联合治疗及用于治疗脱髓鞘病症的用途
阅读：253发布：2020-07-11
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1.一种在有需要的受试者中治疗选自多发性硬化症或视神经的炎症疾患的CNS脱髓鞘疾病的方法，所述方法包含将其量足以治疗所述CNS脱髓鞘疾病的抗LINGO-1抗体分子和免疫抑制剂施用于所述受试者，其中所述免疫抑制剂选自以下一项或多项：
IFN-β1分子；
皮质类固醇；
谷氨酸、赖氨酸、丙氨酸和酪氨酸的聚合物或格拉默(glatiramer)；
针对alpha-4整联蛋白的抗体或其片段或那他株单抗；
蒽二酮分子或米托蒽醌；
芬戈莫德(fingolimod)或FTY720或其它SIP1功能调节剂；
富马酸二甲酯；
针对T细胞IL-2受体alpha亚基的抗体或达利珠单抗(daclizumab)；
针对CD52的抗体或阿仑单抗(alemtuzumab)；
针对CD20的抗体；或
二氢乳清酸脱氢酶的抑制剂或特立氟胺(teriflunomide)；
从而治疗所述CNS脱髓鞘疾病。
2.权利要求1所述的方法，其中所述CNS脱髓鞘疾病是多发性硬化症。
3.权利要求1所述的方法，其中所述视神经的炎症疾患是视神经炎。
4.权利要求3所述的方法，其中所述视神经炎是急性视神经炎。
5.一种在有需要的受试者中治疗多发性硬化症或视神经炎的方法，所述方法包含将其量足以治疗所述多发性硬化症或视神经炎的抗LINGO-1抗体分子和IFN-β1分子施用于所述受试者。
6.一种在有需要的受试者中治疗多发性硬化症或视神经炎的方法，所述方法包含将其量足以治疗所述多发性硬化症或视神经炎的抗LINGO-1抗体分子和皮质类固醇施用于所述受试者。
7.权利要求1至6中任一项所述的方法，其中所述抗LINGO-1抗体分子导致以下一项或多项：增强髓鞘化，增强神经轴突保护，促进少突胶质细胞的分化和存活，提高突触数量或突触效率，或增加传导速度。
8.权利要求1至7中任一项所述的方法，其中所述抗LINGO-1抗体分子是针对人LINGO-1的单克隆抗体。
9.权利要求8所述的方法，其中所述抗LINGO-1抗体分子是针对人LINGO-1的人的、人源化的、CDR嫁接的、或体外生成的抗体。
10.权利要求8或9所述的方法，其中所述抗LINGO-1抗体分子是免疫球蛋白G亚类1(IgG1)。
11.权利要求1至10中任一项所述的方法，其中所述抗LINGO-1抗体分子包含无糖基(IgG1)框架。
12.权利要求1至11中任一项所述的方法，其中所述抗LINGO-1抗体分子经修饰以与野生型IgG1相比降低效应细胞和补体功能。
13.权利要求1至12中任一项所述的方法，其中所述抗LINGO-1抗体分子包含重链可变域的一个、两个或三个CDR，其包含SEQ ID NO：6、7或8，或SEQ ID NO：2、3或30的氨基酸序列，或与之基本相同的序列。
14.权利要求1至12中任一项所述的方法，其中所述抗LINGO-1抗体分子包含轻链可变域的一个、两个或三个CDR，其包含SEQ ID NO：14、15或16，或SEQ ID NO：10、11或12的氨基酸序列，或与之基本相同的序列。
15.权利要求1至12中任一项所述的方法，其中所述抗LINGO-1抗体分子包含重链可变域，其包含SEQ ID NO：5或SEQ ID NO：66的氨基酸序列，或与之基本相同的序列。
16.权利要求1至12中任一项所述的方法，其中所述抗LINGO-1抗体分子包含轻链可变域，其包含SEQ ID NO：13或SEQ ID NO：9的氨基酸序列，或与之基本相同的序列。
17.权利要求1至12中任一项所述的方法，其中所述抗LINGO-1抗体分子包含重链，其包含SEQ ID NO：275的氨基酸序列或与之基本相同的序列；以及轻链，其包含SEQ ID NO：276的氨基酸序列或与之基本相同的序列。
18.权利要求1至17中任一项所述的方法，其中所述IFN-β1分子包含IFN-β1a或IFN-β1b多肽、其变体、同源物、片段或聚乙二醇化变体中的一种或多种。
19.权利要求1至17中任一项所述的方法，其中所述IFN-β1分子包含选自IFN-β1a分子、IFN-β1b分子、或IFN-β1a分子或IFN-β1b分子的聚乙二醇化变体的IFNβ药剂。
20.权利要求19中所述的方法，其中所述IFN-β1a分子是 或 所述
IFN-β1b分子是 或 或
21.权利要求1至20中任一项所述的方法，其中所述抗LINGO-1抗体分子包含重链可变域，其包含SEQ ID NO：5或SEQ ID NO：66的氨基酸序列；以及轻链可变域，其包含SEQ ID NO：13或SEQ ID NO：9的氨基酸序列；且所述免疫抑制剂是
22.权利要求1至21中任一项所述的方法，其中所述受试者患有以下一项：复发-缓解型多发性硬化症(RRMS)、原发性进展型MS、继发性进展型MS、临床孤立综合征(CIS)、临床定义的MS(CDMS)、或良性MS。
23.权利要求22所述的方法，其中所述受试者具有一个或多个新形成的损伤。
24.权利要求22所述的方法，其中所述受试者具有一个或多个先前存在的损伤。
25.权利要求1至21中任一项所述的方法，其中所述受试者患有复发-缓解型多发性硬化症(RRMS)。
26.权利要求1至21中任一项所述的方法，其中所述受试者患有继发性进展型MS(SPMS)。
27.权利要求25或26项所述的方法，其中所述受试者是具有活动性疾病的患者。
28.权利要求1至27中任一项所述的方法，其中所述治疗步骤包括在所述受试者中减轻一种或多种疾病相关症状；或减轻、延迟或阻止复发，或失能的恶化。
29.权利要求1至28中任一项所述的方法，其中所述抗LINGO-1抗体分子和所述免疫抑制剂同时施用。
30.权利要求1至28中任一项所述的方法，其中所述抗LINGO-1抗体分子和所述免疫抑制剂序贯施用。
31.权利要求1至28中任一项所述的方法，其中所述抗LINGO-1抗体分子和所述免疫抑制剂的施用彼此部分重叠。
32.权利要求1至28中任一项所述的方法，其中所述免疫抑制剂和所述抗LINGO-1抗体分子的施用的开始发生于同一时间。
33.权利要求1至28中任一项所述的方法，其中所述免疫抑制剂的施用在所述抗LINGO-
1抗体分子开始治疗之前。
34.权利要求1至28中任一项所述的方法，其中所述抗LINGO-1抗体分子的施用在所述免疫抑制剂开始治疗之前。
35.权利要求1至28中任一项所述的方法，其中所述免疫抑制剂的施用在所述抗LINGO-
1抗体分子的施用终止后继续。
36.权利要求1至28中任一项所述的方法，其中所述抗LINGO-1抗体分子的施用在所述免疫抑制剂的施用终止后继续。
37.权利要求1至36中任一项所述的方法，其中所述抗LINGO-1抗体分子是针对LINGO-1的抗体分子，并通过静脉内、皮下、玻璃体内、鞘内或肌肉内施用。
38.权利要求40所述的方法，其中所述抗LINGO-1抗体分子通过静脉内施用。
39.权利要求1至38中任一项所述的方法，其中所述抗LINGO-1抗体分子以1到100mg/kg给药。
40.权利要求1至38中任一项所述的方法，其中所述抗LINGO-1抗体分子以约3mg/kg、约
10mg/kg、约30mg/kg、约50mg/kg、或约100mg/kg给药。
41.权利要求1至40中任一项所述的方法，其中所述抗LINGO-1抗体分子每一、二、三、四或五周一次通过IV输注施用。
42.权利要求1至41中任一项所述的方法，其中所述免疫抑制剂是IFN-β1分子，通过静脉内、皮下或肌肉内施用。
43.权利要求42所述的方法，其中所述IFN-β1分子通过以下一种或多种方式施用：
(i)20-45微克每周一次通过肌肉内注射；
(ii)20-30微克每周三次，或40-50微克每周三次，通过皮下注射；或
(iii)10至50μg的量肌肉内，每周三次，或每五到十天，一周一次。
44.权利要求1至43中任一项所述的方法，其中：
所述抗LINGO-1抗体分子每四周一次通过IV输注施用，以约3mg/kg、约10mg/kg、约
30mg/kg、约50mg/kg、或约100mg/kg给药；以及
所述免疫抑制剂是IFN-β1分子且通过以下一种或多种方式施用：
(i)20-45微克每周一次通过肌肉内注射；
(ii)20-30微克每周一次或三次，或40-50微克每周一次或三次，通过皮下注射；或(iii)10至50μg的量肌肉内，例如每周三次，或每五到十天。
45.权利要求1至44中任一项所述的方法，其中所述受试者已经或正通过以下一项或多项评价：
进行神经系统检查；
获取所述受试者扩展失能状态量表(EDSS)的状态；
获取所述受试者多发性硬化症功能复合(MSFC)的状态；
检测所述受试者的损伤状态；
获取上肢和/或下肢功能的测量；
获取短距离步行功能的测量；
获取长距离步行功能的测量；
获取认知功能的测量；
获取视觉功能的测量。
46.权利要求1至44中任一项所述的方法，进一步包括以下一项或多项：
获取所述受试者MSFC的状态；
进行神经系统检查；
获取所述受试者扩展失能状态量表(EDSS)的状态；
检测所述受试者的损伤状态；
获取上肢和/或下肢功能的测量；
获取短距离步行功能的测量；
获取长距离步行功能的测量；
获取认知功能的测量；
获取视觉功能的测量。
47.权利要求45或46所述的方法，其中上肢功能的测量使用9孔柱测试(9HP)获取。
48.权利要求45或46所述的方法，其中短距离步行功能的测量使用25英尺计时步行(T25FW)获取。
49.权利要求45或46所述的方法，其中认知功能的测量包含学习测试、记忆测试和/或注意力/处理速度测试的评价。
50.权利要求1至44中任一项所述的方法，其中所述受试者使用EDSS评估和选自以下一种、两种、三种或全部的步行功能评估来评价：短距离步行功能、长距离步行功能、上肢功能或下肢功能。
51.权利要求50所述的方法，其中肢端和/或步行功能的测量有至少10％、15％、20％、
25％或更高的增加指示所述受试者中疾病的进展；肢端和/或步行功能的测量有至少10％、
15％、20％、25％或更高的降低指示所述受试者中的改善结果。
52.权利要求49所述的方法，其中所述认知功能的测量包含以下一种或多种的评价：听觉记忆、言语学习和/或记忆言语信息(例如选择性提醒测试(SRT))；用于评价听觉/言语记忆的测试(例如加州言语学习测试第二版(CVLT2))，雷伊听觉言语学习测试(RAVLT)；用于评价视觉/空间记忆的测试(例如简易视觉空间记忆测试修订版(BVMTR))；认知测试，例如PASAT、SDMT；以及患者报告结果测量(例如MSWS-12、MSIS-29、ABILHAND、MSNQ和/或SF-36)。
53.权利要求45或46中任一项所述的方法，其中认知功能的测试使用包含SDMT、PASAT-
3和-3、SRT-总学习(SRT-TL)、SRT延迟回忆(SRT-DR)和BVNTR延迟回忆(BVMTR-DR)的MS认知终点复合进行。
54.权利要求53所述的方法，其中所述认知功能的测量包含MS-COG。
55.权利要求45至54中任一项所述的方法，其中所述受试者的改善通过以下一项或多项定义：
a.EDSS从≤6.0的基线分数降低≥1.0分；
b.T25FW中从基线处改善≥15％；
c.9HPT中从基线处改善≥15％；或
d.PASAT中从基线处改善≥15％。
56.权利要求45至54中任一项所述的方法，其中所述受试者的损伤状态使用磁共振成像评价。
57.权利要求56所述的方法，其中磁共振成像包含磁转移和弥散张量成像。
58.一种试剂盒，其包含针对人LINGO-1的抗体分子和IFN-β1分子及说明书，其关于在治疗多发性硬化症或视神经的炎症疾患中使用。
59.一种包装组合物，其包含针对人LINGO-1的抗体分子和IFN-β1分子及说明书，其关于在治疗多发性硬化症或视神经的炎症疾患中使用。
60.一种在有需要的受试者中治疗急性视神经炎的方法，所述方法包括将其量足以治疗所述急性视神经炎的抗LINGO-1抗体分子施用于所述受试者。
61.权利要求60所述的方法，其中所述抗LINGO-1抗体分子包含重链可变域的一个、两个或三个CDR，其包含SEQ ID NO：6、7或8或SEQ ID NO：2、3或30的氨基酸序列，或与其基本相同的序列。
62.权利要求60所述的方法，其中所述抗LINGO-1抗体分子包含轻链可变域的一个、两个或三个CDR，其包含SEQ ID NO：14、15或16或SEQ ID NO：10、11或12的氨基酸序列，或与其基本相同的序列。
63.权利要求60所述的方法，其中所述抗体分子包含重链可变域，其包含SEQ ID NO：5或SEQ ID NO：66的氨基酸序列，或与其基本相同的序列。
64.权利要求60所述的方法，其中所述抗体分子包含轻链可变域，其包含SEQ ID NO：13或SEQ ID NO：9的氨基酸序列，或与其基本相同的序列。
65.权利要求60所述的方法，其中所述抗体分子包含重链，其包含SEQ ID NO：275所述的氨基酸序列或与其基本相同的氨基酸序列；以及轻链，其包含SEQ ID NO：276所述的氨基酸序列，或与其基本相同的氨基酸序列。
联合治疗及用于治疗脱髓鞘病症的用途
[0002] 相关申请
[0003] 本申请要求2012年9月9日提交的美国临时申请No.61/711,638的权益，其内容通过提述完整并入本文。
[0004] 发明背景
[0006] 越来越多的数据表明，不可逆的轴突缺失在MS的早期病程中即发生。在中枢神经系统(CNS)中，横断的轴突无法再生；因此，目的为抑制MS损伤部位形成的早期治疗是重要的。早在疾病开始的时候，具有活性炎症的损伤部位中的轴突被截断(Trapp等(1998)N Engl J Med 338:278-285；Bjartmar等(2001)Curr Opin Neurol 14:271-278；Ferguson等(1997)Brain120:393-399)。脱髓鞘的程度与炎症的程度，脱髓鞘轴突在炎症环境中的暴露，以及非炎性介质相关(Trapp等(1998)N Engl J Med 338:278-285；Kornek等(2000)Am J Pathol 157:267-276；Bitsch et al,(2000)Brain 123:1174-1183)。在脱髓鞘损伤部位，也存在少突胶质细胞的破坏，伴随着受损的髓鞘再生(Peterson等(2002)J Neuropathol Exp Neurol 61:539-546；Chang等(2002)N Engl J Med 346:165-173)。少突胶质细胞的缺失导致了髓鞘再生能力的减弱，同时可能导致支持神经元和轴突的营养因子的缺失(Bjartmar等(1999)J Neurocytol28:383-395)。
[0007] 目前已批准的针对CNS脱髓鞘疾病例如多发性硬化症(MS)的疗法主要是免疫调节，通常对于CNS的修复没有直接作用。虽然通过少突胶质细胞的一定程度上的轴突髓鞘再生在MS的病程的早期即发生，但最终对CNS的修复能力不足，从而导致不可逆的组织损伤，以及加重的疾病相关的失能(disability)。因此，对于CNS脱髓鞘疾病需要一些增强髓鞘再生和对神经轴突的保护的其他疗法。
[0008] 发明概述
[0009] 本发明至少部分提供用于提高受试者例如人(例如人MS患者)中以下一个或多个方面，同时减轻受试者中的炎症状况的方法和组合物：髓鞘化，髓鞘再生，少突胶质细胞数量，或对于神经轴突的保护。在某些实施方案中，本文所述的方法和组合物包括修复剂(例如LINGO-1的拮抗剂)以及免疫调节剂的联用。在其它实施方案中，所述修复剂(例如LINGO-1的拮抗剂)可用于治疗视神经的炎症状况，例如视神经炎(例如急性视神经炎(AON))。因此，本发明所述的方法、组合物以及试剂盒可应用于治疗CNS病症，例如CNS脱髓鞘疾病。
[0010] 因而，一方面，本发明描述了用于提高受试者(例如有此需要的受试者)中以下一个或多个方面的方法：髓鞘化，髓鞘再生，少突胶质细胞数量或神经轴突的保护。所述方法包括将修复剂(例如LINGO-1的拮抗剂)和免疫调节剂以足以增强以下一个或多个方面的量施用于所述受试者：髓鞘化，髓鞘再生，少突胶质细胞数量或神经轴突的保护。
[0011] 在相关的方面，本发明特征为一种治疗受试者(例如有此需要的受试者)中CNS病症例如CNS脱髓鞘疾病(例如多发性硬化症)的方法。所述方法包括以足以减轻一种或多种与病症相关的症状的量将修复剂(例如LINGO-1的拮抗剂)和免疫调节剂施用于所述患者，由此治疗该病症。在某些实施方案中，所述治疗包括：在受试者中减轻一种或多种与该疾病相关的症状；和/或减轻、延迟或阻止复发或失能的加重。
[0012] 另一方面，本发明特征为试剂盒，其包含修复剂(例如LINGO-1的拮抗剂)和免疫调节剂，例如本文所述的试剂。可选的，所述试剂盒是标记的和/或包含关于在治疗CNS病症如CNS脱髓鞘疾病中使用的说明书。
[0013] 再一方面，本发明特征为包装组合物(例如包装药物组合物)，其包含修复剂(例如LINGO-1的拮抗剂)和/或免疫调节剂，例如本文所述的试剂。可选的，所述包装组合物是标记的和/或包含关于修复剂和免疫调节剂联合应用于治疗CNS病症，例如CNS脱髓鞘疾病的用途的说明书。所述LINGO-1的拮抗剂和/或免疫调节剂可以是适合于任何施用途径的形式，例如外周施用(例如静脉内，皮下，肌肉内，玻璃体内，鞘内或口服施用)。根据使用的组合物，施用途径可以是相同或不同的。在一个实施方案中，所述包装药物组合物包括LINGO-1的拮抗剂(例如针对LINGO-1的抗体)，其被制备为适合静脉内施用的形式或制备物。在另一个实施方案中，所述包装药物组合物包括免疫调节剂(例如干扰素)，其被制备为适合肌肉内施用的形式或制备物。所述经包装的药物组合物可以包括一种或多种试剂。
[0014] 再一方面，本发明特征为一种治疗受试者(例如有此需要的受试者)中视神经的炎症疾病例如视神经炎(例如急性视神经炎(AON))的方法。所述方法包括以足以减轻一种或多种与该疾病相关的症状的量向受试者施用修复剂(例如LINGO-1的拮抗剂)，由此治疗病症。在某些实施方案中，所述治疗包括：在受试者中减轻与该状况或疾病相关的一个或多个症状；和或减轻、延迟或阻止复发或失能的加重。
[0015] 前面提到的任意方法、组合物和试剂盒的另外的实施方案、特征或改进如下所述：
[0016] CNS病症和CNS脱髓鞘疾病
[0017] CNS病症(例如CNS脱髓鞘疾病)可以是伴随有以下一项或多项的任意状况(condition)、疾病、病症(disorder)或损伤：脱髓鞘，髓鞘形成障碍，轴突损伤，轴突区域丧失或轴向扩散，或神经突触/连接性的丧失，和/或少突胶质细胞或神经细胞的死亡或功能障碍。在某些实施方案中，CNS病症通过导致轴突髓鞘的损伤影响神经系统。在其它实施方案中，CNS病症包括由Nogo受体-1(NgR1)介导的对轴突或神经突延伸的抑制，例如在脑部和脊髓中。在其它实施方案中，CNS病症具有一种或多种炎症组分。例示性CNS病症包括但不限于：CNS脱髓鞘疾病，CNS损伤，肌萎缩性侧索硬化症(ALS)，亨廷顿病，阿尔兹海默症，帕金森病，糖尿病性神经病，中风，自发炎症性脱髓鞘疾病，多发性硬化症(MS)，视神经炎(例如急性视神经炎)，视神经脊髓炎(NMO)，脑白质营养不良，维他命B12缺乏，进行性多灶性白质脑病(leukoencephalopathy)(PML)，脑脊髓炎(EPL)，急性播散性脑脊髓炎(ADEM)，脑桥中央髓鞘溶解(central pontine myelolysis)(CPM)，沃勒变性(Wallerian Degeneration)，肾上腺脑白质营养不良(adrenoleukodystrophy)，亚历山大病(Alexander's disease)，佩-梅氏病(Pelizaeus Merzbacher disease)(PMZ)，外伤性青光眼(traumatic glaucoma)，脑室周围白质软化(periventricular leukomalatia)(PVL)，特发性震颤(essential
tremor)，白质中风(white matter stroke)，或横贯性脊髓炎(transverse myelitis)。CNS脱髓鞘疾病可以选自上述病症中的一种或多种。在一个实施方案中，CNS脱髓鞘疾病指多发性硬化症。在其它实施方案中，CNS脱髓鞘疾病指视神经炎，例如急性视神经炎。
tremor)，白质中风(white matter stroke)，或横贯性脊髓炎(transverse myelitis)。CNS脱髓鞘疾病可以选自上述病症中的一种或多种。在一个实施方案中，CNS脱髓鞘疾病指多发性硬化症。在其它实施方案中，CNS脱髓鞘疾病指视神经炎，例如急性视神经炎。
[0018] 修复剂
[0019] 在某些实施方案中，所述修复剂能够导致以下一项或多项：增强髓鞘化或髓鞘再生，增强神经轴突的保护，增加轴突延伸，增加神经突的出芽，以及/或增加少突胶质细胞的数量(例如通过提高以下一种或多种：少突胶质细胞的存活或分化)。
[0020] 在一个实施方案中，所述修复剂是包含LRR和Ig结构域的Nogo受体相互作用蛋白(LINGO，例如LINGO-1)的拮抗剂。LINGO-1，曾被称为Sp53，是一个选择性的表达于成人CNS神经元和少突胶质细胞的细胞表面糖蛋白，其在该处的功能被认为是作为少突胶质细胞分化、髓鞘化和髓鞘再生的负调节因子。因此，拮抗LINGO-1能够增强轴突的髓鞘化和髓鞘再生，例如通过少突胶质细胞，增强CNS中神经轴突的保护。LINGO-1在2006年7月7日提交的国际申请PCT/US2006/026271，2004年3月17日提交的PCT/US2004/008323，2005年6月24日提交的PCT/US2005/022881以及2008年1月9日提交的PCT/US2008/000316中都有所描述，其各自通过提述完整并入本文。
[0021] 在一个实施方案中，所述修复剂例如LINGO-1的拮抗剂，抑制或降低LINGO-1例如人的LINGO-1的表达或活性。
[0022] 在一个实施方案中，所述修复剂例如LINGO-1的拮抗剂，抑制或降低NgR1、p57和LINGO-1，和/或NgR1、TAJ(TROY)和LINGO-1的复合物(例如功能性信号传导复合物)的形成和/或活性。在另一个实施方案中，所述修复剂如例LINGO-1的拮抗剂，抑制或减弱LINGO-1对NgR1的结合。
[0023] 在一个实施方案中，所述修复剂例如LINGO-1的拮抗剂，是抗体分子。在一个实施方案中，所述抗体分子降低NgR1、p57和LINGO-1，和/或NgR1、TAJ(TROY)和LINGO-1的复合物(例如功能性信号传导复合物)的形成和/或活性。在一个实施方案中，所述抗体分子结合复合物中的至少一个组分(例如NgR1、p57和LINGO-1；和/或NgR1、TAJ(TROY)和LINGO-1中的至少一个)，并抑制或减弱其功能性信号传导。
[0024] 在一个实施方案中，所述抗体分子结合LINGO例如人的LINGO。在另一个实施方案中，所述抗体分子结合LINGO-1，例如人的LINGO-1。所述抗体分子可以是单克隆或单特异性抗体或其抗原结合片段(例如Fab，F(ab’)2，Fv，单链Fv片段，单域抗体，双抗体(dAb)，二价或双特异性抗体或其片段，其单域变体)，其结合LINGO-1，例如哺乳动物(例如人LINGO-1(或其功能性变体))。在一个实施方案中，所述抗体分子是针对LINGO-1(例如人LINGO-1)的单克隆抗体。通常来说，所述抗体分子是人的，人源化的，CDR嫁接的，嵌和的，骆驼源的，或是在体外生成的针对人LINGO-1的抗体(或是其功能性片段例如本文所述的抗体片段)。通常来说，所述抗体抑制、降低或中和LINGO-1的一种或多种活性(例如本文所述的LINGO-1的一种或多种生物学活性)。
[0025] 所述抗体分子可以是全长的(例如包括至少一个，通常两个完整的重链，以及至少一个，通常两个完整的轻链)，或可包含抗原结合片段(例如Fab，F(ab’)2，Fv，单链Fv片段，或单域抗体或其片段)。在其它的实施方案中，所述抗体分子具有重链恒定区，其选自例如IgG1，IgG2，IgG3，IgG4，IgM，IgA1，IgA2，IgD和IgE的重链恒定区；尤其是选自例如IgG1，IgG2，IgG3和IgG4的重链恒定区(例如人的)。在另一实施方案中，所述抗体分子具有轻链恒定区，例如选自例如kappa或lambda的轻链恒定区(例如人的)。所述抗体分子的框架区或恒定区可以被改变，例如突变，来调节抗体的特性(例如增加或减少以下一项或多项：Fc受体结合，抗体糖基化，半胱氨酸残基的数量，效应器细胞功能，和/或补体功能)。在一个实施方案中，所述抗体分子的框架区或恒定区被改变，例如突变，来减少以下一个或多个方面：Fc受体结合，抗体糖基化，半胱氨酸残基的数量，效应器细胞功能，和/或补体功能。在一个实施方案中，所述抗体分子的框架区被修饰以减少抗体糖基化，效应器细胞和/或补体功能。在一个实施方案中，所述抗体分子包含无糖基化的框架。
[0026] 在另一个实施方案中，所述抗体分子结合LINGO-1例如人的LINGO-1，是一个免疫球蛋白G亚类1(IgG1)。在某些实施方案中，所述抗体分子通过修饰来与野生型IgG1相比降低效应器细胞和补体功能。在一个实施方案中，所述抗体分子包含无糖基化的(IgG1)框架。
[0027] 在某些实施方案中，所述抗体分子特异性的结合与参照单克隆抗体Li62或Li81相同，或大体相同的LINGO-1表位，所述Li62和Li81描述于美国专利No.8,058,406和美国专利No.8,128,926中，两者均通过提述完整并入本文。在一个实施方案中，所述抗体分子包含、主要组成为或组成为免疫球蛋白的重链可变区(VH)，其中CDR1，CDR2和CDR3区选自表3所示的氨基酸序列，或与之大体相同的氨基酸序列(例如与表3中所示氨基酸序列至少80％，85％，90％或95％相同的氨基酸序列；或与Li62或Li81的免疫球蛋白重链的VHCDR1，CDR2，CDR3区至少80％，85％，90％，95％或100％相同)。
[0028] 在一些实施方案中，所述抗体分子包括VH，其包含、主要组成为或组成为SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:8或SEQ ID NO：17到49中的任一个的氨基酸序列，或与之大体相同的氨基酸序列(例如与之至少80％，85％，90％或95％相同的氨基酸序列)。
[0029] 在一个实施方案中，所述抗体分子包括VH，其中VH CDR1、CDR2和CDR3包含、主要组成为或组成为SEQ ID NOs:6、7和8中相应的氨基酸序列，或与之大体相同的氨基酸序列(例如与之至少80％，85％，90％或95％相同的氨基酸序列)。
[0030] 在一个实施方案中，所述抗体分子包括VH，其中VH CDR1、CDR2和CDR3包含、主要组成为或组成为SEQ ID NOs:2、3和30中相应的氨基酸序列，或与之大体相同的氨基酸序列(例如与之至少80％，85％，90％或95％相同的氨基酸序列)。
[0031] 在另外的实施方案中，所述抗体分子包括免疫球蛋白的轻链可变区(VL)，其中的CDR1，CDR2和CDR3选自表4中的多肽序列，或与之大体相同的氨基酸序列(例如与表4中所示氨基酸序列至少80％，85％，90％或95％相同的氨基酸序列；或与Li62或Li81免疫球蛋白轻链的VL CDR1，CDR2，CDR3区至少80％，85％，90％，95％或100％相同)。
[0032] 在一个实施方案中，所述抗体分子包括VL，其中VL CDR1、CDR2和CDR3包含、主要组成为或组成为SEQ ID NOs:14、15和16中相应的氨基酸序列，或与之大体相同的氨基酸序列(例如与之至少80％，85％，90％或95％相同的氨基酸序列)。
[0033] 在一个实施方案中，所述抗体分子包括VL，其中VL CDR1，CDR2和CDR3包含、主要组成为或组成为SEQ ID NOs:10、11和12中相应的氨基酸序列，或与之大体相同的氨基酸序列(例如与之至少80％，85％，90％或95％相同的氨基酸序列)。
[0034] 在一个实施方案中，所述抗体分子包括VH，其中VH CDR1，CDR2和CDR3包含、主要组成为或组成为SEQ ID NOs:6、7和8中相应的氨基酸序列；同时包括一个VL，其中VL CDR1、CDR2和CDR3包含、主要组成为或组成为SEQ ID NOs:14、15和16中相应的氨基酸序列；或与之大体相同的氨基酸序列(例如与之至少80％，85％，90％或95％相同的氨基酸序列)。
[0035] 在一个实施方案中，所述抗体分子包括VH，其中VH CDR1，CDR2和CDR3包含、主要组成为或组成为SEQ ID NOs:2、3和30中相应的氨基酸序列；同时包括VL，其中VL CDR1，CDR2和CDR3包含、主要组成为或组成为SEQ ID NOs:10、11和12中对应的氨基酸序列；或与之大体相同的氨基酸序列(例如与之至少80％，85％，90％或95％相同的氨基酸序列)。
[0036] 在另外的实施方案中，所述抗体分子包括选自下组的VH：SEQ ID NOs:1、5和53-85，或与之基本相同的氨基酸序列(例如与所述的SEQ ID NOs:1、5和53-85至少80％，85％，
90％，或95％相同的氨基酸序列)。
90％，或95％相同的氨基酸序列)。
[0037] 在一个实施方案中，所述抗体分子包括VH，其包含、主要组成为或组成为SEQ ID NO:5中的氨基酸序列，或与之大体相同的氨基酸序列(例如与所述的SEQ ID NOs:5至少80％，85％，90％，或95％相同的氨基酸序列)。
[0038] 在一个实施方案中，所述抗体分子包括VH，其包含、主要组成为或组成为SEQ ID NO:66中的氨基酸序列，或与之大体相同的氨基酸序列(例如与所述的SEQ ID NOs:66至少80％，85％，90％，或95％相同的氨基酸序列)。
[0039] 在其他的实施方案中，所述抗体分子包括选自下组的VL：如表4中显示的SEQ ID NOs:9和13，或与之基本相同的氨基酸序列(例如与如表4中显示的SEQ ID NOs:9和13至少80％，85％，90％，或95％相同的氨基酸序列)。
[0040] 在一个实施方案中，所述抗体分子包括VL，其包含、主要组成为或组成为SEQ ID NO:13的氨基酸序列，或与之大体相同的氨基酸序列(例如与所述SEQ ID NO:13至少80％，85％，90％，或95％相同的氨基酸序列)。
[0041] 在一个实施方案中，所述抗体分子包括VL，其包含、主要组成为或组成为SEQ ID NO:9中的氨基酸序列，或与之大体相同的氨基酸序列(例如与所述的SEQ ID NO:9至少80％，85％，90％，或95％相同的氨基酸序列)。
[0042] 在一个实施方案中，所述抗体分子包括VH，其包含、主要组成为或组成为SEQ ID NO:5的氨基酸序列，或与之大体相同的氨基酸序列(例如与所述的SEQ ID NO:5至少80％，85％，90％，或95％相同的氨基酸序列)；同时包括VL，其包含、主要组成为或组成为SEQ ID NO:13的氨基酸序列，或与之大体相同的氨基酸序列(例如与所述的SEQ ID NO:13至少
80％，85％，90％，或95％相同的氨基酸序列)。
80％，85％，90％，或95％相同的氨基酸序列)。
[0043] 在一个实施方案中，所述抗体分子包括VH，其包含、主要组成为或组成为SEQ ID NOs:66的氨基酸序列，或与之大体相同的氨基酸序列(例如与所述的SEQ ID NO:66至少80％，85％，90％，或95％相同的氨基酸序列)；同时包括VL，其包含、主要组成为或组成为SEQ ID NO:9的氨基酸序列；或与之大体相同的氨基酸序列(例如与所述的SEQ ID NO:9至少80％，85％，90％，或95％相同的氨基酸序列)。
[0044] 在另一个实施方案中，所述抗体分子包括如下所示的重链，其包含、主要组成为或组成为SEQ ID NO:275中的氨基酸序列，或与之大体相同的氨基酸序列(例如与之至少80％，85％，90％或95％相同的氨基酸序列)，如下所示：
[0045]
[0046] 在另外的实施方案中，所述抗体分子包含、主要组成为或组成为如下所示的轻链，包含SEQ ID NO:276的氨基酸序列，或与之大体相同的氨基酸序列(例如与之至少80％，85％，90％或95％相同的氨基酸序列)，如下所示：
[0047]
[0048] 在另外一个实施方案中，所述修复剂(例如LINGO-1的拮抗剂)是可溶性的LINGO分子，例如LINGO-1分子(例如LINGO-1的片段)，或是LINGO-1复合物的组分的可溶形式(例如可溶形式的NgR1，p75或TAJ(TROY))。
[0049] LINGO-1或复合物组分的可溶形式可以单独使用，也能够与第二部分例如免疫球蛋白Fc结构域，血清白蛋白，聚乙二醇化，GST，Lex-A，MBP多肽序列或抗体(例如双特异性或多特异性的抗体)功能性相连(例如通过化学偶联，基因或多肽融合，非共价联合或其他形式)。所述融合蛋白也可以额外包含连接序列，将第一部分例如LINGO-1或复合物组分的可溶形式与第二部分相连。在其它的实施方案中，另外的氨基酸序列可以被加到融合蛋白的N-或C-端来帮助其表达，空间柔性，检测和/或分离或纯化。例如，LINGO-1或复合物组分的可溶形式能够与多种亚型的重链恒定区融合，包括：IgG1，IgG2，IgG3，IgG4，IgM，IgA1，IgA2，IgD和IgE。通常来说，所述融合蛋白包括LINGO的胞外域或复合物组分(或与之同源的序列)，以及例如将其融合到人免疫球蛋白的Fc链例如人IgG(例如人的IgG1或人的IgG2，或其突变形式)。Fc序列能够在一个或多个氨基酸位点进行突变，以减少效应器细胞功能、Fc受体结合和/或补体活性。
[0050] 在另一个实施方案中，联合加入一种或多种修复剂。例如，可加入LINGO-1的拮抗剂以与另外的髓鞘再生试剂联合。
[0051] 免疫调节剂
[0052] 本文所述的方法，试剂盒和组合物可以包括一种或多种免疫调节剂。在某些实施方案中，所述免疫调节剂选自以下一种或多种：
[0053] IFN-β1分子；
[0054] 谷氨酸，赖氨酸，丙氨酸和酪氨酸的聚合物，例如格拉默(glatiramer)(例如)；
[0055] 针对α-4整联蛋白的抗体或其片段，例如那他株单抗(natalizumab)(例如)；
[0056] 蒽二酮(anthracenedione)分子，例如米托蒽醌(mitoxantrone)(例如)；
[0057] 芬戈莫德(fingolimod)，例如FTY720(例如 )；
[0059] 针对T细胞IL-2受体α亚基的抗体，例如达克珠单抗(daclizumab)；
[0060] 针对CD52的抗体，例如阿仑单抗(alemtuzumab)(例如CAMPATH)；
[0062] 针对CD20的抗体，例如ocrelizumab；
[0063] 鞘氨醇1-磷酸酶(S1P)调节剂，例如WO 2012/109108中所述的；或
[0064] 皮质类固醇。
[0065] 在一个实施方案中，所述免疫调节剂是IFN-β1分子。所述IFN-β1分子可选自IFN-β1a或IFN-β1b多肽、变体、同源物、片段或其聚乙二醇变体中的一种或多种。
[0066] 在一个实施方案中，所述IFN-β1分子包括IFN-β试剂，其选自IFN-β1a分子、IFN-β1b分子，或IFN-β1a分子或IFN-β1b分子的聚乙二醇化变体。
[0067] 在一个实施方案中，所述IFN-β1分子是IFN-β1a试剂(例如 )。在另一个实施方案中，所述IFN-β1是IFN-β1b试剂(例如 或
)。
)。
[0068] 在一个实施方案中，所述免疫调节剂是谷氨酸，赖氨酸，丙氨酸和酪氨酸的聚合物，例如格拉默(例如 )。
[0069] 在一个实施方案中，所述免疫调节剂是针对alpha-4整联蛋白的抗体或其片段(例如那他株单抗(例如 ))。
[0070] 在其它实施方案中，所述免疫调节剂是蒽二酮分子(例如米托蒽醌(例如))。
[0071] 在另一个实施方案中，所述免疫调节剂是芬戈莫德(fingolimod)(例如FTY720；例如 )。
[0072] 在一个实施方案中，所述免疫调节剂是富马酸二甲酯(例如口服的富马酸二甲酯(例如BG-12))。
