技术领域

本发明涉及一种茶园天敌昆虫诱集方法。

                              背景技术

我国是茶叶的祖国，我国的茶树栽培历史悠久。近年来已查明我国拥有茶 树害虫800余种，其中5％(30～45种)为常发性的重要害虫。茶树害虫综合 治理的概念已提出几十年了，在治虫实践中也不断地得到丰富和发展，然而， 在实际的茶树害虫防治中主要依靠化学防治。一般地，一些茶场和农户每年化 防10多次，夏秋茶期间，每7～10天就要施1次药，易于造成农药残留，还会 致害虫产生抗药性，茶园食物网、链结构趋于单纯，自然控制潜能弱化。茶叶 农残一度成了限制我国茶叶出口的瓶颈。欧盟、日本等又在增加对我国出口茶 叶中农残的检测项目，几十倍～上百倍地降低茶叶农残的最大检测量。因此， 必须拓展治虫新途径。

90年代以来，寄主植物—害虫—天敌三营养级间的化学通讯机理成为研究 热点，化学信息的载体即化学信息物质。昆虫化学信息物质无污染、使用剂量 微小(mg～μg级)、活性强。害虫释放的利它素和虫害植物释放的互利素均可 有效地吸引天敌，国际上一直在探索应用这类物质无害化治理害虫[1，2]。然而， 突破性的研究很少，较大面积的成功应用鲜见报道。昆虫一般都有趋光性[3]， 王勇等(1991)[4]报道土黄色彩纸对茶尺蠖幼虫有引诱效应。肖素女(1997)[5] 研究了白、蓝、黄、黄绿、墨绿5种色板对茶小绿叶蝉Jacobiasca formosana Paoli 和黑刺粉虱Aleurocanthus spiniferus(Quaintance)的引诱作用，发现黄绿色粘纸诱 捕叶蝉的效果好，黄纸对黑刺粉虱的效果好。然而，尚未见茶园中以色彩引诱 天敌的报道。

茶树为多年生常绿灌丛，茶丛内郁闭，生境稳定，藏匿着多种天敌昆虫。 已记载的天敌昆虫有数百种。常见的类群有茧蜂、瓢虫、食蚜蝇、食虫虻、姬 蜂、草蛉，等等。如果将昆虫信息素与色彩结合起来制成诱集器，在某种害虫 发生期释放，则有可能诱集很多天敌前来控制害虫，减免施用化学农药，而促 进有机茶和无公害茶叶生产。

参考文献

[1]Dicke，M.1994.Local and systemic production of volatiles herbivore-induced terpenoids：their role in plant-

carnivore mutualism.J.Plant Physiol.143：465-472

[2]Vet，L.E.M.，and Dicke，M.1992.Ecology of infochemical use by natural enemies in a tritrophic context.Ann.

