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一种丁酸梭菌及丁酸梭菌饲料添加剂的生产方法

阅读：20发布：2020-05-12

专利汇可以提供一种丁酸梭菌及丁酸梭菌饲料添加剂的生产方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本发明公开了丁酸梭菌技术领域的一种丁酸梭菌及丁酸梭菌饲料添加剂的生产方法，该丁酸梭菌的发酵用菌株选择方法如下：步骤一：对丁酸梭菌进行提取；步骤二：对丁酸梭菌进行菌种分离；步骤三：对丁酸梭菌进行抑菌活性筛选；步骤四：对丁酸梭菌进行菌种鉴定；通过筛选丁酸梭菌产丁酸性能较好的菌株，实现固态共培养丁酸梭菌嗜酸乳杆菌及代谢产物等在动物肠道中的协同调控及替代抗生素的作用，同时利用豆粕、葡萄皮渣玉米DDGS等高纤维副产品，通过丁酸梭菌嗜酸乳杆菌固态共培养发酵，达到加工副产品原料高值化利用的目的，充分节约饲料资源，进一步降本增效。，下面是一种丁酸梭菌及丁酸梭菌饲料添加剂的生产方法专利的具体信息内容。

权利要求

1.一种丁酸梭菌，该丁酸梭菌用在饲料发酵中，其特征在于：该丁酸梭菌的发酵用菌株选择方法如下：
步骤一：对丁酸梭菌进行提取；
步骤二：对丁酸梭菌进行菌种分离；
步骤三：对丁酸梭菌进行抑菌活性筛选；
步骤四：对丁酸梭菌进行菌种鉴定；
步骤五：对鉴定后的菌株进行筛选，筛选出降解纤维素产丁酸能力80％以上的菌株；
步骤六：将筛选后的菌株接种在纤维素固体培养基中，测定短链脂肪酸组分，选定发酵用菌株。
2.根据权利要求1所述的一种丁酸梭菌，其特征在于：所述步骤一中提取方法为在土壤中对丁酸梭菌进行提取。
3.根据权利要求1所述的一种丁酸梭菌，其特征在于：所述步骤二中菌种分离方法为厌氧培养法。
4.根据权利要求1所述的一种丁酸梭菌，其特征在于：所述步骤三中筛选方法为孔穴琼脂扩散法。
5.根据权利要求1所述的一种丁酸梭菌，其特征在于：所述步骤四中鉴定方法为形态学、生理生化和16SrDNA基因序列同源性分析法。
6.根据权利要求1-6任意一项所述的丁酸梭菌饲料添加剂的生产方法，其特征在于：该生产方法步骤如下：
步骤一：通过响应面法优化丁酸梭菌以豆粕、葡萄皮渣、玉米DDGS等副产品为固体培养基的发酵条件，得到最佳参数，建立固态培养方法；
步骤二：将培养的丁酸梭菌与嗜酸乳杆菌共同进行培养；
步骤三：将共同培养的丁酸梭菌及嗜酸乳杆菌菌株加入豆粕、葡萄皮渣玉米DDGS等高纤维副产品进行发酵得到饲料添加剂。

说明书全文

一种丁酸梭菌及丁酸梭菌饲料添加剂的生产方法

技术领域

[0001] 本发明涉及丁酸梭菌技术领域，具体为一种丁酸梭菌及丁酸梭菌饲料添加剂的生产方法。

背景技术

[0002] 丁酸梭菌，又名酪酸菌，丁酸梭状芽孢杆菌，丁酸菌，主要分布在人的粪便和土壤中，其厌氧培养的过滤物中含有较少的脂肪酸，具有极强的整肠作用，它可抑制肠道中的致病菌，促进肠道中有益菌如双歧杆菌和乳杆菌的生长。

