| 专利类型 | 发明公开 | 法律事件 | 公开; 实质审查; |
| 专利有效性 | 实质审查 | 当前状态 | 实质审查 |
| 申请号 | CN202411979043.9 | 申请日 | 2024-12-31 |
| 公开(公告)号 | CN119770462A | 公开(公告)日 | 2025-04-08 |
| 申请人 | 安徽工程大学; | 申请人类型 | 学校 |
| 发明人 | 李伟; 彭博; 张寻; 王英沣; 殷茂力; 张一帆; 程小龙; 李海成; | 第一发明人 | 李伟 |
| 权利人 | 安徽工程大学 | 权利人类型 | 学校 |
| 当前权利人 | 安徽工程大学 | 当前权利人类型 | 学校 |
| 省份 | 当前专利权人所在省份：安徽省 | 城市 | 当前专利权人所在城市：安徽省芜湖市 |
| 具体地址 | 当前专利权人所在详细地址：安徽省芜湖市北京中路 | 邮编 | 当前专利权人邮编：241000 |
| 主IPC国际分类 | A61K9/70 | 所有IPC国际分类 | A61K9/70 ; C08F251/00 ; C08F220/20 ; C08F220/60 ; D04H1/728 ; D04H1/42 ; A61K47/36 ; A61K47/18 ; A61K47/14 ; A61K31/16 ; A61K31/616 ; A61P31/04 ; A61P29/00 ; A61P43/00 ; A61P9/00 ; A61P35/00 ; A61P3/10 ; A61L15/28 ; A61L15/20 ; A61L15/42 ; A61L15/44 ; A61L15/46 |
| 专利引用数量 | 0 | 专利被引用数量 | 0 |
| 专利权利要求数量 | 10 | 专利文献类型 | A |
| 专利代理机构 | 蚌埠鼎力专利商标事务所有限公司 | 专利代理人 | 王琪; 颜晓玲; |
| 摘要 | 本 发明 公开一种高效抗菌的 淀粉 接枝共聚物 纳米 纤维 载药膜及其制备方法和应用，属于 生物 医学领域，具体是以高直链玉米淀粉为原料，采用Fe2+‑H2O2 氧 化还原体系，将 丙烯酸 羟丁酯和(3‑丙烯酰胺基丙基)三甲基 氯化铵 两种 单体 接枝到高直链玉米淀粉上，制备两亲性淀粉接枝共聚物，并采用静电纺制出淀粉接枝共聚物纳米纤维载药膜。本发明制备的淀粉接枝共聚物纳米纤维载药膜，淀粉接枝共聚物与药物相容性良好，药物累计释放速率明显降低，药物释放时间更加持久，可以实现药物的长时间释放以及持续性 给药 ；载药膜还具有优异的抗菌性、较高的孔隙率和较强的 水 蒸汽 透过率，用作外用 敷料 ，能提供更好的透气性及氧气渗透性，能够应用于缓释药物或医疗材料中。 | ||
| 权利要求 | 1.一种高效抗菌的淀粉接枝共聚物纳米纤维载药膜的制备方法，其特征在于，包括以下步骤： |
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| 说明书全文 | 一种高效抗菌的淀粉接枝共聚物纳米纤维载药膜的制备方法及应用 技术领域背景技术[0002] 近年来，随着经济迅速发展，石油资源日趋紧张、价格持续飞涨，以及以石油化工产品为主要原料加工制备各种高分子材料所造成的一系列重大环境污染问题，促使玉米淀粉这种价格低廉、天然可再生、环保性能好、可降解，符合环境保护和可持续发展战略要求的天然高分子材料的应用研究，日益受到人们的重视，在纺织经纱上浆、造纸、食品、塑料和医药等领域中广为使用。