一种促使多粘类芽孢杆菌产芽孢的发酵方法
专利汇可以提供一种促使多粘类芽孢杆菌产芽孢的发酵方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 属于 生物 技术和 生物工程 领域，具体涉及一种促使多粘类芽孢杆菌产芽孢的 发酵 方法。包括以下步骤：将多粘类芽孢杆菌在活化培养基进行活化；将多粘类芽孢杆菌接种至 种子 培养基进行种子培养；再将种子培养液接种至发酵培养液发酵培养，依次经过一级升温并调节pH值继续培养；二级升温并调节pH值继续培养；发酵结束时，调节pH，即可；本发明能够缩短多粘类芽孢杆菌发酵过程中的芽孢出芽时间及提高芽孢数量和出芽率，出芽孢率达91.4%以上，有利于减低生产成本和提高产品 质量 。，下面是一种促使多粘类芽孢杆菌产芽孢的发酵方法专利的具体信息内容。
1.一种促使多粘类芽孢杆菌产芽孢的发酵方法，其特征在于，包括以下步骤：
将多粘类芽孢杆菌在活化培养基进行活化；
将多粘类芽孢杆菌接种至种子培养基进行种子培养；
再将种子培养液接种至发酵培养液发酵培养，依次经过一级升温并调节pH值继续培养；二级升温并调节pH值继续培养；发酵结束时，调节pH，即可；
所述的发酵培养提高活菌数量培养条件为：30℃，120 rpm，pH7.0，24 h；
所述的一级升温并调节pH值继续培养条件为：40-44℃，120 rpm，pH7.5-8.0，12 h；
所述的二级升温并调节pH值继续培养条件为：45-50℃，120 rpm，pH8.0-8.5，12 h。
2.根据权利要求1所述的一种促使多粘类芽孢杆菌产芽孢的发酵方法，其特征在于，所述步骤（1）中活化条件为30℃，活化培养基包括以下组分：(NH4)HPO4 1.0g/L，KCl 0.20g/L，MgSO4.7H2O 0.20g/L，酵母膏 2.0g/L，葡萄糖 5.0g/L，琼脂 20.0g/L，且pH 7.0，培养48 h。
3.根据权利要求1所述的一种促使多粘类芽孢杆菌产芽孢的发酵方法，其特征在于，所述步骤（2）中种子培养条件为30℃，120 rpm，所述种子培养基包括以下组分：(NH4)HPO4
1.0g/L，KCl 0.20g/L，MgSO4.7H2O 0.20g/L，酵母膏 5.0g/L，葡萄糖 10g/L，且pH 7.0，培养12 h。
4.根据权利要求1所述的一种促使多粘类芽孢杆菌产芽孢的发酵方法，其特征在于，所述步骤（3）中发酵培养基包括以下组分：含菊粉30-40g/L的菊芋菊粉粗提液，硫酸铵4.0 g/L，碳酸钙1.0 g/L，硫酸镁1.0 g/L，磷酸氢二钾3.0 g/L，玉米浆1.0 g/L，酵母粉5.0 g/L；
且pH 7.0，发酵至24 h。
5.根据权利要求1所述的一种促使多粘类芽孢杆菌产芽孢的发酵方法，其特征在于，所述多粘类芽孢杆菌的菌种为能产菊粉酶的多粘类芽孢杆菌（paenibacillus polymyxa），所述菌种保藏编号为CGMCC No. 3044。
6.根据权利要求4所述的一种促使多粘类芽孢杆菌产芽孢的发酵方法，所述含菊粉30-
40g/L的菊芋菊粉粗提液的制备方法如下：按照质量比1:8将菊芋干粉和水搅拌均匀，70℃水浴保温2h，降至室温后，调节pH至10，然后80℃水浴保温1h，过滤除去残渣后收集并稀释1倍得到含菊粉30-40g/L的菊芋菊粉粗提液。
一种促使多粘类芽孢杆菌产芽孢的发酵方法
技术领域
背景技术
碳源。
发明内容
（1）将多粘类芽孢杆菌在活化培养基进行活化；
（2）将多粘类芽孢杆菌接种至种子培养基进行种子培养；
（3）再将种子培养液接种至发酵培养液发酵培养，依次经过一级升温并调节pH值继续培养；二级升温并调节pH值继续培养；发酵结束时，调节pH，即可；
所述的发酵培养提高活菌数量培养条件为：30℃，120 rpm，pH7.0，24 h；
所述的一级升温并调节pH值继续培养条件为：40-44℃，120 rpm，pH7.5-8.0，12 h；
所述的二级升温并调节pH值继续培养条件为：45-50℃，120 rpm，pH8.0-8.5，12 h。
具体实施方式
在营养琼脂上，30℃培养48h出现白色小菌落(φ=0.6 1.2mm)，菌落呈圆形，表面光滑，~
