本发明涉及用作αvβ3整合素拮抗剂并因此用于药物组合物的药用化 合物。本发明还涉及通过抑制或拮抗αvβ3整合素来治疗由αvβ3介导的疾 病的方法。

                        发明背景

整合素是一类细胞表面的糖蛋白，它调节细胞粘附，因而是发生在 各种生物过程中的细胞粘附相互作用的有用的调节剂。整合素是异源二 聚体，由α和β多肽亚基经非共价键合而成。迄今己鉴定了11种不同的 α亚基，6种β亚基。各种α亚基可与各种β亚基结合形成特定的整合素。

被确定为αvβ3的整合素(又称Vitronectin受体)在多种状态或疾病 中起作用，包括肿瘤转移，实体瘤生长(瘤形成)，骨质疏松，佩吉特 氏病，恶性肿瘤的体液血钙过多症，血管生成作用，包括肿瘤血管生成， 视网膜病，关节炎，包括风湿性关节炎，牙周病，牛皮癣和平滑肌细胞 迁移(例如再狭窄)。此外，还发现这类药物可用作抗病毒、抗真菌和 抗微生物药物。因此，选择性抑制或拮抗αvβ3的化合物会有益于治疗这 些疾病。

业己证明，αvβ3整合素或其它含有αv的整合素可结合于多种含有 Arg-Gly-Asp(RGD)的基质大分子上。含有RGD序列的化合物模拟细 胞外基质配体，以结合于细胞表面的受体。然而也证明了RGD肽通常对 RGD依赖的整合素无选择性，例如与αvβ3结合的多数RGD肽也结合 αvβ5，αvβ1和αIIbβ3。对血小板αIIbβ3(又称纤维蛋白原受体)的拮抗作 用已知可阻断人血小板聚集。当用于治疗与整合素αvβ3有关的疾病时， 为避免出血的副作用，宜开发对αvβ3为选择拮抗剂的化合物，而不对αIIbβ3 拮抗。

肿瘤细胞侵入过程有三个阶段：1)肿瘤细胞连结到细胞间基质；2) 基质的蛋白裂解；3)细胞运动穿越溶解的屏障。该过程可反复进行，导 致在远离原发肿瘤部位的转移。

Seftor等(Proc.Natl.Acad.Sci.USA.Vol.89(1992)1557-1561)证明 αvβ3整合素在黑色素病细胞侵入中具有生物学功能。Montgimery等 (Proc.Natl.Acad.Sci.USA.Vol 91(1994)8856-8860)证明在人黑素 病细胞上表达的整合素αvβ3可促进生存信号，保护细胞免遭程序死亡。 通过干扰αvβ3整合素细胞粘附受体以调节肿瘤细胞转移过程，阻止肿瘤 转移会是有益的。

Brooks等(Cell，Vol.79(1994)1157-1164)证实，αvβ3的拮抗剂提 供了治疗癌形成(抑制实体瘤生长)的方法，因为全身用αvβ3拮抗剂可 导致人特定肿瘤的各种组织学的明显退化。

粘附受体整合素αvβ3已确证是鸡和人的血管形成的标记物，因此， 该受体在血管形成和新血管形成中起关键作用。血管形成的特征是，平 滑肌细胞和上皮细胞的侵入、移行和繁殖。αvβ3拮抗剂通过选择性地促 进新脉管形成中的细胞程序死亡抑制该过程。新血管的生长或血管形成 作用也参与了其它病理过程如糖尿病视网膜病(Adonis等，Amer.J. Ophthal.，Vol 118(1994)，445-450)，和风湿性关节炎(Peacock等，J.Exp. Med.Vol.175(1992)，1135-1138)。因此，αvβ3拮抗剂是治疗与新脉管 形成有关的疾病的有用的药物(Brooks等，Science，Vol. 264(1994)，569-571)。

己报导了细胞表面受体αvβ3是负责骨骼连接的破骨细胞上的主要整 合素。破骨细胞引起骨骼重吸收，当这种骨重吸收活性超过了骨形成活 性时，则导致骨质疏松(骨丢失)，致使骨折增加、残废和增加残亡率。 αvβ3拮抗剂己证明是体外(Sato等，J.Cell.Biol.Vol.111(1990)1713- 1723)和体内(Fisher等，Endocrinology，Vot 132(1993)1411-1413)破 骨细胞活性的强效抑制剂。αvβ3拮抗作用致使骨的重吸收降低，因而使 骨形成与重吸收活性恢复到正常的平衡状态。因此，提供作为骨骼重吸 收有效抑制剂的破骨细胞αvβ3的拮抗剂是有益的，并因此用来治疗或预 防骨质疏松病。

αvβ3整合素在平滑肌细胞迁移中的作用也是个治疗靶点，用于预防 或抑制neointimal增生，该增生导致血管手术后再狭窄(Choi等，J.Vasc. Surg.Vol.19(1)(1994)125-34)。用药物预防或抑制neointimal增生以防 止或抑制再狭窄是有益的。

White(Current Bidogy Vol.3(9)(1993)，596-599)报导了腺病毒利用 αvβ3进入宿主细胞。整合素在病毒颗粒的细胞摄粒作用中似乎是需要 的，它使病毒基因组渗透到宿主细胞的胞浆中。所以，抑制αvβ3的化合 物可用作抗病毒药。

EP-A 0445796公开了乙酸和通式为 H2N(HN)-C-X-CO-ZCH(Q1)COOQ2(其中X可以是对-亚苯基)的衍生物。这种化合物可 用作纤维蛋白原受体IIb/IIIa的拮抗剂。

EP-A 0643072涉及对-脒基或氨基乙醇-亚苯基取代的2-哌嗪 酮-酸化合物，该化合物可作口服给药的抗血栓形成剂。

WO 94/18981公开了通式(1)-(3)的化合物， 这些化合物用作纤维蛋白原受体拮抗剂。

                       发明概述

本发明涉及式I表示的一组化合物或其药用盐 式中 A是 式中

Y1是选自N-R2，O和S；

R2选自如下的一个基团：氢；烷基，芳基；羟基；烷氧基；氰基； 硝基；氨基；链烯基；链炔基；酰氨基、胺酰基；烷羰基；芳羰基；烷 氧羰基；芳氧羰基；卤烷羰基；卤烷氧羰基；烷硫羰基；芳硫羰基；酰 氧甲氧羰基；由如下一个或多个取代基任选取代的烷基：低碳烷基；卤 素；羟基；卤烷基；氰基；硝基；羧基；氨基；烷氧基；芳基或任选由 如下一个或多个基团取代的芳基：卤素，卤烷基，低碳烷基；烷氧基； 氰基；烷磺酰基；烷硫基；硝基；羧基；氨基；羟基；磺酸基，磺酰氨 基；芳基；稠合芳基；单环杂环；或稠合单环杂环；任选有如下一个或 多个基团取代的芳基：卤素；卤烷基；羟基；低碳烷基；烷氧基；亚甲 二氧基；亚乙二氧基；氰基；硝基；烷硫基；烷磺酰基；磺酸基；磺酰 氨基；羧基衍生物；氨基；芳基；稠合芳基；单环杂环和稠合的单环杂 环；单环杂环；和任选由如下一个或多个基团取代的单环杂环：卤素； 卤烷基；低碳烷基；烷氧基；氨基；硝基；羟基；羧基衍生物；氰基； 烷硫基；烷磺酰基；磺酸基；磺酰氨基；芳基或稠合芳基；或

R2和R7一起共同形成一个4-12元含有二氮的杂环，环上可任选 地由如下一个或多个基团取代：低碳烷基；羟基；酮基；烷氧基；卤素； 苯基；氨基；羧基或羧酯基，以及稠合的苯基；或

R2与R7一起共同形成一个5元环芳杂环，环上可任选地由如下一个 或多个基团取代：低碳烷基；苯基和羟基；或

R2与R7一起共同形成一个与苯基稠合的5元杂环；

R7(当未与R2一起形成环时)和R8独立选自如下基团：氢；烷基； 链烯基；链炔基；芳烷基；氨基；烷胺基；羟基；烷氧基；芳胺基；酰 胺基；烷羰基；芳羰基；烷氧羰基；芳氧基；芳氧羰基；卤烷羰基；卤 烷氧羰基；烷硫羰基；芳硫羰基；酰氧甲氧羰基；环烷基；双环烷基； 芳基；酰基；苯甲酰基；任选自如下一个或多个基团取代的烷基：低碳 烷基；卤素；羟基；卤烷基；氰基；硝基；羧基衍生物；氨基；烷氧基； 巯基；烷硫基；磺酰基；芳基；芳烷基；任选自如下一个或多个基团取 代的芳基：卤素；卤烷基；低碳烷基；烷氧基；亚甲二氧基；亚乙二氧 基；烷硫基；卤烷硫基；巯基；羟基；氰基；硝基；羧基衍生物；芳氧 基；胺酰基；酰氨基；氨基；烷胺基；二烷胺基；三氟烷氧基；三氟甲 基；磺酰基；烷磺酰基；卤烷磺酰基；磺酸基；磺酰胺基；芳基；稠合 芳基；单环杂环；稠合单环杂环；任选自如下一个或多个基团取代的芳 基：卤素；卤烷基；低碳烷基；烷氧基；亚甲二氧基；亚乙二氧基；烷 硫基；卤烷硫基，巯基；羟基；氰基；硝基；羧基衍生物；芳氧基；氨 酰基；酰胺基；氨基；烷胺基；二烷胺基；三氟烷氧基；三氟甲磺酰基； 烷磺酰基；磺酸基；磺酰胺基；芳基；稠合芳基；单环杂环；或稠合单 环杂环；单环杂环基；任选自如下一个或多个基团取代的单环杂环基： 卤素；卤烷基；低碳烷基；烷氧基；芳氧基；氨基；硝基；羟基；羧基 衍生物；氰基；烷硫基；烷磺酰基；芳基；稠合芳基；单环和双环杂环 烷基；SO2R10，其中R10选自如下基团：烷基；芳基和单环杂环；它们 都可任选地被如下一个或多个基团取代：卤素；卤烷基；烷基；烷氧基； 氰基；硝基；氨基；酰氨基；三氟烷基；氨酰基；烷胺磺酰基；烷磺酰 基；烷磺酰氨基；烷胺基；二烷胺基；三氟甲硫基；三氟烷氧基；三氟甲磺酰 基；芳基；芳氧基；巯基；烷硫基和单环杂环，以及 ，式中 R10的定义同上；或

NR7和R8一起共同形成4-12元含有一个氮的单环或双环杂环，并 任选地被选自如下一个或多个基团取代：低碳烷基；羧基衍生物；芳基； 或羟基，其中该环可任选地含有选自如下的杂原子：O，N和S；

R5选自如下的基团；氢；烷基；链烯基；链炔基；苄基和苯乙基， 或

A是 式中Y2选自如下的一个基团：烷基；环烷基；双环烷基；单环杂环；任 选地被芳基取代的烷基，该芳基也可任选地被如下的一个或多个基团取 代：卤素；卤烷基；烷基；硝基；羟基；烷氧基；芳氧基；芳基或稠合 芳基；芳基可任选地被如下一个或多个基团取代：卤素；卤烷基；羟基； 烷氧基；芳氧基；芳基；稠合芳基；硝基，亚甲二氧基；亚乙二氧基； 或烷基；链烯基；链炔基；-S-R9和-O-R9，式中R9选自如下基 团：氢；烷基；芳烷基；芳基；链烯基；链炔基；或R9和R7一起共同 形成一个4-12元含有一个氮和一个硫或一个氧原子的杂环，该环可任 选地被如下基团取代：低碳烷基；羟基；酮基；苯基；羧基或羧酯基； 稠合苯基；或R9与R7一起共同形成噻唑；噁唑；苯并噁唑或苯并噻唑； 和

R5与R7的定义同前；或

Y2(当Y2是碳时)与R7一起共同形成4-12元含有一个氮或两个 氮原子的杂环，该环任选地被如下基团取代：烷基；芳基；酮基或羟基； 或 A是 式中R2与R7一起共同形成5-8元含有两个氮原子的杂环，环上任选 地被如下一个或多个基团取代：低碳烷基；羟基；酮基；苯基，或羧基 衍生物；R8选自如下基团：烷羰基；芳羰基；烷氧羰基；芳氧羰基；卤 烷羰基；卤烷氧羰基；烷硫羰基；芳硫羰基；或酰氧甲氧羰基；

R5的定义同前；或

A是 式中R2与R7一起共同形成5-8元含有两个氮原子的杂环，环上任选 地被羟基、酮基、苯基或烷基取代；

两个R8选自如下的基团：烷羰基；芳羰基；烷氧羰基；芳氧羰基； 卤烷羰基；卤烷氧羰基；烷硫羰基；芳硫羰基；和酰氧甲氧羰基； Z1是一个或多个如下的基团：氢；烷基；羟基；烷氧基；芳氧基；卤素； 卤烷基；卤烷氧基；硝基；氨基；烷胺基；酰氨基；二烷胺基；氰基； 烷硫基；烷磺酰基；羧基衍生物；三卤乙酰胺基；乙酰胺基；芳基，稠 合芳基；环烷基；巯基；单环杂环；稠合单环杂环；和A，A的定义同 前；

V选自如下基团：-N-(R6)-，式中R6选自如下一个基团：氢；低 碳烷基；环烷基；芳烷基；芳基和单环杂环；或R6与Y一起共同形成一 个4-12元含有一个氮原子的杂环；

Y，Y3，Z和Z3独立地选自如下基团：氢；烷基；芳基和环烷基； 或Y与Z一起共同形成环烷基；或Y3与Z3一起共同形成环烷基；

n是整数1，2或3；

t是整数0，1或2；

p是整数0，1，2或3；

R是X-R3，式中X选自如下基团：氧，硫和NR4，式中R3和R4独 立地选自如下基团：氢；烷基；链烯基；链炔基；卤烷基；芳基；芳烷 基；糖基；甾类；聚烷基醚；烷胺基；烷基N，N-二烷基胺酰基；三甲 基乙酰氧甲基；和在游离酸的情况下，所有它们的药用盐。

R1选自如下基团：氢；烷基；链烯基；链炔基；芳基；羧基衍生物； 卤烷基；环烷基；单环杂环；单环杂环上可任意地被如下基团取代：烷 基；卤素，卤烷基；氰基；羟基；芳基；稠合芳基；硝基；烷氧基；芳 氧基；烷磺酰基；芳磺酰基；磺酰胺基；巯基；烷硫基；羧基衍生物， 氨基；胺酰基；

烷基可任意地被一个或多个如下基团取代：卤素；卤烷基；羟基； 烷氧基；芳氧基；巯基；烷硫基；链炔基；链烯基；烷基；芳硫基；烷 亚砜基；烷磺酰基；芳亚砜基；芳磺酰基；氰基；硝基；氨基；烷氨基； 二烷基氨基；烷磺酰胺基；芳磺酰胺基；酰胺基；羧基衍生物；磺酰胺 基；磺酸盐；膦酸衍生物；次膦酸衍生物；芳基；芳硫基；芳亚砜基； 或芳砜基，所有基团可任意地被如下基团取代：卤素；烷基；卤烷基； 氰基；硝基；羟基，羧基衍生物；烷氧基；芳氧基；氨基；烷胺基；二 烷胺基；胺酰基；芳基，稠合芳基；单环杂环；稠合单环杂环，单环杂 环硫基，单环杂环亚砜基；单环杂环砜基；环上可任意被如下基团取代： 卤素；卤烷基；硝基；羟基；烷氧基；稠合芳基或烷基；烷羰基；卤烷 羰基和芳羰基；芳环上一个或多个位置可任意地被如下基团取代；卤素； 卤烷基；烷基；烷氧基；芳氧基；亚甲二氧基；亚乙二氧基；烷硫基； 卤烷硫基，巯基；羟基；氰基；硝基；酰氧基；羧酸衍生物；羧烷氧基； 胺酰基；酰胺基；氨基；烷基氨基；二烷基氨基；三氟烷氧基；三氟甲 基磺酰基；烷磺酰基；磺酸基；磺酰胺基；芳基；稠合芳基；单环杂环 和稠合单环杂环； 和 式中R7和R8的定义同前，并且它们可以共同 与氮组成一个氨基酸。 和

R11选自如下基团：氢；烷基；芳烷基；链烯基；链炔基；卤烷基或 链卤烯基；或R11和Y一起共同组成含有一个氮的4-12元杂环。

本发明的另一内容是提供了含有式I化合物的药用组合物。这些化 合物和组合物用于选择性地抑制或拮抗αvβ3整合素，因此本发明的另一 内容是涉及一种选择性地抑制或拮抗αvβ3整合素的方法。本发明还涉及 治疗或抑制与此相关的病理状态，如用于治疗骨质疏松，噁性肿瘤的体 液钙过高症，佩吉特病，肿瘤转移，实体瘤的生长(癌生成)血管生成 (包括肿瘤血管生成)，视网膜病，包括糖尿病的视网膜病，关节炎(包 括风湿性关节炎)，牙周病，牛皮癣，血管平滑肌迁移，和再狭窄病。 此外，这些药剂还用作抗病毒药和抗微生物药物。

                         详细说明

本发明涉及上述式I代表的一组化合物。

本发明优选的方案是上式化合物： 式中

A是 其中Y1选自N-R2、O和S；

R2选自H、氰基、烷基、芳基、取代的烷基、羟基、烷氧基、烷羰 基、胺酰基、硝基、氨基和单环杂环基、芳基羰基、烷氧羰基、苄氧羰 基、卤  烷氧羰基、烷硫羰基、芳硫羰基、酰氧甲氧羰基；或者R2与R7 一起形成4-12元环；

R5、R7和R8各选自H、烷基、链烯基、链炔基、环烷基、双环烷 基取代的烷基、芳烷基、芳氧基、羟基、烷氧基、氨基、烷氨基、芳氨 基、胺酰基、烷羰基、芳羰基、烷氧羰基、芳氧羰基、卤代烷羰基、卤 代烷氧羰基、烷硫羰基、芳硫羰基、酰氧甲氧羰基、取代的苯基、芳酰 基、单杂环和双杂环、单杂环烷基和双杂环烷基和-SO2R10其中R10选 自烷基、氨基和芳基，三者都可任意由一个或多个选自如下的基团取代： 酰胺基、氨基、羰基、氰基、硝基、烷氧基、卤素、烷基、三氟烷基、 胺酰基、烷氨磺酰基、烷基磺酰基、烷基磺酰胺基、烷氨基、二烃基氨 基、芳氧基、巯基、三氟甲硫基、三氟烷氧基和三氟甲磺酰基，或-NR7和R8一起形成4-12元环，其中该环含有选自O、N、S和杂原子， 并可被任意取代。

这些化合物中，特别优选的是，其中

V是-N(R6)-其中R6选自H和低级烷基；

n是1；

t是0或1；

p是0、1或2；和

R是O-R3。 进一步特别优选的化合物是，其中 A是

其中Y1是N-R2，R2与R7一起形成4-12元环；和R5和R8独 立地选自H、烷基、链烯基、链炔基、环烷基、双环烷基取代的烷基、 芳烷基、芳氧基、羟基、烷氧基、氨基、烷氨基、芳氨基、胺酰基、烷 羰基、芳羰基、烷氧羰基、芳氧羰基、卤代烷羰基、卤代烷氧羰基、烷 硫羰基、芳硫羰基、酰氧基甲氧羰基、取代的苯基、芳酰基、单杂环和 双杂环、单杂环烷基和双杂环烷基和-SO2R10，其中R10选自烷基、氨 基和芳基，三者都任意被一个或多个选自如下的基团取代：酰胺基、氨 基、羰基、氰基、硝基、烷氧基、卤素、烷基、三氟烷基、胺酰基、烷 氨基磺酰基、烷基磺酰基、烷磺酰胺基、烷氨基、二烷氨基、芳氧基、 巯基、三氟甲硫基、三氟烷氧基和三氟甲磺酰基，或-NR7和R8一起形 成4-12元环，该环含有一个选自O、N和S的杂原子，和该环可被 任意取代。

这些化合物中特别优选的是，其中

V是-N(R6)-，其中R6选自H和低级烷基；

n是1；

t是0；和

p是1。

进一步优选的通式I化合物是，其中

A是 其中Y2选自低级烷基、取代烷基、苯基、取代苯基、环烷基、单杂环、 -S-R9和-O-R9，其中R9选自H、烷基、取代的烷基、苯基、取 代的苯基和单杂环或R9和R7一起形成4-12元环，或Y2和R7一起形 成任意取代的4-12元环。上述基团中特别优选Y2和R7一起形成可任 意取代的4-12环，或另外是

V是-N(R6)-其中R6选自H和低级烷基；

n是1；    

t是0或1；和

p是1。 上述优选基团中特别优选Y2选自低级烷基、取代的烷基、苯基、取代的 苯基、环烷基和单杂环，或另外

V是-N(R6)-其中R6选自H和低级烷基；

n是1；

t是0；和

p是1。

本发明进一步涉及含有治疗有效量的上述公开化合物的药物组合物。

本发明也涉及选择性地抑制或拮抗αvβ3整合素的方法，尤其是涉及 抑制骨重吸收、牙周病、骨质疏松、癌症体液血钙过高症，佩吉特病， 肿瘤转移，实体瘤生长(癌生成)，包括肿瘤血管生成的血管生长，包 括糖尿病视网膜病在内的视网膜病，包括风湿性关节炎在内的关节炎， 平滑肌细胞迁移和心瓣膜再狭窄的方法，它是通过服用有效治疗量的式I -V化合物和药用载体，以达到抑制作用。

下面列出了本申请所用的各个术语的定义：

所用的术语“烷基”或“低碳烷基”是指有1到大约10个碳原子的 直链或支链烷基，尤其优选的是1到大约6个碳原子。这类烷基的实例 是甲基，乙基，正丙基，异丙基，正丁基，异丁基，仲丁基，叔丁基， 戊基，新戊基，己基，异己基，等等。

所用的术语“链烯基”或“低碳链烯基”，是指含有至少1个双链 和2～大约6个碳原子的不饱和非环烃基，烯烃中碳-碳双键可以是顺 式或反式的构型，这些基团有乙烯基，丙烯基，丁烯基，异丁烯基，戊 烯基，己烯基等等。

所用的术语“链炔基”或“低碳链炔基”，是指含有一个或多个三 键的2～大约6个碳原子的非环状烃基。这些基团的实例有乙炔基，丙 炔基，丁炔基，戊炔基，己炔基，等等。

所用的术语“环烷基”，是指含有3～大约8个碳原子的饱和或部 分不饱和环烃基，优选为4～大约6个碳原子。这样的环烷基的实例有 环丙基，环丙烯基，环丁基，环戊基，环己基，2-环己-1-烯基， 等等。

所用的“芳基”，是指由一个或多个芳香环构成的芳环体系，优选 的芳基是含有一个、二个或三个芳环。该术语包含的芳基如苯基，吡啶 基，萘基，噻吩基，呋喃基，联苯基，等等。

所用的“氰基”，是指式 基。

所用的“羟基”是指式 基。

所用的术语“低碳亚烷基”或“亚烷基”，是指含有1～大约6个 碳原子的二价直链或支链的饱和烃基。

所用的术语“烷氧基”，是指式-OR20表示的直链或支链含氧基团， R20为上述定义的烷基。烷氧基实例包括甲氧基，乙氧基，正丙氧基，正 丁氧基，异丙氧基，异丁氧基，仲丁氧基，叔丁氧基，等等。

所用的术语“芳烷基”，是指式 基，式中R21是上述的芳 基，R22是上述的亚烷基。芳烷基的实例包括苄基，吡啶甲基，萘丙基， 苯乙基，等等。

所用的术语“硝基”，是指式 基。

所用的术语“卤代”或“卤素”，是指溴、氯、氟或碘。

所用的术语“卤烷基”，是指上述的烷基中的一个或多个碳原子上 被一个或多个相同或不同的卤素取代。卤烷基的实例包括有三氟甲基， 二氯乙基，氟丙基，等等。

所用的术语“羧基”，是指-COOH基。

所用的术语“酸酯基”是指-COOR23基，式中R23选自上述的H， 烷基，芳烷基或芳基。

所用的术语“羧基衍生物”，是指式 ，式中Y6和Y7 各自独立选自O，N或S，R23选自上述的H、烷基，芳烷基或芳基。

所用的术语“氨基”，是指-NH2代表的基团。

所用的术语“烷磺酰基”或“烷砜基”，是指 式， 式中 R24为上述的烷基。

所用的术语“烷硫基”，是指式-SR24基，其中R24为上述定义的 烷基。

所用的术语“磺酸基”，是指式 ，式中R25是上述定 义的H，烷基，芳基，等等。

所用的术语“磺酰氨基”，是指式 ，式中R7和R8的 定义同前。

所用的术语“稠合芳基”，是指上述的芳环与一个或多个苯环稠合。 “稠合芳基”一语包括萘基。

所用的术语“单环杂环”是指含有4～大约12个原子，优选为5～ 大约10个原子的单环，其中1～3个原子选自杂原子氧、氮和硫，并且 若有2个或多个不同的杂原子存在时，其中至少一个杂原子是氮。这些 单环杂环的代表有咪唑，呋喃，吡啶；噁唑，吡喃，三唑，噻吩，吡唑， 噻唑，噻二唑，等等。

所用术语“稠合的单环杂环”是指上述的单环杂环与一个苯环稠合。 这类稠合的单环杂环的实例有苯并呋喃，苯并吡喃，苯并二氧杂环戊烷， 苯并噻唑，苯并噻吩，苯并咪唑，等等。

所用的术语“亚甲二氧基”，是指基团 “亚乙二氧基” 为

所用的术语“含有二个氮原子的4-12元杂环”，是指式 ，式中m是1或2，R19是H，烷基，芳基或芳烷基，尤 其优选的是4-9元环，包括有例如咪唑啉环。

所用的术语“任选取代的5-元杂芳环”，是指例如式 “与苯稠合的5-元杂芳环”是指该“5-元杂芳环”与苯稠合。与苯 稠合的5-元杂芳环的代表是苯并咪唑，

所用的术语“双环烷基”，是指含有6～大约12个碳原子的双环烷 基，为饱和的或部分不饱和的双环烃基。

所用的术语“酰基”，是指 ，其中R26是烷基，链烯基， 链炔基，芳基或芳烷基，并可按上述任意取代。这种基团有乙酰基，苯 甲酰基，等等。

所用的术语“巯基，是指式

所用的术语“磺酰基”，是指式 基，式中R27为上述 的烷基，芳基或芳烷基。

所用的“卤烷硫基”，是指式-S-R28，式中R28为上述的卤烷基。

所用的术语“芳氧基”，是指式 ，其中R29为上述的芳 基。

所用的术语“酰氨基”，是指式 基，其中R30为上 述的烷基，芳烷基或芳基。

所用的术语“氨酰基”，是指式

所用的术语“烷胺基”，是指式-NHR32，式中R32是上述的烷基。

所用的术语“二烷胺基”，是指式-NR33R34，式中R33和R34为上 述的相同或不同的烷基。

所用的术语“三氟甲基”，是指式

所用的术语“三氟甲氧基”，是指式 ，式中R35是一 单链或上述的一个亚烷基。

所用的术语“烷胺基磺酰基”，是指式 ，式中R36 是上述的烷基。

所用的“烷磺酰氨基”，是指式 ，式中R36为上 述的烷基。

所用的术语“三氟甲硫基”，是指式

所用的术语“三氟甲磺酰基”，是指式

所用的术语“含有一个氮原子的4-12元单环或双环”，是指4- 12个原子、优选为4～9个原子的饱和或部分不饱和的单环或双环，环 中一个原子是氮原子。这样的环可任选地含有另一个选自氮、氧或硫的 杂原子。杂环包括有吗啉，哌啶和哌嗪，硫代吗啉，四氢吡咯，脯氨酸， 氮杂环庚烯，等等。

所用的术语“苄基”是指式

所用的术语“苯乙基”是指式

所用的术语“含有一个氮和一个硫或一个氧原子的4-12元杂环”， 是指含4-12个原子、优选为4-9个原子的、其中至少一个原子是氮 和至少一个原子是氧或硫原子的杂环。该定义的杂环有噻唑啉，等等。

所用的术语“芳磺酰基”，或“芳砜基”，是指式 式 中，R37为上述的芳基。

所用的术语“烷亚砜基”或“芳亚砜基”，是指 ，式 中R38分别为上述的烷基或芳基。

所用的术语“膦酸衍生物”，是指式 式中R39和R40 相同或不相同，为H，烷基，芳基或芳烷基。

所用的术语“亚膦酸衍生物”，是指式 式中R41是 上述的H、烷基、芳基或芳烷基。

所用的术语“芳硫基”，是指式 ，式中R42是上述的 芳基。

所用的“单环杂环硫基”，是指式 ，式中R43为上述 的单环杂环基。

所用的术语“单环杂环亚砜基”和“单环杂环砜基”，分别指式 和 ，式中R43为上述的单环杂环基。

所用的术语“烷羰基”，是指式 ，R50为上述的烷基。

所用的术语“芳羰基”，是指 ，R51为上述的芳基。

所用的术语“烷氧羰基”是指式 式中R52为上述的烷氧 基。

所用的术语“芳氧羰基：，是指式 ，式中R51为上述 的芳基。

所用的术语“卤烷羰基”，是指式 ，式中R53为上述 的卤烷基。

所用的术语“卤烷氧羰基”，是指式 ，式中R53为上述 的卤烷基，

所用的术语“烷硫羰基”，是指式 ，式中R50为上述的 烷基。

所用的术语“芳硫羰基”，是指式 ，式中R51为上述的 芳基。

所用的术语“酰氧甲氧羰基”，是指式 ，式 中R54为上述的酰基。

所用的术语“芳胺基”，是指式R51-NH-式中R51为上述的芳基。

所用的术语“聚烷基醚”，是指通常用的二醇类，如三乙二醇，四 乙二醇，聚乙二醇，等等。

所用的术语“烷胺酰基”，是指 式中R50为上述的烷 基。

所用的术语“N，N-二烷胺酰基”，是指式 式中R50 为上述的相同或不同的烷基。

所用的术语“新戊酰氧甲基”，是指式

所用的术语“酰氧基”，是指式R55-O-，式中R55是上述的酰基。

所用的术语“组合物”，是指将多种成分或组分混合所得到的产物。

所用的术语“药用载体”，是指药用材料，但分或赋形剂，如液体 或固体的填充剂，稀释剂，赋形剂，溶剂或化学试剂的转运剂。

所用的术语“有效治疗量”，指剂可使研究者或医生所希望的组织、 系统或动物呈现生物学或医疗效应的药物或药剂的剂量。

下列的缩写词与相应的意义可互换应用： 1H-NMR＝质子核磁共振 AcOH＝乙酸 BH3-THF＝硼烷-四氢呋喃复合物 Bn＝苄基 BOC＝叔丁氧羰基 ButLi＝丁基锂 Cat＝催化量 CH2Cl2＝二氯甲烷 CH3CN＝乙腈 CH3I＝碘甲烷 CHN分析＝碳/氢/氮元素分析 CHNCl分析＝碳/氢/氮/氯元素分析 CHNS分析＝碳/氢/氮/硫元素分析 DCC＝1，3-二环己基碳二亚胺 DIBAL＝氢化二异丁基铝 DIEA＝二异丙基乙胺 DMA＝N，N-二甲氨基乙酰胺 DMAP＝4-(N，N-二甲胺基)吡啶 BMF＝N，N-二甲基甲酰胺 DSC＝二琥珀酰碳酸酯 EDCl＝1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐 Et＝乙基 Et2O＝乙醚 Et3N＝三乙胺 EtOAc＝乙酸乙酯 EtOH＝乙醇 FAB MS＝快原子轰击质谱 g＝克 GIHA＝间-胍基马尿酸 GIHA HCl＝间-胍基马尿酸盐酸盐 HPLC＝高效液相色谱 IBCF＝氯代甲酸异丁酯 i-Pr＝异丙基 i-Porp＝异丙基 K2CO3＝碳酸钾 KOH＝氢氧化钾 KSCN＝硫氰酸钾 LiOH＝氢氧化锂 MCPBA＝间氯过氧苯甲酸 Me＝甲基 MeOH＝甲醇 MeSCl＝甲烷磺酰氯 mg＝毫克 MgSO4＝硫酸镁 ml＝毫升 ml＝毫升 MS＝质谱 N2＝氮气 NaCNBH3＝氰代硼氢化钠 NaH＝氢化钠 NaHCO3＝碳酸氢钠 NaOH＝氢氧化钠 Na3PO4＝磷酸钠 Na2SO4＝硫酸钠 NEt3＝三乙胺 NH4HCO3＝碳酸氢铵 NH4+HCO2-＝甲酸铵 NMM＝N-甲基吗啉 NMR＝核磁共振 RPHPLC＝反相高效液相色谱 RT＝室温 Pd/c＝钯/碳 ph＝苯基 Pt/c＝铂/碳 t-BOC＝叔丁氧羰基 TFA＝三氟乙酸 THF＝四氢呋喃 TMEDA＝三甲基乙二胺 TMS＝三甲硅烷基 Δ＝加热反应混合物。

式I-V所示的化合物可以多种异构形式存在，所有这些异构体均 被包括在内。互变异构体也包括在内，并且也包括这些异构体和互变异 构体的药用盐。

本说明中的结构式和分子式中，一个键穿过环上的一个键，可表示 为与环上的任何一个原子相连。

“药用盐”一语是指由式I化合物与一种其负离子对人体适宜的酸 相混合而制备的盐。药用盐的实例包括有：盐酸盐，溴氢酸盐，碘氢酸 盐，硫酸盐，磷酸盐，醋酸盐，丙酸盐，乳酸盐，马来酸盐，苹果酸盐， 琥珀酸盐，酒石酸盐，等等。用常规的方法(参见Berge等，J.pharm.Sci.， 66(1)，1-19(1977)的附加药用盐实例)制备所有这些药用盐。

选择性地抑制或拮抗αvβ3整合素的本发明化合物，可用口服，胃肠 道外、吸入喷雾或局部用药，在单元剂型中还含有常规的药用载体，助 剂和赋形剂。胃肠道外给药例如包括皮下、静脉、肌肉内、胸骨内、输 注或腹胫内注射。

本发明化合物可以任何适宜途径给药。即以药用组合物所适宜的途 径并对所治疗的疾病是有效的剂量给药。为阻止或中止该疾病过程或治 疗其病理状态所需的化合物的有效治疗量是熟悉本药物技术的于临床前 和临床中应用时的技术人元很容易确定的。

因此，本发明提供了治疗经选择性抑制或拮抗αvβ3细胞表面受体所 介导的病理状态的方法，该方法包括给以有效治疗量的选自式I-V所 示化合物组的一个化合物，式I-V中一个或多个化合物与一个或多个 无毒的药用载体和/或稀释剂和/或助剂(本文通称作“载体材料)结合给 药，如若需要还可用其它活性成分。本发明尤其提供了抑制αvβ3细胞表 面受体的方法。本发明更提供了抑制骨重吸收、治疗骨质疏松、抑制癌 症体液血钙过高症、治疗佩吉特病、抑制肿瘤转移、抑制癌生成(实体 瘤生长)、抑制包括肿瘤血管生成的血管生成，治疗糖尿病视网膜病， 抑制关节炎，牛皮癣和牙周病，以及抑制平滑肌细胞迁移(包括再狭窄) 等方法。

基于本领域技术人元所熟知的标准实验室实验方法和技术，以及与 已知有效化合物的比较，式I化合物可用来治疗有上述病理状态的患者。 本领域技术人元皆知他们能够选择最适宜的本发明的化合物，这取决于 各种因素，包括对用标准测定方法和动物模型实验结果的评价。

对患者上述一种病理状态的患者治疗时，包括给以有效治疗量的式I 化合物，以控制该状态或延长患者的生存时间。所用的术语“抑制作用” 是指减慢、阻断、停止或中止该疾病状态，但未必指的完全清除病理状 态。延长患者的生存期，但无显著的有利的效果，说明在一定程度上对 疾病有所控制。

如前所述，本发明化合物可用于各种生物学、预防和治疗领域中 这些化合物对预防或治疗αvβ3整合素起作用的任何疾病或症状是有用 的。

化合物和/或含有该化合物的组合物的剂量范围根据多种因素而 定；包括类型、年龄、体重、性别、患者之病状，疾病的严重程度；用 药途径，以及所用特定化合物的活性。所以剂量范围可以很宽。剂量水 平可由每日每公斤体重大约0.01mg到大约100mg，以治疗上述的各种疾 病。

经注射给药的有效成分作为组合物制成剂型，置于例如生理盐水、 右旋糖或水等适宜的载体中。每日合适的剂量有代表性的是每公斤体重 大约0.01-10mg，多次注射给药，这些取决于上述的因素。

哺乳动物需要作这种治疗给药时，将有效治疗量的化合物通常与一 种或多种适于给药途径的助剂合用。可与化合物混合的有：乳糖，蔗糖， 淀粉，烷酸的纤维素酯，纤维素烷基酯，滑石粉，硬脂酸，硬脂酸镁， 氧化镁，磷酸和硫酸的钠盐或钙盐，明胶，西黄耆胶，藻酸钠聚乙烯吡 咯烷酮，和/或聚乙烯醇，并打成片剂或装入胶囊以方便给药。另外， 化合物可溶于水、聚乙二醇，丙二醇，乙醇，玉米油，棉籽油，花生油， 麻油，苄醇，氯化钠，和/或各种缓冲液。其它助剂和用药方式在药剂界 中是广泛皆知的。

本发明所用的药物组合物可进行常规的药剂学处理，例如灭菌，和/ 或也可包含常规的药剂学助剂，如防腐剂，稳定剂，保湿剂，乳化剂， 缓冲剂，等等。

制备本发明化合物的合成通法列于流程图I-XXI。对本发明各个 方面的解释和实际的操作在本发明的适当之处叙述。下面的流程图和实 施例只是对本发明加以说明。本领域的技术人员在理解和已知这些流程 和实施例中所述的不同条件和过程后，可合成本发明的各种化合物。

除非特指，所有使用的原料和装置均可买到。

                  流程图I

流程I叙述了吡啶基β-氨基酸的合成，它可用来合成R1为吡啶基 的本发明化合物。该反应可用常规的方法加以变换，即用各种其它的适 宜的醛代替吡啶甲醛，从而制备其它的芳基、烷基或杂环基取代的β- 氨基酸。简要地说，在流程I中将醋酸铵加到吡啶甲醛的异丙醇溶液中， 再加入丙二酸。搅拌回流反应混合物，滤集生式的沉淀，用热异丙醇洗 涤，干燥，得3-氨基-3-(3-吡啶基)丙酸。该酸在过量乙醇和 过量HCl气的存在下加热，合成其乙酯。

另外，本发明用的β-氨基酸可用改良的克诺维纳格反应得到 (Secor，H，V.；Edwards，W.B.J.J.Org.Chem.1979，44，3136- 40；Bellasoued，M.；Arous-Chtar，R.；Gaudemar，M.J.；J Organometal.Chem.1982，231，185-9)，通过与西佛碱经利付马斯基 反应得到(Furukawa，M.；Okawara，T.；Noguchi，Y.；Terawaki， Y.Chem Pharm.Bull..1978，26，260)，麦克尔加成到丙烯酸衍生物 而得到(Davies，S.G.；Ichihara，O.Tetrahedron：Asvmmetrv 1991，2，183-6；Furukawa，M.；Okawara，T R.；Terawaki， Y.Chem.Pharm.Bull.，1977，25，1319-25)。新近的方法包括 用有机金属试剂在Pd或Zn调节的偶联反应中而得到(Konopelski， J.；Chu，K.S.；Negrete，G.R.；J.Org.Chem.1991，56，1355； Mokhallalati，M.K.；Wu，M.J.；Prigden，L.N.Tetrahedron Lett. 1993，34，47-50)，从而补充了如β-酮酯还原氨化的较传统的反 应。

外消旋的β-烷基β-氨基酯也可方便地由相应的β-内酰胺于乙 醇中用无水HCl气处理而制得。β-内酰胺是由相应的烯和异氰酸氯磺 酰酯反应而制得(Szabo，W.A.Aldrichimica Acta，1977，23和它 所引用之文献)。后面的方法用于制备α-和β-取代的β-氨基酸 (Manhas，M.S.；Wagle，D.R.；Chong，J.；Bose，A.K.， Hetrocvcles，1988，27，1755。)另一个合成α-取代的β-氨基酸 的途径是在20-80℃温度范围内，于20-100atm压力下，用瑞尼镍 还原氰乙酸酯(Testa，E.；Fontanella，L.；Fava，F，Fermaco Ed. Sci.，1958，13，152；Testa，E.；Fontanella，L，Annalen 1959， 625，95)。此外，有多种制备β-氨基酸的方法，可经还原酮酸的腙 (Gootijes，J.；Nomte，W.Th.Rec.Trav.Chem.1953，72，721)， 还原肟(Anziegin，A.；Gulewivich，W.Z.Phvsiol.Chem.，1926， 158，32)，以及由硝基丙酸来制备。最终产物的纯化通常用反相高效 液相色谱(RP HPLC)[高效液相色谱，蛋白和肽化学，F.Lottspeich， A.Henscher，K.P.Hupa，(eds)Walter DeGruyter，纽约，1981]或用结 晶法纯化。

                       流程图II

流程图II说明了用于将α-氨基酸偶联到以流程图I制备的β-氨基 酸的方法。这样制得的化合物用于偶联到取代的苯甲酸化合物，以制备 本发明所要的化合物。该方法可用常规方法改良而将其它的氨基烷酸偶 联到流程I所制备的β-氨基酯上。

简言之，于流程II中将N-甲基吗啉加到t-Boc-甘氨酸的DMF 溶液中，然后加入氯代甲酸异丁酯。在另一烧瓶内，该取代的β-氨基 酯的DMF溶液与N-甲基吗啉混合，将两个混合物于室温下混合，生 成 得到的产物用HCl/二噁烷去保护基，生成(B)。

                  流程图III

流程III是用于制备本发明的胍基苯甲酸部分的方法学说明，它可用 来与甘氨酸-β-氨基酸进行偶联。这也可用本领域熟知的其它适宜的 胍基化试剂完成，例如用吡唑-甲脒-盐酸盐(Aldrich)。流程III的方法 可用常规的方法和技术改进，以制备用来同β-氨基酸偶联的其它化合 物。

简言之，于流程图III中，将3-氨基苯甲酸加到3，5-二甲基吡唑 -1-甲脒硝酸盐于二恶烷、水和DIEA的溶液中。搅拌回流该混合物， 滤集沉淀，洗涤，干燥。沉淀再与水混成浆状，用盐酸酸化，浓缩，除 去溶剂，剩余物于乙醚中成浆状，干燥，得3-胍基苯甲酸盐酸盐(C)。

                      流程图IV

流程IV是用于将胍基苯甲酸(C)偶联到本发明所需化合物的β-氨 基酯(B)部分的方法学说明。该方法可用本领域技术人元熟知的常规方法 加以改进。

简言之，在流程IV中，将氯甲酸异丁酯加到3-胍基苯甲酸(C，流 程III中制得)于DMF和N-甲基吗啉的混合液中。搅拌反应液，将β- 氨基酯化合物(B)(流程II制得)于DMF和N-甲基吗啉的浆液分次加入。 搅拌反应液，滤集沉淀，用DMF洗涤。除去DMF。得到的酯溶于水中， 用乙醚洗涤，水相中加入LiOH，搅拌大约1小时。溶液用三氟乙酸处理 至pH＝5，产物用RPHPLC纯化得所需化合物(D)。

                         流程图V

                           步骤A

                        步骤B **若R11不是氢；用标准的烷化方法进行该烷化反应，生成

它可用来代替该合成方法中的(E)。

                           流程图V(续)

                             步骤C

                            流程图V(续)

                          流程图V(续)

                           步骤C(续)

                         流程图V(续)

                            步骤D

流程V是用于制备本发明各种化合物的方法说明。该方法可由下面 的实例和流程I-IV的更具体的说明。该方法可由本领域技术人元所改 进，用常规方法已知的试剂和条件替换，生成所需的化合物。

具体地说，在流程V和步骤C中，在合成中间体苯甲酸(A1)到(A14) 中，起始氨基苯甲酸 或者可以买到，或者可经还原相应的硝基苯甲酸得到，后者可买到或通 过硝化相应的苯甲酸接着，还原为所要的氨基苯甲酸而合成。这些化合 物的R5都是氢。若R5不是氢，则可用常规方法将氨基进行烷基化。

此外，中间体(A2)的合成通常也可按美国专利3202660所述的一般方 法由相应的氨基苯甲酸制备。

在合成中间体(A3)中所用的 可由 与(Me)3OBF4于二氯甲烷中合成。

在合成中间体(A4)中所用的 可由Y2-CN和甲醇(1当量)和氯化氢气(1当量)于庚烷中合成。

在流程V中的所有的试剂或可买到，或可由本领域技术人元所熟知 的方法合成之。

流程图V步骤C[(A1)到(A14)]中间体与中间体(F)(流程V的步骤B) 的偶联反应除了在流程V的步骤D所述的混合酸酐法外，还可用本领域 技术人元熟知的其它偶联剂进行。

                流程图VA

             醛的另外合成方法

                       Z10的定义与Z1相同

用于制备醛(R1)的方法于流程VA中作了说明，该醛无市售，它用来 制备流程V步骤A所述的β-氨基酸。该β-氨基酸然后再用来合成本 发明化合物，如流程V的步骤A到D所述。

其它这样的方法对本领域技术人元也是已知的，并且可用来合成用 于制备本发明化合物的醛类，

                     流程图VI(A)

             流程图VI(B)

流程VI(A)是合成式I化合物的另一方法，所有的试剂或者可以买 到，或者用本领域技术人元已知的方法得到。

β-氨基酯的合成如同在流程V步骤A制备化合物(E)中所述的那 样。

偶联、胍基化或形成脲和硫脲，可用另外的方法，并为本领域技术 人元所熟知。

流程VI(B)是合成本发明的另外的方法。所有的试剂或可买到，或用 标准的已知方法得到。

                     流程图VII(A)

                  流程图VII(B)

流程VII(A)和(B)与流程VI(A)和(B)相似，是合成本发明化合物的另 外的方法(流程VII(B)比流程VII A更加通用)。与流程VI一样，试剂和 条件并不局限于这些流程中所述的，而是可用本领域技术人元熟知的其 它试剂替换。

                    流程图VIII

流程VIII是合成通式I的基团A化合物的说明，A是氨基噻唑啉或 氨基噻嗪。所有的原料和试剂都可买到，或在所给的其它流程图和实施 例中所述来制备。另外的偶联方法或试剂和条件也可用本领域技术人元 所熟知的其它方法，试剂和条件。

                      流程图IX 氰基胍 实施例D       R7＝Bn，实施例E       R7＝Bn，实施例I

          R7＝Me，实施例F       R7＝Me，实施例J

          R7＝H， 实施例G      R7＝H，实施例K

          R7＝Et，实施例H       R7＝Et，实施例L

        R7＝Bn，R1＝Ph，R＝Bn，实施例132        R7＝Bn，R1＝Ph，实施例136

        R7＝Me，R1＝Ph，R＝Bn，实施例133        R7＝Me，R1＝Ph，实施例137

        R7＝H，R1＝Ph，R＝Bn，实施例134        R7＝H，R1＝Ph，实施例138

        R7＝Et，R1＝Ph，R＝Et，实施例135        R7＝Et，R1＝Ph，实施例139

        R7＝Me，R1＝乙炔基，R＝Et，实施例140    R7＝Me，R1＝乙炔基，实施例141 i)吡啶，N-氰基二硫代亚氨基碳酸二甲酯，70℃。ii)R7NH2，EtOH，回流。iii)THF，MeOH，H2O，NaOH。 iv)CH2Cl2，DMAP，NEt3，EDCl。v)THF，MeOH，H2O，NaOH，2)H+。

              流程图X

                  流程图XI i)N，N′-Bis-Boc-硫脲，DMF，NEt3，HgCl2，0，15mins ii)MeOH，THF，H2O，KOH. iii)CH2Cl2，TFA，0°，90mins.

流程IX、X和XI是合成本发明特定化合物的另外的实例。所有的 原料和试剂可买到，或在本说明中已述。本领域技术人元可用另外的方 法、试剂和条件进行合成。

                     流程图XII

化合物中 1)R1＝CO2H(E)可以买到

(E)由流程V步骤A得到) 其中， 系指氨基酸，该氨基酸由适宜的保护基团保护。 制备其它的R1基的另外合成方法如下：

            流程图XII(续)

*这些均可进一步作为中间体，如在用于例举本发明化合物的合成方 法的各个流程中的(E)。

                     流程XII(续)

本发明化合物的R1为取代的烷基时，可用类似的方法按下述反应进行 合成：

流程XII A概括了在流程XII中由天冬氨酰醇合成保护的天冬氨酰醛 的方法，是由Swern氧化反应并与亲核试剂如可买到的或用标准方法制 备的格氏试剂与该醛反应，从而得到C-4，R1-取代的天冬氨酰醇衍 生物。伯胺产物可用标准的酸性条件除去BOC基来制备，得到中间体β -氨基酸(如流程I)。BOC保护的C-4取代的醇可转化成酮衍生物， 接着用第二次Swern氧化作用，再除去BOC，得到所需的中间体胺(如 流程I)。

为了合成如下的化合物，其中

                  流程图XIII 其中t＝1，Y3和Z3均为氢 然后用同样的方式进一步衍生化，如同前面流程中的列举得到的那样。

          流程图XIV

流程XIV为合成氨基氢化香豆素的方法(参见J.Rico， Tetr.Let.1994，35，6599-6602)，它容易开环生成R1为邻羟基苯基的 部分，并进而用Z1取代。

                   流程图XIV A

流程XIV A是合成氨基氢化香豆素酯的方法，是由流程XIV的氨基 氢化香豆素制备，然后与流程VII(B)的中间体(H)偶联，用 DSC/NMM/DMF使(H)活化或用IBCF/NMM/DMF，继之用氨基氢化香豆 素酯盐酸盐/NMM活化(H)。最后用标准条件进行水解，生成羧酸衍生物。

                  流程图XIV B

流程XIV B是由硫代香豆素合成4-氨基氢化硫代香豆素的方法。 硫代香豆素可根据J.A.Panetta和H.Rapoport，J.Org.Chem.，1982， 47，2626-2628及该文中所引用的文献的方法容易地制备，并且按照 流程XIV的方法转变成4-氨基氢化硫代香豆素。用类似于流程XIV和 XIV A的方法将氨基氢化硫代香豆素与流程VII(B)的中间体(H)偶联。用 碱(例如LiOH或NaOH)于水性有机溶剂中进行水解，生成羧酸-硫醇产 物。

                 流程图XVI

流程XVI是合成本发明的A为环胍的化合物的另一种方法。本领域 技术人元熟知的另外的试剂和物质可适宜地用本领域技术人元熟知的物 质代替，从而生成所需的化合物。

                   流程图XVII

             流程图XVII((续))

流程XVII是合成A为5元或6元环胍的化合物的方法。

AA到FF可以是氢或其它的取代基，如上面所定义的A是含两个氮 的杂环，适宜的取代的二胺可以买到或用本领域熟知的方法合成。

                 流程图XVIII

              流程图XIX

               流程图XX

               流程图XX(续)

流程XVIII-XX为合成潜在的前药的方法，其中胍中的一个或两 个氮原子由潜在的活泼功能基进行衍生。这些方法只是制备本发明化合 物的方法学说明。也可用本领域技术人员熟知的其它的方法、试剂和条 件来合成本发明化合物。

                  流程图XXI

流程XXI进一步说明了本发明化合物的潜在的前药或活性化合物。

流程XXI尤其说明了环状和非环胍化合物的N-羟基或N-烷氧基 类似物的合成方法。

所列的参考文献对流程VIB列举的苯胺的适宜衍生作用的详细合成 作了说明。

               实施例A

3-N-t-Boc-氨基-4-羟基-(3S)-丁酸苄酯的制备

将N-t-Boc-L-天冬氨酸的β-苄酯(75g，20mmol)溶解 于THF(30ml)中，并于0℃和N2气氛下30分钟内滴加到BH3-THF (400ml，40mmol)中。溶液于0℃下搅拌2.5小时后，用10％乙酸 的甲醇(50ml)溶液骤冷，蒸发溶剂。将残留物溶于乙醚(200ml)中， 用1N HCl、饱和K2CO3、水洗涤并以MgSO4干燥。经真空除溶剂离 析出产物，异丙醛/己烷重结晶，mp56-57℃。1H-NMR(d6-DMSO)δ1.4(s， 9H)，2.68(d，2H，J＝6Hz)，3.82(d，2H，J＝5Hz)，4.01 (m，1H)，5.16(s，2H)，5.21(bs，1H)，7.37(bs，5H).