但是，淀粉大分子中存在大量葡萄糖环状结构，致使淀粉膜呈现“硬而脆”的特点；淀粉分子中含有大量的羟基，在每个葡萄糖单元上的2，3，6号碳上均有羟基，在分子内、分子间形成了大量的氢键，即使氢键本身的作用力较弱，但由于氢键的数量巨大，使得分子间的连接十分紧密，分子运动比较困难，造成淀粉的可加工性差。这些都严重影响淀粉在上述领域中的应用效果。 [0003] 目前，利用静电纺制备淀粉纳米纤维膜，已有一些学者进行了相关的研究。但通过静电纺丝法制备的纯淀粉纤维膜，还存在一定的缺陷，如水溶胀性大等，造成其作为药物载体时，药物很容易因淀粉纳米纤维水溶胀性大而快速分散到水中，呈现很差的药物缓释性能，无法实现药物的长效缓释。此外，纯淀粉纤维膜不具备抗菌性，当负载抗炎、止痛的药物(如阿司匹林)时，形成的载药膜不具备抗菌的性能。 发明内容[0004] 本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供一种高效抗菌的淀粉接枝共聚物纳米纤维载药膜的制备方法及应用，在淀粉分子链上接入能展示“远程作用”的接枝支链，制备出淀粉接枝聚合物；利用接枝支链的抗菌性，以及接枝支链与药物间产生静电力，来克服静电纺丝法制备纯淀粉纳米纤维载药膜存在的性能问题，能明显提高载药膜的药物缓释效果和抗菌效果。 [0005] 为解决上述技术问题，本发明提供一种高效抗菌的淀粉接枝共聚物纳米纤维载药膜的制备方法，包括以下步骤： [0007] (2)静电纺制淀粉接枝共聚物纳米纤维载药膜：将步骤(1)制备的淀粉接枝共聚物溶于极性有机溶剂中，形成淀粉接枝共聚物溶液，向淀粉接枝共聚物溶液中加入待载药物，加热至50～90℃并搅拌至溶液变透明，得纺丝液，对纺丝液进行静电纺丝得到淀粉接枝共聚物纳米纤维载药膜。 [0008] 作为上述技术方案的进一步描述，步骤(1)具体为：将高直链玉米淀粉加入酒精‑水混合液中制备成淀粉乳，调节淀粉乳的pH至3～4，氮气保护下，在30～40min内将丙烯酸羟丁酯、(3‑丙烯酰胺基丙基)三甲基氯化铵、硫酸亚铁铵水溶液和过氧化氢水溶液同时滴加到淀粉乳中，30～40℃连续绝氧反应4～8小时，调节pH值至6～7，抽滤、洗涤并粉碎滤饼后干燥，获得淀粉接枝共聚物。 [0009] 作为上述技术方案的进一步描述，酒精‑水混合液中酒精与水的体积比为(3～5):1，淀粉乳的质量分数为20～40％。 [0010] 作为上述技术方案的进一步描述，硫酸亚铁铵水溶液的质量分数为0.5％，过氧化氢水溶液的质量分数为0.1％。 [0011] 作为上述技术方案的进一步描述，所述的有机溶剂是二甲基亚砜、二甲基亚砜、N,N‑二甲基甲酰胺、N,N‑二甲基乙酰胺、吡啶或三氯甲烷。 [0012] 作为上述技术方案的进一步描述，步骤(2)所述的待载药物是需缓释的药物，例如一些治疗慢性病的药物，药物的添加量是淀粉接枝共聚物质量的8～15％。具体的，所述的待载药物是阿司匹林、布洛芬、对乙酰氨基酚、贝诺酯或吲哚美辛。 [0013] 本发明还提供这种高效抗菌的淀粉接枝共聚物纳米纤维载药膜在药物缓释系统或医疗材料中的应用，所述的药物缓释系统包括但不限于一些抗炎、止痛、解热和慢性病治疗的缓释药物，所述的医疗材料包括但不限于一些治疗外伤的缓释药敷料。 [0014] 与现有技术相比，本发明的有益效果为： [0015] (1)本发明制备的纳米纤维载药膜中，淀粉接枝共聚物与药物相容性良好； [0016] (2)与直接利用淀粉制备的载药膜相比，本发明利用淀粉接枝共聚物制备的纳米纤维载药膜的药物累计释放速率明显降低，药物释放时间更加持久，可以实现药物的长时间释放以及持续性给药，可用于治疗一些难以一次性根除的慢性疾病，如：心血管疾病、癌症、糖尿病等； [0018] (4)两种接枝单体单元的引入，使淀粉呈现亲水性特征，从而增强了淀粉与水分子间的结合作用，增加了溶胀率，使纳米纤维载药膜在人体内或不同环境中受到的影响较小，即本发明制备的淀粉接枝共聚物纳米纤维载药膜具有较强的环境稳定性； [0019] (5)本发明将(3‑丙烯酰胺基丙基)三甲基氯化铵单体接到淀粉上，起到杀菌、抗菌的作用，与利用淀粉制备的纳米纤维载药膜相比，本发明利用淀粉接枝共聚物制备的纳米纤维载药膜具有优异的抗菌性能，抑菌率基本达到100％。附图说明 [0020] 图1是制备的淀粉接枝共聚物的分子结构图； [0021] 图2是样品1、样品2、样品3和样品0的SEM图； [0022] 图3是阿司匹林的标准曲线图； [0023] 图4是样品1、样品2、样品3和样品0的纳米纤维载药膜的药物累积释放速率图； [0024] 图5是样品1、样品2、样品3和样品0的纳米纤维载药膜的孔隙率柱状图； [0026] 图7是样品1、样品2、样品3和样品0的纳米纤维载药膜的溶胀率结果柱状图； [0027] 图8是样品1、样品2、样品3和样品0的纳米纤维载药膜的水蒸气透过率结果柱状图。 [0028] 图9是样品0和样品3的纳米纤维载药膜对E.coil的抗菌效果图； [0029] 图10是样品0和样品3的纳米纤维载药膜对S.aureus的抗菌效果图。 具体实施方式[0030] 下面结合具体实施方式对本发明作进一步说明。 [0031] 实施例1 [0032] 本实施例提供一种高效抗菌的淀粉接枝共聚物纳米纤维载药膜的制备方法，包括以下步骤： [0033] (1)制备淀粉接枝共聚物：通过采用Fe2+‑H2O2氧化还原体系，将丙烯酸羟丁酯和(3‑丙烯酰胺基丙基)三甲基氯化铵两种单体接枝到高直链玉米淀粉上，制备淀粉接枝共聚物，具体为： [0034] 称取干重120g的高直链玉米淀粉，加入到体积比为3:1的酒精‑水混合液中制备成质量分数为20％的淀粉乳，以稀盐酸调节pH至3～4，转移至四口烧瓶中充分搅拌。水浴加热至40℃后，通入氮气30min并在氮气保护下将40g丙烯酸羟丁酯、20g(3‑丙烯酰胺基丙基)三甲基氯化铵、质量分数为0.5％的硫酸亚铁铵、质量分数为1.0％的过氧化氢水溶液按所需用量同时滴加到淀粉乳中，且要求在30～40min内滴加完毕，然后连续绝氧反应4小时。用6％的碳酸钠溶液调节接枝产物pH至6～7，抽滤、洗涤数次后粉碎滤饼并于烘箱中烘干装袋备用，获得淀粉接枝共聚物，分子结构如图1所示，淀粉接枝共聚物的接枝率为17.08％。 [0035] (2)静电纺制淀粉接枝共聚物纳米纤维载药膜： [0036] 称取一定量步骤(1)制备的淀粉接枝共聚物，将淀粉接枝共聚物溶于二甲基亚砜中，淀粉接枝共聚物的质量分数为15％，添加淀粉接枝共聚物质量8％的需缓释的药物阿司匹林，加热至50℃并使用磁力搅拌器进行搅拌，至溶液变得透明，静置直至脱泡，得纺丝液；调节静电纺丝设备的纺丝环境温度为60℃，电压20kV，注射器与滚筒之间的距离为15cm，推进速度为1mL/h，对纺丝液进行静电纺丝得到淀粉接枝共聚物纳米纤维载药膜，记为样品1。 [0037] 实施例2 [0038] 本实施例提供一种高效抗菌的淀粉接枝共聚物纳米纤维载药膜的制备方法，包括以下步骤： [0039] (1)制备淀粉接枝共聚物： [0040] 称取干重120g的高直链玉米淀粉，加入到体积比为5:1的酒精‑水混合液中制备成质量分数为40％的淀粉乳，以稀盐酸调节pH至3～4，转移至四口烧瓶中充分搅拌。水浴加热至40℃后，通入氮气30min并在氮气保护下将40g丙烯酸羟丁酯、30g(3‑丙烯酰胺基丙基)三甲基氯化铵、质量分数为0.5％的硫酸亚铁铵、质量分数为1.0％的过氧化氢水溶液按所需用量同时滴加到淀粉乳中，且要求在30～40min内滴加完毕，然后连续绝氧反应5小时。用6％的碳酸钠溶液调节接枝产物pH至6～7，抽滤、洗涤数次后粉碎滤饼并于烘箱中烘干装袋备用，获得淀粉接枝共聚物，分子结构如图1所示，淀粉接枝共聚物的接枝率为23.17％。 [0041] (2)静电纺制淀粉接枝共聚物纳米纤维载药膜： [0042] 称取一定量步骤(1)制备的淀粉接枝共聚物，将淀粉接枝共聚物溶于二甲基亚砜中，淀粉接枝共聚物的质量分数为40％，添加淀粉接枝共聚物质量15％的阿司匹林，加热至90℃并使用磁力搅拌器进行搅拌，至溶液变得透明，静置直至脱泡，得纺丝液；调节静电纺丝设备的纺丝环境温度为60℃，电压20kV，注射器与滚筒之间的距离为15cm，推进速度为 1mL/h，对纺丝液进行静电纺丝得到淀粉接枝共聚物纳米纤维载药膜，记为样品2。 [0043] 实施例3 [0044] 本实施例提供一种高效抗菌的淀粉接枝共聚物纳米纤维载药膜的制备方法，包括以下步骤： [0045] (1)制备淀粉接枝共聚物： [0046] 称取干重120g的高直链玉米淀粉，加入到体积比为4:1的酒精‑水混合液中制备成质量分数为30％的淀粉乳，以稀盐酸调节pH至3～4，转移至四口烧瓶中充分搅拌。水浴加热至30℃后，通入氮气30min并在氮气保护下将40g丙烯酸羟丁酯、40g(3‑丙烯酰胺基丙基)三甲基氯化铵、质量分数为0.5％的硫酸亚铁铵、质量分数为1.0％的过氧化氢水溶液按所需用量同时滴加到淀粉乳中，且要求在30～40min内滴加完毕，然后连续绝氧反应6小时。用6％的碳酸钠溶液调节接枝产物pH至6～7，抽滤、洗涤数次后粉碎滤饼并于烘箱中烘干装袋备用，获得淀粉接枝共聚物，分子结构如图1所示，淀粉接枝共聚物的接枝率为27.99％。 [0047] (2)静电纺制淀粉接枝共聚物纳米纤维载药膜： [0048] 称取一定量步骤(1)制备的淀粉接枝共聚物，将淀粉接枝共聚物溶于二甲基亚砜中，淀粉接枝共聚物的质量分数为18％，添加淀粉接枝共聚物质量10％的阿司匹林，加热至70℃并使用磁力搅拌器进行搅拌，至溶液变得透明，静置直至脱泡，得纺丝液；调节静电纺丝设备的纺丝环境温度为60℃，电压20kV，注射器与滚筒之间的距离为15cm，推进速度为 1mL/h，对纺丝液进行静电纺丝得到淀粉接枝共聚物纳米纤维载药膜，记为样品3。 [0049] 对比例： [0050] 本对比例提供一种淀粉纳米纤维载药膜的制备方法，具体为： [0051] 称取一定量高直链玉米淀粉，将高直链玉米淀粉溶于二甲基亚砜中，高直链玉米淀粉的质量分数为18％，添加淀粉质量10％的阿司匹林，加热至70℃并使用磁力搅拌器进行搅拌，至溶液变得透明，静置直至脱泡，得纺丝液；调节静电纺丝设备的纺丝环境温度为60℃，电压20kV，注射器与滚筒之间的距离为15cm，推进速度为1mL/h，对纺丝液进行静电纺丝得到淀粉纳米纤维载药膜，记为样品0。 [0052] 性能测试： [0053] 1、SEM形貌表征： [0054] SEM能够观察纳米纤维载药膜表面的形貌结构，包括纤维的形状、大小、排列方式等。对静电纺纳米纤维载药膜进行SEM分析可以直观地了解纤维的形貌特征，评估纤维的均匀性、密度和排列情况，为后续的性能测试和应用提供形貌基础，图2分别为利用高直链淀粉及3种淀粉接枝共聚物对应制备的纳米纤维载药膜(样品0、样品1、样品2与样品3)的SEM图，由图2可以看出，4种载药膜的纳米纤维表面基本光滑，无明显聚合物颗粒残留，表明高直链淀粉及3种淀粉接枝共聚物与阿司匹林相容性都良好。 [0055] 2、药物缓释性能测试： [0056] 一般而言，为了治疗一些难以一次性根除的慢性疾病，如：心血管疾病、癌症、糖尿病等，为实现药物的长时间释放，以及持续性给药，具有较低缓释速率的纳米纤维载药膜将会是最佳选择。 [0057] 2.1制备磷酸盐(PBS)缓释溶液：称取8.0g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4、0.24g KH2PO4溶于800mL蒸馏水中，用HCl调节溶液至7.4，最后加蒸馏水定容至1L，即可得0.01mol/L的PBS缓释溶液。 [0058] 2.2绘制阿司匹林标准曲线：分别称取适量的阿司匹林并溶解于PBS缓释溶液中，分别得到10mg/L、15mg/L、20mg/L、25mg/L、30mg/L和35mg/L的标准溶液，使用紫外分光光度计对这些标准溶液进行全波长吸光度测试，然后在296nm波长处测定吸光度，将吸光度作为y轴，阿司匹林溶液浓度作为x轴，绘制阿司匹林标准曲线，如图3所示，由图3可知，当阿司匹林浓度在5～100mg/L范围内时，吸光度与浓度呈现良好的线性关系，标准曲线方程为y＝2 0.0152x‑0.0233，相关系数R为0.9941。 [0059] 2.3测试样品的缓释性能：取100mL PBS缓释溶液，裁取并称取相同质量的样品1、样品2、样品3和样品0的纳米纤维载药膜，分别放入PBS缓释溶液中保持恒温37℃，分别在1h、2h、3h、6h、9h取出6mL PBS缓释溶液在紫外分光光度计296nm波长下测定其吸光度，每取出6mL PBS缓释溶液就同时补入6mL PBS缓释溶液，根据阿司匹林标准曲线计算出药物的累计释放量，进而绘制出4种样品的阿司匹林药物累计释放速率曲线，如图4所示。 [0060] 2.4缓释性能结果分析：从图4可以看出，利用高直链淀粉制备的样品0在2小时后累计释放速率就已经接近40％，而利用淀粉接枝共聚物制备的样品1、样品2和样品3的药物累计释放速率相较于样品0有明显降低，且样品3的阿司匹林药物缓释速率最低，药物释放时间最持久。样品3具有大量带正电荷的阳离子，可以与带负电荷的阿司匹林药物发生静电吸附作用，从而对药物阿司匹林的释放起到了阻碍作用，降低了阿司匹林的累计释放速率，明显提高了载药膜的药物缓释效果。 [0061] 3、孔隙率测试： [0062] 孔隙率是伤口敷料在实际应用中一个重要的衡量参数，理想伤口敷料孔隙率数值应在60～90％之间，以提供伤口更好的透气及氧气的渗透。 [0063] 3.1孔隙率测试过程：分别裁取3cm×3cm样品1、样品2、样品3和样品0的纳米纤维载药膜，在常温下静置，以达到与环境相当湿度平衡状态，防止水分蒸发或吸收导致样品中孔隙率变化。使用电子天平准确称量裁取的样品1、样品2、样品3和样品0的重量，并记录为m0。将称重后的样品分别放置在乙醇溶液中，使其完全浸泡1h后，取出浸泡的样品，用纸巾擦去表面多余的溶液，使用电子天平再次准确称重处理后的样品的重量，并记录为m1，采用如下公式计算样品的孔隙率(p，％)并绘制孔隙率图，如图5所示： [0064] [0065] 3.2孔隙率结果分析：从图5可以看出，随着接枝率的增大，孔隙率逐渐增大，主要原因是随着接枝率的增大，平均纤维直径越低，载药膜比表面积越大，孔隙率越高。 [0066] 4、水接触角测试： [0067] 水接触角测试可用于评估纳米纤维载药膜的表面性能，纳米纤维载药膜通常用作药物释放系统或医疗材料，其表面的稳定性对其功能和性能，至关重要。通常情况下，亲水性纳米纤维载药膜的药物缓释速率更快，相反，适当降低亲水性则更有利于降低药物的释放速率从而实现载药膜药物的长时间稳定释放。 [0068] 4.1水接触角测试过程：分别从样品1、样品2、样品3和样品0上裁取5×5mm2的纳米纤维载药膜样品，固定于载玻片边缘，调整载物台高度并使载玻片处于水平状态后，使水滴垂直滴落至样品中心表面，拍摄液体刚接触到样品时的正面图，如图6所示，并调整基线，计算样品1、样品2、样品3和样品0的接触角。 [0069] 4.2水接触角测试结果：从图6可以看出，样品1、样品2、样品3和样品0的纳米纤维载药膜的水接触角均小于90°，分别为33.94°、48.91°、41.41°、22.62°，随着接枝率的增大，载药膜的水接触角略微有所下降，这是由于随着接枝率的增加，亲水性阳离子基团数目增加，一定程度上增加了载药膜的亲水性；此外，随着接枝率的增加，纤维直径下降，比表面积增加，孔隙率增大，进而提高了纳米纤维载药膜的界面水吸附能力。 [0070] 5、溶胀性能测试： [0071] 溶胀性能测试可以帮助评估载药膜在不同溶液条件下的稳定性。药物缓释系统可能会在人体体内或环境中受到不同的溶液环境影响，例如不同的pH值、温度或溶液成分等，通过模拟这些条件并测试载药膜的溶胀性能，可以评估其在实际应用中的稳定性和可靠性。 [0072] 5.1溶胀性能测试过程：将样品1、样品2、样品3和样品0分别剪成2cm×2cm的大小，在温度25℃、相对湿度65％条件下静置24h，分别对剪下的样品1、样品2、样品3和样品0进行称重，记作m0，将样品1、样品2、样品3和样品0放入自身质量40倍的PBS缓释溶液中，在37℃烘箱放置24h达到饱和状态，静置悬垂30s后分别称量样品1、样品2、样品3和样品0的湿重，记作m1，根据下面公式分别计算样品1、样品2、样品3和样品0的溶胀率，并绘制溶胀率图，如图7所示： [0073] [0074] 5.2溶胀性能测试结果：由图7可以看出，随着接枝率的提高，载药膜的溶胀率呈现逐渐增加的趋势，分析原因，可能是两种接枝单体单元的引入，整体使淀粉呈现亲水性特征，从而随着接枝率增大，亲水性增强，增强了淀粉与水分子间的结合作用，使载药膜的溶胀率增加。 [0075] 6、水蒸气透过率的测试： [0076] 对纳米纤维载药膜进行水蒸气透过率测试的意义在于评估其在应用过程中的透气性能。水蒸气透过率是指单位时间内水蒸气穿过材料的速率，是衡量材料透气性能的重要指标之一。