水溶性天然产物薄层定量图像识别检测方法
阅读：1031发布：2020-06-06
专利汇可以提供水溶性天然产物薄层定量图像识别检测方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 公开了一种 水 溶性天然产物薄层定量 图像识别 检测方法，包括：(1)含有 水溶性 天然产物的待检测样品在薄层色谱板上进行点样；(2)利用第一展开剂和第二展开剂对点样后的薄层色谱板进行薄层色谱逐级展开；所述第一展开剂为乙酸乙酯/ 乙醇 /水/乙酸组成的展开体系，所述第二展开剂为三氯甲烷/乙酸乙酯/ 甲酸 组成的展开体系；(3)利用 染色 剂系统对展开后的薄层色谱板进行显色；(4)对显色后的薄层色谱板进行 图像采集 ，根据图像与水溶性天然产物含量之间的关系，得出水溶性天然产物的含量。本发明的方法操作简便，不需要专用仪器。本发明的方法定量性好，准确度高。本发明的方法测试速度快，可以多个样品同时测定。，下面是水溶性天然产物薄层定量图像识别检测方法专利的具体信息内容。
1.一种水溶性天然产物薄层定量图像识别检测方法，其特征在于，包括：
(1)含有水溶性天然产物的待检测样品在薄层色谱板上进行点样；
(2)利用第一展开剂和第二展开剂对点样后的薄层色谱板进行薄层色谱逐级展开；所述第一展开剂为乙酸乙酯/乙醇/水/乙酸组成的展开体系，所述第二展开剂为三氯甲烷/乙酸乙酯/甲酸组成的展开体系；
(3)利用染色剂系统对展开后的薄层色谱板进行显色；
(4)对显色后的薄层色谱板进行图像采集，根据图像与水溶性天然产物含量之间的关系，得出水溶性天然产物的含量；
所述第一展开剂中各溶剂的体积比为乙酸乙酯/乙醇/水/乙酸＝5/2.5～3/0.1～0.2/
0.1～0.15；所述第二展开剂中各溶剂的体积比为三氯甲烷/乙酸乙酯/甲酸＝1/0.8～1.2/
0.01～0.05；
所述水溶性天然产物包括儿茶素、槲皮素、茶皂苷、矢车菊素葡萄糖苷、齐墩果醇酸、氯化矢车菊素、芦丁中的一种或多种。
2.根据权利要求1所述的水溶性天然产物薄层定量图像识别检测方法，其特征在于，步骤(2)中，首先利用第一展开剂展开至R1的距离，然后晾干，再用第二展开剂重新展开至R2距离，所述R1为15～25毫米；所述R2为35～45毫米。
3.根据权利要求1所述的水溶性天然产物薄层定量图像识别检测方法，其特征在于，所述染色剂系统为对甲氧基苯甲醛显色剂。
4.根据权利要求3所述的水溶性天然产物薄层定量图像识别检测方法，其特征在于，所述染色剂系统的组成体积为：对甲氧基苯甲醛/乙酸/乙醇/硫酸＝9.1～9.5/3.5～4/300～
350/12.5。
5.根据权利要求1所述的水溶性天然产物薄层定量图像识别检测方法，其特征在于，所述待检测样品中水溶性天然产物的浓度为0.01-10mg/mL，点样量为0.1-10微升。
6.根据权利要求1所述的水溶性天然产物薄层定量图像识别检测方法，其特征在于，采用相机或扫描仪进行电子化图像采集。
7.根据权利要求1所述的水溶性天然产物薄层定量图像识别检测方法，其特征在于，对采集的图像利用ImageJ进行处理，并最终进行积分定量，利用积分值与样品含量之间的关系，得到含有水溶性天然产物的待检测样品的浓度。
8.根据权利要求1所述的水溶性天然产物薄层定量图像识别检测方法，其特征在于，预先构建样品含量与积分值之间的标准曲线，检测时，根据得到的积分值以及所述的标准曲线，得到所述的含有水溶性天然产物的待检测样品的浓度。
水溶性天然产物薄层定量图像识别检测方法
技术领域
背景技术
