舒缓过敏皮肤、抗炎、抗刺激的护肤组合物、制剂及其制备方法专利检索-抗刺激剂医疗服务专利检索查询-专利查询网

舒缓过敏皮肤、抗炎、抗刺激的护肤组合物、制剂及其制备方法

阅读：317发布：2020-05-12

专利汇可以提供舒缓过敏皮肤、抗炎、抗刺激的护肤组合物、制剂及其制备方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且一种舒缓过敏皮肤、抗炎、抗刺激的护肤组合物，所述组合物主要由下述质量百分比的原料制成：中药提取物1～10wt％、刺激抑制因子1～10wt％、抗敏止痒剂1～10wt％、光敏修复剂1～10wt％、余量为基质。本发明护肤组合物中的原材料选用均为天然舒缓成分，原料天然温和，对皮肤刺激性小，通过多种途径抗炎、舒敏、修复保护皮肤，提高皮肤免疫力。本发明原料获取简单、制备方法便捷，成本较之其他抗敏方法便宜，易于被广大消费者接受，具有很好的应用前景和市场前景。，下面是舒缓过敏皮肤、抗炎、抗刺激的护肤组合物、制剂及其制备方法专利的具体信息内容。

权利要求

1.一种舒缓过敏皮肤、抗炎、抗刺激的护肤组合物，其特征在于，所述组合物由下述质量百分比的原料制成：
中药提取物1～10wt％
刺激抑制因子1～10wt％
抗敏止痒剂1～10wt％
光敏修复剂1～10wt％
余量为基质；
其中，该中药提取物由下述重量份配比的原料药制成：
黄芩1～5份、丹参0.5～5份、防风0.5～5份、白鲜皮0.5～5份、麦冬0.5～5份、甘草0.5～5份；
该刺激抑制因子为扭刺仙人掌茎提取物；该抗敏止痒剂为麦冬和扭刺仙人掌茎混合提取物；该光敏修复剂为银杏和扭刺仙人掌茎混合提取物。
2.根据权利要求1所述的护肤组合物，其特征在于，所述基质的成分及用量为：
3.一种舒缓过敏皮肤、抗炎、抗刺激的护肤组合物，其特征在于，所述组合物由下述质量百分比的原料制成：
中药提取物1～10wt％
刺激抑制因子1～10wt％
抗敏止痒剂1～10wt％
光敏修复剂1～10wt％
尿囊素0.05～2wt％和/或水溶性神经酰胺0.05～2wt％
余量为基质；
其中，该刺激抑制因子为扭刺仙人掌茎提取物；该抗敏止痒剂为麦冬和扭刺仙人掌茎混合提取物；该光敏修复剂为银杏和扭刺仙人掌茎混合提取物；
该中药提取物由下述重量份配比的原料药制成：
黄芩1～5份、丹参0.5～5份、防风0.5～5份、白鲜皮0.5～5份、麦冬0.5～5份、甘草0.5～5份。
4.根据权利要求3所述的护肤组合物，其特征在于，所述中药提取物按照下述方法制成，具体步骤为：
(1)按照权利要求3所述组分及用量称取各原料药；
(2)将各原料药混合并于水中浸泡，浸泡时间为2小时以上；所述原料药与水的质量体积比g/ml为1∶10～20；
(3)添加丙二醇，所述丙二醇与水的质量比为1∶0.5～1.5；加热至70～95℃提取，用100～200目过滤，取上清液；
(4)将上清液冷却至35～55℃，真空抽滤，取过滤液，得到所述中药提取物。
5.一种舒缓过敏皮肤、抗炎、抗刺激的护肤制剂，其特征在于，所述护肤制剂由权利要求1至4中任意一项所述护肤组合物制成，该护肤制剂为外用制剂，该外用制剂为面霜、乳液、爽肤水、洗面奶、喷雾剂或精华素。
6.根据权利要求3或4所述的护肤组合物，其特征在于，所述基质的成分及用量为：
7.一种制备舒缓过敏皮肤、抗炎、抗刺激的护肤组合物的方法，其特征在于，所述方法步骤如下：
(1)按照权利要求6所述护肤组合物准备各原料；
(2)中药提取物、刺激抑制因子、抗敏止痒剂和光敏修复剂、尿囊素和/或水溶性神经酰胺与基质同时加入到去离子水中；所述基质不包括增稠剂、防腐剂和透明质酸钠；
(3)加热到80℃后搅拌溶解，降温到40℃时加入透明质酸钠及增稠剂搅拌均匀；
(4)调节pH值在5.0～6.5之间，加入防腐剂。
8.一种舒缓过敏皮肤、抗炎、抗刺激的护肤精华素，其特征在于，其是用权利要求6所述组合物经权利要求7所述方法制成的。

