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一种防治根结 线虫生防菌剂及其应用

阅读：424发布：2020-06-12

专利汇可以提供一种防治根结线虫生防菌剂及其应用专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本发明属于微生物农药技术领域，为了解决目前防治植物根据线虫单一菌株防病机制单一、防治效果偏低的问题，提供了一种防治根结线虫生防菌剂及其应用。由地衣芽孢杆菌- 荧光假单胞菌混合发酵液、弗氏链霉菌发酵液、黄孢原毛平革菌-疣孢漆斑菌混合发酵液按照2-5：1-3：1-7的体积比混合，然后混合液与藜麦皮按照质量比为1kg:6-8kg混合均匀制备而成。五种菌株互不拮抗，相互协同杀虫，且制备工艺相对简单，应用前景广阔。本发明防治蔬菜根结线虫病，促进植物生长发育，提高植物抗病性。，下面是一种防治根结线虫生防菌剂及其应用专利的具体信息内容。

权利要求

1.一种防治根结线虫生防菌剂，其特征在于：由地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）-荧光假单胞菌（Pseudomonas fluorescens）混合发酵液、弗氏链霉菌(Streptomyces fradiae)发酵液、黄孢原毛平革菌（Phanerochaete chrysosporium Burdsall）-疣孢漆斑菌（Myrothecium verrucaria）混合发酵液按照2-5：1-3：1-7的体积比混合，然后混合液与藜麦皮按照质量比为1kg:6-8kg混合均匀制备而成；
其中：地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）-荧光假单胞菌（Pseudomonas fluorescens）混合发酵液为：地衣芽孢杆菌种子液和荧光假单胞菌种子液按1-2：1的体积比混合，搅拌3-5分钟后，按照3-8%体积比接种量接入发酵培养基中，30℃培育18-22h，得到地衣芽孢杆菌-荧光假单胞菌混合发酵液；
弗氏链霉菌(Streptomyces fradiae)发酵液为：弗氏链霉菌种子液按照3-8%体积比接种量接入发酵培养基中， 29℃培养7d，得到弗氏链霉菌发酵液；
黄孢原毛平革菌（Phanerochaete chrysosporium Burdsall）-疣孢漆斑菌（Myrothecium verrucaria）混合发酵液为：黄孢原毛平革菌种子液和疣孢漆斑菌种子液按
1：1的体积比混合，搅拌3-5分钟后，按照3-6%体积比接种量接入发酵培养基中， 28℃培养
5d，得到黄孢原毛平革菌-疣孢漆斑菌混合发酵液。
2.根据权利要求1所述的一种防治根结线虫生防菌剂，其特征在于：所述地衣芽孢杆菌-荧光假单胞菌混合发酵液中：地衣芽孢杆菌的有效活菌数为2.2-3.0×1010cfu•L−1 、荧光假单胞菌的有效活菌数为1.0-1.6×1010cfu·L−1；弗氏链霉菌发酵液中弗氏链霉菌的有效活菌数为1.4-3.3×106cfu·L−1；黄孢原毛平革菌-疣孢漆斑菌混合发酵液中：黄孢原毛平革菌的有效活菌数为0.8-2.5×108cfu·L−1、疣孢漆斑菌的有效活菌数为2.6-5.0×
108cfu·L−1；所述混合液中有效活菌总数为3.12-5.50×109cfu·L−1。
3.根据权利要求1所述的一种防治根结线虫生防菌剂，其特征在于：所述发酵液中：所述地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）为ACCC11080；荧光假单胞菌（Pseudomonas fluorescens）为ACCC10646；弗氏链霉菌(Streptomyces fradiae)为ACCC40124；黄孢原毛平革菌（Phanerochaete chrysosporium Burdsall）为ACCC30530；疣孢漆斑菌（Myrothecium verrucaria）为ACCC30197。
4.根据权利要求1所述的一种防治根结线虫生防菌剂，其特征在于：所述混合液与藜麦皮混合均匀后35℃干燥48h，200目粉碎即为防治根结线虫生防菌剂。
5.根据权利要求1所述的一种防治根结线虫生防菌剂，其特征在于：所述地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）-荧光假单胞菌（Pseudomonas fluorescens）混合发酵液为：地衣芽孢杆菌种子液和荧光假单胞菌种子液按2：1的体积比混合后搅拌3-5min，按6%体积比的接种量接入发酵培养基中，30℃培育18-22h获得；
所述弗氏链霉菌(Streptomyces fradiae)发酵液为：弗氏链霉菌种子液按照8%体积比接种量接入发酵培养基中，29℃培养7d，得到弗氏链霉菌发酵液；
所述黄孢原毛平革菌（Phanerochaete chrysosporium Burdsall）-疣孢漆斑菌（Myrothecium verrucaria）混合发酵液为：黄孢原毛平革菌种子液和疣孢漆斑菌种子液按
1:1的体积比混合，搅拌3-5分钟后，按照5%体积比接种量接入发酵培养基中，28℃培养5d，得到黄孢原毛平革菌-疣孢漆斑菌混合发酵液。
6.根据权利要求1所述的一种防治根结线虫生防菌剂，其特征在于：所述地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）-荧光假单胞菌（Pseudomonas fluorescens）混合发酵液中采用的发酵培养基为：玉米淀粉 15 g·L−1，糖蜜10g·L−1，蛋白胨 1 g·L−1，葡萄糖 2 g·L−1，硫酸铵5 g·L−1，KH2PO4 0.45 g·L−1，MgSO4 0.45 g·L−1；
所述弗氏链霉菌(Streptomyces fradiae)发酵液中采用的发酵培养基为：葡萄糖
6.0g·L−1，黄豆饼粉6.0 g·L−1，可溶性淀粉 35 g·L−1，硫酸镁 2 g·L−1，碳酸钙2 g·L−1；
所述黄孢原毛平革菌（Phanerochaete chrysosporium Burdsall）-疣孢漆斑菌−1
（Myrothecium verrucaria）混合发酵液中采用的发酵培养基为：马铃薯200 g·L 、可溶性淀粉3 g·L−1，硝酸钠0.8 g·L−1，乳糖15 g·L−1、牛肉膏5 g·L−1、硫酸铵3 g·L−1。
7.根据权利要求1所述的一种防治根结线虫生防菌剂，其特征在于：所制备的生防菌剂在田间杀线虫时的施用方法为穴施，保护地蔬菜每株根系周围穴施8-12g,每亩用量12-25公斤。