                实施例B

3-氨基-4-(邻氨基苯甲酸基)-(3S)-丁酸苄酯的制备

将实施例A的3-N-t-Boc-氨基-4-羟基-(3S)-丁酸苄 酯(10g，32mmol)溶于二甲基甲酰胺(50ml)中，接着溶于三乙胺 (4.4g，46mmol)中。向上述溶液中加靛红酸酐(5.0g，3mmol)并于 25℃下搅拌该溶液24小时。反应完成后(经RPHPLC监测)，加水并 用乙酸乙酯(100ml)提取产物，以Na2SO4干燥。蒸发掉溶剂后，得到 12g黄色油状物。向该油中加二噁烷(20ml)，接着加4N HCl的二噁 烷(20ml)溶液。反应物放置4小时，加乙醚并从溶液中分出油状物。 该过程重复两次。将乙醚加到半固体中并激烈搅拌16小时。得到白色固 体，其MS和NMR与预期的结构一致。

               实施例BB

3-硝基苯甲酰基甘氨酸的制备

将甘氨酸(20g，266mmol)加到水(200ml)中，接着加氢氧化钾 (20g，357mmol)，在冰浴上冷却至0℃。于10分钟期间，向该溶液 中滴加3-硝基苯甲酰氯(20g，108mmol)的乙腈(20ml)溶液。反 应完成后(3-4小时)，加浓盐酸至pH2，接着加NaCl饱和水溶液(75ml)。 过滤产物，水洗，空气干燥，得22g产物，产率90％。1H-NMR(d6-DMSO) δ，3.92(d，2H，J＝6.1)，7.9(t，1H，J＝7.9)，8.3(t，1H，J＝5.6)，8.35(m，2H)， 8.69(s，1H)，9.25(t，1H，J＝7.2Hz)。MS(FAB)m/e 231.0(M+Li+)。 元素分析C9H8N2O5：

计算值：C，45.89 H，4.25 N，9.92

测定值：C，45.97 H，4.44 N，10.11

              实施例C

N-〔2-〔〔(3-硝基苯基)羰基]氨基]-1-氧乙基]-β-丙 氨酸乙酯的制备

将N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(14g，5.5mmol)加到实施例BB的3 -硝基苯甲酰基甘氨酸(10g，4.5mmol)的干燥二甲基甲酰胺(30ml) 溶液中，接着加N，N-二甲基氨基吡啶(200mg)。1小时后，一次加 入β-氨基丙酸乙酯盐酸盐(7g，4.6mmol)的20％碳酸钾水溶液 (50ml)。反应完成后，过滤收集产物(14g，产率97％)。 1H-NMR(d6-DMSO)δ，1.18(t，3H，J＝7.2Hz)，2.46(t， 2H，J＝7.0)，3.34(q，2H，J1＝6.7Hz，J2＝12.6Hz)， 3.87(d，2H，J＝5.9Hz)，4.05(q，2H，J1＝7.4Hz，J2＝ 14.2Hz)，7.8(t，1H，J＝8.0Hz)，8.1(t，1H，J＝5.6 Hz)，8.35(m，2H)，8.71(s，1H)，9.22(bs，1H). MS(FAB)m/e 324.2(M+H+) 元素分析C14H17N3O6  H2O

计算值：C，49.26 H，4.99 N，12.32

测定值：C，49.42 H，5.01 N，12.21

                实施例D

3-〔〔(氰基亚氨基)(甲硫基)甲基]氨基]苯甲酸甲酯的制备

搅拌的3-氨基甲基苯甲酸酯(6.04g，40mM)和N-氰基二硫亚 氨基碳酸二甲酯(11.96g，80mM)在吡啶(70ml)中的混合物，于氮 气氛下回流加热2.5小时。将反应混合物冷却至室温。在室温下放置过 夜，从反应混合物中结晶出标题化合物6.2g。标题化合物不必提纯可用 于以下实施例。

MR与预想的结构一致。

               实施例E

3-〔〔(氰基亚氨基)〔(苯基甲基)氨基]甲基]氨基]苯甲酸甲 酯的制备

搅拌着的实施例D的化合物(1.0g)和苄胺(440mg)在乙醇 (15ml)中的混合物，在氮气氛下回流加热3小时。将反应混合物冷却 至室温。于室温下放置过夜，得到白色固体并经过滤分离(720mg)。 粗滤液经硅胶色谱进一步提纯(洗脱剂：乙酸乙酯/己烷1∶1)，得到标 题化合物(550mg)为白色固体。

NMR与预想的结构一致。

                 实施例F

3-〔〔(氰基亚氨基)(甲基氨基)甲基]氨基]苯甲酸甲酯的制备

按实施例E所述方法制备标题化合物，用等当量的甲胺代替苄胺。 所得标题化合物为白色固体(产率55％)。

NMR与预想的结构一致。

实施例G

3-〔〔氨基(氰基亚氨基)甲基]氨基]苯甲酸甲酯的制备

实施例D所得化合物(1.0g)和氢氧化铵(2ml)在乙醇(20ml) 中的混合物，于密封管中在70℃下加热3.5小时。将反应混合物冷却至 室温并蒸发至一半体积，室温放置放夜后，得到白色固体，过滤分离并 用甲醇洗。所得标题化合物(389mg)为白色固体。

NMR与预想的结构一致

                   实施例H

3-〔〔(氰基亚氨基)(乙氨基)甲基]氨基]苯甲酸甲酯的制备

按实施例G所述进行反应，不过，要用等当量的乙胺代替氢氧化铵。 所得标题化合物(78％)为白色固体。

NMR与预想的结构一致。

                   实施例I

3-〔〔(氰基亚氨基)(苯基甲基)氨基)甲基]氨基]苯甲酸的制 备

向搅拌的实施例E化合物(250mg)在THF(2ml)和MeOH (2ml)的溶液中，加1N NaOH(2ml)。在室温下搅拌反应混合物2 小时，真空浓缩，得到白色固体。残余物悬浮于水中并用1N HCl酸化。 过滤所得固体，乙醚洗，干燥，得标题化合物(140mg)，不经进一步 提纯可用于以下实施例。

NMR与预想的结构一致。

             实施例J

3-〔〔(氰基亚氨基)(甲基氨基)甲基]氨基]苯甲酸的制备

按实施例I所述方法制备标题化合物，但实施例E的化合物用等当 量实施例F的化合物代替。所得标题化合物(87％)为白色固体。

NMR与预想的结构一致。

                   实施例K

3-〔〔氨基(氰基氨基)甲基]氨基]苯甲酸的制备

按实施例I所述方法制备标题化合物，但是实施例E的化合物以等 当量的实施例G的化合物代替。所得标题化合物(92％)为白色固体。

NMR与预想的结构一致。

                   实施例L

3-〔〔(氰基亚氨基)(乙基氨基)甲基]氨基]苯甲酸的制备

按实施例I所述方法制备标题化合物，但是实施例E的化合物以等 当量的实施例H的化合物代替。所得标题化合物(81％)为白色固体。

NMR与预想的结构一致。

                   实施例M

m-胍基马尿酸盐酸盐的制备 步骤A

甘氨酸(200g)和KOH(200g)的水(1000ml)溶液在0℃以 滴加m-硝基苯甲酰氯(100g)的乙腈(100ml)溶液处理。反应混 合物温热至室温并搅拌4小时。加12N HCl水溶液至pH＜2。反应混合 物于室温下放置过夜。过滤所得固体，水洗(2×250ml)，60℃下真 空干燥。分离得到100g m-硝基马尿酸。1H-NMR和CHN分析结 果与所要产物一致。 步骤B

m-硝基马尿酸(50g)和5％Pd/C(5g)在甲醇(200ml)中 的悬浮液经受50psi的氢压。2小时后，过滤反应物。所得灰白色固体用 2％HCl水溶液洗(2×250ml)。浅黄色溶液被冻干，得到m-氨基 马尿酸盐酸盐(30g)。 步骤C

m-氨基马尿酸盐酸盐(10g)，NMM(12ml)和1H-吡唑- 1-甲脒盐酸盐(8.3g)在二噁烷(80ml)和水(20ml)的混合物回 流6小时。移开热浴，反应混合物冷至室温。加饱和NaCl水溶液(10ml) 并过滤反应混合物。所得固体用二噁烷(20ml)接着用丙酮(20ml) 洗涤。将橙红色固体溶解于1∶1的CH3CN∶H2O中并用20％HCl水溶液 处理至pH＜3。冻干固体，得到m-胍基马尿酸盐酸盐(10g)。MS、 1H-NMR和CHN分析结果与所要产物一致。

           实施例N

3-〔〔(氰基亚氨基)〔(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]氨基]苯甲 酸甲酯的制备

按实施例E所述方法制备标题化合物，但是用等当量的2-(氨基 甲基)吡啶代替苄胺。所得标题化合物为白色固体(产率75％)。

NMR与预想的结构一致。

            实施例O

3-〔〔(氰基亚氨基)〔(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]氨基]苯甲 酸的制备

按实施例I所述方法制备标题化合物，不过，用等当量实施例N的 化合物代替实施例E的化合物。所得标题化合物为白色固体(产率70 ％)。

NMR与预想的结构一致。

                实施例P

3-〔〔(氰基亚氨基)〔(3-吡啶基甲基)氨基]甲基]氨基]苯甲 酸甲酯的制备

按实施例E所述方法制备标题化合物，但是，用等当量3-(氨基 甲基)吡啶代替苄胺。所得标题化合物为白色固体(产率70％)。

NMR与预想的结构一致。

                实施例Q

3-〔〔(氰基亚氨基)〔(3-吡啶基甲基)氨基]甲基]氨基]苯甲 酸的制备

按实施例I所述方法制备标题化合物，但是，用等当量实施例P的 化合物代替实施例E的化合物。所得化合物为白色固体(产率65％)。

NMR与预想的结构一致。

                  实施例R

下式化合物的制备

向搅拌的DL-3-氨基-3-苯基丙酸(16.5g，0.1M)，二噁烷 (160ml)，水(40ml)和三乙胺(25ml)的溶液中加碳酸二叔丁酯 (18.6g，0.1mol)。于室温下搅拌反应混合物16小时。真空浓缩反应混 合物得到油样胶。将其溶于乙酸乙酯。用水、饱和NaCl和水洗所得溶液。 分出有机相干燥(Na2SO4)并蒸发，得到粗产物(8.9g)，不必提纯即 用于下步(实施例S)。

NMR与预想的结构一致。

               实施例S

下式化合物的制备

向搅拌的实施例R的化合物(8.3g，30mmol)的DMF(50ml)溶 液中加K2CO3(10g)和苄基溴(5.7g，30mmol)。在氮气氛下和室温 下搅拌反应混合物16小时。用水(400ml)稀释反应混合物并用乙酸乙 酯提取。分出有机相，用水、5％NaHCO3和水洗，干燥(Na2SO4)和 真空浓缩，得到粗制酯(8.5g)。不必进一步提纯，标题化合物用于下 步(实施例T)。

NMR与预想的结构一致。

                  实施例T

下式化合物的制备

向搅拌的实施例S的化合物(2.0g)的二氯甲烷(20ml)溶液中， 加三氟乙酸(20ml)。于室温下搅拌反应混合物16小时。真空浓缩反 应混合物，得到2.05g粗产物，不必进一步提纯可用于下步(实施例U)。

NMR与预想的结构一致。

                 实施例U

下式化合物的制备

于0℃下向搅拌的N-t-Boc-甘氨酸(876mg，5mmol)、二 氯甲烷(20ml)和N-甲基吗啉(1.01g)的溶液中，加IBCF(690mg) 并于0℃搅拌反应混合物15分钟。于0℃下将实施例T的产物(1.845g) 加到反应混合物中。将反应混合物温热至室温并再搅拌6小时。用水、 饱和NaHCO3溶液和水先后洗反应混合物，干燥(Na2SO4)，真空浓缩， 得到粗产物(2.2g)。经闪蒸柱提纯，92.5∶7∶0.5/CHCl3∶乙醇∶NH4OH洗脱，得到标题化合物(1.82g)为油状物。

NMR与预想的结构一致。

                  实施例V

下式化合物的制备

向搅拌的实施例U的产物(1.8g)和二氯甲烷(20ml)的溶液中， 加三氟乙酸(12ml)，于室温下搅拌反应混合物16小时。真空浓缩反 应混合物，得到粗产物(1.7g)为油样胶，不必进一步提纯可用于下步 骤(实施例132、133和134)。

NMR与预想的结构一致。

                  实施例1

(±)β-[[2-[[[3-〔(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]吡啶-3-丙酸乙酯的双(三氟乙酸)盐的制备 步骤A

向3-吡啶甲醛(300ml)的2-丙醇(3升)溶液中加乙酸铵 (297g)，接着加丙二酸(398g)。回流搅拌反应混合物5小时。趁 热滤出沉淀并用热的异丙醇(2升]洗涤。干燥所得白色固体，得到DL -3-氨基-3-(3-吡啶基)丙酸(220g)，为白色固体。

NMR和MS与所要产物的一致。 步骤B

步骤A的DL-3-氨基-3(3-吡啶基)丙酸(220g)在无水 乙醇中(3.6升)成浆液。在搅拌下向该浆液中鼓HCl气40分钟(慢慢 放热至61℃)。然后，回流加热该浆液4小时(1-1.5小时后形成溶 液)。在冰浴上冷却反应混合物至5℃。于5℃下搅拌1.5小时后，滤出 所得白色沉淀，用乙醛充分洗涤，于50℃下真空干燥，得到331.3g DL -3-氨基-3-(3-吡啶基)丙酸乙酯二盐酸盐，为白色固体。

NMR和MS与所要产物的一致。 步骤C

于5-10℃下，向步骤B的DL-3-氨基-3-(3-吡啶)丙 酸乙酯二盐酸盐(220.6g，0.83mol)的无水THF(2升)和三乙胺 (167.2g，1.65mol)溶液中，分次加入N-t-Boc-甘氨酸的N-羟 基琥珀酰亚胺酯(225g，0.826mol)(Sigma)(不放热)。于室温下 搅拌反应混合物过夜。过滤出沉淀并用THF洗。真空除去滤液中的溶剂。 将残留物溶于乙酸乙酯(2.3升)。用饱和碳酸氢钠(2×900ml)和 水(3×900ml)依次洗乙酸乙酯层，用MgSO4干燥，真空除去溶剂。 残留物在10％乙酸乙酯/己烷(2.5升)中成浆并放置过夜。滤取沉淀、 用10％乙酸乙酯/己烷(1升)和己烷依次洗涤，干燥，得到β-[[2- 〔〔(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]乙酰基]氨基]吡啶-3-丙酸乙 酯(233g)，为白色固体。

NMR和MS与预想的结构一致。 步骤D

将步骤C的β-[[2-〔〔(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]乙酰 基]氨基]吡啶-3-丙酸乙酯(232g，0.66mol)溶液于温热的二噁烷(1 升)中。冷至室温后，慢慢加入4M HCl的二噁烷(1.6升)(Aldrich) 溶液。几分钟后生成白色沉淀，然后变粘稠。2小时后，滗出溶剂。将 该粘稠物在乙醚中制成浆液并滗出乙醚直至得到白色固体。真空干燥该 白色固体，得到β-〔(2-氨基乙酰基)氨基]吡啶-3-丙酸乙酯二 盐酸盐(224.2g)，为白色吸湿性固体。

NMR和MS与预想的结构一致。 步骤E

向3，5-二甲基吡唑-1-甲脒硝酸盐(6g，0.03mol)(Aldrich) 和二异丙胺(3.8g，0.03mol)的二噁烷(20ml)和水(10ml)溶液中 加3-氨基苯甲酸(2.7g，0.02mol)。回流搅拌反应混合物2.5小时后， 于室温下过夜。滤取所得沉淀，用二噁烷/水洗，干燥。该沉淀在水中制 成浆液，用浓HCl酸化直至形成溶液。真空除去溶剂，残留物在乙醚中 成浆两次(滗出乙醚)。真空干燥产物，得到3-胍基苯甲酸盐酸盐 (1.77g)，为白色固体。

NMR和MS与预想的结构一致。 步骤F

在冰浴下向步骤E的产物(0.49g，0.0023mol)和N-甲基吗啉 (0.23g，0.0023mol)的无水DMF(8ml)溶液中，加氯甲酸异丁酯(0.3/g， 0.0023mol)于冰浴温度下搅拌5分钟后，将步骤D的产物(0.73g， 0.0023mol)和N-甲基吗啉(0.46g，0.0045mol)在无水DMF(8ml) 中的浆液一次加入。于室温下搅拌反应混合物过夜。于78℃水浴上真空 除去溶剂，并经RPHPLC分离产物，得到(±)β-[[2-[[[3-〔〔氨 基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]吡啶-3-丙酸乙酯 二(三氟乙酸)盐(800mg)，为吸湿性白色固体。

NMR和MS与预想的结构一致。

               实施例2

(±)β-[[2-[[[3-〔(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]吡啶-3-丙酸二(三氟乙酸)盐的制备

向实施例1的产物(700mg，0.001mol)的水溶液(20ml)中加LiOH(160mg，0.0038mol)。于室温下搅拌反应混合物1小时。在以TFA 降低pH值至≈5后，经RPHPLC分离产物，得到标题化合物(640mg)， 为白色固体。

NMR和MS与预想的结构一致。

              实施例3

(±)β-[[2-[[[3-〔(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]苯丙酸乙酯三氟乙酸盐的制备

按实施例1的方法制备标题化合物，但是，以等当量的苯甲醛代替 步骤A中的3-吡啶甲醛。

NMR和MS与预想的结构一致。

              实施例4

(±)β-[[2-[[[3-〔(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]苯丙酸三氟乙酸盐的制备

向在水(10ml)中的实施例3的产物(0.37g，0.0007mol)中加 LiOH(80mg，0.002mol)。于室温下搅拌反应混合物1小时。用TFA 调节pH至≈3并经RPHPLC分离产物，得到标题化合物(280mg)， 为白色固体。

NMR和MS与预想的结构一致。

             实施例5

(±)β-[[2-[[[3-〔(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-1，3-苯并二氧杂环戊烯-5-丙酸乙醛三氟乙酸盐的制备

按实施例1的方法制备标题化合物，但是，用等当量的胡椒醛 (Aldrich)代替步骤A的3-吡啶甲醛。

NMR和MS与预想的结构一致。

         实施例6

(±)β-[[2-[[[3-〔(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨 基]乙酰基]氨基]-1，3-苯并二氧杂环戊烯-5-丙酸三氟乙酸盐的制备

向在水(40ml)和乙腈(5ml)中的实施例5的产物(0.35g， 0.0006mol)中加LiOH(70mg，0.0017mol)。于室温下搅拌反应混合 物1小时。用TFA降低pH值至≈4.5并经RPHPLC分离产物，得到标 题化合物(280mg)，为白色固体。

NMR和MS与预想的结构一致。

               实施例7

(±)β-[[2-[[[3-〔(氨基亚氨基甲基)氨基]萘-1-基]羰基] 氨基]乙酰基]氨基]吡啶-3-丙酸乙酯二(三氟乙酸)盐的制备 步骤A

向在MeOH/H2O(40ml，1∶l)的3-硝基-1-萘甲酸甲酯(2.5g， 0.011mol)(Aldrich)中加LiOH(1.8g，4当量)。于室温下搅拌溶液 过夜。在氮气流下除去溶剂。将残留物溶于水中并用浓HCl酸化溶液。 滤取沉淀，水洗，干燥，得到3-硝基-1-萘甲酸(2.18g)，为白色 固体。 步骤B

将3-硝基-1-萘甲酸(1.77g，0.008mol)溶解于最少量的温甲 醇中。加10％Pd/C(300mg)并于50psi H2下和帕尔摇动器上摇动5 小时。经硅藻土滤出催化剂和真空除去溶剂。干燥残留物，得到3-氨 基-1-萘甲酸(1.43g)，为桃红色固体。 步骤C

向在二噁烷(5ml)和水(2.5ml)中的3，5-二甲基吡唑-1-甲 脒硝酸盐(1.6g，0.008mol)(Aldrich)和二异丙基乙基胺(1.02g， 0.008mol)中，加3-氨基-1-萘甲酸(1g，0.0053mol)。回流搅拌 反应混合物过夜。冷却反应混合物至室温，滤取沉淀，用二噁烷/水洗， 干燥。该沉淀在水中制成浆液并用浓HCl酸化。于水浴上70℃真空除去 溶剂。残留物在乙醚中制成浆液，滗去乙醚，重复三次，然后，真空干 燥，得到3-胍基-1-萘甲酸盐酸盐(460mg)，为白色固体。 步骤D

于冰浴温度下，向在无水DMF(8ml)中的3-胍基-1-萘甲酸 盐酸盐(400mg，0.0015mol)和N-甲基吗啉(150mg)中，加氯甲酸 异丁酯(210mg)。在冰浴温度下搅拌5分钟后，一次加入实施例1步 骤D的产物(490mg，0.0015mol)，N-甲基吗啉(300mg)和无水 DMF(6ml)的浆液。于室温下搅拌反应混合物过夜。于水浴上78℃ 真空除去溶剂。产物经RPHPLC分离，得到本实施例的标题化合物 (410mg)，为白色固体。

NMR和MS与预想的结构一致。

             实施例8

(±)β-[[2-[[[3-〔(氨基亚氨基甲基)氨基]萘-1-基]羰基] 氨基]乙酰基]氨基]吡啶-3-丙酸二(三氟乙酸)盐的制备

向在水(15ml)和乙腈(2ml)中的实施例7步骤D的产物(280mg， 0.0004mol)中加LiOH(70mg，0.0016mol)。于室温下搅拌反应混合 物1小时。用TFA降低pH值至5并经RPHPLC分离产物，得到标题化 合物(240mg)，为吸湿性白色固体。

NMR和MS与预想的结构一致。

              实施例9

(±)β-[[2-[[[3-〔(4，5-二氢-1H-咪唑-2-基)氨基] 苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]吡啶-3-丙酸乙酯二(三氟乙酸)盐的制 备 步骤A

向在二噁烷(40ml)和水(20ml)中的2-甲硫基-2-咪唑啉 氢碘酸盐(14.6g，0.06mol)(Aldrich)和二异丙基乙基胺(7.6g， 0.06mol)中，加3-氨基苯甲酸(5.4g，0.04mol)。回流搅拌反应混合 物过夜。在冰浴上冷却反应液；滤取所得沉淀，用二噁烷洗。经RPHPLC 提纯粗产物，得到3-(2-氨基咪唑啉)苯甲酸(800mg)。 步骤B

向在无水DMF(8ml)中的步骤A产物(400mg，0.00125mol)和 N-甲基吗啉(130mg，0.00125mol)中，加氯甲酸异丁酯(170mg， 0.00125mol)。于冰浴温度下搅拌5分钟后，一次加入在无水DMF (6ml)中的实施例1步骤D产物(410mg，0.0025mol)和N-甲基吗 啉(250mg，0.0025mol)。于室温下搅拌反应混合物过夜。于79℃水浴 上真空除去溶剂并经RPHPLC分离产物，得到本实施例的标题化合物 (600mg)，为吸湿性白色固体。

NMR和MS与预想的结构一致。

           实施例10

(±)β-[[2-[[[3-〔(4，5-二氢-1H-咪唑-2-基)氨基] 苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]吡啶-3-丙酸二(三氟乙酸)盐的制备

向在水(20ml)中的实施例9步骤B的产物(450mg，0.00068mol) 中，加LiOH(110mg，0.0027mol)。于室温下搅拌反应混合物1小时。 用TFA降低pH值至5并经RPHPLC分离产物，得到标题化合物 (250mg)，为吸湿性白色固体。

NMR和MS与预想的结构一致。

                实施例11

(±)β-[[2-[[[3-〔(3，4，5，6-四氢-2H-氮杂_-7-基) 氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]吡啶-3-丙酸乙酯二(三氟乙酸) 盐的制备 步骤A

向无水乙醇(20ml)中的1-氮杂-2-甲氧基-1-环庚烯(3.67g， 0.0288mol)(Aldrich)中，加3-氨基苯甲酸盐酸盐(5g，0.0288mol)， 很快形成溶液。于室温下搅拌反应混合物过夜。滤取生成的沉淀，乙醚 洗，真空干燥，得到3-(1-氮杂-2-氨基-1-环庚烯)苯甲酸 (4.9g)。 步骤B

在冰浴温度下，向在无水DMF(8ml)中的步骤A的产物(0.5g， 0.0019mol)和N-甲基吗啉(0.19g，0.0019mol)中，加氯甲酸异丁酯 (0.25g，0.0019mol)。于冰浴温度下搅拌5分钟后，一次加入实施例1 步骤D的产物(0.6g，0.0019mol)和N-甲基吗啉(0.38g，0.0037mol) 在无水DMF(7ml)中的浆液。于室温下搅拌反应混合物过夜。在78 ℃水浴上真空除去溶剂并经RPHPLC分离产物，得到标题化合物 (490mg)。

NMR和MS与预想的结构一致。    

                实施例12

(±)β-[[2-[[[3-〔(3，4，5，6-四氢-2H-氮杂_-7-基) 氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]吡啶-3-丙酸二(三氟乙酸)盐的 制备

向在水(20ml)中的实施例11步骤B的产物(400mg， 0.00058mol)中，加LiOH(80mg，0.0019mol)。室温下搅拌反应混合 物1小时。用TFA降低pH值至4.5并经RPHPLC分离产物，得到标题 化合物(320mg)，为白色固体。

NMR和MS与预想的结构一致。

                实施例13

(±)β-[[2-[[[3-〔(3，4，5，6-四氢-2H-氮杂_-7-基) 氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]-1，3-苯并二氧杂环戊烯-5-丙酸乙酯 TFA盐的制备

按实施例11的方法制备上述化合物，但是，以等当量的胡椒醛 (Aldrich)代替实施例11步骤B所用实施例1步骤A的产物。

NMR和MS与预想的结构一致。

                   实施例14

(±)β-[[2-[[[3-〔(3，4，5，6-四氢-2H-氮杂_-7-基) 氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]-1，3-苯并二氧杂环戊烯-5-丙 酸TFA盐的制备

向在水(10ml)和二噁烷(7.5ml)中的实施例13的产物(0.46g， 0.00091mol)中，加LiOH(80mg，0.0018mol)。室温下搅拌反应混合 物2小时。用TFA降低pH值至5并经RPHPLC分离产物，得到标题化 合物(440mg)，为白色固体。

NMR和MS与预想的结构一致。

              实施例15

(±)β-[[2-[[[3-〔(3，4，5，6-四氢-2H-氮杂_-7-基) 氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]苯丙酸三氟乙酸盐的制备

按实施例12的方法制备上述化合物，以等当量的苯甲醛代替实施例 1步骤A中的3-吡啶甲醛，和如实施例11步骤B所述进一步使用实施 例1步骤D的产物。

NMR和MS与预想的结构一致。

               实施例16

(±)β-[[2-[[[3-〔(3，4-二氢-2H-吡咯-5-基)氨基] 苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]吡啶-3-丙酸乙酯二(三氟乙酸)盐的制 备

按实施例11的方法制备上述化合物，不过，用1-氮杂-2-甲氧 基-1-环戊烯代替步骤A中的1-氮杂-2-甲氧基-1-环庚烯。

NMR和MS与预想的结构一致。

*1-氮杂-2-甲氧-1-环戊烯按如下方法制备：

向在CH2Cl2(100ml)中的2-吡咯烷酮(2.7g，0.033mol)中加 四氟硼酸三甲基氧鎓(10g)(Aldrich)。于室温下搅拌反应混合物2 天。加饱和NaHCO3并在分液漏斗中摇动后，分离和蒸出CH2Cl2。于大 气压下进一步蒸馏并收集沸点≈120℃的部分，得1g所要产物。

                  实施例17

β-[[2-[[[3-〔(3，4-二氢-2H-吡咯-5-基)氨基]苯 基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]吡啶-3-丙酸二(三氟乙酸)盐的制备

向在水(15ml)中的实施例16的产物(380mg，0.00057mol)中加 LiOH(100mg，0.002mol)。于室温内搅拌反应2小时。用TFA降低pH 值至5并经RPHPLC分离产物，得到标题化合物(150mg)，为白色固 体。

NMR和MS与预想的结构一致。

             实施例18

(±)β-〔〔1-[[[3-〔(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨 基]-1-环丙基]羰基)氨基]吡啶-3-丙酸乙酯二(三氟乙酸)盐的 制备

按实施例1的方法制备上述化合物，不过，用等当量的1-(N-t -Boc-氨基)环丙烷-N-羟基琥珀酰亚胺羧酸酯(Sigma)代替实 施例1步骤C中的N-t-Boc-甘氨酸的N-羟基琥珀酰亚胺酯。

NMR和MS与预想的结构一致。

              实施例19

(±)β-〔〔1-[[[3-〔(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨 基]-1-环丙基]羰基)氨基]吡啶-3-丙酸二(三氟乙酸)盐的制备

向在水(15ml)中的实施例18的产物(220mg，0.00033mol)中， 加LiOH(60mg，0.0013mol)。用TFA降低pH值至3并经RPHPLC分 离产物，得到标题化合物(170mg)，为白色固体。

NMR和MS与预想的结构一致。

                 实施例20

(±)β-[[2-〔〔〔4-氯-3-〔(3，4，5，6-四氢-2H-氮杂 _-7-基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]吡啶-3-丙酸乙酯二 TFA盐的制备

按实施例11的方法制备上述化合物，不过，用等当量的3-氨基- 4-氯苯甲酸盐酸盐(Aldrich)代替实施例11步骤A的3-氨基苯甲 酸盐酸盐。

NMR和MS与预想的结构一致。

             实施例21

(±)β-[[2-〔〔〔4-氟-3-〔(3，4，5，6-四氢-2H-氮杂 _-7-基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]吡啶-3-丙酸二TFA 盐的制备

向在水(15ml)中的实施例20的产物(150mg，0.0002mol)中， 加LiOH(40mg，0.0008mol)。于室温下搅拌反应1小时。用TFA降 低pH值至3并经RPHPLC分离产物，得到标题化合物(100mg)，为 白色固体。

NMR和MS与预想的结构一致。

                   实施例22   (±)β-[[2-〔〔〔3，5-二〔(3，4，5，6-四氢-2H-氮杂_-7 -基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]吡啶-3-丙酸三(三氟乙酸) 盐的制备

按照实施例12的方法制备上述化合物，不过，用等当量的3，5-二 氨基苯甲酸二盐酸盐(0.3当量)(Fluka)代替实施例11步骤A中的 3-氨基苯甲酸盐酸盐。

NMR和MS与预想的结构一致。

                实施例23

(±)β-[[2-[[[3-〔〔亚氨基〔(苯基甲基)氨基]甲基]氨基] 苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]吡啶-3-丙酸乙酯二(三氟乙酸)盐的制 备 步骤A

在THF(75ml)中的1-(3-羧基苯基)-2-硫脲(5g， 0.025mol)(Trans World Chemicals)和CH3I(3.62g，0.025mol) 回流搅拌2小时。真空除去溶剂，残留物在乙醚中制成浆液，重复三次， 每次都滗出乙醚，真空干燥，得到N-(3-羧基苯基)-S-甲基异 硫脲鎓(isothiouronium)氢碘酸盐(7.8g)，为黄色固体。 步骤B

向在水(5ml)和二噁烷(5ml)中的步骤A产物(1.5g， 0.0044mol)和二异丙基乙基胺(0.57g，0.0044mol)中，加苄胺(0.48g， 0.0044mol)。回流加热反应混合物6小时后，冷却至室温，生成沉淀。 加二噁烷(6ml)并于室温下搅拌所得浆液过夜，滤取沉淀，用二噁烷/ 水洗，干燥，在水中成浆并用浓HCl酸化。真空除溶剂，残留物在乙醚 中成浆三次，每次均滗出乙醚。干燥后，分离得1-(3-羧基苯基) -2-苄基胍盐酸盐(800mg)，为白色固体。

NMR和MS与预想的结构一致。 步骤C

按实施例1步骤F制备标题化合物，不过，用等当量上述步骤B产 物代替实施例1步骤F中步骤E的产物。

NMR和MS与预想的结构一致。

              实施例24

(±)β-[[2-[[[3-〔(亚氨基((苯基甲基)氨基]甲基]氨基] 苯基)羰基)氨基)乙酰基]氨基]吡啶-3-丙酸二(三氟乙酸)盐的制 备

向在水(20ml)中的实施例23步骤C的产物(330mg， 0.00045mol)中，加LiOH(80mg)。在室温下搅拌反应1小时，用 TFA降低pH值至3并经RPHPLC分离产物，得到标题化合物(330mg)， 为白色固体。

NMR和MS与预想的结构一致。

                  实施例25

(±)β-[[2-[[[3-〔(亚氨基苯基甲基)氨基]苯基)羰基)氨 基)乙酰基]氨基]吡啶-3-丙酸乙酯二(三氟乙酸)盐的制备 步骤A

向在水(15ml)和二噁烷(15ml)中的苯亚氨酸乙酯盐酸盐(3g， 0.016mol)(Fluka)和二异丙基乙基胺(2.1g，0.016mol)中，加3- 氨基苯甲酸(2.22g，0.016mol)(Aldrich)。于室温下搅拌反应混合物 4天。滤取所得沉淀，二噁烷/水洗，干燥。将沉淀物在水中制浆并用浓 HCl酸化。真空除溶剂，残留物在乙醚中制浆。滗出乙醚，真空干燥残 留物，得到N-(3-羧基苯基)苯甲脒盐酸盐(700mg)，为白色固 体。

NMR和MS与预想的结构一致。 步骤B

按实施例1步骤F制备标题化合物，不过，用等当量的上述步骤A 产物代替实施例1步骤F中步骤E的产物。

NMR和MS与预想的结构一致。

                实施例26

(±)β-[[2-[[[3-〔(亚氨基苯基甲基)氨基]苯基)羰基)氨基) 乙酰基]氨基]吡啶-3-丙酸二(三氟乙酸)盐的制备

向在水(20ml)中的实施例25步骤B的产物(240mg，0.0034mol) 中，加LiOH(50mg)。于室温下搅拌反应混合物35分钟。用TFA降 低pH值至3并经RPHPLC分离产物，得到标题化合物(120mg)，为 白色固体。

NMR和MS与预想的结构一致。

              实施例27

β-[[2-[[[3-〔(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基)羰基)氨基] 乙酰基]氨基]-3，5-二氯苯丙酸三氟乙酸盐的制备

按实施例2的方法制备标题化合物，不过，用等当量3，5-二氯苯甲 醛(Aldrich)代替实施例1步骤A的3-吡啶甲醛。

            实施例30

βS-[[2-[[[3-〔(3，4，5，6-四氢-2H-氮杂_-7-基) 氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]-4-戊炔酸三氟乙酸盐的制备

按实施例12的方法制备标题化合物，不过，用等当量的3-S-氨 基-4-戊炔酸乙酯盐酸盐(J.Med.Chem.1995，38，3378-2394)代 替实施例1步骤C中的DL-3-氨基-3-(3-吡啶基)丙酸乙酯 二盐酸盐和如实施例11步骤B所述，进一步用实施例1步骤D的产物。

                   实施例34

βS-[[2-[[[3-〔〔亚氨基(1-吡咯烷基)甲基]氨基]苯基] 羰基]氨基]乙酰基]氨基]-4-戊炔酸三氟乙酸盐的制备

按实施例24的方法制备标题化合物，不过，用等当量的吡咯烷代替 实施例23步骤B中的苄胺和用等当量的3-S-氨基-4-戊炔酸乙酯 盐酸盐代替实施例1步骤C中的DL-3-氨基-3-(3-吡啶基) 丙酸乙酯二盐酸盐并如实施例23步骤C所述进一步用实施例1步骤D 产物。

              实施例35

βS-[[2-[[[3-〔(氨基亚氨基甲基)氨基]-2，5，6-三氟苯基] 羰基]氨基]乙酰基]氨基]-4-戊炔酸三氟乙酸盐的制备

按实施例2的方法制备标题化合物，不过，用等当量的3-S-氨 基-4-戊炔酸乙酯盐酸盐代替实施例1步骤C中的DL-3-氨基-3 -(3-吡啶基)丙酸乙酯二盐酸盐和用等当量的3-氨基-2，5，6-三 氟苯甲酸代替实施例1步骤E中的3-氨基苯甲酸。

               实施例36

(±)β-[[2-[[[3-〔(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基)羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-3，5-二(三氟甲基)苯丙酸三氟乙酸盐的制备 步骤A

(±)β-[[2-[[[3-〔(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基)羰基)氨 基)乙酰基]氨基]-3，5-二(三氟甲基)苯丙酸乙酯的制备

按实施例1的方法制备标题化合物，不过，用等当量3，5-二-三氟 甲基苯甲醛(Aldrich)代替步骤A的3-吡啶甲醛。

NMR和MS与预想的结构一致。 步骤B

向在水(25ml)和CH3CN(10ml)中的上述步骤A产物(260mg， 0.00039mol)中，加LiOH(41mg，0.00098mol)。于室温下搅拌反应1 小时。用TFA降低pH值至3并经RPHPLC分离产物，冻干后得到210mg 标题化合物，为白色固体。

NMR和MS与预想的结构一致。

                   实施例37

(±)β-[[2-[[[3-〔(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基)羰基]氨基] 乙酰基]氨基]〔1，1′-联苯基]-4-丙酸三氟乙酸盐的制备

按实施例2的方法制备标题化合物，不过，用等当量的4-联苯基 甲醛代替实施例1步骤A中的3-吡啶甲醛。

                 实施例38

(±)β-[[2-[[[3-〔(氨基亚氨基甲基)氨基]-5-(三氟甲 基)苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]-3，5-二(三氟甲基)苯丙酸乙酯三 氟乙酸盐的制备

按实施例1的方法制备标题化合物，不过，用等当量的3，5-二-三 氟甲基苯甲醛(Aldrich)代替步骤A中的3-吡啶甲醛和用等当量的3 -氨基-5-三氟甲基苯甲酸〔由3-硝基-5-三氟甲基苯甲酸 (Lancaster)在乙醇中以10％Pd/C和50psi H2压下还原4小时而合成]代替 步骤E中的3-氨基苯甲酸并回流搅拌步骤E所得反应混合物过夜而不 是2.5小时。

NMR和MS与预想的结构一致。

              实施例39

(±)β-[[2-[[[3-〔(氨基亚氨基甲基)氨基]-5-(三氟甲 基)苯基)羰基)氨基)乙酰基]氨基]-3，5-二(三氟甲基)苯丙酸三 氟乙酸盐的制备

向在水(12ml)和CH3CN(12ml)中的实施例38产物(600mg， 0.00082mol)中，加LiOH(140mg，0.0033mol)。于室温下搅拌反应混 合物1.5小时。用TFA降低pH值至2.5并经RPHPLC分离产物，冻干后 得到标题化合物(520mg)，为白色固体。

NMR和MS与预想的结构一致。

             实施例40

3S-[[2-[[[3-〔(氨基羰基氨基)苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨 基]-4-戊炔酸的制备 步骤A

用J.Med.Chem.1995，38，3378-94的方法制备3S-氨基-4-戊 炔酸乙酯盐酸盐。 步骤B

在5％HCl水溶液(25ml)中的2g m-氨基马尿酸以尿素(2g) 处理。该溶液被回流4小时。经HPLC(RP-CH3CN/H2O)提纯m- N-氨基甲酰基氨基马尿酸，冻干，得1.2g白色固体。MS与所要产物 的一致。 步骤C

在DMF(5ml)和吡啶(5ml)中的m-尿素马尿酸(1.2g)的悬 浮液用DSC(1.5g)处理。加催化量的DMAP并搅拌反应混合物3小 时。3S-氨基戊炔酸盐酸盐(0.8g)和K2CO3(0.7g)在饱和NaHCO3水溶液(5ml)中的溶液加到反应混合物中。于室温下搅拌反应混合物 过夜。用45ml 1∶1的CH3CN∶H2O稀释所得混合物并用三氟乙酸(5ml) 酸化。用HPLC(RP-CH3CN/H2O)提纯所得酯，冻干后得到白色固 体(125mg)。然后，用1∶1的CH3CN∶H2O(20ml)处理该物质并用 LiOH碱化至pH＞12。完成反应后，用HPLC(RP-CH3CN/H2O)提 纯，得60mg所要产物。MS、1H NMR和CHN分析与所要产物一致。

                  实施例41

(±)β-[[2-[[[3-〔(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]萘-1-丙酸三氟乙酸盐的制备 步骤A

在异丙醇(50ml)中的新蒸1-萘甲醛(8.6g)乙酸铵(10.6g) 和丙二酸(5.7g)的混合物被回流4小时。趁热过滤反应物，用热异丙 醇洗(2×50ml)，用水(125ml)和异丙醇(100ml)先后洗涤并于 40℃下真空干燥，得到4.6g βS-氨基萘-1-丙酸，为白色固体。 MS和1H NMR与所要产物的一致。 步骤B

步骤A的产物(4.6g)在甲醇(100ml)中的悬浮液用4N HCl/ 二噁烷(10ml)处理。搅拌反应过夜，减压除溶剂。所得油状物溶于1∶ 1的CH3CN∶H2O中并经HPLC(RP-CH3CN/H2O)提纯，得到βS- 氨基萘-1-丙酸甲酯(4.6g)，为白色固体。

MS和1H NMR与所要产物一致。 步骤C

m-胍基马尿酸盐酸盐(1.4g)在DMF(5ml)和吡啶(5ml) 中的悬浮液，用DSC(3g)和催化量的DMAP处理。于室温下搅拌反 应混合物过夜。所得溶液用步骤B的产物(1.7g)和NMM(0.6ml) 在DMF(2.5ml)和吡啶(2.5ml)中的溶液处理。于室温下搅拌混合 物过夜。然后，反应物用TFA处理并用1∶1的CH3CN∶H2O(50ml)稀 释。所得溶液经HPLC(RP-CH3CN/H2O)提纯，冻干后得到(±) βS-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基] 萘-1-丙酸甲酯(1.3g)，为白色固体。

MS和1H NMR与所要产物一致。 步骤D

步骤C产物(0.5g)在1∶1的CH3CN/H2O(15ml)中的溶液用 LiOH处理至pH＞12。用HPLC(RP-CH3CN/H2O)监测反应和当水 解完成后，经HPLC(RP-CH3CN/H2O)提纯所要物质。冻干后，得 白色固体(0.3g)。

MS，1H NMR和CHN分析与所要产物一致。

              实施例42

(±)3-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]-2- 氧代吡啶烷-1-丙酸三氟乙酸盐的制备 步骤A

N-(叔丁氧羰基)-L-蛋氨酸(6.2g)在DMF(25ml)和 吡啶(25ml)中的溶液，用DSC(9.6g)和催化量的DMAP处理。4 小时后，向其中加β-丙氨酸乙酯盐酸盐(3.8g)和K2CO3(3.5g)在 饱和NaHCO3水溶液(25ml)中的溶液。室温下搅拌反应混合物过夜。 减压除去过量溶剂并以HPLC(RP-CH3CN/H2O)提纯，得到N-〔2 -[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-4-(甲硫基)-1-氧丁基]-β -丙氨酸乙酯(7.0g)，为无色油。MS证实该油为所要产物并不必提 纯可用于下步。 步骤B

将6.5g步骤A的油溶解于DMF(25ml)中并用CH3I(5.0ml) 处理。约1小时后，加NaH(0.50g)，接着，再加NaH(0.50g)。 反应物用水(25ml)和乙酸乙酯(200ml)处理。有机层用另外的水(3 ×25ml)，和饱和NaCl水溶液(1×25ml)先后洗，Na2SO4干燥。 减压除去过量溶剂，得到4g下式化合物， 为褐色半固体。MS与所要结构一致，不必提纯可用于下步。 步骤C

步骤B产物(4g)的乙醇(50ml)溶液用4N HCl/二噁烷(20ml) 处理。减压除去过量溶剂。粗制的固体经HPLC(RP-CH3CN/H2O)提 纯。加20％HCl水溶液(10ml)，冻干后得1g 3-氨基-2-氧代 吡咯烷-1-丙酸乙酯，为白色固体。MS与所要产物一致。 步骤D

m-胍基苯甲酸盐酸盐(0.7g)的DMF(3ml)和吡啶(3ml) 溶液，用DSC(0.8g)和催化量的DMAP处理。3小时后，加入步骤C 产物(0.7g)与等摩尔量K2CO3的水(3ml)溶液。室温下搅拌过夜。 经HPLC(RP-CH3CN/H2O)分离得所要的酯。该白色固体(100mg) 用水(10ml)处理并用LiOH碱化至pH＞12。2小时后，经HPLC (RP-CH3CN/H2O)分离并冻干，得所要产物(75mg)，为白色固体，

MS，1H NMR和CHN分析与所要产物的一致。

             实施例43

3R-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基] 氨基]-4-戊炔酸盐酸盐的制备 步骤A

在CH2Cl2(60ml)中的3-[N-(叔丁氧羰基)氨基]戊-4-炔酸乙 酯(3g)[J.Med.Chem.，1995，38，3378-94]，于0℃下用TFA (30ml)处理。搅拌反应混合物3小时，减压除去过量溶剂，得黄色油 (3.3g)。MS证实该油为所要产物。 步骤B

m-胍基马尿酸盐酸盐(3.3g)的DMF(12ml)和吡啶(12ml) 溶液，用DSC(6.1g)和催化量的DMAP处理。3小时后，加步骤A 的粗产物(3.3g)的饱和NaHCO3水溶液(12ml)。室温下搅拌反应 混合物过夜。减压除溶剂，所得固体用TFA和1∶1的CH3CN/H2O处理， 经HPLC(RP-CH3CN/H2O)分离产物，得到3R-[[2-[[[3-[(氨基 亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]丙酸乙酯三氟乙酸盐 (3g)，为白色固体。

MS和1H NMR与所要产物的一致。 步骤C

将步骤B产物(3g)溶于1∶1的CH3CN/H2O(5ml)中并用LiOH处理至pH＞12。4小时后，用TFA酸化反应物，并用HPLC(RP- CH3CN/H2O)分离所要产物的TFA盐。冻干后的固体(2.5g)用1∶3 的CH3CN∶H2O(100ml)成浆并用离子交换树脂AG2-X8氯化物型 (BioRad)(50g)处理。过滤混合物并用20％HCl(5ml)处理。 透明液冻干后，重复离子交换过程，得所要产物(2.2g)。

MS、1H NMR和CHNCl分析与所要产物一致。

          实施例44

3S-[[2-[[[3-[[[(苯基甲基)氨基]羰基]氨基]苯基]羰基]氨基]乙 酰基]氨基]-4-戊炔酸的制备 步骤A

在CH3CN(100ml)中的m-氨基马尿酸盐酸盐(20g)用异氰 酸苄酯(16ml)处理。反应物用5％HCl水溶液(400ml)处理，过滤， 水(50ml)洗，得21g m-(苄基尿)马尿酸。MS和1H NMR与所 要产物一致，不必进一步提纯。 步骤B

3S-[[2-[[[3-[[[(苯基甲基)氨基]羰基]氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-4-戊炔酸乙酯以实施例40的方法制备，不过，用等当 量的m-(苄基尿)马尿酸代替m-尿马尿酸。经HPLC(RP- CH3CN/H2O)提纯所要的酯，得1.2g产物，为白色固体。

MS和1HNMR与所要的酯一致。 步骤C

步骤B产物(1.0g)的1∶1 CH3CN/H2O(20ml)溶液用KOH(pH＞12)处理。4小时后，用TFA酸化并经HPLC(RP-CH3CN/H2O) 提纯两次，得到白色固体(300mg)。

MS、1H NMR和CHN分析与所要产物一致。

                 实施例45

3S-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基] 氨基]-4-戊炔酸盐酸盐的制备

实施例58的产物(6g)溶于121的CH3CN∶H2O(75ml)并用 KOH处理。加KOH维持pH值大于12。4小时后，用TFA酸化反应混 合物并经HPLC(RP-CH3CN/H2O)提纯。在适宜的流分被冷冻干燥后， 得到TFA盐(4.2g)。固体以1∶1 CH3CN∶H2O(100ml)制浆并用离 子交换树脂AG2-X8氯型(BioRad)(50g)处理。过滤混合物并用 20％HCl(5ml)处理。冻干后，重复离子交换，得到所要产物(3.5g)。

MS、1H NMR和CHNCl分析与所要产物一致。

          实施例46

β-[[2-[[[3-(氨基羰基氨基)苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]吡啶 -3-丙酸盐酸盐的制备

将尿素(4g)和β-[[2-[[(3-氨基苯基)羰基]氨基]乙酰基]氨 基]吡啶-3-丙酸乙酯三氟乙酸盐(4g)溶于20％HCl水溶液 (50ml)并回流6小时。用KOH(pH＞12)碱化反应物。4小时后， 用TFA酸化反应物并经HPLC(RP-CH3CN/H2O)提纯。将所得白色固 体溶于1∶1的CH3CN∶H2O(100ml)中并以实施例43步骤C所述进 行离子交换处理。冻干后，得所要产物(3.2g)。

MS，1H NMR和CHNCl与所要产物一致。

       实施例47

(±)β3-[[2-[[[3-[[[(苯基甲基)氨基]羰基]氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]吡啶-3-丙酸盐酸盐的制备

实施例48的产物(5g)溶于1∶1的CH3CN∶H2O(75ml)中并 用KOH处理，加KOH维持pH＞12。4小时后，用TFA酸化反应物并经 HPLC(RP-CH3CN/H2O)提纯。冻干后，将TFA盐(4.5g)。该固 体在1∶1 CH3CN∶H2O(100ml)中制浆并用离子交换树脂AG2-X8 氯型(BioRad)(50g)处理，过滤混合物并用20％HCl(5ml)处 理。冻干后，重复离子交换过程，得到所要产物(4.1g)，为白色固体。

MS，1H NMR和CHNCl与所要产物一致。

             实施例48

(±)β-[[2-[[[3-[[[(苯基甲基)氨基]羰基]氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]吡啶-3-丙酸乙酯盐酸盐的制备 步骤A

m-硝基马尿酸[5.6g)的DMF(25ml)溶液用DSC(9.6g) 和催化量的DMAP处理。5小时后，加3-氨基-3-(3-吡啶基)丙酸 乙酯二盐酸盐(8g)和K2CO3(2g)的饱合NaHCO3水溶液(25ml)。 室温搅拌反应混合物过夜。加水(25ml)并过滤混合物。用H2O(25ml) 洗所得固体，用CH3CN(25ml)制浆并过滤，得到β-[[2-[[(3-硝 基苯基)羰基]氨基]乙酰基]氨基]吡啶-3-丙酸乙酯(6.5g)，为白色 固体。MS与所要产物一致。 步骤B

步骤A的产物(6.5g)和5％Pd/C(0.6g)的水(50ml)和乙醇 (50ml)悬浮液，经受50psi氢压3小时。混合物经硅藻土板过滤，减 压除去溶剂。用CH2Cl2处理所得油，再减压除溶剂，得到β-[[2-[[(3 -氨基苯基)羰基]氨基]乙酰基]氨基]吡啶-3-丙酸乙酯(5.8g)，为 褐色泡沫状物。

MS和1H NMR与所要产物一致。 步骤C

步骤B的产物(1.9g)的CH3CN(5ml)溶液用异氰酸苄酯 (0.8ml)处理。1小时后，再加异氰酸苄酯(0.1ml)，完成反应。 0.25小时后，用水(50ml)处理反应混合物。将所得粘性油溶于CH3CN并用TFA酸化。经HPLC(RP-CH3CN/H2O)提纯该溶液，冻干，用 HPLC(RP-CH3CN/H2O)再提纯白色固体并用20％HCl(5ml)处 理，得所要产物，为白色固体(1.3g)。

MS，1H NMR和CHNCl与所要产物一致。

                    实施例51

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基] 氨基]呋喃-3-丙酸乙酯三氟乙酸盐的制备 步骤A

3-呋喃甲醛(8.6ml)、丙二酸单乙酯(15.8g)和乙酸铵(9.6g) 的异丙醇(200ml)悬浮液，在氮气下回流加热。5小时后，减压除去 溶剂，用水(250ml)处理所得半固体并用12N HCl酸化至pH2。水层 用CH2Cl2(2×100ml)洗后，用K2CO3中和至pH＞9，用CH2Cl2(2 ×100ml)提取产物。有机层用Na2SO4干燥，减压除溶剂，得到β-氨 基呋喃-3-丙酸乙酯(5g)，为金色油。

MS和1H NMR与所要产物一致。 步骤B

m-胍基马尿酸盐酸盐(1.4g)的DMF(5ml)和吡啶(5ml) 溶液，用DSC(1.9g)和催化量的DMAP处理。5小时后，向步骤A 的产物(1.2g)的CH3CN(1ml)溶液中加饱和NaHCO3水溶液(1ml)， 室温搅拌混合物过夜并经HPLC(RP-CH3CN/H2O)提纯。冻干，得 固体产物(1.2g)

MS，1H NMR和CHN分析与所要产物一致。

                   实施例52

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基] 氨基]呋喃-3-丙酸三氟乙酸盐的制备

实施例51的产物(0.6g)溶于1∶1的CH3CN∶H2O(15ml)并用 NaOH(pH＞12)处理。4小时后，用TFA酸化反应混合物并经HPLC (RP-CH3CN/H2O)提纯。冻干后，得固体产物(0.3g)。

MS，1H NMR和CHN分析与所要产物一致。

           实施例53

3-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨 基]戊二酸三氟乙酸盐的制备 步骤A

在甲醇(50ml)中的3-酮戊二酸二甲酯(13g)用甲酸铵(5g) 和NaCNBH3(2g)处理。加10ml水并减压除溶剂。将所得半固体溶于5 ％HCl水溶液(250ml)，CH2Cl2(2×50ml)洗。用K2CO3碱化水 层(pH＞9)并用CH2Cl2(2×75ml)提取产物。合并有机层，用Na2SO4干燥。除去溶剂，得到2.5g(±)3-氨基戊二酸二甲酯，将其溶于甲 醇(50ml)并用4N HCl/二噁烷(10ml)处理。减压除溶剂，得到2.7g (±)3-氨基戊二酸二甲酯盐酸盐。

MS和1H NMR与所要产物一致。 步骤B

m-胍基马尿酸盐酸盐(1.5g)的DMF(4.5ml)和吡啶(4.5ml) 溶液，用DSC(1.8g)和催化量的DMAP处理。2小时后，向其中加 入3-氨基戊二酸二甲酯盐酸盐(1.1g)和NMM(350μl)的水(3ml) 溶液。于室温下搅拌反应混合物过夜并经HPLC分离产物，得到1.5g 3 -[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]戊 二酸二甲酯，为白色固体。

MS和1H NMR与所要产物的一致。 步骤C

步骤B的产物(750mg)溶于1∶1的CH3CN∶H2O(40ml)并用 KOH(pH＞12)水处理。4小时后，用TFA酸化反应物并经HPLC(RP- CH3CN/H2O)提纯。冻干后得固体(400mg)。

MS，1H NMR和CHN分析与所要产物一致。

          实施例54

(±)3-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基] 氨基]戊二酸单甲酯三氟乙酸盐的制备 步骤A

m-胍基马尿酸盐酸盐(1.5g)的DMF(4.5ml)和吡啶(4.5ml) 溶液，用DSC(1.8g)和催化量的DMAP处理。2小时后，向反应中 加3-氨基戊二酸二甲酯盐酸盐(1.1g)和NMM(350μl)的水(3ml) 溶液。室温下搅拌反应物过滤并经HPLC分离产物，得到3-[[2-[[[3 -[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]戊二酸二甲酯 (1.5g)，为白色固体。

MS和1HNMR与所要产物一致。 步骤B

750mg步骤A的产物溶于Na2PO4缓冲液(50ml，50mM，pH8.5) 并用猪酯酶(200μl)处理。用LiOH调节pH。48小时后，用TFA酸 化溶液并经HPLC(RP-CH3CN/H2O)提纯。冻干后得固体产物 (175mg)。

MS，1HNMR和CHN分析与所要产物一致。

        实施例55

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基] 氨基]呋喃-2-丙酸三氟乙酸盐的制备 步骤A

2-呋喃甲醛(4.8g)、乙酸铵(9.6g)和丙二酸单乙酯(6.6g) 在异丙醇(50ml)中的悬浮液回流6小时。减压除溶剂并用乙酸乙酯 (100ml)和5％HCl水溶液(400ml)处理所得油。水层用乙酸乙酯 (100ml)洗并用K2CO3(pH9)碱化。用CH2Cl2提取产物(2× 100ml)。合并有机层，Na2SO4干燥，除溶剂，得β-氨基呋喃-2- 丙酸乙酯(2.5g)，为浅黑色油。

MS和1HNMR与所要产物一致。

以实施例53步骤A所述方法处理此浅黑色油，得到2.7g β-氨基呋 喃-2-丙酸乙酯盐酸盐。 步骤B

m-胍基马尿酸盐酸盐(272mg)的DMF(1ml)和吡啶(1ml) 溶液，用DSC(450mg)和催化量的DMAP处理。2小时后，向其中 加步骤A的产物(221mg)和NMM(111μl)的水(1ml)和CH3CN(1ml)溶液。室温下搅拌反应物过夜。经HPLC(RP-CH3CN/H2O) 提纯并冻干后，得(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰 基]氨基]乙酰基]氨基]呋喃-2-丙酸乙酯，为白色固体(200mg)

MS与所要产物一致。 步骤C

步骤B的产物(200mg)溶于1∶1的CH3CN∶H2O(20ml)并用 LiOH(pH＞12)处理。4小时后，用TFA酸化反应物并经HPLC(RP -CH3CN/H2O)提纯。冻干，得固体(175mg)。

MS、1HNMR和CHN分析与所要产物一致。

         实施例56

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基] 氨基]萘-2-丙酸三氟乙酸盐的制备 步骤A

2-萘甲醛(7.8g)和乙酸铵(9.6g)在异丙醇(50ml)中的悬浮 液回流加热1小时。加丙二酸(5.2g)并继续回流3小时。趁热过滤反 应液并用热异丙醇(50ml)洗固体，接着，用CH3CN(100ml)洗。 真空干燥所得白色固体过夜，得到9g β-氨基萘-2-丙酸。

MS和1H NMR与所要产物一致。 步骤B

步骤A产物(2.5g)在甲醇(100ml)中的悬浮液用4N HCl/二噁 烷(10ml)处理。搅拌所得溶液过夜。减压除溶剂并经HPLC(RP- CH3CN/H2O)提纯所得半固体。将所得固体溶于CH3CN/H2O，用20％ HCl水溶液(5ml)处理，冻干，得β-氨基萘-2-丙酸甲酯盐酸盐 (1.1g)。

MS和1H NMR与所要产物一致。 步骤C

m-胍基马尿酸(0.7g)的DMF(4ml)和吡啶(4ml)溶液用 DSC(1.1g)和催化量的DMAP处理。4小时后，向其中加步骤B的 产物(0.9g)和NMM(0.4ml)在DMF(2ml)、吡啶(2ml)和水 (1ml)中的溶液。室温下搅拌反应液过夜并用TFA酸化。经HPLC(RP -CH3CN/H2O)分离产物，冻干，得固体(0.7g)。

MS、1H NMR和CHN分析与所要产物一致。 步骤D

将步骤C的产物(200mg)溶于1∶1的CH3CN∶H2O(20ml)并 用KOH(pH＞12)处理。4小时后，用TFA酸化反应物并经HPLC(RP -CH3CN/H2O)提纯，冻干，得固体(175mg)。

MS、1HNMR和CHN分析与所要产物一致。

          实施例57

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基] 氨基]噻吩-3-丙酸甲酯三氟乙酸盐的制备 步骤A

3-噻吩甲醛(11.2g)的异丙醇(100ml)溶液用乙酸铵(20g) 处理。加热所得混合物并加丙二酸(10.4g)。回流反应4小时后趁热过 滤。固体用热异丙醇(2×50ml)洗，于40℃真空干燥过夜，得β- 氨基噻吩-3-丙酸(8g)。

MS和1H NMR与所要产物一致。 步骤B

步骤A的产物(5g)在甲醇(100ml)中的悬浮液用4N HCl/二噁 烷(10ml)处理。搅拌反应过夜。减压除溶剂，得β-氨基噻吩-3- 丙酸甲酯盐酸盐(7.8g)，为黄色泡沫。

MS和1H NMR与所要产物一致。 步骤C

m-胍基马尿酸盐酸盐(2.7g)的DMF(10ml)和吡啶(10ml) 溶液，用DSC(4.5g)和催化量的DMAP处理。4小时后，向其中加 步骤B产物(2.2g)和NMM(1.3ml)的DMF(5ml)溶液并于室温 下搅拌反应过夜。反应混合物用1∶1的CH3CN∶H2O(50ml)处理并 用TFA酸化。经HPLC(RP-CH3CN/H2O)分离，冻干，得固体(2.2g)。

MS，1H NMR和CHN分析与所要产物一致。

             实施例58

3S-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基] 氨基]-4-戊炔酸乙酯三氟乙酸盐的制备

m-胍基马尿酸盐酸盐(2.7g)的DMF(10ml)和吡啶(10ml) 溶液，用DSC(4.5g)和催化量的DMAP处理。4小时后，向其中加 3S-氨基-4-戊炔酸乙酯盐酸盐(1.8g)和NMM(1.1ml)的DMF (5ml)溶液并于室温下搅拌反应过夜。反应混合物以1∶1的CH3CN∶H2O(50ml)处理并以TFA酸化。经HPLC(RP-CH3CN/H2O)分离， 冻干，得固体(2.6g)。

MS，1H NMR和CHN分析与所要产物一致。

            实施例59

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基] 氨基]噻吩-3-丙酸三氟乙酸盐的制备

实施例57的产物(750mg)溶于1∶1的CH3CN∶H2O(20ml)并用 KOH(pH＞12)处理。4小时后，反应混合物以TFA酸化并经HPLC (RP-CH3CN/H2O)提纯，冻干，得固体(500mg)。

MS，1H NMR和CHN分析与所要产物一致。

             实施例60

(±)2-[3-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-4-羧基丁基]磺酰基]苯甲酸三氟乙酸盐的制备 步骤A

2-[(3-氨基-4-羧基丁基)硫]苯甲酸(1g)(按U.S.5409939 制备)的甲醇(50ml)溶液用4N HCl/二噁烷(10ml)处理过夜。减压 除溶剂，得所要产物(0.9g)，为白色固体。MS与预期产物2-[(3- 氨基-4-(甲氧基羰基)丁基)硫]苯甲酸甲酯一致。 步骤B

m-胍基马尿酸盐酸盐(0.8g)的DMF(3ml)和吡啶(3ml) 溶液，用DSC(1.2g)和催化量的DMAP处理。2小时后，向其中加 步骤A产物(1g)、NMM(0.3ml)的DMF(3ml)溶液。室温下 搅拌反应过夜。加KOH直至pH值大于12。4小时后，反应混合物以 TFA酸化并经HPLC(RP-CH3CN/H2O)提纯，冻干，得固体(±)2 -[3-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基] -4-羧基丁基]硫]苯甲酸三氟乙酸盐(750mg)

MS、1H NMR和CHN分析与所要产物一致。 步骤C

步骤B的产物(320mg)的1∶1 CH3CN∶H2O(50ml)溶液，用m -氯过氧苯甲酸(340mg)处理。室温下搅拌反应过夜并经HPLC(RP -CH3CN/H2O)提纯，冻干，得固体(300mg)。

MS、1H NMR和CHN分析与所要产物一致。

                       实施例61

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基] 氨基]噻吩-2-丙酸三氟乙酸盐的制备 步骤A

3-氨基-3-(2-噻吩基)丙酸(0，5g)[在实施57步骤A中 用1摩尔量的2-噻吩甲醛代替制得]的甲醇(50ml)溶液，用4N HCl， 二噁烷(10ml)处理。6小时后，减压除溶剂，得到蜡状固体。用 Et2O/CH3CN处理，得到β-氨基噻吩-2-丙酸甲酯(370mg)，为白 色粉末。

MS和1H NMR与所要产物一致。 步骤B

m-胍基马尿酸盐酸盐(0.4g)的DMF(1.5ml)和吡啶(1.5ml) 溶液，用DSC(0.6g)和催化量的DMAP处理。3小时后，向其中加 步骤A的产物(0.3g)和NMM(220μl)的DMF(1.5ml)溶液。室 温下搅拌反应过夜。经HPLC(RP-CH3CN/H2O)分离该酯并冻干。 所得白色固体用在1∶4 CH3CN∶H2O中的KOH(pH＞12)处理4小时 后，反应混合物以TFA酸化并经HPLC(RP-CH3CN/H2O)提纯，冻 干，得固体(300mg)

MS、1H NMR和CHN分析与所要产物一致。

            实施例62

(±)2-[[3-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-4-羧基丁基]硫]苯甲酸甲酯三氟乙酸盐的制备

m-胍基马尿酸盐酸盐(0.8g)的DMF(3ml)和吡啶(3ml) 溶液，用DSC(1.2g)和催化量的DMAP处理。2小时后，向其中加2 -[[3-氨基-4-(甲氧基羰基)丁基]硫]苯甲酸甲酯(1g)[按U.S. 5409939制备]、NMM(0.3ml)的DMF(3ml)溶液。室温下搅拌反 应过夜。加KOH直至pH大于12。2小时后，酸化反应物并经HPLC (RP-CH3CN/H2O)提纯，冻干，得固体(250mg)。

MS、1H NMR和CHN分析与所要产物一致。

         实施例63

(±)3-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰 基]氨基]-5-[(4-甲基苯基)硫]戊酸甲酯三氟乙酸盐的制备 步骤A

3-氨基-5-[(4-甲基苯基)硫]戊酸(1.0g)[按U.S.5409939制 备]的甲酯(50ml)溶液，用4N HCl/二噁烷(10ml)处理。室温下搅 拌反应过夜。减压除溶剂，得到3-氨基-5-[(4-甲基苯基)硫]戊酸 甲酯(1.1g)，为白色固体。

MS和1H NMR与所要产物一致 步骤B

m-胍基马尿酸盐酸盐(0.6g)的DMF(2ml)和吡啶(2ml) 溶液，用DSC(0.7g)和催化量的DMAP处理。1小时后，向其中加 步骤A的产物(0.6g)的饱和NaHCO3水溶液(1.5ml)的水溶液和乙 腈(1.5ml)。室温下搅拌反应2小时，用TFA酸化反应物，经HPLC 分离得标题化合物(0.6g)，为白色固体。

MS和1H NMR与所要产物一致

             实施例64

(±)3-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基] 氨基]-4-[[(4-甲基苯基)磺酰基]氨基]丁酸甲酯三氟乙酸盐的制备 步骤A

搅拌氨基乙醛二甲基乙缩醛(15.8g)、P-甲苯磺酰氯(19.1g) 和三乙胺(10.1g)在CH2Cl2(200ml)中的混合物2小时。用5％HCl水溶液(50ml)和乙醚(200ml)处理反应物。分离水层和有机层。有 机层用5％HCl水溶液(50ml)和水(50ml)先后洗涤，Na2SO4干燥， 减压除溶剂，得30g所要的乙缩醛；MS和1H NMR证实其结构如下式： 步骤B

步骤A的乙缩醛(10g)、CH3CN(70ml)和HCl水溶液(15ml) 的混合物，于50℃下加热10分钟。加乙醚，提取所要的醛。该醛不必 进一步提纯用于下步。MS证实该醛的结构为下式： 步骤C

重氮基乙酸乙酯(2.3g)、SnCl2(2.5g)在CH2Cl2(75ml)中 的混合物，用步骤B的醛(5g)处理。2小时后，加HCl水溶液和乙醚。 分出有机层并用MgSO4干燥。减压除溶剂，得5g粗剂β-酮基酯，不必 提纯用于下步，MS和1H NMR证实其结构如下式： 步骤D

搅拌步骤C的β-酮基酯(12g)、甲醇(100ml)H4N·HCO2(30g)和NaCNBH3(1.3g)的混合物。24小时后，减压除溶剂。用 CH2Cl2处理所得半固体并用HCl水溶液提取所要产物。除去溶剂，得6g 粗制的β-氨基酯。经MS和1H NMR证实其结构如下式： 步骤E

m-胍基马尿酸盐酸盐(337mg)的DMF(1ml)和吡啶(1ml) 溶液，用DSC(0.4g)和催化量的DMAP处理。2小时后，向其中加 步骤D的产物(322mg)和NMM(200μl)的DMF(1ml)溶液。 室温搅拌反应过夜。用TFA酸化反应物并经HPLC(RP-CH3CN/H2O) 分离，得标题化合物(250mg)，为白色固体。

MS、1H NMR和CHN分析与所要产物一致。

                  实施例65

3-[[2-[[[3-〔(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰 基]氨基)-4-〔〔(4-甲基苯基)磺酰基)氨基)丁酸三氟乙酸盐 的制备

实施例64的产物(180mg)在1∶1 CH3CN∶H2O(4ml)中的溶液， 用LiOH(100mg)处理。2小时后，用TFA酸化反应物并经HPLC(RP -CH3CN/H2O)提纯，得标题化合物(100mg)，为白色固体。

