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芝麻粕提取物的制备方法及包含其作为活性成分的用于预防或改善大肠炎的食品组合物

申请号 CN202080002374.0 申请日 2020-09-23 公开(公告)号 CN114190077A 公开(公告)日 2022-03-15
申请人 株式会社皇后篮; 发明人 朴政勇; 林丽淑;
摘要 本 发明 提供了制备具有抗大肠炎功效的芝麻粕提取物的方法,其中以 水 作为 溶剂 对芝麻粕进行 超 声波 提取。根据本发明的芝麻粕提取物具有抑制体重减轻、 粪便 异常、直肠出血和大肠缩短并抑制 炎症 介质细胞因子IL‑6、IL‑1β和TNF‑α的表达的效果,即包含其作为活性成分的组合物是能够 预防 /改善或 治疗 炎性 疾病 (特别是大肠炎疾病)的组合物,因此可以有效地用于诸如药物或功能性健康食品等多种产业领域。
权利要求

1.一种芝麻粕提取物的制备方法,包括:
向芝麻粕添加溶剂以制备芝麻粕混合物;
对所述芝麻粕混合物进行声波提取;
对经所述超声波提取的提取物进行过滤后进行浓缩;以及
对经所述浓缩的浓缩液进行干燥。
2.根据权利要求1所述的芝麻粕提取物的制备方法,其中在所述超声波提取中,在频率
10kHz至50kHz、温度20℃至30℃、3小时至5小时以及振幅70%至90%的条件下进行超声波处理。
3.根据权利要求1所述的芝麻粕提取物的制备方法,其中重复执行所述超声波提取1次至5次。
4.根据权利要求1所述的芝麻粕提取物的制备方法,其中所述芝麻粕混合物通过以1:
10至1:30的重量比(w/v)混合所述芝麻粕与所述溶剂来获得。
5.根据权利要求1所述的芝麻粕提取物的制备方法,其中所述浓缩的条件是温度50℃至60℃、搅拌的每分钟转数15至25、真空度‑9托至‑7托和蒸发速率170L/小时至190L/小时。
6.根据权利要求1所述的芝麻粕提取物的制备方法,其中在所述干燥中,
以温度‑50℃至‑40℃和5至7小时的条件进行冷冻,并且
以温度25℃至35℃和48至52小时的条件进行干燥。
7.一种芝麻粕提取物,其通过根据权利要求1至权利要求6中任一项所述的制备方法来制备。
8.一种用于预防或改善炎性疾病的食品组合物,包含根据权利要求7所述的芝麻粕提取物作为活性成分。
9.根据权利要求8所述的食品组合物,其中所述食品为健康功能食品。
10.根据权利要求8所述的食品组合物,其中所述炎性疾病为大肠炎。
11.根据权利要求10所述的食品组合物,其中所述大肠炎选自由急性肠炎、细菌性大肠炎、细菌性痢疾、霍乱、肠伤寒、旅行者腹泻、病毒性大肠炎、伪膜性大肠炎、阿米巴性大肠炎、炎性肠病、溃疡性大肠炎、胶原性大肠炎、淋巴性大肠炎、缺血性大肠炎、改道性大肠炎、克罗恩氏病、白塞氏综合症、药物诱发性大肠炎、显微镜下大肠炎、淋巴细胞性大肠炎、放射性大肠炎和未定型大肠炎组成的群组。
12.一种用于预防或改善炎性疾病的健康功能食品,包含根据权利要求7所述的芝麻粕提取物作为活性成分。
13.根据权利要求12所述的健康功能食品,其中所述健康功能食品选自由饮料类、肉类、巧克、饼干类、比萨、拉面、其它面条类、口香糖类、糖果类、淇淋类、酒精饮料类、维生素复合剂和保健品类组成的群组。
14.根据权利要求12所述的健康功能食品,其中所述健康功能食品为选自由包括锭剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、液状剂、粉剂、片状剂、糊状剂、糖浆剂、凝胶剂、果冻剂、棒剂的健康功能食品制剂类、饮料类、口香糖类和糖果类组成的群组中的一种或多种剂型。
15.根据权利要求12所述的健康功能食品,其中所述炎性疾病为大肠炎。
16.根据权利要求15所述的健康功能食品,其中所述大肠炎选自由急性肠炎、细菌性大肠炎、细菌性痢疾、霍乱、肠伤寒、旅行者腹泻、病毒性大肠炎、伪膜性大肠炎、阿米巴性大肠炎、炎性肠病、溃疡性大肠炎、胶原性大肠炎、淋巴性大肠炎、缺血性大肠炎、改道性大肠炎、克罗恩氏病、白塞氏综合症、药物诱发性大肠炎、显微镜下大肠炎、淋巴细胞性大肠炎、放射性大肠炎和未定型大肠炎组成的群组。
17.一种用于预防或治疗炎性疾病的药物组合物,包含根据权利要求7所述的芝麻粕提取物作为活性成分。
18.根据权利要求17所述的药物组合物,其中所述炎性疾病为大肠炎。
19.根据权利要求18所述的药物组合物,其中所述大肠炎选自由急性肠炎、细菌性大肠炎、细菌性痢疾、霍乱、肠伤寒、旅行者腹泻、病毒性大肠炎、伪膜性大肠炎、阿米巴性大肠炎、炎性肠病、溃疡性大肠炎、胶原性大肠炎、淋巴性大肠炎、缺血性大肠炎、改道性大肠炎、克罗恩氏病、白塞氏综合症、药物诱发性大肠炎、显微镜下大肠炎、淋巴细胞性大肠炎、放射性大肠炎和未定型大肠炎组成的群组。
20.根据权利要求17所述的药物组合物,其中所述芝麻粕提取物抑制体重减轻、粪便异常、直肠出血和大肠缩短并且减少IL‑6、IL‑1β和TNF‑α的表达。
21.一种芝麻粕提取物在预防或治疗炎性疾病中的用途。
22.根据权利要求21所述的用途,其中所述芝麻粕提取物是通过根据权利要求1至权利要求6中任一项所述的制备方法来制备的。

说明书全文

芝麻粕提取物的制备方法及包含其作为活性成分的用于预防

或改善大肠炎的食品组合物

技术领域

[0001] 芝麻粕提取物的制备方法、包含其作为活性成分的用于预防或改善大肠炎的食品组合物和健康功能食品、以及包含其作为活性成分的用于预防或治疗大肠炎的组合物。

背景技术

[0002] 芝麻粕(sesame oil meal,胡麻粕)是榨油后留下的褐色副产物(物质),也被称为胡麻粕。芝麻粕的粗蛋白质含量高达约40‑50%,并且除蛋白质外,和磷含量也较高,适合所有牲畜的口味,而且可以长期保存。
