技术领域
[0001] 本
发明涉及检测技术领域，具体为一种尿液异常代谢细胞捕获和检测方法。
背景技术
[0002] 尿液检查，是医学的一种检测方式。包括尿常规分析、尿液中有形成分检测(如尿红细胞、白细胞等)、蛋白成分定量测定、尿酶测定等。尿液检查对临床诊断、判断疗效和
预后有着十分重要的价值。
[0003] 尿液有形成分检测目前是将尿液加入规定体积的计数池中，经过一定时间的自然沉降使有形成分降落到计数池底，通过
显微镜人工观测计取计数池底各种有形成分，或利用自动控制手段对计数池底层拍摄图像利用分析
软件自动识别各种有形成分，但是目前的细胞捕获和检测方法由于尿液具有不同的粘稠度，
沉降速度差别很大，容易导致图像不清晰，检测结果不准，为此提出一种图像清晰，检测结果准确的方法来解决此问题。
发明内容
[0004] 本发明的目的在于提供一种尿液异常代谢细胞捕获和检测方法，具备图像清晰，检测结果准确的优点，解决了目前的细胞捕获和检测方法由于尿液具有不同的粘稠度，沉降速度差别很大，容易导致图像不清晰，检测结果不准的问题。
[0005] 为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种尿液异常代谢细胞捕获和检测方法，包括以下步骤：
[0006] 步骤1：去除样本杂质：拿取尿液样本，将尿液样本倒入试管，接着将尿素酶
水溶液加入试管，静置孵育，从而去除尿液样本中的尿素，然后加入活性
吸附剂，使用
超声波震荡，去除尿液样本中的硫和磷；
[0007] 步骤2：加入PBS溶液：将尿液样本倒入离心设备进行离心，加入PBS溶液，得到FPBS重悬的尿液细胞；
[0008] 步骤3：处理器皿：对器皿进行清洗，将APTES溶液加入到器皿中，接着将器皿避光放置一个半小时，然后吸除多余的APTES，最后使用纯水清洗若干次后，将器皿放入烘箱中烘干；
[0009] 步骤4：倒入器皿：将FPBS重悬的尿液细胞加入到器皿中，然后吸除多余液体，接着吸出多余液体加入多聚甲
醛进行固定、吸出多余液体加入PBS进行清洗；
[0010] 步骤5：检测：将尿液细胞倒在滤膜上进行过滤，滤膜将尿液细胞截留在滤膜上，对截留在滤膜上的尿液细胞进行检测，检测使用显微镜拍照识别。
[0011] 优选的，所述在步骤1中，尿液样本为患者清晨起床第一次小便的中端尿液，且患者需要提前至少八个小时不喝水。
[0012] 优选的，所述在步骤1中，取得尿液样本后应该在两个小时内及时处理，或放入4℃左右的
冰箱保存，但不可超过6小时。
[0013] 优选的，所述在步骤2中，使用200g离心，离心需要6分钟。
[0014] 优选的，所述在步骤2中，PBS溶液中FBS的
质量占比应为百分之一。
[0015] 优选的，所述在步骤3中，烘干时间为1～2h，烘干
温度为75～85℃。
[0016] 优选的，所述在步骤4中，多聚甲醛中多聚甲醛的质量占比应为百分之四，在4℃的温度中放置10分钟。
[0017] 优选的，所述在步骤4中，加入预冷后的甲醇，在-15℃的温度中放置15分钟。
[0018] 优选的，所述在步骤4中，清洗完成后将器皿静置20分钟，温度37℃。
[0019] 优选的，所述在步骤5中，滤膜分两种：一种是透明滤膜，一种是不透明滤膜，优选透明滤膜。
[0020] 与
现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明通过设置去除样本杂质、加入PBS溶液、处理器皿、倒入器皿和检测的工艺流程，解决了目前的细胞捕获和检测方法由于尿液具有不同的粘稠度，沉降速度差别很大，容易导致图像不清晰，检测结果不准的问题，该尿液异常代谢细胞捕获和检测方法，具备图像清晰，检测结果准确的优点。
具体实施方式
[0021] 下面将通过
实施例的方式对本发明作更详细的描述，这些实施例仅是举例说明性的而没有任何对本发明范围的限制。
[0022] 本发明提供一种技术方案：一种尿液异常代谢细胞捕获和检测方法，包括以下步骤：
[0023] 步骤1：去除样本杂质：拿取尿液样本，将尿液样本倒入试管，接着将尿素酶水溶液加入试管，静置孵育，从而去除尿液样本中的尿素，然后加入活性吸附剂，使用
