抗微生物化合物及其使用方法
阅读：230发布：2021-03-27
专利汇可以提供抗微生物化合物及其使用方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且提供了用于 治疗 微 生物 感染的化合物、药物组合物和方法。该化合物当与一种或多种抗微生物剂共同给予时，可以增强一种或多种抗微生物剂的治疗效果。该化合物具有抗病毒特性。本 申请 提供了包含该化合物和药学上可接受的载体的药物组合物。该药物组合物可进一步包括至少一种抗生素，例如庆大霉素、阿米卡星、卡那霉素、新霉素、壮观霉素、新毒胺或其任何组合。该化合物和组合物可用于治疗或 预防 微生物感染。，下面是抗微生物化合物及其使用方法专利的具体信息内容。
1.一种用于治疗受试者的微生物感染的组合物，其特征在于，所述组合物包含药学上可接受的载体和有效量的式I表示的化合物，
式I
其中X和Y独立地为O、S或NR10；
其中Z为O、S、CR11R12或NR13；
其中R1、R2、R9、R10、R11、R12、R13、R14和R15独立地为不存在、氢、-C(O)R18、-C(W)NR19R20、或者取代或未取代的烷基、链烯基、炔基、烷氧基、环烷基、杂环基、环烯基、杂环烯基、芳基、杂芳基、芳氧基、芳烷基、杂烷基、烷芳基、卤素、烷基杂芳基、-NR16R17；其中R16和R17独立地为氢、取代或未取代的烷基、链烯基、炔基、环烷基、杂环基、环烯基、杂环烯基、芳基、杂芳基、芳烷基、杂烷基、烷芳基或烷基杂芳基；
其中R18为氢、羟基、或者取代或未取代的烷基、链烯基、炔基、环烷基、烷氧基、杂环基、环烯基、杂环烯基、芳基、芳氧基、杂芳基、芳烷基、杂烷基、烷芳基或烷基杂芳基；
其中W为O、S或NR21；
其中R19、R20和R21独立地为氢或者取代或未取代的烷基、链烯基、炔基、环烷基、杂环基、环烯基、杂环烯基、芳基、杂芳基、芳烷基、杂烷基、烷芳基或烷基杂芳基；
其中A为双键或单键；并且
其中当A为双键时R15不存在，
其中所述有效量的所述化合物可有效抑制微生物中的二氢叶酸还原酶。
2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述化合物为
式II，其中R1为-O-R4、-NR5R8或-CH2-R5；R2为卤素、不存在、-O-CH3或-O-CH2-CH3；R9为–COOH、-CH2-COOH、-CH2-O-CH3或-CH2-CH2-O-CH3；R4为-CH2-R5或-CO-R5；R5为；
R6为卤素或不存在；R7为卤素或不存在。
3.根据权利要求2所述的组合物，其特征在于，R1位于选自2、3、4、5和6的位置；任选地，R6位于4位；任选地，R7位于2或6位；并且任选地，R2位于3、4或5位。
4.根据权利要求2所述的组合物，其特征在于，所述化合物为
式IIA
其中R1为-O-R4、-NR5R8或-CH2-R5；R2为卤素、不存在、-O-CH3或-O-CH2-CH3；R3为-COOH或-CH2-COOH；R4为-CH2-R5或-CO-R5；R5为
；
R6为卤素或不存在；R7为卤素或不存在。
5.根据权利要求4所述的组合物，其特征在于，R1位于选自2、3、4、5和6的位置；任选地，R6位于4位；任选地，R7位于2或6位；并且任选地，R2位于3、4或5位。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的组合物，其特征在于，所述化合物选自化合物2-4、
6-7、10、13、15、17-20、22、24-25、27-31、34-37、42、44、48-50、52-53、56、60、62-63、69、80-
82和87。
7.根据权利要求1-6中任一项所述的组合物，其特征在于，所述组合物还包含治疗有效量的抗生素。
8.根据权利要求7所述的组合物，其特征在于，所述抗生素选自庆大霉素、阿米卡星、卡那霉素、新霉素、壮观霉素、新毒胺及其组合。
9.根据权利要求7或8中任一项所述的组合物，其特征在于，所述抗生素的所述治疗有效量小于当不存在所述组合物时给予受试者的所述抗生素的治疗有效剂量或治疗最佳剂量。
10.一种治疗受试者的微生物感染的方法，其特征在于，所述方法包括给予所述受试者根据权利要求1-9中任一项所述的组合物，其中所述微生物感染是由一种或多种微生物引起的，并且所述组合物可有效抑制引起所述感染的至少一种所述微生物中的二氢叶酸还原酶。
11.根据权利要求10所述的方法，其特征在于，引起所述感染的至少一种所述微生物是选自以下的细菌：对甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、单核细胞增生李斯特氏菌、洋葱伯克霍尔德菌、大肠杆菌、粪肠球菌、肺炎链球菌或其组合。
12.根据权利要求10或11所述的方法，其特征在于，所述组合物通过胃肠外给予或口服给予。
13.根据权利要求10-12中任一项所述的方法，其特征在于，引起所述感染的至少一种所述微生物是选自以下的抗生素抗性微生物：肺炎链球菌、弯曲杆菌、淋病奈瑟氏球菌、沙门氏菌（包括耐药性非伤寒沙门氏菌和耐药性沙门氏菌伤寒血清型）、志贺氏菌、耐万古霉素肠球菌(VRE)、耐万古霉素金黄色葡萄球菌(VRSA)、耐红霉素A群链球菌、耐克林霉素B群链球菌、耐碳青霉烯肠杆菌科(CRE)、耐药结核病菌、广谱肠杆菌科(ESBL)、多重耐药不动杆菌（包括MRAB）、艰难梭菌、肠致病性大肠杆菌(EPEC)、铜绿假单胞菌、幽门螺杆菌、咽峡炎链球菌和尿道病原性大肠杆菌(UPEC)。
14.根据权利要求13所述的方法，其特征在于，引起所述感染的所述微生物是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)。
15.根据权利要求10或11所述的方法，其特征在于，引起所述感染的所述微生物是单核细胞增生李斯特氏菌、铜绿假单胞菌、洋葱伯克霍尔德菌、粪肠球菌和肺炎链球菌的多重耐药菌株。
16.根据权利要求10-15中任一项所述的方法，其特征在于，所述感染选自脓疱疮、疡肿、脓肿、毛囊炎、蜂窝织炎、坏死性筋膜炎、脓性肌炎、手术/创伤性伤口感染和感染的溃疡和烧伤）、骨髓炎、器械相关的骨关节感染、脓疱疮、继发感染皮肤病变、脑膜炎、脑脓肿、硬膜下积脓、脊髓硬膜外脓肿。
17.根据权利要求10-16中任一项所述的方法，其特征在于，所述感染时尿道感染。
18.根据权利要求10-17中任一项所述的方法，其特征在于，所述受试者住院或免疫受损。
19.一种对需要消毒的表面进行消毒的方法，其特征在于，所述方法包括使所述表面与根据权利要求1-9中任一项所述的化合物或组合物接触。
20.根据权利要求19所述的方法，其特征在于，所述化合物以喷雾剂、气溶胶剂或泡沫剂的形式施用于所述表面上。
21.根据权利要求20所述的方法，其特征在于，将所述化合物吸收到适于擦拭待消毒的表面的布中。
22.根据权利要求19-21中任一项所述的方法，其特征在于，所述表面是选自以下的仪器的表面：手术器械、心导管和导尿管、植入物和用于无菌体腔的超声探头。
23.根据权利要求19-22中任一项所述的方法，其特征在于，所述仪器选自内窥镜、喉镜窥视片、食管测压探头、膀胱镜、肛门直肠测压导管、隔膜贴合环、胃镜、十二指肠镜、乙状结肠镜、直肠镜、结肠镜、支气管镜和喉镜。
24.一种提高抗生素的功效的方法，其特征在于，所述方法包括共同给予所述抗生素和根据权利要求1-9中任一项所述的化合物或组合物，所述化合物或组合物是以能有效提高所述抗生素的功效的量给予。
25.根据权利要求25所述的方法，其特征在于，所述化合物或组合物与所述抗生素分开给予、同时给予或依次给予。
26.根据权利要求26所述的方法，其特征在于，在体外测定中测量所述抗生素单独引起的微生物生长抑制与所述抗生素和所述化合物或组合物的组合引起的微生物生长抑制并进行比较得出，所述抗生素的功效提高至少2倍。
27.一种降低选自耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、单核细胞增生李斯特氏菌、洋葱伯克霍尔德菌、大肠杆菌、粪肠球菌、肺炎链球菌或其组合的细菌在受试者中的毒力的方法，其特征在于，所述方法包括给予所述受试者有效量的根据权利要求1-9中任一项所述的化合物或组合物。
28.根据权利要求27所述的方法，其特征在于，所述化合物选自化合物3、48、49和87。
抗微生物化合物及其使用方法
技术领域
背景技术
[0002] 自人类存在以来，传染病一直是死亡的主要原因，而细菌感染在这一医学挑战中起着主要角色。近几十年来，医院感染和抗生素抗性细菌相关感染已成为医学领域的主要挑战。人们的注意力集中在ESKAPE病原体(ESKAP为屎肠球菌(Enterococcus faecium)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae)、鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)和肠杆菌属物种(Enterobacter spp.)的拉丁名的首字母缩略字)，它们在感染毒力方面的良好适应性或者在抵抗治疗方面的多重抗药性使得治疗选择非常有限(Khan等,Front Microbiol.,7:174(2016))。抗性机制的快速发展使得新药在使用后的短时间内就变得不那么有效。由于低利润率导致的药物抗生素供应减少只不过使这种情况变得更糟(Butler等,The Journal of antibiotics,66(10):571-591(2013))。可以预见，在不远的未来，将出现更多抗性细菌，并且针对细菌的强效抗微生物剂的缺乏将成为主要威胁(Tommasi等,Nat Rev Drug Discov.,14(8):529-42(2015))。因此需要新的针对细菌的抗微生物剂/治疗方法。
[0003] 抗生素抗性是细菌感染的主要问题。人们已经致力于开发用于细菌生长抑制的新化合物。但是，过去几十年来没有取得重大成就。抗生素抗性细菌的当前治疗选择仍然依赖于几种二线或三线抗生素的组合效应。仍然需要更好的治疗选择。
[0004] 因此，本发明的一个目的是提供具有抗微生物活性的化合物。
[0005] 本发明的另一个目的是提供增强现有抗生素的抗微生物作用的化合物。
[0006] 本发明的另一个目的是提供用于治疗细菌感染的组合物。
[0007] 本发明的又一个目的是提供治疗患有微生物感染的受试者的方法。
[0008] 本发明的再一个目的是提供具有抗菌活性的化合物，其可用于对抗抗药性细菌感染。
发明内容
[0009] 本发明公开了用于例如治疗微生物感染、消毒表面、增加抗生素功效和降低细菌毒力的化合物、组合物和方法。一些形式提供了具有抗微生物特性的化合物，包括化合物2-4、6-7、10、13、15、17-20、22、24-25、27-31、34-37、42、44、48-50、52-53、56、60、62-63、69、
80-82和87，如下文进一步公开。在一些形式中，本发明的化合物当与一种或多种抗微生物剂共同施用时，能增强该一种或多种抗微生物剂的治疗效果。在其他形式中，本发明的化合物具有抗毒力性质，该抗毒力性质以hla启动子lux报告基因测定中的阻遏和以色素的生成的抑制来测量。
80-82和87，如下文进一步公开。在一些形式中，本发明的化合物当与一种或多种抗微生物剂共同施用时，能增强该一种或多种抗微生物剂的治疗效果。在其他形式中，本发明的化合物具有抗毒力性质，该抗毒力性质以hla启动子lux报告基因测定中的阻遏和以色素的生成的抑制来测量。
[0010] 本发明提供了在药学上可接受的载体中包含本文公开的化合物的的药物组合物。优选的化合物包括化合物2-4、6-7、10、13、15、17-20、22、24-25、27-31、34-37、42、44、48-
50、52-53、56。在这种形式中，药物组合物可进一步包含至少一种抗生素，例如庆大霉素、阿米卡星、卡那霉素、新霉素、壮观霉素、新毒胺或其任何组合。
50、52-53、56。在这种形式中，药物组合物可进一步包含至少一种抗生素，例如庆大霉素、阿米卡星、卡那霉素、新霉素、壮观霉素、新毒胺或其任何组合。
[0011] 可以将本发明化合物配制成清洁制剂。清洁制剂对于家庭清洁应用(例如，硬质表面如地板、台面、浴盆、餐具，以及较软的布料如衣服、海绵、纸巾等)、个人护理应用(例如洗剂、沐浴露、肥皂、洗发水、擦拭巾)以及工业和医院应用(例如，器械、医疗器械、手套的消毒)是十分有效的。
[0012] 本发明还公开了治疗或预防由微生物(例如金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes)、洋葱伯克霍尔德菌(Burkholderia cepacia)、大肠杆菌(Escherichia coli)、粪肠球菌(Enterococcus faecalis)、肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae))引起的微生物感染或者对污染了微生物的表面进行消毒的方法。该方法包括向有需要的受试者给予有效量的式2-4、6-7、10、13、15、17-20、22、24-25、27-31、34-37、42、44、48-50、52-53、56、60、62-63、69、80-82和87中任一式所示的化合物中的一种或多种化合物。在一些形式中，该方法还包括给予有效量的至少一种抗生素，例如庆大霉素、阿米卡星、卡那霉素、新霉素、壮观霉素、新毒胺或其任何组合。
[0013] 抗生素可以分开给予、同时给予或依次给予。在优选的形式中，分开给予、同时给予或依次给予的一种或多种抗微生物剂(包括一种或多种抗生素)的量，可小于该一种或多种抗微生物剂(包括一种或多种抗生素)当给予未接受所公开的化合物的患者或动物时的治疗有效剂量或治疗最佳剂量。
[0014] 公开了由式I表示的化合物其中X和Y独立地为O、S或NR10；其中Z为O，S，CR11R12或NR13；其中R1、R2、R9、R10、R11、R12、R13、R14和R15独立地为不存在、氢、-C(O)R18、-C(W)NR19R20或者取代或未取代的烷基、链烯基、炔基、烷氧基、环烷基、杂环基、环烯基、杂环烯基、芳基、杂芳基、芳氧基、芳烷基、杂烷基、烷芳基、卤素、烷基杂芳基、-NR16R17；其中R16和R17独立地为氢、取代或未取代的烷基、链烯基、炔基、环烷基、杂环基、环烯基、杂环烯基、芳基、杂芳基、芳烷基、杂烷基、烷芳基或烷基杂芳基；
其中R18为氢、羟基或者取代或未取代的烷基、链烯基、炔基、环烷基、烷氧基、杂环基、环烯基、杂环烯基、芳基、芳氧基、杂芳基、芳烷基、杂烷基、烷芳基或烷基杂芳基；其中W为O、S或NR21；
其中R19、R20和R21独立地为氢或者取代或未取代的烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、环烯基、杂环烯基、芳基、杂芳基、芳烷基、杂烷基、烷芳基或烷基杂芳基；
其中A为双键或单键；并且当A为双键时，R15不存在。
其中R18为氢、羟基或者取代或未取代的烷基、链烯基、炔基、环烷基、烷氧基、杂环基、环烯基、杂环烯基、芳基、芳氧基、杂芳基、芳烷基、杂烷基、烷芳基或烷基杂芳基；其中W为O、S或NR21；
其中R19、R20和R21独立地为氢或者取代或未取代的烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、环烯基、杂环烯基、芳基、杂芳基、芳烷基、杂烷基、烷芳基或烷基杂芳基；
其中A为双键或单键；并且当A为双键时，R15不存在。
[0015] 在一些形式中，该化合物可以为其中R1为-O-R4、-NR5R8或-CH2-R5；R2为卤素、不存在、-O-CH3或-O-CH2-CH3；R9为–COOH、-CH2-COOH、-CH2-O-CH3或-CH2-CH2-O-CH3；R4为-CH2-R5或-CO-R5；R5为
R6为卤素或不存在；R7为卤素或不存在。
R6为卤素或不存在；R7为卤素或不存在。
[0016] 在该化合物的一些形式中，R1位于选自2、3、4、5和6的位置。在一些形式中，R6位于4位。在一些形式中，R7位于2或6位。在一些形式中，R2位于3、4或5位。在一些形式中，R6位于
4位，R7位于2或6位，R2位于3或5位。
4位，R7位于2或6位，R2位于3或5位。
[0017] 在一些形式中，该化合物为其中R1为-O-R4、-NR5R8或-CH2-R5；R2为卤素、不存在、-O-CH3或-O-CH2-CH3；R3为-COOH或-CH2-COOH；R4为-CH2-R5或-CO-R5；R5为
R6为卤素或不存在；R7为卤素或不存在。
R6为卤素或不存在；R7为卤素或不存在。
[0018] 在一些形式中，R1位于选自2、3、4、5和6的位置。在一些形式中，R6位于4位。在一些形式中，R7位于2或6位。在一些形式中，R2位于3、4或5位。在一些形式中，R6位于4位，R7位于2或6位，R2位于3或5位。
[0019] 在一些形式中，该化合物选自化合物2-4、6-7、10、13、15、17-20、22、24-25、27-31、34-37、42、44、48-50、52-53、56、60、62-63、69、80-82和87。
[0020] 还公开了包含有效量的一种或多种所公开化合物和药学上可接受的载体的组合物。此类组合物可用于例如治疗受试者的微生物感染。在一些形式中，有效量的该化合物可有效抑制微生物中的二氢叶酸还原酶。
[0021] 在一些形式中，该组合物还包含治疗有效量的抗生素。在一些形式中，抗生素选自庆大霉素、阿米卡星、卡那霉素、新霉素、壮观霉素、新毒胺及其组合。在一些形式中，抗生素的治疗有效量小于当不存在该组合物时给予受试者的抗生素的治疗有效剂量或治疗最佳剂量。
[0022] 还公开了一种治疗受试者的微生物感染的方法，该方法包括给予受试者一种或多种该组合物。在一些形式中，微生物感染是由一种或多种微生物引起的，并且该组合物可有效抑制引起感染的至少一种微生物中的二氢叶酸还原酶。
[0023] 在一些形式中，引起感染的至少一种微生物是选自以下的细菌：对甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(Staphyloccous aureus)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes)、洋葱伯克霍尔德菌(Burkholderia cepacia)、大肠杆菌(Escherichia coli)、粪肠球菌(Enterococcus faecalis)、肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)或其组合。