[0003] 除了诸如蛋白质、膳食纤维和无机物等营养成分之外,芝麻粕还含有周知为抗化剂的大量木脂素成分。特别地,如已知,芝麻粕中包含的作为一种木脂素的芝麻素酚糖苷具有诸如抗氧化和抑制脑细胞损伤等多种功能。
[0004] 另一方面,免疫的70%在肠道中确定。肠道中的细菌会分解我们吃的食物,使其易于消化,并训练免疫系统。相反,也有可能引发癌症或腹泻。因此,只有肠道细菌均衡良好,肠才会健康,身体也会健康。最近的研究也陆续表明,肥胖和各种疑难杂症与这些肠道细菌和肠道免疫密切相关。
[0005] 炎症是一种重要的免疫反应,其通过去除有害要素并修复细胞和组织来防止损伤或感染。但是,过度的急性或慢性炎症会引发严重的疾病,例如大肠炎、关节炎、哮喘、大肠炎、帕金森氏病、阿尔茨海默氏病和败血症。
[0006] 在炎性疾病中,大肠炎(colitis)作为在大肠中发生炎症的疾病,是由诸如感染、较差的血液供应和自身免疫反应等多种原因引起的。主要症状包括腹胀、下腹痛和腹泻,有时在粪便中混有粘液、脓液或血液。大肠炎可根据病因分为感染性大肠炎和非感染性大肠炎,并且也可根据发病时间分为急性大肠炎和慢性大肠炎。急性大肠炎包括阿米巴性痢疾、细菌性痢疾、由沙氏菌或抗生素引起的伪膜性大肠炎(pseudomembranous enteritis)等,慢性大肠炎包括溃疡性大肠炎、克罗恩病、结核性、梅毒性和X射线性大肠炎等。此外,除炎性大肠病(inflammatory bowel disease,IBD)外,大肠炎还包括过敏性大肠综合症(irritable bowel syndrome,IBS)等。
[0007] 通常,针对炎性肠病,对类固醇和免疫抑制剂未见效果的患者使用生物制剂,例如抗TNF制剂。根据一项研究已知,用抗TNF制剂治疗的患者中有20‑40%会在一年内因耐药性而出现失效。另外,由于在全身起到免疫抑制作用,因此存在增加机会性感染、结核、潜伏性结核被激活等险的副作用。鉴于这些问题,需要开发无副作用并且可以长期服用的健康功能食品。
[0008] 此外,作为健康功能食品原料,迄今为止开发的有助于肠道健康的的功能性原料分为有助于肠道中有益细菌的增殖和有害细菌的抑制、免疫调节以及排便的三类,且包括异麦芽低聚糖、大豆低聚糖益生菌等。其中,益生菌是健康功能食品中唯一有助于免疫调节的原料。然而,在炎性肠病患者中,肠壁不稳定,使得在服用益生菌时,感染发生败血症或菌血症的风险较高,因此需要格外注意,目前为了解决此问题,需要研究开发多种材料的健康功能食品。
[0009] 关于芝麻粕具有多种功效的事实已进行大量研究,然而尽管其具有可利用性,但由于开发用于将其商业化的提取工艺方面的困难,目前仍将芝麻油残留物丢弃。目前尽管将一部分芝麻粕用作饲料肥料,但大部分都被丢弃,导致发生诸如额外的处理成本、环境污染等问题。
[0010] 如上所述,目前期望充分利用作为高附加值材料的芝麻粕,但是在提取物的生产方面仍存在困难,并且对其用作为用于治疗与之相关的特定疾病的药物或功能性食品的材料的研究更是微乎其微。发明内容
[0011] 技术问题
[0012] 本发明的一目的是提供一种以作为提取溶剂的芝麻粕提取物的制备方法。
[0013] 本发明的另一目的是提供一种包含芝麻粕提取物作为活性成分的用于预防或改善大肠炎的食品组合物。
[0014] 本发明的又一目的是提供一种包含芝麻粕提取物作为活性成分的用于预防或改善大肠炎的健康功能食品。
[0015] 本发明的又一目的是提供一种包含芝麻粕提取物作为活性成分的用于预防或治疗大肠炎的药物组合物。
[0016] 根据本发明的技术思想的芝麻粕提取物的制备方法要实现的技术问题不限于上述技术问题,并且本领域技术人员从以下描述中可以清楚地理解未提及的其它技术问题。
[0017] 技术方案
[0018] 为了实现上述目的,本发明提供一种芝麻粕提取物的制备方法,包括:向芝麻粕添加溶剂以制备芝麻粕混合物;对所述芝麻粕混合物进行声波提取;对经所述超声波提取的提取物进行过滤后进行浓缩;以及对经所述浓缩的浓缩液进行干燥。
[0019] 根据一实施方式,所述溶剂可以是水。
[0020] 根据一实施方式,在所述超声波提取中,可以在频率10kHz至50kHz、温度20℃至30℃、3小时至5小时以及振幅70%至90%的条件下进行超声波处理。
[0021] 根据一实施方式,可以重复执行所述超声波提取1次至5次。
[0022] 根据一实施方式,所述芝麻粕混合物可以通过以1:10至1:30的重量比(w/v)混合所述芝麻粕与所述溶剂来获得。
[0023] 另外,本发明提供根据上述方法制备的芝麻粕提取物。
[0024] 另外,本发明提供一种包含芝麻粕提取物作为活性成分的用于预防或改善炎性疾病的食品组合物。
[0025] 根据一实施方式,所述食品可以是健康功能食品。
[0026] 此外,本发明提供了一种包含芝麻粕提取物作为活性成分的用于预防或改善炎性疾病的健康功能食品。
[0027] 根据一实施方式,所述健康功能食品可以选自由饮料类、肉类、巧克、饼干类、比萨、拉面、其它面条类、口香糖类、糖果类、淇淋类、酒精饮料类、维生素复合剂和保健品类组成的群组。
[0028] 根据一实施方式,所述健康功能食品可以是选自由诸如锭剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、液状剂、粉剂、片状剂、糊状剂、糖浆剂、凝胶剂、果冻剂、棒剂等健康功能食品制剂类、饮料类、口香糖类和糖果类组成的群组中的一种或多种剂型。
[0029] 另外,本发明提供一种包含芝麻粕提取物作为活性成分的用于预防或治疗炎性疾病的药物组合物。
[0030] 根据一实施方式,所述提取物可以具有抑制体重减轻、粪便异常、直肠出血和大肠缩短并且减少炎症介质细胞因子IL‑6、IL‑1β和TNF‑α的表达的效果。
[0031] 根据一实施方式,所述炎性疾病可以是大肠炎。
