一种天然植物杀虫剂及其制备方法和应用
阅读：772发布：2020-06-26
专利汇可以提供一种天然植物杀虫剂及其制备方法和应用专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 公开了一种天然 植物 杀虫剂 及其制备方法，属植物 农药 领域，其中杀虫剂按制剂的体积计含有1mg/mL～10mg/mL的活性物质广藿香 酮 或2.5mg/mL～40mg/mL的广藿 香精油 。制备方法中广藿香酮乳剂是将广藿香酮按配比直接均匀分散在5％司盘－20溶液中；广藿香精油乳剂是将广藿香精油按配比直接均匀分散在6％吐温－80溶液中。本发明具有资源丰富、成本低、对 有害 生物 高活性、对非靶标生物安全、低残留、易降解的优点，用于 农作物 病虫害防治 。，下面是一种天然植物杀虫剂及其制备方法和应用专利的具体信息内容。
1.一种天然植物杀虫剂，其特征是按制剂的体积计含有1mg/mL～10mg/mL的活性物质广藿香酮。
2.根据权利要求1所述的一种天然植物杀虫剂，其特征是所述的制剂为乳剂。
3.根据权利要求1所述的一种天然植物杀虫剂，其特征是活性物质广藿香酮用广藿香精油代替，广藿香精油的含量为2.5mg/mL～40mg/mL。
4.根据权利要求3所述的一种天然植物杀虫剂，其特征是所述的制剂为乳液剂。
5.根据权利要求2所述一种天然植物杀虫剂的制备方法，其特征是将广藿香酮按配比直接均匀分散在5％司盘-20溶液中。
6.根据权利要求4所述一种天然植物杀虫剂的制备方法，其特征是将广藿香精油按配比直接均匀分散在6％吐温-80溶液中。
7.根据权利要求1至4所述的一种天然植物杀虫剂在农业、种植业、仓储上的应用。
一种天然植物杀虫剂及其制备方法和应用
技术领域
背景技术
农药是保证农业丰收、改善人类食品供应，提高人类生活水平的必不可少的重要物资。为此，世界上许多国家投入相当的人力、物力致力于新农药的开发，特别是发达国家中的一些世界性的大化工企业，更是不惜一切进行新农药的研制。当今，开发一个新的化学农药往往需要7至8千万美元，历时10年左右，筛选上万个化合物始能获得一个具有商业价值的新农药。然而，随着化学农药的大量使用，给人类带来了种种弊端，诸如有害生物抗药性的产生，残留毒性以及环境污染等问题。目前，许多高毒性、高残留、持久性农药已被禁止使用。人们对农药的认识和期望也发生了深刻的变化。人们把对新农药开发的目标转向对有害生物高活性、对非靶标生物安全、低残留、易降解的农药。因此，从天然物质中开发新农药是一个极为重要的途径和突破口。
在天然物质中，植物是生物活性化合物的天然宝库。目前已发现具有农药活性的就达5000余种，其产生的次生代谢物超过400000种，其中的大多数化合物如萜稀类、生物碱、类黄酮、甾体、酚类、独特的氨基酸和多糖类等均具有杀虫或抗菌活性，这种天然活性物质有的直接可以农药，有的可作为先导化合物通过结构改造制得具有农药活性的化合物，因此开发利用植物资源用于有害生物防治的前景十分广阔。我国古代医药学家在长期的实践中积累了丰富的中医药临床知识，为研究中药农药的筛选工作提供了很强的针对性。以此为突破口研究中药农药活性成分、寻找农药活性母体、创新新农药具有很强的现实意义。