粘状，中央凸起，透明。适当延长培养，菌落增大，细胞的尺寸和形状变化很小。
7.0，培养48 h；将多粘类芽孢杆菌接种至种子培养基进行培养，所述的种子培养条件为30℃，120 rpm，种子培养基含有（g/L）：(NH4)HPO4 1.0，KCl 0.20，MgSO4.7H2O 0.20，酵母膏
5.0，葡萄糖 10，且pH 7.0，培养12 h；再将种子培养液接种至发酵培养液，所述的培养条件为30℃，120 rpm，发酵培养基含有：菊芋菊粉粗提液（含菊粉32.4 g/L），硫酸铵4.0 g/L，碳酸钙1.0 g/L，硫酸镁1.0 g/L，磷酸氢二钾3.0 g/L，玉米浆1.0 g/L，酵母粉5.0 g/L；且pH
7.0，发酵至24 h；将上述发酵液一级升温并调节pH值继续培养， 40℃，120 rpm，pH7.5，12 h；然后发酵液二级升温并调节pH值继续培养，45 ℃，120 rpm，pH8.0，12 h。发酵结束时，调节pH7.0，发酵液中出芽孢率83.6 %，芽孢数量达5.88Í109 cfu/mL。
6.0，培养48 h；将多粘类芽孢杆菌接种至种子培养基进行培养，所述的种子培养条件为30℃，120 rpm，种子培养基含有（g/L）：(NH4)HPO4 1.0，KCl 0.20，MgSO4.7H2O 0.20，酵母膏
5.0，葡萄糖 10，且pH 7.0，培养12 h；再将种子培养液接种至发酵培养液，所述的培养条件为30℃，120 rpm，发酵培养基含有：菊芋菊粉粗提液（含菊粉35.2 g/L），硫酸铵4.0 g/L，碳酸钙1.0 g/L，硫酸镁1.0 g/L，磷酸氢二钾3.0 g/L，玉米浆1.0 g/L，酵母粉5.0 g/L；且pH
7.0，发酵至24 h。将上述发酵液一级升温并调节pH值继续培养， 42℃，120 rpm，pH 8.0，12 h；然后发酵液二级升温并调节pH值继续培养，48℃，120 rpm，pH 8.5，12 h。发酵结束时，调节pH7.0，发酵液中出芽孢率91.4 %以上，芽孢数量达7.09Í109 cfu/mL。
7.0，培养48 h；将多粘类芽孢杆菌接种至种子培养基进行培养，所述的种子培养条件为30℃，120 rpm，种子培养基含有（g/L）：(NH4)HPO4 1.0，KCl 0.20，MgSO4.7H2O 0.20，酵母膏
5.0，葡萄糖 10，且pH 7.0，培养12 h；再将种子培养液接种至发酵培养液，所述的培养条件为30℃，120 rpm，发酵培养基含有：菊芋菊粉粗提液（含菊粉33.9 g/L），硫酸铵4.0 g/L，碳酸钙1.0 g/L，硫酸镁1.0 g/L，磷酸氢二钾3.0 g/L，玉米浆1.0 g/L，酵母粉5.0 g/L；且pH
7.0，发酵24 h。将上述发酵液一级升温并调节pH值继续培养， 44℃，120 rpm，pH 7.5，12 h；然后发酵液二级升温并调节pH值继续培养，50℃，120 rpm，pH 8.5，12 h。发酵结束时，调节pH7.0，发酵液中出芽孢率87.5 %以上，芽孢数量达6.15Í109 cfu/mL。
20.0，且pH 7.0，培养48 h；将多粘类芽孢杆菌接种至种子培养基进行培养，所述的种子培养条件为30℃，120 rpm，种子培养基含有（g/L）：(NH4)HPO4 1.0，KCl 0.20，MgSO4.7H2O
0.20，酵母膏 5.0，葡萄糖 10，且pH 7.0，培养12 h；再将种子培养液接种至发酵培养液，所述的培养条件为30℃，120 rpm，发酵培养基含有：菊芋菊粉粗提液（含菊粉33.9 g/L），硫酸铵4.0 g/L，碳酸钙1.0 g/L，硫酸镁1.0 g/L，磷酸氢二钾3.0 g/L，玉米浆1.0 g/L，酵母粉
5.0 g/L；且pH 7.0，发酵48 h, 发酵液中出芽孢率低于0.1%，芽孢数量约6.0Í104 cfu/mL；
发酵72 h, 发酵液中出芽孢率低于0.1%，芽孢数量约1.06Í106 cfu/mL。
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