생봉독을 이용한 신생 자돈의 면역 증진법{Immunization therapy of piglet by honeybee venom}

본 발명은 돼지의 면역증진에 관한 것이며, 더욱 상세하게는 분만직후 신생 자돈의 면역을 증진시키기 위해서 동물성 천연 기능활성 물질인 생봉독을 이용하는 것으로, 신생 자돈의 면역증진에 부합되는 봉침혈위를 특정(特定)하고 이 부위에 살아있는 일벌의 봉침을 직자침(直刺針)하여 생봉독이 자연스럽게 주입되도록 유도함으로써, 시술이 간편하고 신생 자돈의 면역 효과를 높이며 경제적인 신생 자돈의 면역 증진법에 관한 것이다.

치료가 까다로운 돼지의 염증성 질환을 치료하기 위하여 여러 가지의 약물이개발되어 이용되고 있으나, 그 동안 약물에 대한 내성이 높아져서 치료가 잘되지 않을 뿐만 아니라 재발 또한 현저하게 증가하고 있다. 따라서, 돼지질병의 치료에 많은 시간과 치료비, 노력이 소요되고 경영비중 방역과 치료비의 비중이 점차 커지고 있다. 게다가, 이러한 약물의 투여는 돈육의 질을 저하시키고, 궁극적으로는 돈육을 섭취하는 인간의 건강을 심각하게 위협하게 된다.

일반적으로, 질병의 예방법에는 세균과 바이러스, 곰팡이, 기생충 등의 병원체를 제거하거나 이들 병원체가 감염대상 동물로 접근하는 것을 막기 위한 방역이 있으며, 방역에도 불구하고 돼지가 질병으로부터 감염시 이를 막아주는 예방대책으로 백신접종에 의한 항체 형성이 있다. 백신접종은 병원체를 약화시키거나 죽여서 동물에 접종하여 질병에 대한 방어능력인 면역력을 획득하게 하는 것이다.

질병의 치료법으로는 주사기와 주사약을 이용하는 약물요법이 일반적이며, 최근에는 사람의 침구혈위(鍼灸穴位)에 약물을 주입하는 약침요법이 개발된바 있다. 약물 요법이나 약침요법은 질병을 치료함에 있어서 인공의 합성약물을 투여하는 것이다.

예를 들면, 기존의 양돈 농가에서는 분만직 후 신생 자돈의 면역증진을 위한 특별한 방법은 없고 모돈의 초유(初乳)에 많이 의존하여 왔다. 분만직후 신생 자돈이 모체로 부터 독립하여 스스로 면역물질을 생산하기 전에는 초유로 부터 면역물질을 전달받아야 하며, 스스로 섭취한 초유를 소화시킬 수 있는 소화능력을 촉진시키는 것이 중요하다. 그런데, 신생 자돈의 경우에는 통상적으로 단미와 절치, 거세를 실시함에 따라 심한 상처와 스트레스를 받게되고 소화능력이 저하된다. 따라서,이러한 외상의 회복과 이에 따른 스트레스의 회복을 돕기 위해서 종래에는 항생물질을 투여하였다. 그 결과, 앞에서 언급한 바와 같이 약물에 대한 내성이 증가하여 상처와 스트레스의 회복이 더디고, 돈육의 질이 저하되며, 약물 투입에 소요되는 치료비용이 많은 것이 결점이었다.

본 발명은 상기와 같은 종래의 문제점을 해결하기 위해 안출된 것으로, 본 발명의 목적은 합성약물이 아닌 동물성 천연 기능활성 물질인 생봉독을 이용하여 신생 자돈의 면역증진에 부합되는 돼지의 봉침혈위에 살아있는 일벌의 봉침을 직자침하여 생봉독이 자연스럽게 주입되도록 유도함으로써, 시술이 간편하고 면역효과가 높으며 경제성이 있는 신생 자돈의 면역 증진법을 제공하는데 있다.

도 1은 본 발명의 바람직한 실시 예에 따른 신생 자돈의 면역을 증진하기 위한 생봉독 봉침혈위를 나타낸 도면이다.