[0073] 在其它实施方案中，所述免疫调节剂是针对T细胞IL-2受体α亚基的抗体(例如达克珠单抗)。
[0074] 在其它实施方案中，所述免疫调节剂是针对CD20的抗体，例如ocrelizumab。
[0075] 在其它实施方案中，所述免疫调节剂是皮质类固醇，例如甲基强的松龙(methylprednisolone)(例如高剂量的皮质类固醇例如甲基强的松龙)。
[0076] 在某些实施方案中，所述方法还包括使用一种或多种症状管理疗法，例如抗抑郁剂，镇痛剂，抗震颤剂等。
[0077] 对所述修复剂(例如本文所述的一种或多种修复剂例如LINGO-1的拮抗剂)和免疫调节剂(例如本文所述的一种或多种免疫调节剂)的任何联用可以应用于本文所述的方法，试剂盒和组合物。例如，所述修复剂可以和由谷氨酸，赖氨酸，丙氨酸和酪氨酸的多聚物，例如格拉默联用。在其它的实施方案中，所述修复剂可以和针对alpha-4整联蛋白的抗体或其片段，例如那他株单抗联用。在另一个实施方案中，所述修复剂可以和蒽二酮分子，例如米托蒽醌联用。在另一个实施方案中，所述修复剂可以和芬戈莫德，例如FTY720联用。在另外一个实施方案中，所述修复剂可以和富马酸二甲酯，例如口服的富马酸二甲酯联用。在其它的实施方案中，所述修复剂可以和针对T细胞IL-2受体α亚基的抗体，例如达克珠单抗联用。在另外一个实施方案中，所述修复剂可以和针对CD52的抗体，例如阿仑单抗联用。在另外一个实施方案中，所述修复剂可以和二氢乳清酸脱氢酶的抑制剂，例如莱佛米特联用。在另一个实施方案中，所述修复剂可以和针对CD20的抗体，例如ocrelizumab联用。在另一个实施方案中，所述修复剂可以和皮质类固醇，例如甲基强的松龙联用。在一个实施方案中，所述修复剂可以和S1P调节剂联用。
[0078] 在其它实施方案中，所述修复剂与两种，三种，四种或更多的免疫调节剂联用，例如本文所述免疫调节剂中的两种，三种，四种或更多。在一个示例性的实施方案中，LINGO-1的拮抗剂，IFN-β1分子和皮质类固醇联合使用。在其它实施方案中，LINGO-1的拮抗剂，IFN-β1分子和谷氨酸、赖氨酸、丙氨酸和酪氨酸的多聚物，例如格拉默联合使用。在其它的实施方案中，LINGO-1的拮抗剂，IFN-β1分子和针对alpha-4整联蛋白的抗体或其片段，例如那他株单抗联合使用。
[0079] 在本文所述的方法、试剂盒和组合物的某些实施方案中，修复剂是针对LINGO-1的抗体分子，例如本文所述的抗LINGO抗体，而免疫抑制剂是IFN-β1分子，例如本文所述的IFN-β1分子。
[0080] 联合治疗和施用时间
[0081] 本文所述的修复剂(例如LINGO-1拮抗剂)和免疫调节剂的联合可以通过任何顺序施用，例如本文所述的同时或序贯施用。在一个实施方案中，所述修复剂与所述免疫调节剂同时施用。在另一个实施方案中，所述修复剂和所述免疫调节剂序贯施用。例如，修复剂的施用和免疫调节剂的施用相互间可以至少部分或完全重叠。
[0082] 在某些实施方案中，所述免疫调节剂和所述修复剂的施用在同一时间开始。在其它的实施方案中，所述免疫调节剂的施用在使用所述修复剂治疗开始之前。在另一些实施方案中，所述修复剂的施用在使用所述免疫调节剂治疗开始之前。在另一个实施方案中，在停止施用所述修复剂后继续施用所述免疫调节剂。在其它实施方案中，在停止施用所述免疫调节剂后继续施用所述修复剂。在其它的实施方案中，所述修复剂的施用间歇性持续进行(例如每3、6或12个月施用2或3个月，或每1到2年施用3到6个月)，而所述免疫调节剂连续给药。
[0083] 在某些实施方案中，所述修复剂是针对LINGO-1的抗体分子，通过静脉，皮下或肌肉内施用。在一个实施方案中，所述抗体分子通过静脉内施用。在这些实施方案中，所述抗体分子以约1到100mg/kg(通常为约3mg/kg、约10mg/kg、约30mg/kg、约50mg/kg或约100mg/kg)施用。在一些实施方案中，所述抗体分子每1、2、3、4或5周通过IV输注施用一次。
[0084] 在某些实施方案中，所述免疫调节剂是IFN-β1分子，通过静脉内，皮下或肌肉内施用。例如，可以通过以下一种或多种方式施用所述IFN-β1分子：
[0085] (i)20-45微克(例如30微克)，例如每周一次通过肌肉内注射；
[0086] (ii)20-30微克(例如22微克)，例如每周三次，或40-50微克(例如44微克)，例如每周一次，通过皮下注射；或
[0087] (iii)10到50微克间的量，肌肉内施用，例如每周三次，或每5到10天一次，例如每周一次；或
[0088] (iv)200到600微克间的量(例如250到500微克)，例如每隔一天，通过皮下注射。在一个实施方案中，所述IFN-β1分子是干扰素β-1b( 或 )。
[0089] 在其它实施方案中，所述修复剂是针对LINGO-1的抗体分子，通过IV输注每四周施用一次，其剂量为约3mg/kg、约10mg/kg、约30mg/kg、约50mg/kg或约100mg/kg；所述免疫调节剂IFN-β1通过以下一种或多种方式施用：
[0090] (i)20-45微克(例如30微克)，例如每周一次通过肌肉内注射；
[0091] (ii)20-30微克(例如22微克)，例如每周三次，或40-50微克(例如44微克)，例如每周一次，通过皮下注射；或
[0092] (iii)10到50微克间的量，肌肉内注射，例如每周三次，或每5到10天一次，例如每周一次。
[0093] 受试者
[0094] 对于本文公开的所有方法、组合物和试剂盒，所述受试者为患有或有风险患CNS病症或CNS脱髓鞘疾病的受试者(例如人)，，例如如本文所述的。
[0095] 在一个实施方案中，所述受试者(例如人)患有，或有风险患MS。所述患有MS的受试者可以处于任何治疗阶段。在某些实施方案中，所述患有MS的受试者选自患有以下一种或多种疾病的人：良性MS，RRMS(例如静息RRMS，活性RRMS)，原发性进行性MS(primary progressive MS,PPMS)，或继发性进行性MS(secondary progressive MS,SPMS)，临床孤立综合征(clinically isolated syndrome,CIS)，或临床定义MS(clinically defined MS,CDMS)。在一个实施方案中，所述受试者无症状。在其它的实施方案中，所述受试者具有一个或多个MS样症状，例如具有临床孤立综合征(CIS)或临床定义MS(CDMS)的那些。在其它实施方案中，所述受试者具有一种或多种MS复发症(例如急性视神经炎，横贯性脊髓炎，脑干综合征)。
[0096] 在一个实施方案中，所述受试者患有复发形式的MS(例如RRMS或复发性SPMS)。在一个实施方案中，所述受试者患有RRMS以及一种或多种进行中的临床恶化和/或亚临床活动，例如通过钆(Gd)增强或磁共振成像(例如脑部或脊髓MRI)上形成的和/或增大的T2/FLAIR损伤所示。在另一个实施方案中，所述受试者患有SPMS以及一种或多种进行中的临床恶化和/或亚临床活动，例如通过钆(Gd)增强或磁共振成像(例如脑部或脊髓MRI)上形成新的和/或增大的T2/FLAIR损伤所示。在一个实施方案中，所述受试者患有活动形式的MS，例如活动性RRMS。在其它的实施方案中，所述MS受试者至少有一个新发展的损伤。在其它实施方案中，所述MS受试者至少有一个已存在的损伤。在一个实施方案中，所述受试者患有RRMS，以及一个或多个新发展的或已存在的损伤，或其联合。在其它实施方案中，所述受试者的基线EDSS分数为1.5到7。
[0097] 在一个实施方案中，所述患者是没有接受过MS疗法(例如本文所述试剂的单一疗法或联合疗法)的MS患者(例如患有RRMS或SPMS的患者)。在一个实施方案中，所述受试者是一个新诊断或未诊断的RRMS或SPMS患者，或患有放射性孤立综合征的受试者。在另一个实施方案中，所述受试者是接受过本文所述MS疗法(例如本文所试剂的单一疗法或联合疗法)的MS患者(例如RRMS患者)。在其它实施方案中，所述受试者是接受过一个星期，两个星期，一个月，两个月，三个月，四个月，六个月，一年或更久MS疗法的MS患者。
[0098] 受试者监测
[0099] 公开了可替代或联合本文公开的方法，用来评价，诊断，和/或监测CNS病症或CNS脱髓鞘疾病进展的方法。所述方法包括评价受试者(例如患者，患者组或患者群体)，其患有CNS病症或CNS脱髓鞘疾病，或有形成该病症的风险。在一个实施方案中，对所述受试者的评价使用(i)评估神经功能(例如EDSS)和/或(ii)评估生理功能。例如，生理功能评估可以包括步行功能评估(例如短距离和/或长距离步行功能)，单独或与上肢和/或下肢功能的评估联合。
[0100] 在某些实施方案中，对所述患者的评价通过以下一个或多个方面：
[0101] 进行神经学检查；
[0102] 获取所述受试者扩展失能状态量表(Expanded Disability Status Scale)(EDSS)的状态；
[0103] 获取所述受试者多发性硬化症功能复合(Multiple Sclerosis Functional Composite)(MSFC)的状态；
[0104] 检测所述受试者的损伤状态，例如通过MRI评估；
[0105] 获取上肢和/或下肢功能的测量。
[0106] 获取步行功能的测量(例如短距离步行功能)(例如25英尺计时步行(T25FW))；或长距离步行功能(例如6分钟步行测试(6MW))；
[0107] 获取认知功能的测量(例如MS-COG)；或
[0108] 获取视觉功能的测量。
[0109] 在一个实施方案中，所述上肢功能的测量通过9孔柱测试(9HP)获得。
[0110] 在其它实施方案中，所述短距离步行功能的测量通过25英尺计时步行(T25FW)获得。
[0111] 在其它实施方案中，所述长距离步行功能的测量通过6分钟步行测试(6MW)获得。
[0112] 在某些实施方案中，肢体和/或步行功能的测量提高至少10％，15％，20％，25％或更高提示疾病的进展，例如所述受试者症状和/或失能的稳定恶化；而上述肢体和/或步行功能的测量降低至少10％，15％，20％，25％或更多提示所述受试者结果的改善(例如疾病进展的减退或病患的改善)。
[0113] 在某些实施方案中，对所述受试者的评估通过神经功能评价，例如EDSS。在一些实施方案中，所述EDSS包括神经功能的评价，步行功能的评价或两者兼有。在一个实施方案中，EDSS分数基于一个或多个EDSS功能系统(FS)的得分计算而来(例如一个、两个、三个、四个、五个、六个或所有的七个选自视觉、脑干、小脑、运动、感知、膀胱/肠或认知系统的EDSS FS分数)。在其它的实施方案中，所述EDSS包括步行分数。在一个实施方案中，所述EDSS包括对患者步行能力的判定，包括以下一个或多个(所有)方面：无限制步行，例如无辅助或休息的预设距离步行(例如一段大于或等于500、300、200或100米，或小于200或100米的距离)；单侧辅助；两侧辅助；基本或完全受限于轮椅；基本或完全受限于床。
[0114] 在一个实施方案中，所述对视觉功能的评估通过以下一个或多个方法获得：例如低对比度字母视力(low-contrast letter acuity，LCLA)，视觉功能问卷(Visual Function Questionnaire，VFQ)，功能性视力对比测试(Functional Acuity Contrast Testing，FACT)，VEP(见例如MacKay,AM(2008)Invest Ophthalmol Vis Sci.49(1):438-
41)，光学相干层析成像(optical coherence tomography，OCT)，其中一些方法见例如Balcer等，(2010)Neurology 74Suppl3:S16-23；Bock,M.等，(2012)Br J Ophthalmol.96(1):62-7)。
41)，光学相干层析成像(optical coherence tomography，OCT)，其中一些方法见例如Balcer等，(2010)Neurology 74Suppl3:S16-23；Bock,M.等，(2012)Br J Ophthalmol.96(1):62-7)。
[0115] 在其它实施方案中，所述对认知功能的测量包含对学习能力测试的评价，记忆能力的评价和/或注意力/处理速度测试的评价。例如，所述对认知功能的测量可以包括评价听觉记忆，语言学习和/或视觉信息存储(例如选择性提醒测试(Selective Reminding Test，SRT))中的一种或多种；评价听觉/语言记忆的测试(例如加州言语学习测试第二版(California Verbal Learning Test Second Edition，CVLT2))，雷伊听觉言语学习测试(Rey Auditory Verbal Learning Test，RAVLT)；评价视觉/空间记忆的测试(例如Brief Visuospatial Memory Test Revised(BVMTR))；处理速度认知测试，例如Paced Auditory Serial Addition Test(PASAT)，Symbol Digit Modalities Test(SDMT)；MSNQ-信息，MSNQ-受试者，和/或SF-36。在一个实施方案中，所述对认知功能的测量通过使用MS认知端点复合进行，其包含SDMT，PASAT-3和-3，SRT-Total Learned(SRT-TL)，SRT Delayed Recall(SRT-DR)和BVMTR Delayed Recall(BVMTR-DR)(例如描述于Cadavid等,29th Congress European Committee for Treatment and Research in MS(ECTRIMS)，2-
5October 2013)。
5October 2013)。
[0116] 在某些实施方案中，所述受试者的损伤状态通过磁共振成像来评估。在一个实施方案中，磁共振成像包含磁转移和/或发散张量成像(diffusion tensor imaging)。
[0117] 在某些实施方案中，所述受试者的改善通过以下一个或多个方面定义：
[0118] a.EDSS从小于或等于6.0的基线得分降低大于等于1.0分；
[0119] b.T25FW中从基线处改善大于等于15％
[0120] c.9HPT中从基线处改善大于等于15％；或
[0121] d.PASAT中从基线处改善大于等于15％。
[0122] 在其它实施方案中，所述方法还包括以下一个或多个方面：
[0123] (i)鉴定所述受试者需要疗法，例如本文所述的疗法；
[0124] (ii)鉴定所述受试者对疗法的提高或降低反应，例如本文所述的疗法；
[0125] (iii)鉴定所述受试者处于稳定状态，显示功能或能力的改善(例如作为疾病的无进展者)，或显示功能或能力的衰退(例如作为疾病的进展者)。
[0126] (iv)对所述受试者诊断和/或预后。
[0127] 本文所述方法的步骤(例如修复剂和免疫调节剂的施用(“施用步骤”))，以及受试者的监测和/或评价(“评价步骤”)可以以任何顺序进行。在一个实施方案中，施用步骤先于评价步骤发生。在另一个实施方案中，评价步骤先于施用步骤发生。
[0128] 除非另有定义，本文所用的所有技术和学术术语与这一发明所属领域的普通技术人员通常理解的意义相同。虽然与本文所述的相似或相当的方法和材料可以用于实施或检测本发明，下面描述了合适的方法和材料。本文所提到的所有出版物、专利申请、专利和其它引用其内容通过提述完整并入本文。另外，所述的材料、方法和例子只为了说明而并非限定。
[0131] 图1描述了在实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠模型中，用于量化视神经轴突密度的目标区域(ROI)选择。
[0132] 图2A线状图表显示了用媒介物或抗LINGO-1抗体处理的EAE小鼠的存活曲线。图2B线状图表显示了用媒介物或抗LINGO-1拮抗剂处理的EAE小鼠完全瘫痪的形成。
[0133] 图3A-3F包含了在小鼠EAE中，冠状视神经弥散成像的图像。弥散方向通过小箭头标示。视神经的正确位置通过大箭头标示。图3A是T2加权定位扫描的图像。图3B是视神经垂直方向的弥散加权图像。图3C是视神经平行方向的弥散加权扫描图像。图3D是视神经垂直方向的弥散加权图像。图3E是图3B中视神经图像的放大。图3F是图3D中视神经图像的放大。
[0134] 图4条线图描述了通过弥散张量成像(DTI)分析的小鼠EAE中视神经的完整性。
[0135] 图5描述了用媒介物或抗LINGO-1抗体治疗的EAE小鼠或健康小鼠中视神经的组织学分析。
[0136] 图图6描述了用媒介物或抗LINGO-1抗体治疗的EAE小鼠或健康小鼠中视神经中轴突缺失的测量。图图6包括了对视神经面积(μm2)，平均中心轴突面积(μm2)，中心轴突总数，外周轴突总数，中心轴-质总面积(μm2)，外周轴-质总面积(μm2)的测量。
[0137] 图7描述了分别使用抗βIII微管蛋白染色和DAPI检测的视神经切片的组织学分析，其经过以下处理：治疗组(Veh+对照抗体)，甲基强的松龙(MP)，抗LINGO-1抗体，以及MP+抗LINGO-抗体。
[0138] 图8线状图反映所示的治疗组中轴突片段数量/区域。抗LINGO-1单克隆抗体治疗组(Veh+抗LINGO-1单克隆抗体)表现出高5倍的轴突数量，提示抗LINGO-1单克隆抗体治疗阻止了轴突的缺失(图图8)。与对照治疗组相比(Veh+对照抗体)，联合治疗组(MP+抗LINGO-1单克隆抗体)表现出轴突数量中的8倍增加。
[0139] 发明详述
[0140] 炎症性脱髓鞘CNS疾病，例如MS，是一种青壮年中常见的非创伤性神经失能。现有已批准的MS疗法主要是免疫调节，对CNS的修复并没有可检测的直接效果。例如，对复发性MS病人现有的标准护理包括使用免疫调节药物来降低复发的频率和严重程度，以及复发相关生理失能的积累，同时提供所需的多种症状治疗，例如对于抑郁，膀胱失调，或行走缺陷。几种免疫调节药物目前可用于复发性MS，包括但不限于：干扰素β的不同制剂(通过肌肉内[IM][Avonex]或皮下[SC] 给药的干扰素β-1a，干扰素)，醋酸格拉替雷 那他株单抗
(例如 )，以及芬戈莫德 短期的皮质类固醇偶尔给药可以获得部分
成功。化疗剂，例如米托蒽醌和环磷酰胺，偶尔会用于严重的复发性MS病例。虽然通过少突胶质细胞的一定程度上的轴突髓鞘再生在MS的病程的早期即发生，但内源性修复CNS的能力经常不足，从而导致不可逆的组织损伤以及加重的疾病相关的失能。
(例如 )，以及芬戈莫德 短期的皮质类固醇偶尔给药可以获得部分
成功。化疗剂，例如米托蒽醌和环磷酰胺，偶尔会用于严重的复发性MS病例。虽然通过少突胶质细胞的一定程度上的轴突髓鞘再生在MS的病程的早期即发生，但内源性修复CNS的能力经常不足，从而导致不可逆的组织损伤以及加重的疾病相关的失能。
[0141] 一些临床前研究揭示了在毒性损伤(铜宗，Cuprizone)(Mi等，(2009)Ann Neurology,65:304-15)，化学损伤(溶血磷脂酰胆碱[LPC])，炎症性脱髓鞘(髓鞘少突胶质糖蛋白-实验性自身免疫脑脊髓炎[MOG-EAE])(Mi等，(2007)Nat Med,13:1228-33)；和毒性(1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶[MPTP])神经损伤(Inoue等，(2007)ProcNatl Acad Sci,104:14430-5)，外伤性/高血压视神经损伤(Fu等，(2008)Invest Opthalmol Vis Sci,
49:975-85)以及脊髓损伤(Ji等，(2006)Mol Cell Neurosci,33:311-20；Ji et al.(2008)Mol Cell Neurosci,39:258-67；Lv et al.(2010)Neuroimmunomodulat,17:270-8)动物模型中，拮抗LINGO-1在增强CNS髓鞘再生和神经轴突保护中的作用。因此，使用抗LINGO-1抗体拮抗LINGO-1可以增强CNS中髓鞘再生和神经轴突保护。在外周施用后，足够浓度的抗LINGO-1抗体可以到达CNS以阻断轴突和少突胶质细胞两者中的LINGO-1。这一过程可以通过MS病人脑中一般存在的少突胶质细胞前体细胞(OPC)的分化，促进髓鞘再生。
49:975-85)以及脊髓损伤(Ji等，(2006)Mol Cell Neurosci,33:311-20；Ji et al.(2008)Mol Cell Neurosci,39:258-67；Lv et al.(2010)Neuroimmunomodulat,17:270-8)动物模型中，拮抗LINGO-1在增强CNS髓鞘再生和神经轴突保护中的作用。因此，使用抗LINGO-1抗体拮抗LINGO-1可以增强CNS中髓鞘再生和神经轴突保护。在外周施用后，足够浓度的抗LINGO-1抗体可以到达CNS以阻断轴突和少突胶质细胞两者中的LINGO-1。这一过程可以通过MS病人脑中一般存在的少突胶质细胞前体细胞(OPC)的分化，促进髓鞘再生。
[0142] 抗LINGO-1抗体与轴突和神经元中LINGO-1的结合也能通过阻断CNS中髓磷脂碎片在Nogo66受体-1(NgR1)/p75/LINGO-1受体复合物上的信号传导，提供对神经轴突的保护。已提出在MS中，轴突修复/神经突再生的失败至少部分由于在损伤的轴突中，髓鞘碎片在NgR1/p75/LINGO-1复合物和NgR1/TROY/LINGO-1复合物上的信号传导(Mi等，(2004)Nat Neurosci,7:221-8)。NgR1受体复合物上的信号传导也许不仅影响轴突的再生(Yamashita等，(2005)Mol Neurobiol,32:105-11)，也影响神经轴突损伤后神经细胞的存活
(Yamashita等，(2005)Mol Neurobiol,32:105-11)。
(Yamashita等，(2005)Mol Neurobiol,32:105-11)。
[0143] 不希望受到理论的束缚，据信新形成的损伤至少部分由于轴突更多的保存下来以及受到胶质瘢痕的影响较小，也许更易于修复和髓鞘再生(Jasmin and Ohara(2002)Neuroscientists 8(3):198-203；Vick et al.(1992)J.Neurotrauma 9Suppl 1:S93-103)。然而，LINGO-1拮抗剂对已存在的损伤也能产生修复效果。例如，抗LINGO-1抗体对于已存在损伤的效力通过以下证据支持：(1)OPCs在长期脱髓鞘的MS损伤中被发现这一发现，(2)动物实验中表明在长期脱髓鞘的脑部损伤诱导髓鞘再生的能力，以及(3)研究表明在建立的脱髓鞘损伤中(例如在铜宗模型中)，通过阻断LINGO-1增强髓鞘再生。
[0144] 因此，使用抗LINGO-1抗体拮抗LINGO-1能够增强CNS脱髓鞘疾病例如MS和急性视神经炎中的髓鞘再生和神经轴突保护，引起CNS修复的改善，伴随着对对应神经功能和失能的有利影响。由于抗LINGO-1抗体对于MS发病机理中的炎症组分没有可检测的免疫调节作用，因此期望将其与免疫调节剂共同施用。因此，公开了免疫调节剂例如IFN-β试剂例如和修复剂例如抗LINGO-1抗体的联合治疗。
[0145] 本发明提供，至少部分提供方法、组合物和试剂盒，用于增强以下一个或多个方面：受试者例如人(例如MS病人)中的髓鞘化，髓鞘再生，少突胶质细胞的数量，或神经轴突保护，并减轻受试者体内的炎症。这些本文所述的方法、组合物和试剂盒对于治疗CNS疾病例如CNS脱髓鞘疾病是有用的。相应的，本文所述的方法、组合物和试剂盒包括修复剂(例如LINGO-1的拮抗剂)和免疫调节剂的联用。
[0146] 在其它实施方案中，所述修复剂(例如LINGO-1拮抗剂)可以用于治疗视神经炎症状况例如视神经炎(例如急性视神经炎(AON))。因此也公开包含修复剂的方法和组合物，用于治疗视神经炎症例如视神经炎(例如AON)。
[0147] 本文所使用的术语“修复剂”包括所有可以导致以下一项或多项的试剂：增强髓鞘化，髓鞘再生，增强神经轴突保护，增加轴突的延伸，增加神经元的出芽和/或增加少突胶质细胞的数量(例如通过增加以下一个或多个方面：少突胶质细胞的存活或分化)，并没有显著的(例如可检测的)免疫调节效果。在一个实施方案中，所述修复剂是LINGO-1的拮抗剂，例如本文所述的LINGO-1拮抗剂。
[0148] 本发明的各个方面在以下小节中有进一步详细的描述。
[0149] 定义：
[0150] 如本文所使用的，每一个下列术语具有与其在本节相关联的含义。
[0151] 如本文所使用的，冠词“一”和“一个”指一个或多于一个(例如，至少一个)所述冠词的语法对象。
[0152] 除非上下文另有明确说明，本文中所使用的术语“或”表示和/或，可与术语“和/或”替换使用。
[0153] 本文所使用的术语“蛋白”和“多肽”可以替换使用。
[0154] “大约”和“近似”一般表示由于测量方法的特性或精度，对定量测量可接受程度的误差。范例性的误差程度在所给值或所给范围的百分之(％)20以内，典型的，在10％以内，更典型的，在5％以内。
[0155] 本文所使用的术语“获取”指代，通过“直接获取”或“间接获取”结果，得到对所希望结果的确定或评价，例如值，例如数字值。“直接获取”表示执行一个过程(例如执行测试，例如上肢和/或下肢功能的测量，和/或步行功能)来获得结果，例如值。“间接获取”指代从另一方或来源接收结果，例如值(例如直接获取值的第三方临床医生或保健专家)。
[0156] “CNS病症”(例如“CNS脱髓鞘疾病”)可以是伴随以下一或多项的任何疾病，病症或损伤：脱髓鞘，髓鞘功能障碍，轴突损伤，和/或少突胶质细胞或神经细胞的功能障碍或死亡，或神经突触/连接的缺失。在某些实施方案中，所述CNS病症通过导致轴突髓鞘的损伤来影响神经系统。在其它实施方案中，所述CNS疾病包括Nogo受体-1(NgR1-)介导的轴突或神经突延伸的抑制，例如在脑部和脊髓中。在其它的实施方案中，所述CNS病症具有一个或多个炎症组分。在一个实施方案中，所述CNS病症(例如所述CNS脱髓鞘疾病)是多发性硬化症。如果至少一个疾病或病症的症状被减轻，缓和，结束，减慢或阻止了，所述CNS病症(例如所述CNS脱髓鞘疾病)被“治疗”，“抑制”或“减轻”。
[0157] 如本发明中所使用的，如果所述疾病的反复或复发被减轻，减慢，延迟或阻止了，则多发性硬化症被“治疗”，“抑制”或“减轻”。多发性硬化症的典型临床症状可以用来确定受试者的疾病状态，包括例如刺痛，麻木，肌肉无力，平衡感缺失，视线模糊或复视丧失，言语不清，突发性瘫痪，协调能力缺失，认知障碍，疲劳，热敏感，痉挛，头晕，震颤，步态异常，言语/吞咽困难，以及通过成像技术例如MRI评估的损伤程度。MS的临床征兆通过例如建立在神经系统检查和长距离步行上的EDSS评分系统进行常规分类和标准化。在量表的较低端(1-5.5)，一整步的降低提示有效的MS治疗(Kurtzke,Ann.Neurol.36:573-79,1994)，而一整步的增加表示提示疾病的进展或恶化(例如加重)。在量表的较高端(5-7)，半分通常表示改善(减少)或恶化(增加)。
[0158] 本文中使用的“扩展残疾状态量表”或“EDSS”具有其在医疗实践中的惯常意义。EDSS是常用于MS分类和标准化的计分系统。公认的计分从0分(正常)到10分(MS导致的死亡)。EDSS分数在大约4到6分之间的典型病人有中度失能(例如有限的步行能力)，而EDSS分数在约7或8分的病人有严重的失能(例如需要轮椅)。更具体的，EDSS分数在1到3分之间表明MS病人完全适宜步行，但在一个或多个功能系统中具有征兆；EDSS分数在高于3到4.5分的范围表明中度或相对严重的失能；EDSS分数在5到5.5分表明妨害或妨碍完全日常活动的失能；EDSS分数在6到6.5分表明病人需要间断到恒定，或单侧到双侧的恒定辅助(手杖，拐杖或支架)来行走；EDSS分数在7到7.5分表明即使在辅助下，MS病人无法行走超过5米，基本受限于轮椅；EDSS分数在8到8.5分表明病人受限于床；EDSS分数在9到10分表明MS病人被限定在床上，并且渐渐的不能有效交流或吃和吞咽，直到MS引起的死亡。
[0159] 本文所使用的“疾病进展”包括对受试者中一种或多种症状和/或失能恶化的测量(例如一种或多种测量)。在某些实施方案中，疾病进展通过一段时间内一种或多种症状和/或失能的稳定恶化来评价，与持续相对较短的复发相对。在某些实施方案中，疾病的进展在患有复发形式MS(例如RRMS)或进展性形式MS的受试者中评价(例如患有原发性或继发性进行性多发性硬化症(分别为PPMS或SPMS)的受试者，或患有进行性复发性MS(PRMS)的受试者)。
[0160] 在某些实施方案中，对疾病进展的所述评价包括上肢功能的测量(例如9HP评估)。可替换或联合的，疾病进展包括下肢功能的测量。可替换或联合的，疾病进展包括步行能力的测量，例如短距离步行功能(例如T25FW)。可替换或联合的，疾病进展包括步行能力的测量，例如长距离步行功能(例如6分钟步行测试)。在一个实施方案中，所述疾病进展包括EDSS步行功能以外的步行功能测量。在一个实施方案中，所述疾病进展包括上肢功能的测量(例如9HP评估)和步行能力的测量例如短距离步行能力(例如T25FW)。在一个实施方案中，所述的疾病进展包括上肢功能的测量(例如9HP评估)和下肢功能的测量。在一个实施方案中，所述疾病进展包括上肢功能的测量(例如9HP评估)，下肢功能的测量和步行能力的测量，例如短距离步行功能(例如T25FW)和/或长距离步行功能(例如定时(例如6分钟)的步行测试(例如6MWT))。在一个实施方案中，T25W，6MWT和9MWT评估中的一个，两个或联合能够用于获取疾病进展值。所述步行功能的测量(例如短距离步行功能(例如T25FW)或长距离步行功能(例如定时(例如6分钟)的步行测试(例如6MWT))和/或上肢功能的测量(例如9HP评估)能够进一步和EDSS联合来评价MS，例如进展性形式的MS。
[0161] 在一个实施方案中，进展者是具有反映以下至少一个，两个或所有标准的疾病进展值的受试者：
[0162] a.T25FW中确认的疾病进展：25英尺步行所花费的时间在基线步行上增加至少15％或20％，并在相距至少3、4、5或6个月的第二个时间点确认；
[0163] b.通过定时(例如6分钟)步行测试(例如6MWT)确定的疾病进展：步行所花费的时间在基线步行上增加至少15％或20％，并在相距至少3、4、5或6个月的第二个时间点确认；
[0164] c.通过9HP确定的疾病进展：在9HP中所花费的时间在基线花费时间上增加至少15％或20％，并在相距至少3、4、5或6个月的第二个时间点确认。9HP中的进展可以发生于任一只手，但是对其的确认应该在同一只手上；和/或
[0165] d.EDSS中确认的疾病进展：
[0166] (i)如果EDSS总分的改变通过(或主要通过)评价神经功能中的改变(例如神经系统一个或多个改变)来确定，则EDSS总分在基线上增加至少1分；和/或
[0167] (ii)如果EDSS总分的改变通过(或主要通过)步行功能的改变来确定，则EDSS总分在基线上增加至少0.5分
[0168] 如果(i)和(ii)其中一个或两个在相距至少3、4、5或6个月的第二个时间点确认(通常距离至少6个月)
[0169] 以上所提到测试(例如T25FW，6MWT，EDSS或9HP)的基线值可以通过使用最佳基线值或平均基线值来确定。
[0170] 本文使用的“响应(responsiveness)”，对治疗有“响应(response)”以及该术语的其它形式，表示受试者对所述疗法治疗的反应。例如，如果受试者至少一个多发性硬化症的症状(例如疾病的加重)减轻或延缓大约10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或以上，则MS受试者对疗法响应。在另一个例子中，如果通过合适的测量确定受试者至少一个多发性硬化症的症状减轻约5％、10％、20％、30％、40％、50％或以上，则MS受试者对疗法响应，所述测量例如以下一种或多种：上肢或下肢功能测量，步行功能测量，或扩展残疾状态量表(EDSS)评估。在另一个实施方案中，如果受试者进展前的时间增加，则MS受试者对疗法响应。本文所陈述的几种方法可以用来确定病人是否对治疗响应，包括本文所述的评估。
[0171] 在某些实施方案中，受试者的改善通过以下一项或多项确定：
[0172] a.EDSS从小于等于6.0的基线分数下降大于等于1.0分
[0173] b.从T25FW基线改善大于等于15％；
[0174] c.从9HPT基线改善大于等于15％；或
[0175] d.从PASAT基线改善大于等于15％
[0176] “不响应者”或“进展者”指代以下受试者例如MS病人，如果通过任何合适的测量确定在对疗法的反应(例如本文所述的疗法)中，该受试者中多发性硬化症的至少一个症状或失能减轻少于约5％，所述测量例如以下一种或多种：上肢或下肢功能的测量，步行功能的测量，认知功能的测量，或扩展残疾状态量表(EDSS)的评估。
[0177] 本文公开的方法、组合物和试剂盒包含多肽和核酸，其具有特定序列，或与之大体相同或相似的序列，例如与特定序列至少85％、90％、95％或更高相同的序列。在氨基酸序列的上下文中，术语“大体相同”用于指代第一个氨基酸序列含有足够或最低限度数量的氨基酸残基，其与第二个氨基酸序列中比对的氨基酸残基i)相同或ii)为其保守替换，以致第一个和第二个氨基酸序列可具有共同的结构域和/或共同的功能活性。例如，含有与本文所述的序列具有至少约85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％同一性的共同的结构域的氨基酸序列称为大体相同。
[0178] 在核苷酸序列的上下文中，本文使用的术语“大体相同”指代第一条核酸序列包含足够或最低限度数量的核苷酸，其与第二条核酸序列的比对核苷酸相同，以致第一条和第二条核酸序列编码的多肽具有共同的功能活性，或编码共同的结构多肽域，或共同的功能多肽活性。例如，与本文所述的序列具有至少约85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％同一性的核苷酸序列在称为大体相同。
[0179] 对于序列间同源性或同一性(本文中这两个术语可相互替换)的计算通过以下进行。
[0180] 为了确定两条氨基酸序列或两条核酸序列间的同一性百分比，将这序列比对以达到最佳比较的目的(例如可以在第一条和第二条氨基酸或核酸序列中的一条或两条中引入缺口，来获得最佳比对，为了比较的目的，可以忽视非同源序列)。在一个优选的实施方案中，用于比较目的而比对的参考序列的长度为参考序列长度的至少30％，优选至少40％，更优选的至少50％，60％以及甚至更优选的至少70％，80％，90％，100％。在对应氨基酸位置或核苷酸位置的氨基酸残基或核苷酸进行对比。当第一条序列位置被与第二条序列对应位置相同的氨基酸残基或核苷酸占据，那么这两个分子在这一位置相同(本发明使用的氨基酸或核酸“同一性”等同于氨基酸或核苷酸“同源性”)。
[0181] 两条序列间的百分比同一性是两条序列共有相同位置数量的函数，考虑缺口的数量，以及每个缺口的长度，其为了两条序列的最佳匹配而需要被引入。
[0182] 序列间的对比以及确定两条序列百分比同一性可以通过使用数学算法完成。在一个优选的实施方案中，两条氨基酸序列间的同一性百分数通过Needleman and Wunsch((1970)J.Mol.Biol.48:444-453)算法完成，其被整合到GCG软件包中的GAP程序中(在http://www.gcg.com可获得)，使用Blossum 62矩阵或PAM 250矩阵，缺口权重为16、14、12、10、8、6或4，长度权重为1、2、3、4、5或6。在另一个优选的实施方案中，两条核苷酸序列间的相同百分比通过使用GCG软件包中的GAP程序确定(在http://www.gcg.com可获得)。使用NWSgapdna.CMP矩阵，缺口权重为40、50、60、70或80，长度权重为1、2、3、4、5或6。一组尤其优选的参数(除非特殊说明，应当使用此组)为Blossum 62计分矩阵，缺口罚分12，缺口延伸罚分4，以及移码缺口罚分5。
