艾可尼西亚花蜂蜜和口服液
阅读：228发布：2020-12-18
专利汇可以提供艾可尼西亚花蜂蜜和口服液专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 公开了 艾 可尼西亚花蜂蜜以及相关的口服液制剂，具有艾可尼西亚和一般蜂蜜两者的有效成份，含有乔松素和酚 醛 树脂 ，还公开了相关的制备方法。本发明具备了艾可尼西亚汁液或提取物浓缩液本身难以具备的医疗效果和功能，并且更适合十二岁以下儿童和老年人服用，填补了市场空白。，下面是艾可尼西亚花蜂蜜和口服液专利的具体信息内容。
1、一种全新的艾可尼西亚花蜂蜜，其特征在于具有艾可尼西亚和蜂蜜两者 的有效成份。
2、权力要求1所述的艾可尼西亚花蜂蜜，其特征在于含有乔松素和酚醛树 脂，乔松素的含量介于200～2000μg/100g花蜂蜜，酚醛树脂的含量介于总重量 的0.5～3.0％。
3、一种全新的艾可尼西亚花蜂蜜的制备方法，其特征在于利用艾可尼西亚 花养殖蜜蜂。
4、一种全新的艾可尼西亚花蜂蜜的制备方法，其特征在于利用艾可尼西亚 提取物浓缩液和一般蜂蜜混合而成，艾可尼西亚提取物浓缩液和一般蜂蜜的比例 介于1∶1～100之间。
5、权力要求4所述的艾可尼西亚花蜜的制备方法，艾可尼西亚提取物浓缩 液和一般蜂蜜的比例介于1∶1～10之间。
6、权力要求1所述的艾可尼西亚花蜂蜜的应用，直接食用，或制成软胶囊， 口服液，片剂，药丸，胶囊，包衣片，气溶胶，或其它液体制剂。
7、一种艾可尼西亚口服液制剂，其特征在于具有艾可尼西亚和蜂蜜两者的 有效成份，含有乔松素和酚醛树脂；所述的乔松素的含量介于200～2000μg/100ml 之间，所述的酚醛树脂的含量介于总重量的0.5～3.0％。
8、权力要求7所述的艾可尼西亚口服液制剂，是酒溶液或者水溶液，或者 是悬浮液和乳胶液等。
9、艾可尼西亚口服液制剂的制备方法，其特征在于，由艾可尼西亚花蜂蜜 和药学上可接受的载体配制而成。
10、艾可尼西亚口服液制剂的制备方法，其特征在于，由艾可尼西亚提取物 浓缩液和药学上可接受的载体配制而成。
发明领域
本发明涉及一种全新的艾可尼西亚产品，更确切地说就是艾可尼西亚花蜂蜜 和艾可尼西亚口服液，以及相关的生产或制备方法。
发明背景
艾可尼西亚(Echinacea，中文又译为紫锥菊)原产北美，土著印第安人历来 用作草药，作为治疗外伤、蛇咬、头痛及感冒的最佳药物，一般用于防治伤风、 咽喉肿痛、流感和伤口愈合、中轻度感染等，能提高免疫功能，上个世纪20年 代即被列入美国国家药典，是北美最受欢迎的草药之一。在欧洲，以艾可尼西亚 为原料的产品已连续数年占据年销量第一的位置，尤其在德国和法国，艾可尼西 亚及其制剂已成为家庭常备药。在美国药用植物销售排名中，艾可尼西亚在1995， 1996，1997，1999，2002年均排名第一，并且被评为2002年的风云草药(Herb of the Year， http：//www.nres.uiuc.edu/outreach/pubs/hfs/Echinacea.pdf)。
其免疫活性受到国内外的普遍重视，在欧美正被广泛应用于药品、营养补充剂和 保健食品领域。
现代医学研究发现，艾可尼西亚中含有多种多糖及糖蛋白，咖啡酸类衍生物， 和紫锥菊苷等。例如，多糖PSI为4-甲氧基-葡萄糖醛-阿拉伯糖-木聚糖聚糖(4 -O-methy-glucuronoar-binoxylan，Mr 35000)，多糖PSII为酸性阿拉伯糖 -鼠李糖-半乳糖聚糖(acidicarabinorhamnogalactan，Mr 45000)，中性岩藻糖 -半乳糖-木聚糖一葡萄糖聚糖(fucogalactoxyloglucans，Mr 10000和25000)； 酸性阿拉伯糖-半乳糖聚糖(arabinogalac tan，Mr 75000)等。从艾可尼西亚中 得到的糖蛋白有三种，Mr分别为17000，21000，和30000。其它从艾可尼西亚 中分离出化合物还包括脂肪酰胺类化合物，菊苣酸甲酯，2-氧咖啡酰基-3-氧-阿 魏酰基酒石酸和2，3-氧-双阿魏酰基酒石酸，2-氧代-阿魏酰基酒石酸及2-氧- 咖啡酰基-3-氧-香豆酰基酒石酸，2-氧-咖啡酰基-3-氧-阿魏酸酒石酸，2，3- 氧-双-5[α-羰基-β(3，4-双羰基苯基)乙基]-咖啡酰基酒石酸和2-氧-咖 啡酰基-3-氧[5-[α-羰基-β(2，4-双羰基苯基)-乙基]-咖啡酰基]-酒石酸， 等等。所有这些物质均被证明具有很好的提高免疫力和消炎作用等(Echinacea， The Plant That Boots Your Immune System，London，1999，Souvenir Press Ltd.)。