在天然物质中，植物是生物活性化合物的天然宝库。目前已发现具有农药活性的就达5000余种，其产生的次生代谢物超过400000种，其中的大多数化合物如萜稀类、生物碱、类黄酮、甾体、酚类、独特的氨基酸和多糖类等均具有杀虫或抗菌活性，这种天然活性物质有的直接可以农药，有的可作为先导化合物通过结构改造制得具有农药活性的化合物，因此开发利用植物资源用于有害生物防治的前景十分广阔。我国古代医药学家在长期的实践中积累了丰富的中医药临床知识，为研究中药农药的筛选工作提供了很强的针对性。以此为突破口研究中药农药活性成分、寻找农药活性母体、创新新农药具有很强的现实意义。
发明内容
本发明的其中一个目的在于提供一种资源丰富、成本低、对有害生物高活性、对非靶标生物安全、低残留、易降解的一种天然植物杀虫剂。
本发明的另一目的在于提供一种述植物杀虫灭菌剂的制备方法。
本发明的前一目的是这样实现的：一种天然植物杀虫剂，其中按制剂的体积计含有1mg/mL～10mg/mL的活性物质广藿香酮。
上述的一种天然植物杀虫剂中所述的制剂以乳剂为佳，这样制造剂型稳定、方便易用。
上述的一种天然植物杀虫剂中所述活性物质广藿香酮用广藿香精油代替，广藿香精油的含量为2.5mg/mL～40mg/mL；所述的制剂以乳剂为佳，可以保证广藿香精油分散均匀、稳定，方便使用。
上述的一种天然植物杀虫剂在农业、种植业、仓储上具有广泛的应用价值。
本发明的后一目的是这样实现的：一种天然植物杀虫剂的制备方法，其中水剂是将广藿香酮按配比直接均匀分散在5％司盘-20溶液中。乳液剂是将广藿香精油按配比直接均匀分散在6％吐温-80溶液中。
本发明与现有技术相比，具有下述优点：(1)广藿香作为一种重要的植物中药，有着悠久的用药历史，使用安全。
(2)广藿香在广东省的广州、肇庆、湛江等地分布广、贮量大，毗邻的海南、广西也有较大的资源，这为该植物的开发应用提供了丰富的原材料。
(3)室内试验证实广藿香酮和广藿香精油具有防治檀香粉蝶和荔枝卷叶蛾侵袭作用，对菜粉蝶和小菜蛾幼虫具有较好的拒食和毒杀作用，对斜纹夜蛾有较强的拒食作用，对多种植物病原真菌均有不同程度的抑制作用。
(4)广藿香酮和广藿香精油的提取方法简易，工艺成熟。
本发明的另一目的在于提供一种述植物杀虫灭菌剂的制备方法。
本发明的前一目的是这样实现的：一种天然植物杀虫剂，其中按制剂的体积计含有1mg/mL～10mg/mL的活性物质广藿香酮。
上述的一种天然植物杀虫剂中所述的制剂以乳剂为佳，这样制造剂型稳定、方便易用。
上述的一种天然植物杀虫剂中所述活性物质广藿香酮用广藿香精油代替，广藿香精油的含量为2.5mg/mL～40mg/mL；所述的制剂以乳剂为佳，可以保证广藿香精油分散均匀、稳定，方便使用。
上述的一种天然植物杀虫剂在农业、种植业、仓储上具有广泛的应用价值。
本发明的后一目的是这样实现的：一种天然植物杀虫剂的制备方法，其中水剂是将广藿香酮按配比直接均匀分散在5％司盘-20溶液中。乳液剂是将广藿香精油按配比直接均匀分散在6％吐温-80溶液中。
本发明与现有技术相比，具有下述优点：(1)广藿香作为一种重要的植物中药，有着悠久的用药历史，使用安全。
