技术领域

本发明涉及三取代1H-咪唑类转化生长因子-β(transforming growth factor β，TGF-β)信号途径的抑制剂，具体讲是Type I受体或 称活化素样激酶-5受体(activin-like kinase-5 receptor，简称 ALK-5受体)对Smad(mother against dpp)2或Smad3磷酸化的抑 制剂，以及它们的制备方法和在医疗领域的用途，特别是治疗和预防与 TGF-β信号异常相关的各种疾病的用途。

                      背景技术

转化生长因子-β是一类细胞因子超家族，这一超家族成员包括转 化生长因子βs(TGFβs)、活化素(activines)、抑制素(inhibins)和骨 生成蛋白[bone morphogenetic proteins(BMP)]和谬氏抑制物 (Mullerian-inhibiting substance)等，能够调节非常广泛的生理过 程，包括细胞的增殖、分化、附着、迁移和坏死。

TGF-β超家族的信号的传导需要两种类型的单跨膜丝氨酸/苏氨酸 受体，这两种受体分别称为Type I或ALK受体和Type II受体。Type I或ALK受体和Type II受体的不同之处在于以下三个方面：(1)ALK 受体缺少一个富含丝氨酸/苏氨酸的细胞内片段；(2)在各种Type I 受体中有一个有别于Type II受体高度同源的丝氨酸/苏氨酸激酶功能 区；(3)在各种Type I受体都有一个称为GS功能区的共同的序列片 段，这一功能区内包含一个富含甘氨酸和丝氨酸残基的区域，位于细胞 内激酶功能区的N端，此区域对其被Type II受体活化至关重要。

许多的研究表明：TGF-β信号需要ALK和Type II受体的共同作 用。大体上，TGF-β的二聚体(配体)先与一个Type II受体的二聚 体结合，接着募集两个Type I受体，被TGF-β活化的Type II受体 磷酸化ALKs的GS功能区，并因此使之活化，活化的ALKs磷酸化其下 游信号分子细胞质内的受体活化的Smads(R-Smads)的C端，两个磷 酸化的R-Smads能与一个Smad4-也称通用媒介Smad[common mediator Smad(C-Smad)]形成三聚体复合物，这一复合物进入细胞核 调节靶基因的转录。

通常，在大多数种属中，Type II受体调节细胞的分化，而Type I 受体调节细胞间质的生成，因此本发明涉及的通式I化合物是用于抑制 Type I受体，进而调节细胞间质的合成，而不是用于调节Type II所 媒介的细胞分化。

在哺乳动物中共发现了七种Type I受体(ALK1-7)和五种Type II 受体，特定Type I和Type II受体的结合决定了配体信号的专一性 (Piek and Roberts，2001)，活化素(Activins)或TGFβs活化的Type I受体ALK4和ALK5分别磷酸化Smad2和Smad3，而BMP活化的 ALK1、ALK2、ALK3和ALK6磷酸化Smad1、Smad5和Smad8(Heldin et al.，1997)。必须指出的是，有证据显示，在内皮细胞中TGFβs也可 活化ALK1和Smad1和Smad5(Oh et al.，2000；Goumans et al.， 2002)。新近发现的ALK7被认为通过活化Smad2介导TGFβ总科的另一 种成员Nodal(Reissmann et al.，2001，Watanabe et al.，1999； Jornvall et al.，2001)，尽管Smad途径已经被大量地研究，TGFβ家 族配体的信号也可以活化其他信号途径。包括MAKP途径和磷脂酰肌醇 3-激酶，推测也可以通过Type I受体(de Caestecker et al.，2000)。

TGFβ信号异常与疾病

早期的研究显示，不正常的TGFβ1(第一个被发现而且研究最透彻 的TGFβ总科成员)信号与诸如纤维化和癌变等许多病理过程有关 (Border and Noble，1994；Wakefield and Roberts，2002)。TGFβ1 在伤口愈合中也发挥重要的作用，其异常信号可能与过度发育的疤痕和 疤痕瘤的形成有关(Bettinger et al.，1996；O′Kane and Ferguson， 1997)。

近年更不断有关于TGFβ信号相关疾病的报道。例如Border W.A 等报道TGF-β1信号的活化以及细胞外间质的扩充是慢性肾炎和脉管性 疾病的早期表现和持续诱因(Border W.A.，Noble N.A.，N.Engl.J. Med.，Nov.10，1994；331(19)：1286-92)。此外，TGF-β1通过其受 体ALK5对Smad3的磷酸化作用在纤连蛋白和血浆酶原活化子抑制剂-1 的形成中发挥作用，这些都是巩膜沉积物的组成成分(Zhang Y.，Feng X.H.，Derynck R.，Nature，Aug.27，1998；394(6696)：909-13；Usui T.，Takase M.，Kaji Y.，Suzuki K.，Ishida K.，Tsuru T.，Miyata K.，Kawabata M.，Yamashita H.，Invest.Ophthalmol.Vis.Sci.， October 1998；39(11)：1981-9)。

肾和心血管系统的进行性纤维化是人类的主要死因并且是卫生资 源的主要消耗者。TGF-β1已经被证实与很多肾脏的纤维化病变相关 (Border W.A.，Noble N.A.，N.Engl.J.Med.，Nov 10，1994； 331(19)：1286-92)。在发生急性或慢性肾小球肾炎(Yoshioka K.， Takemura T.，Murakami K.，Okada M.，Hino S.，Miyamoto H.，Maki S.，Lab.Invest.，February 1993；68(2)：154-63)、糖尿病肾病 (Yamamoto，T.，Nakamura，T.，Noble，N.A.，Ruoslahti，E.，Border， W.A.，(1993)PNAS 90：1814-1818)、异体移植排斥、HIV肾病、血管 紧张素诱导的肾病时(Border W.A.，Noble N.A.，N.Engl.J.Med.， Nov.10，1994；331(19)：1286-92)，体内的TGF-β1水平会升高。在这 些疾病发生时，TGF-β1的表达与细胞外间质的生成相关。三条证据显 示细胞外间质的生成是由TGF-β1引起的。第一，在体外，外源的TGF-β1 可以诱导正常的肾小球、肾小球膜和非肾细胞产生细胞外间质，且抑制 蛋白酶的活性。第二，TGF-β1的压制抗体可以阻止老鼠肾脏中细胞外 间质的积累。第三，转基因的TGF-β1的老鼠或体内转染了TGF-β1基 因的正常老鼠的肾脏会发生快速的肾小球硬化(Kopp J.B.，Factor V. M.，Mozes M.，Nagy P.，Sanderson N.，Bottinger E.P.，Klotman P. E.，Thorgeirsson S.S.，Lab Invest，June 1996；74(6)：991-1003)， 因此抑制TGF-β1的活性可能对治疗慢性肾脏疾病是有效的。

研究显示，受伤的血管中TGF-β1及其受体增加显示与新内膜的形 成有关(Saltis J.，Agrotis A.，Bobik A.，Clin Exp Pharmacol Physiol，March 1996；23(3)：193-200)。另外，TGF-β1是平滑肌细 胞(″SMC″)在体外转移的强效促进剂，动脉管壁上的SMC的迁移有助于 发生动脉硬化症和瓣膜狭窄。此外，在内皮细胞抗总胆固醇产物的多元 性分析中TGF-β受体ALK5显示与总胆固醇相关(P＜0.001)(Blann A. D.，Wang J.M.，Wilson P.B.，Kumar S.，Atherosclerosis，February 1996；120(1-2)：221-6)，此外动脉粥样硬化损伤部位的SMC中有高 的ALK5/TGF-β type II受体比率，这是因为TGF-β1在纤维增生性脉 管损害中是过量表达的，受体变异了的细胞可以以缓慢而不受控的方式 生长，同时过量地产生细胞外间质(McCaffrey T.A.，ConsigliS.，Du B.，Falcone D.J.，Sanborn T.A.，Spokojny A.M.，Bush H.L.，Jr.， J Clin Invest，December 1995；96(6)：2667-75)。

TGF-β1在发生活跃的间质合成的动脉粥样硬化损伤中对非泡沫状 的巨噬细胞表现出免疫趋向的性质，这显示非泡沫状的巨噬细胞在动脉 粥样硬化损伤的重新塑型中可能通过一种TGF-β依赖的机理参与负责 调节间质的基因的表达，因此通过抑制TGF-β1对ALK5的作用可以对 TGF-β1动脉粥样硬化和由此引起的动脉狭窄有治疗作用。

TGF-β还显示与腹膜粘连有关(Saed G.M.，Zhang W.，Chegini N.， Holmdahl L.，and Diamond M P.，Wound Repair Regeneration. 7(6)：504-510，1999 November-December)。因此，抑制ALK5可能有 益于预防术后腹膜和真皮下纤维化粘连。

ALK5的强效选择性抑制剂可能用于治疗和预防与ALK5激酶相关的 各种疾病：如慢性肾炎、急性肾炎、伤口愈合、关节炎、骨质疏松症、 充血性心脏坏死、溃疡、角膜创伤、糖尿病肾病、神经功能损伤、阿尔 兹海莫综合症、动脉硬化症、腹膜或皮下粘连，以及任何主要与纤维化 相关的病变，包括但不局限于肺纤维化，肝纤维化和心脏瓣膜狭窄。

这里的术语ALK5抑制剂指一个化合物能够选择性地抑制ALK5受 体，而对p38激酶或Type II受体或其它一些激酶没有抑制作用或只有 弱的抑制作用，而且不是通过抑制Smad2和Smad3之外的Smads蛋白 如Smad6和Smad7而发挥作用。

这里所说的术语“溃疡”包括但是并不局限于糖尿病溃疡、慢性溃 疡、胃溃疡、十二指肠溃疡等。

                      发明内容

本发明的目的是寻找并开发作用于ALK5受体激酶功能区的小分子 抑制剂，通过抑制ALK5对其下游信号Smad2或Smad3的磷酸化，阻断 或部分阻断TGFβ信号向分子内的传播，从而纠正异常的TGF-β信号， 治疗和预防各种与ALK5媒介的TGF-β信号异常相关的疾病。

本发明人经过研究发现，具有下面通式I的化合物具有抑制ALK5 对Smad3/2的磷酸化的作用，可以阻断或部分阻断TGF-β信号向细胞 内的传播，因此可以用于治疗和预防与TGF-β信号异常相关的各种疾 病，从而完成了本发明。