说明书全文

一种防治根结线虫生防菌剂及其应用

技术领域

[0001] 本发明属于微生物农药技术领域，具体涉及一种防治根结线虫生防菌剂及其应用。

背景技术

[0002] 根结线虫(Meloidogyne spp.)病是全球范围内严重影响蔬菜设施栽培产量的重要根部病害之一，具有分布广泛性、多寄主性、强侵染性和发生危害隐蔽等特点。随着设施蔬菜栽培的迅猛发展，根结线虫的发病率逐年上升，严重地区可减产30-40%，甚至绝收。目前，农业上最主要的防治手段仍是农药和土壤消毒，造成农药大量残留、环境污染。因此，提高蔬菜的品质和产量，寻求安全、高效、环境友好型根结线虫防治措施已成为蔬菜产业迫在眉睫的重要需求。目前发现，室内研究表明荧光假单胞菌代谢产物、疣孢漆斑菌分生孢子和代谢物、黄孢原毛平革菌分生孢子对根结线虫J2、卵有很强的杀死和寄生作用，是较为有效的防治根结线虫的生防菌种，大田实验结果表明，单一施用这三种生防菌中任何一种很难有效防治根结线虫病，活性相对较低。

[0003] 在生防菌施用过程中，利用单一微生物防治植物根结线虫报道较多，但是单一菌株防病机制单一，定值能力差，易受土壤环境各种因素影响，造成防治效果偏低。通过生防菌之间的相互亲和协同作用，实现多菌株的优势互补，既能提高植物本身生长活力或产量，减少土壤根结线虫的群体数量，增加土壤自由线虫、有益微生物数量，抑制根结线虫对植物根部侵染，从而提高生防效果和稳定性。