(2)广藿香在广东省的广州、肇庆、湛江等地分布广、贮量大，毗邻的海南、广西也有较大的资源，这为该植物的开发应用提供了丰富的原材料。
(3)室内试验证实广藿香酮和广藿香精油具有防治檀香粉蝶和荔枝卷叶蛾侵袭作用，对菜粉蝶和小菜蛾幼虫具有较好的拒食和毒杀作用，对斜纹夜蛾有较强的拒食作用，对多种植物病原真菌均有不同程度的抑制作用。
(4)广藿香酮和广藿香精油的提取方法简易，工艺成熟。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步地详细说明，但不构成对本发明的任何限制。本发明的广藿香酮是从广藿香精油分离得到，而广藿香精油又是按传统的中药挥发油提取方法从植物广藿香的根、根茎，茎和叶中提取。
实施例1广藿香精油对檀香粉蝶和荔枝卷叶蛾的拒食、忌避作用1.1供试精油：广藿香精油为本研究所自提，每毫升约含生药50g。
1.2供试昆虫檀香粉蝶(Delias aglaia L.)：从本研究所标本园采回刚孵化的檀香幼虫，放入大塑料盒内，用幼嫩的檀香叶饲喂，待幼虫长至5龄时供试。
荔枝褐带长卷叶蛾(Homona coffearia Nietner)：从增城果园采回刚孵化的荔枝褐带长卷叶蛾幼虫，放入大塑料盒内，用幼嫩的荔枝叶饲喂，待幼虫长至5龄时供试。
1.3拒食作用测定药剂配制：以6％吐温-80溶液为溶剂，分别将广藿香精油倍比稀释成2.5mg/mL、5mg/mL、10mg/mL、20mg/mL、40mg/mL五个梯度浓度。
选择性饲喂拒食活性测定：取直径为9cm的培养皿，培养皿底用湿滤纸保湿。在同一培养皿中放入处理叶碟和对照叶碟各2枚，交叉排列。接入1头饥饿4h的供试幼虫，设6个重复。24h后将残存叶片取出，用方格纸测量叶碟的被取食面积。
非选择性饲喂拒食活性测定：取直径为9cm的培养皿，培养皿底用湿滤纸保湿。在同一培养皿中放入处理叶碟和对照叶碟各4枚。对照叶碟则放入另一个培养皿中。均接入1头饥饿4h的供试幼虫，设6个重复。24h后将残存叶片取出，用方格纸测量叶碟的被取食面积。
拒食率的计算：选择性拒食率＝(Sck-S)/(Sck+S)；非选择性拒食率＝(Sck-S)/Sck。其中：Sck为对照叶碟的平均取食面积；S为处理叶碟的平均取食面积。利用SPSS软件对数据进行统计分析，多重比较采用Duncan’s新复极差法。
1.4忌避作用测定檀香粉蝶忌避试验是采回鲜嫩无虫的枝条，用玻璃三角瓶喷雾器将试液均匀地喷于其上，于250ml烧杯内加入自来水，杯口放一圆形硬纸片，靠边处相对方向打两个洞，取一条处理枝条和一条对照枝条(只喷6％吐温-80溶液)，穿过纸片上的洞插入烧杯内。剪取含相当数量檀香粉蝶幼虫的叶片几块，置于纸片中间，等到叶片枯萎后，檀香粉蝶幼虫便会自动逃离。一定时间后，以处理和对照枝条上着落的檀香粉蝶幼虫数来判断此处理对檀香粉蝶的忌避作用。忌避率按以下公式计算：