Rev.Entomol.37：141-172

[3]陈宁生.视觉通讯.见：中国农业百科全书昆虫卷编辑委员会编，中 国农业百科全书·昆虫卷.农业出版社.1990.362～363

[4]王勇，张汉鹄，邹运鼎.彩纸对茶尺蠖幼虫诱集效率的研究.植物保 护学报，1991，18(2)：177～180

[5]萧素女.茶园中有色粘纸诱捕害虫之效果调查.台湾茶业研究汇报， 1997，16：51～60

[6]中国科学院编译出版委员会名词室编定.色谱.北京：科学出版社. 1957

                              发明内容

本发明的目的是提供一种茶园天敌昆虫诱集方法。

方法的步骤为：1)采用吸附法分离鉴定出虫害茶梢挥发物10种，即苯甲醛、 反-2-己烯醛、吲哚、水杨酸甲酯、罗勒烯、顺-3-乙酸己烯酯、顺-3-己烯-1-醇、 芳樟醇、香叶醇和反-2-己烯酸，2)采用生物测定方法确定苯甲醛、反-2-己烯醛、 吲哚、水杨酸甲酯为具有引诱活性的挥发性组分，3)将苯甲醛、反-2-己烯醛、 吲哚、水杨酸甲酯分别配成浓度为0.01-20μg/ml的味源物，再将4种味源物按 1∶0.5-1.5∶0.2-1.2∶0.3-1.5组配，配制引诱天敌昆虫的引诱剂，4)采用茶园小 区引诱试验从10种色彩中确定对天敌昆虫具有引诱效应的鹦鹉绿、芽绿和素馨 黄3种色彩，5)将芽绿色与苯甲醛、反-2-己烯醛、吲哚、水杨酸甲酯引诱剂组 合，制成天敌昆虫的诱集器，6)将诱集器放入田间诱集天敌昆虫。

本发明的优点：

1)无污染，适应于当前的有机茶和无公害茶叶生产；

2)效率高、性能稳定。短暂的时间内就可将天敌引来控制害虫、减免施用化 学农药；

3)便于运输，使用方便；

4)成本低廉。

                              附图说明

附图是本发明诱集器结构示意图。

                        具体实施方式

1、采用吸附法分离鉴定出虫害茶梢挥发物10种，即苯甲醛、反-2-己烯醛、 吲哚、水杨酸甲酯、罗勒烯、顺-3-乙酸己烯酯、顺-3-己烯-1-醇、芳樟醇、香叶 醇和反-2-己烯酸

制作两头带有口径为6～10毫米细小开口、中空的玻璃柱，容积4.5～5.5升， 进口接压缩空气瓶，出口依次接Tenax TA吸附柱、真空泵。在吸附挥发物之前， 将Tenax TA柱在270～280℃，通氮活化4小时4～8小时。在玻璃容器中加入 190～210克茶蚜危害茶梢，吹入空气，同时从吸附柱后抽气，在进口前、Tenax  TA柱后用流量计控制流量，进、出气流量都为300毫升/分钟。11～13小时后 取下吸附柱，用重蒸乙醚淋洗，再用氮气缓慢吹扫至15～30微升，吸取1μl 注入GC-MS检测，配合标样鉴定组分。鉴定了茶蚜为害茶梢挥发物中10种化 学组分：苯甲醛、反-2-己烯醛、吲哚、水杨酸甲酯、罗勒烯、顺-3-乙酸己烯酯、 顺-3-己烯-1-醇、芳樟醇、香叶醇和反-2-己烯酸。其中反-2-己烯醛、苯甲醛、吲 哚、水杨酸甲酯为含量大的组分。

2、以生物测定方法确定引诱活性强的互利素    

1)“Y”形嗅觉仪

“Y”形管两臂和基部长度均为10cm，两臂夹角为90°，依次联接味源瓶 (或对照瓶)、蒸馏水瓶、活性碳瓶。以正己烷为溶剂，将反-2-己烯醛、苯甲醛、 吲哚、水杨酸甲酯等10种蚜害茶梢挥发物分别配成溶液作为味源物，浓度为0.01 μg/ml、1μg/ml。以正己烷为为对照。用开口的2ml安碚瓶盛1ml的味源物 置于味源瓶、盛1ml的正己烷置于对照瓶中。从Y管基部以真空泵抽气，自然 空气依次经活性碳过滤、蒸馏水瓶加湿、味源瓶(或对照瓶)，在Y管两臂交汇， 进入Y管基部。停止抽气，从Y管基部开口分别逐头引入9种天敌昆虫：蚜茧 蜂Aphidius sp.、异色瓢虫显明变种L.axyridis(Pallas)var.spectabilis Faldermaenn、异色瓢虫显现变种L.axyridis(Pallas)ab.conspicua Faldermaenn、 异色瓢虫十九斑变种、异色瓢虫二斑变型L.axyridis(Pallas)ab.bimaculata Hemmelmann、七星瓢虫Coccinella septempunctata L.、中华草蛉Chrysopa sinica Tjedea、大草蛉Chrysopa septempunctata Wesmeal和门氏食蚜蝇Sphaerophoria menthastri L.。引入后，再抽气，昆虫将逆风前进，在Y管两臂交汇处稍作停 留，选择其中的一臂进入。

