技术领域
[0001] 本
发明属于果树栽培技术领域，具体的说是涉及一种田间鉴定柑橘黄龙病的方法。
背景技术
[0002] 柑橘黄龙病是世界柑橘生产上的毁灭性病害，是由一种限于韧皮部内寄生的革兰氏阴性细菌引起，能够侵染包括柑橘属、枳属、金柑属和九里香等多种芸香科
植物。目前，该病主要分布在亚洲、非洲、大洋洲、南美洲和北美洲的近50 个国家和地区， 中国19 个柑橘生产省（市、自治区）中已有11 个受到该病危害，严重制约柑橘产业的健康发展。疑似黄龙病树表现症状为
叶片斑驳、叶片均匀黄化、红鼻子果、青果（不转色）、树势衰落等。而根部受损、枝干遭受虫害、缺素、营养
缺陷等因素往往也会使柑橘植株表现出类似黄龙病症状。
[0003] 目前，全世界大部分柑橘产区均不同程度上遭受黄龙病的危害。根据16S rRNA或16S/23S rRNA 基因区间的序列特征，目前发现黄龙病病原有3 个种，分别是亚洲种、非洲种和美洲种。
[0004] 黄龙病主要是由柑橘木虱进行传播，感染黄龙病之后，果实外观常常出现畸形、红鼻子果、青果等，果实品味差，几乎完全失去经济价值。为了防止黄龙病的发生、蔓延，目前生产上采取培育无病毒苗木、杀灭木虱、挖除病树等方法来进行
预防。但在目前，很多地方往往是根据树形、叶片
颜色（斑驳、黄化）在田间来判断植株是否感染黄龙病，因此往往把因根部受损而导致类似黄龙病症状（斑驳、黄化、缺素状等）的植株也挖除掉了，造成了不可挽回的部分损失。
[0005] 公开于该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不应当被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已为本领域一般技术人员所公知的
现有技术。
发明内容
[0006] 针对现有技术的不足，本发明的目的是提供一种甄别田间柑橘黄龙病的方法。
[0007] 本发明提供的技术方案为：
[0008] 一种田间鉴定柑橘黄龙病的方法，包括以下步骤：
[0009] （1）在砍伐疑似黄龙病树之前，先轻剪老病枝，再沿着病树冠滴
水线挖宽20cm×深30cm的沟，均匀撒上
肥料，回埋覆土；冬季清园时
施肥1次，待第2次生理落果之后再施肥1次；
[0010] （2）施肥之后观察春、夏、秋3批次梢的叶色；
[0011] （3）年底果实成熟时观察果实形状及颜色；
[0012] （4）初步鉴定出未遭受黄龙病危害的果树。
[0013] 本发明的技术方案中，步骤（1）中所述的轻剪老病枝的标准为自顶部往下剪除每个病枝的1/3；所述的肥料按重量份包括以下组分：硝铵磷80份、聚
氨基酸1份、
乙二胺四乙酸锌钠盐1份、乙二胺四乙酸镁钠盐1份、乙二胺四乙酸
铁钠盐0.15份、乙二胺四乙酸锰钠盐0.10份、吲哚丁酸0.10份、多菌灵0.05份和恶霉灵0.1份。
[0014] 本发明的技术方案中，所述的冬季清园的时间为每年的12月底至次年1月初；所述的第二次生理落果时间为每年的4月底。
[0015] 本发明的技术方案中，步骤（1）中肥料的用量为0.7-3.0kg/株。
[0016] 本发明的技术方案中，步骤（2）中观察春、夏、秋梢的时间分别是每年的3月份、5月份和8月份，叶色为斑驳、黄化或叶片革质化叶脉肿胀。
[0017] 本发明的技术方案中，步骤（3）中观察果实形状及颜色的时间是当年10月中旬至12月底，黄龙病果实为红鼻子果或青果。
