专利汇可以提供一种苗期甘薯黑斑病精准抗性鉴定方法专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且本 发明 公开一种苗期甘薯黑斑病精准抗性鉴定方法,属于农业植保领域,包括1)病菌分离与活化;2)PS培养液的制备;3)病原菌的摇培;4)黑斑病菌孢子悬浮液的制备;5)参试薯苗准备和接种;6)调查评价;本发明鉴定方法科学高效,操作简单,采用孢子液灌根接种鉴定,接近于田间甘薯 幼苗 感染黑斑病的实际情况,鉴定结果更加精准可靠,同时避免了 水 培薯苗抗病鉴定过程中薯苗茎秆容易腐烂的问题,和采用薯 块 进行抗病鉴定过程中薯块保湿后被杂菌污染容易腐烂的问题,为苗期甘薯黑斑病提供了一种精准抗性鉴定方法,为早期快速大量筛选甘薯黑斑病抗性品种提供了有 力 的保障,对于指导甘薯抗病育种具有重要的应用价值。,下面是一种苗期甘薯黑斑病精准抗性鉴定方法专利的具体信息内容。
1.一种苗期甘薯黑斑病精准抗性鉴定方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)病菌分离与活化:从田间采集发病薯块,用组织分离法和单孢分离法分离纯化甘薯黑斑病菌,并经科赫式法则验证后,采用马铃薯葡萄糖琼脂培养基,培养7天,备用;
2)PS培养液的制备:称取马铃薯20g加入1L超纯水煮沸至马铃薯完全烂软,纱布过滤后加入15g蔗糖,加超纯水定容至1L,每个三角瓶分装30mL,然后于121℃高压灭菌15min备用;
3)病原菌的摇培:取出活化好的甘薯黑斑病菌,用直径为6mm的打孔器打取菌碟,每个三角瓶中接种20个菌碟,将接种好的三角瓶置于28℃恒温摇床中,于120rpm/min摇培48h;
4)黑斑病菌孢子悬浮液的制备:采用滤纸过滤收集滤液,显微镜下观察并调节孢子悬浮液浓度为1×105CFU/ml;
5)参试薯苗准备和接种:从甘薯储藏库取甘薯品种,每个3块,置于装土的盆钵中催芽,待发芽后每个品种剪取3棵生长一致的甘薯幼苗,分别种植在装灭菌土的盆钵中,将制备好的孢子悬浮液进行灌根处理,每个盆钵灌根量为50ml,之后每3天用灭菌水均匀喷雾;
6)调查评价:接种15天后调查薯苗黑斑病发病情况,并根据病情指数分级标准将薯苗分为0、1、3、5、7、9级,共6个等级,根据平均病情指数将品种对黑斑病的抗性分为抗病、中抗、感病和高感四个级别;平均病情指数=(重复1病情指数+重复2病情指数+重复3病情指数)/3;苗期甘薯黑斑病抗性水平按照以下标准进行确定:
抗病:平均病情指数≤2.0;
中抗:2.0<平均病情指数≤4.0;
感病:4.0<平均病情指数≤6.0;
高感:平均病情指数>6.0;
所述的分级标准是:
0级:整株健康无病症;
1级:植株正常生根,地下部茎有零星黑斑,茎基部叶片发黄或有萎蔫,地上部正常分枝生长;
3级:植株生根但根系较少,地下部茎有连片黑斑,茎基部叶片发黄,薯苗生长缓慢;
5级:植株不生根,地下部茎有连片黑斑,茎基部叶片发黄,薯苗完全不分枝;
7级:地下部坏死腐烂,整株叶片发黄,植株萎蔫;
9级:地下部坏死腐烂,薯苗心叶腐烂,整株死亡。
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