[0024] 在一些形式中，引起感染的至少一种微生物是耐抗生素微生物，其选自肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)、弯曲杆菌(Campylobacter)、淋病奈瑟氏球菌(Neisseria gonorrhoeae)、沙门氏菌(Salmonella)、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)、志贺氏菌(Shigella)、耐万古霉素肠球菌(VRE)、耐万古霉素金黄色葡萄球菌(VRSA)、耐红霉素耐药A群链球菌、耐克林霉素B群链球菌、耐碳青霉烯类肠杆菌科(CRE)、耐药结核病菌、广谱肠杆菌科(ESBL)、多重抗药性不动杆菌(包括MRAB)、艰难梭菌(Clostridium difficile)、肠致病性大肠杆菌(EPEC)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、幽门螺旋杆菌(H.pylori)、咽峡炎链球菌(Streptococcus anginosus)和泌尿系致病性大肠杆菌(UPEC)。
[0025] 在一些形式中，引起感染的至少一种微生物是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)。
[0026] 在一些形式中，引起感染的微生物是单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、洋葱伯克霍尔德菌
(Burkholderia cepacia)、粪肠球菌(Enterococcus faecalis)和肺炎链球菌
(Streptococcus pneumoniae)的多重耐药菌株。
(Burkholderia cepacia)、粪肠球菌(Enterococcus faecalis)和肺炎链球菌
(Streptococcus pneumoniae)的多重耐药菌株。
[0027] 在一些形式中，感染选自脓疱疮、疡肿、脓肿、毛囊炎、蜂窝织炎、坏死性筋膜炎、脓性肌炎、手术/创伤性伤口感染和感染的溃疡和烧伤)、骨髓炎、器械相关的骨关节感染、脓疱疮、继发感染皮肤病变、脑膜炎、脑脓肿、硬膜下积脓、脊髓硬膜外脓肿。
[0028] 在一些形式中，感染是尿道感染。在一些形式中，该组合物通过胃肠外给予或口服给予。在某些形式中，受试者住院或免疫受损。
[0029] 还公开了一种对需要消毒的表面进行消毒的方法，该方法包括使该表面与一种或多种所公开的化合物接触或与一种或多种所公开的组合物接触。
[0030] 在一些形式中，该化合物以喷雾剂、气溶胶剂或泡沫剂的形式施用于该表面上。在一些形式中，将该化合物吸收到适于擦拭待消毒的表面的布中。在一些形式中，该表面是选自以下的仪器的表面：手术器械、心导管和导尿管、植入物和用于无菌体腔的超声探头。
[0032] 还公开了一种提高抗生素的功效的方法，该方法包括共同给予该抗生素和一种或多种所公开的化合物或一种或多种所公开的组合物，该一种或多种所公开的化合物或一种或多种所公开的组合物是以能有效提高该抗生素的功效的量给予。
[0033] 在一些形式中，该化合物或组合物与该抗生素分开给予、同时给予或依次给予。在一些形式中，在体外测定中测量该抗生素单独引起的微生物生长抑制与该抗生素和该化合物或组合物的组合引起的微生物生长抑制并进行比较得出，该抗生素的功效提高至少2倍。
[0034] 还公开了一种降低选自耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Staphyloccous aureus)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes)、洋葱伯克霍尔德菌(Burkholderia cepacia)、大肠杆菌(Escherichia coli)、粪肠球菌(Enterococcus faecalis)、肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)或其组合的细菌在受试者中的毒力的方法，该方法包括给予该受试者有效量的一种或多种所公开的化合物或者一种或多种所公开的组合物。
[0036] 图1显示了微量稀释方格分析(microdilution checkerboard analysis)，其中显示了化合物13与庆大霉素的组合效果。该分析表明，化合物13在抑制金黄色葡萄球菌(S.aureus)Mu3菌株生长方面与庆大霉素具有增强效应。热图(Heat Plot)显示了得自重复实验的平均增长。
[0037] 图2显示了微量稀释方格分析，其中显示了化合物13与阿米卡星的组合效果。该分析表明，化合物13在抑制金黄色葡萄球菌Mu3菌株生长方面与阿米卡星具有增强效应。热图显示了得自重复实验的平均增长。
[0038] 图3显示了微量稀释方格分析，其中显示了化合物13与卡那霉素的组合效果。该分析表明，化合物13在抑制金黄色葡萄球菌Mu3菌株生长方面与卡那霉素具有增强效应。热图显示了得自重复实验的平均增长。
[0039] 图4显示了微量稀释方格分析，其中显示了化合物13与新霉素的组合效果。该分析表明，化合物13在抑制金黄色葡萄球菌Mu3菌株生长方面与新霉素具有增强效应。热图显示了得自重复实验的平均增长。
[0040] 图5显示了微量稀释方格分析，其中显示了化合物13与壮观霉素的组合效果。该分析表明，化合物13在抑制金黄色葡萄球菌Mu3菌株生长方面与壮观霉素具有增强效应。热图显示了得自重复实验的平均增长。
[0041] 图6显示了微量稀释方格分析，其中显示了化合物13与新毒胺的组合效果。该分析表明，化合物13在抑制金黄色葡萄球菌Mu3菌株生长方面与新毒胺具有增强效应。热图显示了得自重复实验的平均增长。
[0042] 图7显示了微量稀释方格分析，其中显示了化合物13与庆大霉素的组合效果。该分析表明，化合物13在抑制金黄色葡萄球菌ATCC 29213菌株生长方面与庆大霉素具有增强效应。热图显示了得自重复实验的平均增长。
[0043] 图8显示了微量稀释方格分析，其中显示了化合物13与庆大霉素的组合效果。热地图图(heat map plot)显示了化合物13与庆大霉素对Newman菌株的方格测定的归一化生长。该分析表明，化合物13在抑制金黄色葡萄球菌Newman菌株生长方面与庆大霉素具有增强效应。热图显示了得自重复实验的平均增长。
[0044] 图9显示了微量稀释方格分析，其中显示了化合物13与庆大霉素的组合效果。热地图图显示了化合物13与庆大霉素对RN4220菌株的方格测定的归一化生长。该分析表明，化合物13在抑制金黄色葡萄球菌RN4220菌株生长方面与庆大霉素具有增强效应。热图显示了得自重复实验的平均增长。
[0045] 图10显示了微量稀释方格分析，其中显示了化合物13与庆大霉素的组合效果。热地图图显示了化合物13与庆大霉素对USA300菌株的方格测定的归一化生长。该分析表明，化合物13在抑制金黄色葡萄球菌USA300菌株生长方面与庆大霉素具有增强效应。热图显示了得自重复实验的平均增长。
[0046] 图11显示了微量稀释方格分析，其中显示了化合物13与庆大霉素的组合效果。热地图图显示了化合物13与庆大霉素对COL菌株的方格测定的归一化生长。该分析表明，化合物13在抑制金黄色葡萄球菌COL菌株生长方面与庆大霉素具有增强效应。热图显示了得自重复实验的平均增长。
[0047] 图12显示了微量稀释方格分析，其中显示了化合物13与庆大霉素的组合效果。热地图图显示了化合物13与庆大霉素对RN6390菌株的方格测定的归一化生长。该分析表明，化合物13在抑制金黄色葡萄球菌RN6390菌株生长方面与庆大霉素具有增强效应。热图显示了得自重复实验的平均增长。
[0048] 图13显示了微量稀释方格分析，其中显示了化合物13与庆大霉素的组合效果。该分析表明，化合物13在抑制金黄色葡萄球菌ST45-502菌株生长方面与庆大霉素具有增强效应。热图显示了得自重复实验的平均增长。
[0049] 图14显示了微量稀释方格分析，其中显示了化合物13与庆大霉素的组合效果。该分析表明，化合物13在抑制金黄色葡萄球菌AE-052菌株生长方面与庆大霉素具有增强效应。热图显示了得自重复实验的平均增长。
[0050] 图15显示了微量稀释方格分析，其中显示了化合物13与庆大霉素的组合效果。该分析表明，化合物13在抑制金黄色葡萄球菌ST239-III-AH-504菌株生长方面与庆大霉素具有增强效应。热图显示了得自重复实验的平均增长。
[0051] 图16显示了微量稀释方格分析，其中显示了化合物13与庆大霉素的组合效果。该分析表明，化合物13在抑制金黄色葡萄球菌ST239-IIIA-503菌株生长方面与庆大霉素具有增强效应。热图显示了得自重复实验的平均增长。
[0052] 图17显示了50μM的化合物13类似物与各种浓度的庆大霉素的组合对金黄色葡萄球菌Mu3的二次筛选。该分析表明，一些结构类似物对金黄色葡萄球菌Mu3具有组合抑制效应。热图显示了得自重复实验的平均增长。
[0053] 图18显示了20μM的化合物13类似物与各种浓度的庆大霉素的组合对金黄色葡萄球菌Mu3的二次筛选。该分析表明，一些结构类似物对金黄色葡萄球菌Mu3具有组合抑制效应。热图显示了得自重复实验的平均增长。
[0054] 图19显示了5μM的化合物13类似物与各种浓度的庆大霉素的组合对金黄色葡萄球菌Mu3的二次筛选。该分析表明，一些结构类似物对金黄色葡萄球菌Mu3具有组合抑制效应。热图显示了得自重复实验的平均增长。
[0055] 图20显示了微量稀释方格分析，其中显示了化合物13与庆大霉素的组合效果。该分析表明，化合物13在抑制金黄色葡萄球菌Mu3菌株生长方面与庆大霉素具有增强效应。热图显示了得自重复实验的平均增长。
[0056] 图21显示了微量稀释方格分析，其中显示了化合物17与庆大霉素的组合效果。该分析表明，化合物17在抑制金黄色葡萄球菌Mu3菌株生长方面与庆大霉素具有增强效应。热图显示了得自重复实验的平均增长。
[0057] 图22显示了微量稀释方格分析，其中显示了化合物19与庆大霉素的组合效果。该分析表明，化合物19在抑制金黄色葡萄球菌Mu3菌株生长方面与庆大霉素具有增强效应。热图显示了得自重复实验的平均增长。
[0058] 图23显示了微量稀释方格分析，其中显示了化合物20与庆大霉素的组合效果。该分析表明，化合物20在抑制金黄色葡萄球菌Mu3菌株生长方面与庆大霉素具有增强效应。热图显示了得自重复实验的平均增长。
[0059] 图24显示了微量稀释方格分析，其中显示了化合物36与庆大霉素的组合效果。该分析表明，化合物36在抑制金黄色葡萄球菌Mu3菌株生长方面与庆大霉素具有增强效应。热图显示了得自重复实验的平均增长。
[0060] 图25显示了微量稀释方格分析，其中显示了化合物82与庆大霉素的组合效果。该分析表明，化合物82在抑制金黄色葡萄球菌Mu3菌株生长方面与庆大霉素具有增强效应。热图显示了得自重复实验的平均增长。
[0061] 图26化合物3的处理减少了Mu3感染后BALB/c小鼠的肾脏细菌负荷。该分析表明，化合物3本身可以减少细菌感染。
[0062] 图27化合物3的处理减少了Mu3感染后BALB/c小鼠的脾脏细菌负荷。该分析表明，化合物3本身可以减少细菌感染。
[0063] 图28化合物3的处理减少了Mu3感染后BALB/c小鼠的肝脏细菌负荷。该分析表明，化合物3本身可以减少细菌感染。
[0064] 图29化合物3的处理减少了USA300感染后BALB/c小鼠的脾脏细菌负荷。该分析表明，化合物3本身可以减少细菌感染。
[0065] 图30化合物3的处理减少了USA300感染后BALB/c小鼠的肝脏细菌负荷。该分析表明，化合物3本身可以减少细菌感染。
[0066] 图31热地图图显示了化合物82与庆大霉素对单核细胞增生李斯特菌(L.monocytogenes)的方格测定的归一化生长。该分析表明，化合物82在抑制单核细胞增生李斯特菌菌株生长方面与庆大霉素具有增强效应。热图显示了得自重复实验的平均增长。
[0067] 图32热地图图显示了化合物82与庆大霉素对粪肠球菌(E.faecalis)的方格测定的归一化生长。该分析表明，化合物82在抑制粪肠球菌菌株生长方面与庆大霉素具有增强效应。热图显示了得自重复实验的平均增长。
[0068] 图33热地图图显示了化合物82与庆大霉素对大肠杆菌(E.coli)的方格测定的归一化生长。该分析表明，化合物82在抑制大肠杆菌菌株生长方面与庆大霉素具有增强效应。热图显示了得自重复实验的平均增长。
[0069] 图34热地图图显示了化合物82与庆大霉素对肺炎链球菌(S.pneumoniae)的方格测定的归一化生长。该分析表明，化合物82在抑制肺炎链球菌菌株生长方面与庆大霉素具有增强效应。热图显示了得自重复实验的平均增长。
[0070] 图35显示了微量稀释方格分析，其中显示了化合物82与新毒胺的组合效果。该分析表明，化合物82在抑制金黄色葡萄球菌Mu3菌株生长方面与新毒胺具有增强效应。热图显示了得自重复实验的平均增长。
具体实施方式
[0072] 术语“约”的使用旨在描述这样的数值，其在大约+/-10％的范围内高于或低于规定值；在其他形式中，该数值在大约+/-5％的范围内高于或低于规定值；在其他形式中，该数值在大约+/-2％的范围内高于或低于规定值；在其他形式中，该数值在大约+/-1％的范围内高于或低于规定值。前述范围旨在通过上下文来确定，并且不暗示进一步的限制。除非本文另有说明或上下文明显矛盾，否则本文描述的所有方法均可以任何合适的顺序进行。除非另外声明，否则本文提供的任何和所有实例或示例性语言(例如，“诸如”)的使用仅旨在更好地说明本发明，而不是对本发明的范围进行限制。说明书中的任何语言都不应被解释为表明任何未要求保护的要素对于本发明的实施是必不可少的。
[0073] 本文所用的“气溶胶”是指任何颗粒细雾制品，其可以是溶液或悬浮液，无论是否使用推进剂生产。
[0075] 本文所用“两亲性”是指同时具有亲水性和亲脂性(疏水性)性质的分子。
[0076] 术语“载体”是指用以给予化合物和/或抗生素的稀释剂、佐剂、赋形剂和/或介质。
[0077] 本文所用的“清洁制剂”是指这样的组合物，其适合施用于表面，用以除去污垢、油等，用以消毒，或者这两种用途的组合。清洁组合物可以是抗菌的、抗微生物的、或两者兼备。清洁组合物可适用于人体皮肤，这意味着该组合物的所有组分以当施用于人体皮肤时不引起显著刺激迹象的浓度存在。本文所用的“显著的刺激迹象”包括在施用部位、注射部位的红斑、发红和/或肿胀，在施用部位的坏死，在施用部位的剥脱性皮炎，以及妨碍日常活动和/或需要医疗关注或住院治疗的严重疼痛。
[0078] “连续相”是指其中悬浮着固体或分散着另一种液体液滴的液体，有时称为外相。这也指胶体的其中分布着固体或流体颗粒的流体相。如果连续相是水(或另一种亲水性溶剂)，则水溶性或亲水性药物将溶解在连续相中(而不是分散)。在多相制剂(例如乳液)中，离散相悬浮或分散在连续相中。
[0079] “乳膏剂”是“水包油”或“油包水”型的粘性液体或半固体乳液。
[0080] “乳剂”是含有均匀掺合在一起的不可混溶组分的混合物的组合物。
[0081] 本文所用“凝胶剂”是胶体，其中分散相与连续相结合以产生半固体材料，例如胶冻。
[0082] 本文所用“亲水性”是指具有易与水相互作用的强极性基团的物质。
[0083] 本文所用的“疏水性”是指对水缺乏亲和力的物质；倾向于排斥水而不吸水，不溶于水或与水混合。
[0084] 本文所用“亲脂性”是指对脂质具有亲和力的化合物。
[0085] “洗剂”是低至中等粘度的液体制剂。
[0088] 本文所用的“肠胃外给予(给药)”是指通过除消化道或非侵入性局部或区域途径之外的任何方法给药。
[0089] 本文针对药物组合物所用的术语“药学上可接受的”意指由联邦或州政府的管理机构批准或在美国药典或其他公认的药典中列出用于动物和/或人类。
[0090] 本文所用的“药学上可接受的盐”是指本文定义的化合物的衍生物，其中母体化合物通过制备其酸盐或碱盐来修饰。
[0091] 本文所用的“治疗”(动词或名词)是指阻止或抑制或者试图阻止或抑制感染的发展或进展，和/或引起或试图引起感染和/或其症状的减少、抑制、消退或缓解。本领域技术人员会理解，可以使用各种临床和科学方法和测定法来评估感染的发展或进展，并且类似地，可以使用各种临床和科学方法和测定法来评估感染和/或其症状的减少、消退或缓解。“治疗”是指医疗性治疗和预防性或防止性措施。需要治疗的人包括那些已经感染的人以及容易感染的人或者要预防感染的人。在至少一些形式中，所治疗的感染是金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes)、洋葱伯克霍尔德菌(Burkholderia cepacia)、大肠杆菌(Escherichia coli)、粪肠球菌(Enterococcus faecalis)、肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)感染。在其他形式中，所治疗的感染是微生物感染。
[0092] 本文所用的术语“受试者”是指动物。通常，术语“受试者”和“患者”在本文中可以与受试者互换使用。因此，“受试者”包括作为患者进行微生物感染的治疗的人。
[0093] 术语“动物”包括但不限于小鼠、大鼠、狗、猫、兔、猪、猴、黑猩猩和人。
[0094] 当应用于本文所述的化合物、抗生素和药物组合物时，术语“有效量”和“治疗有效量”可互换使用，是指产生所需治疗结果所必要的量。例如，有效量是这样的含量水平，其能有效治疗、治愈或减轻正被给予组合物和/或抗生素或药物组合物的感染的症状。对所寻求的特定治疗目标有效的量将取决于多种因素，包括所治疗的感染及其严重性和/或发展/进展的阶段；所用特定化合物和/或抗生素或药物组合物的生物利用度和活性；给予的途径或方法和在受试者身上的引入部位；特定组合物的清除率和其他药代动力学特性；治疗时间；接种方案；与特定组合物组合使用或同时使用的药物；被治疗者的年龄、体重、性别、饮食、生理和一般健康状况；以及相关科学领域的技术人员所熟知的相似因素。取决于所治疗的受试者的状况，必然出现剂量的一些变化，无论如何，医生或其他个体施用治疗将确定个体患者的合适剂量。
