血细胞分析是临床检验最常用项目，能检测20多项血液项目的病理性变化，对于抗生素的合理应用、各种贫血检查、血液病筛查、过敏疾病筛查等都有很大帮助；采用血细胞分析技术，可及时监测人体的身体状况，减少发病机率或控制病情。
血细胞五分类技术是当前该领域最先进的分析技术，其分析系统由仪器和试剂组成。国外目前只有美国雅培、库尔特、法国ABX、日本西森美康等公司生产；国内厂商，仅见有深圳迈瑞公司报道有产品。如美国雅培公司推出的CELL-DYN3000、CELL-DYN3200、CELL-DYN 3500和CELL-DYN 3700血细胞分析仪在国内就存在较大的市场，但与该仪器配套使用的试剂国内则长期依赖进口，导致试剂价格偏高，不利于国内广大医院，特别是基层医院的推广和应用。为降低试剂的成本，国内已出现有自行研制出的该类试剂，如公开号为CN1424582的中国发明专利，公开了一种雅培3700全自动五分类血细胞分析仪试剂，它包括稀释液、清洗剂、溶血剂和鞘液四种配套试剂，其中稀释液的组成为：NaCl10～20g/L、Na2SO45～15g/L、EDTA-K20.1～0.5g/L、甲基脲0.5～1.5g/L，噻唑啉酮0.3～0.8g/L，哌嗪烷基磺酸1～4g/L；清洗剂的组成为：NaCl10～20g/L、Na2SO45～18g/L、聚氧乙烯烃基苯乙醚0.2～0.7g/L、磷酸钠0.7～1.4g/L、哌嗪烷基磺酸3～10g/L、噻唑啉酮0.2～0.8g/L，溶血剂的组成为：季胺盐30～70g/L、KCN0.1～0.5g/L、Triton X-1000.5～1.5ml/L、乙醇30～60ml/L；鞘液的组成为：氨基甲烷1.2g/L，聚氧乙烯醚96mg/L，甲基脲4.5g/L，苯醚6g/L，噻唑啉酮8.8g/L。该发明血细胞分析仪试剂较国外进口试剂成本低，具有较好的推广使用价值；但是该试剂中溶血剂中仍含有剧毒化合物氰化钾，不仅危害操作人员的身体健康，同时对环境造成污染。

本发明要解决的技术问题是提供一种成本低廉、试剂性能优越且不含氰化物的适于五分类全自动血细胞分析仪用试剂。
为解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案：
血细胞分析仪用试剂，由稀释液、溶血剂、鞘液和清洗液组成，其中：
所述稀释液的组成及含量为：
硼酸2～12g/L、硼砂2～10g/L、氯化钠5～15g/L、硫酸钠8～20g/L、乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)0.1～0.5g/L、甲基脲0.5～2.0g/L、盐酸羟胺3～9g/L、氯化钾0.2～1.0g/L；
所述溶血剂的组成及含量为：
季铵盐10～25g/L、二乙醇胺1～5ml/L、聚乙二醇辛基苯基醚(Tri tonX-100)0.5～2ml/L、异丙醇0.3～1.5ml/L、氯化钠1～5g/L；
所述鞘液的组成及含量为：
氨基甲烷1～10g/L、甲基脲0.1～1g/L、芳香醇1～15ml/L、乙醇5～15ml/L、聚氧乙烯月桂醚0.1～0.5g/L；
所述清洗液的组成及含量为：
硼酸2～12g/L、硼砂2～15g/L、氯化钠2～10g/L、硫酸钠4～10g/L、聚氧乙烯烃基苯乙醚0.5～2g/L、次氯酸钠0.5～2g/L。
上述稀释液、溶血剂、鞘液和清洗液的组成优选如下：
稀释液的组成及含量为：
硼酸8.5～12g/L、硼砂3～6g/L、氯化钠5～10g/L、硫酸钠8～12g/L、乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)0.1～0.3g/L、甲基脲0.5～1.0g/L、盐酸羟胺3～6g/L、氯化钾0.2～0.8g/L；
溶血剂的组成及含量为：
季铵盐15～25g/L、二乙醇胺1～3ml/L、聚乙二醇辛基苯基醚(TritonX-100)0.5～1ml/L、异丙醇0.3～1ml/L、氯化钠3～5g/L；
鞘液的组成及含量为：
氨基甲烷1～5g/L、甲基脲0.1～0.5g/L、芳香醇1～10ml/L、乙醇5～10ml/L、聚氧乙烯月桂醚0.1～0.3g/L；
清洗液的组成及含量为：
硼酸7～12g/L、硼砂2～6g/L、氯化钠4～10g/L、硫酸钠4～8g/L、聚氧乙烯烃基苯乙醚0.5～1g/L、次氯酸钠0.5～1.5g/L。
以上配方中，
所述的鞘液中的芳香醇选自二苯醚、苯甲醇、苯乙醇和乙二醇苯醚中的一种或两种。
鞘液中的聚氧乙烯月桂醚为聚氧乙烯月桂醚35(Brij35)。
所述鞘液的渗透压为35～80mOsm/kg。
所述稀释液的渗透压为280～350mOsm/kg。
所述稀释液的pH值为6.5～8.0，具体可用盐酸来调。
所述溶血剂的pH值为PH7.5～9.5，具体可用盐酸来调。
所述鞘液的pH值为8.0～10.0，具体可用盐酸来调。
所述清洗液的pH值为6.5～8.5，具体可用盐酸来调。
与现有技术相比，本发明的优点在于：
1、改变国内五分类全自动血细胞分析仪用试剂长期依赖进口的现状，试剂由国内生产、销售，大大降低了其成本；
2、试剂中的溶血剂为无氰溶血剂，不仅大大降低了对生产单位人员和实验操作者身体健康的损害，同时也避免了使用氰化物对环境造成的污染；