[0032] 根据一实施方式,所述大肠炎可以选自由急性肠炎、细菌性大肠炎、细菌性痢疾、霍乱、肠伤寒、旅行者腹泻、病毒性大肠炎、伪膜性大肠炎、阿米巴性大肠炎、炎性肠病、溃疡性大肠炎、胶原性大肠炎、淋巴性大肠炎、缺血性大肠炎、改道性大肠炎、克罗恩氏病、白塞氏综合症、药物诱发性大肠炎、显微镜下大肠炎、淋巴细胞性大肠炎、放射性大肠炎和未定型大肠炎组成的群组。
[0033] 另外,本发明提供芝麻粕提取物在预防或治疗炎性疾病中的用途。
[0034] 根据一实施方式,芝麻粕提取物的特征在于其是通过根据本发明的一实施方式的制备方法来制备的。
[0035] 发明效果
[0036] 根据本发明的芝麻粕提取物具有缓解大肠炎的诸如体重减轻、粪便异常、直肠出血等症状,抑制大肠缩短,并且抑制炎症介质细胞因子IL‑6、IL‑1β、TNF‑α的表达的效果,即包含其作为活性成分的组合物是能够预防/改善或治疗炎性疾病(特别是大肠炎)的组合物,因此可以有效地用于诸如药物或功能性健康食品等多种产业领域。
[0037] 另外,由于芝麻粕可作为粮食作物食用,因此本发明的包含源自其的提取物作为活性成分的组合物具有即使长期使用也安全的优点。特别地,包含芝麻粕提取物的食品组合物和健康功能食品具有无副作用且可长期服用并且能够有效抑制炎性肠病的优点。
[0038] 然而,通过根据本发明的实施例的芝麻粕提取物的制备方法可获得的效果不限于以上提及的这些,并且根据以下描述,本领域技术人员能够清楚地理解未提及的其它效果。附图说明
[0039] 为了有助于更充分地理解本说明书中引用的附图,提供每个附图的简要说明。
[0040] 图1示出了通过根据本发明的一实施方式的芝麻粕提取物的制备方法大量提取芝麻粕的过程。
[0041] 图2示出了根据本发明的一实施方式的DSS大肠炎小鼠模型的所测量的体重。
[0042] 图3示出了根据本发明的一实施方式的DSS大肠炎小鼠模型的所测量的饮水量。
[0043] 图4示出了根据本发明的一实施方式的DSS大肠炎小鼠模型的所测量的粪便异常程度。
[0044] 图5示出了根据本发明一实施方式的DSS大肠炎小鼠模型的所测量的直肠出血程度。
[0045] 图6是示出根据本发明的一实施方式的DSS大肠炎小鼠模型的所测量的大肠长度。
[0046] 图7示出了根据本发明的一实施方式的DSS大肠炎小鼠模型的大肠组织H&E染色结果。
[0047] 图8示出了根据本发明的一实施方式的DSS大肠炎小鼠模型的IL‑6测量结果。
[0048] 图9示出了根据本发明的一实施方式的DSS大肠炎小鼠模型的IL‑1β测量结果。
[0049] 图10示出了根据本发明的一实施方式的DSS大肠炎小鼠模型的IFN‑γ测量结果。
[0050] 图11示出了根据本发明的一实施方式的DSS大肠炎小鼠模型的TNF‑α测量结果。

具体实施方式

[0051] 本发明可以施加多种变更并且可以具有多种实施例,即在附图中示出了特定的实施例,并且将通过详细描述来对其进行详细说明。然而,这并不旨在将本发明限制为特定的实施方式,并且本发明应当理解为包括本发明的精神和范围内所包含的所有变更、等同物和替代物。
[0052] 本发明提供一种芝麻粕提取物的制备方法,包括:向芝麻粕添加溶剂以制备芝麻粕混合物;对所述芝麻粕混合物进行超声波提取;对经所述超声波提取的提取物进行过滤后进行浓缩;以及对经所述浓缩的浓缩液进行干燥。
[0053] 在本发明中,“芝麻粕”是在对芝麻执行压榨工艺以除去芝麻油后获得的副产物。所述芝麻可以使用已在低温或高温下加热处理过的芝麻,或者未经过加热工艺的生芝麻,对此不作限定。
[0054] 根据一实施方式,所述溶剂优选使用能够有效提取芝麻粕的溶剂,例如可以选自水、具有1至4个原子水溶性醇或其混合溶剂,但最优选100%的水。当将水用作溶剂时,所具有的优点在于不需要使用昂贵的乙醇溶剂,且能够减少在用于乙醇汽化的加热过程、用于中和的附加工艺以及废水处理方面的经济成本负担。
[0055] 在本发明中,术语“提取物”还包括通过进一步对提取物进行分馏(fractionation)而获得的分馏物。也就是说,除了水、具有1至4个碳原子的低级醇、非极性溶剂或其混合溶剂的提取物外,还包括用该溶剂重新分馏的分馏物,或通过多种色谱法或具有恒定分子量截留值的超滤膜获得的分馏物。
[0056] 根据一实施方式,在超声波提取中,可以在频率10kHz至50kHz、温度20℃至30℃、3小时至5小时以及振幅%70至90%的条件下进行超声波处理。
[0057] 以往,诸如热水提取和超声波提取之类的工艺被用作从天然物中获得生理活性物质的方法,但是由于最佳提取条件根据目标物质的特性而不同,因此有必要根据目标物质建立最佳提取条件。
[0058] 另一方面,在现有的超声波提取工艺中,因使用醇和酸而产生中和和废水处理所导致的环境成本负担,并且需要较长的提取时间,因此这是非常经济性较低的方法。
[0059] 根据本发明的芝麻粕提取物的制备方法的特征在于,完全不使用有机溶剂,而仅使用水,因此不需要用于中和的附加工艺,并且还可以减少用于废水处理的经济成本负担。具体地,根据本发明的用于大量生产芝麻粕提取物、维持其稳定性以及维持提取物的生理活性功能的最佳提取条件可以优选频率10kHz至50kHz、温度20℃至30℃、3小时至5小时和振幅70%至90%,更优选频率20kHz、温度25℃、4小时和振幅80%。
[0060] 根据一实施方式,可以重复执行超声波提取1次至5次,并且优选地,可以重复执行超声波提取3次至5次。
[0061] 根据一实施方式,所述芝麻粕混合物可以通过以1:10至1:30的重量比(w/v)混合芝麻粕和溶剂来获得。具体地,可以通过将包括芝麻粕重量的约10倍至30倍(w/v),优选20倍至30倍(w/v)的纯净水的水添加至干燥芝麻粕中并混合来获得。
[0062] 根据一实施方式,经超声波提取的提取物可以用滤布过滤后进行冻干,或者使用壳体式过滤器(100μm,50μm)过滤后进行冻干。
