技术领域
[0001] 本
发明属于护肤品技术领域，尤其涉及一种具有美白功能的芦笋护肤组合物及其制备方法。
背景技术
[0002] 人们常说“一白遮千丑”，美白自古以来都是许多人的追求。现代生活压
力大、环境污染严重，
皮肤暴露在紫外线、
汽车尾气、香烟烟雾、电磁
辐射、空气灰尘等中，使皮肤变得更加脆弱，容易出现干燥、过敏、暗黄、色素沉着、变黑等问题。
[0003] 正常皮肤的
颜色主要由三个因素决定：(1)皮肤内黑素(真黑素)、胡萝卜素等各类色素的含量及分布；(2)皮肤血液内
氧合血红蛋白与还原蛋白的含量；(3)皮肤表面的散射光学因素，包括皮肤表面的粗糙程度、表皮的厚度及照射在皮肤表面的散射光学因素。其中黑素是影响皮肤颜色的主要物质，而酪
氨酸酶是黑素合成过程的限速酶，因此要减少黑色素的合成，实现皮肤美白，抑制酪氨酸酶活性显得异常重要，目前市面上大多数的美白剂也主要是通过抑制酪氨酸酶的表达和活性来实现，如熊果苷、VC及其衍
生物等。但酪氨酸酶只是调控皮肤黑素形成的主要因素并非唯一因素，单纯的抑制酪氨酸酶活性，并不能有效的美白肌肤。同时目前很多的美白剂还存在不稳定、易氧化、变色等问题，有的甚至对皮肤还会产生刺激性。因此开发一款天然、安全、高效的美白护肤组合物，将多种美白途径相结合，使之发挥协同效应，同时提高皮肤自身的免疫力，将美白和养白相结合，具有潜在的应用价值。
[0004] 芦笋又名“石刁柏”，味美醇香，脆嫩爽口、淡雅开胃，食而不腻，是一种低热量、高营养价值的蔬菜，其富含多种游离的必需氨基酸、黄
酮、谷胱甘肽、
抗坏血酸、多糖等
生物活性成分。目前芦笋在食品及保健品领域已经得到了广泛的应用，但其在体外的应用如
化妆品中的应用较少，同时目前对芦笋的功效研究主要集中在抗氧化方面，而本发明研究发现芦笋提取物具有美白功效，其可抑制酪氨酸酶活性，减少黑色素的形成，帮助皮肤实现美白。应用天然、安全、温和的
植物美白成分进行美白产品开发是未来美白化妆品的发展趋势，因此开发以芦笋为主要美白活性成分的护肤组合物具有潜在的市场价值。
发明内容
[0005] 本发明的目的在于针对上述
现有技术中存在的不足，为了克服上述美白产品存在的功效单一、不稳定、有刺激等问题，本发明提供一种芦笋护肤组合物及其制备方法，用于美白及养白肌肤、提亮肤色、平滑肌肤、增强皮肤免疫机能、恢复皮肤健康，提升皮肤抵御外界环境刺激的能力。同时该组合物制作简单、安全、温和、有效。
[0006] 本发明通过下列技术方案实现：一种芦笋皮肤护肤组合物，包括下列
质量百分比的组分：
[0007]
[0008] 以上各组分的总和为100％。
[0009] 所述芦笋提取物为芦笋汁、芦笋粉中的一种或二种，且二种的混合比是任意的。
[0010] 进一步的，所述芦笋提取物中芦笋汁占皮肤护肤组合物质量的0.5％～95％；所述芦笋提取物中芦笋粉占皮肤护肤组合物质量的0.1％～5％，两种组合物质量之和不超过所述皮肤护肤组合物质量的95％。
[0011] 进一步的，所述芦笋汁、芦笋粉采用下列方法制得：
[0012] 芦笋汁：选新鲜的芦笋原料经清洗、榨汁、
水浸提、离心、过滤、浓缩至可溶性固形物含量≥12％的浅褐色至褐色的澄清透明液体。
[0013] 芦笋粉：选新鲜的芦笋原料经清洗、榨汁、水浸提、离心、过滤、浓缩至可溶性固形物含量≥12％的浅褐色至褐色的澄清透明液体，再经过常规的喷干或冻干获得的浅褐色至褐色粉末。