[0183] 两条氨基酸或核苷酸序列间的同一性百分比可以使用算法E.Meyers and W.Miller((1989)CABIOS,4:11-17)确定，其被整合到ALIGN程序中(2.0版)，使用PAN 120权重残量表，缺口长度罚分12，缺口罚分4。
[0184] 本发明描述的核酸和蛋白序列可以作为“查询序列”在发表数据库中进行搜索，例如，鉴定家族其它成员或相关序列。这些搜索可以使用NBLAST和XBLAST程序(2.0版)Altschul,等，(1990)J.Mol.Biol.215:403-10。BLAST核苷酸搜索可以使用NBLAST程序进行，score＝100，wordlength＝12，来获得本发明中BMP-10/BMP-10受体核酸(SEQ ID NO:1)分子的核苷酸序列同源物。BLAST蛋白搜索可以通过XBLAST程序进行，score＝50，wordlength＝3，来获得本发明中BMP-10/BMP-10受体(SEQ ID NO:1)蛋白分子氨基酸序列的同源物。为了获得缺口比对以达到比较的目的，可以使用如Altschul等，(1997)Nucleic Acids Res.25:3389-3402中描述的Gapped BLAST。当使用BLAST和Gapped BLAST程序时，可使用对应程序(例如XBLAST和NBLAST)的默认参数。见http://www.ncbi.nlm.nih.gov。
[0185] 本文也包括多肽的片段，衍生物，类似物或变体，以及其任何组合。术语“片段”，“变体”，“衍生物”和“同源物”包括了保留对应天然多肽至少部分特性的任意多肽。多肽的片段包括蛋白水解片段，以及缺失片段。多肽的变体包括上述的片段，以及通过氨基酸替代，缺失或插入导致的改变的氨基酸序列。变体可以是天然产生或非天然产生的。非天然产生的变体可以通过本领域已知的诱变技术产生。多肽变体可能包含保守或非保守的氨基酸替代、删除或增加。
[0186] 术语“功能性变体”指代与天然产生序列具有大体相同氨基酸序列，或由大体相同的核苷酸序列编码的多肽，并能够具有天然产生序列的一种或多种活性。
[0187] 多肽的衍生物是已被改变以表现出天然多肽没有的附加特性的多肽。例子包括融合蛋白。
[0188] “保守氨基酸替代”指氨基酸残基被具有相似侧链的氨基酸残基替代。现有技术已鉴定具有相似侧链的氨基酸残基家族。这些家族包括具有碱性侧链的氨基酸(例如赖氨酸，精氨酸，组氨酸)，具有酸性侧链的氨基酸(例如天冬氨酸，谷氨酸)，无电荷极性侧链(例如甘氨酸，天冬酰胺，谷氨酰胺，丝氨酸，苏氨酸，酪氨酸，半胱氨酸)，无极性侧链(丙氨酸，缬氨酸，亮氨酸，异亮氨酸，脯氨酸，苯基丙氨酸，蛋氨酸，色氨酸)，β-分支侧链(例如苏氨酸，缬氨酸，异亮氨酸)，以及芳香族侧链(例如酪氨酸，苯基丙氨酸，色氨酸，组氨酸)。
[0189] 本发明的各个方面在下面进一步详细描述。另外的定义在整个说明书中陈述。
[0190] 修复剂
[0191] 本文所述的方法、组合物和试剂盒包括修复剂(例如LINGO-1的拮抗剂)和免疫调节剂的联合。在一个实施方案中，所述修复剂是包含LRR和Ig结构域的Nogo受体相互作用蛋白(“LINGO”，例如LINGO-1)的拮抗剂。例如，所述LINGO-1拮抗剂能够抑制或降低LINGO-1，例如人LINGO-1的表达或活性。在一个实施方案中，所述LINGO-1拮抗剂抑制或降低NgR1、p57和LINGO-1；和/或NgR1、TAJ(TROY)和LINGO-1的复合物(例如功能性信号传导复合物)的形成和/或其活性。在另一个实施方案中，所述LINGO-1的拮抗剂抑制或降低LINGO-1对NgR1的结合。
[0192] LINGO-1和LINGO-1拮抗剂
[0193] LINGO-1，曾被称为Sp53，是一个选择性的表达在成人CNS神经元和少突胶质细胞中的细胞表面糖蛋白。LINGO-1是包含三个其它旁系同源物的蛋白家族的成员：LINGO-2(GI:12309630，61％蛋白同一性)，LINGO-3(GI:23342615,56％同一性)和LINGO-4(GI:21211752,44％同一性)。LINGO-1进化上高度保守，人和小鼠的直系同源物共享99.5％同一性。通过Northern印迹分析，发现LINGO-1高表达在人脑中，而在非神经组织中检测不到(Barrette等，(2007)Mol Cell Neurosci,34:519-38；Carim-Todd等，(2003)EurJournal Neurosci,18:3167-82；Llorens等，(2008)Dev Neurobiol,68:521-41；Mi等，(2004)Nat Neurosci,7:221-8；Okafuji等，(2005)Gene Expr Patterns,6:57-62；Park等，(2006)Neurosci Lett,404:61-6；Shao等，(2005)Neuron,45:353-9)。在2006年7月7日提交的国际申请PCT/US2006/026271，2004年3月17日提交的PCT/US2004/008323，2005年6月24日提交的PCT/US2005/022881以及2008年1月9日提交的PCT/US2008/000316中也对LINGO-1有详细描述，其各自通过提述完整并入本文。
[0194] LINGO-1选择性表达在少突胶质细胞前体细胞(OPCs)和神经元中。LINGO-1作为少突胶质细胞分化、髓鞘化和髓鞘再生的负调控因子发挥功能；阻止少突胶质细胞对轴突的髓鞘化(Lee等，(2007)J Neurosci,27:220-5；Mi等，(2005)Nat Neurosci,8:745-51；Mi等，(2008)Int Journal Biochem Cell Biol 40(10):1971-8；Mi等，(2009)Ann Neurology,65:304-15)。损伤后，轴突和神经元的LINGO-1表达增加(Ji等，(2006)Mol Cell Neurosci,
33:311-20)。LINGO-1的表达阻止少突胶质细胞引起的轴突髓鞘化。一些临床前研究揭示了在毒性损伤(铜宗，Cuprizone)(Mi等，(2009)Ann Neurology,65:304-15)、化学损伤(溶血磷脂酰胆碱[LPC])、炎症性脱髓鞘(髓鞘少突胶质糖蛋白-实验性自身免疫脑脊髓炎[MOG-EAE])(Mi等，(2007)Nat Med,13:1228-33)，毒性(1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶[MPTP])神经损伤(Inoue等，(2007)Proc Natl Acad Sci,104:14430-5)，外伤性/高血压视神经损伤(Fu等，(2008)Invest Opthalmol Vis Sci,49:975-85)以及脊髓损伤(Ji等，(2006)Mol Cell Neurosci,33:311-20；Ji等，(2008)Mol Cell Neurosci,39:258-67；Lv等，(2010)Neuroimmunomodulat,17:270-8)动物模型中，拮抗LINGO-1在加强CNS髓鞘再生和神经轴突保护中的潜能。通过抑制轴突和少突胶质细胞中的LINGO-1，导致CNS中髓鞘碎片和/或硫酸蛋白多糖在NgR1受体复合物上的信号传导的阻断，可提供髓鞘再生和神经轴突的保护。这转而可能通过通常存在于MS患者脑中的少突胶质细胞前体细胞(OPCs)的分化，促进髓鞘再生。因此，LINGO-1的拮抗作用可以增强轴突的髓鞘化或髓鞘再生，例如通过少突胶质细胞，并增强CNS中神经轴突的保护，例如在CNS脱髓鞘疾病例如多发性硬化症(MS)和急性视神经炎中，引起CNS修复的改善。
33:311-20)。LINGO-1的表达阻止少突胶质细胞引起的轴突髓鞘化。一些临床前研究揭示了在毒性损伤(铜宗，Cuprizone)(Mi等，(2009)Ann Neurology,65:304-15)、化学损伤(溶血磷脂酰胆碱[LPC])、炎症性脱髓鞘(髓鞘少突胶质糖蛋白-实验性自身免疫脑脊髓炎[MOG-EAE])(Mi等，(2007)Nat Med,13:1228-33)，毒性(1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶[MPTP])神经损伤(Inoue等，(2007)Proc Natl Acad Sci,104:14430-5)，外伤性/高血压视神经损伤(Fu等，(2008)Invest Opthalmol Vis Sci,49:975-85)以及脊髓损伤(Ji等，(2006)Mol Cell Neurosci,33:311-20；Ji等，(2008)Mol Cell Neurosci,39:258-67；Lv等，(2010)Neuroimmunomodulat,17:270-8)动物模型中，拮抗LINGO-1在加强CNS髓鞘再生和神经轴突保护中的潜能。通过抑制轴突和少突胶质细胞中的LINGO-1，导致CNS中髓鞘碎片和/或硫酸蛋白多糖在NgR1受体复合物上的信号传导的阻断，可提供髓鞘再生和神经轴突的保护。这转而可能通过通常存在于MS患者脑中的少突胶质细胞前体细胞(OPCs)的分化，促进髓鞘再生。因此，LINGO-1的拮抗作用可以增强轴突的髓鞘化或髓鞘再生，例如通过少突胶质细胞，并增强CNS中神经轴突的保护，例如在CNS脱髓鞘疾病例如多发性硬化症(MS)和急性视神经炎中，引起CNS修复的改善。
[0195] 在本领域，LINGO-1也被称为LRRN6、LRRN6A、FLJ14594、LERN1、MGC17422和UNQ201。人的全长野生型LINGO-1多肽包含LRR域，其由14个富含亮氨酸的重复组成(包括N-和C-端帽)，Ig结构域，跨膜区，以及胞内域。所述胞内域包含经典酪氨酸磷酸化位点。另外，天然存在的LINGO-1蛋白包含信号序列，LRR-C端域(LRRCT)和Ig结构域之间一个短碱性区，以及Ig结构域和胞内域之间的跨膜区。人的LINGO-1基因(SEQ ID NO:52)包含可选的翻译起始密码子，因此六个额外的氨基酸，即MQVSKR(SEQ ID NO:87)可以存在或不存在于LINGO-1信号序列的N端。基于本文SEQ ID NO:51的LINGO-1氨基酸序列，根据氨基酸残基的数量，表2列出了LINGO-1的结构域和其它区域。所述LINGO-1多肽的特点在PCT公开文本No.WO 2004/
085648中有更详细的描述，通过提述完整并入本文。
085648中有更详细的描述，通过提述完整并入本文。
[0196] 表2
[0197]
[0198]
[0199] LINGO-1的组织分布和发育表达在人和大鼠中已有研究。LINGO-1的生物学在实验动物(大鼠)模型中已有研究。如通过Northern印迹和免疫组织化学染色确认的，大鼠LINGO-1的表达定位于神经元和少突胶质细胞。大鼠LINGO-1的mRNA表达水平受到发育调控，在出生后短时间内达到峰值，例如出生后第一天。在大鼠脊髓横断损伤模型中，如通过RT-PCR确认的，LINGO-1在损伤部位上调。见Mi等，Nature Neurosci.7:221-228(2004)。
[0200] 在包含多个LINGO-1多肽结构或功能域的氨基酸的上下文中，术语“大约”包括大或小几个(例如10、9、8、7、6、5、4、3、2或1)氨基酸的具体所述值。由于表2列举的这些域的位置是通过计算机制图预测的，普通技术人员能够理解根据用于定义域的标准，组成域的氨基酸残基也许稍有变化(例如改变约1到15个残基)。
[0201] 全长的野生型LINGO-1结合NgR1。见PCT公开文本No.WO2004/085648。LINGO-1表达于少突胶质细胞，且LINGO-1蛋白参与调节少突胶质细胞介导的轴突髓鞘化。见U.S专利公开文本No.2006/0009388A1，通过提述完整并入本文。
[0202] 全长LINGO-1分子的核苷酸序列如下：
[0203] ATGCTGGCGGGGGGCGTGAGGAGCATGCCCAGCCCCCTCCTGGCCTGCTGGCAGCCCATCCTCCTGCTGGTGCTGGGCTCAGTGCTGTCAGGCTCGGCCACGGGCTGCCCGCCCCGCTGCGAGTGCTCCGCCCAGGACCGCGCTGTGCTGTGCCACCGCAAGCGCTTTGTGGCAGTCCCCGAGGGCATCCCCACCGAGACGCGCCTGCTGGACCTAGGCAAGAACCGCATCAAAACGCTCAACCAGGACGAGTTCGCCAGCTTCCCGCACCTGGAGGAGCTGGAGCTCAACGAGAACATCGTGAGCGCCGTGGAGCCCGGCGCCTTCAACAACCTCTTCAACCTCCGGACGCTGGGTCTCCGCAGCAACCGCCTGAAGCTCATCCCGCTAGGCGTCTTCACTGGCCTCAGCAACCTGACCAAGCTGGACATCAGCGAGAACAAGATTGTTATCCTGCTGGACTACATGTTTCAGGACCTGTACAACCTCAAGTCACTGGAGGTTGGCGACAATGACCTCGTCTACATCTCTCACCGCGCCTTCAGCGGCCTCAACAGCCTGGAGCAGCTGACGCTGGAGAAATGCAACCTGACCTCCATCCCCACCGAGGCGCTGTCCCACCTGCACGGCCTCATCGTCCTGAGGCTCCGGCACCTCAACATCAATGCCATCCGGGACTACTCCTTCAAGAGGCTCTACCGACTCAAGGTCTTGGAGATCTCCCACTGGCCCTACTTGGACACCATGACACCCAACTGCCTCTACGGCCTCAACCTGACGTCCCTGTCCATCACACACTGCAATCTGACCGCTGTGCCCTACCTGGCCGTCCGCCACCTAGTCTATCTCCGCTTCCTCAACCTCTCCTACAACCCCATCAGCACCATTGAGGGCTCCATGTTGCATGAGCTGCTCCGGCTGCAGGAGATCCAGCTGGTGGGCGGGCAGCTGGCCGTGGTGGAGCCCTATGCCTTCCGCGGCCTCAACTACCTGCGCGTGCTCAATGTCTCTGGCAACCAGCTGACCACACTGGAGGAATCAGTCTTCCACTCGGTGGGCAACCTGGAGACACTCATCCTGGACTCCAACCCGCTGGCCTGCGACTGTCGGCTCCTGTGGGTGTTCCGGCGCCGCTGGCGGCTCAACTTCAACCGGCAGCAGCCCACGTGCGCCACGCCCGAGTTTGTCCAGGGCAAGGAGTTCAAGGACTTCCCTGATGTGCTACTGCCCAACTACTTCACCTGCCGCCGCGCCCGCATCCGGGACCGCAAGGCCCAGCAGGTGTTTGTGGACGAGGGCCACACGGTGCAGTTTGTGTGCCGGGCCGATGGCGACCCGCCGCCCGCCATCCTCTGGCTCTCACCCCGAAAGCACCTGGTCTCAGCCAAGAGCAATGGGCGGCTCACAGTCTTCCCTGATGGCACGCTGGAGGTGCGCTACGCCCAGGTACAGGACAACGGCACGTACCTGTGCATCGCGGCCAACGCGGGCGGCAACGACTCCATGCCCGCCCACCTGCATGTGCGCAGCTACTCGCCCGACTGGCCCCATCAGCCCAACAAGACCTTCGCTTTCATCTCCAACCAGCCGGGCGAGGGAGAGGCCAACAGCACCCGCGCCACTGTGCCTTTCCCCTTCGACATCAAGACCCTCATCATCGCCACCACCATGGGCTTCATCTCTTTCCTGGGCGTCGTCCTCTTCTGCCTGGTGCTGCTGTTTCTCTGGAGCCGGGGCAAGGGCAACACAAAGCACAACATCGAGATCGAGTATGTGCCCCGAAAGTCGGACGCAGGCATCAGCTCCGCCGACGCGCCCCGCAAGTTCAACATGAAGATGATATGA.(SEQ ID NO:52)
[0204] 全长LINGO-1多肽的多肽序列如下：
[0205] MLAGGVRSMPSPLLACWQPILLLVLGSVLSGSATGCPPRCECSAQDRAVL CHRKRFVAVPEGIPTETRLLDLGKNRIKTLNQDEFASFPHLEELELNENIVSAVEPGAFNNLFNLRTLGLRSNRLKLIPLGVFTGLSNLTKLDISENKIVILLDYMFQDLYNLKSLEVGDNDLVYISHRAFSGLNSLEQLTLEKCNLTSIPTEALSHLHGLIVLRLRHLNINAIRDYSFKRLYRLKVLEISHWPYLDTMTPNCLYGLNLTSLSITHCNLTAVPYLAVRHLVYLRFLNLSYNPISTIEGSMLHELLRLQEIQLVGGQLAVVEPYAFRGLNYLRVLNVSGNQLTTLEESVFHSVGNLETLILDSNPLACDCRLLWVFRRRWRLNFNRQQPTCATPEFVQGKEFKDFPDVLLPNYFTCRRARIRDRKAQQVFVDEGHTVQFVCRADGDPPPAILWLSPRKHLVSAKSNGRLTVFPDGTLEVRYAQVQDNGTYLCIAANAGGNDSMPAHLHVRSYSPDWPHQPNKTFAFISNQPGEGEANSTRATVPFPFDIKTLIIATTMGFISFLGVVLFCLVLLFLWSRGKGNTKHNIEIEYVPRKSDAGISSADAPRKFNMKMI.(SEQ ID NO:51)
[0206] 抗LINGO-1抗体分子
[0207] 在某些实施方案中，所述抗体分子结合LINGO，例如人的LINGO。在另一个实施方案中，所述抗体分子结合LINGO-1，例如人的LINGO-1。在一个实施方案中，所述抗体分子被分离，纯化或重组。“分离的”多肽或其片段、变体或衍生物，意指多肽不在其自然环境中。不要求纯化的具体水平。例如，分离的多肽可以从其天然或自然环境中除去。在宿主细胞中表达的重组产生的多肽和蛋白就本发明的目的而言是分离的，通过任何合适的技术分离，分级，或部分或基本纯化的天然或重组多肽。
[0208] 本文中所使用的术语“抗体分子”指代包含至少一个免疫球蛋白可变域序列的蛋白。术语抗体分子包括，例如，全长的抗体、成熟的抗体、片段，例如抗体的抗原结合片段，本文所公开抗体的衍生物、类似物或变体，及其任意组合。
[0209] 术语“片段”，“变体”，“衍生物”和“类似物”当指代LINGO-1抗体分子时或抗体多肽时，包括所有保留了对应天然抗体或多肽至少一些抗体结合特性的任意多肽。多肽片段除了本文其它地方讨论的特定抗体片段外，包括蛋白水解片段，以及缺失片段。LINGO-1抗体和抗体多肽的变体包括上述的片段，以及由于氨基酸替代、删除或插入而改变了氨基酸序列的多肽。变体可以是自然或非自然发生的。非自然发生的变体可以通过本领域已知的诱变技术来产生。多肽变体可以包含保守或非保守的氨基酸替代，缺失或增加。LINGO-1抗体分子和抗体多肽的衍生物是被改变以表现出天然多肽不具有的附加特性的多肽。例子包括融合蛋白。
[0210] 本文中所使用的LINGO-1抗体分子或抗体多肽的“衍生物”指代对象多肽，其具有通过官能侧基反应化学衍生化而来的一个或多个残基。“衍生物”也包括含有一个或多个天然存在的20个标准氨基酸的氨基酸衍生物的那些肽。例如，4-羟基脯氨酸可以替代赖氨酸；5-羟基赖氨酸可以替代赖氨酸；3-甲基组氨酸可以替代组氨酸；高丝氨酸可以替代丝氨酸；
以及鸟氨酸可以替代赖氨酸。
以及鸟氨酸可以替代赖氨酸。
[0211] 例如，抗体分子可以包括重(H)链可变域序列(本文缩写为VH)，和轻链(L)可变域序列(本文缩写为VL)。在另一个例子中，抗体分子包括两个重(H)链可变域序列和两个轻(L)链可变域序列，从而形成两个抗原结合位点，例如Fab、Fab’、F(ab’)2、Fc、Fd、Fd’、Fv、单链抗体(例如ScFv)、单可变域抗体、双抗体(Dab)(二价或双特异性)以及嵌合(例如人源化)抗体，其可以通过对完整抗体的修饰，或使用重组DNA技术从头合成产生。这些功能性抗体片段保留了选择性结合其对应抗原或受体的能力。抗体和抗体片段可以来自任意类的抗体包括但不限于IgG、IgA、IgM、IgD和IgE，以及来自任意抗体亚类(例如IgG1、IgG2、IgG3和IgG4)。所述抗体分子可以是单克隆或多克隆的。所述抗体可以是人的、人源化的、CDR嫁接的或体外生成的抗体。所述抗体可以具有选自例如IgG1、IgG2、IgG3或IgG4的重链恒定区。所述抗体可以具有选自例如kappa或lambda的轻链。
[0212] 抗原结合片段的例子包括：(i)Fab片段，组成为VL、VH、CL、CH1结构域的单价片段；(ii)F(ab’)2片段，包含通过铰链区二硫键相连的两个Fab片段的二价片段；(iii)组成为VH和CH1结构域的Fd片段；(iv)组成为抗体单臂的VL和VH结构域的Fv片段，(v)组成为VH结构域的双抗体(dAb)片段；(vi)骆驼源的或骆驼源化的可变区；(vii)单链Fv(ScFv)，见例如(Bird等，(1988)Science 242:423-426；和Huston等，(1988)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 85:
5879-5883)；(viii)单域抗体。这些抗体片段通过本领域技术人员已知的常规技术获得，且所述片段通过与完整抗体相同的方式筛选使用。
5879-5883)；(viii)单域抗体。这些抗体片段通过本领域技术人员已知的常规技术获得，且所述片段通过与完整抗体相同的方式筛选使用。
[0213] 抗体分子也可以是单域抗体。单域抗体可以包括互补决定区为单域多肽一部分的抗体。例子包括但不限于，重链抗体，天然无轻链的抗体，来源于常规4-链抗体的单域抗体，工程化抗体，以及除抗体来源的那些以外的单域支架。单域抗体可以是本领域的任何单域抗体，或未来的任何单域抗体。单域抗体可以来源于任何物种，包括但不限于小鼠、人、骆驼、美洲驼(llama)、鱼、鲨鱼、羊、兔和牛。在本发明的一个方面，单域抗体可以来源于在鱼中发现的免疫球蛋白的可变区，例如来源于在鲨鱼血清中发现的称为NovelAntigen Receptor(NAR)的免疫球蛋白同种型。生产来源于NAR(“IgNAR”)可变区的单域抗体的方法在WO 03/014161和Streltsov(2005)Protein Sci.14:2901-2909中有所描述。根据本发明的另一个方面，单域抗体是天然存在的单域抗体，称为无轻链的重链抗体。例如，WO 9404678公开了这种单域抗体。为清楚起见，这种来源于天然无轻链的重链抗体的可变区在本文中称为VHH或纳米抗体，将其与四条链免疫球蛋白的常规VH区分开。这种VHH分子可以来源于骆驼(Camelidae)种中产生的抗体，例如骆驼(camel)、美洲驼(llama)、单峰驼(dromedary)、羊驼(alpaca)和原驼(guanaco)。骆驼(Camelidae)以外的其它物种也可以产生天然无轻链的重链抗体；这些VHH也在本发明的范围之内。
[0214] VH和VL区可以再分为高变区，称为“互补决定区”(CDR)，其散布于更为保守的区域，称为“框架区”(FR)。框架区和CDR的范围已经通过一些方法精确定义(见Kabat,E.A.等，(1991)Sequences of Proteins of Immunological Interest,Fifth Edition,U.S.Department of Health and Human Services,NIH Publication No.91-3242；
Chothia,C.等，(1987)J.Mol.Biol.196:901-917；以及Oxford Molecular's AbM抗体建模软件使用的AbM定义。见，例如Protein Sequence and Structure Analysis of Antibody Variable Domains.于:Antibody Engineering Lab Manual(Ed.:Duebel,S.and
Kontermann,R.,Springer-Verlag,Heidelberg)。通常来说，除非特殊说明，使用以下定义：
重链可变域的CDR1使用AbM定义，其它CDR使用Kabat定义。另外，本发明关于Kabat或AbM CDR所述的实施方案也可以使用Chothia高变环来实施。每个VH和VL典型的包括三个CDR和四个FR，从氨基端到羧基端通过以下顺序排列：FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4。
Chothia,C.等，(1987)J.Mol.Biol.196:901-917；以及Oxford Molecular's AbM抗体建模软件使用的AbM定义。见，例如Protein Sequence and Structure Analysis of Antibody Variable Domains.于:Antibody Engineering Lab Manual(Ed.:Duebel,S.and
Kontermann,R.,Springer-Verlag,Heidelberg)。通常来说，除非特殊说明，使用以下定义：
重链可变域的CDR1使用AbM定义，其它CDR使用Kabat定义。另外，本发明关于Kabat或AbM CDR所述的实施方案也可以使用Chothia高变环来实施。每个VH和VL典型的包括三个CDR和四个FR，从氨基端到羧基端通过以下顺序排列：FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4。
[0215] 本文使用的“免疫球蛋白可变域序列”指代可以形成免疫球蛋白可变域结构的氨基酸序列。例如，所述序列可以包括天然存在的可变域氨基酸序列的全部或部分。例如，所述序列可以包括或不包括一个，两个或更多N-或C-端氨基酸，或可以包括与蛋白质结构的形成相容的其它改变。
[0216] 术语“抗原结合位点”指代抗体分子的部分，其包含形成与LINGO-1或其表位结合的界面的决定簇。关于蛋白(或蛋白模拟物)，所述抗原结合位点通常包括一个或多个环(由至少四个氨基酸或氨基酸模拟物组成)，其形成与LINGO-1结合的界面。典型的，所述抗体分子的抗原结合位点包含至少一个或两个CDR，或更典型的，至少三个、四个、五个或六个CDR。
[0217] 本文使用的术语“单克隆抗体”或“单克隆抗体组合物”指代由单分子组成的抗体分子制剂。单克隆抗体组合物表现出对特定表位的单一结合特异性和亲和力。单克隆抗体可以通过杂交瘤技术或不使用杂交瘤技术的方法(例如重组方法)制成。
[0218] “有效的人”蛋白指不引起中和抗体应答的蛋白，例如人抗鼠抗体(HAMA)应答。HAMA在许多情况下是有问题的，例如如果抗体分子重复施用，例如治疗长期的或复发的疾病状况。HAMA应答可以使得抗体的重复施用潜在无效，因为其增加抗体从血清中的清除(见例如Saleh等，Cancer Immunol.Immunother.,32:180-190(1990))以及潜在的过敏反应(见例如LoBuglio等，Hybridoma,5:5117-5123(1986))。
[0219] 在某些实施方案中，所述抗体分子可以是单克隆或单特异性抗体，或其抗原结合片段(例如Fab、F(ab')2、Fv、单链Fv片段、单域抗体、双抗体(dAb)、二价抗体或双特异性抗体或其片段、单域变体)，其结合LINGO-1，例如哺乳动物的(例如人LINGO-1(或其功能性变体))。在一个实施方案中，所述抗体是针对LINGO-1的单克隆抗体，例如人LINGO-1。典型的，所述抗体分子是针对人LINGO-1的人的、人源化的、CDR嫁接的、嵌合的、骆驼源的或体外产生的抗体(或其功能性片段，例如本文所述的抗体片段)。典型的，所述抗体分子抑制、减少或中和LINGO-1的一种或多种活性(例如本文所述的LINGO-1的一种或多种生物学活性)。
[0220] 在某些实施方案中，所述抗体分子特异性与描述于美国专利No.8,058,406和美国专利No.8,128,926中的参考单克隆抗体Li62或Li81结合相同或基本相同的LINGO-1的表位，其通过提述完整并入本文。示例性抗LINGO-1抗体分子描述于美国专利No.8,058,406。在一个实施方案中，抗体分子至少包括Li62、Li81的抗原结合域。本文所使用的术语“抗原结合域”包括与抗原上的表位(例如LINGO-1的表位)特异性结合的位点。抗体的抗原结合区通常包括免疫球蛋白重链可变区的至少部分以及免疫球蛋白轻链可变区的至少部分。这些可变区所形成的结合位点决定了抗体的特异性。
[0221] 在其它实施方案中，所述抗LINGO-1抗体分子竞争性抑制Li62或Li81结合LINGO-1。
[0222] 在某些实施方案中，所述抗LINGO-1抗体分子特异性或优先结合特定LINGO-1多肽片段或结构域。这些LINGO-1多肽片段包括但不限于包含、基本组成为或组成为SEQ ID NO:51的氨基酸34到532；34到417；34到425；34到493；66到532；66到417；66到426；66到493；66到532；417到532；417到425(LINGO-1碱性区)；417到493；417到532；419到493(LINGO-11g区)；或425到532的LINGO-1多肽；或与SEQ ID NO:51的氨基酸34到532；34到417；34到425；
34到493；66到532；66到417；66到426；66到493；66到532；417到532；417到425(LINGO-1碱性区)；417到493；417到532；419到493(LINGO-11g区)；或425到532至少70％、75％、80％、
85％、90％或95％相同的LINGO-1变体多肽。
34到493；66到532；66到417；66到426；66到493；66到532；417到532；417到425(LINGO-1碱性区)；417到493；417到532；419到493(LINGO-11g区)；或425到532至少70％、75％、80％、
85％、90％或95％相同的LINGO-1变体多肽。
[0223] 在某些实施方案中，所述抗LINGO-1抗体分子特异性或优先结合LINGO-1多肽片段，其包含，基本组成为，或组成为LINGO-1的一个或多个富含亮氨酸的重复(LRR)。这些片段包括，例如包含，基本组成为或组成为SEQ ID NO:51的氨基酸66到89；66到113；66到137；90到113；114到137；138到161；162到185；186到209；210到233；234到257；258到281；282到
305；306到329；或330到353的片段。也涵盖变体LINGO-1多肽的对应片段，其与SEQ ID NO:
51的氨基酸66到89；66到113；66到137；90到113；114到137；138到161；162到185；186到209；
210到233；234到257；258到281；282到305；306到329；或330到353至少70％、75％、80％、
85％、90％或95％相同。
305；306到329；或330到353的片段。也涵盖变体LINGO-1多肽的对应片段，其与SEQ ID NO:
51的氨基酸66到89；66到113；66到137；90到113；114到137；138到161；162到185；186到209；
210到233；234到257；258到281；282到305；306到329；或330到353至少70％、75％、80％、
85％、90％或95％相同。
[0224] 在某些实施方案中，所述抗LINGO-1抗体分子特异性或优先结合片段，其包含，基本组成为或组成为一个或多个与LINGO-1的LRR侧接的富含半胱氨酸的区域。这些片段包括，例如包含，基本组成为或组成为SEQ ID NO:51的氨基酸34到64(N端LRR侧接区(LRRNT))的片段；或包含，基本组成为或组成为SEQ ID NO:51的氨基酸363到416(C端LRR侧接区(LRRCT))的片段；也涵盖变体LINGO-1多肽的对应片段，其与SEQ ID NO:51氨基酸34到64或氨基酸363到416至少70％、75％、80％、85％、90％或95％相同。
[0225] 在某些实施方案中，所述抗LINGO-1抗体分子特异性或优先结合包含，基本组成为或组成为SEQ ID NO:51的氨基酸41到525；SEQ ID NO:51的40到526；SEQ ID NO:51的39到527；SEQ ID NO:51的38到528；SEQ ID NO:51的37到529；SEQ ID NO:51的36到530；SEQ ID NO:51的35到531；SEQ ID NO:51的34到531；SEQ ID NO:51的46到520；SEQ ID NO:51的45到
521；SEQ ID NO:51的44到522；SEQ ID NO:51的43到523；以及SEQ ID NO:51的42到524的片段。
521；SEQ ID NO:51的44到522；SEQ ID NO:51的43到523；以及SEQ ID NO:51的42到524的片段。
[0226] 在某些实施方案中，所述抗LINGO-1抗体分子特异性或优先结合包含，基本组成为或组成为SEQ ID NO:51的氨基酸1到33；SEQ ID NO:51的1到35；SEQ ID NO:51的34到64；SEQ ID NO:51的36到64；SEQ ID NO:51的66到89；SEQ ID NO:51的90到113；SEQ ID NO:51的114到137；SEQ ID NO:51的138到161；SEQ ID NO:51的162到185；SEQ ID NO:51的186到
209；SEQ ID NO:51的210到233；SEQ ID NO:51的234到257；SEQ ID NO:51的258到281；SEQ ID NO:51的282到305；SEQ ID NO:51的306到329；SEQ ID NO:51的330到353；SEQ ID NO:51的363到416；SEQ ID NO:51的417到424；SEQ ID NO:51的419到493；和SEQ ID NO:51的494到551的片段。
209；SEQ ID NO:51的210到233；SEQ ID NO:51的234到257；SEQ ID NO:51的258到281；SEQ ID NO:51的282到305；SEQ ID NO:51的306到329；SEQ ID NO:51的330到353；SEQ ID NO:51的363到416；SEQ ID NO:51的417到424；SEQ ID NO:51的419到493；和SEQ ID NO:51的494到551的片段。
[0227] 在某些实施方案中，所述抗LINGO-1抗体分子特异性或优先结合包含，基本组成为或组成为SEQ ID NO:51的氨基酸1到33；SEQ ID NO:51的1到35；SEQ ID NO:51的1到64；SEQ ID NO:51的1到89；SEQ ID NO:51的1到113；SEQ ID NO:51的1到137；SEQ ID NO:51的1到161；SEQ ID NO:51的1到185；SEQ ID NO:51的1到209；SEQ ID NO:51的1到233；SEQ ID NO:
51的1到257；SEQ ID NO:51的1到281；SEQ ID NO:51的1到305；SEQ ID NO:51的1到329；SEQ ID NO:51的1到353；SEQ ID NO:51的1到416；SEQ ID NO:51的1到424；SEQ ID NO:51的1到
493；SEQ ID NO:51的1到551；SEQ ID NO:51的1到531或SEQ ID NO:51的1到532的片段。