[0063] 根据一实施方式,所述浓缩条件可以是温度50℃至60℃、搅拌RPM(每分钟转数)15至25、真空度‑9托至‑7托和蒸发速率170L/小时至190L/小时的条件,优选温度55℃至60℃、搅拌RPM 20、真空度‑8托和蒸发速率180L/小时的条件。
[0064] 根据一实施方式,在所述浓缩方法中,使用隔膜将滤液传送至搅拌浓缩器中,并且在传送完成之后,在浓缩条件下开始浓缩。浓缩完成后,对其加压并传送到液体移动罐中。
[0065] 根据一实施方式,可以通过诸如冷冻干燥喷雾干燥、低温冷空气干燥等方法进行干燥。优选地,冷冻条件可以为温度‑50℃至‑40℃和5至7小时,干燥条件可以为温度25℃至35℃和48至52小时,更优选地,冷冻条件为温度‑45℃和6小时,干燥条件可以为温度30℃和
51小时。
[0066] 根据一实施方式,在干燥方法中,将托盘放置在架子上之后,将浓缩液放入烧杯中,然后在上述条件下冷冻干燥。
[0067] 另外,本发明提供根据上述方法制备的芝麻粕提取物。芝麻粕提取物具有抑制或改善大肠炎症状的效果。
[0068] 另外,本发明提供一种用于预防或改善炎性疾病的食品组合物,其包含芝麻粕提取物作为活性成分。
[0069] 根据一实施方式,食品可以是健康功能食品。
[0070] 根据一实施方式,炎性疾病可以是大肠炎。
[0071] 在本发明中,术语“预防”是指通过施用根据本发明的包含芝麻粕提取物的组合物来抑制或延迟特定疾病(例如大肠炎)的发病的任何操作。
[0072] 如本文所用,术语“改善”是指至少降低与所治疗的状态有关的参数(例如症状程度)的任何操作。
[0073] 在本发明中,术语“炎性疾病”可以例如系统性红斑狼疮、硬皮症、溃疡性大肠炎、克罗恩病、特应性皮炎、皮癣、过敏性反应、皮炎、糖尿病性视网膜病、视网膜炎、黄斑变性、葡萄膜炎、结膜炎、中风、冠状动脉疾病、动脉硬化、动脉粥样硬化、心肌梗塞、不稳定型心绞痛、血管炎、血管狭窄、川崎病、巨细胞动脉炎、关节炎、类风湿关节炎、强直性脊柱炎、骨关节炎、骨质疏松症、过敏、糖尿病、糖尿病肾炎、肾炎、肾脏炎、干燥综合征、自身免疫性胰腺炎、牙周病、哮喘、移植物抗宿主病、慢性盆腔炎、子宫内膜炎、鼻炎、肿瘤转移、移植排斥和慢性前列腺炎等。
[0074] 在本发明中,术语“大肠炎”是指大肠发生炎症的状态,例如急性肠炎、细菌性大肠炎、细菌性痢疾、霍乱、肠伤寒、旅行者腹泻、病毒性大肠炎、伪膜性大肠炎、阿米巴性大肠炎、炎性肠病、溃疡性大肠炎、胶原性大肠炎、淋巴性大肠炎、缺血性大肠炎、改道性大肠炎、克罗恩氏病、白塞氏综合症、药物诱发性大肠炎、显微镜下大肠炎、淋巴细胞性大肠炎、放射性大肠炎或未定型大肠炎,但不限于此。
[0075] 在本发明中,术语“食品组合物”是指通过与提供给摄入其的受试者的营养素无关地、有利地作用于生物体的一种或多种功能而提供更好的健康状况的食品。因此,该食品组合物可用于预防、改善或治疗疾病或致病因素。
[0076] 本发明的食品组合物可以是含有芝麻粕提取物作为活性成分的食品组合物。根据一实施方式,基于组合物的总重量,芝麻粕提取物的含量可以为0.001重量%至99.9重量%。
[0077] 除了包含芝麻粕提取物作为活性成分之外,本发明的食品组合物可以像常规食品组合物一样包含多种调味剂或天然碳水化合物等作为附加成分。
[0078] 上述天然碳水化合物的实例包括:单糖,例如葡萄糖、果糖等;二糖,如麦芽糖、蔗糖等;和多糖,例如,诸如糊精和环糊精等常见糖以及诸如木糖醇、山梨糖醇和赤藓糖醇等糖醇。上述调味剂可以有利地使用天然调味剂(索甜),甜叶菊提取物(例如莱鲍迪甙A、甘草甜素等)和合成调味剂(糖精、阿斯巴甜等)。
[0079] 另外,优选地,除了上述活性成分之外,本发明的食品组合物可以还包含至少一种食品学上可接受的或药学上可接受的载体以配制成食品组合物。
[0080] 食品组合物的制剂形态可以是锭剂、胶囊剂、粉剂、颗粒剂、液状剂、丸剂、液剂、糖浆剂、汁剂、混悬剂、乳剂或滴剂。例如,为了配制锭剂或胶囊剂形态,可以将活性成分与口服的、无毒的药学上可接受的诸如乙醇、甘油、水等惰性载体混合。另外,如果需要或必要,混合物中还可以包含合适的粘合剂润滑剂、崩解剂和发色剂。合适的粘合剂包括但不限于淀粉、明胶、天然糖(例如,葡萄糖或β‑乳糖)、玉米甜味剂、天然和合成胶(例如阿拉伯胶、黄芪胶或油酸钠)、硬脂酸钠、硬脂酸镁、钠苯甲酸酯、乙酸钠、氯化钠等。崩解剂包括但不限于淀粉、甲基纤维素、琼脂、膨润土、黄原胶等。作为对于配制为液体溶液的组合物可接受的载体,可使用盐水、无菌水、林格氏溶液、缓冲盐溶液、白蛋白注射液、葡萄糖溶液、麦芽糖糊精溶液、甘油、乙醇或这些成分中的一种或多种的混合物,并且可以根据需要添加其他常规添加剂,例如抗氧化剂、缓冲液和抑菌剂,以适合灭菌和生物体。另外,可以另外添加稀释剂、分散剂、表面活性剂、粘合剂和润滑剂以配制成可注射剂型(例如水溶液、混悬剂、乳液)、丸剂、胶囊剂、颗粒剂或锭剂。
[0081] 以上述方式配制的本发明的食品组合物可以用作功能性食品或可以添加到各种食品中。
[0082] 可以向添加本发明的组合物的食品例如包括饮料类、肉类、巧克力、食品类、饼干类、比萨、拉面、其它面条类、口香糖类、糖果类、冰淇淋类、酒精饮料类、维生素复合剂和保健品类。
[0083] 此外,除作为活性成分的芝麻粕提取物外,食品组合物还可包括各种营养剂、维生素、矿物质(电解质)、调味剂(例如合成调味剂和天然调味剂)、发色剂和增稠剂(奶酪、巧克力等)、果胶酸和其盐、藻酸及其盐、有机酸、保护性胶体增稠剂、pH调节剂、稳定剂、防腐剂、甘油、醇、碳酸饮料中使用的碳酸化剂等。另外,本发明的食品组合物可以包含用于制备天然果汁、果汁饮料以及蔬菜饮料的果肉。
[0084] 作为本发明的活性成分的芝麻粕提取物作为天然物质,几乎没有如同化学药品的副作用,因此即使在长时间服用以赋予抗氧化功能时也可以放心使用。