[0014] 所述芦荟提取物为芦荟汁或芦荟粉中的一种或二种，且二种的混合比是任意的。
[0015] 进一步的，所述芦荟提取物中芦荟汁占护肤组合物质量的0.5％～95％；所述芦荟提取物中芦荟粉占护肤组合物质量的0.1％～5％，两种组合物质量之和不超过所述皮肤护肤组合物质量的95％。
[0016] 进一步的，所述芦荟粉、芦荟汁采用下列方法制得：
[0017] 芦荟汁：采用下列任意一种方法制得：(A)采摘三年以上成熟的芦荟鲜叶，经常规清洗、消毒、去皮、榨汁后，再进行常规的酶解、脱色、脱盐处理，最后经常规的过滤、杀菌后，灌装得芦荟汁；(B)采摘三年以上成熟的芦荟鲜叶，经常规的清洗、消毒、去皮、
粉碎、均质后，经常规离心分离、脱除芦荟苷，再经过常规的脱盐处理、杀菌后，灌装得芦荟汁。
[0018] 芦荟粉：将上述芦荟原汁经过浓缩后，通过常规的喷干或冻干获得的芦荟粉。
[0019] 进一步的，所述芦笋护肤组合物中乙酰壳糖胺与烟酰胺两者的质量比为1:1～1:3。
[0020] 所述
益生元为低聚果糖、菊粉、
棉子糖、低聚半乳糖中的一种或几种，且几种的混合比是任意的。
[0021] 所述天然抗炎剂为植物抗炎剂及其衍生物，具体包括甘草提取物、
马齿苋提取物、黄芪提取物、
雪莲花提取物、苦参提取物、黄檗提取物、肾茶提取物、丹参提取物、厚朴提取物、三七提取物、青蒿提取物、黄连提取物、金
银花提取物、姜提取物、山金车提取物、
甘草酸二
钾、甘草亭酸、羟基积雪草苷、积雪草提取物、α-
红没药醇中至少一种。且上述各提取物均为市购产品，或者按下列方法制得：分别称取对应的甘草、马齿苋、黄芪、雪莲花、苦参、黄檗、肾茶、丹参、厚朴、三七、青蒿、黄连、金银花、姜、山金车、白花春黄菊原料；分别用没过原料的常温多元醇蒸馏水溶液(其中多元醇与蒸馏水的质量比为1:3)浸泡20～25h，将其加热至
沸腾后，保持微沸2h，然后过滤，将滤液进行旋转
蒸发浓缩成1g/ml的浓缩液，即得对应原料甘草、马齿苋、黄芪、雪莲花、苦参、黄檗、肾茶、丹参、厚朴、三七、青蒿、黄连、金银花、姜、山金车、白花春黄菊的提取物。
[0022] 所述的抗污染剂包括抗光污染剂、抗空气污染剂中的至少一种。
[0023] 进一步的抗光污染剂包括可可籽提取物、密蒙花提取物、万寿菊花提取物、越桔果提取物、欧洲酸樱桃花提取物中至少一种。更进一步的，所述可可籽提取物优选购自Ashland公司的Blumilight，密蒙花提取物优选购自GREENTECH公司的SOLIBERINE
[0024] 进一步的，所述抗空气污染剂包括四氢甲基嘧啶
羧酸、肌肽、脱羧肌肽HCI、五味子提取物、翼籽辣木籽提取物、小球藻提取物、胡椒木提取物、三
角褐指藻提取物。更进一步的，所述五味子提取物优选购自GREENTECH公司的URBALYS、所述小球藻提取物优选购自广州迪美公司的
冰源小球藻深层
净化因子(CPEs)。
[0025] 进一步的，为了延长本发明所涉及的芦笋护肤组合物的存放时间，可根据需要加入
防腐剂，所述防腐剂为microcare PHC(由苯氧
乙醇与氯苯甘醚组成的防腐剂组合物)、苯氧乙醇、1,2-戊二醇、Spectrastat PHL(由1,2-己二醇、辛酰羟肟酸与1,3-丙二醇组成的防腐剂组合物)、乙基己基甘油、对羟基苯乙酮、1,2-己二醇中的至少一种，其占芦笋护肤组合物的量为0～4％。