[0003] 丁酸梭菌做为饲料添加剂在饲料中应用，在动物肠道内可体现五大生物特性：一是促进动物肠道有益菌群(双歧杆菌,乳酸杆菌)的增殖和发育，抑制肠道内有害菌和腐败菌的生长、繁殖，纠正肠道菌群紊乱，减少肠毒素的发生；二是在动物肠道内能产生B族维生素、维生素K、淀粉酶等物质，具有保健作用；三是丁酸梭菌的主要代谢产物丁酸是肠道上皮组织细胞的再生和修复主要营养物质；四是厌氧或者兼性厌氧芽孢杆菌，不受胃酸、胆汁酸等影响；五是对多种饲用抗生素有较强的耐受性,可配伍使用。丁酸梭菌作为新饲料添加剂的使用，对于减少当前饲料中抗生素产品的滥用、减少药物在肉品中的残留、降低动物细菌的耐药性和保障动物健康方面有着重要的意义。

[0004] 现有的丁酸梭菌中，并不能通过筛选丁酸梭菌来实现固态共培养丁酸梭菌嗜酸乳杆菌及代谢产物等在动物肠道中的协同调控及替代抗生素的作用，导致丁酸梭菌在与高纤维副产品混合使，不能达到加工副产品原料高值化利用的目的，不能达到节约饲料资源的目的，不能降低成本。

发明内容

[0005] 本发明的目的在于提供一种丁酸梭菌及丁酸梭菌饲料添加剂的生产方法，以解决上述背景技术中提出的丁酸梭菌在与高纤维副产品混合时不能达到加工副产品原料高值化利用的目的的问题。

[0006] 为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种丁酸梭菌，该丁酸梭菌的发酵用菌株选择方法如下：

[0007] 步骤一：对丁酸梭菌进行提取；

[0008] 步骤二：对丁酸梭菌进行菌种分离；

[0009] 步骤三：对丁酸梭菌进行抑菌活性筛选；

[0010] 步骤四：对丁酸梭菌进行菌种鉴定；

[0011] 步骤五：对鉴定后的菌株进行筛选，筛选出降解纤维素产丁酸能力80％以上的菌株；

[0012] 步骤七六：将筛选后的菌株接种在纤维素固体培养基中，测定短链脂肪酸组分，选定发酵用菌株。

[0013] 优选的，所述步骤一中提取方法为在土壤中对丁酸梭菌进行提取。

[0014] 优选的，所述步骤二中菌种分离方法为厌氧培养法。

[0015] 优选的，所述步骤三中筛选方法为孔穴琼脂扩散法。

[0016] 优选的，所述步骤四中鉴定方法为形态学、生理生化和16SrDNA基因序列同源性分析法。

[0017] 优选的，该生产方法步骤如下：

[0018] 步骤一：通过响应面法优化丁酸梭菌以豆粕、葡萄皮渣、玉米DDGS等副产品为固体培养基的发酵条件，得到最佳参数，建立固态培养方法；

[0019] 步骤二：将培养的丁酸梭菌与嗜酸乳杆菌共同进行培养；

[0020] 步骤三：将共同培养的丁酸梭菌及嗜酸乳杆菌菌株加入豆粕、葡萄皮渣玉米DDGS等高纤维副产品进行发酵得到饲料添加剂。

[0021] 与现有技术相比，本发明的有益效果是：通过该一种丁酸梭菌及丁酸梭菌饲料添加剂的生产方法，现有的丁酸梭菌中，并不能通过筛选丁酸梭菌来实现固态共培养丁酸梭菌嗜酸乳杆菌及代谢产物等在动物肠道中的协同调控及替代抗生素的作用，导致丁酸梭菌在与高纤维副产品混合使，不能达到加工副产品原料高值化利用的目的，不能达到节约饲料资源的目的，不能降低成本，本申请文件中，通过筛选丁酸梭菌产丁酸性能较好的菌株，实现固态共培养丁酸梭菌嗜酸乳杆菌及代谢产物等在动物肠道中的协同调控及替代抗生素的作用，同时利用豆粕、葡萄皮渣玉米DDGS等高纤维副产品，通过丁酸梭菌嗜酸乳杆菌固态共培养发酵，达到加工副产品原料高值化利用得目的，充分节约饲料资源，进一步降本增效。