3、该试剂适用于五分类全自动血细胞分析仪，尤其适用于美国雅培公司的Cell-Dyn3700/3500、Cell-Dyn3000、Cell-Dyn3200五分类全自动血细胞分析仪，本申请试剂的PH、电导率、渗透压等参数均符合进口Cell-Dyn3700/3500五分类全自动血细胞分析仪的测试要求；溶血剂A750测试达到ICSH标准；白细胞、红细胞、血红蛋白、血小板等与进口ABBOTTCELL-DYN3700/3500试剂相关系数均大于0.95；白细胞五分类图谱与进口试剂一致；
4、该试剂在去除鞘液后也可适用于三分类血细胞分析仪；其中的溶血剂等也可用于其它系列的血液分析仪。
附图说明
图1为本发明实施例2制得的试剂与原装进口的ABBOTT CELL-DYN3000，3500and3700 Systems DILUENT、CELL-DYN3500and3700 Systems DETERGENT、CELL-DYN3500and3700 Systems WIC/Hgb LYSE REAGENT、CELL-DYN3000，3500and3700 Systems SHEATH试剂对来自桂林市第二人民医院和桂林市妇女儿童医院的100例临床样本上ABBOTT CELL-DYN3700进行测试，所测的WBC项目的测试结果对比相关线性图；
图2为本发明实施例2制得的试剂与原装进口的ABBOTT CELL-DYN3000，3500and3700 Systems DILUENT、CELL-DYN3500and3700 Systems DETERGENT、CELL-DYN3500and3700 Systems WIC/Hgb LYSE REAGENT、CELL-DYN3000，3500and3700 Systems SHEATH试剂对来自桂林市第二人民医院和桂林市妇女儿童医院的100例临床样本上ABBOTT CELL-DYN3700进行测试，所测的RBC项目的测试结果对比相关线性图；
图3为本发明实施例2制得的试剂与原装进口的ABBOTT CELL-DYN3000，3500and3700 Systems DILUENT、CELL-DYN3500and3700 Systems DETERGENT、CELL-DYN3500and3700 Systems WIC/Hgb LYSE REAGENT、CELL-DYN3000，3500and3700 Systems SHEATH试剂对来自桂林市第二人民医院和桂林市妇女儿童医院的100例临床样本上ABBOTT CELL-DYN3700进行测试，所测的HGB项目的测试结果对比相关线性图；
图4为本发明实施例2制得的试剂与原装进口的ABBOTT CELL-DYN3000，3500and3700 Systems DILUENT、CELL-DYN3500and3700 Systems DETERGENT、CELL-DYN3500and3700 Systems WIC/Hgb LYSE REAGENT、CELL-DYN3000，3500and3700 Systems SHEATH试剂对来自桂林市第二人民医院和桂林市妇女儿童医院的100例临床样本上ABBOTT CELL-DYN3700进行测试，所测的PLT项目的测试结果对比相关线性图。

下面以实施例对本发明作进一步说明。
以下实施例中用到的试剂均为分析纯试剂。
实施例1
在常温和常压下，分别按以下表1中指定的各组分以常规方法配制稀释液、溶血剂、鞘液和清洗液粗品，其中鞘液中的芳香醇为苯甲醇；配制所得的粗品分别用0.2μm的纤维薄膜过滤，即得本发明所述的血细胞分析仪用试剂。
实施例2
分别按以下表1中指定的各组分重复实施例1的方法，但用苯乙醇代替苯甲醇。
实施例3
分别按以下表1中指定的各组分重复实施例1的方法，但用二苯醚代替苯甲醇。
实施例4
分别按以下表1中指定的各组分重复实施例3的方法，但用苯甲醇代替二苯醚。
实施例5
分别按以下表1中指定的各组分重复实施例3的方法，但用苯乙醇代替二苯醚。
实施例6
分别按以下表1中指定的各组分重复实施例3的方法，但用乙二醇苯醚代替二苯醚。
实施例7
分别按以下表1中指定的各组分重复实施例1的方法，但用二苯醚和乙二醇苯醚代替苯甲醇，其中二苯醚和乙二醇苯醚的体积比为1∶1。
表1：


对比实验例1
分别用上述实施例1制得的血细胞分析仪用试剂(简称试剂1)、实施例2制得的血细胞分析仪用试剂(简称试剂2)和原装进口的美国ABBOTTCELL-DYN3000，3500and3700 Systems DILUENT、CELL-DYN3500and3700Systems DETERGENT、CELL-DYN3500and3700 Systems WIC/Hgb LYSE REAGENT、CELL-DYN3000，3500and3700 Systems SHEATH试剂(简称试剂A)对从桂林市第二人民医院随机抽取的一个血样用ABBOTT CELL-DYN3700进行测试，每种试剂对该血样测试10次，所得结果如下表2所示，其中，为测试10次的平均值，CV(％)为变异系数。
表2：