[0095] 组合物高通量筛选为发现新的小分子作为抗菌剂提供了良好的机会。
[0096] 通过顺序筛选过程，确定了先导化合物的化合物库，用于未来进行抗生素增效剂的化学优化。如下所示，化合物13与通常用于临床的氨基糖苷类、庆大霉素、卡那霉素、阿米卡星、新霉素、壮观霉素和新毒胺组合显示出增强效应。此外，这些化合物(浓度约为50μM)显示出能将抗生素的MIC降低到相应的临床转效点以下，从而使得无效的抗生素可再次用于MRSA治疗。
[0097] 在一些形式中，当该化合物与一种或多种抗微生物剂共同给予时，该化合物将使一种或多种抗微生物剂的治疗效果增强至少2倍。如实施例中所述，可通过测量在与抗生素一起给予的所公开化合物的存在下细菌生长的抑制，来体外测定增强作用。在一些形式中，该化合物有效抑制细菌生长的程度比单独使用庆大霉素(庆大霉素+DMSO对照)获得的抑制程度高至少30％、优选至少40％、更优选至少60％。在其他形式中，与庆大霉素+DMSO对照相比，该化合物具有抗毒力性质，该抗毒力性质以hla启动子lux报告基因测定中的阻遏来测量。在该化合物存在下，在一些产生色素的细菌中也观察到色素的生成的抑制。
[0098] 本领域普通技术人员能够使用从细胞培养测定和动物研究中获得的数据，来设计用于人类的剂量范围。这些化合物的剂量优选地落在包含ED50的循环浓度范围内，毒性很小或没有毒性。取决于所用的剂型和给药途径，剂量可在该范围内变化。对于在所公开的方法中使用的任何化合物，最初可以从细胞培养测定来估计治疗有效剂量。可以在动物模型中设计剂量以达到循环血浆浓度范围，该循环血浆浓度范围包含细胞培养中所测定的IC50(实现症状的半数最大抑制的测试化合物浓度)。这些信息可用于更准确地确定人体中的有用剂量。例如，可以通过高效液相色谱(HPLC)测量血浆中的水平。通常，对于典型的受试者，调节剂的剂量当量为约1ng/kg至10mg/kg。
[0099] 因此，公开了具有抗微生物活性的化合物，其可以在组合物中以有效量使用，以预防、治疗或改善由微生物感染引起的症状。在一些形式中，该化合物能增强抗生素的抗微生物作用。在另一种形式中，该化合物具有抗毒力性质。
[0100] 本文公开的化合物可以与治疗期间的其他生物活性剂组合使用，例如抗生素。这种组合治疗可以进一步增强用所公开的化合物进行治疗的治疗效果。所公开的化合物可以与抗生素一起提供累加效应、协同效应或抗生素增强效应。
[0101] 化合物所公开的化合物由以下通式I表示：其中X和Y独立地为O、S或NR10；
其中Z为O、S、CR11R12或NR13；
其中R1、R2、R9、R10、R11、R12、R13、R14和R15独立地为不存在、氢、-C(O)R18、-C(W)NR19R20、或者取代或未取代的烷基、链烯基、炔基、烷氧基、环烷基、杂环基、环烯基、杂环烯基、芳基、杂芳基、芳氧基、芳烷基、杂烷基、烷芳基、卤素、烷基杂芳基、-NR16R17；其中R16和R17独立地为氢、取代或未取代的烷基、链烯基、炔基、环烷基、杂环基、环烯基、杂环烯基、芳基、杂芳基、芳烷基、杂烷基、烷芳基或烷基杂芳基；
其中R18为氢、羟基、或者取代或未取代的烷基、链烯基、炔基、环烷基、烷氧基、杂环基、环烯基、杂环烯基、芳基、芳氧基、杂芳基、芳烷基、杂烷基、烷芳基或烷基杂芳基；其中W为O、S或NR21；
其中R19、R20和R21独立地为氢或者取代或未取代的烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、环烯基、杂环烯基、芳基、杂芳基、芳烷基、杂烷基、烷芳基或烷基杂芳基；
其中A是双键或单键；并且当A为双键时，R15不存在。
其中Z为O、S、CR11R12或NR13；
其中R1、R2、R9、R10、R11、R12、R13、R14和R15独立地为不存在、氢、-C(O)R18、-C(W)NR19R20、或者取代或未取代的烷基、链烯基、炔基、烷氧基、环烷基、杂环基、环烯基、杂环烯基、芳基、杂芳基、芳氧基、芳烷基、杂烷基、烷芳基、卤素、烷基杂芳基、-NR16R17；其中R16和R17独立地为氢、取代或未取代的烷基、链烯基、炔基、环烷基、杂环基、环烯基、杂环烯基、芳基、杂芳基、芳烷基、杂烷基、烷芳基或烷基杂芳基；
其中R18为氢、羟基、或者取代或未取代的烷基、链烯基、炔基、环烷基、烷氧基、杂环基、环烯基、杂环烯基、芳基、芳氧基、杂芳基、芳烷基、杂烷基、烷芳基或烷基杂芳基；其中W为O、S或NR21；
其中R19、R20和R21独立地为氢或者取代或未取代的烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、环烯基、杂环烯基、芳基、杂芳基、芳烷基、杂烷基、烷芳基或烷基杂芳基；
其中A是双键或单键；并且当A为双键时，R15不存在。
[0102] 在一些形式中，该化合物可以为其中R1为-O-R4、-NR5R8或-CH2-R5；R2为卤素、不存在、-O-CH3或-O-CH2-CH3；R9为–COOH、-CH2-COOH、-CH2-O-CH3或-CH2-CH2-O-CH3；R4为-CH2-R5或-CO-R5；R5为
R6为卤素或不存在；R7为卤素或不存在。
R6为卤素或不存在；R7为卤素或不存在。
[0103] 在该化合物的一些形式中，R1位于选自2、3、4、5和6的位置。在一些形式中，R6位于4位。在一些形式中，R7位于2或6位。在一些形式中，R2位于3、4或5位。在一些形式中，R6位于
4位，R7位于2或6位，R2位于3或5位。
4位，R7位于2或6位，R2位于3或5位。
[0104] 在一些形式中，该化合物为式IIA，其中R1为-O-R4、-NR5R8或-CH2-R5；R2为卤素、不存在、-O-CH3或-O-CH2-CH3；R3为-COOH或-CH2-COOH；R4为-CH2-R5或-CO-R5；R5为
R6为卤素或不存在；R7为卤素或不存在。
R6为卤素或不存在；R7为卤素或不存在。
[0105] 在一些形式中，R1位于选自2、3、4、5和6的位置。在一些形式中，R6位于4位。在一些形式中，R7位于2或6位。在一些形式中，R2位于3、4或5位。在一些形式中，R6位于4位，R7位于2或6位，R2位于3或5位。
[0106] 在一些形式中，R1为-O-R4并且位于3位；R2不存在；R3为–COOH；R4为-CH2-R5；R5为R6为-Cl并且位于4位；R7为-Cl并且位于2位。
[0107] 在一些形式中，R1为-O-R4并且位于3位；R2不存在；R3为–COOH；R4为-CH2-R5；R5为R6为-Cl；R7为不存在。
[0108] 在一些形式中，R1为-O-R4并且位于4位；R2不存在；R3为–COOH；R4为-CH2-R5；R5为R6为-Cl；R7为不存在。在一些形式中，R1为-O-R4并且位于4位；R2为-O-CH2-CH3；R3为–COOH；R4为–CH2-R5；R5为
R6为-Cl；R7为不存在。
R6为-Cl；R7为不存在。
[0109] 这些基团和其他基团列于表8中。
[0110] 表8.式IIA的取代基的例子(注：表中ring position指环位置，benzyl指苄基)考虑了以上公开的R1-R7的所有组合。
[0111] 在一些形式中，X和Y独立地为O、S或NR10；Z为O、S、CR11R12或NR13；R1、R2、R9、R10、R11、R12、R13、R14和R15独立地为不存在、氢、取代或未取代的烷基、烯基、炔基、烷氧基、环烷基、杂环基、环烯基、杂环烯基、芳基、杂芳基、芳氧基、芳基烷基、杂烷基、烷基芳基、卤素、烷基杂芳基、-NR16R17；其中R16和R17独立地为氢、取代或未取代的烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、环烯基、杂环烯基、芳基、杂芳基、芳烷基、杂烷基、烷芳基、烷基杂芳基、-C(O)R18或-C(W)NR19R20；R18为氢、羟基、取代或未取代的烷基、烯基、炔基、环烷基、烷氧基、杂环基、环烯基、杂环烯基、芳基、芳氧基、杂芳基、芳烷基、杂烷基、烷芳基或烷基杂芳基；W为O、S、NR21；R19、R20和R21独立地为氢、取代或未取代的烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、环烯基、杂环烯基、芳基、杂芳基、芳烷基、杂烷基、烷芳基或烷基杂芳基；A为双键或单键；并且当A为双键时，R15不存在。
[0112] 在式II的一些形式中，R1可为-O-R4或-NR5R8或-CH2-R5；R2可为卤素或不存在或-O-CH3或-O-CH2-CH3；R9可为-COOH或-CH2-COOH或-CH2-O-CH3或-CH2-CH2-O-CH3；R4可为-CH2-R5或-CO-R5；R5可为R6可为卤素或不存在；R7可为卤素或不存在。在一些形式中，R1位于3或5位；R1位于第4位；R1位于2或6位；在一些形式中，R6位于4位。在一些形式中，R7位于2或6位。在一些形式中，R2位于3、4或5位。
[0113] 考虑了以上公开的R1-R7的所有组合。
[0114] 在一些形式中，该化合物由式IIA表示：在这些形式中，R1可为-O-R4或-NR5R8或-CH2-R5；R2可为卤素、不存在，或者它可为-O-CH3或-O-CH2-CH3；R3可为-COOH或-CH2-COOH；R4可为-CH2-R5或-CO-R5；R5可为
在一些形式中，R6为卤素或不存在。在一些形式中，R7为卤素或不存在。在一些形式中，R1位于3或5位。在一些形式中，R1位于4位。在一些形式中，R1位于2或6位。在一些形式中，R6位于4位。在一些形式中，R7位于2或6位。在一些形式中，R2位于3、4或5位。
在一些形式中，R6为卤素或不存在。在一些形式中，R7为卤素或不存在。在一些形式中，R1位于3或5位。在一些形式中，R1位于4位。在一些形式中，R1位于2或6位。在一些形式中，R6位于4位。在一些形式中，R7位于2或6位。在一些形式中，R2位于3、4或5位。
[0115] 考虑了以上公开的R1-R7的所有组合。
[0116] 特别优选的化合物的结构和化学名称如下所示。
[0117] 化合物2((5-{4-[(4-氯苯甲酰基)氧基]亚苄基}-4-氧代-2-硫代-1,3-噻唑烷-3-基)乙酸)。
[0118] 化合物3({5-[4-(苄氧基)亚苄基]-4-氧代-2-硫代-1,3-噻唑烷-3-基}乙酸)。
[0119] 化合物4((5-{4-[(2,4-二氯苯甲酰基)氧基]亚苄基}-4-氧代-2-硫代-1,3-噻唑烷-3-基)乙酸)。
[0120] 化合物6((5-{4-[(4-氯苄基)氧基]-3-甲氧基亚苄基}-4-氧代-2-硫代-1,3-噻唑烷-3-基)乙酸)。
[0121] 化合物7({5-[4-(1-萘基甲氧基)亚苄基]-4-氧代-2-硫代-1,3-噻唑烷-3-基}乙酸)。
[0122] 化合物10({5-[4-(苯甲酰氧基)亚苄基]-4-氧代-2-硫代-1,3-噻唑烷-3-基}乙酸)。
[0123] 化合物13((5-{3-[(4-氯苄基)氧基]亚苄基}-4-氧代-2-硫代-1,3-噻唑烷-3-基)乙酸)。
[0124] 化合物15((5-{3-[(4-氯苄基)氧基]-4-甲氧基亚苄基}-4-氧代-2-硫代-1,3-噻唑烷-3-基)乙酸)。
[0125] 化合物17((5-{3-[(2,4-二氯苄基)氧基]亚苄基}-4-氧代-2-硫代-1,3-噻唑烷-3-基)乙酸)。
[0126] 化合物18((5-{3-[(2,4-二氯苄基)氧基]-4-甲氧基亚苄基}-4-氧代-2-硫代-1,3-噻唑烷-3-基)乙酸)。
[0127] 化合物19((5-{3-[(2-氯苄基)氧基]亚苄基}-4-氧代-2-硫代-1,3-噻唑烷-3-基)乙酸)。
[0128] 化合物20((5-{4-[(4-氯苄基)氧基]-3-乙氧基亚苄基}-4-氧代-2-硫代-1,3-噻唑烷-3-基)乙酸)。
[0129] 化合物22({5-[4-(苄氧基)-3-甲氧基亚苄基]-4-氧代-2-硫代-1,3-噻唑烷-3-基}乙酸)。
[0130] 化合物24({5-[3-(苄氧基)-4-甲氧基亚苄基]-4-氧代-2-硫代-1,3-噻唑烷-3-基}乙酸)。
[0131] 化合物25((5-{4-[(2-氟苄基)氧基]-3-甲氧基亚苄基}-4-氧代-2-硫代-1,3-噻唑烷-3-基)乙酸)。
[0132] 化合物27((5-{3-[(2-氟苄基)氧基]-4-甲氧基亚苄基}-4-氧代-2-硫代-1,3-噻唑烷-3-基)乙酸)。
[0133] 化合物28((5-{2-[(4-氯苄基)氧基]亚苄基}-4-氧代-2-硫代-1,3-噻唑烷-3-基)乙酸)。
[0134] 化合物29((5-{4-[(3-甲基苯甲酰基)氧基]亚苄基}-4-氧代-2-硫代-1,3-噻唑烷-3-基)乙酸)。
[0135] 化合物30({5-[3-氟-4-(1-吡咯烷基)亚苄基]-4-氧代-2-硫代-1,3-噻唑烷-3-基}乙酸)。
[0136] 化合物31([5-(4-乙氧基亚苄基)-4-氧代-2-硫代-1,3-噻唑烷-3-基]乙酸)。
[0137] 化合物34((5-{4-[(3,4-二氯苄基)氧基]-3-乙氧基亚苄基}-4-氧代-2-硫代-1,3-噻唑烷-3-基)乙酸)。
[0138] 化合物35((5-{4-[(4-氟苯甲酰基)氧基]亚苄基}-4-氧代-2-硫代-1,3-噻唑烷-3-基)乙酸)。
[0139] 化合物36((5-{4-[(2-碘苯甲酰基)氧基]亚苄基}-4-氧代-2-硫代-1,3-噻唑烷-3-基)乙酸)。
[0140] 化合物37(2-[5-(4-甲氧基亚苄基)-4-氧代-2-硫代-1,3-噻唑烷-3-基]丙酸)。
[0141] 化合物42({5-[(4-甲氧基-1-萘基)亚甲基]-4-氧代-2-硫代-1,3-噻唑烷-3-基}乙酸)。
[0142] 化合物44((5-{4-[(4-溴苄基)氧基]-3-甲氧基亚苄基}-4-氧代-2-硫代-1,3-噻唑烷-3-基)乙酸)。
[0143] 化合物48([4-氧代-5-(4-丙氧基亚苄基)-2-硫代-1,3-噻唑烷-3-基]乙酸)。
[0144] 化合物49((5-{4-[甲基(苯基)氨基]亚苄基}-4-氧代-2-硫代-1,3-噻唑烷-3-基)乙酸。)化合物50((5-{4-[(2-氯-4-氟苄基)氧基]-3-甲氧基亚苄基}-4-氧代-2-硫代-1,3-噻唑烷-3-基)乙酸)。
[0145] 化合物52({5-[2-(苄氧基)亚苄基]-4-氧代-2-硫代-1,3-噻唑烷-3-基}乙酸)。
[0146] 化合物53(2-[5-(4-氯亚苄基)-4-氧代-2-硫代-1,3-噻唑烷-3-基]丙酸)。
[0147] 化合物56((5-{5-溴-2-[(4-氯苄基)氧基]亚苄基}-4-氧代-2-硫代-1,3-噻唑烷-3-基)乙酸)。
[0148] 化合物60({5-[3-(苯甲酰氧基)亚苄基]-4-氧代-2-硫代-1,3-噻唑烷-3-基}乙酸)。
[0149] 化合物62((5-{3-甲氧基-4-[(3-甲基苯甲酰基)氧基]亚苄基}-4-氧代-2-硫代-1,3-噻唑烷-3-基)乙酸)。
[0150] 化合物63((5-{3-[(2-氟苄基)氧基]亚苄基}-4-氧代-2-硫代-1,3-噻唑烷-3-基)乙酸)。
[0151] 化合物69(4-[(4-{[3-(2-甲氧基乙基)-4-氧代-2-硫代-1,3-噻唑烷-5-亚基]甲基}苯氧基)甲基]苯甲酸)。
[0152] 化合物80((5-{5-溴-2-[(2-氯苄基)氧基]亚苄基}-4-氧代-2-硫代-1,3-噻唑烷-3-基)乙酸)。
[0153] 化合物81((5-{[1-(2-氟苄基)-1H-吲哚-3-基]亚甲基}-4-氧代-2-硫代-1,3-噻唑烷-3-基)乙酸)。
[0154] 化合物82((5-{4-[(4-氯苄基)氧基]亚苄基}-4-氧代-2-硫代-1,3-噻唑烷-3-基)乙酸)。
[0155] 化合物87(3-[5-(4-甲氧基亚苄基)-4-氧代-2-硫代-1,3-噻唑烷-3-基]丙酰胺)。
[0156] 药学上可接受的盐本文还公开了式I表示的化合物及其衍生物以及其他经确定能结合DHFR的化合物的药学上可接受的盐。药学上可接受的盐的实例包括但不限于碱性残基(如胺)的无机或有机酸盐；和酸性残基(如羧酸)的碱或有机盐。药学上可接受的盐包括母体化合物的例如由无毒无机酸或有机酸形成的常规无毒盐或季铵盐。这些常规的无毒盐包括衍生自无机酸如盐酸、氢溴酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸和硝酸的盐；以及由有机酸如乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、扑姆酸、马来酸、羟基马来酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水杨酸、磺胺酸、2-乙酰氧基苯甲酸、富马酸、甲苯磺酸、萘磺酸、甲磺酸、乙烷二磺酸、草酸和羟乙磺酸制备的盐。
[0157] 化合物的药学上可接受的盐可以通过常规化学方法由含有碱性或酸性部分的母体化合物合成。通常，这些盐可以通过使这些化合物的游离酸或碱形式与化学计量的量的适当碱或酸在水中或在有机溶剂中或在两者的混合物中反应来制备；通常，优选非水介质如乙醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇或乙腈。合适的盐的列表可参见Remington’s Pharmaceutical Sciences,第20版,Lippincott Williams&Wilkins,美国马里兰州巴尔的摩,2000,第704页；和“Handbook of Pharmaceutical Salts:Properties,Selection,and Use”,P.Heinrich Stahl和Camille G.Wermuth编辑,Wiley-VCH,Weinheim,2002。