具体实施方式

[0022] 下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

[0023] 本发明提供如下技术方案：一种丁酸梭菌及丁酸梭菌饲料添加剂的生产方法，用于达到加工副产品原料高值化利用的目的，充分节约饲料资源，进一步降本增效的。

[0024] 实施例

[0025] 该丁酸梭菌的发酵用菌株选择方法如下：

[0026] 步骤一：对丁酸梭菌进行提取；

[0027] 步骤二：对丁酸梭菌进行菌种分离；

[0028] 步骤三：对丁酸梭菌进行抑菌活性筛选；

[0029] 步骤四：对丁酸梭菌进行菌种鉴定；

[0030] 步骤五：对鉴定后的菌株进行筛选，筛选出降解纤维素产丁酸能力80％以上的菌株；

[0031] 步骤六：将筛选后的菌株接种在纤维素固体培养基中，测定短链脂肪酸组分，选定发酵用菌株。

[0032] 优选的，所述步骤一中提取方法为在土壤中对丁酸梭菌进行提取。

[0033] 优选的，所述步骤二中菌种分离方法为厌氧培养法。

[0034] 优选的，所述步骤三中筛选方法为孔穴琼脂扩散法。

[0035] 优选的，所述步骤四中鉴定方法为形态学、生理生化和16SrDNA基因序列同源性分析法。

[0036] 优选的，该生产方法步骤如下：

[0037] 步骤一：通过响应面法优化丁酸梭菌以豆粕、葡萄皮渣、玉米DDGS等副产品为固体培养基的发酵条件，得到最佳参数，建立固态培养方法；

[0038] 步骤二：将培养的丁酸梭菌与嗜酸乳杆菌共同进行培养；

[0039] 步骤三：将共同培养的丁酸梭菌及嗜酸乳杆菌菌株加入豆粕、葡萄皮渣玉米DDGS等高纤维副产品进行发酵得到饲料添加剂。

[0040] 将丁酸梭菌与嗜酸乳杆菌共同进行培养，分为三组，分别取对数期的两种菌，然后按对照组1仅接丁酸梭菌纯培养，对照组2仅接嗜酸乳杆纯培养，实验组接混合菌株，实验组中丁酸梭菌与嗜酸乳杆菌的比例为1：1，分别测定活菌数，确定丁酸梭菌与嗜酸乳杆菌共生关系，并对固体共培养参数进行优化，如下表：

[0041]组别对照组1 对照组2 实验组1
活菌数(mm2/个) 180 140 280
共生关系 / / 融合
固体培养参数 PH＝7、温度＝28 PH＝7、温度＝28 PH＝7、温度＝28

[0042] 由上表可知，当丁酸梭菌与嗜酸乳杆菌融合时，其活菌数最多，且丁酸梭菌与嗜酸乳杆菌之间相互融合。

[0043] 将优化后的培养关系中筛选出丁酸梭菌与嗜酸乳杆菌添加不同的剂量，研究在肉鸡日粮中替代抗生素及提高免疫力抗氧化能力方面的可行性，选出三个实验例，实验例1为日常没有采用本申请文件中产生的最优化饲料添加剂的饲料，实验例2为全部采用本申请文件中产生的最优化饲料添加剂的饲料，实验例3为一半日常饲料，一半采用本申请文件中产生的最优化饲料添加剂的饲料对肉鸡进行喂养，来测定肉鸡生产性能、肠道形态学及肠道菌群、免疫指标、及有关生理生化指标，得出下表：

[0044]

[0045] 由上表可知，当采用实验例3一半日常饲料，一半采用本申请文件中产生的最优化饲料添加剂的饲料对肉鸡进行喂养时，其生产性能、肠道形态、免疫指标和生理生化指标均优于实验例1和实验例2，从而达到加工副产品原料高值化利用目的，充分节约饲料资源，进一步降本增效的。

[0046] 虽然在上文中已经参考了一些实施例对本发明进行描述，然而在不脱离本发明的范围的情况下，可以对其进行各种改进并且可以用等效无替换其中的部件。尤其是，只要不存在结构冲突，本发明所披露的各个实施例中的各项特征均可通过任意方式相互结合起来使用，在本说明书中未对这些组合的情况进行穷举的描述仅仅是处于省略篇幅和节约资源的考虑。因此，本发明并不局限于文中公开的特定实施例，而且包括落入权利要求的范围内的所有技术方案。

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