〈도면의 주요부분에 대한 부호의 설명〉

10 : 해문혈(海門穴) 12 : 교소혈(交巢穴)

14 : 두구혈(??口穴)

상기한 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은,

생봉이 수용된 시술용 이동 봉상을 준비하는 단계(S1);

상기 시술용 이동봉상으로부터 생봉을 핀셋으로 한 마리씩 포획하는 단계(S2); 그리고

포획된 생봉독을 신생 자돈의 면역 증진에 부합하는 봉침혈위인 해문혈(海門穴), 교소혈(交巢穴) 및 두구혈(??口穴)에 주입하는 단계(S3)를 포함하는 것을 특징으로 하는 생봉독을 이용한 신생 자돈의 면역 증진법을 제공한다.

바람직하게는, 상기 생봉은 이탈리안 종 꿀벌로서 출방후 15일령 이상의 성숙된 일벌이 이용된다.

이하, 본 발명에 따른 생봉독을 이용한 신생 자돈의 면역증진법에 대하여 상세히 설명하면 다음과 같다.

본 발명에서는 분만직후 자돈의 면역증진을 위해서 동물성 천연 기능활성 물질인 생봉독을 이용한다. 즉, 신생 자돈의 면역증진에 부합되는 돼지의 봉침혈위에 살아있는 일벌의 봉침을 직자침하여 생봉독이 자연스럽게 주입되도록 유도함으로써, 출생직후 단미와 절치, 거세시 입는 창상 치유와 이에 대한 자돈의 스트레스를 빨리 회복시키고 자돈의 면역을 증진시키고자 한다.

표 1. 봉독의 성분별 함량

상기 표 1 에는 본 발명에서 이용되는 생봉독의 조성과 함량이 나타나 있다.

즉, 펩타이드 성분이 11종, 효소제 성분이 5종, 생리적 활성아민 성분이 3종, 비펩타이드 합성물질이 4종으로, 현재까지 23종의 성분이 분석되었다. 이와 같이 생봉독에는 다양한 물질이 복합적으로 섞여 있으며, 건조 봉독 성분 중에서 가장 많이 함유된 성분은 메리틴(melittin)으로 40∼50%를 차지하고 있다.

상기 표 1 의 성분을 갖는 봉독이 포유동물의 체내에 주입되면, 각각의 성분이 종합적으로 작용하면서 포유동물의 면역계를 자극하고, 항염증 작용, 세포의 용해(용혈작용), 신경독 효과, 항세균 및 항진균 작용, 방사선으로부터의 보호작용, 항알킬화 작용 등의 약리 기능이 복합적으로 작용하는 것으로 밝혀진 바 있다.

표2. 봉독의 주요 성분별 생체내 작용

지금까지 밝혀진 생봉독내 각 성분조성과 포유동물 생체내에서의 작용은 상기 표 2 에 나타낸 바와 같다(Christopher MH. Kim, 1992).

이상에서 언급한 바와 같이 포유동물의 생체내 생봉독의 약리적 치료효과와 면역 기능이 어떤 다른 약물보다 뛰어나기 때문에, 본 발명에서는 생봉독을 주입하여 자돈의 면역기능을 증진시키고자 한다. 또한, 질병 발생 이전에 면역원성을 높여서 질환의 예방법을 마련하고자 한다.

한편, 생봉독의 주입량은 추출한 건조 생봉독의 경우에는 정확한 주입량을 결정할 수 있으나, 살아있는 벌에 의해서 직접 동물의 체조직내로 주입되는 생봉독의 주입량을 정확하게 측정하기는 어렵다. 그러므로, 본 발명에서는 15일령 이상의 일벌 1마리의 평균 생봉독 량이 0.03㎎인 것을 근거로 시술 마리수를 기초하여 생봉독의 투입량을 결정한다.

크리스토퍼 엠-에이치 킴(Christopher MH. Kim, 1992)에 의하면 사람의 경우 체중 70㎏의 환자에 대한 생봉독 주입 마리수는 1일 최대 20마리로 한정하고 있는데, 1일에 총 0.6㎎ 정도의 생봉독 액을 주입할 수 있다고 한다. 동물은 사람보다도 수명이 짧고 그 동안 살면서 여러 종류의 약물에 대한 내성이 낮은 상태이기 때문에 사람보다도 적은 량의 생봉독이 주입되어도 치료 및 예방 효과가 높은 것으로 판단되었다.

