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一种稻秸秆富硒抗虫抗病有机菌肥

阅读:881发布:2021-06-07

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1. 一种稻秸秆富硒抗虫抗病有机菌肥,其特征在于制备方法为:
一)制备水稻秸秆富硒发酵
(1)制备水稻秸秆发酵菌种液
A)制备菌种培养基
a、制备A液体培养基:将去皮土豆80-120g、水稻秸秆粉18-22g加水900-1100ml置于密闭容器内,加热排除冷空气后维持110-130℃、0.5-1小时,冷却后再加入红糖8-12g、补足水量,混匀,转入100℃蒸汽灭菌0.5-1小时,制得A液体培养基;
b、制备B液体培养基:将水稻秸秆粉180-220g加水900-1100ml置于密闭容器内,加热排除冷空气后维持110-130℃、0.5-1小时,冷却后再加入尿素2-4g、补足水量,混匀,转入100℃蒸汽灭菌0.5-1小时,制得B液体培养基;
c、制得C液体培养基:将水稻秸秆粉18-22g加水900-1100ml置于密闭容器内,加热排除冷空气后维持110-130℃、0.5-1小时,冷却后再加入红糖8-12g、尿素4-6g、蛋白胨4-6g、补足水量,混匀,转入100℃蒸汽灭菌0.5-1小时,制得C液体培养基;
d、制备D液体培养基:将水稻秸秆粉180-220g加水900-1100ml置于密闭容器内,加热排除冷空气后维持110-130℃、0.5-1小时,冷却后再加入红糖4-6g、尿素8-12g、补足水量,混匀,转入100℃蒸汽灭菌0.5-1小时,制得D液体培养基;
B)制备各菌种菌株的菌种液
a、将草菇菌种活化,无菌接入A液体培养基,转速160-200r/min、25-45℃摇床培养5-7日,至菌液粘稠、颜色改变并可见菌丝大量生长;继续无菌接入B液体培养基,转速160-
200r/min、25-45℃培养6-8日,至发酵菌液粘稠、颜色改变、可见菌丝大量生长且菌丝生物量达500 mg/100ml以上;
b、将木霉菌种活化,无菌接入A液体培养基,转速160-200r/min、25-40℃摇床培养5-7日,至菌液粘稠、颜色改变并可见菌丝大量生长;继续无菌接入B液体培养基,转速160-
200r/min、25-40℃培养6-8日,至发酵菌液粘稠、颜色改变、可见菌丝大量生长且菌丝生物量达500 mg/100ml以上;
c、将球毛壳菌菌种活化,无菌接入A液体培养基,转速160-200r/min、25-40℃摇床培养
5-7日,至菌液粘稠、颜色改变并可见菌丝大量生长;继续无菌接入B液体培养基,转速160-
200r/min、25-40℃培养6-8日,至菌丝生物量达500 mg/100ml以上;
d、将嗜热侧孢霉菌种活化,无菌接入A液体培养基,转速160-200r/min、35-55℃摇床培养5-7日,至菌液粘稠、颜色改变并可见菌丝大量生长;继续无菌接入B液体培养基,转速
160-200r/min、35-55℃培养7-9日,至发酵菌液粘稠、颜色改变、可见菌丝大量生长且菌丝生物量达500 mg/100ml以上;
e、将产黄纤维单胞菌菌种活化,活化后无菌接入C液体培养基,转速160-200r/min、25-
40℃摇床培养1-2日,至菌液浑浊、颜色改变;继续无菌接入D液体培养基,转速160-200r/min、25-40℃摇床培养1-2日,至发酵液浑浊、颜色改变,并经细胞平板涂抹计数达5×108/ml以上;
C)制备水稻秸秆发酵菌种液
将上述培养的草菇菌种液、木霉菌种液、球毛壳菌菌种液、嗜热侧孢霉菌种液、产黄纤维单胞菌菌种液等量混合,即为水稻秸秆发酵菌种液;
(2)制备水稻秸秆富硒发酵料
A)发酵原料重量份配比:
水稻秸秆10000公斤
养猪场猪粪尿及其冲洗水或其沼气发酵后的沼渣沼液9000-12000公斤
98%浓硫酸300-350公斤
石灰200-250公斤
红糖100-150公斤
尿素200-300公斤
KCl50-100公斤
KH2PO4 50-100公斤
MgCl2 50-100公斤
FeSO4 50-100公斤
MnCl2 50-80公斤
ZnSO4 50-80公斤
NaSeO3 10-30公斤;
B)发酵料制备方法:
a、水稻秸秆酸处理
将水稻秸秆粉粹为1-2cm小段,并等分为堆体甲和堆体乙;猪粪尿及其冲洗水或其沼渣沼液也等分为两份,并分别加入堆体甲和堆体乙;堆体甲在加入猪粪尿及其冲洗水或其沼渣沼液时,随之加入全部配方量的浓硫酸溶液并拌匀,并以猪粪尿及其冲洗水或其沼渣沼液调节含水量至65-75%,酸处理12-24小时,期间翻堆3-4次;堆体乙先拌入全部配方量的石灰,后加入猪粪尿及其冲洗水或其沼渣沼液,拌匀,并以猪粪尿及其冲洗水或其沼渣沼液调节含水量至65-75%,碱处理12-24小时,期间翻堆3-4次;
b、水稻秸秆低温发酵
将上述经过酸、碱处理后的堆体甲、堆体乙进行混合、拌匀,按配方量加入全部KCl、KH2PO4、MgCl2、FeSO4 、MnCl2 、ZnSO4 、NaSeO3 、水稻秸秆发酵菌种液,并加入1/2配方量的尿素,拌匀,建堆发酵,约从第二天开始,每天翻堆1-2次,维持堆温约25-40℃,至第7-10日、堆体内可见菌丝明显生长;
c、水稻秸秆高温发酵
水稻秸秆低温发酵过程中、至堆体内可见菌丝大量生长时,继续加入全部配方用量的红糖及余下配方用量的尿素,拌匀,适当覆膜,进行高温发酵,至7-10日、堆体温度经高温自然降至常温、堆料黑褐色并可见大量菌丝,结束发酵,打碎,即为水稻秸秆富硒发酵料;
二)制备水稻秸秆抗虫菌肥
A)制备菌种培养基
a、制备K液体培养基
将水稻秸秆富硒发酵料90-110g加水900-1100ml置于密闭容器内,加热排除冷空气后维持110-130℃、0.5-1小时,冷却后再加入蛋白胨4-6g,混匀,转入100℃蒸汽灭菌0.5-1小时,制得K液体培养基;
b、制备L液体培养基
将水稻秸秆富硒发酵料180-220g加水900-1100ml置于密闭容器内,加热排除冷空气后维持110-130℃、0.5-1小时,冷却后补足水量,混匀,转入100℃蒸汽灭菌0.5-1小时,制得L液体培养基;
B) 制备抗虫菌菌种液
将苏金芽孢杆菌菌种进行活化,活化后无菌接入K液体培养基,转速160-200r/min、
25-40℃摇床培养1-2日,至菌液浑浊、颜色改变;继续无菌接入L液体培养基,转速160-
200r/min、25-40℃摇床培养1-2日,至发酵液浑浊、颜色改变,并经细胞平板涂抹计数达5×
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10/ml以上,即为抗虫菌菌种液;
C) 制备水稻秸秆抗虫菌肥
以1000公斤刚发酵完成的水稻秸秆富硒发酵料,加入抗虫菌菌种液50-100公斤,并以抗虫菌菌种液调节发酵料的含水量至约60-65%,结合翻堆,控制发酵温度约25-45℃,培养
7-8日,至堆体降为室温,即为水稻秸秆抗虫菌肥;
三) 制备水稻秸秆防病抗生菌肥
A) 制备菌种培养基
a、制备M培养基
将水稻秸秆富硒发酵料90-110g、黄豆粉18-22g加水900-1100ml置于密闭容器内,加热排除冷空气后维持110-130℃、0.5-1小时,冷却后后补足水量,混匀,转入100℃蒸汽灭菌
0.5-1小时,制得M液体培养基;
b、制备N培养基
将水稻秸秆富硒发酵料180-220g加水900-1100ml置于密闭容器内,加热排除冷空气后维持110-130℃、0.5-1小时,冷却后补足水量,混匀,转入100℃蒸汽灭菌0.5-1小时,制得N液体培养基;