荔枝卷叶蛾忌避试验是用长方形5×10cm滤纸等分为两半，一半为处理，一半为对照。精油用6％吐温-80溶液稀释成不同浓度后，取1ml均匀展布于滤纸上，使滤纸上的药液沉积量分别达到0.5mg/cm2、1mg/cm2、2mg/cm2、4mg/cm2、8mg/cm2。对照滴1ml6％吐温-80溶液，将处理和对照两个半边滤纸在反面用透明胶连接起来，放入长方形塑料盒。将20头荔枝卷叶蛾接入塑料盒内，让其在滤纸上自由爬行。4小时和24时后各检查一次对照边合处理边分布的虫数。忌避率按以下公式计算：
1.5非选择性饲喂拒食作用不同浓度广藿香精油对檀香粉蝶和荔枝卷叶蛾幼虫的非选择性拒食作用结果见表1。
表1广藿香精油对檀香粉蝶和荔枝卷叶蛾的非选择性拒食作用
从表1可知，广藿香精油对檀香粉蝶和荔枝卷叶蛾幼虫有较好的拒食作用，且24h和48h的拒食活性均随使用浓度的提高而升高。其中以檀香粉蝶幼虫更为敏感，各个浓度的拒食率都为100％；2.5mg/mL-40mg/mL浓度对荔枝卷叶蛾拒食效果较好，都在90％以上。同时可以看到，拒食作用也随着时间的推迟而下降，48h比24h的拒食率略有下降。
1.6选择性饲喂拒食作用表2广藿香精油对檀香粉蝶和荔枝卷叶蛾的选择性作用
由表2可知，广藿香油对檀香粉蝶幼虫的选择性拒食作用非常强烈，2.5mg/mL以上的浓度就可达到100％的拒食率。20mg/mL以上的浓度对荔枝卷叶蛾也较为敏感，拒食率在90％以上。
1.7忌避作用测定表3广藿香精油对檀香粉蝶和荔枝卷叶蛾的忌避作用
从表3可以看出，对照边的虫数都高于处理边的虫数，说明广藿香油对檀香粉蝶和荔枝卷叶蛾都有忌避作用。
实施例2广藿香精油对斜纹夜蛾拒食作用1.1供试精油：广藿香精油为本研究所自提，每毫升约含生药50g。
1.2供试昆虫斜纹夜蛾(Spodoptera litura Fab.)：从田间采回斜纹夜蛾卵块放于保湿的培养皿内，待卵孵化为幼虫后，转入大玻璃缸中，用木薯叶饲喂，当幼虫长至3龄时挑取整齐一致的幼虫供试。
1.3试验方法药剂配制：以丙酮为溶剂，分别将广藿香精油倍比稀释成2.5mg/mL、5mg/mL、10mg/mL、20mg/mL、40mg/mL五个梯度浓度。
选择性饲喂拒食活性测定、非选择性饲喂拒食活性测定与实施例1相同。
1.4非选择性饲喂拒食作用表4广藿香精油对斜纹夜蛾非选择性拒食作用
表4表明，各处理取食量比对照明显下降，拒食率随处理浓度的提高而提高。处理后48h比24h的拒食率相对下降。处理后24h和48h后拒食率顺序为：40mg/mL＞20mg/mL＞10mg/mL＞5mg/mL＞2.5mg/mL。在非选择性条件下处理后24h的拒食中浓度AFC50为68.88μg/mL(置信区间为66.42～71.34μg/mL)，处理后48h的AFC50为94.40μg/mL(置信区间为91.96～96.85μg/mL)。
1.5选择性饲喂拒食作用表5广藿香精油对斜纹夜蛾选择性拒食作用
表5表明，各种浓度的广藿香精油对斜纹夜蛾幼虫的取食行为表现出不同的拒食作用。在选择饲喂试验中，各浓度都表现出很高的拒食率，5种浓度拒食率次序是：40mg/mL＞20mg/mL＞10mg/mL＞5mg/mL＞2.5mg/mL。在选择性条件下处理后24h的拒食中浓度AFC50为36.23μg/mL(置信区间为34.19～38.26μg/mL)。