[0002] 水溶性天然产物包括类黄酮、黄酮苷、花色苷、皂苷是植物中重要的活性成分，具有抑菌保鲜、抗氧化、延缓衰老、抗菌、抗病毒、降血脂、抗癌等功效。类黄酮、黄酮苷、花色苷水溶性天然产物具有优良的抗氧化作用，可通过清除活性氧簇或其反应生成稳定化合物的方式有效平衡人体内自由基，并且其金属离子鳌合能力能终止自由基链式反应。大量的体内及体外实验和流行病学资料表明，皂苷水溶性天然产物具有抗炎、降脂、抗糖尿病和心血管疾病(CVD)预防等生物学和药理作用，在制药、生化、日化、食品以及精细化工等高科技领域具有广阔的应用前景。常用的水溶性天然产物检测方法有分光光度法方法、液相法，但是需要专用的仪器，操作相对麻烦。
[0003] 最近计算机图像处理技术迅猛发展，图像的定量分析已经可行。以ImageJ为代表的图像处理程序已广泛用于生命科学研究领域，如电泳条带定量分析、细胞计数、组织结构定量处理等。ImageJ是一个NIH开发的公共领域Java图像处理程序。它可以在任何具有Java 1.4或更高版本虚拟机的计算机上作为联机applet或可下载应用程序运行。可下载的发行版适用于Windows，Mac OS，Mac OS X和Linux。它可以显示，编辑，分析，处理，保存和打印8位，16位和32位图像。它可以读取许多图像格式，包括TIFF，GIF，JPEG，BMP，DICOM，FITS和“raw”。它支持“堆栈”，一系列共享单个窗口的图像。它是多线程的，因此可以与其他操作并行执行诸如图像文件读取之类的耗时操作。它可以计算用户定义选择的面积和像素值统计。它可以测量距离和角度。它可以创建密度直方图和线轮廓图。它支持标准图像处理功能，如对比度操作，锐化，平滑，边缘检测和中值滤波。它可以进行几何变换，如缩放，旋转和翻转。所有分析和处理功能均可在任何放大系数下使用。该程序同时支持任意数量的窗口(图像)，仅受可用内存的限制。空间校准可用于以毫米为单位提供真实世界的尺寸测量。还可以进行密度或灰度校准。ImageJ采用开放式架构设计，通过Java插件提供可扩展性。可以使用ImageJ的内置编辑器和Java编译器开发自定义采集，分析和处理插件。用户编写的插件可以解决几乎任何图像处理或分析问题。
[0004] 天然产物的薄层分析是一种常用的高效技术，但是传统的薄层定量分析需要专用的仪器，应用不便。因此基于最新的计算机图像定量分析手段，进行类黄酮多酚的薄层定量图像识别检测能够简化操作，有力地拓宽使用范围。目前已经有一些利用图像识别进行活性成分定量检测的研究。例如申请号200510115774.X专利文献，公开了一种基于图像处理技术的薄层色谱定量分析方法，包括步骤：(1)对载有样品薄层板拍照形成数字图像；(2)对拍摄图像预处理：镜头畸变校正、滤除噪声；(3)利用点样均匀分布、纵向距离等分原则确定控制点；(4)根据控制点插值方法构造图像背景；(5)从镜头畸变校正图像去除背景，根据背景对像素点亮度归一化；(6)对薄层图像进行分割(7)对分割后的区域灰度进行积分、定量分析。但该方法只对图像分析的一般原理进行了描述，无法直接应用到具体天然产物的定量检测。申请号201510163742.0的专利文献，公开了一种巴戟天耐斯糖含量测定方法，利用梯形积分法对色谱峰进行积分，根据峰面积和样品浓度进行定量分析。但该方法仅限于一种特定糖的测定。申请号201810451846.5的专利文献，公开了一种鉴别蜂蜜真伪的方法，用ImageJ软件对蜂蜜样品中的寡糖进行分析。但该方法仅限于一类糖的分析。因此开发适用于不同类型的薄层图像识别定量分析方法，对于天然产物的快速分析鉴别具有重要的意义。
发明内容
[0005] 本发明提供了一种水溶性天然产物薄层定量图像识别检测方法工艺简便，不需要专用仪器，适用面广。
[0006] 一种水溶性天然产物薄层定量图像识别检测方法，包括：
[0007] (1)将含有水溶性天然产物的待检测样品在薄层色谱板上进行点样；
[0008] (2)利用第一展开剂和第二展开剂对点样后的薄层色谱板进行薄层色谱逐级展开；所述第一展开剂为乙酸乙酯/乙醇/水/乙酸组成的展开体系，所述第二展开剂为三氯甲烷/乙酸乙酯/甲酸组成的展开体系；