超声波震荡，去除尿液样本中的硫和磷；
[0024] 步骤2：加入PBS溶液：将尿液样本倒入离心设备进行离心，加入PBS溶液，得到FPBS重悬的尿液细胞；
[0025] 步骤3：处理器皿：对器皿进行清洗，将APTES溶液加入到器皿中，接着将器皿避光放置一个半小时，然后吸除多余的APTES，最后使用纯水清洗若干次后，将器皿放入烘箱中烘干；
[0026] 步骤4：倒入器皿：将FPBS重悬的尿液细胞加入到器皿中，然后吸除多余液体，接着吸出多余液体加入多聚甲醛进行固定、吸出多余液体加入PBS进行清洗；
[0027] 步骤5：检测：将尿液细胞倒在滤膜上进行过滤，滤膜将尿液细胞截留在滤膜上，对截留在滤膜上的尿液细胞进行检测，检测使用显微镜拍照识别。
[0028] 实施例一：
[0029] 去除样本杂质：拿取尿液样本，将尿液样本倒入试管，接着将尿素酶水溶液加入试管，静置孵育，从而去除尿液样本中的尿素，然后加入活性吸附剂，使用超声波震荡，去除尿液样本中的硫和磷；加入PBS溶液：将尿液样本倒入离心设备进行离心，加入PBS溶液，得到FPBS重悬的尿液细胞；处理器皿：对器皿进行清洗，将APTES溶液加入到器皿中，接着将器皿避光放置一个半小时，然后吸除多余的APTES，最后使用纯水清洗若干次后，将器皿放入烘箱中烘干；倒入器皿：将FPBS重悬的尿液细胞加入到器皿中，然后吸除多余液体，接着吸出多余液体加入多聚甲醛进行固定、吸出多余液体加入PBS进行清洗；检测：将尿液细胞倒在滤膜上进行过滤，滤膜将尿液细胞截留在滤膜上，对截留在滤膜上的尿液细胞进行检测，检测使用显微镜拍照识别。
[0030] 实施例二：
[0031] 在实施例一中，再加上下述工序：
[0032] 在步骤1中，尿液样本为患者清晨起床第一次小便的中端尿液，且患者需要提前至少八个小时不喝水，避免检测结果受到干扰。
[0033] 去除样本杂质：拿取尿液样本，将尿液样本倒入试管，接着将尿素酶水溶液加入试管，静置孵育，从而去除尿液样本中的尿素，然后加入活性吸附剂，使用超声波震荡，去除尿液样本中的硫和磷；加入PBS溶液：将尿液样本倒入离心设备进行离心，加入PBS溶液，得到FPBS重悬的尿液细胞；处理器皿：对器皿进行清洗，将APTES溶液加入到器皿中，接着将器皿避光放置一个半小时，然后吸除多余的APTES，最后使用纯水清洗若干次后，将器皿放入烘箱中烘干；倒入器皿：将FPBS重悬的尿液细胞加入到器皿中，然后吸除多余液体，接着吸出多余液体加入多聚甲醛进行固定、吸出多余液体加入PBS进行清洗；检测：将尿液细胞倒在滤膜上进行过滤，滤膜将尿液细胞截留在滤膜上，对截留在滤膜上的尿液细胞进行检测，检测使用显微镜拍照识别。
[0034] 实施例三：
[0035] 在实施例二中，再加上下述工序：
[0036] 在步骤1中，取得尿液样本后应该在两个小时内及时处理，或放入4℃左右的冰箱保存，但不可超过6小时，可以避免尿液样本中的物质分解影响检测效果。
[0037] 去除样本杂质：拿取尿液样本，将尿液样本倒入试管，接着将尿素酶水溶液加入试管，静置孵育，从而去除尿液样本中的尿素，然后加入活性吸附剂，使用超声波震荡，去除尿液样本中的硫和磷；加入PBS溶液：将尿液样本倒入离心设备进行离心，加入PBS溶液，得到FPBS重悬的尿液细胞；处理器皿：对器皿进行清洗，将APTES溶液加入到器皿中，接着将器皿避光放置一个半小时，然后吸除多余的APTES，最后使用纯水清洗若干次后，将器皿放入烘箱中烘干；倒入器皿：将FPBS重悬的尿液细胞加入到器皿中，然后吸除多余液体，接着吸出多余液体加入多聚甲醛进行固定、吸出多余液体加入PBS进行清洗；检测：将尿液细胞倒在滤膜上进行过滤，滤膜将尿液细胞截留在滤膜上，对截留在滤膜上的尿液细胞进行检测，检测使用显微镜拍照识别。
[0038] 实施例四：
[0039] 在实施例三中，再加上下述工序：
[0040] 在步骤2中，使用200g离心，离心需要6分钟，PBS溶液中FBS的质量占比应为百分之一，可以对确保离心的效果。