在过去的二、三十年内，无数的临床试验从现代医学的角度证明了艾可尼 西亚具有良好的治疗效果和用药安全性，包括对天生的免疫系统缺陷疾病的治疗 效果(Z.Phytother.1989，10，67-70.和Phytomed.1996，3，95-102)。艾 可尼西亚在现代医学上的应用主要集中在它对免疫系统的强化作用上面，主要用 于治疗病毒性感染，病菌性感染，原虫性疾病，和真菌性感染等(Alternative Medicine Review，2001，6，411-414)，其中有六个临床试验和体外试验证明艾 可尼西亚汁液能够刺激白细胞的产生并且提高白细胞的吞噬活性(J.Altern. Complement Med.1995，1，145-160)。在超过3900人的临床试验中证明，艾 可尼西亚汁液能够很好地降低感冒和流感的发病率，减轻病患的症状等 (Nutrition Science News，1999年九月号和1999年三月号等)。另外发现艾可 尼西亚汁液能有效地抑制病毒的分裂，控制病毒的衍生复制(Planta Med.1978， 33，89-102)。通过对1280个患有支气管炎的儿童进行回顾性研究，结果表明 用艾可尼西亚汁液治疗比用抗生素治疗能加快治愈进程，这主要由于支气管炎大 多是一种病毒性感染，抗生素对其无能为力，但艾可尼西亚制剂可刺激非特异性 防御机制，攻击被病毒感染的细胞。同时发现，采用艾可尼西亚汁液治疗的上呼 吸道感染的儿童再发病的几率远远低于空白对照组(美国药学学会杂志： Journal of the American Medical Association，2003，290，2824-2830)。
虽然很多临床实验证明艾可尼西亚汁液能够很好的提高肌体的免疫力 (Altern.Med.Rev.2002，7，138-149)，并且从艾可尼西亚中提取的很多化合 物被证明有很好的疗效，但是艾可尼西亚提高肌体免疫力的机理非常复杂，迄今 为止还是不能完全明白。任何一种分离出来的单一化合物都没有艾可尼西亚本身 的疗效显著，现在主要还是使用艾可尼西亚本身如全草和汁液来给患者治疗，但 是口服艾可尼西亚汁液制剂一般需要服用十天以上，有时会达到12周之久，虽 然艾可尼西亚汁液的急毒性非常低，在长期毒性实验中艾可尼西亚汁液也显示很 好的耐受性，很少发生副作用，但味道不佳，对十二岁以下儿童和老年人来说， 服用比较困难。
而且，艾可尼西亚汁液或提取物浓缩液本身并不稳定，易于出现沉淀而影响 产品的医疗效果，需要加入一些酸将它们的pH值调整到微酸性来加以稳定，如 调整到pH值4.5-5.3之间。
其免疫活性受到国内外的普遍重视，在欧美正被广泛应用于药品、营养补充剂和 保健食品领域。
现代医学研究发现，艾可尼西亚中含有多种多糖及糖蛋白，咖啡酸类衍生物， 和紫锥菊苷等。例如，多糖PSI为4-甲氧基-葡萄糖醛-阿拉伯糖-木聚糖聚糖(4 -O-methy-glucuronoar-binoxylan，Mr 35000)，多糖PSII为酸性阿拉伯糖 -鼠李糖-半乳糖聚糖(acidicarabinorhamnogalactan，Mr 45000)，中性岩藻糖 -半乳糖-木聚糖一葡萄糖聚糖(fucogalactoxyloglucans，Mr 10000和25000)； 酸性阿拉伯糖-半乳糖聚糖(arabinogalac tan，Mr 75000)等。从艾可尼西亚中 得到的糖蛋白有三种，Mr分别为17000，21000，和30000。其它从艾可尼西亚 中分离出化合物还包括脂肪酰胺类化合物，菊苣酸甲酯，2-氧咖啡酰基-3-氧-阿 魏酰基酒石酸和2，3-氧-双阿魏酰基酒石酸，2-氧代-阿魏酰基酒石酸及2-氧- 咖啡酰基-3-氧-香豆酰基酒石酸，2-氧-咖啡酰基-3-氧-阿魏酸酒石酸，2，3- 氧-双-5[α-羰基-β(3，4-双羰基苯基)乙基]-咖啡酰基酒石酸和2-氧-咖 啡酰基-3-氧[5-[α-羰基-β(2，4-双羰基苯基)-乙基]-咖啡酰基]-酒石酸， 等等。所有这些物质均被证明具有很好的提高免疫力和消炎作用等(Echinacea， The Plant That Boots Your Immune System，London，1999，Souvenir Press Ltd.)。
在过去的二、三十年内，无数的临床试验从现代医学的角度证明了艾可尼 西亚具有良好的治疗效果和用药安全性，包括对天生的免疫系统缺陷疾病的治疗 效果(Z.Phytother.1989，10，67-70.和Phytomed.1996，3，95-102)。艾 可尼西亚在现代医学上的应用主要集中在它对免疫系统的强化作用上面，主要用 于治疗病毒性感染，病菌性感染，原虫性疾病，和真菌性感染等(Alternative Medicine Review，2001，6，411-414)，其中有六个临床试验和体外试验证明艾 可尼西亚汁液能够刺激白细胞的产生并且提高白细胞的吞噬活性(J.Altern. Complement Med.1995，1，145-160)。在超过3900人的临床试验中证明，艾 可尼西亚汁液能够很好地降低感冒和流感的发病率，减轻病患的症状等 (Nutrition Science News，1999年九月号和1999年三月号等)。另外发现艾可 尼西亚汁液能有效地抑制病毒的分裂，控制病毒的衍生复制(Planta Med.1978， 33，89-102)。通过对1280个患有支气管炎的儿童进行回顾性研究，结果表明 用艾可尼西亚汁液治疗比用抗生素治疗能加快治愈进程，这主要由于支气管炎大 多是一种病毒性感染，抗生素对其无能为力，但艾可尼西亚制剂可刺激非特异性 防御机制，攻击被病毒感染的细胞。同时发现，采用艾可尼西亚汁液治疗的上呼 吸道感染的儿童再发病的几率远远低于空白对照组(美国药学学会杂志： Journal of the American Medical Association，2003，290，2824-2830)。