上述表2中的数据表明，实施例1、2所制得的血细胞分析仪用试剂的测试结果与原装进口的美国ABBOTT CELL-DYN3000，3500and3700 SystemsDILUENT、CELL-DYN3500and3700 Systems DETERGENT、CELL-DYN3500and3700Systems WIC/Hgb LYSE REAGENT、CELL-DYN3000，3500and3700 SystemsSHEATH试剂的测试结果一致。
对比实验例2
将本发明实施例2制得的血细胞分析仪用试剂(简称试剂2)与原装进口的ABBOTT CELL-DYN3000，3500and3700 Systems DILUENT、CELL-DYN3500and3700 Systems DETERGENT、CELL-DYN3500and3700 Systems WIC/HgbLYSE REAGENT、CELL-DYN3000，3500and3700 Systems SHEATH试剂(简称试剂A)对来自桂林市第二人民医院和桂林市妇女儿童医院的100例临床样本用ABBOTT CELL-DYN3700进行测试，测试结果如下表3所示，其中所测WBC、RBC、HGB和PLT项目的测试结果对比相关线性图分别如图1、2、3和4所示，其相关性R＞0.95。
表3：

  4   4.07   3.94   4.65   4.64   134   133   143   133   5   7.51   7.47   4.66   4.68   141   140   266   280   6   5.24   5.35   6.26   6.19   127   127   207   211   7   4.72   4.73   4.79   4.83   141   143   225   238   8   5.19   5.13   4.98   5.13   160   162   219   235   9   4.62   4.78   5.53   5.51   161   162   227   226   10   3.78   4   4.56   4.53   143   142   211   207   11   8.23   8.02   4.89   4.83   154   154   217   224   12   8.36   8.38   5.4   5.45   170   173   237   225   13   9.14   9.25   4.07   4.08   127   128   234   227   14   7.67   7.6   4.61   4.57   136   136   172   177   15   4.2   4.13   4.28   4.24   121   121   203   178   16   6   6.11   4.66   4.67   145   145   250   250   17   4.23   4.24   5.12   5.1   154   155   236   229   18   5.31   5.44   2.64   2.64   84.7   84.5   201   180   .19   5.45   5.91   4.89   4.89   144   144   221   209   20   4.24   4.32   4.34   4.36   121   122   168   177   21   5.23   5.5   4.5   4.52   141   140   202   186   22   4.62   4.84   4.01   4.05   133   133   159   163   23   7.67   7.58   4.84   4.7   139   135   415   462   24   4.95   5   5.03   4.98   149   149   213   192
  4   4.07   3.94   4.65   4.64   134   133   143   133   25   8.72   8.89   4.71   4.68   126   126   327   3儿   26   6.46   6.47   5.17   5.1   148   147   241   234   27   8.34   8.38   3.71   3.71   114   113   204   184   28   5.12   5.14   5.64   5.56   164   164   306   282   29   4.01   4.2   4.4   4.3   137   137   294   296   30   8.38   8.2   5.01   4.94   149   148   231   206   31   5.62   5.9   4.65   4.71   138   138   237   220   32   4.44   4.47   3.54   3.6   55.4   54.8   362   