MS、1H NMR和CHN分析与所要产物的一致。

                 实施例66

(±)3-[[2-[[[3-〔(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基)-5-〔(4-甲基苯基)硫]戊酸三氟乙酸盐的制备

实施例63产物(180mg)的1∶1 CH3CN∶H2O(4ml)溶液，用 LiOH(100mg)处理。2小时后，反应物用TFA酸化并经HPLC(RP -CH3CN/H2O)提纯，得标题化合物(100mg)，为白色固体。

MS、1H NMR和CHN分析与所要产物一致。

                   实施例67

(±)3-[[2-[[[3-〔(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基)-5-〔(4-甲基苯基)磺酰基]戊酸三氟乙酸盐的制备

实施例63的产物(200mg)的1∶1 CH3CN∶H2O(4ml)溶液，用 m-氯过氧苯甲酸(460mg)处理。室温下搅拌反应过夜。用LiOH(200mg)处理反应物。2小时后，反应物用TFA酸化并经HPLC(RP -CH3CN/H2O)提纯，得标题化合物(180mg)，为白色固体。

MS、1HNMR和CHN分析与所要产物一致。

              实施例68

3S-[[2-[[[3-〔(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙 酰基]氨基)-4-(苯硫基)丁酸三氟乙酸盐的制备 步骤A

3S-〔〔(1，1-二甲基乙氧基)羰基)氨基)-4-〔(甲磺酰 基)氧]丁酸苯基甲酯(3.9g)的〔按U.S.5409939制备]、苯硫酚(1.1ml) 和K2CO3(1.4g)在DMF(20ml)中的悬浮液，于室温下搅拌过夜。 用乙酸乙酯处理反应物，有机层用水(2×25ml)和饱和NaCl(25ml) 先后洗涤。用Na2SO4干燥有机层后，减压除溶剂，得到金色油(4.5g)。 将该油溶于CH2Cl2(100ml)并用TFA(20ml)处理。4小时后，减 压除溶剂并以HPLC(RP-CH3CN/H2O)提纯产物，得到3S-氨基- 4-(苯硫基)丁酸苯甲酯三氟乙酸盐(1.2g)，为白色固体。

MS和1H NMR与分析与所要产物一致。 步骤B

m-胍基马尿酸盐酸盐(273mg)和NMM(110μl)的DMF (1ml)溶液，用新戊酰氯(120μl)处理。30分钟后，向其中加步骤 A的产物(208mg)、NMM(110μl)和催化量DMAP的DMF(1ml) 溶液。4小时后，经HPLC(RP-CH3CN/H2O)分离，得3S-[[2 -[[[3-〔(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]-4 -(苯硫基)丁酸苯甲酯(200mg)，为白色固体。

MS和1H NMR与分析与所要产物一致。 步骤C

步骤B产物(200mg)的1∶1 CH3CN∶H2O(4ml)溶液，用KOH(pH＞12)处理。2小时后，反应物用TFA酸化并经HPLC(RP- CH3CN/H2O)分离产物，得标题化合物(100mg)，为白色固体。

MS、1H NMR和CHN分析与所要产物一致。

               实施例69

3S-[[2-[[[3-〔(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙 酰基]氨基)-4-戊炔酸三氟乙酸盐的制备 步骤A

m-胍基马尿酸盐酸盐(2.7g)的DMF(10ml)的溶液，用新戊 酰氯(1.3ml)处理。30分钟后，向其中加3S-氨基-4-戊炔酸单 盐酸盐(1.8g)、NMM(1.5ml)和催化量的DMAP的DMF(10ml) 溶液。室温下搅拌反应过夜。经HPLC(RP-CH3CN/H2O)分离，得 3S-[[2-[[[3-〔(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基] 氨基)-4-戊炔酸乙酯TFA盐(1.5g)，为白色固体。

MS与所要产物一致。 步骤B

步骤A的产物(1.5g)的1∶1 CH3CN/H2O(75ml)溶液，用LiOH(pH＞12)处理。2小时后，反应液用TFA酸化并经HPLC(RP- CH3CN/H2O)提纯，冻干，得固体(1.2g)标题化合物。

MS、1H NMR和CHN分析与所要产物一致。

                   实施例70

3R-[[2-[[[3-〔(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙 酰基]氨基)-4-戊炔酸三氟乙酸盐的制备 步骤A

m-胍基马尿酸盐酸盐(0.8g)和NMM(0.3ml)的DMF(2.5ml) 悬浮液，用新戊酰氯(0.4ml)处理。30分钟后，向其中加3R-氨基 -4-戊炔酸乙酯(0.4g)。NMM(0.3ml)和催化量DMAP的DMF (2.5ml)溶液。室温下搅拌反应过夜。经HPLC(RP-CH3CN/H2O) 分离，得3R-[[2-[[[3-〔(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨 基]乙酰基]氨基)-4-戊炔酸乙酯三氟乙酸盐(0.5g)，为白色固体。

MS与所要产物一致 步骤B

步骤A的产物(0.5g)的1∶1 CH3CN∶H2O(75ml)溶液，用LiOH(pH＞12)处理。2小时后，反应液用TFA酸化并经HPLC(RP- CH3CN/H2O)提纯，冻干，得固体(250mg)标题化合物。

MS、1H NMR和CHN分析与所要产物一致。

               实施例71

2-〔〔2S-[[2-[[[3-〔(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基] 氨基]乙酰基]氨基)-2-(羧基甲基)乙基)磺酰基)苯甲酸三氟乙酸 盐的制备

实施例72产物(120mg)的甲醇(10ml)溶液，用m-氯苯甲酸 (100mg)处理。室温下搅拌反应过夜。产物经HPLC(RP-CH3CN/H2O) 提纯。得到标题化合物(100mg)，为白色固体。

MS、1H NMR和CHN分析与所要产物一致。

实施例72

2-〔〔2S-[[2-[[[3-〔(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基] 氨基]乙酰基]氨基)-2-(羧基甲基)乙基]硫]苯甲酸三氟乙酸盐的制 备 步骤A

实施例A(6.2g)的CH2Cl2(40ml)溶液，于0℃下以三乙胺 (4.25ml)和甲磺酰氯(2.3ml)处理。3小时后，用乙酸乙酯/乙醚提 取，分离出3S-〔〔(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-4-〔(甲 磺酰基)氧]丁酸苯甲酯。有机层用Na2SO4干燥，除去溶剂，得3S-〔〔(1，1 -二甲基乙氧基)羰基]氨基]-4-〔(甲磺酰基)氧]丁酸苯甲酯(8.8g)。 所得产物、K2CO3(3.0g)和催化量的18-冠-6、DMAP和硫酸氢四丁 铵在DMF(10ml)中的悬浮液，用硫代水杨酸甲酯(3.8ml)处理。2 小时后，用乙酸乙酯提取产物。有机层用Na2SO4干燥，减压除溶剂。将 所得油(10.2g)溶于CH2Cl2(50ml)并用TFA(20ml)处理。室温 下搅拌反应过夜。减压除溶剂，将该油溶于1∶1 CH3CN∶H2O并用 NaOH(pH＞12)碱化。2小时后，用TFA酸化反应物并用HPLC(RP- CH3CN/H2O)分离产物。加20％HCl(2ml)并冻干产物，得黄色固 体(0.9g)。

MS与2-〔(2-氨基-3-羧基丙基)硫]苯甲酸盐酸盐一致。 步骤B

3-氨基苯甲酸(41.1g)的二噁烷(300ml)溶液，用3，5-二甲 基(吡唑-1-甲脒)HNO3(100g)、DIEA(90ml)和水(100ml) 处理。回流反应物3小时并于室温下搅拌过夜。滤取固体，用二噁烷 (150ml)和1∶1二噁烷∶水(250ml)先后洗涤。将固体悬浮于乙醚 (400ml)和CH3CN(100ml)中，用4N HCl/二噁烷(100ml)和20 ％HCl(1ml)处理。48小时后，过滤反应物，干燥，得3-〔(氨 基亚氨基甲基)氨基]苯甲酸(34.1g)，为淡紫色固体。    

MS与所要产物一致。 步骤C

2-〔(2S-氨基-4-羧基丁基)硫]苯甲酸(0.9g)和DIEA (1.5ml)的DMF(5ml)溶液，用N-〔1，1-二甲基乙氧基)羰基] 甘氨酸的2，5-二氧吡咯烷-1-基酯(1.1g)和催化量的DMAP处理， 1小时后，加甲醇(5ml)和4N HCl/二噁烷(10ml)。18小时后，经 HPLC(RP-CH3CN/H2O)分离，得2-〔〔2S-〔(2-氨基乙酰 基)氨基]-3-(甲氧基羰基)丙基]苯甲酸甲酯(1.0g)，为白色固 体。

MS与所要产物一致。 步骤D

步骤C的产物(200mg)和NMM(130μl)的DMF(1ml)溶 液，用IBCF(152μl)处理。2分钟后，反应物以步骤B的产物 (330mg)、NMM(260μl)和催化量的DMAP的DMF(1ml)溶 液处理。2小时后，反应物用水处理并用NaOH(pH＞12)碱化。4小时后， 反应物用TFA酸化并经HPLC(RP-CH3CN/H2O)分离产物，得标题 化合物(200mg)为白色固体。

MS、1H NMR和CHN分析与所要产物一致。

               实施例79

(±)β-[[2-[[[3-〔(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]甲氨 基]乙酰基]氨基]吡啶-3-丙酸乙酯二(三氟乙酸)盐的制备 步骤A

向装有涂聚四氟乙烯的搅拌棒的200ml烧瓶中，加N-t-Boc- 肌氨酸(3.80g，0.019mol)和无水DMF(70ml)。向其中加N-甲基 吗啉(NMM)(21ml，1.92g，0.019mol)，在盐-冰水浴上将反应混 合物冷至0℃。几分钟后，加氯甲酸异丁酯(IBCF)(95％，2.74g，2.6ml. 0.019mol)。约5分钟后，再加3-氨基-3-吡啶-3-基丙酸乙酯 二盐酸盐(5.0g，0.019mol)和NMM(3.84g，0.038mol)的DMF (40ml)溶液并于0-5℃搅拌反应混合物过夜。在施转蒸发器上(60 ℃)除去挥发性物质，得半固体。将其溶于乙酸乙酯和稀盐酸(pH2)。 向水层中加乙酸乙酯(200ml)并加固体碳酸氢钠调节水层的pH值为约 7。加稀NaOH水溶液调节pH值至8。分离水层和有机层。水层用乙酸 乙酯洗。合并有机层，Na2SO4干燥，除去挥发性物质，得粘稠油，其 MS与所要产物一致。 步骤B

将步骤A产物溶于二噁烷(20ml)并转移至装有涂聚四氟乙烯的搅 拌棒和连接矿物油打泡器的园底烧瓶中。加4N HCl/二噁烷(约30ml)。 约1小时后，真空除去HCl气并在旋转蒸发器上浓缩反应混合物。从二 噁烷中第二次蒸发，赶走剩余的HCl气，得到白色泡沫体。MS和NMR 与所要产物的二盐酸一致。 步骤C

用大体与步骤A同样的条件和方法，由偶合3-胍基苯甲酸与步骤 B的产物，得标题化合物。于是，将3-胍基苯甲酸盐酸盐(1.5g，7.0mmol， Aldrich)溶于DMF(70ml)中，加等当量的NMM(0.77ml，7.0mmol) 并将混合物冷至0℃。加等当量的IBCF(0.91ml，7mmol)，几分钟后， 加由步骤B制备的1.1当量肌氨酸吡啶基氨基酸酯(2.4g二盐酸盐)和 NMM(0.78ml)的DMF(约50ml)溶液，温热反应混合物至室温过 夜。除去挥发物，经RPHPLC分离产物，以99∶1的含0.05％TFA的水∶ 乙腈至45∶55的含0.05％TFA的水∶乙腈梯度洗脱，80ml/分钟流速进行 60分钟。合并所要产物的流分，冻干，得标题化合物(0.96g)，为蓬 松的固体。

MS和NMR与所要产物一致。

                 实施例80

(±)β-[[2-[[[3-〔(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]甲氨 基]乙酰基]氨基]吡啶-3-丙酸二(三氟乙酸)盐的制备

实施例79的产物(0.33g)溶于水(20ml)并加稀LiOH水溶液调 至pH11。1小时后，以分析C-18HPLC表明，酯水解作用大体完成。 用实施例79步骤C大体相同的条件，由制备C-18HPLC分离所要产 物，冻干，得标题化合物(0.19g)。

HNMR、FABMS和CHN分析与所要产物一致。

              实施例81

β-[[2-[[[3-〔(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]- 1-氧丙基]氨基]吡啶-3-丙酸乙酯二(三氟乙酸)盐的制备 步骤A

用实施例79步骤A的方法，将R，S-N-t-Boc丙氨酸(2.0g， 0.0106mol)偶合于3-氨基-3-吡啶基丙酸乙酯二盐酸盐(3.2g)， 得产物(3.42g，分离的产率88％)。

MS和NMR与所要N-Boc产物一致。 步骤B

用实施例79步骤B的方法，从步骤A的产物除去Boc保护基，得 到它的二盐酸盐(3.5g)，为白色固体。MS和NMR与所要的氨基酸 酯一致。 步骤C

用实施例79步骤C的条件，将步骤B所得氨基酸酯(1.6g)偶合 于3-胍基苯甲酸(0.75g，3.5mmol)，得标题化合物(1.8g，2.7mmol， 分离产率79％)，冻干后为白色固体。

MS和1H NMR与所要产物一致。

                 实施例82

β-[[2-[[[3-〔(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]-1 -氧丙基]氨基]吡啶-3-丙酸二(三氟乙酸)盐的制备

用实施例80的方法，将实施例81的产物(0.5g)水解为酸。用与 实施例79步骤C大体相同的条件，经制备C-18HPLC分离所要产物， 冻干后为0.45g。

HNMR和FAB MS与所要产物一致。

               实施例83

(±)β-[[2-[[[3-〔(氨基亚氨基甲基)氨基]-4-甲基苯基] 羰基]氨基]乙酰基]氨基]吡啶-3-丙酸二(三氟乙酸)盐的制备 步骤A

用实施例79步骤A的方法，将N-t-Boc甘氨酸偶合于3-氨基 -3-(3-吡啶基)丙酸二盐酸盐(5.0g，0.019mol)，经后处理得黄 色油(6.0g，90％)。

MS与所要化合物一致。 步骤B

溶解步骤A的产物(5.9g)在二噁烷(约20ml)和TFA中，除去 Boc保护基。反应进行数分钟，直至放气停止。在旋转蒸发器上除去挥 发性物质，得棕色油。

MS和NMR与所要产物一致。 步骤C

用实施例79步骤C的方法，将步骤B制备的氨基酯偶合于4-甲基 -3-硝基苯甲酸，得到一种油。经制备RPHPLC(C-18)提纯， 得所要的偶合产物(1.76g)，为非晶型固体。

NMR和MS与所要产物一致。 步骤D

用以下方法，将步骤C产物中的硝基还原成苯胺。将步骤C的产物 (1.75g)移至一个6盎司装有压力计和入口阀和出口阀的Fischer- Porter压力瓶中。将起始化合物溶于冰醋酸，加3％钯/碳催化剂(约1g) 并封闭容器。在三次真空氮循环后，以氢气(55psig)给容器加压，于 室温下反应过夜。经硅藻土过滤除去催化剂，浓缩无色溶液，得黄色粘 性油(2.0g)。

MS与所要产物一致。 步骤E

用以下方法，将步骤D的苯胺(1.0g，2.12mmol)胍基他 (guanylated)。将苯胺溶于乙腈(约50ml)，加在水中的1H-吡唑 -1-甲脒盐酸盐(0.342g，2.3mmol)以及三乙胺(0.64g，0.92ml. 6.4mmol)，回流该溶液。加热过夜后，在旋转蒸发器上除去挥发性物 质，经RPHPLC提纯半固体得所要的胍基化产物(冻干后为0.3g)。

NMR和MS与所要产物一致。 步骤F

溶解步骤E的胍基-酯(0.3g)于水(20ml)中并加稀LiOH至 pH11，水解该酯成酸。约1小时后，由分析型RPHPLC观察酸转化己完 成。经制备HPLC提纯和冻干，得标题化合物，为白色粉未(0.19g)。

NMR和MS与所要产物一致。

             实施例84

β-[[2-〔〔(3-氨基-4-甲基苯基)羰基]氨基]乙酰基]氨基] 吡啶-3-丙酸二(三氟乙酸)盐的制备

以实施例83步骤下类似的条件和提纯过程，将实施例83步骤D所 得的苯胺-酯水解为酸，得到所要的苯胺-酸，标题化合物。

NMR和MS与所要的产物一致。

             实施例85

±)β-[[2-[[[3-〔〔(氨基亚氨基甲基)氨基]甲基]苯基]羰基] 氨基]乙酰基]氨基]吡啶-3-丙酸二(三氟乙酸)盐的制备 步骤A

将3-氰基苯甲酸(7.0g，0.0476mol)加到园底烧瓶中(200ml) 并溶于DMF：吡啶(50ml)中。向该溶液加碳酸二丁酰酯(DSC，14.6g， 0.0571mol)和催化量的DMAP。放气一停止，即加甘氨酸叔丁酯(9.6g， 0.057mol)并反应过夜。加三乙胺(10ml)并搅拌数分钟。在旋转蒸发 器上除去挥发性物质，将粗反应混合物溶于水和乙酸乙酯中。加稀盐酸 酸化水层，分层并弃去水层。用饱和NaHCO3水溶液洗有机层，干燥 (Na2SO4)，浓缩，得产物(11.1g)。MS与所要的偶合产物一致。 步骤B

以实施例82步骤D类似的方式，将步骤A所得的氰基-叔丁酯还 原为相应的苄基胺化合物。这样，将氰基-叔丁基酯(10.0g， 0.0681mol)溶解于乙酸(约70ml)，同时加热和冷却。加催化剂(0.5g 3％钯/碳)。将反应物转入一个6盎司的Fischer-Porter瓶并加氢压 (55psig)。连续地加氢直至氢吸收停止。由硅藻土滤出催化剂，蒸除 溶剂，得粗制的苄基氨基-叔丁酯，MS与所要化合物一致。 步骤C

以类似于实施例83步骤B的方式，从步骤B的产物除去Boc基， 得到苄基氨基酸。MS与所要产物一致。 步骤D

将步骤C所得氨基酸(9.0g，0.03mol)溶于乙腈∶水(约1∶1)中 并加过量的三乙胺。几分钟后，除去挥发性物质，得粗制的三乙胺盐。 将其再溶于乙腈∶水(200ml)中，加1H-吡嗪-1-甲脒盐酸盐(4.3g， 0.03mol)并回流反应混合物。回流反应过夜后，浓缩至半固体。将其溶 于水(20ml)中并加固体NaHCO3调至约pH7。滤出生成的沉淀。MS 和NMR与两性离子一致。用水处理该两性离子并加盐酸直至pH值为约 2，此产物转化为其盐酸盐。冻干，得盐酸盐。 步骤E

以实施例83步骤F的过程，将步骤D的产物(0.47g)水解为胍基 -酸。冻干，得固体(0.41g)。为二(三氟乙酸)盐。

NMR和MS与所要产物一致。 步骤F

用步骤A的方法，将步骤E的胍基-酸偶合于3-氨基-3-(3-吡 啶基)丙酸。经制备RPHPLC提纯，得固体(1.66g)。

NMR和MS与所要产物一致。

           实施例86

3S-[[2-[[[3-〔(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙 酰基]氨基)-4-羟基丁酸的制备 步骤A

3-N-t-Boc-氨基-4-羟基丁酸苄酯的制备

将N-t-Boc天冬氨酸的α-苄酯(10.0mmol)溶于THF (10ml)中，在氮气氛下于30分钟内和0℃下滴加BH3-THF溶液 (20ml，20.0mmol)。于0℃下再搅拌混合物1-2小时，用10％AcOH 的甲醇(10ml)溶液急止反应，蒸除溶剂。将残留物溶于乙酸乙酯并用 1N HCl、水、和1M NH4HCO3先后提取。MgSO4干燥，真空除溶剂后， 得产物。MS与所要产物一致。 步骤B

N-t-Boc-3-氨基-2，3-二氢-5-氧-3S-呋喃的制备

在催化量的樟脑磺酸存在下和25℃，搅拌3-N-t-Boc-氨基 -4-羟基丁酸苄酯(20g，64mmol)的二氯甲烷(200ml)溶液16小 时。真空除溶剂，在硅胶床(22cm×6cm的Merck60硅胶)上快速色 谱提纯粗产物，己烷/乙酸乙酯(90/10至70/30；200ml/分流速)梯度 洗脱。分离出纯的N-t-Boc-3-氨基内酯，为白色固体(5.4g)。 MS与所要产物一致。 步骤C

3-氨基-2，3-二氢-5-氧-3S-呋喃盐酸盐的制备

将步骤B的3-N-t-Boc-3-氨基内酯(5.0g，25mmol)溶 于4N HCl/二噁烷(20ml)中。25℃下搅拌45分钟后，加4N HCl/二 噁烷溶液(10ml)，25℃下搅拌1小时后，真空除多余的HCl。所得 溶液一放置即沉淀出结晶。滤取白色结晶，干燥，得2.9g产物。1H NMR(DMSO-d6)δ2.55(dd，1H，J1＝18.3Hz，J2＝2.5 Hz)，3.0(dd，1H，J1＝8.5Hz，J2＝18.3Hz)，4.1(m， 1H)，4.35(dd，1H，J1＝10.5Hz，J2＝2.7Hz)，4.5(dd， 1H，J1＝10.5Hz，J2＝6.5Hz)，MS(FAB)102.1(M+H+). 步骤D

用以下方法，将3-氨基-2，3-二氢-5-氧-3S-呋喃盐酸盐 偶合于m-胍基马尿酸盐酸盐(GIHA)。向GIHA(1.6g，5.9mmol) 的DMF(约30ml)中，加等当量的NMM(0.59g，0.64ml，5.82mmol)， 搅拌混合物几分钟直至形成沉淀。混合物冷至0℃，加等当量的DSC (1.49g，5.82mmol)和催化量的DMAP，反应再进行至少0.5小时。活 化大体完成后，向反应混合物中加3-氨基-5-氧-3S-呋喃盐酸盐 (0.8g，5.82mmol)，接着加等当量的NMM(0.59g，0.64ml，5.82mmol)， 使反应至完成(1-16小时)。在旋转蒸发器上于60℃除去挥发性物 质，将残留物溶于少量水：乙腈(用少量乙腈使成溶液)。加纯净的TFA 调节溶液的pH值至约3，经制备RPHPLC分离所得的偶合产物，冻干 后，得单TFA盐，为吸湿性固体(0.54g)。 步骤E

溶解步骤D的产物(0.54g)在水(20ml)中，得标题化合物。加 稀NaOH水溶液，将溶液的pH值调至约11。经RPHPLC测定，反应完 成后，冻干该溶液(最终pH值为约8)。

1H NMR和MS与所要产物一致。

                    实施例87

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-2-羟基苯丙酸钠三氟乙酸盐的制备

用大体实施例86步骤D的方法，将3-氨基氢化香豆素盐酸盐 (2.0g，0.010mol)(按J.Rico，Tett.Let.，1994，35，6599-6602制 备)偶合于GIHA(1.50g，0.004mol)。经制备RPHPLC提纯，得到所 要产物，为香豆素和羟基酸TFA盐的混合物。冻干后，得浅黄色粉末 (1.50g)。溶解提纯后的混合物于水中，用稀NaOH水溶液调节至pH7 -8，冻干，得所要的酚-酸。

MS和NMR与所要产物一致。

                   实施例88

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-2-羟基-5-甲基苯丙酸三氟乙酸盐的制备

按实施例87所引文献制备的3-氨基-6-甲基氢化香豆素，以实 施例87类似的量、条件和提纯法偶合于GIHA上，得到褐色固体 (0.76g)。

NMR和MS与所要产物一致。

                   实施例89

(±)3-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-4-[(2-羟基乙基)氨基]-4-氧丁酸三氟乙酸盐的制 备 步骤A

将N-t-Boc天冬氨酸的α-苄酯(7.7 mmol，2.50g)溶于DMF：吡 啶(1∶1，70ml)并与催化量的DMAP一起加DSC(8.5mmol，2.2g)。 放气停止后(约1小时)，加乙醇胺(0.52g，8.3mmol)的吡啶(20ml) 溶液，并于室温下反应过夜。除去挥发物，得金色油。将所得产物在乙 酸乙酯和HCl水溶液间分配。有机层用饱和NaHCO3水溶液和水先后洗 涤，无水Na2SO4干燥，除去挥发物，得金色油(2.64g)。

1H NMR和MS与所要产物一致。 步骤B

用标准方法，使步骤A的粗产物(2.3g)脱苄基。于是，将步骤A 的产物溶于乙酸(约70ml)，转移至Fischer-Porter压力瓶中，并加3 ％钯/碳(1g)和氢气(54psig)。激烈搅拌反应混合物并装满氢气。 在无进一步的氢吸收后(约1小时)，经硅藻土板滤除催化剂，除去溶 剂，得无色油(1.73g)。

NMR和MS与所要产物一致。 步骤C

将步骤B所得粗产物溶于二噁烷(20ml)，在激烈搅拌下，向其中 加4N HCl的二噁烷(40ml)溶液。反应一直进行至放气停止(约15 分钟)。除去挥发物并经乙醚研制后，得金色油。

H NMR和MS与所要产物一致。 步骤D

用类似于实施例86步骤D的方法，将步骤C的产物(1.0g， 4.7mmol)偶合于GIHA(1.5g，4.11mmol)。粗制偶合产物被浓缩成粘 稠油并在水：乙腈中再生，经制备RPHPLC提纯，得标题化合物，冻干 后为0.44g。

H NMR和MS与所要产物一致。

                   实施例94

2S-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰 基]氨基]-3-羧基丙基的2-氨基苯甲酸酯二(三氟乙酸)盐单水合物 的制备 步骤A

3-N-t-Boc-氨基-4-羟基-(3S)-丁酸苄基酯的制备

将N-t-Boc-L-天冬氨酸的β-苄酯(Sigma)(75g，20mmol)溶 于THF(30ml)，在氮气氛和0℃下于30分钟内，滴加到BH3-THF (400ml，40mmol)中。于0℃下搅拌该溶液2.5小时后，加50ml 10％ 乙酸的甲醇溶液使反应急停。蒸除溶剂，将残留物溶于乙醚(200ml)， 用1N HCl、饱和K2CO3和水先后洗涤，MgSO4干燥。真空除溶剂后 得产物。异丙醚/己烷重结晶后，mp 56-57℃。1H NMR(d6-DMSO)δ 1.4(s，9H)，2.68(d，2H，J＝6Hz)，3.82(d，2H，J＝5 Hz)，4.01(m，1H)，5.16(s，2H)，5.21(bs，1H)，7.37 (bs，5H). 步骤B

3-氨基-4-(氨茴酸)-(3S)-丁酸苄基酯的制备

将3-N-t-Boc-氨基-4-羟基-(3S)-丁酸苄基酯(10g， 32mmol)溶于50ml二甲基甲酰胺，接着加三乙胺(4.4g，46mmol)。 加靛红酸酐(5.0g，3mmol)并于25℃下搅拌溶液24小时。反应完成后 (反向HPLC监测)，加水，用乙酸乙酯提取(100ml)和Na2SO4干燥。 蒸发掉溶剂，得12g黄色油。向该油中加二噁烷(20ml)，接着加4N HCl的二噁烷溶液(20ml)。放置4小时，加乙醚，从溶液中分出油状物。 再向油状物中加乙醚并滗出，重复两次。加乙醚到半固体中，激烈搅拌 16小时，收集白色固体。

MS和1H NMR与所要产物一致。 步骤C

将N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)(1.4g，0.5mmol)加到GIHA (1.0g，0.5mmol)的无水二甲基甲酰胺(20ml)溶液中，接着加二甲 氨基吡啶(100mg)。1小时后，一次加苄基-3-氨基-4-氨茴酸 -(3S)-丁酸酯(0.7g，0.5mmol)的DMF/NMM(1∶1)(5.0ml) 溶液。经反相色谱提纯(水/乙腈洗脱)，得白色固体(1.0g)。

MS和1H NMR与所要产物一致。 步骤D

步骤C的苄基酯用H2气和催化剂Pd/C(500mg，5％)氢化4小时。 完成反应后，经反相色谱(水/乙腈洗脱)提纯产物，得白色固体(1.0g)。

MS和1H NMR与所要产物一致。

                    实施例95

β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基] 氨基]-1，4-苯并二噁烷-6-丙酸三氟乙酸盐的制备 步骤A

向1，4-苯并二噁烷-6-甲醛(Aldrich)(10g)的异丙醇溶液 (205ml)，加乙酸铵(12.5g)，接着加丙二酸(6.0g)，回流搅拌 反应混合物5小时。趁热过滤反应混合物，用热异丙醇(100ml)洗。 得白色固体，干燥，得DL-3-氨基-3-(1，4-苯并二噁烷)丙酸 (6.3g)，为白色固体。

MS和1H NMR与所要产物一致。 步骤B

步骤A的产物(6g)在无水乙醇(250ml)和乙酰氯(20ml)中 制成浆液，回流加热4小时。冷却反应混合物至25℃，减压蒸除溶剂， 得固体，乙醚(50ml)洗，得DL-3-氨基-3-(1，4-苯并二噁 烷)丙酸乙酯(6.5g)，为白色固体。

MS和1H NMR与所要产物一致。 步骤C

将N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)(1.4g，0.5mmol)加到GIHA (1.0g，0.5mmol)的无水二甲基甲酰胺(20ml)溶液中，接着加二甲 基氨基吡啶(100mg)。1小时后，一次加入步骤B的产物(0.7g， 0.5mmol)的DMF/NMM(1∶1，5.0ml)溶液。反应完成后，经反相色 谱提纯产物(水/乙腈洗脱)，得白色固体(1.1g)。

MS和1H NMR与所要产物一致。 步骤D

将DL-3-氨基-3-(1，4-苯并二噁烷)丙酸乙酯加合物(步 骤C产物)(500mg)溶于水/乙腈(1∶1)中，接着加LiOH(100mg)。 于25℃下搅拌反应混合物并以HPLC监测。完成水解后(1-2小时)， 加三氟乙酸直至pH＝2。经反相色谱提纯产物(水/乙腈洗脱)，得255mg 白色固体。

MS和1H NMR与所要产物一致。

                    实施例96

N-[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基] -β-丙氨酸乙酯的制备

将N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)(1.4g，0.5mmol)加到GIHA (1.0g，0.5mmol)的无水二甲基甲酰胺(20ml)溶液中，接着加二甲 基氨基吡啶(100mg)。1小时后，一次加β-丙氨酸乙酯盐酸盐(0.7g， 0.5mmol)的DMF/NMM(1∶1，5.0ml)溶液。反应完成后，经反相色 谱提纯产物(水/乙腈洗脱)，得白色固体(1.1g)。

MS和1H NMR与所要产物一致。

                   实施例97

N-[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基] -β-丙氨酸的制备

将实施例96的化合物(500mg)溶于水/乙腈(1∶1)中，接着加 LiOH(200mg)。于25℃下搅拌反应混合物并经HPLC监测。完成水 解作用后(1-2小时)，加三氟乙酸直至pH＝2。经反相色谱提纯产 物(水/乙腈洗脱)，得到白色固体375mg。MS和1H NMR与预期的结 构一致。

                  实施例98

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-喹啉-3-丙酸乙酯二(三氟乙酸)盐的制备 步骤A

向3-喹啉甲醛(Aldrich)(10g)的异丙醇(205ml)溶液中， 加乙酸铵(12.5g)，接着加丙二酸(6.0g)。回流搅拌反应混合物5 小时。趁热过滤反应混合物并用热异丙醇(100ml)洗。干燥所得白色 固体，得DL-3-氨基-3-(3-喹啉)丙酸(6.3g)。

MS和1H NMR与所预期的结构一致。 步骤B

步骤A的产物(6g)在无水乙醇(250ml)和乙酰氯(20ml)中 制成浆液，并回流加热该浆液4小时。冷却反应混合物至25℃，减压蒸 除溶剂，得固体，用乙醚(50ml)洗，得DL-3-氨基-3-(3- 喹啉)丙酸乙酯(6.5g)，为白色固体。

MS和1H NMR与所预期的结构一致。 步骤C

将N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)(1.4g，0.5mmol)加到GIHA (1.0g，0.5mmol)的无水二甲基甲酰胺(20ml)溶液中，接着加二甲 基氨基吡啶(100mg)。1小时后，一次加步骤B产物(1.2g，0.5mmol) 的DMF/NMM(1∶1)(5.0ml)溶液。产物经反相色谱提纯(水/乙腈) 洗脱，得白色固体(1.2g)。

MS和1H NMR与预期的结构一致。

                    实施例99

β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基] 氨基]喹啉-3-丙酸二(三氟乙酸)盐的制备

将实施例98的化合物(600mg)溶于水/乙腈(1∶1)中，接着加 LiOH(100mg)。于25℃下搅拌反应混合物并经HPLC监测。完成水 解作用后(1-2小时)，加三氟乙酸直至pH＝2。经反相色谱提纯产 物(水/乙腈洗脱)，得到白色固体470mg。MS和1H NMR与预期的结 构一致。

                  实施例100

β-[[2-[[[3-[( 4，5-二氢噻唑-2-基)氨基]苯基]羰基]氨 基]乙酰基]氨基]吡啶-3-丙酸乙酯三氟乙酸盐的制备 步骤A

3-硝基苯甲酰甘氨酸的制备

将甘氨酸(20g，266mmol)加到水(200ml)中，接着加KOH(20g， 357mmol)并在冰浴上冷至0℃。于10分钟内，向此溶液中滴加3-硝 基苯甲酰氯(Aldrich)(20g，10.8mmol)的乙腈(20ml)溶液。反应 完成后(3-4小时)，加浓HCl直至pH＝1，接着加饱和NaCl水溶 液(75ml)。滤取产物，水洗，空气干燥。 1H-NMR(d6-DMSO)δ，3.92(d，2H，J＝ 6.1)，7.9(t，1H，J＝7.9)，8.3(t，1H，J＝5.6)，8.35 (m，2H)，8.69(s，1H)，9.25(t，1H，J＝7.2Hz).MS (FAB)m/e 231.0(M+Li+). 元素分析(C9H8N2O5)

计算值：C，45.89；H，4.25；N，9.92

测定值：C，45.97；H，4.44；N，10.11。 步骤B

将步骤A制得的3-硝基苯甲酰甘氨酸(4g)溶于帕尔瓶中的乙醇 (60ml)中，加5％Pd/C(500mg)。在帕尔瓶中于50psi氢化反应 混合物1.5小时。完成反应后，经硅藻土塞滤除催化剂，减压除溶剂，真 空干燥产物。 步骤C

将乙腈(5ml)加到步骤B粗制的苯胺中，接着加2-(甲硫基) -2-噻唑啉(7g)并回流加热6小时。减压除溶剂，得固体。加乙醚， 过滤出固体，得褐色固体(4.6g)。 步骤D

N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)(1.4g，0.5mmol)加到2- (甲硫基)-2-噻唑啉(1.0g，0.5mmol)的无水二甲基甲酰胺(20ml) 溶液中，接着加二甲氨基吡啶(100mg)。1小时后，一次加DL-3 -氨基-3-(3-吡啶基)丙酸乙酯(1.2g，0.5mmol)的DMF/NMM (1∶1)(5.0ml)溶液。产物经反相色谱(水/乙腈)提纯，得白色固 体(520g)。

MS和1H NMR与预期的结构一致。

                   实施例101

β-[[2-[[[3-[(4，5-二氢噻唑-2-基)氨基]苯基]羰基]氨 基]乙酰基]氨基]吡啶-3-丙酸三氟乙酸盐的制备

将实施例100的化合物(600mg)溶于水/乙腈(1∶1)中，接着 加LiOH(100mg)。于25℃下搅拌反应混合物并经HPLC监测。完成 水解作用后(1-2小时)，加三氟乙酸直至pH＝2。经反相色谱提纯 产物(水/乙腈洗脱)，得到白色固体470mg。MS和1H NMR与预期的 结构一致。

                     实施例102

N-[2-[[[3-[[[(苯基甲基)氨基]羰基]氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]-β-丙氨酸乙酯的制备

将(3-硝基苯甲酰基甘氨酰基)-3-酰氨基丙酸乙酯(2g， 0.62mmol)(实施例100，步骤A)加到帕尔瓶中的无水乙醇(60ml) 中并加5％Pd/C(500mg)。在帕尔瓶中于50psi压力下氢化反应混合 物1.5小时。完成反应后，经硅藻土塞滤除催化剂，减压除溶剂，真空干 燥产物。将乙腈(5ml)加到粗制苯胺中，接着加异氰酸苄酯(700mg， 0.75mmol)，溶液变成固体。加乙醚，滤取固体，得苄基脲，为橙色固 体(2.6g，产率99％)。经反相色谱(水/乙腈洗脱)提纯产物(1g一 份)，得白色固体。1H NMR(d6-DMSO)δ1.17(t， 3H，J＝7.3Hz)，2.48(t，2H，J＝7.1Hz)，3.45(q，2H， J1＝6.8Hz，J2＝13.2Hz)，3.80(d，2H，J＝6.9Hz)， 4.06(q，2H，J1＝7.5Hz，J2＝13.4Hz)，4.31(d，2H，J ＝7.5Hz)，7.2-7.4(m，5H)，7.8(t，1H，J＝8.0Hz)， 7.85(bs，1H)，8.1(t，1H，J＝5.6Hz)，8.35(m，2H)， 8.71(s，1H)，8.78(bs，1H)，9.22(bs，1H). Ms(FAB)m/e 427.3(M+H+). 元素分析C22H26N4O5  1.5H2O

计算值：C，58.28；H，5.74；N，12.36

测定值：C，58.48；H，5.57；N，12.25。

                实施例103

N-[[2-[[[3-[[[(苯基甲基)氨基]羰基]氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]丙酸的制备

将实施例102的化合物(400mg，0.094mmol)溶于水/乙腈(1∶1)中， 接着加LiOH(100mg，0.4mmol)。于25℃下搅拌反应混合物并经HPLC 监测。完成水解作用后(1-2小时)，加三氟乙酸直至pH＝2。经反相色 谱提纯产物(水/乙腈洗脱)，得到白色固体265mg。1H NMR(d6-DMSO)δ， 2.48(t，2H，J＝7.1Hz)，3.45(q，2H，J1＝6.8Hz，J2＝ 13.2Hz)，3.80(d，2H，J＝6.9Hz)，4.31(d，2H，J＝ 7.5Hz)，7.2-7.4(m，5H)，7.8(t，1H，J＝8.0Hz)，7.85 (bs，1H)，8.1(t，1H，J＝5.6Hz)，8.35(m，2H)，8.71 (s，1H)，8.78(bs，1H)，9.22(bs，1H). Ms(FAB)m/e 405.6(M+Li+). 元素分析C20H22N4O5  0.5H2O

计算值：C，59.00；H，5.39；N，13.75

测定值：C，59.29；H，5.11；N，13.63。

实施例104

β-[[2-[[(3-硝基苯基)羰基]氨基]乙酰基]氨基]吡啶-3- 丙酸乙酯的制备

用实施例C中所用同样的方法，不过，用等当量的DL-3-氨基 -3-吡啶基丙酸乙酯代替β-丙氨酸乙酯盐酸盐。将N，N′-二琥珀酰 亚胺碳酸酯(14g，5.5mmol)加到3-硝基苯甲酰甘氨酸(10g， 4.5mmol)的无水二甲基甲酰胺(30ml)溶液中，接着加二甲氨基吡啶 (200mg)。1小时后一次加入DL-3-氨基-3-(3-吡啶基) 丙酸乙酯二盐酸盐(13g，4.6mmol)在20％K2CO3水溶液(50ml)中 的溶液。反应完成后，过滤收集产物(11.5g，产率80％)。

MS和1H NMR与预期的结构一致。

                   实施例105

β-[[2-[[[3-[[[(苯基甲基)氨基]羰基]氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]吡啶-3-丙酸乙酯三氟乙酸盐的制备

实施例104的DL-(3-硝基苯甲酰基甘氨酰基)-3-酰氨基- 3-吡啶基丙酸乙酯(2g，0.62mmol)，加到帕尔瓶中的无水乙醇 (60ml)中，加5％Pd/C(500mg)，于50psi下氢化帕尔瓶中的混 合物1.5小时。反应完成后，经硅藻土塞过滤除去催化剂。减压除溶剂， 真空干燥产物。加乙腈(5ml)于粗制苯胺中，接着加异氰酸苄酯(700mg， 0.75mmol)。溶液变成固体，加乙醚，滤取产物。经反相色谱提纯(水 /乙腈洗脱)产物，得白色固体(1.5g)。

MS和1H NMR与预期的结构一致。

                   实施例106 (±)β-[[2-[[[3-[[[(苯基甲基)氨基]羰基]氨基]苯基]羰基]氨 基]乙酰基]氨基]吡啶-3-丙酸的制备

将实施例105的化合物(400mg，0.094mmol)溶于水/乙腈(1∶1) 中，接着加LiOH(100mg，0.4mmol)。于25℃下搅拌反应混合物并经 HPLC监测。完成水解作用后(1-2小时)，加三氟乙酸直至pH＝2。 经反相色谱提纯产物(水/乙腈洗脱)，得到白色固体200mg。MS和1H NMR与预期的结构一致。

                      实施例107

β-[[2-[[[3-[[(苯基氨基)羰基]氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基] 氨基]吡啶-3-丙酸乙酯的制备

将DL-(3-硝基苯甲酰基甘氨酰基)-3-酰氨基-3-(3 -吡啶基)丙酸乙酯(2g，0.64mmol)，加到在帕尔瓶中的无水乙醇 (60ml)中，加5％Pd/C(500mg)，在帕尔瓶中与50psi下，氢化 混合物1.5小时。完成反应后，经硅藻土塞滤除催化剂，减压除溶剂，真 空干燥产物。加乙腈(5ml)于粗制苯胺中，接着加异氰酸苯酯(600mg， 0.75mmol)。溶液变成固体，加乙醚，滤出产物。经反相色谱(水/乙腈 洗脱)提纯，得白色固体(1.1g)。MS和1H NMR与预期的结构一致。

                     实施例108

β-[[2-[[[3-[[(苯基氨基)羰基]氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基] 氨基]吡啶-3-丙酸三氟乙酸盐的制备

将实施例107的化合物(500mg，0.095mmol)溶于水/乙腈(1∶1) 中，接着加LiOH(100mg，0.4mmol)。于25℃下搅拌反应混合物并经 HPLC监测。完成水解作用后(1-2小时)，加三氟乙酸直至pH＝2。 经反相色谱提纯产物(水/乙腈洗脱)，得到白色固体350mg。MS和1H NMR与预期的结构一致。

                 实施例109

β-[[2-[[[3-(氨基羰基氨基)苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基] 吡啶-3-丙酸乙酯三氟乙酸盐的制备

将DL-(3-硝基苯甲酰基甘氨酰基)-3-酰氨基-3-(3 -吡啶基)丙酸乙酯(2g，0.62mmol)，加到帕尔瓶中的无水乙醇 (60ml)中，加5％Pd/C(500mg)，并于50psi下氢化混合物1.5 小时。反应完成后，通过硅藻土塞滤去催化剂。减压除去溶剂，真空干 燥产物。加HCl(20％，75ml)于粗制苯胺中，接着加尿素(2g)。 加热回流该溶液15小时。完成反应后(15小时)，反相色谱提纯产物 (水/乙腈洗脱)，冻干，得白色固体(1.2g)。MS和1H NMR与预期 的结构一致。

                 实施例110

β-[[2-[[[3-(氨基羰基氨基)苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基] 吡啶-3-丙酸三氟乙酸盐的制备

将实施例109的化合物(500mg，0.095mmol)溶于水/乙腈(1∶1) 中，接着加LiOH(100mg，0.4mmol)。于25℃下搅拌反应混合物并经 HPLC监测。完成水解作用后(1-2小时)，加三氟乙酸直至pH＝2。 经反相色谱提纯产物(水/乙腈洗脱)，冻干后得到白色固体350mg。 MS和1H NMR与预期的结构一致。

                 实施例111

β-[[2-[[[3-[[[[(4-甲基苯基)磺酰基]氨基]羰基]氨基]苯 基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]吡啶-3-丙酸乙酯三氟乙酸盐的制备

将DL(3-硝基苯甲酰基甘氨酰基)-3-酰氨基-3-(3-吡 啶基)丙酸乙酯(2g，0.64mmol)，加到帕尔瓶中的无水乙醇(60ml) 中，加5％Pd/C(500mg)，并于50psi下氢化混合物1.5小时。反应 完成后，通过硅藻土塞滤去催化剂。减压除去溶剂，真空干燥产物。加 乙腈(5ml)于粗制苯胺中，接着加p-甲苯磺酰基异氰酸酯(600mg， 0.75mmol)，溶液变成固体，加乙醚，滤取产物。反相色谱提纯产物(水 /乙腈洗脱)，冻干，得白色固体(1.1g)。MS和1H NMR与预期的结 构一致。

                 实施例112

β-[[2-[[[3-[[[[(4-甲基苯基)磺酰基]氨基]羰基]氨基]苯 基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]吡啶-3-丙酸三氟乙酸盐的制备

将实施例111的化合物(500mg，0.095mmol)溶于水/乙腈(1∶1) 中，接着加LiOH(100mg，0.4mmol)。于25℃下搅拌反应混合物并经 HPLC监测。完成水解作用后(1-2小时)，加三氟乙酸直至pH＝2。 经反相色谱提纯产物(水/乙腈洗脱)，冻干后得到白色固体350mg。 MS和1H NMR与预期的结构一致。

                  实施例113

β-[[2-[[[3-[(氨基硫代甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基] 氨基]吡啶-3-丙酸乙酯三氟乙酸盐的制备

将DL(3-硝基苯甲酰基甘氨酰基)-3-酰氨基-3-(3-吡 啶基)丙酸乙酯(2g，0.64mmol)，加到帕尔瓶中的无水乙醇(60ml) 中，加5％Pd/C(500mg)，并于50psi下氢化混合物1.5小时。反应 完成后，通过硅藻土塞滤去催化剂。减压除去溶剂，真空干燥产物。加 乙腈(5ml)于粗制苯胺中，接着加苯甲酰基异硫氰酸酯(600mg， 0.75mmol)。完成反应后，减压除去溶剂。向所得油状物中加甲醇 (50ml)，接着加K2CO3(2g)。搅拌反应物直至水解完成。反相色 谱提纯产物(水/乙腈洗脱)，冻干，得白色固体980mg。MS和1H NMR 与预期的结构一致。

                  实施例114

β-[[2-[[[3-[(氨基硫代甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基] 氨基]吡啶-3-丙酸三氟乙酸盐的制备

将实施例113的化合物(500mg，0.095mmol)溶于水/乙腈(1∶1) 中，接着加LiOH(100mg，0.4mmol)。于25℃下搅拌反应混合物并经 HPLC监测。完成水解作用后(1-2小时)，加三氟乙酸直至pH＝2。 经反相色谱提纯产物(水/乙腈洗脱)，冻干后得到白色固体350mg。 MS和1HNMR与预期的结构一致。

                  实施例115

DL-(3-硝基苯甲酰基甘氨酰基)-3-氨基-3-苯基丙酸乙 酯的制备

将N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(14g，5.5mmol)加到在无水二甲基 甲酰胺(30ml)中的3-硝基苯甲酰基甘氨酸(10g，4.5mmol)中，接 着，加二甲氨基吡啶(200mg)。1小时后，向其中一次加入，在20％ K2CO3水溶液(50ml)中的DL-3-氨基-3-苯基丙酸乙酯盐酸盐 (12g，4.6mmol)。反应完成后，过滤收集产物(12g，产率87％)。

MS和1H NMR与预期的结构一致。

                  实施例116

β-[[2-[[[3-[(氨基硫代甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基] 氨基]吡啶-苯丙酸乙酯的制备

将实施例115的化合物(2g，0.64mmol)加到帕尔瓶中的无水乙醇 (60ml)中。加5％Pd/C(500mg)，在帕尔瓶中于50psi下氢化混 合物1.5小时。反应完成后，经硅藻土塞滤除催化剂，减压除溶剂，真空 干燥产物。加乙腈(5ml)于粗制苯胺中，接着加异硫氰酸苯甲酰酯 (600mg，0.75mmol)。反应完成后，减压除去溶剂。向所得油中加甲 醇(50ml)，接着加K2CO3(2g)。搅拌反应混合物直至水解完成。 反相色谱(水/乙腈洗脱)提纯产物，冻干，得白色固体(980mg)。

MS和1HNMR与预期的结构一致。

                 实施例117

β-[[2-[[[3-[(氨基硫代甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基] 氨基]苯丙酸的制备

将实施例116的化合物(500mg，0.095mmol)溶于水/乙腈(1∶1) 中，接着加LiOH(100mg，0.4mmol)。于25℃下搅拌反应混合物并经 HPLC监测。完成水解作用后(1-2小时)，加三氟乙酸直至pH＝2。 经反相色谱提纯产物(水/乙腈洗脱)，冻干后得到白色固体350mg。 MS和1H NMR与预期的结构一致。

                  实施例118

β-[[2-[[[3-[[[(苯基甲基)氨基]羰基]氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]苯丙酸乙酯的制备

将DL(3-硝基苯甲酰基甘氨酰基)-3-酰氨基-3-苯基丙酸 乙酯(2g，0.62mmol)，加到帕尔瓶中的无水乙醇(60ml)中，加5％ Pd/C(500mg)，并于50psi下氢化混合物1.5小时。反应完成后，通 过硅藻土塞滤去催化剂。减压除去溶剂，真空干燥产物。加乙腈(5ml) 于粗制苯胺中，接着加异氰酸苄酯(700mg，0.75mmol)。溶液变成固 体。加乙醚，滤取产物。反相色谱提纯产物(水/乙腈洗脱)，冻干，得 白色固体(1.5g)。MS和1H NMR与预期的结构一致。

                  实施例119

β-[[2-[[[3-[[[(苯基甲基)氨基]羰基]氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]苯丙酸的制备

将实施例118的化合物(400mg，0.094mmol)溶于水/乙腈(1∶1) 中，接着加LiOH(100mg，0.4mmol)。于25℃下搅拌反应混合物并经 HPLC监测。完成水解作用后(1-2小时)，加三氟乙酸直至pH＝2。 经反相色谱提纯产物(水/乙腈洗脱)，冻干后得到白色固体200mg。 MS和1H NMR与预期的结构一致。

                  实施例120

β-[[2-[[(3-硝基苯基)羰基]氨基]乙酰基]氨基]-1，3-苯并二 氧杂环戊烯-5-丙酸乙酯的制备

将N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(14g，5.5mmol)加到在无水二甲基 甲酰胺(30ml)中的3-硝基苯甲酰基甘氨酸(10g，4.5mmol)中，接 着加二甲氨基吡啶(200mg)。1小时后，一次加入在20％K2CO3水溶 液(50ml)中的DL-3-氨基-3-苯并二噁茂基(piperinal)丙酸 乙酯盐酸盐(7g，4.6mmol)。反应完成后，过滤收集产物(14g，产率 97％)。

MS和1HNMR与预期的结构一致。

                  实施例121

β-[[2-[[[3-[[[(苯基甲基)氨基]羰基]氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-1，3-苯并二氧杂环戊烯-5-丙酸乙酯的制备

将实施例120的化合物(2g，0.62mmol)，加到帕尔瓶中的无水乙 醇(60ml)中，加5％Pd/C(500mg)，并于50psi下氢化混合物1.5 小时。反应完成后，通过硅藻土塞滤去催化剂。减压除去溶剂，真空干 燥产物。加乙腈(5ml)于粗制苯胺中，接着加异氰酸苄酯(700mg， 0.75mmol)。溶液变固体。加乙醚，滤取产物。反相色谱提纯产物(水 /乙腈洗脱)，冻干，得白色固体(1.5g)。MS和1H NMR与预期的结 构一致。

                  实施例122

β-[[2-[[[3-[[[(苯基甲基)氨基]羰基]氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-1，3-苯并二氧杂环戊烯-5-丙酸的制备

将实施例121的化合物(400mg，0.094mmol)溶于水/乙腈(1∶1) 中，接着加LiOH(100mg，0.4mmol)。于25℃下搅拌反应混合物并经 HPLC监测。完成水解作用后(1-2小时)，加三氟乙酸直至pH＝2。 经反相色谱提纯产物(水/乙腈洗脱)，冻干后得到白色固体200mg。 MS和1H MR与预期的结构一致。

                  实施例123

β-[[2-[[[3-[[(苯基氨基)羰基]氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基] 氨基]-1，3-苯并二氧杂环戊烯-5-丙酸乙酯的制备

将DL-(3-硝基苯甲酰基甘氨酰基)-3-酰氨基-3-哌啶丙 酸乙酯(2g，0.62mmol)加到帕尔瓶中的无水乙醇(60ml)中，加5％ Pd/C(500mg)，并于50psi下氢化混合物1.5小时。反应完成后，通 过硅藻土塞滤去催化剂。减压除去溶剂，真空干燥产物。加乙腈(5ml) 于粗制苯胺中，接着加异氰酸苯酯(700mg，0.75mmol)。溶液变成固 体。加乙醚，滤取产物。反相色谱提纯产物(水/乙腈洗脱)，冻干，得 白色固体(1.5g)。MS和1H NMR与预期的结构一致。

                     实施例124

β-[[2-[[[3-3-[[(苯基氨基)羰基]氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基] 氨基]-1，3-苯并二氧杂环戊烯-5-丙酸的制备

将实施例123的化合物(400mg，0.094mmol)溶于水/乙腈(1∶1) 中，接着加LiOH(100mg，0.4mmol)。于25℃下搅拌反应混合物并经 HPLC监测。完成水解作用后(1-2小时)，加三氟乙酸直至pH＝2。 经反相色谱提纯产物(水/乙腈洗脱)，冻干后得到白色固体200mg。 MS和1H NMR与预期的结构一致。

                 实施例126

β-[[2-[[[3-[[[[4-(氨基磺酰基)苯基甲基]氨基]羰基]氨 基]苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]吡啶-3-丙酸三氟乙酸盐的制备 步骤A

向4-(氨基甲基)苯磺酰胺盐酸盐水合物(Aldrich)(6g)的 乙腈溶液中，加3-乙氧基羰基的苯基异氰酸酯(Lancaster)(5g) 和三乙胺(5ml)。搅拌反应1小时。减压除溶剂，得固体物。加水并 滤取固体(10.2g)。MS和1HNMR与预期的结构一致。 步骤B

步骤A的化合物(10g)溶于水/乙腈(1∶1)中，接着加LiOH(4g)。于25℃下，搅拌反应混合物，并以HPLC监测。水解反应完 成后(4-6小时)，加10％HCl水溶液直至pH＝2。产物经过滤提 纯，得白色固体(7g)。MS和1H NMR与预期的结构一致。 步骤C

N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)(1.4g，0.5mmol)加到在无 水二甲基甲酰胺(20ml)中的4-(氨基甲基)苯磺酰胺和3-乙氧羰 基的苯基异氰酸酯的羧酸一脲(1g，0.5mmol)〔参见方案V(A13)〕 中，接着加二甲氨基吡啶(100mg)。1 小时后，一次加入在DMF/NMM (1∶1)(5.0ml)中的实施例1步骤C的化合物(2.2g，0.5mmol)。 反应完成后，反相色谱提纯产物(水/乙腈洗脱)，冻干，得白色固体 (1.2g)。MS和1H NMR与预期的结构一致。 步骤D

将步骤C的化合物(600mg)溶于水/乙腈(1∶1)中，接着加LiOH(100mg，)。于25℃搅拌反应混合物，并以HPLC监测。水解反应完 成后(1-2小时)，加三氟乙酸至pH＝2。反相色谱提纯产物(水/ 乙腈洗脱)，冻干，得500mg白色固体。MS和1H NMR与预期的结构 一致。

                 实施例127

β-[[2-[[[3-[[[(3-吡啶基甲基)氨基]羰基]氨基]苯基]羰 基]氨基]乙酰基]氨基]吡啶-3-丙酸二(三氟乙酸盐)的制备 步骤A

向3-吡啶甲胺(Aldrich)(6g)的乙腈溶液中，加3-乙氧基 羰基的苯基异氰酸酯(Lancaster)(5g)和三乙胺(5ml)。搅拌反 应1小时。减压除溶剂，得固体物。加水并滤取固体(12g)。MS和 1HNMR与预期的结构一致。 步骤B

步骤A的化合物(10g)溶于水/乙腈(1∶1)中，接着加LiOH (4g)。于25℃下，搅拌反应混合物，并以HPLC监测。水解反应完 成后(4-6小时)，加10％HCl水溶液直至pH＝2。产物经过滤提 纯，得白色固体(5.6g)。MS和1H NMR与预期的结构一致。 步骤C

N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)(1.4g，0.5mmol)加到在无 水二甲基甲酰胺(20ml)中的3-吡啶甲胺和3-乙氧羰基苯基异氰酸 酯的羧酸一脲(1g，0.5mmol)〔参见方案V(A13)〕中，接着加二 甲氨基吡啶(100mg)。1小时后，一次加入在DMF/NMM(1∶1) (5.0ml)中的实施例1步骤C的化合物(2.2g，0.5mmol)。反应完成 后，反相色谱提纯产物(水/乙腈洗脱)，冻干，得白色固体(1.1g)。 MS和1H NMR与预期的结构一致。 步骤D

将步骤C的化合物(500mg)溶于水/乙腈(1∶1)中，接着加LiOH(100mg，)。于25℃搅拌反应混合物，并以HPLC监测。水解反应完 成后(1-2小时)，加三氟乙酸至pH＝2。反相色谱提纯产物(水/ 乙腈洗脱)，冻干，得430mg白色固体。MS和1H NMR与预期的结构 一致。

                 实施例129

β-[[2-[[[3-[[[(2-羧基乙基)氨基]羰基]氨基]苯基]羰基] 氨基]乙酰基]氨基]吡啶-3-丙酸三氟乙酸盐的制备 步骤A

实施例104的化合物(1.5g)溶于帕尔瓶中的乙醇(60ml)中。 加5％Pd/C(500mg)，并于50psi下氢化混合物1.5小时。经硅藻土 塞滤除催化剂，减压除溶剂，并真空干燥产物。 步骤B

乙腈(5ml)加到步骤A的粗制苯胺中，接着加异氰酸根合丙酸乙 酯(Aldrich)(800mg)并搅拌1小时。减压除溶剂，得固体。加乙 醚，滤取固体，得褐色固体。反相色谱提纯产物(水/乙腈洗脱)，冻干， 得500mg白色固体。MS和1H NMR与预期的结构一致。 步骤C

步骤B的化合物(500mg)溶于水/乙腈(1∶1)中，接着加LiOH(100mg)。于25℃下搅拌反应混合物并以HPLC监测。水解反应完成 后(1-2小时)，和三氟乙酸直至pH＝2。反相色谱提纯产物(水/ 乙腈洗脱)，冻干，得220mg白色固体。MS和1H NMR与预期的结构 一致。

                 实施例130

β-[[2-[[[3-[[[(2-苯基乙基)氨基]羰基]氨基]苯基]羰基] 氨基]乙酰基]氨基]吡啶-3-丙酸三氟乙酸盐的制备 步骤A

向苯基乙基胺盐酸盐(Aldrich)(6g)的乙腈溶液中，加3-乙 氧基羰基的苯基异氰酸酯(Lancaster)(5g)和三乙胺(5ml)。搅 拌反应1小时。减压除溶剂，得固体物。加水并滤取固体(11g)。MS 和1H NMR与预期的结构一致。 步骤B

步骤A的化合物(10g)溶于水/乙腈(1∶1)中，接着加LiOH(4g)。于25℃下，搅拌反应混合物，并以HPLC监测。水解反应完 成后(4-6小时)，加10％HCl水溶液直至pH＝2。产物经过滤提 纯，得白色固体(5.6g)。MS和1H NMR与预期的结构一致。 步骤C

N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)(1.4g，0.5mmol)加到在无 水二甲基甲酰胺(20ml)中的苯基乙胺和3-乙氧羰基的苯基异氰酸酯 的羧酸一脲(1g，0.5mmol)〔参见方案V(A13)〕中，接着加二甲 氨基吡啶(100mg)。1小时后，一次加入在DMF/NMM(1∶1) (5.0ml)中的实施例1步骤C的化合物(2.2g，0.5mmol)。反应完成 后，反相色谱提纯产物(水/乙腈洗脱)，冻干，得白色固体(1.0g)。 MS和1H NMR与预期的结构一致。 步骤D

将步骤C的化合物(800mg)溶于水/乙腈(1∶1)中，接着加LiOH(100mg，)。于25℃搅拌反应混合物，并以HPLC监测。水解反应完 成后(1-2小时)，加三氟乙酸至pH＝2。反相色谱提纯产物(水/ 乙腈洗脱)，冻干，得633mg白色固体。MS和1H NMR与预期的结构 一致。

                 实施例131

β-[[2-[[[3-[[[(1-萘基乙基)氨基]羰基]氨基]苯基]羰基] 氨基]乙酰基]氨基]吡啶-3-丙酸三氟乙酸盐的制备 步骤A

向1-萘基甲胺(Aldrich)(5g)的乙腈溶液中，加3-乙氧基 羰基的苯基异氰酸酯(Lancaster)(5g)和三乙胺(5ml)。搅拌反 应1小时。减压除溶剂，得固体物。加水并滤取固体(9g)。MS和1H NMR与预期的结构一致。 步骤B

步骤A的化合物(8g)溶于水/乙腈(1∶1)中，接着加LiOH(3g)。 于25℃下，搅拌反应混合物，并以HPLC监测。水解反应完成后(4- 6小时)，加10％HCl水溶液直至pH＝2。产物经过滤提纯，得白色 固体(5.6g)。MS和1H NMR与预期的结构一致。 步骤C

N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)(1.4g，0.5mmol)加到在无 水二甲基甲酰胺(20ml)中的1-萘基甲胺和3-乙氧羰基的苯基异氰 酸酯的羧酸一脲(1g，0.5mmol)〔参见方案V(A13)〕中，接着加 二甲氨基吡啶(100mg)。1小时后，一次加入在DMF/NMM(1∶1) (5.0ml)中的实施例1步骤C的化合物(2.2g，0.5mmol)。反应完成 后，反相色谱提纯产物(水/乙腈洗脱)，冻干，得白色固体(1.0g)。 MS和1H NMR与预期的结构一致。 步骤D

将步骤C的化合物(600mg)溶于水/乙腈(1∶1)中，接着加LiOH(100mg，)。于25℃搅拌反应混合物，并以HPLC监测。水解反应完 成后(1-2小时)，加三氟乙酸至pH＝2。反相色谱提纯产物(水/ 乙腈洗脱)，冻干，得410mg白色固体。MS和1H NMR与预期的结构 一致。

                  实施例132

β-[[2-[[[3-[[(氰基亚氨基)苯基甲基氨基]甲基]氨基]苯基] 羰基]氨基]乙酰基]氨基]苯丙酸苯甲酯的制备

于0℃，向搅拌的实施例1的产物(140mg，0.52mM)的二氯甲烷 (25ml)溶液中，加三乙胺(0.5ml)、DMAP(10mg)、DECL (95mg)和实施例V的化合物(215mg，0.52mM)。于0℃，搅拌反 应混合物15分钟，温热至室温并再搅拌16小时。真空浓缩反应混合物， 得油样胶。将其溶于乙酸乙酯，用水、饱和NaHCO3水溶液和水先后洗 涤。分出有机层，Na2SO4干燥，蒸发，得到粗产物。以硅胶色谱进一步 提纯该粗产物(乙酸乙酯洗脱)，除去溶剂，得到标题化合物(88mg)， 为透明油状物。

NMR与预期的结构一致。

                  实施例133

β-[[2-[[[3-[[(氰基亚氨基)甲基氨基]甲基]氨基]苯基]羰基] 氨基]乙酰基]氨基]苯丙酸苯甲酯的制备

于0℃下，向搅拌的实施例J的产物(90mg，0.41mM)的二氯甲烷 (25ml)溶液中，加三乙胺(0.5ml)、DMAP(10mg)、  EDCl (95mg)和实施例V的化合物(215mg，0.52mM)。于0℃下，搅拌 反应混合物15分钟，温热至室温后再搅拌16小时。真空浓缩反应混合 物，得油状胶体。将其溶于乙酸乙酯，所得溶液用水、饱和NaHCO3和 水先后洗涤。分出有机层，Na2SO4干燥并蒸发，得粗产物。粗产物经硅 胶色谱提纯(乙酸乙酯洗脱)，除溶剂，得标题化合物(80mg)，为透 明油状物。NMR与预期的结构一致。

                  实施例134

β-[[2-[[[3-[[(氰基亚氨基)氨基]甲基]氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]苯丙酸苯甲酯的制备

于0℃下，向搅拌的实施例K的产物(212mg，1.0mM)的二氯甲 烷(25ml)溶液中，加三乙胺(0.5ml)、DMAP(10mg)、EDCl (95mg)和实施例V的化合物(215mg，0.52mM)。于0℃下，搅拌 反应混合物15分钟，温热至室温后再搅拌16小时。真空浓缩反应混合 物，得油状胶体。将其溶于乙酸乙酯，所得溶液用水、饱和NaHCO3和 水先后洗涤。分出有机层，Na2SO4干燥并蒸发，得粗产物。粗产物经硅 胶色谱提纯(乙酸乙酯洗脱)，除溶剂，得标题化合物(285mg)，为 透明油状物。NMR与预期的结构一致。

                 实施例135

β-[[2-[[[3-[[(氰基亚氨基)乙氨基]甲基]氨基]苯基]羰基] 氨基]乙酰基]氨基]苯丙酸乙酯的制备

于0℃下，向搅拌的实施例L的产物(464mg，2.0mM)、DL-β -〔(2-氨基-1-氧乙基)氨基〕苯基-3-丙酸乙酯(728mg， 2.0mM)〔按实施例1(步骤B、C和D)制备，不过，用等当量的 DL-3-氨基-3-(3-苯基)丙酸代替DL-3-氨基-3-(3 -吡啶基)丙酸〕、三乙胺(2.0ml)和DMAP(20mg)的二氯甲烷 (15ml)溶液中，加EDCl(191mg)。于0℃下搅拌反应混合物15 分钟，然后，于室温下再搅拌16小时。真空浓缩反应混合物，得油样胶 体。将其溶于乙酸乙酯。用水、饱和NaHCO3和水先后洗涤所得溶液。 分出有机层，Na2SO4干燥，蒸发，得粗产物。该粗产物经反相HPLC C18 柱进一步提纯(0.5％TFA-水/乙腈洗脱)，得标题化合物(280mg)， 为白色固体。 元素分析C24H28N6O4  0.3H2O：

计算值：C，61.34；H，6.13；N，17.88.