51的1到257；SEQ ID NO:51的1到281；SEQ ID NO:51的1到305；SEQ ID NO:51的1到329；SEQ ID NO:51的1到353；SEQ ID NO:51的1到416；SEQ ID NO:51的1到424；SEQ ID NO:51的1到
493；SEQ ID NO:51的1到551；SEQ ID NO:51的1到531或SEQ ID NO:51的1到532的片段。
[0228] 在某些实施方案中，所述抗LINGO-1抗体分子特异性或优先结合包含，基本组成为或组成为SEQ ID NO:51的氨基酸34到64；SEQ ID NO:51的34到89；SEQ ID NO:51的34到113；SEQ ID NO:51的34到137；SEQ ID NO:51的34到161SEQ ID NO:51的34到185；SEQ ID NO:51的34到209；SEQ ID NO:51的34到233；SEQ ID NO:51的34到257；SEQ ID NO:51的34到
281；SEQ ID NO:51的34到305；SEQ ID NO:51的34到329；SEQ ID NO:51的34到353；SEQ ID NO:51的34到416；SEQ ID NO:51的34到424；SEQ ID NO:51的34到493；以及SEQ ID NO:51的
34到551的片段。
281；SEQ ID NO:51的34到305；SEQ ID NO:51的34到329；SEQ ID NO:51的34到353；SEQ ID NO:51的34到416；SEQ ID NO:51的34到424；SEQ ID NO:51的34到493；以及SEQ ID NO:51的
34到551的片段。
[0229] 在某些实施方案中，所述抗LINGO-1抗体分子特异性或优先结合包含，基本组成为或组成为SEQ ID NO:51的氨基酸34到530；SEQ ID NO:51的34到531；SEQ ID NO:51的34到532；SEQ ID NO:51的34到533；SEQ ID NO:51的34到534；SEQ ID NO:51的34到535；SEQ ID NO:51的34到536；SEQ ID NO:51的34到537；SEQ ID NO:51的34到538；SEQ ID NO:51的34到
539；SEQ ID NO:51的30到532；SEQ ID NO:51的31到532；SEQ ID NO:51的32到532；SEQ ID NO:51的33到532；SEQ ID NO:51的34到532；SEQ ID NO:51的35到532；SEQ ID NO:51的36到
532；SEQ ID NO:51的30到531；SEQ ID NO:51的31到531；SEQ ID NO:51的32到531；SEQ ID NO:51的33到531；SEQ ID NO:51的34到531；SEQ ID NO:51的35到531；以及SEQ ID NO:51的
36到531的片段。
539；SEQ ID NO:51的30到532；SEQ ID NO:51的31到532；SEQ ID NO:51的32到532；SEQ ID NO:51的33到532；SEQ ID NO:51的34到532；SEQ ID NO:51的35到532；SEQ ID NO:51的36到
532；SEQ ID NO:51的30到531；SEQ ID NO:51的31到531；SEQ ID NO:51的32到531；SEQ ID NO:51的33到531；SEQ ID NO:51的34到531；SEQ ID NO:51的35到531；以及SEQ ID NO:51的
36到531的片段。
[0230] 在某些实施方案中，所述抗LINGO-1抗体分子特异性或优先结合包含，基本组成为或组成为SEQ ID NO:51的氨基酸36到64；SEQ ID NO:51的36到89；SEQ ID NO:51的36到113；SEQ ID NO:51的36到137；SEQ ID NO:51的36到161；SEQ ID NO:51的36到185；SEQ ID NO:51的36到209；SEQ ID NO:51的36到233；SEQ ID NO:51的36到257；SEQ ID NO:51的36到
281；SEQ ID NO:51的36到305；SEQ ID NO:51的36到329；SEQ ID NO:51的36到353；SEQ ID NO:51的36到416；SEQ ID NO:51的36到424；SEQ ID NO:51的36到493；以及SEQ ID NO:51的
36到551的片段。
281；SEQ ID NO:51的36到305；SEQ ID NO:51的36到329；SEQ ID NO:51的36到353；SEQ ID NO:51的36到416；SEQ ID NO:51的36到424；SEQ ID NO:51的36到493；以及SEQ ID NO:51的
36到551的片段。
[0231] 在某些实施方案中，所述抗LINGO-1抗体分子特异性或优先结合包含，基本组成为或组成为SEQ ID NO:51的氨基酸36到530；SEQ ID NO:51的36到531；SEQ ID NO:51的36到532；SEQ ID NO:51的36到533；SEQ ID NO:51的36到534；SEQ ID NO:51的36到535；SEQ ID NO:51的36到536；SEQ ID NO:51的36到537；SEQ ID NO:51的36到538；以及SEQ ID NO:51的
36到539的片段。
36到539的片段。
[0232] 在某些实施方案中，所述抗LINGO-1抗体分子特异性或优先结合包含，基本组成为或组成为SEQ ID NO:51的氨基酸417到493；SEQ ID NO:51的417到494；SEQ ID NO:51的417到495；SEQ ID NO:51的417到496；SEQ ID NO:51的417到497；SEQ ID NO:51的417到498；SEQ ID NO:51的417到499；SEQ ID NO:51的417到500；SEQ ID NO:51的417到492；SEQ ID NO:51的417到491；SEQ ID NO:51的412到493；SEQ ID NO:51的413到493；SEQ ID NO:51的
414到493；SEQ ID NO:51的415到493；SEQ ID NO:51的416到493；SEQ ID NO:51的411到
493；SEQ ID NO:51的410到493；SEQ ID NO:51的410到494；SEQ ID NO:51的411到494；SEQ ID NO:51的412到494；SEQ ID NO:51的413到494；SEQ ID NO:51的414到494；SEQ ID NO:51的415到494；SEQ ID NO:51的416到494；SEQ ID NO:51的417到494；以及SEQ ID NO:51的
418到494的片段。
414到493；SEQ ID NO:51的415到493；SEQ ID NO:51的416到493；SEQ ID NO:51的411到
493；SEQ ID NO:51的410到493；SEQ ID NO:51的410到494；SEQ ID NO:51的411到494；SEQ ID NO:51的412到494；SEQ ID NO:51的413到494；SEQ ID NO:51的414到494；SEQ ID NO:51的415到494；SEQ ID NO:51的416到494；SEQ ID NO:51的417到494；以及SEQ ID NO:51的
418到494的片段。
[0233] 在某些实施方案中，所述抗LINGO-1抗体分子特异性或优先结合LINGO-1多肽，其包含，基本组成为或组成为LINGO-1Ig结构域的肽，或这些多肽的片段、变体或衍生物。具体的，多肽包含，基本组成为或组成为以下多肽序列：ITX1X2X3(SEQ ID NO:88)、ACX1X2X3(SEQ ID NO:89)、VCX1X2X3(SEQ ID NO:90)和SPX1X2X3(SEQ ID NO:91)，其中X1是赖氨酸、精氨酸、组氨酸、谷氨酰胺或天冬酰胺，X2是赖氨酸、精氨酸、组氨酸、谷氨酰胺或天冬酰胺，X3是赖氨酸、精氨酸、组氨酸、谷氨酰胺或天冬酰胺。例如，某些抗体分子可以结合的LINGO-1肽片段，包括包含，基本组成为或组成为以下多肽序列的那些片段：SPRKH(SEQ ID NO:92)、SPRKK(SEQ ID NO:93)、SPRKR(SEQ ID NO:94)、SPKKH(SEQ ID NO:95)、SPHKH(SEQ ID NO:96)、SPRRH(SEQ ID NO:97)、SPRHH(SEQ ID NO:98)、SPRRR(SEQ ID NO:99)、SPHHH(SEQ ID NO:100)、SPKKK(SEQ ID NO:101)、LSPRKH(SEQ ID NO:102)、LSPRKK(SEQ ID NO:103)、LSPRKR(SEQ ID NO:104)、LSPKKH(SEQ ID NO:105)、LSPHKH(SEQ ID NO:106)、LSPRRH(SEQ ID NO:
107)、LSPRHH(SEQ ID NO:108)、LSPRRR(SEQ ID NO:109)、LSPHHH(SEQ ID NO:110)、LSPKKK(SEQ ID NO:111)、WLSPRKH(SEQ ID NO:112)、WLSPRKK(SEQ ID NO:113)、WLSPRKR(SEQ ID NO:114)、WLSPKKH(SEQ ID NO:115)、WLSPHKH(SEQ ID NO:116)、WLSPRRH(SEQ ID NO:117)、WLSPRHH(SEQ ID NO:118)、WLSPRRR(SEQ ID NO:119)、WLSPHHH(SEQ ID NO:120)、WLSPKKK(SEQ ID NO:121)。这些LINGO-1多肽包括LINGO-1Ig结构域中的碱性“RKH环”(Arginine-Lysine-Histidine，氨基酸456-458)。包括碱性三肽的另外的LINGO-1肽为ITPKRR(SEQ ID NO:122)、ACHHK(SEQ ID NO:123)和VCHHK(SEQ ID NO:124)。
107)、LSPRHH(SEQ ID NO:108)、LSPRRR(SEQ ID NO:109)、LSPHHH(SEQ ID NO:110)、LSPKKK(SEQ ID NO:111)、WLSPRKH(SEQ ID NO:112)、WLSPRKK(SEQ ID NO:113)、WLSPRKR(SEQ ID NO:114)、WLSPKKH(SEQ ID NO:115)、WLSPHKH(SEQ ID NO:116)、WLSPRRH(SEQ ID NO:117)、WLSPRHH(SEQ ID NO:118)、WLSPRRR(SEQ ID NO:119)、WLSPHHH(SEQ ID NO:120)、WLSPKKK(SEQ ID NO:121)。这些LINGO-1多肽包括LINGO-1Ig结构域中的碱性“RKH环”(Arginine-Lysine-Histidine，氨基酸456-458)。包括碱性三肽的另外的LINGO-1肽为ITPKRR(SEQ ID NO:122)、ACHHK(SEQ ID NO:123)和VCHHK(SEQ ID NO:124)。
[0234] 在某些实施方案中，所述抗LINGO-1抗体分子特异性或优先结合LINGO-1多肽，其包含，基本组成为或组成为LINGO-1Ig结构域的肽，或这些多肽的片段、变体或衍生物。具体的，多肽包含，基本组成为或组成为以下多肽序列：X4X5RKH(SEQ ID NO:125)、X4X5RRR(SEQ ID NO:126)、X4X5KKK(SEQ ID NO:127)、X4X5HHH(SEQ ID NO:128)、X4X5RKK(SEQ ID NO:129)、X4X5RKR(SEQ ID NO:130)、X4X5KKH(SEQ ID NO:131)、X4X5HKH(SEQ ID NO:132)、X4X5RRH(SEQ ID NO:133)和X4X5RHH(SEQ ID NO:134)，其中X4是任意氨基酸，X5是任意氨基酸。
[0235] 在某些实施方案中，所述抗LINGO-1抗体分子特异性或优先结合LINGO-1多肽，其包含，基本组成为或组成为LINGO-1Ig结构域的肽，或这些多肽的片段、变体或衍生物。具体的，多肽包含，基本组成为或组成为以下多肽序列：ITX6X7X8(SEQ ID NO:135)、ACX6X7X8(SEQ ID NO:136)、VCX6X7X8(SEQ ID NO:137)和SPX6X7X8(SEQ ID NO:138)，其中X6是赖氨酸、精氨酸、组氨酸、谷氨酰胺或天冬酰胺，X7是任意氨基酸，X8是赖氨酸、精氨酸、组氨酸、谷氨酰胺或天冬酰胺。例如，多肽包含，基本组成为或组成为以下多肽序列：SPRLH(SEQ ID NO:139)。
[0236] 在某些实施方案中，所述抗LINGO-1抗体分子特异性或优先结合LINGO-1多肽，其包含，基本组成为或组成为含有LINGO-1Ig结构域氨基酸452-458的肽或其衍生物，其中氨基酸452是色氨酸或苯基丙氨酸残基。
[0237] 在某些实施方案中，所述抗LINGO-1抗体分子特异性或优先结合LINGO-1多肽，其包含，基本组成为或组成为含有LINGO-1碱性域的多肽。具体的，多肽包含，基本组成为或组成为以下多肽序列：RRARIRDRK(SEQ ID NO:140)、KKVKVKEKR(SEQ ID NO:141)、RRLRLRDRK(SEQ ID NO:142)、RRGRGRDRK(SEQ ID NO:143)和RRIRARDRK(SEQ ID NO:144)。
[0238] 用于生产本发明的抗体或抗体片段的其它示例性可溶LINGO-1多肽，以及获得这些分子的方法和材料可以在例如国际专利申请No.PCT/US2004/008323中找到，通过提述完整并入本文。
[0239] 制造抗体的方法是本领域已知的，并在本文中有描述。当针对LINGO-1不同片段，或不带信号肽的全长LINGO-1的抗体产生后，确定该抗体或抗原结合片段结合到LINGO-1的哪些氨基酸或表位，可以通过本文所述的表位定位方案以及本领域所知的方法确定(例如在"Chapter 11--Immunology,"Current Protocols in Molecular Biology,Ed.Ausubel等v.2,John Wiley & Sons,Inc.(1996)中所述的双抗体夹心ELISA)。另外的表位定位方案可以在Morris,G.Epitope Mapping Protocols,New Jersey:Humana Press(1996)中找到，通过提述两者完整并入本文。表位定位也可以通过商品化的手段/工具进行(例如ProtoPROBE,Inc.(Milwaukee,Wis.))。
[0240] 另外，可以筛选产生的结合LINGO-1任何部分的抗体作为LINGO-1拮抗剂从而促进神经突生长，神经细胞和少突胶质细胞的存活、增殖和分化，以及促进髓鞘化的能力。可以对抗体筛选少突胶质细胞/神经细胞存活，例如使用本文所述的方法，例如实施例11或12或在2008年1月9日提交的PCT/US2008/000316，和2006年7月7日提交的PCT/US2006/026271所述，其通过提述完整并入本文。另外，可以筛选抗体的例如促进髓鞘化的能力，其通过使用本文所述的方法例如实施例2、6、9、10、11或13或PCT/US2008/000316和/或PCT/US2006/026271所述。最后，可以筛选抗体促进少突胶质细胞增殖和分化，以及神经突生长的能力，例如通过使用本文所述的方法例如实施例4或5或PCT/US2008/000316和/或PCT/US2006/
026271所述。本发明的抗体的其它拮抗剂功能可以通过描述于US 8058406实施例的其它分析方法测试，其通过提述并入本文。
026271所述。本发明的抗体的其它拮抗剂功能可以通过描述于US 8058406实施例的其它分析方法测试，其通过提述并入本文。
[0241] 在某些实施方案中，所述抗LINGO-1抗体分子特异性或优先结合LINGO-1的至少一个表位，其中表位包含，基本组成为或组成为SEQ ID NO:5的至少约四到五个氨基酸，SEQ ID NO:5的至少七个、至少九个、或至少约15到约30个氨基酸。所述SEQ ID NO:51的给定表位的氨基酸可以是，但不必是邻接的或线性的。在某些实施方案中，所述LINGO-1的至少一个表位包含，基本组成为或组成为非线性表位，其由表达在细胞表面上的LINGO-1胞外域或以可溶片段，例如与IgG Fc区融合形成。因此，在某些实施方案中，LINGO-1的至少一个表位包含，基本组成为或组成为SEQ ID:51的至少4个、至少5个、至少6个、至少7个、至少8个、至少9个、至少10个，至少15个、至少20个、至少25个、约15个到约30个、或至少10个、15个、20个、25个、30个、35个、40个、45个、50个、55个、60个、65个、70个、75个、80个、85个、90个、95个或100个连续的或非连续的氨基酸，其中非连续氨基酸通过蛋白质折叠形成表位。
[0242] 在其它实施方案中，所述抗LINGO-1抗体分子特异性或优先结合LINGO-1的至少一个表位，其表位包含，基本组成为或组成为，除上述SEQID:51的一个、两个、三个、四个、五个、六个或更多的连续或非连续氨基酸外的另外部分，而且可以包含修饰蛋白质的另外模块，例如可以包括糖模块，从而使得所述LINGO-1抗体以比对未修饰版本的蛋白更高的亲和力结合经修饰的靶蛋白。或者，所述LINGO-1抗体与靶蛋白的未修饰版本完全不结合。
[0243] 在某些实施方案中，所述抗LINGO-1抗体分子特异性或优先结合LINGO-1多肽或其片段，或LINGO-1变体多肽，其亲和力由比所述参考单克隆抗体的KD小的解离常数(KD)表征。
[0244] 在某些实施方案中，所述抗LINGO-1抗体分子特异性或优先结合上述LINGO-1、或片段或变体的至少一个表位，即与这些表位的结合比其与不相关的、或随机的表位结合更容易；优先结合上述LINGO-1、或片段或变体的至少一个表位，即与这些表位的结合比其与相关的、相似的、同源的或类似的表位更容易；竞争性抑制参考抗体的结合，该参考抗体本身特异性或优先结合上述LINGO-1或片段或变体的某个/些表位；或结合上述LINGO-1或片段或变体的至少一个表位，其亲和力通过小于约5x 10-2M、约10-2M、约5x 10-3M、约10-3M、约5x 10-4M、约10-4M、约5x 10-5M、约10-5M、约5x 10-6M、约10-6M、约5x 10-7M、约10-7M、约5x 10-
8M、约10-8M、约5x 10-9M、约10-9M、约5x 10-10M、约10-101M、约5x 10-11M、约10-11M、约5x 10-12M、约10-12M、约5x 10-13M、约10-13M、约5x 10-14M、约10-14M、约5x 10-15M、约10-15M的解离常数(KD)表征。在一个具体的方面，所述抗体或其片段，相对于鼠LINGO-1多肽或其片段，优先结合人LINGO-1多肽或其片段。
8M、约10-8M、约5x 10-9M、约10-9M、约5x 10-10M、约10-101M、约5x 10-11M、约10-11M、约5x 10-12M、约10-12M、约5x 10-13M、约10-13M、约5x 10-14M、约10-14M、约5x 10-15M、约10-15M的解离常数(KD)表征。在一个具体的方面，所述抗体或其片段，相对于鼠LINGO-1多肽或其片段，优先结合人LINGO-1多肽或其片段。
[0245] 在其它实施方案中，所述抗LINGO-1抗体分子结合LINGO-1多肽或其片段或变体，其解离率(k(off))小于或等于5x 10-2sec-1、10-2sec-1、5x 10-3sec-1或10-3sec-1。或者，本发明的抗体或其抗原结合片段、变体或衍生物结合LINGO-1多肽或其片段或变体，解离率(k-4 1 -4 1 -5 1 -5 1 -6 1 -6 1(off))小于或等于5x 10 sec 、10 sec、5x 10 sec 、或10 sec、5x 10 sec、10 sec 、5x
10-7sec1或10-7sec1。
10-7sec1或10-7sec1。
[0246] 在其它实施方案中，所述抗LINGO-1抗体分子结合LINGO-1多肽或其片段或变体，其结合率(k(on))大于或等于103M-1sec-1、5x 103M-1sec-1、104M-1sec-1、5x 104M-1sec-1。或者，所述抗体分子结合LINGO-1多肽或其片段或变体，其结合率(k(on))大于或等于105M-1sec-1、5x 105M-1sec-1、106M-1sec-1、5x 106M-1sec-1、或107M-1sec-1、5x 107M-1sec-1。
[0247] 在其它的实施方案中，所述LINGO-1抗体分子是LINGO-1活性的拮抗剂。在某些实施方案中，例如，拮抗剂LINGO-1抗体结合表达在神经元上的LINGO-1，阻断对髓鞘相关神经突生长的抑制或神经细胞的死亡。在其它实施方案中，LINGO-1抗体对表达在少突胶质细胞上的LINGO-1的结合阻断对少突细胞生长或分化的抑制，或阻断CNS神经元的脱髓鞘或髓鞘功能障碍。
[0248] 修饰形式的LINGO-1抗体分子可以通过使用本领域已知技术，从完整的前体或亲本抗体制成。示例性的技术在本文中有更详细的讨论。
[0249] 在某些实施方案中，所述抗体分子可以通过重组产生，例如，通过噬菌体展示或通过组合方法产生。用于产生抗LINGO-1抗体的噬菌体展示和组合方法是本领域已知的(描述于例如Ladner等，美国专利号5,223,409；Kang等，国际公布号WO 92/18619；Dower等，国际公布号WO 91/17271；Winter等，国际公布WO 92/20791；Markland等，国际公布号WO 92/15679；Breitling等，国际公布WO 93/01288；McCafferty等，国际公布号WO 92/01047；
Garrard等，国际公布号WO 92/09690；Ladner等，国际公布号WO 90/02809；Fuchs等，(1991)Bio/Technology 9:1370-1372；Hay等，(1992)Hum Antibod Hybridomas 3:81-85；Huse等，(1989)Science 246:1275-1281；Griffths等，(1993)EMBO J 12:725-734；Hawkins等，(1992)J Mol Biol 226:889-896；Clackson等，(1991)Nature 352:624-628；Gram等，(1992)PNAS 89:3576-3580；Garrad等，(1991)Bio/Technology 9:1373-1377；Hoogenboom等，(1991)Nuc Acid Res19:4133-4137；以及Barbas等，(1991)PNAS 88:7978-7982，其内容均通过提述并入本文)。
Garrard等，国际公布号WO 92/09690；Ladner等，国际公布号WO 90/02809；Fuchs等，(1991)Bio/Technology 9:1370-1372；Hay等，(1992)Hum Antibod Hybridomas 3:81-85；Huse等，(1989)Science 246:1275-1281；Griffths等，(1993)EMBO J 12:725-734；Hawkins等，(1992)J Mol Biol 226:889-896；Clackson等，(1991)Nature 352:624-628；Gram等，(1992)PNAS 89:3576-3580；Garrad等，(1991)Bio/Technology 9:1373-1377；Hoogenboom等，(1991)Nuc Acid Res19:4133-4137；以及Barbas等，(1991)PNAS 88:7978-7982，其内容均通过提述并入本文)。
[0250] 在一个实施方案中，所述抗LINGO-1抗体是完全的人抗体(例如在小鼠中制成的抗体，通过基因工程以从人免疫球蛋白序列产生抗体)，或非人抗体，例如啮齿类(小鼠或大鼠)、山羊、灵长类(例如猴)、骆驼抗体。所述的非人抗体可以是啮齿类的(小鼠或大鼠抗体)。生产啮齿类抗体的方法是本领域已知的。
[0251] 人单克隆抗体可以使用带有人免疫球蛋白基因而不是小鼠体系的转基因小鼠产生。将来自这些转基因小鼠的脾细胞用感兴趣的抗原免疫以产生杂交瘤，其分泌对人蛋白的表位具有特异性亲和力的人mAb(见例如Wood等，国际申请WO 91/00906；Kucherlapati等，PCT公布WO 91/10741；Lonberg等，国际申请WO 92/03918；Kay等，国际申请92/03917；Lonberg,N.等，1994Nature 368:856-859；Green,L.L.等，1994Nature Genet.7:13-21；
Morrison,S.L.等，1994Proc.Natl.Acad.Sci.USA 81:6851-6855；Bruggeman等，1993Year Immunol 7:33-40；Tuaillon等，1993PNAS 90:3720-3724；Bruggeman等，1991Eur J Immunol 21:1323-1326)。
Morrison,S.L.等，1994Proc.Natl.Acad.Sci.USA 81:6851-6855；Bruggeman等，1993Year Immunol 7:33-40；Tuaillon等，1993PNAS 90:3720-3724；Bruggeman等，1991Eur J Immunol 21:1323-1326)。
[0252] 抗LINGO-1抗体可以是其中可变区或其部分，例如CDRs是在非人的生物体中产生的，例如大鼠或小鼠。嵌合的、CDR-嫁接的和人源化的抗体在本发明范围内。在非人的生物体例如大鼠或小鼠中产生抗体，接着在例如可变框架或恒定区修饰，来减少在人中的抗原性在本发明范围内。
[0253] 嵌合抗体可以通过本领域已知的重组DNA技术产生。例如，编码鼠(或其它物种)单克隆抗体Fc恒定区的基因使用限制酶消化，移除编码鼠Fc的区域，并将编码人Fc恒定区的基因的等同部分替代(见Robinson等，国际专利公布PCT/US86/02269；Akira等，欧洲专利申请184,187；Taniguchi,M.，欧洲专利申请171,496；Morrison等，欧洲专利申请173,494；Neuberger等，国际申请WO 86/01533；Cabilly等，美国专利号4,816,567；Cabilly等，欧洲专利申请125,023；Better等，(1988Science 240:1041-1043)；Liu等，(1987)PNAS84:3439-
3443；Liu等，1987,J.Immunol.139:3521-3526；Sun等，(1987)PNAS84:214-218；Nishimura等，1987,Canc.Res.47:999-1005；Wood等，(1985)Nature 314:446-449；以及Shaw等，1988,J.Natl Cancer Inst.80:1553-1559)。
3443；Liu等，1987,J.Immunol.139:3521-3526；Sun等，(1987)PNAS84:214-218；Nishimura等，1987,Canc.Res.47:999-1005；Wood等，(1985)Nature 314:446-449；以及Shaw等，1988,J.Natl Cancer Inst.80:1553-1559)。
[0254] 人源化或CDR-嫁接的抗体具有至少一个或两个，但通常为所有三个受体CDRs(免疫球蛋白重链或轻链的)被供体CDR取代的。所述抗体可以被非人CDR的至少一部分取代，或只有一些CDRs被非人CDRs取代。仅需要取代人源化抗体结合LINGO-1或其片段所需的CDR数。
[0255] 抗体可以通过本领域已知方法进行人源化。人源化抗体可以通过使用人Fv可变区等同序列取代不直接参与抗原结合的Fv可变区序列来产生。产生人源化抗体的一般方法由Morrison,S.L.,1985,Science 229:1202-1207,Oi等，1986,BioTechniques 4:214,以及Queen等，US 5,585,089,US 5,693,761和US5,693,762提供，其内容通过提述并入本文。人源化或CDR-嫁接抗体可以通过CDR-嫁接或CDR替代产生，其中免疫球蛋白链的一个、两个或全部CDRs可以被取代。见例如美国专利5,225,539；Jones等，1986Nature 321:552-525；Verhoeyan等，1988Science 239:1534；Beidler等，1988J.Immunol.141:4053-4060；Winter US 5,225,539，其内容通过提述明确并入本文。Winter描述了一种CDR-嫁接的方法，可以用于制备本发明中的人源化抗体(1987年3月26日提交的英国专利申请GB 2188638A；Winter US 5,225,539)，其内容通过提述明确并入本文。
[0256] 本发明的范围也包括特定氨基酸被替代、缺失或加入的人源化抗体。人源化抗体可以在框架区具有氨基酸替代，以改善其与抗原的结合。例如，人源化抗体将具有与供体框架残基相同或与受体框架残基不同的另外一个氨基酸相同的框架残基。为了产生这种抗体，人源化免疫球蛋白链被选择的，少数受体框架残基可以被对应的供体氨基酸取代。优选的替代位置包括CDR邻近的或能够与CDR相互作用的氨基酸残基(见例如US 5585089)。从供体中选择氨基酸的标准描述于US 5585089，例如US 5585089的12-16列，其内容通过提述并入本文。其它用于人源化抗体的技术描述于1992年12月23日发表的Padlan等，EP 519596A1。
[0257] 所述抗LINGO-1抗体可以是单链抗体。单链抗体(scFV)可以是工程化的(见例如Colcher,D.等，(1999)Ann N Y Acad Sci 880:263-80；和Reiter,Y.(1996)Clin Cancer Res 2:245-52)。所述的单链抗体可以通过二聚化或多聚化产生多价抗体，其具有对同一个靶蛋白LINGO-1不同表位的特异性。
[0258] 在其它实施方案中，所述抗体分子具有重链恒定区，其选自例如IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgM、IgA1、IgA2、IgD和IgE的重链恒定区；特别是选自例如IgG1、IgG2、IgG3、和IgG4的(例如人)重链恒定区。在另一个实施方案中，所述抗体分子具有轻链恒定区，其选自例如(例如人的)kappa或lambda的轻链恒定区。所述的恒定区可以被改变，例如突变，来修饰抗体的特性(例如增加或减少一项或多项：Fc受体的结合、抗体的糖基化、半胱氨酸残基的数量、效应细胞功能和/或补体功能)。在一个实施方案中所述抗体具有：效应功能；并能固定补体。在其它实施方案中所述抗体不募集效应细胞；或固定补体。在另一个实施方案中，所述抗体具有降低的或不具有结合Fc受体的能力。例如，同种型或亚型，片段或其它突变体，其不支持与Fc受体的结合，例如具有经诱变或缺失的Fc受体结合区。
[0259] LINGO-1抗体分子可以包含恒定区，其介导一种或多种效应功能。例如，补体C1组分和抗体恒定区的结合可以激活补体系统。补体系统的激活对于调理作用(opsonisation)和细胞病原体的溶解是重要的。补体的激活也刺激炎症反应，并可能参与自身免疫超敏性。进一步，抗体分子通过Fc区与多种细胞上的受体结合，通过抗体Fc区上的Fc受体结合位点结合到细胞上的Fc受体(FcR)。存在一些不同类抗体的特异性Fc受体，包括IgG(gamma受体)，IgE(epsilon受体)，IgA(alpha受体)和IgM(mu受体)。抗体与细胞表面的Fc受体的结合引起一些重要的和多种的生物学反应，包括对抗体包被颗粒的吞食和破坏，免疫复合物的清除，杀伤细胞对抗体包被靶细胞的溶解(本文也称为抗体依赖性细胞介导的细胞毒性，或ADCC)，炎症介质的释放，胎盘转移以及对免疫球蛋白产生的控制。
[0260] 在某些实施方案中，所述抗LINGO-1抗体分子其中一个或多个恒定区至少部分被删除或改变，以提供需要的生物化学特性例如与具有近似相同的免疫原性的完整未改变的抗体相比，降低的效应功能，非共价二聚化的能力，增加的定位到肿瘤位点的能力，减少的血清半衰期，或增加的血清半衰期。例如，本文所述用于诊断或治疗方法的某些抗体是结构域删除的抗体，其包含与免疫球蛋白重链相似的多肽链，但缺少一个或多个重链结构域的至少一部分。例如，在某些抗体中，所修饰抗体的恒定区的一整个结构域被删除，例如，CH2结构域的全部或部分被删除。
[0261] 在某些LINGO-1抗体分子中，Fc部分可以使用本领域已知的技术突变，来减少效应功能。例如，恒定区的删除或失活(通过点突变或其它方法)可以减少循环的修饰抗体与Fc受体的结合，从而增加肿瘤中的定位。在其它案例中，可以是与本发明一致的恒定区修饰减弱了补体的结合，从而减少了缀合的细胞毒素的血清半衰期和非特异性联合。对于恒定区的其它修饰可以用于修饰二硫键或寡糖部分，由于增加的抗原特异性或抗体柔性，允许增强的定位。修饰所得的生理概况(profile)、生物利用度和其它生化效应，例如肿瘤定位，生物分布以及血清半衰期，可以使用公知的免疫技术容易的测量和定量，不需要过度的实验。
[0262] 示例性抗LINGO-1抗体分子
[0263] 在某些实施方案中，所述抗LINGO-1抗体分子包含、基本组成为或组成为免疫球蛋白重链可变区(VH)，其中重链可变区的至少一个CDRs，或重链可变区的至少两个CDRs与描述于表3中Li62或Li81或其变体的参考重链CDR1、CDR2、CDR3氨基酸序列至少80％、85％、90％、或95％相同。或者，所述VH的CDR1、CDR2和CDR3区与描述于表3中Li62或Li81或其变体的参考重链CDR1、CDR2、CDR3氨基酸序列至少80％、85％、90％、或95％相同。因此，根据这个实施方案，本发明的重链可变区具有与表3所示的多肽序列相关的CDR1、CDR2或CDR3多肽序列。在某些实施方案中，所述抗LINGO-1抗体分子包含，基本组成为或组成为描述于表3的VH多肽或其片段，或与其至少80％、85％、90％、或95％相同的氨基酸序列。
[0264] 表3：LINGO-1抗体VH序列
[0265]
[0266]
[0267]
[0268]
[0269]
[0270] 在另一个实施方案中，所述抗LINGO-1抗体分子包括多肽，其包含，基本组成为或组成为免疫球蛋白重链可变区(VH)，其中至少CDR3区与选自下组的参考CDR3序列至少80％、85％、90％、或95％相同：SEQ ID NOs：4、8和17-49。在进一步的实施方案中，所述CDR3区与选自下组的参考CDR3序列相同：SEQ ID NOs：4、8和17-49。在更进一步的实施方案中，所述抗LINGO-1抗体分子包括多肽，其包含、基本组成为或组成为免疫球蛋白重链可变区(VH)，其中CDR1和CDR2分别与SEQ ID NOs：2和3的CDR1和CDR2氨基酸序列至少80％、85％、
90％、95％或100％相同，且CDR3区与选自下组的CDR3氨基酸序列至少80％、85％、90％、
95％或100％相同：SEQ ID NOs：4和17-34。在其它的实施方案中，所述抗LINGO-1抗体分子包括多肽，其包含，基本组成为或组成为免疫球蛋白重链可变区(VH)，其中CDR1和CDR2分别与SEQ ID NOs：6和7的CDR1和CDR2氨基酸序列至少80％、85％、90％、95％或100％相同，且CDR3区与选自下组的CDR3氨基酸序列至少80％、85％、90％、95％或100％相同：SEQ ID NOs：8和35-49。
