本发明涉及新的具有α7-烟碱乙酰胆碱受体激动活性的异喹啉-3-甲酸 酰胺、它们的制备、药物用途以及含有它们的药物组合物。

更具体而言，本发明提供了游离碱或酸加成盐形式的式I化合物，

其中R1和R2独立地是氢、(C1-4)烷基、卤素、羟基、(C1-4)烷氧基、二(C1-4) 烷氨基、(C1-4)烷硫基、氰基或者三氟甲基，R3为氢或(C1-4)烷基，且n为 1或2。

卤素表示氟、溴、氯或碘。

任何烷基、烷氧基或烷硫基是支链或直链基团。它们优选为甲基、甲 氧基或甲硫基。n优选为2。

由于式I化合物和它们的盐中存在不对称的碳原子，所以这些化合物 可以以旋光活性形式或者旋光异构体混合物、例如外消旋混合物的形式存 在。包括外消旋混合物在内的所有的旋光异构体以及它们的混合物均是本 发明的一部分。

(S)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基氨基化合物和(S)-1-氮杂双环[2.2.1]庚-2- 基氨基化合物是优选的。

另一方面，本发明提供了式I化合物及其盐的生产工艺，该工艺包括 如下步骤：使式II化合物

其中R1和R2如上定义，

与式III化合物反应，

其中R3和n如上定义，并以游离碱或酸加成盐形式回收所得式I化合物。

该反应可以按照常规方法进行，例如在实施例中所述的方法。

处理上述工艺所得的反应混合物和纯化由此所得的化合物可以按照抑 制工艺进行。

酸加成盐可通过已知方法由游离碱得到，反之亦然。

旋光纯形式的式I化合物可通过众所周知的方法由相应的外消旋物获 得。或者，可以使用旋光纯形式的原料。

起始式II化合物可通过常规方法获得，例如可通过常规方法使式IV 或V氧化获得，

其中R1和R2如上定义。

式III、IV、V的原料是已知的，或者由已知化合物获得，例如如实施 例中所述。

式I化合物及其可药用的酸加成盐，下文称为本发明的药物，在体外 和动物实验中都表现出有价值的药理性质，因此可用作药物。

具体而言，本发明的化合物是α7-烟碱乙酰胆碱受体(nAChR)激动剂。

本发明的药物在功能性试验中表现出对α7-nAChR的高亲合力，如下 述测试所示：

a)用稳定表达α7-nAChR的大鼠垂体细胞系进行对α7-nAChR亲合力的 功能性试验。使用经受体刺激产生的钙内流作为读数。在该试验中，本 发明的药物的pEC50值为约5至约8；

b)为了评价本发明的药物的选择性，采用稳定表达α4β2-nAChR亚型的 人上皮细胞系进行类似的功能性试验。在该试验中，本发明的药物对 α4β2-nAChR没有活性或表现出较小活性。

c)为了评价本发明的化合物的选择性，采用稳定表达神经节nAChR亚型 的人上皮细胞系或内源性表达肌型(muscle type)烟碱性受体的细胞系，

如a)中所述进行类似的功能性试验。在该试验中，本发明的药物对神经 节亚型及肌型烟碱性受体亚型没有活性或表现出较小活性。

在由S.Leonard等人在Schizophrenia Bulletin 22，431-445(1996)中 所述的感觉闸道缺损(sensory gating deficit)小鼠模型(DBA/2-小鼠)中，本 发明的药物在浓度为约10至约40μM时引起显著的感觉闸道。

因此，本发明的药物可用于治疗精神紊乱如精神分裂症、躁狂症、抑 郁症及焦虑症，用于治疗神经变性紊乱如老年痴呆症、阿尔茨海默氏病及 其它智力缺陷紊乱，如注意力缺陷多动障碍(ADHD)、认知功能障碍以及 记忆缺失；帕金森氏病、亨廷顿舞蹈病、肌萎缩性侧索硬化及多发性硬化 症，还可用于治疗疼痛、癫痫及炎性紊乱如类风湿性关节炎和节段性回肠 炎。对炎性紊乱的治疗作用基于如下发现：α-7激动机可减少TNF从巨噬 细胞中的释放，如Wang等人，Nature，2002：421，384中所报道的。α7- nAChR激动剂在神经变性中的有用性还在文献中被证明，例如在Wang 等人的J.biol.Chem.(275，5626-5632(2000)中被证明。