测定值：C，61.17；H，6.26；N，17.85。

NMR与预期的结构一致。

                  实施例136

β-[[2-[[[3-[[(氰基亚氨基)-[(苯基甲基)氨基]甲基]氨基] 苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]苯丙酸的制备

向搅拌的实施例132的化合物(88mg)的甲醇(2ml)和THF (2ml)溶液中，加1N NaOH(2ml)。室温下搅拌反应混合物2小 时，蒸发，并将残留物溶于水。用1N HCl调节所得溶液至pH4，过 滤出所得固体，用水和乙醚先后洗涤滤液。

得到标题化合物(62mg)，为白色固体。

NMR与预期的结构一致。 元素分析C27H26N6O4  0.5H2O  0.25Et2O：

计算值：C，63.93；H，5.65；N，15.97.

测定值：C，63.96；H，5.73；N，15.81。

                  实施例137

β-[[2-[[[3-[[(氰基亚氨基)(甲基氨基)-甲基]氨基]苯基]羰 基]氨基]乙酰基]氨基]苯丙酸的制备

向搅拌的实施例133的化合物(240mg)的甲醇(3ml)和THF (3ml)溶液中，加1N NaOH(3ml)。室温下搅拌反应混合物2小 时，蒸发，并将残留物溶于水中。用1N HCl调节所得溶液至pH4， 并用乙酸乙酯/甲醇提取。有机提取液用水洗涤，Na2SO4干燥，蒸发， 得透明胶体。用反相HPLC在C18柱上进一步提纯粗产物(0.5％TFA -水/乙腈洗脱)，冻干，得标题化合物(88mg)，为白色固体。NMR 与预期的结构一致。 元素分析C21H22N6O4  0.55TFA：

计算值：C，54.71；H，4.68；N，17.32.

测定值：C，54.92；H，4.70；N，16.93。

                    实施例138

β-[[2-[[[3-[[氨基(氰基亚氨基)甲基]氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]苯丙酸的制备

向搅拌的实施例134的化合物(285mg)的甲醇(3ml)和THF (3ml)溶液中，加1N NaOH(3ml)。室温下搅拌反应混合物2小 时，蒸发，并将残留物溶于水中。用1N HCl调节所得溶液至pH4， 并用乙酸乙酯/甲醇提取。有机提取液用水洗涤，Na2SO4干燥，蒸发， 得米色固体。用反相HPLC在C18柱上进一步提纯粗产物(0.5％TFA -水/乙腈洗脱)，冻干，得标题化合物(65mg)，为白色固体。

NMR与预期的结构一致。 元素分析 C20H20N6O41.25H2O，0.3 MeOH：

计算值：C，55.35；H，5.42；N，19.08.

测定值：C，55.70；H，5.01；N，18.69.

                 实施例139

β-[[2-[[[3-[[(氰基亚氨基)(乙氨基)甲基]氨基]苯基]羰基] 氨基]乙酰基]氨基]苯丙酸的制备

向搅拌的实施例135的化合物(285mg)的甲醇(3ml)和THF (3ml)溶液中，加1N NaOH(3ml)。室温下搅拌反应混合物2小 时，蒸发，并将残留物溶于水中。用1N HCl调节所得溶液至pH 4， 并用乙酸乙酯/甲醇提取。有机提取液用水洗涤，Na2SO4干燥，蒸发， 得米色固体。用反相HPLC在C18柱上进一步提纯粗产物(0.5％TFA -水/乙腈洗脱)，冻干，得标题化合物(180mg)，为白色固体。

NMR与预期的结构一致。 元素分析  C22H24N6O4  0.35H2O：

计算值：C，59.68；H，5.62；N，18.98.

测定值：C，59.80；H，5.61；N，18.59.

                 实施例140

3S-[[2-[[[3-[[(氰基亚氨基)(甲氨基)甲基]氨基]苯基]羰基] 氨基]乙酰基]氨基]-4-戊炔酸乙酯的制备 在0℃下，向搅拌的实施例J的产物(436mg，2.0mM)、DL-β -〔(2-氨基-1-氧乙基)氨基〕-4-戊炔酸乙酯(624mg，2.0mM) 〔按实施例1(步骤B、C和D)制备，不过，用等当量的3S-氨基 -4-戊炔酸乙酯(J.Med.Chem.，1995，38，3378)代替DL-3- 氨基-3-(吡啶基)丙酸〕、三乙胺(2.0ml)和DMAP(20mg) 的二氯甲烷(20ml)溶液中，加EDCl(382mg，2.0mM)。于0℃下， 搅拌反应混合物15分钟，然后，于室温下，再搅拌16小时。真空浓缩 反应混合物，得油样胶体。将其溶于乙酸乙酯，用水、饱和NaHCO3和 水先后洗所得溶液。分出有机层，Na2SO4干燥，蒸发，得粗产物。该粗 产物经RPHPLC在C18柱上进一步提纯(0.5％TFA-水/乙腈洗脱)， 冻干，得标题化合物(280mg)，为白色固体。

NMR与预期的结构一致。 元素分析  C17H18N6O4 0.45TFA：

计算值：C，50.99；H，4.41；N，19.93.

测定值：C，51.28；H，4.70；N，19.72.

                 实施例141

3S-[[2-[[[3-[[(氰基亚氨基)(甲氨基)甲基]氨基]苯基]羰基] 氨基]乙酰基]氨基]-4-戊炔酸的制备

向搅拌的实施例140的化合物(280mg)的甲醇(3ml)和THF (3ml)溶液中，加1N NaOH(3ml)。室温下搅拌反应混合物2小 时，蒸发，并将残留物溶于水中。用1N HCl调节所得溶液至pH4， 并用乙酸乙酯/甲醇提取。有机提取液用水洗涤，Na2SO4干燥，蒸发， 得米色固体。用反相HPLC在C18柱上进一步提纯粗产物(0.5％TFA -水/乙腈洗脱)，冻干，得标题化合物(122mg)，为白色固体。

NMR与预期的结构一致。 元素分析  C17H18N6O4 0.45 TFA：

计算值：C，50.99；H，4.41；N，19.93.

测定值：C，51.28；H，4.70；N，19.72.

                 实施例143

β-[[2-[[[3-[[(氰基亚氨基)(2-吡啶甲基)氨基]甲基]氨基] 苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]苯丙酸乙酯三氟乙酸盐的制备

按实施例135所述方法合成标题化合物，不过，以等当量的实施例 O的化合物代替实施例L的化合物。得标题化合物。NMR与预期化合物 一致。 元素分析C28H29N7O4 1TFA，1H2O：

计算值：C，54.63；H，4.89；N，14.86

测定值：C，54.28；H，4.58；N，14.63

                 实施例144

β-[[2-[[[3-[[(氰基亚氨基)(2-吡啶甲基)氨基]甲基]氨基] 苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]苯丙酸二(三氟乙酸盐)的制备

按实施例136所述方法合成标题化合物，不过，以等当量的实施例 143的化合物代替实施例132的化合物。得白色固体产物。NMR与预期 化合物一致。 元素分析  C26H25N7O4 2TFA，1H2O：

计算值：C，48.33；H，3.92；N，13.15

测定值：C，48.21；H，3.59；N，13.19

                  实施例145

β-[[2-[[[3-[[(氰基亚氨基)(3-吡啶甲基)氨基]甲基]氨基] 苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]苯丙酸乙酯三氟乙酸盐的制备

按实施例135所述方法合成标题化合物，不过，以等当量的实施例 Q的化合物代替实施例L的化合物。得白色固体。NMR与预期化合物一 致。 元素分析  C28H29N7O4 1TFA，1H2O：

计算值：C，54.63；H，4.89；N，14.86

测定值：C，54.24；H，4.85；N，14.41

                  实施例146

β-[[2-[[[3-[[(氰基亚氨基)(3-吡啶甲基)氨基]甲基]氨基] 苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]苯丙酸二(三氟乙酸盐)的制备

按实施例136所述方法合成标题化合物，不过，以等当量的实施例 145的化合物代替实施例132的化合物。得白色固体。NMR与预期化合 物一致。 元素分析  C26H25N7O4 2TFA，0.25H2O：

计算值：C，49.22；H，3.79；N，13.39

测定值：C，49.50；H，4.05；N，13.64

                实施例147

β-[[2-[[(3-氨基-4-氯苯基)羰基]氨基]乙酰基]氨基]苯 丙酸乙酯的制备

按实施例135所述方法合成标题化合物，不过，以等当量的3-氨 基-4-氯苯甲酸代替实施例L的化合物。得棕色固体(产率93.5％)。 NMR与预期化合物一致。

                实施例148

β-[[2-[[[4-氯-3-[[[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基] [[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]亚氨基]甲基]氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰 基]氨基]苯丙酸乙酯的制备

于0-5℃下，向搅拌的实施例147的产物(400mg，1.13mM)、 N，N′-二-Boc-硫脲(311mg，1.13mM)〔Edwin  J.Iwanowicz  et al.，Synthetic Communications，23(10)(1993)1443-1445〕、DMF (6ml)和三乙胺(0.6ml)溶液中，加HgCl2(360mg)。于0-5℃ 下，搅拌反应混合物15分钟，温热至室温后，再搅拌2小时。用乙酸乙 酯(50ml)稀释混合物并经硅藻土真空过滤。真空浓缩滤液，得到油样 胶体。经快速硅胶柱提纯(乙酸乙酯洗脱)，得标题化合物(254mg)， 为白色固体。NMR与预期结构一致。 C31H40N5O8  1.5H2O：

计算值：C，55.31；H，6.44；N，10.40

测定值：C，55.17；H，6.50；N，10.56。

                  实施例149

β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]-4-氯苯基]羰基]氨 基]乙酰基]氨基]苯丙酸乙酯三氟乙酸盐的制备

于0℃下，向搅拌的实施例148的产物(420mg)的二氯甲烷 (5ml)溶液中，加TFA(9ml)。温热混合物至室温并于室温下搅拌 1.5小时。真空浓缩反应混合物，得粗产物。经反相HPLC在C18柱上进 一步提纯粗产物(0.5％TFA-水/乙腈洗脱)，冻干，得标题化合物 (68mg)，为白色固体。 C21H24N5O4Cl  1.0TFA  0.45H2O：

计算值：C，48.63；H，4.60；N，12.33

测定值：C，48.28；H，4.16；N，12.13。

                  实施例150

β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]-4-氯苯基]羰基]氨 基]乙酰基]氨基]苯丙酸的制备

按实施例135所述方法合成标题化合物，不过，以等当量的实施例 149的化合物代替实施例132的化合物。得白色固体。NMR与预期化合 物一致。 C19H20N5O4Cl 1.5TFA：

计算值：C，44.87；H，3.68；N，11.89

测定值：C，44.54；H，3.80；N，11.43。

                实施例152

β-[[2-[[(5-氨基-2-氯苯基)羰基]氨基]乙酰基]氨基]苯 丙酸甲酯的制备

按实施例135所述方法合成标题化合物，不过，以等当量的3-氨 -6-氯苯甲酸代替实施例L的化合物。得淡棕色固体。NMR与预期 化合物一致。

               实施例153

β-[[2-[[[2-氯-5-[[[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基] [[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]亚氨基]甲基]氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基] 氨基]苯丙酸甲酯的制备

按实施例148所述方法合成标题化合物，不过，以等当量的实施例 152的化合物代替实施例146的化合物。得白色固体。NMR与预期化合 物一致。

                 实施例154

β-[[2-[[[2-氯-5-[[[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基] [[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]亚氨基]甲基]氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰 基]氨基]苯丙酸的制备

按实施例136所述方法制备标题化合物，不过，用等当量的实施例 153的化合物代替实施例132的化合物。得白色固体。

NMR与预期化合物一致。

                  实施例155

β-[[2-[[[5-[(氨基亚氨基甲基)氨基]-2-氯苯基]羰基]氨 基]乙酰基]氨基]苯丙酸三氟乙酸盐的制备

按实施例150所述方法制备标题化合物，不过，用等当量的实施例 154的化合物代替实施例149的化合物。得白色固体。

NMR与预期化合物一致。 C19H20N5O4Cl 1TFA  0.25H2O：

计算值：C，47.02；H，4.04；N，10.06

测定值：C，47.17；H，3.85；N，12.72。

                  实施例156 使用本发明公开的方法和以所需的试剂起始，制备下列化合物： R3      Y1                            R7 Et或H    O                             n-Bu Et或H    O                             i-Pr Et或H    O                             t-Bu Et或H    O                             n-Pr Et或H    O                             Et或H    O                             Et或H    O                             环己基 Et或H    O                             环己基甲基 Et或H    O                             Et或H    S                             Et或H    S                             环己基甲基 Et或H    S                             3-吡啶基 R3      Y1                R7 Et或H    O              Et或H    S              Et或H    S              Et或H    O              Et或H    O              Et或H    O              Et或H    O              R3      Y1                   R7 Et或H    O                    Et或H    O                    Et或H    O                    Et或H    O                    Et或H    O                    Et或H    O                    Et或H    O                    Et或H    O                    R3      Y1                  R7 Et或H    O             Et或H    O             Et或H    O             Et或H    O             Et或H    O             Et或H    O             Et或H    O             R3       Y1                  R7 Et或H     O               Et或H     O               Et或H     O               Et或H     O               Et或H     O               Et或H     O               Et或H     O               R3      Y1                   R7 Et或H    O                Et或H    O                Et或H    O                Et或H    O                Et或H    O                R3      Y1                   R7 Et或H    O                Et或H    O                Et或H    O                Et或H    O                Et或H    O               

                    实施例AA 下式化合物的制备

按实施例E所述方法，制备上式化合物，不过，用p-氨基甲基苯 磺酰胺代替苄胺，所得化合物为白色固体。

NMR与预期的结构一致。

                    实施例AB

下式化合物的制备

按实施例I所述方法，制备上式化合物，不过，用实施例R的化合 物代替实施例E的化合物，所得化合物为白色固体。

NMR与预期的结构一致。

                   实施例AC

下式化合物的制备

按实施例140所述方法制备上式化合物，不过，用N-t-Boc甘 氨酸代替实施例J的化合物和用DL-3-氨基-3-(3，5-二氯苯 基)丙酸乙酯代替DL-β-〔(2-氨基-1-氧乙基)氨基〕-4 -戊炔酸乙酯。所得化合物为油样胶体。

NMR与预期的结构一致。

                    实施例AD

下式化合物的制备

按实施例161所述方法制备上式化合物，不过，用实施例AC的化 合物代替实施例159的化合物。所得化合物为油样胶体。

NMR与预期的结构一致。

                   实施例157

3S-[[2-[[[3-[[[[(4-(氨基磺酰基)苯基甲基]氨基](氰基 亚氨基)甲基]氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基-4-戊炔酸乙酯的制 备

按实施例140所述方法制备标题化合物，不过，用实施例AA的化 合物代替实施例J的化合物。所得化合物为油样胶体。

NMR与预期的结构一致。

                  实施例158

3S-[[2-[[[3-[[[[(4-(氨基磺酰基)苯基甲基]氨基](氰基 亚氨基)甲基]氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]-4-戊炔酸三氟乙酸 盐单水合物的制备

按实施例141所述方法制备上述化合物，不过，用实施例157的化 合物代替实施例140的化合物。粗产物经RPHPLC在C18柱上提纯(0.5 ％TFA-水/乙腈洗脱)，冻干，得标题化合物，为白色固体。

NMR与预期的结构一致。 元素分析  C23H23N7O6S.1.25 TFA

计算值：C，44.64；H，3.86；N，14.29.

测定值：C，44.85；H，4.00；N，14.36.

                   实施例159

β-[[2-[[[3-[[氨基(氰基亚氨基)甲基]氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-3，5-二氯苯丙酸乙酯的制备

按实施例140所述方法制备标题化合物，不过，用实施例K的化合 物代替实施例J的化合物和用实施例AD的化合物代替DL-β-〔(2 -氨基-1-氧乙基)氨基〕-4-戊炔酸乙酯。所得标题化合物为油 样胶体。

NMR与预期的结构一致。

                  实施例160

β-[[2-[[[3-[[氨基(氰基亚氨基)甲基]氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-3，5-二氯苯丙酸的制备

按实施例141所述方法制备标题化合物，不过，用实施例159的化 合物代替实施例140的化合物。粗产物经HPLC在C18柱上提纯(0.5％ TFA-水/乙腈洗脱)，冻干，得标题化合物，为白色固体。

NMR与预期的结构一致。    

                  实施例161

β-[2-[[[3-[[氨基(氨基羰基)亚氨基]甲基]氨基]苯基]羰基]氨 基]乙酰基]氨基]-3，5-二氯苯丙酸乙酯三氟乙酸盐的制备

向搅拌的实施例159的化合物(2.65g)的二氯甲烷(120ml)溶 液中，加三氟乙酸(60ml)。于25℃下，搅拌反应混合物1小时。真 空浓缩反应混合物，得粗产物。从乙醚中重结晶，得标题化合物(2.02g)， 为白色固体。

NMR与预期的结构一致。 元素分析  C21H22N5O4Cl3 1.05 TFA.

计算值：C，43.31；H，3.79；N，10.98.

测定值：C，43.18；H，3.81；N，10.64.

                   实施例162

β-[[2-[[[3-[[氨基(氨基羰基)亚氨基]甲基]氨基]苯基]羰基] 氨基]乙酰基]氨基]-3，5-二氯苯丙酸三氟乙酸盐的制备

按实施例141所述方法制备标题化合物，不过，用实施例161的化 合物代替实施例140的化合物。所得标题化合物为白色固体。

NMR与预期的结构一致。 元素分析C20H20N6O5Cl2 1.25 TFA：

计算值：C，42.37；H，3.36；N，13.18.

测定值：C，42.48；H，3.46；N，12.96.

                  实施例AE 下式化合物的制备

按实施例141所述方法制备上式化合物，不过，用实施例AC的化 合物代替实施例140的化合物。所得标题化合物为白色固体。

NMR与预期的结构一致。

                  实施例AF

下式化合物的制备

向搅拌的实施例AE的化合物(954mg，33mmol)、DMF(10ml)、 K2CO3(1g)和NaI(129mg)的溶液中，加2-氯-N，N-二甲基 乙酰胺(363mg，3mmol)。于室温下，搅拌反应混合物16小时。真空 浓缩反应混合物，得油样胶体。从乙醚中重结晶，得白色固体(AF) (610mg)。

NMR与预期的结构一致。

                   实施例AG

下式化合物的制备

按实施例161所述方法制备标题化合物，不过，用实施例AF的化合 物代替实施例159的化合物。所得标题化合物为油样胶体。

NMR与预期的结构一致。

                   实施例163

β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基] 氨基]-3，5-二氯苯丙酸[(二甲氨基)羰基]甲酯的制备

按实施例132所述方法制备标题化合物，不过，用m-胍基苯甲酸 代替实施例I的化合物和用实施例AG的化合物代替实施例V的化合物。 所得标题化合物为白色固体。

NMR与预期的结构一致。 元素分析C23H26N6O3Cl2 1.3 TFA：

计算值：C，44.85；H，4.01；N，12.28

测定值：C，44.51；H，3.88；N，12.38.

                       实施例AH

下式化合物的制备

向搅拌的2-甲基-2-硫异脲的硫酸盐(11.1g)二氯甲烷 (150ml)中，加氯甲酸乙酯(8ml)和饱和NaHCO3溶液(150ml)。 室温下，搅拌反应混合物18小时。用水洗反应混合物，Na2SO4干燥， 真空浓缩，得油样胶体粗产物。经快速柱色谱提纯，得标题化合物 (9.8g)，为白色固体。

NMR与预期的结构一致。

                    实施例164

下式化合物的制备

按实施例140所述方法制备标题化合物，不过，用3-氨基苯甲酰 基甘氨酸代替实施例J的化合物和用3-氨基-3-(3，5-二氯苯基) 丙酸叔丁酯代替DL-β-〔(2-氨基-1-氧乙基)氨基〕-4- 戊炔酸乙酯。得标题化合物，为油样胶体。

NMR与预期的结构一致。

                   实施例165

3，5-二氯-β-[[2-[[[3-[[[(乙氧羰基)氨基][(乙氧羰基) 亚氨基]甲基]氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]苯丙酸1，1-二甲基乙 酯的制备

向搅拌的实施例AH的化合物(250mg)的DMF(2ml)和三乙胺 (150mg)溶液中，加实施例164的化合物(150mg)。将反应混合物 冷至0℃并搅拌5分钟。用HgCl2(50mg)处理混合物并于室温下搅拌 1小时。真空浓缩混合物，得油样胶体。经快速柱色谱提纯，得油样胶体。

NMR与预期的结构一致。

                   实施例166

3，5-二氯-β-[[2-[[[3-[[[(乙氧羰基)氨基][(乙氧羰基) 亚氨基]甲基]氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]苯丙酸的制备

按实施例160所述方法制备标题化合物，不过，用实施例165的化 合物代替实施例159的化合物。所得标题化合物为白色固体。

NMR与预期的结构一致。 元素分析  C25H27N5O8Cl2  0.5H2O，0.25TFA：

计算值：C，48.31；H，4.49；N，11.05.

测定值：C，48.55；H，4.21；N，10.84.

                       实施例AI

下式化合物的制备

于0℃下，向搅拌的3-氨基-4-氯苯甲酸(25.0g，157mmol) 的甲醇(300ml)悬浮液中，加氯化氢直至甲醇溶液被饱和。于0°-5℃ 下，搅拌反应混合物30分钟，温热至室温并再搅拌4天。真空浓缩反应 混合物，用乙醚研制所得白色固体，得标题化合物(26.2g)，为白色固 体。

NMR与预期的结构一致。

                     实施例AJ

下式化合物的制备

于0℃下，向Z-t-Boc-硫脲(24.8g，90mmol)和3-氨基- 4-氯苯甲酸甲酯(20g，90mmol)的二甲基甲酰胺(120ml)和三乙胺 (45ml)溶液中，加HgCl2(30.1g，111mmol)。于0℃下，搅拌反应 混合物15分钟，温热至室温并再搅拌2小时。用乙酸乙酯(600ml)稀 释反应混合物，减压过滤所得浆液。浓缩滤液，得油样胶体。经硅胶色 谱提纯(乙酸乙酯/庚烷20∶80洗脱)，得上式化合物(8.6g)，为白 色固体。

NMR与预期的结构一致。

                     实施例AK

下式化合物的制备

于室温下，将实施例AI的产物溶于甲醇(3ml)中并加1M NaOH(14ml)。室温下搅拌反应混合物2小时。真空浓缩反应混合物，将残 留物溶于水并用乙醚洗。用1N HCl酸化水层至pH＝3。滤取生成的 白色沉淀，用水和乙醚先后洗涤，干燥，得1.2g白色固体。

NMR与预期的结构一致。

                     实施例AL

下式化合物的制备

于0℃下，向实施例AJ的产物(550mg，1.33mmol)的CH2Cl2(4ml)溶液中，加TFA(1ml)。撤掉冰浴，在室温下搅拌反应混合 物2小时。真空浓缩反应混合物，得无色油状物。向其中加4N HCl/二 噁烷溶液(2ml)，生成白色沉淀。真空浓缩此溶液，得280mg所要产 物，为白色固体。

NMR与预期的结构一致。

                  实施例167

β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]-4-氯苯基]羰基]氨 基]乙酰基]氨基]-3，5-二氯丙酸乙酯的制备

将实施例AL的化合物(500mg)和1-甲基哌啶(400mg)的DMF (20ml)溶液冷却至0℃，在氮气氛下，向其中加氯甲酸异丁酯 (274mg)。搅拌反应混合物5分钟后，向其中加实施例AD化合物 (866mg)的DMF(2ml)溶液。慢慢温热反应混合物至室温并搅拌 16小时。加水急冷并以乙酸乙酯提取。用水洗有机层，Na2SO4干燥，真 空浓缩。残留物经RPHPLC提纯，冻干，得标题化合物(329mg)，为 油样胶体。 元素分析  C21H22N5O4Cl3 1TFA，0.5H2O：

计算值：C，43.31；H，3.79；N，10.98

测定值：C，43.18；H，3.81；N，10.64.

实施例168

β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]-4-氯苯基]羰基]氨 基]乙酰基]氨基]-3，5-二氯丙酸三氟乙酸盐的制备

按实施例141所述方法制备标题化合物，不过，用实施例167的化 合物代替实施例140的化合物，所得标题化合物为白色固体。

NMR与预期的结构一致。 元素分析  C19H18N5O4Cl3·1TFA：

计算值：C，41.98；H，3.19；N，11.66.

测定值：C，42.14；H，3.30；N，11.18.

                     实施例169

下式化合物的制备

按实施例140所述方法制备上式化合物，不过，用实施例K的化合 物代替实施例J的化合物。所得标题化合物为油样胶体。

NMR与预期的结构一致。 元素分析  C18H20N6O4 0.6TFA：

计算值：C，50.93；H，4.59；N，18.56.

测定值：C，50.69；H，4.71；N，18.32.

                  实施例170

3S-[[2-[[[3-[[氨基(氨基羰基)亚氨基]甲基]氨基]苯基]羰基] 氨基]乙酰基]氨基]-4-戊炔酸乙酯的制备

按实施例161所述方法制备上式化合物，不过，用实施例169的化 合物代替实施例159的化合物。所得标题化合物为油样胶体。

NMR与预期的结构一致。

                  实施例171

3S-[[2-[[[3-[[氨基(氨基羰基)亚氨基]甲基]氨基]苯基]羰基] 氨基]乙酰基]氨基]-4-戊炔酸三氟乙酸盐水合物的制备

按实施例141所述方法制备上式化合物，不过，用实施例170的化 合物代替实施例140的化合物。所得标题化合物为油样胶体。

NMR与预期的结构一致。

                实施例172

3S-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]-4-氯苯基]羰基] 氨基]乙酰基]氨基]-4-戊炔酸乙酯的制备

按实施例167所述的方法制备标题化合物，不过，用DL-β-〔(2 -氨基-1-氧乙基)氨基〕-4-戊炔酸乙酯代替实施例AD的化合 物。所得标题化合物为油样胶体。

NMR与预期的结构一致。

                实施例173

3S-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]-4-氯苯基]羰基] 氨基]乙酰基]氨基]-4-戊炔酸三氟乙酸盐的制备

按实施例141所述方法制备标题化合物，不过，用实施例172的化 合物代替实施例140的化合物，所得标题化合物为白色固体。

NMR与预期的结构一致。 元素分析C15H16N5O4Cl，1TFA，0.5H2O：

计算值：C，41.77；H，3.71；N，14.33.

测定值：C，41.84；H，3.64；N，13.94.

                  实施例174

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-3，4-二氯苯丙酸乙酯三氟乙酸盐的制备 步骤A

按实施例1步骤A和B制备DL-3-氨基-3-(3，4-二氯苯 基)丙酸乙酯盐酸盐，不过，以等当量的3，4-二氯苯甲醛(Aldrich) 代替实施例1步骤A中的3-吡啶甲醛。 步骤B

在冰浴温度下，向m-胍基与尿酸盐酯盐(实施例M)(400mg， 0.0015mol)和N-甲基吗啉(150mg，0.0015mol)的无水DMF(6ml) 溶液中，加氯甲酸异丁酯(200mg，0.0015mol)。搅拌5分钟后，在冰 浴温度下，一次加入上面步骤A的产物(440mg，0.0015mol)和N-甲 基吗啉(150mg，0.0015mol)在无水DMF(6ml)中的浆液。室温下搅 拌反应混合物过夜。于78℃的水浴上，减压除溶剂，经RPHPLC分离产 物，得标题化合物(520mg)，为白色固体。

MS和NMR与预期的结构一致。

                  实施例175

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-3，4-二氯苯丙酸三氟乙酸盐的制备

向实施例174的产物(420mg，0.0007mol)的水(8ml)和CH3CN(8ml)溶液中，加LiOH(118mg，0.003mol)。室温下搅拌反应混合 物1.5小时。用TFA降低混合物的pH值至≈3，并经RPHPLC分离产 物，冻干，得标题化合物(390mg)，为白色固体。

MS和NMR与预期的结构一致。

                 实施例176

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]-5-(三氟甲 基)苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]-3，5-二氯苯丙酸乙酯三氟乙酸盐的 制备

按实施例38的方法制备标题化合物，不过，用等当量的3，5-二氯 苯甲醛(Aldrich)代替3，5-二(三氟甲基)苯甲醛。

MS和NMR与预期的结构一致。

                 实施例177

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]-5-(三氟甲 基)苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]-3，5-二氯苯丙酸三氟乙酸盐的制备

向实施例176的产物(620mg，0.00094mol)的水(10ml)和乙腈 (10ml)溶液中，加LiOH(157mg，0.037mol)。室温下搅拌反应混 合物2小时。用TFA降低混合物的pH值至≈3，并经RPHPLC分离产 物，冻干，得标题化合物(560mg)，为白色固体。

MS和NMR与预期的结构一致。

                  实施例178

β-[[2-[[[3-[(4，5-二氢-1H-咪唑-2-基)氨基]苄基] 羰基]氨基]乙酰基]氨基]-3，5-二(三氟甲基)苯丙酸乙酯三氟乙酸盐 的制备

按实施例9的方法制备标题化合物，不过，用等当量的3，5-二(三 氟甲基)苯甲醛(Aldrich)代替实施例9步骤B中实施例1步骤A的3 -吡啶甲醛。

MS和NMR与预期的结构一致。

                  实施例179 (±)β-[[2-[[[3-[(4，5-二氢-1H-咪唑-2-基)氨基]苄基] 羰基]氨基]乙酰基]氨基]-3，5-二(三氟甲基)苯丙酸三氟乙酸盐的制 备

向实施例178的产物(360mg，0.0005mol)的水(8ml)和乙腈 (8ml)溶液中，加LiOH(88mg，0.0021mol)。室温搅拌反应混合物 3小时。用TFA降低混合物的pH值至≈3，并经RPHPLC分离产物， 冻干，得标题化合物(300mg)，为白色固体。

MS和NMR与预期的结构一致。

                 实施例180

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-2，5-二甲基苯丙酸乙酯三氟乙酸盐的制备

按实施例174的方法制备标题化合物，不过，用等当量的2，5-二 甲基苯甲醛(Aldrich)代替实施例174步骤A的3，4-二氯苯甲醛。

MS和NMR与预期的结构一致。

                 实施例181

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-2，5-二甲基苯丙酸三氟乙酸盐的制备

向实施例180的产物(710mg，0.0013mol)的水(10ml)和乙腈 (10ml)溶液中，加LiOH(215mg，0.005mol)。室温下搅拌反应混 合物2.5小时。用TFA降低混合物的pH值至≈3，并经RPHPLC分离 产物，冻干，得标题化合物(600mg)，为白色固体。

MS和NMR与预期的结构一致。

                 实施例182

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-3-氯苯丙酸乙酯三氟乙酸盐的制备

按实施例174的方法制备标题化合物，不过，用等当量的3-氯苯 甲醛(Aldrich)代替实施例174步骤A中的3，4-二氯苯甲醛。

MS和NMR与预期的结构一致。

                  实施例183

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-3-氯苯丙酸三氟乙酸盐的制备

向实施例182的产物(720mg，0.0013mol)的水(15ml)和乙腈 (10ml)溶液中，加LiOH(880mg，0.02mol)。室温下搅拌反应混合 物1小时。用TFA降低混合物的pH值至≈2，并经RPHPLC分离产物， 冻干，得标题化合物(550mg)，为白色固体。

MS和NMR与预期的结构一致。

                 实施例184

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-3-溴苯丙酸乙酯三氟乙酸盐的制备

按实施例174的方法制备标题化合物，不过，用等当量的3-溴苯 甲醛(Aldrich)代替实施例174步骤A的3，4-二氯苯甲醛。

MS和NMR与预期的结构一致。

                  实施例185

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-3-溴苯丙酸三氟乙酸盐的制备  

向实施例184的产物(1.0mg，0.00165mol)的水(15ml)和乙腈 (10ml)溶液中，加LiOH(210mg，0.005mol)。室温下搅拌反应混 合物1.5小时。用TFA降低混合物的pH值至≈2.5，并经RPHPLC分离 产物，冻干，得标题化合物(460mg)，为白色固体。

MS和NMR与预期的结构一致。

                 实施例186

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-4-溴苯丙酸乙酯三氟乙酸盐的制备

按实施例174的方法制备标题化合物，不过，用等当量的4-溴苯 甲醛(Aldrich)代替实施例174步骤A中的3，4-二氯苯甲醛。

MS和NMR与预期的结构一致。

                 实施例187

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-4-溴苯丙酸三氟乙酸盐的制备

向实施例186的产物(1.3mg，0.0023mol)的水(15ml)和乙腈 (15ml)溶液中，加LiOH(290mg，0.0069mol)。室温下搅拌反应混 合物1小时。用TFA降低混合物的pH值至≈2.5，并经RPHPLC分离 产物，冻干，得标题化合物(1.1g)，为白色固体。

MS和NMR与预期的结构一致。

                  实施例188

(±)β-[[2-[[[3-[(3，4，5，6-四氢-2H-氮杂_-7-基) 氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]-3，5-二氯苯丙酸乙酯三氟乙酸盐 的制备

按实施例11的方法制备标题化合物，不过，用等当量的3，5-二氯 苯甲醛(Aldrich)代替实施例11步骤B中实施例1步骤A的3-吡啶 甲醛。

MS和NMR与预期的结构一致。

                  实施例189

(±)β-[[2-[[[3-[(3，4，5，6-四氢-2H-氮杂_-7-基) 氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]-3，5-二氯苯丙酸三氟乙酸盐的制 备

向实施例188的产物(370mg，0.00057mol)的水(20ml)和乙腈 (15ml)溶液中，加LiOH(192mg，0.0046mol)。室温下搅拌反应混 合物3小时。用TFA降低混合物的pH值至≈2.5，并经RPHPLC分离 产物，冻干，得标题化合物(280mg)，为白色固体。

MS和NMR与预期的结构一致。

                  实施例190

(±)β-[[2-[[[3-[(4，5-二氢-1H-咪唑-2-基)氨基] 苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]-3，5-二氯苯丙酸乙酯三氟乙酸盐的制 备

按实施例9的方法制备标题化合物，不过，用等当量的3，5-二氯 苯甲醛(Aldrich)代替实施例9步骤B中实施例1步骤A的3-吡啶 甲醛。

MS和NMR与预期的结构一致。

                  实施例191

(±)β-[[2-[[[3-[(4，5-二氢-1H-咪唑-2-基)氨基] 苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]-3，5-二氯苯丙酸三氟乙酸盐的制备

向实施例190的产物(200mg，0.00032mol)的水(10ml)和乙腈 (10ml)溶液中，加LiOH(54mg，0.0013mol)。室温下搅拌反应混 合物1.5小时。用TFA调低混合物的pH值至≈2.5，并经RPHPLC分离 产物，冻干，得标题化合物(190mg)，为白色固体。

MS和NMR与预期的结构一致。

                 实施例192

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-3，5-二甲基苯丙酸乙酯三氟乙酸盐的制备

按实施例174的方法制备标题化合物，不过，用等当量的3，5-二 甲基苯甲醛(Lancaster)代替实施例174步骤A的3，4-二氯苯甲醛。

MS和NMR与预期的结构一致。

                 实施例193

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-3，5-二甲基苯丙酸三氟乙酸盐的制备

向实施例192的产物(730mg，0.0013mol)的水(10ml)和乙腈 (10ml)溶液中，加LiOH(221mg，0.005mol)。室温下搅拌反应混 合物1小时。用TFA调低混合物的pH值至≈2.5，并经RPHPLC分离 产物，冻干，得标题化合物(570mg)，为白色固体。

MS和NMR与预期的结构一致。

                  实施例194

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-3，5-二甲氧基苯丙酸乙酯三氟乙酸盐的制备

按实施例174的方法制备标题化合物，不过，用等当量的3，5-二 甲氧基苯甲醛(Aldrich)代替实施例174步骤A中的3，4-二氯苯甲 醛。

MS和NMR与预期的结构一致。

                 实施例195

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-3，5-二甲氧基苯丙酸三氟乙酸盐的制备

向实施例194的产物(800mg，0.00014mol)的水(20ml)和乙腈 (8ml)溶液中，加LiOH(230mg，0.0055mol)。室温下搅拌反应混 合物1.5小时。用TFA调低反应混合物的pH值至≈3，并经RPHPLC 分离产物，冻干，得标题化合物(670mg)，为白色固体。

MS和NMR与预期的结构一致。

                 实施例196

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-3，5-二氯苯丙酸的(2，2-二甲基-1-氧代丙氧基) 甲酯三氟乙酸盐的制备 步骤A

按实施例1步骤A的方法制备DL-3-氨基-3-(3，5-二氯 苯基)丙酸，不过，用等当量的3，5-二氯苯甲醛(Aldrich)代替实施 例1步骤A的3-吡啶甲醛。MS和NMR与预期的结构一致。 步骤B

于冰浴温度下，向步骤A的产物(3.0g，0.0128mol)的二噁烷 (25ml)和水(13ml)溶液中，加NaOH(0.52g，0.013mol)的水 (13ml)溶液。于冰浴温度下，搅拌10分钟后加BOC酐(3.0g， 0.014mol)。于室温下，搅拌反应混合物2小时。真空除去二噁烷后， 在冰浴中冷却该水溶液。在用乙酸乙酯复盖后，用KHSO4调低pH值至 2.5。分出乙酸乙酯层，用乙酸乙酯提取水层两次以上。合并乙酸乙酯层， 水洗三次，MgSO4干燥，减压除溶剂。残留物在5％乙酸乙酯/己烷中制 浆并放置过夜，得白色固体。过滤固体，用10％乙酸乙酯/己烷洗，干 燥，得N-BOC-DL-3-氨基-3-(3，5-二氯苯基)丙酸 (2 9g)，为白色固体。 步骤C

向步骤B的产物(2.5g，0.0075mol)的丙酮(30ml)和水(5ml) 溶液中，加KOH(87％)(0.5g，0.0075mol)。向其中加新戊酸氯甲 酯(1.3g，0.0084mol)(Aldrich)，接着加NaI(190mg)。回流搅 拌反应混合物过夜。真空除溶剂，将残留物溶于乙醚。用饱和NaHCO3洗两次，水洗三次，MgSO4干燥。真空除溶剂，得N-BOC-DL-3 -氨基-3-(3，5-二氯苯基)丙酸的新戊酰基氧甲酯(2.92g)，为 白色固体。MS和NMR与预期的结构一致。 步骤D

向步骤C的产物(2.92g，0.0065mol)加过量4M HCl的二噁烷 (Aldrich)溶液。室温下搅拌反应混合物过夜。真空除溶剂，残留物以 石油醚/异丙醚(50∶50)制浆两次，以石油醚制浆一次(每次均滗去溶 剂)。真空干燥所得固体，得DL-3-氨基-(3，5-二氯苯基)丙酸 新戊酰基氧甲酯盐酸盐(2.0g)，为白色固体。MS和NMR与预期的 结构一致。 步骤E

按照实施例174步骤B的方法，制备标题化合物，不过，用等当量 的上面步骤D的产物代替实施例174步骤B中所用实施例174步骤A的 产物。分离出标题化合物，为白色固体。MS和NMR与预期的结构一致。

                   实施例197

(±)3，5-二氯-β-[[2-[[[3-[(氰基亚氨基)(甲氨基)甲基] 氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]苯丙酸乙酯的制备 步骤A

按实施例1步骤A-D的方法制备β-[[(2-氨基乙酰基)氨基](3， 5-二氯苯基)]-3-丙酸乙酯盐酸盐，不过，用等当量的3，5-二氯苯 甲醛代替实施例1步骤A的3-吡啶甲醛。MS和NMR与预期的结构 一致。 步骤B

在冰浴温度下，向上面步骤A的产物(1.1g，0.0031mol)、实施例 J的产物(680mg，0.0031mol)、DMAP(38mg，0.00031mol)、三乙 胺(320mg，0.0031mol)和二氯甲烷(12ml)中，加EDCI(600mg， 0.0031mol)。反应混合物在冰浴温度下搅拌15分钟后，在室温下搅拌 过夜。真空除溶剂，残留物溶于乙酸乙酯，用饱和NaHCO3洗一次，水 洗两次，MgSO4干燥后，真空除溶剂。所得固体在乙酸乙酯/异丙醚(1∶ 3)制浆1小时。滤取所得固体，异丙醚洗，真空干燥，得标题化合物 (1.35g)，为白色固体。

                   实施例198

(±)3，5-二氯-β-[[2-[[[3-[(氰基亚氨基)(甲氨基)甲基] 氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]苯丙酸的制备

向实施例197步骤B的产物(1.18g，0.0023mol)的水(15ml)和 乙腈(15ml)溶液中，加LiOH(240mg，0.0057mol)。室温下搅拌反 应混合物3小时。用TFA调低混合物的pH值至≈3，并经RPHPLC分 离产物，冻干，得标题化合物(1.02g)，为白色固体。

MS和NMR与预期的结构一致。

                   实施例199

(±)3，5-二氯-β-[[2-[[[3-[(1，4，5，6-四氢嘧啶-2 -基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]苯丙酸乙酯三氟乙酸盐的制备 步骤A

向实施例23步骤A的产物(10.1g，0.03mol)的DMF(15ml)溶 液中，加1，3-二氨基丙烷(2.3g，0.031mol)、三乙胺(3.9g，0.03mol) 和DMAP(420mg)。于140°-150℃下，搅拌反应混合物4.5小时(为 粘稠沉淀)。冷至室温后，加水(30ml)，再搅拌15分钟后，滤取沉 淀并水洗。将此沉淀在水中制浆并用浓HCl调至酸性形成溶液。冻干， 除溶剂，残留物用异丙醚成浆两次(每次滗去溶剂)。真空干燥，得3 -(2-氨基-1，4，5，6-四氢嘧啶)苯甲酸盐酸盐(4.0g)，为白色 固体。MS和NMR与预期的结构一致。 步骤B

在冰浴温度下，向上面步骤A的产物(884mg，0.0035mol)和NMM (350mg，0.0035mol)的无水DMF(6ml)溶液中，加氯甲酸异丁酯 (470mg，0.0035mol)。搅拌5分钟后，在冰浴温度下，向其中加实施 例197步骤A的产物(1.07g，0.003mol)和NMM(300mg，0.003mol) 在无水DMF(6ml)中的浆液。真空除溶剂，产物经RPHPLC分离， 冻干，得标题化合物(820mg)，为白色固体。

MS和NMR与预期的结构一致。

                   实施例200

(±)3，5-二氯-β-[[2-[[[3-[(1，4，5，6-四氢嘧啶-2 -基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]苯丙酸三氟乙酸盐的制备

向实施例199步骤B的产物(780mg，0.0012mol)的水(10ml)和 乙腈(10ml)溶液中，加LiOH(830mg，0.005mol)。室温搅拌反应 混合物1.5小时。用TFA调低混合物的pH值至≈2.5，并经RPHPLC分 离产物，冻干，得标题化合物(560mg)，为白色固体。MS和NMR 与预期的结构一致。

                 实施例201

(±)β-[[2-[[[3-[[[(氨基羰基)-亚氨基)甲氨基]甲基]氨 基]苯基]-羰基]氨基]乙酰基]氨基]-3，5-二氯苯丙酸的制备

向实施例198的产物(300mg，0.0006mol)的CH2CN(10ml)和 H2O(25ml)溶液中加入TFA(6ml)。在室温下搅拌反应混合物两 周。用RPHPLC分离产物得到标题化合物(冷冻干燥后为290mg)，为 白色固体。

MS和NMR与预期的结构一致。

                  实施例202

(±)β-[[2-[[[3-[(3，4-二氢-2H-吡咯-5-基)氨基] 苯基]羰基]氨基]乙酰基]-氨基]-3，5-二氯苯丙酸乙酯的制备

按照实施例16方法制备上述化合物，用等当量的3，5-二氯苯甲醛 (Aldrich)代替实施例1步骤A中的3-吡啶甲醛，其用来合成实施例 11步骤B中所用的实施例1步骤D的产物。

MS和NMR与预期的结构一致。

                  实施例203

(±)β-[[2-[[[3-[(3，4-二氢-2H-吡咯-5-基)氨基] 苯基]羰基]氨基]乙酰基]-氨基]-3，5-二氯苯丙酸的三氟乙酸盐的制备

向实施例202的产物(1.27g，0.002mol)的H2O(15ml)和CH2CN(15ml)溶液中加入LiOH(345mg，00.82mol)。在室温下搅拌反应 混合物1.5小时。用TFA调低pH至2.7并通过RPHPLC分离产物得到标 题化合物(冷冻干燥后为80mg)，为白色固体。

MS和NMR与预期的结构一致。

                  实施例204

(±)3，5-二氯-β-[[2-[[[3-[(2，3，4，5-四氢吡啶-6 -基)氨基]苯基]-羰基]氨基]乙酰基]氨基]苯丙酸乙酯的三氟乙酸盐的制 步骤A

向邻-甲基戊内酰亚胺(valerolactim)(Oakwood)(6.9g， 0.061mol)的CH2CN(75ml)混合液中加入3-氨基苯甲酸盐酸盐 (Aldrich)(10g，0.0576mol)。简单加热形成溶液后，在室温下搅拌 反应混合物过夜。过滤所得沉淀物，用CH3CN洗涤并真空干燥得到3- (1-氮杂-2-氨基-1-杂己烯)苯甲酸盐酸盐(12.2g)，为白色 固体。

MS和NMR与预期的结构一致。 步骤B

按照实施例199方法制备标题化合物，用等当量的上述步骤A产物 代替实施例199步骤B所用的步骤A的产物。

MS和NMR与要求的结构一致。

                  实施例205

(±)3，5-二氯-β-[[2-[[[3-[(2，3，4，5-四氢吡啶-6 -基)氨基]苯基]-羰基]氨基]乙酰基]氨基]苯丙酸的三氟乙酸盐的制备

向实施例204步骤B产物(890mg，0.0014mol)的H2O(20ml) 和CH3CN(20ml)溶液中加入LiOH(236mg，0.0056mol)。在室温 下搅拌反应混合物1小时。用TFA调低pH至约为3并用RPHPLC分离 产物得到标题化合物(冷冻干燥后320mg)，为白色固体。

MS和NMR与要求的结构一致。

                 实施例206

(±)β-[[2-[[[3-[(3-氨基硫代甲基)-氨基]苯基]羰基]氨 基]乙酰基]氨基]-3，5-二氯苯丙酸的制备

按照实施例198方法制备上述化合物，以等当量的1-(3-羧苯 基)-2-硫脲(Transworld)代替实施例197步骤B中的实施例J产 物。

MS和NMR与要求的结构一致。

                 实施例207

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)-氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-3，4-二溴苯丙酸的三氟乙酸盐的制备

按照实施例175的方法制备上述化合物，以等当量的3，4-二溴苯 甲醛(Lancaster)代替实施例174步骤A的3，4-二氯苯甲醛。

MS和NMR与要求的结构一致。

                 实施例208

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)-氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-3-氟-5-(三氟甲基)苯丙酸的三氟乙酸盐的制备

按照实施例175的方法制备上述化合物，以等当量的3-氟-5- 三氟甲基苯甲醛(Lancaster)代替实施例174步骤A中的3，4-二氯苯 甲醛。

MS和NMR与要求的结构一致。

                 实施例209

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)-氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-3-溴-5-氟苯丙酸的三氟乙酸盐的制备 步骤A

在-78℃下N2气氛下，在火焰干燥的烧瓶中盛有1-氟-3，5- 二溴苯(Lancaster)(10g，0.0394mol)的无水乙醚(50ml)溶液，向 其中滴加1.6m丁基锂(Aldrich)的己烷溶液，在滴加过程中保持温度 低于-78℃。在滴加完成后，再在-78℃搅拌反应50分钟。慢慢温热 反应至-30℃，然后在保持-20℃以下的温度，以相同速度滴加入无 水DMF(3.6g，0.049mol)。

在滴加完成后，在1小时中慢慢升温至0℃，然后在室温下搅拌过 夜。将反应混合物缓慢倒入冷的10％的HCl水溶液(80ml)中。搅拌 15分钟后，分离醚层并用H2O(4X)洗涤醚层，用MgSO4干燥并真空 除去醚得到3-溴-5-氟苯甲醛(8，16g)，为琥珀色液体。

MS和NMR与所要求的产物一致。 步骤B

按照实施例175的方法制备标题化合物，以等当量的3-溴-5- 氟苯甲醛(上述步骤A)代替实施例174步骤A的3，4-二氯苯甲醛。

MS和NMR与所要求的结构一致。

                 实施例210

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)-氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-3，5-二溴苯丙酸的三氟乙酸盐的制备 步骤A

向3，5-二溴苄基溴(Lancaster)(20g，0.061mol)的水(27ml) 和水醋酸(27ml)溶液中加入六亚甲基四胺(Aldrich)。反应混合物 在回流下加热2小时。然后加入浓HCl(22ml)并继续回流30分钟。 冷却至室温后，将反应混合物倾倒入H2O(230ml)中，搅拌10分钟 过滤得到的沉淀物，用H2O洗涤，干燥得到3，5-二溴苯甲醛(11.45g) 为白色固体。

MS和NMR与所要求的产物一致。 步骤B

按照实施例175的方法制备标题化合物，以等当量的3，5-二溴苯 甲醛(上述步骤A)代替实施例174步骤A的3，4-二溴苯甲醛。

MS和NMR与所要求的结构一致。

                  实施例211

(±)3，5-二溴-β-[[2-[[[3-[(1，4，5，6-四氢嘧啶-2 -基)氨基]苯基]-羰基]氨基]乙酰基]氨基]苯丙酸的三氟乙酸盐的制备 步骤A

按照实施例1，步骤A-D的方法制备β-〔(2-氨基乙酰基) 氨基〕(3，5-二溴苯基)-3-丙酸乙酯的盐酸盐，以等当量的3，5 -二溴苯甲醛(实施例210，步骤A)代替实施例1步骤A中的3-吡 啶甲醛。

MS和NMR与所要求的结构一致。 步骤B

按照实施例200的方法制备标题化合物，以等当量的实施例211步 骤A(上述)的产物代替实施例199步骤B中所用实施例197步骤A的产物。

MS和NMR与所要求的结构一致。

                 实施例217

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-3-溴-5-甲基苯丙酸的三氟乙酸盐的制备 步骤A

向5-溴-间-二甲苯(24.03g，0.13mol)的苯(125ml)溶液中 加入过氧化苯甲酰(3.04g，0.013mol)。在回流下加热在250ml圆底烧 瓶中的反应混合物。在15分钟过程中加入N-溴丁二酰亚胺(18.15g， 0.10mol)。2小时后，中止加热并将反应混合物冷却至室温。过滤除去 沉淀物并浓缩滤液。将残余物溶于己烷并过滤除去另外的固体。将滤液 通过小的硅胶板并浓缩滤液。在冰上用甲醇研制所得黄色油状体得到3 -溴-5-甲基苄基溴(7.34g)，为白色固体。

MS和NMR与所要求的结构一致。 步骤B

向3-溴-5-甲基苄基溴(上述步骤A)(5.49g，20mmol)的冰 醋酸(9.0ml)和H2O(9ml)溶液中加入六亚甲基四胺(4.50g， 32mmol)，在回流下搅拌反应2小时。加入浓HCl(7.0ml)并在回流 下再搅拌混合物15分钟。冷却至室温后，用H2O(75ml)稀释反应混 合物并用乙醚(150ml)萃取。用H2O(3×25ml)，10％NaHCO3(2×50ml)洗涤乙醚层，然后用MgSO4干燥。真空下除去乙醚，然 后将残余物用己烷和10％Et2O/己烷从硅胶色谱柱上洗脱下来，得到3 -溴-5-甲基苯甲醛(2.80g)，为浅黄色油状物，一旦放置会固化。

MS和NMR与所要求的结构一致。 步骤C

按照实施例175的方法制备上述化合物，以等当量的3-溴-5- 甲基苯甲醛(上述步骤B)代替实施例174步骤A的3，4-二氯苯甲醛。

MS和NMR与所要求的结构一致。

                 实施例213

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]-5-(三氟甲 基)苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]-3，5-二溴苯丙酸的三氟乙酸盐的制 备

按照实施例39的方法制备上述化合物，但是，以等当量的3，5-二 溴苯甲醛(实施例210步骤A)代替实施例38的3，5-二-三氟甲基苯 甲醛。

MS和NMR与所要求的结构一致。

                 实施例214

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-3-溴-5-氯苯丙酸的三氟乙酸盐的制备 步骤A

在-78℃下，向N2气氛下的火焰干燥的烧瓶中的1-氯-3，5- 二溴苯(Esprit)(20g，0.074mol)的无水乙醚(150ml)溶液中滴加 入1.6m丁基锂的己烷溶液，保持温度低于-78℃，然后温热至-30℃。 在保持温度低于-20℃的情况下，滴加入无水DMF(6.8g，0.092mol)。 滴加完成后，将反应缓慢温热至0℃，然后在室温下搅拌过夜。将反应 混合物缓慢倾倒入冷的10％的HCl水溶液(160ml)中。搅拌15分钟 后，分离乙醚层，用水(4X)洗涤，用MgSO4干燥并真空下除去溶剂， 得到3-溴-5-氯苯甲醛(13g)，为白色固体。

MS和NMR与所要求的结构一致。 步骤B

按照实施例175的方法制备标题化合物，但是，以等当量的3-溴 -5-氯苯甲醛(上述步骤A)代替实施例174步骤A的3，4-二氯苯 甲醛。

MS和NMR与所要求的结构一致。

                实施例215

(±)3-溴-5-氯-β-[[2-[[[3-[(1，4，5，6-四氢嘧啶 -2-基)氨基]苯基]-羰基]氨基]乙酰基]氨基]苯丙酸的三氟乙酸盐的制 备 步骤A

按照实施例1，步骤A-D的方法制备β-〔(2-氨基乙酰基) 氨基〕(3-溴-5-氯苯基)-3-丙酸乙酯的盐酸盐，但是，以等 当量的3-溴-5-氯苯甲醛(实施例214，步骤A)代替实施例1步 骤A中的3-吡啶甲醛。

MS和NMR与所要求的结构一致。 步骤B

按照实施例200的方法制备标题化合物，但是，以等当量的上述步 骤A的产物代替实施例199步骤B中的实施例197步骤A的产物，

MS和NMR与所要求的结构一致。

                 实施例216

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]-5-(三氟甲 基)苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]-3-溴-5-氯苯丙酸的三氟乙酸盐 的制备

按照实施例39的方法制备上述化合物，但是，以等当量的3-溴- 5-氯苯甲醛(实施例214，步骤A)代替实施例38中的3，5-二-三 氟甲基苯甲醛。

MS和NMR与所要求的结构一致。

              实施例217

(±)2-[2-[2-(2-羟基乙氧基)乙氧基]乙氧基]乙基的3，5 -二氯-β-[[2-[[[3-[(1，4，5，6-四氢嘧啶-2-基)氨基]苯基] 羰基]氨基]乙酰基]氨基]苯丙酸酯的三氟乙酸盐的制备