虽然很多临床实验证明艾可尼西亚汁液能够很好的提高肌体的免疫力 (Altern.Med.Rev.2002，7，138-149)，并且从艾可尼西亚中提取的很多化合 物被证明有很好的疗效，但是艾可尼西亚提高肌体免疫力的机理非常复杂，迄今 为止还是不能完全明白。任何一种分离出来的单一化合物都没有艾可尼西亚本身 的疗效显著，现在主要还是使用艾可尼西亚本身如全草和汁液来给患者治疗，但 是口服艾可尼西亚汁液制剂一般需要服用十天以上，有时会达到12周之久，虽 然艾可尼西亚汁液的急毒性非常低，在长期毒性实验中艾可尼西亚汁液也显示很 好的耐受性，很少发生副作用，但味道不佳，对十二岁以下儿童和老年人来说， 服用比较困难。
而且，艾可尼西亚汁液或提取物浓缩液本身并不稳定，易于出现沉淀而影响 产品的医疗效果，需要加入一些酸将它们的pH值调整到微酸性来加以稳定，如 调整到pH值4.5-5.3之间。
发明内容
(一)、发明目的
虽然艾可尼西亚用作草药已有上千年的历史，并且艾可尼西亚又有着花大 花期长的特点，但是可能由于生活习惯、风俗等原因，迄今为止未见有艾可尼西 亚花蜂蜜问世。为了更好地结合蜂蜜和艾可尼西亚两者的医药治疗作用和营养保 健作用，造福人类，我们开发了艾可尼西亚新产品。
本发明的目的就是提供全新的艾可尼西亚产品，包括艾可尼西亚花蜂蜜以及 相关的口服液制剂，特别适合十二岁以下儿童和老年人服用。
(二)、发明产品和主要指标检测方法
所述的艾可尼西亚花蜂蜜，它既包含艾可尼西亚所有的有效成份，如前文背 景技术所述，又含有蜂蜜所特有的医疗有效成份，比如含有乔松素(pinocembrin) 和酚醛树脂(phenolics)，其中酚醛树脂的含量介于总重量的0.5～3.0％，乔松 素的含量介于200～2000μg/100g花蜂蜜。
所述的艾可尼西亚口服液制剂，它既包含艾可尼西亚所有的有效成份，如前 文背景技术所述，又含有蜂蜜所特有的医疗有效成份，比如含有乔松素和酚醛树 脂，酚醛树脂的含量介于总重量的0.5～3.0％，乔松素的含量介于200～ 2000μg/100ml之间。
在汉代问世的《神农本草经》已将蜂蜜列为药中上品。此后历代医经和本草 书籍中对蜂蜜都有记载。明代医学家李时珍在《本草纲目》中论述道：“蜂蜜， 其入药之功有五：清热也，补中也，解毒也，润燥也，止痛也。”
现代科学研究和使用结果表明( http：//www.hot38.com/news/news2.htm)， 蜂蜜中含有大量的各种各样的有效成分，如多糖，高含量的还原性糖，葡萄糖氧 化酶(glucose oxidase)，溶酶菌(lysozyme)，各种萜类化合物(terpenes)，球 松素(pinostrobin)，乔松素(pinocembrin，有时又译成松属素)，白杨素 (chrysin)，多种酚醛树脂，苯甲醇，等等。蜂蜜不仅能够护肤美容和促进长寿， 还有很好的抗菌消炎、促进组织再生，促进消化，提高免疫力，改善睡眠，保护 肝脏，抗疲劳，促进儿童生长发育，保护心血管，润肺止咳，促进钙吸收等一系 列重要作用。另外，美国的科研究工作人员发现蜂蜜又是很强的抗氧化剂 ( http：//www.chinapropolis.com.cn/yy jk19.htm)。
根据医学上的分析，蜂蜜中一般都含有乔松素(pinocembrin)，其抗菌、抗 病毒，对链球菌、葡萄球菌、白喉杆菌等革兰氏阳性菌有较强的抑制作用，同时 对胃肠功能有调节作用，可使胃酸分泌正常，促进消化，又可以纾解口腔溃疡， 并加速伤口愈合；同时蜂蜜中含有和单纯的艾可尼西亚汁液或提取物浓缩液不同 种的名为酚醛树脂(phenolics)的化合物，酚醛树脂具有抗氧化的特性，所以蜂 蜜的抗氧化能力接近维生素C。
乔松素和酚醛树脂均可采用理化数据和波谱分析鉴定，比如用高压液相色谱 (HPLC)分析方法，可以进行定性和定量分析。
酚醛树脂的测定方法：在谱图上把各种酚醛树脂的吸收峰面积经过统一量化 后加在一起来计算总含量；
乔松素的测定方法：在谱图上的吸收峰要能明显的观测到，峰高最少是杂音 峰(noise)的三倍以上。例如采用反相C-18，5μm，4.6×250mm(Waters)柱，流 动相为A：30毫摩尔的NaH2PO4，B：乙腈；温度35℃，线性梯度方法为：0-28 分钟：10％B→30％B；28-70分钟，30％B→55％B；70-75分钟，55％B→10％B，乔松 素峰的保留时间(retention time)在48.48分钟，乔松素的含量达到200 μg/100g蜂蜜以上。
对于艾可尼西亚花蜂蜜来说，pH值正常范围是3.4-5.6左右，因此不需外 加酸来稳定，稳定性更高。
(三)、产品的制备方法
1艾可尼西亚花蜂蜜的制备方法：
方法一 通过养蜂获得
适合于生产艾可尼西亚蜂蜜的养蜂放牧方式有大转地、小转地、定地三种方 式。在艾可尼西亚种植面积较小的情况下，最好采取定地饲养，即将蜂群基本上 饲养在固定的蜂场，该蜂场可以处在艾可尼西亚种植区的任何地方，最好是放在 艾可尼西亚种植区的中心部分。
虽然每一品种蜜蜂都有其不同特性，但适合于生产艾可尼西亚花蜂蜜的蜜蜂 的品种包括所有的蜜蜂，即中国的蜜蜂和西方各国的蜜蜂，比如意大利蜜蜂(Apis mellifera ligustica；Italian bee)、卡尼鄂拉蜜蜂(A.m.carnica；Carniolan bee)、喀爾巴阡蜜蜂(A.m.carpathica；Carpathian bee)、高加索蜜蜂(A.m. caucasica；Caucasian bee)，还包括为提高产量而培育的各种杂交品种的蜜蜂， 比如以封闭方式培育(Closed population breeding)方法将一些优良新蜂种的基 因导入，强化蜂种亚使蜂种性位(对偶)基因增加，以減少二倍体雄蜂的产生而得 到的新蜜蜂品种等。