B)制备防病抗生菌种液
将细黄链霉菌菌种进行活化,活化后无菌接入M液体培养基,转速160-200r/min、25-40℃摇床培养7-9日,至菌丝大量生长、菌液粘稠;继续无菌接入N液体培养基,转速160-200r/min、25-40℃摇床培养9-11日,至发酵菌液粘稠、颜色改变、可见菌丝大量生长且菌丝生物量达500 mg/100ml以上,即为防病抗生菌菌种液;
C)制备水稻秸秆防病抗生菌肥
以1000公斤刚发酵完成的水稻秸秆富硒发酵料,加入防病抗生菌种液50-100公斤,并以防病抗生菌菌种液调节发酵料的含水量至约60-65%,结合翻堆,控制发酵温度约25-45℃,培养10-12日,至堆体降为室温,即为水稻秸秆防病抗生菌肥;
四)制备中药抗虫液肥
称取苦参根系及茎叶、花椒果实及叶片各300公斤,捣碎或切碎,加2-3倍水量,一同加入到密闭加热容器内,加热排除冷空气后继续加热至110-120℃,搅拌、熬煮12-24小时,至基本无颗粒残留,转移至敞开加热容器内,文火加热并维持微沸腾、搅拌、熬煮3-4小时,至液体浓缩至250-350公斤,即为中药抗虫液肥;
五)制备菌肥辅料
将磷矿粉300公斤、长石粉80-120公斤混匀,即为最终菌肥产品的辅料,用于调节最终产品含水量;
六)制备水稻秸秆富硒抗虫抗病有机菌肥产品
将水稻秸秆富硒发酵料、水稻秸秆抗虫菌肥、水稻秸秆防病抗生菌肥、中药抗虫液肥等量或不等量混合,并按总重量的20-30%加入辅料,调节含水量至30%以下,即为本水稻秸秆富硒抗虫抗病有机菌肥。

说明书全文

一种稻秸秆富硒抗虫抗病有机菌肥

技术领域

[0001] 本发明涉及农业肥料领域。技术背景
[0002] 多年来,人们习惯于大量施用无机化肥及农药土壤有机质严重缺乏,生态遭到破坏,土壤板结、贫瘠,性能下降,病虫害易发多发、抗药性增强,农药、化肥使用量逐年加大,有毒有害残留增加,已开始威胁人们健康。遵循现代生态原理,迅速补充土壤有机质的同时,以现代功能生物及中药等非农药方法,防治土壤及作物病虫害,修复土壤生态及土壤性能,促进农业可持续发展,有重要意义。
[0003]

发明内容

[0004] 本发明的目的,就是针对人们多年来习惯于大量施用化肥、农药,土壤有机质缺乏、有益微生物稀少、土壤生态系统遭到破坏,化肥、农药使用量逐年攀升,有毒有害物质残留加剧,危害人们健康、已形成恶性循环之趋势,而提供一种水稻秸秆富硒抗虫抗病有机菌肥,制备方法为:一)制备水稻秸秆富硒发酵
(1)制备水稻秸秆发酵菌种液
A)制备菌种培养基
a、制备A液体培养基:将去皮土豆80-120g、水稻秸秆粉18-22g加水900-1100ml置于密闭容器内,加热排除冷空气后维持110-130℃、0.5-1小时,冷却后再加入红糖8-12g、补足水量,混匀,转入100℃蒸汽灭菌0.5-1小时,制得A液体培养基;
b、制备B液体培养基:将水稻秸秆粉180-220g加水900-1100ml置于密闭容器内,加热排除冷空气后维持110-130℃、0.5-1小时,冷却后再加入尿素2-4g、补足水量,混匀,转入100℃蒸汽灭菌0.5-1小时,制得B液体培养基;
c、制得C液体培养基:将水稻秸秆粉18-22g加水900-1100ml置于密闭容器内,加热排除冷空气后维持110-130℃、0.5-1小时,冷却后再加入红糖8-12g、尿素4-6g、蛋白胨4-6g、补足水量,混匀,转入100℃蒸汽灭菌0.5-1小时,制得C液体培养基;
d、制备D液体培养基:将水稻秸秆粉180-220g加水900-1100ml置于密闭容器内,加热排除冷空气后维持110-130℃、0.5-1小时,冷却后再加入红糖4-6g、尿素8-12g、补足水量,混匀,转入100℃蒸汽灭菌0.5-1小时,制得D液体培养基;