생봉독의 시술을 위해서는 먼저 생봉독 요법용 꿀벌의 선정 및 포획이 필요하다. 꿀벌의 품종은 세계적으로 여러 종류가 있는데 우리 나라에서 사육하고 있는 꿀벌의 품종은 동양종(재래종)과 이탈리안 종이며, 그 가운데 이탈리안 종이 대부분을 차지한다. 재래종 꿀벌은 시술용으로 사용이 가능하나, 사육환경 조건이 이탈리안 종보다 까다롭고 환경적응 능력이 약해서 대중성이 저하된다. 이에 비해서, 이탈리안 종 꿀벌은 대중성이 높고, 사양관리가 쉬우며, 번식능력이 좋아서 강군(强群)을 유지하여 농가에서 시술용으로 충분히 이용할 수 있다. 또한, 국내 환경에 적응성이 뛰어나고 사육장소를 옮겨도 적응을 잘하며, 분봉성(分蜂性)이 약하여 관리하기에 안전하다. 게다가, 성질이 재래종 보다 순하고, 월동능력이 높다. 따라서, 본 발명에서는 이탈리안 종 꿀벌을 사용하여 생봉독 요법을 수행한다.

이탈리안 종 꿀벌에는 여왕벌, 수펄, 일벌의 3종류가 있는데 여왕벌은 독낭과 봉침은 있으나 봉상 1군에 한 마리만 있으므로 이용할 수 없고, 수펄은 독낭과 봉침이 없어서 이용할 수 없다. 일벌은 봄부터 가을까지 지속적으로 번식되어 양봉 1군당(단상 10매군) 일벌의 숫자가 약20,000마리를 유지하고 있고, 독낭과 봉침이 있으며 쉽게 포획할 수 있어 생봉독 주입용으로는 일벌만을 사용한다.

일벌 중에서도 독낭의 생봉독 저장량에는 차이가 있어서 시술용으로 이용할 일벌을 선택할 때에는 외형적으로 구분하여 이용한다. 생봉독 주입용 꿀벌은 일벌중에서도 출방후 15일령 이상의 성숙된 일벌만을 포획하여 이용하는 것이 바람직하다. 왜냐하면, 출방후 15일령 이상의 성숙된 일벌은 봉침이 강하면서 생봉독이 잘 주입되고, 생봉독 량도 많이 주입되기 때문이다. 15일령 이상의 일벌에서는 약 0.02∼0.04mg(평균 0.03mg)의 생봉독이 독낭에 저장되어 있다가, 자극을 받으면 신경작용에 의하여 독낭이 수축되면서 봉침을 통하여 봉독이 분비된다. 17일령 이후에는 봉독의 생산능력이 거의 정지되고 독낭의 무게도 변화되지 않는다.

시술용 일벌중에서 노봉(老蜂)의 외형적 특징은 비교적 체구가 크면서 머리,흉부 및 복부에 체모가 없고 광택이 있다. 전체적인 체색은 진한 흑갈색을 띄며, 성질은 외부의 자극에 민감하여 공격력이 강한 편이다. 노봉일 수록 봉침이 강하여 조직침투와 생봉독 주입이 잘된다.

생봉독의 시술을 위해서는 먼저 15일령 이상의 일벌을 포획하여야 하는데, 일벌의 수명은 일정하지 않고 계절과 노동량에 따라 차이가 있다. 봄과 가을의 대유밀기에는 일벌들의 활동이 극에 달하므로 수명이 1∼2개월 정도이고, 혹서기인 7∼8월에는 체온조절을 위한 대사촉진으로 1개월 정도의 수명인데 비하여 노동을 거의 하지 않는 겨울철의 일벌은 체력소모가 적기 때문에 약4∼6개월간 생존이 가능하다.

시술용 생봉을 포획할 때는 전용 핀셋과 휴대가 편리한 시술용 이동 봉상이 필요한데, 핀셋은 끝이 뽀족하고 첨단부위가 약간 넙적하면서 강한 것을 이용한다. 또한, 시술용 이동 봉상은 가로 11㎝, 높이 5㎝, 세로 6cm 정도의 작고 투명한 플라스틱 상자로서, 바닥을 제외한 다른 부위는 모두 공기가 잘 통하도록 공기창이 있는 것을 이용한다. 이동 봉상은 이탈리안 종 꿀벌을 약 250마리 이상 수용할 수 있으며, 바닥은 식량을 넣을 수 있는 칸막이가 있다. 이 칸막이에 기포 고당을 넣어주면 일벌들은 이것을 식량으로 이용하기 때문에, 이동 봉상에 식량이 떨어지지 않으면 일벌은 약 10∼20일간 생존이 가능하다. 이동 봉상 내에는 물을 공급하지 않아도 벌의 생존이 가능하다.

