专利汇可以提供一种基于葡聚糖信号放大ki67和p16INK4a检测试剂盒专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且本 发明 公开一种基于葡聚糖 信号 放大ki67和p16INK4a检测 试剂 盒 ,所述试剂盒包括ki-67葡聚糖多聚AP标记 抗体 、p16INK4a葡聚糖多聚HRP标记抗体、DAB显色液和AP显色液。本发明试剂盒采用酶标多聚一抗进行免疫检测,公开了葡聚糖多聚抗体制备的特定条件,同时以葡聚糖分子为 支撑 骨架,复合抗体和信号标记物形成葡聚糖多聚抗体,其携带大量的信号标记物极大的提高了信号强度,降低了抗体使用浓度、避免非特异信号干扰。同时,高分子复合物与酶是多位点结合,为酶的天然三维构象提供了稳定的支撑,大幅度维持了酶和抗体的 稳定性 ,实现大分子之间的高效键合。本发明试剂盒极大的减少了抗体用量,减少了操作流程和时间,且具有更高的显色效率和检测灵敏度。,下面是一种基于葡聚糖信号放大ki67和p16INK4a检测试剂盒专利的具体信息内容。
1.一种基于葡聚糖信号放大ki-67和p16INK4a双染检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括ki-67葡聚糖多聚AP标记抗体、p16INK4a葡聚糖多聚HRP标记抗体、DAB显色液和AP显色液;
所述ki-67葡聚糖多聚AP标记抗体制备方法为:将葡聚糖溶于磷酸盐缓冲溶液中,加入适量高碘酸钠进行氧化,用葡聚糖基质相同磷酸盐缓冲溶液进行透析过夜,水溶碱性磷酸酶,加入适量高碘酸钠氧化,使用乙二醇终止反应,透析过夜;将氧化葡聚糖和ki-67抗体和活化后碱性磷酸酶混合反应后,透析过夜,使用保存液稀释至工作液;
INK4a
所述p16 葡聚糖多聚HRP标记抗体制备步骤为:将葡聚糖溶于磷酸盐缓冲溶液中,加入适量高碘酸钠进行氧化,用葡聚糖基质相同磷酸盐缓冲溶液进行透析过夜,水溶辣根过氧化物酶,加入适量高碘酸钠氧化,使用乙二醇终止反应,透析过夜;将氧化葡聚糖和p16INK4a抗体和活化后辣根过氧化物酶混合反应后,透析过夜,使用保存液稀释至工作液。
INK4a
2.根据权利要求1所述的一种基于葡聚糖信号放大ki-67和p16 双染检测试剂盒,其特征在于,所述葡聚糖分子量为400000-500000。
3.根据权利要求1所述的一种基于葡聚糖信号放大ki-67和p16INK4a双染检测试剂盒,其特征在于,所述葡聚糖多聚抗体保存液配方包括:PBS、Tris或HEPES缓冲液中的一种,以及
1%-2%牛血清蛋白,0.01%-1%的Proclin300。
4.根据权利要求1所述的一种基于葡聚糖信号放大ki-67和p16INK4a双染检测试剂盒,其特征在于,所述DAB显色液组成为A液底物:H2O2;B液增强:NiCl2;C液色原:二氨基联苯胺。
5.根据权利要求1所述的一种基于葡聚糖信号放大ki-67和p16INK4a双染检测试剂盒,其特征在于,所述AP显色液组成为A液稀释:Tris缓冲液;B液底物:α-萘酚AS-BI磷酸盐;C液色原:品红。
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