B)制备各菌种菌株的菌种液
a、将草菇菌种活化,无菌接入A液体培养基,转速160-200r/min、25-45℃摇床培养5-7日,至菌液粘稠、颜色改变并可见菌丝大量生长;继续无菌接入B液体培养基,转速160-
200r/min、25-45℃培养6-8日,至发酵菌液粘稠、颜色改变、可见菌丝大量生长且菌丝生物量达500 mg/100ml以上;
b、将木霉菌种活化,无菌接入A液体培养基,转速160-200r/min、25-40℃摇床培养5-7日,至菌液粘稠、颜色改变并可见菌丝大量生长;继续无菌接入B液体培养基,转速160-
200r/min、25-40℃培养6-8日,至发酵菌液粘稠、颜色改变、可见菌丝大量生长且菌丝生物量达500 mg/100ml以上;
c、将球毛壳菌菌种活化,无菌接入A液体培养基,转速160-200r/min、25-40℃摇床培养
5-7日,至菌液粘稠、颜色改变并可见菌丝大量生长;继续无菌接入B液体培养基,转速160-
200r/min、25-40℃培养6-8日,至菌丝生物量达500 mg/100ml以上;
d、将嗜热侧孢霉菌种活化,无菌接入A液体培养基,转速160-200r/min、35-55℃摇床培养5-7日,至菌液粘稠、颜色改变并可见菌丝大量生长;继续无菌接入B液体培养基,转速
160-200r/min、35-55℃培养7-9日,至发酵菌液粘稠、颜色改变、可见菌丝大量生长且菌丝生物量达500 mg/100ml以上;
e、将产黄纤维单胞菌菌种活化,活化后无菌接入C液体培养基,转速160-200r/min、25-
40℃摇床培养1-2日,至菌液浑浊、颜色改变;继续无菌接入D液体培养基,转速160-200r/min、25-40℃摇床培养1-2日,至发酵液浑浊、颜色改变,并经细胞平板涂抹计数达5×108/ml以上;
C)制备水稻秸秆发酵菌种液
将上述培养的草菇菌种液、木霉菌种液、球毛壳菌菌种液、嗜热侧孢霉菌种液、产黄纤维单胞菌菌种液等量混合,即为水稻秸秆发酵菌种液;
(2)制备水稻秸秆富硒发酵料
A)发酵原料重量份配比:
水稻秸秆10000公斤 养猪场猪粪尿及其冲洗水或其沼气发酵后的沼渣沼液9000-
12000公斤 98%浓硫酸300-350公斤 石灰200-250公斤 红糖100-150公斤 尿素200-300公斤 KCl50-100公斤 KH2PO4 50-100公斤 MgCl2 50-100公斤 FeSO4 50-100公斤 MnCl2 50-80公斤 ZnSO4 50-80公斤 NaSeO3 10-30公斤;
B)发酵料制备方法:
 a、水稻秸秆酸处理
将水稻秸秆粉粹为1-2cm小段,并等分为堆体甲和堆体乙;猪粪尿及其冲洗水或其沼渣沼液也等分为两份,并分别加入堆体甲和堆体乙;堆体甲在加入猪粪尿及其冲洗水或其沼渣沼液时,随之加入全部配方量的浓硫酸溶液并拌匀,并以猪粪尿及其冲洗水或其沼渣沼液调节含水量至65-75%,酸处理12-24小时,期间翻堆3-4次;堆体乙先拌入全部配方量的石灰,后加入猪粪尿及其冲洗水或其沼渣沼液,拌匀,并以猪粪尿及其冲洗水或其沼渣沼液调节含水量至65-75%,碱处理12-24小时,期间翻堆3-4次;
b、水稻秸秆低温发酵
将上述经过酸、碱处理后的堆体甲、堆体乙进行混合、拌匀,按配方量加入全部KCl、KH2PO4、MgCl2、FeSO4 、MnCl2 、ZnSO4 、NaSeO3 、水稻秸秆发酵菌种液,并加入1/2配方量的尿素,拌匀,建堆发酵,约从第二天开始,每天翻堆1-2次,维持堆温约25-40℃,至第7-10日、堆体内可见菌丝明显生长;
c、水稻秸秆高温发酵
水稻秸秆低温发酵过程中、至堆体内可见菌丝大量生长时,继续加入全部配方用量的红糖及余下配方用量的尿素,拌匀,适当覆膜,进行高温发酵,至7-10日、堆体温度经高温自然降至常温、堆料黑褐色并可见大量菌丝,结束发酵,打碎,即为水稻秸秆富硒发酵料;