对于上述适应症，适宜的剂量当然根据例如所用化合物、宿主、给药 方式以及所治疗病症的性质及严重程度而变。然而一般来说，当日剂量为 约0.01至约100、优选约0.1至约50mg/kg动物体重时，在动物中获得满 意的结果。对于较大的哺乳动物如人类而言，标明的日剂量为约1至约500、 优选约5至约300mg本发明的药物，可方便地以例如至多一日四次的分开 剂量或者以缓释形式给药。

本发明的药物可以通过任何常规途径给药，特别是肠内给药(优选经口 服给药，例如以片剂和胶囊的形式)或胃肠道外给药(例如以注射溶液或混 悬液的形式)。

依前说述，本发明还提供了用作药物的本发明的药物，例如用于治疗 上文提及的任何病症。

本发明还提供了如下定义的药物组合物：该组合物包含本发明的药物 和至少一种药用载体或稀释剂。该组合物可按照常规方法制备。单位剂型 含有例如约0.25至约150、优选约1至约25mg本发明的化合物。

而且，本发明还提供了本发明的药物在制备用于治疗上文提及的任何 病症的药物中的用途。

在另一方面，本发明提供了在需要该治疗的受治疗者中治疗上文提及 的任何病症的方法，该方法包括对该受治疗者施用治疗有效量的本发明的 药物。

下述实施例用于解释本发明。

实施例1：异喹啉-3-甲酸{(S)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-2-烷基}-酰胺

将529mg异喹啉-3-甲酸水合物溶于18ml DMF中，然后加入508mg 1- 羟基-苯并三唑和1.81g二环己基碳二亚胺。于室温搅拌1小时后，滤除所 沉淀的二环已基脲，并向滤液中加入500mg 3(S)-氨基奎宁环二盐酸盐和 1.3ml乙基-二异丙胺。于室温搅拌48小时后，滤除第二分二环己基脲，并 用MeOtBu/DMF(4∶1)洗涤。将洗涤液和滤液合并，在5℃下放置过夜使之 结晶。滤除晶状沉淀，并用MeOtBu/DMF(4∶1)洗涤，然后用MeOtBu洗 涤，得到单盐酸盐形式的标题化合物。

NMR(1H，400MHz，δH d6-DMSO)：1.75(1H，t)，1.96(2H，m)，2.12(1H，q)，2.24(1H，d)，3.24 (3H，m)，3.43(2H，m)，3.65(1H，t)，4.49(1H，q)，7.86(1H，t)，7.92(1H，t)，8.24(1H，d)，8.30 (1H，d)，8.61(1H，s)，9.31(1H，d)，9.46(1H，s)，10.59(1H，br).

MS(ES+)：282(MH)+

实施例2：异喹啉-3-甲酸{(R)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基}-酰胺

按照实施例1，从3(R)-氨基奎宁环和异喹啉-3-甲酸水合物开始，最终 制备单盐酸盐形式的化合物。

NMR(1H，400MHz，δH d6-DMSO)：1.76(1H，t)，1.96(2H，q)，2.12(1H，q)，2.24(1H，d)，3.22 (3H，m)，3.45(2H，m)，3.64(1H，t)，4.49(1H，q)，7.88(1H，t)，7.96(1H，t)，8.25(1H，d)，8.33 (1H，d)，8.71(1H，s)，9.38(1H，d)，9.49(1H，s)，10.77(1H，s).

MS(ES+)：282(MH)+

实施例3：6-氟-异喹啉-3-甲酸{(R)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基}-酰胺

按照实施例1，从3(R)-氨基奎宁环和6-氟-异喹啉-3-甲酸开始，最终 制备化合物。经硅胶色谱法，用MeOtBu/EtOH/浓氨水溶液(75∶22.5∶2.5) 洗脱，进行进一步纯化。

NMR(1H，400MHz，δH d6-DMSO)：1.38(1H，m)，1.63(2H，dt)，1.78(1H，m)，1.93(1H，q)， 2.65-2.80(4H，m)，2.94(1H，dt)，3.18(1H，dt)，4.06(1H，m)，7.72(1H，dt)，8.04(1H，dd)， 8.39(1H，q)，8.57(1H，s)，8.76(1H，d)，9.42(1H，s).