[0158] 中间体本文使用虚拟配体筛选法鉴定的化合物可用作起始化合物或中间体化合物以产生最终化合物，该最终化合物相对于起始化合物或中间化合物，与酶(例如DHFR)的结合提高，或者对酶(例如DHFR)的抑制提高。可以使用常规技术修饰本文鉴定的化合物，以提高生物利用度、增加血流中的半衰期、增加溶解度、增加亲水性、增加疏水性或其组合。可以修饰化合物以掺入能电离或者能够与水形成相对较强的分子间吸引力(氢键)的极性官能团，例如醇、胺、酰胺、羧酸、磺酸和磷酸基团，通常产生水溶性提高的类似物。酸性和碱性基团特别有用，因为这些基团可用于形成盐，这将为最终产品提供更广泛的剂型。然而，通过将酸基团引入含有碱基团的结构中或者将碱基团引入到含有酸基团的结构中形成两性离子，可以降低水溶性。引入弱极性基团如羧酸酯、芳基卤化物和烷基卤化物，不会显著改善水溶性并且会导致脂溶性提高。
[0159] 将酸性残基掺入化合物中不太可能改变活性类型，但它可以导致类似物表现出溶血性质。此外，芳族酸基团的引入通常导致抗炎活性，而具有α官能团的羧酸可以充当螯合剂。碱性水增溶性基团具有改变作用方式的趋势，因为碱通常会干扰涉及胺的神经递质和生物过程。然而，它们的掺入确实意味着类似物可以配制成多种酸盐。不可电离的基团不具有酸性和碱性基团的缺点。
[0160] 通过反应性较低的C-C、C-O和C-N键直接与前导化合物的碳骨架结合的基团，可能不可逆地连接到前导结构上。通过酯、酰胺、磷酸根、硫酸根和糖苷键与化合物连接的基团更可能从所得类似物中代谢以重新形成母体化合物，因为类似物从其给药点转移到其作用位点。具有这种类型的增溶性基团的化合物充当前药，因此它们的活性更可能与母体化合物相同。然而，增溶性基团的损失速率将取决于转移途径的性质，并且这可能影响药物的活性。
[0161] 为了保持化合物所显示的活性类型，水增溶性基团应连接到该结构的不参与药物-受体相互作用的部分上。因此，用于引入新的水增溶性基团的途径及其在先导化合物中的位置将取决于化合物的相对反应性和分子的其余部分。水增溶性结构和用于将它们引入到前导结构中的途径的实例。O-烷基化、N-烷基化、O-酰化和N-酰化反应用于同时引入酸性基团和碱性基团。乙酰化方法同时使用适当的酰氯和酸酐。
[0162] 水增溶性结构和用于将它们引入到前导化合物中的途径的实例包括但不限于用于将磷酸酯基团引入到化合物中的磷酸酰卤。已通过相应的单氯化醇(monochlorinated hydrin)的反应和使用合适的环氧化物，来引入含有羟基的结构。可以通过直接磺化或将亚硫酸氢盐加成到反应性C＝C键，来引入磺酸基团。
[0163] 其他活性剂可与本文公开的化合物一起使用的其他生物活性剂包括但不限于抗微生物剂(特别是抗生素)、消毒剂、抗瘢痕形成剂和抗炎剂。
[0164] 可掺入到穿孔胶原涂覆的网状物中的抗微生物剂包括但不限于抗菌药物、抗病毒剂、抗真菌剂和抗疟药。抗微生物剂包括能杀死或抑制微生物生长的物质，例如杀微生物剂和微生物抑制剂。可以掺入到穿孔胶原涂覆的网状物中的抗微生物剂包括但不限于：利福平；米诺环素及其盐酸盐、硫酸盐或磷酸盐；三氯生；洗必泰；万古霉素及其盐酸盐、硫酸盐或磷酸盐；四环素及其盐酸盐、硫酸盐或磷酸盐及其衍生物；庆大霉素；头孢菌素抗菌药；氨曲南；头孢替坦及其二钠盐；劳拉卡；头孢西丁及其钠盐；头孢唑啉及其钠盐；头孢克洛；头孢布坦及其钠盐；头孢唑肟；头孢唑肟钠盐；头孢哌酮及其钠盐；头孢呋辛及其钠盐；头孢呋辛酯；头孢丙烯；头孢他啶；头孢噻肟及其钠盐；头孢羟氨苄；头孢他啶及其钠盐；头孢氨苄；头孢孟多酯钠；头孢吡肟及其盐酸盐、硫酸盐和磷酸盐；头孢地尼及其钠盐；头孢曲松钠及其钠盐；头孢克肟及其钠盐；头孢泊肟普昔酯；美罗培南及其钠盐；亚胺培南及其钠盐；西司他丁及其钠盐；阿奇霉素；克拉霉素；地红霉素；红霉素及其盐酸盐、硫酸盐或磷酸盐、乙基琥珀酸盐和硬脂酸盐形式；克林霉素；克林霉素盐酸盐、硫酸盐或磷酸盐；林可霉素及其盐酸盐、硫酸盐或磷酸盐、妥布霉素及其盐酸盐、硫酸盐或磷酸盐；链霉素及其盐酸盐、硫酸盐或磷酸盐；新霉素及其盐酸盐、硫酸盐或磷酸盐；乙酰磺恶唑；甲磺酸粘菌素及其钠盐；喹奴普丁；达福普汀；阿莫西林；氨苄青霉素及其钠盐；克拉维酸及其钠或钾盐；青霉素G；苄星青霉素G、或普鲁卡因盐；青霉素G钠或钾盐；羧苄青霉素及其二钠或茚满二钠盐；哌拉西林及其钠盐；替卡西林及其二钠盐；舒巴坦及其钠盐；莫西沙星；环丙沙星；氧氟沙星；左氧氟沙星；诺氟沙星；加替沙星；甲磺酸曲伐沙星；甲磺酸阿曲氟沙星；甲氧苄啶；磺胺甲恶唑；去甲环素及其盐酸盐、硫酸盐或磷酸盐；多西环素及其盐酸盐、硫酸盐或磷酸盐；土霉素及其盐酸盐、硫酸盐或磷酸盐；氯四环素及其盐酸盐、硫酸盐或磷酸盐；甲硝唑；氨苯砜；阿托伐醌；
利福布丁；利奈唑胺；多粘菌素B及其盐酸盐、硫酸盐或磷酸盐；磺胺醋酰及其钠盐；克拉霉素；庆大霉素；双胍类；杆菌肽；银、铜、锌和金离子、盐和络合物。在一种优选的形式中，掺入到植入物中的抗微生物剂是(i)利福平和(ii)米诺环素及其盐酸盐、硫酸盐或磷酸盐。在一种特别优选的形式中，穿孔胶原涂覆的网状物包含利福平和米诺环素或其盐酸盐、硫酸盐或磷酸盐。
利福布丁；利奈唑胺；多粘菌素B及其盐酸盐、硫酸盐或磷酸盐；磺胺醋酰及其钠盐；克拉霉素；庆大霉素；双胍类；杆菌肽；银、铜、锌和金离子、盐和络合物。在一种优选的形式中，掺入到植入物中的抗微生物剂是(i)利福平和(ii)米诺环素及其盐酸盐、硫酸盐或磷酸盐。在一种特别优选的形式中，穿孔胶原涂覆的网状物包含利福平和米诺环素或其盐酸盐、硫酸盐或磷酸盐。
[0165] 制剂本文所述的化合物可以配制用于肠内、肠胃外、局部或肺部给予。所述化合物可与一种或多种药学上可接受的载体和/或赋形剂组合，所述载体和/或赋形剂被认为是安全有效的，并且可以施用于个体而不会引起不希望的生物学副作用或不希望的相互作用。载体是药物制剂中存在的除活性成分之外的所有组分。
[0166] 此类药物载体可以是无菌液体，例如水和油，包括石油、动物、植物或合成来源的那些油，例如花生油、大豆油、矿物油、芝麻油等。盐水溶液和右旋糖水溶液和甘油溶液也可用作液体载体，特别是用于可注射溶液剂。
[0167] 本文公开的化合物还可以配制用作消毒剂，例如，在医院环境中。
[0168] 这些组合物可以采用溶液、悬浮液、乳液、片剂、丸剂、胶囊、粉末、缓释制剂等形式。
[0169] 合适的药物赋形剂包括淀粉、葡萄糖、蔗糖、明胶、乳糖、麦芽、大米、面粉、白垩、硅胶、硬脂酸钠、甘油单硬脂酸酯、滑石、氯化钠、甘油、丙烯、乙二醇、水、乙醇等。药物组合物还可含有润湿剂或乳化剂或悬浮/稀释剂、或pH缓冲剂、或用于改变或维持化合物/抗生素的释放速率的物剂，所有这些都在本文中进一步公开。
[0170] 胃肠外制剂本文所述的化合物可以配制用于肠胃外给药。例如，肠胃外给药可包括静脉内、皮内、动脉内、腹膜内、病灶内、颅内、关节内、肿瘤内、胸膜内、气管内、玻璃体内、肿瘤内、肌肉内、皮下、结膜下、囊内、心内、腔内通过注射和通过输注给予患者。
[0171] 可以使用本领域已知的技术将肠胃外制剂制备成含水组合物。通常，这种组合物可以制备成可注射制剂，例如溶液剂或混悬剂；固体形式，其适用于在注射前加入重构介质制备溶液剂或混悬剂；乳剂，例如油包水(w/o)乳剂、水包油(o/w)乳剂及其微乳剂、脂质体或乳质体(emulsome)。
[0172] 如果用于静脉内给药，将组合物包装在无菌等渗水性缓冲液的溶液中。必要时，组合物还可包含增溶剂。组合物的组分单独供应或以单位剂量形式混合在一起供应，例如，作为干燥的冻干粉末或浓缩溶液在密封容器如安瓿或小袋中供应，标明活性剂的量。如果组合物通过输注给药，则可以用含有无菌药用级水或盐水的输液瓶分配。当通过注射给予组合物时，可以提供一安瓿的无菌水或盐水，使得成分可以在注射前混合。载体可以是溶剂或分散介质，其包含例如水、乙醇、一种或多种多元醇(例如甘油、丙二醇和液体聚乙二醇)、油如植物油(例如花生油，玉米油、芝麻油等)及它们的组合。可例如通过使用诸如卵磷脂的包衣，在分散的情况下通过维持所需的粒度和/或通过使用表面活性剂，来保持适当的流动性。在许多情况下，优选包括等渗剂，例如糖或氯化钠。
[0173] 作为游离酸或碱或其药理学上可接受的盐的活性化合物的溶液和分散体，可以在水或其它溶剂或分散介质中制备，所述溶剂或分散介质适当地与一种或多种药学上可接受的赋形剂混合，所述赋形剂包括但不限于表面活性剂、分散剂、乳化剂、pH调节剂、粘度调节剂及其组合。
[0174] 合适的表面活性剂可以是阴离子表面活性剂、阳离子表面活性剂、两性表面活性剂或非离子表面活性剂。合适的阴离子表面活性剂包括但不限于含有羧酸根、磺酸根和硫酸根离子的阴离子表面活性剂。阴离子表面活性剂的实例包括长链烷基磺酸和烷基芳基磺酸的钠、钾、铵盐，如十二烷基苯磺酸钠；二烷基磺基琥珀酸钠，如十二烷基苯磺酸钠；二烷基磺基琥珀酸钠，如双-(2-2-乙硫基)-磺基琥珀酸钠(sodium bis-(2-ethylthioxyl)-sulfosuccinate)；和烷基硫酸盐，如十二烷基硫酸钠。阳离子表面活性剂包括但不限于季铵化合物，例如苯扎氯铵、苄索氯铵、西曲溴铵、硬脂基二甲基苄基氯化铵、聚氧乙烯和椰子胺。非离子表面活性剂的实例包括乙二醇单硬脂酸酯、丙二醇肉豆蔻酸酯、甘油单硬脂酸酯、甘油硬脂酸酯、聚甘油-4-油酸酯、脱水山梨糖醇酰化物、蔗糖酰化物、PEG-150月桂酸酯、PEG-400单月桂酸酯、聚氧乙烯单月桂酸酯、聚山梨醇酯、聚氧乙烯辛基苯基醚、PEG-1000十六烷基醚、聚氧乙烯十三烷基醚、聚丙二醇丁醚、 401、硬脂酰单异丙醇酰
胺和聚氧乙烯氢化牛脂酰胺。两性表面活性剂的实例包括N-十二烷基-β-丙氨酸钠、N-月桂基-β-亚氨基二丙酸钠、肉豆蔻酰两性乙酸盐、月桂基甜菜碱和月桂基磺基甜菜碱。
胺和聚氧乙烯氢化牛脂酰胺。两性表面活性剂的实例包括N-十二烷基-β-丙氨酸钠、N-月桂基-β-亚氨基二丙酸钠、肉豆蔻酰两性乙酸盐、月桂基甜菜碱和月桂基磺基甜菜碱。
[0176] 该制剂在重构时通常缓冲至pH为3-8，以用于肠胃外给药。合适的缓冲液包括但不限于磷酸盐缓冲液、乙酸盐缓冲液和柠檬酸盐缓冲液。
[0178] 无菌可注射溶液剂可以通过将所需量的活性化合物掺入适当的溶剂或分散介质中，根据需要与上面列出的一种或多种赋形剂一起，然后过滤灭菌来制备。通常，通过将各种灭菌的活性成分掺入无菌介质中来制备分散体，所述无菌介质含有基础分散介质和上面列出的那些所需的其它成分。在用于制备无菌可注射溶液剂的无菌粉末的情况下，优选的制备方法是真空干燥和冷冻干燥技术，其从先前无菌过滤的溶液中产生活性成分加任何其他所需成分的粉末。粉末可以制备成颗粒本质上是多孔的，这可以增加颗粒的溶解。制备多孔颗粒的方法是本领域熟知的。
[0179] 控释制剂本文所述的肠胃外制剂可以配制用于控制释放，包括立即释放、延迟释放、延长释放、脉冲释放以及它们的组合。
[0180] 1.纳米颗粒和微颗粒对于肠胃外给药，可将一种或多种化合物和任选的一种或多种另外活性剂掺入到提供该化合物和/或一种或多种另外活性剂的控制释放的微颗粒、纳米颗粒或其组合中。在其中制剂含有两种或更多种药物的形式中，药物可以配制成用于相同类型的控释(例如，延迟释放、延长释放、立即释放或脉冲释放)，或者药物可以独立地配制用于不同类型的释放(例如，立即释放和延迟释放、立即释放和延长释放、延迟释放和延长释放、延迟释放和脉冲释放等)。
[0181] 例如，该化合物和/或一种或多种另外活性剂可以掺入到提供药物的受控释放的聚合物微粒中。通过药物从微颗粒中扩散出来和/或通过水解和/或酶促降解使聚合物颗粒降解，来控制药物的释放。合适的聚合物包括乙基纤维素和其他天然或合成纤维素衍生物。
[0182] 在水性环境中缓慢溶解并形成凝胶的聚合物，例如羟丙基甲基纤维素或聚环氧乙烷、也可适合作为含药物的微颗粒的材料。其它聚合物包括但不限于聚酸酐、聚(酯酸酐)、多羟基酸如聚乳酸(PLA)、聚乙交酯(PGA)、聚(丙交酯-共-乙交酯)(PLGA)、聚3-羟基丁酸酯(PHB)及其共聚物、聚-4-羟基丁酸酯(P4HB)及其共聚物、聚己内酯及其共聚物，以及它们的组合。
[0183] 或者，可以将药物掺入由这样的材料制备的微颗粒中，所述材料不溶于水溶液或缓慢溶于水溶液，但是能够通过包括酶促降解、胆汁酸的表面活性作用和/或机械腐蚀的方式在胃肠道内降解。本文所用的术语“在水中缓慢溶解”是指在30分钟内不溶于水的材料。优选的实例包括脂肪、脂肪状物质、蜡、蜡状物质及其混合物。合适的脂肪和脂肪状物质包括脂肪醇(如十二烷醇、肉豆蔻醇、十八烷醇、十六烷醇或十六十八烷醇)，脂肪酸和衍生物，包括但不限于脂肪酸酯、脂肪酸甘油酯(甘油单酯、甘油二酯和甘油三酯)和氢化脂肪。具体实例包括但不限于氢化植物油、氢化棉籽油、氢化蓖麻油、可以商品名 获得的氢化油、硬脂酸、可可脂和硬脂醇。合适的蜡和蜡状材料包括天然或合成蜡、烃和普通蜡。蜡的具体实例包括蜂蜡、糖蜡、蓖麻蜡、巴西棕榈蜡、石蜡和小烛树蜡。本文所用的蜡状材料定义为任何在室温下通常是固体并且具有约30至300℃的熔点的材料。
[0184] 在某些情况下，可能需要改变水渗透到微颗粒中的速率。为此，速率控制(芯吸)剂可以与上面列出的脂肪或蜡一起配制。速率控制材料的实例包括某些淀粉衍生物(例如蜡质麦芽糖糊精和滚筒干燥的玉米淀粉)、纤维素衍生物(例如羟丙基甲基纤维素、羟丙基纤维素、甲基纤维素和羧甲基纤维素)、海藻酸、乳糖和滑石。另外，可以加入药学上可接受的表面活性剂(例如卵磷脂)以促进这种微颗粒的降解。
[0185] 不溶于水的蛋白质如玉米醇溶蛋白也可用作用于形成含药物的微颗粒的材料。另外，水溶性蛋白质、多糖及其组合可以与药物一起配制成微颗粒，然后交联形成不溶性网络。例如，环糊精可以与单个药物分子复合并随后交联。
[0186] 2.制备纳米颗粒和微颗粒的方法可以通过已知的药物制剂技术，来实现将药物包封或掺入载体材料中以产生含药物的微颗粒。在脂肪、蜡或蜡状材料中配制时，通常将载体材料加热至高于其熔化温度，并加入药物以形成混合物，该混合物包含悬浮在载体材料中的药物颗粒、溶解在载体材料中的药物或者同时存在这两种情况。随后可通过几种方法配制微颗粒，包括但不限于凝固、挤出、喷雾冷却或水分散的方法。在一个优选的方法中，将蜡加热至其熔化温度以上，加入药物，并在熔融的蜡-药物混合物冷却过程中在恒定搅拌下凝结该混合物。或者，可以将熔融的蜡-药物混合物挤出并滚圆以形成粒料或珠粒。这些方法在本领域中是已知的。
[0187] 对于一些载体材料，可能需要使用溶剂蒸发技术来生产含药物的微颗粒。在这种情况下，药物和载体材料共溶于互溶剂中，随后可通过若干技术生产微颗粒，包括但不限于在水或其它适当的介质中形成乳液、喷雾干燥、或者通过从本体溶液中蒸发掉溶剂并研磨所得材料。
[0188] 在一些形式中，将颗粒形式的药物均匀地分散在水不溶性或缓慢水溶性的材料中。为了使组合物内的药物颗粒的尺寸最小化，可以在配制之前研磨药物粉末本身以产生细颗粒。制药领域中已知的喷射研磨方法可用于此目的。在一些形式中，通过将蜡或蜡状物质加热到其熔点以上并加入药物颗粒同时搅拌所得混合物，来将颗粒形式的药物均匀地分散在蜡或蜡状物质中。在这种情况下，可以向混合物中加入药学上可接受的表面活性剂，以促进药物颗粒的分散。
[0189] 颗粒也可涂覆一个或多个改性防粘涂层。可将通过脂肪酶水解的脂肪酸固体酯喷涂到微颗粒或药物颗粒上。玉米醇溶蛋白是天然水不溶性蛋白质的一个例子。它可以通过喷涂或通过湿法制粒技术涂覆在含有药物的微颗粒或药物颗粒上。除天然不溶于水的材料外，一些消化酶底物也可用交联程序处理，导致形成不溶性网络。已经报道了许多通过化学手段和物理手段引发的交联蛋白质的方法。获得交联的最常用方法之一是使用化学交联剂。化学交联剂的实例包括醛(戊二醛和甲醛)、环氧化合物，碳二亚胺和京尼平。除了这些交联剂之外，已经使用氧化和天然糖来交联明胶。也可以使用酶促方法完成交联；例如，转谷氨酰胺酶已被批准作为用于交联海产品的GRAS物质。最后，可以通过物理手段如热处理、UV辐射和γ辐射来引发交联。
[0190] 为了在含有药物的微颗粒或药物颗粒周围产生交联蛋白质包被层，可以将水溶性蛋白质喷涂到微颗粒上，然后通过上述方法之一进行交联。或者，含药物的微颗粒可以通过凝聚-相分离(例如，通过添加盐)在蛋白质内进行微囊化，随后进行交联。用于此目的的一些合适的蛋白质包括明胶、白蛋白、酪蛋白和谷蛋白。
[0191] 多糖也可以交联形成水不溶性网络。对于许多多糖，这可以通过与能交联聚合物主链的钙盐或多价阳离子反应来实现。将果胶、藻酸盐、葡聚糖、直链淀粉和瓜尔胶在多价阳离子存在下进行交联。也可以形成带相反电荷的多糖之间的复合物；例如，果胶和壳聚糖可以通过静电相互作用进行复合。
[0192] 可注射/可植入配方本文所述的化合物可以掺入可注射/可植入的固体或半固体植入物中，例如聚合物植入物。在一些形式中，将该化合物掺入这样的聚合物中，该聚合物在室温下为液体或糊状物，但在与含水介质如生理流体接触时，表现出粘度增加而形成半固体或固体物质。示例性聚合物包括但不限于由至少一种不饱和羟基脂肪酸与羟基链烷酸共聚而衍生的羟基链烷酸聚酯。该聚合物可以熔化，与活性物质混合并浇铸或注塑成装置。这种熔体制造要求该聚合物的熔点低于待输送物质和聚合物发生降解或变得具有反应性的温度。该装置也可以通过溶剂浇铸制备，其中该聚合物溶解在溶剂中，药物溶解或分散在聚合物溶液中，然后蒸发溶剂。溶剂方法要求该聚合物可溶于有机溶剂。另一种方法是将该聚合物和装有活性剂的药物或聚合物颗粒的混合粉末进行压缩模塑。
[0193] 或者，可将该化合物掺入聚合物基质中并模塑、压缩或挤出成在室温下为固体的装置。例如、可将该化合物掺入可生物降解的聚合物中，例如聚酸酐、聚氢链烷酸(PHAs)、PLA、PGA、PLGA、聚己内酯、聚酯、聚酰胺、聚原酸酯、聚磷腈、蛋白质和多糖如胶原蛋白、透明质酸、白蛋白和明胶以及它们的组合，并压缩成固体装置，例如圆盘，或挤压成装置，例如棒。
[0194] 可通过该聚合物的选择、该聚合物的分子量和/或修饰该聚合物以增加降解，如孔的形成和/或可水解的键的掺入，来改变一种或多种化合物的释放。用于修饰生物可降解聚合物的性质以改变化合物从植入物的释放曲线的方法是本领域熟知的。
[0195] 胃肠外制剂口服制剂可包括标准载体，例如药物级甘露醇，乳糖，糖精钠，淀粉，硬脂酸镁，纤维素，碳酸镁等。这些组合物将含有治疗有效量的该化合物和/或抗生素以及合适的量的载体，以便根据待使用的给药方式为患者提供适当的形式。合适的口服剂型包括片剂、胶囊剂、溶液剂、混悬剂糖浆剂和锭剂。片剂可以使用本领域熟知的压缩或模制技术制备。明胶或非明胶胶囊剂可以制备成硬或软胶囊壳，其可以使用本领域熟知的技术包封液体、固体和半固体填充材料。