[0026] 进一步的，所述防腐剂microcare PHC在
皮肤护理组合物中单独使用时的质量百分比为0.5～1％；所述苯氧乙醇在皮肤护理组合物中单独使用时的质量百分比为0.3～1％。
[0027] 进一步的，为了提高芦笋护肤组合物中的
稳定性，可根据需要加入pH调节剂，所述pH调节剂为
碱性，占芦笋护肤组合物质量的0～2.5％；所述碱性pH调节剂为三乙醇胺、氨甲基丙醇、精氨酸中的任意一种。
[0028] 进一步的，所述碱性pH调节剂三乙醇胺或氨甲基丙醇在芦笋护肤组合物中单独使用时的质量百分比分别为0～2.5％；精氨酸在芦笋护肤组合物中单独使用时的质量百分比为0～0.5％。
[0029] 进一步的，所述芦笋护肤组合物最终的pH为5.0～6.0，更优的是5.0～5.5。
[0030] 进一步的，本发明所涉及的芦笋护肤组合物还可根据需要添加辅助性成分，具体为螯合剂、香料、抗
氧化剂、增
溶剂、
增稠剂、多元醇，辅助性成分占芦笋护肤组合物质量的0～10％，其中：
[0031] 所述螯合剂为EDTA-2Na、EDTA-4Na中的一种。
[0032] 所述香料为香精、精油、花水中的一种或几种，且几种的混合比是任意的。
[0033] 进一步的，所述香精为玫瑰香精、茉莉香精、薄荷香精、杏仁香精、柠檬香精、黄瓜香精、绿茶香精中的至少一种。
[0034] 进一步的，所述精油为玫瑰精油、桂花精油、茉莉精油、薰衣草精油、甜橙精油、薄荷精油、茶树精油、肉桂精油、迷迭精油、柠檬精油中的至少一种。
[0035] 进一步的花水为玫瑰花水、茉莉花水、薰衣草花水、白玉兰花水中的至少一种。
[0036] 所述抗氧化剂为异抗坏血酸钠、VE、茶多酚中的至少一种。
[0037] 所述增溶剂为PEG-40氢化
蓖麻油、PEG-50氢化蓖麻油、吐温-20、吐温80、中的一种或几种，且几种的混合比是任意的。
[0038] 所述增稠剂为卡波类、聚
丙烯酸交联
聚合物-6、黄原胶、
纤维素中的一种或几种，且几种的混合比是任意的。
[0039] 进一步的，卡波类为carbopol ETD2020、carbopol 940、carbopol Ultrez 21、carbopol Ultrez 30中的至少一种；所述
纤维素为
羧甲基纤维素、羟基丙基纤维素、羟基丁基纤维素、羟丙基乙基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素中的至少一种。
[0040] 所述的多元醇为甘油、1,3-丙二醇、丁二醇中至少一种，且几种的混合比是任意的。
[0041] 本发明的另一目的在于提供一种芦笋护肤组合物的制备方法，经过下列各步骤：
[0042] (1)按下列质量百分数的组分备料：
[0043]
[0044] 以上各组分的总和为100％；
[0045] (2)将步骤(1)中的芦笋提取物中芦笋粉和(或)芦荟提取物中芦荟粉、烟酰胺、乙酰壳糖胺、益生元、天然抑炎剂、抗污染剂加入到芦笋提取物中芦笋汁和/或芦荟提取物中芦荟汁中，搅拌均匀，得芦笋护肤组合物；
[0046] (3)在步骤(2)的芦笋护肤组合物中，根据需求加入防腐剂、pH调节剂、辅助性成分中的一种或几种，得芦笋护肤品。