332   33   4.92   5.17   4.09   4.14   121   122   238   228   34   5.56   5.95   4.64   4.66   136   136   272   266   35   10.2   11.8   4.8   5.07   145   153   208   199   36   8.37   8.47   5.34   5.5   112   113   299   333   37   5.22   5.49   4.06   4.03   125   125   399   284   38   4.45   4.58   4.35   4.36   131   131   273   261   39   8.07   8.11   4.71   4.73   135   136   373   391   40   9.45   9.36   4.87   4.73   142   138   300   287   41   6.51   6.88   5.01   5.02   142   141   295   276   42   7.27   7.34   4.62   4.61   123   122   345   350   43   4.72   4.79   3.92   3.83   116   113   197   185   44   7.73   7.36   5.28   5.11   147   143   202   190
  4   4.07   3.94   4.65   4.64   134   133   143   133   45   1.58   1.31   4.93   4.95   150   150   191   188   46   5.87   5.59   3.64   3.58   104   101   233   251   47   13.5   14.8   5.24   5.14   105   104   341   348   48   7.34   7.33   5.17   5.14   138   138   273   268   49   5.14   4.96   3.92   3.89   120   120   203   197   50   4.76   4.8   4.42   4.4   131   132   238   245   51   6.37   6.46   4.1   4.15   119   121   231   244   52   6.43   6.73   3.95   4.11   117   122   255   275   53   4.79   4.66   4.98   4.9   150   147   188   194   54   5.68   5.91   4.81   4.77   142   142   178   185   55   5.99   6.32   4.83   4.88   153   155   213   245   56   5.99   6.08   5.42   5.24   164   159   198   208   57   5.38   5.27   5.17   5.17   155   154   225   218   58   5.53   5.45   4.36   4.42   127   132   273   282   59   7.5   7.06   5.34   5.16   149   145   185   179   60   7.03   7.24   4.95   4.88   149   149   252   238   61   12   12.2   4.54   4.49   115   115   223   216   62   6.71   6.84   5.46   5.5   119   119   280   262   63   8.4   8.48   4.58   4.57   133   134   285   297   64   6.86   7.1   4.24   4.21   125   124   219   216
  4   4.07   3.94   4.65   4.64   134   133   143   133   65   4.92   5.06   4.29   4.18   123   120   186   182   66   7.02   7.06   3.97   3.95   117   118   320   314   67   10   9.55   4.9   4.87   140   140   177   170   68   8.58   8.83   3.83   3.8   76.3   76.9   242   227   69   5.98   5.99   4.33   4.33   120   119   220   222   