计数选择味源及正己烷的天敌昆虫数。用χ2法检测选择味源的昆虫数与选 择正己烷的昆虫数之间的差异。发现9种供试昆虫对苯甲醛、反-2-己烯醛、吲 哚、水杨酸甲酯表现出明显的趋性，趋向反-2-己烯醛、苯甲醛、水杨酸甲酯的 昆虫数与趋向对照(正己烷)的昆虫数之间差异达显著水平(P＜0.05)。

2)昆虫触角电位仪

供试挥发物为苯甲醛、反-2-己烯醛、吲哚、水杨酸甲酯等10种虫害茶梢挥 发物。浓度为0.01μg/ml、1μg/ml，正己烷为溶剂。并以正己烷为对照。供试 天敌昆虫为采自茶园的上述9种天敌昆虫。昆虫触角电位反应在北京大学生物 膜和膜生物技术国家重点实验室完成。结果表明，苯甲醛、反-2-己烯醛、吲哚、 水杨酸甲酯可引起较大的触角电位反应。

3、将苯甲醛、反-2-己烯醛、吲哚、水杨酸甲酯分别配成浓度为(0.01-20) μg/ml的味源物，再将4种味源物按1∶0.5-1.5∶0.2-1.2∶0.3-1.5组配，配制引 诱天敌昆虫的引诱剂

用正己烷为溶剂，将苯甲醛、反-2-己烯醛、吲哚、水杨酸甲酯分别配成浓 度为0.01-20μg/ml的味源物，再将4种味源物按1∶0.5-1.5∶0.2-1.2∶0.3-1.5组 配，经“Y”形嗅觉仪所做的生物测定表明，引诱效果更强。这就是茶园天敌昆 虫引诱剂。    

用无水乙醇浸泡天然橡胶制成的橡皮头，晾干。再用引诱剂浸泡这样的橡 皮头，就制成了诱芯。

4、采用茶园小区引诱试验从10种色彩中确定对天敌昆虫具有引诱效应的 鹦鹉绿、芽绿和素馨黄3种色彩

1)田间小区试验确定引诱力强的色彩

购置芽绿、鹦鹉绿、素馨黄、油菜花黄、橄榄黄绿、玉髓绿、孔雀绿、蓝 绿、墨绿和雪白10种彩纸，每种色彩均制成10块长40cm、宽20cm的双面色 板，色板的两面均匀地涂抹无色昆虫胶，置于茶园引诱天敌。结果表明芽绿、 素馨黄、鹦鹉绿的引诱效果较强。

2)测定3种强引诱力色彩的参数

使用香港美能达公司生产的色彩色差计(color difference meter)，型号 CR-331C，色空间选用绝对测量方式(L*a*b*色差系统)。测得：

鹦鹉绿 L69.00(67～70)    a-43.57(-40～-47)    b+44.27(+40～447)

芽绿   L75.42(73～75)    a-40.57(-40～-47)    b+47.43(+44～+50)

素馨黄 L86.96(84～90)    a-5.84(-2～-9)       b+64.77(+6 1～+68)

其中第1个数值L表示亮度；a、b是色度坐标，第2个数值“+”表示红 成份，“-”表示绿成份；第3个数值“+”表示黄成份，“-”表示蓝成份。

5、将芽绿色与反-2-己烯醛、苯甲醛、吲哚、水杨酸甲酯引诱剂组合，制成 天敌昆虫的诱集器

诱集茶园天敌昆虫的诱集器为芽绿色色板加上载有引诱剂的诱芯。引诱剂 由苯甲醛、反-2-己烯醛、吲哚、水杨酸甲酯分别配成浓度为0.01-20μg/ml的味 源物，这4种味源物溶液再按1∶0.5-1.5∶0.2-1.2∶0.3-1.5组配，溶剂为正己烷。