[0047] 芦笋护肤品的使用方法如下：将需要护理的皮肤清洁干净后，擦上适量的芦笋护肤品，并按摩至其完全吸收即可，根据需要每天可使用2～3次或将芦笋护肤组合物加入到面膜基材中，制成面膜，敷于面部10～15min后取下，每周使用2～3次。
[0048] 本发明提供的芦笋护肤组合物的药理作用：
[0049] 该芦笋护肤组合物中芦笋提取物，充分保留了芦笋中多糖、黄酮、酚类物质、抗坏血酸、氨基酸等护肤活性成分，经本发明所制得的芦笋提取物不仅具有良好的抗氧化活性，可抵抗氧化引起的皮肤衰老，包括色素沉着，同时还通过黑色素抑制及酪氨酸酶活性抑制实验证明其可很好的抑制酪氨酸酶活性及黑色素的合成，帮助皮肤实现美白。
[0050] 该芦笋组合物中的芦荟提取物，保留了芦荟中的芦荟多糖、氨基酸等护肤活性成分，可保湿滋润、修复肌肤，提供细胞养分，促进细胞新陈代谢，增强皮肤的免疫力，减少紫外线照射时
炎症因子释放，帮助细胞修复，提高肌肤自身抵御环境刺激的能力，使肌肤变得水润透白。
[0051] 该芦笋组合物中的烟酰胺，可阻断黑素的传递路径，抑制黑素体转运，从而减少表皮细胞中黑素的含量，帮助皮肤实现美白，同时其还具有良好的保湿和屏障修护的作用，进一步帮助提亮肤色；
[0052] 该芦笋组合物中的乙酰壳糖胺，可抑制酪氨酸酶的
糖化作用，减少到达黑素小体的酪氨酸酶，减少黑素的合成，同时其可与烟酰胺协同增效，进一步提高芦笋组合物的美白效果。
[0053] 该芦笋组合物中的益生元，可调节皮肤表面的微生态平衡。当皮肤的微生态失衡时，会导致多种皮肤问题如黄褐斑、痤疮等。微生态屏障是维持皮肤健康的重要屏障。过度清洁、不恰当的美容观念和方式、化妆，以及生活方式的变化、辐射、药品和化学品的污染(如
自来水的余氯，
土壤和水源的化学品药品污染，空气重金属的污染等等)、压力等都可能导致皮肤表面的微生态失衡。微生态平衡是维持皮肤健康和美丽的
基础，芦笋组合物中的益生元通过节皮肤表面的微生态平衡可确保皮肤更好的吸收营养、维持正常生理功能和抵御外界刺激及侵害，辅助减少黑色素的形成，帮助肌肤维持
健康状态，让白由内透出来。
[0054] 该组合物中的天然抗炎剂可缓解外界炎症损伤(如紫外线照射、创伤或者皮肤出现湿疹、过敏性皮炎和刺激性皮炎等引起的炎症反应)所带来的色素沉着。当皮肤发生炎症反应时，表皮角质细胞释放的炎症因子会刺激黑素细胞和一些免疫细胞的活性，导致黑素合成增加，并转移至邻近的角质形成细胞，最终导致表皮色素沉着。天然抗炎剂通过抑制炎症反应所释放的炎症因子，减少黑色素的形成，同时其可与益生元协同增效，通过抑制皮肤炎症来改善皮肤免疫系统，帮助修复皮肤自身的
微生物屏障。
[0055] 该组合物中的抗污染剂可抵御空气中的悬浮颗粒，
挥发性有机化合物，氮氧化物，多元芳
烃及电视、电脑、手机等
电子设备发出的蓝光所引起的蛋白氧化、DNA损伤、角质屏障功能受损、炎症反应等，从而改善因环境污染所导致的皮肤缺水、色素沉着、色斑、屏障功能失调、过敏等现象。同时还可与益生元、天然抗炎剂两者协同增效，共同帮助皮肤恢复微生态屏障，增强皮肤的自身免疫机能，进一步对抗因环境污染所带来的皮肤问题，辅助提亮肤色，美白肌肤。