发明内容

[0004] 本发明为了解决目前防治植物根据线虫单一菌株防病机制单一、防治效果偏低的问题，提供了一种防治根结线虫生防菌剂及其应用。

[0005] 本发明由如下技术方案实现的：一种防治根结线虫生防菌剂，由地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）-荧光假单胞菌（Pseudomonas fluorescens）混合发酵液、弗氏链霉菌(Streptomyces fradiae)发酵液、黄孢原毛平革菌（Phanerochaete chrysosporium Burdsall）-疣孢漆斑菌（Myrothecium verrucaria）混合发酵液按照2-5：1-3：1-7的体积比混合，然后混合液与藜麦皮按照质量比为1kg:6-8kg混合均匀制备而成；其中：地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）-荧光假单胞菌（Pseudomonas fluorescens）混合发酵液为：地衣芽孢杆菌种子液和荧光假单胞菌种子液按1-2：1的体积比混合，搅拌3-5分钟后，按照3-8%体积比接种量接入发酵培养基中，30℃培育18-22h，得到地衣芽孢杆菌-荧光假单胞菌混合发酵液；
弗氏链霉菌(Streptomyces fradiae)发酵液为：弗氏链霉菌种子液按照3-8%体积比接种量接入发酵培养基中， 29℃培养7d，得到弗氏链霉菌发酵液；
黄孢原毛平革菌（Phanerochaete chrysosporium Burdsall）-疣孢漆斑菌（Myrothecium verrucaria）混合发酵液为：黄孢原毛平革菌种子液和疣孢漆斑菌种子液按
1：1的体积比混合，搅拌3-5分钟后，按照3-6%体积比接种量接入发酵培养基中， 28℃培养
5d，得到黄孢原毛平革菌-疣孢漆斑菌混合发酵液。

[0006] 所述地衣芽孢杆菌-荧光假单胞菌混合发酵液中：地衣芽孢杆菌的有效活菌数为2.2-3.0×1010cfu•L−1 、荧光假单胞菌的有效活菌数为1.0-1.6×1010cfu·L−1；弗氏链霉菌发酵液中弗氏链霉菌的有效活菌数为1.4-3.3×106cfu·L−1；黄孢原毛平革菌-疣孢漆斑菌混合发酵液中：黄孢原毛平革菌的有效活菌数为0.8-2.5×108cfu·L−1、疣孢漆斑菌的有效活菌数为2.6-5.0×108cfu·L−1；所述混合液中有效活菌总数为3.12-5.50×109cfu·L−1。

[0007] 所述地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）为ACCC11080；荧光假单胞菌（Pseudomonas fluorescens）为ACCC10646；弗氏链霉菌(Streptomyces fradiae)为ACCC40124；黄孢原毛平革菌（Phanerochaete chrysosporium Burdsall）为ACCC30530；疣孢漆斑菌（Myrothecium verrucaria）为ACCC30197。

[0008] 所述混合液与藜麦皮混合均匀后35℃干燥48h，200目粉碎即为防治根结线虫生防菌剂。

[0009] 优选：所述地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）-荧光假单胞菌（Pseudomonas fluorescens）混合发酵液为：地衣芽孢杆菌种子液和荧光假单胞菌种子液按2：1的体积比混合后搅拌3-5min，按6%体积比的接种量接入发酵培养基中，30℃培育18-22h获得；
所述弗氏链霉菌(Streptomyces fradiae)发酵液为：弗氏链霉菌种子液按照8%体积比接种量接入发酵培养基中，29℃培养7d，得到弗氏链霉菌发酵液；
所述黄孢原毛平革菌（Phanerochaete chrysosporium Burdsall）-疣孢漆斑菌（Myrothecium verrucaria）混合发酵液为：黄孢原毛平革菌种子液和疣孢漆斑菌种子液按
1:1的体积比混合，搅拌3-5分钟后，按照5%体积比接种量接入发酵培养基中，28℃培养5d，得到黄孢原毛平革菌-疣孢漆斑菌混合发酵液。

[0010] 所述地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）-荧光假单胞菌（Pseudomonas fluorescens）混合发酵液中采用的发酵培养基为：玉米淀粉 15 g·L−1，糖蜜10g·L−1，蛋白胨 1 g·L−1，葡萄糖 2 g·L−1，硫酸铵5 g·L−1，KH2PO4 0.45 g·L−1，MgSO4 0.45 g·L−1；所述弗氏链霉菌(Streptomyces fradiae)发酵液中采用的发酵培养基为：葡萄糖
6.0g·L−1，黄豆饼粉6.0 g·L−1，可溶性淀粉 35 g·L−1，硫酸镁 2 g·L−1，碳酸钙2 g·L−1；
所述黄孢原毛平革菌（Phanerochaete chrysosporium Burdsall）-疣孢漆斑菌（Myrothecium verrucaria）混合发酵液中采用的发酵培养基为：马铃薯200 g·L−1、可溶性−1 −1 −1 −1 −1
淀粉3 g·L ，硝酸钠0.8 g·L ，乳糖15 g·L 、牛肉膏5 g·L 、硫酸铵3 g·L 。