一方面，本发明涉及通式I的化合物、其所有可能的异构体或其可 药用的盐或水合物

其中：

R1和R2相互独立地是任选一取代或二取代的芳基，例如苯基、萘 基和蒽基；或者任选一取代或二取代的含有一个或一个以上选自N、O 和S的杂原子的杂环基，例如喹啉基、吡咯基、吡啶基、哌啶基、哌嗪 基、吗啉基、咪唑基、吡唑基、噻唑基和呋喃基；取代基独立地选自卤 素例如氟、羟基、氨基、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫 基、其中n代表1、2或3的-O-(CH2)n-Ph或-S-(CH2)n-Ph、腈基、其中 R’是氢或C1-6烷基的-CO2R’和芳基例如苯基；

或者R1和R2相互独立地是与一个芳香的或非芳香的5-7元杂环稠 合的苯基，这里所说的杂环是指含有一个或两个选自N、O和S的杂原 子的环；

或者R1和R2相互独立地是取代的在与母核连接位点的邻位含有质 子给体或质子受体的杂环基，例如取代的吡啶-2-基、吡咯-2-基、哒嗪 -3-基、嘧啶-2-基、咪唑-2-基、吡唑-3-基、噻唑-2-基和呋喃-2-基； 或者是取代的在2位上含有作为质子给体或质子受体的取代基的苯基， 例如2-氟苯基、2-甲氧基苯基、2-羟基苯基和2-三氟甲基苯基；取代 基独立地选自卤素例如氟、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷 硫基、腈基、氨基、羟基、苯基、硝基、其中n代表1、2或3的-O-(CH2)n-Ph、 -S-(CH2)n-Ph或-NH-(CH2)n-Ph、其中R代表氢或C1-6烷基的-CO2R；

R3是任选一取代或二取代的芳基，例如苯基、萘基和蒽基；或者任 选一取代或二取代的含有一个或一个以上选自N、O和S的杂原子的杂 环基，例如吡咯基、哌啶基、哌嗪基、哒嗪基、嘧啶基、咪唑基、吡唑 基、噻唑基和呋喃基；取代基独立地选自-COOH、-CONH2、-CN、-NO2、 C1-6烷硫基、-SO2-C1-6烷基、C1-6烷氧基、-SONH2、-CONHOH、-NH2、-CHO、 -CH2OH、-CH2NH2、其中R’代表H或C1-6烷基的-COOR’、-SONHR’或-CONHR’、 以及其中R’代表C1-6烷基或酰基的-NHR’；

或者R3是卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、腈基、氨基、 羟基、硫羟基、苯基、硝基、其中n代表1、2或3的-O-(CH2)n-Ph、 -S-(CH2)n-Ph或-NH-(CH2)n、或者其中R’代表H或C1-6烷基的-CO2R’。

本文使用的术语“C1-6烷基”，不管是其自身还是作为其它更大基 团如C1-6烷氧基的一部分，均指直链或支链的含有1-6个碳原子的原子 团，包括但并不局限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、 异丁基和叔丁基等。

本文使用的术语“C1-6卤代烷基”是指其中1个或多个氢被卤素原 子取代的C1-6烷基，这里特别需要提到的是三氟甲基(-CF3)。

本文使用的术语“卤素(卤代)”是指氟(氟代)、氯(氯代)、 溴(溴代)或碘(碘代)”。

本文使用的术语“芳基”指5-14元的取代的或非取代的芳环系统， 或可能包含稠合的双环或三环的芳环系统，包括但是并不局限于苯基和 萘基。

在一个实施方案中，R1是任选一取代或二取代的芳基，例如苯基、 萘基和蒽基；或者任选一取代或二取代的含有一个或一个以上选自N、O 和S的杂原子的杂环基，例如喹啉基、吡咯基、吡啶基、哌啶基、哌嗪 基、吗啉基、咪唑基、吡唑基、噻唑基和呋喃基；取代基独立地选自卤 素例如氟、羟基、氨基、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫 基、其中n代表1、2或3的-O-(CH2)n-Ph或-S-(CH2)n-Ph、腈基、其中 R’是氢或C1-6烷基的-CO2R’和芳基例如苯基；

或者R1是与一个芳香的或非芳香的5-7元杂环稠合的苯基，这里 所说的杂环是指含有一个或两个选自N、O和S的杂原子的环；

R2是取代的在与母核连接位点的邻位含有质子给体或质子受体的 杂环基，例如取代的吡啶-2-基、吡咯-2-基、哒嗪-3-基、嘧啶-2-基、 咪唑-2-基、吡唑-3-基、噻唑-2-基和呋喃-2-基；或者是取代的在2位 上含有作为质子给体或质子受体的取代基的苯基，例如2-氟苯基、2- 甲氧基苯基、2-羟基苯基和2-三氟甲基苯基；取代基独立地选自卤素例 如氟、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、腈基、氨基、 羟基、苯基、硝基、其中n代表1、2或3的-O-(CH2)n-Ph、-S-(CH2)n-Ph 或-NH-(CH2)n-Ph、其中R代表氢或C1-6烷基的-CO2R；

或者R2是与一个芳香的或非芳香的5-7元杂环稠合的苯基，这里 所说的杂环是指含有一个或两个选自N、O和S的杂原子的环；

R3是任选一取代或二取代的芳基，例如苯基、萘基和蒽基；或者任 选一取代或二取代的含有一个或一个以上选自N、O和S的杂原子的杂 环基，例如吡咯基、哌啶基、哌嗪基、哒嗪基、嘧啶基、咪唑基、吡唑 基、噻唑基和呋喃基；取代基独立地选自-COOH、-CONH2、-CN、-NO2、 C1-6烷硫基、-SO2-C1-6烷基、C1-6烷氧基、-SONH2、-CONHOH、-NH2、-CHO、 -CH2OH、-CH2NH2、其中R’代表H或C1-6烷基的-COOR’、-SONHR’或-CONHR’、 以及其中R’代表C1-6烷基或酰基的-NHR’；

或者R3是卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、腈基、氨基、 羟基、硫羟基、苯基、硝基、其中n代表1、2或3的-O-(CH2)n-Ph、 -S-(CH2)n-Ph或-NH-(CH2)n、或者其中R’代表H或C1-6烷基的-CO2R’。

在另一个实施方案中，R2是任选一取代或二取代的芳基，例如苯基、 萘基和蒽基；或者任选一取代或二取代的含有一个或一个以上选自N、O 和S的杂原子的杂环基，例如喹啉基、吡咯基、吡啶基、哌啶基、哌嗪 基、吗啉基、咪唑基、吡唑基、噻唑基和呋喃基；取代基独立地选自卤 素例如氟、羟基、氨基、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫 基、其中n代表1、2或3的-O-(CH2)n-Ph或-S-(CH2)n-Ph、腈基、其中 R’是氢或C1-6烷基的-CO2R’和芳基例如苯基；

或者R2是与一个芳香的或非芳香的5-7元杂环稠合的苯基，这里 所说的杂环是指含有一个或两个选自N、O和S的杂原子的环；

R1是取代的在与母核连接位点的邻位含有质子给体或质子受体的 杂环基，例如取代的吡啶-2-基、吡咯-2-基、哒嗪-3-基、嘧啶-2-基、 咪唑-2-基、吡唑-3-基、噻唑-2-基和呋喃-2-基；或者是取代的在2位 上含有作为质子给体或质子受体的取代基的苯基，例如2-氟苯基、2- 甲氧基苯基、2-羟基苯基和2-三氟甲基苯基；取代基独立地选自卤素例 如氟、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、腈基、氨基、 羟基、苯基、硝基、其中n代表1、2或3的-O-(CH2)n-Ph、-S-(CH2)n-Ph 或-NH-(CH2)n-Ph、其中R代表氢或C1-6烷基的-CO2R；

或者R1是与一个芳香的或非芳香的5-7元杂环稠合的苯基，这里 所说的杂环是指含有一个或两个选自N、O和S的杂原子的环；

R3是任选一取代或二取代的芳基，例如苯基、萘基和蒽基；或者任 选一取代或二取代的含有一个或一个以上选自N、O和S的杂原子的杂 环基，例如吡咯基、哌啶基、哌嗪基、哒嗪基、嘧啶基、咪唑基、吡唑 基、噻唑基和呋喃基；取代基独立地选自-COOH、-CONH2、-CN、-NO2、 C1-6烷硫基、-SO2-C1-6烷基、C1-6烷氧基、-SONH2、-SONHR’、-CONHOH、 -NH2、-CHO、-CH2OH、-CH2NH2、其中R’代表H或C1-6烷基的-COOR’、 -SONHR’或-CONHR’、以及其中R’代表C1-6烷基或酰基的-NHR’；

或者R3是卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、腈基、氨基、 羟基、硫羟基、苯基、硝基、其中n代表1、2或3的-O-(CH2)n-Ph、 -S-(CH2)n-Ph或-NH-(CH2)n、或者其中R’代表H或C1-6烷基的-CO2R’。

在一个优选的实施方案中，R1是3，4-亚甲二氧基苯基、2-氟苯基、 苯并-1，4-二氧六环-6-基、3，4-二甲氧苯基、4-氟苯基或3-氟-4-甲氧 基苯基；R2是6-甲基吡啶-2-基、2-氟苯基、吡啶-2-基、3，4-亚甲 二氧基苯基或2-甲氧基苯基；且R3是对氰基苯基、对氨基甲酰基苯基 或叔丁基。