[0085] 另外,本发明提供了包含芝麻粕提取物作为活性成分的食品组合物在预防或改善炎性疾病中的用途。
[0086] 本发明的食品组合物没有副作用,可以长时间服用,并且对炎性疾病具有抑制效果。另外,本发明提供一种用于预防或改善炎性疾病的健康功能食品,其包含芝麻粕提取物作为活性成分。
[0087] 根据一实施方式,炎性疾病可以是大肠炎。
[0088] 本发明的健康功能食品可以制备和加工成锭剂、胶囊剂、粉剂、颗粒剂、液状剂、丸剂等形态,以用于预防或改善炎症相关疾病。
[0089] 在本发明中,术语“健康功能食品”是指使用根据《健康功能食品法》对人体具有有用功能的原料或成分制备和加工的食品,并且表示为了在诸如对于人体结构和功能进行营养素调节或起到生理作用等保健用途方面获得有益效果而摄入。
[0090] 本发明的健康功能食品可以含有常规的食品添加剂,并且除非另有说明,否则根据食品药品监督管理局批准的食品添加剂法规的总则和通用检验方法按照所属项目的规格和标准来确定其是否适合用作食品添加剂。
[0091] 食品添加剂法规中列出的项目的实例包括:化学合成物,例如类、甘酸、柠檬酸钙、烟酸和肉桂酸;天然添加剂,例如柿子色素、甘草提取物、结晶纤维素、高粱色素和瓜尔豆胶;和混合制剂,例如L‑谷氨酸钠制剂、面条用添加剂、防腐剂、焦油色制剂等。
[0092] 例如,在锭剂形态的健康功能食品中,通过常规方法将作为本发明的活性成分的芝麻粕提取物与赋形剂、粘合剂、崩解剂和其他添加剂混合的混合物制粒,然后添加润滑剂等后模压或直接模压上述混合物。另外,如果需要,锭剂形态的健康食品可以含有矫味剂等。
[0093] 在胶囊形态的健康功能食品中,硬胶囊剂可以通过在常规的硬胶囊中填充作为本发明的活性成分的芝麻粕提取物与诸如赋形剂等添加剂的混合物来制备,软胶囊剂可以通过在胶囊基质(例如明胶)中填充提取物与诸如赋形剂等添加剂的混合物来制备。如果需要,软胶囊可以包含诸如甘油或山梨糖醇等增塑剂、发色剂、防腐剂等。
[0094] 可以通过将作为本发明的活性成分的芝麻粕提取物与赋形剂、粘合剂和崩解剂等的混合物以现有已知的方法模制来制备丸剂形态的健康功能食品,且可以根据需要用白糖或其它包衣剂对其进行包衣,也可以在表面涂上淀粉或滑石等材料。
[0095] 颗粒状的健康食品可以通过将作为本发明的活性成分的芝麻粕与赋形剂、粘合剂、崩解剂等的混合物按照现有公知的方法制成颗粒状,可以根据需要包含着香剂、矫味剂等。
[0096] 实验证明本发明的芝麻粕提取物具有优异的抗炎效果,特别是抗大肠炎效果,并且在预防或改善炎症相关疾病方面是有效的。
[0097] 根据一实施方式,健康功能食品可以是饮料类、肉类、巧克力、饼干类、比萨、拉面、其它面条类、口香糖类、糖果类、冰淇淋类、酒精饮料类、维生素复合剂和保健品类。
[0098] 根据一实施方式,健康功能食品可以是选自由诸如锭剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、液状剂、粉剂、片状剂、糊状剂、糖浆剂、凝胶剂、果冻剂、棒剂等健康功能食品制剂类、饮料类、口香糖类和糖果类组成的群组中的一种或多种剂型。
[0099] 另外,本发明提供包含芝麻粕提取物作为活性成分的健康功能食品用于预防或改善炎性疾病的用途。
[0100] 本发明的健康功能食品无副作用且可长期服用,并且对炎性疾病具有抑制效果。
[0101] 另外,本发明提供一种用于预防或治疗大肠炎的药物组合物,其包含芝麻粕提取物作为活性成分。
[0102] 根据一实施方式,可以制备包含芝麻粕提取物作为活性成分的用于预防或治疗大肠炎的药物组合物,该药物组合物包括芝麻粕提取物和药学上可接受的盐,并且可以用于抑制体重减轻、粪便异常、直肠出血以及大肠缩短,且可用于治疗和预防大肠炎。
[0103] 在本发明中,术语“药学上可接受的盐”是指通过常规方法制备的盐,并且可以通过本领域技术人员已知的方法使用而不受限制。药学上可接受的盐包括但不限于衍生自药学上或生理学上可接受的以下无机酸、有机酸和碱的盐。合适的酸的实例包括盐酸、溴酸、硫酸硝酸、高氯酸、富马酸、马来酸、磷酸、乙醇酸、乳酸、水杨酸、琥珀酸甲苯‑对‑磺酸、酒石酸、乙酸、柠檬酸、甲磺酸、甲酸、苯甲酸丙二酸‑2‑磺酸、苯磺酸等。衍生自合适的碱的盐可包括碱金属(例如钠)、碱土金属(例如镁,铵)等。
[0104] 在本发明中,术语“治疗”是指通过施用包含根据本发明的芝麻粕提取物的组合物来改善或有益地改变特定疾病(例如大肠炎)的症状的任何操作。
[0105] 在本发明中,术语“施用”是指通过任何合适的方法将本发明的组合物引入患者,并且本发明的组合物的施用途径可以是口服或非口服的多种途径,只要其可以到达靶组织即可,具体可以是口腔、直肠、局部、静脉内、腹膜内、肌内、动脉内、透皮、鼻内、吸入、眼内或皮内途径。本发明的治疗方法包括以药学有效量施用本发明的组合物。对于本领域技术人员显而易见的是,主治医师可以在正确的医学判断范围内确定适当的每日总使用量。优选地,针对特定患者的具体治疗有效量根据诸如要实现的反应的类型和程度、具体组合物(诸如视情况是否使用其他制剂)、患者的年龄、体重、总体健康状况、性别、饮食、施用时间、施用途径、组合物的分泌率、治疗时间、与具体组合物一起使用或同时使用的药物等多种因素以及医学领域众所周知的类似因素而不同地适用。因此,优选地考虑上述情况而确定适合于本发明目的的组合物的有效量。
[0106] 根据一实施方式,基于组合物的总重量,芝麻粕提取物的含量可以为0.001重量%至99.9重量%。
[0107] 另外,本发明的组合物可以应用于需要治疗和预防大肠炎的任何动物,并且该动物不仅包括人和灵长类动物,而且还包括牲畜,例如牛、猪、羊、马、狗和猫。
[0108] 本发明的药物组合物可以在临床施用过程中采用口服或非口服,并且可以以一般药物制剂的形态使用。