시술용 생봉을 포획하는 요령은 계절별로 차이가 있다.

첫째, 일벌이 밖에서 활동을 하지 않는 계절, 즉 늦가을부터 이른 봄철까지는 가급적 봉군내에 봉구(蜂球)의 정태(靜態) 상태가 동태(動態)로 바뀌지 않게 자극하지 않는 상태하에 주의하여 일벌을 봉침 전용 핀셋으로 포획한다. 보다 상세하게 설명하면, 이동 봉상의 뚜껑 일부를 조용히 개봉하고 생봉 포획시 다리 부분을 핀셋으로 집어서 시술용 이동 봉상에 넣는다.

둘째, 일벌의 소문활동시기, 즉 늦봄부터 가을까지의 이른 아침 또는 일몰직전에 소문 앞에 활동하는 벌이 많지 않을 때에는, 이동 봉상 전면을 중심으로 좌측 또는 우측으로 조용히 비켜서 접근한 다음, 미리 준비된 핀셋으로 벌의 다리를 잡고서 시술용 이동 봉상내로 주의하면서 넣는다. 다음으로, 이동 봉상 소문을 통한 일벌의 출입이 왕성할 때(벌의 활동시기, 4월∼11월)에는, 시술용 이동 봉상내에 기포 고당을 먹이용으로 넣어 주고 시술용 이동 봉상의 고무밴드를 잠시 제거한 후 시술용 이동 봉상의 문을 1/2∼3/4정도 열고서 느린 동작으로 열려진 봉군의 소문에 수직으로 세워 놓는다. 이러한 상태로 10∼20분 정도 경과되면 약 50∼300마리 정도의 일벌이 스스로 별다른 충격없이 시술용 이동 봉상내로 진입한다.

위에서 언급한 바와 같이, 일벌의 포획 시에는 항상 다리를 핀셋으로 잡아야 한다. 일벌은 신체에 손상이 없어야 장기간 생존할 수 있다(20일 이상 생존 가능). 만약, 핀셋으로 복부와 두부, 흉부를 포획할 경우에는 체조직의 일부가 상처를 입게 되므로 단시간 내에 일벌이 치사되어 일벌을 이용한 생봉독 시술이 어렵다.

시술용 이동 봉상내로 포획한 일벌을 장시간 생존시키기 위해서는 식량이 필요한데, 적합한 식량으로는 기포 고당을 시술용 이동 봉상에 넣어주면 일벌은 이것을 식량 대용으로 빨아먹게 되어 생존력이 연장되므로 생봉독 시술을 편리하게 한다. 이때, 액상 고당 또는 완전 고당이 액상화되면 벌의 몸체부에 묻어 벌의 흉부 및 복부의 기공이 막혀서 벌의 수명이 단축되고 활동하지 못하여 치사하게 되므로 주의하여야 한다.

한편, 일벌은 5℃이하의 기온에 노출되면 저온충격으로 생존력이 저하되므로, 이동 봉상은 항상 5℃이상으로 보온을 하여야 한다. 특히, 겨울철 영하의 기온에서 생봉독 주입 시술을 할 경우에는 보온이 꼭 필요하다. 무더운 여름철에 시술용 이동 봉상에 포획된 일벌은 직사광선을 피하고 시원한 곳에서 보관하여야 장기간 생존할 수 있다. 특히, 여름철 뜨거운 직사광선이나 자동차 실내에 넣어 두면 치사가 빠르다. 또한, 벌은 살충제에 매우 약하므로 모기 약 또는 모기향 등의 살충제를 사용할 때에는 항상 격리시킨 다음 처리하여야 한다.

항상 시술용 이동 봉상은 공기가 통할 수 있는 어두운 보호망 또는 비닐 등으로 피복하지 않은 종이 봉투 등에 넣어서 이용하지 않을 때 벌의 활동을 억제시키어 수명을 연장하도록 한다.

본 발명은 분만직후 자돈의 면역 증진을 위해서 중수의학(中獸醫學)(황정일 등, 1992)과 돼지 침구치료(이종창, 1979) 문헌에 게재된 바 있는 돼지의 체부 경혈도를 기초로 하여 면역증진을 위한 생봉독을 주입하는 봉침혈위를 선정하였다.