[0009] (3)利用染色剂系统对展开后的薄层色谱板进行显色；
[0010] (4)对显色后的薄层色谱板进行图像采集，根据图像与水溶性天然产物含量之间的关系，得出水溶性天然产物的含量。
[0011] 具体讲，一种水溶性天然产物薄层定量图像识别检测方法，基于计算机图像识别的对不同水溶性天然产物(类黄酮、黄酮苷、花色苷、皂苷)及其混合物进行同时定量分析，包括以下步骤：
[0012] (1)利用乙酸乙酯/乙醇/水/乙酸和三氯甲烷/乙酸乙酯/甲酸展开剂系统对不同大类天然产物进行薄层色谱逐级展开；
[0013] (2)利用统一的染色剂系统对不同水溶性天然产物进行薄层色谱显色；
[0014] (3)对水溶性天然产物薄层色谱图像电子化及定量分析，得出最终水溶性天然产物薄层定量结果。
[0015] 本发明中，水溶性天然产物在检测前，可以利用溶剂溶解，配制为水溶性天然产物样品溶液，然后再进行薄层色谱展开；所述的水溶性天然产物样品溶液浓度为0.01-10mg/mL；进一步优选为0.5-5mg/mL。采用薄层色谱时，点样量为0.1-10微升；优选为0.1～1微升。所述待检测水溶性天然产物样品可以利用多种溶剂溶解，一般采用溶解性较好，易挥发的溶剂，作为优选，所述溶剂为乙醇、二氯甲烷、丙酮、甲醇或乙酸乙酯等中的一种或多种；进一步优选为乙醇或乙酸乙酯中的一种或两种。
[0016] 所述的水溶性天然产物样品点样至薄层色谱后在展开剂系统中逐级展开，首先用乙酸乙酯/乙醇/水/乙酸展开剂板上展开至R1的距离，然后晾干，再用三氯甲烷/乙酸乙酯/甲酸展开剂重新展开至R2的长度。
[0017] 本发明中，所述的R1、R2均是以初始点样中心点为起始点、以展开剂展开后最前端线为终点表示的距离。作为优选，所述R1为15～25毫米；所述R2为35～45毫米。当然，对于特定的展开体系，也可以通过控制展开时间对两种展开体系的展开作用进行控制。作为优选，所述R1为20毫米；所述R2为40毫米。
[0018] 所述第一展开剂中各溶剂的体积比为乙酸乙酯/乙醇/水/乙酸＝5：2.5～3/0.1～0.2/0.1～0.15；进一步优选的体积比为：乙酸乙酯/乙醇/水/乙酸＝5/2.85/0.15/0.12；所述第二展开剂中各溶剂的体积比为三氯甲烷/乙酸乙酯/甲酸＝1/0.8～1.2/0.01～0.05；
进一步优选的体积比为三氯甲烷/乙酸乙酯/甲酸＝1/1/0.03。
进一步优选的体积比为三氯甲烷/乙酸乙酯/甲酸＝1/1/0.03。
[0020] 所述染色剂系统的组成为对甲氧基苯甲醛/乙酸/乙醇/硫酸的体积比为9.1～9.5/3.5～4/300～350/12.5。作为进一步优选，所述的对甲氧基苯甲醛显色剂组成为对甲氧基苯甲醛/乙酸/乙醇/硫酸(9.2/3.75/338/12.5，v/v/v/v)。
[0021] 本发明中，所述水溶性天然产物包括类黄酮、黄酮苷、花色苷、皂苷中的一种或多种；作为进一步优选，所述水溶性天然产物包括儿茶素、槲皮素、茶皂苷、矢车菊素葡萄糖苷、齐墩果醇酸、氯化矢车菊素、芦丁中的一种或多种。
[0022] 所述的水溶性天然产物样品在薄层色谱上显色后，采用相机或扫描仪进行电子化图像采集。
[0023] 如图1所示，显色完成后，可采用相机或扫描仪进行电子化图像采集，完成水溶性天然产物样品图像的电子化。所述的水溶性天然产物样品图像电子化后，选择合适的图像处理软件，如：ImageJ等，进行图像优化处理。由于定量分析基于灰度值，故先用软件将图片转为灰度图片。
[0024] 所述的水溶性天然产物样品图像优化处理包括去噪声、平滑。对上述灰度图片进行去椒盐噪声，校正，锐化边缘，平滑等一系列操作，使图片更适合于定量分析。
[0026] 所述的水溶性天然产物样品图像背景去除后，进行积分定量，得到定量结果。