[0011] 所制备的生防菌剂在田间杀线虫时的施用方法为穴施，保护地蔬菜每株根系周围穴施8-12g,每亩用量12-25公斤。

[0012] 需要说明的是，本发明种子培养以及发酵罐培养方式是本领域常规技术，并不详述。

[0013] 本发明从多种生防菌中选择五种菌株，其中：真菌类黄孢原毛平革菌和疣孢漆斑菌主要通过分生孢子寄生卵和J2方式杀死根结线虫；细菌类地衣芽孢杆菌和荧光假单胞菌代谢产物杀死根结线虫J2，同时促进植物根系发育，提高植物抗病性；放线菌弗氏链霉菌代谢产物杀死根结线虫J2，同时促进土壤真菌数量，造成与根结线虫进行营养和空间的竞争。这五种菌株互不拮抗，相互协同杀虫，且制备工艺相对简单，应用前景广阔。本发明防治蔬菜根结线虫病，促进植物生长发育，提高植物抗病性。
附图说明

[0014] 图1为本发明所制备的防治根结线虫生防菌剂对甜瓜根结线虫田间防治效果，图中：a-b:对照，未防治的甜瓜根系；c-d:处理，防治后的甜瓜根系。

具体实施方式

[0015] 为了使本领域技术人员更好地理解本申请中的技术方案，下面将结合本申请具体实施例，对本申请的技术方案进行清楚，完整地描述，显然，所描述的实施例仅是本申请一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本申请中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

[0016] 实施例1：一种防治根结线虫生防菌剂，由地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）-荧光假单胞菌（Pseudomonas fluorescens）混合发酵液、弗氏链霉菌(Streptomyces fradiae)发酵液、黄孢原毛平革菌（Phanerochaete chrysosporium Burdsall）-疣孢漆斑菌（Myrothecium verrucaria）混合发酵液按照2：2：6的体积比混合，搅拌10分钟后，得到液体菌剂；液体菌剂与藜麦皮按照1kg:6kg混合均匀后35℃干燥48h，200目粉碎即为防治根结线虫生防菌剂。

[0017] 其中：地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）-荧光假单胞菌（Pseudomonas fluorescens）混合发酵液为：地衣芽孢杆菌种子液和荧光假单胞菌种子液按2：1的体积比混合，搅拌3-5分钟后，按照6%体积比接种量接入发酵培养基中，30℃培育18-22h，得到地衣芽孢杆菌-荧光假单胞菌混合发酵液；发酵培养基为：玉米淀粉 15 g·L−1，糖蜜10g·L−1，蛋白胨 1 g·L−1，葡萄糖 2 g·L−1，硫酸铵5 g·L−1，KH2PO4 0.45 g·L−1，MgSO4 0.45 g·L−1；弗氏链霉菌(Streptomyces fradiae)发酵液为：弗氏链霉菌种子液按8%体积比接种量接入发酵培养基中， 29℃培养7d，得到弗氏链霉菌发酵液；发酵培养基为：葡萄糖 6.0g·L−1，黄豆饼粉6.0 g·L−1，可溶性淀粉 35 g·L−1，硫酸镁 2 g·L−1，碳酸钙2 g·L−1；
黄孢原毛平革菌（Phanerochaete chrysosporium Burdsall）-疣孢漆斑菌（Myrothecium verrucaria）混合发酵液为：黄孢原毛平革菌种子液和疣孢漆斑菌种子液按
1：1的体积比混合，搅拌3-5分钟后，按照5%体积比接种量接入发酵培养基中，28℃培养5d，−1
得到黄孢原毛平革菌-疣孢漆斑菌混合发酵液。发酵培养基为：马铃薯200 g·L 、可溶性淀粉3 g·L−1，硝酸钠0.8 g·L−1，乳糖15 g·L−1、牛肉膏5 g·L−1、硫酸铵3 g·L−1。

[0018] 所述地衣芽孢杆菌-荧光假单胞菌混合发酵液中：地衣芽孢杆菌的有效活菌数为2.2-3.0×1010cfu•L−1 、荧光假单胞菌的有效活菌数为1.0-1.6×1010cfu·L−1；弗氏链霉菌
6 −1
发酵液中弗氏链霉菌的有效活菌数为1.4-3.3×10cfu·L ；黄孢原毛平革菌-疣孢漆斑菌混合发酵液中：黄孢原毛平革菌的有效活菌数为0.8-2.5×108cfu·L−1、疣孢漆斑菌的有效活菌数为2.6-5.0×108cfu·L−1；所述混合液中有效活菌总数为3.12-5.50×109cfu·L−1。