向实施例200的产物(200mg，0.00033mol)的DMA(1.5ml)溶 液中加入羰基二咪唑(carbonyldiimidazole)(67mg，0.00041mol)。 在室温下搅拌反应1小时。加入四甘醇(214mg，0.0011mol)并在60℃ 搅拌反应混合物过夜。将反应物冷却至室温并通过RPHPLC分离产物， 得到标题化合物(冷东干燥后120mg)，为吸湿性白色固体。

MS和NMR与所要求的结构一致。

              实施例218

(±)2-[2-[2-(2-羟基乙氧基)乙氧基]乙氧基]乙基的β- [[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基] -3，5-二氯苯丙酸酯的三氟乙酸盐的制备

按照实施例217的方法制备上述化合物，但是，以等当量的实施例 27的产物代替实施例200的产物。

MS和NMR与所要求的结构一致。

                 实施例219

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-3-溴-5-碘苯丙酸的三氟乙酸盐的制备 步骤A

先向一个250ml圆底烧瓶中加入甲醇(40ml)，然后加入无水盐酸 饱和溶液60ml。然后加入3-溴-5-碘苯甲酸(Aldrich)(5.02g 0.015mol)并在室温下搅拌反应混合物6小时。反应混合物被倾倒入冷 的饱和的NaHCO3溶液(700ml)中。用二氯甲烷(100ml)萃取混合 物3次。合并有机层，用MgSO4干燥并真空下浓缩，得到5-溴-3- 碘苯甲酸甲酯(5.08g)，为粉红色固体。MP＝55-57℃。

MS和NMR与要求的结构一致。 步骤B

在-78℃，两分钟内，向5-溴-3-碘苯甲酸甲酯(上述步骤A) (5.01g，0.015mol)的无水二氯甲烷(100ml)溶液中滴加入二异丁基 氢化铝(5.50ml，0.03mol)。搅拌混合物1小时然后温热至0℃。将反 应液倾倒入600ml冷的3N HCl中，并用二氯甲烷(150ml)萃取3次。 合并有机层，用MgSO4干燥并真空下浓缩，得到5-溴-3-碘苯甲醇 (4.54g)，为白色固体。MP＝110-112℃。

MS和NMR与要求的结构一致。 步骤C

磁力搅拌在50ml圆底烧瓶中的5-溴-3-碘苯甲醛(3.01g， 9.6mmol)并用15ml无水二氯甲烷稀释，得到一混浊溶液。然后将反应 烧瓶塞紧，并用金属丝扣紧瓶塞。

向另一个装有冷凝管的100ml圆底烧瓶中加入无水二氯甲烷 (15ml)。在-20℃，加二氧化氮(1.72g，18.7mmol)于二氯甲烷溶 液中。

将苯甲醇溶液急冷至0℃，并在稳定态氮气氛下，将二氧化氮/二氯 甲烷溶液通过套管转移至反应烧瓶。在二氧化氮溶液转移完成后，在0 ℃磁力搅拌反应溶液15分钟。再在室温下搅拌反应溶液18小时。

将反应烧瓶置通风柜中排气，多余的二氧化氮随氮蒸汽排出。然后 通过旋转蒸发浓缩反应溶液，并将其再悬浮于30ml乙醚中。在500ml 的分液漏斗中，用200ml 10％的碳酸氢钠洗涤乙醚溶液。用150ml乙 醚萃取得到的水溶液3次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤并真空下 浓缩，得到2.89g黄色固体。

产物用闪蒸色谱分离，得到5-溴-3-碘苯甲醛，为白色固体。

MS和NMR与所要求的结构一致。 步骤D

按照实施例175的方法制备标题化合物，但是，以等当量的5-溴 -3-碘苯甲醛(上述步骤C)代替实施例174步骤A的3，4-二氯苯 甲醛。

MS和NMR与所要求的结构一致。

                 实施例220

(±)2-[[2-(2-羟基乙氧基)乙氧基]乙氧基]乙基的3，5-二 氯-β-[[2-[[[3-[(1，4，5，6-四氢嘧啶-2-基)氨基]苯基]羰 基]氨基]乙酰基]氨基]苯丙酸酯的三氟乙酸盐的制备

按照实施例217的方法制备上述化合物，但是，以等当量的三甘醇 代替四甘醇。

MS和NMR与所要求的结构一致。

                 实施例222

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-2-羟基-4-甲氧基苯丙酸的制备

按照J Rico，Tett.Let，1994，35，6599-6602的方法，由7-甲 氧基香豆素(Aldrich)制备的(RS)-4-氨基-7-甲氧基氢化香 豆素盐酸盐，基本上用实施例86步骤D的方法和比例，使其与GIHA (1.50g，5.5mmol)偶合。通过制备性RPHPLC(纯化得到所需产物， 为氢化香豆素(Lactone)和苯氧基一酸的三氟乙酸盐的混合物，冷冻干 燥后为浅黄色粉末(1.25g)。将提纯后的混合物溶于水中，用稀的NaOH水溶液调节至pH7-8，经HPLC分析至反应完成，得到所要的苯酚一 酸，经冷冻干燥(0.5g)。MS和NMR与所要求的苯酚一羧酸的结构 一致。

                 实施例223

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-5-羟基-4-甲氧基苯并呋喃-6-丙酸的三氟乙酸盐 的制备

按照J Rico，Tett.Let.，1994，35，6599-6602的方法，由8-甲 氧基补骨脂灵(8-methoxypsoralen)制备的(RS)-4-氨基-8 -甲氧基-氢化补骨脂灵盐酸盐(2.2g，8.1mmol)，基本上用实施例86 步骤D的方法和比例使其与GIHA(2.0g，7.3mmol)偶合。通过制备性 RPHPLC分离产物，得到所需的苯酚一酸，NMR和MS与所要求的结构 一致。

                 实施例224

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-9H-芴-2-丙酸的三氟乙酸盐的制备 步骤A (±)β-氨基-9H-芴-2-丙酸

2 -芴-甲醛(5.0g，26mmol，Aldrich)与丙二酸(3.25g， 31mmol)、乙酸铵(2.4g，31mmol)和异丙醇(70ml)合并，并在回 流下过夜。冷却后，过滤收集沉淀物并干燥。NMR和MS与所预期结构 一致。 步骤B (±)β-氨基-9H-芴-2-丙酸乙酯

将步骤A产物溶于无水乙醇中，通干燥的氯化氢气体使之饱和，并 将混合物回流过夜。除去挥发物并将所得半固体在乙酸乙酯和水中分 配。加入2.5N  NaOH碱化水层并用EtOAc(2×200ml)萃取。用无 水NaSO4干燥有机层并通干燥氯化氢气体直到沉淀作用停止。除去挥发 物，直至留下半固体残余物。在乙醚中研磨并过滤收集固体。NMR和 MS与所预期结构一致。 步骤C

标题化合物以下面方法制备。基本上使用实施例86步骤D的方法， 使GIHA(0.41g，1.5mmol)与步骤B的产物(0.42g，1.5mmol)偶合。 用制备性的RPHPLC分离标题化合物的乙酯。产物(280mg)用二噁烷 水溶液(1∶1)与过量的LiOH水解成酸，用TFA酸化并通过RPHPLC 纯化。冷冻干燥后得到白色非晶型固体(250mg)。NMR和MS与预 期结构一致。

                 实施例225

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-3，5-二氯-2-羟基苯丙酸的三氟乙酸盐一水合物的制 备 步骤A

上述化合物基本上使用实施例224步骤A的同样方法和比例，通过 3，5-二氯水杨醛(10.0g，52.4mmol，Aldrich)，丙二酸和乙酸铵在异丙 醇中反应制得。NMR和MS与所要求中间体一致。 步骤B

基本上使用实施例86步骤D相同的方法和比例，使GHIA(1.0g 3.7mmol)与步骤A产物(1.1g，4.4mmol)偶合。通过C-18RPHPLC 分离所需产物，合并合适的流份并冷冻干燥，得到标题化合物(0.42g)。 NMR和MS与预期结构一致。

                 实施例226

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-2-羟基-5-硝基苯丙酸的三氟乙酸盐的制备

基本上使用实施例86步骤D的方法和比例，将按照J.Rico，Tett Let.， 1994，35，6599-6602的方法，由6-硝基香豆素(Aldrich)制备 的(RS)-4-氨基-6-硝基-氢化香豆素盐酸盐(1.1g，4.4mmol  与GIHA(1.0g，3.7mmol)偶合。通过制备性的RPHPLC纯化，得到所 需产物，为氢化香豆素(Lactone)和苯氧基一酸的三氟乙酸的混合物， 冷冻干燥后为粉末。将纯化后的混合物溶于水中，用稀的NaOH水溶液 调至pH 7-8，直到通过HPLC监测反应完成，冷冻干燥，基本上完全 转变成所要的苯酚一酸。MS和NMR与所要的苯酚一羧酸一致。

                 实施例227

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-3，5-二溴-2-羟基苯丙酸的三氟乙酸盐的一水合物的 制备 步骤A

基本上按照实施例1步骤A和B的方法，制备上述β-氨基酸酯的 盐酸盐，但是，以3，5-二溴水杨醛(20.0g，0.0715mol，Aldrich)代替 步骤A的3-吡啶甲醛，并保持比例不变。NMR和MS与预期结构一 致。 步骤B

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-3，5-二溴-2-羟基苯丙酸乙酯的三氟乙酸盐的一水合 物

基本上使用实施例86步骤D相同的方法和比例。将GHIA(1.0g， 3.7mmol)和步骤A的产物(1.78g，4.4mmol)偶合。通过C-18RPHPLC 分离所要产物并合并合适的流份并冷冻干燥，得到步骤B的标题化合物 (0.52g)。NMR和MS与预期结构一致。 步骤C

基本上使用实施例6的方法和条件，将步骤B所得产物转化为酸， 但是，水解溶剂为二噁烷水。通过制备性C-18RPHPLC纯化，得到TFA 盐(300mg)。NMR和MS与预期结构一致。

                 实施例228

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-5-溴-2-羟基苯丙酸的三氟乙酸盐的一水合物的制备

基本上使用实施例224的方法和比例来制备标题化合物，但是，用5 -溴水杨酸醛代替3，5-二氯水杨醛，得到标题化合物的乙酯。酯水解 后得到酸-苯酚(冷却干燥后0.3g)。NMR和MS与预期结构一致。

                 实施例229

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]环己烷丙酸的三氟乙酸盐的一水合物的制备 步骤A

向(R，S)-3-氨基-3-苯丙酸乙酯盐酸盐的无水乙醇 (70ml)溶液中加入5％钯/碳，并将混合物转移至一加压瓶。清洗后， 用氢气(54psig)加压反应容器，并使反应进行完全。除去挥发物并且 无需进一步纯化产物。NMR和MS与预期结构一致。 步骤B

基本上使用实施例86步骤D的方法和比例，将(R，S)3-氨基 -3-环己烷丙酸乙酯与GIHA偶合。用C-18RPHPLC分离并冷冻干 燥得到(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨 基]乙酰基]氨基]环己烷丙酸乙酯的三氟乙酸盐的一水合物，为白色非晶 型粉末。再用实施例224步骤C的方法将其水解得到标题化合物 (0.5g)。NMR和MS与预期结构一致。

                 实施例230

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氧基] 乙酰基]氨基]-3，5-二氯-2-羟基苯丙酸乙酯的三氟乙酸盐一水合物 的制备 步骤A

按照实施例233步骤A和B的方法，制备(RS)-4-氨基-6，8 -二氯氢化香豆素的盐酸盐，但是，以3，5-二氯水杨醛代替实施例233 步骤A中的3-溴-5-氯水杨醛。

向(RS)-4-氨基-6，8-二氯氢化香豆素的盐酸盐(8.0g， 0.0207mol)的无水EtOH(30ml)溶液中加入4N HCl的二噁烷 (10ml)溶液，并在室温下搅拌反应混合物2.5小时。旋转蒸发(冷) 除去过量HCl并浓缩反应混合物得到一固体(50℃)。用EtOAc (25ml)和Et2O(10ml)处理该固体并搅拌，过滤分离，得到白色固 体(5.84g)。MS和NMR与所要的β-氨基酸乙酯的盐酸盐一致。 步骤B

向GIHA HCl(3.4g，0.0124mol)的二甲基乙酰胺(40ml)溶液 中加入N-甲基吗啉NMM(1.36ml，0.0124mol)，并于轻微搅拌下冷 却至0-5℃。加入氯甲酸异丁酯(1.61ml，0.0124mol)并反应约10分 钟，于此时，将步骤A的产物(3.90g，0.0124mol)和NMM(1.36ml) 的DMA(20ml)溶液加入反应混合物中，并偶合反应过夜。除去挥发 物并将反应混合物再溶于乙腈冰中并加入TFA调至pH约为2。通过制 备性C-18RPHPLC分离产物并冷冻干燥，得到TFA盐(2.61g)。 NMR和MS与标题化合物结构一致。

                 实施例231

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-5-氯-2-羟基苯丙酸的三氟乙酸盐的一水合物的制备

基本上使用实施例224的方法和比例，制备上述化合物，但是，用5 -氯水杨醛代替3，5-二氯水杨醛。在最后的酯水解后，得到酸-苯酚 (冷冻干燥后为0.3g)。NMR和MS与预期结构一致。

                  实施例232

(±)3，5-二氯-2-羟基-β-[[2-[[[3-[(3，4，5，6-四 氢-2H-氮杂_-7-基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]苯丙酸的 三氟乙酸盐的一水合物的制备 步骤A

向m-氨基马尿酸(2.0g，8.7mmol)的乙腈(50ml)溶液中加入 1-氮杂-2-甲氧基-1-环庚烷(1.2g，9.5mmol)(Aldrich)。在 室温下让反应过周末。除去溶剂并将残余物与乙醚一起研磨得到一固体 (1.6g)，通过分析性的RPHPLC纯化为3-(1-氮杂-2-氨基- 1-环庚烷)马尿酸，MS和NMR与预期结构一致。 步骤B

将步骤A所得产物3-(1-氮杂-2-氨基-1-环庚烷)马尿 酸(1.0g，3.2mmol)与实施例230步骤A制得的化合物(1.0g， 3.2mmol)偶合，基本上使用实施例230步骤B的方法和条件进行，只 是用3-(1-氮杂-2-氨基-1-环庚烷)马尿酸代替GIHA。通 过C-18RPHPLC纯化，得到标题化合物的乙酯(0.5g)。NMR和 MS结构一致。 步骤C

将步骤B的产物(0.35g)溶于二噁烷-水(1∶1，30ml)中，并加 LiOH(NaOH可任意取代LiOH)调节至pH约为11。一经完全水解成 酸(由分析性RPHPLC测定)，就加入TFA将反应混合物酸化至pH约 为2-3，并经制备性的C-18RPHPLC分离所要化合物。NMR和 MS与标题化合物结构一致。

                 实施例233

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-3-溴-5-氯-2-羟基苯丙酸的三氟乙酸盐的一水合 物的制备 步骤A

将3-溴-5-氯水杨醛(11.0g，0.047mol)和三乙胺(5.6ml) 的乙酐(14.0ml)溶液在回流下加热4小时。将反应冷却至室温并在真 空下除去挥发物。将所得固体在EtOAc和碳酸氢钠水溶液间分配，并分 离两层溶液。用EtOAc再萃取水层并合并有机层，干燥(Na2SO4)并真 空下除去挥发物，得到一固体(13.5g，)。NMR和MS与预期结构一致。 步骤B

按照J.Rico，Tett.Let.，1994，35，6599-6602的方法将步骤A所 得产物(10.0g，0.039mol)转变成(RS)-4-氨基-6-氯-8-溴 -氢化香豆素的盐酸盐(5.1g，18.5mmol)，方法做以下改进：通过加 双-三甲硅烷基氨化锂到步骤A的香豆素中所得的产物，在后处理前于 0℃加入一当量HOAc，使其骤冷。 步骤C

基本上使用实施例230的方法，将步骤B产物(4.0g，0.013mol)与 GHIA HCl(3.3g，0.012mol)偶合，但是，以步骤B所得化合物代替 实施例30步骤A化合物，在经C-18RPHPLC纯化并按照实施例232 步骤C方法水解合适的流份后，得所要化合物(TFA盐)，冷冻干燥后 为松软的白色粉末(4.8g)。NMR和MS与预期结构一致。

                 实施例234

(±)5-氨基-β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基] 羰基]氨基]乙酰基]氨基]-2-羟基苯丙酸的双(三氟乙酸)盐的一水合 物的制备

将实施例226的产物(0.5g)溶于AcOH∶H2O(2∶1，60ml)中， 并加入3％的钯/碳(0.5g，Aldrich)。用氢气(20psig)给反应混合物 加压，并在剧烈搅拌下反应2小时。过滤除去催化剂并浓缩混合物得到 一粘稠的油状物。将油状物溶于水中，并通过C-18RPHPLC分离所要 化合物。NMR和MS与预期结构一致。

                 实施例235

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-5-溴吡啶-3-丙酸的双(三氟乙酸)盐的一水合物的 制备 步骤A

向5-溴烟酸(20.0g，0.10mol)，O，N-二甲基羟基胺(9.8g， 0.1mol)和1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亚胺的盐酸 盐的DMF(200ml)溶液中加入1-羟基三唑(200ml，0.5M的DMF 溶液，0.10mol)和三乙胺(19.7ml，0.14mol)，并将反应混合物剧烈 搅拌18小时。在60℃下真空除去挥发物，直到所剩为糊状物。将反应 混合物分配到乙酸乙酯(300ml)和饱和的碳酸氢钠水溶液中，分离两 层溶液并用EtOAc再萃取水层。合并有机层，干燥(Na2SO4)并浓缩得 到一暗黄色油状物(21.4g)。NMR和MS与预期结构一致。 步骤B

将在THF(300ml)中的步骤A产物(12.9g，0.053mol)溶液冷却 至0℃，并通过注射器加入在THF(53ml的1.0M标准液，Aldrich) 的LAH。0.5小时后，加入KHSO4(19.6g，0.13mol，在100ml水中)。 几分钟后，加入稀的HCl水溶液(50ml)并分离有机层，干燥(Na2SO4) 并除去挥发物，得到一黄色油状物，放置后固化。通过升华纯化固体， 得到标题化合物，为白色固体(7.8g)。NMR和MS与预期结构一致， 步骤C

基本上按照实施例1步骤A和B的方法来制备上面β-氨基酸酯的 盐酸盐，但是，以步骤B的化合物(6.24g，0.034mol)代替步骤A中的 3-吡啶甲醛，并保持比例不变。通过C-18RPHPLC分离产物，得到 di-TFA盐。NMR和MS与预期结构一致。 步骤D

基本上使用实施例230步骤B的方法，将步骤C产物与GIHA HCl(0.5g，1.8mmol)偶合，但是，以上面步骤C的产物(和相应地两当量 的NMM)代替实施例230步骤A的产物。通过C-18RPHPLC将产物 的乙酯作为其di-TFA盐分离。NMR和MS与预期结构一致。 步骤E

基本上使用实施例232步骤C的方法，将步骤D的产物(200mg) 水解为相应的酸。通过C-18RPHPLC分离产物得到其di-TFA盐， 冷冻干燥得到标题化合物，为白色固体(150mg)。NMR和MS与预 期结构一致。

               实施例236

(±)3-溴-5-氯-2-羟基-β-[[2-[[[3-[(1，4，5，6 -四氢嘧啶-2-基)氨基]苯基]-羰基]氨基]乙酰基]氨基]苯丙酸的三氟 乙酸盐的一水合物的制备 步骤A

向在乙醇(无水，140ml)中的1-(3-羧基苯基)-2-硫脲 (14.0g，71.3mmol)溶液中加入碘甲烷(10.2g)，并将溶液回流2.5 小时。在60℃下，真空除去挥发物，得到一黄色油状物。用叔丁基甲基 醚处理并除去挥发物，得到一黄色泡沫状物，冷却后变硬。NMR和MS 与预期结构一致。 步骤B

向溶解在DMA(50ml)中的步骤A的产物(5.0g，0.015mol)中 加入催化量的DMAP和1，3-丙二胺(1.2g，0.016mol)，在100℃下 加热溶液48小时。除去挥发物直到剩下浓稠的油状物。用EtOAc、Et2O和MeOH(50ml)顺序处理，通过过滤分离得到一固体。将产物悬浮 于在二噁烷中的4N HCl中，并搅拌几小时。过滤所得固体，用Et2O洗涤并干燥，得到固体(800mg)。NMR和MS与所预期的HCl盐酸 结构一致。 步骤C

向溶在THF(50ml)中的实施例233步骤B制得的(RS)-4 -氨基-6-氯-8-溴-氢化香豆素的盐酸盐(2.6g)的溶液中加入 三乙胺(1.0ml)和N-t-Boc-甘氨酸-N-羟基琥珀酰亚胺酯 (2.0g，Sigma)，并让反应进行完全。除去挥发物并将残余物分配在 EtOAc和水中。分离有机层，用稀释的HCl水溶液和饱和碳酸氢钠溶液 洗涤并干燥(Na2SO4)和浓缩得到一暗色泡沫体(3.2g)。此产物可直 接用于下一步而不需进一步纯化。 步骤D

向充分搅拌的HCl溶液(4N二噁烷溶液)(Aldrich)中加入溶于 二噁烷(20ml)中的步骤C所得混合物，使BOC保护基被去掉。放气 中止反应(大约0.5小时)，除去挥发物，得到一深色残余物，以乙醚一 起研磨，过滤，得到一黄色固体(2.46g)。NMR和MS与所预期结构 一致，为盐酸盐。 步骤E

基本上使用实施例230步骤B的方法，使步骤D的产物(1.4g)和 步骤B的产物(1.0g)偶合。当偶合反应完成时，从粗反应混合物中除 去挥发物。反应混合物再依次溶于二噁烷∶水中并通过加NaOH水溶液调 至pH约为11。保持pH在10以上直到通过分析性RPHPLC监测确认， 水解完成。这时加入TFA调节pH至2-3，通过制备性C-13RPHPLC 分离得到所要产物(冷冻干燥后为0.35g)。NMR和MS与预期结构一 致，为TFA盐。

                  实施例237

(±)3，5-二氯-2-羟基-β-[[2-[[[3-[(1，4，5，6-四 氢嘧啶-2-基)氨基]苯基]-羰基]氨基]乙酰基]氨基]苯丙酸的三氟乙酸 盐的一水合物的制备

基本上使用实施例236方法和条件来制备上述化合物(350mg)， 但是，按照实施例233步骤A和B的方法，用由相应水杨醛配制的(RS) -4-氨基-6，8-二氯-氢化香豆素的盐酸盐代替步骤E中的(RS) -4-氨基-6-溴-8-氯氢化香豆素的盐酸盐。NMR和MS与预期 结构一致，为TFA盐。

                    实施例238

(±)3，5-二氯-β-[[2-[[[3-[(4，5-二氢-1H-吡咯烷 -2-基)氨基]苯基]-羰基]氨基]乙酰基]氨基]-2-羟基苯丙酸的三氟 乙酸盐的一水合物的制备 步骤A

按照实施例236步骤A和B的方法制备上面化合物，但是，以1，2 -乙二胺(1，2-diaminoethane)代替步骤B的1，3-丙二胺。 步骤B

按照实施例237的偶合方法，将步骤A的产物与上述化合物的盐酸 盐(实施例237制备的)偶合，制得所要的最终产物(300mg)。NMR 和MS与预期结构一致，为TFA盐。

                    实施例239

(±)3-溴-5-氯-β-[[2-[[[3-[(4，5-二氢-1H-吡 咯烷-2-基)氨基]苯基]-羰基]氨基]乙酰基]氨基]-2-羟基苯丙酸的 三氟乙酸盐的一水合物的制备

按照实施例238的方法制备上面化合物，但是，以实施例238步骤 A的产物代替实施例237步骤B的产物。NMR和MS与预期结构一致 为TFA盐。

                   实施例240

3，5-二氯-β-[[2-[[[3-[[[(乙酯基)氨基]硫代甲基]氨基] 苯基]-羰基]氨基]乙酰基]氨基]苯丙酸的制备 步骤A 3-氨基-3-(3，5-二氯苯基)丙酸叔丁酯

在N2气氛下，在一钢瓶中制备13.5g的1-溴-3，5-二氯苯 (Aldrich，13.5g)、丙烯酸叔丁酯(Aldrich，11.1ml)、三乙胺(8.4ml)、 Pd(OAc)2(0.12g)、三-p-甲苯膦(0.9g)和乙腈(20ml)的混合 物。将容器密封并在120℃下加热16小时。加入氯仿(40ml)到冷的 反应混合物中，并用乙醚和水萃取混合物。用水洗涤有机相，用MgSO4干燥并在真空下浓缩。将残余物快速通过硅胶过滤，用在己烷中的8％ 的乙酸乙酯洗脱，得到13g稠的液体。在钢瓶中，将此产物(12.6g)， 叔丁醇(35ml)和氨(40ml)的混合物，在80℃加热25小时(压 力，温室是130psi；在80℃，500psi)。冷却和排气后，真空下浓缩 内容物。用乙酸乙酯(100ml)萃取残余物并冷却，加入稀盐酸(1N， 100ml)。用固体K2CO3碱化水相，并用乙醚和二氯甲烷萃取。用K2CO3干燥有机相并真空浓缩，得到上述化合物(11g)，为浓稠的红棕色液 体。 步骤B

在-78℃下，向在CH2Cl2中的搅拌着的3-硝基苯甲酰氯(7g， Aldrich)中，加入甘氨酸甲酯的盐酸盐(5g，Aldrich)，再加入三乙胺 (20ml)。在16小时中，将混合物温热至室温。除去挥发物并用乙酸 乙酯和水萃取残余物。用水洗涤有机相，用MgSO4干燥并真空浓缩。在 四氢呋喃(50ml)的氢氧化锂水溶液(50ml，1M)中搅拌残余物15分 钟。除去挥发物并用盐酸(50ml，3M)处理残余物，用乙酸乙酯和水萃 取。用水洗涤有机相，用MgSO4干燥并真空浓缩。在-78℃下，向在 四氢呋喃(15ml)中的搅拌着的残余物(2.24g)溶液中依从加入4- 甲基吗啉(1.1ml，Aldrich)和氯甲酸异丁酯(1.3ml，Aldrich)。30分 钟后，加入3-氨基-3-(3，5-二氯苯基)丙酸叔丁酯(2.91g，步 骤A制备)。在2小时内，将混合物温热至室温。除去挥发物并用乙酸 乙酯和水萃取残余物。用水洗涤有机相，用MgSO4干燥并真空下浓缩。 将在四氢呋喃和乙醚(1∶1，30ml)中的残余物溶液和3％Pd/C(0.5g) 在5psi氢气压的帕尔氢化器中振摇5小时。过滤混合物并浓缩滤液，得 到上述化合物，为浓稠的胶状物。该样品可直接使用，不需进一步纯化。 步骤C

将在甲苯(5ml)中的步骤B化合物(1.2g)和乙酯基异硫氰酸酯 (Aldrich，0.3μl)的混合物在回流下加热30分钟。浓缩混合物并用硅 胶层析处理残余物，得到标题化合物的叔丁基酯(0.78g)，为白色固体。 在23℃下，将该叔丁基酯(0.3g)的三氟乙酸(4ml)溶液放置16小 时。除去挥发物并通过HPLC纯化残余物，得到标题化合物，为白色固 体。 C22H22N4O6S·0.5H2O

计算值：C，48.01；H，4.21；N，10.18；S，5.83

实测值：C，47.61；H，4.11；N，9.94； S，5.83。

                  实施例241

3，5-二氯-β-[[2-[[[3-[[[(乙酯基)氨基]亚氨基甲基]氨 基]苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]苯丙酸的三氟乙酸盐的一水合物的制备 步骤A

将在甲苯(15ml)中的氨基甲酸叔丁酯(Lancaster，5g)和乙酯基 异硫氰酸酯(Aldrich，5ml)的混合物在回流下加热2小时。在16小时 内，将溶液冷却至室温。将沉淀物过滤并用己烷洗涤，得到上述化合物 (5.5g)，为白色固体。 步骤B

向搅拌着的实施例240步骤B制得的化合物(1.3g)和步骤A产物 (0.7g)的DMF(7ml)溶液中，依次加入氯化汞(0.77g)和三乙胺 (0.8ml)。将混合物在1小时中温热至室温并继续搅拌1小时以上。 用乙酸乙酯稀释混合物并通过硅藻土过滤。用水洗涤滤液，MgSO4干燥 并真空浓缩。通过色谱法纯化残余物，得到上述化合物，为白色固体。 步骤C

在三氟乙酸(10ml)中的步骤B产物(0.5g)的溶液，在23℃下 放置2小时。除去挥发物并通过HPLC纯化残余物，得到标题化合物。为 白色固体。 C22H23N5O6Cl2·1.25CF3COOH·0.5H2O

计算值：C，42.96；H，3.86；N，10.23；Cl，10.35

实测值：C，43.21；H，3.49；N，10.20；Cl，10.52。

                  实施例242

β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基] 氨基][1，1′-联苯基]-3-丙酸的制备 步骤A

将在15ml二甲基甲酰胺中的9.64g(41.4mmol)3-溴联苯， 5.8ml(4.2g，41mmol)的三乙胺、6.73g(52.6mmol)的丙烯酸叔丁 酯、624mg(2.05mmol)的三-p-甲苯膦和83mg的乙酸钯的混合物 在油浴中于110℃下搅拌过夜。冷却后，将混合物分配在乙酸乙酯和水 中并用乙酸乙酯进一步萃取水层。用盐水洗涤合并的有机萃取物，用硫 酸干燥，过滤并浓缩。硅胶色谱分离残余物，用二氯甲烷和己烷作洗 脱剂，得到上述化合物(10.5g)，为淡黄色油状物。 1H NMR(CDCl3)7.77-7.36(m，9H)，7.69(d，J＝15Hz，1H)， 6.47(d，J＝15Hz，1H)，1.58(s，9H). 步骤B

将10.5g(37.5mmol)步骤A产物、50ml液氨、52.g乙酸和80ml 叔丁醇的混合物在100℃下加热18小时。冷却后，浓缩混合物并将其分 配到乙酸乙酯和碳酸氢钠水溶液中。用乙酸乙酯进一步萃取水层，用盐 水洗涤合并的有机萃取物，用硫酸钠干燥，过滤并蒸发。用硅胶色谱分 离残余物，先用乙酸乙酯，然后用10％甲醇-1％氢氧化铵-89％乙 酸乙酯作为洗脱剂洗脱，得到上述化合物(4.75g)，为无色油状物。 分析计算C19H23NO2 1/8 H2O(MW 299.65)：

计算值：C，76.16；H，7.74；N，4 67

实测值：C，76.29；H，7.57；N，4.66。 步骤C

β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]碳基]氨基]乙酰基] 氨基][1，1′-联苯基]-3-丙酸1，1-二甲基乙基酯

向搅拌着的20ml无水二甲基甲酰胺中的实施例M的化合物(1.00g. 3.66mmol)溶液中，在氩气和冰浴条件下，加入476μl(3.84mmol) 的N-甲基哌啶，产生白色固体。搅拌15分钟后，滴加500μl的氯甲酸 异丁酯(3.84mmol)，并继续搅拌约20分钟，得到均匀的溶液，加入 5ml二甲基甲酰胺中的步骤B产物(1.09g，3.66mmol)溶液，并在室温 下搅拌混合物过夜。浓缩混合物得到2.88g橙色油状物。用反相制备性 HPLC处理1.50g粗混合物，用90％到50％的三氟乙酸水溶液-乙腈梯 度洗脱，然后蒸干适合的流份，得到上述化合物(800mg)，为白色固体。 1H NMR(CDCl3-DMSO)8.93(br s，1H)，8.56(t，1H)，8.22 (d，1H)，7.81-7.12(m，13H，5.46(dd，1H)，4.12(t，2H)， 2.88(dd，1H)，2.77(dd，1H)，1.31(s，9H). 步骤D

将在10ml二氯甲烷中的800mg步骤C产物的溶液加到10ml三氟乙 酸中，并在室温下搅拌混合物过夜。浓缩后，用反相制备性HPLC纯化， 以三氟乙酸水溶液-乙腈的混合物洗脱，蒸发适合的流份后，得到上述 化合物(250mg)，为纯白固体。 分析C25H26N5O4CFCOOH 1/2H2O(MW 581.53)：

计算值：C，55.77；H，4.33；N，12.04。

实测值：C，55.81；H，4.57；N，11.68。

                  实施例243

β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基] 氨基][嘧啶-5-丙酸的三氟乙酸盐的制备 步骤A

在11ml乙腈中的5.00g(31.1mmol)5-溴嘧啶、3.14g (31.1mmol)的三乙胺、5.06g(39.5mmol)的丙烯酸叔丁酯、475mg 的三-o-甲苯膦和63mg的乙酸钯混合物，在氩气中，在回流下搅拌8 小时。冷却后，将混合物分配在乙酸乙酯和水中。用乙酸乙酯进一步萃 取水层，用盐水洗涤合并的有机萃取物，用硫酸钠干燥，过滤并蒸发 硅胶色谱法纯化残余物，用30-50％乙酸乙酯-己烷梯度洗脱，得到 上述化合物(0.99g)，为白色晶体。 1H NMR(CDCl3)9.19(s，1H)，8.86(s，2H)，7.53(d，J＝15Hz， 1H)，6.54(d，J＝15Hz，1H)，1.55(s，9H). 步骤B

将在70-80℃油浴中的1.28g(6.21mmol)的步骤A产物的苄胺 (12ml)溶液搅拌过夜。冷却后，蒸去过量的苄胺。用硅胶色谱法纯化 残余物，用50％乙酸乙酯-己烷作为洗脱剂，得到上述化合物(1.33g)， 为无色油状物。 1H NMR(CDCl3) 9.18(s，1H)，8.78(s，2H)，7.21(m，5H)， 4.14(t，1H)，3.68(d，1H)，3.59(d，1H)，2.73(dd，1H)， 2.57(dd，1H)，1.41(s，9H). 步骤C

向50ml 4∶1的乙醇-环己烯中的1.33g(4.25mmol)的步骤B 产物溶液中加入10％Pd/C。在氩气和回流下搅拌混合物过夜，加入35mg 吡啶鎓的对甲苯磺酸盐，继续回流8小时。冷却后，过滤，并浓缩滤液。 残余物通过硅胶过滤，10％甲基-乙酸乙酯洗脱，得到上述化合物 (852mg)，为蜡状的固体。 1H NMR(CDCl3)9.26(s，1H)，8.78(s，2H)，4.46(dd，1H)， 2.64(m，2H)，1.81(br s，1H)，1.43(s，9H). 步骤D

在氩气下，向在冰浴中搅拌着的m-胍基马尿酸(1.04g， 3.82mmol)的无水二甲基甲酰胺(8ml)溶液中滴加入398mg (4.01mmol)的N-甲基哌啶，产生白色固体。将混合物搅拌10分钟， 然后加入1.03g(4.01mmol)的固体二丁二酰亚胺碳酸酯。搅拌1.5小 时后，得到澄清均匀的溶液，向其中加入852mg(3.82mmol)步骤C 产物的溶液。室温下搅拌过夜后，将混合物蒸干。用反相HPLC处理混 合物，三氟乙酸水溶液和乙腈的混合物为洗脱剂，然后，蒸发适合的流 分，得到上述化合物(230g)，为白色固体。 1H NMR(CDCl3-DMSO)10.58(s，1H)，9.09(s，1H)，8.76 (s，2H)，8.57(t，1H)，8.49(d，1H)，7.79-7.11(m，4H)， 5.36(dd，1H)，4.07(t，2H)，2.90(dd，1H)，2.79(dd，1H)， 1.35(s，9H). 步骤E

将230mg步骤D产物溶于20ml 1∶1的二氯甲烷-三氟乙酸中，所 得混合物在室温下搅拌过夜。蒸发后，反相HPLC处理混合物，用三氟 乙酸水溶液-乙腈混合物洗脱，然后蒸发适合的流分得到上述化合物 (183mg)，为白色固体。 分析C17N19N7O4CFCOOH 1/2H2O(MW 508.41)：

计算值：C，44.89；H，3.97。

实测值：C，44.75；H，4.16。

                  实施例244

β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基] 氨基]-3-甲基噻吩-2-丙酸的三氟乙酸盐的制备 步骤A

在氩气下，在20ml乙腈中的10.0g(56.5mmol)2-溴-3-甲 基噻吩、10.5ml(9.18g，71.8mmol)的丙烯酸叔丁酯、15.7ml(11.4g， 113mmol)的三乙胺、857mg的三-o-甲苯膦和113mg的乙酸钯的混 合物，在回流下搅拌8小时。冷却后，混合物在乙酸乙酯和水中分配， 用乙酸乙酯进一步萃取水层，用硫酸钠干燥合并的有机萃取物，过滤并 蒸发，得到上述化合物(12.7g)，为暗红色油状物。 1H NMR(CDCl3)7.78(d，J＝15Hz，1H)，7.24(d，J＝6Hz，1H)， 6.87(d，J＝6Hz，1H)，6.13(d，J＝15Hz，1H)，2.36(s，3H)， 1.56(s，9H). 步骤B

按实施例242步骤B方法，将8.00g(35.7mmol)的步骤A产物与 氨反应。50％乙酸乙酯-己烷为洗脱剂，用硅胶色谱法处理粗产物，得 到上述产物(1.78g)，为红色油状物，放置析出结晶。 1H NMR(CDCl3)7.11(d，1H)，6.78(d，1H)，4.72(m，1H)， 2.58(m，2H)，2.23(br s，2H)，2.21(s，3H)，1.44 (s，9H). 步骤C

β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基] 氨基]-3-甲基噻吩-2-丙酸的1，1-二甲基乙酯

在氩气下，向在冰浴中搅拌着的1.13g(4.15mmol)m-胍基马尿 酸的20ml无水二甲基甲酰胺溶液中，滴加入530μl(432mg，4.36mmol) 的N-甲基哌啶，产生白色固体。向该混合物中加入1.12g(4.36mmol) 的固体二丁二酰亚胺碳酸酯(disuccinimidyl carbonate)，并搅拌所得混 合物30分钟，得到澄清溶液。加入在8ml二甲基甲酰胺中的步骤B产物 (1.00g，4.15mmol)溶液，在室温下搅拌过夜。蒸发除去挥发物，得到3.8g 残余物。反相HPLC处理1.5g该混合物，用三氟乙酸水溶液-乙腈作洗 脱剂，然后蒸发适合的流分得到上述化合物(171mg)，为灰白色固体。 通过转化步骤D中描述的鉴别。 步骤D

在室温下，将在15ml 1∶1的二氯甲烷-三氟乙酸中的167mg步骤 C产物的溶液搅拌过夜。反相HPLC处理残余物，用三氟乙酸水溶液- 乙腈洗脱，然后蒸发适合的流分，得到上述化合物(103mg)，为白色 固体。 分析C18N21N5O4SCF3COOH(MW 517.48)：

计算值：C，46.42；H，4.29；N，13.53

实测值：C，46 88；H，4.52；N，13.24。

                 实施例245

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-3-(甲硫基)苯丙酸的三氟乙酸盐的制备 步骤A 3-〔3-(甲硫基)苯基〕-2E-丙酸的1，1-二甲基乙基酯

将在20ml DMF中的乙酸钯(110mg，0.00049mol)、3-溴苯硫 基甲烷(10g，0.05mol)、丙烯酸叔丁酯(7.7g，0.06mol)三-对-甲 苯膦(0.76g，0.0025mol)三乙胺(5.1g，0.05mol)的溶液在120℃下 加热20小时。过滤除去固体，并用CH2Cl2洗涤。浓缩滤液得一油状固 体。加入乙酸乙酯并过滤除去固体。浓缩滤液得到油状物。通过硅胶色 谱法纯化该产物。NMR与预期结构一致。 计算分析C14H18O2S(250.36)：

计算值：C，67.16；H，7.25。

实测值：C，673.3；H，7.24。 步骤B (±)β-氨基-3-〔3-(甲硫基)苯基〕丙酸的1，1-二甲基乙基 酯的单盐酸盐

用氨饱和的t-BuOH和1ml醋酸处理步骤A产物(10g，0.04mol)， 在110℃和900psi的帕尔摇动器中振荡78小时。过滤并浓缩混合物， 得到深色油状物。用硅胶色谱法纯化产物。用在二噁烷中的7N HCl处 理在100ml EtOAc中的游离碱溶液。过滤沉淀物，用EtOAc洗涤，干 燥。NMR证明了其结构。 分析计算C14H22NO2SCl·0.1H2O(303.85+0.1mH2O)：

计算值：C，55.01；H，7.32；N，4.58。

实测值：C，54.89；H，7.36；N，4.41。 步骤C

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-3-(甲硫基)苯丙酸的1，1-二甲基乙基酯的三氟乙酸 盐

在0℃，将N-甲基哌啶(0.69g，0.007mol)加到在20ml DMF 中的实施例M的化合物(0.91g，0.00334mol)中。形成白色沉淀。10 分钟后加入IBCF(0.47g，0.00351mol)。15分钟后，加入在6ml DMF 中的步骤B产物(1.01g，0.00334mol)的溶液。除去冰浴并在室温下搅 拌溶液20小时。浓缩溶液得到橙色浆状物。用反相HPLC纯化产物、 〔CH3CN/H2O(0.06％TFA)〕。NMR证明了其结构。 分析计算 C24H31N5O4S.TFA.1/2H2O(608.64)

计算值：C，51.31；H，5.47；N，11.51

实测值：C，51.46；H，5.67；N，11.51 步骤D

将在10ml CH2Cl2/TFA(1∶1)中的步骤C产物(0.50g)，在室 温下搅拌24小时。浓缩后得到一浅黄色油状物。通过反相HPLC(CH3CN/H2O.0.06％TFA)纯化产物。NMR证明了其结构。 分析计算  C20H23N5O4S.TFA.1/4 H2O(548.03)：

计算值：C，48.22；H，4.51；N，12.78.

实测值：C，48.19；H，4.66；N，12.80.

                 实施例246

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-6-甲基吡啶-2-丙酸的双(三氟乙酸)盐的制备 步骤A 3-(6-甲基-2-吡啶 基)-2E-丙酸的1，1-二甲基乙基酯

将在150ml甲苯中的6-甲基-2-吡啶甲醛(9.0g，0.074mol)和 (叔丁基羰基亚甲基)三苯膦(28.0g，0.074mol)溶液在85-90℃加 热5小时，然后在室温下搅拌20小时。过滤除去白色固体并浓缩滤液。 加入1∶1的甲苯/己烷(100ml)使产生更多的白色沉淀，过滤除去。浓 缩滤液得油状物。通过硅胶色谱法纯化产物。NMR证明了其结构。 分析计算  C13H17NO2(219.29)：

计算值：C，71.21；H，7.81；N，6.39.

实测值：C，70.84；H，7.81；N，6.32. 步骤B (±)6-甲基-β-[[(苯氧羰基)甲基]氨基]-吡啶-2-丙酸的1，1 -二甲基乙基酯

将在苄胺(48.9g，0.456mol)中的步骤A产物(5.0g，0.0228mol) 溶液在80℃下加热6小时，然后在100℃加热20小时。在115℃加热 溶液3小时，然后浓缩得到油状物。通过硅胶色谱法纯化产物。通过NMR 证明其结构。 分析计算  C20H26N2O2(326.44)：

计算值：C，73.59；H，8.03；N，8.58.

实测值：C，73.12；H，8.14；N，8.41. 步骤C (±)β-氨基-6-甲基吡啶-2-丙酸的1，1-二甲基乙基酯

在5psi和室温下，用催化量的4％的Pd/C处理在3A EtOH (100ml)中的步骤B产物(5.7g，0.017mol)48小时。过滤后，浓缩 滤液得到油状物。通过硅胶色谱法纯化产物。用NMR证明其结构。 分析计算  C13H20N2O2.0.3mH2O(242.62)：

计算值：C，64.35；H，8.60；N，11.55.

实测值：C，64.15；H，8.38；N，11.46. 步骤D

按照实施例245步骤C和D所描述的方法依次反应，但是以(±)β -氨基-6-甲基吡啶-2-丙酸的1，1-二甲基乙基酯代替(±)β- 氨基-3-(甲硫基)苯丙酸的1，1-二甲基乙基酯，制得标题化合物。 用NMR证明其结构。 分析计算  C23H24N6O8F6(626.47)：

计算值：C，44.10；H，3.86；N，13.41.

实测值：C，44.12；H，3.70；N，13.36.

                 实施例247

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-3-(甲磺酰基)苯丙酸的双(三氟乙酸)盐的制备 步骤A 甲基-3-溴苯砜

将在250ml水中的过硫酸氢钾制剂(Oxone_90.8g，0.15mol)溶液 加到搅拌着的在250ml MeOH和200ml丙酮中的3-溴苯硫基甲烷 (15g，0.0739mol)溶液中。在室温下搅拌混合物20小时。浓缩溶液除 去MeOH和丙酮。加入水(400ml)并将产物萃取入EtOAc。用Na2SO4干燥EtOAc，过滤并浓缩得到一固体。用NMR证明其结构。 步骤B

按照实施例245步骤A-D所描述的方法依次反应，但是，以甲基 -3-溴苯砜代替3-溴苯硫基甲烷，制得标题化合物。 分析计算  C20H23N5O6S.2TFA(689.55)：

计算值：C，41.81；H，3.65；N，10.16；S，4.65.

实测值：C，41.91；H，3.74；N，10.45；S，5.15.

                 实施例249

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-3，5-二乙氧基苯丙酸的三氟乙酸盐的制备 步骤A

向在DMF(100ml)中的3，5-二羟基苯甲醛(10g)中加入K2CO3(20g)和乙基碘(20g)。在25℃，搅拌3天。加入水(250ml)并 将产物萃取到乙酸乙酯中。分离有机层，用水、盐水洗涤并用Na2SO4干燥，得到3，5-二乙氧基苯甲醛(12g)，为深色油状物。该物质用 作下一步反应的原料。MS和H-NMR与预期一致。 步骤B

向在乙醇(70ml)中的3，5-二乙氧基苯甲醛(步骤A)(10g) 中加入乙酸铵(12.5g)，再加入丙二酸单乙酯(6.0g)。回流下搅拌 反应混合物5小时。冷却溶液，减压除去乙醇。将混合物分配到HCl水 溶液(100ml)和乙酸乙酯中。去掉有机层并用固体K2CO3碱化酸层。 将所得混合物分配到二氯甲烷(150ml)和水层中，分离并用Na2SO4干燥有机层。蒸发溶剂得到DL-3-氨基-3-(3，5-二乙氧基苯 基)丙酸乙酯，为油状物。加入乙醚(100ml)，然后加入在二噁烷中 的HCl(20ml，4N)并强烈搅拌1小时。过滤收集HCl盐(6.3g)。 MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤C

将N，N′-二琥珀酰亚胺基碳酸酯(DSC)(1.0g，0.4mmol)加入在 无水二甲基甲酰胺(6ml)中的实施例M化合物(1.0g，0.4mmol)中， 然后加入二甲基氨基吡啶(100mg)。20分钟后，加入3-氨基-3 -(3，5-二乙氧基苯基)丙酸乙酯的盐酸盐(1.1g，0.5mmol)，然后 加入NMM(2.0ml)。完成反应后(1-16小时)，反相色谱法纯化 产物(水/乙腈)得到白色固体(1.1g)。MS和H-NMR与预期结构 一致。 步骤D

将步骤C制得的DL-3-氨基-3-(3，5-二乙氧基苯基)丙 酸乙酯加合物(500mg)溶解于水/乙腈(1∶1)中，然后加入氢氧化 锂(100mg)。在25℃搅拌反应，并通过HPLC监测。在水解完成后(1 -2小时)，加入三氟乙酸直至pH＝2。通过反相色谱法纯化产物(水 /乙腈)得到255mg标题化合物，为白色固体。MS和H-NMR与预期 结构一致。

                   实施例250

β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基] 氨基]-4-溴噻吩-2-丙酸的三氟乙酸盐的制备 步骤A

向乙醇(70ml)中的3-溴噻吩-5-甲醛(Aldrich)(10g) 中加入乙酸铵(2.5当量)，然后加入丙二酸单乙酯(1.1当量)。将反 应混合物回流搅拌5小时。冷却溶液，减压下除去乙醇。加入HCl水溶 液(100ml)并以乙酸乙酯分配混合物。丢掉有机层并用固体K2CO3碱 化酸层。将所得混合物分配在二氯甲烷(150ml)中，分离并用Na2SO4干燥。蒸发溶剂得到DL-3-氨基-3-(3-溴噻吩)丙酸乙酯，为 油状物。加入乙醚(100ml)，然后加入在二噁烷中的HCl(20ml，4N) 并剧烈搅拌1小时。过滤收集HCl盐(6.3g)。MS和H-NMR与预 期结构一致。 步骤B

将N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)(1.0g，0.4mmol)加入在 无水二甲基甲酰胺(6ml)中的方案VII的化合物H(1.0g，0.4mmol) 中，然后加入二甲基氨基吡啶(100mg)。20分钟后，加DL-氨基-3- (3-溴噻吩)丙酸乙酯的盐酸盐(1.1g，0.5mmol)，然后加入NMM (2.0ml)。当反应完成后(1-16小时)，用反相色谱法(水/乙腈) 纯化产物得到白色固体(1.1g)。MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤C

将步骤B制得的DL 3-氨基-3-(3-溴噻吩)丙酸乙酯加合物 (500mg)溶于水/乙腈(1∶1)中，然后加入氢氧化锂(100mg)。 在25℃，搅拌反应，并通过HPLC监测。完成水解反应(1-2小时) 后，加入三氟乙酸至pH＝2。通过反相色谱法(水/乙腈)纯化产物， 得到255mg标题化合物为白色固体。MS和H-NMR与预期结构一致。

                  实施例251

β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基] 氨基]-5-氯噻吩-2-丙酸的三氟乙酸盐的制备 步骤A

向在乙醇(70ml)中的2-氯噻吩-5-甲醛(Aldrich)(10g) 中加入乙酸铵(2.5当量)，然后加入丙二酸单乙酯(1.1当量)。在回 流下搅拌反应混合物5小时。冷却溶液，并减压下除去乙醇。加入HCl水溶液(100ml)并用乙酸乙酯分配混合物。弃去有机层并用固体K2CO3碱化酸层。将所得混合物分配到二氯甲烷(150ml)中，分离并用Na2SO4干燥。蒸去溶剂得到DL 3-氨基-3-(2-氯噻吩)丙酸乙酯，为油 状物。加入乙醚(100ml)，再加入在二噁烷中的HCl(20ml，4N)并 剧烈搅拌1小时。过滤收集其盐酸盐(6.3g)。MS和H-NMR与预 期结构一致。 步骤B

将N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)(1.0g，0.4mmol)加到在 无水二甲基甲酰胺(6ml)中的实施例M的化合物(1.0g，0.4mmol)中， 然后加入二甲基氨基吡啶(100mg)。20分钟后，加入DL-氨基-3- (2-氯噻吩)丙酸乙酯的盐酸盐(1.1g，0.5mmol)，然后加入NMM (2.0ml)。反应完成后(1-16小时)，通过反相色谱法(水/乙腈) 纯化产物，得到白色固体(1.1g)。MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤C

将步骤B制得的DL 3-氨基-3-(2-氯噻吩)丙酸乙酯的加合 物(500mg)溶解在水/乙腈(1∶1)中，然后加入氢氧化锂(100mg)。 在25℃搅拌反应，并通过HPLC监测。水解完成后(1-2小时)，加 入三氟乙酸至pH＝2。通过反相色谱法(水/乙腈)纯化产物，得到255mg 标题化合物，为白色固体。MS和H-NMR与预期结构一致。

                  实施例252

β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基] 氨基]-1H-吡唑-3-丙酸的三氟乙酸盐的制备 步骤A

向3-吡唑甲醛(Maybridge)(10g)的乙醇(70ml)溶液中加 乙酸铵(2.5当量)，接着，加丙二酸单乙酯(1.1当量)。回流搅拌反 应混合物5小时。冷却溶液，减压除乙醇。加HCl水溶液(100ml)并 以乙酸乙酯分配混合物。丢弃有机层和用固体K2CO3碱化酸层。所得混 合物在二氯甲烷(150ml)间分配，分离，Na2SO4干燥。蒸除溶剂，得 DL-3-氨基-3-(3-吡唑)丙酸乙酯，为油状。加乙醚(100ml)， 接着，加在二噁烷中的HCl(20ml，4N)并激烈搅拌1小时。过滤，收 集HCl盐(6.3g)。MS和H-NMR与预期产物一致。 步骤B

将N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)(1.0g，0.4mmol)加到方 案VII中的化合物H(1.0g，0.4mmol)的无水二甲基甲酰胺(6ml)溶 液中，接着，加二甲氨基吡啶(100mg)。20分钟后，加DL 3-氨基 -3-(3-吡唑)丙酸乙酯盐酸盐(1.1g，0.5mmol)，接着，加NMM (2.0ml)。反应完成后(1-16小时)，产物经反相色谱(水/乙腈) 提纯，得白色固体(1.1g)。MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤C

将步骤B所得DL-3-氨基-3-(3-吡唑)丙酸乙酯加合物 (500mg)溶于水/乙腈(1∶1)中，接着，加氢氧化锂(100mg)。 于25℃下搅拌反应混合物并以HPLC监测。完成水解后(1-2小时)， 加三氟乙酸直至pH＝2。经反相色谱提纯(水/乙腈)，得255mg标题 化合物，为白色固体。

MS和H-NMR与预期结构一致。

                  实施例253

β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基] 氨基]-5-甲基噻吩-2-丙酸的三氟乙酸盐的制备 步骤A

向5-甲基噻吩-2-甲醛(Lancaster)(10g)的乙醇(70ml) 溶液中加乙酸铵(2.5当量)，接着，加丙二酸单乙酯(1.1当量)。回 流搅拌反应混合物5小时。冷却溶液，减压除乙醇。加HCl水溶液 (100ml)并以乙酸乙酯分配混合物。丢弃有机层和用固体K2CO3碱化 酸层。所得混合物在二氯甲烷(150ml)间分配，分离，Na2SO4干燥。 蒸除溶剂，得DL-3-氨基-3-(5-甲基噻吩)丙酸乙酯，为油状。 加乙醚(100ml)，接着，加在二噁烷中的HCl(20ml，4N)并激烈搅 拌1小时。过滤，收集HCl盐(6.3g)。MS和H-NMR与预期产物 一致。 步骤B

将N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)(1.0g，0.4mmol)加到实 施例M的化合物(1.0g，0.4mmol)的无水二甲基甲酰胺(6ml)溶液中， 接着，加二甲氨基吡啶(100mg)。20分钟后，加DL-3-氨基-3- (5-甲基噻吩)丙酸乙酯盐酸盐(1.1g，0.5mmol)，接着，加NMM (2.0ml)。反应完成后(1-16小时)，产物经反相色谱(水/乙腈) 提纯，得白色固体(1.1g)。MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤C

将步骤B所得DL-3-氨基-3-(5-甲基噻吩)丙酸乙酯加 合物(500mg)溶于水/乙腈(1∶1)中，接着，加氢氧化锂(100mg)。 于25℃下搅拌反应混合物并以HPLC监测。完成水解后(1-2小时)， 加三氟乙酸直至pH＝2。经反相色谱提纯(水/乙腈)，得255mg标题 化合物，为白色固体。

MS和H-NMR与预期结构一致。

实施例254

β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基] 氨基]-2，3，5-三氯苯丙酸的三氟乙酸盐的制备 步骤A

向2，3，5-三氯苯甲醛(Lancaster)(10g)的乙醇(70ml)溶 液中加乙酸铵(2.5当量)，接着，加丙二酸单乙酯(1.1当量)。回流 搅拌反应混合物5小时。冷却溶液，减压除乙醇。加HCl水溶液(100ml) 并以乙酸乙酯分配混合物。丢弃有机层和用固体K2CO3碱化酸层。所得 混合物在二氯甲烷(150ml)间分配，分离，Na2SO4干燥。蒸除溶剂， 得DL-3-氨基-3-(2，3，5-三氯苯基)丙酸乙酯，为油状 (6.3g)。MS和H-NMR与预期产物一致。 步骤B

将N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)(1.0g，0.4mmol)加到实 施例M的化合物(1.0g，0.4mmol)的无水二甲基甲酰胺(6ml)溶液中， 接着，加二甲氨基吡啶(100mg)。20分钟后，加DL-3-氨基-3- (2，3，5-三氯苯基)丙酸乙酯盐酸盐(1.1g，0.5mmol)，接着，加 NMM(2.0ml)。反应完成后(1-16小时)，产物经反相色谱(水/ 乙腈)提纯，得白色固体(1.1g)。MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤C

将步骤B所得DL-3-氨基-3-(2，3，5-三氯苯基)丙酸乙 酯加合物(500mg)溶于水/乙腈(1∶1)中，接着，加氢氧化锂 (100mg)。于25℃下搅拌反应混合物并以HPLC监测。完成水解后(1 -2小时)，加三氟乙酸直至pH＝2。经反相色谱提纯(水/乙腈)， 得255mg标题化合物，为白色固体。

MS和H-NMR与预期结构一致。

                  实施例255

β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基] 氨基]-2(羧基甲氧基)苯丙酸的三氟乙酸盐的制备 步骤A

向2-甲酰基苯氧基乙酸(Fisher)(10g)的乙醇(70ml)溶液 中加乙酸铵(2.5当量)，接着，加丙二酸单乙酯(1.1当量)。回流搅 拌反应混合物5小时。过滤溶剂，得DL-3-氨基-3-(2-甲酰基 苯氧基乙酸)丙酸乙酯，为固体(6.3g)。MS和H-NMR与预期产 物一致。 步骤B

将N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)(1.0g，0.4mmol)加到实 施例M的化合物(1.0g，0.4mmol)的无水二甲基甲酰胺(6ml)溶液中， 接着，加二甲氨基吡啶(100mg)。20分钟后，加DL-3-氨基-3- (2-甲酰基苯氧基乙酸)丙酸乙酯盐酸盐(1.1g，0.5mmol)，接着， 加NMM(2.0ml)。反应完成后(1-16小时)，产物经反相色谱(水 /乙腈)提纯，得白色固体(1.1g)。MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤C

将步骤B所得DL-3-氨基-3-(2-甲酰基苯氧基乙酸)丙 酸乙酯加合物(500mg)溶于水/乙腈(1∶1)中，接着，加氢氧化锂 (100mg)。于25℃下搅拌反应混合物并以HPLC监测。完成水解后(1 -2小时)，加三氟乙酸直至pH＝2。经反相色谱提纯(水/乙腈)， 得255mg标题化合物，为白色固体。

MS和H-NMR与预期结构一致。

实施例256

β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基] 氨基]-4-甲氧基-1，3-苯并二氧杂环戊烯-6-丙酸的三氟乙酸盐的 制备 步骤A

向2-甲氧基(Fisher)(10g)的乙醇(70ml)溶液中加乙酸铵 (2.5当量)，接着，加丙二酸单乙酯(1.1当量)。回流搅拌反应混合 物5小时。冷却溶液，减压除乙醇。加HCl水溶液(100ml)并以乙酸 乙酯分配混合物。丢弃有机层和用固体K2CO3碱化酸层。所得混合物在 二氯甲烷(150ml)间分配，分离，Na2SO4干燥。蒸除溶剂，得DL- 3-氨基-3-(2-甲氧基)丙酸乙酯，为油状(6.3g)。MS和H -NMR与预期产物一致。 步骤B

将N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)(1.0g，0.4mmol)加到实 施例M的化合物(1.0g，0.4mmol)的无水二甲基甲酰胺(6ml)溶液中， 接着，加二甲氨基吡啶(100mg)。20分钟后，加DL-3-氨基-3- (2-甲氧基胡椒基)丙酸乙酯盐酸盐(1.1g，0.5mmol)，接着，加NMM (2.0ml)。反应完成后(1-16小时)，产物经反相色谱(水/乙腈) 提纯，得白色固体(1.1g)。MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤C

将步骤B所得DL-3-氨基-3-(2-甲氧基胡椒醛)丙酸乙酯加合 物(500mg)溶于水/乙腈(1∶1)中，接着，加氢氧化锂(100mg)。 于25℃下搅拌反应混合物并以HPLC监测。完成水解后(1-2小时)， 加三氟乙酸直至pH＝2。经反相色谱提纯(水/乙腈)，得255mg标题 化合物，为白色固体。

MS和H-NMR与预期结构一致。

                  实施例257

β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基] 氨基]-5-溴-2-甲氧基-苯丙酸的三氟乙酸盐的制备 步骤A

