一种具有抗干旱胁迫功能的菌株及其应用
阅读：647发布：2020-05-14
专利汇可以提供一种具有抗干旱胁迫功能的菌株及其应用专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 发现保藏编号为GDMCC No：60235的阿勒泰丝 氨 酸球菌W204具有干旱胁迫抗性。该细菌可作为抗干旱胁迫的重要基因来源，用于构建转基因 生物 ，培育耐受干旱胁迫的转基因 植物 。，下面是一种具有抗干旱胁迫功能的菌株及其应用专利的具体信息内容。
一种具有抗干旱胁迫功能的菌株及其应用
技术领域
背景技术
[0002] 在众多非生物胁迫中，干旱是限制植物生长的最主要胁迫因子，几乎影响了植物生长发育的每个阶段。从自然界现有生物资源中寻找抗干旱胁迫基因，转化到植物中予以表达，从而提高植物对干旱的忍耐力，是解决这一问题的关键。
[0003] 目前，已报道具有抗干旱能力的微生物多为Deinococcus属的细菌，如耐辐射异常球菌(Deinococcus radiodurans)，D.radiodurans在漫长的干旱抗性的进化过程中形成了自身强大的DNA修复系统。但是，目前还未有关于Serinicoccus属细菌抗干旱胁迫冲击的报道。
发明内容
[0004] 本发明的目的是发现具有干旱胁迫抗性能力的微生物。
[0005] 本发明发现以下菌株具有抗干旱胁迫功能：
[0006] 阿勒泰丝氨酸球菌W204(Serinicoccus altayensis W204)【altay.en’sis.N.L.masc.adj.】，保藏编号为GDMCC No：60235。保藏单位：广东省微生物菌种保藏中心；保藏时间：2017年9月15日。
[0007] 该抗干旱阿勒泰丝氨酸球菌W204的菌落形态见图1，扫描电镜图片见图2。
[0008] 本发明通过实验发现该菌具有良好的抗干旱胁迫能力，经过3M山梨醇冲击8h后仍旧能够正常生长，见图3。
[0009] 本发明所述的阿勒泰丝氨酸球菌W204为Serinicoccus属的革兰氏阳性，该属从未报道具有干旱胁迫抗性。
[0010] 通过将本发明所述的阿勒泰丝氨酸球菌W204与丝氨酸球菌属标准菌株微生物学特性比较：
[0011] 与丝氨酸球菌属标准菌株------Serinicoccus marinus DSM 15273T等的对比实验表明，本发明发现的抗干旱阿勒泰丝氨酸球菌W204与该属标准菌株的微生物学特性有显著差异(
[0012] 表1)。
[0013] 表1阿勒泰丝氨酸球菌W204与已报道的同属菌株的微生物学特性比较
[0014]
[0015] 注：“+”表示阳性，“-”表示阴性，“W”表示弱阳性，ND表示无相关数据[0016] 通过对该菌干旱抗性机理的研究，可以更好地阐明该菌的抗逆特性，进一步加深人们对于干旱胁迫耐受机理的认识。也可作为新的转基因生物的基因供体，将其优良的抗干旱基因转入其它生物体中，使其获得优良的抗逆性状。
[0018] 图1抗干旱阿勒泰丝氨酸球菌W204的菌落形态；
[0019] 图2抗干旱阿勒泰丝氨酸球菌W204的扫描电镜图片；
[0020] 图3抗干旱阿勒泰丝氨酸球菌W204与对照菌株E.coli trans 109对山梨醇的耐受对比：左图为对照菌株E.coli trans 109在不同浓度山梨醇及不同时间冲击下的生长情况，右图为阿勒泰丝氨酸球菌W204在不同浓度山梨醇及不同时间冲击下的生长情况。
具体实施方式
[0021] 实施例1阿勒泰丝氨酸球菌W204的获得
[0022] 于新疆阿勒泰地区白桦林间的草地采集土壤样品，称取1g土样，加入20mL TGY培养基中于30℃、200rpm下富集培养112h，取富集培养物100μL，按照10-1、10-2、10-3、10-4、10-5和10-6依次梯度稀释，分别取200μL涂布于R2A琼脂培养基平板上，倒置于30℃培养箱中培养几天，分离到本发明所述的耐干旱阿勒泰丝氨酸球菌W204。
[0023] 所述R2A琼脂培养基：酪蛋白水解物0.5g/L；酵母提取物0.5g/L；胰蛋白胨0.5g/L；葡萄糖0.5g/L；可溶性淀粉0.5g/L；磷酸氢二钾0.3g/L；无水硫酸镁0.024g/L；丙酮酸钠
0.3g/L；氯化钠10g/L；琼脂15g/L。pH 7.0-7.4。
0.3g/L；氯化钠10g/L；琼脂15g/L。pH 7.0-7.4。
[0024] 培养温度为37℃。
[0025] 实施例2阿勒泰丝氨酸球菌W204的耐干旱实验(山梨醇耐受试验)
[0026] 1、试验方法
[0027] 将本发明所述的耐干旱阿勒泰丝氨酸球菌W204菌液培养到OD600＝0.8，通过4000×g、1min、4℃离心收集菌体；后将菌体分别重悬于等体积500mM、2M和3M山梨醇，之后37℃，200rpm培养。500mM山梨醇培养时间10min，2M和3M山梨醇培养时间为4h、6h和8h。在相应的时间点取样，并依次稀释为10-1、10-2、10-3、10-4和10-5。每个浓度梯度取8μL点在2216E琼脂培养基上，37℃倒置培养，观察结果。
[0028] 同时以OD600＝0.6的大肠杆菌Trans109(E.coli trans 109)菌株为对照。
[0029] 试验菌和对照菌各进行3次平行实验。
[0030] 2、实验结果
[0031] 本发明的抗干旱阿勒泰丝氨酸球菌W204在3M山梨醇冲击8h后仍旧能正常生长，和未处理菌株并未表现出差异，见图3。
[0032] 对照菌株E.coli trans 109在2M山梨醇冲击4h后，其生长较未处理菌株相差两个数量级，3M山梨醇冲击4h后菌株几乎不生长。
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