90％、95％或100％相同，且CDR3区与选自下组的CDR3氨基酸序列至少80％、85％、90％、
95％或100％相同：SEQ ID NOs：4和17-34。在其它的实施方案中，所述抗LINGO-1抗体分子包括多肽，其包含，基本组成为或组成为免疫球蛋白重链可变区(VH)，其中CDR1和CDR2分别与SEQ ID NOs：6和7的CDR1和CDR2氨基酸序列至少80％、85％、90％、95％或100％相同，且CDR3区与选自下组的CDR3氨基酸序列至少80％、85％、90％、95％或100％相同：SEQ ID NOs：8和35-49。
[0271] 在另一个实施方案中，所述抗LINGO-1抗体分子包括多肽，其包含，基本组成为或组成为免疫球蛋白重链可变区(VH)，其中CDR1、CDR2和CDR3区具有与表3所示CDR1、CDR2和CDR3组相同的多肽序列。在某些实施方案中，所述抗体分子包括特异性或优先结合LINGO-1的VH多肽。
[0272] 在进一步的实施方案中，所述抗LINGO-1抗体分子包括多肽，其包含，基本组成为或组成为VH多肽序列，其与选自SEQ ID NOs：1、5和53-85的参考VH多肽序列至少80％、85％、90％、95％或100％相同。在一个具体的实施方案中，所述VH多肽包含选自下组的CDR3氨基酸序列：SEQ IDNOs：4、8和17-49。
[0273] 在某些实施方案中，所述抗LINGO-1抗体分子包括多肽，其包含，基本组成为或组成为选自下组的VH多肽序列：SEQ ID NOs：1、5和53-85。在某些实施方案中，抗体或抗原结合片段包括特异性或优先结合LINGO-1的VH多肽。
[0274] 在另一个方面，所述抗LINGO-1抗体分子包括VH，其包含SEQ ID NOs：1或SEQ ID NOs：5的氨基酸。在某些实施方案中，抗体或抗原结合片段包括特异性或优先结合LINGO-1的VH。在某些实施方案中，抗体或其抗原结合片段包含、基本组成为或组成为VH，其特异性或优先结合与描述于表3的Li62、Li81或其变体相同的表位，或竞争性抑制这些单克隆抗体结合LINGO-1。
[0275] 在某些实施方案中，所述抗LINGO-1抗体分子包括多肽，其包含，基本组成为或组成为免疫球蛋白重链，除了取代一个或多个以下氨基酸外，其与SEQ ID NO：146的多肽相同：W50、P53、I57和/或W104。在某些实施方案中，W50被H、F、L、M、G、I或D残基取代。在某些实施方案中，P53被L、S、T、W或G残基取代。在某些实施方案中，I57被G、M、N、H、L、F、W、Y、S、P、V或T残基取代。在某些实施方案中，W104被V、H、S、Q、M、L、T或I残基取代。
[0276] 在某些实施方案中，所述抗LINGO-1抗体分子包括多肽，其包含、基本组成为或组成为免疫球蛋白重链可变区，除了取代氨基酸P53外，其与SEQ ID NO：5的多肽相同。在某些实施方案中，P53被L、S、T、W或G残基取代。
[0277] 在某些实施方案中，所述抗LINGO-1抗体分子包括多肽，其包含、基本组成为或组成为免疫球蛋白重链可变区，除了取代一个或多个以下氨基酸外，其与SEQ ID NO：1的多肽相同：W50、P53、I57和/或W104。在某些实施方案中，W50被H、F、L、M、G、I或D残基取代。在某些实施方案中，P53被L、S、T、W或G残基取代。在某些实施方案中，I57被G、M、N、H、L、F、W、Y、S、P、V或T残基取代。在某些实施方案中，W104被V、H、S、Q、M、L、T或I残基取代。
[0278] 在某些实施方案中，所述抗LINGO-1抗体分子包括多肽，其包含、基本组成为或组成为免疫球蛋白重链可变区，除了取代一个或多个以下氨基酸外，其与SEQ ID NO：66的多肽相同：W50、P53、I57和/或W104。在某些实施方案中，W50被H、F、L、M、G、I或D残基取代。在某些实施方案中，P53被L、S、T、W或G残基取代。在某些实施方案中，I57被G、M、N、H、L、F、W、Y、S、P、V或T残基取代。在某些实施方案中，W104被V、H、S、Q、M、L、T或I残基取代。
[0279] 在某些实施方案中，所述抗LINGO-1抗体包括一个或多个上述VH多肽，其特异性或优先结合与描述于表3的Li62、Li81或其变体的相同的表位，或竞争性抑制这些抗体结合LINGO-1。
[0280] 在另一个实施方案中，所述抗LINGO-1抗体分子包括多肽，其包含、基本组成为或组成为免疫球蛋白轻链可变区(VL)，其中所述轻链可变区的至少一个CDRs或所述轻链可变区的至少两个CDRs与本文公开的单克隆LINGO-1抗体的参考重链CDR1、CDR2、CDR3氨基酸序列至少80％、85％、90％、或95％相同。或者，所述VL的CDR1、CDR2和CDR3区与本文公开的单克隆LINGO-1抗体的参考轻链CDR1、CDR2、CDR3氨基酸序列至少80％、85％、90％、或95％相同。因此，根据这个实施方案，抗体分子的轻链可变区具有与表4所示多肽相关的CDR1、CDR2或CDR3多肽序列。在某些实施方案中，所述抗LINGO-1抗体分子包含特异性或优先结合LINGO-1的VL多肽。
[0281] 表4：LINGO-1抗体VL序列
[0282]
[0283] 在另一个实施方案中，所述抗LINGO-1抗体分子包括多肽，其包含、基本组成为或组成为免疫球蛋白轻链可变区(VL)，其中CDR1、CDR2和CDR3区具有表4所示CDR1、CDR2和CDR3组相同的多肽序列。在某些实施方案中，抗体分子或抗原结合片段包含特异性或优先结合LINGO-1的VL多肽。
[0284] 在进一步的实施方案中，所述抗LINGO-1抗体分子包括多肽，其包含、基本组成为或组成为VL多肽，其与选自表4所示SEQ ID NO：9或SEQ IDNO：13的参考VL序列至少80％、85％、90％、或95％相同。在某些实施方案中，所述抗LINGO-1抗体分子包含特异性或优先结合LINGO-1的VL多肽。另一方面，所述抗LINGO-1抗体分子包括多肽，其包含、基本组成为或组成为选自表4所示SEQ ID NO：9或SEQ ID NO：13的VL多肽。在某些实施方案中，所述包含该VL多肽的抗LINGO-1抗体分子特异性或优先结合LINGO-1。
[0285] 在某些实施方案中，所述抗LINGO-1抗体分子包括多肽，其包含、基本组成为或组成为免疫球蛋白轻链，除了取代氨基酸W94外，其与SEQ IDNO：145的多肽相同。在某些实施方案中，W94被A、D、L、N、G、Q、V或S残基取代。
[0286] 在某些实施方案中，所述抗LINGO-1抗体分子包括多肽，其包含、基本组成为或组成为免疫球蛋白轻链可变区，除了取代氨基酸W94外，其与SEQ ID NO：5的多肽相同。在某些实施方案中，W94被A、D、L、N、G、Q、V或S残基取代。
[0287] 在某些实施方案中，所述抗LINGO-1抗体分子包括多肽，其包含、基本组成为或组成为上述的一个或多个VL多肽，其特异性或优先结合与Li62或Li81相同的表位，或竞争性抑制这些单克隆抗体结合LINGO-1。
[0288] 在其它的实施方案中，所述抗LINGO-1抗体分子包含、基本为组成或组成为表3所示的VH多肽，以及表4所示的VL多肽，其选自下组：i)SEQID NO：1或SEQ ID NOs：53-70和SEQ ID NO：9；以及iii)SEQ ID NO：5或SEQ ID NOs：71-85和SEQ ID NO：13。
[0289] 在某些实施方案中，所述抗LINGO-1抗体分子包含、基本组成为或组成为如下所示SEQ ID NO：86的抗体重链，或与其至少80％、85％、90％、或95％相同的氨基酸序列。
[0290] EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSAYEMKWVRQAPGKGLEWVSVIGPSGGFTFYADISVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCATEGDNDAFDIWGQGTTVTVSSASTKGPISVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTIVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLIMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDIWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSIDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTIQKSLS LSPG(SEQ ID NO:86)
[0291] 在其它的实施方案中，所述抗LINGO-1抗体分子包含、基本组成为或组成为无糖基化版本的抗体重链。例如，无糖基化版本的Li81描述于2008年1月9日提交的PCT/US2008/000316，和US8128926，其通过提述完整并入本文。无糖基化版本的Li81抗体通过改变Li81重链序列中的单个氨基酸(T变为A)创造。所述无糖基化版本的Li81重链序列(SEQ ID NO：
50)如下所示。所述的单个氨基酸改变通过加宽和下划线标记：
50)如下所示。所述的单个氨基酸改变通过加宽和下划线标记：
[0292] EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSAYEMKWVRQAPGKGLEWVSVIGPSGGFTFYADISVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCATEGDNDAFDIWGQGTTVTVSSASTKGPISVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTIVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLIMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSAYRVVSVLTVLHQDIWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSIDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTIQKSLS LSPG.(SEQ ID NO:50)
[0293] 所述抗LINGO-1抗体分子包括重链，其与包含SEQ ID NO：50或86氨基酸的参考多肽至少80％、85％、90％、或95％相同。在某些实施方案中，包含该重链的抗体或抗原结合片段特异性或优先结合LINGO-1。
[0294] 在一个实施方案中，所述抗LINGO-1抗体分子是全人的抗LINGO-1单克隆抗体，其设计成无糖基化免疫球蛋白G亚类1(IgG1)的框架区，来减少效应功能(本文中也称为抗LINGO-1抗体1)。进行了对LINGO-1敲除小鼠的组织学和功能评价，且在几个脱髓鞘动物模型中证明了抗LINGO-1抗体1的体内药理学活性。在评价结合特性、生物学活性和药理学活性的基础上，对抗LINGO-1抗体1在体内和体外进行了表征。这些研究的结果表明抗LINGO-1抗体1具有表1中描述的以下特性。
[0295] 表1抗LINGO-1抗体1的性质
[0296]
[0297]
[0298] 在一个实施方案中，所述抗体分子包括VH，其中VH CDR1、CDR2和CDR3分别包含SEQ ID NOs：6、7和8的氨基酸，或与其基本相同的氨基酸序列(例如与其至少80％、85％、90％或95％相同)。
[0299] 在一个实施方案中，所述抗体分子包括VH，其中VH CDR1、CDR2和CDR3分别包含SEQ ID NOs：2、3和30的氨基酸，或与其基本相同的氨基酸序列(例如与其至少80％、85％、90％或95％相同)。
[0300] 在另一个实施方案中，所述抗体分子包括VL，其中VL CDR1、CDR2和CDR3分别包含SEQ ID NOs：14、15和16的氨基酸，或与其基本相同的氨基酸序列(例如与其至少80％、85％、90％或95％相同)。
[0301] 在另一个实施方案中，所述抗体分子包括VL，其中VL CDR1、CDR2和CDR3分别包含SEQ ID NOs：10、11和12的氨基酸，或与其基本相同的氨基酸序列(例如与其至少80％、85％、90％或95％相同)。
[0302] 在一个实施方案中，所述抗体分子包括VH，其中VH CDR1、CDR2和CDR3分别包含SEQ ID NOs：6、7和8的氨基酸；以及VL，其中VL CDR1、CDR2和CDR3分别包含SEQ ID NOs：14、15和16的氨基酸；或与其基本相同的氨基酸序列(例如与其至少80％、85％、90％或95％相同)。
[0303] 在一个实施方案中，所述抗体分子包括VH，其中VH CDR1、CDR2和CDR3分别包含SEQ ID NOs：2、3和30的氨基酸；以及VL，其中VL CDR1、CDR2和CDR3分别包含SEQ ID NOs：10、11和12的氨基酸；或与其基本相同的氨基酸序列(例如与其至少80％、85％、90％或95％相同)。
[0304] 在一个实施方案中，所述抗体分子包括VH，其包括SEQ ID NO：5的氨基酸序列，或与其基本相同的氨基酸序列(例如与所述SEQ ID NO：5至少80％、85％、90％或95％相同的氨基酸序列)。
[0305] 在一个实施方案中，所述抗体分子包括VH，其包括SEQ ID NO：66的氨基酸序列，或与其基本相同的氨基酸序列(例如与所述SEQ ID NO：66至少80％、85％、90％或95％相同的氨基酸序列)。
[0306] 在一个实施方案中，所述抗体分子包括VL，其包括SEQ ID NO：13的氨基酸序列，或与其基本相同的氨基酸序列(例如与所述SEQ ID NO：13至少80％、85％、90％或95％相同的氨基酸序列)。
[0307] 在一个实施方案中，所述抗体分子包括VL，其包括SEQ ID NO：9的氨基酸序列，或与其基本相同的氨基酸序列(例如与所述SEQ ID NO：9至少80％、85％、90％或95％相同的氨基酸序列)。
[0308] 在一个实施方案中，所述抗体分子包括VH，其包括SEQ ID NO：5的氨基酸序列，或与其基本相同的氨基酸序列(例如与所述SEQ ID NO：5至少80％、85％、90％或95％相同的氨基酸序列)；以及VL，其包括SEQ ID NO：13的氨基酸序列，或与其基本相同的氨基酸序列(例如与所述SEQ ID NO：13至少80％、85％、90％或95％相同的氨基酸序列)。
[0309] 在一个实施方案中，所述抗体分子包括VH，其包括SEQ ID NO：66的氨基酸序列，或与其基本相同的氨基酸序列(例如与所述SEQ ID NO：66至少80％、85％、90％或95％相同的氨基酸序列)；以及VL，其包括SEQ ID NO：9的氨基酸序列，或与其基本相同的氨基酸序列(例如与所述SEQ ID NO：9至少80％、85％、90％或95％相同的氨基酸序列)。
[0310] 在另一个实施方案中，所述抗体分子包括如下所示的重链，其包含SEQ ID NO：275的氨基酸序列，或与其基本相同的氨基酸序列(例如与其至少80％、85％、90％或95％相同的氨基酸序列)，如下：
[0311]
[0312]
[0313] 在其它实施方案中，所述抗体分子包括如下所示的轻链，其包含SEQ IDNO：276的氨基酸序列，或与其基本相同的氨基酸序列(例如与其至少80％、85％、90％或95％相同的氨基酸序列)，如下：
[0314]
[0315] 上述所有多肽可以进一步包括另外的多肽，例如用来引导所编码多肽分泌的信号肽，本文所述的抗体恒定区，或本文所述的其它异源多肽。另外，本发明的多肽包括如别处所述的多肽片段。本发明另外的多肽包括本文所述的融合多肽、Fab片段以及其它衍生物。
[0316] 另外，如本文其它地方更详细描述的，本发明包括组合物，其包含上述的多肽。
[0317] 本领域的普通技术人员可以理解本文公开的LINGO-1抗体多肽可以通过修饰，使其与衍生其的天然存在的结合多肽在氨基酸序列上不同。例如，衍生于指定蛋白的多肽或氨基酸序列可能与开始序列相似，例如具有一定百分比的同一性，例如其与开始序列可能60％、70％、75％、80％、85％、90％或95％相同。
[0318] 此外，可以制成引起保守替代或“非必要”氨基酸区域的改变的核苷酸或氨基酸替代、删除或插入。例如，衍生于指定蛋白的多肽或氨基酸序列可能除了一个或多个单个氨基酸替代、插入或删除(例如一个、两个、三个、四个、五个、六个、七个、八个、九个、十个、十五个、二十个或更多单个氨基酸替代、插入或删除)外，与开始序列相同。在某些实施方案中，相对于开始序列，衍生于指定蛋白的多肽或氨基酸序列有一到五个、一到十个、一到十五个或一到二十个单个氨基酸替代、插入或删除。
[0319] 可溶性LINGO-1拮抗剂和融合蛋白
[0320] 在另一个实施方案中，所述修复剂，例如LINGO-1的拮抗剂，是可溶性LINGO分子，例如LINGO-1分子(例如LINGO-1的片段)，或LINGO-1复合物组分的可溶形式(例如NgR1，p75或TAJ(TROY)的可溶形式)。
[0321] 在某些实施方案中，可溶性LINGO-1分子或LINGO-1抗体分子包含通常与抗体不相关的氨基酸序列或一个或多个部分。示例性修饰在下面有更详细的描述。例如，本发明的单链fv抗体片段可以包含柔性连接序列，或可以通过修饰添加功能性部分(例如PEG、药物、毒素或标签)。
[0322] 本文所述的抗体分子、可溶形式的LINGO-1或复合物组分可以单独使用或与第二个部分、异源部分例如异源多肽，功能连接(例如化学偶联、基因或多肽融合、非共价联合或其它形式)。术语“异源”应用于多核苷酸或多肽时，表示与其在自然界非天然相连的部分。例如，所述的多核苷酸或多肽衍生于独特的实体，来自于该实体的其余部分与其进行比较。
例如，本文使用的融合到LINGO-1抗体分子的“异源多肽”来源于同一物种的非免疫球蛋白多肽，或不同物种的免疫球蛋白或非免疫球蛋白多肽。
例如，本文使用的融合到LINGO-1抗体分子的“异源多肽”来源于同一物种的非免疫球蛋白多肽，或不同物种的免疫球蛋白或非免疫球蛋白多肽。
[0323] 示例性的异源部分包括但不限于免疫球蛋白Fc结构域、血清白蛋白、聚乙二醇化、GST、Lex-A和MBP多肽序列。所述融合蛋白可以另外包括连接序列，将第一部分例如抗体分子、LINGO-1或复合物组分的可溶形式与第二部分连接。在其它实施方案中，另外的氨基酸序列可以被加到融合蛋白的N-或C-端来帮助其表达、空间柔性、检测和/或分离或纯化。例如，LINGO-1或复合物组分的可溶形式可以与多种同种型的重链恒定区融合，包括：IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgM、IgA1、IgA2、IgD和IgE。
[0324] 应当理解本文所述的抗体分子和可溶性或融合蛋白可以与一个或多个其它分子实体功能连接(例如化学偶联、基因融合、非共价联合或其它形式)，例如抗体(例如双特异性或多特异性抗体)等。
[0325] 在一个实施方案中，所述融合蛋白包括LINGO-1或复合物组分的胞外域(或与其同源的序列)，以及，例如融合到人免疫球蛋白Fc链，例如人IgG(例如人IgG1或人IgG2，或其突变形式)。所述Fc序列可以在一个或多个氨基酸突变，来降低效应细胞功能、Fc受体的结合和/或补体活性。
[0326] 在某些实施方案中，抗LINGO-1抗体分子可以包含、基本组成为或组成为融合蛋白。在这种情况下，融合蛋白是嵌合分子，其包含，例如，带有至少一个靶标结合位点的免疫球蛋白抗原结合域，以及至少一个异源部分。所述氨基酸序列可以通常存在于单独的蛋白中，在融合多肽中将其拼在一起，或其通常存在于相同的蛋白中，但在融合多肽中通过新的排列放置。融合蛋白可以通过例如化学合成创造，或通过创造和翻译多核苷酸，其中该肽区域通过所需关系编码。
[0327] 核酸分子/重组表达
[0328] 核酸分子，宿主细胞和载体，其包括编码本文所述任意多肽，例如修复剂和免疫调节剂的核苷酸序列，也包括在本发明中。
[0329] 在一个示例性的实施方案中，分离的多核苷酸包含、基本组成为或组成为核酸，其编码抗LINGO-1抗体分子免疫球蛋白重链可变区(VH)，其中重链可变区的至少一个CDRs或重链可变区的至少两个CDRs与描述于表3中Li62或Li81或其变体的参考重链CDR1、CDR2、CDR3氨基酸序列至少80％、85％、90％、或95％相同。或者，所述VH的CDR1、CDR2和CDR3区与描述于表3中Li62或Li81或其变体的参考重链CDR1、CDR2、CDR3氨基酸序列至少80％、85％、90％、或95％相同。因此，根据这个实施方案，本发明的重链可变区具有与表3所示的多肽序列相关的CDR1、CDR2或CDR3多肽序列。
[0330] 在另一个示例性的实施方案中，分离的多核苷酸包含、基本组成为或组成为核酸，其编码抗LINGO-1抗体分子免疫球蛋白重链可变区(VL)，其中轻链可变区的至少一个CDRs或轻链可变区的至少两个CDRs与本文公开的LINGO-1单克隆抗体参考轻链CDR1、CDR2、CDR3氨基酸序列至少80％、85％、90％、或95％相同。或者，所述VL的CDR1、CDR2和CDR3区与本文公开的LINGO-1单克隆抗体参考轻链CDR1、CDR2、CDR3氨基酸序列至少80％、85％、90％、或95％相同。因此，根据一个实施方案，本发明的轻链可变区具有与表4所示多肽序列相关的CDR1、CDR2或CDR3多肽序列。
[0331] 上述的任意多核苷酸可以进一步包括另外的核酸，其编码，例如指导编码多肽分泌的信号肽，本文所述的抗体恒定区，或本文所述的其它异源多肽。
[0332] 也公开包含多核苷酸的组合物，其包含上述一个或多个多核苷酸。在一个实施方案中，所述组合物包含第一多核苷酸和第二多核苷酸，其中所述第一多核苷酸编码本文所述的VH多肽，所述第二多核苷酸编码本文所述的VL多肽。
[0333] 也公开本发明如别处所述的多核苷酸片段。本发明也考虑本文所述的编码融合多肽、Fab片段以及其它衍生物的另外的多核苷酸。
[0334] 所述多核苷酸可以通过本领域的任意已知方法生产或制造。例如，如果所述抗体核苷酸序列已知，编码抗体的多核苷酸可以通过化学合成的寡核苷酸来组装(例如描述于Kutmeier等，BioTechniques 17:242(1994))，简单的说，涉及重叠寡核苷酸的合成，其包含编码抗体的序列的部分，将这些寡核苷酸退火和连接，以及然后将连接的寡核苷酸通过PCR扩增。
[0335] 本文所述多肽的重组表达，例如结合LINGO-1的抗体分子，需要构建表达载体，其包含编码多肽的多核苷酸，例如抗体分子。一旦获得了编码抗体分子或抗体分子重链或轻链或其部分(优选包含重链或轻链可变区)，可以使用本领域已知技术，通过重组DNA技术来生产用于生产抗体分子的载体。因此，通过表达包含多肽编码核苷酸序列的多核苷酸来制备蛋白的方法描述与本文和US 8058406，其内容通过提述完整并入本文。
[0336] 本领域技术人员所知的方法可以用于构建包含抗体编码序列和适当的转录和翻译控制信号的表达载体。这些方法包括，例如，体外DNA重组技术、合成技术以及体内基因重组。可复制的载体包含编码本文所述多肽(例如抗LINGO-1抗体分子或其重链或轻链，或重链或轻链的可变区)的核苷酸序列可操作的连接到启动子。这些载体可以包括编码抗体分子恒定区的核苷酸序列(见例如PCT公开WO 86/05807；PCT公开WO 89/01036；以及美国专利No.5,122,464)，抗体可变区可以克隆到这些载体中，以表达完整的重链或轻链。
[0337] 所述宿主细胞可以用两种表达载体共转染，第一种载体编码重链衍生的多肽而第二种载体编码轻链衍生的多肽。所述的两种载体可能包含相同的可选标记，使得重链和轻链多肽等量表达。或者，可以使用编码重链和轻链两者的单个载体。在这种情况下，轻链被有利的放在重链之前，以避免毒性游离重链的过剩(Proudfoot,Nature 322:52(1986)；Kohler,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 77:2197(1980))。所述用于重链和轻链的编码序列可能包含cDNA或基因组DNA。
[0338] 本文使用的术语“载体”或“表达载体”表示用于向宿主细胞引入和表达目的基因的作为媒介物的载体。本领域技术人员已知，这些载体可以容易的从以下组选择：质粒、噬菌体、病毒和逆转录病毒。通常来说，与本发明相容的载体包含选择性标记，合适的限制性位点来帮助目的基因的克隆，以及进入和/或在真核或原核细胞中复制的能力。
[0339] 为了达到本发明的目的，可以采用多种表达载体系统。例如一种使用来源于动物病毒例如牛乳头瘤病毒、多瘤病毒、腺病毒、牛痘病毒、杆状病毒、逆转录病毒(RSV、MMTV或MOMLV)或SV40病毒的DNA元件的载体。其它载体涉及使用带有内部核糖体结合位点的多顺反子系统。另外，通过引入一个或多个允许选择转染的宿主细胞的标记物，可以选择将DNA整合到其染色体中的细胞。所述的标记物可以向营养缺陷型的宿主提供原养、杀菌剂抗性(例如抗生素)或对重金属例如铜的抗性。所述可选择标记物基因可以直接连接到待表达的DNA序列，或通过共转化引入同一个细胞。可能还需要另外的元件来最优合成mRNA。这些元件可以包括信号序列、剪接信号以及转录启动子、增强子和终止信号。
[0340] 在一个实施方案中，所述克隆的可变区基因随重链和轻链的恒定区基因(优选人的)一同插入到表达载体中，合成如以上讨论。在一个实施方案中，这是通过使用Biogen IDEC,Inc的专有表达载体，称作NEOSPLA(美国专利号6459730)实现。这个载体包含巨细胞病毒的启动子/增强子，小鼠beta球蛋白主要启动子，SV40复制起点，牛生长激素多聚腺甘酸化序列，新霉素磷酸转移酶外显子1和2，二氢叶酸还原酶基因和前导序列。这个载体被发现当掺入可变区和恒定区基因，转染到CHO细胞中，接下来在包含G418的培养基中选择以及氨甲喋呤放大时，导致非常高水平的抗体表达。当然，任何可以在真核细胞中引起表达的表达载体可以用于本发明。合适载体的例子包括但不限于：pcDNA3、pHCMV/Zeo、pCR3.1、pEF1/His、pIND/GS、pRc/HCMV2、pSV40/Zeo2、pTRACER-HCMV、pUB6/V5-His、pVAX1以及pZeoSV2质粒(可以从Invitrogen,San Diego,Calif.获得)，以及pCI质粒(可以从Promega,Madison,Wis.获得)。一般来说，筛选大量的转化细胞以获得那些表达合适的高水平免疫球蛋白重链和轻链的细胞是常规的实验手段，可以通过例如，自动化系统实行。载体系统在美国专利号5,736,137和5,658,570中也有教授，其各自内容通过提述完整并入本文。这一系统提供高表达水平，例如>30pg/细胞/天。其它示例性载体系统公开于例如美国专利号6,413,777。
[0341] 在其它实施方案中，所述LINGO-1抗体分子可以使用多顺反子构建来表达，例如2002年11月18日提交的美国专利申请公开号2003-0157641A1，其完整并入本文。在这些新颖的表达系统中，多种感兴趣的基因产物例如抗体的重链和轻链可以通过单个顺反子构建体生产。这些系统有利的使用内在核糖体进入位点(IRES)，来在真核宿主细胞中提供相对高水平的结合多肽。相容的IRES序列公开于美国专利号6,193,980，也并入本文。本领域的技术人员将理解这些表达系统可以用于有效的生产本申请公开的全系列多肽。
[0342] 更一般的说，一旦所述编码多肽例如抗LINGO-1抗体分子的单体亚单位的载体或DNA序列被制备，所述表达载体可以引入合适的宿主细胞中。向宿主细胞中引入质粒可以通过多种本领域技术人员熟知的技术完成。这些包括但不限于，转染(包括电泳和电穿孔)、原生质体融合、磷酸钙沉淀、包膜DNA细胞融合、显微注射、以及完整病毒感染。见Ridgway,A.A.G."Mammalian Expression Vectors"Vectors,Rodriguez和Denhardt,Eds.,Butterworths,Boston,Mass.,Chapter 24.2,pp.470-472(1988)。典型的，通过电穿孔将质粒引入宿主。怀有表达构建体的宿主细胞在适合生产轻链和重链的条件下生长，并分析重链和/或轻链蛋白的合成。示例性的分析技术包括酶联免疫吸附测定(ELISA)，放射免疫法(RIA)，或荧光活化细胞分选仪分析(FACS)，免疫组织化学以及其它。
[0343] 表达载体通过常规技术转移到宿主细胞，然后转染的细胞通过常规技术培养，以产生用于本文所述方法的多肽。因此，本发明包括宿主细胞，其包含编码本发明的抗体或其重链或轻链的多核苷酸，可操作的连接到异源的启动子。在用于表达双链抗体的优选实施方案中，编码重链和轻链两者的载体可以在宿主细胞中共表达，来表达完整的免疫球蛋白分子，在US8058406中有详述，其内容通过提述完整并入本文。
[0344] 本文使用的“宿主细胞”指代怀有使用重组DNA技术构建，并编码至少一个异源基因的载体的细胞。在从重组宿主中分离抗体的过程描述中，除非明确的另有说明，术语“细胞”和“细胞培养物”可替换使用，表示抗体的来源。也就是说，从“细胞”中回收多肽可以表示从离心后(spun down)的完整细胞中，或从包含培养基和悬浮细胞两者的培养物中。
[0345] 多种宿主-表达载体系统可以用于表达多肽，例如抗体分子，用于本文所述的方法。这些系统包括但不限于微生物例如细菌(例如大肠杆菌、枯草芽孢杆菌(B.subtilis))，其使用包含多肽编码序列的重组噬菌体DNA、质粒DNA或粘粒DNA表达载体转化；酵母(例如酵母属(Saccharomyces)、毕赤酵母属(Pichia))，其使用包含抗体编码序列的重组酵母表达载体转化；昆虫细胞系统，其使用包含多肽编码序列的重组病毒表达载体(例如杆状病毒)感染；植物细胞系统，其使用包含抗体编码序列的重组病毒表达载体(例如花椰菜花叶病毒，CaMV；烟草花叶病毒，TMV)感染，或使用包含抗体编码序列的重组质粒表达载体(例如Ti质粒)转化；或哺乳动物细胞系统(例如COS、CHO、BLK、293、3T3细胞)，其怀有重组表达构建物，包含来源于哺乳动物细胞基因组(例如金属硫蛋白启动子)或哺乳动物病毒(例如腺病毒晚期启动子；牛痘病毒7.5K启动子)的启动子。典型的，细菌细胞例如大肠杆菌，更典型的，真核细胞，特别是用于表达完整的重组抗体分子，用于重组多肽或抗体分子的表达。例如，哺乳动物细胞例如中国仓鼠卵巢细胞(CHO)，连同载体例如人巨细胞病毒主要中间早期基因启动子元件，是用于多肽抗体的有效表达系统(Foecking等，Gene 45:101(1986)；Cockett等，Bio/Technology 8:2(1990))。
[0346] 用于蛋白表达的宿主细胞系通常是哺乳动物来源的；本领域的技术人员被认为具有优选确定特定的宿主细胞系的能力，其最适于目的基因产物在其中表达。示例性的宿主细胞系包括但不限于：CHO(中国仓鼠卵巢)、DG44和DUXB11(中国仓鼠卵巢细胞系，DHFR-)、HELA(人宫颈癌)、CVI(猴肾细胞系)、COS(带有SV40T抗原的CVI衍生物)、VERY、BHK(幼仓鼠肾)、MDCK、293、W138、R1610(中国仓鼠成纤维细胞)、BALBC/3T3(小鼠成纤维细胞)、HAK(仓鼠肾细胞系)、SP2/O(小鼠骨髓瘤)、P3.times.63-Ag3.653(小鼠骨髓瘤)，BFA-1c1BPT(牛内皮细胞)，RAJI(人淋巴细胞)和293(人肾)。宿主细胞系通常可以从商业化服务、美国组织培养物保藏中心或发表的文献获得。
[0347] 另外，可以选择以所期待的特定方式调节插入序列的表达，或修饰和处理基因产物的宿主细胞株。这些对蛋白产物的修饰(例如糖基化)和处理(例如剪切)对于蛋白的功能可能是重要的。不同宿主细胞对蛋白和基因产物的翻译后处理和修饰具有特征性的和特定的机制。可以选择合适的细胞系或宿主系统来确保表达的外来蛋白的正确修饰和处理。为了达到这一目的，可以使用拥有适当处理基因产物的初级转录、糖基化和磷酸化的细胞器的真核宿主细胞。
[0348] 对于长期的，高产量的重组蛋白生产，优选稳定的表达。例如稳定表达抗体分子的细胞系可以是工程化的。宿主细胞可以用受到合适表达控制元件(例如启动子、增强子、序列、转录终止子、多聚腺甘酸位点等)控制的DNA以及可选择标记物转化，而不是使用包含病毒来源的复制的表达载体。在引入外源DNA后，工程细胞可以在浓缩的培养基中生长1-2天，然后转入选择性培养基。重组质粒上的选择性标记物赋予对选择的抗性，允许细胞稳定的将质粒整合到其染色体中，并生长形成灶(foci)，这相应地可以被克隆和扩大为细胞系。这种方法可以有利的用于稳定表达抗体分子的工程细胞系。
[0349] 特别优选CHO细胞。在某些实施方案中，所述抗体分子表达于CHO细胞，其使用含有特异性针对人LINGO-1蛋白的IgG1-agly重轻链结构基因的表达载体稳定转染。翻译后从内质网相关信号肽上移除的天然人kappa轻链信号肽和人重链信号肽，可以用于引导所述抗LINGO-1抗体分子的分泌。所述抗体分子可以从培养基中纯化，并制备成液体。所述抗体分子可以由通过链间二硫键连接2条重链和2条轻链组成。在一个实施方案中，所述完整抗体分子的分子量约为144.4kDa。
[0350] 可以使用一些选择系统，包括但不限于单纯疱疹病毒胸苷激酶(Wigler等，Cell 11:223(1977))，次黄嘌呤-鸟嘌呤转磷酸核糖基酶(Szybalska & Szybalski,
Proc.Natl.Acad.Sci.USA 48:202(1992))，以及腺嘌呤转磷酸核糖基酶(Lowy等，Cell 22:
817 1980)基因，分别可以用于tk-、hgpt-或aprt-细胞中。另外，抗代谢物抗性可以用作下述基因的选择基础：dhfr，其赋予对甲氨蝶呤的抗性(Wigler等，Natl.Acad.Sci.USA 77:
357(1980)；O'Hare等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 78:1527(1981))；gpt，其赋予对霉酚酸的抗性(Mulligan&Berg,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 78:2072(1981))；neo，其赋予对氨基糖苷类G-418的抗性(Clinical Pharmacy 12:488-505；Wu和Wu,Biotherapy 3:87-95(1991)；
Tolstoshev,Ann.Rev.Pharmacol.Toxicol.32:573-596(1993)；Mulligan,Science 260:
926-932(1993)；以及Morgan和Anderson,Ann.Rev.Biochem.62:191-217(1993)；TIB TECH
11(5):155-215(May,1993))；以及hygro，其赋予对潮霉素的抗性(Santerre等，Gene 30:
147(1984))。可以使用重组DNA技术领域公知的方法，描述于Ausubel等，(eds.),Current Protocols in Molecular Biology,John Wiley&Sons,NY(1993)；Kriegler,Gene
Transfer and Expression,A Laboratory Manual,Stockton Press,NY(1990)；以及第12和13章,Dracopoli等，(eds),Current Prolocols in Human Genetics,John Wiley&Sons,NY(1994)；Colberre-Garapin等，J.Mol.Biol.150:1(1981)，通过提述完整并入本文。
