专利汇可以提供MALDI-TOFMS即用型质控活菌标准品专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且本 发明 公开了一种MALDI‑TOF MS即用型质控活菌标准品,解决了现有的阳性对照菌株获得时间长的技术问题,属于质谱标准品的技术领域。该活菌标准品,通过以下步骤制备得到:(1)培养目的获得单菌落来源的二代菌株,鉴定确认种属正确;(2)收集新鲜二代菌株,悬浮于冻干保护剂中,制成活菌标准品母液;(3)稀释活菌标准品母液,计算活菌标准品母液中菌株浓度;同时,将稀释后的活菌标准品母液制成菌球,计算获得冻干存活率;(4)依据冻干存活率,制备含有目标菌数的质控活菌标准品,保存于‑20℃。本发明可以充分利用MALDI‑TOF MS鉴定菌株种属快速、高通量的特点,缩短 微 生物 检验的时间,提高检验效率。,下面是MALDI-TOFMS即用型质控活菌标准品专利的具体信息内容。
1.MALDI-TOF MS即用型质控活菌标准品,其特征在于,通过以下步骤制备得到:
(1)培养目的获得单菌落来源的二代菌株,经过生化鉴定,确认种属正确;
(2)收集新鲜二代菌株,悬浮于冻干保护剂中,涡旋使二代菌株分散成单个菌落,且经5μm滤膜进行过滤,除去未能分散成单个菌落细胞团,制成活菌标准品母液;
(3)稀释活菌标准品母液,接种于平板培养基中,经培养对菌落进行计数,结合稀释倍数计算活菌标准品母液中菌株浓度;同时,将稀释后的活菌标准品母液制成菌球,并将菌球接种于平板培养基中,经培养对菌落进行计数,再与冻干前浓度进行比较,计算获得冻干存活率;
(4)依据冻干存活率,制备含有目标菌数的质控活菌标准品,保存于-20℃,即为MALDI-TOF MS即用型质控活菌标准品。
2.根据权利要求1所述的MALDI-TOF MS即用型质控活菌标准品,其特征在于,步骤(2)所述冻干保护剂的组分包括蔗糖、葡糖糖和牛血清白蛋白。
3.根据权利要求1所述的MALDI-TOF MS即用型质控活菌标准品,其特征在于,步骤(3)所述菌球的制备方法为:取稀释后的活菌标准品母液以20μL/球的量滴入含有液氮的烧杯中进行速冻,然后置于冷冻干燥机中进行冻干14~18小时,再放入2mL的西林瓶中,将胶塞虚掩的盖在西林瓶上,然后用冷冻干燥机进行真空轧盖。
4.根据权利要求1所述的MALDI-TOF MS即用型质控活菌标准品,其特征在于,步骤(3)所述菌球的制备方法为:取稀释后的活菌标准品母液以20μL/球的量滴入含有液氮的烧杯中进行速冻,然后置于冷冻干燥机中进行冻干16小时,再放入2mL的西林瓶中,将胶塞虚掩的盖在西林瓶上,然后用冷冻干燥机进行真空轧盖。
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