说明书全文

舒缓过敏皮肤、抗炎、抗刺激的护肤组合物、制剂及其制备

方法

技术领域

[0001] 本发明涉及一种护肤组合物，具体地说是一种能有效起到舒缓过敏皮肤、抗炎、抗刺激功效的护肤组合物，以及由该组合物制备的外用制剂及其制备方法。

背景技术

[0002] 皮肤过敏是一个很常见的生理反应。大多数人都会有过皮肤过敏的经历。随着现代社会化妆品、化学制剂使用的不断增加，不断加剧的环境污染以及花粉、某些食物等本来的致敏物质都使皮肤过敏的可能性不断增加。此外，其他各种原因也使得敏感性皮肤的人群不断增加。

[0003] 据报道，欧洲，美国和日本约40％～50％的女性为敏感性肌肤。英国在对2058名受试对象(包括男性和女性)的研究中发现，约51.4％的女性和38.2％的男性存在皮肤敏感的问题。法国对15岁以上人群进行电话调查，52％的被调查者为敏感性皮肤，其中大多数为女性，男性和女性敏感者的比率分别是44％和59％。而在中国，约36.1％的女性为敏感性皮肤。

[0004] 防治皮肤过敏的途径有很多，概括的可以分为以下几大类。

[0005] 远离过敏原：过敏是具有过敏体质的人在接触过敏原后，引发的免疫异常反应和免疫调节紊乱。防止皮肤过敏最重要的是尽量避免与引起过敏的物质接触。过敏原是过敏反应发生的必要条件，离开了过敏原，就可以避免过敏的发生，但是不同人体过敏原有很大差异性，因此不是对所有过敏病人都会有作用。

[0006] 使用抗组胺物质：抗组胺是拮抗组胺对人体的生物效应，即应用抗组胺物质。抗组胺物质可抑制肥大细胞释放组胺等过敏物质，抑制嗜酸性细胞和肥大细胞的分裂作用，从而阻止这类细胞在炎症部位的聚集，缓解炎症反应，达到治疗目的。然而抗组胺物质大部分是药用成分，在化妆品中是不允许使用。

[0007] 清除自由基：最新研究表明，过敏体质的形成，以及过敏的发作，都与机体内的自由基过多堆积有关。而日趋严重的环境污染，化学品滥用及辐射问题，都会直接造成自由基在体内的堆积。通过清除自由基，调节机体免疫，可达到逐步改善过敏体质的，但是，所需时间较长，短期见效不明显。

[0008] 止痒、抗刺激：皮肤瘙痒为敏感性肌肤的常见并发症，引起皮肤瘙痒的原因很多，主要原因是皮肤干燥。治疗皮肤瘙痒一方面靠药物，但更重要的是患者要注意对皮肤的调养，克制搔抓，搔抓会导致越抓越痒，越痒越抓的恶性循环，使症状进一步加重。化学物质通常首先损伤细胞膜，使细胞耐受性降低，促使细胞分泌各种炎症因子，进而引发炎症。因此通过提高细胞耐受性，保护细胞膜是防治皮肤过敏的有效途径之一。

[0009] 增强皮肤屏障功能：皮肤脂质性屏障的异常不仅降低了皮肤的储水保湿功能，也直接影响着角质形成细胞的生长与分化调节，影响健康角质层的形成，而后者正是皮肤物理性屏障结构的核心部分，修复或增强皮肤的屏障功能是降低皮肤敏感度的有效方式。

[0010] 目前化妆品市场上，各大品牌都推出了针对敏感肌肤人群使用的产品，但是能有效舒缓过敏皮肤的产品很少。即使是抗过敏类的化妆品，也存在着不是其效果不佳、甚至其产品本身就对过敏皮肤有刺激的缺陷，甚至是在化妆品中加入了国家禁止加入的激素类药物以使其具有抗过敏的功效，长期使用该种产品会引起表皮萎缩、色素沉着等，对皮肤会造成不可逆的损坏。