实施例3广藿香酮、广藿香精油的杀虫作用1.1供试药剂：广藿香精油为本研究所自提，每mL约含生药50g；广藿香酮由本研究室从该精油中分离制备，得率为0.25％，纯度98.5％以上。以6％吐温-80溶液为溶剂，将广藿香精油倍比稀释成2.5mg/mL、5mg/mL、10mg/mL、20mg/mL、40mg/mL五个梯度浓度；以5％司盘-20溶液为溶剂，将广藿香酮倍比稀释成1mg/mL、2mg/mL、4mg/mL、8mg/mL、10mg/mL五个梯度浓度。
1.2供试昆虫菜粉蝶(Preris rapae L.)：从本所标本园教学实习区采回菜粉蝶蛹和高龄幼虫饲养，幼虫化蛹后收集于大培养皿内，羽化时移入长50cm、宽60cm、高80cm的养虫笼内，笼内放入盆栽的介蓝，并于笼内用棉花浸渍10％蜜糖液，供成虫补充营养，让成虫在芥蓝上产卵，2d后取出，待卵孵化成幼虫后将一批幼虫收集于大玻璃缸中用介蓝或甘蓝饲喂，待其发育至4龄幼虫时用于试验。
小菜蛾(Plutella xylostella L.)：从华南农业大学养虫室取回高龄幼虫在室内饲养繁殖，待其化蛹时收集蛹于培养皿内，羽化后连培养皿一起放入长50cm、宽60cm、高80cm的小养虫笼内，笼内放有长30cm、宽20cm、高5cm的塑料盒，盆内种有2叶大小的菜薹幼苗和10％蜜糖水为成虫补充营养，让成虫在盆栽菜薹苗上产卵，待幼虫长至3龄时供试。
1.3试验方法选择性饲喂拒食活性测定、非选择性饲喂拒食活性测定与实施例1相同，触杀试验法使用微量进样器将试样点滴于试虫的胸部背板上，经过一段时间后检查试虫的死亡率。校正死亡率按Abbott公式求得：校正死亡率(％)＝(处理死亡率-对照死亡率)×100/(1-对照死亡率)。利用Excel软件计算不同浓度广藿香油和广藿香酮的毒力回归曲线及LC50值。
1.4广藿香精油对菜粉蝶和小菜蛾幼虫非选择性拒食作用表6广藿香精油对菜粉蝶和小菜蛾幼虫非选择性拒食作用
表6表明：广藿香精油对菜粉蝶和小菜蛾幼虫均有较好的拒食作用，且24h和48h的拒食活性都随使用浓度的提高而升高，拒食作用随着时间的推移而下降，48h比24h的拒食率略有下降。
1.5广藿香精油对菜粉蝶和小菜蛾幼虫选择性拒食作用表7广藿香精油对菜粉蝶和小菜蛾幼虫选择性拒食作用
表7表明：广藿香精油对菜粉蝶和小菜蛾幼虫的选择性拒食作用更为强烈，5mg/mL以上的精油对菜粉蝶幼虫就达到100％的拒食率，相对而言，对小菜蛾的拒食作用比较缓和，各浓度精油的拒食率分别是28％、31％、44％、58％、76％。
1.6广藿香油和广藿香酮对菜粉蝶幼虫毒杀作用表8广藿香油和广藿香酮对菜粉蝶幼虫毒杀作用
表8结果表明，广藿香精油和广藿香酮对菜粉蝶幼虫的毒杀作用都很强，LC50分别为104.28μg/mL和32.20μg/mL。
1.7广藿香酮对菜粉蝶和小菜蛾幼虫非选择性拒食作用表9广藿香酮对菜粉蝶和小菜蛾幼虫选择性拒食作用
从表9可以看出，广藿香酮对菜粉蝶和小菜蛾幼虫有强烈的拒食作用，且24h和48h的拒食活性均随使用浓度的提高而升高。拒食作用也随着时间的推迟而下降，48h比24h的拒食率略有下降。
1.8广藿香酮对菜粉蝶和小菜蛾幼虫选择性拒食作用表10广藿香酮对菜粉蝶和小菜蛾幼虫选择性拒食作用