[0018] 与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
[0019] 1. 本发明的方法用根部施肥的方法待新梢长出后根据叶色判别植株是否感染黄龙病来替代直接砍伐疑似黄龙病株的方法，具有安全、节本、增收等优点。
[0020] 2. 本发明的方法既可以使非黄龙病树避免遭受砍伐，减少果农在经济上的损失，又可以避免因大量砍伐疑似黄龙病树所需补苗数量、劳动量及其他农资投入，降低了生产成本。
附图说明
[0021] 图1为处理后与对照
采样进行PCR检测结果；
[0022] 有关附图标记的说明：
[0023] A-恢复正常的叶片；B-患黄龙病的叶片。
具体实施方式
[0024] 下面结合
实施例对本发明的具体实施方式进行详细描述，但应当理解本发明的保护范围并不受具体实施方式的限制。
[0025] 除非另有其它明确表示，否则在整个
说明书和
权利要求书中，术语“包括”或其变换如“包含”或“包括有”等等将被理解为包括所陈述的元件或组成部分，而并未排除其它元件或其它组成部分。
[0026] 实施例1：
[0027] 一种甄别田间柑橘黄龙病的方法，包括以下步骤：
[0028] 1）试验地点是广西荔浦县、西林县（西林县西平乡：东经105°17′，北纬24°19′，海拔730m；荔浦县修仁镇：东经110°15′，北纬24°25′海拔200m）在挖除疑似黄龙病树之前，先轻剪老病枝，再沿着病树冠滴水线挖宽20cm×深30cm的沟，均匀撒上肥料0.7kg/株，回埋覆土；冬季清园施肥一次，第二次生理落果之后施一次；所述的肥料按重量份包括以下组分：硝铵磷80份、聚氨基酸1份、乙二胺四乙酸锌钠盐1份、乙二胺四乙酸镁钠盐1份、乙二胺四乙酸铁钠盐0.15份、乙二胺四乙酸锰钠盐0.10份、吲哚丁酸0.10份、多菌灵0.05份和恶霉灵
0.1份；所述的冬季清园的时间为每年的12月底至次年1月初；所述的第二次生理落果时间为每年的4月底；所述的轻剪老病枝的标准为自顶部往下剪除每个病枝的1/3；
[0029] （2）在翌年春夏秋三季观察新梢长出的形状及颜色，如果新梢是绿色、淡绿色且叶片富有光泽、柔软有弹性的，果实形状、颜色及转色均正常的则可初步判断不是黄龙病树；反之，如果新梢还是有典型黄龙病症状的，挂果基本上是青果或红鼻子果的则是黄龙病树；
[0030] （3）于冬季清园挖除被认定为黄龙病植株。
[0031] 实施例2：
[0032] 一种甄别田间柑橘黄龙病的方法，包括以下步骤：
[0033] （1）试验地点是广西龙州县（东经106°52′，北纬22°22′海拔263m）。在挖除疑似黄龙病树之前，先轻剪老病枝，再沿着病树冠滴水线挖20cm×深30cm的沟，均匀撒上肥料1.5kg/株，回埋覆土；冬季清园施肥一次，所述的肥料按重量份包括以下组分：硝铵磷80份、聚氨基酸1份、乙二胺四乙酸锌钠盐1份、乙二胺四乙酸镁钠盐1份、乙二胺四乙酸铁钠盐
0.15份、乙二胺四乙酸锰钠盐0.10份、吲哚丁酸0.10份、多菌灵0.05份和恶霉灵0.1份；所述的冬季清园的时间为每年的12月底至次年1月初；所述的第二次生理落果时间为每年的4月底；所述的轻剪老病枝的标准为自顶部往下剪除每个病枝的1/3；