发明内容

[0011] 本发明的主要目的是提供一种具有舒缓过敏皮肤、抗炎、抗刺激功效的护肤组合物。

[0012] 本发明的另一目的在于提出一种利用上述组合物制备的护肤制剂。

[0013] 本发明的再一目的在于提出上述护肤制剂的制备方法。

[0014] 为实现上述目的本发明发明思路为：

[0015] 本发明以中药复方提取物为重要成分，并加入刺激抑制因子、抗敏止痒剂、光敏修复剂、尿囊素和水溶性神经酰胺作为活性组分，在护肤品中添加其中的一种或多种即可实现舒缓过敏皮肤、抗炎、抗刺激的功效，同时添加各组分可产生协同作用，效果更佳。

[0016] 本发明选用黄芩、丹参、防风、自鲜皮、麦冬和甘草六味药物组合，将这些药物组合使得各药物产生协同作用，从而能有效起到舒缓过敏皮肤、抗炎、抗刺激的功效。六味药物药材功效简介如下：

[0017] 黄芩：性味苦，寒。归肺、胆、脾、大肠、小肠经。功能与主治：清热燥湿，泻火解毒，止血，安胎，降血压。用于湿温、暑温胸闷呕恶，湿热痞满，泻痢，黄疸，肺热咳嗽，高热烦渴，血热吐衄，痈肿疮毒，胎动不安。

[0018] 丹参：性味苦，微寒。归心、肝经。功效：活血调经，祛瘀止痛，凉血消痈，清心除烦，养血安神。主治：月经不调，经闭痛经，症瘕积聚，胸腹刺痛，热痹疼痛，疮疡肿痛，心烦不眠；肝脾肿大，心绞痛。

[0019] 防风：性味味辛、甘，性微温。归膀胱、肝、脾经。功效：祛风解表，胜湿止痛，止痉。主治：外感表证，风疹瘙痒，风湿痹痛，破伤风。

[0020] 白鲜皮：性味：苦；咸；寒。归经：脾经；肺经；小肠经；胃经；膀胱经。功能：清热燥湿；祛风止痒；解毒。主治：风热湿毒所致的风疹；湿疹；疥癣；黄疸；湿热痹。

[0021] 麦冬：养阴生津，润肺清心。用于肺燥干咳，虚痨咳嗽，津伤口渴，心烦失眠，内热消渴，肠燥便秘，咽白喉。本发明组合物中，中药复方美白剂是以中医“君臣佐使”的思想为原则。

[0022] 甘草：主要功效：补脾益气，清热解毒，祛痰止咳，缓急止痛，调和诸药。用于脾胃虚弱，倦怠乏力，心悸气短，咳嗽痰多，脘腹、四肢挛急疼痛，痈肿疮毒，缓解药物毒性、烈性。

[0023] 本发明的发明人将上述六味药物进行配伍发现其外用抗敏舒缓功效显著，其中丹参活血化瘀、凉血，“一味丹参，功同四物”，具有益气固表，行血祛瘀的功效，与防风相配共用起固护肌表的作用。白鲜皮清热解毒，除湿，止痒。麦冬兼顾养阴生津。甘草，美白作用十分显著，是最佳的植物美白剂，解毒的传统功能又令甘草在舒缓镇静皮肤方面十分有效，可以作为抵抗皮肤过敏的成分。

[0024] 本发明组合物中，刺激抑制因子对化妆品中表面活性剂(PAC-Na)、防腐剂、香精引起的刺激均具有很好的防护效果。对因刺激引起的细胞膜损伤和DNA损伤均具有显著的修复作用。抗敏止痒剂具有优异的抗组胺功能，可明显降低皮肤敏感和瘙痒现象，增加皮肤的耐受性，对因搔痒引起的细胞损伤具有显著的修复作用。通过红细胞刺激测试，证明抗敏止痒剂对细胞无损伤，对皮肤“零”刺激。光敏修复剂针对紫外线敏感和耐受性差的肌肤而开发的光敏抑制修复类植物添加剂，对因紫外线造成的细胞损伤及皮肤过敏反应具有显著的抑制和修复作用，具有优异的抗紫外线功能，良好的广谱吸收性，高效的清除自由基及抑制透明质酸酶效果，减轻晒伤、水肿、光毒、光敏反应发生。