[0041] 去除样本杂质：拿取尿液样本，将尿液样本倒入试管，接着将尿素酶水溶液加入试管，静置孵育，从而去除尿液样本中的尿素，然后加入活性吸附剂，使用超声波震荡，去除尿液样本中的硫和磷；加入PBS溶液：将尿液样本倒入离心设备进行离心，加入PBS溶液，得到FPBS重悬的尿液细胞；处理器皿：对器皿进行清洗，将APTES溶液加入到器皿中，接着将器皿避光放置一个半小时，然后吸除多余的APTES，最后使用纯水清洗若干次后，将器皿放入烘箱中烘干；倒入器皿：将FPBS重悬的尿液细胞加入到器皿中，然后吸除多余液体，接着吸出多余液体加入多聚甲醛进行固定、吸出多余液体加入PBS进行清洗；检测：将尿液细胞倒在滤膜上进行过滤，滤膜将尿液细胞截留在滤膜上，对截留在滤膜上的尿液细胞进行检测，检测使用显微镜拍照识别。
[0042] 实施例五：
[0043] 在实施例四中，再加上下述工序：
[0044] 在步骤3中，烘干时间为1～2h，烘干温度为75～85℃，这样便可以完成烘干。
[0045] 去除样本杂质：拿取尿液样本，将尿液样本倒入试管，接着将尿素酶水溶液加入试管，静置孵育，从而去除尿液样本中的尿素，然后加入活性吸附剂，使用超声波震荡，去除尿液样本中的硫和磷；加入PBS溶液：将尿液样本倒入离心设备进行离心，加入PBS溶液，得到FPBS重悬的尿液细胞；处理器皿：对器皿进行清洗，将APTES溶液加入到器皿中，接着将器皿避光放置一个半小时，然后吸除多余的APTES，最后使用纯水清洗若干次后，将器皿放入烘箱中烘干；倒入器皿：将FPBS重悬的尿液细胞加入到器皿中，然后吸除多余液体，接着吸出多余液体加入多聚甲醛进行固定、吸出多余液体加入PBS进行清洗；检测：将尿液细胞倒在滤膜上进行过滤，滤膜将尿液细胞截留在滤膜上，对截留在滤膜上的尿液细胞进行检测，检测使用显微镜拍照识别。
[0046] 实施例六：
[0047] 在实施例五中，再加上下述工序：
[0048] 在步骤4中，多聚甲醛中多聚甲醛的质量占比应为百分之四，在4℃的温度中放置10分钟，加入预冷后的甲醇，在-15℃的温度中放置15分钟，清洗完成后将器皿静置20分钟，温度37℃，这样可以达到想要的效果。
[0049] 去除样本杂质：拿取尿液样本，将尿液样本倒入试管，接着将尿素酶水溶液加入试管，静置孵育，从而去除尿液样本中的尿素，然后加入活性吸附剂，使用超声波震荡，去除尿液样本中的硫和磷；加入PBS溶液：将尿液样本倒入离心设备进行离心，加入PBS溶液，得到FPBS重悬的尿液细胞；处理器皿：对器皿进行清洗，将APTES溶液加入到器皿中，接着将器皿避光放置一个半小时，然后吸除多余的APTES，最后使用纯水清洗若干次后，将器皿放入烘箱中烘干；倒入器皿：将FPBS重悬的尿液细胞加入到器皿中，然后吸除多余液体，接着吸出多余液体加入多聚甲醛进行固定、吸出多余液体加入PBS进行清洗；检测：将尿液细胞倒在滤膜上进行过滤，滤膜将尿液细胞截留在滤膜上，对截留在滤膜上的尿液细胞进行检测，检测使用显微镜拍照识别。
[0050] 实施例七：
[0051] 在实施例六中，再加上下述工序：
[0052] 在步骤5中，滤膜分两种：一种是透明滤膜，一种是不透明滤膜，优选透明滤膜，免除沉降环节，易于实现快捷获得尿液有形成分的清晰图像。
[0053] 去除样本杂质：拿取尿液样本，将尿液样本倒入试管，接着将尿素酶水溶液加入试管，静置孵育，从而去除尿液样本中的尿素，然后加入活性吸附剂，使用超声波震荡，去除尿液样本中的硫和磷；加入PBS溶液：将尿液样本倒入离心设备进行离心，加入PBS溶液，得到FPBS重悬的尿液细胞；处理器皿：对器皿进行清洗，将APTES溶液加入到器皿中，接着将器皿避光放置一个半小时，然后吸除多余的APTES，最后使用纯水清洗若干次后，将器皿放入烘箱中烘干；倒入器皿：将FPBS重悬的尿液细胞加入到器皿中，然后吸除多余液体，接着吸出多余液体加入多聚甲醛进行固定、吸出多余液体加入PBS进行清洗；检测：将尿液细胞倒在滤膜上进行过滤，滤膜将尿液细胞截留在滤膜上，对截留在滤膜上的尿液细胞进行检测，检测使用显微镜拍照识别。
[0054] 尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、
修改、替换和变型，本发明的范围由所附
权利要求及其等同物限定。