本发明特别优选的通式I化合物或其可药用的盐或水合物优选下 面的化合物：

(1)4-[1-(3，4-亚甲二氧基苯基)-2-(6-甲基吡啶-2-基)-1H-咪 唑-4-基]苯腈；

(2)4-[1-(3，4-亚甲二氧基苯基)-2-(6-甲基吡啶-2-基)-1H- 咪唑-4-基]苯甲酰胺；

(3)4-[1-(3，4-亚甲二氧基苯基)-2-(2-氟苯基)-1H-咪唑-4- 基]苯腈；

(4)4-[1-(3，4-亚甲二氧基苯基)-2-(2-氟苯基)-1H-咪唑-4- 基]苯甲酰胺；

(5)4-[1-(3，4-亚甲二氧基苯基)-2-(吡啶-2-基)-1H-咪唑-4- 基]苯腈；

(6)4-[1-(3，4-亚甲二氧基苯基)-2-(吡啶-2-基)-1H-咪唑-4- 基]苯甲酰胺；

(7)4-[1-(2-氟苯基)-2-(3，4-亚甲二氧基苯基)-1H-咪唑-4-基] 苯腈；

(8)4-[1-(2-氟苯基)-2-(3，4-亚甲二氧基苯基)-1H-咪唑-4-基] 苯甲酰胺；

(9)4-[1-(苯并-1，4-二氧六环-6-基)-2-(吡啶-2-基)-1H-咪唑 -4-基]苯腈；

(10)4-[1-(苯并-1，4-二氧六环-6-基)-2-(吡啶-2-基)-1H-咪 唑-4-基]苯甲酰胺；

(11)4-[1-(苯并-1，4-二氧六环-6-基)-2-(6-甲基吡啶-2- 基)-1H-咪唑-4-基]苯腈；

(12)4-[1-(苯并-1，4-二氧六环-6-基)-2-(6-甲基吡啶-2- 基)-1H-咪唑-4-基]苯甲酰胺；

(13)4-[1-(3，4-二甲氧苯基)-2-(吡啶-2-基)-1H-咪唑-4-基] 苯腈；

(14)4-[1-(3，4-二甲氧苯基)-2-(吡啶-2-基)-1H-咪唑-4-基] 苯甲酰胺；

(15)2-[(1-(4-氟苯基)-4-叔丁基-1H-咪唑-2-基)]-6-甲基吡 啶；

(16)2-[(1-(苯并-1，4-二氧六环-6-基)-4-叔丁基-1H-咪唑-2- 基)]-6-甲基吡啶；

(17)2-[(1-(3-氟-4-甲氧基苯基)-4-叔丁基-1H-咪唑-2- 基)]-6-甲基吡啶；

(18)4-[1-(3-氟-4-甲氧基苯基)-2-(6-甲基吡啶-2-基)-1H-咪 唑-4-基]苯腈；

(19)4-[1-(3-氟-4-甲氧基苯基)-2-(6-甲基吡啶-2-基)-1H-咪 唑-4-基]苯甲酰胺；

(20)4-[1-(4-氟苯基)-2-(6-甲基吡啶-2-基)-1H-咪唑-4-基] 苯腈；

(21)4-[1-(4-氟苯基)-2-(6-甲基吡啶-2-基)-1H-咪唑-4-基] 苯甲酰胺；

(22)4-[1-(3，4-亚甲二氧基苯基)-2-(2-甲氧基苯基)-1H-咪唑 -4-基]苯腈；

(23)4-[1-(3，4-亚甲二氧基苯基)-2-(2-甲氧基苯基)-1H-咪唑 -4-基]苯甲酰胺；

(24)1-(3，4-亚甲二氧苯基)-4-叔丁基-2-(2-甲氧基苯基)-1H- 咪唑；

(25)4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)-2-(6-甲基吡啶-2-基)-1H-咪唑 -4-基]苯腈；

(26)4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)-2-(6-甲基吡啶-2-基)-1H-咪唑 -4-基]苯甲酰胺；

(27)2-(1-(3，4-亚甲二氧苯基)-4-叔丁基-1H-咪唑-2-基)-6- 甲基吡啶；

及其可药用盐或水合物。

本发明还涉及如通式I所示化合物的合适的可药用的盐或水合物， 其中可药用的盐包括但是并不局限于通式I化合物与无机酸如盐酸、硫 酸、磷酸、亚磷酸、氢溴酸和硝酸所成的盐以及与各种有机酸，如马来 酸、苹果酸、延胡索酸、琥珀酸、酒石酸、柠檬酸、乙酸、乳酸、甲磺 酸、对甲苯磺酸、棕榈酸等所成的盐。本发明中的一些化合物可能用水 或各种有机溶剂结晶或重结晶，在这种情况下，可能形成各种溶剂化物。 本发明包括那些化学计量的溶剂化物，包括水合物，也包括在用低压升 华干燥法制备时形成的包含可变量水的化合物。

本发明还涉及通式I化合物的各种异构体。本发明中部分化合物可 能以光学异构体或互变异构体的形式存在，本发明包括其所有存在形 式，特别是纯异构体的形式。不同的异构体形式可以以各种常规的手段 与其它形式的异构体分离或拆分开，或者某种异构体可以各种常规的合 成方法或立体专一或不对称合成的方法得到。既然通式I化合物是以药 用为目的的，可以理解它们最好以纯的形式提供，例如至少60％的纯度， 更合适的75％，更好的85％，最好至少98％的纯度(％是指重量百分比)。 不纯化合物的制备方法可用来用于药用组合物中更纯的形式。这些不够 纯的产物中至少含有1％，更适合的5％，更好的至少10％的如通式I所示 的化合物或其可药用的衍生物。

另一方面，本发明涉及制备通式I化合物的合成方法。通式I的化 合物可以从已知的或可购得的化合物为原料，经过人工合成的方法制 备。如果原料不能购得，则这里提供它们的制备方法，或它们可以通过 文献报道的方法制备。

具体地说，本发明提供了制备通式(I)化合物或其可药用盐或水合 物的方法，其包括如下步骤：

(i)在有机碱，如NaN(SiMe3)2存在下，在惰性溶剂，如THF中使芳 腈和芳胺反应，生成N-芳基取代的芳基甲脒

其中R1和R2同前文的定义；

(ii)使生成的N-芳基取代的芳基甲脒与通式为 的化合 物在C1-C6的低级醇，优选异丙醇中，在有机碱或无机碱，如NaHCO3 存在下加热至50-100℃反应，生成具有1，2，4-三取代咪唑结构的化 合物

其中R3同前文的定义。

在合成通式I化合物的过程中，易变或对反应进程有不良影响的基 团，如酰胺，羧基、羟基、羰基或氨基和吡啶上的N，可以先被保护起 来，再在适当的步骤脱去保护。有关有机官能团的保护和脱保护在相 关文献如Protective Groups in Organic Chemistry，T.W.Greene and P.G.M.Wuts，(Wiley-Interscience，New York，2nd edition，1991). 中已有详尽的论述。也可以先以其潜在的官能团的形式存在，再在适当 的步骤转化成所需的基团。

例如，当R3为4-腈基苯基时，可将腈基转化为酰胺或羧基。

通式I化合物可以用常规方法单个合成，亦可用组合化学的混-分 方法或平行合成的方法以库(每个库中至少含两个，或5-1000个，最 好是10-100个化合物)为单位合成，即可以在液相中合成也可以用固 相合成方法。

关于制备通式I化合物更详尽的资料见实施例。

另一方面，本发明涉及通式I的化合物、其所有可能的异构体或其 可药用的盐或水合物用于生产治疗哺乳动物的由ALK5受体媒介的疾病 的药物的用途，所述由ALK5受体媒介的疾病包括但不局限于如下疾病： 慢性肾炎、急性肾炎、伤口愈合、关节炎、骨质疏松症、肾脏疾病、充 血性心脏坏死、溃疡、眼部疾病、角膜创伤、糖尿病肾病、神经功能损 伤、阿尔兹海莫综合症、动脉硬化症、腹膜或皮下粘连，以及任何主要 与纤维化相关的病变，包括但不局限于肺纤维化、肝纤维化和心脏瓣膜 狭窄。

本发明还涉及治疗哺乳动物的由ALK5受体媒介的疾病的方法，该 方法包括用合适的方式对需要治疗的哺乳动物给予有效剂量的通式I的 化合物、其所有可能的异构体或其可药用的盐或水合物。本发明还公开 了对需要治疗的哺乳动物的给药方式、通式I化合物或其合适的可药用 盐或水合物的有效剂量。

另一方面，本发明涉及通式I的化合物、其所有可能的异构体或其 可药用的盐或水合物用于生产可抑制哺乳动物体内TGF-β信号的药物的 用途。

本发明还涉及抑制哺乳动物体内TGF-β信号的方法，例如抑制 Type I或ALK5受体对Smad2或Smad3的磷酸化，此方法包括对需要抑 制TGF-β信号的哺乳动物用合适的方式给予有效剂量的通式I化合物、 其所有可能的异构体或合适的可药用盐或水合物。

另一方面，本发明涉及通式I的化合物、其所有可能的异构体或其 可药用的盐或水合物用于生产用于抑制哺乳动物体内细胞间质形成的 药物的用途。

本发明还涉及在哺乳动物中抑制细胞间质形成的方法，例如通过 抑制Type I或ALK5受体对Smad2和Smad3的磷酸化，此方法包括对 需要抑制细胞间质形成的哺乳动物用合适的方式给予有效剂量的通式I 化合物、其所有可能的异构体或其可药用的盐或水合物。

另一方面，本发明的通式I的化合物或其可药用的盐可以单独使用， 或与可药用的载体或赋形剂一起以药物组合物的形式使用，当以药物组 合物的形式使用时，通常将有效剂量的本发明通式I化合物或其可药用 盐或水合物以及一种或多种可药用载体或稀释剂结合制成适当的施用 形式或剂量形式，这一程序包括通过合适的方式将组分混合、粒化、压 缩或溶解。因此，本发明提供了药物组合物，它包含通式I的化合物、 其所有可能的异构体或其可药用的盐或水合物以及至少一种可药用的 载体。

本发明化合物的药物组合物，可以以下方面的任意方式施与：口服、 喷雾吸入、直肠给药、鼻腔给药、阴道给药、局部给药、非肠道给药如 皮下、静脉、肌内、腹膜内、鞘内、心室内、胸骨内或颅内注射或输入， 或借助一种外植的储器用药，其中优选口服、肌注、腹膜内或静脉内用 药方式。

本发明化合物或含有它的药物组合物可以单位剂量形式给药。给药 剂型可以是液体剂型、固体剂型。液体剂型可以是真溶液类、胶体类、 微粒剂型、乳剂剂型、混悬剂型。其他剂型例如片剂、胶囊、滴丸、气 雾剂、丸剂、粉剂、溶液剂、混悬剂、乳剂、颗粒剂、栓剂、冻干粉针 剂、包合物、埋植剂、贴剂、擦剂等。