[0056] 本发明具备的优点和效果：采用上述方案得到的芦笋护肤组合物，以芦笋为主要功效成分，抑制影响皮肤颜色的主要物质黑素合成过程限速酶——酪氨酸酶的活性，同时辅于烟酰胺抑制黑素体转运、乙酰壳糖胺抑制酪氨酸酶糖化作用、减少黑色素的合成，从而实现美白肌肤。同时皮肤干燥、毛孔粗大、皮肤创伤、炎症反应、氧化应激反应、角质屏障受损、微生态屏障失调等亦会导致皮肤暗沉无光，出现色素沉着。芦荟、益生元、天然抗炎剂、抗污染剂可保湿、修护、平滑肌肤、改善皮肤角质屏障、微生态屏障、抑制炎症反应，从而帮助皮肤恢复健康状态，减少因皮肤免疫系统
缺陷所造成的色素沉着、皮肤粗糙等问题，帮助养白肌肤，让肌肤呈现自然白皙的状态。
具体实施方式
[0057] 下面通过
实施例对本发明进行详细说明。
[0058] 实施例1
[0059] (1)按下表的组分和含量进行备料
[0060] 表1实施例1中芦笋组合物配方表
[0061]
[0062]
[0063] (2)将步骤(1)中的芦荟粉、烟酰胺、乙酰壳糖胺、菊粉、棉子糖、苦参提取物、密蒙花提取物、脱羧肌肽HCI、microcare PHC加入芦笋汁中，搅拌均匀后，加入pH调节剂精氨酸，并搅拌混合均匀得芦笋护肤组合物；其中：
[0064] 所述芦笋汁采用下列方法制得：
[0065] 选新鲜的芦笋原料经清洗、榨汁、水浸提、离心、过滤、浓缩至可溶性固形物含量≥12％的浅褐色至褐色的澄清透明液体；
[0066] 所述芦笋汁通过斑马鱼黑色素测试实验评估了其抑制黑色素生产的效果，具体的实验方法及实验结果如下所示：
[0067] 1)实验方法
[0068] a、挑选受精卵后9hpf的健康斑马鱼胚胎随机置于6孔细胞培养板，50枚/孔，每孔加入5ml溶液。实验设立溶剂对照组和样品组，每组设3个复孔。置于曲线控制生化
培养箱中孵育。
[0069] b、暴露至72hpf后，用体视
显微镜观察斑马鱼色素沉着情况并拍照记录。
[0070] c、每孔挑选40条幼鱼置于培养皿中，用PBS冲洗两遍，并将幼鱼转移到1.5mL EP管中，加入150μl脱氧胆酸钠溶液(5g/L)，并在低温下超声制备成匀
浆液。
[0071] d、酪氨酸酶活力的测定：将匀浆液以10000×g离心5min，取100μl上清液置于96孔板中，同时加入100μl左旋多巴溶液(5μmol/L)，置于37℃孵育1h。使用酶标仪检测各实验组的吸光值(OD475值)。酪氨酸酶活性抑制率按下列公式计算:
[0072]
[0073] e、黑色素含量的测定：向EP管中加入150μl NaOH溶液(1mol/L)，在100℃水浴锅中水浴加热10min，并震动使EP管中黑色素充分溶解。取100μl溶液置于96孔板中，用酶标仪于405nm
波长处测定吸光度。按下列公式计算样品对黑色素合成的抑制率:
[0074]
[0075] f、统计分析：采用SPSS 19.0
软件统计处理数据，实验数据均用 数据表示，用单因素方差分析。各浓度组与空白对照组两两比较：*P<0.05。
[0076] 2)实验结果
[0077] 表2芦笋汁对斑马鱼黑色素合成抑制率(与空白对照组比较：*P<0.05；**P<0.01；***P<0.001)
[0078]
[0079] 表3芦笋汁对斑马鱼酪氨酸酶活力抑制率(与空白对照组比较：*P<0.05；**P<0.01；***P<0.001)
[0080]
[0081] 从实验结果可以看出：芦笋汁可抑制酪氨酸酶活性、减少黑色素的生成，具有良好的美白效果。
[0082] 所述芦荟粉采用下列方法制得：