表10表明：广藿香酮对菜粉蝶和小菜蛾幼虫的选择性拒食作用非常强烈，4mg/mL以上的浓度就可以达到100％的拒食率。
从上述的实施例中可以看出，以广藿香精油及广藿香酮配制的杀虫灭菌剂对蔬菜、果树、药用植物的害虫以及贮藏害虫有强烈的拒食、忌避、触杀等作用，可作为一种新型的无残留、无污染农药在农业生产、种植业中获得广泛的应用。
实施例1广藿香精油对檀香粉蝶和荔枝卷叶蛾的拒食、忌避作用1.1供试精油：广藿香精油为本研究所自提，每毫升约含生药50g。
1.2供试昆虫檀香粉蝶(Delias aglaia L.)：从本研究所标本园采回刚孵化的檀香幼虫，放入大塑料盒内，用幼嫩的檀香叶饲喂，待幼虫长至5龄时供试。
荔枝褐带长卷叶蛾(Homona coffearia Nietner)：从增城果园采回刚孵化的荔枝褐带长卷叶蛾幼虫，放入大塑料盒内，用幼嫩的荔枝叶饲喂，待幼虫长至5龄时供试。
1.3拒食作用测定药剂配制：以6％吐温-80溶液为溶剂，分别将广藿香精油倍比稀释成2.5mg/mL、5mg/mL、10mg/mL、20mg/mL、40mg/mL五个梯度浓度。
选择性饲喂拒食活性测定：取直径为9cm的培养皿，培养皿底用湿滤纸保湿。在同一培养皿中放入处理叶碟和对照叶碟各2枚，交叉排列。接入1头饥饿4h的供试幼虫，设6个重复。24h后将残存叶片取出，用方格纸测量叶碟的被取食面积。
非选择性饲喂拒食活性测定：取直径为9cm的培养皿，培养皿底用湿滤纸保湿。在同一培养皿中放入处理叶碟和对照叶碟各4枚。对照叶碟则放入另一个培养皿中。均接入1头饥饿4h的供试幼虫，设6个重复。24h后将残存叶片取出，用方格纸测量叶碟的被取食面积。
拒食率的计算：选择性拒食率＝(Sck-S)/(Sck+S)；非选择性拒食率＝(Sck-S)/Sck。其中：Sck为对照叶碟的平均取食面积；S为处理叶碟的平均取食面积。利用SPSS软件对数据进行统计分析，多重比较采用Duncan’s新复极差法。
1.4忌避作用测定檀香粉蝶忌避试验是采回鲜嫩无虫的枝条，用玻璃三角瓶喷雾器将试液均匀地喷于其上，于250ml烧杯内加入自来水，杯口放一圆形硬纸片，靠边处相对方向打两个洞，取一条处理枝条和一条对照枝条(只喷6％吐温-80溶液)，穿过纸片上的洞插入烧杯内。剪取含相当数量檀香粉蝶幼虫的叶片几块，置于纸片中间，等到叶片枯萎后，檀香粉蝶幼虫便会自动逃离。一定时间后，以处理和对照枝条上着落的檀香粉蝶幼虫数来判断此处理对檀香粉蝶的忌避作用。忌避率按以下公式计算：
荔枝卷叶蛾忌避试验是用长方形5×10cm滤纸等分为两半，一半为处理，一半为对照。精油用6％吐温-80溶液稀释成不同浓度后，取1ml均匀展布于滤纸上，使滤纸上的药液沉积量分别达到0.5mg/cm2、1mg/cm2、2mg/cm2、4mg/cm2、8mg/cm2。对照滴1ml6％吐温-80溶液，将处理和对照两个半边滤纸在反面用透明胶连接起来，放入长方形塑料盒。将20头荔枝卷叶蛾接入塑料盒内，让其在滤纸上自由爬行。4小时和24时后各检查一次对照边合处理边分布的虫数。忌避率按以下公式计算：
1.5非选择性饲喂拒食作用不同浓度广藿香精油对檀香粉蝶和荔枝卷叶蛾幼虫的非选择性拒食作用结果见表1。
表1广藿香精油对檀香粉蝶和荔枝卷叶蛾的非选择性拒食作用
