首页 / 专利库 / 环境工程 / 生物修复 / 植物修复 / 植物挥发 / 一种柑橘木虱植物源杀虫剂及其制备方法

一种柑橘木虱植物杀虫剂及其制备方法

阅读:608发布:2020-05-11

专利汇可以提供一种柑橘木虱植物杀虫剂及其制备方法专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且本 发明 公开了一种柑橘木虱 植物 源 杀虫剂 及其制备方法,其由胜红蓟根部内生黑曲霉 水 相次生产物和二甲基亚砜组成。本发明通过将入侵植物胜红蓟根部内生黑曲霉水相次生产物与二甲亚砜混合,达到对柑橘木虱的毒杀效果,并将胜红蓟变废为宝。本发明以植物的内生 真菌 资源为出发点,发掘了植物内生真菌成为新药源的潜 力 ,为植物源 农药 的开发应用提供新思路。,下面是一种柑橘木虱植物杀虫剂及其制备方法专利的具体信息内容。

1.一种柑橘木虱植物杀虫剂,其特征在于:由胜红蓟根部内生黑曲霉相次生产物和二甲基亚砜组成,胜红蓟根部内生黑曲霉水相次生产物在二甲基亚砜中的浓度为0.25-
4.00mg/mL;
其中,胜红蓟根部内生黑曲霉水相次生产物的制备包括:将胜红蓟根部内生黑曲霉接种于液体培养基中,于27-29℃和180-220rpm条件下震荡培养,所得发酵液用乙酸乙酯萃取后取下层挥发至浸膏状即成。
2.如权利要求1所述的柑橘木虱植物源杀虫剂,其特征在于:所述胜红蓟根部内生黑曲霉水相次生产物在二甲基亚砜中的浓度为4.00mg/mL。
3.权利要求1或2所述的柑橘木虱植物源杀虫剂的制备方法,其特征在于:包括如下步骤:
(1)将胜红蓟新鲜根部组织用自来水和无菌水依次冲洗干净除去表皮污垢后于室内自然晾干;
(2)将步骤(1)所得的物料采用组织切法处理后接入平板培养基中,于27-29℃恒温培养箱培养至平板培养基内的组织块的边缘长出菌落或菌丝后,将不同颜色、大小和形态的菌落和菌丝分别进行挑取,转接至空白的上述平板培养基中于27-29℃恒温培养箱培养,反复操作直至纯化到每个平板培养基中只有一种内生真菌,通过形态学观察和分子生物学鉴定筛选得到黑曲霉Aspergillus niger;
(3)将上述黑曲霉Aspergillus niger接种于液体培养基中,于27-29℃和180-220rpm条件下震荡培养6-8d至液体培养基中长出大量大小均匀的球状菌体,所得发酵液用乙酸乙酯萃取后取下层挥发至浸膏状,即得胜红蓟根部内生黑曲霉水相次生产物;
(4)将上述胜红蓟根部内生黑曲霉水相次生产物与二甲基亚砜均匀混合,即成。
4.如权利要求2所述的制备方法,其特征在于:所述步骤(2)中的恒温培养箱的温度
28℃。
5.如权利要求4所述的缓释栓塞微球,其特征在于:所述步骤(3)为:将所述黑曲霉Aspergillus niger接种于液体培养基中,于28℃和200rpm条件下震荡培养7d至液体培养基中长出大量大小均匀的球状菌体,所得发酵液用乙酸乙酯萃取后取下层挥发至浸膏状,即得胜红蓟根部内生黑曲霉水相次生产物。

说明书全文

一种柑橘木虱植物杀虫剂及其制备方法

技术领域

[0001] 本发明属于植物虫害防治技术领域,具体涉及一种柑橘木虱植物源杀虫剂及其制备方法。

背景技术

[0002] 柑橘木虱(Diaphorina citri)是传播柑橘黄龙病(citrus huanglongbing,HLB)的主要自然虫媒,通过携带一种较为常见的韧皮部杆菌病原体在健康树木上取食而感染柑橘植株,导致柑橘树木寿命缩短,果实产量及质量降低等现象。柑橘黄龙病作为最具毁灭性的一种柑橘病害,对我国柑橘种质资源构成严峻的威胁,对柑橘种植项目的经济造成严重的损失。因此从源头防治柑橘木虱是柑橘黄龙病综合防控的关键。
[0003] 目前对于柑橘木虱的防治多采用化学合成农药防治措施,但化学农药的大量使用,较高的化学毒性积累不仅污染土壤环境,并且药物残留问题对人类身体健康也造成潜在威胁。因此,研发毒副作用小,安全有效的绿色植物源农药在柑橘木虱防控措施上也将有积极的意义。

