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一种对萼花臂尾轮虫进行半数环境容纳量扩培的方法

阅读：896发布：2020-05-08

专利汇可以提供一种对萼花臂尾轮虫进行半数环境容纳量扩培的方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本发明属于渔业生物群落结构与食物网功能关系技术领域。本发明提供了一种对萼花臂尾轮虫进行半数环境容量扩培的方法，包括：确定萼花臂尾轮虫培养增长速率K点和K/2点培养萼花臂尾轮虫。本发明方法提供了在K/2时进行转接培养可以保持种群长期的高速稳定增长，有利于保证实验材料的稳定获取；即生长繁殖力最旺盛的时候进行转接培养，从而使轮虫种群保持稳定增长。本发明的方法简单易上手，材料易获得，效果显著；且适宜于轮虫的稳定培养。，下面是一种对萼花臂尾轮虫进行半数环境容纳量扩培的方法专利的具体信息内容。

权利要求

1.一种对萼花臂尾轮虫进行半数环境容量扩培的方法，其特征在于，包括：确定萼花臂尾轮虫培养增长速率K点和K/2点培养萼花臂尾轮虫。
2.依据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的确定萼花臂尾轮虫培养增长速率K点，包括：孵化萼花臂尾轮虫休眠卵、培养萼花臂尾轮虫、确定增长速率K点。
3.依据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的K/2点培养萼花臂尾轮虫，包括：孵化萼花臂尾轮虫休眠卵、培养萼花臂尾轮虫、在K/2点进行再培养。

说明书全文

一种对萼花臂尾轮虫进行半数环境容纳量扩培的方法

技术领域

[0001] 本发明属于渔业生物群落结构与食物网功能关系技术领域。

背景技术

[0002] 轮虫隶属于轮虫动物门(Rotifera)，大部分种类身体大小在100—500μm，在假体腔动物中是十分繁盛的一个类群。其种类数量仅次于线虫动物，全世界有约2000种。轮虫中大部分(约1600种)种类属于单巢纲，其余则属于双巢纲(另一分类方法则分为蛭态纲和尾盘纲)。轮虫动物门有许多种类在全世界广泛分布，大部分生活在淡水环境。

[0003] 萼花臂尾轮虫(Brachionus calyciflorus)在淡水轮虫中具有十分重要的地位。萼花臂尾轮虫属于单巢纲(Monogononta)，游泳目(Ploima)，臂尾轮科(Brachionidae)，臂尾轮属(Brachionus)。萼花臂尾轮虫具有生长快速，在我国广泛分布，易于获得，易于培养等优点，是实验研究中重要的模式生物。如何在实验室对其进行快速扩培，并保持其种群的稳定增长，以便适应实验需求具有重要意义。

[0004] 在具有空间、食物限制的人工繁殖培养中，由于轮虫繁殖速度快，其种群密度可快速达到峰值，从而密度过高，水体溶氧快速消耗，代谢废物积累而造成养殖轮虫死亡，因此种群密度迅速下降。这种种群密度的剧烈波动不利于研究人员开展试验研究。

[0005] 如何找到克服目前问题的解决方案，是本领域研究人员一直无法解决的难题。

发明内容

[0006] 本发明提供了一种对萼花臂尾轮虫进行半数环境容量扩培的方法，包括：确定萼花臂尾轮虫培养增长速率K点和K/2点培养萼花臂尾轮虫。

[0007] 进一步地，所述的确定萼花臂尾轮虫培养增长速率K点，包括：孵化萼花臂尾轮虫休眠卵、培养萼花臂尾轮虫、确定增长速率K点。

[0008] 进一步地，所述的K/2点培养萼花臂尾轮虫，包括：孵化萼花臂尾轮虫休眠卵、培养萼花臂尾轮虫、在K/2点进行再培养。

[0009] 本发明方法提供了在K/2时进行转接培养可以保持种群长期的高速稳定增长，有利于保证实验材料的稳定获取；即生长繁殖力最旺盛的时候进行转接培养，从而使轮虫种群保持稳定增长。本发明的方法简单易上手，材料易获得，效果显著；且适宜于轮虫的稳定培养。附图说明