〈실시 예〉

도 1은 본 발명의 바람직한 실시 예에 따른 신생 자돈의 면역증진을 위한 봉침혈도를 나타낸 도면이다. 본 발명의 바람직한 실시 예에 따르면, 출산직후 자돈에 미리 준비한 생봉으로 도 1에 나타낸 바와 같은 면역을 증진하기 위한 봉침혈도를 기준으로 생봉독 요법을 시술한다.

하기에서는 도 1을 참조하여 신생 자돈의 면역증진을 위한 생봉독 주입법에 대하여 설명한다.

신생 자돈의 면역을 증진하기 위해 면역 증진에 부합되는 돼지의 봉침혈위에 생봉독을 주입한다. 이를 위해서, 먼저 생봉을 수용하고 있는 시술용 이동 봉상을 준비하고, 준비된 이동 봉상으로부터 핀셋으로 생봉을 한 마리씩 포획한다. 즉, 벌이 들어있는 시술용 이동 봉상의 문을 조금 열고서 핀셋으로 벌을 포획하는데, 이때는 벌의 체부(흉부 또는 복부)를 집어서 꺼낸다. 이렇게 생봉을 포획한 후에는 본 발명의 바람직한 실시 예에 따른 신생 자돈의 면역을 증진하기 위한 시술 경혈도(=도 1)에 따라 생봉독 요법을 시술한다.

생봉독의 주입단계에서는 생봉독을 신생 자돈의 면역증진과 관련된 봉침혈위인 해문혈(海門穴)(10), 교소혈(交巢穴)(12) 및 두구혈(??口穴)(14)에 주입한다. 이때, 해문혈(10)은 돼지의 배꼽을 중심으로 좌우 양쪽 1∼2cm 떨어진 지점이고 두구혈(14)은 돼지의 배꼽 중앙부위이다. 해문혈(10)과 두구혈(14)은 돼지의 소화기 계를 관장하는 혈이다. 교소혈(12)은 항문 위쪽 미본(尾本)의 아래에 움푹 들어간 곳이고, 돼지의 생식기계와 소화기계 등을 관장하는 혈이다.

생봉독의 주입횟수는 해문혈(10)에 좌우 1마리씩 2마리의 생봉을 시술하며, 교소혈(12)과 두구혈(14)에는 생봉 1마리를 각각 시술한다. 이때, 생봉독의 빠른 확산을 위해 해당 봉침혈위를 중심으로 주입하는 것을 원칙으로 한다. 교소혈(12)의 생봉독 시술은 자돈이 출생직후 자연노출에 대한 저항성을 높이어 외부의 여러요인에 의해 발생하는 병원성 미생물에 대한 저항성을 또한 높이기 위한 것이다. 이에 의해, 자돈 설사증 등의 질환에 내병성이 커지고, 소화기능이 촉진되어 자돈의 성장 속도와 사료 효율이 향상된다. 두구혈(12)에는 출생직후 자돈의 제대를 절단한 뒤 생봉독 요법을 시술하여 병원성 미생물 침입을 방지하기 위한 것으로, 이 시술로 제대 절단부의 창상 치유를 촉진시켜 제대염을 예방한다.

한편, 생봉독의 시술법에는 생봉 직접 주입법과 복부 절단 주입법중 한 가지를 선택하거나 병행한다.

생봉 직접 주입법은 시술용 이동 봉상에서 핀셋으로 직접 꺼낸 생봉을 치료대상 질환의 환부에 직자침하는 시술로서, 직자침한 벌의 봉침은 돼지의 체부에 붙어있는 상태에서 벌의 몸체만을 제거한다. 봉침을 체조직에 박혀있는 상태로 두면 봉침과 생봉독 낭에 붙어있는 신경작용으로 생봉독이 계속 조직속으로 분비된다. 조직에 박혀있는 봉침은 인위적으로 제거하지 않아도 일정시간 지나면 저절로 빠져 나오게 된다.

다음으로, 복부 절단 주입법은 이동 봉상에서 꺼낸 생봉을 여분의 핀셋 또는 다른 손의 엄지와 검지로 벌의 흉부 등뒤(날개)쪽을 잡고서 핀셋으로 시술하기에 편리하도록 생봉의 두부와 흉부를 제거하고 봉침이 있는 복부만을 시술직전에 분리시킨 다음, 환부에 직자침하는 것으로 복부의 수축작용에 의하여 봉침이 조직으로 침투되면 복부는 분리되고 봉침만이 체조직 내에 남아서 생봉독을 체조직으로 투입시키는 것이다.

