L双酚A(BPA)的存在下，芳香化酶形成聚集体并将失去其功能。10-HDA的添加可避免双酚A对芳香化酶的变性作用。这些结果证明了芳香化酶在细胞中的不良作用和10-HDA对芳香化酶的保护作用。实施例2：体内小鼠模型
[0100] 芳香化酶在小鼠内侧杏仁核中以高水平表达，并且通过与陌生小鼠的互动激活相同区域。在人类中，芳香化酶也在杏仁核中高度表达，并且fMRI研究表明与对照相比，杏仁核在患有ASD的人中较少被激活。假定芳香化酶敲除小鼠(ArKO)模型可表现出反映ASD的一些关键诊断行为和症状(包括例如ASD样行为障碍)的行为表型。
[0101] 因此，开发了芳香化酶缺乏的小鼠模型(ArKO)，其显示出核心的孤独症样特征，包括发声缺陷、强迫性理毛和社会互动缺陷(图2；A至E)。当敲除芳香化酶时，睾酮在ArKO小鼠的血清中积累，并且不能通过雌激素受体激动剂降低。
[0102] 特别地，本发明人已经发现，正常功能的芳香化酶的缺少将促成在雄性ArKO(芳香化酶敲除)小鼠中发生而在雌性ArKO小鼠中不发生的以下ASD样行为障碍：i)异常的社会互动(图2A)：发现幼年(4周龄)雄性ArKO小鼠比野生型雄性小鼠(WT)花费显著较少的时间来探究陌生小鼠。相反，发现雌性ArKO和WT小鼠花费相似的时间长度与陌生小鼠相处。
ii)超声波发声缺陷(图2B)：发现当与它们的仔鼠分开时，雄性ArKO 9天大幼鼠的发声显著小于雄性WT同窝仔鼠。
iii)重复行为：如在施用水喷雾后20分钟时间段内测得的，发现与WT和雌性ArKO小鼠相比，雄性ArKO小鼠理毛更频繁(图2C)并且持续更长的时间段(图2D)。还发现与WT和雌性ArKO小鼠相比，雄性ArKO小鼠在转轮上花费显著更多的时间(图2E)。
ii)超声波发声缺陷(图2B)：发现当与它们的仔鼠分开时，雄性ArKO 9天大幼鼠的发声显著小于雄性WT同窝仔鼠。
iii)重复行为：如在施用水喷雾后20分钟时间段内测得的，发现与WT和雌性ArKO小鼠相比，雄性ArKO小鼠理毛更频繁(图2C)并且持续更长的时间段(图2D)。还发现与WT和雌性ArKO小鼠相比，雄性ArKO小鼠在转轮上花费显著更多的时间(图2E)。
[0103] 本发明人已经证明双酚A(BPA)(在聚碳酸酯塑料和环氧树脂的制备中使用的)可在体外使芳香化酶变性(图1)。因此，进行进一步的研究以调查环境暴露于双酚A(BPA)在随后的孤独症样行为发展中的作用。在调查暴露于BPA的作用的进一步研究中，使用显示出核心ASD样特征的ArKO小鼠作为对比。
[0104] 因此，将BPA(50μg/kg)施用于妊娠中期(即，胎龄10.5至14.5天)的妊娠小鼠。发现所得WT雄性后代表现出ASD样行为，与雄性ArKO小鼠的那些行为相似(图2F)。特别地，雄性后代比对照雄性后代(暴露于媒介物的)或暴露于BPA的雌性后代花费显著较少的时间与陌生小鼠相处。此外，如通过死后体视学所检测到的，发现暴露于BPA的雄性后代在内侧杏仁核中神经元减少13.5％，这与在青少年和成年孤独症患者大脑的杏仁核中观察到的神经元数目减少约15％是一致的。进行进一步的研究以调查BPA暴露对子宫内芳香化酶-GFP阳性神经元数目的影响(图3)。内侧杏仁核参与社会互动和高度表达的芳香化酶。如通过标准体视学方法所计数的，在暴露于BPA之后，发现芳香化酶-GFP阳性神经元的数目显著减少。实施例4：用10-HDA处理的体内小鼠模型
[0105] 如实施例2所述，通过使雌性野生型FVBN小鼠与雄性CYP19-GFP小鼠交配，随后在第10.5-14.5妊娠日皮下注射50μg/kg/天的BPA，来产生具有孤独症样行为的小鼠。
[0106] 在断奶后，通过腹膜内注射向对照和暴露于BPA的幼鼠每日施用10-HDA(0和500μg/kg/天；溶解于盐水)，持续最长6周的时间段。在3周的每日处理后，首先研究6只仔鼠的焦虑、记忆、社会互动(图4A)和无意识的理毛。