6、将诱集器放入田间诱集天敌昆虫

天敌昆虫诱集器放置于茶园中，诱捕器下边缘与茶梢平齐，诱捕器之间的 距离为(4～8)米。

7、实施例

实施例1采用吸附法分离鉴定出虫害茶梢挥发物10种，即苯甲醛、反-2- 己烯醛、吲哚、水杨酸甲酯、罗勒烯、顺-3-乙酸己烯酯、顺-3-己烯-1-醇、芳樟 醇、香叶醇和反-2-己烯酸

制作两头带有口径为7毫米细小开口、中空的玻璃柱，容积5升，进口接 压缩空气瓶，出口依次接Tenax TA吸附柱、真空泵。在吸附挥发物之前，将Tenax TA柱在275℃通氮活化4小时。在玻璃容器中加入200克茶蚜危害茶梢，吹入 空气，同时从吸附柱后抽气，在进口前、Tenax TA柱后用流量计控制流量，进、 出气流量都为300毫升/分钟。

12小时后取下吸附柱，用重蒸乙醚淋洗，再用氮气缓慢吹扫至20微升， 吸取1μl注入GC-MS检测，配合标样鉴定组分。

鉴定了茶蚜为害茶梢挥发物中10种化学组分：苯甲醛、反-2-己烯醛、吲哚、 水杨酸甲酯、罗勒烯、顺-3-乙酸己烯酯、顺-3-己烯-1-醇、芳樟醇、香叶醇和反 -2-己烯酸。其中反-2-己烯醛、苯甲醛、吲哚、水杨酸甲酯为含量大的组分。

实施例2采用生物测定方法确定苯甲醛、反-2-己烯醛、吲哚、水杨酸甲酯 为具有引诱活性的挥发性组分

按照具体实施方式2，用浓度为1μg/ml的味源测定9种天敌昆虫在嗅觉仪 中对10种虫害挥发物的的行为反应。计数选择味源及正己烷的天敌昆虫数。用 χ2法检测选择味源的昆虫数与选择正己烷的昆虫数之间的差异。发现9种供试 昆虫对苯甲醛、反-2-己烯醛、吲哚、水杨酸甲酯表现出明显的趋性，趋向反-2- 己烯醛、苯甲醛、水杨酸甲酯的昆虫数与趋向对照(正己烷)的昆虫数之间差 异达显著水平(P＜0.05)。  

按照具体实施方式2，利用触角电位仪，测定9种天敌昆虫对浓度为1μg/ml 的10种虫害茶梢挥发物的电生理反应。并以正己烷为对照。昆虫触角电位反应 在北京大学生物膜和膜生物技术国家重点实验室完成。结果表明，苯甲醛、反-2- 己烯醛、吲哚、水杨酸甲酯可引起较大的触角电位反应。

实施例3将苯甲醛、反-2-己烯醛、吲哚、水杨酸甲酯分别配成浓度为 0.01-20μg/ml的味源物，再将4种味源物按1∶0.5-1.5∶0.2-1.2∶0.3-1.5组配，配 制引诱天敌昆虫的引诱剂

以正己烷为溶剂，将苯甲醛、反-2-己烯醛、吲哚、水杨酸甲酯分别配成浓 度为1μg/ml的味源物，这4种味源物溶液再按1∶1∶1∶1组配。用无水乙醇浸泡 天然橡胶制成的橡皮头24小时，晾干。再用引诱剂浸泡橡皮头24小时，晾干， 就制成了天敌引诱剂。