[0196] 可以使用药学上可接受的载体制备制剂。本文一般使用的“载体”包括但不限于稀释剂、防腐剂、粘合剂、润滑剂、崩解剂、溶胀剂、填充剂、稳定剂及其组合。载体还包括包衣组合物的所有组分，其可包括增塑剂、颜料、着色剂、稳定剂和助流剂。
[0197] 合适的包衣材料的实例包括但不限于纤维素聚合物，例如乙酸邻苯二甲酸纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、邻苯二甲酸羟丙基甲基纤维素和乙酸琥珀酸羟丙基甲基纤维素、聚乙酸乙烯酯邻苯二甲酸酯、丙烯酸聚合物和共聚物，以及可以商品名(Roth Pharma、Westerstadt、德国)商购的甲基丙烯酸树脂、玉米醇溶蛋白、虫胶和多糖。
[0198] 另外，包衣材料可含有常规载体，如增塑剂、颜料、着色剂、助流剂、稳定剂、成孔剂和表面活性剂。
[0199] “稀释剂”，也称为“填充剂”，通常是增加固体剂型的体积所必需的，从而提供实用尺寸以便压制片剂或形成珠粒和颗粒。合适的稀释剂包括但不限于二水合磷酸二钙、硫酸钙、乳糖、蔗糖、甘露醇、山梨糖醇、纤维素、微晶纤维素、高岭土、氯化钠、干淀粉、水解淀粉、预胶化淀粉、二氧化硅、氧化钛、硅酸铝镁和糖粉。“粘合剂”用于赋予固体剂型内聚性质，从而确保片剂或珠粒或颗粒在剂型形成后保持完整。合适的粘合剂材料包括但不限于淀粉、预胶化淀粉、明胶、糖(包括蔗糖、葡萄糖、右旋糖、乳糖和山梨糖醇)、聚乙二醇、蜡、天然和合成树胶如阿拉伯树胶、黄蓍胶、海藻酸钠、纤维素(包括羟丙基甲基纤维素、羟丙基纤维素、乙基纤维素和硅酸镁铝(veegum))以及合成聚合物如丙烯酸和甲基丙烯酸共聚物、甲基丙烯酸共聚物、甲基丙烯酸甲酯共聚物、氨基烷基甲基丙烯酸酯共聚物、聚丙烯酸/聚甲基丙烯酸和聚乙烯吡咯烷酮。“润滑剂”用于促进片剂制造。合适的润滑剂的实例包括但不限于硬脂酸镁、硬脂酸钙、硬脂酸、山嵛酸甘油酯、聚乙二醇、滑石和矿物油。
[0200] “崩解剂”用于促进剂型在给药后崩解或“分解”，通常包括但不限于淀粉、羟基乙酸淀粉钠、羧甲基淀粉钠、羧甲基纤维素钠、羟丙基纤维素、预胶化淀粉、粘土、纤维素、精氨酸、树胶或交联聚合物，例如交联的PVP(来自GAF Chemical Corp的 XL)。
[0201] “稳定剂”用于抑制或延迟药物分解反应，所述反应包括例如氧化反应。合适的稳定剂包括但不限于抗氧化剂、丁基化羟基甲苯(BHT)；抗坏血酸及其盐和酯；维生素E、生育酚及其盐类；亚硫酸钠，如偏亚硫酸氢钠；半胱氨酸及其衍生物；柠檬酸；没食子酸丙酯和丁基羟基茴香醚(BHA)。
[0202] 控释肠内制剂可以配制口服剂型例如胶囊剂、片剂、溶液剂和混悬剂，用于控制释放。例如，可将该一种或多种化合物和任选的一种或多种另外的活性剂配制成纳米颗粒、微颗粒及其组合，并包封在软或硬明胶或非明胶胶囊中，或分散在分散介质中以形成口服混悬剂或糖浆剂。颗粒可由药物和控释聚合物或基质形成。或者，药物颗粒可以在掺入最终剂型之前用一种或多种控释包衣包覆。
[0203] 在另一种形式中，该一种或多种化合物和任选的一种或多种另外的活性剂分散在基质材料中，该基质材料在与含水介质如生理流体接触时凝胶化或乳化。在凝胶的情况下，基质溶胀而包埋活性剂，活性剂随着时间的推移通过基质材料的扩散和/或降解而缓慢释放。这种基质可以配制成片剂或配制成硬胶囊和软胶囊的填充材料。
[0204] 在另一种形式中，将该一种或多种化合物和任选的一种或多种另外的活性剂配制成销售的口服剂型，例如片剂或胶囊剂，并且该固体剂型用一个或多个控释包衣包覆，例如延迟释放包衣或延长释放包衣。该一个或多个包衣还可含有该化合物和/或另外的活性剂。
[0205] (1)延长释放剂型延长释放制剂通常制备为扩散或渗透系统，其是本领域已知的。扩散系统通常由两种类型的装置即储存器和基质组成，并且是本领域公知的和有描述的。通常通过将药物与缓慢溶解的聚合物载体压制成片剂形式来制备基质装置。用于制备基质装置的三种主要类型的材料是不溶性塑料、亲水性聚合物和脂肪族化合物。塑料基质包括但不限于丙烯酸甲酯-甲基丙烯酸甲酯、聚氯乙烯和聚乙烯。亲水性聚合物包括但不限于纤维素聚合物例如甲基和乙基纤维素、羟烷基纤维素例如羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和
934，聚环氧乙烷及其混合物。脂肪族化合物包括但不限于各种蜡，例如巴西棕榈
蜡和三硬脂酸甘油酯，以及蜡类物质，包括氢化蓖麻油或氢化植物油，或其混合物。
934，聚环氧乙烷及其混合物。脂肪族化合物包括但不限于各种蜡，例如巴西棕榈
蜡和三硬脂酸甘油酯，以及蜡类物质，包括氢化蓖麻油或氢化植物油，或其混合物。
[0206] 在某些优选形式中，塑料材料是药学上可接受的丙烯酸类聚合物，包括但不限于丙烯酸和甲基丙烯酸共聚物、甲基丙烯酸甲酯、甲基丙烯酸甲酯共聚物、甲基丙烯酸乙氧基乙酯、甲基丙烯酸氰乙酯、甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物、聚丙烯酸、聚甲基丙烯酸、甲基丙烯酸烷基胺共聚物、聚甲基丙烯酸甲酯、聚甲基丙烯酸(酸酐)、聚甲基丙烯酸酯、聚丙烯酰胺、聚甲基丙烯酸酐和甲基丙烯酸缩水甘油酯共聚物。
[0207] 在某些优选的形式中，丙烯酸类聚合物由一种或多种甲基丙烯酸氨酯(ammonio methacrylate)共聚物组成。甲基丙烯酸氨酯共聚物是本领域公知的，并且在NF XVII中被描述为具有低含量季铵基团的丙烯酸酯和甲基丙烯酸酯的完全聚合的共聚物。
[0208] 在一种优选的形式中，丙烯酸类聚合物是丙烯酸树脂漆，例如可以商品名从Rohm Pharma商购的丙烯酸树脂漆。在进一步优选的形式中，丙烯酸类聚合
物包括两种丙烯酸树脂漆的混合物，这两种丙烯酸树脂漆分别以商品名
RL30D和 RS30D从Rohm Pharma商购获得。 RL30D和
RS30D是丙烯酸酯和甲基丙烯酸酯的共聚物，具有低含量的季铵基团，在
RL30D中，铵基与其余的中性(甲基)丙烯酸酯的摩尔比为1:20，而在 RS30D中
为1:40。平均分子量约为150,000。 S-100和 L-100也是优选的。
代码名称RL(高渗透性)和RS(低渗透性)是指这些试剂的渗透性。 RL/RS混合
物不溶于水和消化液。然而，所形成的包括其的多颗粒系统，在水溶液和消化液中是可溶胀的和可渗透的。
物包括两种丙烯酸树脂漆的混合物，这两种丙烯酸树脂漆分别以商品名
RL30D和 RS30D从Rohm Pharma商购获得。 RL30D和
RS30D是丙烯酸酯和甲基丙烯酸酯的共聚物，具有低含量的季铵基团，在
RL30D中，铵基与其余的中性(甲基)丙烯酸酯的摩尔比为1:20，而在 RS30D中
为1:40。平均分子量约为150,000。 S-100和 L-100也是优选的。
代码名称RL(高渗透性)和RS(低渗透性)是指这些试剂的渗透性。 RL/RS混合
物不溶于水和消化液。然而，所形成的包括其的多颗粒系统，在水溶液和消化液中是可溶胀的和可渗透的。
[0209] 上述聚合物如 RL/RS可以以任何所需的比例混合在一起，以便最终获得具有所需溶出曲线的缓释制剂。理想的缓释多颗粒系统可以例如从100％
RL、50％ RL和50％ RS，以及10％ RL
和90％ RS获得。本领域技术人员将认识到也可以使用其他丙烯酸类聚合物，
例如 L。
RL、50％ RL和50％ RS，以及10％ RL
和90％ RS获得。本领域技术人员将认识到也可以使用其他丙烯酸类聚合物，
例如 L。
[0210] 或者，可以使用渗透系统或通过将半透性包衣施加到剂型，来制备延长释放制剂。在后一种情况下，可以通过以适当的比例组合低渗透性和高渗透性包衣材料，来实现所需的药物释放曲线。
[0211] 具有上述不同药物释放机制的装置可以组合成包含单个或多个单元的最终剂型。多个单元的实例包括但不限于包含片剂、珠粒或颗粒的多层片剂和胶囊剂。可通过使用包衣或压缩方法在延长释放芯的顶部施加速释层，或者在多单元系统例如含有延长释放和速释珠粒的胶囊中，将速释部分添加到延长释放系统中。
[0212] 含有亲水性聚合物的延长释放片剂通过本领域公知的技术制备，例如直接压片、湿法制粒或干法制粒。它们的制剂通常掺入聚合物、稀释剂、粘合剂和润滑剂以及活性药物成分。通常的稀释剂包括惰性粉末物质，例如淀粉、粉状纤维素特别是结晶和微晶纤维素、糖例如果糖、甘露醇和蔗糖、谷物粉和类似的可食用粉末。典型的稀释剂包括例如各种类型的淀粉、乳糖、甘露醇、高岭土、磷酸钙或硫酸盐、无机盐如氯化钠和糖粉。粉末状纤维素衍生物也是有用的。典型的片剂粘合剂包括诸如淀粉、明胶和糖的物质，糖例如乳糖、果糖和葡萄糖。也可使用天然和合成树胶，包括阿拉伯树胶、藻酸盐、甲基纤维素和聚乙烯吡咯烷酮。聚乙二醇、亲水聚合物、乙基纤维素和蜡也可用作粘合剂。片剂制剂中需要润滑剂以防止片剂和冲头粘在模具中。润滑剂选自光滑的固体，如滑石粉、硬脂酸镁和硬脂酸钙、硬脂酸和氢化植物油。
[0213] 含有蜡材料的延长释放片剂通常使用本领域已知的方法制备，例如直接共混方法、凝固方法和水分散方法。在凝固方法中，将药物与蜡材料混合并喷雾凝结或凝结并筛分和处理。
[0214] (2)延迟释放剂型延迟释放制剂可以通过用聚合物膜包覆固体剂型来产生，所述聚合物膜不溶于胃的酸性环境，而可溶于小肠的中性环境中。
[0215] 延迟释放剂量单位可以例如通过用选择的包衣材料包覆药物或含药物的组合物来制备。含药物的组合物可以是例如用于掺入胶囊中的片剂，用作“包衣芯”剂型中的内芯的片剂，或用于掺入片剂或胶囊中的多种含药物的珠粒、粒子或颗粒。优选的包衣材料包括可生物侵蚀的、可逐渐水解的、逐渐水溶的和/或可酶促降解的聚合物，并且可以是常规的“肠溶”聚合物。如本领域技术人员所理解的，肠溶聚合物在下胃肠道的较高pH环境中变得可溶，或者随着该剂型穿过胃肠道而缓慢侵蚀，而酶促可降解的聚合物被存在于下胃肠道特别是结肠中的细菌酶降解。用于实现延迟释放的合适包衣材料包括但不限于纤维素聚合物、例如羟丙基纤维素、羟乙基纤维素、羟甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、乙酸琥珀酸羟丙基甲基纤维素、邻苯二甲酸羟丙基甲基纤维素、甲基纤维素、乙基纤维素、乙酸纤维素、醋酸邻苯二甲酸纤维素、偏苯三酸乙酸纤维素和羧甲基纤维素钠；丙烯酸聚合物和共聚物，优选由丙烯酸、甲基丙烯酸、丙烯酸甲酯、丙烯酸乙酯、甲基丙烯酸甲酯和/或甲基丙烯酸乙酯形成的丙烯酸聚合物和共聚物，以及以商品名 (Rohm Pharma；Westerstadt，德国)商购的其它甲基丙烯酸树脂，包括 L30D-55和L100-55(可溶于pH5.5及以上)、
L-100(可溶于pH6.0及以上)、 S(可溶于pH7.0及以上，因为更高
的酯化度)和 NE，RL和RS(具有不同渗透度和可膨胀度的水不溶性聚合物)；
乙烯基聚合物和共聚物，如聚乙烯吡咯烷酮、乙酸乙烯酯、乙酸乙烯酯邻苯二甲酸酯、乙酸乙烯酯巴豆酸共聚物和乙烯-乙酸乙烯酯共聚物；可酶促降解的聚合物，如偶氮聚合物、果胶、壳聚糖、直链淀粉和瓜尔胶；玉米醇溶蛋白和虫胶。也可以使用不同包衣材料的组合。也可以应用使用不同聚合物的多层包衣。
L-100(可溶于pH6.0及以上)、 S(可溶于pH7.0及以上，因为更高
的酯化度)和 NE，RL和RS(具有不同渗透度和可膨胀度的水不溶性聚合物)；
乙烯基聚合物和共聚物，如聚乙烯吡咯烷酮、乙酸乙烯酯、乙酸乙烯酯邻苯二甲酸酯、乙酸乙烯酯巴豆酸共聚物和乙烯-乙酸乙烯酯共聚物；可酶促降解的聚合物，如偶氮聚合物、果胶、壳聚糖、直链淀粉和瓜尔胶；玉米醇溶蛋白和虫胶。也可以使用不同包衣材料的组合。也可以应用使用不同聚合物的多层包衣。
[0216] 本领域技术人员通过评价用不同量的各种包衣材料制备的片剂、珠粒和颗粒的各个释放曲线，可以容易地确定特定包衣材料的优选包覆重量。正是材料、方法和应用形式的组合才产生所需的释放特征，人们只能从临床研究中确定。
[0217] 包衣组合物可包括常规添加剂，例如增塑剂、颜料、着色剂、稳定剂、助流剂等。增塑剂通常存在以降低包衣的脆性，并且通常相对于聚合物干重将占约10重量％至50重量％。典型的增塑剂的实例包括聚乙二醇、丙二醇、三醋精、邻苯二甲酸二甲酯、邻苯二甲酸二乙酯、邻苯二甲酸二丁酯、癸二酸二丁酯、柠檬酸三乙酯、柠檬酸三丁酯、柠檬酸三乙基乙酰酯、蓖麻油和乙酰化单甘油酯。稳定剂优选用于稳定分散体中的颗粒。典型的稳定剂是非离子乳化剂，例如脱水山梨糖醇酯、聚山梨醇酯和聚乙烯吡咯烷酮。建议使用助流剂以减少成膜和干燥过程中的粘着效应，并且通常将占包衣溶液中聚合物重量的约25重量％至100重量％。一种有效的助流剂是滑石粉。也可以使用其他助流剂，例如硬脂酸镁和甘油单硬脂酸酯。也可以使用颜料，如二氧化钛。还可以向包衣组合物中加入少量的消泡剂，例如硅氧烷(例如二甲基硅油)。
[0218] 局部制剂用于局部给药的合适剂型包括乳膏剂、软膏剂、油膏剂、喷雾剂、凝胶剂、洗剂、乳剂和透皮贴剂。该制剂可以配制用于经粘膜、经上皮、经内皮或透皮给药。该化合物还可以配制用于鼻内递送、肺部递送或吸入。该组合物还可含有一种或多种化学渗透促进剂、膜渗透剂、膜转运剂、润肤剂、表面活性剂、稳定剂、缓冲剂及其组合。
[0219] 在某些形式中，可能需要向有需要的患者提供一种或多种化合物的连续递送。对于局部应用，可以进行反复施用，或者可以使用贴剂在延长的时间段内连续给予化合物。
[0220] “缓冲剂”用于控制组合物的pH。优选地，缓冲剂将组合物从约pH 4缓冲至约pH7.5，更优选从约pH 4缓冲至约pH 7，最优选从约pH 5缓冲至约pH 7。在一个优选的形式中，缓冲剂是三乙醇胺。“润肤剂”是软化或舒缓皮肤的外用剂，其是本领域公知的并且在药典中列出，例如“Handbook of Pharmaceutical Excipients”，第四版，Pharmaceutical Press，2003。这些包括但不限于杏仁油、蓖麻油、长角豆(ceratonia)提取物、鲸蜡硬脂醇、十六醇、十六烷基酯蜡、胆固醇、棉籽油、环聚二甲基硅氧烷、乙二醇棕榈酸硬脂酸酯、甘油、甘油单硬脂酸酯、甘油单油酸酯、异丙基肉豆蔻酸酯、棕榈酸异丙酯、羊毛脂、卵磷脂、轻质矿物油、中链甘油三酯、矿物油和羊毛脂醇、凡士林、凡士林和羊毛脂醇、大豆油、淀粉、硬脂醇、葵花籽油、木糖醇及其组合。在某些形式中，润肤剂是硬脂酸乙基己酯和棕榈酸乙基己酯。
[0221] “乳化剂”是表面活性物质，其促进一种液体在另一种液体中的悬浮，并促进油和水的稳定混合物或乳液的形成。常见的乳化剂有：金属皂、某些动植物油和各种极性化合物。合适的乳化剂包括阿拉伯胶、阴离子乳化蜡、硬脂酸钙、卡波姆、鲸蜡硬脂醇、鲸蜡醇、胆固醇、二乙醇胺、棕榈酸硬脂酸乙二醇酯、单硬脂酸甘油酯、单油酸甘油酯、羟丙基纤维素、羟丙甲纤维素、羊毛脂、含水(hydrous)、羊毛脂醇、卵磷脂、中链甘油三酯、甲基纤维素、矿物油和羊毛脂醇、磷酸二氢钠、单乙醇胺、非离子乳化蜡、油酸、泊洛沙姆、泊洛沙姆、聚氧乙烯烷基醚、聚氧乙烯蓖麻油衍生物、聚氧乙烯脱水山梨糖醇脂肪酸酯、聚氧乙烯硬脂酸酯、海藻酸丙二醇酯、自乳化单硬脂酸甘油酯、脱水柠檬酸钠、十二烷基硫酸钠、脱水山梨糖醇酯、硬脂酸、葵花籽油、黄蓍胶、三乙醇胺、黄原胶及其组合。在一些形式中，乳化剂是甘油硬脂酸酯。
[0222] “渗透促进剂”是本领域已知的，包括但不限于脂肪醇、脂肪酸酯、脂肪酸、脂肪醇醚、氨基酸、磷脂、卵磷脂、胆酸盐、酶、胺和酰胺、络合剂(脂质体、环糊精、改性纤维素和二酰亚胺)、大环类如大环内酯、酮和酸酐和环脲、表面活性剂、N-甲基吡咯烷酮及其衍生物、DMSO和相关化合物、离子化合物、氮酮和相关化合物，以及溶剂如醇类、酮类、酰胺类、多元醇类(如乙二醇类)。这些类别的实例是本领域已知的。
[0223] “防腐剂”可用于防止真菌和微生物的生长。合适的抗真菌剂和抗微生物剂包括但不限于苯甲酸、对羟基苯甲酸丁酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、苯甲酸钠、丙酸钠、苯扎氯铵、苄索氯铵、苯甲醇、西吡氯铵、氯丁醇、苯酚、苯乙醇和硫柳汞。
[0224] “表面活性剂”是表面活性物质，其能降低表面张力，从而提高产品的乳化、起泡、分散、铺展和润湿性质。合适的非离子表面活性剂包括乳化蜡、单油酸甘油酯、聚氧乙烯烷基醚、聚氧乙烯蓖麻油衍生物、聚山梨醇酯、脱水山梨糖醇酯、苯甲醇、苯甲酸苄酯、环糊精、甘油单硬脂酸酯、泊洛沙姆、聚维酮及其组合。在一些形式中，非离子表面活性剂是硬脂醇。
[0225] (a)乳剂乳剂是一种液体以小球形式分布在第二液体的整体中所得的制品。在特定形式中，乳剂的不可混溶组分包括亲脂性组分和水性组分。分散的液体是不连续相，分散介质是连续相。当油是分散的液体而水溶液是连续相时，它被称为水包油乳液，而当水或水溶液是分散相而油或含油物质是连续相时，它被称为油包水乳液。油相和水相中的任一者或两者可含有一种或多种表面活性剂、乳化剂、乳液稳定剂、缓冲剂和其它赋形剂。优选的赋形剂包括表面活性剂，尤其是非离子表面活性剂；乳化剂，特别是乳化蜡；和液体非挥发性非水性物质，特别是二醇如丙二醇。油相可含有其他油性的药学上批准的赋形剂。例如，诸如羟基化蓖麻油或芝麻油的材料可以在油相中用作表面活性剂或乳化剂。
[0226] 油相可以至少部分地由推进剂组成，例如HFA推进剂。油相和水相中的任一者或两者可含有一种或多种表面活性剂，乳化剂，乳液稳定剂，缓冲剂和其它赋形剂。优选的赋形剂包括表面活性剂，尤其是非离子表面活性剂；乳化剂，特别是乳化蜡；和液体非挥发性非水性物质，特别是二醇如丙二醇。油相可含有其他油性的药学上批准的赋形剂。例如，诸如羟基化蓖麻油或芝麻油的材料可以在油相中用作表面活性剂或乳化剂。
[0227] 有一类乳剂是自乳化系统。这些药物递送系统通常是胶囊(硬壳或软壳)，其由分散或溶解在表面活性剂和亲脂性液体如油或其它水不混溶液体的混合物中的药物组成。当胶囊暴露于含水环境并且外明胶壳溶解时，含水介质和胶囊内容物之间的接触立即产生非常小的乳液液滴。这些通常在胶束或纳米颗粒的尺寸范围内。不需要混合力来产生乳剂，这通常是乳剂配制方法中的情况。
[0228] (b)洗剂洗剂可含有细粉状物质，通过使用悬浮剂和分散剂，细粉状物质可溶于分散介质中。或者，洗剂可以具有与介质不混溶的液体物质作为分散相，并且通常通过乳化剂或其它合适的稳定剂分散。在一些形式中，洗剂是乳液形式，粘度为100-1000厘沱。洗剂的流动性使得可以在宽的表面区域上快速和均匀地施用。洗剂通常旨在用于在皮肤上干燥，从而在皮肤表面留下薄薄的一层药用成分。