二)制备水稻秸秆抗虫菌肥
A)制备菌种培养基
a、制备K液体培养基
将水稻秸秆富硒发酵料90-110g加水900-1100ml置于密闭容器内,加热排除冷空气后维持110-130℃、0.5-1小时,冷却后再加入蛋白胨4-6g,混匀,转入100℃蒸汽灭菌0.5-1小时,制得K液体培养基;
b、制备L液体培养基
将水稻秸秆富硒发酵料180-220g加水900-1100ml置于密闭容器内,加热排除冷空气后维持110-130℃、0.5-1小时,冷却后补足水量,混匀,转入100℃蒸汽灭菌0.5-1小时,制得L液体培养基;
B) 制备抗虫菌菌种液
将苏金芽孢杆菌菌种进行活化,活化后无菌接入K液体培养基,转速160-200r/min、
25-40℃摇床培养1-2日,至菌液浑浊、颜色改变;继续无菌接入L液体培养基,转速160-
200r/min、25-40℃摇床培养1-2日,至发酵液浑浊、颜色改变,并经细胞平板涂抹计数达5×
108/ml以上,即为抗虫菌菌种液;
C) 制备水稻秸秆抗虫菌肥
以1000公斤刚发酵完成的水稻秸秆富硒发酵料,加入抗虫菌菌种液50-100公斤,并以抗虫菌菌种液调节发酵料的含水量至约60-65%,结合翻堆,控制发酵温度约25-45℃,培养
7-8日,至堆体降为室温,即为水稻秸秆抗虫菌肥;
三) 制备水稻秸秆防病抗生菌肥
A) 制备菌种培养基
a、制备M培养基
将水稻秸秆富硒发酵料90-110g、黄豆粉18-22g加水900-1100ml置于密闭容器内,加热排除冷空气后维持110-130℃、0.5-1小时,冷却后后补足水量,混匀,转入100℃蒸汽灭菌
0.5-1小时,制得M液体培养基;
b、制备N培养基
将水稻秸秆富硒发酵料180-220g加水900-1100ml置于密闭容器内,加热排除冷空气后维持110-130℃、0.5-1小时,冷却后补足水量,混匀,转入100℃蒸汽灭菌0.5-1小时,制得N液体培养基;
B)制备防病抗生菌种液
将细黄链霉菌菌种进行活化,活化后无菌接入M液体培养基,转速160-200r/min、25-40℃摇床培养7-9日,至菌丝大量生长、菌液粘稠;继续无菌接入N液体培养基,转速160-200r/min、25-40℃摇床培养9-11日,至发酵菌液粘稠、颜色改变、可见菌丝大量生长且菌丝生物量达500 mg/100ml以上,即为防病抗生菌菌种液;
C)制备水稻秸秆防病抗生菌肥
以1000公斤刚发酵完成的水稻秸秆富硒发酵料,加入防病抗生菌种液50-100公斤,并以防病抗生菌菌种液调节发酵料的含水量至约60-65%,结合翻堆,控制发酵温度约25-45℃,培养10-12日,至堆体降为室温,即为水稻秸秆防病抗生菌肥;
四)制备中药抗虫液肥
称取苦参根系及茎叶、花椒果实及叶片各300公斤,捣碎或切碎,加2-3倍水量,一同加入到密闭加热容器内,加热排除冷空气后继续加热至110-120℃,搅拌、熬煮12-24小时,至基本无颗粒残留,转移至敞开加热容器内,文火加热并维持微沸腾、搅拌、熬煮3-4小时,至液体浓缩至250-350公斤,即为中药抗虫液肥;
五)制备菌肥辅料
将磷矿粉300公斤、长石粉80-120公斤混匀,即为最终菌肥产品的辅料,用于调节最终产品含水量;
六)制备水稻秸秆富硒抗虫抗病有机菌肥产品
将水稻秸秆富硒发酵料、水稻秸秆抗虫菌肥、水稻秸秆防病抗生菌肥、中药抗虫液肥等量或不等量混合,并按总重量的20-30%加入辅料,调节含水量至30%以下,即为本水稻秸秆富硒抗虫抗病有机菌肥。
[0005]本发明优点:
1、以水稻秸秆和养猪场粪尿及其冲洗水或其沼渣沼液等农业废弃物为主要原料,通过系列微生物的作用,将水稻秸秆等转化为腐殖质等有机质,变废为宝,可为作物提供充足有机养分,改善土壤结构和性能;