本发明的药物组合物中还可以含有常用的载体，这里所述可药用载 体包括但不局限于：离子交换剂，氧化铝，硬脂酸铝，卵磷脂，血清蛋 白如人血清蛋白，缓冲物质如磷酸盐，甘油，山梨酸，山梨酸钾，饱和 植物脂肪酸的部分甘油酯混合物，水，盐或电解质，如硫酸鱼精蛋白， 磷酸氢二钠，磷酸氢钾，氯化钠，锌盐，胶态氧化硅，三硅酸镁，聚乙 烯吡咯烷酮，纤维素物质，聚乙二醇，羧甲基纤维素钠，聚丙烯酸酯， 蜂蜡，羊毛酯等。载体在药物组合物中的含量可以是1重量％-98重量％， 通常大约占到80重量％。为方便起见，局部麻醉剂，防腐剂，缓冲剂等 可直接溶于载体中。

口服片剂和胶囊可以含有赋形剂如粘合剂，如糖浆，阿拉伯胶，山 梨醇，黄芪胶，或聚乙烯吡咯烷酮，填充剂，如乳糖，蔗糖，玉米淀粉， 磷酸钙，山梨醇，氨基乙酸，润滑剂，如硬脂酸镁，滑石，聚乙二醇， 硅土，崩解剂，如马铃薯淀粉，或可接受的增润剂，如月桂醇钠硫酸盐。 片剂可以用制药学上公知的方法包衣。

口服液可以制成水和油的悬浮液，溶液，乳浊液，糖浆或酏剂，也 可以制成干品，用前补充水或其它合适的媒质。这种液体制剂可以包含 常规的添加剂，如悬浮剂，山梨醇，纤维素甲醚，葡萄糖糖浆，凝胶， 羟乙基纤维素，羧甲基纤维素，硬脂酸铝凝胶，氢化的食用油脂，乳化 剂，如卵磷脂，山梨聚醣单油酸盐，阿拉伯树胶；或非水载体(可能包 含可食用油)，如杏仁油，油脂如甘油，乙二醇，或乙醇；防腐剂，如 对羟基苯甲酸甲酯或丙酯，山梨酸。如需要可添加调味剂或着色剂。

栓剂可包含常规的栓剂基质，如可可黄油或其它甘油酯。

对胃外投药，液态剂型通常由化合物和一种消毒的载体制成。载体 首选水。依照所选载体和药物浓度的不同，化合物既可溶于载体中也可 制成悬浮溶液，在制成注射用溶液时先将化合物溶于水中，过滤消毒后 装入封口瓶或安瓿中。

当皮肤局部施用时，本发明化合物可以制成适当的软膏，洗剂，或 霜剂的形式，其中活性成分悬浮或溶解于一种或多种的载体中。其中软 膏制剂可以使用的载体包括但不局限于：矿物油，液体凡士林，白凡士 林，丙二醇，聚氧化乙烯，聚氧化丙烯，乳化蜡和水；洗剂和霜剂可使 用的载体包括但不限于：矿物油，脱水山梨糖醇单硬脂酸酯，吐温60， 十六烷酯蜡，十六碳烯芳醇，2-辛基十二烷醇，苄醇和水。

依据给药方式的不同，组分中可以含有重量比0.1％，或更合适的重 量比10-60％的活性组分。但组分中包含单位剂量时，每个单位最好包含 50-500毫克活性成分。依据给药途径和给药频率的不同，用于成人的适 宜治疗剂量为每天100-3000毫克，如每天1500毫克。这一剂量对应于 1.5-50毫克/公斤/天，合适的剂量是5-20毫克/公斤/天。

必须认识到，通式I化合物的最佳给药剂量和间隔是由化合物性质 和诸如给药的形式、路径和部位以及所治疗的特定哺乳动物等外部条件 决定的，而这一最佳给药剂量可用常规的技术确定。同时也必须认识到， 最佳的疗程，即通式I化合物在额定的时间内每日的剂量，可用本领域 内公知的方法确定。

                      具体实施方式

下面的具体实施例是本发明的优选实施方案，其不应理解为对本发 明构成任何限制。

化合物的熔点由RY-1熔点仪测定，温度计未较正。质谱由 Micromass ZabSpec高分辨率质谱仪(分辨率1000)测定。1H NMR由 JNM-ECA-400超导NMR仪测定，工作频率1H NMR 400MHz。

                      实施例

实施例1  4-[1-(3，4-亚甲二氧基苯基)-2-(6-甲基吡啶-2- 基)-1H-咪唑-4-基]苯腈的制备

步骤1 N-(3，4-亚甲二氧基苯基)-(6-甲基吡啶-2-基)甲脒的制备

向4.0mL 1M的双三甲基硅基氨基钠的5mLTHF(无水)溶液中缓慢 滴入508mg(3.6mmol)3，4-亚甲二氧基苯胺的3mL THF(无水)溶液，将 此混合物在室温下搅拌20分钟后滴入425mg(3.6mmol)6-甲基-2-腈基 吡啶的3mL THF(无水)溶液，将此混合物在室温下反应过夜，然后冲入 冰水中，用乙酸乙酯萃取至水层无产物，有机层用水洗，无水NaCl溶 液洗涤，无水MgSO4干燥，蒸发溶剂后残余物用硅胶柱层析(二氯甲烷/ 甲醇100/0.5洗脱)得到495mg N-(3，4-亚甲二氧基苯基)-(6-甲基吡 啶-2-基)甲脒，收率54％，mp：108-110℃，1H-NMR(400M，CDC13) δ2.59(3H，s，CH3)，5.96(2H，s，O-CH2-O)，6.49(1H，dd， J＝8.12，1.40Hz)，6.59(1H，d，J＝1.40Hz)，6.83(1H，d，J＝8.12Hz)， 7.24(1H，d，J＝7.68Hz)，7.70(1H，dd(t)，J＝7.68，7.68Hz)，8.21(1H， d，J＝7.68Hz).EIMS(m/e，％)255(M+，100)，137(85)。

步骤2 4-腈基溴乙酰苯的制备

向1.45g(10mmol)4-腈基乙酰苯的25mL冰乙酸溶液中滴入5滴由 1.10g液溴和冰乙酸配成的溶液，油浴35-40℃下搅拌至溴水颜色消失， 再缓慢滴入上述溴水的冰乙酸溶液，保持反应温度在30℃左右，滴完之 后，反应混合物在30℃左右继续反应3小时，然后在室温下敞口搅拌过 夜，减压蒸去冰乙酸，残余物固化后用乙醚洗涤得到1.36g 4-腈基溴乙 酰苯，收率61％，mp：84-86℃，1H-NMR(400M，CDCl3)δ4.44(3H，s)， 7.83(2H，d，J＝8.40Hz)，8.09(2H，d，J＝8.40Hz)。

步骤3 4-[1-(3，4-亚甲二氧基苯基)-2-(6-甲基吡啶-2-基)-1H-咪 唑-4-基]苯腈的制备

将220mg(0.86mmol)N-(3，4-亚甲二氧基苯基)-(6-甲基吡啶-2-基) 甲脒和309mg(1.38mmol)4-腈基溴乙酰苯溶于14mL异丙醇中，加入 108mg(1.29mmol)碳酸氢钠，将此反应混合物加热至50℃反应1.5小时， 然后在80℃下反应3小时，降至室温后浓缩反应液，残余物用硅胶柱层 析分离(二氯甲烷/甲醇100/0.3洗脱)得到210mg目的化合物，收率 64％，mp：185-187℃，1H-NMR(400M，CDCl3)δ2.38(3H，s，CH3)，6.05(1H， s，O-CH2-O)，6.78(1H，dd，J＝7.84，1.92Hz，)，6.79(1H，d，J＝1.92Hz)， 6.80(1H，d，J＝7.84Hz)，7.07(1H，d，J＝7.28Hz)，7.51(1H，s，C5H)， 7.58(1H，dd，J＝7.28，7.56Hz)，7.63(1H，d，J＝7.56Hz)，7.68(1H，d， J＝8.40Hz，)，7.98(1H，d，J＝8.40).EIMS(m/e，100)，380(M+，93)， 379(M+-H，100)。

实施例2  4-[1-(3，4-亚甲二氧基苯基)-2-(6-甲基吡啶-2- 基)-1H-咪唑-4-基]苯甲酰胺的制备

取100mg 4-[1-(3，4-亚甲二氧基苯基)-2-(6-甲基吡啶-2-基)-1H- 咪唑-4-基]苯腈(制法见实施例1)，加热溶于5mL叔丁醇中，再加入 60mg KOH粉末，油浴100℃下加热反应4小时，原料消失，将反应混 合物降至室温后减压蒸去溶剂，残余物硅胶柱层析纯化(二氯甲烷/甲 醇100/2洗脱)得到62mg 4-[1-(3，4-亚甲二氧基苯基)-2-(6-甲基吡 啶-2-基)-1H-咪唑-4-基]苯甲酰胺，收率60％，mp：218-220℃， 1H-NMR(400M，CDCl3)δ2.21(3H，s，CH3)，6.11(1H，s，O-CH2-O)， 6.82(1H，dd，J＝8.12，2.24Hz)，6.97(1H，d，J＝8.12Hz)，7.02(1H，d， J＝2.24Hz)，7.17(1H，dd，J＝7.08，1.40Hz)，7.32(1H，brs，NH D2O可 互换的)，7.75(1H，dd，J＝7.08，7.00Hz)，7.77(1H，dd，J＝7.00， 1.40Hz)，7.93(1H，d，J＝8.40Hz)，7.96(1H，d，J＝8.40)，7.97(1H，brs， NH，D2O可互换的)，8.10(1H，s)。EIMS(m/e，％)398(M+，100).HR-EIMS 计算值C23H18N4O3 398.1379，实测值398.1360。