发明内容

[0004] 本发明的目的在于克服现有技术缺陷,提供一种柑橘木虱植物源杀虫剂。
[0005] 本发明的另一目的在于提供上述柑橘木虱植物源杀虫剂的制备方法[0006] 本发明的技术方案如下:
[0007] 一种柑橘木虱植物源杀虫剂,由胜红蓟根部内生黑曲霉相次生产物和二甲基亚砜组成,胜红蓟根部内生黑曲霉水相次生产物在二甲基亚砜中的浓度为0.25-4.00mg/mL;
[0008] 其中,胜红蓟根部内生黑曲霉水相次生产物的制备包括:将胜红蓟根部内生黑曲霉接种于液体培养基中,于27-29℃和180-220rpm条件下震荡培养,所得发酵液用乙酸乙酯萃取后取下层挥发至浸膏状即成。
[0009] 在本发明的一个优选实施方案中,所述胜红蓟根部内生黑曲霉水相次生产物在二甲基亚砜中的浓度为4.00mg/mL。
[0010] 上述柑橘木虱植物源杀虫剂的制备方法,包括如下步骤:
[0011] (1)将胜红蓟新鲜根部组织用自来水和无菌水依次冲洗干净除去表皮污垢后于室内自然晾干;
[0012] (2)将步骤(1)所得的物料采用组织切法处理后接入平板培养基中,于27-29℃恒温培养箱培养至平板培养基内的组织块的边缘长出菌落或菌丝后,将不同颜色、大小和形态的菌落和菌丝分别进行挑取,转接至空白的上述平板培养基中于27-29℃恒温培养箱培养,反复操作直至纯化到每个平板培养基中只有一种内生真菌,通过形态学观察和分子生物学鉴定筛选得到黑曲霉Aspergillus niger;
[0013] (3)将上述黑曲霉Aspergillus niger接种于液体培养基中,于27-29℃和180-220rpm条件下震荡培养6-8d至液体培养基中长出大量大小均匀的球状菌体,所得发酵液用乙酸乙酯萃取后取下层挥发至浸膏状,即得胜红蓟根部内生黑曲霉水相次生产物;
[0014] (4)将上述胜红蓟根部内生黑曲霉水相次生产物与二甲基亚砜均匀混合,即成。
[0015] 在本发明的一个优选实施方案中,所述步骤(2)中的恒温培养箱的温度为28℃。
[0016] 在本发明的一个优选实施方案中,所述步骤(3)为:将所述黑曲霉Aspergillus niger接种于液体培养基中,于28℃和200rpm条件下震荡培养7d至液体培养基中长出大量大小均匀的球状菌体,所得发酵液用乙酸乙酯萃取后取下层挥发至浸膏状,即得胜红蓟根部内生黑曲霉水相次生产物。
[0017] 本发明的有益效果是:
[0018] 1、本发明通过将入侵植物胜红蓟根部内生黑曲霉水相次生产物与二甲亚砜混合,达到对柑橘木虱的毒杀效果,并将胜红蓟变废为宝。
[0019] 2、本发明以植物的内生真菌资源为出发点,发掘了植物内生真菌成为新药源的潜,为植物源农药的开发应用提供新思路。