一般新采收的蜂蜜含水率都高于20％，长时间存放容易发酵变质，因此必须 加以浓缩脱水。浓缩脱水的方式可以使用低温真空浓缩、紅外线浓缩、冷冻除湿 浓缩、热风浓缩等数种；浓缩温度一般介于4～100℃，常用温度最好4～55℃之 间；浓缩方式最好采用低温真空浓缩方法。低温真空浓缩的特点是效率较高，处 理量也大，能够确保蜂蜜中的有效治疗成分不受到影响。浓缩后得到的蜂蜜采样 进行分析，其含水量少于20％。
蜂蜜在采收浓缩脱水杀菌后，采样分析其中的有效成分含量，以确保产品的 医药疗效。有效成分主要指乔松素，多糖，和各种酚醛树脂(phenolics)。所说 的酚醛树脂，比如菊苣酸(cichoric acid)，绿原酸(chlorogenic acid)，松果 菊苷(echinacoside)等，这是现在国际通用的分析标准。
方法二 把艾可尼西亚提取物浓缩液和一般的蜂蜜混合
采用常规方法把艾可尼西亚提取物浓缩液和一般蜂蜜混合，比例一般是 1∶1～100之间，常用的比例是1∶1～10之间。
一般的蜂蜜是指人类已知的所有蜂蜜，比如下面这些常见的枣花蜜、荆条花 蜜、槐花蜜、梨花蜜、葵花蜜、荞麦花蜜、紫云英花蜜、荔枝花蜜等等，但是本 发明是包括所有蜂蜜。
混合中采用的蜂蜜可以是浓缩脱水以前的蜂蜜，也可以是浓缩脱水以后的 蜂蜜。一般新采收的蜂蜜含水率都高于20％，长时间存放容易发酵变质，因此必 须加以浓缩脱水。浓缩脱水的方式、温度范围等如方法一中所述。
混合中有时可加入适量的表面活性剂和消泡剂。一般常用的药用表面活性剂 和消泡剂均可以用于本发明。
2艾可尼西亚口服液制剂的制备方法
方法一 把艾可尼西亚花蜂蜜和药学上可接受的载体配制，可以制成其它剂 型来使用，比如软胶囊，口服液，片剂，药丸，胶囊，包衣片，气溶胶，和其它 液体制剂。
口服液等液体制剂可以是酒溶液或者水溶液，或者是悬浮液和乳胶液等。在 选用固体制剂时，需要使用相应的赋型剂，赋型剂的选择对于本领域内熟练的技 术人员来说是很容易的。
方法二 把艾可尼西亚提取物浓缩液和药学上可接受的载体配制，也可以制 成口服液。口服液等液体制剂可以是酒溶液或者水溶液，或者是悬浮液和乳胶液 等。
在选用口服液制剂方式时，需要加入适当的矫味剂，它们可以是蜂蜜，山梨 糖，木糖，木糖醇，甘油，甘草酸二钠，甘露醇，甘露糖，半乳糖，麦芽糖，乳 糖，果糖，甜精，糖精钠，甜菊糖甙，葡萄糖，和蔗糖等。
必要的话可以加入适当的防腐剂和抗氧化剂，适合于作为防腐剂的物质包括 苯甲酸(Benzoic Acid)，山梨酸(Sorbic Acid)，乙醇(Alcohol)，对羟基苯甲 酸酯类(Parabene)，苯甲醇(Benzyl Alcohol)，和苯乙醇(Phenethanolum)等； 适合于作为抗氧化剂的物质包括亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、亚硫酸钠、干燥亚硫 酸钠、硫代硫酸钠、抗坏血酸、甲硫氨酸(蛋氨酸)、硫脲、乙二胺四醋酸二钠 (EDTA-Na2)、磷酸、枸橼酸、叔丁基对羟基茴香醚(BHA)、叔丁基对甲酚(BHT)、 去甲双氢愈创木酸(CDGA)、生育酚、棓酸酯类等。
有时在制剂中也需要加入适量的芳香剂，胶浆剂，和着色剂等。芳香剂包括 人工合成的香料有酯、醇、醛、酮、萜类等按不同比例制成的香精，和小茴香 油、玫瑰油、玫瑰香精、柠檬油、柠檬香精、香草香精、香草醛、香蕉香精、菠 萝香精、薄荷油、橙皮油、苹果香精等。胶浆剂粘稠具缓和性，可干扰味蕾的味 觉而达到矫味目的，常用的有淀粉、阿拉伯胶、西黄耆胶、羧甲基纤维素、甲基 纤维素、海藻酸钠、果胶、琼脂等。着色剂，如人工合成的焦糖色素和二氧化钛 等。
其它还包括加入乳化剂和能够提高脂溶性物质在消化系统内重吸收的程度 和增高它们生物学利用率的脂类或脂溶性的辅助性物质，或者加入水扩散性的辅 助性物质，或者两种辅助性物质同时加入，等等。常用的脂类或脂溶性的辅助性 物质包括生育醇(维生素E，Tocopherol)、植物油、和卵磷脂(Lecithin)等。常 用的水溶性和水扩散性的辅助性物质包括卵磷脂、聚山梨酯 80(Polysorbate-80)、和油乳酸等。可以用作乳化剂的物质包括阿拉伯胶、西黄 蓍胶、白芨胶、明胶、虫胶、(海)藻酸钠、(无水)羊毛脂、琼脂、胆固醇、卵磷 脂、蜂蜡、凡士林、鲸蜡醇、硬脂醇、鲸蜡、石蜡等。
口服液中有时要加入适量的表面活性剂和消泡剂。一般常用的药用表面活性 剂和消泡剂均可以用于本发明。
(四)、服用方式
本发明中的艾可尼西亚花蜂蜜可以直接使用，使用的量根据具体产品的情况 而定。一般标准化的(Standardized)艾可尼西亚花蜂蜜(含有乔松素，并且酚醛 树脂的重量总含量不少于0.5％)，每天早晚各一次，每次一克。
艾可尼西亚口服液依生产方法(配方)而定，如采用艾可尼西亚提取物浓缩液， 蜂蜜，明胶(Gelatin)，甘油(glycerin)，卵磷脂(Lecithin)，羧甲基纤维素，和 水配制而成，标准化后(含有乔松素，并且酚醛树脂的重量总含量不少于0.5％)， 每瓶装5毫升，使用口服方法，每天早晚各一次，每次一瓶；或者说配制成酚醛 树脂的重量总含量不少于0.5％的口服液，每瓶装10毫升，每天早晚各一次，每 次一瓶。
(五)、有益效果
艾可尼西亚花蜂蜜和艾可尼西亚口服液制剂结合了艾可尼西亚汁液或提取 物浓缩液与蜂蜜两者的医疗保健功能，兼备双方的有效成份，比如本发明中的产 品含有一定量的乔松素和酚醛树脂，使其具有了艾可尼西亚汁液或提取物浓缩液 本身不能具备的医疗效果和功能，并且更适合十二岁以下儿童和老年人服用，填 补了市场空白。