透气性能可影响药物在载药膜内药物的释放速率和释放行为，进而影响到药物的疗效和治疗效果。 [0077] 6.1水蒸气透过率测试过程：在圆柱形玻璃瓶中装入10mL磷酸盐缓冲液。将样品1、样品2、样品3和样品0分别剪成约等于容器口横截面积的尺寸(S)，容器口分别被剪下载药膜覆盖后再用胶布密封并称重记为m0，并将含有10mL磷酸盐缓冲液的开放式玻璃瓶作为空白对照组，之后，将整个装置置于37℃烘箱中，以保持相对较低的湿度条件，每隔一小时取出称重一次记为mn，共两次，根据下面公式分别计算样品1、样品2、样品3和样品0的水蒸气透过率，并绘制透过率图，如图8所示： [0078] [0079] 式中：T是质量减少后两次间隔时间，S是玻璃瓶口的面积(0.000706m2)。 [0080] 6.2水蒸气透过率测试结果：由图8可以看出，水蒸气透过率随淀粉接枝共聚物接枝率的升高先减小后升高，这是由于孔隙率与水蒸气透过率呈正相关，即孔隙率越高则水蒸气单位时间内穿过载药膜的速率越快。 [0081] 7、抗菌性能测试： [0082] 7.1细菌培养：用接种环刮取一足量的细菌，放入装有5mL液态培养液(Broth)的玻璃管中，涡旋使细菌分散均匀，玻璃管在恒温摇床中37℃振荡培养(120r/min)。细菌培养18～24h后，离心分离细菌，并用5mL的PBS缓释溶液洗涤分散细菌。最后，将分散均匀的0.1mL细菌/PBS悬浮液，加入到新的装有Broth的玻璃管中，并放入振荡箱中继续恒温培养，此为一代细菌，按照上述方法将细菌繁殖三代后备用，其中E.coil菌的接种浓度为5.7×6 6 10CFU/sample，S.aureus菌的接种浓度为2.5×10CFU/sample。 [0083] 7.2抗菌性能测试过程：分别将样品0和样品3裁剪成2.5cm×2.5cm大小，将样品放置在无菌操作平台的培养皿表面，分别滴加25μL预先培养好的细菌悬浮液；将另一片样品覆盖在上面，确保菌液与样品充分接触，等待5min后，将两片样品放入5mL的PBS缓释溶液中，溶液涡旋10s后，采用100mmol/L的PBS缓释溶液进行连续稀释，并均匀滴加至固体培养皿表面，于37℃恒温培养箱中培养24h后，对菌落数进行测定，并计算抗菌率。空白样操作与上述实验样相同，样品的抑菌率采用如下公式进行计算： [0084] [0085] 式中：N1为样品细菌菌落数(个)；N0为空白样细菌菌落数(个)。 [0086] 7.3抗菌性能测试结果：样品0和样品3的抗菌效果分别如图9、图10所示，可以看出，直接利用高直链玉米淀粉制备的载药膜(样品0)对两种菌都具有很差的抗菌性(图9a、图10a)，而接枝后淀粉接枝共聚物所制备的载药膜(样品3)具有优异的抗菌性能，对两种菌的抑菌率均基本达到100％(图9b，图10b)，原因可能是淀粉接枝共聚物上含有大量带正电荷的阳离子(3‑丙烯酰胺基丙基)三甲基氯化铵单体单元，带正电荷的阳离子单体单元可与细菌细胞壁上带负电荷的阴离子位点产生强静电作用，导致细胞溶解和死亡，使载药膜呈现高效抗菌的作用。 [0087] 以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不会使相应技术方案的本质脱离本发明的保护范围。 |
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