[0025] 本发明的具体技术方案如下：

[0026] 一种舒缓过敏皮肤、抗炎、抗刺激的护肤组合物，所述组合物主要由下述质量百分比的原料制成：

[0027] 中药提取物1～10wt％

[0028] 刺激抑制因子1～10wt％

[0029] 抗敏止痒剂1～10wt％

[0030] 光敏修复剂1～10wt％

[0031] 余量为基质。

[0032] 另一种舒缓过敏皮肤、抗炎、抗刺激的护肤组合物，所述组合物主要由下述质量百分比的原料制成：

[0033] 中药提取物1～10wt％

[0034] 刺激抑制因子1～10wt％

[0035] 抗敏止痒剂1～10wt％

[0036] 光敏修复剂1～10wt％

[0037] 尿囊素0.05～2wt％和/或水溶性神经酰胺0.05～2wt％

[0038] 余量为基质。

[0039] 所述中药提取物由下述重量份配比的原料药制成：

[0040] 黄芩1～5份、丹参0.5～5份、防风0.5～5份、白鲜皮0.5～5份、麦冬0.5～5份、甘草0.5～5份。

[0041] 所述中药提取物按照下述方法制成，具体步骤为：

[0042] (1)按照上述组分及用量称取各原料药；

[0043] (2)将各原料药混合并于水中浸泡，浸泡时间为2小时以上；所述原料药与水的质量比(g/ml)为1∶10～20；

[0044] (3)添加丙二醇，所述丙二醇与水的质量比为1∶0.5～1.5；加热至70～95℃提取，用100～200目的纱布粗滤，取上清液；

[0045] (4)将上清液冷却至35～55℃，用硅藻土真空抽滤，取过滤液，得到所述组合物中药提取物。

[0046] 所述步骤(4)中抽滤是用硅藻土或滤板真空抽滤，真空度是0.05～0.1MPa。所述硅藻土或滤板的过滤细度为500～700目。

[0047] 所述刺激抑制因子为扭刺仙人掌茎提取物；该抗敏止痒剂为麦冬和扭刺仙人掌茎混合提取物；该光敏修复剂为银杏和扭刺仙人掌茎混合提取物。

[0048] 一种舒缓过敏皮肤、抗炎、抗刺激的护肤制剂，所述护肤制剂由上述护肤组合物和护肤品领域可接受的辅料制成。

[0049] 所述护肤制剂为外用制剂，所述外用制剂为面霜、乳液、爽肤水、洗面奶、喷雾剂或精华素。根据使用途径不同，本发明组合物制成外用制剂，如外用面霜、爽肤水、洗面奶、喷雾剂或精华素。但不局限于上述剂型，可按照护肤品工业领域中已知的方法，将上述药物组合物按已知方法除菌后制成各种不同的外用制剂。

[0050] 所述基质的成分及用量为：

[0051]

[0052]

[0053] 增稠剂选用丙烯酰基二甲基牛磺酸铵/VP共聚物。

[0054] 所述基质可以使用护肤品领域常用的各剂型特用基质，只要活性成分如上述，均可以实现本发明的目的。本发明人推荐使用基质的成分及用量如上述，此基质成分和用量可以使本发明活性成分发挥最佳效果。

[0055] 一种制备舒缓过敏皮肤、抗炎、抗刺激的护肤组合物的方法，所述方法步骤如下：

[0056] (1)按照上述配比准备各原料；

[0057] (2)中药提取物、刺激抑制因子、抗敏止痒剂和光敏修复剂、尿囊素和/水溶性神经酰胺与基质同时加入到去离子水中；所述基质不包括增稠剂、防腐剂和透明质酸钠；

[0058] (3)加热到80℃后搅拌溶解，降温到40℃时加入透明质酸钠及增稠剂搅拌均匀；

[0059] (4)调节pH值在5.0～6.5之间，加入防腐剂。

[0060] 上述方法制备得到的制剂为精华素，为本发明推荐使用制剂类型。

[0061] 本发明制成的抗敏制剂，柔和，无刺激性异味。其用法与用量如下：

[0062] 方法：每日洁面后，在肌肤上和易发部位涂本发明抗敏制剂，早晚各一次。

[0063] 用量：根据个人需要对于平日护理用，适量涂抹本发明制剂即可。对于易发敏感部位，以全部覆盖易感部位为准。

[0064] 本发明的有益效果：

[0065] 本发明原材料选用均为天然舒缓成分，原料天然温和，对皮肤刺激性小，通过多种途径抗炎、舒敏、修复保护皮肤，提高皮肤免疫力。本发明原料获取简单、制备方法便捷，成本较之其他抗敏方法便宜，易于被广大消费者接受，具有很好的应用前景和市场前景。