[0027] 以采用ImageJ软件进行图像处理为例，其过程为：
[0028] 所述的水溶性天然产物样品在薄层色谱上显色后，采用HP M1005扫描仪进行电子化图像采集，各项参数设置为：百万种颜色输出，分辨率300dpi，亮度和对比度默认值，图片以TIFF格式保存。
[0029] 所述的水溶性天然产物样品图像电子化后，采用ImageJ软件进行图像优化处理。
[0030] 首先，定量分析基于灰度值，故启动ImageJ软件，先选择“Image”-“Type”-“8-bit”，将图片转换成灰度图片，然后选择“Image”-“Adjust”-“Brightness/Contrast...”，在弹出的对话框中点击“Auto”，调整图像对比度和明度，使待分析区域可视化程度更高。
[0031] 其次，对灰度图像进行降噪和平滑等图像优化处理，先选择“Process”-“Noise”-“Despeckle”，通过一个中值滤波器将图像中的每个像素替换为其3*3邻域中像素的中值以去除图像中的椒盐噪声，再选择“Process”-“Noise”-“RemoveOutliers...”，将偏差超过设定阈值的像素点替换为周围像素的中间值以校正图像；然后再选择“Process”-“Filters”-“UnsharpMask...”，抽取模糊版本来锐化及增强图像边缘；最后选择“Process”-“Smooth”平滑整个图像以使积分基线更加平稳。
[0032] 然后，所述的水溶性天然产物样品图像优化处理后，采用ImageJ软件进行背景去除。选择“Process”-“SubtractBackground...”，基于ImageJ中“Rollingball”算法，在弹出的对话框中给定合适的滚球半径，并勾选“Lightbackground”和“Slidingparaboloid”，将图像中的连续背景除去。
[0033] 所述的水溶性天然产物样品图像背景去除后，采用ImageJ软件进行积分定量，得到定量结果。点击“RectangularSelectionTool”选择目标区域，点击“Ctrl+1”确定条带，点击“Ctrl+3”进行积分，用“StraightLineSelectionTool”将峰两端连接形成封闭图形后，用“wandtool”确定峰面积，完成定量分析。
[0034] 本发明可以使用各种规格的常见的薄层色谱板，作为优选，标准曲线与实际检测所用的薄层色谱板相同。
[0035] 本发明进行定量分析时，可预先构建积分值(对于ImageJ为峰面积)与样品含量之间的标准曲线，然后，在得到积分值后，可以直接得到样品的含量，即实现待检测样品的定量化。
[0036] 一种具体的制作标准曲线的方法如下：
[0037] (i)取设定浓度(比如可以为1.0，2.0，3.0mg/L，可以为平行设置多组)设定体积(可以为0.5微升)的标准样品，在薄层色谱板上进行点样；
[0038] (ii)利用第一展开剂和第二展开剂对点样后的薄层色谱板进行薄层色谱逐级展开；所述第一展开剂为乙酸乙酯/乙醇/水/乙酸组成的展开体系，所述第二展开剂为三氯甲烷/乙酸乙酯/甲酸组成的展开体系；
[0039] (iii)利用染色剂系统对展开后的薄层色谱板进行显色；
[0040] (iv)对显色后的薄层色谱板进行图像采集，得到积分值；
[0041] (v)按照步骤(i)～(iv)的方法，得到多组标准样品对应的积分值，制作样品浓度与积分值之间的标准曲线。
[0042] 第一展开剂和第二展开剂展开距离可以参考上述对检测方法的说明，比如首先用乙酸乙酯/乙醇/水/乙酸展开剂板上展开至R1的距离，然后晾干，再用三氯甲烷/乙酸乙酯/甲酸展开剂重新展开至R2的长度。所述R1为15～25毫米；所述R2为35～45毫米。当然，对于特定的展开体系，也可以通过控制展开时间对两种展开体系的展开作用进行控制。作为优选，实际检测采用的展开剂体系与制作标准曲线采用的展开体系相同。