MS(ES+)：300(MH)+

原料可如下制备：

6-氟-异喹啉-3-甲酸盐酸盐

将2.15g 6-氟-1，2，3，4-四氢-异喹啉-3-甲酸甲酯溶于120ml二甲苯中。 加入1.6g Pd-C(10％)，并将混悬液回流8小时。滤除催化剂，用MeOH 洗涤，合并滤液和洗涤液，蒸发至干。

将1g所得的6-氟-异喹啉-3-甲酸甲酯粗品溶于20ml MoOH/THF(1∶1) 中，在5℃下与510mg LiOH水合物在10ml水中的溶液缓慢混合。所得溶 液于室温搅拌过夜，倒入由50ml MeOtBu、10ml水和7ml 2N盐酸水溶液 组成的溶液中。滤除沉淀，用MeOtBu洗涤。

NMR(1H，400MHz，δH d6-DMSO)：7.77(1H，dt)，8.04(1H，dd)，8.38(1H，dt)，8.66(1H，s)， 9.43(1H，s).

MS(ES-)：190(M-H)-

6-氟-1，2，3，4-四氢-异喹啉-3-甲酸甲酯

将2g m-氟-DL-苯丙氨酸混悬于20ml浓盐酸和8ml 37％甲醛溶液中， 于90℃搅拌3.5小时，在此期间发生部分溶液。于室温继续搅拌过夜，滤 除沉淀，用冷水洗涤。将滤液和洗涤液合并，蒸发至干，残余物悬浮于50ml MoOH(用HCl饱和)中并搅拌过夜，在此期间形成澄清溶液。蒸发溶剂， 残余物溶于CH2Cl2/MeOH(9∶1)中，用2N Na2CO3溶液和盐水萃取。有机 相用Na2SO4干燥，蒸发，采用MeOtBu进行硅胶色谱法。获得标题化合 物，为油状物，MS(ES+)：210(MH)+。另外，6-氟-3-甲基-1，2，3，4-四氢- 异喹啉-3-甲酸甲酯和8-氟-1，2，3，4-四氢-异喹啉-3-甲酸甲酯作为副产物被分 离出。

实施例4：8-氟-异喹啉-3-甲酸{(R)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基}-酰胺

按照实施例1，从3(R)-氨基奎宁环和8-氟-异喹啉-3-甲酸开始，制备 标题化合物。经硅胶色谱法，用MeOtBu/EtOH/浓氨水溶液(80/18/2)洗脱， 进行进一步纯化。

NMR(1H，400MHz，δH d6-DMSO)：1.38(1H，m)，1.63(2H，dt)，1.78(1H，m)，1.93(1H，q)， 2.64-2.81(4H，m)，2.93(1H，dt)，3.17(1H，dt)，4.07(1H，m)，7.63(1H，dt)，7.90(1H，dd)， 8.09(1H，d)，8.63(1H，s)，8.79(1H，d)，9.53(1H，s).

MS(ES+)：300(MH)

原料可如下制备：

8-氟-异喹啉-3-甲酸盐酸盐

按照6-氟-异喹啉-3-甲酸的制备(实施例3)，使8-氟-1，2，3，4-四氢-异喹 啉-3-甲酸甲酯氧化，然后进行皂化反应，制备得该化合物。

NMR(1H，400MHz，δH d6-DMSO)：7.68(1H，dd)，7.92(1H，dd)，8.09(1H，d)，8.71(1H，s)， 9.57(1H，s).