[0066] 本发明上述发明内容部分已经对本发明的技术方案做了详细的描述，本领域技术人员根据上述内容即可重复本发明并获得所述的技术效果。下面通过具体实施方式对本发明技术内容做进一步的解释，以使本领域技术人员更清楚的理解，并非对本发明的限制，任何等同替换或公知改变均属于本发明保护范围。附图说明

[0067] 下面结合附图详细描述本发明的具体实施方式：

[0068] 图1为中药提取物浓度对透明质酸酶抑制率的影响图；

[0069] 图2为中药提取物红细胞溶血实验图。

具体实施方式

[0070] 本实施例所用药材均可以从中国药材集团公司购买得到，符合中华人民共和国药典2005版标准。其他成分来源见表1。

[0071] 表1

[0072]

[0073]

[0074] 增稠剂选用丙烯酰基二甲基牛磺酸铵/VP共聚物。

[0075] 防腐剂用量不做具体限定，选用化妆品中常用防腐剂即可，只要符合国家标准添加量即可。本发明实施例采用LGP液体防腐剂该防腐剂全称为LIQUID GERMALL PLUS，购自ISP国际特品有限公司。

[0076] 本发明所用的均质乳化设备为(北京市和莫机电研究所)生产的，其有均质、搅拌和温控等功能。其他厂家生产的用于化妆品制备的均质乳化设备也可用于本发明，只要严格按照本发明所述的工艺参数进行操作，均可达到本发明所述效果。

[0077] 实施例1本发明中药提取物的制备

[0078] (1)按下述重量份配比称取各原料药：

[0079] 黄芩2g、丹参1g、防风1g、白鲜皮1g、麦冬1g、甘草1g。

[0080] (2)将各原料药混合并于去离子水中浸泡，浸泡时间为2小时以上；所述原料药与去离子水的质量比为1∶10，即添加70ml水。

[0081] (3)添加丙二醇，所述丙二醇与去离子水的质量比为1∶0.5，即添加35g丙二醇；加热至85℃搅拌提取2小时(加盖保鲜膜，减少蒸发)，停止加热，用200目的纱布粗滤，取上清液；

[0082] (4)将上清液水循环冷却至35℃，真空硅藻土滤饼抽滤，细度为500目，真空度是0.05～0.1MPa(在抽滤过程中真空度随滤液体积变化浮动，只要在此范围内即可)，得滤液，测定pH值、固含量、电导率，测定结果为：pH值为5.0～6.0、固含量为30～35％和电导率为200～300μs/cm2。

[0083] 实施例2本发明中药提取物的制备

[0084] (1)按下述重量份配比称取各原料药：

[0085] 黄芩4g、丹参3g、防风5g、白鲜皮0.5g、麦冬0.5g、甘草4g。

[0086] (2)将各原料药混合并于去离子水中浸泡，浸泡时间为2小时以上；所述原料药与去离子水的质量比为1∶15；即添加255ml水。

[0087] (3)添加丙二醇，所述丙二醇与去离子水的质量比为1∶1，即添加255g丙二醇；加热至70℃搅拌提取2小时(加盖保鲜膜，减少蒸发)，停止加热，用100目的纱布粗滤，取上清液；

[0088] (4)将上清液水循环冷却至50℃，真空硅藻土滤饼抽滤，细度为600目，真空度是0.05～0.1MPa(在抽滤过程中真空度随滤液体积变化浮动，只要在此范围内即可)得滤液，测定pH值、固含量、电导率，测定结果为：pH值为5.0～6.0、固含量为30～35％和电导率
2
为200～300μs/cm。

[0089] 实施例3本发明精华素的制备

[0090] (1)按照下述配比准备各原料：

[0091] 实施例1制备中药提取物5wt％

[0092] 刺激抑制因子6wt％

[0093] 抗敏止痒剂10wt％

[0094] 光敏修复剂2wt％

[0095] 余量为基质。

[0096] 基质成分如下：

[0097]

