专利汇可以提供癌细胞内过氧化氢检测比色/荧光纸芯片的制备专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且本 发明 公开了一种比色/ 荧光 纸芯片的制备方法及测定细胞内的过 氧 化氢的方法。利用蜡打印技术在纸芯片上制备疏 水 区域、亲水区域以及中空通道,通过 激光切割 机切割中空通道。在工作区域2上生长二氧化铈,利用二氧化铈的类酶性质,与过氧化氢变成橘黄色,实现了 可视化 的比色检测。又因过氧化氢可以替代 吸附 在二氧化铈上的DNA,通过荧光 信号 “关‑开”,从而实现高灵敏的荧光测定。,下面是癌细胞内过氧化氢检测比色/荧光纸芯片的制备专利的具体信息内容。
1.比色/荧光纸芯片检测癌细胞内过氧化氢的方法,其特征是包括以下步骤:
1.1 在计算机上设计比色/荧光纸芯片的疏水蜡打印区域和亲水工作区域;
1.2通过蜡打印机将步骤1.1中设计的纸芯片打印上疏水图案,随后将得到的纸芯片于
120-150 ºC下加热1-2 min,使蜡融化,形成疏水层;
1.3利用激光切割机,对步骤1.2中得到的纸芯片进行切割,最终得到纸芯片由左侧纸芯片从左到右的加样区、亲水区域2和亲水区域1以及右侧纸芯片的五个圆形孔洞区组成;
1.4在步骤1.3中所得纸芯片的亲水区域1上生长二氧化铈;
1.5将生物相容性好的荧光物质修饰的DNA、适配体链及癌细胞固定到步骤1.4所得的纸芯片上,随后用牛血清白蛋白封锁活性位点;
1.6在步骤1.5所得的纸芯片亲水区域2上埋伏储备液;
1.7将步骤1.6所得的纸芯片从右向左折叠,进行可视化比色检测;随后放入荧光设备中,在一定的激发波长和发射波长下进行精确荧光测定。
2.根据权利要求1所述比色/荧光纸芯片检测癌细胞内过氧化氢的方法,其特征在于,左侧纸芯片的亲水区域1和加样区直径为6 mm,亲水区域2的直径为4 mm,右侧纸芯片的五个圆形孔洞区为与左侧纸芯片的亲水区域完全对应的孔洞,连接两个孔洞的是长为4 mm,宽为2 mm的亲水通道。
3.根据权利要求1所述比色/荧光纸芯片检测癌细胞内过氧化氢的方法,其特征在于,在步骤1.3中所得纸芯片的亲水区域1上生长二氧化铈,具体步骤如下:
将相同体积的20.0 mM的氯铂酸和10.0 mM 的硼氢化钠溶液混合后,迅速吸取20.0 μL滴加到纸芯片的亲水区域1,室温下生长10 min,用二次水彻底冲洗,在室温下干燥;接下来将0.374 g 硝酸铈、0.09 g 六亚甲基四胺及0.4 g 聚乙烯吡咯烷酮溶解在16 mL蒸馏水中,混匀,将混合物转移到50 mL高压釜中,之后,将生长有Pt纳米粒子层的纸芯片浸入高压釜中,并在180 ºC下保持100 min,然后冷却到室温,将纸芯片取出后,用乙醇和二次水彻底清洗,最后60 ºC真空干燥。
4.根据权利要求1所述比色/荧光纸芯片检测癌细胞内过氧化氢的方法,其特征在于,步骤1.5中所述的生物相容性好的荧光物质为:碳点或氮掺杂碳点或氮硫掺杂碳点或金簇或银簇或铜簇或金银簇。
5.根据权利要求1所述比色/荧光纸芯片检测癌细胞内过氧化氢的方法,其特征在于,纸芯片亲水区域2上埋伏的储备液为10 µL癌细胞的相应刺激物血管内皮细胞生长因子佛波酯。
6.根据权利要求1所述比色/荧光纸芯片检测癌细胞内过氧化氢的方法,其特征在于,将步骤1.6所得的纸芯片从右向左折叠,进行样品的测定,绘制灰度与癌细胞浓度的标准曲线,实现可视化比色测定;随后放入荧光设备中,在一定的激发波长和发射波长下进行样品的测定,绘制荧光强度与癌细胞浓度的标准曲线,实现精确荧光测定。
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