一种大蒜花总苞液培及体外受精方法
专利汇可以提供一种大蒜花总苞液培及体外受精方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 涉及一种大蒜花总苞液培及 体外受精 方法。提供了大蒜花苞 营养液 的配方制备方法，以及经过种质筛选、液培、防腐处理、体外 授粉 等操作过程，使大蒜成功地开花、受精的方法。本发明的液培技术既克服“养分竞争和高温逆境”的不良影响，又解决了大蒜生长后期植株衰老，花器官 水 分、养分供给不足，导致子房败育的问题，可用于大蒜杂交育种，种质创新和大蒜的遗传学研究与教学，有重要的经济意义和学术价值。，下面是一种大蒜花总苞液培及体外受精方法专利的具体信息内容。
1.大蒜花总苞液培及体外受精方法，其特征在于包括配制大蒜花 总苞液体培养营养液、筛选种质、液培、防腐、体外授粉的操作 工序，大蒜花总苞液体培养营养液的组分为：
KH2PO450-150mg/L
KNO3500-2500mg/L
(NH4)2SO450-134mg/L
MgSO45-25mg/L
CaCl230-150mg/L
H3BO40.1-1mg/L
蔗糖5-25g/L
营养液中加克菌康农药登记号：LS2001336 3.2-8g/L，进行防 腐，每隔3-7d换一次营养液。
2.如权利要求1所述一种大蒜花总苞液培及体外受精方法，其特征 在于将种质按常规种于田间观查圃，调查记载物候期、植株生育特 性，抽薹后每份材料取5株调查花薹长度、粗度、薹重、总苞大小、 颜色、幼蕾数、气生鳞茎数，计算幼蕾/气生鳞茎比，选发育较好的 3～5个幼蕾观察花器官发育情况，选出幼蕾/气生鳞茎比较高，开花 多，花药、子房发育较正常的种质备用。
3.如权利要求1所述一种大蒜花总苞液培及体外受精方法，其特征 在于液培的操作方法为，选择抽薹较早，花薹粗壮，花蕾多的种质， 于现薹后2-18d，从距地面5-25cm处切取带茎花苞，剔除营养芽 或气生鳞茎，冲洗花茎切口将花茎切口朝下放入装有300-500ml 培养液的无毒塑料桶内培养，及时清除残存的营养芽。
4.如权利要求1所述一种大蒜花总苞液培及体外受精方法，其 特征在于体外受精：选用花药发育正常、花粉粒活力高的种质的花药， 于大蒜花完全开放前，用细毛刷蘸花粉为适宜种质的花授粉，放入装 有培养液的无毒塑料桶内，然后置干净、通风好，温度25±2℃，光 照13～16h/d，相对湿度75～80％的环境中培养7-56d。
技术领域
本发明涉及一种大蒜花总苞液培及体外受精方法，属于蔬菜科技 领域。
背景技术
发明内容
大蒜花苞液体培养营养液：
KH2PO450-150mg/L
KNO3500-2500mg/L
(NH4)2SO450-134mg/L
MgSO45-25mg/L
CaCl230-150mg/L
H3BO40.1-1mg/L
蔗糖(Sucrose)5-25g/L
将以上溶液均匀混合放置在干净、通风好，温度15-33℃， 光照8-20h/d，相对湿度55-90％的环境中。
营养液中H3BO4和蔗糖(Sucrose)添加量对促进开花，延长 花期起关键作用，H3BO4和蔗糖(Sucrose)的适量添加克服了“养 分竞争和高温逆境”的不良影响，有利于解决大蒜生长后期植株 衰老，花器官水分、养分供给不足，导致子房败育的问题。
大蒜花体外受精的成功，需要大蒜花苞液体培养营养液和正 确的液培过程。
液培操作过程：
一、种质筛选
从来自全国各地及国外的160份大蒜种质中，通过将种质按常 规种于田间观查圃，调查记载物候期、植株生育特性，抽薹后每份材 料取5株调查花薹长度、粗度、薹重、总苞大小、颜色、幼蕾数、气 生鳞茎数，计算幼蕾/气生鳞茎比，选发育较好的3～5个幼蕾观察花 器官发育情况。选出F22，F66，F59，F54等4份幼蕾/气生鳞茎比较 高，开花多，花药、子房发育较正常的种质备用。
二、液培
选择抽薹较早，花薹粗壮，花蕾多的种质，于现薹后2-18d， 从距地面5-25cm处切取带茎花苞，人工观察剔除营养芽或气生鳞 茎，自来水冲洗花茎切口20min.，蒸馏水冲洗，将花茎切口朝下放入 装有300-500ml含消毒剂培养液的无毒塑料桶内，置入温度25±2 ℃，光照13～16h/d，相对湿度75-80％的培养室内培养，并及时清除 残存的营养芽。