向3-溴-6-甲氧基苯甲醛(Aldrich)(10g)的乙醇(70ml) 溶液中加乙酸铵(2.5当量)，接着，加丙二酸单乙酯(1.1当量)。回 流搅拌反应混合物5小时。冷却溶液，减压除乙醇。加HCl水溶液 (100ml)并以乙酸乙酯分配混合物。丢弃有机层和用固体K2CO3碱化 酸层。所得混合物在二氯甲烷(150ml)间分配，分离，Na2SO4干燥。 蒸除溶剂，得DL-3-氨基-3-(3-溴-6-甲氧基苯基)丙酸乙 酯，为油状(6.3g)。MS和H-NMR与预期产物一致。 步骤B

将N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)(1.0g，0.4mmol)加到实 施例M的化合物(1.0g，0.4mmol)的无水二甲基甲酰胺(6ml)溶液中， 接着，加二甲氨基吡啶(100mg)。20分钟后，加DL-3-氨基-3- (3-溴-6-甲氧基苯基)丙酸乙酯盐酸盐(1.1g，0.5mmol)，接着， 加NMM(2.0ml)。反应完成后(1-16小时)，产物经反相色谱(水 /乙腈)提纯，得白色固体(1.1g)。MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤C

将步骤B所得DL-3-氨基-3-(3-溴-6-甲氧基苯基) 丙酸乙酯加合物(500mg)溶于水/乙腈(1∶1)中，接着，加氢氧化 锂(100mg)。于25℃下搅拌反应混合物并以HPLC监测。完成水解后 (1-2小时)，加三氟乙酸直至pH＝2。经反相色谱提纯(水/乙腈)， 得255mg标题化合物，为白色固体。

MS和H-NMR与预期结构一致。

实施例258

β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基] 氨基]-6-氯-1，3-苯并二氧杂环戊烯-5-丙酸的三氟乙酸盐的制备 步骤A

向6-氯胡椒蘸(Lancaster)(10g)的乙醇(70ml)溶液中加乙酸铵 (2.5当量)，接着，加丙二酸单乙酯(1.1当量)。回流搅拌反应混合 物5小时。冷却溶液，减压除乙醇。加HCl水溶液(100ml)并以乙酸 乙酯分配混合物。丢弃有机层和用固体K2CO3碱化酸层。所得混合物在 二氯甲烷(150ml)间分配，分离，Na2SO4干燥。蒸除溶剂，得DL- 3-氨基-3-(6-氯胡椒基)丙酸乙酯，为油状(6.3g)。MS和H-NMR 与预期产物一致。 步骤B

将N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)(1.0g，0.4mmol)加到实 施例M的化合物(1.0g，0.4mmol)的无水二甲基甲酰胺(6ml)溶液中， 接着，加二甲氨基吡啶(100mg)。20分钟后，加DL-3-氨基-3- (3-氯胡椒基)丙酸乙酯盐酸盐(1.1g，0.5mmol)，接着，加NMM(2.0ml)。 反应完成后(1-16小时)，产物经反相色谱(水/乙腈)提纯，得白色 固体(1.1g)。MS和H-MR与预期结构一致。 步骤C

将步骤B所得DL-3-氨基-3-(6-氯胡椒基)丙酸乙酯加合物 (500mg)溶于水/乙腈(1∶1)中，接着，加氢氧化锂(100mg)。 于25℃下搅拌反应混合物并以HPLC监测。完成水解后(1-2小时)， 加三氟乙酸直至pH＝2。经反相色谱提纯(水/乙腈)，得255mg标题 化合物，为白色固体。

MS和H-NMR与预期结构一致。

                  实施例259

β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基] 氨基]-苯并呋喃-2-丙酸的三氟乙酸盐的制备 步骤A

向2-苯并呋喃甲醛(Lancaster)(10g)的乙醇(70ml)溶液 中加乙酸铵(2.5当量)，接着，加丙二酸单乙酯(1.1当量)。回流搅 拌反应混合物5小时。冷却溶液，减压除乙醇。加HCl水溶液(100ml) 并以乙酸乙酯分配混合物。丢弃有机层和用固体K2CO3碱化酸层。所得 混合物在二氯甲烷(150ml)间分配，分离，Na2SO4干燥。蒸除溶剂， 得DL-3-氨基-3-(2-苯并呋喃基)丙酸乙酯，为油状(6.3g)。 MS和H-NMR与预期产物一致。 步骤B

将N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)(1.0g，0.4mmol)加到实 施例M的化合物(1.0g，0.4mmol)的无水二甲基甲酰胺(6ml)溶液中， 接着，加二甲氨基吡啶(100mg)。20分钟后，加DL-3-氨基-3- (2-苯并呋喃基)丙酸乙酯盐酸盐(1.1g，0.5mmol)，接着，加NMM (2.0ml)。反应完成后(1-16小时)，产物经反相色谱(水/乙腈) 提纯，得白色固体(1.1g)。MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤C

将步骤B所得DL-3-氨基-3-(2-苯并呋喃基)丙酸乙酯 加合物(500mg)溶于水/乙腈(1∶1)中，接着，加氢氧化锂(100mg)。 于25℃下搅拌反应混合物并以HPLC监测。完成水解后(1-2小时)， 加三氟乙酸直至pH＝2。经反相色谱提纯(水/乙腈)，得255mg标题 化合物，为白色固体。

MS和H-NMR与预期结构一致。

实施例260

β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基] 氨基]-3-(羧基甲氧基)苯丙酸的三氟乙酸盐的制备 步骤A

向3-甲酰基苯氧基乙酸(Fisher)(10g)的乙醇(70ml)溶液 中加乙酸铵(2.5当量)，接着，加丙二酸单乙酯(1.1当量)。回流搅 拌反应混合物5小时。过滤溶液，得DL-3-氨基-3-(3-甲酰基 苯氧基乙酸)丙酸乙酯，为油状(6.3g)。MS和H-NMR与预期产 物一致。 步骤B

将N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)(1.0g，0.4mmol)加到实 施例M的化合物(1.0g，0.4mmol)的无水二甲基甲酰胺(6ml)溶液中， 接着，加二甲氨基吡啶(100mg)。20分钟后，加DL-3-氨基-3- (3-甲酰基苯氧基乙酸)丙酸乙酯盐酸盐(1.1g，0.5mmol)，接着， 加NMM(2.0ml)。反应完成后(1-16小时)，产物经反相色谱(水 /乙腈)提纯，得白色固体(1.1g)。MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤C

将步骤B所得DL-3-氨基-3-(3-甲酰基苯氧基乙酸)丙 酸乙酯加合物(500mg)溶于水/乙腈(1∶1)中，接着，加氢氧化锂 (100mg)。于25℃下搅拌反应混合物并以HPLC监测。完成水解后(1 -2小时)，加三氟乙酸直至pH＝2。经反相色谱提纯(水/乙腈)， 得255mg标题化合物，为白色固体。

MS和H-NMR与预期结构一致。

实施例261

3-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基] 氨基]-4，4，4-三氟丁酸的三氟乙酸盐的制备 步骤A

向3-氨基-4，4，4-三氟丁酸(Lancaster)(2g)的乙醇(70ml) 溶液中加在二噁烷中的HCl(20ml，4N)并激烈搅拌16小时。减压下 除去溶剂。收集HCl盐(2.3g)。MS和H-NMR与预期产物一致。 步骤B

将N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)(1.0g，0.4mmol)加到实 施例M的化合物(1.0g，0.4mmol)的无水二甲基甲酰胺(6ml)溶液中， 接着，加二甲氨基吡啶(100mg)。20分钟后，加DL-3-氨基-3- (4，4，4-三氟)丙酸乙酯盐酸盐(1.1g，0.5mmol)，接着，加NMM (2.0ml)。反应完成后(1-16小时)，产物经反相色谱(水/乙腈) 提纯，得白色固体(1.1g)。MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤C

将步骤B所得DL-3-氨基-3-(4，，4 4-三氟)丙酸乙酯加 合物(500mg)溶于水/乙腈(1∶1)中，接着，加氢氧化锂(100mg)。 于25℃下搅拌反应混合物并以HPLC监测。完成水解后(1-2小时)， 加三氟乙酸直至pH＝2。经反相色谱提纯(水/乙腈)，得255mg标题 化合物，为白色固体。

MS和H-NMR与预期结构一致。

实施例262

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-3-溴-4，5-二甲氧基苯丙酸的三氟乙酸盐的制备 步骤A

向3-溴-4，5-二甲氧基苯甲醛(Aldrich)(10g)的乙醇 (70ml)溶液中加乙酸铵(2.5当量)，接着，加丙二酸单乙酯(1.1 当量)。回流搅拌反应混合物5小时。冷却溶液，减压除乙醇。加HCl水溶液(100ml)并以乙酸乙酯分配混合物。丢弃有机层和用固体K2CO3碱化酸层。所得混合物在二氯甲烷(150ml)间分配，分离，Na2SO4干燥。蒸除溶剂，得DL-3-氨基-3-(3-溴-4，5-二甲氧基苯 基)丙酸乙酯，为油状(6.3g)。MS和H-NMR与预期产物一致。 步骤B

将N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)(1.0g，0.4mmol)加到实 施例M的化合物(1.0g，0.4mmol)的无水二甲基甲酰胺(6ml)溶液中， 接着，加二甲氨基吡啶(100mg)。20分钟后，加DL-3-氨基-3- (2-溴-4，5-二甲氧基苯基)丙酸乙酯盐酸盐(1.1g，0.5mmol)， 接着，加NMM(2.0ml)。反应完成后(1-16小时)，产物经反相 色谱(水/乙腈)提纯，得白色固体(1.1g)。MS和H-NMR与预期 结构一致。 步骤C

将步骤B所得DL-3-氨基-3-(3-溴-4，5-二甲氧基苯 基)丙酸乙酯加合物(500mg)溶于水/乙腈(1∶1)中，接着，加氢 氧化锂(100mg)。于25℃下搅拌反应混合物并以HPLC监测。完成水 解后(1-2小时)，加三氟乙酸直至pH＝2。经反相色谱提纯(水/ 乙腈)，得255mg标题化合物，为白色固体。

MS和H-NMR与预期结构一致。

实施例263

3-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基] 氨基]-4-甲基戊酸的三氟乙酸盐的制备 步骤A

用实施例53步骤A的方法制备DL-3-氨基-3-(异丙基)丙 酸乙酯，但是，用乙酰乙酸异丙酯(10g)代替3-酮戊二酸二甲酯。 MS和H-NMR与预期产物一致。 步骤B

将N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)(1.0g，0.4mmol)加到实 施例M的化合物(1.0g，0.4mmol)的无水二甲基甲酰胺(6ml)溶液中， 接着，加二甲氨基吡啶(100mg)。20分钟后，加DL-3-氨基-3- (异丙基)丙酸乙酯(1.1g，0.5mmol)，接着，加NMM(2.0ml)。 反应完成后(1-16小时)，产物经反相色谱(水/乙腈)提纯，得白色 固体(1.1g)。MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤C

将步骤B所得DL-3-氨基-3-(异丙基)丙酸乙酯加合物 (500mg)溶于水/乙腈(1∶1)中，接着，加氢氧化锂(100mg)。 于25℃下搅拌反应混合物并以HPLC监测。完成水解后(1-2小时)， 加三氟乙酸直至pH＝2。经反相色谱提纯(水/乙腈)，得255mg标题 化合物，为白色固体。

MS和H-NMR与预期结构一致。

                 实施例264

3-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基] 氨基]戊酸的三氟乙酸盐的制备 步骤A 用实施例53步骤A的方法制备DL-3-氨基-3-(3-乙基) 丙酸乙酯，但是，用乙酰乙酸乙酯(10g)代替3-酮戊二酸二甲酯。 MS和H-NMR与预期产物一致。 步骤B

将N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)(1.0g，0.4mmol)加到实 施例M的化合物(1.0g，0.4mmol)的无水二甲基甲酰胺(6ml)溶液中， 接着，加二甲氨基吡啶(100mg)。20分钟后，加DL-3-氨基-3- (乙基)丙酸乙酯盐酸盐(1.1g，0.5mmol)，接着，加NMM(2.0ml)。 反应完成后(1-16小时)，产物经反相色谱(水/乙腈)提纯，得白色 固体(1.1g)。MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤C

将步骤B所得DL-3-氨基-3-(乙基)丙酸乙酯加合物 (500mg)溶于水/乙腈(1∶1)中，接着，加氢氧化锂(100mg)。 于25℃下搅拌反应混合物并以HPLC监测。完成水解后(1-2小时)， 加三氟乙酸直至pH＝2。经反相色谱提纯(水/乙腈)，得255mg标题 化合物，为白色固体。

MS和H-NMR与预期结构一致。

实施例265

β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基] 氨基]-5-溴-3-氯-2-羟基苯丙酸的三氟乙酸盐的制备 步骤A

按照方案XIV制备DL-3-溴-5-氯-2-羟基氨基香豆素。 使用G.Casiraghi，et al.，J.Chem.Soc.Perkin  Trans 1 p.318，1978，的方 法，制备4-溴-2-氯水杨醛，并使用Vogel′s The Textbook of Practical  Organic  Chemistry，fifth edition p.1040的方法，制备6- 溴-8-氯香豆素。使用7-氯-5-溴香豆素(7g)用实施例87方 法，制备氨基香豆素。MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤B

将N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)(1.0g，0.4mmol)加到在 无水二甲基甲酰胺(6ml)中的实施例M的化合物(1.0g，0.4mmol)中， 然后加入二甲基氨基吡啶(100mg)。20分钟后，加入DL-3-溴- 5-氯-2-羟基氨基香豆素的盐酸盐(1.1g，0.5mmol)，然后加入NMM (2.0ml)。反应完成后(1-16小时)，用反相色谱法(水/乙腈)纯 化产物，得到白色固体(1.1g)。MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤C

将步骤B制得的DL-3-溴-5-氯-2-羟基氨基内酯加合物 (500mg)溶于水/乙腈中，缓慢开环形成标题化合物(2-羟基酸) 255mg，为白色固体。通过反相色谱法纯化并冷冻干燥，得到其TFA盐。 MS和H-NMR与预期结构一致。

                 实施例266

β-[[2-[[[3-[[[(4-吡啶基甲基)氨基]羰基]氨基]苯基]羰 基]氨基]乙酰基]氨基]吡啶-3-丙酸的(双)三氟乙酸盐的制备 步骤A

将甘氨酸叔丁酯(20g，119mmol)加到水(200ml)中，然后加入 碳酸钾(20g，180mmol)并在冰浴中冷却至0℃。在10分钟内，向该 溶液中滴加3-硝基苯甲酰氯(20g，108mmol)的乙腈(20ml)溶液。 反应完成后(3-4小时)，加入浓盐酸至pH＝3，然后加入饱和的 NaCl水溶液(75ml)。过滤产物，用水洗涤并空气中干燥，得产物(22g， 产率90％)。MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤B

将(3-硝基苯甲酰基)甘氨酸叔丁酯(10g)加到在帕尔瓶(Parr jar)中的无水乙醇(60ml)中。加入5％Pd/C(1mg)并将混合物在 帕尔装置中于50psi压力下氢化2.5小时。反应完成后用硅藻土板过滤除 去钯催化剂。减压下除去溶剂并真空干燥样品。将二甲基甲酰胺 (25ml)加到粗苯胺叔丁基酯中，然后加入三乙胺(1.5当量)并冷却 至0℃。加入氯甲酸苯酯(6.5g，1.1当量)并搅拌2小时。加入水并过 滤，得到苯基氨基甲酸叔丁酯，为白色固体(12.5g，产率99％)。MS 和H-NMR与预期结构一致。 步骤C 将二甲基甲酰胺(25ml)加到步骤B的苯基氨基甲酸叔丁酯中，然 后加入4-吡啶基甲胺(1.1当量)。将反应在70℃下搅拌2小时，再 在25℃搅拌12小时。加入水，并将混合物分配到乙酸乙酯中，分离并 用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，得到油状物(6g)。MS和H-NMR 与预期结构一致。 步骤D

将步骤C化合物(6g)溶于二噁烷(25ml)中。加入在二噁烷中 的HCl(20ml，4N)。搅拌溶液12小时并在减压下除去溶剂，然后加 入乙醚。过滤固体并在真空干燥箱中干燥12小时。 步骤E

将N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)(1.0g，0.4mmol)加到在 无水二甲基甲酰胺(6ml)中的步骤D制得的化合物(1.0g，0.4mmol) 中，然后加入二甲基氨基吡啶(100mg)。20分钟后，加入DL-3- 氨基-3-吡啶基丙酸乙酯的盐酸盐(1.1g，0.5mmol)，然后加入NMM (2.0ml)。反应完成后(1-16小时)，用反相色谱法(水/乙腈)纯 化产物，得到白色固体(1.1g)。MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤F

将步骤E制得的DL-3-氨基-3-吡啶基丙酸乙酯加合物 (500mg)溶于水/乙腈(1∶1)中，然后加入氢氧化锂(100mg)。 在25℃搅拌反应并通过HPLC监测。水解完成后(1-2小时)加入三 氟乙酸至pH＝2。通过反相色谱法(水/乙腈)纯化产物，得到255mg 的标题化合物，为白色固体。MS和H-NMR与预期结构一致。

                  实施例267

3，5-二氯-β-[[2-[[[3-[[[(4-吡啶甲基)氨基]羰基]氨 基]苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]苯丙酸的三氟乙酸盐的制备 步骤A

将N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)(1.0g，0.4mmol)加到在 无水二甲基甲酰胺(6ml)中的实施例268步骤B制得的化合物(1.0g， 0.4mmol)中，然后加入二甲基氨基吡啶(100mg)。20分钟后，加入 DL-3-氨基-3-(1，3-二氯苯基)丙酸乙酯的盐酸盐(1.1g， 0.5mmol)，然后加入NMM(2.0ml)。反应完成后(1-16小时)， 通过反相色谱法(水/乙腈)纯化产物，得到白色固体(1.1g)。MS和 H-NMR与预期结构一致。 步骤B

将步骤A制得的DL-3-氨基-3-(1，3-二氯苯基)丙酸乙 酯加合物(500mg)溶于水/乙腈(1∶1)中，然后加氢氧化锂(100mg)。 在25℃搅拌反应，并用HPLC监测。水解完成后(1-2小时)，加入 三氟乙酸至pH＝2。通过反相色谱法(水/乙腈)纯化产物，得到3 15mg 的标题化合物，为白色固体。MS和H-NMR与预期结构一致。

实施例268

β-[[2-[[[3-[[[(2-吡啶基甲基)氨基]羰基]氨基]苯基]羰 基]氨基]乙酰基]氨基]吡啶-3-丙酸的(双)三氟乙酸盐的制备 步骤A

将二甲基甲酰胺(25ml)加到实施例266步骤B的苯基氨基甲酸叔 丁酯中，然后加入2-吡啶甲胺(1.1当量)。在70℃搅拌反应2小时 并在25℃搅拌1-2小时。加入水并将混合物分配到乙酸乙酯中，分离， 用盐水洗涤并用Na2SO4干燥，得到油状物(6g)。MS和H-NMR 与预期结构一致。 步骤B

将步骤A制得的化合物(6g)溶于二噁烷(25ml)中。向该溶液 中加入在二噁烷中的HCl(20ml，4N)。搅拌1-2小时。在减压下除 去溶剂，然后加入乙醚。过滤固体并在真空干燥箱中干燥12小时。 步骤C

将N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)(1.0g，0.4mmol)加到在 无水二甲基甲酰胺(6ml)中的步骤B制得的化合物(1.0g，0.4mmol) 中，然后加入二甲基氨基吡啶(100mg)。20分钟后，加入DL-3- 氨基-3-吡啶基丙酸乙酯的盐酸盐(1.1g，0.5mmol)，然后加入NMM (2.0ml)。反应完成后(1-16小时)，通过反相色谱法(水/乙腈) 纯化产物，得到白色固体(1.1g)。MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤D

将步骤C制得的DL-3-氨基-3-吡啶基丙酸乙酯加合物 (500mg)溶于水/乙腈(1∶1)中，然后加入氢氧化锂(100mg)。 在25℃下搅拌反应，并通过HPLC监测。水解反应完成后(1-2小时)， 加入三氟乙酸至pH＝2。通过反相色谱法(水/乙腈)纯化产物，得到 550mg的标题化合物，为白色固体。MS和H-NMR与预期结构一致。

                  实施例269

3，5-二氯-β-[[2-[[[3-[[[(苯基甲基)氨基]羰基]氨基]苯 基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]苯丙酸的一水合物的制备 步骤A

将(3-硝基苯甲酰基)甘氨酸叔丁酯(10g)加到在帕尔瓶中的 无水乙醇(60ml)中。加入5％Pd/C(1mg)并将混合物在50psi压 力下的帕尔装置中氢化2.5小时。反应完成后，通过硅藻土过滤除去催化 剂钯。减压下除去溶剂并真空干燥样品。 步骤B

将乙腈(50ml)加到步骤A制得的粗苯胺(10g)中，然后加入异 氰酸苄基酯(7.0g)。将溶液温热至70℃2小时，并除去溶剂。加入乙 醚并过滤固体，得到苄基脲叔丁酯，为橙红色固体(12.6g)。 步骤C

将步骤B制得的化合物(6g)溶于二噁烷(25ml)中。向其中加 在二噁烷中的HCl(20ml，4N)。搅拌溶液12小时并减压下除去溶剂， 然后加入乙醚。过滤固体并在真空干燥箱中干燥12小时。 步骤D

将N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)(1.0g，0.4mmol)加入在 无水二甲基甲酰胺(6ml)中的步骤C制得的化合物(1.0g，0.4mmol) 中，然后加入二甲基氨基吡啶(100mg)。20分钟后，加入DL-3- 氨基-3-(1，3-二氯苯基)丙酸乙酯的盐酸盐(1.1g，0.5mmol)， 然后加入NMM(2.0ml)。反应完成后(1-16小时)，通过反相色 谱法(水/乙腈)纯化产物，得到白色固体(1.2g)。MS和H-NMR 与预期结构一致。 步骤E

将步骤D制得的DL-3-氨基-3-(1，3-二氯苯基)丙酸乙 酯加合物(500mg)溶于水/乙腈(1∶1)中，然后加入氢氧化锂 (100mg)。在25℃搅拌反应，并通过HPLC监测。水解完成后(1 -2小时)，加入三氟乙酸至pH＝2。通过反相色谱法(水/乙腈)纯 化产物，得到250mg的标题化合物，为白色固体。MS和H-NMR与 预期结构一致。

                实施例270

3-氯-β-[[2-[[[3-[[[(苯基甲基)氨基]羰基]氨基]苯基] 羰基]氨基]乙酰基]氨基]苯丙酸的一水合物的制备 步骤A

将N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)(1.0g，0.4mmol)加到在 无水二甲基甲酰胺(6ml)中的实施例269步骤C制得的化合物(1.0g， 0.4mmol)中，然后加入二甲基氨基吡啶(100mg)。20分钟后，加入 DL-3-氨基-3-(3-氯苯基)丙酸乙酯的盐酸盐(1.1g， 0.5mmol)，然后加入NMM(2.0ml)。反应完成后(1-16小时)， 通过反相色谱法(水/乙腈)纯化产物，得到白色固体(0.9g)。MS和 H-NMR与预期结构一致。 步骤B

将步骤A制得的DL-3-氨基-3-(3-氯苯基)丙酸乙酯加 合物(500mg)溶于水/乙腈(1∶1)中，然后加入氢氧化锂(100mg)。 在25℃搅拌反应，并通过HPLC监测。水解完成后(1-2小时)，加 入三氟乙酸至pH＝2。通过反相色谱法(水/乙腈)纯化产物，得到350mg 标题化合物，为白色固体。MS和H-NMR与预期结构一致。

                 实施例271

β-[[2-[[[3-[[[(1-苯基乙基)氨基]羰基]氨基]苯基]羰基] 氨基]乙酰基]氨基]吡啶-3-丙酸的三氟乙酸盐的制备 步骤A

将二甲基甲酰胺(25ml)加到实施例266步骤B的苯基氨基甲酸叔 丁酯，然后加入α-甲基苄胺(1.1当量)。在70℃搅拌反应2小时并 在25℃搅拌1-2小时。加入水，将混合物在乙酸乙酯间分配，分离， 用盐水洗涤并用Na2SO4干燥，得到油状物(6g)。MS和H-NMR 与预期结构一致。 步骤B

将步骤A制得的化合物(6g)溶于二氯甲烷(50ml)中。向溶液 中加TFA(20ml)。搅拌溶液12小时。减压下除去溶剂，然后加入乙 醚。过滤并在真空干燥箱中干燥1-2小时。 步骤C

将N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)(1.0g，0.4mmol)加到在 无水二甲基甲酰胺(6ml)中的步骤B制得的化合物(1.0g，0.4mmol) 中。然后加入二甲基氨基吡啶(100mg)。20分钟后，加入DL-3- 氨基-3-吡啶丙酸乙酯的盐酸盐(1.1g，0.5mmol)，然后加入NMM (2.0ml)。反应完成后(1-16小时)，通过反相色谱法(水/乙腈) 纯化产物，得到白色固体(1.0g)。MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤D

将步骤C制得的DL-3-氨基-3-吡啶基丙酸乙酯加合物 (500mg)溶于水/乙腈(1∶1)中，然后加入氢氧化锂(100mg)。 反应在25℃下搅拌，并通过HPLC监测。水解完成后(1-2小时)， 加入三氟乙酸至pH＝2。通过反相色谱法(水/乙腈)纯化产物，得到 150mg标题化合物，为白色固体。MS和H-NMR与预期结构一致。

                 实施例272

β-[[2-[[[3-[[[[(1H-苯并咪唑-2-基)甲基]氨基]羰基] 氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]-3，5-二氯苯丙酸的三氟乙酸盐的 制备 步骤A

将二甲基甲酰胺(25ml)加到实施例266步骤B的苯基氨基甲酸叔 丁酯中，然后加入2-氨基甲基苯并咪唑(Aldrich)(1.1当量)。将 反应物加热至70℃并搅拌2小时，在25℃搅拌1-2小时。加入水并 将混合物分配到乙酸乙酯中，分离，用盐水洗涤并用Na2SO4干燥，得到 油状物(6g)。MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤B

将步骤A制得的化合物(6g)溶于二氯甲烷(50ml)中。向此混 合物中加入TFA(20ml)。搅拌混合物1-2小时。减压下除去溶剂， 然后加入乙醚。过滤并在真空干燥箱中干燥1-2小时。 步骤C

将N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)(1.0g，0.4mmol)加到在 无水二甲基甲酰胺(6ml)中的步骤B制得的化合物(1.0g，0.4mmol) 中。然后加入二甲基氨基吡啶(100mg)。20分钟后，加入DL-3- 氨基-3-(1，3-二氯苯基)丙酸乙酯的盐酸盐(1.1g，0.5mmol)， 然后加入NMM(2.0ml)。反应完成后(1-16小时)，通过反相色 谱法(水/乙腈)纯化产物，得到白色固体(0.8g)。MS和H-NMR 与预期结构一致。 步骤D

将步骤C制得的DL-3-氨基-3-(1，3-二氯苯基)丙酸乙 酯的加合物(500mg)溶于水/乙腈(1∶1)中，然后加入氢氧化锂 (100mg)。在25℃下搅拌反应，并通过HPLC监测。水解完成后(1 -2小时)，加三氟乙酸至pH＝2。通过反相色谱法(水/乙腈)纯化 产物，得到125mg标题化合物，为白色固体。MS和H-NMR与预期 结构一致。

                实施例273

β-[[2-[[[3-[[[[(3，5-二氯苯基)甲基]氨基]羰基]氨基] 苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]吡啶-3-丙酸的三氟乙酸盐的制备 步骤A

将二甲基甲酰胺(25ml)加到实施例266步骤B中的苯基氨基甲酸 叔丁酯中，接着，加入3，5-二氯苄胺(Lancaster)(1.1当量)。在 70℃，加热搅拌反应2小时，然后在25℃搅拌1-2小时。加入水并将 混合物分配至乙酸乙酯中，分离，盐水洗涤并用Na2SO4干燥。得油状物 (6g)。MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤B

将步骤A制得的化合物(6g)溶于二氯甲烷(50ml)中。加TFA (20ml，4N)，搅拌混合物1-2小时。减压下除去溶剂，然后加入乙 醚。过滤并在真空干燥箱内干燥1-2小时。 步骤C

将N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)(1.0g，0.4mmol)加到步 骤B制得的化合物(1.0g，0.4mmol)的无水二甲基甲酰胺(6ml)溶液 中，然后加入二甲基氨基吡啶(100mg)。20分钟后，加入DL-3- 氨基-3-(吡啶基)丙酸乙酯的盐酸盐(1.1g，0.5mmol)，然后加入 NMM(2.0ml)。反应完成后(1-16小时)，通过反相色谱法(水/ 乙腈)纯化产物，得白色固体(0.8g)。MS和H-NMR与预期结构 一致。 步骤D

将步骤C制得的DL-3-氨基-3-(吡啶基)丙酸乙酯加合物 (500mg)溶于水/乙腈(1∶1)中，接着，加入氢氧化锂(100mg)。 在25℃下搅拌反应，并通过HPLC监测。完成水解后(1-2小时)， 加三氟乙酸至pH＝2。产物用反相色谱法(水/乙腈)纯化，得到125mg 标题化合物，为白色固体。MS和H-NMR与预期结构一致。

               实施例274

3-[[2-[[[3-[[[[(3，5-二氯苯基)甲基]氨基]羰基]氨基] 苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]丁酸的制备 步骤A

将二甲基甲酰胺(25ml)加到实施例266步骤B的苯基氨基甲酸叔 丁酯中，然后加入3，5-二氯苄胺(Lancaster)(1.1当量)。反应在 在70℃加热搅拌2小时，并在25℃搅拌1-2小时。加入水，并将混 合物分配至乙酸乙酯中，分离，盐水洗涤并用Na2SO4干燥。得油状物 (6g)。MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤B

将步骤A制得的化合物(6g)溶于二氯甲烷(50ml)中。向混合 物中加入TFA(20ml)。搅拌混合物1-2小时。减压下除去溶剂， 然后加入乙醚。过滤固体并在真空干燥箱中干燥1-2小时。MS和H -NMR与预期结构一致。 步骤C

将N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)(1.0g，0.4mmol)加到步 骤B制得的化合物(1.0g，0.4mmol)的无水二甲基甲酰胺(6ml)溶液 中，然后加入二甲基氨基吡啶(100mg)。20分钟后，加入DL-3- 氨基-3-(甲基)丙酸乙酯(Aldrich)(1.1g，0.5mmol)，然后加 入NMM(2.0ml)。反应完成后(1-16小时)，产物用反相色谱(水 /乙腈)纯化，得到白色固体(0.8g)。MS和H-NMR与预期结构一 致。 步骤D

将步骤C制得的DL-3-氨基-3-(甲基)丙酸乙酯加合物 (500mg)溶于水/乙腈(1∶1)中，然后加入氢氧化锂(100mg)。 在25℃搅拌反应，并用HPLC监测。完成水解后(1-2小时)，加入 三氟乙酸至pH＝2。产物用反相色谱(水/乙腈)纯化，得到125mg标 题化合物，为白色固体。MS和H-NMR与预期结构一致。

                  实施例275

β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基] 氨基]-3，5-双(1-甲基-乙氧基)苯丙酸的三氟乙酸盐的制备 步骤A

向在丙酮(100ml)中的3，5-二羟基苯甲醛中加入K2CO3(20g) 和2-碘丙烷(20g)。将混合物回流加热并搅拌2天。加水(250ml) 并用乙酸乙酯萃取产物。分离有机层，水洗涤，再用盐水洗涤并用Na2SO4干燥，得3，5-二异丙氧基苯甲醛(12g)，为深色油状物。该油被用 于下一步骤。MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤B

向3，5-二异丙氧基苯甲醛(步骤A)(10g)的乙醇(70ml)溶 液中加入乙酸铵(12.5g)，然后加入丙二酸单乙酯(6.0g)。将反应 混合物回流搅拌5小时。冷却混合物，减压除去乙醇。加入HCl水溶液 (100ml)并用乙酸乙酯分配混合物。弃去有机层并用固体K2CO3碱化 酸层。将反应混合物分配到二氯甲烷(150ml)中，分离并用Na2SO4干燥。蒸去溶剂，得到DL-3-氨基-3-(3，5-二异丙基苯基)丙 酸乙酯，为油状。加入乙醚(100ml)，然后加入在二噁烷中的HCl(20ml， 4N)并激烈搅拌1小时。过滤收集盐酸盐(4.3g)。MS和H-NMR 与预期结构一致。 步骤C

将N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)(1.0g，0.4mmol)加到在 无水二甲基甲酰胺(6ml)中的实施例M的化合物(1.0g，0.4mmol)中。 然后加入二甲基氨基吡啶(100mg)。20分钟后，加入DL-3-氨基 -3-(3，5-二异丙氧基苯基)丙酸乙酯的盐酸盐(1.1g，0.5mmol)， 再加入NMM(2.0ml)。反应完成后(1-16小时)，经反相色谱法 (水/乙腈)纯化产物，得到白色固体(0.8g)。MS和H-NMR与预 期结构一致。 步骤D

将步骤C制得的DL-3-氨基-3-(3，5-二异丙氧基苯基) 丙酸乙酯加合物(500mg)溶解在水/乙腈(1∶1)中，然后加入氢氧 化锂(100mg)。在25℃搅拌反应，并通过HPLC监测。水解完成后(1 -2小时)，加三氟乙酸至pH＝2。产物用反相色谱(水/乙腈)纯化 得到625mg标题化合物，为白色固体。MS和H-NMR与预期结构一 致。

                   实施例276

β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基] 氨基]-3，5-二溴-4-羟基苯丙酸的三氟乙酸盐的制备 步骤A

向4-羟基-3，5-二溴苯甲醛(Aldrich)(10g)的乙醇(70ml) 溶液中加入乙酸铵(2.5当量)，然后加入丙二酸单乙酯(1.1当量)。 将反应混合物回流搅拌5小时。冷却混合物，并减压下除去乙醇。加入 HCl水溶液(100ml)并将混合物分配到乙酸乙酯中。丢弃有机层并用 固体K2CO3碱化酸层。将所得混合物分配到二氯甲烷(150ml)中，分 离并用Na2SO4干燥。蒸去溶剂得到DL-3-氨基-3-(4-羟基- 3，5-二溴苯基)丙酸乙酯，过滤收集固体(1.3g)。MS和H-NMR 与预期结构一致。 步骤B

将N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)(1.0g，0.4mmol)加到在 无水二甲基甲酰胺(6ml)中的实施例M的化合物(1.0g，0.4mmol)中。 然后加入二甲基氨基吡啶(100mg)。20分钟后，加入DL-3-氨基 -3-(4-羟基-3，5-二溴苯基)丙酸乙酯的盐酸盐(1.1g， 0.5mmol)，接着加入NMM(2.0ml)。反应完成后(1-16小时)， 产物用反相色谱(水/乙腈)纯化，得到白色固体(0.89g)。MS和H -NMR与预期结构一致。 步骤C

将步骤B制得的DL-3-氨基-3-(4-羟基-3，5-二溴苯 基)丙酸乙酯加合物(500mg)溶于水/乙腈(1∶1)中，接着加入氢 氧化锂(100mg)。在25℃搅拌反应，并通过HPLC监测。水解完成后 (1-2小时)，加三氟乙酸至pH＝2。产物用反相色谱(水/乙腈) 纯化，得到425mg的标题化合物，为白色固体。MS和H-NMR与预期 结构一致。

                  实施例277

β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基] 氨基]-3，5-二氯-4-羟基苯丙酸的三氟乙酸盐的制备 步骤A

向4-羟基-3，5-二氯苯甲醛(Aldrich)(10g)的乙醇(70ml) 溶液中加入乙酸铵(2.5当量)，然后加入丙二酸单乙酯(1.1当量)。 将反应混合物回流搅拌5小时。冷却混合物，减压下除去乙醇。加入HCl水溶液(100ml)用乙酸乙酯分配混合物。丢弃有机层并用固体K2CO3碱化酸层。将所得混合物分配到二氯甲烷(150ml)中，分离并用Na2SO4干燥。蒸发去溶剂得到DL-3-氨基-3-(4-羟基-3，5-二氯苯 基)丙酸乙酯，为固体(2.5g)。MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤B

将N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)(1.0g，0.4mmol)加到实 施例M的化合物(1.0g，0.4mmol)的无水二甲基甲酰胺(6ml)中。接 着加入二甲基氨基吡啶(100mg)。20分钟后，加入DL-氨基-3- (4-羟基-3，5-二氯苯基)丙酸乙酯的盐酸盐(1.1g，0.5mmol)， 然后加入NMM(2.0ml)。反应完成后(1-16小时)，用反相色谱 (水/乙腈)纯化产物，得到白色固体(0.9g)。MS和H-NMR与预 期结构一致。 步骤C

将步骤B制得的DL-氨基-3-(4-羟基-3，5-二氯苯基) 丙酸乙酯加合物(500mg)溶于水/乙腈(1∶1)中，接着，加入氢氧 化锂(100mg)。在25℃搅拌反应，并用HPLC监测。水解完成后(1 -2小时)，加三氟乙酸至pH＝2。产物用反相色谱(水/乙腈)纯化， 得到325mg标题化合物，为白色固体。MS和H-NMR与预期结构一 致。

                  实施例278

β-[[2-[[[3-[(5，6-二氢-4H-噻嗪-2-基)氨基]苯基] 羰基]氨基]乙酰基]氨基]吡啶-3-丙酸的双(三氟乙酸)盐的制备 步骤A

将实施例104制备化合物(2.0g)加到在帕尔瓶中的无水乙醇 (60ml)中。加入5％的Pd/C(500mg)并将混合物在帕尔装置中， 在50psi压力下氢化2.5小时。反应完成后，用硅藻土过滤除去催化剂钯。 减压下除去溶剂并将样品真空干燥。 步骤B

将步骤A制得的化合物加到乙腈(20ml)中，接着加入2-甲基硫 二氢-1，3-噻嗪(2.0g)中，〔按照J.Chem.Soc.Perkin Transaction， 1943，p.243-245的方法制得〕并加热4小时。反应完成后加水并将 产物用反相色谱(水/乙腈)纯化得到白色固体(1.3g)。MS和H- NMR与预期结构一致。 步骤C

将步骤B制得的DL-3-氨基-3(吡啶基)丙酸乙酯噻嗪加合 物(700mg)溶于水/乙腈(1∶1)中，接着加入氢氧化锂(100mg)。 在25℃搅拌反应，并用HPLC监测。水解完成后(1-2小时)，加三 氟乙酸至pH＝2。产物用反相色谱(水/乙腈)纯化，得到520mg标题 化合物，为白色固体。MS和H-NMR与预期结构一致。

                  实施例279

β-[[2-[[[5-[(氨基亚氨基甲基)氨基]-2-羟基苯基]羰基] 氨基]乙酰基]氨基]-3，5-二氯苯丙酸的三氟乙酸盐的制备 步骤A

将氨基水杨酸(10g)、K2CO3(10g)和碳酸二叔丁酯(12g) 置于盛有水/乙腈(100ml，(1∶1))的烧瓶中。用RPHPLC监测反应过程。 反应完成后，加入稀HCl水溶液(pH＝4)，从混合物中分离出产物， 过滤，得棕红色固体(15g)。将该化合物在70℃的干燥箱中干燥16 小时。MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤B

将N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)(2.0g，0.8mmol)加到在 无水二甲基甲酰胺(4ml)中的步骤A制得的N-Boc化合物(2.0g， 0.4mmol)中。接着，加入二甲基氨基吡啶(100mg)。20分钟后，加 入甘氨酸乙酯的盐酸盐(2.1g，0.9mmol)，然后加入DIEA(2.0ml)。 反应完成后(2小时)，用乙酸乙酯(100ml)萃取产物，用HCl水溶 液洗涤，再用盐水洗并用Na2SO4干燥，得到深色油状物(2.5g)。 MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤C

将步骤B制得的甘氨酸乙酯N-Boc苯甲酰胺加合物(2g)溶于 水/乙腈(1∶1)中，接着，加入氢氧化锂(200mg)。在25℃搅拌反 应，并用HPLC监测。水解完成后(1-2小时)，加盐酸至pH＝4。 用乙酸乙酯(100ml)萃取产物，并用HCl水溶液、盐水洗涤，用Na2SO4干燥，得到深色油状物。将油状物和乙醚激烈搅拌，过滤并在干燥箱中 干燥16小时，得固体(1.9g)。MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤D

将N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)(1.0g，0.4mmol)加到步 骤C制得的甘氨酸化合物(1.0g，0.4mmol)的无水二甲基甲酰胺 (6ml)溶液中。接着加入二甲基氨基吡啶(100mg)。20分钟后， 加入DL-3-氨基-3-(3，5-二氯苯基)丙酸乙酯的盐酸盐(1.1g， 0.5mmol)，接着加入NMM(2.0ml)。反应完成后(1-16小时)， 产物用反相色谱(水/乙腈)纯化，得到白色固体(0.9g)。MS和H- NMR与预期结构一致。 步骤E

将步骤D制得的化合物(6g)溶于二氯甲烷(50ml)中。向该混 合物中加入HCl/二噁烷(20ml，4N)。将该混合物搅拌1-2小时。 减压下除去溶剂，接着加入乙醚。再减压下除溶剂。用反相色谱(水/乙 腈)纯化固体，得白色固体(0.8g)。MS和H-NMR与预期结构一 致。 步骤F

将步骤E的苯胺溶于乙腈(20ml)中。向该混合物中加入吡唑甲咪 的盐酸盐(2g)，然后加入DIEA，将混合物回流搅拌4小时。反应完 成后(1-16小时)，用反相色谱(水/乙腈)纯化产物，得白色固体 (0.9g)。MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤G

将步骤F制得的DL-3-氨基-3-(3，5-二氯苯基)丙酸乙酯 加合物(500mg)溶于水/乙腈(1∶1)中，然后加入氢氧化锂(100mg)。 在25℃搅拌反应，并用HPLC监测。水解完成后(1-2小时)，加入 三氟乙酸至pH＝2。产物用反相色谱(水/乙腈)纯化，得125mg标题 化合物，为白色固体。MS和H-NMR与预期结构一致。

                  实施例280

β-[[2-[[[3-[[(苯氧基氨基)羧基]氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰 基]氨基]吡啶-3-丙酸的三氟乙酸盐的制备 步骤A

向在乙腈中的O-苯基羟基胺盐酸盐(Fluka)(4g)的乙腈溶液 中，加入3-乙氧基羰基苯基异氰酸酯(Lancaster)(5g)和NMM(1 当量)。在70℃搅拌反应1小时。反应完成后，减压下除去溶剂，得到 固体。加入水并过滤得褐色固体(7.5g)。MS和H-NMR与预期结 构一致。 步骤B

将步骤A制得的化合物(7g)溶于水/乙腈(1∶1)中，接着，加 入氢氧化锂(4g)。在25℃搅拌反应，并用HPLC监测。水解完成后 (4-6小时)，加入10％的HCl水溶液至pH＝2。过滤，在70℃的 真空干燥箱中干燥16小时得白色固体(7g)。MS和H-NMR与预 期结构一致。 步骤C

将N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)(1.4g，0.5mmol)加到在 无水二甲基甲酰胺(20ml)中的O-苯基羟基胺的羧酸脲和3-乙氧基 羰基苯基异氰酸酯〔方案V中的(A13)〕(1.0g，0.5mmol)，然后加 入二甲基氨基吡啶(100mg)。1小时后，一次加入在DMF/NMM(1∶ 1)(5.0ml)中的DL-3-氨基-3-(吡啶基)丙酸乙酯的 盐酸盐(2.2g，0.7mmol)，反应完成后，用反相色谱(水/乙腈)纯化产 物，得白色固体(0.8g)。MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤D

将步骤C制得的化合物(300mg)溶于水/乙腈(1∶1)中，然后 加入氢氧化锂(100mg)。在25℃搅拌反应，并用HPLC监测。水解完 成后(1-2小时)，加入三氟乙酸至pH＝2。产物用反相色谱(水/ 乙腈)纯化，得500mg标题化合物，为白色固体。MS和H-NMR与 预期结构一致。

                  实施例281

β-[[2-[[[3-[[[(苯基氨基)氨基]羰基]氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]吡啶-3-丙酸的三氟乙酸盐的制备 步骤A

向在乙腈中的苯肼的盐酸盐(Aldrich)(3.5g)中，加入3-乙 氧基羰基苯基异氰酸酯(Lancaster)(5g)和NMM(1当量)。在 70℃搅拌反应1小时。反应完成后，减压除去溶剂，得固体块状物。加 水并过滤得褐色固体(8.7g)。MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤B

将步骤A制得的化合物(5g)溶于水/乙腈(1∶1)中，然后加入 氢氧化钠(3g)。在25℃搅拌反应，并用HPLC监测。水解完成后(4 -6小时)，加入10％的HCl水溶液调至pH＝4。过滤产物并在70 ℃的真空干燥箱中干燥16小时，得黄色固体(3.2g)。MS和H-NMR 与预期结构一致。 步骤C

将N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)(500mg，0.5mmol)加到 在无水二甲基甲酰胺(20ml)中的步骤B制得的化合物和3-乙氧基羰 基苯基异氰酸酯(1.0g，0.5mmol)中，然后加入二甲基氨基吡啶 (100mg)。1小时后，一次加入在DMF/NMM(1∶1)(5.0ml)中 的甘氨酸DL-3-氨基-3-(吡啶基)丙酸乙酯的盐酸盐(1.0g， 0.7mmol)。反应完成后，产物用反相色谱(水/乙腈)纯化，得到白色 固体(0.8g)。MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤D

将步骤C制得的化合物(300mg)溶于水/乙腈(1∶1)中，然后 加入氢氧化锂(100mg)。在25℃搅拌反应，并用HPLC监测。水解完 成后(1-2小时)，加入三氟乙酸至pH＝2。产物用反相色谱(水/ 乙腈)纯化，得500mg标题化合物，为白色固体。MS和H-NMR与 预期结构一致。

                实施例282

β-[[2-[[[3-[(5-氨基-1，2，4-三唑-3-基)氨基]苯基] 羰基]氨基]乙酰基]氨基]-3，5-二氯苯丙酸的三氟乙酸盐的制备 步骤A

将甘氨酸(20g，266mmol)加入水(20ml)中，然后加入氢氧化 钾(20g，357mmol)，并将混合物在冰浴中冷却至0℃。向该混合物中， 在10分钟内滴加入3-硝基苯甲酰氯(Aldrich)(20g，108nmol)的 乙腈(20ml)溶液。反应完成后(3-4小时)，加入浓盐酸至pH＝ 1，然后加入饱和NaCl水溶液(75ml)。过滤产物，用水洗涤并空气 干燥(22g，产率90％)。 步骤B

将N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)(1.5g，0.7mmol)加到在 无水二甲基甲酰胺(6ml)中的步骤A制得的化合物(1.0g，0.4mmol) 中，然后加入二甲基氨基吡啶(100mg)。20分钟后，加入DL-3- 氨基-3-(3，5-二氯苯基)丙酸乙酯的盐酸盐(1.1g，0.5mmol)， 然后加入NMM(2.0ml)。反应完成后(1-16小时)，加水/HCl水 溶液(5m1)，分离产物并过滤产物，得白色固体(0.9g)。MS和H -NMR与预期结构一致。 步骤C

步骤B制得的化合物的硝基还原，按Tetrahedron Letters，Vol.25 1984，839-842中描述的方法进行。还原反应最好使用2g硝基化合 物。 步骤D

向步骤C制得的化合物(2g)中加入异丙醇(20ml)，然后加入 二苯氧基氰基胺(1g)(Aldrich)。在70℃搅拌反应1小时。反应完 成后，减压除去溶剂，得块状固体。加入乙醚并过滤得褐色固体(3.2g)。 MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤E

向步骤D制得的化合物(1g)中加入乙醇(10ml)，然后加入肼 (1.5ml)(Aldrich)。在25℃搅拌反应1小时。反应完成后，减压 除去溶剂，得块状固体。反应完成后(1小时)。产物用反相色谱(水/ 乙腈)纯化得白色固体(0.7g)。MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤F

将步骤E制得的化合物(300mg)溶于水/乙腈(1∶1)中，然后 加入氢氧化锂(100mg)。在25℃搅拌反应，并用HPLC监测。水解完 成后(1-2小时)，加入三氟乙酸至pH＝2。产物用反相色谱(水/ 乙腈)纯化得430mg标题化合物，为白色固体。MS和H-NMR与预 期结构一致。

                   实施例283

β-[[2-[[[3-[(1，2，3，4-四氢-2，4-二氧嘧啶-6-基) 氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]吡啶-3-丙酸的三氟乙酸盐的制备 步骤A

将3-氨基苯甲酸(4g)加到乙氧基乙醇(4ml)中，然后加入6 -氯尿嘧啶(4g)，并在125℃加热3-4小时。过滤产物，用乙醚洗 涤并空气干燥，得褐色固体(4.5g)。MS和H-NMR与预期结构一 致。 步骤B

将N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)(2g，0.7mmol)加到在无 水二甲基甲酰胺(6ml)中的步骤A制得的化合物(2.0g，0.4mmol)中， 然后加入二甲基氨基吡啶(100mg)。20分钟后，加入甘氨酸叔丁酯的 盐酸盐(1.1g，0.5mmol)，然后加入DIEA(2.0ml)。反应完成后(2 -3小时)，用乙酸乙酯萃取来分离产物，用HCl水溶液，饱和的K2CO3和盐水先后洗涤，并用Na2SO4干燥，得黄色油状物(3g)。MS和H -NMR与预期结构一致。 步骤C

将步骤B制得的化合物(2g)溶于二氯甲烷(50ml)中。向该混 合物中加入TFA(20ml)。将混合物搅拌12小时。减压下除去溶剂， 然后乙醚。过滤并真空干燥1-2小时。得固体(1.8g)。MS和H- NMR与预期结构一致。 步骤D

将N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)(1.5g，0.7mmol)加到在 无水二甲基甲酰胺(6ml)中的实施例283步骤C制得的化合物(1.0g， 0.4mmol)中，然后加入二甲基氨基吡啶(100mg)。20分钟后，加入 DL-3-氨基-3-(3-吡啶基)丙酸乙酯的盐酸盐(1.1g， 0.5mmol)，然后加入NMM(2.0ml)。反应完成后(1-16小时)， 产物用反相色谱(水/乙腈)纯化，得白色固体(0.9g)。MS和H- NMR与预期结构一致。 步骤E

将步骤D制得的化合物(300mg)溶于水/乙腈(1∶1)中，接着 加入氢氧化锂(100mg)。在25℃搅拌反应，并用HPLC监测。水解完 成后(1-2小时)，加入三氟乙酸至pH＝2。产物用反相色谱(水/ 乙腈)纯化得430mg标题化合物，为白色固体。MS和H-NMR与预 期结构一致。

                   实施例284

3，5-二氟-β-[[2-[[[3-[[1，2，3，4-四氢-2，4-二氧嘧啶 -6-基]氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]苯丙酸的制备 步骤A 将N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)(0.6g)加到在无水二甲基 甲酰胺(6ml)中的实施例283步骤C制得的化合物(0.6g)中，然后 加入二甲基氨基吡啶(100mg)。20分钟后，加入DL-3-氨基-3 -(3，5-二氯苯基)乙酸乙酯的盐酸盐(1.1g，0.5mmol)，然后加入 NMM(2.0ml)。反应完成后(1-16小时)，产物用反相色谱(水/ 乙腈)纯化，得白色固体(0.9g)。MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤B

将步骤A制得的化合物(200mg)溶于水/乙腈(1∶1)中，然后 加入氢氧化锂(100mg)。在25℃搅拌反应，并用HPLC监测。水解完 成后(1-2小时)，加入三氟乙酸至pH＝2。产物用反相色谱(水/ 乙腈)纯化，得105mg标题化合物，为白色固体。MS和H-NMR与 预期结构一致。

                   实施例285

3，5-二氯-β-[[2-[[[3-[[亚氨基(1-哌啶基)甲基]氨基] 苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]苯丙酸的三氟乙酸盐的制备 步骤A

按照实施例24的方法制备上述化合物，但是，以等当量的哌啶代替 实施例23步骤B的苄胺，并用等当量的DL-3-氨基-3-(3，5- 二氯苯基)丙酸乙酯的盐酸盐代替实施例1步骤C的DL-3-氨基-3 -(3-吡啶基)丙酸乙酯的二盐酸盐，并进一步使用在实施例23步骤 C中描述的实施例1步骤D的方法。MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤B

将步骤A制得的化合物(200mg)溶于水/乙腈(1∶1)中，然后 加入氢氧化锂(100mg)。在25℃搅拌反应，并用HPLC监测。水解完 成后(1-2小时)，加入三氟乙酸至pH＝2。用反相色谱(水/乙腈) 纯化产物，得105mg标题化合物，为白色固体。MS和H-NMR与预 期结构一致。

                   实施例286

β-[[2-[[[3-[[苯并噁唑-2-基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰 基]氨基]吡啶-3-丙酸的三氟乙酸盐的制备 步骤A

将实施例104制得的化合物(2.0g)加到在帕尔瓶中的无水乙醇 (60ml)中。加入5％Pd/C(500mg)并将混合物在50psi压力下的 帕尔装置中氢化2.5小时。反应完成后，用硅藻土过滤除去催化剂钯。减 压下除去溶剂并将样品真空干燥。 步骤B

将步骤A所得化合物溶于DMF(20ml)中。向该混合物中加入2 -氯苯并噁唑(Aldrich)(2g)和K2CO3(4g)。70℃加热混合物 至苯胺耗尽。反应完成后，产物用反相色谱(水/乙腈)纯化，得到215mg 标题化合物。为白色固体。MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤C

将步骤B所得的化合物(200mg)溶于水/乙腈(1∶1)中，接着， 加入氢氧化锂(100mg)。在25℃搅拌反应混合物，并用HPLC监测。 水解完成后(1-2小时)，加入三氟乙酸至pH＝2。产物用反相色谱 (水/乙腈)纯化，得185mg标题化合物，为白色固体。MS和H-NMR 与预期结构一致。

                 实施例287

β-[[2-[[[3-[[5-苯基-1H-咪唑-2-基)氨基]苯基]羰 基]氨基]乙酰基]氨基]吡啶-3-丙酸的三氟乙酸盐的制备 步骤A

将实施例M步骤B制得的化合物(5g)加到乙醇(100ml)中， 接着，加入二噁烷中的无水HCl(10ml)。将混合物回流加热2小时。 减压下除去溶剂，得其乙酯(5.6g)。MS和H-NMR与预期结构一 致。 步骤B

向步骤A的产物(3g)中加入乙腈(50ml)，接着，加入溴代乙 酰苯(2.7g)和DIEA(2ml)。将混合物加热2小时并减压下除去溶 剂。产物用乙酸乙酯萃取分离并用Na2SO4干燥，得深红色固体(5g)。 MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤C

将步骤B所得的化合物(2g)溶于水/乙腈(1∶1)中，接着加入 氢氧化锂(100mg)。在25℃搅拌反应混合物，并用HPLC监测。水解 完成后(1-2小时)，加HCl水溶液至pH＝7。产物经过滤和真空 干燥得2.6g褐色固体。MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤D

将N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)(0.3g，0.7mmol)加到步 骤C所得的化合物(0.5g，0.4mmol)的无水二甲基甲酰胺(5ml)溶液 中。接着，加二甲氨基吡啶(100mg)。20分钟后，加入DL 3-氨基 -3-(3-吡啶基)丙酸乙酯的盐酸盐(1.1g，0.5mmol)，接着，加 入NMM(2.0ml)。反应完成后(1-16小时)，产物经反相色谱(水 /乙腈)提纯，得白色固体(0.9g)。MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤E

将步骤D所得的产物(250mg)溶于水/乙腈(1∶1)中，接着， 加氢氧化锂(100mg)。于25℃下搅拌反应混合物并以HPLC监测。完 成水解后(1-2小时)，加入三氟乙酸直至pH＝2。经反相色谱提纯 (水/乙腈)，得110mg标题化合物，为白色固体。

MS和H-NMR与预期结构一致。

                 实施例288

3-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基] 氨基]-5-〔(3，5-二氯苯基)氨基〕-5-氧代戊酸的三氟乙酸盐 的制备 步骤A

将β-氨基戊二酸(Sigma)(5g)和三氟乙酸酐(Sigma) (20ml)的混合物在25℃搅拌1-2小时。减压除去溶剂，剩油状物。 加入乙醚(50ml)并过滤得产物(5g)。MS和H-NMR与预期结 构一致。 步骤B

将DMF(20ml)中的步骤A产物和3，5-二氯苯胺(6g)的混 合物搅拌16小时。反应完成后，加入HCl水溶液(100ml)和乙酸乙酯 (100ml)，并将混合物振摇和分离。用盐水洗涤有机层，Na2SO4干燥 得酰胺(4g)。MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤C

用稀氢氧化铵(10ml在50ml水中)和步骤B制得的化合物一起加 热来除去步骤B产物的三氟乙酰基。反应完成后，用10％HCl酸化混合 物并过滤得产物(2.5g)。MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤D

将步骤C制得的化合物(2g)加到乙醇(100ml)中，接着，加入 二噁烷中的无水HCl(10ml)。将混合物回流加热2小时。减压下除去 溶剂，得其乙酯(1.9g)。MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤E

将N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)(0.6g，0.7mmol)加到实 施例M步骤A制得的化合物(0.6g，0.4mmol)的无水二甲基甲酰胺 (5ml)溶液中。接着，加二甲氨基吡啶(100mg)。20分钟后，加 实施例288步骤D制得的化合物(0.7g，0.5mmol)，接着，加NMM (2.0ml)。反应完成后(1-16小时)，产物经反相色谱(水/乙腈) 提纯，得白色固体(0.51g)。MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤F

将步骤E制得的产物(250mg)溶于水/乙腈(1∶1)中，接着， 加氢氧化锂(100mg)。于25℃下搅拌反应混合物并以HPLC监测。完 成水解后(1-2小时)，加入三氟乙酸直至pH＝2。经反相色谱提纯 (水/乙腈)，得110mg标题化合物，为白色固体。

MS和H-NMR与预期结构一致。

                  实施例289

β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]-5-羧苯基]羰基]氨 基]乙酰基]氨基]吡啶-3-丙酸的双(三氟乙酸)盐的制备 步骤A

将N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)(6.5g)加到在无水二甲 基甲酰胺(10ml)中的5-硝基间苯二甲酸的单甲酯(5g)中，接着， 加入二甲氨基吡啶(200mg)。20分钟后，加入β-甘氨酸叔丁酯 (2.6g)，接着，加入NMM(2.0ml)。反应完成后(4小时)，产 物用乙酸乙酯萃取分离，并用Na2SO4干燥，得白色固体(5.1g)。MS 和H-NMR与预期结构一致。 步骤B

将步骤A制得的化合物(5g)溶于二噁烷(50ml)中。向混合物 中加入HCl(20ml，4N)。将混合物搅拌1-2小时。减压除去溶剂， 接着，加入乙醚并减压除去溶剂。过滤固体并真空干燥得白色固体 (4g)。MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤C

将N，N-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)(2g)加到无水二甲基甲 酰胺(10ml)中的步骤B制得的化合物(2g)中，然后加入二甲氨基 吡啶(200mg)。20分钟后，加入DL-3-氨基-3-(3-吡啶基) 丙酸乙酯的盐酸盐(1.6g)，接着，加入NMM(2.0ml)。反应完成 后(4小时)，产物用乙酸乙酯萃取分离并用Na2SO4干燥，得油状物 (3g)。MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤D

步骤C制得的化合物的硝基还原反应，按Tetrahedron Letters，Vol. 25，1984，839-842中所描述的方法。还原反应使2g硝基化合物还原得 到1g产物。MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤E

按照实施例M的方法将步骤D所得化合物(1g)胍基化并用反相 色谱(水/乙腈)纯化，得110mg标题化合物，为白色固体。MS和H- NMR与预期结构一致。 步骤F

将步骤E制得的化合物(100mg)溶于水/乙腈(1∶1)中，接着， 加入氢氧化锂(100mg)。在25℃下搅拌反应混合物，并用HPLC监测。 水解完成后(1-2小时)，加入三氟乙酸至pH＝2。产物用反相色谱 (水/乙腈)纯化，得110mg标题化合物，为白色固体。MS和H-NMR 与预期结构一致。

                  实施例290

β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]-5-羧基苯基]羰基] 氨基]乙酰基]氨基]-3，5-二氯苯丙酸的三氟乙酸盐的制备 步骤A

将N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)(65g)加到无水二甲基 甲酰胺(10ml)中的5-硝基间苯二甲酸单甲酯(5g)中，接着，加 入二甲氨基吡啶(200mg)。20分钟后，加入β-甘氨酸叔丁酯 (2.6g)，接着，加入NMM(2.0ml)。反应完成后(4小时)，产 物用乙酸乙酯萃取分离并用Na2SO4干燥，得白色固体(5.1g)。MS和 H-NMR与预期结构一致。 步骤B