이상과 같은 생봉독 요법후에도 신생 자돈의 면역이 증진되지 않으면 같은방법으로 생봉독 요법을 반복하여 시술한다. 그러면, 신생 자돈의 면역이 효과적으로 증진된다.

결과 및 고찰

(1) 연구 배경

봉독의 약리작용은 포유동물의 면역계를 자극하고 항염증작용과 세포의 용해, 신경독 효과, 항세균과 항진균 작용, 방사선으로부터 보호작용, 항알킬화 작용 등의 약리적 효과가 있는 것으로 밝혀지고 있다.

면역계에 대한 시험은 국제적으로 생봉독 주입에 의한 가축의 질병에 대한 직접적인 치료법은 아직 찾아볼 수 없으나 Cristopher MH(1992)는 사람의 여러가지 질병 치료법의 개발을 위한 예비실험으로 소형 실험동물을 이용한 실험의 예는 있어 봉독의 다양한 작용기전을 밝혀내고 있다

봉독내의 성분과 봉독이 체내에서의 작용기전과 각종 사람질병의 치료방법을 개발하여 높은 치료효과를 보여 실제 봉독 및 봉침요법을 응용하고 있다.

소련의 Artemov(1959) 교수는 봉독은 포유동물의 면역계를 자극하여 질병과 성공적으로 싸울 수 있게 하는데, 봉독이 면역계에 작용하는 주된 면역작용은 유기체의 생체계를 자극하는 것이고 다음은 생체의 방어력을 증가시키는 것이라고 하였다.

미국의 Belleveau 교수팀은 봉독은 동물의 암세포 치료에 적용한 결과 봉독자체는 암세포나 정상세포에 직접적인 작용은 없었으나 간접적으로 면역체계를 자극시켜서 그 효과가 있다는 것을 증명한 바가 있다.

면양에 봉독을 주입한 결과 적혈구로 면역된 동물 비장에서 많은 면역반점 형성 세포를 발견했고, spleen cell의 T-cell 주사분열 물질에 대한 반응에 중대한 영향을 주었는데 이것은 봉독이 어떤 T-cell과 세포군에 영향을 주는 것으로 시사하고 있다. 또한 생쥐에 대한 봉독의 면역효과에서 봉독은 T-cell과 B-lymphocytes의 기능에 유효함을 나타내고 있으며, 다른 작용은 항원경쟁을 거치는 것으로 생각되는 면역반응으로서 봉독은 면역체계를 억압하는 특성을 지니고 있는데 이와 같은 현상은 봉독내의 여러가지 성분중에 메리틴(melittin), 아파민(apamin), 비만세포 탈과립 펩타이드, 단백효소 억제제 등 분자량이 12,000-15,000 미만의 성분에서 나타난다고 하였다.

봉독의 고분자량의 성분인 포스포리파제(phospholipase) A ₂ 는 세포막의 투과성을 증가시키고 히알우론산 효소는 면역성 적응세포에 항원수송을 촉진하는 작용이 있다고 하였다.

가축 질병에 대한 예비실험 결과에서 국내에서는 생봉독 주입에 의한 가축의 질병치료에 대한 보고는 없으며 본 연구팀이 양돈장에서 자돈의 세균성 설사증, 분만 모돈의 무유증과 유방염 등에 실험한 결과 치료효과가 높고 생봉독을 처치한 자돈에서는 내병성 효과가 있는 것으로 판단되어 생봉독 투여에 따른 자돈의 면역성과 내병성 증강에 미치는 영향을 체액성 면역물질을 분석하였다.

(2) 재료 및 방법

공시동물 : 충청북도 청주시 소재 양돈장에서 분만한 지 1일령이 된 신생 자돈을 공시동물로 하였다. 공시동물은 2-5산차의 모돈 3마리가 분만한 동복의 자돈 32마리를 암수구분 없이 무작위로 동복의 자돈을 1/2씩 나누어 실험군에 16마리, 대조군에는 16마리를 분류하여 3주간 동일한 사육 환경에서 모돈과 같이 사육하였다.