实施例4采用茶园小区引诱试验从10种色彩中确定对天敌昆虫具有引诱效 应的鹦鹉绿、芽绿和素馨黄3种色彩

按具体实施方式4所述，制作10色彩的粘胶板。

2002年10月22日在浙江省宁波市北仑镇天赐茶叶公司茶园引诱天敌，芽 绿、鹦鹉绿、素馨黄、油菜花黄、橄榄黄绿、玉髓绿、孔雀绿、蓝绿、墨绿、 雪白10种色板平均每块板诱得各类天敌个数分别为：18±8，15±9，14±9，14± 8，13±8，12±7，10±7，8±4，6±4及5±3头。

2003年5月30日，安徽省麻姑山茶场试验，芽绿、鹦鹉绿、素馨黄、油菜 花黄、橄榄黄绿、玉髓绿、孔雀绿、蓝绿、墨绿、雪白10种色板平均每块板诱 得各类天敌个数分别为：16±8，15±6，15±7，15±8，12±5，11±4，10±4， 7±3，6±3以及5±3头。

上述试验表明芽绿、鹦鹉绿、素馨黄三种色彩引诱力较强。

实施例5将芽绿色与苯甲醛、反-2-己烯醛、苯甲醛、吲哚、水杨酸甲酯引 诱剂组合，制成天敌昆虫的诱集器

按照具体实施方式5，将苯甲醛、反-2-己烯醛、苯甲醛、吲哚、水杨酸甲酯 引诱剂(浓度1ug/ml，配比1∶1∶1∶1)与素馨黄、芽绿、鹦鹉绿组合，制成天敌 昆虫的诱集器。

2003年8月26日选安徽省麻姑山茶场的林间茶园，面积50亩。选中心区 域为试验区，用素馨黄5块、芽绿5块和鹦鹉绿5块，分别挂上引诱天敌的诱 芯，间距为5m×5m。28日调查，5块板诱集天敌个数：芽绿53、鹦鹉绿51、 素馨黄50。30日调查平均每块板诱集天敌个数：芽绿24、鹦鹉绿21、素馨黄 20。

2003年9月11日选安徽省麻姑山茶场的无公害试验茶园，面积30亩。选 中心区域为试验区，用素馨黄5块、芽绿5块和鹦鹉绿5块，分别挂上引诱天 敌的诱芯，间距为5m×5m。13日查效果，5块板诱集天敌个数：芽绿113、 鹦鹉绿60、素馨黄72。

上述结果表明，芽绿与引诱剂组合制成的诱集器诱集效果最好。

实施例6将诱集器放入田间诱集天敌昆虫

2003年10月23日选安徽省麻姑山茶场常规生产茶园，芽绿色板挂上载有 天敌引诱剂(浓度为1ug/ml，配比为1∶1∶1∶1)的诱芯作为引诱器，共20个； 选用芽绿色板挂上重蒸正己烷浸泡的诱芯作为对照，也是20个。将40个诱捕 器随机地分布于茶园中，诱捕器下边缘与茶芽相接。10月25日查引诱效果。

1)天敌诱捕器与对照诱捕器相比

天敌诱捕器诱得总物种数33；总个体数348，平均每诱捕器诱得天敌个数 17.4±7.1对照诱捕器诱得总物种数28；总个体数222，平均每诱捕器诱得天敌 个数11.6±6.3。

用“成组数据的比较分析”方法，对于天敌诱捕器诱得天敌个数与对照诱捕 器诱得天敌个数进行t测验，测得差异达极显著水平(P＜0.01)。

2)天敌诱捕器正面(挂诱芯)与反面相比

正面的天敌种数29，平均每诱捕器诱得天敌种数5.1±1.8种；反面的天敌种 数21，平均每诱捕器诱得天敌种数3.0±1.8种。用“成对数据的比较分析”方法， 对于天敌诱捕器和对照诱捕器诱得的种数进行t测验，测得差异达极显著水平(P ＜0.01)。

正面的天敌个数246，平均每个诱捕器诱得天敌个数为12.3±5.3；反面的 天敌个数102，平均每诱捕器诱得天敌个数为为5.1±4.2。用“成对数据的比较 分析”方法，对于二者进行t测验，测得差异达极显著水平(P＜0.01)。