[0034] （2）在翌年春夏秋三季观察新梢长出的形状及颜色，如果新梢是绿色、淡绿色且叶片富有光泽、柔软有弹性的，果实形状、颜色及转色均正常的则可初步判断不是黄龙病树；反之，如果新梢还是有典型黄龙病症状的，挂果基本上是青果或红鼻子果的则是黄龙病树；
[0035] （3）于冬季清园挖除被认定为黄龙病植株。
[0036] 实施例3：
[0037] 一种甄别田间柑橘黄龙病的方法，包括以下步骤：
[0038] 1）试验地点是广西壮族自治区农业科学院
园艺研究所试验基地（东经108°14′，北纬22°51′海拔96m）。在挖除疑似黄龙病树之前，先轻剪老病枝，再沿着病树冠滴水线挖20cm×深30cm的沟，均匀撒上肥料3kg/株，回埋覆土。冬季清园施肥一次。所述的肥料按重量份包括以下组分：硝铵磷80份、聚氨基酸1份、乙二胺四乙酸锌钠盐1份、乙二胺四乙酸镁钠盐1份、乙二胺四乙酸铁钠盐0.15份、乙二胺四乙酸锰钠盐0.10份、吲哚丁酸0.10份、多菌灵0.05份和恶霉灵0.1份；所述的冬季清园的时间为每年的12月底至次年1月初；所述的第二次生理落果时间为每年的4月底；所述的轻剪老病枝的标准为自顶部往下剪除每个病枝的
1/3；
[0039] （2）在翌年春夏秋三季观察新梢长出的形状及颜色，如果新梢是绿色、淡绿色且叶片富有光泽、柔软有弹性的，果实形状、颜色及转色均正常的则可初步判断不是黄龙病树；反之，如果新梢还是有典型黄龙病症状的，挂果基本上是青果或红鼻子果的则是黄龙病树；
[0040] （3）于冬季清园挖除被认定为黄龙病植株。
[0041] 待翌年10月10旬左右果实成熟时期，分别对实施例1-3中所试验的沙糖橘、红心蜜柚和改良橙病树的新梢进行叶片形状、颜色、果实形状及颜色等情况做调查，同时设置以不施肥处理作为对照，结果见表1。
[0042] 表1 采用本发明田间鉴定黄龙病树的方法的实施效果
[0043]
[0044] 从表1可以看出，采用本发明的田间鉴定黄龙病树的方法使取得部分疑似黄龙病树恢复了正常，果型好，叶色果色均接近健康植株标准；另外，采用本发明的田间鉴定黄龙病树的方法，其恢复后树势比施用其他肥料的叶色更浓绿，也远远好于对照和处理后仍然不能恢复植株的衰落树势。
[0045] 另外，采用柑橘黄龙病亚洲种(Candidatus Liberibacter asiaticus)的16S rDNA特异引物fD1/fD2和OI1/OI2对处理树A和对照树B新梢的叶片样品进行PCR扩增，每个样品做24个重复，PCR检测结果见图1。
[0046] 如图1所示，在处理树A和对照树B新梢的叶片各自24个样品中，处理树A完全没有检测出黄龙病，对照树B中部分表现感染黄龙病现象。
[0047] 综上所述，采用本发明的田间鉴定黄龙病树的方法可避免因在外观直觉诊断盲目挖除非黄龙病树现象的发生，延长了果园部分植株寿命，降低了果农劳动成本，提高了果农的经济效益。本发明实施对象有砂糖橘、改良橙和红心蜜柚，在发现有疑似黄龙病树的果园中，本发明非常适合在所有柑橘栽培地区推广使用。
[0048] 前述对本发明的具体示例性实施方案的描述是为了说明和例证的目的。这些描述并非想将本发明限定为所公开的精确形式，并且很显然，根据上述教导，可以进行很多改变和变化。对示例性实施例进行选择和描述的目的在于解释本发明的特定原理及其实际应用，从而使得本领域的技术人员能够实现并利用本发明的各种不同的示例性实施方案以及各种不同的选择和改变。本发明的范围意在由权利要求书及其等同形式所限定。