[0098] (2)中药提取物、刺激抑制因子、抗敏止痒剂和光敏修复剂与基质同时加入到去离子水中；所述基质不包括增稠剂、防腐剂和透明质酸钠；

[0099] (3)加热到80℃后搅拌溶解，降温到40℃时加入透明质酸钠及增稠剂搅拌均匀；

[0100] (4)调节pH值在5.0，加入防腐剂。

[0101] 实施例4本发明精华素的制备

[0102] (1)按照下述配比准备各原料：

[0103] 实施例1制备中药提取物2wt％

[0104] 刺激抑制因子8wt％

[0105] 抗敏止痒剂2wt％

[0106] 光敏修复剂10wt％

[0107] 尿囊素0.05wt％

[0108] 余量为基质。

[0109] 基质成分如下：

[0110]

[0111] (2)中药提取物、刺激抑制因子、抗敏止痒剂和光敏修复剂与基质同时加入到去离子水中；所述基质不包括增稠剂、防腐剂和透明质酸钠；

[0112] (3)加热到80℃后搅拌溶解，降温到40℃时加入透明质酸钠及增稠剂搅拌均匀；

[0113] (4)调节pH值在6.0，加入防腐剂。

[0114] 实施例5本发明精华素的制备

[0115] (1)按照下述配比准备各原料：

[0116] 实施例2制备中药提取物8wt％

[0117] 刺激抑制因子2wt％

[0118] 抗敏止痒剂6wt％

[0119] 光敏修复剂5wt％

[0120] 水溶性神经酰胺0.05wt％。

[0121] 余量为基质。

[0122] 基质成分如下：

[0123]

[0124]

[0125] (2)中药提取物、刺激抑制因子、抗敏止痒剂和光敏修复剂与基质同时加入到去离子水中；所述基质不包括增稠剂、防腐剂和透明质酸钠；

[0126] (3)加热到80℃后搅拌溶解，降温到40℃时加入透明质酸钠及增稠剂搅拌均匀；

[0127] (4)调节pH值在6.5，加入防腐剂。

[0128] 实施例6本发明精华素的制备

[0129] (1)按照下述配比准备各原料：

[0130] 实施例2制备中药提取物2wt％

[0131] 刺激抑制因子8wt％

[0132] 抗敏止痒剂2wt％

[0133] 光敏修复剂10wt％

[0134] 尿囊素2wt％

[0135] 水溶性神经酰胺2wt％。

[0136] 余量为基质。

[0137] 基质成分如下：

[0138]

[0139] (2)中药提取物、刺激抑制因子、抗敏止痒剂和光敏修复剂与基质同时加入到去离子水中；所述基质不包括增稠剂和透明质酸钠；

[0140] (3)加热到80℃后搅拌溶解，降温到40℃时加入透明质酸钠及增稠剂搅拌均匀；

[0141] (4)调节pH值在5.0～6.5之间，加入防腐剂。

[0142] 上述剂型的制备为本领域公知常识，本发明在此仅举例说明，所有剂型的辅料选择和用量不限于此，本领域技术人员可对其作适当调整。本发明适用多种外用剂型，在此不一一列举。

[0143] 中药提取物功效实验

[0144] 1、抑制透明质酸酶能力测定

[0145] 该方法按照如下文献提供的方法进行：黄丽，冯志臣，韦保耀，滕建文。地榆与桂枝抗过敏作用的研究，食品科技，2007年第06期：135-137。

[0146] 透明质酸酶是过敏反应的参与者，研究表明透明质酸酶与炎症、过敏有强相关性，许多抗过敏药物有强抑制透明质酸酶活性的作用。透明质酸酶能够无选择地水解透明质酸中的β-N-乙酰葡糖胺与D-葡糖醛酸盐之间的1，4-键，而得到β-N-乙酰葡糖胺，β-N-乙酰葡糖胺在碱性条件下可以与乙酰丙酮缩合生成生色原2-甲基-3-二乙酰吡咯衍生物，生色原与对-二甲氨基苯甲醛在浓盐酸乙醇中生色。基本反应方程式：

[0147]

[0148] 实验方法：取0.1mL0.25mmol/L CaCl2溶液和0.5mL透明质酸酶液37℃保温培养20min；加入样品液0.5mL，继续37℃保温培养20min；加入0.5mL透明质酸钠液37℃保温
30min，常温放置5min；加入0.1mL0.4mol/L NaOH溶液和0.5mL乙酰丙酮溶液，置于沸水浴中加热15min后立即用冰水进行冷却5min；加入埃尔利希试剂1.0mL并用3.0mL无水乙醇进行稀释，放置20min显色，用分光光度计测定其吸光度值。