实施例3  4-[1-(3，4-亚甲二氧基苯基)-2-(2-氟苯基)-1H-咪唑 -4-基]苯腈的制备

步骤1 N-(3，4-亚甲二氧基苯基)-(2-氟苯基)甲脒的制备

方法同实施例1步骤1，只是以2-氟苯腈代替6-甲基-2-腈基吡啶， 得到4-[1-(3，4-亚甲二氧基苯基)-2-(2-氟苯基)-1H-咪唑-4-基]苯腈 粗品，收率38％，油状物，1H-NMR(400M，CDCl3)δ5.94(2H，s，O-CH2-O)， 6.42(1H，d，J＝8.12Hz)，6.53(1H，s)，6.79(1H，d，J＝8.12Hz)，7.09-7.14( 1H，m)，7.21-7.25(1H，m7.43)，7.40-7.46(1H，m)，8.04(1H，m).FAB-MS(m /e，％)，259(M+，100)，242(M+-NH2，15)。

步骤2 4-[1-(3，4-亚甲二氧基苯基)-2-(2-氟苯基)-1H-咪唑-4- 基]苯腈的制备

方法同实施例1步骤3，只是以N-(3，4-亚甲二氧基苯基)-(2-氟苯 基)甲脒代替N-(3，4-亚甲二氧基苯基)-(6-甲基-吡啶-2-基)甲脒，得 到4-[1-(3，4-亚甲二氧基苯基)-2-(2-氟苯基)-1H-咪唑-4-基]苯腈， 收率74％，mp：168-170℃，1H-NMR(400M，CDCl3)δ6.04(2H，s，O-CH2-O)， 6.66(1H，dd，J＝8.12，1.68Hz)，6.68(1H，d，J＝1.68Hz)，6.75(01H，d， J＝8.12Hz)，7.01(1H，dd，J＝9.24，8.68Hz)，7.24(1H，dd，J＝7.28， 7.56Hz)，7.40(1H，m)，7.59(1H，s，C5H)，7.63(1H，m)，7.70(2H，d， J＝8.40Hz)，7.98(2H，d，J＝8.40Hz)，FABMS(m/e，％)，384(MH+，100)。

实施例4  4-[1-(3，4-亚甲二氧基苯基)-2-(2-氟苯基)-1H-咪唑 -4-基]苯甲酰胺的制备

方法同实施例2，只是以4-[1-(3，4-亚甲二氧基苯基)-2-(2-氟苯 基)-1H-咪唑-4-基]苯腈(制法见实施例3)代替4-[1-(3，4-亚甲二氧 基苯基)-2-(6-甲基吡啶-2-基)-1H-1H-咪唑-4-基]苯腈，得到 4-[1-(3，4-亚甲二氧基苯基)-2-(2-氟苯基)-1H-咪唑-4-基]苯甲酰胺， 收率63％，mp：111-113℃，1H-NMR(400M，CDCl3)δ5.69(1H，brs，NH，可 互换的)，6.02(2H，s，O-CH2-O)，6.18(1H，brs，NH，可互换的)， 6.67(1H，dd，J＝8.12，1.96Hz)，6.70(1H，d，J＝1.96Hz)，6.74(1H，d， J＝8.12Hz)，6.99(1H，dd，J＝9.56，8.68Hz)，7.22(1H，ddd，J＝7.56， 7.56，0.84Hz，)，7.37(1H，m)，7.67(1H，s)，7.62(1H，ddd，J＝7.28， 7.56，1.40Hz)，7.87(2H，d，J＝8.40Hz，)，7.94(2H，d， J＝8.40Hz).EIMS(m/e，％)401(M+，100)，383(M+-H2O，18)，255(80). HR-EIMS计算值C23H16FN3O3 401.1176，实测值401.1178。

实施例5  4-[1-(3，4-亚甲二氧基苯基)-2-(吡啶-2-基)-1H-咪唑 -4-基]苯腈的制备

步骤1 N-(3，4-亚甲二氧基苯基)-(吡啶-2-基)甲脒的制备

方法同实施例1步骤1，只是以吡啶-2-基代替6-甲基-吡啶-2-基， 得到N-(3，4-亚甲二氧基苯基)-(吡啶-2-基)甲脒，收率36％，油状物， 1H-NMR(400M，CD3COCD3)δ5.96(2H，s，O-CH2-O)，6.43(1H，dd， J＝8.00，1.92Hz)，6.51(1H，d，J＝1.92Hz)，6.80(1H，d，J＝8.00Hz)， 7.51(1H，dd，J＝7.72，4.68Hz)，7.92(1H，dd，J＝8.00，7.72Hz)， 8.37(1H，d，J＝8.00Hz)，8.61(1H，d，J＝4.68Hz).FAB-MS(m/e，％)， 242(MH+，100)，225(MH+-NH3，70)。

步骤2 4-[1-(3，4-亚甲二氧基苯基)-2-(吡啶-2-基)-1H-咪唑-4- 基]苯腈的制备

方法同实施例1步骤3，只是以N-(3，4-亚甲二氧基苯基)-(吡啶-2- 基)甲脒代替N-(3，4-亚甲二氧基苯基)-(6-甲基吡啶-2-基)甲脒，得到 4-[1-(3，4-亚甲二氧基苯基)-2-(吡啶-2-基)-1H-咪唑-4-基]苯腈，收 率30％，mp：187-189℃，1H-NMR(400M，CDCl3)δ6.06(2H，s，O-CH2-O)， 6.77，6.80(2H，Absystem，J＝9.00Hz，C5’H)，6.78(1H，s)，7.22(1H， dd，J＝7.60，5.64Hz)，7.52(1H，s，C5H)，7.70(2H，d，J＝8.16Hz)， 7.72(1H，dd，J＝7.60，7.88Hz)，7.88(1H，d，J＝7.88Hz)，7.99(2H，d， J＝8.16Hz)，8.45(1H，d，J＝5.64Hz).EIMS(m/e，％)366(M+，80)， 365(M+-H，100)。

实施例6  4-[1-(3，4-亚甲二氧基苯基)-2-(吡啶-2-基)-1H-咪唑 -4-基]苯甲酰胺的制备

方法同实施例2，只是以4-[1-(3，4-亚甲二氧基苯基)-2-(吡啶-2- 基)-1H-咪唑-4-基]苯腈(制法见实施例5)代替4-[1-(3，4-亚甲二氧 基苯基)-2-(6-甲基吡啶-2-基)-1H-咪唑-4-基]苯腈，得到4-[1-(3，4- 亚甲二氧基苯基)-2-(吡啶-2-基)-1H-咪唑-4-基]苯甲酰胺，收率83％， mp：218-220℃，1H-NMR(400M，DMSO-d6)δ6.10(2H，s，O-CH2-O)， 6.81(1H，dd，J＝8.32，2.08Hz)，6.94(1H，d，J＝8.32Hz)，6.98(1H，d， J＝2.08Hz)，7.33(1H，dd，J＝7.40，4.76Hz)，7.88(1H，dd，J＝7.40， 7.88Hz)，8.00(1H，d，J＝7.88Hz)，7.93(2H，d，J＝8.60Hz)，7.96(2H， d，J＝8.60Hz)，8.06(1H，s，C5H)，8.37(1H，d，J＝4.76Hz).FABMS(m/e， ％)385(MH+，25)，69(100)。

实施例7  4-[1-(2-氟苯基)-2-(3，4-亚甲二氧基苯基)-1H-咪唑 -4-基]苯腈的制备

步骤1 N-(2-氟苯基)-(3，4-亚甲二氧基苯基)甲脒的制备

方法同实施例1步骤1，只是以2-氟苯胺和3，4-亚甲二氧基苯腈分 别代替3，4-亚甲二氧基苯胺和6-甲基-2-腈基吡啶，得到N-(2-氟苯 基)-(3，4-亚甲二氧基苯基)甲脒粗品，收率38％，直接用于下步反应。

步骤2 4-[1-(2-氟苯基)-2-(3，4-亚甲二氧基苯基)-1H-咪唑-4- 基]苯腈的制备

方法同实施例1步骤3，只是以N-(2-氟苯基)-(3，4-亚甲二氧基苯 基)甲脒代替N-(3，4-亚甲二氧基苯基)-(6-甲基-吡啶-2-基)甲脒，得 到4-[1-(2-氟苯基)-2-(3，4-亚甲二氧基苯基)-1H-咪唑-4-基]苯腈， mp：204-206℃，1H-NMR(400M，CDCl3)δ5.97(2H，s，O-CH2-O)，6.72(1H， d，J＝8.08Hz)，6.90(1H，dd，J＝8.08，1.36Hz)，7.00(1H，d，J＝1.36Hz)， 7.2-7.31(3H，m)，7.45-7.48(1H，m)，7.48(1H，s，C5H)，7.70(2H，d， J＝8.32Hz)，7.98(2H，d，J＝8.32Hz).FABMS(m/e，％)384(MH+，100)。

实施例8  4-[1-(2-氟苯基)-2-(3，4-亚甲二氧基苯基)-1H-咪唑 -4-基]苯甲酰胺的制备

方法同实施例2，只是以4-[1-(2-氟苯基)-2-(3，4-亚甲二氧基苯 基)-1H-咪唑-4-基]苯腈(制法见实施例7)代替4-[1-(3，4-亚甲二氧 基苯基)-2-(6-甲基吡啶-2-基)-1H-咪唑-4-基]苯腈，得到4-[1-(2-氟 苯基)-2-(3，4-亚甲二氧基苯基)-1H-咪唑-4-基]苯甲酰胺，收率82％， mp：185-186℃，1H-NMR(400M，CDCl3)δ5.6-6.2(2H，br，NH，可互换的)， 5.95(2H，s，O-CH2-O)，6.71(1H，d，J＝8.12Hz)，6.90(1H，dd，J＝8.12， 1.68Hz)，7.00(1H，d，J＝1.68Hz)，7.21-7.33(3H，m)，7.41-7.46(1H， m)，7.46(1H，s，C5H)，7.87(2H，d，J＝8.04Hz)，7.96(2H，d， J＝8.04Hz).EIMS(m/e，％)，401(M+，100)，383(M+-H2O，30).HR-EIMS 计算值C23H16FN3O3 401.1176，实测值401.1169。