Proc.Natl.Acad.Sci.USA 48:202(1992))，以及腺嘌呤转磷酸核糖基酶(Lowy等，Cell 22:
817 1980)基因，分别可以用于tk-、hgpt-或aprt-细胞中。另外，抗代谢物抗性可以用作下述基因的选择基础：dhfr，其赋予对甲氨蝶呤的抗性(Wigler等，Natl.Acad.Sci.USA 77:
357(1980)；O'Hare等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 78:1527(1981))；gpt，其赋予对霉酚酸的抗性(Mulligan&Berg,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 78:2072(1981))；neo，其赋予对氨基糖苷类G-418的抗性(Clinical Pharmacy 12:488-505；Wu和Wu,Biotherapy 3:87-95(1991)；
Tolstoshev,Ann.Rev.Pharmacol.Toxicol.32:573-596(1993)；Mulligan,Science 260:
926-932(1993)；以及Morgan和Anderson,Ann.Rev.Biochem.62:191-217(1993)；TIB TECH
11(5):155-215(May,1993))；以及hygro，其赋予对潮霉素的抗性(Santerre等，Gene 30:
147(1984))。可以使用重组DNA技术领域公知的方法，描述于Ausubel等，(eds.),Current Protocols in Molecular Biology,John Wiley&Sons,NY(1993)；Kriegler,Gene
Transfer and Expression,A Laboratory Manual,Stockton Press,NY(1990)；以及第12和13章,Dracopoli等，(eds),Current Prolocols in Human Genetics,John Wiley&Sons,NY(1994)；Colberre-Garapin等，J.Mol.Biol.150:1(1981)，通过提述完整并入本文。
[0351] 另外的表达、生产和/或纯化多肽例如抗体的方法和宿主系统公开于US8058406，其内容通过提述完整并入本文。
[0352] 核酸拮抗剂
[0353] 在某些实施方案中，所述LINGO-1拮抗剂抑制编码LINGO-1的核酸的表达。这种LINGO-1拮抗剂的例子包括核酸分子，例如，反义分子、核酶、RNAi双链分子、三螺旋分子、microRNA分子，其与编码LINGO-1核酸或转录调节区杂交，并阻断或减少LINGO-1的mRNA表达。
[0354] “反义”核酸可以包括与编码蛋白的“正义”核酸互补的核苷酸序列，例如与双链cDNA分子编码链互补，或与mRNA序列互补。所述的反义核酸可以与完整LINGO-1的编码链互补，也可以仅与其部分互补。在另一个实施方案中，所述反义核酸分子与编码LINGO-1核苷酸序列编码链的“非编码区”反义(例如5’和3’非翻译区)。反义试剂可以包括，例如从约8个到约80个核酸碱基(例如从约8个到约80个核苷酸)，例如约8个到约50个核酸碱基，或约12个到约30个核酸碱基。反义化合物包括核酶，外在引导序列(EGS)，寡核苷酸(oligozymes)，以及其它短催化性RNAs或催化性寡核苷酸，与靶核酸杂交，并调节其表达。反义化合物可以包括一段至少8个连续的核酸碱基，其与靶基因中的序列互补。寡核苷酸不需要和其靶核酸序列100％互补来特异性杂交。当寡核苷酸与靶标的结合干扰靶标分子的正常功能，导致效用的缺失，且在需要特异性结合的情况下，例如在体内分析或治疗处理的生理条件下，或在体外分析中在这些分析实施的条件下，有足够程度的互补来避免寡核苷酸与非靶标序列的非特异性结合，则表明寡核苷酸特异性杂交。示例性的反义化合物包括与靶标核酸例如所述编码LINGO-1的mRNA特异性杂交的DNA或RNA序列。所述互补区可以在约8个到约80个核酸碱基中延伸。所述化合物可以包括一个或多个修饰的核酸碱基，这在本领域是已知的。对核酸试剂的描述是可获得的，见例如美国专利号4,987,071；5,116,742；和5,093,246；Woolf等，(1992)Proc Natl Acad Sci USA；Antisense RNA and DNA,D.A.Melton,Ed.,Cold Spring Harbor Laboratory,Cold Spring Harbor,N.Y.(1988)；89:7305-9；Haselhoff and Gerlach(1988)Nature 334:585-59；Helene,C.(1991)Anticancer Drug Des.6:569-84；Helene(1992)Ann.N.Y.Acad.Sci.660:27-36；和Maher(1992)Bioassays 14:807-15。
[0355] siRNA是小双链RNAs(dsRNAs)，其可选的包括悬突。例如，siRNA的双链区约长18到25个核苷酸，例如长19、20、21、22、23或24个核苷酸。典型的，所述siRNA序列与靶标mRNA精确互补。dsRNAs和siRNAs特别的可以用于在哺乳动物细胞中(例如人细胞)沉默基因的表达。siRNA也包括短发卡RNAs(shRNAs)，其具有29个碱基对的茎和2个核苷酸的3’悬突。见例如Clemens等，(2000)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 97:6499-6503；Billy等，(2001)
Proc.Natl.Sci.USA 98:14428-14433；Elbashir等，(2001)Nature.411:494-8；Yang等，(2002)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 99:9942-9947；Siolas等，(2005),Nat.Biotechnol.23(2):227-31；20040086884；U.S.20030166282；20030143204；20040038278；和20030224432。
Proc.Natl.Sci.USA 98:14428-14433；Elbashir等，(2001)Nature.411:494-8；Yang等，(2002)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 99:9942-9947；Siolas等，(2005),Nat.Biotechnol.23(2):227-31；20040086884；U.S.20030166282；20030143204；20040038278；和20030224432。
[0356] 在另一个实施方案中，所述核酸分子是核酶。对编码LINGO-1的核酸具有特异性的核酶可以包括与LINGO-1mRNA的核苷酸序列互补的一个或多个序列，以及一个具有已知负责mRNA剪切的催化序列的序列(见美国专利号5,093,246或Haselhoff和Gerlach(1988)Nature 334:585-591；Cech等，美国专利号4,987,071；以及Cech等，美国专利号5,116,742；Bartel,D.和Szostak,J.W.(1993)Science 261:1411-1418)。
[0357] 在一个实施方案中，所述核酸分子是microRNA分子。对编码LINGO-1的核酸具有特异性的microRNA可以包括与LINGO-1mRNA核苷酸序列互补的一个或多个序列，可以通过翻译抑制或靶标降解，导致基因沉默(见Bartel DP(2009)Cell 136(2):215–33；Kusenda B等，(2006)Biomed Pap Med Fac Univ Palacky Olomouc Czech Repub 150(2):205–15)。
[0358] LINGO-1基因表达可以被与LINGO-1调节区(例如LINGO-1启动子和/或增强子)互补的靶向核苷酸序列抑制，其形成三螺旋结构，阻止LINGO-1基因在靶细胞中的转录。一般见Helene,C.(1991)Anticancer Drug Des.6:569-84；Helene,C.(1992)Ann.N.Y.Acad.Sci.660:27-36；以及Maher,L.J.(1992)Bioassays 14:807-15。可以用于靶向形成三螺旋的潜在序列可以通过创造称为“switchback”的核酸分子增加。
[0359] LINGO-1核酸分子可以在碱基部分、糖部分或磷酸骨架部分被修饰来改善，例如稳定性、杂交或分子的可溶性。对于合成寡核苷酸修饰的非限制例子见Toulmé(2001)Nature Biotech.19:17和Faria等，(2001)Nature Biotech.19:40-44；Hyrup B.等，(1996)Bioorganic&Medicinal Chemistry 4:5-23)。
[0360] 免疫调节剂
[0361] 现有几种免疫调节剂用于改善患者中多发性硬化症的进程。这些试剂包括但不限于，IFN-β1分子；谷氨酸、赖氨酸、丙氨酸和酪氨酸的聚合物，例如格拉默(glatiramer)；针对α-4整联蛋白的抗体或其片段，例如那他株单抗(natalizumab)；蒽二酮(anthracenedione)分子，例如米托蒽醌(mitoxantrone)；芬戈莫德(fingolimod)，例如FTY720；富马酸二甲酯(dimethyl fumarate)，例如口服的富马酸二甲酯；针对T细胞IL-2受体α亚基的抗体，例如达利珠单抗(daclizumab)；针对CD52的抗体，例如阿仑单抗
(alemtuzumab)；二氢乳清酸脱氢酶的抑制剂，例如特立氟胺(teriflunomide)；针对CD20的抗体，例如ocrelizumab；以及皮质类固醇。本文公开的修复剂可以与任何这些试剂联合。
(alemtuzumab)；二氢乳清酸脱氢酶的抑制剂，例如特立氟胺(teriflunomide)；针对CD20的抗体，例如ocrelizumab；以及皮质类固醇。本文公开的修复剂可以与任何这些试剂联合。
[0362] 示例性的免疫调节剂在下面有更详细的描述。
[0363] IFNβ试剂(Beta干扰素)
[0364] 一种已知的MS疗法包括使用干扰素beta治疗。干扰素(IFNs)是大多数动物的免疫系统对外来因子例如病毒、细菌、寄生虫和肿瘤细胞的响应中，免疫系统细胞产生的天然蛋白。干扰素属于称为细胞因子的一大类糖蛋白。干扰素beta具有165个氨基酸。干扰素alpha和beta由多种细胞种类产生，包括T细胞和B细胞、巨噬细胞、成纤维细胞、内皮细胞、成骨细胞和其它，其刺激巨噬细胞和NK细胞两者。干扰素gamma参与免疫和炎症反应的调节。它由激活的T细胞和Th1细胞产生。
[0365] 现有几种不同类型的干扰素被批准用于人。干扰素alpha(包括干扰素alpha-2a，干扰素alpha-2b和干扰素alfacon-1)被美国食品药品监督管理局(FDA)批准作为丙型肝炎的治疗。现有两种FDA批准的干扰素beta。干扰素beta 1a 与人类中天然发现的干扰素beta相同，而干扰素beta 1b 在某些方面与人类中天然发现的干
扰素beta扰素1a不同，包括其包含在17位取代了半胱氨酸残基的丝氨酸残基。干扰素beta的其它用途包括治疗AIDS、皮肤T细胞瘤、急性丙型肝炎(非甲型，非乙型)、卡波西肉瘤、恶性黑色素瘤、毛细胞白血病、以及转移性肾细胞癌。
扰素beta扰素1a不同，包括其包含在17位取代了半胱氨酸残基的丝氨酸残基。干扰素beta的其它用途包括治疗AIDS、皮肤T细胞瘤、急性丙型肝炎(非甲型，非乙型)、卡波西肉瘤、恶性黑色素瘤、毛细胞白血病、以及转移性肾细胞癌。
[0366] IFNβ试剂可以通过任何本领域已知的方法施用于受试者，包括全身的(例如口服、肠胃外、皮下，静脉内，直肠，肌肉内，玻璃体内，腹膜内，鼻内，经皮，或通过吸入或腔内安装)。典型的，所述IFNβ试剂通过皮下或肌肉内施用。
[0367] IFNβ试剂可用于治疗使用本文所述的方法确定为“响应者”的受试者。在一个实施方案中，所述IFNβ试剂用于单一疗法(例如，作为单一的“疾病改善疗法”)，虽然所述治疗方案可以进一步包含使用“症状管理疗法”例如抗抑郁药、止痛药、抗震颤剂等。在一个实施方案中，所述IFNβ试剂是IFNβ-1A试剂(例如 )。在另一个实施方案中，所述IFNβ试剂是IFNβ-1B试剂(例如 )。
[0368] 一种IFNβ-1a，被指示用于患有复发形式的MS、使用本文所述的方法被确定为响应者的患者的治疗，来减缓生理失能的积累以及减少临床恶化的频率。
(干扰素beta-1a)是166个氨基酸的糖蛋白，其预测分子量为约22,500道尔顿。其通过重组DNA技术，使用基因工程化的、被引入人干扰素beta基因的中国仓鼠卵巢细胞生产。
的氨基酸序列和天然人干扰素beta相同。 (干扰素beta-1a)的推荐剂
量为30mcg，肌肉内注射每周一次。 作为30mcg的冻干粉小瓶或30mcg的预充式注
射器的形式，可以通过商业化途径获得。
(干扰素beta-1a)是166个氨基酸的糖蛋白，其预测分子量为约22,500道尔顿。其通过重组DNA技术，使用基因工程化的、被引入人干扰素beta基因的中国仓鼠卵巢细胞生产。
的氨基酸序列和天然人干扰素beta相同。 (干扰素beta-1a)的推荐剂
量为30mcg，肌肉内注射每周一次。 作为30mcg的冻干粉小瓶或30mcg的预充式注
射器的形式，可以通过商业化途径获得。
[0369] 干扰素beta 1a 和人类中天然发现的干扰素beta相同(例如干扰素beta Ia(SwissProt Accession No.P01574和gi:50593016))。干扰素beta的序列为：
[0370] MTNKCLLQIALLLCFSTTALSMSYNLLGFLQRSSNFQCQKLLWQLNGRLEYCLKDRM
[0371] NFDIPEEIKQLQQFQKEDAALTIYEMLQNIFAIFRQDSSSTGWNETIVENLLANVYHQIN
[0372] HLKTVLEEKLEKEDFTRGKLMSSLHLKRYYGRILHYLKAKEYSHCAWTIVRVEILRNF YFINRLTGYLRN(SEQ ID NO:275)。
[0373] 制造 的方法是本领域已知的。
[0374] 对使用本文所述方法鉴定的响应者的治疗，进一步涵盖具有与 基本相似的生物学活性的组合物(例如IFN beta 1a分子)当使用相似的方式施用时，可以达到与 相似的成功治疗。这类其它组合物包括，例如其它干扰素和片段、相似物、同
源物、衍生物以及具有大体相似生物学活性的天然变体。在一个实施方案中，所述INFβ试剂通过修饰来增加一个或多个药代动力学特性。例如INFβ试剂可以是修饰形式的干扰素1a，使其包括聚乙二醇化部分。聚乙二醇化形式的干扰素beta 1a描述于，例如Baker,D.P.等，(2006)Bioconjug Chem 17(1):179-88；Arduini,RM等，(2004)Protein Expr Purif 34(2):229-42；Pepinsky,RB等，(2001)J.Pharmacol.Exp.Ther.297(3):1059-66；Baker,D.P.等，(2010)J Interferon Cytokine Res30(10):777-85，其通过提述完整并入本文，且描述人干扰素beta 1a，在其N端alpha氨基酸修饰使其包括PEG部分，例如20kDa mPEG-O-2-甲基丙醛部分)。聚乙二醇化形式的IFN beta 1a可以通过例如可注射施用途径(例如皮下)施用。
源物、衍生物以及具有大体相似生物学活性的天然变体。在一个实施方案中，所述INFβ试剂通过修饰来增加一个或多个药代动力学特性。例如INFβ试剂可以是修饰形式的干扰素1a，使其包括聚乙二醇化部分。聚乙二醇化形式的干扰素beta 1a描述于，例如Baker,D.P.等，(2006)Bioconjug Chem 17(1):179-88；Arduini,RM等，(2004)Protein Expr Purif 34(2):229-42；Pepinsky,RB等，(2001)J.Pharmacol.Exp.Ther.297(3):1059-66；Baker,D.P.等，(2010)J Interferon Cytokine Res30(10):777-85，其通过提述完整并入本文，且描述人干扰素beta 1a，在其N端alpha氨基酸修饰使其包括PEG部分，例如20kDa mPEG-O-2-甲基丙醛部分)。聚乙二醇化形式的IFN beta 1a可以通过例如可注射施用途径(例如皮下)施用。
[0375] 也是一种干扰素β-1a试剂，而 以及是干扰素β-1b试剂。 和 制备为用于皮下注射施用的形式。
[0376] 本领域技术人员可以确定IFNβ试剂的施用剂量，包括基于使用的特定干扰素beta试剂，其临床可接受的施用量。例如， 典型施用在30微克每周，通过肌肉内注射。其它形式的干扰素beta 1a，特别是 施用在例如22微克每周三次或44微克每
周一次，通过皮下注射。干扰素beta-1A可以通过例如肌肉内施用，其量为10到50μg。例如，可以每五到十天施用，例如每周一次，而 可以每周施用三次。
周一次，通过皮下注射。干扰素beta-1A可以通过例如肌肉内施用，其量为10到50μg。例如，可以每五到十天施用，例如每周一次，而 可以每周施用三次。
[0377] 抗VLA4抗体(例如那他株单抗 )
[0378] 抗VLA4抗体(例如那他株单抗)抑制白细胞从血液中迁移到中枢神经系统。这些抗体结合活化的T细胞和其它单核白细胞表面的VLA-4(也称为α4βl)。其可以破坏T细胞和内皮细胞之间的粘附，因此阻止单核白细胞穿越内皮迁移进入薄壁组织(parenchyma)。作为结果，促炎症细胞因子的水平也被降低。那他株单抗可以降低患有复发缓解型(relapse remitting)多发性硬化症和复发二次进展型多发性硬化症患者中脑损伤的数量和临床复发以及失能的积累。
[0379] 那他株单抗和相关的VLA-4结合抗体描述于，例如美国专利号5,840,299。单克隆抗体21.6和HP1/2是示例性的结合VLA-4的鼠单克隆抗体。那他株单抗是鼠单克隆抗体21.6的人源化版本(见例如美国专利号5,840,299)。人源化版本的HP 1/2也有描述(见例如美国专利号6,602,503)。几个另外的VLA-4结合单克隆抗体，例如HP2/1、HP2/4、L25和P4C2描述于例如美国专利号6,602,503；Sanchez-Madrid等，(1986)Eur.J.Immunol16:1343-1349；Hemler等，(1987)J Biol.Chem.2:11478-11485；Issekutz等，(1991)J Immunol 147:109(TA-2mab)；Pulido等，(1991)J Biol.Chem.266:10241-10245；以及美国专利号5,888,
507)。上述出版物(包括抗体组合物、剂量、施用和生产方法)的内容经过提述完整并入本文。
507)。上述出版物(包括抗体组合物、剂量、施用和生产方法)的内容经过提述完整并入本文。
[0380] 富马酸二甲酯
[0381] 富马酸二甲酯，DMF， 是一种富马酸酯。DMF被认为减少白细胞穿过血脑屏障，并通过激活抗氧化通路，特别是激活Nrf-2通路(Lee等，(2008)Int MS Journal
15:12-18)，表现出神经保护的效果。研究也提示， 具有降低炎症细胞对CNS的活性和影响的潜能，并诱导CNS细胞中的直接细胞保护反应。这些效果可以增强CNS细胞减轻毒性炎症和氧化应激的能力，该能力在MS的病理生理学中发挥功能。
15:12-18)，表现出神经保护的效果。研究也提示， 具有降低炎症细胞对CNS的活性和影响的潜能，并诱导CNS细胞中的直接细胞保护反应。这些效果可以增强CNS细胞减轻毒性炎症和氧化应激的能力，该能力在MS的病理生理学中发挥功能。
[0382] 醋酸格拉替雷
[0383] (醋酸格拉替雷)组成为合成多肽的乙酸盐，特别是四种天然存在的氨基酸：L-谷氨酸、L-丙氨酸、L-酪氨酸和L-赖氨酸(Bornstein等，(1987)N Engl J Med.317:408-414)。 表现出和髓磷脂碱性蛋白的结构相似性，被认为通过将T
辅助细胞1类反应转变为T辅助细胞2类反应从而作为免疫调节因子发挥功能(Duda等，(2000)J Clin Invest 105:967-976；Nicholas等，(2011)Drug Design,Development,and Therapy 5:255-274)。
辅助细胞1类反应转变为T辅助细胞2类反应从而作为免疫调节因子发挥功能(Duda等，(2000)J Clin Invest 105:967-976；Nicholas等，(2011)Drug Design,Development,and Therapy 5:255-274)。
[0384] 米托蒽醌( 蒽二酮分子)
[0385] 米托蒽醌是一种蒽二酮分子(1,4-二羟基-5,8-双[2-(2-羟乙基氨基)乙基氨基]蒽-9,10-二酮)以及II类拓扑异构酶抑制剂，其抑制DNA合成和细胞修复。它用于治疗癌症和MS。米托蒽醌用于治疗几种进行形式的MS，包括继发性进展MS、进展性复发MS以及晚期的复发-缓解型MS。
[0386] 例如，米托蒽醌对于缓解继发性进展MS，以及延长复发-缓解型MS和进展性复发MS的复发间的时间是有效的(Fox E(2006)Clin Ther 28(4):461–74)。
[0387] 分戈莫德( 鞘氨醇-1-磷酸受体调控物)
[0388] 分戈莫德是一种免疫调节药物，被批准用于治疗MS。其将复发-缓解型多发性硬化症复发率降低超过一半，但可能具有严重的副作用。分戈莫德是一种鞘氨醇-1-磷酸受体调控物，其将淋巴细胞扣留在淋巴结中，阻止其移动到中枢神经系统用于MS中的自发免疫反应。
[0389] 针对T细胞IL-2受体alpha亚基的抗体(达利珠单抗； )
[0390] 针对T细胞IL-2受体alpha亚基的抗体，例如达利珠单抗，可以用于本文公开的方法和组合物。达利珠单抗是针对T细胞IL-2受体alpha亚基的治疗性人源化单克隆抗体。达利珠单抗对于不受干扰素控制的多发性硬化症患者中减少损伤和改善临床评分是有效的(Rose JW等，(2007).Neurology 69(8):785–789)。
[0391] 针对CD52的抗体，例如阿仑单抗
[0392] 针对CD52的抗体，例如阿仑单抗(现在作为 处于进一步开发中)，结合CD52，这一蛋白存在于成熟淋巴细胞而非干细胞的表面。III期研究报道了将阿仑单抗和(高剂量皮下干扰素beta-1a)相比，在治疗复发-缓解型MS(RRMS)患者中的阳性结
果。阿仑单抗在欧洲已经被批准。
果。阿仑单抗在欧洲已经被批准。
[0393] CD20抗体，例如ocrelizumab
[0394] CD20的抗体，例如ocrelizumab、利妥昔单抗(rituximab)、奥法木单抗(ofatumumab)，靶向成熟的B淋巴细胞。利妥昔单抗和ocrelizumab在复发-缓解型MS中的2期临床试验研究揭示了与安慰剂相比，在通过脑损伤测量(例如通过MRI扫描测量)的疾病活性和复发率中的统计学显著的降低。
[0395] 二氢乳清酸脱氢酶抑制剂，例如特立氟胺
[0396] 二氢乳清酸脱氢酶的抑制剂，例如特立氟胺，抑制嘧啶合成。特立氟胺(也被称为A77 1726)是来氟米特(leflunomide)的一种活性代谢产物。特立氟胺抑制快速分裂的细胞，包括被认为推动MS疾病进展的活化T细胞。特立氟胺作为治疗MS的药物正在临床试验中研究(VollmerEMS News(May 28,2009))。
[0397] 类固醇
[0398] 类固醇例如皮质类固醇以及ACTH试剂可以用于治疗复发-缓解型MS或继发性发展型MS的急性复发。这些试剂包括但不限于以及
[0399] 上述的一个或多个免疫调节剂可以与本文公开的修复剂联用，如下面更详细描述并通过IFN-b和抗LINGO-1抗体治疗的联用来示例的。
[0400] 治疗方法
[0401] 修复剂，例如LINGO-1拮抗剂，可以减缓通常发生于CNS神经元的NgR1介导的对神经轴突再生和树突分支的抑制。这对于CNS损伤后，脑部或脊髓中需要轴突修复和神经突出芽的情况是有益的。脊髓损伤，包括部分或完全粉碎或断绝，示例了其中需要轴突修复，但是通常经由NgR1通路的运转受到抑制的情况。脑部轴突延伸和/或神经突的出芽对其有益的疾病或病症的例子包括但不限于，中风、多发性硬化症(MS)以及其它神经退行性疾病或病症例如多发性硬化症，进行性多灶性白质脑病(leukoencephalopathy)(PML)，脑脊髓炎(EPL)，急性播散性脑脊髓炎(ADEM)，脑桥中央髓鞘溶解(central pontine myelolysis)(CPM)，光学视神经脊髓炎(neuromyelitis optics)(NMO)，肾上腺脑白质营养不良(adrenoleukodystrophy)，亚历山大病(Alexander's disease)，佩-梅氏病(Pelizaeus Merzbacher disease)(PMZ)，脑室周围白质软化(periventricular leukomalatia)(PVL)，球形细胞样脑白质病(Globoid cell Leucodystrophy)(克腊伯氏病)(Krabbe's disease)以及沃勒变性(Wallerian Degeneration)，视神经炎(例如急性视神经炎)，横贯性脊髓炎(transverse myelitis)，肌萎缩性脊髓侧索硬化症(amylotrophic lateral sclerosis)(ALS)，亨廷顿病，阿尔兹海默症，帕金森病，脊髓损伤、外伤性脑损伤、辐射后损伤、化疗神经并发症、中风、神经病、急性缺血型视神经病变、维他命B12缺乏、孤立的维生素E缺乏综合征、AR、巴-科综合征(Bassen-Kornzweig syndrome)、马-比二氏综合征(Marchiafava-Bignami syndrome)、异染性脑白质营养不良(metachromatic leukodystrophy)、三叉神经痛(trigeminal neuralgia)、贝尔氏麻痹(Bell's palsy)、脊髓损伤、外伤性青光眼(traumatic glaucoma)、特发性震颤(essential tremor)，渗透低钠血症(osmotic hyponatremia)，以及所有与神经细胞死亡有关的神经疾病。
[0402] LINGO-1表达于少突胶质细胞，并作用于少突胶质细胞的生物学。LINGO-1的可溶性衍生物、多核苷酸(例如RNAi)、以及特异性结合LINGO-1的某些抗体可以作为LINGO-1在少突胶质细胞中功能的拮抗剂，促进少突胶质细胞的增殖、分化和存活，在体外和体内促进神经元的髓鞘化。这对于治疗或预防涉及脱髓鞘和髓鞘功能障碍的疾病或病症是有益的。少突细胞的增殖、分化和存活，以及髓鞘化或髓鞘再生对其有益的疾病或病症的例子包括多发性硬化症(MS)、进行性多灶性白质脑病(leukoencephalopathy)(PML)，脑脊髓炎(EPL)，急性播散性脑脊髓炎(ADEM)，脑桥中央髓鞘溶解(central pontine myelolysis)(CPM)，肾上腺脑白质营养不良、光学视神经脊髓炎(neuromyelitis optics)(NMO)，亚历山大病(Alexander's disease)，佩-梅氏病(Pelizaeus Merzbacher disease)(PMZ)，球形细胞样脑白质病(Globoid cell Leucodystrophy)(克腊伯氏病)(Krabbe's disease)，沃勒变性(Wallerian Degeneration)，视神经炎(例如急性视神经炎)，脑室周围白质软化(periventricular leukomalatia)(PVL)，横贯性脊髓炎(transverse myelitis)，肌萎缩性脊髓侧索硬化症(amylotrophic lateral sclerosis)(ALS)，亨廷顿病，阿尔兹海默症，帕金森病，脊髓损伤、外伤性脑损伤、辐射后损伤、化疗神经并发症、中风、急性缺血型视神经病变、维他命B12缺乏、孤立的维生素E缺乏综合征、AR、巴-科综合征(Bassen-Kornzweig syndrome)、马-比二氏综合征(Marchiafava-Bignami syndrome)，异染性脑白质营养不良(metachromatic leukodystrophy)、三叉神经痛(trigeminal neuralgia)，外伤性青光眼(traumatic glaucoma)，渗透低钠血症(osmotic hyponatremia)以及贝尔氏麻痹(Bell's palsy)。
[0403] 因此，公开了用于治疗脊髓损伤，CNS神经细胞生长抑制相关的疾病或病症，少突胶质细胞生长或分化抑制相关的疾病或病症，以及涉及CNS神经元脱髓鞘或髓鞘功能障碍的疾病的方法，用于遭受这类损伤或疾病，或倾向于患这类病的受试者。所述方法包括向受试者施用有效量的修复剂，例如LINGO-1拮抗剂，单独或与免疫调节剂联合。
[0404] 在一个实施方案中，所述修复剂单独或联用，减轻了视神经炎症疾患(例如视神经炎，例如急性视神经炎(AON))的一种或多种症状。AON是一种视神经的炎症性疾病，通常发生于多发性硬化症中。AON由视神经的炎症性损伤造成，并表现为由于水肿、炎症以及包裹视神经和轴突的髓鞘损伤导致的视力丧失。作为AON的结果，视网膜神经纤维层和视网膜神经节细胞层有显著缺失。目前AON的治疗受限于使用高剂量的皮质类固醇的静脉内治疗，其加速水肿的分解，但不促进中枢神经细胞的髓鞘再生或提供CNS炎症性脱髓鞘中的神经轴突保护。因此，本文公开的修复剂可以单独或联合用于治疗这类视神经的炎症。
[0405] “治疗”或这个词的其它形式指代单独或与一种或多种症状管理药剂联用的联合疗法，施用于受试者例如MS患者，来阻碍疾病的进展、引起缓解、延长受试者的期待存活时间，和/或减少对医疗干预(例如住院)的需要。在那些受试者中，治疗可以包括但不限于抑制或减轻一个或多个症状，例如麻木、刺痛、肌肉无力；降低复发率或严重程度，减少硬化损伤的尺寸或数量；抑制或延迟新损伤的形成；延长生存期，或延长无进展生存期，和/或提高生活质量。
[0406] 除非另有特殊说明，本文使用的术语“阻止/预防”涵盖在受试者开始遭受复发之前发生和/或其抑制或减轻疾病的严重性的行为。
[0407] 除非另有特殊说明，本文使用的术语“管理”包含在已经遭受疾病的受试者中阻止疾病症状的进展，和/或在已经遭受疾病的受试者中延长停留在缓解期的时间。这一术语包含调节疾病的阈值、形成和/或持续时间，或改变患者对疾病的反应方式。
[0408] 除非另有特殊说明，本文使用的化合物的“治疗有效量”是在疾病的治疗或管理中，足够提供治疗益处或延期或最小化一个或多个疾病相关的症状的量。化合物的治疗有效量表示单独或与其它治疗剂联用的治疗剂的量，其在治疗或管理疾病中提供治疗益处。“治疗有效有效量”可以包含改善整体治疗、减轻或避免疾病的症状或成因，或增强另一治疗剂的治疗功效的量。
[0409] 除非另有特殊说明，本文使用的化合物的“预防有效量”是足够阻止疾病的复发，或一个或多个疾病相关症状，或阻止其再发的量。化合物的预防有效量表示单独或与其它治疗剂联合，在阻止疾病的复发中提供预防益处的化合物的量。术语“预防有效量”可以包含改善整体预防或增强另一预防试剂预防功效的量。
[0410] 本文所使用的术语“患者”或“受试者”典型的指人(例如任何年龄组的男人或女人，例如小儿患者(例如婴儿、儿童、青少年)或成年患者(例如青年、中年或老年))或其它哺乳动物，例如灵长类(例如食蟹猴、恒河猴)；经济相关的哺乳类动物例如牛、猪、马、山羊、绵羊、猫和/或狗，其将要或已作为治疗、观察和/或实验的客体。当这一术语与化合物或药物的施用结合使用时，则所述患者作为治疗、观察和/或化合物或药物施用的客体。
[0411] MS的治疗
[0412] 多发性硬化症(MS)是中枢神经系统疾病，其特点为炎症以及轴突和髓鞘的缺失。
[0413] 患有MS的受试者可通过建立临床确定MS的诊断的临床标准来鉴定该临床确定MS如Poser等，(1983)Ann.Neurol.13:227所定义。简单来说，患有临床确定MS的个体已具有两次发作，以及两处损伤的临床证据或一处损伤临床证据以及另一个单独损伤的近似临床证据。确定的MS也可以通过两次发作的证据和脑脊髓液中IgG的寡克隆带，或通过一次发作、两处损伤的临床证据以及脑脊髓液中IgG的寡克隆带的联合来诊断。McDonald标准也可以用于诊断MS。(McDonald等，(2001)Recommended diagnostic criteria for Multiple sclerosis:guidelines from the International Panel on the Diagnosis of Multiple Sclerosis,Ann Neurol 50:121-127)；Polman,CH等，(2005Dec).Diagnostic criteria for multiple sclerosis:2005revisions to the"McDonald Criteria"Annals of Neurology 58(6):840–6；Polman,C.H.等，(2011)Ann.Neurol.69(2):292-302)。所述McDonald标准包括当不存在多次临床发作时，使用随着时间推移的CNS损伤的MRI证据用于诊断MS。McDonald标准的进一步更新(Polman等，Annals of Neurology 2011)允许在发现特征性MRI损伤的基础上，在第一CNS脱髓鞘发作时诊断MS。多发性硬化症的有效治疗可以通过几种不同的方式评价。下述参数可以用于测量治疗的效力。两个示例性的标准包括：
EDSS(扩展失能状态量表)，以及MRI(磁共振成像)上恶化的出现。
EDSS(扩展失能状态量表)，以及MRI(磁共振成像)上恶化的出现。
[0414] 恶化定义为可归于MS的新症状的出现，并伴随着适当的新神经系统异常。另外，所述恶化必须持续至少24小时，并在此之前有至少30天的稳定或改善。简单的说，患者由临床医生给予标准的神经系统检查。根据神经系统计分量表的改变，例如斯克里普斯神经评定量表(Scripps Neurological Rating Scale)(Sipe等，(1984)Neurology 34:1368)；EDSS；或通过患者报告结局(例如MSWS-12)，恶化是轻度的、中度的或重度的。确定年度恶化率和非恶化患者的比例。
[0415] 使用临床测量，在治疗组和安慰剂组之间非恶化或非复发患者的比率或比例的任一项测量具有统计学显著差异，则疗法可以被视为有效。另外，也可以测量到第一次恶化的时间、恶化持续时间以及严重程度。在这方面，测量疗法的效力是在治疗组和安慰剂组中，到第一次恶化的时间或持续时间以及严重程度之间的统计学显著差异。非恶化或非复发期大于一年、18个月、20或24个月特别值得注意。临床测量包括在一到两年间隔期的复发率，以及EDSS的改变，包括EDSS上从基线恶化1.0单位前时间，其持续三到六个月。在Kaplan-Meier曲线上，对失能的持续进展的延迟表明有效。其它标准包括MRI上T2图面积和体积的改变，以及通过钆增强图像确定的损伤数量和体积。
[0416] 使用钆-DTPA-增强成像，MRI可用于测量活性损伤(McDonald等，Ann.Neurol.36:14,1994)，或使用T2-加权技术测量损伤的位置和程度。简单的说，获得基线MRIs。相同的成像平面和患者位置用于随后的每一项研究。可以选择定位和成像的顺序，来最大化损伤的探测和帮助损伤的追踪。相同的定位和成像顺序可以用于随后的研究。MS损伤的存在、位置和程度可以由放射科医生确定。损伤的面积可以描画轮廓并一片片相加获得总损伤面积。