[0149] 样品对透明质酸酶抑制率的测定计算公式：

[0150]

[0151] 式中A——对照溶液ABS值(用醋酸缓冲溶液代替样品溶液)

[0152] B——对照空白溶液ABS值(用醋酸缓冲溶液代替样品溶液及酶液)

[0153] C——试样溶液ABS值

[0154] D——试样空白溶液ABS值(用醋酸缓冲溶液代替酶液)

[0155] 实验结果见图1，由图1可知，该中药提取物的透明质酸酶抑制能力随浓度增加而增强，具有线性关系，100％原液可以保持87.62％的清除率，证明本发明实施例1制备的中药提取液具有较强的透明质酸酶抑制的能力，可用于制备化妆品。

[0156] 2.红细胞溶血实验

[0157] 实验方法参照ECVAM-DB-ALM：INVITTOX protocol：Red Blood Cell Test System INVITTOX n°37。采用SDS作为致敏原，刺激血红细胞溶血。实验通过测定从血红细胞中漏出的血红蛋白量评价细胞膜的损伤程度，该损伤程度与物质的刺激性具有直接相关性。

[0158] 实验原理：溶血试验(hemolysis test)基于测定从红细胞中漏出的血红蛋白的量来评价膜损伤。分光光度法测定化学物作用后的红细胞悬液的吸光度，计算出溶血率和HC50值(即使50％红细胞溶血的受试物的浓度值)和蛋白变性的数值DI值。模型评价：溶血试验与Draize试验的结果分析显示较好的相关性一致性。目前国外已发展到验证研究阶段，并提出了包括其在内的替代Draize眼刺激试验的化学物安全性评价方案。结果计算：

[0159] ①溶血试验

[0160] 设阳性对照红细胞溶血量为100％，分别计算不同SDS浓度体系RBC溶血率(OD540nm/OD阳性对照)。绘制曲线，计算曲线上50％溶血量浓度(H50)。

[0161] ②蛋白变性：DI(％)＝100*(R1-Ri)/(R1-R2)

[0162] 其中：R1为阳性对照OD575nm/OD540nm值。

[0163] Ri为样品变性试验中OD575nm/OD540nm值。

[0164] R2为1mg/mLSDS的OD575nm/OD540nm值。

[0165] 定义L/D＝H50/DI。按表2得出其刺激强度

[0166] 表2.不同刺激强度的L/D值

[0167]

[0168] 实验结果见图2，由图2可知，实施例2制备的中药提取物随浓度降低对血红细胞的刺激性也随之降低。表明此中药提取物相对刺激性不明显。

[0169] 本发明临床实验及结果

[0170] 实验一：

[0171] 采用实例5进行临床观察100例，观察前皮肤临床主要表现为肌肤敏感，瘙痒不适，有的常年发作。

[0172] 1、方法：每日洁面后，在肌肤上和易发部位涂抹实施例5制备的精华素适量，早晚各一次。3天、7天、1个月，统计结果。

[0173] 2、评判标准：(1)治愈：临床症状消失、一个月内再无皮肤敏感反应；(2)有效：临床症状减轻、皮肤敏感反应部分消退或消失，减小或减少；(3)无效：临床症状、皮肤敏感未见好转。

[0174] 3、试用结果：(1)见效快，3天、7天有效率可达90％以上，并有一定的治愈率，1个月的治愈率为85％以上。(2)对肌肤一般敏感治疗效果均显著。(3)没有一例反应出现过敏、皮肤不适等现象。

[0175] 实验二：

[0176] 采用实例6进行临床观察100例，观察前皮肤临床主要表现为肌肤敏感，瘙痒不适，有的常年发作。

[0177] 1、方法：每日洁面后，在肌肤上和易发部位涂抹实施例6制备的精华素适量，早晚各一次。3天、7天、1个月，统计结果。

[0178] 2、评判标准：(1)治愈：临床症状消失、一个月内再无皮肤敏感反应；(2)有效：临床症状减轻、皮肤敏感反应部分消退或消失，减小或减少；(3)无效：临床症状、皮肤敏感未见好转。

[0179] 3、试用结果：(1)见效快，3天、7天有效率可达90％以上，并有一定的治愈率，1个月的治愈率为90％以上。(2)对肌肤一般敏感治疗效果均显著。(3)没有一例反应出现过敏、皮肤不适等现象。

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