实施例9  4-[1-(苯并-1，4-二氧六环-6-基)-2-(吡啶-2-基)-1H- 咪唑-4-基]苯腈的制备

步骤1 N-(苯并-1，4-二氧六环-6-基)-(吡啶-2-基)甲脒的制备

方法同实施例1步骤1，只是以6-氨基-苯并-1，4-二氧六环和2- 腈基吡啶分别代替3，4-亚甲二氧基苯胺和6-甲基-2-腈基吡啶，得到 N-(苯并-1，4-二氧六环-6-基)-(吡啶-2-基)甲脒，收率32％，mp：101-103 ℃，1H-NMR(400M，CDCl3)δ4.28(4H，s，O-CH2-CH2-O)，6.54(1H，dd， J＝8.40，2.24Hz)，6.58(1H，d，J＝2.24Hz)，6.86(1H，d，J＝8.40Hz)， 7.39(1H，dd，J＝7.28，4.76Hz)，7.80(1H，dd，J＝7.28，7.28Hz)， 8.40(1H，d，J＝7.28Hz)，8.56(1H，d，J＝4.76Hz).EIMS(m/e，％)，255(M+， 100)。

步骤2 4-[1-(苯并-1，4-二氧六环-6-基)-2-(吡啶-2-基)-1H-咪 唑-4-基]苯腈的制备

方法同实施例1步骤3，只是以N-(苯并-1，4-二氧六环-6-基)-(吡 啶-2-基)甲脒代替N-(3，4-亚甲二氧基苯基)-(6-甲基吡啶-2-基)甲脒， 得到4-[1-(苯并-1，4-二氧六环-6-基)-2-(吡啶-2-基)-1H-咪唑-4-基] 苯腈，收率43％，mp：193-195℃，1H-NMR(400M，CDCl3)δ4.28(4H，dd， J＝0.76Hz，O-CH2-CH2-O)，6.75(1H，dd，J＝8.68，2.24Hz)，6.85(1H，d， J＝2.24Hz)，6.86(1H，d，J＝8.68Hz)，7.23(1H，m)，7.53(1H，m)， 7.73(1H，m)，7.88(1H，m)，7.69(2H，d，J＝8.03Hz)，8.00(2H，d， J＝8.03Hz).FABMS(m/e，％)381(MH+，100)。

实施例10  4-[1-(苯并-1，4-二氧六环-6-基)-2-(吡啶-2-基)-1H- 咪唑-4-基]苯甲酰胺的制备

方法同实施例2，只是以4-[2-(苯并-1，4-二氧六环-6-基)-1-(吡 啶-2-基)-1H-咪唑-4-基]苯腈(制法见实施例9)代替4-[1-(3，4-亚甲 二氧基苯基)-2-(6-甲基吡啶-2-基)-1H-咪唑-4-基]苯腈，得到 4-[2-(3，4-亚甲二氧基苯基)-1-(2-氟苯基)-1H-咪唑-4-基]苯甲酰胺， 收率73％，mp：225-227℃，1H-NMR(400M，CDCl3)δ4.31(4H，AB system， J＝0.76Hz，O-CH2-CH2-O)，5.5(1H，brs，NH，可互换的)，6.1(1H，brs， NH，可互换的)，6.76(1H，dd，J＝8.40，2.80Hz)，6.87(1H，d， J＝2.80Hz)，6.89(1H，d，J＝8.40Hz)，7.26(2H，m)，7.52(1H，s， C5H)，7.78(1H，m)，8.48(1H，m)，7.90(2H，d，J＝8.12Hz)，8.00(2H， d，J＝8.03Hz).EIMS(m/e，％)398(M+，100)，380(M+-H2O，20).HR-EIMS 计算值C23H18N4O3 398.1379，实测值398.1371。

实施例11  4-[1-(苯并-1，4-二氧六环-6-基)-2-(6-甲基吡啶-2- 基)-1H-咪唑-4-基]苯腈的制备

步骤1 N-(苯并-1，4-二氧六环-6-基)-(6-甲基吡啶-2-基)甲脒 的制备

方法同实施例1步骤1，只是以6-氨基-苯并-1，4-二氧六环代替 3，4-亚甲二氧基苯胺，得到N-(苯并-1，4-二氧六环-6-基)-(吡啶-2-基 6-甲基吡啶-2-基)甲脒粗品，收率：87％，直接用于下步反应。

步骤2 4-[1-(苯并-1，4-二氧六环-6-基)-2-(6-甲基吡啶-2-基)- 1H-咪唑-4-基]苯腈的制备

方法同实施例1步骤3，只是以N-(苯并-1，4-二氧六环-6-基)-(吡 啶-2-基)甲脒代替N-(3，4-亚甲二氧基苯基)-(6-甲基吡啶-2-基)甲脒， 得到4-[1-(苯并-1，4-二氧六环-6-基)-2-(6-甲基吡啶-2-基)-1H-咪唑 -4-基]苯腈，收率43％，mp：146-148℃，1H-NMR(400M，CDCl3)δ2.39(3H， s)，4.31(4H，m)，6.78(1H，dd，J＝8.44，2.52Hz)，6.87(1H，d， J＝2.52Hz)，6.89(1H，d，J＝8.44Hz)，7.11(1H，d，J＝7.84Hz)，7.37(1H， d，J＝7.56Hz)，7.52(1H，s)，7.60(1H，7.84，7.56Hz)，7.70(2H，d， J＝8.40Hz)，8.02(2H，J＝8.40Hz).EIMS(m/e，100)，394(M+，90)， 393(M+，100)。

实施例12  4-[1-(苯并-1，4-二氧六环-6-基)-2-(6-甲基吡啶-2- 基)-1H-咪唑-4-基]苯甲酰胺的制备

方法同实施例2，只是以4-[1-(苯并-1，4-二氧六环-6-基)-2-(6- 甲基吡啶-2-基)-1H-咪唑-4-基]苯腈(制法见施例11)代替4-[1-(3，4- 亚甲二氧基苯基)-2-(6-甲基吡啶-2-基)-1H-咪唑-4-基]苯腈得到 4-[1-(苯并-1，4-二氧六环-6-基)-2-(6-甲基吡啶-2-基)-1H-咪唑-4- 基]苯甲酰胺，收率45％，mp：245-247℃，1H-NMR(400M，CDCl3)δ4.30(4H， s，O-CH2-CH2-O)，5.7(1H，brs，NH，可互换的)，6.2(1H，brs，NH，可 互换的)，6.78(1H，dd，J＝8.68，2.52Hz)，6.87(1H，d，J＝2.52Hz)， 6.85(1H，d，J＝8.68Hz)，7.06(1H，d，J＝7.28Hz)，7.50(1H，s，C5H)， 7.56(1H，dd，J＝7.84，7.28Hz)，7.59(1H，d，J＝7.84Hz)，7.82(2H， d，J＝8.44Hz)，7.97(2H，d，J＝8.44Hz).EIMS(m/e，％)412(M+，100)， 393(M+-F，60).HR-EIMS计算值C24H20N4O3 412.1535，实测值412.1537。

实施例13  4-[1-(3，4-二甲氧苯基)-2-(吡啶-2-基)-1H-咪唑-4- 基]苯腈的制备

步骤1 N-(3，4-二甲氧苯基)-(吡啶-2-基)甲脒的制备

方法同实施例1步骤1，只是以3，4-二甲氧苯基苯胺和2-腈基吡 啶分别代替3，4-亚甲二氧基苯胺和6-甲基-2-腈基吡啶，得到N-(3，4- 二甲氧苯基)-(吡啶-2-基)甲脒，收率42％，mp：122-125℃，1H-NMR(400M， CDCl3)δ3.88(3H，s，O-CH3)，3.89(3H，s，O-CH3)，6.60(1H，dd， J＝8.40，2.24Hz)，6.64(1H，d，J＝2.24Hz)，6.88(1H，d，J＝8.40Hz)， 7.41(1H，dd，J＝7.84，4.48Hz)，7.82(1H，dd，J＝7.84，7.84Hz)， 8.43(1H，d，7.84Hz)，8.58(1H，d，J＝4.48Hz).FABMS(m/e，100)， 258(MH+，100)，241(MH+-NH3，85)。

步骤2 4-[1-(3，4-二甲氧苯基)-2-(吡啶-2-基)-1H-咪唑-4-基] 苯腈的制备

方法同实施例1步骤3，只是以N-(3，4-二甲氧苯基)-(吡啶-2-基) 甲脒代替N-(3，4-亚甲二氧基苯基)-(6-甲基吡啶-2-基)甲脒，得到 4-[1-(3，4-二甲氧苯基)-2-(吡啶-2-基)-1H-咪唑-4-基]苯腈， mp：189-191℃，1H-NMR(400M，CDCl3)δ3.78(3H，s，O-CH3)，3.94(3H， s，O-CH3)，6.81(1H，s)，6.87(1H，s)，6.88(1H，s)，7.22(1H，dd， J＝6.76，5.06Hz)，7.70(2H，d，J＝8.40Hz)，7.56(1h，s，C5H)，7.71(1H， m)，7.84(1H，d，J＝7.88Hz)，8.02(2H，d，J＝8.40Hz，)，8.58(1H，d， J＝5.06Hz)，FABMS(m/e，％)383(M+，100)。

实施例14  4-[1-(3，4-二甲氧苯基)-2-(吡啶-2-基)-1H-咪唑-4- 基]苯甲酰胺的制备

方法同实施例2，只是以4-[1-(3，4-二甲氧苯基)-2-(吡啶-2- 基)-1H-咪唑-4-基]苯腈(制法见实施例13)代替4-[1-(3，4-亚甲二氧 基苯基)-2-(6-甲基吡啶-2-基)-1H-咪唑-4-基]苯腈得到4-[1-(3，4-二 甲氧苯基)-2-(吡啶-2-基)-1H-咪唑-4-基]苯甲酰胺，收率60％，183-184 ℃：1H-NMR(400M，CDCl3)δ3.72(3H，s，O-CH3)，3.88(3H，s，O-CH3)， 5.68(H，br，NH，可互换的)，6.20(H，br，NH，可互换的)，6.77(1H， d，J＝1.68Hz)，6.85(1H，d，J＝8.40Hz)，6.86(1H，s)，6.88(1H，dd， J＝8.40，1.68Hz)，7.28(1H，dd，J＝7.56，5.04Hz)，7.46(1H，d， J＝8.12Hz，)，7.80(1H，dd，J＝8.12，7.56Hz)，7.87(2H，d，J＝8.04Hz)， 7.96(2H，d，J＝8.04Hz).8.48(1H，d，J＝5.04Hz).EIMS(m/e，％)400(M+， 100)。