[0083] 采摘三年以上成熟的芦荟鲜叶，经常规清洗、消毒、去皮、榨汁后，再进行常规的酶解、脱色、脱盐处理后所得的芦荟汁，经过浓缩后，通过常规的冻干而得的芦荟粉。
[0084] 所述苦参提取物用下列方法制得：分别用没过苦参的常温多元醇蒸馏水溶液(其中多元醇与蒸馏水的质量比为1:3)浸泡20～25h，将其加热至沸腾后，保持微沸2h，然后过滤，将滤液进行
旋转蒸发浓缩成1g/ml的浓缩液。
[0085] 所述密蒙花提取物为市售产品。
[0086] 实施例2
[0087] (1)按下表的组分和含量进行备料
[0088] 表4实施例2中芦笋组合物配方表
[0089] 序号 成分 含量％1 芦笋汁 60.37
2 芦荟汁 20
3 芦荟粉 0.2
4 烟酰胺 3
5 乙酰壳糖胺 1.5
6 菊粉 3
7 低聚半乳糖 2
8 马齿苋提取物 1
9 白花春黄菊提取物 0.5
10 可可籽提取物 1
11 小球藻提取物(CPEs) 1.5
12 五味子提取物 0.5
13 对羟基苯乙酮 0.5
14 1,2-己二醇 0.5
15 carbopol ETD2020 0.25
16 EDTA-2Na 0.05
17 玫瑰花水 0.5
18 VE 0.1
19 PEG-40氢化蓖麻油 0.3
20 1,3-丙二醇 3
21 三乙醇胺 0.23
[0090] (2)将步骤(1)中的芦荟粉、乙酰壳糖胺、菊粉、低聚半乳糖、马齿苋提取物、白花春黄菊提取物、可可籽提取物、小球藻提取物、五味子提取物、carbopol ETD2020、EDTA-2Na、玫瑰花水加入到芦笋汁及芦荟汁的
混合液中，在搅拌下加入加热溶解好的对羟基苯乙酮、1,2-己二醇及1,3-丙二醇混合物，在搅拌下加入混合均匀的PEG-40氢化蓖麻油和VE，并搅拌至增稠剂carbopol ETD2020完全溶解后，加入烟酰胺、pH调节剂三乙醇胺，并搅拌混合均匀即可制得所需的芦笋护肤组合物；其中：
[0091] 所述芦笋汁及芦荟粉制备方法同实施例1；
[0092] 所述芦荟汁采用下列方法制得：
[0093] 采摘三年以上成熟的芦荟鲜叶，经常规的清洗、消毒、去皮、粉碎、均质后，经常规离心分离、脱除芦荟苷，再经过常规的脱盐处理、杀菌后，灌装得芦荟凝胶原汁。
[0094] 所述白花春黄菊提取物、马齿苋提取物为市售产品。
[0095] 实施例3
[0096] (1)按下表的组分和含量进行备料
[0097] 表5实施例3中芦笋组合物配方表
[0098] 序号 成分 含量％1 芦笋汁 0.5
2 芦笋粉 5
3 芦荟汁 69.9
4 烟酰胺 1.5
5 乙酰壳糖胺 1.5
6 菊粉 1.2
7 低聚果糖 1.05
8 黄芪提取物 2
9 雪莲花提取物 2.8
10 丹参提取物 3
11 肾茶提取物 1.2
12 甘草提取物 1
13 欧洲酸樱桃花提取物 3
14 密蒙花提取物 1
15 胡椒木提取物 1
16 Spectrastat PHL 1.2
17 羟乙基纤维素 1
18 carbopol Ultrez 21 1
19 EDTA-2Na 0.1
20 氨甲基丙醇 1.05
[0099] (2)将步骤(1)中的芦笋粉、乙酰壳糖胺、菊粉、低聚果糖、黄芪提取物、雪莲花提取物、丹参提取物、肾茶提取物、甘草提取物、欧洲酸樱桃花提取物、密蒙花提取物、胡椒木提取物、Spectrastat PHL、羟乙基纤维素、carbopol Ultrez 21、EDTA-2Na加入到芦笋汁和芦荟汁的混合液中，并搅拌至增稠剂完全溶解后，在搅拌下加入烟酰胺、pH调节剂氨甲基丙醇，并搅拌混合均匀，即可制得所需的芦笋护肤组合物；