[0043] 作为优选，构建标准曲线时，展开距离与实际检测过程中展开距离相同，采用的点样条件，显色条件，以及图像采集和处理条件均与检测过程中一致。
[0044] 本发明即可以用于单个组分样品的检测，也可以用于混合组份样品的检测，用于混合组份样品的检测时，利用图像采集单元分别实现对各个组份样品点的图像采集，然后分别计算样品的浓度值。当然，利用本发明，我们还可以一次实现多个样品的检测，检测时，可将多个样品在同一个薄层色谱板上进行点样，然后分别进行图像采集和计算。如图1所示，针对六个浓度依次升高的样品采用本发明的方法进行检测，即将样品分别点样至同一薄层色谱板上的点样位置，相互之间距离只要能够避免干扰即可；然后展开，进行显色，然后利用计算机扫描仪进行扫描，分别读取各个样品对应的图像，进行积分，最终得到对应样品的浓度值，检测结果与分别单独检测相当，几乎没有干扰作用。
[0045] 本发明相对于现有的检测方法具有如下优点：
[0046] (1)本发明的水溶性天然产物薄层定量图像识别检测方法操作简便，不需要专用仪器。
[0047] (2)本发明的方法，采用同一展开体系，可以对多种水溶性天然产物进行检测，定量性好，操作简单，准确度高。
[0049] 图1为针对六个浓度依次升高的样品采用本发明的方法进行检测的过程图。
具体实施方式
[0050] 下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。
[0051] 实施例中采用的显色剂为对甲氧基苯甲醛染色剂，其组成为对甲氧基苯甲醛/乙酸/乙醇/硫酸(9.2/3.75/338/12.5，v/v/v/v)。
[0052] 首先制作标准曲线，方法如下：
[0053] (i)取设定浓度的标准样品，在薄层色谱板(采用实施例1同样的薄层色谱板)上进行点样；本实施例中，采用0.5，1.0，2.0，3.0，4.0mg/L五组标准样品(样品与每个实施例需要检测的样品相同)，溶剂为乙醇，点样体积为0.5微升；
[0054] (ii)干燥后，利用第一展开剂和第二展开剂对点样后的薄层色谱板进行薄层色谱逐级展开；
[0055] 用乙酸乙酯/乙醇/水/乙酸(5/2.85/0.15/0.12，v/v/v/v)展开剂板上展开20毫米的距离，然后晾干，再用三氯甲烷/乙酸乙酯/甲酸(1/1/0.03，v/v/v)展开剂重新展开至40毫米的长度；
[0056] (iii)利用对甲氧基苯甲醛染色剂对展开后的薄层色谱板进行显色：250℃加热台加热15秒进行显色；
[0057] (iv)薄层显色后用计算机扫描仪进行扫描，分辨率设置为300dpi。扫描得到的图像用ImageJ进行去噪声、平滑处理，然后去除背景，最后进行定量积分，分别得到0.5，1.0，2.0，3.0，4.0mg/L五组标准样品对应的积分值；
[0058] (v)制作样品浓度与积分值之间的标准曲线。
[0059] 为了检测的精确度，针对每组标准样品，平行检测三次，取积分值的平均值为其对应的积分值。
[0060] 针对不同组分的样品，均需要按照上述方法进行标准曲线的绘制。
[0061] 制作标准曲线过程中，以及实施例中的样品显色后，后续图像处理过程为：
[0062] 采用HP M1005扫描仪对显色后的薄层色谱板进行电子化图像采集，各项参数设置为：百万种颜色输出，分辨率300dpi，亮度和对比度默认值，图片以TIFF格式保存。
[0063] 采用ImageJ软件进行图像优化处理。首先，定量分析基于灰度值，故启动ImageJ软件，先选择“Image”-“Type”-“8-bit”，将图片转换成灰度图片，然后选择“Image”-“Adjust”-“Brightness/Contrast...”，在弹出的对话框中点击“Auto”，调整图像对比度和明度，使待分析区域可视化程度更高。