从表1可知，广藿香精油对檀香粉蝶和荔枝卷叶蛾幼虫有较好的拒食作用，且24h和48h的拒食活性均随使用浓度的提高而升高。其中以檀香粉蝶幼虫更为敏感，各个浓度的拒食率都为100％；2.5mg/mL-40mg/mL浓度对荔枝卷叶蛾拒食效果较好，都在90％以上。同时可以看到，拒食作用也随着时间的推迟而下降，48h比24h的拒食率略有下降。
1.6选择性饲喂拒食作用表2广藿香精油对檀香粉蝶和荔枝卷叶蛾的选择性作用
由表2可知，广藿香油对檀香粉蝶幼虫的选择性拒食作用非常强烈，2.5mg/mL以上的浓度就可达到100％的拒食率。20mg/mL以上的浓度对荔枝卷叶蛾也较为敏感，拒食率在90％以上。
1.7忌避作用测定表3广藿香精油对檀香粉蝶和荔枝卷叶蛾的忌避作用
从表3可以看出，对照边的虫数都高于处理边的虫数，说明广藿香油对檀香粉蝶和荔枝卷叶蛾都有忌避作用。
实施例2广藿香精油对斜纹夜蛾拒食作用1.1供试精油：广藿香精油为本研究所自提，每毫升约含生药50g。
1.2供试昆虫斜纹夜蛾(Spodoptera litura Fab.)：从田间采回斜纹夜蛾卵块放于保湿的培养皿内，待卵孵化为幼虫后，转入大玻璃缸中，用木薯叶饲喂，当幼虫长至3龄时挑取整齐一致的幼虫供试。
1.3试验方法药剂配制：以丙酮为溶剂，分别将广藿香精油倍比稀释成2.5mg/mL、5mg/mL、10mg/mL、20mg/mL、40mg/mL五个梯度浓度。
选择性饲喂拒食活性测定、非选择性饲喂拒食活性测定与实施例1相同。
1.4非选择性饲喂拒食作用表4广藿香精油对斜纹夜蛾非选择性拒食作用
表4表明，各处理取食量比对照明显下降，拒食率随处理浓度的提高而提高。处理后48h比24h的拒食率相对下降。处理后24h和48h后拒食率顺序为：40mg/mL＞20mg/mL＞10mg/mL＞5mg/mL＞2.5mg/mL。在非选择性条件下处理后24h的拒食中浓度AFC50为68.88μg/mL(置信区间为66.42～71.34μg/mL)，处理后48h的AFC50为94.40μg/mL(置信区间为91.96～96.85μg/mL)。
1.5选择性饲喂拒食作用表5广藿香精油对斜纹夜蛾选择性拒食作用
表5表明，各种浓度的广藿香精油对斜纹夜蛾幼虫的取食行为表现出不同的拒食作用。在选择饲喂试验中，各浓度都表现出很高的拒食率，5种浓度拒食率次序是：40mg/mL＞20mg/mL＞10mg/mL＞5mg/mL＞2.5mg/mL。在选择性条件下处理后24h的拒食中浓度AFC50为36.23μg/mL(置信区间为34.19～38.26μg/mL)。
实施例3广藿香酮、广藿香精油的杀虫作用1.1供试药剂：广藿香精油为本研究所自提，每mL约含生药50g；广藿香酮由本研究室从该精油中分离制备，得率为0.25％，纯度98.5％以上。以6％吐温-80溶液为溶剂，将广藿香精油倍比稀释成2.5mg/mL、5mg/mL、10mg/mL、20mg/mL、40mg/mL五个梯度浓度；以5％司盘-20溶液为溶剂，将广藿香酮倍比稀释成1mg/mL、2mg/mL、4mg/mL、8mg/mL、10mg/mL五个梯度浓度。
