一种快速检测树体内潜伏腐烂病菌的生物学方法
专利汇可以提供一种快速检测树体内潜伏腐烂病菌的生物学方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 公开了一种快速检测树体内潜伏腐烂病菌的 生物 学方法，涉及病菌的检测技术。本方法适合检测苹果或梨树枝条组织内是否潜伏有具有侵染活性的腐烂病菌，及病菌的潜伏部位，检测所使用的基本材料为苹果树或梨树健康枝条的皮层。具体方法为：将苹果或梨树组织的待检部位，切成0.1~10cm组织 块 ，浸沾未冷凝的PDA后，接种到苹果或梨树枝条健康皮层的内面，在适宜的温湿下培养3~5天，观测皮层是否发病，依此推断待检材料中是否潜伏有具侵染性的腐烂病菌。本发明的优点在于：方法简便，容易操作，材料容易获得，结果准确可靠，克服组织分离法和分子生物学方法的 缺陷 ，为腐烂病的研究和防治提供了一套简便可靠的检测技术。，下面是一种快速检测树体内潜伏腐烂病菌的生物学方法专利的具体信息内容。
1.一种快速检测树体内潜伏腐烂病菌的生物学方法，其特征在于：可用于检测苹果或梨树枝条组织内是否潜伏有具有侵染活性的腐烂病菌，所使用的材料为苹果和梨树健康枝条的皮层，具体过程包括取样及预处理、剥取苹果和梨树枝条的皮层、接种与培养和症状观察四个步骤；
所述苹果树或梨树枝条为苹果或梨树上的任何枝条，包括生长枝条和枯死枝条，一年生枝条和多年生枝条，生长枝条和果苔枝，等等；
所述枝条组织为枝条上的任何组织，包括枝条表皮组织、周皮、皮孔、芽、芽眼、枝条皮层、韧皮部、木质部或整个枝段；
所述具有侵染活的腐烂病菌是指能够侵染苹果和梨树的健康皮层，并导致皮层发病的腐烂病菌；
所述苹果和梨树的健康枝条为任何粗度的苹果或梨树的枝条，但要求枝条的皮层健康无病，表面光滑，能够剥取完整皮层；
所述枝条皮层为从苹果和梨树枝条上剥取的皮层，厚度大于2mm，宽度大于1cm，长度大于3cm，具体大小需根据检测材料确定；
所述预处理是指把待检测的样品置于PDB（马铃薯+葡萄糖）浸泡1~2小时，或浸沾未冷凝的PDA（马铃薯+葡萄糖+琼脂），使待检测的样品上有腐烂病菌生长所需要的营养物质；
所述剥取皮层一般是先将枝条剪成3cm~20cm枝段，用刀片在枝段的一侧切口，然后从切口处沿形成层剥取完整的皮层；
所述接种是将预处理后的待检材料接种到苹果或梨树枝条年皮层上，使待检测材料与皮层紧密接触，用PE拉伸膜扎紧，让待检测材料中的病菌生长扩展至健康的皮层，使皮层发病；
所述培养是把将接种并包扎好的材料，转入一个相对湿度为95%以上培养皿、保湿缸或保湿盒中，转入10℃~30℃的培养箱中，培养3~5天；其中，常用的培养温度为20℃，培养湿度为100%，培养时间为5天；
所述症状观察是指检查接种后培养的皮层是否发生腐烂病，是否出现典型的腐烂病症状；
典型的腐烂病的症状为皮层内面红褐色、腐烂、变软、表面密生灰白色菌丝层、有酒糟味，腐烂斑超过待检材料外缘0.5cm以上。
2.权利要求1所述的一种快速检测树体内潜伏腐烂病菌的生物学方法，其特征是：腐烂病菌检测使用的基本培养基质为苹果树或梨树健康枝条的皮层，其中苹果枝条皮层更适合检测苹果树腐烂病菌，梨树枝条皮层更适合检测梨树腐烂病菌。
一种快速检测树体内潜伏腐烂病菌的生物学方法
技术领域
背景技术
发明内容
（2）剥取苹果或梨枝条皮层：剪取苹果或梨树新鲜枝条，剪成5cm~20cm长的茎段，用小刀从枝段的一边切口，从切口沿形成层剥取完整健康皮层，备用；
（3）接种与培养：将预处理的待检样品，直接放到苹果或梨的皮层上，让待检测样品与枝条皮层的内面紧密接触，并用PE拉伸膜包紧；将接种并包扎好的材料，转入一个相对湿度大于95%保湿缸或保湿盒中，转入10℃~30℃的培养箱中培养3~5天；常用培养温度为
20℃，相对湿度为100%，培养时间为5天；
（4）症状检查：培养时间结束，取出培养材料，用肉眼直接检查枝条皮层上是否有典型的腐烂病症状。典型的腐烂病的症状为，皮层内面红褐色、腐烂、变软、表面密生灰白色菌丝层、有酒糟味，腐烂斑超过待检材料外缘0.5cm以上。典型的腐烂病症状如图1所示。
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