[0229] 乳膏剂乳膏剂可含有乳化剂和/或其他稳定剂。在一些形式中，该制剂是粘度大于1000厘沱、通常在20,000-50,000厘沱范围内的乳膏的形式。乳膏剂通常优于软膏剂，因为它们通常更容易涂抹并且更容易去除。乳膏剂和洗剂之间的差异是粘度，其取决于各种油的量/使用和用于制备制剂的水的百分比。乳膏剂通常比洗剂更浓稠，可具有各种用途，并且通常使用更多种不同的油/黄油，这取决于对皮肤的所需效果。在乳膏制剂中，水基百分比为约60-75％，油基为总量的约20-30％，其他百分比为乳化剂、防腐剂和添加剂所占，总量为100％。
[0230] 软膏剂合适的软膏基质的实例包括烃基质(例如，凡士林、白凡士林、黄色软膏和矿物油)；吸收基质(亲水凡士林、无水羊毛脂、羊毛脂和冷霜)；水可除去的基质(例如亲水性软膏)和水溶性基质(例如聚乙二醇软膏)。糊剂通常与软膏剂的不同之处在于它们含有较大百分比的固体。对于用相同组分制备的软膏剂，糊剂通常更具吸收性且不太油腻。
[0231] (e)凝胶剂凝胶剂是在液体介质中含有小分子或大分子的分散体的半固体体系，其通过溶解或悬浮在该液体介质中的增稠剂或聚合物材料的作用而变成半固体。液体可包括亲脂性组分、含水组分或两者。一些乳剂可以是凝胶剂或以其他方式包括凝胶组分。然而，一些凝胶剂不是乳剂，因为它们不含有不可混溶的组分的均匀共混物。合适的胶凝剂包括但不限于改性纤维素例如羟丙基纤维素和羟乙基纤维素；Carbopol均聚物和共聚物；及其组合。液体介质中合适的溶剂包括但不限于二甘醇单乙醚；亚烷基二醇，如丙二醇；二甲基异山梨醇；醇类，如异丙醇和乙醇。溶剂通常根据其溶解药物的能力来选择。还可以掺入其他可改善制剂的皮肤感觉和/或润肤性的添加剂。这些添加剂的实例包括但不限于肉豆蔻酸异丙酯、乙酸乙酯、C12-C15烷基苯甲酸酯、矿物油、角鲨烷、环聚二甲基硅氧烷、癸酸/辛酸甘油三酯及其组合。
[0232] (f)泡沫剂泡沫剂由乳液与气态推进剂组合而成。气态推进剂主要由氢氟烷烃(HFAs)组成。合适的推进剂包括HFAs，如1,1,1,2-四氟乙烷(HFA 134a)和1,1,1,2,3,3,3-七氟丙烷(HFA 227)，但这些HFAs和其他的目前已批准或可能被批准用于医疗用途的HFAs的混合物和掺混物是合适的。推进剂优选不是在喷雾时会产生易燃或爆炸性蒸气的烃类推进剂气体。此外，该组合物优选不含有在使用时会产生易燃或爆炸性蒸气的挥发性醇。
[0233] 消毒制剂可以将该化合物配制成清洁制剂。清洁制剂对于家庭清洁应用(例如，硬质表面如地板、台面、浴盆、餐具，以及较软的布料如衣服、海绵、纸巾等)、个人护理应用(例如洗剂、沐浴露、肥皂、洗发水、擦拭巾)以及工业和医院应用(例如，器械、医疗器械、手套的消毒)是十分有效的。这些制剂对于清洁被革兰氏阴性细菌和革兰氏阳性细菌感染或污染的表面是有效的。
[0234] 本文公开的化合物可以在合适溶剂中配制成溶液剂，用于在喷雾瓶中给药；所述化合物可以配制成适于喷洒到表面上的气溶胶或泡沫，或者吸收到适合于擦拭待消毒的表面的布料中。制备用作本文所公开的形式的消毒剂的制剂的方法是本领域已知的。
[0235] 一些形式在含有pH染料指示剂和碱性物质的组合物中提供NSC309401或其衍生物。pH指示剂染料指示哪个表面已被消毒，并确保经历足够的时间以消毒该表面。参见例如美国公开号20140057987，其通过引用整体并入。
[0236] 清洁制剂可包括该化合物和可接受的载体。载体可以有多种形式。例如，载体可以是水基溶液或清洁剂、醇基溶液或凝胶或乳液载体，包括但不限于水包油乳液、油包水乳液、水包油包水乳液和硅油包水包油乳液。含有该化合物的载体溶液可以直接施加到待处理的表面上或通过合适的基材递送。
[0237] 清洁制剂可配制用于皮肤。在这些形式中，该化合物可以配制在皮肤病学上可接受的载体中。皮肤病学上可接受的载体也可以例如配制成醇基或水基手清洁剂、盥洗皂、液体皂、洗发剂、沐浴凝胶、护发素、头发滋养剂、糊剂或摩丝。
[0238] 清洁制剂可含有一种或多种表面活性剂。表面活性剂适当地选自阴离子表面活性剂、非离子表面活性剂、两性离子表面活性剂、两性表面活性剂和两性型表面活性剂，以及这些表面活性剂的混合物。这些表面活性剂是洗涤领域技术人员所熟知的。可能的表面活性剂的非限制性实例包括isoceteth-20、甲基椰油酰基牛磺酸钠、甲基油酰基牛磺酸钠和十二烷基硫酸钠。更广泛种类的另外表面活性剂的实例在McCutcheon的“Detergents and Emulsifiers”一书(北美版，1986年，Allured Publishing Corporation出版)中有描述。清洁制剂可任选地含有常规用于清洁制剂中的其它材料，其含量为本领域确定的含量。
[0239] 适用于清洁制剂的其他载体可包括各种基于基材的产品。在这种情况下，本发明的制剂可以浸渍到基材产品中或基材产品上，并且可以让其保持湿润或可以对其进行干燥过程。例如，合适的载体包括但不限于适用于个人护理和家用的干湿巾(例如，非织造婴儿擦巾、家用清洁擦拭物、手术制备擦拭物等)；尿布；婴儿尿垫；牙线；个人护理和家庭护理海绵或编织布(如洗布、毛巾等)；薄纸型产品(例如面巾纸、纸巾等)；和一次性衣服(例如手套，工作服，手术口罩，婴儿围兜，袜子，鞋垫等)。清洁制剂可以掺入各种家庭护理产品中，包括但不限于硬表面清洁剂(例如，消毒剂喷雾剂、液体或粉末)；洗碗或洗衣洗涤剂(液体或固体)、地板蜡、玻璃清洁剂等。
[0240] 示例性载体可包括水溶液，例如含有约0％至约98.8％(按组合物重量计)的水。另外，载体可含有醇水溶液。醇溶液中存在的醇的量将根据其中掺入该组合物的产品的类型而变化，比如说，擦拭巾中优选醇的量为约0％至约25％，而洗手液优选含有约60％至约95％的醇。因此，合适的皮肤病学上可接受的醇溶液或凝胶可含有按组合物重量计约0％至约95％的醇。
[0241] 适合包含在载体的醇溶液中的醇包括但不限于一元醇、二元醇及其组合。更优选的醇选自一元直链或支链C2-C18醇。最优选的醇选自乙醇、异丙醇、正丙醇、丁醇及其组合。含有醇溶液的清洁制剂可以是无水的或含水的。
[0242] 可以将增稠剂添加到水或醇中以形成凝胶。合适的增稠剂的实例包括但不限于天然存在的聚合物材料，例如海藻酸钠、黄原胶、温柏种子提取物、黄蓍胶、淀粉等，半合成聚合物材料、例如纤维素醚(例如羟乙基纤维素、甲基纤维素、羧甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素)、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇、瓜尔胶、羟丙基瓜尔胶、可溶性淀粉、阳离子纤维素、阳离子瓜尔胶等，以及合成聚合物材料如羧乙烯基聚合物、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇、聚丙烯酸聚合物、聚甲基丙烯酸聚合物、聚乙酸乙烯酯聚合物、聚氯乙烯聚合物、聚偏二氯乙烯聚合物等。也可以使用无机增稠剂，例如硅酸铝如膨润土，或聚乙二醇和聚乙二醇硬脂酸酯或二硬脂酸酯的混合物。
[0243] 除了上述化合物之外，清洁制剂还可含有一种或多种抗微生物剂或抗真菌剂。这些物剂能够破坏微生物，防止微生物的发展或防止微生物的致病作用。另外的抗微生物剂和抗真菌剂的实例包括β内酰胺药物、喹诺酮药物、环丙沙星、诺氟沙星、四环素、红霉素、阿米卡星、2,4,4'-三氯-2'-羟基二苯基醚 苯氧基乙醇、苯氧基丙醇、苯氧基异丙醇、强力霉素、卷曲霉素、氯己定、氯四环素、土霉素、克林霉素、乙胺丁醇、己脒、甲硝唑、喷他嗪、庆大霉素、卡那霉素、铁霉素、甲基环素、甲胺、米诺环素、新霉素、奈替米星、巴龙霉素、链霉素、妥布霉素、咪康唑、盐酸四环素、红霉素、锌红霉素、依托红霉素、硬脂酸红霉素、硫酸阿米卡星、盐酸强力霉素、硫酸卷曲霉素、葡萄糖酸洗必太、盐酸洗必太、盐酸金霉素、盐酸土霉素、盐酸克林霉素、盐酸乙胺丁醇、盐酸甲硝唑、喷他脒盐酸盐、硫酸庆大霉素、硫酸卡那霉素、lineomycin、盐酸甲烯盐酸盐、乌洛托品马尿酸盐、乌洛托品扁桃酸盐、盐酸米诺环素、硫酸新霉素、奈替米星、硫酸巴龙霉素、硫酸链霉素、硫酸妥布霉素、盐酸咪康唑、酮康唑、金刚烷胺盐酸盐、金刚烷胺硫酸盐、羟甲辛吡酮、氯间二甲苯酚、制霉菌素、托萘酯、羟基吡啶硫酮(尤其是吡啶硫酮锌、其也被称为ZPT)、二甲基二羟甲基乙内酰脲 甲
基氯/甲基异(卡松 )、亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、咪唑烷基脲 二偶氮烷
基脲(Germaill )、苄醇、2-溴-2-硝基丙烷-1,3-二醇 福尔马林(甲醛)、丁
基氨基甲酸碘丙烯酯(多相 )、氯乙酰胺、甲胺、甲基二溴腈戊二腈(1,2-二溴-2,4-二氰基丁烷或 )、戊二醛、5-溴-5-硝基-1,3-二恶烷 苯乙醇、邻苯基苯
酚/邻苯基苯酚钠、羟甲基甘氨酸钠 聚甲氧基双环恶唑烷 二甲
氧基硅烷、硫脲二氯苄醇、克菌丹、氯噻吩、二氯萘、氯丁醇、月桂酸甘油酯、2,4-卤代二苯醚等、4'-三氯-2'-羟基二苯醚( 或TCS)、2,2'-二羟基-5,5'-二溴二苯醚、酚类化合
物如苯酚、2-甲基苯酚、3-甲基苯酚、4-甲基苯酚、4-乙基苯酚、2,4-二甲基苯酚、2,5-二甲基苯酚、3,4-二甲基苯酚、2,6-二甲基苯酚、4-正丙基苯酚、4-n-丁基苯酚、4-正戊基苯酚、
4-叔戊基苯酚、4-正己基苯酚、4-正庚基苯酚、单-和多-烷基和芳族卤代苯酚、如对氯苯酚、甲基-氯酚、对氯苯基乙酯、对氯苯基正丙酯、对氯苯甲酸正丁酯、对氯苯甲醇、对羟基苯甲酚、对氯苯基正己酯、对氯苯环己烷、正庚基对氯苯酚、正辛基对氯酚、邻氯苯酚、甲基邻氯苯酚、邻氯苯酚、正丙基邻氯苯酚、正丁基邻氯苯酚、正戊基邻氯苯酚、正己基邻氯苯酚、正庚基邻氯苯酚、邻苄基对氯苯酚、邻苄基间甲基对氯苯酚、邻苄基-间、间二甲基对氯苯酚、对苯乙基对氯苯酚、邻苯乙基-间甲基对氯苯酚、3-甲基对氯苯酚、3,5-二甲基对氯苯酚、6-乙基1-3-甲基对氯苯酚、6-正丙基-3-甲基对氯苯酚、6-异丙基-3-甲基对氯苯酚、2-乙基-
3,5-二甲基对氯苯酚、6-仲丁基-3-甲基对氯苯酚、2-异丙基-3,5-二甲基对氯苯酚、6-二乙基甲基-3-甲基对氯苯酚、6-异丙基-2-乙基-3-对氯苯酚、2-仲基-3,5-二甲基对氯苯酚、2-二乙基甲基-3,5-二甲基对氯苯酚、6-仲辛基-3-甲基对氯苯酚、对氯-m-甲酚、对-溴苯酚、甲基对溴酚、乙基对溴苯酚、正丙基对溴苯酚、正丁基对-溴苯酚、正戊基对溴苯酚、仲戊基对溴苯酚、正己基对溴苯酚、环己基对溴苯酚、邻溴苯酚、叔戊基邻溴苯酚、正己基邻溴酚、正丙基-间、间-二甲基邻溴苯酚、2-苯基苯酚、4-氯-2-甲基苯酚、4-氯-3-甲基苯酚、4-氯-
3,5-二甲基苯酚、2,4-二氯-3,5-二甲基苯酚、3,4,5,6-四溴-2-甲基苯酚、5-甲基-2-戊基苯酚、4-异丙基-3-甲基苯酚、对-氯-间-二甲苯酚(PCMX)、氯代百里酚、5-氯-2-羟基二、间苯二酚及其衍生物、包括甲基间苯二酚、乙基间苯二酚、正丙基间苯二酚、正丁基间苯二酚、正戊基间苯二酚、正己基间苯二酚、正庚基间苯二酚、正辛基间苯二酚、正壬基间苯二酚、苯基间苯二酚、间苯二酚苄基、苯乙基间苯二酚、苯基丙基间苯二酚、对氯苄基间苯二酚、5-氯-2,4-二羟基二苯基甲烷、4'-氯-2,4-二羟基二苯基甲烷、5-溴-2,4-二羟基二苯基甲烷、和4'-溴-2,4-二羟基二苯基甲烷、双酚化合物如2、2'-亚甲基双(4-氯苯酚)、2,2'-亚甲基双(3,4,6-三氯苯酚)、2,2'-亚甲基双(4-氯-6-溴苯酚)、双(2-羟基)-3,5-二氯苯基)硫醚、和双(2-羟基-5-氯苄基)硫化物、苯甲酸酯(对羟基苯甲酸酯类)、如对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸异丙酯、防腐剂、苄酯、对羟基苯甲酸甲酯钠、和对羟基苯甲酸丙酯钠、卤代碳酰替苯胺(如3,4,4'-三氯卡巴利( 或TCC))、3-三氟甲基-4,4'-二氯卡巴利酰胺、3,3'、4-三氯碳酰替苯胺等)、
阳离子活性物质如苯扎氯铵和克霉唑。可用于所公开的组合物和方法的另一类抗微生物剂(特别是抗菌剂)是称为天然精油的所谓“天然”抗菌活性物质。典型的天然精油抗菌活性物质包括茴香油、柠檬油、橙油、迷迭香油、冬青油、百里香油、薰衣草油、丁香油、啤酒花、茶树、香茅油、小麦、大麦、柠檬草、雪松叶、雪松、肉桂、跳蚤草、天竺葵、檀香、紫罗兰、蔓越莓、桉树、马鞭草、薄荷、口香糖安息香、罗勒、茴香、冷杉、香脂、薄荷脑、淫羊藿、卡氏水仙、小檗科(Berberidaceae daceae)、Ratanhiae和姜黄。
基氯/甲基异(卡松 )、亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、咪唑烷基脲 二偶氮烷
基脲(Germaill )、苄醇、2-溴-2-硝基丙烷-1,3-二醇 福尔马林(甲醛)、丁
基氨基甲酸碘丙烯酯(多相 )、氯乙酰胺、甲胺、甲基二溴腈戊二腈(1,2-二溴-2,4-二氰基丁烷或 )、戊二醛、5-溴-5-硝基-1,3-二恶烷 苯乙醇、邻苯基苯
酚/邻苯基苯酚钠、羟甲基甘氨酸钠 聚甲氧基双环恶唑烷 二甲
氧基硅烷、硫脲二氯苄醇、克菌丹、氯噻吩、二氯萘、氯丁醇、月桂酸甘油酯、2,4-卤代二苯醚等、4'-三氯-2'-羟基二苯醚( 或TCS)、2,2'-二羟基-5,5'-二溴二苯醚、酚类化合
物如苯酚、2-甲基苯酚、3-甲基苯酚、4-甲基苯酚、4-乙基苯酚、2,4-二甲基苯酚、2,5-二甲基苯酚、3,4-二甲基苯酚、2,6-二甲基苯酚、4-正丙基苯酚、4-n-丁基苯酚、4-正戊基苯酚、
4-叔戊基苯酚、4-正己基苯酚、4-正庚基苯酚、单-和多-烷基和芳族卤代苯酚、如对氯苯酚、甲基-氯酚、对氯苯基乙酯、对氯苯基正丙酯、对氯苯甲酸正丁酯、对氯苯甲醇、对羟基苯甲酚、对氯苯基正己酯、对氯苯环己烷、正庚基对氯苯酚、正辛基对氯酚、邻氯苯酚、甲基邻氯苯酚、邻氯苯酚、正丙基邻氯苯酚、正丁基邻氯苯酚、正戊基邻氯苯酚、正己基邻氯苯酚、正庚基邻氯苯酚、邻苄基对氯苯酚、邻苄基间甲基对氯苯酚、邻苄基-间、间二甲基对氯苯酚、对苯乙基对氯苯酚、邻苯乙基-间甲基对氯苯酚、3-甲基对氯苯酚、3,5-二甲基对氯苯酚、6-乙基1-3-甲基对氯苯酚、6-正丙基-3-甲基对氯苯酚、6-异丙基-3-甲基对氯苯酚、2-乙基-
3,5-二甲基对氯苯酚、6-仲丁基-3-甲基对氯苯酚、2-异丙基-3,5-二甲基对氯苯酚、6-二乙基甲基-3-甲基对氯苯酚、6-异丙基-2-乙基-3-对氯苯酚、2-仲基-3,5-二甲基对氯苯酚、2-二乙基甲基-3,5-二甲基对氯苯酚、6-仲辛基-3-甲基对氯苯酚、对氯-m-甲酚、对-溴苯酚、甲基对溴酚、乙基对溴苯酚、正丙基对溴苯酚、正丁基对-溴苯酚、正戊基对溴苯酚、仲戊基对溴苯酚、正己基对溴苯酚、环己基对溴苯酚、邻溴苯酚、叔戊基邻溴苯酚、正己基邻溴酚、正丙基-间、间-二甲基邻溴苯酚、2-苯基苯酚、4-氯-2-甲基苯酚、4-氯-3-甲基苯酚、4-氯-
3,5-二甲基苯酚、2,4-二氯-3,5-二甲基苯酚、3,4,5,6-四溴-2-甲基苯酚、5-甲基-2-戊基苯酚、4-异丙基-3-甲基苯酚、对-氯-间-二甲苯酚(PCMX)、氯代百里酚、5-氯-2-羟基二、间苯二酚及其衍生物、包括甲基间苯二酚、乙基间苯二酚、正丙基间苯二酚、正丁基间苯二酚、正戊基间苯二酚、正己基间苯二酚、正庚基间苯二酚、正辛基间苯二酚、正壬基间苯二酚、苯基间苯二酚、间苯二酚苄基、苯乙基间苯二酚、苯基丙基间苯二酚、对氯苄基间苯二酚、5-氯-2,4-二羟基二苯基甲烷、4'-氯-2,4-二羟基二苯基甲烷、5-溴-2,4-二羟基二苯基甲烷、和4'-溴-2,4-二羟基二苯基甲烷、双酚化合物如2、2'-亚甲基双(4-氯苯酚)、2,2'-亚甲基双(3,4,6-三氯苯酚)、2,2'-亚甲基双(4-氯-6-溴苯酚)、双(2-羟基)-3,5-二氯苯基)硫醚、和双(2-羟基-5-氯苄基)硫化物、苯甲酸酯(对羟基苯甲酸酯类)、如对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸异丙酯、防腐剂、苄酯、对羟基苯甲酸甲酯钠、和对羟基苯甲酸丙酯钠、卤代碳酰替苯胺(如3,4,4'-三氯卡巴利( 或TCC))、3-三氟甲基-4,4'-二氯卡巴利酰胺、3,3'、4-三氯碳酰替苯胺等)、
阳离子活性物质如苯扎氯铵和克霉唑。可用于所公开的组合物和方法的另一类抗微生物剂(特别是抗菌剂)是称为天然精油的所谓“天然”抗菌活性物质。典型的天然精油抗菌活性物质包括茴香油、柠檬油、橙油、迷迭香油、冬青油、百里香油、薰衣草油、丁香油、啤酒花、茶树、香茅油、小麦、大麦、柠檬草、雪松叶、雪松、肉桂、跳蚤草、天竺葵、檀香、紫罗兰、蔓越莓、桉树、马鞭草、薄荷、口香糖安息香、罗勒、茴香、冷杉、香脂、薄荷脑、淫羊藿、卡氏水仙、小檗科(Berberidaceae daceae)、Ratanhiae和姜黄。
[0244] 清洁制剂可以包装在本领域技术人员已知的各种合适的包装中。液体制剂可以理想地包装在手动操作的喷雾分配容器中，该容器通常由合成的有机聚合物塑料材料制成。因此，设想了含有本文所述化合物并包装在喷雾分配器中的消毒制剂，优选包装在触发式喷雾分配器或泵式喷雾分配器中。喷雾型分配器允许均匀地施加本文所述的液体清洁制剂到相对大面积的待消毒表面。
[0245] 所公开的化合物，例如NSC309401或其衍生物，可以浸渍到非织造吸收性擦拭巾中。消毒湿巾在例如美国专利No.8,563,017中也有公开。所公开的化合物，例如NSC309401或其衍生物，可以是含水泡沫，其具有能够产生泡沫的特殊表面活性剂体系。参见美国专利No.8,097,265、美国专利No.5,891,922和美国专利No.4,889,645。
[0246] 所公开的化合物，例如NSC309401或其衍生物，可以在加压喷雾气溶胶中。还参见美国公开号20010053333，其公开了一种液体闪蒸干燥的气溶胶消毒剂组合物，该组合物具有闪蒸组分和有效量的抗微生物剂。