70   15   14.8   6.74   6.6   130   131   158   164   71   4.84   5.13   4.42   4.54   136   139   313   326   72   7.04   7   4.57   4.46   132   131   262   270   73   15.5   15.2   4.3   4.27   137   137   182   180   74   14.4   15   5.21   5.19   144   144   249   230   75   7.29   7.46   5.75   5.68   170   172   241   258   76   7.23   7.37   4.6   4.67   134   134   344   347   77   6.71   6.74   5.36   5.28   123   122   256   236   78   6.42   6.64   4.52   4.43   148   146   141   152   79   4.64   4.49   4.76   4.84   121   120   254   257   80   5.62   5.38   4.76   4.89   142   143   166   158   81   5   5.07   4.17   4.13   141   140   197   191   82   3.87   3.94   3.9   3.89   120   119   247   227   83   4.92   4.86   4.74   4.73   148   147   159   160   84   6.24   6.16   4.47   4.45   134   134   227   232
  4   4.07   3.94   4.65   4.64   134   133   143   133   85   5.86   5.9   5.12   5.11   150   149   197   210   86   11.2   11.3   4.42   4.35   129   129   272   290   87   6.2   6.34   4.65   4.74   139   139   280   272   88   4.55   4.6   4.59   4.55   141   141   180   183   89   4.36   4.52   4.48   4.48   142   142   182   169   90   2.84   2.77   4.42   4.41   123   124   168   186   91   7.37   7.41   6.97   6.94   139   140   451   444   92   11.7   11.6   5.16   5.05   160   159   213   226   93   9.37   9.08   4.47   4.42   127   127   292   316   .94   4.49   4.91   4.83   5.02   120   125   242   260   95   6.97   7.25   3.58   3.46   110   106   191   196   96   15.6   15.7   3.73   3.71   121   121   190   206   97   3.96   5.44   4.49   4.47   129   128   238   241   98   4.74   6.94   4.27   4.34   111   112   212   218   99   7.58   8.09   5.47   5.36   135   133   305   328   100   4.89   5.18   5.07   5.13   103   104   282   285


对比实验例3
本发明实施例3制得的血细胞分析仪用试剂(简称试剂3)、实施例4制得的血细胞分析仪用试剂(简称试剂4)、实施例5制得的血细胞分析仪用试剂(简称试剂5)和实施例6制得的血细胞分析仪用试剂(简称试剂6)的差别仅在于芳香醇的种类不同，为测试本发明所选用的四种芳香醇类物质对测试结果的影响，申请人分别用上述试剂3、4、5和6对同一支标本进行平行测试，所得结果如下表4所示。
表4：

上述测试结果表明，本发明试剂中鞘液所使用的四种芳香醇类物质对测试结果没有影响，都能够良好的反应出标本的实际情况。
当然，本发明并不局限于这些实施例，只要是不违背本发明的主题思想，均应属于本发明的保护范围，如可以在试剂中加入本领域技术人员很容易想到的一些不影响本发明所述试剂性能的其它非必要物质，例如在稀释液中加入少量的叠氮钠，在溶血剂中加入少量的氟化钠，在清洗液中加入少量的Triton X-100等，应该视为在本发明的保护范围内。