可以做三种分析：新损伤的证据，出现活性损伤的比率，以及损伤面积的百分比变化(Paty等，(1993)Neurology 43:665)。疗法引起的改善可以通过对个体患者相比基线，或治疗组和安慰剂组之间的统计学显著改善来建立。
可以做三种分析：新损伤的证据，出现活性损伤的比率，以及损伤面积的百分比变化(Paty等，(1993)Neurology 43:665)。疗法引起的改善可以通过对个体患者相比基线，或治疗组和安慰剂组之间的统计学显著改善来建立。
[0417] 可以通过本文所述的方法治疗，或症状管理疗法管理的示例性多发性硬化症相关症状包括：视神经炎、视力下降、复视、眼球震颤(nystagmus)、眼辨距不良(ocular dysmetria)、核间性眼肌麻痹(internuclear ophthalmoplegia)，动作和声音幻视(movement and sound phosphenes)，瞳孔传入缺陷(afferent pupillary defect)，麻痹，单肢轻瘫(monoparesis)，下肢轻瘫(paraparesis)，轻偏瘫(hemiparesis)，四肢轻瘫(quadraparesis)，瘫痪，截瘫(paraplegia)，偏瘫(hemiplegia)，四肢瘫痪(tetraplegia)，四肢瘫痪(quadraplegia)，痉挛(spasticity)，构音障碍(dysarthria)，肌肉萎缩，肌痉挛(spasms)，抽筋，肌张力低下(hypotonia)，阵挛(clonus)，肌阵挛(myoclonus)，肌纤维震颤(myokymia)，不宁腿综合征(restless leg syndrome)，足下垂，反射功能失调，感觉异常(paraesthesia)，麻木(anaesthesia)，神经痛(neuralgia)，神经病理性和神经源性疼痛(neuropathic and neurogenic pain)，L'hermitte's，本体感觉障碍(proprioceptive dysfunction)，三叉神经痛(trigeminal neuralgia)，共济失调(ataxia)，意向性震颤(intention tremor)，辨距不良(dysmetria)，前庭性共济失调(vestibular ataxia)，眩晕，语音共济失调(speech ataxia)，肌张力障碍(dystonia)，轮替运动障碍
(dysdiadochokinesia)，频繁排尿，膀胱痉挛，弛缓性膀胱，逼尿肌括约肌协同失调(detrusor-sphincter dyssynergia)，勃起功能障碍，性快感缺乏(anorgasmy)，性冷淡(frigidity)，便秘，便急，大便失禁，抑郁，认知功能障碍，痴呆，情绪不稳，情绪不稳，欣快症(euphoria)，双极性综合征，焦虑，失语，吞咽困难，乏力，Uhthoff综合征，胃食管反流，以及睡眠病症。
(dysdiadochokinesia)，频繁排尿，膀胱痉挛，弛缓性膀胱，逼尿肌括约肌协同失调(detrusor-sphincter dyssynergia)，勃起功能障碍，性快感缺乏(anorgasmy)，性冷淡(frigidity)，便秘，便急，大便失禁，抑郁，认知功能障碍，痴呆，情绪不稳，情绪不稳，欣快症(euphoria)，双极性综合征，焦虑，失语，吞咽困难，乏力，Uhthoff综合征，胃食管反流，以及睡眠病症。
[0418] 每一例MS表现出一种或几种呈现和后续过程的模式。最常见的，MS首先显示出一系列的发作，随后随着症状的神秘减轻而完全或部分缓解，直到一段时间的稳定后回归。这被称为复发-缓解型MS(RRMS)。原发-进展型MS(PPMS)特点为逐渐的临床衰退，而没有明显的缓解，虽然可能有暂时的停滞时期或轻微的症状减轻。继发性进展型MS(SPMS)开始于一段复发-缓解的过程，随后一段不依赖于复发的进展过程。不常见的，患者可能具有一段进展-复发(PRMS)的过程，其中疾病进展的途径被间断的急性发作不时打断。PPMS、SPMS和PRMS有时候合在一起，称为慢性进展型MS。
[0419] 一些患者经历恶性MS，其定义为快速的不间断的衰退，导致在疾病发作后短时间内显著的失能或甚至死亡。这一衰退可以通过在治疗方案的早期确定患者对疗法响应的可能性，并将患者转换到其具有最高可能性响应的药剂来阻止或减慢。
[0420] 联合疗法
[0421] 本发明公开免疫调节剂，例如IFN-β药剂，例如 和修复剂，例如抗LINGO-1抗体分子的联合施用，用于脱髓鞘病症的治疗，例如MS。
[0422] 所述药剂，例如包含该药剂的药物组合物，可以与一个或多个其它另外疗法或治疗试剂同时施用、在其之前施用或在其后施用。一般来说，每种试剂可以根据其确定的剂量和/或时间表来施用。应当进一步理解的是，所述用于联合的另外的治疗试剂可以在单一组合物中一同施用，也可以在不同的组合物里分开施用。在方案中采用具体的联合需要考虑的是所述带有另外治疗活性试剂的药物组合物的相容性和/或要达到的期待治疗效果。一般来说，预计联合中使用的其它治疗试剂使用水平不超过当其单独使用的水平。在一些实施方案中，在联合中使用的水平比其单独使用的水平低。
[0423] 对患有疾病的受试者使用修复剂治疗，可以联合一种或多种免疫调节剂。示例性的免疫调节剂描述于本文中，包括但不限于，IFN-β1分子；谷氨酸、赖氨酸、丙氨酸和酪氨酸的聚合物，例如格拉默；针对α-4整联蛋白的抗体或其片段，例如那他株单抗；蒽醌分子，例如米托蒽醌；芬戈莫德，例如FTY720；富马酸二甲酯，例如口服的富马酸二甲酯；针对T细胞IL-2受体α亚基的抗体，例如达利珠单抗；针对CD52的抗体，例如阿仑单抗；二氢乳清酸脱氢酶的抑制剂，例如特立氟胺；皮质类固醇；和抗CD20抗体，例如ocrelizumab。
[0424] 在一个实施方案中，施用 和抗LINGO-1抗体的联合疗法。在某些实施方案中，除每周一次肌肉内(IM)注射 外，抗LINGO-1抗体可以约每四周(正负约5天)
通过静脉内(IV)输注施用一次。抗LINGO-1抗体治疗的剂量可以包括：IV输注：3mg/kg；或
10mg/kg；或30mg/kg；或50mg/kg或100mg/kg；与每周一次 IM注射同时施用。
通过静脉内(IV)输注施用一次。抗LINGO-1抗体治疗的剂量可以包括：IV输注：3mg/kg；或
10mg/kg；或30mg/kg；或50mg/kg或100mg/kg；与每周一次 IM注射同时施用。
[0425] 在一个实施方案中，选择抗LINGO-1抗体分子3mg/kg IV输注，每4周一次。这一方案期待达到与脊髓溶血卵磷脂模型中大鼠血清EC50相似的均值平均血清浓度(针对约0.1％的脑部渗透调整)。其它给药方案，10mg/kg和30mg/kg也可以被施用。这2个剂量方案期待分别达到比大鼠血清EC90(调整约0.1％的脑部渗透)约高1.2倍和3.7倍的均值平均血清浓度。
[0426] 在某些实施方案中，所述免疫调节剂是IFN-β1分子，通过静脉内、皮下或肌肉内施用。例如，所述IFNβ1分子可以通过以下一种或多种方案施用：
[0427] (i)20-45微克(例如30微克)，例如每周一次通过肌肉内注射；
[0428] (ii)20-30微克(例如22微克)，例如每周三次，或40-50微克(例如44微克)，例如每周三次，通过皮下注射；或
[0429] (iii)10到50微克的量，肌肉内施用，例如每周三次，或每5到10天一次，例如每周一次。
[0430] 在一个实施方案中， 30微克每周通过肌肉内注射施用。滴定后当可应用时， 可以根据本领域已知的剂量和施用时间表，通过IM注射施用。
[0431] 在一个实施方案中，所述IFN-β试剂，例如 通过注射设备施用，例如自动注射设备或笔。
[0432] 在一个实施方案中，所述抗LINGO-1抗体分子作为液体药物产品提供，其含有50mg/ml BIIB033(本文也指代具有包括SEQ ID NO:275氨基酸序列的VH和包括SEQ ID NO:
276氨基酸序列的VL的抗体分子)、10mM柠檬酸钠、160mM L-精氨酸盐酸盐(pH 6.5)以及
0.03％(每体积重量)聚山梨醇酯80。所述抗LINGO-1抗体分子分子可以在生理盐水稀释后，通过IV输注施用。
276氨基酸序列的VL的抗体分子)、10mM柠檬酸钠、160mM L-精氨酸盐酸盐(pH 6.5)以及
0.03％(每体积重量)聚山梨醇酯80。所述抗LINGO-1抗体分子分子可以在生理盐水稀释后，通过IV输注施用。
[0433] 在一个实施方案中，所述免疫调节剂是 其被制备为用于IM注射的无菌透明液体。预填充的玻璃注射器中每0.5毫升Avonex包含30mcg干扰素β-1a。其它成分包括乙酸钠三水合物、冰醋酸、精氨酸盐酸盐和聚山梨醇酯20，溶于注射用水，pH约为4.8。所述免疫调节剂，例如 可以通过任意合适的方式施用，例如笔或其它设备。
[0434] 症状管理
[0435] 使用本文所述的联合疗法治疗受试者，可以与一个或多个以下常用于患有MS的受试者的症状管理的疗法联合： (卡马西平)(carbamazepine)、 (卡马西平)、 (卡马西平)、 (卡马西平)、 (加巴喷丁)
(gabapentin)、 (托吡酯)(topiramate)、 (唑尼沙胺)
(zonisamide)、 (苯妥英)(phenytoin)、 (去郁敏)(desipramine)、
(阿米替林)(amitriptyline)、 (丙咪嗪)(imipramine), (丙
咪嗪)、 (丙咪嗪)、 (多虑平)(doxepine)、 (多虑平)、
(多虑平)、 (多虑平)、 (普罗替林)(protriptyline)、
(合成大麻素)(synthetic cannabinoids)、 (己酮可可碱)
(pentoxifylline)、 (布洛芬)(ibuprofen)、阿司匹林、对乙酰氨基酚
(acetaminophen)、 (羟嗪)(hydroxyzine)、 (氟西汀)(fluoxetine)、
(舍曲林)(sertraline)、 (舍曲林)、Effexor (万拉法新)
(venlafaxine)、 (西酞普兰)(citalopram)、 (曲
唑酮)(trazodone)、 (曲唑酮)、 (去甲替林)(nortriptyline)、
(丙咪嗪)(imipramine)、 (度硫平)(dothiepin)、 (洛
菲帕明)(lofepramine)、 (强内心百乐明)(tranylcypromine)、 (吗氯
贝胺)(moclobemide)、 (吗氯贝胺)、Wellbutrin (安非他酮)(bupropion)、
(安非他酮)、 (奈法唑酮)(nefazodone)、 (米氮
平)(mirtazapine)、 (唑吡坦)(zolpidem)、 (阿普唑仑)(alprazolam)、
(羟基安定)(temazepam)、 (安定)(diazepam)、 (丁螺环酮)
(buspirone), (金刚烷胺)(amantadine)、 (匹莫林)(pemoline)、
(莫达非尼)(modafinil)、Ditropan (奥西布林)(oxybutynin)、
(去氨加压素、加压素)(desmopressin,vasopressin)、 (托特罗定)
(tolterodine)、 (氨甲酰甲胆碱)(bethane)、 (酚苄明)
(phenoxybenzamine)、 (特拉唑嗪)(terazosin)、 (普鲁本辛)
(propantheline)、 (莨菪碱)(hyoscyamine)、 (莨菪碱)、
(巴氯芬)(baclofen)、 (乌洛托品)(methenamine)、 (乌洛托
品)、 (呋喃咀啶)(nitrofurantoin), (非那吡啶)
(phenazopyridine)、 (环丙沙星)(ciprofloxacin)、 (比沙可啶)
(bisacodyl)、 (比沙可啶)、 (甘油)(glycerin)、
(车前子亲水胶浆)(psyllium hydrophilic mucilloid)、Fleet (磷酸钠)
(sodium phosphate)、 (多库酯钠)(docusate)、Therevac (氯
硝西泮)(clonazepam)、 (氯硝西泮)、 (丹曲林钠)(dantrolen
sodium)、 (氯压定)(clonidine)、 (肉毒杆菌毒素)(botulinum
toxin)、 (肉毒杆菌毒素)、 (替扎尼定)(tizanidine)、
(替扎尼定)、 (普里米酮)(primidone)、 (乙酰唑胺)
(acetozolamide)、 (左旋多巴、卡比多巴)(levodopa,carbidopa)、
(异烟肼)(isoniazid)、 (异烟肼)、 (氯苯甲嗪)(meclizine)、
(氯苯甲嗪)、 (乘晕宁)(dimenhydrinate)、 (普
鲁氯嗪)(prochlorperazine)、 (莨菪碱)(scopolamine)、 (苯海
拉明)(diphenhydramine)、 (那他株单抗)(natalizumab)、 (阿
仑单抗)(alemtuzumab)、 (4-氨基吡啶)、 (IV免疫球蛋白)、
(IV免疫球蛋白)、Gamimune (IV免疫球蛋白)、 (IV免疫球蛋
白)、 (IV免疫球蛋白) 、 (IV免疫球蛋白) 、
(IV免疫球蛋白)、普瑞巴林(pregabalin)、齐考诺肽(ziconotide),
Badofen以及
(gabapentin)、 (托吡酯)(topiramate)、 (唑尼沙胺)
(zonisamide)、 (苯妥英)(phenytoin)、 (去郁敏)(desipramine)、
(阿米替林)(amitriptyline)、 (丙咪嗪)(imipramine), (丙
咪嗪)、 (丙咪嗪)、 (多虑平)(doxepine)、 (多虑平)、
(多虑平)、 (多虑平)、 (普罗替林)(protriptyline)、
(合成大麻素)(synthetic cannabinoids)、 (己酮可可碱)
(pentoxifylline)、 (布洛芬)(ibuprofen)、阿司匹林、对乙酰氨基酚
(acetaminophen)、 (羟嗪)(hydroxyzine)、 (氟西汀)(fluoxetine)、
(舍曲林)(sertraline)、 (舍曲林)、Effexor (万拉法新)
(venlafaxine)、 (西酞普兰)(citalopram)、 (曲
唑酮)(trazodone)、 (曲唑酮)、 (去甲替林)(nortriptyline)、
(丙咪嗪)(imipramine)、 (度硫平)(dothiepin)、 (洛
菲帕明)(lofepramine)、 (强内心百乐明)(tranylcypromine)、 (吗氯
贝胺)(moclobemide)、 (吗氯贝胺)、Wellbutrin (安非他酮)(bupropion)、
(安非他酮)、 (奈法唑酮)(nefazodone)、 (米氮
平)(mirtazapine)、 (唑吡坦)(zolpidem)、 (阿普唑仑)(alprazolam)、
(羟基安定)(temazepam)、 (安定)(diazepam)、 (丁螺环酮)
(buspirone), (金刚烷胺)(amantadine)、 (匹莫林)(pemoline)、
(莫达非尼)(modafinil)、Ditropan (奥西布林)(oxybutynin)、
(去氨加压素、加压素)(desmopressin,vasopressin)、 (托特罗定)
(tolterodine)、 (氨甲酰甲胆碱)(bethane)、 (酚苄明)
(phenoxybenzamine)、 (特拉唑嗪)(terazosin)、 (普鲁本辛)
(propantheline)、 (莨菪碱)(hyoscyamine)、 (莨菪碱)、
(巴氯芬)(baclofen)、 (乌洛托品)(methenamine)、 (乌洛托
品)、 (呋喃咀啶)(nitrofurantoin), (非那吡啶)
(phenazopyridine)、 (环丙沙星)(ciprofloxacin)、 (比沙可啶)
(bisacodyl)、 (比沙可啶)、 (甘油)(glycerin)、
(车前子亲水胶浆)(psyllium hydrophilic mucilloid)、Fleet (磷酸钠)
(sodium phosphate)、 (多库酯钠)(docusate)、Therevac (氯
硝西泮)(clonazepam)、 (氯硝西泮)、 (丹曲林钠)(dantrolen
sodium)、 (氯压定)(clonidine)、 (肉毒杆菌毒素)(botulinum
toxin)、 (肉毒杆菌毒素)、 (替扎尼定)(tizanidine)、
(替扎尼定)、 (普里米酮)(primidone)、 (乙酰唑胺)
(acetozolamide)、 (左旋多巴、卡比多巴)(levodopa,carbidopa)、
(异烟肼)(isoniazid)、 (异烟肼)、 (氯苯甲嗪)(meclizine)、
(氯苯甲嗪)、 (乘晕宁)(dimenhydrinate)、 (普
鲁氯嗪)(prochlorperazine)、 (莨菪碱)(scopolamine)、 (苯海
拉明)(diphenhydramine)、 (那他株单抗)(natalizumab)、 (阿
仑单抗)(alemtuzumab)、 (4-氨基吡啶)、 (IV免疫球蛋白)、
(IV免疫球蛋白)、Gamimune (IV免疫球蛋白)、 (IV免疫球蛋
白)、 (IV免疫球蛋白) 、 (IV免疫球蛋白) 、
(IV免疫球蛋白)、普瑞巴林(pregabalin)、齐考诺肽(ziconotide),
Badofen以及
[0436] 用于评估 和抗LINGO-1抗体分子联合疗法的临床测试/评估
[0437] 对于所述疗法在任意受试者中的疗效终点可以通过本领域已知的测试或评估方法来评价。例如，对于RRMS患者，对所示受试者的评价可以通过使用EDSS获取受试者的状态。在其它实施方案中，当受试者患有进展形式的MS，例如SPMS或PPMS，除了使用EDSS获取受试者的状态之外，可以通过获得对上肢和/或下肢的功能，和/或步行功能的测量，例如短距离步行功能评价受试者。在某些实施方案中，可以进行下肢步行功能的评估(例如计时步行25英尺(T2FW))，和/或上肢功能的评估(例如9孔柱测试(9HP))。
[0438] 其它的可以被评价的示例性疗效终点包括以下一项或多项。
[0439] 疗效终点
[0440] 示例性主要终点
[0441] 如通过包含扩展失能状态量表(EDSS)、计时25英尺步行(T25FW)、9孔柱测试(9HPT)以及(3秒)同步听觉系列加法测试(Paced Auditory Serial Addition Test)(PASAT)的复合终点测量的，可以对受试者评估确认的神经体格(neurophysical)和/或认知功能在治疗中的改善。
[0442] 神经体格和/或认知功能的改善可以通过以下至少一项来定义：
[0443] a)EDSS中从≤6.0的基线分数下降≥1.0分(下降持续3个月或更长)；
[0444] b)T25FW中从基线处改善≥15％(改善持续3个月或更长)；
[0445] c)9HPT中从基线处改善≥15％(改善持续3个月或更长)；以及
[0446] d)PASAT中从基线处改善≥15％(改善持续3个月或更长)。
[0447] 示例性次要终点
[0448] 如通过EDSS、T25FW、9HPT和PASAT的复合终点测量的，可以对受试者评价确认的神经体格和/或认知功能和/或失能治疗的恶化。失能的进展或神经体格和/或认知功能的恶化通过以下至少一项定义：
[0449] a)EDSS中从≤5.5的基线分数增加≥1.0分，或从等于6.0分的基线分数增加≥0.5分(增加持续3个月或更长)；
[0450] b)T25FW中从基线处恶化≥15％(改善持续3个月或更长)；
[0451] c)9HPT中从基线处恶化≥15％(改善持续3个月或更长)；以及
[0452] d)PASAT中从基线处恶化≥15％(改善持续3个月或更长)。
[0453] 其它临床疗效终点
[0454] 在某些实施方案中，受试者可以使用另外的临床测量来评价，包括：
[0455] a)如通过MS认知复合终点测量的认知功能从基线处的改变，该复合终点包含2个处理速度的测试(PASAT和符号数学模式测试(the Symbol-Digit Modalities Test)[SDMT])和2个记忆学习测试(对于语言记忆的选择性提醒测试(Selective Reminding Test)[SRT]和对于视觉记忆的简明视觉空间记忆测试修订版(Visuospatial Memory Test-Revised)[BVMT-R])；
[0456] b)如通过斯克里普斯神经评定量表(SNRS)确定的临床复发的严重性；和/或
[0457] c)在六分钟步行(6MW)步行时间中从基线处恶化≥10％(例如≥15％,≥20％,≥30％)(恶化持续3个月或更久)。
[0458] 示例性MRI疗效终点
[0459] 脑部MRI分析集中于对新生和已存在损伤在病灶和弥散水平修复的测量，可以包括以下一或多项：
[0460] (i)对新生脑损伤的分析：
[0461] a)百分比的Gd损伤体积，伴随磁化转移率(MTR)的增加或减少；
[0462] b)从发作起新Gd损伤均值MTR相对于正常表现脑白质(NAWM)的变化，以每受试者的损伤作为测量单位；
[0463] c)从发作起MTR信号每扫描体素的变化，其MTR下降到低于正常值(新MTR损伤)，以受试者为测量单位；
[0464] d)从发作起新Gd损伤径向扩散的变化，以受试者为测量单位。
[0465] e)从发作起径向扩散每扫描体素的变化，其MTR下降到低于正常值(新MTR损伤)，以受试者为测量单位；或
[0466] f)从新Gd脑损伤向慢性黑洞(chronic black hole)的转化百分比，慢性黑洞定义为在发作至少6个月后，T1低信号仍然可见。
[0467] (ii)对已存在脑损伤的分析(在基线扫描中呈现的损伤)：
[0468] a.对于异常T1体积，MTR从基线处的变化；
[0469] b.对于异常T2体积，MTR从基线处的变化；
[0470] c.对于与T1低信号不相关的异常T2体积，MTR从基线处的变化；
[0471] d.对于异常T1体积，弥散张量成像(DTI)从基线处的变化；
[0472] e.对于异常T2体积，DTI从基线处的变化；或
[0473] f.对于与T1低信号不相关的异常T2体积，DTI从基线处的变化。
[0474] (iii)对弥散性脑MRI指标的分析：
[0475] a)脑体积变化的百分比；
[0476] b)脑大脑皮层体积从基线处的变化；
[0477] c)丘脑体积从基线处的变化；或
[0478] d)整脑径向弥散从基线处的变化。
[0479] 示例性的患者报告结果(PROs)疗效终点
[0480] 在某些实施方案中，受试者可以通过患者报告结果来评价，包括以下一项或多项：
[0481] a)12项多发性硬化症步行量表(12-Item Multiple Sclerosis Walking Scale)(MSWS-12)。
[0482] b)ABILHAND 56项问卷(ABILHAND 56-Item Questionnaire)。
[0483] c)29项多发性硬化症影响量表(29-Item Multiple Sclerosis Impact Scale)(MSIS-29)。
[0484] d)健康状况调查简表-36(The Short Form(36)Health Survey)(SF-36)。
[0485] e)MSNQ-被调查者和MSNQ-患者。
[0486] 疗效终点分析
[0487] 一般分析方法
[0488] 可以呈现汇总统计数据。对于连续终点，汇总统计数据一般包括：随机或给药的受试者数；或有数据的受试者数、均值、SD、中值和范围。对于分类终点，所述汇总统计数据一般包括：随机或给药的受试者数；在每个类别中有数据的受试者数，或有数据的受试者的百分比。
[0489] 主要终点分析
[0490] 主要功效终点可以包括在复合终点的一个或多个组分(EDSS、T25FW、9HPT或PASAT)中具有确认的临床改善的受试者百分比。确认的改善者百分比可以通过治疗组呈现，其数据通过逻辑回归模型分析。确认改善的时间可以通过使用Cox比例风险模型分析。基线EDSS、T25FW、9HPT(惯用手和非惯用手)、PASAT以及分层因素可以作为协变量包括在逻辑回归和Cox模型中。如果进行了2项基线EDSS评估，较高的EDSS分数可以用于分析。MRI活性也可以作为潜在协变量考察。
[0491] 次要终点分析
[0492] 次要功效终点可以包括在复合终点的一个或多个组分(EDSS、T25FW、9HPT或PASAT)中具有确认的临床恶化的受试者百分比。确认的恶化者的百分比可以通过治疗组表现，其数据通过逻辑回归模型分析。到确认恶化前的时间可以通过使用Cox比例风险模型分析。基线EDSS、T25FW、9HPT(惯用手和非惯用手)、PASAT以及分层因素可以作为协变量包括在逻辑回归和Cox模型中。如果进行了2项基线EDSS评估，较高的EDSS分数可以用于分析。MRI活性也可以作为潜在协变量考察。
[0493] 考察终点分析
[0494] 考察终点可以包括临床指标、MRI指标以及PRO变量。其可以通过呈现连续变量的概括数据、或分类变量的频率分布总结。统计方法的使用依赖于变量的性质。二进制变量可以通过使用逻辑回归模型分析；连续变量可以通过使用协方差分析模型分析，调整相应的基线和分层因素。事件前时间变量可以使用Cox比例风险模型分析，通过调整相应的基线和分层因素。计数变量可以通过负二项回归模型或维克生秩和检验(Wilcoxon rank-sum test)分析。
[0495] 步行评估
[0496] T25FW
[0497] T25FW是25英尺计时步行。T25FW是对在短距离量化步行能力的测试，对应主要是严重失能受试者的恶化，例如EDSS步骤6-6.5。其可以用于下肢功能的量化测量。广泛的说，所述患者被引导到一段清晰标注的25-英尺道路的一端，并被指示尽快但安全的步行25英尺。所述任务可以通过使患者步行回到相同的距离立即再次进行。在完成T25W时，患者可以使用辅助设备。通常使用3分钟的时间限制用于完成所述测试。如果患者在5分钟的休息期间后无法完成T25W试验2，或如果患者无法在3分钟之内完成试验，则测试停止。
[0498] 9HP
[0499] 9HP是9孔-柱测试。这是一种获取不通过EDSS或T2FW测量的上肢(例如手臂和手)功能的重要临床方面的量化测试。不像EDSS和T25FW，9HP对应广泛的EDSS范围。广泛的说，患者被要求只用他们的手捡起9个柱子，每次一个，然后将柱子尽可能快的放入柱插版的孔中，直到所有孔都被填上。然后患者必须不停下来的将柱子每次一个移出，并尽快将其归还到容器中。惯用手和非惯用手各测试两次(惯用手两次连续试验接着立即用非惯用手两次连续试验)。通常使用5分钟的限制时间完成测试。如果患者无法在5分钟内完成一个9HP试验，则测试停止；如果患者无法使用其惯用手在5分钟内完成一个试验，通常要求患者移到使用非惯用手的试验。
[0500] 6MW
[0501] 6分钟步行测试(6MW)用于评估步行距离。广泛的说，患者被要求不使用实物辅助，用可能的最快速度步行6分钟，测量其距离。可以使用辅助设备，但应当在测试之间保持一致性并记录下来。如果可能，患者应该连续步行，但在测试中，患者可以减慢停下来或休息。
[0502] SNRS
[0503] 斯克里普斯神经评定量表(SNRS)测量几个参数，包括心理状态和情绪；眼和相关颅神经，例如视力、视野、眼球活动、眼球震颤；后组颅神经；每一支肢端的运动功能，例如右上、左上、右下、左下；深腱反射，例如上肢、下肢；巴宾斯基征(Babinski sign)，例如左侧、右侧；每一肢端的感知功能，例如右上、左上、右下、左下；小脑症候，例如上肢、下肢；以及步态躯干平衡，例如特殊种类的自主神经功能障碍，例如膀胱功能障碍、性功能障碍。
[0504] EDSS
[0505] 如上所述，EDSS基于标准化的神经系统检查，集中于常发生在MS中的症状。所述EDSS通过神经系统检查评估七个功能系统：视觉、脑干、椎体、小脑、感知、肠/膀胱和大脑。另外EDSS也包括步行范围的评估。EDSS步骤的确定基于功能系统分数以及步行范围。EDSS的范围包括从1到10的19个步骤，EDSS步骤0对应完全正常的检查，而EDSS步骤10对应由于MS的死亡。对于EDSS 0到4之间的计分，所述量表主要依赖FS个体的分数。对于大于4分的计分，EDSS主要通过步行能力和范围确定。
[0506] 患者报告结果评估
[0507] MSWS-12
[0508] 12项多发性硬化症步行量表(MSWS-12)测试是步行能力的自计分测量。所述测试包括12个问题和李克特式(Likert-type)反应，描述MS对步行的影响。这些问题来自于30个MS患者的采访、专家意见，以及文献综述。
[0509] ABILHAND 56项调查问卷
[0510] ABILHAND 56项调查问卷是对动手能力的测量，其设计为测量患者在进行日常任务，例如喂食、穿衣或管理任务中经历的问题。ABILHAND包含56项无偏见的，双手的活动，患者被要求在四级的量表上评判：0＝不可能，1＝非常困难，2＝困难，3＝简单。
[0511] MSIS-29
[0512] 29项多发性硬化症影响量表(MSIS-29)是一种29项自我报告评分量表，其测量MS的生理和心理参数。其中三项涉及有限能力，而其余26项与疾病症状或结果的影响相关。20项涉及生理功能。回答使用从1到5的5分李克特量表。
[0513] SF-36
[0514] 健康状况调查简表-36(SF-36)测试测量与生活质量相关的整体健康。SF-36是有结构的自我报告问卷，患者一般可以在医生很少或不干预下完成。SF-36没有单一的整体分数，相反其产生8个分量表和两个总结分数。所述的8个分量表包括生理功能、由于生理问题的职业限制、身痛、一般健康感、活力、社会功能、由于情绪问题的职业限制、以及精神健康。所述两个总结分数包括身体部分的总结和精神健康部分的总结。
[0515] 认知测试评估
[0516] 几种认知测试手段可以用于确定复合参数的值，如下。
[0517] 符号数字模式测试(SDMT)
[0518] SDMT是用于评价处理速度和工作记忆的测试，其中给受试者90秒以基于参考索引(reference key)来将特定的数字和所给的几何模型(figure)配对。其模仿数字符号或编码任务(the Digit Symbol or Coding Tasks)测试，已经列入威克斯勒智力量表多年(例如Wechsler等，(1974)Manual for the Wechsler Intelligence Scale for Children-Revised.New York:Psychological Corporation；Wechsler等，(1981)WAIS-R Manual.New York:Psychological Corporation)。认识到一些患者的手灵巧度有限制，Rao及同事修改了SDMT，使得其仅包括口头的回答(Rao等，(1991)Neurology 41:685-691)。在本发明选择的这个口头SDMT里，提供参与者一个8.5×11英寸的表单，其包含需要处理的数字和符号。刺激的顶行包括九个符号，其中每一个都与索引中的单个数字配对。页面的其余部分有这些符号的伪随机序列，而参与者的任务是尽可能快地口头回答与每一个符号相关的数字。
分数是在90秒的时间范围内，受试者做出正确配对(从110个中)的总数。
分数是在90秒的时间范围内，受试者做出正确配对(从110个中)的总数。
[0519] 在MS受试者中建立了良好的测试-重测信度(r＝0.93-0.97,p<.001)(Benedict等，(2006)Journal of the International Neuropsychological Society 12:549-558；Benedict等，(2008)Multiple Sclerosis 14:940-946)。对于区分MS患者和正常对照(d＝
1.0-1.5,p<.001)(见例如Deloire等，(2005)Journal of Neurology,Neurosurgery&Psychiatry 76:519-526；Benedict等，(2006)Journal of the International
Neuropsychological Society 12:549-558；Houtchens等，(2007)Neurology 69:113-123；
Strober等，(2009)Multiple Sclerosis 15:1077-1084；Parmenter等，(2010)J Int Neuropsychol Soc 16:6-16)以及区分RRMS和SPMS患者(d＝0.8,p<0.001)(见Benedict等，(2006)Archives of Neurology 63:1301-1306)的良好辨别效度也已经确认。另外，也记录了表现与脑部MRI之间的相关性(见例如Benedict等，(2007)Multiple Sclerosis 13:722-
730；Houtchens等，(2007)Neurology 69:113-123；Tekok-Kilic等，(2007)NeuroImage 36:
1294-1300)。
1.0-1.5,p<.001)(见例如Deloire等，(2005)Journal of Neurology,Neurosurgery&Psychiatry 76:519-526；Benedict等，(2006)Journal of the International
Neuropsychological Society 12:549-558；Houtchens等，(2007)Neurology 69:113-123；
Strober等，(2009)Multiple Sclerosis 15:1077-1084；Parmenter等，(2010)J Int Neuropsychol Soc 16:6-16)以及区分RRMS和SPMS患者(d＝0.8,p<0.001)(见Benedict等，(2006)Archives of Neurology 63:1301-1306)的良好辨别效度也已经确认。另外，也记录了表现与脑部MRI之间的相关性(见例如Benedict等，(2007)Multiple Sclerosis 13:722-
730；Houtchens等，(2007)Neurology 69:113-123；Tekok-Kilic等，(2007)NeuroImage 36:
1294-1300)。
[0520] 同步系列加法测试(Paced Serial Addition Test)(PASAT)
[0521] PASAT首先由Gronwall等人开发用来评估患者从脑震荡中的恢复，其要求患者监控一系列61个数字录音，同时将每个连续数字加到其紧跟的前一位(Gronwall等，(1977)Perceptual and Motor Skills 44:367-373)。PASAT要求快速信息处理，同时将注意力分配到两个任务中，以及合理完整的计算能力。在其原始形式中，PASAT以四个刺激间间隔进行(2.4秒、2.0秒、1.6秒和1.2秒)。刺激间间隔的数量和呈现率后来被Rao及其同事修改为3.0秒和2.0秒用于MS患者(Rao等，(1991)A Manual for the Brief,Repeatable Battery of Neuropsychological Tests in Multiple Sclerosis:National Multiple Sclerosis Society；Rao等，(1991)Neuropsychological Screening Battery for Multiple
Sclerosis:National Multiple Sclerosis Society；Rao等，(1991)Neurology 41:685-
691；Rao等，(1991)Neurology 41:692-696)。