[0248] 使用方法本文公开的方法使用两种手段来抵抗细菌对抗菌剂的抗性。首先，该方法使用本文公开的化合物与现有抗生素的组合。该策略增加了细菌获得所需抗性因子以维持生存的障碍，同时减缓了抗性菌株的上升。本文所述的方法保留了现有抗生素的使用，这将延长这些抗生素的临床使用寿命，为开发新一代抗生素提供时间。这种组合治疗不仅对抗性菌株的出现产生了更大的障碍，而且本文公开的化合物增强了共同施用的抗生素的作用。第二种手段是靶向细菌的毒力因子。由于毒力因子是细菌存活的辅助基因，因此通过化学遗传学方法使这些基因失活不会对细菌构成直接的生长挑战。这反过来将降低发展逃逸突变体的可能性，从而减少抗性菌株的发展。
[0249] 因此，一些形式公开了通过向有需要的受试者给与有效量的一种或多种根据任一式的化合物(化合物2-化合物82)，来治疗或预防该受试者中的微生物感染的方法，所述微生物感染例如但不限于金黄色葡萄球菌(Staphyloccous aureus)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes)、洋葱伯克霍尔德菌(Burkholderia cepacia)、大肠杆菌(Escherichia coli)、粪肠球菌
(Enterococcus faecalis)、肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)感染。在一些形式中，该方法还包括给予有效量的至少一种抗生素，例如庆大霉素、阿米卡星、卡那霉素、新霉素、壮观霉素、新毒胺或其任何组合。抗生素可以在给与该化合物的同时、之前或之后给与。
此外，抗生素和公开的化合物的给与可以是以所给与的药物组合物的形式同时给与。
(Enterococcus faecalis)、肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)感染。在一些形式中，该方法还包括给予有效量的至少一种抗生素，例如庆大霉素、阿米卡星、卡那霉素、新霉素、壮观霉素、新毒胺或其任何组合。抗生素可以在给与该化合物的同时、之前或之后给与。
此外，抗生素和公开的化合物的给与可以是以所给与的药物组合物的形式同时给与。
[0250] 给与可以是在受试者体内局部给与(局限于单个细胞或组织)和/或全身给与。可能需要将化合物/抗生素和所公开的药物组合物局部给与需要治疗的区域，例如感染区域。这种给与方法可以通过例如但不限于手术期间的局部输注、局部应用(例如，与手术后的伤口敷料结合)、通过注射、通过导管或通过植入(例如，多孔膜)来实现。
[0251] 在一些形式中，化合物/抗生素或药物组合物可以在控释系统中递送。这些方法可包括使用泵进行给药(例如，使用静脉内滴注)。在另一种形式中，控释系统可以放置在治疗目标附近(例如，感染部位)，如果全身给药，则仅需要所要求的剂量的一部分。
[0252] 在其他形式中，所公开的小分子用作先导化合物以供进一步修饰以产生更有效和特异性的治疗。
[0253] 微生物可以用所公开的化合物抑制的示例性微生物包括但不限于金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、洋葱伯克霍尔德菌(Burkholderia cepacia)、粪肠球菌(Enterococcus faecalis)、屎肠球菌(Enterococcus faecium)和肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)。优选的形式包括金黄色葡萄球菌的耐甲氧西林菌株和多重耐药性单核细胞增生李斯特氏菌，铜绿假单胞菌，洋葱伯克霍尔德菌，粪肠球菌，肺炎链球菌。
[0254] 可以治疗的其他细菌包括但不限于不动细菌属(Acinteobacter)、Antinomies、项圈藻(Anabaena)、芽孢杆菌属(Bacillus)、拟杆菌属(Bacteroides)、蛭弧菌属(Bdellovibrio)、博德特氏菌属(Bordetella)、包柔氏螺旋体菌属(Borrelia)、弯曲杆菌属(Campylobacter)、茎菌属(Caulobacter)、衣原体(Chlamydia)、绿菌属(Chlorobium)、着色菌属(Chromatium)、梭菌属(Clostridium)、棒状杆菌属(Corynebacterium)、噬纤维菌属(Cytophaga)、奇异球菌属(Deinococcus)、肠杆菌属(Enterobacter)、肠球菌属
(Enterococcus)、埃希氏菌属(Escherichia)、弗朗西斯菌属(Francisella)、盐杆菌属(Halobacterium)、螺杆菌属(Heliobacter)、嗜血杆菌属(Haemophilus)、B型流感嗜血杆菌(Hemophilus influenza type B,HIB)、生丝微菌属(Hyphomicrobium)、克雷伯氏菌属(Klebsiella)、军团菌属(Legionella)、细螺旋体病(Leptspirosis)、李斯特菌属
(Listeria)、脑膜炎球菌(Meningococcus)A、B和C、甲烷杆菌属(ethanobacterium)、微球菌属(Micrococcus)、分支杆菌属(Myobacterium)、支原体(Mycoplasma)、粘球菌属
(Myxococcus)、奈瑟氏菌属(Neisseria)、硝化杆菌属(Nitrobacter)、颤藻属
(Oscillatoria)、原绿藻属(Prochloron)、变形杆菌属(Proteus)、假单胞菌属
(Pseudomonas)、红螺菌属(Phodospirillum)、立克次氏体属(Rickettsia)、沙门氏菌属(Salmonella)、志贺氏菌属(Shigella)、螺菌属(Spirillum)、螺旋体属(Spirochaeta)、葡萄球菌属(Staphylococcus)、链球菌属(Streptococcus)、链霉菌属(Streptomyces)、硫化叶菌属(Sulfolobus)、热原体属(Thermoplasma)、硫杆菌属(Thiobacillus)密螺旋体属(Treponema)、弧菌属(Vibrio)和尔森氏菌属(Yersinia)。
(Enterococcus)、埃希氏菌属(Escherichia)、弗朗西斯菌属(Francisella)、盐杆菌属(Halobacterium)、螺杆菌属(Heliobacter)、嗜血杆菌属(Haemophilus)、B型流感嗜血杆菌(Hemophilus influenza type B,HIB)、生丝微菌属(Hyphomicrobium)、克雷伯氏菌属(Klebsiella)、军团菌属(Legionella)、细螺旋体病(Leptspirosis)、李斯特菌属
(Listeria)、脑膜炎球菌(Meningococcus)A、B和C、甲烷杆菌属(ethanobacterium)、微球菌属(Micrococcus)、分支杆菌属(Myobacterium)、支原体(Mycoplasma)、粘球菌属
(Myxococcus)、奈瑟氏菌属(Neisseria)、硝化杆菌属(Nitrobacter)、颤藻属
(Oscillatoria)、原绿藻属(Prochloron)、变形杆菌属(Proteus)、假单胞菌属
(Pseudomonas)、红螺菌属(Phodospirillum)、立克次氏体属(Rickettsia)、沙门氏菌属(Salmonella)、志贺氏菌属(Shigella)、螺菌属(Spirillum)、螺旋体属(Spirochaeta)、葡萄球菌属(Staphylococcus)、链球菌属(Streptococcus)、链霉菌属(Streptomyces)、硫化叶菌属(Sulfolobus)、热原体属(Thermoplasma)、硫杆菌属(Thiobacillus)密螺旋体属(Treponema)、弧菌属(Vibrio)和尔森氏菌属(Yersinia)。
[0255] 在一种优选形式中，本文公开的组合物用作由耐甲氧西林金黄色葡萄球菌引起的皮肤感染的局部抗菌药物。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)是一种对许多抗生素有抗药性的细菌。疾病预防控制中心鼓励临床医生在与金黄色葡萄球菌感染相容的皮肤和软组织感染(SSTIs)的鉴别诊断中考虑MRSA，特别是那些化脓性感染(波动或可触及的充满液体的腔，黄色或白色中心，中心点或“头”，引流脓，或可能用针或注射器吸脓)。患者诉说“蜘蛛咬伤”，应怀疑是否是金黄色葡萄球菌感染。<0}在社区，大多数MRSA感染是皮肤感染。在其他形式中，该组合物可用于治疗住院或免疫功能不全患者中由耐甲氧西林金黄色葡萄球菌引起的肺或血液的全身性感染。在医疗机构中，MRSA会导致危及生命的血液感染、肺炎和手术部位感染。
[0256] 由MRSA引起的疾病谱似乎与社区中的金黄色葡萄球菌相似。软组织感染(SSTIs)，特别是疔疮(脓肿的毛囊或“疖子”)、痈(聚集的毛囊肿块)和脓肿，是最常报道的临床表现。社区相关MRSA最常见的表现是单纯的皮肤感染，如脓疱病、疖子、脓肿、毛囊炎和蜂窝织炎。
较为罕见但更严重的表现可能会出现、如坏死性筋膜炎和脓性肌炎(在热带地区最常见的)、坏死性肺炎、感染性心内膜炎(影响心脏的阀门)以及骨和关节感染。其他病症包括严重或广泛的疾病(例如，涉及多个感染位点)或在相关蜂窝组织炎存在下快速发展、全身性疾病的征候和症状、相关的共病或免疫抑制、年龄极限、在难以引流的区域(例如脸、手和生殖器)的脓肿、相关联的脓毒性静脉炎、以及缺乏对单独切口和引流的响应、化脓性蜂窝织炎、并发SSTI的住院患者(cSSTI；定义为患者具有较深的软组织感染、外科手术/外伤性伤口感染及感染的溃疡和烧伤)、骨髓炎、器械相关的骨关节感染、轻微皮肤感染的儿童(如脓疱病)和继发感染的皮肤病变(如湿疹、溃疡或撕裂伤)。本文公开的组合物还可用于治疗CNS的MRSA感染，其包括但不限于脑膜炎，脑脓肿，硬膜下积脓，脊髓硬膜外脓肿(Liu等人,Clin Infect Dis.,52(3):e18-55(2011)综述)。
较为罕见但更严重的表现可能会出现、如坏死性筋膜炎和脓性肌炎(在热带地区最常见的)、坏死性肺炎、感染性心内膜炎(影响心脏的阀门)以及骨和关节感染。其他病症包括严重或广泛的疾病(例如，涉及多个感染位点)或在相关蜂窝组织炎存在下快速发展、全身性疾病的征候和症状、相关的共病或免疫抑制、年龄极限、在难以引流的区域(例如脸、手和生殖器)的脓肿、相关联的脓毒性静脉炎、以及缺乏对单独切口和引流的响应、化脓性蜂窝织炎、并发SSTI的住院患者(cSSTI；定义为患者具有较深的软组织感染、外科手术/外伤性伤口感染及感染的溃疡和烧伤)、骨髓炎、器械相关的骨关节感染、轻微皮肤感染的儿童(如脓疱病)和继发感染的皮肤病变(如湿疹、溃疡或撕裂伤)。本文公开的组合物还可用于治疗CNS的MRSA感染，其包括但不限于脑膜炎，脑脓肿，硬膜下积脓，脊髓硬膜外脓肿(Liu等人,Clin Infect Dis.,52(3):e18-55(2011)综述)。
[0257] 本文公开的组合物还可用于治疗受试者中特别是免疫受损患者中由大肠杆菌菌株(耐药性或其他性质)引起的感染。大肠杆菌是许多常见细菌感染的最常见原因之一，包括胆囊炎、菌血症、胆管炎、尿道感染等其他临床感染，如新生儿脑膜炎和肺炎。例如，该组合物可用于治疗免疫受损患者中由大肠杆菌菌株(耐药性或其他性质)引起的社区和/或医院获得性尿道感染(UTI)所造成的病症。
[0258] 可以用本文公开的化合物靶向的其他抗生素抗性微生物包括肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)、弯曲杆菌(Campylobacter)、淋病奈瑟氏球菌(Neisseria gonorrhoeae)、沙门氏菌(Salmonella)(包括耐药性非伤寒沙门氏菌和耐药性沙门氏菌伤寒血清型)、志贺氏菌(Shigella)、耐万古霉素肠球菌(VRE)、耐万古霉素金黄色葡萄球菌(VRSA)、耐红霉素A群链球菌、耐克林霉素B群链球菌、耐碳青霉烯肠杆菌科(CRE)、耐药结核病菌、广谱肠杆菌科(ESBL)、多重耐药不动杆菌(包括MRAB)、艰难梭菌(Clostridium difficile)、肠致病性大肠杆菌(EPEC)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、幽门螺杆菌(H.pylori)、咽峡炎链球菌(Streptococcus anginosus)和尿道病原性大肠杆菌(UPEC)。
[0259] 治疗方法1.感染
所公开的化合物及其衍生物及其组合，可以如上所述以能有效改善或治疗由上述感染受试者(优选人受试者)的微生物引起的感染所造成的症状的量给予。感染可以是全身性的或局部的。感染可以是皮肤、眼睛、喉咙、鼻子或耳朵的感染，或者是包括但不限于肺、肠、心脏、脑和肝的任何器官的感染。感染可以是脓肿或伤口。
所公开的化合物及其衍生物及其组合，可以如上所述以能有效改善或治疗由上述感染受试者(优选人受试者)的微生物引起的感染所造成的症状的量给予。感染可以是全身性的或局部的。感染可以是皮肤、眼睛、喉咙、鼻子或耳朵的感染，或者是包括但不限于肺、肠、心脏、脑和肝的任何器官的感染。感染可以是脓肿或伤口。
[0260] 在某些形式中，可能可取的是向有需要的患者提供一种或多种化合物的连续递送。对于静脉内或动脉内途径，这可以使用滴注系统完成，例如通过静脉内给予。对于局部应用，可以进行重复施用，或者可以使用贴剂长时间连续给予该化合物。
[0261] 由于所公开的化合物的增效作用，在一些形式中，分开给予、同时给予或依次给予的一种或多种抗微生物剂(包括一种或多种抗生素)的量，可小于该一种或多种抗微生物剂(包括一种或多种抗生素)当给予未接受所公开的化合物的患者或动物时的治疗有效剂量或治疗最佳剂量。在一些形式中，给予的一种或多种抗微生物剂，可以比该一种或多种抗生素当给予未接受所公开的化合物的患者或动物时的治疗有效剂量或治疗最佳剂量小5％、10％、15％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％或更多。在另一种形式中，接受该第二形式的治疗或预防的患者的治疗持续时间，可以比当该患者或动物不接受所公开的化合物时的治疗持续时间少5％、10％、15％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％或更多。
[0262] 用作灭菌剂本文所公开的化合物可用作灭菌剂，例如用于高风险环境，如来自医院或医疗机构的硬件。世界卫生组织(WHO)估计，全世界有超过140万人受到医院感染的影响。清洁、消毒和灭菌可以挽救生命并改善患者的治疗效果。发达国家中入住现代医院的患者中有5％至10％会受到一种或多种与医疗保健相关的感染。美国疾病控制和预防中心(CDC)估计，美国每年约有170万例医疗相关感染发生在医院，并且每年有近100,000人死亡。医疗保健相关感染也是包括疗养院和康复单位在内的长期护理机构中的一个重要问题。医疗保健相关病原体的传播最常经由医护人员的手发生，他们在各种患者护理活动中无意中污染了他们的手。不太经常的情况是，医疗保健机构中受污染的表面可能会导致与医疗保健相关的病原体的传播。
[0263] 医疗保健机构中使用的不同消毒水平可以通过Spaulding的分类法来定义(Sehulster等，Guidelines for environmental infection control in health-care facilities.Recommendations from CDC and the Healthcare Infection Control Practices Advisory Committee(HICPAC)(卫生保健机构的环境感染控制指南。CDC和医疗感染控制措施咨询委员会(HICPAC)的建议)；美国伊利诺伊州芝加哥市；American Society for Healthcare Engineering/American Hospital Association(美国医疗保健工程协会/美国医院协会)；2004)。Spaulding的非关键水平、半关键水平和关键水平是基于通过设备、仪器和家具传播的传染病的潜在可能性以及与其接触的身体部位通常所需的无菌水平。与Spaulding分类法相关的消毒水平是低、中、高和无菌。美国疾病控制中心(CDC)在其“Guidelines for Environmental Infection Control in Health-Care Facilities”(“卫生保健设施的环境感染控制指南”)中进一步描述了环境表面的消毒水平。
[0264] 关键物品如果受到任何微生物污染，会带来很高的感染风险。因此，进入无菌组织或血管系统的物体必须是无菌的，因为任何微生物污染都可能传播疾病。此类别包括手术器械、心脏导管和导尿管、植入物和无菌体腔中使用的超声探头。半关键物品接触粘膜或破损皮肤。此类别包括呼吸治疗和麻醉设备、一些内窥镜、喉镜窥视片、食道测压探头、膀胱镜、肛门直肠测压导管和膈肌配件环。这些医疗器械应不含任何微生物；但是，允许少量细菌孢子。关键或半关键仪器的具体实例包括侵入式内窥镜(腹腔镜)和没有操作通道的刚性器械。插入无菌体腔的关节镜和腹腔镜以及辅助器械应该是无菌的。其他例子包括胃镜、十二指肠镜、乙状结肠镜、直肠镜、结肠镜、支气管镜和喉镜。
[0265] 其他使用方法此外，本领域技术人员将理解，所描述的治疗方法不仅适用于受试者的治疗，而且可以体内、离体或体外应用于细胞培养物、器官、组织或个体细胞。
[0266] 药盒此外，如果使用包装材料包装该药物组合物，该包装材料可以是生物惰性的或缺乏生物活性，例如塑料聚合物，硅酮等，并且可以由受试者体内处理而不影响其所包装和/或递送的化合物/抗生素的有效性。
[0267] 另外，该化合物和/或药物组合物可与本文公开的抗生素一起包装，优选的抗生素包括但不限于庆大霉素、阿米卡星、卡那霉素、新霉素、壮观霉素、新毒胺或其任何组合。
[0268] 无需进一步详述，相信本领域技术人员可以使用前述说明最大限度地利用所公开的化合物、组合物和方法。提供以下实施例是为了说明，而不是为了限制。虽然已经提供了具体示例，但是以上描述是说明性的而非限制性的。所描述的形式的任何一个或多个特征可以以任何方式与任何其他描述的形式的一个或多个特征组合。此外，在阅读说明书后，所公开的化合物、组合物和方法的许多变化对于本领域技术人员而言将变得显而易见。