附图说明
图1是艾可尼西亚HPLC谱图(UV chromatogram at 330nm)；
图2是艾可尼西亚特征指纹谱图(LCQ MS fingerprint spectrum)，即艾可 尼西亚花蜂蜜的特征指纹质谱图。
虽然艾可尼西亚用作草药已有上千年的历史，并且艾可尼西亚又有着花大 花期长的特点，但是可能由于生活习惯、风俗等原因，迄今为止未见有艾可尼西 亚花蜂蜜问世。为了更好地结合蜂蜜和艾可尼西亚两者的医药治疗作用和营养保 健作用，造福人类，我们开发了艾可尼西亚新产品。
本发明的目的就是提供全新的艾可尼西亚产品，包括艾可尼西亚花蜂蜜以及 相关的口服液制剂，特别适合十二岁以下儿童和老年人服用。
(二)、发明产品和主要指标检测方法
所述的艾可尼西亚花蜂蜜，它既包含艾可尼西亚所有的有效成份，如前文背 景技术所述，又含有蜂蜜所特有的医疗有效成份，比如含有乔松素(pinocembrin) 和酚醛树脂(phenolics)，其中酚醛树脂的含量介于总重量的0.5～3.0％，乔松 素的含量介于200～2000μg/100g花蜂蜜。
所述的艾可尼西亚口服液制剂，它既包含艾可尼西亚所有的有效成份，如前 文背景技术所述，又含有蜂蜜所特有的医疗有效成份，比如含有乔松素和酚醛树 脂，酚醛树脂的含量介于总重量的0.5～3.0％，乔松素的含量介于200～ 2000μg/100ml之间。
在汉代问世的《神农本草经》已将蜂蜜列为药中上品。此后历代医经和本草 书籍中对蜂蜜都有记载。明代医学家李时珍在《本草纲目》中论述道：“蜂蜜， 其入药之功有五：清热也，补中也，解毒也，润燥也，止痛也。”
现代科学研究和使用结果表明( http：//www.hot38.com/news/news2.htm)， 蜂蜜中含有大量的各种各样的有效成分，如多糖，高含量的还原性糖，葡萄糖氧 化酶(glucose oxidase)，溶酶菌(lysozyme)，各种萜类化合物(terpenes)，球 松素(pinostrobin)，乔松素(pinocembrin，有时又译成松属素)，白杨素 (chrysin)，多种酚醛树脂，苯甲醇，等等。蜂蜜不仅能够护肤美容和促进长寿， 还有很好的抗菌消炎、促进组织再生，促进消化，提高免疫力，改善睡眠，保护 肝脏，抗疲劳，促进儿童生长发育，保护心血管，润肺止咳，促进钙吸收等一系 列重要作用。另外，美国的科研究工作人员发现蜂蜜又是很强的抗氧化剂 ( http：//www.chinapropolis.com.cn/yy jk19.htm)。
根据医学上的分析，蜂蜜中一般都含有乔松素(pinocembrin)，其抗菌、抗 病毒，对链球菌、葡萄球菌、白喉杆菌等革兰氏阳性菌有较强的抑制作用，同时 对胃肠功能有调节作用，可使胃酸分泌正常，促进消化，又可以纾解口腔溃疡， 并加速伤口愈合；同时蜂蜜中含有和单纯的艾可尼西亚汁液或提取物浓缩液不同 种的名为酚醛树脂(phenolics)的化合物，酚醛树脂具有抗氧化的特性，所以蜂 蜜的抗氧化能力接近维生素C。
乔松素和酚醛树脂均可采用理化数据和波谱分析鉴定，比如用高压液相色谱 (HPLC)分析方法，可以进行定性和定量分析。
酚醛树脂的测定方法：在谱图上把各种酚醛树脂的吸收峰面积经过统一量化 后加在一起来计算总含量；
乔松素的测定方法：在谱图上的吸收峰要能明显的观测到，峰高最少是杂音 峰(noise)的三倍以上。例如采用反相C-18，5μm，4.6×250mm(Waters)柱，流 动相为A：30毫摩尔的NaH2PO4，B：乙腈；温度35℃，线性梯度方法为：0-28 分钟：10％B→30％B；28-70分钟，30％B→55％B；70-75分钟，55％B→10％B，乔松 素峰的保留时间(retention time)在48.48分钟，乔松素的含量达到200 μg/100g蜂蜜以上。
对于艾可尼西亚花蜂蜜来说，pH值正常范围是3.4-5.6左右，因此不需外 加酸来稳定，稳定性更高。
(三)、产品的制备方法
1艾可尼西亚花蜂蜜的制备方法：
方法一 通过养蜂获得
适合于生产艾可尼西亚蜂蜜的养蜂放牧方式有大转地、小转地、定地三种方 式。在艾可尼西亚种植面积较小的情况下，最好采取定地饲养，即将蜂群基本上 饲养在固定的蜂场，该蜂场可以处在艾可尼西亚种植区的任何地方，最好是放在 艾可尼西亚种植区的中心部分。
虽然每一品种蜜蜂都有其不同特性，但适合于生产艾可尼西亚花蜂蜜的蜜蜂 的品种包括所有的蜜蜂，即中国的蜜蜂和西方各国的蜜蜂，比如意大利蜜蜂(Apis mellifera ligustica；Italian bee)、卡尼鄂拉蜜蜂(A.m.carnica；Carniolan bee)、喀爾巴阡蜜蜂(A.m.carpathica；Carpathian bee)、高加索蜜蜂(A.m. caucasica；Caucasian bee)，还包括为提高产量而培育的各种杂交品种的蜜蜂， 比如以封闭方式培育(Closed population breeding)方法将一些优良新蜂种的基 因导入，强化蜂种亚使蜂种性位(对偶)基因增加，以減少二倍体雄蜂的产生而得 到的新蜜蜂品种等。