[0010] 图1是K和K/2值标示图。

[0011] 图2是扩培后轮虫仍保持高速增长图。

具体实施方式

[0012] 实施例1

[0013] 本发明的目的是提供一种对萼花臂尾轮虫进行半数环境容量扩培的方法。

[0014] 本方法采用EPA培养液对萼花臂尾轮虫进行培养。光照昼夜周期12h:12h，光照强度1500Lx。食物为采用BG-11培养的小球藻(中科院水生生物研究所#1067)，添加量为106cell/ml。

[0015] 本发明方法在轮虫繁殖力最旺盛时进行转接扩培，有利于保持轮虫种群的持续培养，保证了其作为实验材料来源的稳定可靠。

[0016] 为了实现上述目的，本方法包括以下步骤：

[0017] 1.确定萼花臂尾轮虫培养增长速率K点

[0018] (1)孵化萼花臂尾轮虫休眠卵：

[0019] 吸取于光照培养箱中培养萼花臂尾轮虫产生的底部培养液，挑选出其中的休眠卵，于4℃冰箱中放置4周，取出，放入特制的10ml小玻璃杯中孵化。

[0020] (2)在食物充足的环境中培养并快速繁殖萼花臂尾轮虫：

[0021] 从孵化的轮虫中挑选9只幼体，分为三组平行(A，B，C)，每组3只，放入10ml小玻璃杯中，加入EPA培养液，添加小球藻(FACHB#1067)至106cell/ml，待轮虫数目增长至20只及以上后，将轮虫转移至250ml烧杯中，添加200mlEPA培养液进行培养，保持小球藻浓度在6
10cell/ml。

[0022] (3)确定增长速率K点；

[0023] 每隔24h将培养在200毫升培养液中的轮虫混匀，取8毫升于显微镜下计数，依据数量的变化和时间的关系，确定K点及对应的时间。

[0024] 第一批轮虫从换至250ml烧杯开始计算日期，培养至轮虫种群开始衰退，作出轮虫密度变化曲线，找出增长速率最大的点。

[0025] 所述K点即数量不再增长且出现下降的拐点。

[0026] 第一次轮虫培养试验

[0027]

[0028] 2.K/2点培养萼花臂尾轮虫

[0029] (1)孵化萼花臂尾轮虫休眠卵：

[0030] 吸取于光照培养箱中培养萼花臂尾轮虫产生的底部培养液，挑选出其中的休眠卵，于4℃冰箱中放置4周，取出，放入特制的10ml小玻璃杯中孵化。

[0031] (2)在食物充足的环境中培养并快速繁殖萼花臂尾轮虫：

[0032] 从孵化的轮虫中挑选幼体，放入10ml小玻璃杯中，加入EPA培养液，添加小球藻(水生生物研究所#1067)至106cell/ml，待轮虫数目增长至20只及以上后，将轮虫转移至250ml烧杯中，添加200mlEPA培养液进行培养，保持小球藻浓度在106cell/ml。

[0033] (3)在种群达到半数环境容纳量，即K/2点进行再培养：

[0034] 根据第一步找到的K和K/2值标示(见图1)。在种群增殖率最大时转接扩培；将原有的200毫升轮虫及培养液混匀，转接100毫升至新的烧杯中，并添加培养液至200毫升。扩培后轮虫仍保持高速增长(见图2)。

[0035] 第二次轮虫培养试验

[0036]

[0037]

[0038] 本发明方法提供了在K/2时进行转接培养可以保持种群长期的高速稳定增长，有利于保证实验材料的稳定获取；即生长繁殖力最旺盛的时候进行转接培养，从而使轮虫种群保持稳定增长。本发明的方法简单易上手，材料易获得，效果显著；且适宜于轮虫的稳定培养。

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