1.2供试昆虫菜粉蝶(Preris rapae L.)：从本所标本园教学实习区采回菜粉蝶蛹和高龄幼虫饲养，幼虫化蛹后收集于大培养皿内，羽化时移入长50cm、宽60cm、高80cm的养虫笼内，笼内放入盆栽的介蓝，并于笼内用棉花浸渍10％蜜糖液，供成虫补充营养，让成虫在芥蓝上产卵，2d后取出，待卵孵化成幼虫后将一批幼虫收集于大玻璃缸中用介蓝或甘蓝饲喂，待其发育至4龄幼虫时用于试验。
小菜蛾(Plutella xylostella L.)：从华南农业大学养虫室取回高龄幼虫在室内饲养繁殖，待其化蛹时收集蛹于培养皿内，羽化后连培养皿一起放入长50cm、宽60cm、高80cm的小养虫笼内，笼内放有长30cm、宽20cm、高5cm的塑料盒，盆内种有2叶大小的菜薹幼苗和10％蜜糖水为成虫补充营养，让成虫在盆栽菜薹苗上产卵，待幼虫长至3龄时供试。
1.3试验方法选择性饲喂拒食活性测定、非选择性饲喂拒食活性测定与实施例1相同，触杀试验法使用微量进样器将试样点滴于试虫的胸部背板上，经过一段时间后检查试虫的死亡率。校正死亡率按Abbott公式求得：校正死亡率(％)＝(处理死亡率-对照死亡率)×100/(1-对照死亡率)。利用Excel软件计算不同浓度广藿香油和广藿香酮的毒力回归曲线及LC50值。
1.4广藿香精油对菜粉蝶和小菜蛾幼虫非选择性拒食作用表6广藿香精油对菜粉蝶和小菜蛾幼虫非选择性拒食作用
表6表明：广藿香精油对菜粉蝶和小菜蛾幼虫均有较好的拒食作用，且24h和48h的拒食活性都随使用浓度的提高而升高，拒食作用随着时间的推移而下降，48h比24h的拒食率略有下降。
1.5广藿香精油对菜粉蝶和小菜蛾幼虫选择性拒食作用表7广藿香精油对菜粉蝶和小菜蛾幼虫选择性拒食作用
表7表明：广藿香精油对菜粉蝶和小菜蛾幼虫的选择性拒食作用更为强烈，5mg/mL以上的精油对菜粉蝶幼虫就达到100％的拒食率，相对而言，对小菜蛾的拒食作用比较缓和，各浓度精油的拒食率分别是28％、31％、44％、58％、76％。
1.6广藿香油和广藿香酮对菜粉蝶幼虫毒杀作用表8广藿香油和广藿香酮对菜粉蝶幼虫毒杀作用
表8结果表明，广藿香精油和广藿香酮对菜粉蝶幼虫的毒杀作用都很强，LC50分别为104.28μg/mL和32.20μg/mL。
1.7广藿香酮对菜粉蝶和小菜蛾幼虫非选择性拒食作用表9广藿香酮对菜粉蝶和小菜蛾幼虫选择性拒食作用
从表9可以看出，广藿香酮对菜粉蝶和小菜蛾幼虫有强烈的拒食作用，且24h和48h的拒食活性均随使用浓度的提高而升高。拒食作用也随着时间的推迟而下降，48h比24h的拒食率略有下降。
1.8广藿香酮对菜粉蝶和小菜蛾幼虫选择性拒食作用表10广藿香酮对菜粉蝶和小菜蛾幼虫选择性拒食作用
表10表明：广藿香酮对菜粉蝶和小菜蛾幼虫的选择性拒食作用非常强烈，4mg/mL以上的浓度就可以达到100％的拒食率。
从上述的实施例中可以看出，以广藿香精油及广藿香酮配制的杀虫灭菌剂对蔬菜、果树、药用植物的害虫以及贮藏害虫有强烈的拒食、忌避、触杀等作用，可作为一种新型的无残留、无污染农药在农业生产、种植业中获得广泛的应用。
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