Sclerosis:National Multiple Sclerosis Society；Rao等，(1991)Neurology 41:685-
691；Rao等，(1991)Neurology 41:692-696)。
[0522] 这一测试的后续版本被选为MS功能复合(MSFC)和MACFIMS群(battery)的组分(Benedict等，(2002)Clinical Neuropsychologist 16:381-397)。在MS群体中的测试-重测信度从r＝0.78到0.93(Benedict等，(2006)Journal of the International Neuropsychological Society 16:228-237；Drake等，(2010)Multiple Sclerosis 16:
228-237)。对于区分MS患者和正常对照(d＝0.5-0.7,p<0.001to 0.34)(Deloire等，(2005)Journal of Neurology,Neurosurgery & Psychiatry 76:519-526；Benedict等，(2006)Journal of the International Neuropsychological Society 12:549-558；Houtchens等，(2007)Neurology 69:113-123；Strober等，(2009)Multiple Sclerosis 15:1077-
1084；Parmenter等，(2010)J Int Neuropsychol Soc 16:6-16；Drake等，(2010)Multiple Sclerosis 16:228-237)以及区分RRMS和SPMS患者(d＝0.8,p<0.001)(d＝0.5,p<0.002)(Benedict等，(2006)Archives of Neurology 63:1301-1306)的良好辨别效度已经确认。
感兴趣的PASAT分数是在每一个呈现速率的正确反应的总数。PASATRao版本的两种备选形式可用并选择于本发明中(PASAT3”和PASAT2”)。在PASAT 3”中，刺激每3秒呈现，而在PASAT
2”中，刺激每2秒呈现。
228-237)。对于区分MS患者和正常对照(d＝0.5-0.7,p<0.001to 0.34)(Deloire等，(2005)Journal of Neurology,Neurosurgery & Psychiatry 76:519-526；Benedict等，(2006)Journal of the International Neuropsychological Society 12:549-558；Houtchens等，(2007)Neurology 69:113-123；Strober等，(2009)Multiple Sclerosis 15:1077-
1084；Parmenter等，(2010)J Int Neuropsychol Soc 16:6-16；Drake等，(2010)Multiple Sclerosis 16:228-237)以及区分RRMS和SPMS患者(d＝0.8,p<0.001)(d＝0.5,p<0.002)(Benedict等，(2006)Archives of Neurology 63:1301-1306)的良好辨别效度已经确认。
感兴趣的PASAT分数是在每一个呈现速率的正确反应的总数。PASATRao版本的两种备选形式可用并选择于本发明中(PASAT3”和PASAT2”)。在PASAT 3”中，刺激每3秒呈现，而在PASAT
2”中，刺激每2秒呈现。
[0523] 选择性提醒测试(SRT)
[0524] SRT首先由在顺行性遗忘(anterograde amnesia)领域进行研究的Buschke等人开发(见Buschke等，(1974)Neurology 24:1019-1025)。不要求患者在每个连续学习试验中回忆全部的单词表，实验者只重复在每个连续学习试验中不记得的单词。接着，几个记忆研究者为这个测试开发了标准化数据以及备选形式。注意原始的版本基于使用15个单词和12个学习测试的形式。这类实施艰巨而费时，因此对于简短版本的SRT有很大的兴趣。在MS研究中广泛使用的实施步骤是Rao等人开发的6-测试形式(见例如Rao等，(1991)A Manual for the Brief,Repeatable Battery of Neuropsychological Tests in Multiple Sclerosis:National Multiple Sclerosis Society；Rao等，(1991)Neuropsychological Screening Battery for Multiple Sclerosis:National Multiple Sclerosis Society；
Rao等，(1991)Neurology 41:685-691；Rao等，(1991)Neurology 41:692-696)。本发明使用这一6-测试形式。存在一些不同版本的SRT单词表。本发明使用Hannay和Levin成人单词表，测试表1和3(Hannay等，(1985)J Clin Exp Neuropsychol.7:251-263)。在几项研究中建立了SRT的判别效度，SRT区分MS受试者和正常对照d＝0.6到d＝1.0(见例如Rao等，(1991)A Manual for the Brief,Repeatable Battery of Neuropsychological Tests in
Multiple Sclerosis:National Multiple Sclerosis Society；Deloire等，(2005)Journal of Neurology,Neurosurgery&Psychiatry 76:519-526；Strober等，(2009)Multiple Sclerosis 15:1077-1084)。已有证明SRT的发现可以和脑部MRI中看到的脑室扩大相关(R2＝0.14；p＝0.05)(Christodoulou等，(2003)Neurology 60:1793-1798)。
Rao等，(1991)Neurology 41:685-691；Rao等，(1991)Neurology 41:692-696)。本发明使用这一6-测试形式。存在一些不同版本的SRT单词表。本发明使用Hannay和Levin成人单词表，测试表1和3(Hannay等，(1985)J Clin Exp Neuropsychol.7:251-263)。在几项研究中建立了SRT的判别效度，SRT区分MS受试者和正常对照d＝0.6到d＝1.0(见例如Rao等，(1991)A Manual for the Brief,Repeatable Battery of Neuropsychological Tests in
Multiple Sclerosis:National Multiple Sclerosis Society；Deloire等，(2005)Journal of Neurology,Neurosurgery&Psychiatry 76:519-526；Strober等，(2009)Multiple Sclerosis 15:1077-1084)。已有证明SRT的发现可以和脑部MRI中看到的脑室扩大相关(R2＝0.14；p＝0.05)(Christodoulou等，(2003)Neurology 60:1793-1798)。
[0525] 简明视觉空间记忆测试修订版(BVMT-R)
[0526] BVMT-R基于开发按照韦氏记忆量表的视觉再生子测试的等效替代形式的视觉记忆测试的初步努力(Benedict等，(1993)Neuropsychological Rehabilitation 3:37-51；Benedict等，(1995)Clinical Neuropsychologist 9:11-16；Wechsler等，(1987)Wechsler Memory Scale-Revised Manual.New York:Psychological Corporation)。最初，所述BVMT包括只单次接触六个视觉设计的单页报告。修订版本包括对刺激进行三次10秒接触
(Benedict等，(1997)Brief Visuospatial Memory Test-Revised:Professional
Manual.Odessa,Florida:Psychological Assessment Resources,Inc.；Benedict等，(1996)Psychological Assessment 8:145-153)。在每一次接触后，受试者被要求使用铅笔在空白的纸单上重现矩阵。对于精确度和位置有严格的计分标准。在25分钟延时后，所述患者被要求再次重现信息而不再一次接触。最后提出是/否的识别任务。BVMT-R具有极好的再现性，其测试-重测信度范围从r＝0.85到r＝.91(Benedict等，(1996)Psychological Assessment 8:145-153；Benedict等，(2005)Journal of the International
Neuropsychological Society 11:727-736)；同时对MS和正常对照受试者(d＝0.9,p<0.)(Strober等，(2009)Multiple Sclerosis 15:1077-1084；Parmenter等，(2010)J Int Neuropsychol Soc 16:6-16)，以及RRMS和SPMS患者(d＝0.6,p<0.001)(Benedict等，(2006)Archives of Neurology 63:1301-1306)有良好的判别效度。其预测效度也通过BVMT-R表现和脑部MRI发现之间的相关性的形式建立。进一步，大量研究显示，这个测试的所有6种形式具有等同的难度。本发明感兴趣的变量是总学习和延迟回忆分数(the Total Learning and Delayed Recall scores)。
(Benedict等，(1997)Brief Visuospatial Memory Test-Revised:Professional
Manual.Odessa,Florida:Psychological Assessment Resources,Inc.；Benedict等，(1996)Psychological Assessment 8:145-153)。在每一次接触后，受试者被要求使用铅笔在空白的纸单上重现矩阵。对于精确度和位置有严格的计分标准。在25分钟延时后，所述患者被要求再次重现信息而不再一次接触。最后提出是/否的识别任务。BVMT-R具有极好的再现性，其测试-重测信度范围从r＝0.85到r＝.91(Benedict等，(1996)Psychological Assessment 8:145-153；Benedict等，(2005)Journal of the International
Neuropsychological Society 11:727-736)；同时对MS和正常对照受试者(d＝0.9,p<0.)(Strober等，(2009)Multiple Sclerosis 15:1077-1084；Parmenter等，(2010)J Int Neuropsychol Soc 16:6-16)，以及RRMS和SPMS患者(d＝0.6,p<0.001)(Benedict等，(2006)Archives of Neurology 63:1301-1306)有良好的判别效度。其预测效度也通过BVMT-R表现和脑部MRI发现之间的相关性的形式建立。进一步，大量研究显示，这个测试的所有6种形式具有等同的难度。本发明感兴趣的变量是总学习和延迟回忆分数(the Total Learning and Delayed Recall scores)。
[0528] 实施例1.LINGO-1拮抗作用减轻小鼠中来自MOG-EAE的发病率和致死率，并在发炎的视神经中促进神经轴突的保护。
[0529] 急性视神经炎(AON)是通常发生于多发性硬化症的一种视神经炎症性疾病。AON由视神经的炎症损伤导致，并呈现由于水肿、炎症以及对包裹视神经和轴突的髓鞘损伤所导致的视力丧失。作为AON的结果，通常会有视网膜神经纤维层和视网膜神经节细胞层的显著缺失。目前AON的治疗受限于使用高剂量的皮质类固醇静脉内治疗，其加快水肿的溶解，但不促进中枢神经系统(CNS)髓鞘再生或提供CNS炎症性脱髓鞘中神经轴突的保护。
[0530] 用于研究视神经炎的动物模型包括大鼠和小鼠实验性自身免疫脑脊髓炎(EAE)模型；其中EAE诱导导致视神经炎的形成。在本实施例中，使用EAE小鼠模型来分析LINGO-1拮抗作用的效果。简短的说，EAE的诱导在年龄为8-12周的C57BL/6雄性和雌性小鼠中进行，通过将250μl乳化于弗氏完全佐剂(complete Freund’s adjuvant)(CFA)的125μg MOG 35-55皮下注射于尾根部两侧，随后立即和三天后静脉内注射300ng溶于磷酸盐缓冲盐水(PBS)的百日咳毒素。对于运动系统损伤的功效通过范围为0-7的EAE严重程度评分来测量。
[0531] 将各14只小鼠的两个分别的分组使用腹膜内注射10mg/kg拮抗性抗LINGO-1小鼠抗体或对照单克隆抗体盲测治疗(每个分组的每个治疗组N＝7)。小鼠从EAE诱导后第六天开始到疾病的发作之前，在每三天的四个不同时间治疗(第6、9、12和15天)。小鼠在EAE疾病高峰期处死。
[0532] 在EAE疾病高峰，使用Bruker 4,7T MRI系统上的弥散张量成像(DTI)对视神经成像。使用以下参数获得MRI图像：TR为1s，TE为30ms，Δ为10ms，8NEX，切片厚度0.5mm，视场2x2cm2，数据矩阵256x128。所采用的B值为0s/mm2(非弥散加权图像)和700s/mm2，用于一个平行和一个垂直弥散敏化梯度方向(Wu,Butzkueven等，(2007)Neuroimage 37:13138-
1147)。
1147)。
[0533] 紧跟着MRI分析，小鼠使用戊巴比妥安乐死，PBS灌注，用溶于0.1M PBS的4％多聚甲醛(PFA)固定，然后视神经被移出，并在含有2.5％戊二醛和0.1M二甲胂酸钠缓冲液的4％PFA溶液中后续固定，并处理用于电子显微镜。整个预视交叉横断视神经图像在10X和100X放大倍数下获得，并在PhotoshopCS3软件上合并(Adobe Systems Incorporated,San Jose,CA,USA)。选取五个预视交叉横断视神经ROIs(兴趣区)用于分析，四个外周一个中心，每一个测量约3600μm2(图1)。使用image Pro Plus软件(Media Cybernetics,Inc.,Rockville,MD,USA)进行分析，来评估每个ROI上每个被鉴定轴突的轴突数量，轴突面积和轴浆面积(axoplasmal area)。神经的外周包含大部分的炎症浸润。对每个神经炎症严重浸润的外周面积和中心面积分别评估。
[0534] 在用抗LINGO-1抗体治疗的小鼠中，没有观察到EAE死亡，而在安慰剂治疗的小鼠中，5/14由于EAE的严重性不得不实施安乐死(图2A)。另外，与安慰剂治疗小鼠相比(7/14小鼠)(图2B)，显著更低比例的抗LINGO-1抗体治疗小鼠达到了完全下肢瘫痪(截瘫)(疾病严重程度等级5)(4/14小鼠)。
[0535] 在诱导后16-17天EAE严重程度高峰期，对16只存活的对照治疗小鼠和18只存活的抗LINGO-1抗体治疗小鼠进行视神经弥散MRI扫描。视神经ROI图像包含在预视交叉水平的视神经中心的10个体素。弥散张量成像(DTI)显示，相比对照处理小鼠(平均1183，SD 36msec)，抗LINGO-1抗体分子处理小鼠表现出明显更高的，与长轴(纵向的、轴向的或平行扩散系数或λII)平行的表观扩散系数(apparent diffusion coefficient)(ADC)值(平均
1400，SD27msec)(图3、图4)。与此相反，在与视神经长轴垂直(径向或垂直扩散或λ)的ADC值上，处理组之间没有差别(抗LINGO-1拮抗剂处理小鼠415±19msec对比对照处理小鼠403±
25msec)(图3、图4)。
1400，SD27msec)(图3、图4)。与此相反，在与视神经长轴垂直(径向或垂直扩散或λ)的ADC值上，处理组之间没有差别(抗LINGO-1拮抗剂处理小鼠415±19msec对比对照处理小鼠403±
25msec)(图3、图4)。
[0536] 对于检查的每个视神经的5个ROI中心和外周轴突面积，轴突计算，和轴浆横截面积的评估制成表格用于比较(图5；图6)。分析每疾患十九个EAE神经以及5个健康神经。结果显示，中心或外周ROI的总视神经面积和轴突数量上没有差别(图5；图6)。然而，中心视神经ROI的个体轴突面积(对轴突健康的测量)在对照处理小鼠中相对抗LINGO-1抗体分子处理小鼠低13％(图5；图6)。总的来说，拮抗LINGO-1降低了MOG-EAE在小鼠中的发病率和死亡率；并在发炎的视神经通过降低轴突面积损失和降低轴向弥散损失促进了轴突保护。总之，在组织结构上和通过MRI看到了MOG-EAE中视神经的损伤，而通过阻断LINGO-1似乎有所减轻。
[0537] 实施例2在大鼠EAE模型中，LINGO-1拮抗作用与皮质类固醇治疗联合提供比单独拮抗LINGO-1加强的轴突保护。
[0538] 急性视神经炎(AON)是一种视神经的炎症性疾病，通常发生于多发性硬化症。AON由视神经的炎症损伤导致，并表现为由于水肿导致的视力丧失，炎症，以及对覆盖视神经和轴突的髓鞘的损伤。作为AON的结果，视网膜神经纤维层和视网膜神经节细胞层有显著的缺失。现有的AON治疗受限于使用高剂量皮质类固醇的静脉内治疗，加快水肿的溶解，但不促进中枢神经系统(CNS)髓鞘再生或提供CNS炎症性脱髓鞘中神经轴突的保护。
[0539] 研究视神经炎的动物模型包括大鼠和小鼠实验性自发免疫性脑脊髓炎(EAE)模型；其中EAE的诱导导致视神经炎的形成。在本实施例中，使用EAE大鼠模型分析单独拮抗LINGO-1或与皮质类固醇治疗联用的效果。简短的说，年龄为8-10周的雌性棕色挪威(BN)大鼠通过吸入异氟烷麻醉，在尾根部皮内注射总量为200μl的接种体，其包括100μg溶解于生理盐水，与弗氏完全佐剂乳化的rMOG1-125(1:1)，包含400μg热灭活的结核分支杆菌(mycobacterium tuberculosis)。
[0540] 当临床症状发作后(EAE诱导后15-16天)，使用30mg/kg/天的溶于生理盐水的甲基强的松龙(MP)或单独生理盐水(Veh)静脉注射处理大鼠，连续三天。在MP注射的第二天，向大鼠给药6mg/kg的抗LINGO-1单克隆抗体或对照抗体，腹膜内施用，每周一次施用三周。共有四个不同的治疗组：(1)对照治疗组(Veh+对照抗体(Ab))；MP治疗组(MP+对照抗体)；(3)抗LINGO-1单克隆抗体治疗组(Veh+抗LINGO-1单克隆抗体)；以及(4)联合治疗组(MP+抗LINGO-1单克隆抗体)。
[0541] 在最后一次治疗后一周(症状发作后4周，EAE诱导后6周)，大鼠使用溶于PBS的4％多聚甲醛(PFA)灌注，视神经(ONs)的低温恒温器切片机切片使用抗-βIII微管蛋白抗体染色，使用DAPI来分析轴突的病理，并通过荧光显微镜40X放大倍率显现。对于轴突的定量，分析每个视神经的3个不同切片，每个治疗组计算3-5个动物。
[0542] 如图(图7)所示，在对照治疗组(Veh+对照抗体)，在视神经切片中通过抗-βIII微管蛋白染色检测到了轴突的缺失，提示严重的轴突缺失。通过DAPI染色显示，在这些部位也观察到了炎症性浸润(图7)。在MP治疗组(MP+对照抗体)，轴突的数量略高(p值＝没有显著性)(图8)。在抗LINGO-1单克隆抗体治疗组(Veh+抗LINGO-1单克隆抗体)表现出高5倍的轴突数量，提示抗LINGO-1抗体治疗阻止了轴突缺失(图8)。联合治疗组(MP+抗LINGO-1单克隆抗体)表现出与对照治疗组相比(Veh+对照抗体)增加8倍的轴突数量，提示将抗LINGO-1拮抗剂例如抗LINGO-1单克隆抗体与高剂量的皮质类固醇联合治疗，具有协同效应(图8)。
[0543] 总的来说，拮抗LINGO-1减轻了大鼠EAE视神经的轴突缺失。使用高剂量静脉内甲基强的松龙每日治疗三天没有看到轴突保护，而抗LINGO-1单克隆抗体治疗导致了炎症性脱髓鞘中的轴突保护；而抗LINGO-1单克隆抗体与高剂量IV甲基强的松龙的联合治疗导致了甚至更好的轴突保护。
[0544] 总之，使用单克隆抗LINGO-1抗体分子阻断LINGO-1减轻了大鼠MOG-EAE中的轴突缺失；而LINGO-1阻断在大鼠MOG-EAE中的神经保护效果在存在或不存在高剂量类固醇的抗炎症治疗中都看到了。
[0545] 提述并入
[0546] 引用于本申请的所有参考文献、图形、序列表、专利和公开的专利申请其内容通过提述并入本文。本文提到的所有出版物、专利以及专利申请通过提述完整并入本文，如同每个单独的出版物、专利或专利申请具体且单独的指明为通过提述而并入本文。在冲突的情况下，以本申请，包括本文的所有定义为准。
[0547] 也通过提述完整并入本文的是多核苷酸和多肽序列，其引用与公共数据库中条目的登记号相关，例如那些由The Institute for Genomic Research(TIGR)维持于万维网tigr.org和/或Center for Biotechnology Information(NCBI)于万维网ncbi.nlm.nih.gov。
[0548] 等同物
[0549] 本领域的技术人员将认可或能够确定，仅使用常规实验方法，本发明描述的具体实施方案的许多等同物。也意图涵盖这些等同物。
[0550] 具体地，本发明涉及以下方面：
[0551] 1.一种在有需要的受试者中治疗选自多发性硬化症或视神经的炎症疾患的CNS脱髓鞘疾病的方法，所述方法包含将其量足以治疗所述CNS脱髓鞘疾病的抗LINGO-1抗体分子和免疫抑制剂施用于所述受试者，其中所述免疫抑制剂选自以下一项或多项：
[0552] IFN-β1分子；
[0553] 皮质类固醇；
[0554] 谷氨酸、赖氨酸、丙氨酸和酪氨酸的聚合物或格拉默(glatiramer)；
[0555] 针对alpha-4整联蛋白的抗体或其片段或那他株单抗；
[0556] 蒽二酮分子或米托蒽醌；
[0557] 芬戈莫德(fingolimod)或FTY720或其它SIP1功能调节剂；
[0558] 富马酸二甲酯；
[0559] 针对T细胞IL-2受体alpha亚基的抗体或达利珠单抗(daclizumab)；
[0560] 针对CD52的抗体或阿仑单抗(alemtuzumab)；
[0561] 针对CD20的抗体；或
[0562] 二氢乳清酸脱氢酶的抑制剂或特立氟胺(teriflunomide)；
[0563] 从而治疗所述CNS脱髓鞘疾病。
[0564] 2.项1所述的方法，其中所述CNS脱髓鞘疾病是多发性硬化症。
[0565] 3.项1所述的方法，其中所述视神经的炎症疾患是视神经炎。
[0566] 4.项3所述的方法，其中所述视神经炎是急性视神经炎。
[0567] 5.一种在有需要的受试者中治疗多发性硬化症或视神经炎的方法，所述方法包含将其量足以治疗所述多发性硬化症或视神经炎的抗LINGO-1抗体分子和IFN-β1分子施用于所述受试者。
[0568] 6.一种在有需要的受试者中治疗多发性硬化症或视神经炎的方法，所述方法包含将其量足以治疗所述多发性硬化症或视神经炎的抗LINGO-1抗体分子和皮质类固醇施用于所述受试者。
[0569] 7.项1至6中之一所述的方法，其中所述抗LINGO-1抗体分子导致以下一项或多项：增强髓鞘化，增强神经轴突保护，促进少突胶质细胞的分化和存活，提高突触数量或突触效率，或增加传导速度。
[0570] 8.项1至7中之一所述的方法，其中所述抗LINGO-1抗体分子是针对人LINGO-1的单克隆抗体。
[0571] 9.项8所述的方法，其中所述抗LINGO-1抗体分子是针对人LINGO-1的人的、人源化的、CDR嫁接的、或体外生成的抗体。
[0572] 10.项8或9所述的方法，其中所述抗LINGO-1抗体分子是免疫球蛋白G亚类1(IgG1)。
[0573] 11.项1至10中之一所述的方法，其中所述抗LINGO-1抗体分子包含无糖基(IgG1)框架。
[0574] 12.项1至11中之一所述的方法，其中所述抗LINGO-1抗体分子经修饰以与野生型IgG1相比降低效应细胞和补体功能。
[0575] 13.项1至12中之一所述的方法，其中所述抗LINGO-1抗体分子包含重链可变域的一个、两个或三个CDR，其包含SEQ ID NO：6、7或8，或SEQ ID NO：2、3或30的氨基酸序列，或与之基本相同的序列。
[0576] 14.项1至12中之一所述的方法，其中所述抗LINGO-1抗体分子包含轻链可变域的一个、两个或三个CDR，其包含SEQ ID NO：14、15或16，或SEQID NO：10、11或12的氨基酸序列，或与之基本相同的序列。
[0577] 15.项1至12中之一所述的方法，其中所述抗LINGO-1抗体分子包含重链可变域，其包含SEQ ID NO：5或SEQ ID NO：66的氨基酸序列，或与之基本相同的序列。
[0578] 16.项1至12中之一所述的方法，其中所述抗LINGO-1抗体分子包含轻链可变域，其包含SEQ ID NO：13或SEQ ID NO：9的氨基酸序列，或与之基本相同的序列。
[0579] 17.项1至12中之一所述的方法，其中所述抗LINGO-1抗体分子包含重链，其包含SEQ ID NO：275的氨基酸序列或与之基本相同的序列；以及轻链，其包含SEQ ID NO：276的氨基酸序列或与之基本相同的序列。
[0580] 18.项1至17中之一所述的方法，其中所述IFN-β1分子包含IFN-β1a或IFN-β1b多肽、其变体、同源物、片段或聚乙二醇化变体中的一种或多种。
[0581] 19.项1至17中之一所述的方法，其中所述IFN-β1分子包含选自IFN-β1a分子、IFN-β1b分子、或IFN-β1a分子或IFN-β1b分子的聚乙二醇化变体的IFNβ药剂。
[0582] 20.项19中所述的方法，其中所述IFN-β1a分子是 或 所述IFN-β1b分子是 或 或
[0583] 21.项1至20中之一所述的方法，其中所述抗LINGO-1抗体分子包含重链可变域，其包含SEQ ID NO：5或SEQ ID NO：66的氨基酸序列；以及轻链可变域，其包含SEQ ID NO：13或SEQ ID NO：9的氨基酸序列；且所述免疫抑制剂是
[0584] 22.项1至21中之一所述的方法，其中所述受试者患有以下一项：复发-缓解型多发性硬化症(RRMS)、原发性进展型MS、继发性进展型MS、临床孤立综合征(CIS)、临床定义的MS(CDMS)、或良性MS。
[0585] 23.项22所述的方法，其中所述受试者具有一个或多个新形成的损伤。
[0586] 24.项22所述的方法，其中所述受试者具有一个或多个先前存在的损伤。
[0587] 25.项1至21中之一所述的方法，其中所述受试者患有复发-缓解型多发性硬化症(RRMS)。
[0588] 26.项1至21中之一所述的方法，其中所述受试者患有继发性进展型MS(SPMS)。
[0589] 27.项25或26所述的方法，其中所述受试者是具有活动性疾病的患者。
[0590] 28.项1至27中之一所述的方法，其中所述治疗步骤包括在所述受试者中减轻一种或多种疾病相关症状；或减轻、延迟或阻止复发，或失能的恶化。
[0591] 29.项1至28中之一所述的方法，其中所述抗LINGO-1抗体分子和所述免疫抑制剂同时施用。
[0592] 30.项1至28中之一所述的方法，其中所述抗LINGO-1抗体分子和所述免疫抑制剂序贯施用。
[0593] 31.项1至28中之一所述的方法，其中所述抗LINGO-1抗体分子和所述免疫抑制剂的施用彼此部分重叠。
[0594] 32.项1至28中之一所述的方法，其中所述免疫抑制剂和所述抗LINGO-1抗体分子的施用的开始发生于同一时间。
[0595] 33.项1至28中之一所述的方法，其中所述免疫抑制剂的施用在所述抗LINGO-1抗体分子开始治疗之前。
[0596] 34.项1至28中之一所述的方法，其中所述抗LINGO-1抗体分子的施用在所述免疫抑制剂开始治疗之前。
[0597] 35.项1至28中之一所述的方法，其中所述免疫抑制剂的施用在所述抗LINGO-1抗体分子的施用终止后继续。
[0598] 36.项1至28中之一所述的方法，其中所述抗LINGO-1抗体分子的施用在所述免疫抑制剂的施用终止后继续。
[0599] 37.项1至36中之一所述的方法，其中所述抗LINGO-1抗体分子是针对LINGO-1的抗体分子，并通过静脉内、皮下、玻璃体内、鞘内或肌肉内施用。
[0600] 38.项40所述的方法，其中所述抗LINGO-1抗体分子通过静脉内施用。
[0601] 39.项1至38中之一所述的方法，其中所述抗LINGO-1抗体分子以1到100mg/kg给药。
[0602] 40.项1至38中之一所述的方法，其中所述抗LINGO-1抗体分子以约3mg/kg、约10mg/kg、约30mg/kg、约50mg/kg、或约100mg/kg给药。
[0603] 41.项1至40中之一所述的方法，其中所述抗LINGO-1抗体分子每一、二、三、四或五周一次通过IV输注施用。
[0604] 42.项1至41中之一所述的方法，其中所述免疫抑制剂是IFN-β1分子，通过静脉内、皮下或肌肉内施用。
[0605] 43.项42所述的方法，其中所述IFN-β1分子通过以下一种或多种方式施用：
[0606] (i)20-45微克每周一次通过肌肉内注射；
[0607] (ii)20-30微克每周三次，或40-50微克每周三次，通过皮下注射；或
[0608] (iii)10至50μg的量肌肉内，每周三次，或每五到十天，一周一次。
[0609] 44.项1至43中之一所述的方法，其中：
[0610] 所述抗LINGO-1抗体分子每四周一次通过IV输注施用，以约3mg/kg、约10mg/kg、约30mg/kg、约50mg/kg、或约100mg/kg给药；以及
[0611] 所述免疫抑制剂是IFN-β1分子且通过以下一种或多种方式施用：
[0612] (i)20-45微克每周一次通过肌肉内注射；
[0613] (ii)20-30微克每周一次或三次，或40-50微克每周一次或三次，通过皮下注射；或[0614] (iii)10至50μg的量肌肉内，例如每周三次，或每五到十天。
[0615] 45.项1至44中之一所述的方法，其中所述受试者已经或正通过以下一项或多项评价：
[0616] 进行神经系统检查；
[0617] 获取所述受试者扩展失能状态量表(EDSS)的状态；
[0618] 获取所述受试者多发性硬化症功能复合(MSFC)的状态；
[0619] 检测所述受试者的损伤状态；
[0620] 获取上肢和/或下肢功能的测量；
[0621] 获取短距离步行功能的测量；
[0622] 获取长距离步行功能的测量；
[0623] 获取认知功能的测量；
[0624] 获取视觉功能的测量。
[0625] 46.项1至44中之一所述的方法，进一步包括以下一项或多项：
[0626] 获取所述受试者MSFC的状态；
[0627] 进行神经系统检查；
[0628] 获取所述受试者扩展失能状态量表(EDSS)的状态；
[0629] 检测所述受试者的损伤状态；
[0630] 获取上肢和/或下肢功能的测量；
[0631] 获取短距离步行功能的测量；
[0632] 获取长距离步行功能的测量；
[0633] 获取认知功能的测量；
[0634] 获取视觉功能的测量。
[0635] 47.项45或46所述的方法，其中上肢功能的测量使用9孔柱测试(9HP)获取。
[0636] 48.项45或46所述的方法，其中短距离步行功能的测量使用25英尺计时步行(T25FW)获取。
[0637] 49.项45或46所述的方法，其中认知功能的测量包含学习测试、记忆测试和/或注意力/处理速度测试的评价。
[0638] 50.项1至44中之一所述的方法，其中所述受试者使用EDSS评估和选自以下一种、两种、三种或全部的步行功能评估来评价：短距离步行功能、长距离步行功能、上肢功能或下肢功能。
[0639] 51.项50所述的方法，其中肢端和/或步行功能的测量有至少10％、15％、20％、25％或更高的增加指示所述受试者中疾病的进展；肢端和/或步行功能的测量有至少10％、
15％、20％、25％或更高的降低指示所述受试者中的改善结果。
15％、20％、25％或更高的降低指示所述受试者中的改善结果。
[0640] 52.项49所述的方法，其中所述认知功能的测量包含以下一种或多种的评价：听觉记忆、言语学习和/或记忆言语信息(例如选择性提醒测试(SRT))；用于评价听觉/言语记忆的测试(例如加州言语学习测试第二版(CVLT2))，雷伊听觉言语学习测试(RAVLT)；用于评价视觉/空间记忆的测试(例如简易视觉空间记忆测试修订版(BVMTR))；认知测试，例如PASAT、SDMT；以及患者报告结果测量(例如MSWS-12、MSIS-29、ABILHAND、MSNQ和/或SF-36)。
[0641] 53.项45或46中之一所述的方法，其中认知功能的测试使用包含SDMT、PASAT-3和-3、SRT-总学习(SRT-TL)、SRT延迟回忆(SRT-DR)和BVNTR延迟回忆(BVMTR-DR)的MS认知终点复合进行。
[0642] 54.项53所述的方法，其中所述认知功能的测量包含MS-COG。
[0643] 55.项45至54中之一所述的方法，其中所述受试者的改善通过以下一项或多项定义：
[0644] a.EDSS从≤6.0的基线分数降低≥1.0分；
[0645] b.T25FW中从基线处改善≥15％；
[0646] c.9HPT中从基线处改善≥15％；或
[0647] d.PASAT中从基线处改善≥15％。
[0648] 56.项45至54中之一所述的方法，其中所述受试者的损伤状态使用磁共振成像评价。
[0649] 57.项56所述的方法，其中磁共振成像包含磁转移和弥散张量成像。
[0650] 58.一种试剂盒，其包含针对人LINGO-1的抗体分子和IFN-β1分子及说明书，其关于在治疗多发性硬化症或视神经的炎症疾患中使用。
[0651] 59.一种包装组合物，其包含针对人LINGO-1的抗体分子和IFN-β1分子及说明书，其关于在治疗多发性硬化症或视神经的炎症疾患中使用。
[0652] 60.一种在有需要的受试者中治疗急性视神经炎的方法，所述方法包括将其量足以治疗所述急性视神经炎的抗LINGO-1抗体分子施用于所述受试者。
[0653] 61.项60所述的方法，其中所述抗LINGO-1抗体分子包含重链可变域的一个、两个或三个CDR，其包含SEQ ID NO：6、7或8或SEQ ID NO：2、3或30的氨基酸序列，或与其基本相同的序列。
[0654] 62.项60所述的方法，其中所述抗LINGO-1抗体分子包含轻链可变域的一个、两个或三个CDR，其包含SEQ ID NO：14、15或16或SEQ ID NO：10、11或12的氨基酸序列，或与其基本相同的序列。
[0655] 63.项60所述的方法，其中所述抗体分子包含重链可变域，其包含SEQ ID NO：5或SEQ ID NO：66的氨基酸序列，或与其基本相同的序列。
[0656] 64.项60所述的方法，其中所述抗体分子包含轻链可变域，其包含SEQ ID NO：13或SEQ ID NO：9的氨基酸序列，或与其基本相同的序列。
[0657] 65.项60所述的方法，其中所述抗体分子包含重链，其包含SEQ ID NO：275所述的氨基酸序列或与其基本相同的氨基酸序列；以及轻链，其包含SEQ ID NO：276所述的氨基酸序列，或与其基本相同的氨基酸序列。
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