봉독시술 및 채혈 : 대조군에는 교소혈(交巢穴; 항문 위쪽, 尾本 아래에 움푹 들어간 곳)과 두구혈(??口穴; 배꼽 중앙부의 혈)에 1 ml 주사기로 생리 식염수를 0.2 ml을 투여하였고, 생봉독 투여군은 ??口穴에 이탈리안 생봉 1마리를 직자침하였고, 교소혈에도 생봉 1마리를 직자침하였는데 2일후 다시 동일부위에 재시술하였다. 이때 사용한 생봉은 봉독이 약 0.3mg이 함유된 15일령된 이탈리안 꿀벌( Apis mellifera )을 사용하였다.

대조군과 실험군의 신생 자돈은 생리식염수와 이탈리안 생봉을 처치하기 전과 처치 3일후, 1주후, 2주후 및 3주후에 채혈하였다. 채혈은 신생 자돈을 보조자가 앙와자세로 사지를 보정한 후 경정맥에서 Vacutainer ^?? (Becton Dickinson Vacutainer Systems, USA)로 3ml을 채혈한 후 혈액을 gel & clot activator(Becton Dickinson Systems, USA)로 혈청을 자동 분리하였다.

면역물질 분석 : 경정맥에서 채혈한 혈액을 자연응고시킨 후 분리한 혈청은 냉장고에 보관하였다가 3일이내에 immunoturbidimetric method로 Cobas Integra(Roche, Switzerland)를 이용하여 immunogloburin(Ig) G와 IgA, IgM을 측정하였다.

체중 및 증체량 측정 : 대조군과 실험군은 약물투여하기 전과 약물투여 3일후와 1주후, 2주후, 3주후에 각 개체별로 디지탈 저울로 체중과 증체량을 측정하였다.

생봉독 투여한 신생 자돈의 임상소견 : 생봉독을 시술한 신생 자돈의 임상소견은 시술부위의 혈액순환이 왕성해지면서 창백하던 몸의 피부색이 연한 복숭아색으로 변화되면서 활동성이 다소 높아졌다. 자돈의 생봉독 요법은 고혈압 또는 심장 질환을 앓고 있는 사람에게 간혹 볼 수 있는 allergy 반응이나 shock 반응 등의 부작용은 거의 관찰되지 않았다.

그림 1. 생봉독 요법후 신생 자돈에서 Ig G의 변화

(4) 생봉독 요법에 의한 면역증강

그림 1 에서 보는 바와 같이 Ig G는 생봉독 투여후 3주동안 생리 식염수를 교소혈과 두구혈에 투여한 대조군보다 통계적인 유의차를 보였다(p<0.01). 하기 그림 2 에서 보는 바와 같이 Ig M은 생봉독 투여 1주후에는 약간 낮은 경향을 보였으나 통계적인 유의차는 인정되지 않았고, 투여후 2주에는 대조군보다 더 높은 수치를 보였고 3주후에는 대조군보다 유의성있는 결과를 보였다(p<0.01). 하기 Ig A도 그림 3 에서 보는 바와 같이 생봉독 투여후 1주부터는 더 높은 경향을 보였다. 이러한 결과는 Artemov(1955)가 봉독의 성분중에 포유동물의 면역계를 자극하여 질환을 방어할 수 있는 보고와 일치하는 결과이었으며 이러한 면역물질의 변화는 신생 자돈의 체중과 증체량에도 직접적인 영향을 주었다.

그림 2. 생봉독 요법후 신생 자돈에서 Ig M의 변화

그림 3. 생봉독 요법후 신생 자돈에서 Ig A의 변화

전술한 바와 같은 본 발명에 따른 신생 자돈의 면역 증진은 출생직후 자돈의 면역을 증진시키는데 부합하는 봉침혈위에 살아있는 일벌의 봉침을 직자침하여 생봉독이 자연스럽게 주입되도록 유도한다. 생봉독 요법을 시술하면 신생 자돈의 체액성 면역물질이 증진되어 질병에 대한 저항성이 높아져서 질병의 발생이 억제된다.

상기에서는 본 발명의 바람직한 실시 예를 참조하여 설명하였지만, 해당기술 분야의 숙련된 당업자는 하기의 특허 청구 범위에 기재된 본 발명의 사상 및 영역으로부터 벗어나지 않는 범위 내에서 본 발명을 다양하게 수정 및 변경시킬 수 있음을 이해할 수 있을 것이다.