2、通过系列微生物的作用,将氮磷钾等大中微量无机速效养分转变为有机态元素营养,延长了养分保蓄时间,提高了养分利用效率;
3、遵循生态原理,富含防病杀虫等多种功能菌,以及数种本地丰富的抗虫中草药,可有效防治土壤病虫害及作物病虫害,可填补有机废弃物在速效有机肥生物农药等领域的空白;
4、将无机态硒转变为有机态硒,作物易于吸收、吸收持久,使农产品具有一定保健功能;
5、修复土壤生态链,充分发挥土壤生态功能,安全环保,具有显著的经济效益和社会效益,尤其适合有机绿色农业领域广泛推广施用。
[0006]

具体实施方式

本产品最佳制备方法为:
 一)制备水稻秸秆富硒发酵料
(1)制备水稻秸秆发酵菌种液
A)制备菌种培养基
a、制备A液体培养基:将去皮土豆80-120g、水稻秸秆粉18-22g加水900-1100ml置于密闭容器内,加热排除冷空气后维持110-130℃、0.5-1小时,冷却后再加入红糖8-12g、补足水量,混匀,转入100℃蒸汽灭菌0.5-1小时,制得A液体培养基;
b、制备B液体培养基:将水稻秸秆粉180-220g加水900-1100ml置于密闭容器内,加热排除冷空气后维持110-130℃、0.5-1小时,冷却后再加入尿素2-4g、补足水量,混匀,转入100℃蒸汽灭菌0.5-1小时,制得B液体培养基;
c、制得C液体培养基:将水稻秸秆粉18-22g加水900-1100ml置于密闭容器内,加热排除冷空气后维持110-130℃、0.5-1小时,冷却后再加入红糖8-12g、尿素4-6g、蛋白胨4-6g、补足水量,混匀,转入100℃蒸汽灭菌0.5-1小时,制得C液体培养基;
d、制备D液体培养基:将水稻秸秆粉180-220g加水900-1100ml置于密闭容器内,加热排除冷空气后维持110-130℃、0.5-1小时,冷却后再加入红糖4-6g、尿素8-12g、补足水量,混匀,转入100℃蒸汽灭菌0.5-1小时,制得D液体培养基;
B)制备各菌种菌株的菌种液
a、将草菇菌种活化,无菌接入A液体培养基,转速160-200r/min、25-45℃摇床培养5-7日,至菌液粘稠、颜色改变并可见菌丝大量生长;继续无菌接入B液体培养基,转速160-
200r/min、25-45℃培养6-8日,至发酵菌液粘稠、颜色改变、可见菌丝大量生长且菌丝生物量达500 mg/100ml以上;
b、将木霉菌种活化,无菌接入A液体培养基,转速160-200r/min、25-40℃摇床培养5-7日,至菌液粘稠、颜色改变并可见菌丝大量生长;继续无菌接入B液体培养基,转速160-
200r/min、25-40℃培养6-8日,至发酵菌液粘稠、颜色改变、可见菌丝大量生长且菌丝生物量达500 mg/100ml以上;
c、将球毛壳菌菌种活化,无菌接入A液体培养基,转速160-200r/min、25-40℃摇床培养
5-7日,至菌液粘稠、颜色改变并可见菌丝大量生长;继续无菌接入B液体培养基,转速160-
200r/min、25-40℃培养6-8日,至菌丝生物量达500 mg/100ml以上;
d、将嗜热侧孢霉菌种活化,无菌接入A液体培养基,转速160-200r/min、35-55℃摇床培养5-7日,至菌液粘稠、颜色改变并可见菌丝大量生长;继续无菌接入B液体培养基,转速
160-200r/min、35-55℃培养7-9日,至发酵菌液粘稠、颜色改变、可见菌丝大量生长且菌丝生物量达500 mg/100ml以上;
e、将产黄纤维单胞菌菌种活化,活化后无菌接入C液体培养基,转速160-200r/min、25-
40℃摇床培养1-2日,至菌液浑浊、颜色改变;继续无菌接入D液体培养基,转速160-200r/min、25-40℃摇床培养1-2日,至发酵液浑浊、颜色改变,并经细胞平板涂抹计数达5×108/ml以上;
C)制备水稻秸秆发酵菌种液