[0109] 药物组合物可以配制成散剂、颗粒剂、锭剂、硬胶囊剂、软胶囊剂或注射剂的形态。
[0110] 更具体地,可以分别通过常规的方法配制成口服剂型(例如散剂、颗粒剂、锭剂、胶囊剂、混悬剂、乳剂、糖浆剂、气雾剂等)、外用剂、栓剂、无菌注射液、预填充注射液的形态或冻干的形态,但不限于此。
[0111] 配制时,可以使用诸如填充、增量剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂和表面活性剂等稀释剂或赋形剂来制备。
[0112] 用于口服的固体制剂包括锭剂、丸剂、散剂、颗粒剂、胶囊剂等,并且这种固体制剂可通过在活性成分中混合至少一种赋形剂(例如淀粉、碳酸钙、蔗糖、乳糖、明胶等)来制备。另外,除了简单的赋形剂外,还可以使用润滑剂,例如硬脂酸镁和滑石。
[0113] 口服施用的液状制剂包括混悬剂、内用液剂、乳剂、糖浆剂等,除作为常规的单纯稀释剂的水和液体石蜡外,还可以同时包括各种赋形剂,例如润湿剂、甜味剂、香料、防腐剂等。非口服施用的制剂包括无菌水溶液、非水溶剂、混悬剂、乳剂、冻干制剂、栓剂等。
[0114] 本发明药物组合物的优选剂量可以根据患者的状况和体重、症状的程度、药物的形态、施用途径和持续时间适当选择。
[0115] 另外,本发明提供芝麻粕提取物在预防或治疗炎性疾病中的用途。
[0116] 本发明的芝麻粕提取物抑制体重减轻、粪便异常、直肠出血等,并抑制大肠缩短。另外,提取物能够具有减少炎症介质细胞因子IL‑6、IL‑1β和TNF‑α的表达的效果。
[0117] 本发明为了在使用DSS(右旋糖酐硫酸钠)的大肠炎小鼠模型中确认芝麻粕超声波提取物的抗大肠炎功效,测量了体重、饮水量、粪便异常、直肠出血程度、大肠长度、组织染色和细胞因子。阳性对照组使用了已知具有抗大肠炎功效的绿原酸。根据本发明的实施例,与DSS单独处理组相比,能够证实芝麻粕超声波提取物抑制大肠炎症状或改善症状的效果。
[0118] 小鼠大肠炎的主要症状是体重减轻、大肠缩短、粘膜溃疡等,呈现类似于人类的症状。在本发明的实施例中,DSS用于在小鼠中诱发炎性肠病。DSS通过改变肠膜(肠道菌群)在粘膜中引起炎症反应,在大肠炎的早期,它会导致血便、体重减轻和大肠缩短。随着大肠炎的慢性发展,粘膜会发生各种免疫反应,从而引起肠道炎症。在本发明的实施例中,将芝麻粕提取物的成分中的芝麻素和芝麻林素作为指标,与芝麻粕提取物一起测试在DSS诱导的大肠炎模型小鼠中是否具有抗大肠炎功效。
[0119] 根据本发明的实施例,与CON(正常)组相比,DSS单独处理组呈现体重减轻、粪便异常、直肠出血、大肠缩短、组织坏死和炎性细胞因子增加。相反,与DSS单独处理组相比,在用芝麻粕提取物处理的组中抑制了体重减轻,并且抑制了粪便异常、直肠出血和大肠缩短。
[0120] 通常,已知DSS对上皮细胞具有直接毒性作用,并诱导巨噬细胞和T细胞的活化,从而增加Th1和Th2细胞因子以及其他炎性介质以诱发大肠炎。在用芝麻粕提取物处理的组中发现Th1和Th2涉及的炎症介质细胞因子IL‑6、IL‑1β和TNF‑α减少,特别是TNF‑α表现出明显的细胞因子减少。由此认为芝麻粕提取物具有通过Th1途径显示抗炎功效的潜力。可以说,随着大肠炎性反应的减少,大肠缩短受到抑制,组织坏死减少。由于组织坏死减少,因此粪便异常和肛门出血也减少,这种大肠抗炎功效对抑制体重减轻起到了效果。
[0121] 因此,可以说本发明的芝麻粕提取物具有通过Th1途径的抗炎功效改善炎性肠病且有助于肠健康的潜力。
[0122] 另外,根据本发明的芝麻粕提取物作为有助于肠道健康的功能性原料具有高实用价值。具体地,与作为现有的个别认可原料的异麦芽低聚糖和大豆低聚糖相比,根据本发明的芝麻粕提取物可以通过调节肠内免疫反应有效地抑制炎性肠病,并且具有如同关于免疫力弱的患者报道的益生菌(乳酸菌)的优点:长期使用而没有各种副作用的风险。
[0123] 在下文中,将详细描述实施例和实验例以详细说明本发明。然而,可以以多种不同的形态修改根据本发明的实施例和实验例,并且以下描述的实施例和实验例旨在为本领域普通技术人员详尽地说明本发明的范围。
[0124] 实施例
[0125] 1.材料和方法
[0126] 1.1芝麻粕超声波提取物的制备
[0127] 本发明中使用的芝麻是通过接收国家食粮科学院的种子并与全罗北道高昌市的农家进行合约种植而获得的。洗涤芝麻,并在40至70℃的温度下使用螺旋压榨机分离油,然后将芝麻粕用作样品。
[0128] 将1吨水添加至获得的33kg芝麻粕中,并使用搅拌器混合。操作超声波振荡器循环泵,并在酒精浓度0%、频率20kHz、温度25℃、4小时以及振幅80%的条件下开始提取工艺,然后对一部分样品进行取样以分析提取物。此时,一部分样品通过排出泵排出。之后,用滤布过滤经超声波提取的提取物,且其一部分使用壳体式过滤器(100μm,50μm)进行过滤。
[0129] 使用隔膜泵将滤液传送至搅拌型浓缩器(由于残渣,使用袋式过滤器(20目,40目)进行过滤,并且不传送沉积在容器底部的残渣),完成传送后在温度55℃至60℃、搅拌RPM 20、真空度‑8托、蒸发速率180L/小时的条件下开始浓缩。检查液量后,当液量达到200L左右并到达搅拌器底部橡胶密封圈下方的螺栓时,终止浓缩。然后,对其加压并传送到液体移动罐中。该设备使用CIP(苛性钠)运行。
[0130] 此后,将托盘放在架子上之后,将浓缩液每次以2到2.5L添加至烧杯中,在将浓缩液添加完后检查温度传感器并取样。将冷冻条件设定为温度‑45℃、6小时,将干燥条件设定为温度30℃、51小时,然后使设备运转。冻干完成后,将原料回收到细分用塑料(袋)中。该设备通过CIP(托盘、主体,高压水洗涤)运行。
[0131] 1.2比较例的制备
[0132] 为了按提取方法寻找最佳的芝麻粕提取物,准备了芝麻粕的热水提取物和室温提取物作为比较例。