[0100] 所述芦笋汁的制备方法以及丹参、肾茶、甘草提取物的制备方法同实施例1。
[0101] 所述芦笋粉采用下列方法制得：
[0102] 选新鲜的芦笋原料经清洗、榨汁、水浸提、离心、过滤、浓缩至可溶性固形物含量≥12％的浅褐色至褐色的澄清透明液体，再经过常规的喷干获得的浅褐色至褐色粉末。
[0103] 所述芦笋粉通过酪氨酸酶活性抑制实验评估了其抑制黑色素生产的效果，具体的实验方法及实验结果如下所示：
[0104] 1)实验方法
[0105]
试剂：酪氨酸酶和酪氨酸，Sigma公司生产
[0106] 试剂配制：
[0107]
磷酸盐缓冲液：分别精密称取二水合磷酸氢二钠0.3822g和磷酸二氢钠0.3621g，加入适量超纯水，超声溶解，定容至100mL，配制成pH 6.8的2.0mmol/L磷酸盐缓冲液，4℃保存，备用。
[0108] 酪氨
酸溶液：精密称取适量酪氨酸，加入适量磷酸盐缓冲液，超声溶解、定容，配制成浓度为2.0mmol/L的酪氨酸溶液。
[0109] 样品溶液：准确移取适量芦笋汁，以缓冲盐稀释配制至所需浓度。
[0110] 酪氨酸酶溶液：精密称取适量蘑菇酪氨酸酶，加入适量磷酸盐缓冲液溶解、定容，配制成浓度为0.14mg/ml的酪氨酸酶溶液，现配现用。
[0111] 酶活力的测定：反应在96孔板中进行，依次加入酪氨酸酶溶液、样品溶液、磷酸盐缓冲液和酪氨酸溶液各50μl，反应体系总体积为200μl。同时设立对照组，依次加入酪氨酸溶液50μl，磷酸盐缓冲液100μl，酪氨酸酶溶液50μl。加样完毕后立即使用多功能酶标仪震荡混匀10s，在30℃恒温条件下记录波长475nm处反应体系的吸光值(A475)随时间变化的曲线。取酶促反应呈一级动力学时直线的斜率为酶活力，按如下公式计算酪氨酸酶活性相对抑制率，每组平行3次实验，取平均值。
[0112] 酪氨酸酶活性相对抑制率(％)＝νs/νc×100％
[0113] 其中，νs为对照组的酶活力(A475/min)，νc为样品组的酶活力(A475/min)。
[0114] 2)实验结果
[0115] 表6芦笋粉酪氨酸酶活性相对抑制率(％)
[0116]
[0117] 从实验结果可以看出：芦笋粉可抑制酪氨酸酶活性，且呈现一定的量效关系，即芦笋粉具有良好的美白效果。
[0118] 所述黄芪提取物、雪莲花提取物为市售产品。
[0119] 实施例4
[0120] (1)按下表的组分和含量进行备料
[0121] 表7实施例4中芦笋组合物配方表
[0122]序号 成分 含量％
1 芦笋粉 0.1
2 芦荟汁 95
3 烟酰胺 1.7
4 乙酰壳糖胺 0.5
5 低聚果糖 0.1
6 甘草提取物 1
7 三七提取物 1
8 金银花提取物 0.5
9 四氢甲基嘧啶羧酸 0.1
[0123] (2)将步骤(1)中的芦笋粉、烟酰胺、乙酰壳糖胺、低聚果糖、甘草提取物、三七提取物、金银花提取物、四氢甲基嘧啶羧酸加入芦荟汁中搅拌混合均匀，即可制得所需的芦笋护肤组合物；
[0124] 所述芦笋粉的制备方法同实施例3，芦荟汁及甘草提取物制备方法同实施例2，三七提取物及金银花提取物为市售产品。