一般新采收的蜂蜜含水率都高于20％，长时间存放容易发酵变质，因此必须 加以浓缩脱水。浓缩脱水的方式可以使用低温真空浓缩、紅外线浓缩、冷冻除湿 浓缩、热风浓缩等数种；浓缩温度一般介于4～100℃，常用温度最好4～55℃之 间；浓缩方式最好采用低温真空浓缩方法。低温真空浓缩的特点是效率较高，处 理量也大，能够确保蜂蜜中的有效治疗成分不受到影响。浓缩后得到的蜂蜜采样 进行分析，其含水量少于20％。
蜂蜜在采收浓缩脱水杀菌后，采样分析其中的有效成分含量，以确保产品的 医药疗效。有效成分主要指乔松素，多糖，和各种酚醛树脂(phenolics)。所说 的酚醛树脂，比如菊苣酸(cichoric acid)，绿原酸(chlorogenic acid)，松果 菊苷(echinacoside)等，这是现在国际通用的分析标准。
方法二 把艾可尼西亚提取物浓缩液和一般的蜂蜜混合
采用常规方法把艾可尼西亚提取物浓缩液和一般蜂蜜混合，比例一般是 1∶1～100之间，常用的比例是1∶1～10之间。
一般的蜂蜜是指人类已知的所有蜂蜜，比如下面这些常见的枣花蜜、荆条花 蜜、槐花蜜、梨花蜜、葵花蜜、荞麦花蜜、紫云英花蜜、荔枝花蜜等等，但是本 发明是包括所有蜂蜜。
混合中采用的蜂蜜可以是浓缩脱水以前的蜂蜜，也可以是浓缩脱水以后的 蜂蜜。一般新采收的蜂蜜含水率都高于20％，长时间存放容易发酵变质，因此必 须加以浓缩脱水。浓缩脱水的方式、温度范围等如方法一中所述。
混合中有时可加入适量的表面活性剂和消泡剂。一般常用的药用表面活性剂 和消泡剂均可以用于本发明。
2艾可尼西亚口服液制剂的制备方法
方法一 把艾可尼西亚花蜂蜜和药学上可接受的载体配制，可以制成其它剂 型来使用，比如软胶囊，口服液，片剂，药丸，胶囊，包衣片，气溶胶，和其它 液体制剂。
口服液等液体制剂可以是酒溶液或者水溶液，或者是悬浮液和乳胶液等。在 选用固体制剂时，需要使用相应的赋型剂，赋型剂的选择对于本领域内熟练的技 术人员来说是很容易的。
方法二 把艾可尼西亚提取物浓缩液和药学上可接受的载体配制，也可以制 成口服液。口服液等液体制剂可以是酒溶液或者水溶液，或者是悬浮液和乳胶液 等。
在选用口服液制剂方式时，需要加入适当的矫味剂，它们可以是蜂蜜，山梨 糖，木糖，木糖醇，甘油，甘草酸二钠，甘露醇，甘露糖，半乳糖，麦芽糖，乳 糖，果糖，甜精，糖精钠，甜菊糖甙，葡萄糖，和蔗糖等。
必要的话可以加入适当的防腐剂和抗氧化剂，适合于作为防腐剂的物质包括 苯甲酸(Benzoic Acid)，山梨酸(Sorbic Acid)，乙醇(Alcohol)，对羟基苯甲 酸酯类(Parabene)，苯甲醇(Benzyl Alcohol)，和苯乙醇(Phenethanolum)等； 适合于作为抗氧化剂的物质包括亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、亚硫酸钠、干燥亚硫 酸钠、硫代硫酸钠、抗坏血酸、甲硫氨酸(蛋氨酸)、硫脲、乙二胺四醋酸二钠 (EDTA-Na2)、磷酸、枸橼酸、叔丁基对羟基茴香醚(BHA)、叔丁基对甲酚(BHT)、 去甲双氢愈创木酸(CDGA)、生育酚、棓酸酯类等。
有时在制剂中也需要加入适量的芳香剂，胶浆剂，和着色剂等。芳香剂包括 人工合成的香料有酯、醇、醛、酮、萜类等按不同比例制成的香精，和小茴香 油、玫瑰油、玫瑰香精、柠檬油、柠檬香精、香草香精、香草醛、香蕉香精、菠 萝香精、薄荷油、橙皮油、苹果香精等。胶浆剂粘稠具缓和性，可干扰味蕾的味 觉而达到矫味目的，常用的有淀粉、阿拉伯胶、西黄耆胶、羧甲基纤维素、甲基 纤维素、海藻酸钠、果胶、琼脂等。着色剂，如人工合成的焦糖色素和二氧化钛 等。
其它还包括加入乳化剂和能够提高脂溶性物质在消化系统内重吸收的程度 和增高它们生物学利用率的脂类或脂溶性的辅助性物质，或者加入水扩散性的辅 助性物质，或者两种辅助性物质同时加入，等等。常用的脂类或脂溶性的辅助性 物质包括生育醇(维生素E，Tocopherol)、植物油、和卵磷脂(Lecithin)等。常 用的水溶性和水扩散性的辅助性物质包括卵磷脂、聚山梨酯 80(Polysorbate-80)、和油乳酸等。可以用作乳化剂的物质包括阿拉伯胶、西黄 蓍胶、白芨胶、明胶、虫胶、(海)藻酸钠、(无水)羊毛脂、琼脂、胆固醇、卵磷 脂、蜂蜡、凡士林、鲸蜡醇、硬脂醇、鲸蜡、石蜡等。
口服液中有时要加入适量的表面活性剂和消泡剂。一般常用的药用表面活性 剂和消泡剂均可以用于本发明。
(四)、服用方式
本发明中的艾可尼西亚花蜂蜜可以直接使用，使用的量根据具体产品的情况 而定。一般标准化的(Standardized)艾可尼西亚花蜂蜜(含有乔松素，并且酚醛 树脂的重量总含量不少于0.5％)，每天早晚各一次，每次一克。
艾可尼西亚口服液依生产方法(配方)而定，如采用艾可尼西亚提取物浓缩液， 蜂蜜，明胶(Gelatin)，甘油(glycerin)，卵磷脂(Lecithin)，羧甲基纤维素，和 水配制而成，标准化后(含有乔松素，并且酚醛树脂的重量总含量不少于0.5％)， 每瓶装5毫升，使用口服方法，每天早晚各一次，每次一瓶；或者说配制成酚醛 树脂的重量总含量不少于0.5％的口服液，每瓶装10毫升，每天早晚各一次，每 次一瓶。
(五)、有益效果
艾可尼西亚花蜂蜜和艾可尼西亚口服液制剂结合了艾可尼西亚汁液或提取 物浓缩液与蜂蜜两者的医疗保健功能，兼备双方的有效成份，比如本发明中的产 品含有一定量的乔松素和酚醛树脂，使其具有了艾可尼西亚汁液或提取物浓缩液 本身不能具备的医疗效果和功能，并且更适合十二岁以下儿童和老年人服用，填 补了市场空白。
附图说明
图1是艾可尼西亚HPLC谱图(UV chromatogram at 330nm)；