实施例15  2-[(1-(4-氟苯基)-4-叔丁基-1H-咪唑-2-基)]-6-甲基 吡啶的制备

方法同实施例1步骤3，只是以1-溴频哪酮和N-(4-氟苯基)-(6- 甲基吡啶-2-基)甲脒分别代替4-溴乙酰苯腈和N-(3，4-亚甲二氧基苯 基)-(6-甲基吡啶-2-基)甲脒，得到2-(1-(4-氟苯基)-4-叔丁基-1H-咪 唑-2-基)-6-甲基吡啶，收率：67％，mp：177-179℃，1H-NMR(400M，CDCl3) δ1.38(9H，s，-C(CH3)3)，2.24(3H，s，CH3)，6.85(1H，s)，6.99(1H， d，J＝7.56Hz，C5H)，7.03(2H，dd，J＝8.68，8.68Hz)，7.21(2H，dd， J＝8.96，4.76Hz)，7.55(1H，dd，J＝7.88，7.56Hz)，7.67(1H，d， J＝7.88Hz).EIMS(m/e，100)，309(M+，50)，294(M+-CH3，100).EI-HRMS 计算值C19H20FN3 309.1642，实测值309.1647。

实施例16  2-[(1-(苯并-1，4-二氧六环-6-基)-4-叔丁基-1H-咪唑 -2-基)]-6-甲基吡啶的制备

方法同实施例1步骤3，只是以1-溴频哪酮和N-(苯并-1，4-二氧六 环-6-基)-(6-甲基吡啶-2-基)甲脒分别代替4-溴乙酰苯腈和N-(3，4- 亚甲二氧基苯基)-(6-甲基吡啶-2-基)甲脒，得到2-(1-(苯并-1，4-二 氧六环-6-基)-4-叔丁基-1H-咪唑-2-基)-6-甲基吡啶，收率41％， mp：75-77℃，1H-NMR(400M，CDCl3)δ1.38(9H，s)，2.35(3H，s)，4.27(4H， s)，6.69(1H，dd，J＝9.24，2.52Hz)，6.79(1H，d，J＝9.24Hz)，6.82(1H， d，J＝2.52Hz)，6.84(1H，s)，7.00(1H，bs)，7.53(2H，m). EIMS(m/e，100)349(M+，75)，334(M+-CH3，100).EI-HRMS计算值 C21H23N3O2 349.1790，实测值349.1781。

实施例17  2-[(1-(3-氟-4-甲氧基苯基)-4-叔丁基-1H-咪唑-2- 基)]-6-甲基吡啶的制备

方法同实施例1步骤3，只是以1-溴频哪酮和N-(3-氟-4-甲氧基苯 基)-(6-甲基吡啶-2-基)甲脒分别代替4-溴乙酰苯腈和N-(3，4-亚甲二 氧基苯基)-(6-甲基吡啶-2-基)甲脒，得到2-(1-(3-氟-4-甲氧基苯 基)-4-叔丁基-1H-咪唑-2-基)-6-甲基吡啶，收率：61％，mp：98-100 ℃，1H-NMR(400M，CDCl3)δ1.40(9H，s，-C(CH3)3)，2.28(3H，s，CH3)， 3.92(3H，s，O-CH3)，6.84(1H，s)，6.91(1H，dd，J＝8.72，8.68Hz)， 6.97(1H，m，)，7.02(1H，d，J＝7.60，Hz)，7.07(1H，dd，J＝11.44， 2.52Hz)，7.57(1H，d，J＝7.72，7.56Hz)，7.59(1H，d，J＝7.72Hz)。 EIMS(m/e，100)，339(M+，45)，324(M+-CH3，100).EI-HRMS计算值 C20H22FN3O 339.1747，实测值339.1749。

实施例18  4-[1-(3-氟-4-甲氧基苯基)-2-(6-甲基吡啶-2-基)- 1H-咪唑-4-基]苯腈的制备

步骤1 N-(3-氟-4-甲氧基苯基)-(6-甲基吡啶-2-基)甲脒的制备

方法同实施例1步骤1，只是以33-氟-4-甲氧基苯胺代替3，4-亚 甲二氧基苯胺，得到N-(3-氟-4-甲氧基苯基)-(6-甲基吡啶-2-基)甲脒， 收率58％，油状物，1H-NMR(400M，CDCl3)δ2.59(3H，s，CH3)，3.89(3H， s，O-CH3)，6.77(1H，d，J＝8.96Hz)，6.84(1H，dd，J＝12.6，2.24Hz)， 6.98(1H，dd，J＝8.96，9.00Hz)，7.27(1H，d，J＝7.60Hz)，7.71(1H，dd， J＝7.60，7.84Hz)，8.19(1H，d，J＝7.84Hz)。FABMS(m/e，100)，260(MH+， 100)，243(MH+-NH3，95)。

步骤2 4-[1-(3-氟-4-甲氧基苯基)-2-(6-甲基吡啶-2-基)-1H-咪 唑-4-基]苯腈的制备

方法同实施例1步骤3，只是以N-(3-氟-4-甲氧基苯基)-(6-甲基 吡啶-2-基)甲脒代替N-(3，4-亚甲二氧基苯基)-(6-甲基-吡啶-2-基)甲 脒，得到4-[1-(3-氟-4-甲氧基苯基)-2-(6-甲基吡啶-2-基)-1H-咪唑 -4-基]苯腈，收率61％，mp：162-164℃ 1H-NMR(400M，CDCl3)δ2.28(3H， s，CH3)，3.92(3H，s，O-CH3)，6.98(1H，dd，J＝8.68，8.68Hz)， 7.06-7.08(1H，m)，7.11(1H，d，J＝7.84Hz)，7.14(1H，dd，J＝11.24， 2.52Hz)，7.51(1H，s)，7.64(1H，dd，J＝7.84，7.56Hz)，7.72(2H，d， J＝8.40Hz，7.86(1H，d，J＝7.56Hz)，8.03(2H，d，J＝8.40Hz)。FABMS(m/e， 100)，385(MH+，100)。

实施例19  4-[1-(3-氟-4-甲氧基苯基)-2-(6-甲基吡啶-2- 基)-1H-咪唑-4-基]苯甲酰胺的制备

方法同实施例2，只是以4-[1-(3-氟-4-甲氧基苯基)-2-(6-甲基吡 啶-2-基)-1H-咪唑-4-基]苯腈(制法见实施例18)代替4-[1-(3，4-亚 甲二氧基苯基)-2-(6-甲基吡啶-2-基)-1H-咪唑-4-基]苯腈，得到 4-[1-(3-氟-4-甲氧基苯基)-2-(6-甲基吡啶-2-基)-1H-咪唑-4-基]苯 甲酰胺，收率70％，mp：204-206℃，1H-NMR(400M，CDCl3)δ2.16(3H，s， CH3)，4.00(3H，s，O-CH3)，7.15(1H，m)，7.19(1H，d，J＝7.56Hz)， 7.22(1H，d，J＝8.96，9.00Hz)，7.33(1H，brs，可互换的)，7.39(1H， dd，J＝11.76，2.24Hz)，7.76(1H，dd，J＝7.56，7.56Hz)，7.82(1H， 7.56Hz，7.93(2H，d，J＝8.72Hz)，7.97(2H，d，J＝8.72Hz)，8.14(1H， s)。EIMS(m/e，100)，402(M+，100)，383(M+-F，88).HR-EIMS计算值 C23H19FN4O2 402.1492实测值401.1500。

实施例20  4-[1-(4-氟苯基)-2-(6-甲基吡啶-2-基)-1H-咪唑-4- 基]苯腈的制备

步骤1 N-(4-氟苯基)-(6-甲基吡啶-2-基)甲脒的制备

方法同实施例1步骤1，只是以4-氟苯胺代替3，4-亚甲二氧基苯胺， 得到N-(4-氟苯基)-(6-甲基吡啶-2-基)甲脒，收率：74％，mp：82-85 ℃ 1H-NMR(400M，CDCl3)δ2.59(3H，s)，6.96-7.00(2H，m)， 7.04-7.09(2H，m)，7.27(1H，d，J＝7.56Hz)，7.71(1H，dd， J＝7.56，7.56Hz)，8.20(1H，d，J＝7.56Hz)。EIMS(m/e，100)229(M+，88)， 228(M+-1，85)，111(100)。

步骤2 4-[1-(4-氟苯基)-2-(6-甲基吡啶-2-基)-1H-咪唑-4-基] 苯腈的制备

方法同实施例1步骤3，只是以N-(4-氟苯基)-(6-甲基吡啶-2-基) 甲脒代替N-(3，4-亚甲二氧基苯基)-(6-甲基-吡啶-2-基)甲脒，得到 4-[1-(4-氟苯基)-2-(6-甲基吡啶-2-基)-1H-咪唑-4-基]苯腈，收率： 59％，mp：234-235℃ 1H-NMR(400M，CDCl3)δ2.25(3H，s)，7.07(1H，d， J＝7.84Hz)，7.12(2H，dd，J＝8.96，8.40Hz)，7.30(2H，dd，J＝8.96， 4.76Hz)，7.53(1H，s)，7.62(1H，dd，J＝7.84，7.60Hz)，7.70(2H，d， J＝8.40Hz)，7.80(1H，d，J＝7.60Hz)，7.80(2H，d，J＝8.40Hz)。 FABMS(m/e，100)，355(MH+，68)，242(100)。

实施例21  4-[1-(4-氟苯基)-2-(6-甲基吡啶-2-基)-1H-咪唑-4- 基]苯甲酰胺的制备

方法同实施例2，只是以4-[1-(4-氟苯基)-2-(6-甲基吡啶-2- 基)-1H-咪唑-4-基]苯腈(制法见实施例20)代替4-[1-(3，4-亚甲二氧 基苯基)-2-(6-甲基吡啶-2-基)-1H-咪唑-4-基]苯腈，得到4-[1-(4-氟 苯基)-2-(6-甲基吡啶-2-基)-1H-咪唑-4-基]苯甲酰胺，收率：65％，mp： 236-238℃，1H-NMR(400M，CDCl3)δ2.25(3H，s)，5.68(1H，brs，NH， 可互换的)，6.16(1H，brs，NH，可互换的)，7.05(1H，d，J＝7.56Hz)， 7.10(2H，dd，J＝8.96，8.44Hz)，7.29(2H，dd，J＝8.96，4.76Hz)， 7.51(1H，s)，7.60(1H，dd，J＝7.84，7.56Hz)，7.88(2H，d，J＝8.40Hz)， 7.97(2H，d，J＝8.40Hz)。ESIMS(m/e，％)373(MH+，100)。