[0064] 其次，对灰度图像进行降噪和平滑等处理，先选择“Process”-“Noise”-“Despeckle”，通过一个中值滤波器将图像中的每个像素替换为其3*3邻域中像素的中值以去除图像中的椒盐噪声，再选择“Process”-“Noise”-“RemoveOutliers...”，将偏差超过设定阈值的像素点替换为周围像素的中间值以校正图像；然后再选择“Process”-“Filters”-“Unsharp Mask...”，抽取模糊版本来锐化及增强图像边缘；最后选择“Process”-“Smooth”平滑整个图像以使积分基线更加平稳。
[0065] 然 后 ，采 用Im ag e J软 件进 行 背景 去除 。选 择“P ro ce ss”-“SubtractBackground...”，基于ImageJ中“Rollingball”算法，在弹出的对话框中给定合适的滚球半径，并勾选“Lightbackground”和“Slidingparaboloid”，将图像中的连续背景除去。
[0066] 图像背景去除后，采用ImageJ软件进行积分定量，得到定量结果。点击“RectangularSelectionTool”选择目标区域，点击“Ctrl+1”确定条带，点击“Ctrl+3”进行积分，用“StraightLine SelectionTool”将峰两端连接形成封闭图形后，用“wandtool”确定峰面积，得到对应的积分值。
[0067] 实施例1
[0068] 将(+)-儿茶素乙醇溶液，用毛细管点样0.5微升至薄层色谱待溶剂挥干后，用乙酸乙酯/乙醇/水/乙酸(5/2.85/0.15/0.12，v/v/v/v)展开剂板上展开20毫米的距离，然后晾干，再用三氯甲烷/乙酸乙酯/甲酸(1/1/0.03，v/v/v)展开剂重新展开至40毫米的长度。然后取出待溶剂挥干后用对甲氧基苯甲醛染色剂染色，放置到250℃加热台加热15秒进行显色。薄层显色后用计算机扫描仪进行扫描，分辨率设置为300dpi。扫描得到的图像用ImageJ进行去噪声、平滑处理，然后去除背景，最后进行定量积分，积分值通过与标准值比较得到测量结果。实际值为1.20mg/mL的(+)-儿茶素溶液，测量值为1.22mg/mL，误差为2％。
[0070] 实施例2
[0071] 将槲皮素乙醇溶液，用毛细管点样0.5微升至薄层色谱待溶剂挥干后，用乙酸乙酯/乙醇/水/乙酸(5/2.85/0.15/0.12，v/v/v/v)展开剂板上展开20毫米的距离，然后晾干，再用三氯甲烷/乙酸乙酯/甲酸(1/1/0.03，v/v/v)展开剂重新展开至40毫米的长度。然后取出待溶剂挥干后用对甲氧基苯甲醛染色剂染色，放置到250℃加热台加热15秒进行显色。薄层显色后用计算机扫描仪进行扫描，分辨率设置为300dpi。扫描得到的图像用ImageJ进行去噪声、平滑处理，然后去除背景，最后进行定量积分，积分值通过与标准值比较得到测量结果。实际值为1.51mg/mL的将槲皮素乙醇溶液，测量值为1.53mg/mL，误差为1.5％。
[0072] 实施例3
[0073] 将茶皂苷乙醇溶液，用毛细管点样0.5微升至薄层色谱待溶剂挥干后，用乙酸乙酯/乙醇/水/乙酸(5/2.85/0.15/0.12，v/v/v/v)展开剂板上展开20毫米的距离，然后晾干，再用三氯甲烷/乙酸乙酯/甲酸(1/1/0.03，v/v/v)展开剂重新展开至40毫米的长度。然后取出待溶剂挥干后用对甲氧基苯甲醛染色剂染色，放置到250℃加热台加热15秒进行显色。薄层显色后用计算机扫描仪进行扫描，分辨率设置为300dpi。扫描得到的图像用ImageJ进行去噪声、平滑处理，然后去除背景，最后进行定量积分，积分值通过与标准值比较得到测量结果。实际值为2.5mg/mL的将茶皂苷乙醇溶液，测量值为2.62mg/mL，误差为5％。