图2是艾可尼西亚特征指纹谱图(LCQ MS fingerprint spectrum)，即艾可 尼西亚花蜂蜜的特征指纹质谱图。
具体实施方式
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明 本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法， 通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。
实施例1 谱图分析
图1中，rt＝5.2分种的是caftaric acid，rt＝8.8分种的是绿原酸 (cholorgenic acid)，rt＝11.9分种的是乔松素，rt＝12.6分种的是菊苣酸 (cichoric acid)，rt＝14.5分种的是去羟基菊苣酸(cichoric acid without one OH group)，)，rt＝14.8分种的是菊苣酸甲酯(cichoric acid methyl ester)。
HPLC分析方法采用和艾可尼西亚提取物浓缩液标准样本对比分析，常用的 HPLC分析方法的条件如下：20分钟线性梯度方法，使用反相Phenomenex Hydro-RP C18，2.0×150毫米的液相色谱柱(4μm添料颗粒，Phenomenex， Torrance，CA，USA)，流动相速度为0.3毫升/分钟，流动相A是0.1％甲酸水溶 液，流动相B是0.1％甲酸乙腈溶液。线性梯度方法为：0-10分钟：10％B→30％B； 10-15分钟，30％B→90％B；15-15.1分钟，90％B→10％B；15.1-20分钟，10％B。
分析检测手段可以是质谱(MS)和紫外可见(UV-Vis)等方法，如图1是一 HPLC谱图并使用330nm波长的紫外可见吸取检测。
分析方法也可以采用艾可尼西亚提取物浓缩液指纹特征谱图的方式，比如电 喷雾离子化(electrospray ionization，ESI)质谱法，如图2是艾可尼西亚提 取物浓缩液电喷雾离子化质谱图，使用正电离的LCQ离子井质谱仪(Ion-trap Mass Spectrometer)，50％的乙腈水溶液作流动相，流速0.2毫升/分钟，质量 扫描范围是m/z＝150到m/z＝2000之间。
实施例2 艾可尼西亚花蜂蜜的制备方法
方法一 通过养蜂收获花蜂蜜
在艾可尼西亚种植园的中心，背风朝阳，日照时间长，尤其早晨能早被阳光 照射到的地方，建立蜂箱，采用木质依10框标准蜂箱(又称郎氏蜂箱)。在两公 里的直经内，可放40～50群蜜蜂。每隔7～10天定期检查一次，检查項目包括： 蜂王是否存在、蜂王产卵及幼虫圈大小、粉蜜貯存情形、病虫害发生等，检查時 宜选择天晴温暖的上午进行。
在无花期需要人工补充糖浆喂养，以维持蜂群的发育，糖浆浓度以蔗糖为主， 为45％蔗糖，10％艾可尼西亚提取物浓缩液和45％的水(体积比)。当巢内的蜂蜜已 貯满即可进行采蜜工作，选择晴天进行。采的蜜在低温真空浓缩后进行分析，其 含水量少于20％，然后在无菌氮气保护下装瓶，每瓶50-100ml。
对得到的艾可尼西亚花蜂蜜进行分析检测，因为每箱蜂都不同，产品有一定 的差别，所以PH值介于3.4-5.6之间，其中乔松素和酚醛树脂的检测方法如前所 述，乔松素的含量为200-2000μg/100g花蜂蜜，酚醛树脂的含量为总重量的 0.5-3.0％。
方法二、一般蜂蜜和艾可尼西亚提取物浓缩液混合
在15～20℃下，10升经过低温真空浓缩后的一般蜂蜜在氮气保护下慢慢地 搅拌，并加入200毫克的药用甲基硅油(20ppm浓度)和50克的药用聚山梨酯-40， 待蜂蜜能够轻易搅拌后，把1.2升的的艾可尼西亚提取物浓缩液(购自美国 Affordable Supplements公司，4105 West Pawnee，Wichita，KS，USA)在氮气 保护下慢慢地加入，混合物在20℃下继续搅拌直到混合均匀，然后在无菌氮气 保护下装瓶，每瓶50-100ml。
对得到的艾可尼西亚花蜂蜜进行分析检测，PH值3.4-5.6之间，乔松素的 含量为200-2000μg/100g花蜂蜜，酚醛树脂的含量为总重量的0.5-3.0％。
实施例3 艾可尼西亚口服液制剂的制备方法
方法一、从艾可尼西亚花蜂蜜制备
在15～20℃下，500毫升的无菌蒸馏水在氮气保护下慢慢地搅拌，并加入 2.1克的山梨酸、20毫克的药用甲基硅油(20ppm浓度)和5.0克的药用聚山梨酯 -40，待混合均匀后，加入500毫升的艾可尼西亚花蜂蜜、2.0克的甘草酸二钠、 12克的明胶、10克的甘油、12克的卵磷脂和50克的羧甲基纤维素。在氮气保 护下，混合物在20℃下继续搅拌直到混合均匀后，然后在无菌氮气保护下装瓶， 每瓶10毫升。
对得到的艾可尼西亚口服液制剂进行分析检测，乔松素的含量为 200-2000μg/100ml，酚醛树脂的含量为总重量的0.5-3.0％。
方法二、从艾可尼西亚提取物浓缩液制成
在15～20℃下，1.0升的无菌蒸馏水在氮气保护下慢慢的搅拌，并加入2.6 克的山梨酸，20毫克的药用甲基硅油(20ppm浓度)和5.0克的药用聚山梨酯-40， 待混合均匀后，加入100毫升的蜂蜜、2.0克的甘草酸二钠、12克的明胶、10 克的甘油、12克的卵磷脂和50克的羧甲基纤维素，待该混合物溶液混合均匀后， 加入200毫升的艾可尼西亚提取物浓缩液。在氮气保护下，混合物在20℃下继 续搅拌直到混合均匀后，然后在无菌氮气保护下装瓶，每瓶10毫升。