[0269] 本文所述的方法、化合物和组合物在以下实施例中进一步说明，这些实施例是以举例说明的方式提供的，而不是限制性的。应当理解，所示组分的比例变化和要素替代对于本领域技术人员而言是显而易见的，并且在所公开的形式的范围内。提出了理论方面的内容，但应理解，本申请人并不旨在受所提出的理论的约束。除非另有说明，所有份数或量均以重量计。实施例
[0270] 材料和方法细菌菌株：Mu3(ATCC 700698)、USA300、COL是金黄色葡萄球菌的耐甲氧西林菌株。Newman、ATCC29213、RN4220、RN6390是对甲氧西林敏感的菌株。AE-052、ST-45-502、ST-239-IIIA-503、ST-239-III-AH-504是得自香港玛丽医院的临床分离株。单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)PA01、肺炎链球菌(Streptococccu.pneumonia)R6是参考菌株，洋葱伯克霍尔德菌
(Burkholderia cepacia)、粪肠球菌(Enterococcus faecalis)、大肠杆菌(Escherichia coli)(NDM-1)是得自香港玛丽医院的多重抗药性临床分离株，大肠杆菌(IMP)是实验室菌株[去除]。所有细菌在37℃下在相应的生长培养基脑心浸液(BHI)肉汤(OXOID)、Mueller Hinton(MH)肉汤(BD)或经阳离子调整的Mueller Hinton(CAMH)肉汤(BD)中培养。
(Burkholderia cepacia)、粪肠球菌(Enterococcus faecalis)、大肠杆菌(Escherichia coli)(NDM-1)是得自香港玛丽医院的多重抗药性临床分离株，大肠杆菌(IMP)是实验室菌株[去除]。所有细菌在37℃下在相应的生长培养基脑心浸液(BHI)肉汤(OXOID)、Mueller Hinton(MH)肉汤(BD)或经阳离子调整的Mueller Hinton(CAMH)肉汤(BD)中培养。
[0271] 药物库和化学品：结构多样化的小分子化合物库用于高通量筛选。小分子化合物购自Chembridge。庆大霉素(Sigma-Aldrich)、卡那霉素(Sigma-Aldrich)、阿米卡星(Sigma-Aldrich)、壮观霉素(Sigma-Aldrich)、新霉素(Sigma-Aldrich)、新毒胺(Sigma-Aldrich)在最低抑制浓度(MIC)测试、高通量筛选、纸盘测定和方格测定中使用。
[0272] 最小抑制浓度(MIC)测试。在具有适当生长培养基肉汤的96孔微量滴定板中用肉汤微量稀释法测定细菌对抗生素的MIC。为了测定小分子化合物的MIC，首先将化合物在DMSO中进行两倍连续稀释，将1μL的每个稀释液加入96孔微量滴定板中，得到所需浓度。所有测试一式三份进行并重复进行。
[0273] 高通量筛选(HTS)。使用以下设施进行初步HTS筛选：定制的机器人筛选平台，全自动Beckman Coulter核心系统(Fullerton)，集成了液体处理器、洗涤器、多滴液体分配器(Thermo Scientific)，Kendro机器人CO2培养箱(Thermo Fisher Scientific)和DTX 880多模式读板器(Beckman coulter)。将化学文库预先等分到384孔微量滴定板中，筛选时，得到每孔50μL BHI培养基中20μg/mL的化合物终浓度。所有筛选均在384孔聚苯乙烯微量滴定板(Greiner Bio-One)中完成。用BHI培养基洗涤Mu3的过夜培养物3次，稀释并平板接种，得到每孔5x 105CFU/mL。将板在37℃下孵育16小时，并使用自动DTX 880多模式检测器通过595nm处的光密度读数监测生长。使用BHI培养基进行的筛选被指定为背景筛选。使用含有亚MIC浓度的抗生素的培养基，来筛选显示与各种抗生素的协同特性的潜在化学化合物。选择抗生素的亚MIC浓度用于筛选。含有156.25μg/mL的庆大霉素终浓度的BHI相应地用于各个实验。数据分析由Capilano大学的Jason Madar编制的定制设计的数据分析软件完成。用背景筛选将用各种抗生素得到的筛选结果归一化以计算生长抑制的百分比。选择具有潜在抗生素活性增强作用的化合物进行二次筛选以验证命中结果。
[0274] 将所选的化合物以与初步筛选制备类似的不同浓度进行制备。除了测试不同浓度的所选化合物外，实验程序同初步筛选程序。选择在亚MIC抗生素存在下显示细菌生长抑制的化合物用于更详细的表征。
[0275] 方格测定。在96孔微量滴定板中进行方格测定。首先如本文先前所述测定化学化合物MIC。沿纵坐标将抗生素进行2倍连续稀释，沿横坐标添加化合物以产生化合物和抗生素之间的方格浓度梯度。将细菌培养物覆盖并孵育过夜。通过595nm处的OD吸光度监测细菌生长。
[0276] 细胞毒性测定。根据产品说明书在Vero细胞上对所选化合物进行MTT测定。
[0277] 纸盘扩散测定。通过将10μL的5mM化合物或适量的抗生素浸入8mm直径的滤纸盘中，进行纸盘扩散测定。然后将滤纸盘放在BHI琼脂上经均匀拭抹的细菌菌苔上，并在37℃下生长过夜。较大的抑制区对应于较小的MIC。
[0278] 纸盘扩散和lux测定。将携带hla-启动子lux报告系统的生物发光金黄色葡萄球菌单菌落重悬于200μl无菌水中，1000倍稀释到0.7％(w/v)BHI琼脂中并覆盖到BHI琼脂平板上。将溶解在DMSO中的10μl 50mM类似物化合物浸渍到纸盘中并置于细菌菌苔上。将板在37℃下温育过夜。用Xenogen IVIS100体内成像系统(Xenogen，美国加州Alameda)检测发光。
[0279] 化合物选择性优化。选择得自初步筛选的先导化合物，搜索并订购该化合物的类似物以获得性能更好的化合物。测定类似物的MIC和MTT。通过比较化合物毒性与化合物功效，计算每种化合物的选择性指数。
[0280] 体内实验。所有动物实验均按照香港大学实验动物单位(Laboratory Animal Unit,LAU)的规则进行。用4X108CFU的金黄色葡萄球菌感染6-8周龄的雌性BALB/c小鼠。在感染前一天对化合物3或注射缓冲液对照(含有5％DMSO和2％吐温80的PBS)进行预处理，感染后每天给予两次剂量。感染后3天，对动物实施安乐死；将肾脏、肝脏和脾脏在PBS中匀浆，并接种在BHI琼脂上进行定量细菌培养。
[0281] 结果根据微量肉汤稀释方法，进行三种抗生素(庆大霉素、头孢曲松和左氧氟沙星)对MRSA Mu3的MIC值的初步测试。这是为了建立参考，以便将适量的抗生素用于HTS，以鉴定出可能具有协同活性或增强抗生素的抗微生物作用的化合物。庆大霉素对MRSA Mu3的MIC值确定为1000μg/mL。经调整的亚MIC浓度的抗生素用于筛选；156.25μg/mL的庆大霉素终浓度用于各个筛选实验。
[0282] 在普通BHI中对Mu3菌株进行最终浓度为20μg/mL的结构多样化小分子文库的高通量筛选。通过OD读数监测生长。该筛选是为了起始每种化合物对Mu3菌株的背景抗微生物活性。随后将其与含有亚MIC浓度的抗生素的各个筛选进行比较。抗生素增强性化合物理想地在背景筛选中没有背景抗微生物活性，并且在亚MIC浓度的抗生素存在下表现出生长抑制。在用背景筛选对亚MIC筛选进行归一化之后，通过初始筛选分离初步命中化合物。对所选化合物进行二次筛选，以改善和验证小分子与抗生素的组合效应。
[0283] 最终确定化合物13以进行更深入的研究。该化合物没有显示MIC的迹象，直至未确定的浓度，其中化合物溶解度限制了待测试的较高浓度。
[0284] 用该先导化合物即化合物13对庆大霉素(图1)和其他氨基糖苷类阿米卡星(图2)、卡那霉素(图3)、新霉素(图4)、壮观霉素(图5)、新毒胺(图6)进行方格试验。所有测试的抗生素可以被化合物13增强并显示出组合改善。
[0285] 化合物13还可以在其他金黄色葡萄球菌菌株中表现出与庆大霉素的组合效应。该效应可以在庆大霉素敏感菌株如ATCC 29213(图7)、Newman(图8)、RN4220(图9)、USA300(图10)、COL(图11)、RN6390(图12)、ST-45-502(图13)和AE-052(图14)以及庆大霉素抗性菌株如ST-239-III-AH-504(图15)、ST-239-III-AH-503(图16)中看出。
[0286] 化合物13证明了其在金黄色葡萄球菌中的氨基糖苷增强性特性，购买化合物13的结构类似物用于优化先导化合物。进行二次筛选，用不同浓度的每种类似物化合物与不同庆大霉素浓度进行测试，将50μM、20μM和5μM化合物浓度用于含0μg/ml、100μg/ml和200μg/ml庆大霉素的BHI。选择在筛选中显示活性的类似物(图17、18、19)，总结于表1中。
[0287] 表1.总结各种浓度的类似物与各种浓度的庆大霉素进行二次筛选得到的用数值表示的相对生长。
[0288]*表示相对生长小于40％，**表示化合物定向生长抑制。+/-表示对hla启动子的诱导或抑制。
[0289] 进行结构和功能分析以缩小功能核心结构(表2、3、4、5)。
[0290] 表2.在50μM化合物浓度和200μg/ml庆大霉素下具有超过30％生长抑制的化合物的结构功能分析表2显示了具有超过30％生长抑制的所选类似物的结构功能分析，化合物浓度为50μM和200μg/ml庆大霉素。分析表明，一些功能基团可以改善组合生长抑制效应，并在较低的庆大霉素浓度下保持金黄色葡萄球菌Mu3的生长抑制。
[0291] 表3.在50μM化合物浓度和200μg/ml庆大霉素下具有超过30％生长抑制的化合物的结构功能分析表3显示了具有超过30％生长抑制的所选类似物的结构功能分析，化合物浓度为50μM和200μg/ml庆大霉素。分析表明，一些功能基团可以改善组合生长抑制效应，并在较低的庆大霉素浓度下保持金黄色葡萄球菌Mu3的生长抑制。
[0292] 表4.在50μM化合物浓度和200μg/ml庆大霉素下具有超过30％生长抑制的化合物的结构功能分析表4显示了具有超过30％生长抑制的所选类似物的结构功能分析，化合物浓度为50μM和200μg/ml庆大霉素。分析表明，一些功能基团可以改善组合生长抑制效应，并在较低的庆大霉素浓度下保持金黄色葡萄球菌Mu3的生长抑制。
[0293] 表5.在50μM化合物浓度和200μg/ml庆大霉素下具有超过30％生长抑制的化合物的结构功能分析表5显示了具有超过30％生长抑制的所选类似物的结构功能分析，化合物浓度为50μM和200μg/ml庆大霉素。分析表明，一些功能基团可以提高组合生长抑制效应，并在较低的庆大霉素浓度下保持金黄色葡萄球菌Mu3的生长抑制。
[0294] 纸盘测定用于直接评估具有强效活性的所选化合物的增强效应。对所选化合物即化合物13(图20)、化合物17(图21)、化合物19(图22)、化合物20(图23)、化合物36(图24)和化合物82(图25)进行方格测定。在Vero细胞中用MTT测定法测试这6种化合物的细胞毒性，结果总结在表6中。
[0295] 表6.所选的化合物及其属性的总结表所测试的类似物化合物的纸盘扩散和lux测定揭示了一些类似物的抗毒力性质，总结在表1中。化合物3的其他类似物的测试鉴定了一些潜在的毒力因子抑制剂，表3。
[0297]化合物编号 MIC(μM) 相对lux信号
3 500 0.00439
83 500 0.83975
84 500 0.7261
85 500 0.80121
86 500 0.6369
87 500 0.2657
88 500 0.97768
89 500 0.9655
90 500 1.1926
91 500 0.97015
92 500 0.83975
作为处理的所选化合物3显示了使用Mu3菌株的BALB/c小鼠感染模型中肾脏(图26)、脾脏(图27)和肝脏(图28)细菌负荷的减少。在使用USA300菌株的BALB/c小鼠感染模型中也观察到类似的结果，脾脏(图29)和肝脏(图30)细菌负荷减少。
3 500 0.00439
83 500 0.83975
84 500 0.7261
85 500 0.80121
86 500 0.6369
87 500 0.2657
88 500 0.97768
89 500 0.9655
90 500 1.1926
91 500 0.97015
92 500 0.83975
作为处理的所选化合物3显示了使用Mu3菌株的BALB/c小鼠感染模型中肾脏(图26)、脾脏(图27)和肝脏(图28)细菌负荷的减少。在使用USA300菌株的BALB/c小鼠感染模型中也观察到类似的结果，脾脏(图29)和肝脏(图30)细菌负荷减少。
[0298] 测试所选化合物82对其他细菌的活性。进行方格测定以评估对其他革兰氏阳性细菌单核细胞增生李斯特菌(L.monocytogenes)(图31)、粪肠球菌(E.faecalis)(图32)和肺炎链球菌(S.pneumoniae)(图34)的活性。在单核细胞增生李斯特菌、粪肠球菌和肺炎链球菌中观察到在化合物82存在下的庆大霉素增强效应。此外，化合物82还显示了对革兰氏阴性细菌大肠杆菌(E.coli)的协同效应(图33)。化合物82还可以通过抑制铜绿假单胞菌(P.aeruginosa)和洋葱伯克霍尔德菌(B.cepacia)中的色素形成来介导对其他革兰氏阴性细菌的毒力抑制。最后，化合物82(图35)在新毒胺存在下保持其对金黄色葡萄球菌(S.aureus)的增强效应。
[0299] 讨论以前，通过高通量筛选平台，本申请人成功分离了靶向甲型流感病毒核蛋白的小分子nucleozin(Kao等，Nature biotechnology,28(6):600-605(2010))。筛选了该结构多样化小分子化合物库。通过以20μg/mL的终浓度进行背景筛选(用BHI培养基筛选，不含抗生素)，筛选中排除了具有直接细菌抑制作用的小分子化合物。在亚MIC抗生素存在下进行的筛选，可以鉴定出与抗生素相组合具有潜在细菌生长抑制效应的小分子。选择显示与抗生素具有组合效应的前10％化合物用于进一步研究。进行双浓度二次筛选；加入终浓度为100μg/mL和10μg/mL的化合物。该方法通过减少初步筛选的假阳性以及加强成功的可重复性来改进筛选结果。
[0300] 对得自二次筛选的最佳化合物进行进一步分析。首先表征该化合物(化合物13)在Mu3中的MIC。测试的浓度范围为500μM至0.98μM。未测定高于500μM的MIC。在MIC测定之后，进行化合物13对不同氨基糖苷的方格测定以评估氨基糖苷组合效应。分数抑制浓度(FIC)指数通常用于评估组合效应(Meletiadis等，Antimicrobial agents and chemotherapy,54(2):602-609(2010))。小于或等于0.5的FIC指数被认为具有协同效应，但对于高于500μM的化合物MIC(其实际MIC无法测定)，如果生长抑制所需的抗生素浓度降低至少4倍抗生素MIC的话，则被认为具有增强效应。
[0301] 通过相续的筛选过程，本申请人能够从化合物库聚焦到先导化合物，以便将来对抗生素增效剂进行化学优化。如所示，化合物13与通常用于临床环境的氨基糖苷类庆大霉素、卡那霉素、阿米卡星、新霉素和壮观霉素组合显示出增效作用。此外，在化合物浓度约为50μM时，它可以将抗生素MIC降低到相应的临床转效点以下，从而使得无效的抗生素可再次用于MRSA治疗。新毒胺代表了在临床环境中使用的所有氨基糖苷类共有的核心结构。此外，构建了用于新型氨基糖苷类抗生素筛选的新毒胺衍生物库。化合物13显示出与新毒胺的增强效应，进一步表明增效效应是氨基糖苷类家族中的广谱特征。
[0302] 本申请人证实，其他金黄色葡萄球菌菌株对化合物13和庆大霉素的抗生素增效效应表现出相似的观察结果。无论庆大霉素敏感性如何，所有测试的菌株都显示出在化合物13存在下对庆大霉素的易感性增强。这为金黄色葡萄球菌感染提供了有用的抗生素鸡尾酒疗法。
[0303] 本申请人在先导化合物优化筛选中鉴定了几种强效的类似物化合物，其在与庆大霉素的组合使用中提供增强效应。化合物13、17、36显示出对庆大霉素的增强活性，但伴随着高细胞毒性(由Vero细胞MTT测定得出)。发现化合物19、20具有较低的细胞毒性，同时保持了与庆大霉素的有希望的增强效应。最后发现化合物82表现出低细胞毒性并维持与庆大霉素一起对金黄色葡萄球菌的良好增强效应水平。
[0304] 本申请人将化合物82的有效宿主范围扩展到其他测试的细菌种类，包括革兰氏阳性单核细胞增生李斯特菌、粪肠球菌和肺炎链球菌，革兰氏阴性细菌大肠杆菌。本申请人还证明化合物82可以通过抑制铜绿假单胞菌和洋葱伯克霍尔德菌中的对于在宿主中的定殖很重要的色素形成，来引发对其他革兰氏阴性细菌的毒力抑制。
[0305] 本申请人还发现，除了与现有抗生素的组合效应作为潜在的治疗选择之外，一些化合物本身可以抑制毒力活动。化合物3、48、49在hla启动子lux报道分子测定中显示出显著的抑制。本申请人已经证明使用化合物3作为抗毒力的这一构想可以减少体内小鼠模型中器官的细菌负荷，表明化合物类似物本身可以是细菌感染的治疗方法。化合物3的类似物如化合物87也显示了hla启动子lux抑制，提示该化合物的抗毒力性质。
[0306] 本申请人证明了使用HTS来分离与氨基糖苷类一起对细菌具有增强效应的小分子化合物是成功的。该化合物家族本身也可以作为抗毒力剂来降低细菌的感染性。该化合物可用于下游化学优化，以提高与抗生素的组合效应并增强抗毒力性质，同时提供细胞毒性的降低。所公开化合物的生物活性是新颖的，并且它们提供商业应用以增强常用抗生素的活性以及抗毒力用途。
[0307] 虽然在前面的说明书中，已经就所公开的化合物、组合物和方法的某些型式进行了描述，并且为了说明的目的已经提出了许多细节，但是对于本领域技术人员显而易见的是，所公开的化合物、组合物和方法还有另外的形式，并且在不脱离本发明的基本原理的情况下，本发明所述的某些细节可以作很大的改变。
[0308] 本文引用的所有参考文献都通过引用整体并入。所公开的化合物、组合物和方法可以以其他具体形式体现而不脱离其精神或基本属性，因此，应当参考所附权利要求，而不是前述说明书，来指示所公开的化合物、组合物和方法的范围。
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