将步骤A制得的化合物(5g)溶于二噁烷(50ml)中。向混合物 中加入无水HCl(20ml，4N)。将混合物搅拌12小时。减压除去溶剂，接 着，加入乙醚并减压除去溶剂。过滤并真空干燥，得白色固体(4g)。 MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤C

将N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)(2g)加到在无水二甲基 甲酰胺(10ml)中的步骤B制得的化合物(2g)中，接着，加入二甲 氨基吡啶(200mg)。20分钟后，加入DL-3-氨基-3-(3，5- 二氯苯基)丙酸乙酯的盐酸盐(1.6g)，接着，加入NMM(2.0ml)。 反应完成后(4小时)，产物用乙酸乙酯萃取分离并用Na2SO4干燥，得 油状物(3g)。MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤D

步骤C制得的化合物的硝基还原反应，按Tetrahedron  Letters，Vol. 25，1984，839-842所描述的方法。还原2g硝基化合物，得1g产物。 步骤E

按照实施例M的方法，使1g步骤D制得的化合物胍基化，用反相 色谱(水/乙腈)纯化，得110mg标题化合物，为白色固体。MS和H- NMR与预期结构一致。 步骤F    

将步骤E制得的化合物(100mg)溶于水/乙腈(1∶1)中，接着， 加入氢氧化锂(100mg)。于25℃下搅拌反应混合物，并用HPLC监测。 水解完成后(1-2小时)，加入三氟乙酸至pH＝2。产物用反相色谱 (水/乙腈)纯化，得25mg标题化合物，为白色固体。MS和H-NMR 与预期结构一致。

                  实施例291

β-[[2-[[[3，5-双[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-3，5-二氯苯丙酸的双(三氟乙酸)盐的制备 步骤A

将甘氨酸(20g，266mmol)加到水(200ml)中，接着，加入氢氧 化钾(20g，357mmol)并在冰浴中冷却至0℃。在10分钟内向此混合 物中滴加入在乙腈(20ml)中的3，5-二硝基苯甲酰氯(20g， 108mmol)。反应完成后(3-4小时)，加入浓盐酸至pH＝1。过滤， 用水洗涤并空气干燥，得产物(20g)。MS和H-NMR与预期结构 一致。 步骤B

将N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)(1.2g)加到在无水二甲 基甲酰胺(10ml)中的步骤A所得化合物(2g)中，接着，加入二甲 氨基吡啶(200mg)。20分钟后，加入DL-3-氨基-3-(3，5- 二氯苯基)丙酸乙酯的盐酸盐(1.2g)，接着，加入NMM(2.0ml)。 反应完成后(4小时)，产物用乙酸乙酯萃取分离，并用Na2SO4干燥， 得黄色油状物(2.1g)。MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤C

步骤B制得的化合物的硝基还原反应的条件符合Tetrahedron Letters，Vol.25，1984，839-842中所描述的。使用2.5g硝基化合物，得 2.1g 3，5-二苯胺基衍生物。MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤D

用实施例M的方法，将2g步骤C所得化合物胍基化(使用4g胍基化 试剂)，并用反相色谱(水/乙腈)纯化，得800mg白色固体。MS和H -NMR与预期结构一致。 步骤E

将步骤D所得化合物(500mg)溶于水/乙腈(1∶1)中，接着， 加入氢氧化锂(100mg)。在25℃搅拌反应混合物，并用HPLC监测。 水解完成后(1-2小时)，加入三氟乙酸至pH＝2。产物用反相色谱 (水/乙腈)纯化，得450mg标题化合物，为白色固体。MS和H-NMR 与预期结构一致。

                  实施例292

β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]-5-(三氟乙酰基) 氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]-3，5-二氯苯丙酸的三氟乙酸盐的 制备 步骤A

将在二氯甲烷中的5-氨基-3-硝基苯甲酸(Lancaster)(3g) 和三氟乙酸酐(Sigma)(20ml)的混合物，在25℃搅拌2天。减压 除去溶剂，剩油状物。加入水(50ml)并过滤，得产物(4.5g)。在 70℃，真空干燥产物16小时。MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤B

将N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)(3g)加到在无水二甲基 甲酰胺(4ml)中的步骤A所得化合物(2.7g)中，接着，加入二甲氨 基吡啶(200mg)。20分钟后，加入甘氨酸叔丁酯的盐酸盐(2.7g)， 接着，加入NMM(2.0ml)。反应完成后(4小时)，产物用乙酸乙酯 提取分离并用Na2SO4干燥，得黄色油状物(3.3g)。MS和H-NMR 与预期结构一致。 步骤C

将步骤B所得化合物(3g)溶于二氯甲烷(50ml)中。向混合物 中加TFA(20ml)。搅拌混合物12小时。减压除去溶剂，接着，加入 乙醚。过滤并在真空干燥箱中干燥1-2小时，得固体(2.7g)。MS 和H-NMR与预期结构一致。   步骤D

将N，N′-二琥珀酰亚胺硫酸酯(DSC)(1.5g)加到在无水二甲 基甲酰胺(10ml)中的步骤C的产物(1.2g)中，接着，加二甲氨基 吡啶(200mg)。20分钟后，加入DL-3-氨基-3-(3，5-二氯 苯基)丙酸乙酯的盐酸盐(1.7g)，接着，加NMM(2.0ml)。反应 完成后(4小时)，产物用乙酸乙酯萃取分离并用Na2SO4干燥，得黄色 油状物(2.1g)。MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤E

步骤D制得的化合物硝基还原的条件符合Tetrahedron Letters，Vol， 25，1984，839-842的方法中所描述的。使1.8g硝基化合物还原成1.8g 3 -苯胺衍生物。MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤F

按照实施例M的方法，使1.5g步骤E所得化合物胍基化(使用3g 的胍基化剂)，并用反相色谱(水/乙腈)纯化，得750mg上述化合物， 为白色固体。MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤G    

将步骤F所得化合物(500mg)溶于水/乙腈(1∶1)中，接看， 加入氢氧化锂(100mg)。在25℃搅拌反应混合物，并用HPLC监测。 水解完成后(1-2小时)，加三氟乙酸至pH＝2。产物用反相色谱(水 /乙腈)纯化，得300mg标题化合物，为白色固体。MS和H-NMR与 预期结构一致。

                 实施例293

β-[[2-[[[3-(乙酰氨基)-5-[(氨基亚氨基甲基)氨基] 苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]-3，5-二氯苯丙酸的三氟乙酸盐的制备 步骤A

将在二氯甲烷中的5-氨基-3-硝基苯甲酸(Lancaster)(5g) 和乙酸酐(Sigma)(10ml)的混合物，在25℃搅拌2天。减压除去溶 剂，剩下油状物。向油状物中加水(50ml)并过滤，得产物(45g)。 产物在70℃下真空干燥箱中干燥16小时。MS和H-NMR与预期结 构一致。 步骤B

将N，N′-二琥珀酰亚胺硫酸酯(DSC)(3g)加到在无水二甲基 甲酰胺(6ml)中的步骤A所得化合物(3g)中，接着，加入二甲氨基 吡啶(200mg)。20分钟后，加入甘氨酸叔丁酯的盐酸盐(2.1g)， 接着，加入NMM(2.0ml)。反应完成后(4小时)，产物用乙酸乙酯 萃取分离并用Na2SO4干燥，得黄色油状物(3.3g)。MS和H-NMR 与预期结构一致。 步骤C

将步骤B所得化合物(3g)溶于二氯甲烷(10ml)中。向混合物 中加TFA(10ml)。搅拌混合物12小时。减压除去溶剂，接着，加入 乙醚。过滤并在真空干燥箱中干燥1-2小时，得固体(3g)。MS和 H-NMR与预期结构一致。 步骤D

将N，N′-二琥珀酰亚胺硫酸酯(DSC)(1.5g)加到在无水二甲 基甲酰胺(10ml)中的步骤C所得产物(1.2g)中，接着，加入二甲 氨基吡啶(200mg)。20分钟后，加入DL-3-氨基-3-(3，5- 二氯苯基)丙酸乙酯的盐酸盐(1.7g)，接着，加NMM(2.0ml)。 反应完成后(4小时)，产物用乙酸乙酯萃取分离并用Na2SO4干燥，得 褐色固体(2g)。MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤E

步骤D制得的化合物硝基还原的条件符合Tetrahedron Letters，Vol， 25，1984，839-842中所描述的。1.5g硝基化合物经还原得到1.5g 3- 苯胺衍生物。MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤F

按照实施例M的方法使1.4g步骤E所得的化合物胍基化(使用2g 胍基化剂)，并用反相色谱(水/乙腈)纯化，得750mg上述化合物，为 白色固体。MS和H-NMR与预期结构一致。 步骤G

将步骤F制得的化合物(300mg)溶于水/乙腈(1∶1)中，接着， 加入氢氧化锂(100mg)。在25℃搅拌反应混合物，并用HPLC监测。 水解完成后(1-2小时)，加三氟乙酸至pH＝2。产物用反相色谱(水 /乙腈)纯化，得200mg标题化合物，为白色固体。MS和H-NMR与 预期结构一致。

                实施例294-296 步骤A

向备有机械搅拌器的2L圆底三颈瓶中加入β-氨基-3，5-二氯苯 丙酸(52.78g，0.2255mol)。将β-氨基-3，5-二氯苯丙酸溶于900ml 丙酮中，并加入300ml水和碳酸钠(3.0当量，71.70g，0.6765mol)， pH＝10。将溶解于600ml丙酮中的FMOC琥珀酰亚胺碳酸酯(Sigma Chemical  Co.，1.0当量，76.06g，0.2255mol)，在45分钟内，经加液 漏斗缓慢加入该碱性水溶液中。在室温下搅拌反应16小时。HPLC分析 (水，C18，反相，25em柱，50-90％乙腈水溶液30分钟内)显示 β-氨基-3，5-二氯苯丙酸耗尽。真空下从反应混合物中除去丙酮。 用3.0N盐酸将碱性水相酸化至pH＝3。在2L的分液漏斗中用1L乙酸 乙酯洗涤酸层，除去水层并洗涤有机层(2×250ml水，2×250ml饱 和氯化钠)。干燥有机层(MgSO4)，过滤并真空浓缩，得300ml。加 入石油醚(300ml)，产生白色絮状固体沉淀。空气干燥24小时后，第 一次分离得38.49g(产率38％)。保存母液以便进一步使用。

NMR(DMSO)：2.62-2.72(m，2H)，4.15-4.32(m，1H)，7.21-7.40 (m，5H)，7.45(s，1H)，7.60-7.70(m，2H)，7.85(d，J＝7 Hz，2H)，7.99(d，J＝7 Hz，1H)，MS(FAB)m/e(相对密度)：456.2(20)，179(100)。 步骤B

将王树脂(Wang resin)(25.0g，28.0mmol)置于装有搅拌器和 氮气导入管的1L圆底三颈瓶中。用250ml二氯甲烷溶胀树脂15分钟， 然后排去。将步骤A制得的FMOC保护的氨基酸(25.66g，56.0mmol) 溶解到一装有二氯甲烷/二甲基甲酰胺(4∶1，125ml)的500ml圆底烧 瓶中，通过注射器加入二异丙基碳化二亚胺(DIC，8.77ml，56.0mmol)， 接着，加入二甲氨基吡啶(DMAP，0.342g，2.8mmol)，使其活化。在 25℃搅拌溶液15分钟，然后加入预溶胀的王树脂。在25℃搅拌淤浆2 小时。排液并用甲醇(3×250ml)、二氯甲烷(3×250ml)和乙醚 (3×250ml)洗涤。在250ml二氯甲烷中溶胀树脂并排液。将活化后 的步骤A产物(12.83g，28.0mmol，DIC，4.36ml，28.0mmol，DMAP，0.170g， 1.4mmol在100ml二氯甲烷/二甲基甲酰胺4∶1)加到溶胀后的树脂中。 在25℃搅拌淤浆1小时。树脂被排液并洗涤。树脂结合物的元素分析如 下：

计算值：C，81.31；H，6.30；N，1.05；Cl，5.33。

实测值：C，79.03；H，6.37；N，1.16；Cl，5.74。 步骤C

用250ml二氯甲烷将装有搅拌器和氮气导入管的1L圆底三颈瓶中的 步骤B产物(28.0mmol)预溶胀15分钟。排去溶剂并加入20％哌啶/ 二甲基甲酰胺溶液(125ml)，在25℃搅拌淤浆2小时。用二甲基甲酰 胺(3×100ml)、甲醇(3×100ml)、二氯甲烷(3×100ml)和 乙醚(3×100ml)洗涤树脂。将树脂真空干燥1小时。将FMOC-甘 氨酸(20.81g，70.0mmol，DIC，10.95ml，70.0mmol，DMAP，0.85g， 7.0mmol。在150ml 4∶1的二氯甲烷/二甲基甲酰胺中)活化溶液通过 注射器加到预溶胀的树脂中，并在25℃搅拌2小时。树脂被排液并洗涤 (二氯甲烷、甲醇和乙醚，每种3×100ml)。用250ml二氯甲烷预溶 胀树脂15分钟，排液并将活化后的FMOC-甘氨酸(10.45g，35.0mmol， DIC，5.42ml，35.0mmol，DMAP，0.42g，3.5mmol在100ml 4∶1的二氯甲 烷/二甲基甲酰胺中)溶液经注射器加到溶胀后的树脂中。将淤浆在25 ℃搅拌1小时。树脂排液并洗涤(二氯甲烷、甲醇、乙醚，每种3×100ml)。 真空干燥树脂1小时。Kaiser试验(Kaiser，E.，用来检查固相合成肽的无 末端游离氨基的颜色反应。Anal.Biochem.1970，34，595-598)显 示偶合完成。 步骤D

在一个500ml备有磁力搅拌器的圆底烧瓶中，将3-氨基-苯甲酸 (Aldrich，10.0g，50.8mmol)溶于50ml二噁烷和137ml 10％碳酸钠 中。将搅拌后的溶液冷却至0℃(冰/水)，并在15分钟内滴加入氯甲酸 芴甲酯溶液(13.78g，53.3mmol，在50ml二噁烷中)。将反应温热至25 ℃过夜。HPLC分析(如前所述)显示起始物耗尽。向反应混合物中加 入500ml水，立刻产生白色沉淀。收集固体。用10％的柠檬酸洗涤并真 空干燥。分离得白色絮状固体15.23g(产率83.4％)。

NMR(DMSO)：4.18-4.25(m，3H)，7.25-7.41(m，6H)，7.62-7.72 (m，3H)，7.89-7.90(m，3H)。MS(FAB)：产物的M+H离子，在m/z 360。 步骤E

将20.0g步骤C产物(22.4mmol)在500ml二氯甲烷中预溶胀30 分钟。排去溶剂，并加入250ml 20％哌啶/二甲基甲酰胺，在25℃搅 拌40分钟。树脂被排液并用二甲基甲酰胺、甲醇、二氯甲烷和乙醚(每 种溶剂，3×150ml)洗涤，Kaiser试验显示去保护反应完成。将树脂 真空干燥45分钟。然后用250ml二氯甲烷预溶胀树脂，排去溶剂并将活 化后的步骤D产物(13.54g，35.5mmol，DIC，5.55m，35.5mmol，DMAP， 0.88g，7.2mmol，在100ml 4∶1二氯甲烷/二甲基甲酰胺中)加到预溶胀 后的树脂中。在25℃搅拌反应16小时。树脂被排液并如上述洗涤。Kaiser 试验显示反应未完全。重复进行偶合反应，树脂被排液并洗涤。重复Kaiser 试验显示偶合反应完成。小部分树脂被FMOC去保护(30分钟用20％ 哌啶/二甲基甲酰胺)，并以NMR分析树脂(1小时用95％三氟乙酸/ 水)。

NMR(DMSO)：2.68-2.78(m，2H)，3.88(d，J＝7Hz，2H)，5.06- 5.20(m，1H)，7.32-7.69(m，4H)，7.54(t，J＝8Hz，1H)，7.76(s，1H)，7.83(d， J＝8Hz，1H)，8.57(d，J＝9Hz，1H)，8.87(t，J＝9Hz，1H)。 步骤F

用20ml二甲基甲酰胺预溶胀在100ml圆底烧瓶中的步骤E的树脂 (2.0g，2.0mmol)，排液，然后在25℃，用20ml 20％哌啶/二甲基甲 酰胺处理40分钟。过滤树脂，并用二甲基甲酰胺、甲醇、二氯甲烷和乙 醚(每种溶剂3×10ml)洗涤。Kaiser试验无确定结果，重复进行去保 护和洗涤。重复Kaiser试验仍无确定结果，与所用物质一样。将2.0g树 脂分成1.0g的两部分并置于2打兰的玻璃瓶中。加入二甲基甲酰胺 (4.0ml/每瓶)，接着，加入异硫氰酸甲酯(1.4622g，20mmol)。将小 瓶盖紧并在80℃加热4小时。过滤树脂并用二甲基甲酰胺、甲醇、二氯 甲烷和乙醚(每种溶剂3×10ml)洗涤，真空干燥树脂。 步骤G

将步骤F制得的树脂转移至一个100ml反应器中。用二氯甲烷(3 ×10ml)溶胀树脂并在排液。在另一小瓶中，将2-氯-1-甲基吡啶 鎓碘化物(Aldrich，0.405g，1.58mmol)溶于5ml 4∶1二甲基甲酰胺/ 二氯甲烷中，并加到预溶胀后的树脂中，接着，加入三乙胺(0.441ml， 3.17mmol)。在25℃搅拌反应淤浆8小时。树脂被排液，并用二甲基 甲酰胺和二氯甲烷(每种溶剂 3×10ml)洗涤。真空干燥树脂。 步骤H

将步骤G制得的树脂(0.666g，0.7mmol)转移至一个15ml反应器 中，并将其悬浮于3.5ml二甲基甲酰胺/二氯甲烷(1∶1)中。向树脂淤 浆中加入甲胺(2.0M在四氢呋喃中，4.4ml，8.8mmol)并在25℃搅拌 16小时。树脂被排液，用二甲基甲酰胺、甲醇、二氯甲烷和乙醚(每种 溶剂3×10ml)洗涤。真空干燥树脂1小时。 步骤1

将步骤G的树脂产品(0.666g，0.7mmol)转移至一个15ml反应器 中，并将其悬浮于3.5ml二甲基甲酰胺/二氯甲烷(1∶1)中。向树脂淤 浆中加入乙胺(2.0M在四氢呋喃中，4.4ml，8.8mmol)，并在25℃搅 拌16小时。树脂被排液，用二甲基甲酰胺、甲醇、二氯甲烷和乙醚(每 种溶剂3×10ml)洗涤。真空干燥树脂1小时。 步骤J

将步骤G的树脂产品(0.666g，0.7mmol)转移至一个15ml反应器 中，并将其悬浮于3.5ml二甲基甲酰胺/二氯甲烷(1∶1)中。向树脂淤 浆中加入异丙胺(0.749ml，8.8mmol)，并在25℃搅拌16小时。树脂 被排液，用二甲基甲酰胺、甲醇、二氯甲烷和乙醚(每种溶剂3×10ml) 洗涤。真空干燥树脂1小时。

                   实施例294

(±)3，5-二氯-β-[[2-[[[3-[[(甲氨基)(甲基亚氨基) 甲基]氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]苯丙酸的三氟乙酸盐的制备

在25℃，用2.5ml 95％的三氟乙酸/水处理步骤H的树脂产品1 小时。过滤，收集滤液，用2×1ml的50％三氟乙酸/二氯甲烷洗涤树 脂，并收集滤液。再用1ml二氯甲烷洗涤树脂。将全部滤液合并入一个 衡重2打兰的小瓶中，并在氮气下浓缩。加入甲苯(1ml)以除去过量 的三氟乙酸，并将样品在氮气下再次浓缩。最后加入二氯甲烷(1ml) 并将样品再浓缩，得198.3mg金黄色油状物。HPLC(如前所述， 220nM)显示91％纯度的主峰。NMR(DMSO)：2.72   (d，j＝7Hz，2H)，2.79(s，6H)，3.87(d，j＝7 Hz，2H)，5.11-   5.20(m，1H)，7.30-7.58(m，5H)，7.70-7.80(m，4H)，8.55   (d，j＝8 Hz，1H)，8.76(t，j＝3Hz，1H)，9.39(s，1H). MS(ES)：产物离子，m/z 480。

                  实施例295

(±)3，5-二氯-β-[[2-[[[3-[[(乙基氨基)(甲基亚氨 基)甲基]氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]苯丙酸的三氟乙酸盐的制备

在25℃，用2.5ml 95％的三氟乙酸/水处理步骤I的树脂产品1小 时。收集滤液，用2×1ml的50％三氟乙酸/二氯甲烷洗涤树脂，并收 集滤液。再用1ml二氯甲烷洗涤树脂。将全部滤液合并入一个衡重2打 兰的小瓶中，在氮气流下浓缩滤液。加入甲苯(1ml)以除去过量的三 氟乙酸，并在氮气下再次浓缩样品。最后加入二氯甲烷(1ml)并将样 品再浓缩，得261.2mg金黄色油状物。HPLC(如前所述，220nM)显 示94％纯度的主峰。NMR(DMSO)：1.11   (t，j＝7Hz，3H)，2.72(d，J＝7 hZ，2H)，2.79(s，3H)，3.25-   3.60(m，2H)，3.87(d，j＝7 Hz，2H)，5.02-5.20(m，1H)，   7.30-7.58(m，5H)，7.70-7.85(m，4H)，8.55(d，j＝8 Hz，   1H)，8.76(t，j＝3Hz，1H)，9.40(s，1H). MS(ES)：产物离子，m/z 494。

                   实施例296

(±)3，5-二氯-β-[[2-[[[3-[[[(1-甲基乙基)氨基] (甲基亚氨基)甲基]氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]苯丙酸的三氟乙 酸盐的制备

在25℃，用2.5ml 95％的三氟乙酸/水处理步骤J的树脂产品1小 时。收集滤液，用2×1ml的50％三氟乙酸/二氯甲烷洗涤树脂，并收 集滤液。再用1ml二氯甲烷洗涤树脂。将全部滤液合并入一个衡重2打 兰的小瓶，并在氮气下浓缩滤液。加入甲苯(1ml)以除去过量的三氟 乙酸，并在氮气下再次浓缩样品。最后加入二氯甲烷(1ml)，并再浓 缩样品，得330.3mg金黄色油状物。HPLC(如前所述，220nM)显示 89％纯度主峰。

NMR(DMSO)：1.15(d，j＝7Hz，6H)，2.72(d，j＝7Hz，2H)，2.79

(d，j＝7Hz，3H)，3.79-3.92(m，3H)，5.05-5.20(m，1H)，

7.30-7.50(m，5H)，7.60-7.78(m，4H)，8.55(d，j＝8Hz，

1H)，8.76(t，j＝3Hz，1H)，9.40(s，1H). MS(ES)：产物离子，m/z 508。

                  实施例297-299 步骤A

向一配备有磁力搅拌器的50ml圆底烧瓶中加入3-氨基-3-(4 -氟-苯基)-丙酸(0.300g，1.64mmol)。将其溶于1ml丙酮和6ml 水中，并加碳酸钠(0.53g，4.92mmol)，pH＝10。在20分钟内，将溶 解在6ml丙酮中的FMOC琥珀酰亚胺碳酸酯(Sigma，Chemical，Co.， 0.553g，1.64mmol)通过加液漏斗缓慢加到此碱性水溶液中。在室温下搅 拌反应16小时。HPLC分析(水，C18，反相，25cm柱，50-90％ 乙腈水溶液30分钟内)显示起始物耗尽。真空从反应混合物中除去丙酮。 用3.0N盐酸酸化碱性水相至pH＝3。在50ml分液漏斗中，用15ml乙 酸乙酯洗涤酸层，丢弃水层并洗涤有机层(2×30ml水，2×30ml饱 和氯化钠)。干燥有机层(MgSO4)，过滤并真空浓缩。加入石油醚 (10ml)，得到白色絮状固体沉淀，空气干燥24小时，一次分离得0.582g (产率87.5％)。保存母液以便进一步使用。

NMR(DMSO)：2.55-2.75(m，2H)，4.10-4.30(m，3H)，4.85-4.95 (m，1H)，4.85-4.95(m，1H)，7.12(t，J＝8Hz，2H)，7.24-7.42(m，5H)，7.64(d， J＝8Hz，2H)，7.82-7.94(m，3H)。MS(FAB)：产物的M+Li离子，m/z 412。 步骤B

将王树脂(Wong resin)(0.60g，0.36mmol)置于一个100ml的 圆底烧瓶中。用8ml二氯甲烷溶胀树脂15分钟，然后排液。在另一个 25ml的圆底烧瓶中，通过将FMOC保护的步骤A的氨基酸(0.365g， 0.9mmol)溶于二氯甲烷/二甲基甲酰胺(4∶1)中，并通过注射器加入 二异丙基碳化二亚胺(DIC，0.141ml，0.90mmol)而使其活化，接着，加 入二甲氨基吡啶(DMAP，22mg，0.18mmol)。在25℃搅拌溶液15分钟， 然后加到预溶胀的王树脂中。在25℃搅拌淤浆2小时。反应混合物被排 液并用甲醇(3×10ml)、二氯甲烷(3×10ml)和乙醚(3×10ml) 洗涤。为了确保反应完全，偶合反应程序再重复一遍。真空干燥后，用 8ml二氯甲烷溶胀树脂，排液，并加入8ml 20％的哌啶/二甲基甲酰胺， 并搅拌淤浆30分钟。树脂被排液并如上述进行洗涤。真空干燥树脂1小 时。树脂结合物的元素分析如下：

计算值：C，88.23；H，7.36；N，0.76；F，1.03。

实测值：C，87.13；H，7.31；N，0.79；F，1.06。 步骤C

用8ml二氯甲烷溶胀步骤B所得树脂，然后排液。将活化后的FMOC -甘氨酸溶液(0.267g，0.90mmol，DIC，0.140ml，0.90mmol，DMAP，22mg， 0.18mmol。在10ml二氯甲烷/二甲基甲酰胺中，4∶1)通过注射器加到 预溶胀后的树脂中，并在25℃搅拌2小时。树脂被排液并洗涤(二氯甲 烷、甲醇和乙醚，每种溶剂3×10ml)。用20ml二氯甲烷预溶胀树脂 15分钟，排液并重复偶合反应以确保反应完全。Kaiser试验(Kaiser，E.， 用来检查固相合成肽中末端游离氨基的颜色反应。Anal.Biochem.1970， 34，595-598)显示偶合完成。将树脂悬浮于8ml 20％的哌啶/二甲 基甲酰胺中30分钟，排液并用二甲基甲酰胺、甲醇、二氯甲烷和乙醚(每 种溶剂3×10ml)洗涤。真空干燥树脂1小时。 步骤D

在备有磁力搅拌器的一个500ml的圆底烧瓶中，将3-氨基-苯甲 酸(Aldrich，10.0g，50.8mmol)溶于50ml二噁烷和133ml 10％的碳酸 钠中。将搅拌的溶液冷却至0℃(冰/水)并在15分钟内，滴加入氯甲酸 芴甲酯的溶液(13.78g，53.3mmol，在50ml二噁烷中)。反应温热至25 ℃过夜。HPLC分析(如前所述)显示起始物耗尽。向反应混合物加入 500ml水，立刻产生白色沉淀。收集固体。用10％的柠檬酸洗涤，并真 空干燥。分离得白色絮状固体15.23g(产率83.4％)。

NMR(DMSO)：4.18-4.25(m，3H)，7.25-7.41(m，6H)，7.62-7.72 (m，3H)，7.80-7.90(m，3H)。MS(FAB)：产物的M+H离子，在m/z 360。 步骤E

用10ml二氯甲烷预溶胀步骤C的树脂，排液并将步骤D的活化产 物(0.343g，0.90mmol，DIC，0.141ml，0.90mmol，DMAP，22mg， 0.18mmol。在5ml二氯甲烷/二甲基甲酰胺4∶1中)加到预溶胀后的树 脂中。在25℃搅拌反应混合物16小时。树脂被排液并如前所述洗涤。 Kaiser试验显示反应未完成。重复偶合反应，树脂被排液并洗涤。重复 Kaiser试验显示偶合反应完成。真空干燥树脂1小时。 步骤F

将步骤E的树脂置于一个100ml圆底烧瓶中，用10ml二甲基甲酰胺 预溶胀，排液，然后在25℃，用20ml 20％哌啶/二甲基甲酰胺处理 10分钟。树脂被排液并重复上面操作。过滤树脂并用二甲基甲酰胺、甲 醇、二氯甲烷和乙醚(每种溶剂3×10ml)洗涤。Kaiser试验显示去保 护完成。用二甲基甲酰胺(8.0ml)将树脂转置于2打兰的玻璃瓶中， 然后加入异硫氰酸甲酯(0.526g，7.2mmol)。将小瓶盖紧并在80℃加 热4小时，过滤树脂并用二甲基甲酰胺、甲醇、二氯甲烷和乙醚(每种 溶剂3×10ml)洗涤。真空干燥树脂。树脂结合物的元素分析如下：

计算值：C，83.56；H，6.46；N，2.19；F，1.03；S，1.35。

实测值：C，82.32；H，6.67；N，2.53；F，1.02；S，1.44。 步骤G

将步骤F的树脂(100mg，0.06mmol)移至一个2打兰玻璃瓶中。 用二氯甲烷(3×1ml)溶胀树脂，排液。在另一小瓶中，将2-氯-1 -甲基吡啶鎓碘化物(Aldrich，18.4mg，0.072mmol)溶于3ml的二甲基 甲酰胺/二氯甲烷4∶1中，并将其加入预溶胀后的树脂中，接着，加入三 乙胺(20.1μl，0.144mmol)。在25℃搅拌反应淤浆16小时。树脂被排 液，用二甲基甲酰胺、甲醇、二氯甲烷和乙醚(每种溶剂3×4ml)洗 涤。真空干燥树脂3小时。用95％的三氟乙酸(1.5ml)处理树脂1小 时。过滤树脂并用50％三氟乙酸/二氯甲烷(2×1.0ml)，接着用二氯 甲烷(1×1.0ml)洗涤。将滤液合并入一个衡重的2打兰小瓶，并真 空干燥。

                 实施例297

(±)β-[[2-[[[3-[[(乙基氨基)(甲基亚氨基)甲基]氨基] 苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]-4-氟苯丙酸的三氟乙酸盐的制备 分离得金黄色油状物28.1mg。NMR(DMSO)：1.13

(t，j＝7Hz，3H)，2.65-2.75(m，2H)，2.76-2.85(m，3H)，

3.25(t，j＝3Hz，2H)，3.80-3.95(m，2H)，5.10-5.21(m，1H)，

7.13(t，j＝8Hz，2H)，7.30-7.40(m，3H)，7.52(t，j＝8Hz，

1H)，7.65-7.85(m，3H)，8.49(d，j＝8Hz，1H)，8.71(t，j＝8 Hz，1H)，9.40(s，1H)。HPLC(如前所述，220nM)90.15％纯度。MS (ES)：产物离子m/z 444。

                实施例298

(±)4-氟-β-[[2-[[[3-[[[(1-甲基乙基)氨基](甲 基亚氨基)甲基]氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]苯丙酸的三氟乙酸盐 的制备

分离得金黄色油状物44.9mg。NMR(DMSO)：1.16

(d，j＝7Hz，6H)，2.61-2.70(m，2H)，2.73-2.80(m，3H)，

3.75-3.90(m，3H)，5.10-5.21(m，1H)，7.11(t，j＝8Hz，

2H)，7.25-7.37(m，3H)，7.49(t，j＝8Hz，1H)，7.59-7.82

(m，3H)，8.49(d，j＝8Hz，1H)，8.70(t，j＝3Hz，1H)9.40 (s，1H)。HPLC(如前所述，220nM)98％纯度。MS(ES)：产物 离子m/z 458。

                实施例299

(±)4-氟-β-[[2-[[[3-[[[(4-吡啶基甲基)氨基](甲 基亚氨基)甲基]氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]苯丙酸的三氟乙酸盐 的制备

分离得金黄色油状物31.6mg。NMR(DMSO)：2.60- 2.72(m，2H)，2.81-2.89(d，j＝7Hz，3H)，3.80-3.95(m， 2H)，4.61-4.80(bs，2H)，5.10-5.21(m，1H)，7.01-7.22(m， 4H)，7.29-7.44(m，3H)，7.50(t，j＝8Hz，1H)，7.65-7.85 (m，3H)，8.40-8.50(d，j＝8Hz，1H)，8.70-8.85(m，3H)， 9.73(s，1H)。HPLC(如前所述，220nM)98％纯度。MS(ES)： 产物离子m/z 507。

按照实施例294-299中所述相类似的固相合成法制备下列化合 物。

                  实施例361

(±)3，5-二氯-β-[[2-[[[3-[(1，4，5，6-四氢-5，5- 二甲基嘧啶-2-基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]苯丙酸乙酯的 三氟乙酸盐的制备 步骤A

向在乙醇(100ml)中的1-(3-羧基苯基)-2-硫脲(实施 例236步骤A制得)(10.00g，0.051mol)的悬浮液中加入碘代甲烷 (3.5ml)，并在氮气下，在70℃加热2.5小时。减压浓缩反应混合物， 将残余物与含10％EtOAc的乙醚液(2×100ml)一起研制，并滗析 出上清液。将所得固体真空干燥2小时，将其溶于DMF(75ml)中， 并在1小时内滴加入在DMF(20ml)中的2，2-二甲基-1，3-丙二 胺(42g，0.41mol)溶液。在氮气下，80℃，将反应混合物加热16小 时并同时用在5％次氯酸钠溶液中的甲硫醇捕集，真空蒸馏DMF，将残 余物溶于水(50ml)中，用乙醚(3×25ml)洗涤。用2N HCl酸化 水相至pH4.0，得到白色沉淀。过滤，用水和乙醚洗涤，干燥，得所要 产物80g(63％)，为白色粉末。1H-NMR和MS与预期结构一致， 步骤B

向在DMF(15ml)中的步骤A的HCl盐(1.0g，0.0035mol)的悬 浮液中加入N-甲基吗啉(0.46ml)，并在冰盐浴中冷却至-10℃。 然后用氯甲酸异丁酯(0.45ml)处理反应混合物，在-10℃搅拌30分 钟，在0℃通过向在DMF(5ml)中的甘氨酸叔丁酯盐酸盐(0.6g) 溶液中加入N-甲基吗啉(0.46ml)来形成胺。在-10℃搅拌反应混 合物1小时，再在氩气下，室温下搅拌16小时。真空蒸馏DMF，用5 ％碳酸氢钠(25ml)和EtOAc(25ml)处理残余物，并在室温下搅拌 30分钟。得白色沉淀。过滤沉淀，用水(2×20ml)和EtOAc(2× 20ml)洗涤，干燥，得所要化合物，0.58g(46％)。1H-NMR和 MS与预期结构一致。 步骤C

将步骤B的产物(0.6g，0.0017mol)悬浮于二噁烷(2.0ml)中， 并用4N HCl的二噁烷溶液(0.9ml)处理悬浮液并在室温下搅拌过夜。 用乙醚稀释反应混合物，过滤，用乙醚(3×20ml)洗涤残余物。将所 得的浅黄色固体在底部铺有粒状NaOH的干燥器中干燥，并无需纯化， 直接用于以下步骤。 步骤D

向在DMF(10ml)中的步骤C制得的HCl盐悬浮液中，加入N- 甲基吗啉(0.21ml)，并在冰-盐浴中冷却至-10℃。用氯甲酸异丁 酯(0.24ml)处理反应混合物，在-10℃搅拌30分钟，在0℃，向在 DMF(5ml)中的DL-3-氨基-3-(3，5-二氯苯基)丙酸乙酯 (按实施例1步骤A和B的方法制得，但是，以3，5-二氯苯甲醛代替 3-吡啶甲醛)(0.6g，0.002mol)的溶液中加入N-甲基吗啉(0.46ml) 产生胺。将得到的反应混合物在-10℃搅拌1小时，并在氩气中，室温 下搅拌16小时。真空蒸馏DMF，将残余物与乙醚(2×25ml)一起研 磨，并滗析上清液。用反相HPLC纯化不溶性残余物，用5-70％CH3CN水溶液30分钟内梯度洗脱，流速为70ml/min。合并合适用流份并冷冻 干燥，得所要的TFA盐，为浅黄色粉末。1H-NMR和MS与预期结构 一致。

                   实施例362

(±)3，5-二氯-2-羟基-β-[[2-[[[3-[(1，4，5，6-四 氢-5，5-二甲基嘧啶-2-基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]苯 丙酸的三氟乙酸盐的制备 上述化合物由实施例361步骤C的产物与实施例440步骤A的产物 偶合制得。所要产物用反相HPLC分离，30分钟内，用5-70％CH3CN水溶液梯度洗脱，流速70ml/min。合并适合的流份并冷冻干燥，得所要 的TFA盐。1H-NMR和MS与预期结构一致。

                 实施例363

β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰 基]氨基]-4-氟苯丙酸的三氟乙酸盐的制备 步骤A

将在30ml DMF中的4-氟苯基溴(10.0g，0.057mol)、丙烯酸叔 丁酯(9.52g，0.074mol)、乙酸钯(0.13g，0.00057mol)、三-对甲苯 膦(0.87g，0.0029mol)和三乙胺(5.78g，0.057mol)的混合物在120℃ 加热16小时。冷却混合物并用500ml水处理。用乙酸乙酯(3×200ml) 萃取水相，并用盐水洗涤有机层，用MgSO4干燥，过滤。浓缩滤液并将 残余物用硅胶色谱(乙酸乙酯/己烷，1∶9)纯化，得10.13g产物，为 黄色油状物(80％)。NMR与预期结构一致。 分析计算C13H15FO2：C，70.25；H，6.80。

       实测值：    C，69.77；H，7.08。 步骤B

在一帕尔瓶中，在110℃和900psi压力下，将步骤A的产物(8.7g， 0.039mol)、饱和的叔丁醇、氨和3ml乙酸一起振摇48小时。过滤并浓 缩混合物。用200ml冷的1N HCl溶解残余物，并用乙酸乙酯萃取。然 后用碳酸钾碱化水相并用二氯甲烷(2×200ml)萃取。用盐水洗涤合 并的萃取液，用硫酸镁干燥，过滤，浓缩滤液得4.23g黄色油状物(41 ％)用NMR谱来证明其结构。 步骤C

向在10ml DMF中的实施例M的化合物(1.0g，0.0037mol)溶液 中，快速加入N-甲基哌啶(0.42g，0.0037mol)。在室温下搅拌混合 物20分钟，然后在0℃用氯甲酸异丁酯处理混合物。15分钟后，加入 在3ml DMF中的步骤B的产物溶液。将反应混合物温热至室温并搅拌 过夜。真空除去二甲基甲酰胺并将残余物用反相HPLC〔乙腈/水(含0.5 ％的TFA)〕纯化，得0.97g浅黄色固体(44％)： 分析计算C23H27N5O4F·1.0H2O·1.0TFA：

        C，50.93；H，5.30；N，11.88。

实测值：C，50.61；H，4.92；N，11.74。 步骤D

在0℃，向10ml二氯甲烷中的步骤C产物的悬浮液中加入6ml TFA。在室温下搅拌混合物4小时。除去溶剂并将残余物用反相HPLC 〔乙腈/水(含0.5％的TFA)〕纯化，得0.75g标题化合物，为白色固 体(75％)。 分析计算C19H20N5O4F·1.5TFA：

        C，46.16；H，3.79；N，12.23。

实测值：C，45.86；H，3.68；N，12.23。

                  实施例364

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-1H-咪唑-2-丙酸的三(三氟乙酸)盐的制备 步骤A

将在150ml的四氢呋喃中的2-咪唑甲醛(6.0g，0.063mol)和(叔 丁基羰基亚甲基)三苯膦(29.4g，0.078mol)的溶液在55℃加热过夜。 冷却该澄清溶液并真空浓缩。残余物用硅胶色谱(乙酸乙酯/己烷，8∶2) 纯化，得9.7g产物(1∶1的E/Z混合物)，为白色固体(79％)： 分析计算C10H14N2O2：

        C，61.84；H，7.27；N，14.42。

实测值：C，61.52；H，7.39；N，14.21。 步骤B

向在40ml无水二甲基甲酰胺中的预洗过的氢化钠(0.62g， 0.026mol)悬浮液中缓慢加入步骤A产物，30分钟后，加入2-(三甲 基甲硅烷基)乙氧基甲基氯，并将反应混合物在室温搅拌2小时。加入 水并用乙酸乙酯萃取水相。用盐水洗涤有机层，用硫酸镁干燥并过滤。 浓缩滤液并将残余物用硅胶色谱(乙酸乙酯/己烷，1∶1)纯化，得3.54g E异构体，为无色油状物，和2.66g Z异构体，为白色固体(73％)。 分析计算C16H28N2O3Si：

        C，59.22；H，8.70；N，8.63。

实测值：C，58.94；H，9.12；N，8.53。 步骤C

在-78℃，向在30ml无水四氢呋喃中的N-苄基(三甲基甲硅烷 基)胺(2.16g，0.012mol)的溶液中缓慢加入n-丁基锂(0.012mol)。 30分钟后，加入在15ml四氢呋喃中的步骤B产物(2.6g，0.008mol)溶 液，并于此温度下搅拌反应混合物2.5小时。然后用四氢呋喃中的乙酸溶 液骤冷反应，然后加入饱和碳酸氢钠至pH9。用乙酸乙酯萃取水相并用 盐水洗涤有机层。硫酸镁干燥，过滤，浓缩滤液并用硅胶色谱(乙酸乙 酯/己烷，6∶4)纯化，得1.96g产物，为透明油状物(60％)。 分析计算C23H37N3O3Si：

        C，64.00；H，8.64；N，9.73。

实测值：C，63.72；H，8.85；N，9.73。 步骤D

向在150ml甲醇中的步骤C产物(5.4g，0.0125mol)和甲酰胺铵盐 (7.89g，0.125mol)溶液中加入Pd/C(170mg)。将混合物回流搅拌3 小时。通过硅藻土过滤除去催化剂并浓缩滤液。将残余物溶于400ml水 中，用碳酸钾饱和，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤有机层，用硫酸镁干 燥并过滤。浓缩滤液，得3.9g产物，为无色油状物(91％)。NMR谱 显示该化合物有足够纯度用于下一步骤。 步骤E

用实施例363步骤C中描述的同样条件合成上述化合物。粗产物用 反相HPLC〔乙腈/水(含0.5％的TFA)〕纯化，得1.5g产物，为黄色 固体(60％)： 分析计算C26H41N7O5Si·2.5TFA：

        C，44.07；H，5.19；N，11.61。

实测值：C，44.24；H，5.14；N，11.91。 步骤F

按照实施例363步骤D所描述的方法，由步骤E产物得到标题化合 物。粗产物用反相HPLC〔乙腈/水(含0.5％的TFA)〕纯化，得0.35g 标题化合物，为黄色固体(24％)。 分析计算C16H19N7O4·3.0TFA：

        C，36.93；H，3.10；N，13.70。

实测值：C，37.76；H，2.95；N，14.22。

                   实施例365

(±)β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-2，3，5，6-四氟苯丙酸的三氟乙酸盐的制备 按照实施例364步骤A和步骤C到步骤F所描述的方法顺序反应， 制得上述化合物。NMR谱确认其结构。 分析计算C19H17N5O4F4·1.5TFA：

        C，42.18；H，2.98；N，11.18。

实测值：C，42.24；H，3.07；N，11.12。

                实施例366

β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰 基]氨基]-5-溴噻吩-2-丙酸的三氧乙酸盐的一水合物的制备

将在二氯甲烷(25ml)中的上述化合物的叔丁酯(用此文中相类似 的方法制得)(1.0g，1.91mmol)和三氟乙酸(14.8g，10.0ml，13.0mmol) 溶液在0℃搅拌30分钟。将反应混合物温热至室温并搅拌6小时，减压 下除去溶剂。粗产物用HPLC(乙腈、水、三氟乙酸)纯化，得纯标题 化合物(0.43g，38％)，为白色固体。 分析计算C17H18N5O4SBr·CF3COOH·H2O：

        C，38.01；H，3.53；N，11.67；S，5.34

实测值：C，38.07；H，3.23；N，11.48；S，4.99

                  实施例367

(±)3，5-二氯-β-[[2-[[[3-[(1，4，5，6-四氢-5，5- 二甲基嘧啶-2-基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基]苯丙酸的三氟 乙酸盐的制备

用在乙腈(0.2ml)中的1M LiOH(1.8ml)，将实施例361步骤 D制得的乙酯(0.22g)水解成酸，然后酸化并用反相HPLC纯化，得 0.18g酸，为浅黄色粉末。1H NMR和MS与预期结构一致。

               实施例368

(±)3-溴-5-氯-2-羟基-β-[[2-[[[3-[(1，4，5，6 -四氢-5，5-二甲基嘧啶-2-基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰基]氨基] 苯丙酸的三氟乙酸盐的制备

按照实施例361描述的方法，用实施例361步骤C的酸(0.6g)与 实施例233步骤B的产物(0.5g)偶合制备上述化合物。用反相HPLC 分离所要产物，得0.38g上述化合物，为浅黄色粉末。1H NMR和MS 与预期结构一致。

                实施例370

β-[[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基]乙酰 基]氨基]-2-巯基苯丙酸锂盐的合成 步骤A

硫代肉桂酸S-苯酯的合成：将在二氯甲烷(100ml)中的肉桂酰氯 (14.6g，87.68mmol)溶液加到在冰-水浴中的苯硫酚(9.55g， 86.68mmol)和吡啶(7ml)的二氯甲烷(150ml)溶液中。室温下18 小时后，用稀盐酸(100ml，1N)、盐水(100ml)洗涤反应混合物， 干燥(MgSO4)并浓缩，得19.0g所要的硫酯(91％)，为结晶体。 步骤B

硫代香豆素的合成：将硫代肉桂酸S-苯酯(14.0g，58.25mmol) 和氯化铝(39g)的混合物在85℃加热3小时。将热的反应混合物小心 倾倒在冰上，然后用乙酸乙酯(3×300ml)萃取，用盐水(200ml) 洗涤，干燥(MgSO4)并浓缩。将残余物从己烷-乙酸乙酯中重结晶， 得5.2g(52％)所要产物，为淡黄色晶体。 步骤C

4-氨基-3，4-二氢硫代香豆素盐酸盐的合成：在-78℃，向在 四氢呋喃(20ml)中的硫代香豆素(1.41g，8.52mmol)溶液中，缓慢 加入六甲基二硅氮烷锂(10.22ml，1N，10.22mmol)。45分钟后，将反 应混合物温热至0℃，然后用冰醋酸(0.511g)骤冷反应。10分钟后， 将反应混合物分配到乙酸乙酯(100ml)和碳酸氢钠(100ml)中。干 燥(MgSO4)并浓缩有机层。将所得残余物溶于乙醚(100ml)中，并 加入二噁烷/HCl(20ml，4N)。将形成的沉淀物过滤并真空干燥固体， 得所要产物(0.50g，27％)，为黄色粉末。 步骤D

将m-胍基马尿酸(0.506g，1.855mmol)的二甲基甲酰胺(5ml) 溶液和N-甲基吗啉(0.187g，1.855mmol)冷却至0℃，并搅拌15分 钟。分三次加入氯甲酸异丁酯(0.253g，1.855mmol)。10分钟后，一 次加入4-氨基-3，4-二氢硫代香豆素盐酸盐(0.404g，1.855mmol)， 接着，加入N-甲基吗啉(0.187g，1.855mmol)。在室温下搅拌反应混 合物18小时。浓缩反应混合物并将残余物溶于四氢呋喃/水(1∶1， 5ml)，然后用色谱提纯(反相，95∶5水∶乙腈至含0.1％TFA的30： 70水∶乙腈)梯度洗脱60分钟。将洗脱液冷却干燥，得0.300g标题化合 物，为浅黄色粉末。

1H-NMR和MS与预期结构一致。

                实施例371

(±)β-[2-[[[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]苯基]羰基]氨基] 乙酰基]氨基]-5-氯-2-巯基苯丙酸二锂盐的制备 步骤A

S-(4-氯苯基)的硫代肉桂酸酯的合成：将在二氯甲烷(100ml) 中的肉桂酰氯(26.0g，156.3mmol)溶液加到在冰-水浴中的苯硫酚 (22.6g，156.3mmol)和吡啶(12.6ml)的二氯甲烷(200ml)溶液中。 室温下18小时后，用稀HCl(100ml，1N)、盐水(100ml)洗涤反应 混合物，干燥(MgSO4)并浓缩，得41.0g(96％)所要硫酯，为晶状 固体。 步骤B

6-氯硫代香豆素的合成：将S-(4-氯苯基)的硫代肉桂酸酯 (19.4g)和氯化铝(52g)的混合物在125℃加热搅拌3小时，将热的 反应混合物小心倾倒在冰/水上，然后用乙酸乙酯(3×300ml)萃取， 用盐水(200ml)洗涤，干燥(MgSO4)并浓缩。将残余物与己烷/乙酸 乙酯研磨，得2.0g(14％)所要化合物，为浅黄色晶体。 步骤C

4-氨基-6-氯-3，4-二氢硫代香豆素盐酸盐的合成：在-78℃， 将六甲基二硅氮烷锂(6.4ml，1N，6.4mmol)缓慢加到在四氢呋喃 (20ml)中的6-氯硫代香豆素(1.05g，5.345mmol)溶液中。45 分钟后，将反应混合物温热至0℃，然后用冰醋酸(0.321g)骤冷。10 分钟后，将反应混合物分配到乙酸乙酯(100ml)和碳酸氢钠(100ml) 中。干燥(MgSO4)并浓缩有机层。将所得残余物溶于乙醚(100ml) 中。并加入二噁烷/HCl(20ml，4N)。过滤形成的沉淀物，并真空干 燥固体，得(0.80g，60％)所要产物，为黄色粉末。 步骤D

将m-胍基马尿酸(0.548g，2.0mmol)的二甲基甲酰胺(5ml) 溶液和N-甲基吗啉(0.220ml，2.0mmol)冷却至0℃，并搅拌15分 钟，分三次加入氯甲酸异丁酯(0.260ml，2.0mmol)。10分钟后，一 次加入4-氨基-6-氯-3，4-二氢硫代香豆素盐酸盐(0.50g， 2.0mmol)，接着，加入N-甲基吗啉(0.220ml，2.0mmol)。在室 温搅拌反应混合物18小时。浓缩反应混合物并将残余物溶于四氢呋喃 水(1∶1，5ml)中，然后色谱提纯(反相，从95∶5水∶乙腈至含0.1 ％TFA 30∶70水∶乙腈，60分钟)处理。洗脱液用氢氧化锂水溶液碱化， 然后冷冻干燥，得0.300g标题化合物，为浅黄色粉末。

MS和NMR与预期结构一致。

                实施例372

以下化合物按照实施例370-371描述的方法制备。

     X＝SH；R1，R2＝Cl；R3，R4＝H

     X＝SH；R1，R2＝F；R3，R4＝H

     X＝SH；R1，R2＝Me；R3，R4＝H

     X＝SH；R1，R2＝CF3；R3，R4＝H

     X＝SH；R1，R2＝Br；R3，R4＝H

     X＝SH；R1＝H，R2＝F；R3，R4＝H

     X＝SH；R1＝H，R2＝Br；R3，R4＝H

     X＝SH；R1＝H，R2＝CF3；R3，R4＝H

     X＝SH；R1＝H，R2＝CH3；R3，R4＝H上述化合物中，R3和R4一起代表(CH2)3或(CH2)2。

              实施例374

用实施例233步骤B制得的化合物与3-胍基-5-三氟甲基马尿 酸(按照实施例38方法制备)反应制备上述化合物，基本上用实施例N 步骤3的比例和方法，但用3-胍基-5-三氟甲基马尿酸盐酸盐代替 GIHA HCl。用C-18 RPHPLC分离所要产物。

            实施例375

用实施例374的方法制备上述化合物，但是，用实施例237制得的 (RS)-4-氨基-6，8-二氯-氢化香豆素盐酸盐代替实施例233步 骤B的化合物。用C-18 RPHPLC分离所要产物。

               实施例376

使用实施例374的方法制备上述化合物，但是，用实施例231制得 的(RS)-4-氨基-6-氯-氢化香豆素盐酸盐代替实施例233步骤 B的化合物。用C-18 RPHPLC分离所要产物。

                实施例377

使用实施例374的方法制备上述化合物，但是，用实施例227制得 的化合物代替实施例233步骤B的化合物。用C-18 RPHPLC分离所要 产物。 实施例378

用实施例374的方法制备上述化合物，但是，用实施例226制得的 (RS)-4-氨基-6-硝基-氢化香豆素盐酸盐代替实施例233步骤 B制得的化合物。用C-18 RPHPLC分离所要的产物。

                实施例379 用实施例234的条件，由实施例378的产物制备上述化合物。用C 18 RPHPLC分离所要产物。

                 实施例380

用实施例374的方法制备上述化合物，但是，用实施例235步骤A -C制得的化合物和偶合反应中以2当量的NMM代替实施例233步骤 B制得的化合物和1当量的NMM。用C-18 RPHPLC分离所要产物。

                   实施例381

用实施例374的方法制备上述化合物，但是，以(RS)-4-氨基 -6-甲基-氢化香豆素盐酸盐(实施例88制得)代替实施例233步骤 B制得的化合物。用C-18 RPHPLC分离所要产物。

                  实施例382

用实施例374的方法制备上述化合物，但是，用(RS)-4-氨基 -氢化香豆素盐酸盐(实施例87制得)代替实施例233步骤B制得的化 合物。用C-18 RPHPLC分离所要产物。

                   实施例383

用实施例374的方法制备上述化合物，但是，以(RS)-4-氨基 -7-甲氧基-氢化香豆素盐酸盐(实施例222制得)代替实施例233 步骤B制得的化合物。用C-18 RPHPLC分离所要产物。

                  实施例384

用实施例374的方法制备上述化合物，但是，以(RS)-4-氨基 -8-甲氧基-氢化补骨脂素盐酸盐(实施例223制得)代替实施例233 步骤B制得的化合物。用C-18 RPHPLC分离所要产物。

                  实施例385 步骤A

下式化合物的制备 用7，8-亚甲二氧基-香豆素(按照P.Castillo，J.C.Rodriguez-Ubis 和F.Rodriguez，Synthesis，10，839-840(1986)的方法，从7，8 -二羟基-苯并吡喃-2-酮制得)，按照实施例233步骤A和B的方 法制备上述化合物。 步骤B

用实施例374的方法制备上述化合物，但是，以步骤A产物的盐酸 盐代替实施例233步骤B制得的化合物。用C-18 RPHPLC分离所要产 物。

                  实施例386 步骤A

下式化合物的制备

用6，7-亚甲二氧基-香豆素〔按照Spaeth，等，Chem，Ber，70， 702(1937)的方法，从6，7-二羟基-苯并吡喃-2-酮制得〕，按 照实施例233步骤A和B制备上述化合物。 步骤B

用实施例374的方法制备上述化合物，但是，用步骤A产物的盐酸 盐代替实施例233步骤B制得的化合物。用C-18 RPHPLC分离所要产 物

          实施例387 步骤A

下式化合物的制备

用实施例233步骤A和B的方法，由5，6-亚甲二氧基香豆素(按 照P.Castillo，J.C.Rodriguez Ubis和F.Rodriguez，Synthesis，10， 839-840(1986)的方法，由5，6-二羟基-苯并吡喃-2-酮制得)， 制备上述化合物。 步骤B

用实施例374的方法制备上述化合物，但是，以步骤A产物的盐酸 盐代替实施例233步骤B制得的化合物。用C-18 RPHPLC分离所要产 物。

             实施例388 步骤A

下式化合物的制备

基本上按照S.Kato，et al.，Bull.Chem.Soc.Jap.，54，6，1981， 1895-1896的方法，由七叶苷(Aldrich，用放有P2O5的真空干燥器脱 水)制备上述化合物。将苯基-α-D-吡喃葡糖苷(glucoparanoside) 转变成苯基-2，3，4，6-四-O-苄基-α-D-吡喃葡糖苷并以适当的 摩尔量试剂完成七叶苷的转变。所要产物用标准硅胶色谱法或制备性 C-18 RPHPLC分离。 步骤B

用实施例233步骤B的方法制备上述化合物，但是，以上面步骤A 的产物代替实施例233步骤A的产物。 步骤C

用实施例374的方法制备上述化合物，但是，以上面步骤B产物的 盐酸盐代替实施例233步骤B制得的化合物。所要产物用C-18 RPHPLC 分离。 步骤D

将步骤C产物溶于适宜的溶剂中(例如，乙醇水溶液)，将其转移 至具有内外阀门，压力表和减压阀的Fischer-Porter压力瓶中，并按照标 准的催化氢解方法除去苄基，使用5％ pd/c催化剂，在氢气下，直至去 苄基反应基本完成，制得上述化合物。所要产物用C-18 RPHPLC分离。

                      实施例389 步骤A

下式化合物的制备

基本上用实施例235步骤A-C的方法制备上述化合物。 步骤B

基本上用实施例235步骤D和E的方法制备本实施例的标题化合 物，并用制备性C-18 RPHPLC分离。

                  实施例390 步骤A 4-氯-2-碘苯酚的制备

按照K.J.Edgar和S.N.Falling，J.Org.Chem.，55，16，1990， 5287-5291的方法制备上述化合物。 步骤B 5-氯-3-碘水杨醛的制备

用G.Casiraghi，et al.，J.C.S.Perkin I，1978，318-321的 方法，将步骤A的4-氯-2-碘苯酚转变成其水杨醛。 步骤C 6-氯-8-碘香豆素的制备

基本上使用实施例233步骤A的方法，将5-氯-3-碘水杨醛转 变成相应的香豆素，6-氯-8-碘香豆素，但是，用5-氯-3-碘 水杨醛代替3-溴-5-氯水杨醛。所要产物用标准硅胶色谱法或蒸馏 分离。 步骤D (R，S)-4-氨基-6-氯-8-碘-氢化香豆素的制备

基本上使用实施例233步骤B的方法制备上述化合物，但是，用步 骤C的产物代替3-溴-5-氯水杨醛，所得产物基本为纯的盐酸盐。 步骤E

使用实施例274的方法制备本实施例的化合物，但是，以步骤D的 产物代替实施例233步骤B制得的化合物。用C-18 RPHPLC分离所要 产物。

                实施例391

基本上使用实施例86步骤D的方法制备上述化合物，但是，以3 -胍基-5-三氟甲基马尿酸的盐酸盐代替GIHA HCl。所要产物用C -18 RPHPLC分离。

                实施例392 步骤A

下式化合物的制备

基本上使用实施例235步骤A的方法制备上述化合物，但是，以BOC -L-天冬氨酸-4-叔丁基酯(Fluka)代替5-溴烟酸。 步骤B

下式化合物的制备

基本上按照M.R.Angelastro，et al.，J.Med.Chem.，1994，37， 4538-4554的方法制备上述化合物，但是，以步骤A的产物代替参考 化合物2，(S)-〔1-〔甲氧基甲基氨基)羰基〕-2-甲基丙基〕氨基 甲酸的1，1-二甲基乙基酯并基本上按照获得参考化合物3的方法来去 保护，得上述化合物的HCl盐。 步骤C

基本上使用实施例85步骤A的方法制备上述化合物，但是，以步骤 B的产物代替甘氨酸叔丁酯并用3-胍基-5-三氟甲基马尿酸的盐酸 盐代替GIHA HCl。所要产物用C-18 RPHPLC分离。

                  实施例393 步骤A 3-N-t-BOC-氨基-4-羟基-(3S)-丁酸苄基酯的制备

将N-t-BOC-L-天冬氨酸的β-苄基酯(10.0mmol)溶于 10ml THF中，并在氩气下，在30分钟内，滴加到0℃的BH3-THF(20ml， 20.0mmol)溶液中。在0℃，将反应混合物另搅拌1-2小时后，滴加 入10％乙酸的甲醇液骤冷反应并蒸发溶剂。将油状残余物溶于乙酸乙酯 中，并用1N HCl水溶液和1M NH4HCO3萃取。干燥(Na2SO4)乙 酸乙酯层并蒸发挥发物，得油状物，用异丙醇/己烷结晶(mp56-57℃)： 1H NMR，CDCl3，δ，1.45(s，9H)，2.65(d，2H)，3.68(d，2H)，5.12(s，2H)，5.25 (m，1H)，7.35(m，5H)。 步骤B