具体实施方式

[0020] 以下通过具体实施方式对本发明的技术方案进行进一步的说明和描述。
[0021] 实施例1
[0022] (1)将胜红蓟新鲜根部组织用自来水和无菌水依次冲洗干净除去表皮污垢后于室内自然晾干;
[0023] (2)将步骤(1)所得的物料采用组织切块法处理后接入平板培养基中,于8℃恒温培养箱培养至平板培养基内的组织块的边缘长出菌落或菌丝后,将不同颜色、大小和形态的菌落和菌丝分别进行挑取,转接至空白的上述平板培养基中于28℃恒温培养箱培养,反复操作直至纯化到每个平板培养基中只有一种内生真菌,通过形态学观察和分子生物学鉴定筛选得到黑曲霉Aspergillus niger;上述平板培养基的制备方法包括:取铃薯葡萄糖琼脂培养基PDA40.1g,加入蒸馏水1000mL后搅拌煮沸至澄清状态,于121℃灭菌20min,待温度降低至45-55℃后分别加入120mg硫酸链霉素和150mg青霉素
[0024] (3)将上述黑曲霉Aspergillus niger接种于液体培养基中,于28℃和200rpm条件下震荡培养7d至液体培养基中长出大量大小均匀的球状菌体,所得发酵液用乙酸乙酯萃取后取下层挥发至浸膏状,即得胜红蓟根部内生黑曲霉水相次生产物;上述液体培养基的制备方法包括:取马铃薯葡萄糖水培养基PDB 24g,加入蒸馏水1000mL后搅拌煮沸至澄清状态,于121℃灭菌20min,待温度降低至45-55℃后分别加入120mg硫酸链霉素和150mg青霉素钾;
[0025] (4)将上述胜红蓟根部内生真菌水相次生代谢产物与所述二甲亚砜配制成相应浓度,即得植物源杀虫剂,然后进行施用。
[0026] 实施例2柑橘木虱植物源农药对柑橘木虱的毒杀效果
[0027] 以实验室饲养柑橘木虱为实验虫源,测试实施例1所得的植物源农药对柑橘木虱的毒杀效果。
[0028] 实验采用饲喂法。将新鲜、平整且无病害的九里香叶片制成与试管内径相同的叶碟,将叶碟浸入药液10s后取出晾干,用镊子将叶片平铺于试管内琼脂表面。采用自制捕虫器将20只柑橘木虱成虫从养虫笼转移至装有载毒叶碟的试管中,轻拍试管壁使试虫附着于叶碟上,塞入球至距离叶碟2cm处,每隔12h观察试虫死亡数量,记录到72h停止,以浸过二甲基亚砜溶液的叶碟为空白对照,每组重复三次。计算其每个时间段的死亡率和校正死亡率。计算公式:
[0029] 死亡率(%)=死亡数/供试试虫数×100(公式1)
[0030] 校正死亡率(%)=(处理死亡率-对照死亡率)/(1-对照死亡率)×100(公式2)[0031] 对照组死亡率小于5%则无需校正;对照组死亡率5%-20%需校正;对照组死亡率大于20%需重新测定。
[0032] 表1植物源杀虫剂对柑橘木虱的毒杀效果
[0033]
[0034]
[0035] 注:小写字母代表同一时间不同浓度处理在0.05水平上的差异显著性,P<0.05表示差异显著。
[0036] 表1结果说明,植物源杀虫剂对柑橘木虱均具有一定毒杀能力,且死亡率随毒杀时间延长及样品浓度增加而逐渐升高,并且在同一时间不同浓度死亡率均表现出明显差异。在毒杀60h后,4mg/mL浓度样品便可达到100%。毒杀72h后,各浓度死亡率均达到50%以上,
1mg/mL和2mg/mL浓度的死亡率也达到100%。
[0037] 以上所述,仅为本发明的较佳实施例而已,故不能依此限定本发明实施的范围,即依本发明专利范围及说明书内容所作的等效变化与修饰,皆应仍属本发明涵盖的范围内。
高效检索全球专利

专利汇是专利免费检索,专利查询,专利分析-国家发明专利查询检索分析平台,是提供专利分析,专利查询,专利检索等数据服务功能的知识产权数据服务商。

我们的产品包含105个国家的1.26亿组数据,免费查、免费专利分析。

申请试用

分析报告

专利汇分析报告产品可以对行业情报数据进行梳理分析,涉及维度包括行业专利基本状况分析、地域分析、技术分析、发明人分析、申请人分析、专利权人分析、失效分析、核心专利分析、法律分析、研发重点分析、企业专利处境分析、技术处境分析、专利寿命分析、企业定位分析、引证分析等超过60个分析角度,系统通过AI智能系统对图表进行解读,只需1分钟,一键生成行业专利分析报告。

申请试用

QQ群二维码
意见反馈