[0125] 实施例5
[0126] (1)按下表的组分和含量进行备料
[0127] 表8实施例5中芦笋组合物配方表
[0128]
[0129]
[0130] (2)将步骤(1)中的芦笋粉、芦荟粉、烟酰胺、乙酰壳糖胺、菊粉、低聚果糖、棉子糖、低聚半乳糖、厚朴提取物、姜提取物、万寿菊花提取物、翼籽辣木籽提取物、三角褐指藻提取物、戊二醇、聚丙烯酸交联聚合物-6、黄原胶、EDTA-2Na、茉莉花水、异抗坏血酸钠、1,3-丁二醇、甘油加入芦笋汁和芦荟汁的混合液中，并搅拌混合至增稠剂完全溶解，加入pH调节剂精氨酸，并搅拌混合均匀即可制得所需的芦笋护肤组合物；
[0131] 所述芦荟汁采用下列方法制得：
[0132] 采摘三年以上成熟的芦荟鲜叶，经常规清洗、消毒、去皮、榨汁后，再进行常规的酶解、脱色、脱盐处理，最后经常规的过滤、杀菌后，灌装得芦荟汁。
[0133] 所述芦荟粉采用下列方法制得：
[0134] 采摘三年以上成熟的芦荟鲜叶，经常规的清洗、消毒、去皮、粉碎、均质后，经常规离心分离、脱除芦荟苷所得的芦荟汁，经过浓缩后，通过常规的冻干而得的芦荟粉。
[0135] 所述芦笋汁的制备方法同实施例1，芦笋粉的制备方法同实施例3，厚朴提取物及姜提取物为市售产品。
[0136] 对上述制备好的实施例1～5芦笋护肤组合物的效果进行下列评估：
[0137] 选取60名30～50岁面部有黑色素沉着、经常在户外或长时间在电子设备前工作的女性志愿者，随机分成5组，每组分别使用实施例1～5，根据使用情况对皮肤的保湿性、细腻度、黑色素沉着、光泽度、刺激性等进行观察及感受，并填写相关问卷。经统计测试结果如下所示：
[0138] 表9志愿者1个月体验结果统计表
[0139]
[0140] 表10志愿者2个月体验结果统计表
[0141]
[0142]
[0143] 表11志愿者6个月体验结果统计表
[0144]
[0145] 从上述测试结果可以看出：根据本发明所制得的芦笋护肤组合物，基本无刺激，在保湿性方面，短期即可
感知到皮肤保湿性方面的改善；在皮肤色素沉着改善方面，短时间内效果不是很明显，但长期坚持使用可以获得良好的美白效果；在皮肤的光滑度和光泽度改善方面，两者表现比较相似，这可能是因为光滑度与光泽度有一定相关性，当皮肤变得光滑时，皮肤的通透性增加，让皮肤看起来更加透亮，两者在短期内效果均不明显，但长期坚持使用可细腻肌肤，提亮肤色。同时还有很多志愿者反馈，长期使用后，肤色看似变得更均匀了。综上所述，根据本发明所制得的芦笋护肤组合物可保湿、细腻肌肤、改善色素沉着、提亮肤色。
[0146] 另外，有的志愿者反馈使用该芦笋护肤组合物后，阳光照射后，皮肤发红、刺痛的现象较之前减轻，这可能是因为芦笋、芦荟、天然抗炎剂、抗污染剂共同作用，减轻了紫外线对皮肤所造成的光损伤；也有志愿者反馈使用该芦笋护肤组合物后，皮肤没有以前容易过敏，干燥脱皮的现象基本消失，这可能是因为长期使用芦笋护肤组合物后，帮助其改善了皮肤的角质层屏障及微生态屏障，增强了皮肤自身的免疫系统，可更好的抵御外界刺激。
[0147] 另外，本领域技术人员还可在本发明
权利要求公开的范围和精神内做其它形式和细节上的各种
修改、添加和替换。当然，这些依据本发明精神所做的各种修改、添加和替换等变化，都应包含在本发明所要求保护的范围之内。