[0019] 所述地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）为ACCC11080；荧光假单胞菌（Pseudomonas fluorescens）为ACCC10646；弗氏链霉菌(Streptomyces fradiae)为ACCC40124；黄孢原毛平革菌（Phanerochaete chrysosporium Burdsall）为ACCC30530；疣孢漆斑菌（Myrothecium verrucaria）为ACCC30197。

[0020] 所制备的生防菌剂在田间杀线虫时的施用方法为穴施，保护地蔬菜每株根系周围穴施8g,每亩用量12公斤。

[0021] 实施例2：一种防治根结线虫生防菌剂，由地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）-荧光假单胞菌（Pseudomonas fluorescens）混合发酵液、弗氏链霉菌(Streptomyces fradiae)发酵液、黄孢原毛平革菌（Phanerochaete chrysosporium Burdsall）-疣孢漆斑菌（Myrothecium verrucaria）混合发酵液按照3：1：7的体积比混合，搅拌10分钟后，得到液体菌剂；液体菌剂与藜麦皮按照1kg:8kg混合均匀后35℃干燥48h，200目粉碎即为防治根结线虫生防菌剂。

[0022] 其中：地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）-荧光假单胞菌（Pseudomonas fluorescens）混合发酵液为：地衣芽孢杆菌种子液和荧光假单胞菌种子液按1：1的体积比混合，搅拌3-5分钟后，按照3%体积比接种量接入发酵培养基中，30℃培育18-22h，得到地衣−1 −1芽孢杆菌-荧光假单胞菌混合发酵液；发酵培养基为：玉米淀粉 15 g·L ，糖蜜10g·L ，蛋白胨 1 g·L−1，葡萄糖 2 g·L−1，硫酸铵5 g·L−1，KH2PO4 0.45 g·L−1，MgSO4 0.45 g·L−1；
弗氏链霉菌(Streptomyces fradiae)发酵液为：弗氏链霉菌种子液按5%体积比接种量接入发酵培养基中， 29℃培养7d，得到弗氏链霉菌发酵液；发酵培养基为：葡萄糖 6.0g·L−1，黄豆饼粉6.0 g·L−1，可溶性淀粉 35 g·L−1，硫酸镁 2 g·L−1，碳酸钙2 g·L−1；
黄孢原毛平革菌（Phanerochaete chrysosporium Burdsall）-疣孢漆斑菌（Myrothecium verrucaria）混合发酵液为：黄孢原毛平革菌种子液和疣孢漆斑菌种子液按
1：1的体积比混合，搅拌3-5分钟后，按照3%体积比接种量接入发酵培养基中，28℃培养5d，得到黄孢原毛平革菌-疣孢漆斑菌混合发酵液。发酵培养基为：马铃薯200 g·L−1、可溶性淀粉3 g·L−1，硝酸钠0.8 g·L−1，乳糖15 g·L−1、牛肉膏5 g·L−1、硫酸铵3 g·L−1。

[0023] 所述地衣芽孢杆菌-荧光假单胞菌混合发酵液中：地衣芽孢杆菌的有效活菌数为2.2-3.0×1010cfu•L−1 、荧光假单胞菌的有效活菌数为1.0-1.6×1010cfu·L−1；弗氏链霉菌发酵液中弗氏链霉菌的有效活菌数为1.4-3.3×106cfu·L−1；黄孢原毛平革菌-疣孢漆斑菌混合发酵液中：黄孢原毛平革菌的有效活菌数为0.8-2.5×108cfu·L−1、疣孢漆斑菌的有效活菌数为2.6-5.0×108cfu·L−1；所述混合液中有效活菌总数为3.12-5.50×109cfu·L−1。

[0024] 所述地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）为ACCC11080；荧光假单胞菌（Pseudomonas fluorescens）为ACCC10646；弗氏链霉菌(Streptomyces fradiae)为ACCC40124；黄孢原毛平革菌（Phanerochaete chrysosporium Burdsall）为ACCC30530；疣孢漆斑菌（Myrothecium verrucaria）为ACCC30197。