MS(ES-)：190(M-H)-

8-氟-1，2，3，4-四氢-异喹啉-3-甲酸甲酯

该化合物可作为6-氟-1，2，3，4-四氢-异喹啉-3-甲酸甲酯合成(参见实施 例3)的副产物而得到。MS(EI)：209(M+)

实施例5：8-氟-异喹啉-3-甲酸{(S)-1-氮杂双环[2-2.2]辛-2-基}-酰胺 2-氟-6-碘-苯甲醛

将丁基锂(1.6M，60ml，0.113mol)加入二异丙胺(17.6ml，0.124mol)在 THF(200ml)中的冰冷溶液中。溶液于0℃搅拌30分钟，然后冷却至-78℃。 将1-氟-3-碘-苯(25g，0.113mol)的THF(20ml)溶液缓慢加入预制的LDA混 合物中。所得溶液另外搅拌1小时，之后加入DMF(9.55ml，0.124mol)， 于-78℃继续另外搅拌30分钟。反应物首先用醋酸(20ml)、接着用水(200ml) 使之淬灭。混合物用乙醚萃取。有机层用2N盐酸溶液、盐水洗涤，经MgSO4 干燥，蒸发，得到所需化合物(28.3g)。

2-(2-氟-6-碘-苯基)-[1，3]二烷

采用Dean-Stark装置，将2-氟-6-碘-苯甲醛(3.0g，12mmol)、1，3-丙二 醇(1.3ml，18mmol)和对甲苯磺酸(342mg，1.8mmol)在甲苯(60ml)中回流加 热2小时。有机层用盐水洗涤，经MgSO4干燥，蒸发，得到所需化合物 (3.65g)。

2-乙酰氨基-3-(2-[1，3]二烷-2-基-3-氟-苯基)-丙烯酸甲酯

将2-(2-氟-6-碘-苯基)-[1，3]二烷(1.85g，6mmol)、2-乙酰氨基-丙烯酸 甲酯(906mg，6.33mmol)、碳酸氢钠(1.26g，15mmol)、四丁基氯化铵(1.35g， 4.86mmol)和醋酸钯(II)(52mg，0.23mmol)的DMF(10ml)溶液于90℃加热 18小时。将反应混合物倒入水中，水相用乙酸乙酯萃取。有机层用盐水洗 涤，经MgSO4干燥，蒸干。产物粗品经色谱法(CH2Cl2/MeOH，95∶5)纯化， 得到所需化合物(240mg)。MS(ES+)：m/e＝346.3(Mna+)

8-氟-异喹啉-3-甲酸甲酯

将2-乙酰氨基-3-(2-[1，3]二烷-2-基-3-氟-苯基)-丙烯酸甲酯(10.6g， 32.8mmol)和对甲苯吡啶磺酸盐(2.06g，8.2mmol)在丙酮/水(120ml/15ml)混 合物中加热回流20小时。蒸发除去溶剂，水相残余物用乙酸乙酯萃取。有 机层用盐水洗涤，经MgSO4干燥，蒸干。产物粗品在乙酸乙酯/乙醚中重 结晶，得到5.1g所需化合物。MS(ES+)：m/e＝206.2(MH+)

8-氟-异喹啉-3-甲酸

将氢氧化锂(525mg，21.93mmol)加入8-氟-异喹啉-3-甲酸甲酯(1.5g， 7.31mmol)在甲醇(63ml)和水(7ml)中的溶液中。溶液于室温搅拌18小时。 蒸发除去溶剂混合物，残余物重新溶于甲醇/水混合物。所得溶液用浓盐酸 溶液酸化至pH为1。除去甲醇，过滤收集结晶，干燥，得到1.05g所需化 合物。

8-氟-异喹啉-3-甲酸{(S)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基}-酰胺

将二环己基碳二亚胺(7.69g，30mmol)加入8-氟-异喹啉-3-甲酸(5.1g， 22.4mmol)、乙基-二异丙基胺(4.6ml，26.88mmol)和羟基苯并三唑(5.36g， 33.6mmol)的DMF(150ml)溶液中。混合物于室温搅拌2小时。加入(S)-(1- 氮杂-双环[2.2.2]辛-3-基)胺(4.46g，49.28mmol)和乙基-二异丙基胺(8.7ml， 49.28mmol)，溶液于室温另外搅拌18小时。蒸发除去溶剂，残余物溶于二 氯甲烷中，用饱和K2CO3溶液和盐水洗涤。有机层经MgSO4干燥，蒸发。 产物粗品经色谱法(CH2Cl2/MeOH/NH4OH，92.5/7.5/0.75)纯化，得到所需化 合物(2.35g)。产物在乙醇HCl中重结晶，得到2g盐酸盐。MS(ES+)：m/e ＝300(MH+)