实施例22  4-[1-(3，4-亚甲二氧基苯基)-2-(2-甲氧基苯基)-1H- 咪唑-4-基]苯腈的制备

步骤1 N-(3，4-二甲氧苯基)-(2-甲氧基苯基)甲脒的制备

方法同实施例1步骤1，只是以2-甲氧基苯腈代替2-腈基吡啶，得 到N-(3，4-亚甲二氧基苯基)-(2-甲氧基苯基)甲脒，收率55％，粗品直 接用于下-步反应。

步骤2 4-[1-(3，4-亚甲二氧基苯基)-2-(2-甲氧基苯基)-1H-咪唑 -4-基]苯腈的制备

方法同实施例1步骤3，只是以N-(3，4-亚甲二氧基苯基)-(2-甲 氧基苯基)甲脒代替N-(3，4-亚甲二氧基苯基)-(6-甲基-吡啶-2-基)甲 脒，得到4-[1-(3，4-亚甲二氧基苯基)-2-(2-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4- 基]苯腈，收率66％，mp：182-184℃，1H-NMR(400M，CDCl3)δ3.47(3H， s，OCH3)，5.99(2H，s，O-CH2-O)，6.65(1H，dd，J＝8.12，1.40Hz)， 6.67(1H，d，J＝1.40Hz)，6.72(1H，d，J＝8.12Hz)，6.80(1H，d， J＝8.40Hz)，7.04(1H，dd，J＝7.60，7.28Hz)，7.38(1H，dd，J＝8.40， 7.60Hz)，7.56(1H，s)，7.57(1H，d，J＝7.28Hz)，7.67(2H，d， J＝8.16Hz)，7.96(2H，d，J＝8.16Hz).FAB-MS(m/e，100)，396(MH+， 100)。

实施例23  4-[1-(3，4-亚甲二氧苯基)-2-(2-甲氧基苯基)-1H-咪 唑-4-基]苯甲酰胺的制备

方法同实施例2，只是以4-[1-(3，4-亚甲二氧苯基)-2-(2-甲氧基 苯基)-1H-咪唑-4-基]苯腈(制法见施例22)代替4-[1-(3，4-亚甲二氧 基苯基)-2-(6-甲基吡啶-2-基)-1H-咪唑-4-基]苯腈得到4-[1-(3，4-亚 甲二氧苯基)-2-(2-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基]苯甲酰胺，收率：78％， mp：190-192℃，1H-NMR(400M，CDCl3)δ3.48(3H，s，OCH3)，5.60(1H，brs， NH)，5.99(2H，s，O-CH2-O)，6.20(1H，brs，NH)，6.67(1H，dd，J＝8.12， 1.96Hz)，6.68(1H，d，J＝1.96Hz)，6.72(1H，d，J＝8.12Hz)，6.80(1H， dd，J＝8.40，0.84Hz)，7.04(1H，ddd，J＝7.56，7.60Hz)，7.38(1H，ddd， J＝8.40，7.60，1.68Hz)，7.55(1H，s)，7.58(1H，dd，J＝7.56，1.68Hz)， 7.86(2H，d，J＝8.40Hz)，7.96(2H，d，J＝8.40Hz).ESIMS(+Q)(m/e， 100)，414(MH+，100)，436(MNa+，15)。

实施例24  1-(3，4-亚甲二氧苯基)-4-叔丁基-2-(2-甲氧基苯 基)-1h-咪唑的制备

方法同实施例1步骤3，只是以1-溴频哪酮和N-(3，4-二甲氧苯 基)-(2-甲氧基苯基)甲脒(制法见实施例22，步骤1)分别代替4-溴乙 酰苯腈和N-(3，4-亚甲二氧基苯基)-(6-甲基吡啶-2-基)甲脒，得到 1-(3，4-亚甲二氧苯基)-4-叔丁基-2-(2-甲氧基苯基)-1H-咪唑，收 率：65％，mp：99-101℃，1H-NMR(400M，CDCl3)δ1.38(9H，s，-C(CH3)3)， 3.41(3H，s，O-CH3)，5.95(2H，s  ，O-CH2-O)，6.59(1H，dd， J＝8.12，2.24Hz)，6.63(1H，d，J＝2.24Hz)，6.69(1H，d，J＝8.12Hz)， 6.84(1H，s)，7.74(1H，d，J＝8.16Hz)，6.99(1H，dd，J＝7.56，7.00Hz)， 7.31(1H，dd，J＝8.16，7.00Hz)，7.52(1H，d，J＝7.56Hz)。 EIMS(m/e，100)，351(MH+，100)。

实施例25  4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)-2-(6-甲基吡啶-2- 基)-1H-咪唑-4-基]苯腈的制备

步骤1 N-(3，4-二甲氧苯基)-(6-甲基吡啶-2-基)甲脒

方法同实施例1步骤1，只是以6-甲基-2-腈基吡啶和3，4-二甲氧 苯胺分别代替2-腈基吡啶和3，4-二甲氧苯胺，得到N-(3，4-二甲氧苯 基)-(6-甲基吡啶-2-基)甲脒，收率55％。

步骤2 4-[1-(3，4-二甲氧苯基)-2-(6-甲基-吡啶-2-基)-1H-咪唑 -4-基]苯腈的制备

方法同实施例1步骤3，只是以N-(3，4-二甲氧苯基)-(6-甲基-吡 啶-2-基)甲脒代替N-(3，4-亚甲二氧基苯基)-(6-甲基-吡啶-2-基)甲 脒，得到4-[1-(3，4-二甲氧苯基)-2-(6-甲基-吡啶-2-基)-1H-咪唑-4- 基]苯腈，收率：36％，1H-NMR(400M，CDCl3)δ2.37(3H，s)，3.79(3H，s)， 3.92(3H，s)，6.84-6.86(3H，m)，7.07(1H，m)，7.55-7.57(3H，m)，7.69(2H， d，J＝8.40Hz)，7.99(2H，d，J＝8.40Hz).EIMS(m/e，％)397(MH+，100)。

实施例26  4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)-2-(6-甲基吡啶-2- 基)-1H-咪唑-4-基]苯甲酰胺的制备

方法同实施例2，只是以4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)-2-(6-甲基吡 啶)-1H-咪唑-4-基]苯腈(制法见实施例20)代替4-[1-(3，4-亚甲二氧 基苯基)-2-(6-甲基吡啶-2-基)-1H-咪唑-4-基]苯腈，得到4-[1-(3，4- 二甲氧基苯基)-2-(6-甲基吡啶-2-基)-1H-咪唑-4-基]苯甲酰胺，收 率：65％，mp：215-218℃，1H-NMR(400M，CDCl3)δ2.21(3H，s)，3.70(3H，s)， 3.79(3H，s)，6.86(1H，dd，J＝8.68，1.32Hz)，6.98(1H，d，J＝8.68Hz)， 7.02(1H，d，J＝1.32Hz)，7.19(1H，m)，7.33(1H，brs，NH，可重水交 换)，7.73(2H，m)，7.94(2H，d，J＝8.40Hz)，7.97(2H，d， J＝8.40Hz)，8.12(1H，s).E IMS(m/e，％)，415(MH+，100)。

实施例27  2-[(1-(3，4-亚甲二氧苯基)-4-叔丁基-1H-咪唑-2- 基)]-6-甲基吡啶的制备

方法同实施例1步骤3，只是以1-溴频哪酮代替4-溴乙酰苯腈，得 到2-[(1-(3，4-亚甲二氧苯基)-4-叔丁基-1H-咪唑-2-基)]-6-甲基吡啶， 收率：37％，mp：100-102℃，1H-NMR(400M， CDCl3)δ1.37(9H，s，-C(CH3)3)，2.34(3H，s)，6.00(2H，s)，6.71(1H，dd，J＝ 8.12，2.00Hz)，6.72(1H，d，J＝2.00Hz)，6.74(1H，d，J＝8.12Hz)，6.83(1H， s)，6.99(1H，m)，7.52(2H，m).EIMS(m/e，％)，336(MH+，100)。

本发明涉及的化合物的ALK5抑制活性可用如下方法检测：

实施例28

将HB1117细胞培养于含10％胎牛血清的DMEM中，将复苏后2-5代 的细胞以2-8×103个细胞/孔的密度接种在96孔板上。给药前4-8小时 换新鲜培养液，至细胞丰度70-90％给药。给药设本底对照(培养液)、溶 剂对照(含0.1％DMSO的培养液)及阳性对照(SB431542为阳性药，参 见文献J.Med.Chem.(2002)45(5)；999-1001)，化合物终浓度为0.1 μmol/l和1μmol/l。给药后4小时，给终浓度10ng/ml TGF-β1诱导 表达，本底对照只给培养液。诱导24小时后用化学发光法检测报告基 因表达产物萤火虫萤光素酶活性。用化学发光仪检测各组的光子数，按 照如下公式计算化合物对ALK5的抑制率，结果见附表1。

倍数＝诱导表达各组光子数均值/本底对照组光子数均值

化合物抑制率(％)＝[(溶剂对照组倍数-给药组倍数)/溶剂对照 组倍数]×100％

表1  化合物对TGF-β诱导的荧光素酶报告基因表达的影响   化合物   编号   对照物或   实施例号   浓度   (μmol/l)   抑制率   (％)   0   SB431542   0.1   25.20   1   83.20   1   实施例1   0.1   4.32   1   41.37   2   实施例2   0.1   24.37   1   69.05   3   实施例3   0.1   5.27   1   17.48   4   实施例4   0.1   18.52   1   33.08   5   实施例6   0.1   17.12   1   11.74   6   实施例11   0.1   29.63   1   28.23   7   实施例12   0.1   21.75   1   21.11   8   实施例18   0.1   10.45   1   9.54   9   实施例19   0.1   10.83   1   0.72   10   实施例21   0.1   11.37   1   37.75   11   实施例24   0.1   20.78   1   24.73