[0133] (比较例1:热水提取)将芝麻粕与水以1:30的比例混合,在100℃下进行热水提取4小时,然后在室温下冷却30分钟。
[0134] (比较例2:在室温下提取)将芝麻和水以1:30的比例混合,并在室温(25℃)下提取4小时。
[0135] 使用真空过滤系统和滤纸(Hyundai Micro,韩国)过滤热水提取物和室温提取物,然后使用真空旋转浓缩器将其浓缩至1/4(v/v)。然后,将浓缩液使用冷冻干燥器(Ilshin,韩国)干燥4天以形成粉末形态以制备比较例1和2。
[0136] 2.芝麻粕提取物的功效评价
[0137] 2.1实验动物及施用方法
[0138] 使八周大的C57BL/6小鼠雄性适应一周,然后用于实验。在实验期间,使其自由摄取饲料和饮用水,饲养室温度保持在22±2℃,湿度保持在55±15%,明暗度保持12小时。采用了芝麻粕提取物标准物质芝麻素(Sigma aldrich,美国)和芝麻林素(Sigma aldrich,美国)。实验组分为如下8组,并每天施用一次:施用蒸馏水的正常组10只;在饮水中添加2.5%DSS(右旋糖酐硫酸钠,MPBIO,加拿大)并施用的DSS单独处理组10只;分别将10、100、1000mg/kg芝麻粕超声波提取物和2.5%DSS一起施用的低、中和高处理组各10只;分别将
120mg/kg芝麻素、120mg/kg芝麻林素和2.5%DSS一起施用的芝麻素和芝麻林素处理组各10只;以及将2.5%DSS和200mg/kg绿原酸一起施用的阳性对照组10只。根据初步实验的结果,将实验期设为小鼠体重减轻20%的8天(表1)。
[0139] [表1]
[0140] 实验组设置
[0141]
[0142] 2.2样品制备
[0143] 提取物粉末在室温下保存,在即将口服之前,将其溶于含有5%二甲基亚砜(Sigma aldrich,美国)的一级蒸馏水中。
[0144] 2.3大肠炎症状的测量
[0145] 在每个实验组中测量在诱发大肠炎后的小鼠的体重、饮水量、粪便异常程度和直肠出血程度。每天在同一时间测量小鼠体重和饮水量。至于粪便异常的程度,通过在施用DSS的第8天转移到单个笼子中并诱导排便来观察粪便状态。根据粪便稀薄程度和血便的存在情况,参考Kim等人(2013年,胃肠病学(Gastroenterology))论文的测量方式计算和量化分数。至于直肠出血的程度,通过在施用DSS第8天在排便后不久使用Hema‑screen试剂盒对粪便和肛门的出血程度进行粪便潜血测试(fecal occult blood test)来量化颜色变化。
[0146] 2.4大肠长度测量
[0147] 在每个实验组中测量在诱发大肠炎后的大肠长度。在施用DSS的第8天,处死实验动物,并通过尸体解剖取出从盲肠到肛门的器官,拍照,并测量大肠的长度。
[0148] 2.5大肠的组织学检查
[0149] 对每个实验组进行组织学检查以观察在诱发大肠炎后的大肠病变的程度,例如粘膜组织增厚、发红、炎性细胞增加、由于组织坏死而引起的溃疡等。在施用DSS的第8天处死动物后,通过尸体解剖取出从盲肠到肛门的器官,用磷酸盐缓冲盐水(PBS,Gibco,美国)洗涤并在4%甲中固定2天。此后,制备组织玻片,并通过苏木精和曙红(H&E)染色来观察组织。
[0150] 2.6促炎细胞因子(IL‑6、IL‑1β、IFN‑γ、TNF‑α)的测量
[0151] 在每个实验组中进行ELISA以观察在诱发大肠炎后的促炎细胞因子的程度。在施用DSS的第8天,处死实验动物,通过尸体解剖取出从盲肠到肛门的器官,用PBS洗涤,然后加入裂解缓冲液以溶解组织,并通过离心收集上清液。
[0152] 通过ELISA测量组织的白介素(IL)‑6的浓度。通过溶解组织来获得的上清液用作样品,向每个孔中添加RD1‑14测定稀释剂50uL,然后分别添加50uL的标准品、样品和对照组品,并在室温下反应2小时。之后,添加100μL小鼠IL‑6偶联物并在室温下反应2小时,添加100μL底物溶液后在遮光状态下在室温下反应30分钟,然后分别添加50μL终止液并使用分光光度计在450nm处测量吸光度。在各过程之间,使用洗涤缓冲液将各孔洗涤3次。
[0153] 通过ELISA测量组织中的白介素(IL)‑1β浓度。将通过溶解组织而获得的上清液用作样品,并向每个孔中添加RD1N测定稀释剂50uL,并分别添加50uL的标准品、样品和对照品,并在室温下反应2小时。之后,添加100uL小鼠IL‑1β偶联物并在室温下反应2小时,添加100uL底物溶液并在室温下以遮光状态反应30分钟,然后分别添加50uL终止液并使用分光光度计在450nm处测量吸光度。在各过程之间,使用洗涤缓冲液将各孔洗涤3次。
[0154] 通过ELISA测量组织的干扰素(IFN)‑γ浓度。将通过溶解组织而获得的上清液用作样品,并且向每个孔中添加50uL的RD1‑21测定稀释剂,并且分别添加50uL的标准品、样品和对照品,并且在室温下反应2小时。之后,放入100uL小鼠IFN‑γ偶联物并在室温下反应2小时,放入100uL底物溶液并在遮光条件下于室温下反应30分钟,然后分别添加50uL终止液并使用分光光度计在450nm处测量吸光度。在各过程之间,使用洗涤缓冲液将各孔洗涤3次。
[0155] 通过ELISA测量组织肿瘤坏死因子(TNF)‑α的浓度。将通过溶解组织而获得的上清液用作样品,并且向每个孔中添加50uL的RD1‑63测定稀释剂,并且分别添加50uL的标准品,样品和对照品,并且在室温下反应2小时。之后,添加100uL小鼠TNF‑α偶联物并在室温下反应2小时,添加100uL底物溶液并在室温下以遮光状态反应30分钟,然后分别添加50uL终止液并使用分光光度计在450nm处测量吸光度。在各过程之间,使用洗涤缓冲液将各孔洗涤3次。
[0156] 2.7统计分析