[0025] 所制备的生防菌剂在田间杀线虫时的施用方法为穴施，保护地蔬菜每株根系周围穴施10g,每亩用量20公斤。

[0026] 实施例3：一种防治根结线虫生防菌剂，由地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）-荧光假单胞菌（Pseudomonas fluorescens）混合发酵液、弗氏链霉菌(Streptomyces fradiae)发酵液、黄孢原毛平革菌（Phanerochaete chrysosporium Burdsall）-疣孢漆斑菌（Myrothecium verrucaria）混合发酵液按照5：3：1的体积比混合，搅拌10分钟后，得到液体菌剂；液体菌剂与藜麦皮按照1kg:7kg混合均匀后35℃干燥48h，200目粉碎即为防治根结线虫生防菌剂。

[0027] 其中：地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）-荧光假单胞菌（Pseudomonas fluorescens）混合发酵液为：地衣芽孢杆菌种子液和荧光假单胞菌种子液按1.5：1的体积比混合，搅拌3-5分钟后，按照8%体积比接种量接入发酵培养基中，30℃培育18-22h，得到地−1衣芽孢杆菌-荧光假单胞菌混合发酵液；发酵培养基为：玉米淀粉 15 g·L ，糖蜜10g·L−1，蛋白胨 1 g·L−1，葡萄糖 2 g·L−1，硫酸铵5 g·L−1，KH2PO4 0.45 g·L−1，MgSO4 0.45 g·L−1；
弗氏链霉菌(Streptomyces fradiae)发酵液为：弗氏链霉菌种子液按3%体积比接种量接入发酵培养基中， 29℃培养7d，得到弗氏链霉菌发酵液；发酵培养基为：葡萄糖 6.0g·L−1，黄豆饼粉6.0 g·L−1，可溶性淀粉 35 g·L−1，硫酸镁 2 g·L−1，碳酸钙2 g·L−1；
黄孢原毛平革菌（Phanerochaete chrysosporium Burdsall）-疣孢漆斑菌（Myrothecium verrucaria）混合发酵液为：黄孢原毛平革菌种子液和疣孢漆斑菌种子液按
1：1的体积比混合，搅拌3-5分钟后，按照6%体积比接种量接入发酵培养基中，28℃培养5d，得到黄孢原毛平革菌-疣孢漆斑菌混合发酵液。发酵培养基为：马铃薯200 g·L−1、可溶性淀粉3 g·L−1，硝酸钠0.8 g·L−1，乳糖15 g·L−1、牛肉膏5 g·L−1、硫酸铵3 g·L−1。

[0028] 所述地衣芽孢杆菌-荧光假单胞菌混合发酵液中：地衣芽孢杆菌的有效活菌数为2.2-3.0×1010cfu•L−1 、荧光假单胞菌的有效活菌数为1.0-1.6×1010cfu·L−1；弗氏链霉菌发酵液中弗氏链霉菌的有效活菌数为1.4-3.3×106cfu·L−1；黄孢原毛平革菌-疣孢漆斑菌混合发酵液中：黄孢原毛平革菌的有效活菌数为0.8-2.5×108cfu·L−1、疣孢漆斑菌的有效活菌数为2.6-5.0×108cfu·L−1；所述混合液中有效活菌总数为3.12-5.50×109cfu·L−1。

[0029] 所述地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）为ACCC11080；荧光假单胞菌（Pseudomonas fluorescens）为ACCC10646；弗氏链霉菌(Streptomyces fradiae)为ACCC40124；黄孢原毛平革菌（Phanerochaete chrysosporium Burdsall）为ACCC30530；疣孢漆斑菌（Myrothecium verrucaria）为ACCC30197。

[0030] 所制备的生防菌剂在田间杀线虫时的施用方法为穴施，保护地蔬菜每株根系周围穴施12g,每亩用量25公斤。

[0031] 实验例1：田间试验：实验在太谷象谷根结线虫发生严重的蔬菜地进行。供试作物为甜瓜，移栽前开始施用菌剂。用量每株12克复合菌剂，对照为等量藜麦皮。采收期调查根结指数，评价防治效果。根结严重度分0-10级，防治效果=（对照区病情指数-处理区病情指数）/对照区病情指数×100。

[0032] 防治效果见表1，结果表明说复合菌剂能有效防治甜瓜根结线虫病，防治效果是53.7%，显著提高植株生物产量，处理区植株增高25.3%，根鲜重增加50.9%，由图1可以看出处理区甜瓜根系发达、试验对照区甜瓜根系细小，处理区甜瓜上只有少量根结。

[0033] 表1组合物对甜瓜根结线虫田间防治效果

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