专利汇可以提供基于土壤动物区系去除的转基因植物种植风险评价方法专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且本 发明 提供一种基于 土壤 动物区系去除的转基因 植物 种植 风 险评价方法,主要包括步骤:去除动物区系、添加土壤滤液、植物种植、添加试验动物、取样分析等。本发明通过利用高温灭菌杀死剔除土壤动物成体及卵、利用土壤滤液复原农田原位 微 生物 ,同时结合实验室标准化土壤动物饲喂,在近自然的原位土壤中评估转基因植物种植对单一土壤动物存活率、单代及多代繁殖率的影响。本发明改进了之前所用的田间调查不能有效控制环境因素、室内培养皿饲喂不能充分反映田间土壤环境的缺欠。本发明具有转基因植物种植原位评估和特定敏感类群研究的双重优势,综合建立了近自然状态下评估转基因植物种植对单一敏感土壤动物类群影响的方法体系。,下面是基于土壤动物区系去除的转基因植物种植风险评价方法专利的具体信息内容。
1.一种基于土壤动物区系去除的转基因植物种植风险评价方法,其特征在于,包括步骤:
1)去除动物区系:将转基因植物种植区农田原位土壤取出后,过2mm筛,剔除大土块,然后进行高温灭菌,对整个动物区系进行去除,之后分装到容器中,土壤填入10cm深;
2)添加土壤滤液:将土壤滤液20ml添加到去除土壤动物区系的原位土壤中,还原微生物区系;
3)植物种植:将转基因植物和对照品种种子分别种植到步骤2)处理后得到的农田土壤中;
4)添加试验动物:在已种植转基因植物及对照品种的容器中添加试验动物,每个容器添加实验室培养的单一土壤动物类群10头个体;
5)取样:添加试验动物后20天、35天、70天进行取样,利用体视镜进行人工计数,采集试验动物种群数量,计算存活率、单一世代和多世代繁殖率,比较种植转基因植物和对照品种的土壤,评估转基因植物种植对单一土壤动物类群适合度的影响。
2.根据权利要求1所述的转基因植物种植风险评价方法,其特征在于,所述步骤1)高温灭菌的条件为110-120℃,25-35min。
3.根据权利要求1所述的转基因植物种植风险评价方法,其特征在于,所述步骤2)中土壤滤液按如下方法制备:原位根际土100g,加500ml蒸馏水搅匀后静置24小时,依次用
1mm,180μm,75μm,45μm,45μm和20μm孔径的筛网进行过滤,滤掉土壤动物成体及卵。
4.根据权利要求1所述的转基因植物种植风险评价方法,其特征在于,所述步骤3)中每个作物品种设置5个重复。
5.根据权利要求1-4任一所述的转基因植物种植风险评价方法,其特征在于,所述步骤3)中植物种植后,将种植环境设置为植物和土壤动物的最适温度和湿度重合区间,具体为温度15-25℃和湿度50%-75%。
6.根据权利要求1-4任一所述的转基因植物种植风险评价方法,其特征在于,所述步骤3)中植物种植后,将种植环境设置为温度增加2℃和湿度增加25%,具体为温度17-27℃和湿度75%-100%。
7.根据权利要求1所述的转基因植物种植风险评价方法,其特征在于,所述步骤4)中单一土壤动物的培养方法为:在石膏:活性炭=9:1的培养皿中培养,添加啤酒酵母作为食物,全黑暗培养,培养温度为20±1℃,相对湿度90-100%,每周用去离子水调节一次,保持整个培养基湿润。
8.根据权利要求6所述的转基因植物种植风险评价方法,其特征在于,单一土壤动物的培养后需要同步化,将三天内产的卵收集到一起,卵孵化成幼虫后的第12天,将幼虫添加到已经种植的转基因植物及对照品种的容器中。
9.根据权利要求6所述的转基因植物种植风险评价方法,其特征在于,所述单一土壤动物选自根结线虫、跳虫、变形虫或螨虫。
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