[0107] 由对任何给定动物的各自的基因型或处理不知情的研究人员进行数据收集。评估两种标准作为行为研究、社会互动和无意识理毛活动的基础。
[0108] 针对社会互动研究，将测试小鼠放入社交测试盒内，该社交测试盒为具有三个隔室的透明塑料盒，且在隔墙中有门以允许进入每个隔室。每一侧隔室都包含金属丝笼。经三个阶段评估测试小鼠。在第1阶段中，将测试小鼠放入中间的隔室并允许其探索全部3个隔室10min。在第2阶段中，从中心隔室的任一侧在金属丝笼内关入相同性别和年龄的陌生小鼠(陌生小鼠1)，并允许该测试小鼠探索整个社交测试盒10min的时间段。在第3阶段中，将新的陌生小鼠放入先前空的金属丝笼中，使得该测试小鼠在第一只已经探究过的、现在熟悉的小鼠(陌生小鼠1)和新的陌生小鼠(陌生小鼠2)之间作出选择。使用TopScan视频追踪系统记录并追踪小鼠的移动。分析在每个隔室内的持续时间、嗅探每个金属丝笼花费的时间和在隔室之间转移的次数。
[0109] 使用无意识的理毛活动作为重复活动的度量。在上述的第1阶段或第3隔室研究过程中，通过TopScan视频追踪系统记录小鼠的无意识理毛。理毛的持续时间和频率是测量的参数，并且进行盲分析。
[0110] 在行为测试后，所有处理撤销三个月，并再次测试动物的行为(图4B)，显示10HDA处理撤销导致在暴露于BPA的雄性动物中呈现社会互动缺陷。随后向该雄性动物再施用如上所述的媒介物或10-HDA 3周，并且再次进行行为研究(图4C)。在暴露于50μg/kg/天的BPA的雄性后代中观察到的过度理毛通过10-HDA处理得到改善(图4D)。结果证明，10-HDA可改善暴露于BPA的动物的社会互动缺陷和孤独症样行为。
[0111] 在行为研究之后，将动物处死，并且通过杏仁核中芳香化酶细胞的膜片钳从脑切片收集电生理学数据。证明BPA暴露降低了神经元的电阻，并且10-HDA处理将电阻修复至正常值(图4E)。10-HDA处理还将躯体感觉皮质中神经元的树突长度恢复至正常长度(图4F)。实施例5：BPA和10-HDA在雄性小鼠胚胎的原代皮层细胞培养中的作用的体外分析
[0112] 由胎龄15.5天的雄性小鼠胎儿制备原代皮层培养物。特别地，评估BPA和10-HDA对树突长度和树突棘密度的影响。评估了四个测试组：用BPA处理的小鼠，用10-HDA处理的小鼠，用BPA和10-HDA处理的小鼠，以及媒介物对照。测量了十个神经元并重复该实验。结果表明，BPA降低了神经元的树突棘密度和树突长度。发现10-HDA逆转或保护不受BPA的影响。结果呈现于图5至图9中。结果证明，10-HDA具有刺激神经突和树突棘形成的能力。考虑到与孤独症关联的大多数基因参与神经突生长的调节，因此这种能力是很重要的(“A noise-reduction GWAS analysis implicates altered regulation of neurite outgrowth and guidance in autism”,Hussman JP等人,Mol Autism.2011年1月19日；2(1):1)。实施例6：反式10-HDA和顺式10-HDA活性的比较
[0113] 为了比较反式和顺式10-HDA各自的活性，在500ng/ml BPA(毒性水平)的存在下将各1mM的顺式或反式10-HDA添加至已分化的小鼠运动神经元NSC-34细胞中。在72小时后通过MTT试验测定细胞存活率。结果证明，顺式10-HDA没有提供针对BP毒性的保护，而反式10-HDA显示出神经保护作用。
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