将上述培养的草菇菌种液、木霉菌种液、球毛壳菌菌种液、嗜热侧孢霉菌种液、产黄纤维单胞菌菌种液等量混合,即为水稻秸秆发酵菌种液;
(2)制备水稻秸秆富硒发酵料
A)发酵原料重量份配比:
水稻秸秆10000公斤 养猪场猪粪尿及其冲洗水或其沼气发酵后的沼渣沼液9000-
12000公斤 98%浓硫酸300-350公斤 石灰200-250公斤 红糖100-150公斤 尿素200-300公斤 KCl50-100公斤 KH2PO4 50-100公斤 MgCl2 50-100公斤 FeSO4 50-100公斤 MnCl2 50-80公斤 ZnSO4 50-80公斤NaSeO3 10-30公斤;
B)发酵料制备方法:
a、水稻秸秆酸碱处理
将水稻秸秆粉粹为1-2cm小段,并等分为堆体甲和堆体乙;猪粪尿及其冲洗水或其沼渣沼液也等分为两份,并分别加入堆体甲和堆体乙;堆体甲在加入猪粪尿及其冲洗水或其沼渣沼液时,随之加入全部配方量的浓硫酸溶液并拌匀,并以猪粪尿及其冲洗水或其沼渣沼液调节含水量至65-75%,酸处理12-24小时,期间翻堆3-4次;堆体乙先拌入全部配方量的石灰,后加入猪粪尿及其冲洗水或其沼渣沼液,拌匀,并以猪粪尿及其冲洗水或其沼渣沼液调节含水量至65-75%,碱处理12-24小时,期间翻堆3-4次;
b、水稻秸秆低温发酵
将上述经过酸、碱处理后的堆体甲、堆体乙进行混合、拌匀,按配方量加入全部KCl、KH2PO4、MgCl2、FeSO4 、MnCl2 、ZnSO4 、NaSeO3 、水稻秸秆发酵菌种液,并加入1/2配方量的尿素,拌匀,建堆发酵,约从第二天开始,每天翻堆1-2次,维持堆温约25-40℃,至第7-10日、堆体内可见菌丝明显生长;
c、水稻秸秆高温发酵
水稻秸秆低温发酵过程中、至堆体内可见菌丝大量生长时,继续加入全部配方用量的红糖及余下配方用量的尿素,拌匀,适当覆膜,进行高温发酵,至7-10日、堆体温度经高温自然降至常温、堆料黑褐色并可见大量菌丝,结束发酵,打碎,即为水稻秸秆富硒发酵料;
二)制备水稻秸秆抗虫菌肥
A)制备菌种培养基
a、制备K液体培养基
将水稻秸秆富硒发酵料90-110g加水900-1100ml置于密闭容器内,加热排除冷空气后维持110-130℃、0.5-1小时,冷却后再加入蛋白胨4-6g,混匀,转入100℃蒸汽灭菌0.5-1小时,制得K液体培养基;
b、制备L液体培养基
将水稻秸秆富硒发酵料180-220g加水900-1100ml置于密闭容器内,加热排除冷空气后维持110-130℃、0.5-1小时,冷却后补足水量,混匀,转入100℃蒸汽灭菌0.5-1小时,制得L液体培养基;
B) 制备抗虫菌菌种液
苏云金芽孢杆菌菌种进行活化,活化后无菌接入K液体培养基,转速160-200r/min、
25-40℃摇床培养1-2日,至菌液浑浊、颜色改变;继续无菌接入L液体培养基,转速160-
200r/min、25-40℃摇床培养1-2日,至发酵液浑浊、颜色改变,并经细胞平板涂抹计数达5×
108/ml以上,即为抗虫菌菌种液;
C) 制备水稻秸秆抗虫菌肥
以1000公斤刚发酵完成的水稻秸秆富硒发酵料,加入抗虫菌菌种液50-100公斤,并以抗虫菌菌种液调节发酵料的含水量至约60-65%,结合翻堆,控制发酵温度约25-45℃,培养
7-8日,至堆体降为室温,即为水稻秸秆抗虫菌肥;
三) 制备水稻秸秆防病抗生菌肥
A) 制备菌种培养基
a、制备M培养基
将水稻秸秆富硒发酵料90-110g、黄豆粉18-22g加水900-1100ml置于密闭容器内,加热排除冷空气后维持110-130℃、0.5-1小时,冷却后后补足水量,混匀,转入100℃蒸汽灭菌
0.5-1小时,制得M液体培养基;
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