三、防腐杀菌
为防止蒜花茎腐烂，在营养液中加克菌康(农药登记号： LS2001336)3.2-8g/L，每隔3-7d换一次营养液。
四、大蒜花体外授粉
选用花药发育正常，花粉粒活力高的花药，于花蕾充分膨大，完 全开放前，用细毛刷蘸花粉为适宜种质的花授粉，然后置上述同样环 境条件下培养。7-56d后，观察到大蒜膨大子房内胚珠明显发育，胚 囊内有胚状物即大蒜花成功授粉；通过石蜡切片在显微镜下观察到胚 囊内完整受精胚的细胞结构。
具体实施方式
大蒜花苞液体培养营养液
KH2PO4150mg/L
KNO32500mg/L
(NH4)2SO4134mg/L
MgSO425mg/L
CaCl2150mg/L
H3BO41mg/L
蔗糖(Sucrose)25g/L
将以上溶液均匀混合放置在干净、通风好，温度25±2℃，光照 13-16h/d，相对湿度80％的环境中，选择抽薹较早，花薹粗壮， 花蕾多的种质F66，于现薹后8～10d，从距地面20cm处切取带茎 花苞，人工观察剔除营养芽或气生鳞茎，自来水冲洗花茎切口 20min.，蒸馏水冲洗，将花茎切口朝下放入装有300ml培养液的 无毒塑料桶内培养，及时清除残存的营养芽。采用该技术使大蒜 花蕾正常开放，不败育，花期维持到最长达76d。为防止蒜花茎 腐烂，在营养液中加3％克菌康，每隔5～6d换一次营养液。选用 花药发育正常，花粉粒活力高的花药，于花蕾充分膨大，完全开 放前，用细毛刷蘸花粉为适宜种质的花授粉，然后置上述同样环 境条件下培养。12d后，观察到大蒜膨大子房内胚珠明显发育， 胚囊内有胚状物即大蒜花成功授粉。
实施例2
大蒜花苞液体培养营养液
KH2PO470mg/L
KNO31300mg/L
(NH4)2SO490mg/L
MgSO415mg/L
CaCl280mg/L
H3BO40.5mg/L
蔗糖(Sucrose)15g/L
将以上溶液均匀混合放置在干净、通风好，温度25±2℃，光照 13-16h/d，相对湿度90％的环境中，选择抽薹较早，花薹粗壮，花 蕾多的种质F54，于现薹后8-10d，从距地面20cm处切取带茎花 苞，人工观察剔除营养芽或气生鳞茎，自来水冲洗花茎切口 20min.，蒸馏水冲洗，将花茎切口朝下放入装有300ml如上述配 制培养液的无毒塑料桶内，置在干净、通风好，温度25±2℃，光 照13-16h/d，相对湿度75％的环境中培养，并及时清除残存的营 养芽。采用该技术防止大蒜幼蕾败育，使之正常开放，花期维持 到最长达76d。为防止蒜花茎腐烂，在营养液中加3％克菌康，每 隔5-6d换一次营养液。选用发育正常，花粉粒活力高的花药，于 大蒜花蕾完全开放前，用细毛刷蘸花粉为适宜种质的花授粉，然 后置上述同样环境条件下培养。26d后，观察到大蒜膨大子房内 胚珠明显发育，胚囊内有胚状物即大蒜花成功授粉。
实施例3
大蒜花苞液体培养营养液
KH2PO450mg/L
KNO3 500mg/L
(NH4)2SO450mg/L
MgSO45mg/L
CaCl230mg/L
H3BO40.1mg/L
蔗糖(Sucrose)5g/L
将以上溶液均匀混合放置在干净、通风好，温度25±2℃，光照 13-16h/d，相对湿度90％的环境中，选择抽薹较早，花薹粗壮，花蕾 多的种质F54，于现薹后8-10d，从距地面20cm处切取带茎花苞，人 工观察剔除营养芽或气生鳞茎，自来水冲洗花茎切口20min.，蒸馏水 冲洗，将花茎切口朝下放入装有300ml如上述配制培养液的无毒塑料 桶内，置干净、通风，温度25±2℃，光照13-16h/d，相对湿度75％ 的环境中培养，并及时清除残存的营养芽。采用该技术防止大蒜幼蕾 败育，使之正常开放，花期维持到最长达76d。为防止蒜花茎腐烂， 在营养液中加3％克菌康，每隔5-6d换一次营养液。选用发育正常， 花粉粒活力高的花药，于大蒜花蕾完全开放前，用细毛刷蘸花粉为适 宜种质的花授粉，然后置上述同样环境条件下培养。26d后，观察到 大蒜膨大子房内胚珠明显发育，胚囊内有胚状物即大蒜花成功授粉。
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