下式化合物的制备

用如下的Swern氧化反应条件将步骤A制得的3-N-t-BOC- 氨基-4-羟基-丁酸苄基酯氧化成相应的醛：在氩气下，将草酰氯 (6.40g，20.72mmol)溶于无水CH2Cl2(25ml)中，并用干冰/氯仿浴 冷却至-63℃。用15分钟，滴加入溶解在CH2Cl2(12ml)中的无水DMSO (g，41.4mmol)。然后，10分钟内，加入溶解在二氯甲烷(50ml) 中的乙醇(6.40g，20.7mmol)。再搅拌反应混合物10分钟后，15分 钟内加入在CH2Cl2(25ml)中的Et3N(11.6ml，82.9mmol，4.0当 量)。将所得混合物搅拌15分钟并加水(31ml)骤冷。将所得淤浆倾 倒在己烷(250ml)中，并用KHSO4水溶液洗涤有机层。用乙醚萃取水 层，并用饱和的NaHCO3洗涤合并的有机萃取液，干燥(NaSo4)并蒸 发，得5.8g浅黄色油状物，基本上为所要的醛。用闪蒸色谱(己烷∶乙 酸乙酯，Merk 60硅胶)纯化小部分： 1H NMR(300MHz)，CDCl3，δ， 1.46(s，9H)，2.95(m，2H)，4.37(m，1H)，5.13(s，2H)，5.62(m，1H)，7.38(m， 5H)，9.65(s，1H)，MS(FAB+)314.3(M+Li)。 步骤C 3-N-t-BOC-基-4-羟基-4-苯基-(3S)-丁酸苄基酯的制 备

在-40℃乙腈/干冰浴中，向步骤B制得的醛(5.0g，15mmol)的 乙醚(150ml)溶液中滴加入3.0M的苯基溴化镁的乙醚(10.8ml， 32.6mmol，2当量)溶液。将所得混合物搅拌15分钟并温热至室温。 几分钟后，将混合物倾倒入1M K2HPO4。用乙醚取水层，用NaHCO3水溶液洗涤合并的醚层，干燥(Na2SO4)并蒸发，得油状物(5.66g)， 不需进一步纯化，直接用于下一步骤。1H NMR(300MHz)，CDCl3，δ， 1.4(多重单峰，9H)，2.65(m，2H)，4.18(m，1H)，5.15(m，2H)，7.4(m，10H)， MS(FAB+)392.4(M+Li+)。 步骤D 2-苯基-3-N-t-BOC-氨基-5-氧代-3S-呋喃的制备

将步骤C的羟基酯(5.31g，13.8mmol)溶于苯(100ml)中，加 入催化量的樟脑磺酸并将溶液回流(Dean-Stark)5小时，除去溶剂。 只有50％转化为内酯，所以再继续回流6小时。除去溶剂并将所得油状 物溶于乙酸乙酯。用饱和的NaHCO3水溶液洗涤有机层，干燥(Na2SO4) 并蒸发，得到粘稠油，是比例为2∶1的所要的非对映的内酯和苄醇的混 合物：1H NMR(300MHz)，CDCl3，δ，1.35，1.45(s，2∶1，9H)，2.75(m， 2H)，4.5，4.75(m，2∶1，1H)，4.7(s，2H)，5.1(m，1H)，5.7(d，1H)，7.35(m， 10H)；MS(FAB+)284.6(M+Li+)。 步骤E 2-苯基-3-氨基-5-氧代-3S-呋喃盐酸盐的制备

在室温下用在二噁烷(20ml)中的4N HCl处理步骤D制得内酯 (0.94g，3.4mmol)，直至停止排气。蒸发除去过量的HCl并分离所 要的氨基内酯，干燥后得白色晶体(0.48g，66％)：1H NMR(300 MHz)，d6 DMSO，δ，3.05(m，2H)，4.4(m，1H)，5.85(d，1H)，7.4(s，5H)。 8.2(bs，3H)；MS(FAB+)178(M+H+)。 步骤F

下式化合物的制备

基本上用实施例374的方法制备上述化合物，但是，用上面步骤E 产物代替实施例233步骤B制得的化合物。用C-18 RPHPLC分离所要 产物。

                 实施例394

基本上按照实施例393的方法制备上述化合物，但是，以4-氟苯 基溴化镁代替步骤C中的苯基溴化镁。

                    实施例395

基本上按照实施例393的方法制备上述化合物，但是，以4-氯苯 基溴化镁代替步骤C中的苯基溴化镁。

                    实施例396

基本上按照实施例393的方法制备上述化合物，但是，以4-溴苯 基溴化镁代替步骤C中的苯基溴化镁。

                    实施例397

基本上按照实施例393的方法制备上述化合物，但是，以乙烯基溴 化镁代替步骤C中的苯基溴化镁。

                     实施例398

按大体实施例393的方法制备上式化合物，不过，用乙炔基溴化镁 代替步骤C中的苯基溴化镁。

                     实施例399

按大体实施例393的方法制备上式化合物，不过，用烯丙基溴化镁 代替步骤C中的苯基溴化镁。

                      实施例400

按大体实施例393的方法制备上式化合物，不过，用环戊基溴化镁 代替步骤C中的苯基溴化镁。

                   实施例401

按大体实施例393的方法制备上式化合物，不过，用苯基乙炔基溴 化镁代替步骤C中的苯基溴化镁。

                   实施例402

按大体实施例393的方法制备上式化合物，不过，用甲基溴化镁代 替步骤C中的苯基溴化镁。

                   实施例403

按大体实施例393的方法制备上式化合物，不过，用异丙基溴化镁 代替步骤C中的苯基溴化镁。

            实施例404 步骤A

4-溴镁-1，2-(亚甲基二氧)苯的制备

250ml园底烧瓶中装有在100ml无水THF中的1.74g(0.072mol) 新磨碎的镁，向其中滴加13.1g(0.062mol)4-溴-1，2-(亚甲基 二氧)苯的无水THF(50ml)溶液。滴加期间，混合物被声动 (sonicated)并用水浴维持反应温度于50℃以下。反应完成后，过滤 混合物并用于下步反应。 步骤B

下式化合物的制备

按实施例393的方法制备上式化合物，不过，以步骤A的格利雅试 剂代替实施例393步骤C的苯基溴化镁。

                实施例405 步骤A

下式化合物的制备

按实施例55步骤A的方法制备上式化合物，不过，用2-甲酰基苯 甲酸甲酯代替2-氟甲醛。 步骤B

下式化合物的制备

按实施例55步骤B和C的方法制备上式化合物，不过，用步骤A 的产物代替实施例55步骤A的产物。

         实施例406 步骤A

下式化合物的制备

用实施例393步骤B的方法，将实施例393步骤C的产物氧化成上 面的酮。 步骤B

下式化合物的制备

使用步骤A的产物，以实施例393步骤E的方法，制备上式化合物。 步骤C

下式化合物的制备

按大体实施例374的方法制备上式化合物，不过，用步骤B的产物 代替实施例233步骤B的化合物。通过大体实施例4的方法进行水解， 将苄基酯转变为相应的羧酸，并经C-18 RPHPLC分离，得到所要的产 物。

             实施例407-414

利用实施例406的方法，不过，用实施例394-403制得的适当保 护的天冬氨酰基醇代替实施例406步骤A的天冬氨酰基醇，制得以下代 表性的化合物： 实施例415 下式化合物的制备 步骤A

向在DMF中的实施例23步骤A的产物中，加过量的1，3-二氨基 -2-羟基丙烷和催化量的DMAP。加热该溶液直至大体完成转化，得 到起始的S-甲基异硅脲鎓盐(uronium)。通过该两性离子的沉淀或 制备C-18 RPHPLC(相关方法参见U.S.2899426)分离所要产物。干 燥后，在过量4N HCl/二噁烷(Aldrich)中搅拌该两性离子，生成其 盐酸盐，并经过滤分出该HCl盐。 步骤B

用大体实施例233的方法制备上式化合物，不过，用步骤A的产物 代替实施例233步骤C的GHIA盐酸盐。

               实施例416-439

用大体实施例415的方法，不过，用适当的胺代替(RS)-4-氨 基-6-氯-8-溴氢化香豆素盐酸盐，制得以下代表性化合物：

             实施例440 步骤A

以实施例233步骤A和B的方法制备上式化合物，不过，用3，5- 二氯水杨醛代替实施例233步骤A中的3-溴-5-氯水杨醛。

NMR和MS与预期结构(HCl盐)一致。 步骤B

在适当反应器中的甲醇中的步骤A的产物以干燥HCl气处理，同时 维持激烈的搅拌。反应完成后，真空除去过量的HCl并浓缩溶液至干。 粗产物在下步中使用。也可以，经C-18 RPHPLC分离产物、冻干，得 大体纯的物质。 步骤C

将步骤B的产物溶于DMF中，向搅拌的该溶液中加等摩尔量的碳酸 二叔丁酯和三乙胺以及催化量的DMAP。反应完成后，真空除去挥发性 物质，产物在稀盐酸水溶液和乙酸乙酯间分配。用水洗有机层，Na2SO4干燥，浓缩得上式化合物，不经提纯可用于下步。也可以，经C-18 RPHPLC分离产物、冻干，得大体纯的物质。 步骤D

在惰性气氛下，向搅拌的步骤C产物的DMF溶液中，加等当量的乙 酸酐或乙酰氯和等当量的三乙胺。反应完成后，真空除去挥发性物质。 残留物在稀盐酸水溶液和乙酸乙酯间分配。有机层用NaHCO3水溶液 洗，Na2SO4干燥，浓缩，得上式化合物，不必进一步提纯即可用于下一 步。也可以，经C-18 RPHPLC分离产物、冻干，得基本纯的物质。 步骤E

在激烈搅拌下，用4N HCl/二噁烷处理步骤D的产物。在气体排放 停止后不久，真空除去过量的HCl气。在低于约40℃下，浓缩反应混合 物。用乙醚研制产物，得到所要的产物。该产物也可以经C-18 RPHPLC 分离、冻干，得到大体纯的物质。 步骤F

按实施例230步骤B的方法制备上式化合物，不过，用步骤E的产 物代替实施例230步骤A的产物。

                 实施例441

用两当量的N-甲基吗啉和一当量的乙酸酐或乙酰氯处理实施例 225的化合物和DMF的混合物，制备上式化合物。反应完成后，经C- 18 RPHPLC分离、冻干，得所要产物。

                实施例442

用两当量的N-甲基吗啉和一当量的苯甲酸酐或苯甲酰氯处理实施 例225的化合物和DMF的混合物，制备上式化合物。反应完成后，经C -18 RPHPLC分离、冻干，得所要产物。

                实施例443-452

利用大体实施例230步骤B的方法，不过，用合适的胺代替实施例 230步骤A的产物，可以制备以下代表性的化合物：

                实施例453-460

利用实施例393的方法，不过，用合适的胺盐酸盐代替实施例393 步骤F中步骤E的产物和用GIHA HCl代替步骤F中的3-胍基-5- 三氟甲基马尿酸，制备以下代表性化合物：

                 实施例461

用实施例406的方法，不过，用实施例394-403制备的适当保护 的天冬氨酰醇代替实施例406步骤A的天冬氨酰醇，和用GIHA HCl代替实施例393步骤F的3-胍基-5-三氟甲基马尿酸，制备以下代 表性的化合物：

              实施例470 下式化合物的制备 步骤A

在冰浴温度下，向3，4，5，6-四氢-2-嘧啶硫醇(Aldrich)(5.0g， 0.043mol)和三乙胺(8.7g，0.086mol)的CH2Cl2(50ml)溶液中， 滴加氯甲酸苯酯〔(Aldrich)13.5g，0.086mol〕。然后，于室温下搅 拌过夜。滤取沉淀，CH2Cl2洗。CH2Cl2滤液用水(3X)洗，MgSO4干燥，真空除溶剂。残留物以50％乙酸乙酯/己烷重结晶，得9.03g 3，4，5，6 -四氢-2-嘧啶硫酮-N，N，N′-二苯基氨基甲酸酯，为黄色固体。

MS和NMR与预期结构(HCl盐)一致。 步骤B

在冰浴温度下，向实施例282步骤C的产物(200mg， 0.00042mol)、上面步骤A的产物(150mg，0.00042mol)和三乙胺 (142mg，0.0014mol)的DMF(3ml)溶液中，加HgCl2(250mg， 0.00046mol)。反应混合物在冰浴温度下搅拌半小时和在温度下搅拌2 小时。再加100mg HgCl2并于60℃下搅拌反应混合物过夜。加过量的 乙酸乙酯，并经硅藻土过滤所得浆液。滤液用水(3X)洗，经硅胶板过 滤，产物经硅胶色谱分离，得上述化合物(110mg)，为白色固体。

MS和NMR与预期结构(HCl盐)一致。

             实施例471 下式化合物的制备 步骤A

向3，4，5，6-四氢-2-嘧啶硫醇(Aldrich)(10g，0.086mol) 的无水乙醇(75ml)溶液中，加碘甲烷(12.2g，0.086mol)。回流加 热反应混合物2.5小时。真空除去溶剂，残留物干燥后，得3，4，5，6-四 氢-2-甲硫基嘧啶·HI(22g)，为白色固体。

MS和NMR与预期结构(HCl盐)一致。 步骤B

在冰浴温度下，向上面步骤A的产物(5.16g，0.02mol)和三乙胺 (4.1g，0.04mol)的CH2Cl2(25ml)溶液中，滴加氯甲酸苯酯 (Aldrich)(3.13g，0.02mol)。于室温下搅拌反应混合物过夜。滤 出沉淀，CH2Cl2洗涤。该CH2Cl2液用水(3X)洗，MgSO4干燥，真 空除溶剂，得3，4，5，6-四氢-2-甲硫基嘧啶-N-苯基氨基甲酸酯 (4.8g)，为白色固体。

MS和NMR与预期结构(HCl盐)一致。 步骤C

向上面步骤B的产物(2g，0.008mol)的乙腈(12ml)溶液中， 加实施例M步骤B的产物(1.84g，0.008mol)。回流搅拌反应混合物 过夜。经RPHPLC分离产物，得3，4，5，6-四氢-N-苯基氨基甲酰基- 2-嘧啶-m-氨基马尿酸·TFA(1g)，为白色固体。 步骤D

按实施例174的方法制备上面的化合物，不过，用等当量的3，5-二 氯苯甲醛代替实施例174步骤A的3，4-二氯苯甲醛和用等当量的上面 步骤C的产物代替实施例174步骤B中的m-胍基马尿酸盐酸盐。

MS和NMR与预期结构(HCl盐)一致。

                 实施例472

下式化合物的制备 步骤A

在冰浴温度下，向2-甲硫基-2-咪唑啉·HI(Aldrich)(10g， 0.041mol)和三乙胺(4.14g，0.041mol)的CH2Cl2(50ml)溶液中， 加BOC酐(Aldrich)(8.94g，0.041mol)。室温下搅拌反应混合物 过夜。用水(3X)洗CH2Cl2液，MgSO4干燥，水(3X)洗，MgSO4干燥，真空除溶剂，得到N-BOC-2-甲硫基-2-咪唑啉(8.1g)， 为透明液体，一放置就转变成白色固体。

MS和NMR与预期结构(HCl盐)一致。 步骤B

向上面步骤A的产物(2.7g，0.0124mol)的乙腈(6ml)溶液中， 加3-氨基-5-三氟甲基苯甲酸(3g，0.0124mol)〔由3-硝基- 5-三氟甲基苯甲酸(Lnacaster)催化氢化(pd/c)，接着，用HCl处 理而合成〕。于35-40℃下搅拌反应混合物10天。冷至室温后，滤取 沉淀，乙腈洗，干燥，得3-(N-BOC-4，5-二氢咪唑-2-基) -氨基-5-三氟甲基苯甲酸盐酸盐(3.2g)，为白色固体。

MS和NMR与预期结构(HCl盐)一致。 步骤C

按实施例200的方法制备上式化合物，不过，用等当量的上面步骤 B的产物代替实施例199步骤B中所用步骤A的产物和用TFA处理中间 体(N-BOC乙酯衍生物)1小时，以便除去BOC保护基。

MS和NMR与预期结构(HCl盐)一致。

               实施例473

下式化合物的制备 步骤A

向3-氨基-5-三氟甲基马尿酸盐酸盐(3g，0.01mol)〔按实 施例M步骤A和B的方法制备，不过，用3-硝基-5-三氟甲基苯甲 酰氯〔由3-硝基-5-三氟甲基苯甲酸(Lansaster)和亚硫酰氯制备〕 代替实施例M步骤A的M-硝基苯甲酰氯〕的乙腈(5ml)溶液中， 加实施例472步骤A的产物(2.2g，0.01mol)。于35℃搅拌反应混合 物3天，然后，回流4小时。冷却后，滗出乙腈，残留物在乙醚中成浆 数次(滗出乙醚)，干燥，得3-(4，5-二氢-1H-咪唑-2-基) -氨基-5-三氟甲基马尿酸·HCl(2.5g)，为白色固体。

MS和NMR与预期结构(HCl盐)一致。 步骤B

按实施例210的方法制备上式化合物，不过，用等当量的上面步骤 A的产物代替实施例174步骤B的m-胍基马尿酸HCl。

MS和NMR与预期结构(HCl盐)一致。

           实施例474 下式化合物的制备 步骤A

在冰浴温度下，向2-甲硫基-2-咪唑啉·HI(Aldrich)(10g， 0.041mol)和三乙胺(8.3g，0.0082mol)的CH2Cl2(50ml)溶液中， 滴加氯甲酸乙酯(Aldrich)(4.5g，0.041mol)。于室温下，搅拌反 应混合物过夜。滤出沉淀，用CH2Cl2洗。用水(3X)洗CH2Cl2液， MgSO4干燥，真空除溶剂，得2-甲硫基-2-咪唑啉-N-乙基氨基 甲酸酯(7.1g)，为透明黄色油。

MS和NMR与预期结构(HCl盐)一致。 步骤B

向上面步骤A的产物(5.73g，0.0305mol)的乙腈(12ml)溶液 中，加m-氨基马尿酸·HCl(实施例M步骤B)(7.02g，0.0305mol)。 于室温下，搅拌反应混合物过夜，然后，在50℃和80℃下分别搅拌6 小时和2小时。冷却至室温后，搅拌过夜。滤取沉淀，乙腈洗，干燥， 得3-(4，5-二氢-N-乙基氨基甲酸酯-咪唑-2-基)氨基马尿 酸·HCl(9.6g)，为白色固体。

MS和NMR与预期结构(HCl盐)一致。 步骤C

按实施例174的方法制备上式化合物，不过，用等当量的上面步骤 B产物代替实施例174步骤B中的m-氨基马尿酸和用等当量的实施例 230步骤A的产物代替实施例174步骤B中所用的实施例174步骤A的 产物。

MS和NMR与预期结构(HCl盐)一致。

            实施例475 下式化合物的制备

按实施例474的方法制备上式化合物，不过，用等当量的氯甲酸苯 酯(Aldrich)代替实施例474步骤A的氯甲酸乙酯，并在70℃下加热 反应混合物8小时，然后，在室温下放置2天。

MS和NMR与预期结构(HCl盐)一致。

利用本申请公开的方案和实施例中例举的方法、试剂和条件(或者 通过熟悉本技术领域的人已知的方法从易获得的原料合成试剂)，可合 成本发明的以下化合物：

                  实施例476-517 实施例 #   A     B     C     D    E    F    518    OH    Cl    Cl    Br    H    H    519    OH    Cl    Cl    OH    H    H    520    OH    Cl    Cl    NO2  H    H    521    OH    Cl    Cl    I     H    H    522    OH    Cl    Cl    Cl    H    H    523    OH    Cl    Cl    Cl    H    Cl    524    OH    Cl    Cl    OMe   H    H    525    OH    Cl    Cl    H     CF3 H    526    OH    Cl    Cl    H     OH   H    527    OH    Cl    Cl    H     OMe  H    528    OH    Cl    Cl    H     Cl   H    529    OH    Cl    Cl    H     Cl   Cl    530    OH    Cl    Cl    H     Br   H    531    OH    Cl    Cl    Cl    OH   H    532    OH    Cl    Cl    Br    OH   H    533    OH    Cl    Cl    I     OH   H 实施例 #   A     B     C     D   E    F    534    OH    Br    Cl    Br   H    H    535    OH    Br    Cl    OH   H    H    536    OH    Br    Cl    NO2 H    H    537    OH    Br    Cl    I    H    H    538    OH    Br    Cl    Cl   H    H    539    OH    Br    Cl    Cl   H    Cl    540    OH    Br    Cl    OMe  H    H    541    OH    Br    Cl    H    CF3 H    542    OH    Br    Cl    H    OH   H    543    OH    Br    Cl    H    OMe  H    544    OH    Br    Cl    H    Cl   H    545    OH    Br    Cl    H    Cl   Cl    546    OH    Br    Cl    H    Br   H    547    OH    Br    Cl    Cl   OH   H    548    OH    Br    Cl    Br   OH   H    549    OH    Br    Cl    I    OH   H 实施例 #   A    B     C     D   E    F    550    OH    I    Cl    Br   H    H    551    OH    I    Cl    OH   H    H    552    OH    I    Cl    NO2 H    H    553    OH    I    Cl    I    H    H    554    OH    I    Cl    Cl   H    H    555    OH    I    Cl    Cl   H    Cl    556    OH    I    Cl    OMe  H    H    557    OH    I    Cl    H    CF3 H    558    OH    I    Cl    H    OH   H    559    OH    I    Cl    H    OMe  H    560    OH    I    Cl    H    Cl   H    561    OH    I    Cl    H    Cl   Cl    562    OH    I    Cl    H    Br   H    563    OH    I    Cl    CF3 H    H    564    OH    I    Cl    Cl   OH   H    565    OH    I    Cl    Br   OH   H    566    OH    I    Cl    I    OH   H 实施例 #  A     B     C     D    E    F    567    H    Br    Cl    Br    H    H    568    H    Br    Cl    OH    H    H    569    H    Br    Cl    NO2  H    H    570    H    Br    Cl    I     H    H    571    H    Br    Cl    Cl    H    H    572    H    Br    Cl    Cl    H    Cl    573    H    Br    Cl    OMe   H    H    574    H    Br    Cl    H     CF3 H    575    H    Br    Cl    H     OH   H    576    H    Br    Cl    H     OMe  H    577    H    Br    Cl    H     Cl   H    578    H    Br    Cl    H     Cl   Cl    579    H    Br    Cl    H     Br   H    580    H    Br    Cl    Cl    OH   H    581    H    Br    Cl    Br    OH   H    582    H    Br    Cl    I     OH   H 实施例 #  A     B     C    D     E     F    583    H    Br    Br    Br    H     H    584    H    Br    Br    OH    H     H    585    H    Br    Br    NO2  H     H    586    H    Br    Br    I     H     H    587    H    Br    Br    Cl    H     H    588    H    Br    Br    Cl    H     Cl    589    H    Br    Br    OMe   H     H    590    H    Br    Br    H     CF3  H    591    H    Br    Br    H     OH    H    592    H    Br    Br    H     OMe   H    593    H    Br    Br    H     Cl    H    594    H    Br    Br    H     Cl    Cl    595    H    Br    Br    H     Br    H    596    H    Br    Br    CI    OH    H    597    H    Br    Br    Br    OH    H    598    H    Br    Br    I     OH    H 实施例 #  A     B    C     D    E    F    599    H    Br    I    Br    H    H    600    H    Br    I    OH    H    H    60l    H    Br    I    NO2  H    H    602    H    Br    I    I     H    H    603    H    Br    I    Cl    H    H    604    H    Br    I    Cl    H    Cl    605    H    Br    I    OMe   H    H    606    H    Br    I    H     CF3 H    607    H    Br    I    H     OH   H    608    H    Br    I    H     OMe  H    609    H    Br    I    H     Cl   H    610    H    Br    I    H     Cl   Cl    611    H    Br    I    H     Br   H    612    H    Br    I    Cl    OH   H    613    H    Br    I    Br    OH   H    614    H    Br    I    I     OH   H 实施例 #  A    B    C    D     E    F    615    H    I    I    Br    H    H    616    H    I    I    OH    H    H    617    H    I    I    NO2  H    H    618    H    I    I    I     H    H    619    H    I    I    Cl    H    H    620    H    I    I    Cl    H    Cl    621    H    I    I    OMe   H    H    622    H    I    I    H     CF3 H    623    H    I    I    H     OH   H    624    H    I    I    H     OMe  H    625    H    I    I    H     Cl   H    626    H    I    I    H     Cl   Cl    627    H    I    I    H     Br   H    628    H    I    I    Cl    OH   H    629    H    I    I    Br    OH   H    630    H    I    I    I     OH   H 实施例 #  A     B     C     D    E     F    631    H    Cl    Cl    Br    H     H    632    H    Cl    Cl    OH    H     H    633    H    Cl    Cl    NO2  H     H    634    H    Cl    Cl    I     H     H    635    H    Cl    Cl    Cl    H     H    636    H    Cl    Cl    Cl    H     Cl    637    H    Cl    Cl    OMe   H     H    638    H    Cl    Cl    H     CF3  H    639    H    Cl    Cl    H     OH    H    640    H    Cl    Cl    H     OMe   H    641    H    Cl    Cl    H     Cl    H    642    H    Cl    Cl    H     Cl    Cl    643    H    Cl    Cl    H     Br    H    644    H    Cl    Cl    Cl    OH    H    645    H    Cl    Cl    Br    OH    H    646    H    Cl    Cl    I     OH    H 实施例 #   A     B     C    D     E    F    647    OH    Cl    Cl    Br    H    H    648    OH    Cl    Cl    OH    H    H    649    OH    Cl    Cl    NO2  H    H    650    OH    Cl    Cl    I     H    H    651    OH    Cl    Cl    Cl    H    H    652    OH    Cl    Cl    Cl    H    Cl    653    OH    Cl    Cl    OMe   H    H    654    OH    Cl    Cl    H     CF3 H    655    OH    Cl    Cl    H     OH   H    656    OH    Cl    Cl    H     OMe  H    657    OH    Cl    Cl    H     Cl   H    658    OH    Cl    Cl    H     Cl   Cl    659    OH    Cl    Cl    H     Br   H    660    OH    Cl    Cl    Cl    OH   H    661    OH    Cl    Cl    Br    OH   H    662    OH    Cl    Cl    I     OH   H 实施例 #   A     B     C     D     E     F    663    OH    Br    Cl    Br     H     H    664    OH    Br    Cl    OH     H     H    665    OH    Br    Cl    NO2   H     H    666    OH    Br    Cl    I      H     H    667    OH    Br    Cl    Cl     H     H    668    OH    Br    Cl    Cl     H     Cl    669    OH    Br    Cl    OMe    H     H    670    OH    Br    Cl    H      CF3  H    671    OH    Br    Cl    H      OH    H    672    OH    Br    Cl    H      OMe   H    673    OH    Br    Cl    H      Cl    H    674    OH    Br    Cl    H      Cl    Cl    675    OH    Br    Cl    H      Br    H    676    OH    Br    Cl    Cl     OH    H    677    OH    Br    Cl    Br     OH    H    678    OH    Br    Cl    I      OH    H 实施例 #   A    B     C     D   E     F    679    OH    I    Cl    Br   H     H    680    OH    I    Cl    OH   H     H    681    OH    I    Cl    NO2 H     H    682    OH    I    Cl    I    H     H    683    OH    I    Cl    Cl   H     H    684    OH    I    Cl    Cl   H     Cl    685    OH    I    Cl    OMe  H     H    686    OH    I    Cl    H    CF3  H    687    OH    I    Cl    H    OH    H    688    OH    I    Cl    H    OMe   H    689    OH    I    Cl    H    Cl    H    690    OH    I    Cl    H    Cl    Cl    691    OH    I    Cl    H    Br    H    692    OH    I    Cl    Cl   OH    H    693    OH    I    Cl    Br   OH    H    694    OH    I    Cl    I    OH    H 实施例 #  A     B     C     D   E    F    695    H    Cl    Cl    Br   H    H    696    H    Cl    Cl    OH   H    H    697    H    Cl    Cl    NO2 H    H    698    H    Cl    Cl    I    H    H    699    H    Cl    Cl    Cl   H    H    700    H    Cl    Cl    Cl   H    Cl    701    H    Cl    Cl    OMe  H    H    702    H    Cl    Cl    H    CF3 H    703    H    Cl    Cl    H    OH   H    704    H    Cl    Cl    H    OMe  H    705    H    Cl    Cl    H    Cl   H    706    H    Cl    Cl    H    Cl   Cl    707    H    Cl    Cl    H    Br   H    708    H    Cl    Cl    Cl   OH   H    709    H    Cl    Cl    Br   OH   H    710    H    Cl    Cl    I    OH   H 实施例 #  A     B     C     D   E    F    711    H    Br    Cl    Br   H    H    712    H    Br    Cl    OH   H    H    713    H    Br    Cl    NO2 H    H    714    H    Br    Cl    I    H    H    715    H    Br    Cl    Cl   H    H    716    H    Br    Cl    Cl   H    Cl    717    H    Br    Cl    OMe  H    H    718    H    Br    Cl    H    CF3 H    719    H    Br    Cl    H    OH   H    720    H    Br    Cl    H    OMe  H    721    H    Br    Cl    H    Cl   H    722    H    Br    Cl    H    Cl   Cl    723    H    Br    Cl    H    Br   H    724    H    Br    Cl    Cl   OH   H    725    H    Br    Cl    Br   OH   H    726    H    Br    Cl    I    OH   H 实施例 #  A     B     C     D   E    F    727    H    Br    Br    Br   H    H    728    H    Br    Br    OH   H    H    729    H    Br    Br    NO2 H    H    730    H    Br    Br    I    H    H    731    H    Br    Br    Cl   H    H    732    H    Br    Br    Cl   H    Cl    733    H    Br    Br    OMe  H    H    734    H    Br    Br    H    CF3 H    735    H    Br    Br    H    OH   H    736    H    Br    Br    H    OMe  H    737    H    Br    Br    H    Cl   H    738    H    Br    Br    H    Cl   Cl    739    H    Br    Br    H    Br   H    740    H    Br    Br    Cl   OH   H    741    H    Br    Br    Br   OH   H    742    H    Br    Br    I    OH   H 实施例 #  A     B    C    D    E    F    743    H    Br    I    Br   H    H    744    H    Br    I    OH   H    H    745    H    Br    I    NO2 H    H    746    H    Br    I    I    H    H    747    H    Br    I    Cl   H    H    748    H    Br    I    Cl   H    Cl    749    H    Br    I    OMe  H    H    750    H    Br    I    H    CF3 H    751    H    Br    I    H    OH   H    752    H    Br    I    H    OMe  H    753    H    Br    I    H    Cl   H    754    H    Br    I    H    Cl   Cl    755    H    Br    I    H    Br   H    756    H    Br    I    Cl   OH   H    757    H    Br    I    Br   OH   H    758    H    Br    I    I    OH   H 实施例 #  A    B    C    D    E    F    759    H    I    I    Br   H    H    760    H    I    I    OH   H    H    761    H    I    I    NO2 H    H    762    H    I    I    I    H    H    763    H    I    I    Cl   H    H    764    H    I    I    Cl   H    Cl    765    H    I    I    OMe  H    H    766    H    I    I    H    CF3 H    767    H    I    I    H    OH   H    768    H    I    I    H    OMe  H    769    H    I    I    H    Cl   H    770    H    I    I    H    Cl   Cl    771    H    I    I    H    Br   H    772    H    I    I    Cl   OH   H    773    H    I    I    Br   OH   H    774    H    I    I    I    OH   H 实施例 #   A     B     C    D    E    F    775    OH    Cl    Cl    Br   H    H    776    OH    Cl    Cl    OH   H    H    777    OH    Cl    Cl    NO2 H    H    778    OH    Cl    Cl    I    H    H    779    OH    Cl    Cl    Cl   H    H    780    OH    Cl    Cl    Cl   H    Cl    781    OH    Cl    Cl    OMe  H    H    782    OH    Cl    Cl    H    CF3 H    783    OH    Cl    Cl    H    OH   H    784    OH    Cl    Cl    H    OMe  H    785    OH    Cl    Cl    H    Cl   H    786    OH    Cl    Cl    H    Cl   Cl    787    OH    Cl    Cl    H    Br   H    788    OH    Cl    Cl    Cl   OH   H    789    OH    Cl    Cl    Br   OH   H    790    OH    Cl    Cl    I    OH   H 实施例 #   A     B     C     D   E    F    791    OH    Br    Cl    Br   H    H    792    OH    Br    Cl    OH   H    H    793    OH    Br    Cl    NO2 H    H    794    OH    Br    Cl    I    H    H    795    OH    Br    Cl    Cl   H    H    796    OH    Br    Cl    Cl   H    Cl    797    OH    Br    Cl    OMe  H    H    798    OH    Br    Cl    H    CF3 H    799    OH    Br    Cl    H    OH   H    800    OH    Br    Cl    H    OMe  H    801    OH    Br    Cl    H    Cl   H    802    OH    Br    Cl    H    Cl   Cl    803    OH    Br    Cl    H    Br   H    804    OH    Br    Cl    Cl   OH   H    805    OH    Br    Cl    Br   OH   H    806    OH    Br    Cl    I    OH   H 实施例 #   A    B     C     D   E    F    807    OH    I    Cl    Br   H    H    808    OH    I    Cl    OH   H    H    809    OH    I    Cl    NO2 H    H    810    OH    I    Cl    I    H    H    811    OH    I    Cl    Cl   H    H    812    OH    I    Cl    Cl   H    Cl    813    OH    I    Cl    OMe  H    H    814    OH    I    Cl    H    CF3 H    815    OH    I    Cl    H    OH   H    816    OH    I    Cl    H    OMe  H    817    OH    I    Cl    H    Cl   H    818    OH    I    Cl    H    Cl   Cl    819    OH    I    Cl    H    Br   H    820    OH    I    Cl    Cl   OH   H    82l    OH    I    Cl    Br   OH   H    822    OH    I    Cl    I    OH   H 实施例 #  A     B     C     D    E    F    823    H    Cl    Cl    Br    H    H    824    H    Cl    Cl    H     H    H    825    H    Cl    Cl    NO2  H    H    826    H    Cl    Cl    I     H    H    827    H    Cl    Cl    Cl    H    H    828    H    Cl    Cl    Cl    H    Cl    829    H    Cl    Cl    OMe   H    H    830    H    Cl    Cl    H     CF3 H    831    H    Cl    Cl    H     OH   H    832    H    Cl    Cl    H     OMe  H    833    H    Cl    Cl    H     Cl   H    834    H    Cl    Cl    H     Cl   Cl    835    H    Cl    Cl    H     Br   H    836    H    Cl    Cl    Cl    OH   H    837    H    Cl    Cl    Br    OH   H    838    H    Cl    Cl    I     OH   H 实施例 #  A     B     C     D   E    F    839    H    Br    Cl    Br   H    H    840    H    Br    Cl    OH   H    H    841    H    Br    Cl    NO2 H    H    842    H    Br    Cl    I    H    H    843    H    Br    Cl    Cl   H    H    845    H    Br    Cl    Cl   H    Cl    846    H    Br    Cl    OMe  H    H    847    H    Br    Cl    H    CF3 H    848    H    Br    Cl    H    OH   H    849    H    Br    Cl    H    OMe  H    850    H    Br    Cl    H    Cl   H    851    H    Br    Cl    H    Cl   Cl    852    H    Br    Cl    H    Br   H    853    H    Br    Cl    Cl   OH   H    854    H    Br    Cl    Br   OH   H    855    H    Br    Cl    I    OH   H 实施例 #  A     B     C     D    E    F    856    H    Br    Br    Br    H    H    857    H    Br    Br    OH    H    H    858    H    Br    Br    NO2  H    H    859    H    Br    Br    I     H    H    860    H    Br    Br    Cl    H    H    86l    H    Br    Br    Cl    H    Cl    862    H    Br    Br    OMe   H    H    863    H    Br    Br    H     CF3 H    864    H    Br    Br    H     OH   H    865    H    Br    Br    H     OMe  H    866    H    Br    Br    H     Cl   H    867    H    Br    Br    H     Cl   Cl    868    H    Br    Br    H     Br   H    869    H    Br    Br    Cl    OH   H    870    H    Br    Br    Br    OH   H    871    H    Br    Br    I     OH   H 实施例 #  A     B    C    D    E    F    872    H    Br    I    Br   H    H    873    H    Br    I    OH   H    H    874    H    Br    I    NO2 H    H    875    H    Br    I    I    H    H    876    H    Br    I    Cl   H    H    877    H    Br    I    Cl   H    Cl    878    H    Br    I    OMe  H    H    879    H    Br    I    H    CF3 H    880    H    Br    I    H    OH   H    881    H    Br    I    H    OMe  H    882    H    Br    I    H    Cl   H    883    H    Br    I    H    Cl   Cl    884    H    Br    I    H    Br   H    885    H    Br    I    Cl   OH   H    886    H    Br    I    Br   OH   H    887    H    Br    I    I    OH   H 实施例 #  A    B    C     D   E    F    888    H    I    I    Br   H    H    889    H    I    I    OH   H    H    890    H    I    I    NO2 H    H    891    H    I    I    I    H    H    892    H    I    I    Cl   H    H    893    H    I    I    Cl   H    Cl    894    H    I    I    OMe  H    H    895    H    I    I    H    CF3 H    896    H    I    I    H    OH   H    897    H    I    I    H    OMe  H    898    H    I    I    H    Cl   H    899    H    I    I    H    Cl   Cl    900    H    I    I    H    Br   H    901    H    I    I    Cl   OH   H    902    H    I    I    Br   OH   H    903    H    I    I    I    OH   H 实施例 #  A      B      C     D   E    F    904    H    CF3    Br    Br   H    H    905    H    CF3    Br    OH   H    H    906    H    CF3    Br    NO2 H    H    907    H    CF3    Br    I    H    H    908    H    CF3    Br    Cl   H    H    909    H    CF3    Br    Cl   H    Cl    910    H    CF3    Br    OMe  H    H    911    H    CF3    Br    H    CF3 H    912    H    CF3    Br    H    OH   H    913    H    CF3    Br    H    OMe  H    914    H    CF3    Br    H    Cl   H    915    H    CF3    Br    H    Cl   Cl    916    H    CF3    Br    H    Br   H    917    H    CF3    Br    CF3 H    H    918    H    CF3    Br    H    H    H    919    H    CF3    Br    Cl   OH   H    920    H    CF3    Br    Br   OH   H    921    H    CF3    Br    I    OH   H 实施例 #  A      B      C     D    E    F    922    H    CF3    Br    Br    H    H    923    H    CF3    Br    OH    H    H    924    H    CF3    Br    NO2  H    H    925    H    CF3    Br    I     H    H    926    H    CF3    Br    Cl    H    H    927    H    CF3    Br    Cl    H    Cl    928    H    CF3    Br    OMe   H    H    929    H    CF3    Br    H     CF3 H    930    H    CF3    Br    H     OH   H    931    H    CF3    Br    H     OMe  H    932    H    CF3    Br    H     Cl   H    933    H    CF3    Br    H     Cl   Cl    934    H    CF3    Br    H     Br   H    935    H    CF3    Br    CF3  H    H    936    H    CF3    Br    H     H    H    937    H    CF3    Br    Cl    OR   H    938    H    CF3    Br    Br    OH   H    939    H    CF3    Br    I     OH   H 实施例 #  A      B      C     D    E    F    940    H    CF3    Br    Br    H    H    941    H    CF3    Br    OH    H    H    942    H    CF3    Br    NO2  H    H    943    H    CF3    Br    I     H    H    944    H    CF3    Br    Cl    H    H    945    H    CF3    Br    Cl    H    Cl    946    H    CF3    Br    OMe   H    H    947    H    CF3    Br    H     CF3 H    948    H    CF3    Br    H     OH   H    949    H    CF3    Br    H     OMe  H    950    H    CF3    Br    H     Cl   H    951    H    CF3    Br    H     Cl   Cl    952    H    CF3    Br    H     Br   H    953    H    CF3    Br    CF3  H    H    954    H    CF3    Br    H     H    H    955    H    CF3    Br    Cl    OH   H    956    H    CF3    Br    Br    OH   H    957    H    CF3    Br    I     OH   H 实施例 #  A      B     C     D    E    F    958    H    CF3    I    Br    H    H    959    H    CF3    I    OH    H    H    960    H    CF3    I    NO2  H    H    961    H    CF3    I    I     H    H    962    H    CF3    I    Cl    H    H    963    H    CF3    I    Cl    H    Cl    964    H    CF3    I    OMe   H    H    965    H    CF3    I    H     CF3 H    966    H    CF3    I    H     OH   H    967    H    CF3    I    H     OMe  H    968    H    CF3    I    H     Cl   H    969    H    CF3    I    H     Cl   Cl    970    H    CF3    I    H     Br   H    971    H    CF3    I    CF3  H    H    972    H    CF3    I    H     H    H    973    H    CF3    I    Cl    OH   H    974    H    CF3    I    Br    OH   H    975    H    CF3    I    I     OH   H 实施例 #  A      B     C    D    E    F    976    H    CF3    I    Br   H    H    977    H    CF3    I    OH   H    H    978    H    CF3    I    NO2 H    H    979    H    CF3    I    I    H    H    980    H    CF3    I    Cl   H    H    981    H    CF3    I    Cl   H    Cl    982    H    CF3    I    OMe  H    H    983    H    CF3    I    H    CF3 H    984    H    CF3    I    H    OH   H    985    H    CF3    I    H    OMe  H    986    H    CF3    I    H    Cl   H    987    H    CF3    I    H    Cl   Cl    988    H    CF3    I    H    Br   H    989    H    CF3    I    CF3 H    H    990    H    CF3    I    H    H    H    991    H    CF3    I    Cl   OH   H    992    H    CF3    I    Br   OH   H    993    H    CF3    I    I    OH   H 实施例 #   A      E     C    D    E    F    994     H    CF3    I    Br   H    H    995     H    CF3    I    OH   H    H    996     H    CF3    I    NO2 H    H    997     H    CF3    I    I    H    H    998     H    CF3    I    Cl   H    H    999     H    CF3    I    Cl   H    Cl    1000    H    CF3    I    OMe  H    H    1001    H    CF3    I    H    CF3 H    1002    H    CF3    I    H    OH   H    1003    H    CF3    I    H    OMe  H    1004    H    CF3    I    H    Cl   H    1005    H    CF3    I    H    Cl   Cl    1006    H    CF3    I    H    Br   H    1007    H    CF3    I    CF3 H    H    1008    H    CF3    I    H    H    H    1009    H    CF3    I    Cl   OH   H    1010    H    CF3    I    Br   OH   H    1011    H    CF3    I    I    OH   H

本发明化合物的活性由以下检验法测试。测试结果列于表1中。

             Vitronectin粘连检验 材料

人vitronectin受体(αvβ3)以先前所述方法〔Pytela et al.，Methods in Enzymology，144：475～489(1987)〕，从人胎盘提纯。

人vitronectin以先前所述方法〔Yatohgo et al.，Cell Structure and Function，13：281-292(1988)〕，从新鲜冷冻和血浆提纯。

生物素基化的人vitronectin以先前所述方法〔Charo et al.，J.Biol. Chem.，266(3)：1415-1421(1991)〕，将Pierce Chemical Company (Rockford，IL)的NHS-生物素偶合于纯的vitronectin而制得。

检验用缓冲剂，OPD底质片，和RIA级BSA从Sigma(St.Louis， MO)获得。

抗生素抗体从Calbiochem(La Lolla，CA)获得。

Linbro微量滴度板从Flow Labs(McLean，VA)获得。

ADP试剂从Sigma(St.Louis，MO)获得。 方法 固相受体测定

该检验方法与先前报导的方法〔Nijya et al.，Blood，70：475- 483(1987)〕基本相同。纯的人vitronectin受体(αvβ3)以含有1.0mM Ca++、Mg++和Mn++且pH值为7.4的三羟甲基氨基甲烷缓冲的生理盐水 (TBS+++)将贮液稀释至1.0μg/ml。稀释后的受体立即以100μl/井 (100ng受体/井)移至Linbro微量滴度板上。将滴度板密封并于4℃孵化过 夜，使受体粘结于井上。其余所有步骤是在室温下进行。测定板腾空后 加200μl的1％RIA级BSA的TBS+++溶液(TBS+++/BSA)以便封闭暴 露的塑料表面。接着，孵化2小时，使用96井板清洗机用TBS+++清洗测 定板。从2mM的浓贮液开始，并用TBS+++/BSA中的2nM生物素基化的 vitronectin作稀释剂，制备对数系列稀释度的受试化合物和对照组。受试 (或对照)配体与被标记的配体的预混过程和接着转移50μl等分液到测 定板上的过程，是在CETUS Propette自动机进行的。该标记配体的最终 浓度是1nM试验化合物的最高浓度为1.0×10-4M。竞争反应发生两小 时后，所有的井按前述方法用板清洗机清洗。纯化的辣根过氧化物酶标 记的山羊抗生物素抗体亲合力，以TBS+++/BSA稀释至1∶3000，并向每 个井中加125μl。30分钟后，清洗该板并以在100nM/L柠檬酸盐缓冲剂 (pH5.0)中的OPD/H2O2底物孵化。用微量滴度板读数器，于450nm 波长读数该板，当最大结合对照的井吸收达到约1.0时，最后的A450值 被记录以备分析。用一台EXCELTM延展程序驱动的大型记录仪来分析数 据。平均标准偏差和％CV由重复测定浓度来确定。平均A450值被归一 化为四个最大结合对照组的平均值(不加竞争素)(B-MAX)。归 一化值进行四参数由线拟合算法〔Rodbard et al.，Int.Atomic Energy Agency，Vienna，pp469(1977)〕，在半对数坐标上作图，并对在最高 试验浓度显示大于50％抑制的那些化合物，计算相对于生物素基化 vitronectin最大结合的50％抑制和相应于R2的浓度(IC50)；否则，IC50 报告为大于最高试验浓度。β-[[2-[[5-[(氨基亚氨基甲基)氨基] -1-氧戊基]氨基]-1-氧乙基]氨基]-3-吡啶丙酸〔USSN 08/375,338，实施例1〕，作为一种强效的αvβ3拮抗剂(IC50为3- 10nM)，以阳性对照药加在每一板上进行温孵。

             纯净化的IIb/IIIa受体的检验 材料

人的纤维蛋白质受体(αIIbβ3)是由陈归的血小板提纯而得(Pytela， R.，Pierschbacher，M.D.，Argraves，S.，Suzuki，S.，and  Rouslahti，E. “Arginie-Glycine-Aspartic acid adhesion receptors”，Methods in Enzymology144(1987)：475-489.)

人的vitronectin由新鲜冷冻的血浆按前述方法提纯，即Yatohgo，T.， Izumi，M.，Kashiwagi，H.，and Hayashi，M.，“Novei purification of vitronectin from human plasma by heparin affinity chromatography，” Cell Structute and Function 13(1988)：281-292。

生物素基化人的vitronectin由Pierce Chemical company (Rockford，IL)的NHS-生物素偶合于上述的纯vitronectin而制得。 (Charo，I.F.，Nannizzi，L.，Phillips，D.R.，Hsu，M.A.，Scarborough，R.M.， “Inhibition of fibrmogen binding to GP IIb/IIIa by a GP IIIa peptide”，J.Biol.Chem.266(3)(1991)：1415-1421.)

检验用缓冲剂，OPD底质片，和RIA级BSA从Sigma(St.Louis， MO)获得。

抗生素抗体从Calbiochem(La  Lolla，CA)获得。

Linbro微量滴度板从Flow Labs(McLean，VA)获得。

ADP试剂从Sigma(St.Louis，MO)获得。 方法 固相受体测定

该测定方法与前述方法基本相同，即Niiya，K.，Hodson，E.， Bader，R.，Byers-Ward，V.Koziol，J.A.，Plow，E.F.and Ruggeri，Z.M.， “Increased surface expression of the membrane glycoprotein IIb /IIIa complex inducad by platelet activation：Relationships to the binding of fibrinogen and platelet aggregation”，Blood 70 (1987)：475-483。纯的人纤维蛋白原受体(αIIbβ3)用含有1.0mM  Ca++、Mg++和Mn++且pH值为7.4的三羟甲基氨基甲烷缓冲的生理盐水 (TBS+++)将贮液稀释至1.0μg/ml。稀释后的受体立即以100μl/井 (100ng受体/井)移至Linbro微量滴度板上。将滴度板密封并于4℃孵化过 夜，使受体粘结于井上。其余所有步骤是在室温下进行。测定板腾空后 加200μl的1％RIA级BSA的TBS+++溶液(TBS+++/BSA)以便封闭暴 露的塑料表面。接着，孵化2小时，使用96井板清洗机用TBS+++清洗测 定板。从2mM的浓贮液开始，并用TBS+++/BSA中的2nM生物素基化的 vitronectin作稀释剂制备对数系列稀释度的受试化合物和对照组。受试 (或对照)配体与被标记的配体的预混过程和接着转移50μl等分液到测 定板上的过程是在CETUS Propette自动机进行的。该标记配体的最终 浓度是1nM试验化合物的最高浓度为1.0×10-4M。竞争反应发生两小 时后，所有的井按前述方法用板清洗机清洗。纯化的辣根过氧化物酶标 记的山羊抗生物素抗体亲合力，以TBS+++/BSA稀释至1∶3000，并向每 个井中加125μl。30分钟后，清洗该板并以在100nM/L柠檬酸盐缓冲剂 (pH5.0)中的ODD/H2O2底物孵化。用微量滴度板读数器，于450nm 波长读数该板，当最大结合对照的井吸收达到约1.0时，最后的A450值 被记录以备分析。用一台EXCELTM延展程序驱动的大型记录仪来分析数 据。平均标准偏差和％CV由重复测定浓度来确定。平均A450值被归一 化为四个最大结合对照组的平均值(不加竞争素)(B-MAX)。归 一化值进行四参数由线拟合算法〔Rodbard et al，Int.Atomic Energy Agency，Vienna，pp469(1977)〕，在半对数坐标上作图，并对在最高 试验浓度显示大于50％抑制的那些化合物，计算相对于生物素基化 vitronectin最大结合的50％抑制和相应于R2的浓度(IC50)；否则，IC50 报告为大于最高试验浓度。β-[[2-[[5-[(氨基亚氨基甲基)氨基] -1-氧戊基]氨基]-1-氧乙基]氨基]-3-吡啶丙酸〔USSN 08/375,338，实施例1〕，作为一种强效的αvβ3拮抗剂(IC50为3- 10nM)，以阳性对照药加在每一板上进行温孵。 人的富含血小板血浆的测定

健康的无阿司匹林的供血者从志愿者群中挑选。富含血小板血浆的 采集和随后的ADP孵化和血小板集合物的测定按照Zucker，M.B.， “Platelet Aggregation Measured by the Photometric Method”， Methods in Enzymology 169(1989)：117-133所述方法进行。 以使用纸蝶的标准静脉穿刺技术，抽取45ml全血到含有5ml 3.8％柠 檬酸三钠的60ml注射器中。在注射器中充分混合后，将抗凝的全血转入 50ml的锥形聚乙烯管中。在室温下于200xg离心该血12分钟，沉淀非 血小板细胞。将富血小板血浆移至聚乙烯管中，并于室温下贮备直至使 用。余下的血于2000xg第二次离心15分钟，得到无血小板的血浆。每 微升血小板计算，一般为300,000至500,000。富血小板血浆(0.45ml) 等分加入硅化处理过的小杯中，并在加50uL预稀释的受试化合物之前， 于37℃下搅拌(1100rpm)1分钟。混合1分钟后，加50uL 200uM ADP引发聚集作用。在一台Payton双槽聚集计(Payton Scientific， Buffalo，NY)中记录3分钟。一系列试验化合物稀释液的最大反应(生 理盐水作空白)的百分抑制率，用以确定剂量效应曲线。所有化合物进 行两次试验，半数最大抑制浓度(IC50)是由在最高试验浓度时显示50 ％或更大抑制的那些化合物的剂量效应曲线图解法计算出；否则，IC50 报告为大于最高试验浓度。

M21黑瘤细胞粘连测定

这一测定包括M21人黑瘤细胞对人纤维蛋白原包衣的塑料纸培养皿 的αvβ3相关的粘连作用。

纤维蛋白原从人血浆提纯。

使样品分别通过明胶-琼脂糖4B和赖氨酸-琼脂糖4B树脂，从制 剂中消除Fibroneotin和纤维蛋白溶酶原。纤维蛋白原用复盖缓冲液 (20mM Tris-HCl，150mM NaCl，pH7.4)稀释至10μg/ml。于96井 1mmulon 2微量滴度(microtiter)板(Dynatech；Chantilly，Va)的每 井中加100μl稀释后的纤维蛋白原，于4℃下复盖过夜。这些板用在粘 连缓冲液(无Ca++或Mg++的Hank平衡盐溶液(HBSS--)中的1％BSA (Miles/Pentex；Kankakee，IL)(50mM Hepes，1mg/ml BSA，pH 7.4)于37℃下阻滞1小时。

M21从黑瘤细胞由Dr.J.Smith，La Jolla Cancer Research Institute提供。M21细胞通过用HBSS--冲洗和加细胞分离溶液 (Sigma)并在37℃下孵化5分钟后，从组织培养瓶中收获。收获的细 胞用含有200μM Mn++的粘连检验缓冲液冲洗三次。计数细胞并在含 200μM Mn++的粘连检验缓冲液中悬浮，密度为2×106/ml。M21细胞 在室温下与αvβ3拮抗剂预孵化30分钟。预孵化后，向微量滴度板的每井 中加含有细胞和拮抗剂的溶液并于37℃下粘连30分钟。

粘连后，微量滴度板用大孔吸管，以200μl冲洗缓冲液(50mM Tris-HCl，150mM NaCl，pH7.4)慢慢冲洗三次。稍吸干微量滴度板后，向每 井中加100μl细胞溶解缓冲液(50mM乙酸钠，pH5.0，0.5％ Triton X-100，0.3mg/ml磷酸对硝基苯酯〔Sigma〕。于37℃下孵化60分 钟后，加50μl 1N NaOH停止反应。用一台自动板读数器于412nM记 录每井的吸光度。

                            表I 样品 AvB3 IC50 (nM) IIb/IIIa IC50 (nM) M21黑瘤细胞 IC50(nM) 人PRP (μM) 1 76.9 8350 ＞200 2 0.54 51.2 0.25 200 3 498 72900 3050 4 3.17 473 3.3 ＞200 5 227 3150 6 1.04 15.9 80 8 0.69 9.83 0.28 73.3 10 0.92 54.4 1.82 ＞200 12 1.1 595 9.32 ＞200 14 1.62 139 5.42 ＞200 15 10.2 3830 202 ＞200 17 2.66 137 3.64 ＞200 19 303 72000 21 2.44 1910 ＞200 22 1.37 280 ＞200 24 0.91 58.6 12.7 ＞200 26 14.2 809 ＞200 27 1.53 178 ＞200 30 1.75 424 320 ＞200 34 94.3 269 ＞200 35 57.1 6.21 69.5 36 Step B 14.6 1580 143 ＞200 37 0.88 13.9 ＞20.0 39 12.2 1540 ＞20.0 40 10.3 834 ＞200 41 12.1 830 ＞200 42 124 9800 43 28.3 1640 188 ＞200 44 0.33 998 ＞20.0 45 0.69 39.5 2.54 167 样品 AvB3 IC50 (nM) IIb/IIIa IC50 (nM) M21黑瘤细胞 IC50(nM) 人PRP (μM) 46 5.34 1680 147 ＞200 47 0.86 4270 1.18 ＞200 51 9730 ＞100000 52 3.62 139 11.7 ＞200 53 54.6 930 ＞200 54 10.7 175 ＞200 55 4.77 117 ＞200 56 3.12 65.3 6.87 ＞200 57 1340 15300 58 162 5740 59 2.35 172 24.3 ＞200 60(B) 1.21 72.7 ＞200 60(C) 0.73 16.4 0.74 ＞200 61 1.76 192 228 ＞200 62 1.42 28.4 ＞200 65 9.7 170 13.8 ＞200 66 1.44 73.7 2.51 ＞100 67 2.05 92.3 4.08 ＞200 68 5.48 125 ＞200 69 0.92 33.6 0.95 ＞200 70 63 3240 924 ＞200 71 20.4 202 1040 ＞200 72 1.21 152 ＞200 80 9.49 4.35 30 82 334 353 83 3.39 97.7 11 ＞200 84 2800 246 85 6.65 8.07 86 8.79 246 ＞200 87 6.35 732 ＞200 88 8.44 945 52.3 ＞200 样品 AvB3 IC50 (nM) IIb/IIIa IC50 (nM) M21黑瘤细胞 IC50(nM) 人PRP (μM) 89 1240 9830 94 1.16 101 1 ＞200 95 1.43 25.4 ＞200 96 1810 5400 97 26.9 1170 163 98 146 500 99 0.38 1.89 0.49 57.5 100 8560 ＞100000 101 1680 65700 103 16.6 19100 ＞20.0 106 0.79 3140 0.81 ＞200 107 6400 18700 108 25.2 4870 ＞200 109 575 ＞100000 110 4.5 1860 177 ＞200 112 284 6340 113 276 100000 114 3.26 2940 200 ＞200 116 15500 ＞100000 117 60.1 20100 ＞200 119 3.61 11100 90.4 ＞20.0 121 2840 ＞100000 122 0.79 420 ＞20.0 123 11800 85500 124 22 317 ＞20.0 126 2.48 2010 ＞200 127 0.51 461 ＞200 129 68.9 9460 ＞200 130 47 2690 ＞200 131 3.82 1760 ＞20.0 135 50700 ＞100000 样品 AvB3 IC50 (nM) IIb/IIIa IC50 (nM) M21黑瘤细胞 IC50(nM) 人PRP (μM) 136 54.4 14200 ＞20.0 137 16.2 6500 ＞200 138 36.9 5820 ＞200 139 23.8 16100 ＞200 140 4590 ＞100000 141 3.09 125 ＞200 143 6700 ＞100000 144 55.3 5830 ＞200 145 2720 ＞100000 146 14.3 879 ＞200 150 5.74 631 ＞200 155 5.05 81.1 ＞200 158 10.1 547 160 25.6 10400 162 4.62 1340 ＞200 166 13000 45900 168 2.29 269 171 0.35 83.2 173 0.5 17.4 175 2.12 205 177 0.58 137 ＞20.0 179 2.72 927 181 132 22800 183 1.58 258 185 1.47 166 187 1.31 264 189 4.03 1980 191 0.49 70.3 ＞20.0 193 2.56 209 ＞20.0 195 1.09 98 198 114 37800 200 0.48 1100 ＞200 样品 AvB3 IC50 (nM) IIb/IIIa IC50 (nM) M21黑瘤细胞 IC50(nM) 人PRP (μM) 201 58.1 10800 203 3.56 650 205 1.68 1240 206 78.5 22000 207 0.9 148 208 1.15 277 209 0.83 140 210 2.62 343 211 0.47 607 212 1.93 306 213 2.93 334 214 2.35 454 215 0.41 656 216 1 326 217 74.8 78900 219 2.29 253 221 70.5 23.7 ＞200 222 2.02 112 ＞200 223 4.36 293 ＞200 224 0.71 25.9 225 2.76 471 ＞20.0 226 7.07 2910 ＞200 227 14.1 2640 ＞200 228 3.36 583 ＞200 229 39.1 10600 231 2.99 424 232 19.1 12100 ＞200 233 3.31 647 ＞200 234 89.3 830 235 0.54 29.9 236 0.53 1250 237 0.57 1950 238 0.92 646 样品 AvB3 IC50 (nM) IIb/IIIa IC50 (nM) M21黑瘤细胞 IC50(nM) 人PRP (μM) 239 0.83 673 240 49400 76400 241 557 17200 242 2.28 533 243 0.35 23.6 244 17.6 4560 245 0.96 134 246 7.24 802 247 1.24 417 248 12300 21000 249 5.31 244 251(B) 3.49 280 251(C) 0.76 124 252 1.52 213 253 0.84 109 254 16.5 6910 255 28.4 6050 256 0.58 22 257 49.2 4660 259 0.81 86.7 260 0.74 65.3 261 6.47 4710 262 1.24 172 263 4.19 2760 264 2.18 574 265 6.19 706 266 0.77 1810 267 131 43900 268 0.67 7430 269 209 25400 270 5.51 9160 271 29.9 4610 272 893 8210 样品 AvB3 IC50 (nM) IIb/IIIa IC50 (nM) M21黑瘤细胞 IC50(nM) 人PRP (μM) 273 12.9 4160 274 31.1 21200 275 6.98 1200 276 1.25 111 277 1.41 198 278 0.45 150 279 7.12 637 281 4.16 11500 282 864 9770 284 195 18400 285 229 3170 286 413 8090 287 49.7 41.1 288 8.62 1060 289 0.9 621 290 1.62 1020 291 1.24 37.4 292 3.55 337 294 173 1990 295 144 4560 296 404 9450 297 89.8 3920 298 252 5560 299 109 927 362 0.84 7260 363 2.12 509 364 3.58 223 365 16.9 8470 366 0.44 91.3 367 0.35 1540

本申请以35 USC§119(e)规定，要求1995年8月30日递交的美国 申请号No.60/003277优先权。

                        发明范围