[0074] 实施例4
[0075] 将矢车菊素葡萄糖苷乙醇溶液，用毛细管点样0.5微升至薄层色谱待溶剂挥干后，用乙酸乙酯/乙醇/水/乙酸(5/2.85/0.15/0.12，v/v/v/v)展开剂板上展开20毫米的距离，然后晾干，再用三氯甲烷/乙酸乙酯/甲酸(1/1/0.03，v/v/v)展开剂重新展开至40毫米的长度。然后取出待溶剂挥干后用对甲氧基苯甲醛染色剂染色，放置到250℃加热台加热15秒进行显色。薄层显色后用计算机扫描仪进行扫描，分辨率设置为300dpi。扫描得到的图像用ImageJ进行去噪声、平滑处理，然后去除背景，最后进行定量积分，积分值通过与标准值比较得到测量结果。实际值为1.50mg/mL的矢车菊素葡萄糖苷溶液，测量值为1.53mg/mL，误差为2％。
[0076] 实施例5
[0077] 齐墩果醇酸、槲皮素、(+)-儿茶素、氯化矢车菊素、芦丁乙醇溶液(实际含量分别为：齐墩果醇酸：1.21mg/mL；槲皮素：1.31mg/mL；(+)-儿茶素：1.17mg/mL；氯化矢车菊素：2.54mg/mL；芦丁：1.12mg/mL)，用毛细管点样0.5微升至薄层色谱待溶剂挥干后，用乙酸乙酯/乙醇/水/乙酸(5/2.85/0.15/0.12，v/v/v/v)展开剂板上展开20毫米的距离，然后晾干，再用三氯甲烷/乙酸乙酯/甲酸(1/1/0.03，v/v/v)展开剂重新展开至40毫米的长度。然后取出待溶剂挥干后用对甲氧基苯甲醛染色剂染色，放置到250℃加热台加热15秒进行显色。薄层显色后用计算机扫描仪进行扫描，分辨率设置为300dpi。扫描得到的图像用ImageJ进行去噪声、平滑处理，然后去除背景，最后进行定量积分，积分值通过与标准值比较得到测量结果，得到含量值为齐墩果醇酸：1.17mg/mL；槲皮素：1.27mg/mL；(+)-儿茶素：1.15mg/mL；
氯化矢车菊素：2.46mg/mL；芦丁：1.09mg/mL。误差3％以下。
氯化矢车菊素：2.46mg/mL；芦丁：1.09mg/mL。误差3％以下。
| 标题 | 发布/更新时间 | 阅读量 |
|---|---|---|
| 一种隧道轮廓定位扫描设备及相关装置与方法 | 2020-12-18 | 0 |
| 印刷装置、印刷装置的控制方法以及记录介质 | 2021-06-12 | 1 |
| 一种安装定位装置的三维激光扫描仪球形标靶及其使用方法 | 2023-11-04 | 0 |
| 一种二层转向升降立体车位 | 2020-07-31 | 1 |
| 汽车发动机ECU自动灌装系统 | 2021-02-06 | 1 |
| 一种冲压式蒙皮模具生产线 | 2021-03-26 | 1 |
| 一种智能刀具柜 | 2022-05-05 | 2 |
| 一种英语教具 | 2022-02-10 | 2 |
| 一种新型手持激光读取装置 | 2022-10-24 | 1 |
| 一种快捷式办公用身份证复印机 | 2021-01-20 | 2 |
高效检索全球专利专利汇是专利免费检索,专利查询,专利分析-国家发明专利查询检索分析平台，是提供专利分析，专利查询，专利检索等数据服务功能的知识产权数据服务商。
我们的产品包含105个国家的1.26亿组数据，免费查、免费专利分析。
分析报告
专利汇分析报告产品可以对行业情报数据进行梳理分析，涉及维度包括行业专利基本状况分析、地域分析、技术分析、发明人分析、申请人分析、专利权人分析、失效分析、核心专利分析、法律分析、研发重点分析、企业专利处境分析、技术处境分析、专利寿命分析、企业定位分析、引证分析等超过60个分析角度，系统通过AI智能系统对图表进行解读，只需1分钟，一键生成行业专利分析报告。
扫描仪热门专利
QQ群二维码
意见反馈
意见反馈