对得到的艾可尼西亚口服液制剂进行分析检测，乔松素的含量为 200-2000μg/100ml，酚醛树脂的含量为总重量的0.5-3.0％。
实施例1 谱图分析
图1中，rt＝5.2分种的是caftaric acid，rt＝8.8分种的是绿原酸 (cholorgenic acid)，rt＝11.9分种的是乔松素，rt＝12.6分种的是菊苣酸 (cichoric acid)，rt＝14.5分种的是去羟基菊苣酸(cichoric acid without one OH group)，)，rt＝14.8分种的是菊苣酸甲酯(cichoric acid methyl ester)。
HPLC分析方法采用和艾可尼西亚提取物浓缩液标准样本对比分析，常用的 HPLC分析方法的条件如下：20分钟线性梯度方法，使用反相Phenomenex Hydro-RP C18，2.0×150毫米的液相色谱柱(4μm添料颗粒，Phenomenex， Torrance，CA，USA)，流动相速度为0.3毫升/分钟，流动相A是0.1％甲酸水溶 液，流动相B是0.1％甲酸乙腈溶液。线性梯度方法为：0-10分钟：10％B→30％B； 10-15分钟，30％B→90％B；15-15.1分钟，90％B→10％B；15.1-20分钟，10％B。
分析检测手段可以是质谱(MS)和紫外可见(UV-Vis)等方法，如图1是一 HPLC谱图并使用330nm波长的紫外可见吸取检测。
分析方法也可以采用艾可尼西亚提取物浓缩液指纹特征谱图的方式，比如电 喷雾离子化(electrospray ionization，ESI)质谱法，如图2是艾可尼西亚提 取物浓缩液电喷雾离子化质谱图，使用正电离的LCQ离子井质谱仪(Ion-trap Mass Spectrometer)，50％的乙腈水溶液作流动相，流速0.2毫升/分钟，质量 扫描范围是m/z＝150到m/z＝2000之间。
实施例2 艾可尼西亚花蜂蜜的制备方法
方法一 通过养蜂收获花蜂蜜
在艾可尼西亚种植园的中心，背风朝阳，日照时间长，尤其早晨能早被阳光 照射到的地方，建立蜂箱，采用木质依10框标准蜂箱(又称郎氏蜂箱)。在两公 里的直经内，可放40～50群蜜蜂。每隔7～10天定期检查一次，检查項目包括： 蜂王是否存在、蜂王产卵及幼虫圈大小、粉蜜貯存情形、病虫害发生等，检查時 宜选择天晴温暖的上午进行。
在无花期需要人工补充糖浆喂养，以维持蜂群的发育，糖浆浓度以蔗糖为主， 为45％蔗糖，10％艾可尼西亚提取物浓缩液和45％的水(体积比)。当巢内的蜂蜜已 貯满即可进行采蜜工作，选择晴天进行。采的蜜在低温真空浓缩后进行分析，其 含水量少于20％，然后在无菌氮气保护下装瓶，每瓶50-100ml。
对得到的艾可尼西亚花蜂蜜进行分析检测，因为每箱蜂都不同，产品有一定 的差别，所以PH值介于3.4-5.6之间，其中乔松素和酚醛树脂的检测方法如前所 述，乔松素的含量为200-2000μg/100g花蜂蜜，酚醛树脂的含量为总重量的 0.5-3.0％。
方法二、一般蜂蜜和艾可尼西亚提取物浓缩液混合
在15～20℃下，10升经过低温真空浓缩后的一般蜂蜜在氮气保护下慢慢地 搅拌，并加入200毫克的药用甲基硅油(20ppm浓度)和50克的药用聚山梨酯-40， 待蜂蜜能够轻易搅拌后，把1.2升的的艾可尼西亚提取物浓缩液(购自美国 Affordable Supplements公司，4105 West Pawnee，Wichita，KS，USA)在氮气 保护下慢慢地加入，混合物在20℃下继续搅拌直到混合均匀，然后在无菌氮气 保护下装瓶，每瓶50-100ml。
对得到的艾可尼西亚花蜂蜜进行分析检测，PH值3.4-5.6之间，乔松素的 含量为200-2000μg/100g花蜂蜜，酚醛树脂的含量为总重量的0.5-3.0％。
实施例3 艾可尼西亚口服液制剂的制备方法
方法一、从艾可尼西亚花蜂蜜制备
在15～20℃下，500毫升的无菌蒸馏水在氮气保护下慢慢地搅拌，并加入 2.1克的山梨酸、20毫克的药用甲基硅油(20ppm浓度)和5.0克的药用聚山梨酯 -40，待混合均匀后，加入500毫升的艾可尼西亚花蜂蜜、2.0克的甘草酸二钠、 12克的明胶、10克的甘油、12克的卵磷脂和50克的羧甲基纤维素。在氮气保 护下，混合物在20℃下继续搅拌直到混合均匀后，然后在无菌氮气保护下装瓶， 每瓶10毫升。
对得到的艾可尼西亚口服液制剂进行分析检测，乔松素的含量为 200-2000μg/100ml，酚醛树脂的含量为总重量的0.5-3.0％。
方法二、从艾可尼西亚提取物浓缩液制成
在15～20℃下，1.0升的无菌蒸馏水在氮气保护下慢慢的搅拌，并加入2.6 克的山梨酸，20毫克的药用甲基硅油(20ppm浓度)和5.0克的药用聚山梨酯-40， 待混合均匀后，加入100毫升的蜂蜜、2.0克的甘草酸二钠、12克的明胶、10 克的甘油、12克的卵磷脂和50克的羧甲基纤维素，待该混合物溶液混合均匀后， 加入200毫升的艾可尼西亚提取物浓缩液。在氮气保护下，混合物在20℃下继 续搅拌直到混合均匀后，然后在无菌氮气保护下装瓶，每瓶10毫升。
对得到的艾可尼西亚口服液制剂进行分析检测，乔松素的含量为 200-2000μg/100ml，酚醛树脂的含量为总重量的0.5-3.0％。
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