[0157] 实验的所有结果均表示为平均值±标准误差。为了验证每组的显着性,进行了单向方差分析(ANOVA)检验,统计学显着性为p*<0.05,p**<0.005,p***<0.001(与CON相比),p#<0.05,p##<0.005,p###<0.001(与DSS相比)。
[0158] 3.结果分析
[0159] 3.1芝麻粕提取物的制备结果
[0160] 使用Quen's Bucket提供的芝麻粕,制备热水提取物(比较例1)和室温提取物(比较例2),冷冻干燥完成后的最终收率确认为8.1%的热水提取和7.8%的室温提取。
[0161] 4.芝麻粕提取物的功效评价
[0162] 4.1大肠炎症状的测量
[0163] 4.1.1小鼠体重测量
[0164] 每天测量体重以确定芝麻粕提取物是否具有抗大肠炎功效。参考图2,作为体重测量的结果,当与DSS单独处理组相比时,芝麻粕提取物中等浓度(100mg/kg)处理组显示出从第5天起抑制小鼠体重减轻的趋势,但是在第8天时体重无显著变化。
[0165] 4.1.2小鼠饮水量测量
[0166] 参考图3,作为测量饮水量的结果,当与DSS单独处理组相比时,芝麻粕提取物处理组没有显示出显着差异。根据该实验的结果,通过相同的饮水量可以看出,DSS引起的大肠炎诱发程度在两组之间没有差异。
[0167] 4.1.3粪便异常程度的测量
[0168] 在实验的第8天,测量小鼠的粪便异常程度,以确定芝麻粕提取物是否具有抗大肠炎功效。已知当由DSS诱发大肠炎时,出现稀薄的大便,并且当症状严重时,出现血便。参考图4,作为测量结果,DSS单独处理组中的所有小鼠均出现血便,并且在芝麻粕提取物中等浓度(100mg/kg)处理组中,具有血便症状的小鼠显着减少。
[0169] 4.1.4直肠出血程度的测量
[0170] 为了确定芝麻粕提取物是否具有抗大肠炎功效,对在大肠中炎症反应过程中发生的直肠出血进行了测定。参照图5,作为测量的结果,当与CON(正常)组相比时,所有施用DSS的组具有增加的直肠出血症状。与DSS单独处理组相比,芝麻粕提取物中等浓度(100mg/kg)处理组的直肠出血程度有所降低。
[0171] 4.2大肠长度测量
[0172] 为了确定芝麻粕提取物是否具有抗大肠炎功效,在实验的第8天对小鼠进行尸体解剖,并测量从盲肠到肛门的长度。众所周知,大肠内过度的炎症反应会缩短长度。参照图6,作为测量的结果,当与CON(正常)组相比时,在施用DSS的所有组中大肠的长度均缩短。与DSS单独处理组相比,在芝麻粕提取物中等浓度(100mg/kg)处理组中,大肠长度的缩短得到了抑制。
[0173] 4.3大肠的组织学检查
[0174] 为了确定芝麻粕提取物是否具有抗大肠炎功效,在实验的第8天对小鼠进行尸体解剖,取出大肠组织,制作组织切片并用H&E染色。已知DSS的施用会增加大肠病变,例如粘膜组织增厚、发红、大肠中的炎性细胞增加、由组织坏死引起的溃疡等。参考图7,作为测量的结果,当与DSS单独处理组相比时,在芝麻粕提取物中等浓度(100mg/kg)处理组中,诸如粘膜组织增厚、发红、炎性细胞增加、由于组织坏死引起的溃疡等大肠病变的程度倾向于降低。
[0175] 4.4促炎细胞因子(IL‑6、IL‑1β、IFN‑γ、TNF‑α)的测定
[0176] 4.4.1 IL‑6测量
[0177] 为了确定芝麻粕提取物是否具有抗大肠炎功效,在实验的第8天对小鼠进行尸体解剖以溶解大肠组织,并测量组织中促炎细胞因子(IL‑6)的浓度。已知IL‑6主要由Th2细胞产生,负责体液免疫,分泌过多时会引起炎症。参照图8,作为测量结果,当与CON(正常)组相比时,所有施用DSS的组均显示IL‑6增加。与DSS单独处理组相比,芝麻粕提取物中等浓度(100mg/kg)处理组中IL‑6的浓度降低。
[0178] 4.4.2 IL‑1β测量
[0179] 为了确定芝麻粕提取物是否具有抗大肠炎功效,在实验的第8天对小鼠进行尸体解剖以溶解大肠组织,并测量组织中促炎细胞因子(IL‑1β)的浓度。已知IL‑1β参与细胞适应性免疫,并在诱发大肠炎时增加。参照图9,作为测量结果,当与CON(正常)组相比时,所有施用DSS的组均显示IL‑1β增加。与DSS单独处理组相比,芝麻粕提取物中等浓度(100mg/kg)处理组中IL‑1β的浓度明显降低。基于该实验的结果,可以看出芝麻粕提取物通过抑制负责细胞适应性免疫的IL‑1β的增加而具有抗大肠炎功效。
[0180] 4.4.3 IFN‑γ测量
[0181] 为了确定芝麻粕提取物是否具有抗大肠炎功效,在实验的第8天对小鼠进行尸体解剖以溶解大肠组织,并测量组织中促炎细胞因子(IFN‑γ)的浓度。已知IFN‑γ主要在Th1细胞中产生,负责细胞免疫,分泌过多时会引起炎症。参照图10,作为测量结果,即使在DSS施用组中IFN‑γ也没有增加,因此可以看出在DSS施用小鼠模型中没有诱导IFN‑γ分泌。
[0182] 4.4.4 TNF‑α测量
[0183] *181为了确定芝麻粕提取物是否具有抗大肠炎功效,在实验的第8天对小鼠进行尸体解剖以溶解大肠组织,并测量组织中促炎细胞因子(TNF‑α)的浓度。已知TNF‑α主要在Th1细胞中产生,负责细胞免疫,分泌过多时会引起炎症。参照图11,作为测量结果,当与CON(正常)组相比时,所有施用DSS的组的TNF‑α均升高。与DSS单独处理组相比,芝麻粕提取物中等浓度(100mg/kg)处理组中TNF‑α的浓度显着降低。根据该实验的结果,可以看出芝麻粕提取物通过调节负责体液免疫的Th1的TNF‑α的分泌具有抗大肠炎功效。
[0184] 对于本领域普通技术人员而言显而易见的是,尽管上面已经详细说明了本发明,但是本发明的权利范围不限于此,并且在不脱离权利要求中记载的本发明的技术思想的情况下,可以进行各种修改和变型。
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