| 专利类型 | 发明公开 | 法律事件 | 公开; |
| 专利有效性 | 公开 | 当前状态 | 公开 |
| 申请号 | CN202510047785.6 | 申请日 | 2025-01-10 |
| 公开(公告)号 | CN120005749A | 公开(公告)日 | 2025-05-16 |
| 申请人 | 安琪酵母股份有限公司; | 申请人类型 | 企业 |
| 发明人 | 张彦; 支叶; 肖明华; 梁思威; 王冬阳; 李林; | 第一发明人 | 张彦 |
| 权利人 | 安琪酵母股份有限公司 | 权利人类型 | 企业 |
| 当前权利人 | 安琪酵母股份有限公司 | 当前权利人类型 | 企业 |
| 省份 | 当前专利权人所在省份：湖北省 | 城市 | 当前专利权人所在城市：湖北省宜昌市 |
| 具体地址 | 当前专利权人所在详细地址：湖北省宜昌市城东大道168号 | 邮编 | 当前专利权人邮编：443003 |
| 主IPC国际分类 | C12N1/20 | 所有IPC国际分类 | C12N1/20 ; A01B79/02 ; A01C21/00 ; C05G3/80 ; C12N1/16 ; C12N11/02 ; C12N11/10 ; C12N11/14 ; C09K17/40 ; C09K17/32 ; C12R1/125 ; C12R1/07 ; C12R1/865 ; C09K101/00 ; C09K109/00 |
| 专利引用数量 | 0 | 专利被引用数量 | 0 |
| 专利权利要求数量 | 16 | 专利文献类型 | A |
| 专利代理机构 | 北京格旭知识产权代理事务所 | 专利代理人 | 雒纯丹; |
| 摘要 | 本 发明 属于 微 生物 制剂技术领域，具体涉及一种适用于盐 碱 土的微生物制剂及其制备方法和应用。其中，以重量份计，其包括：4～25份枯草芽孢杆菌，4～30份酿酒 酵母 菌，40～85份增效载体和5～20份保护性载体；增效载体包括选自由酵母 代谢物 、矿源 腐殖酸 和 氨 基酸粉组成的物质组中的一种或两种以上；保护性载体包括选自由麦芽糊精、海藻糖、玉米 淀粉 和凹凸棒石组成的物质组中的一种或两种以上。本发明通过枯草芽孢杆菌和 酿酒酵母 菌协同，并结合增效载体和保护性载体，使得到的微生物制剂具有优异的改善盐碱 土壤 的作用，还具有促进 农作物 生长，以及提升农作物抗盐碱性的作用。且所述微生物菌剂的制备工艺简单易操作， 质量 稳定，且成本较低，更适于工业化生产。 | ||
| 权利要求 | 1.一种适用于盐碱土的微生物制剂，其特征在于，以重量份计，其包括：4～25份枯草芽孢杆菌，4～30份酿酒酵母菌，40～85份增效载体和5～20份保护性载体； |
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| 说明书全文 | 一种适用于盐碱土的微生物制剂及其制备方法和应用技术领域[0001] 本发明属于微生物制剂技术领域，具体涉及一种适用于盐碱土的微生物制剂及其制备方法和应用。 背景技术[0002] 盐碱土是对盐土和碱土的统称。土壤盐碱化又称土壤盐渍化，是指在自然和人为作用下土壤表层盐分含量不断增加，以致超过某一限度的地质过程和现象。盐碱土影响作 物对养分的吸收，降低土壤养分的有效性，恶化土壤的物理和生物学性质。研究表明，土壤含盐量过高会严重影响农作物的产量。 [0003] 当前盐碱地土壤生物改良技术是利用微生物的生命活动来增加土壤中氮、有效磷和有效钾的含量，将土壤中一些植物不能直接利用的物质转换为可被其吸收利用的营养物 质，通过调节作物内含物的物质水平抑制植物病原菌，提高土壤肥力，降低盐碱地土壤盐含量与pH，达到改善盐碱地土壤条件的目的。目前已有具有促生抗病的菌株被制作成微生物 肥料或微生物农药，但主要应用于常规土壤，在盐碱土壤中的应用并不理想。因此，亟需开发一种适用于盐碱地并具有优良性能的微生物制剂。 发明内容[0005] 针对上述技术问题，本发明提供了一种适用于盐碱土的微生物制剂及其制备方法和应用。 [0006] 具体来说，本发明提供了如下技术方案： [0007] 第一方面，本发明提供了一种适用于盐碱土的微生物制剂，以重量份计，其包括：4～25份枯草芽孢杆菌，4～30份酿酒酵母菌，40～85份增效载体和5～20份保护性载体；其中，所述增效载体包括选自由酵母代谢物、矿源腐殖酸和氨基酸粉组成的物质组中的一种 或两种以上；所述保护性载体包括选自由麦芽糊精、海藻糖、玉米淀粉和凹凸棒石组成的物质组中的一种或两种以上。 [0008] 优选地，以重量份计，所述微生物制剂包括4～20份枯草芽孢杆菌；更优选地，所述微生物制剂包括4～13份枯草芽孢杆菌；更进一步优选地，所述微生物制剂包括4～6份枯草芽孢杆菌。和/或 [0009] 优选地，以重量份计，所述微生物制剂包括4～20份酿酒酵母菌；更优选地，所述微生物制剂包括4～6份酿酒酵母菌。和/或 [0010] 优选地，以重量份计，所述微生物制剂包括60～85份增效载体；更优选地，所述微生物制剂包括75～85份增效载体；更进一步优选地，所述微生物制剂包括78～82份增效载体。和/或 [0011] 优选地，以重量份计，所述微生物制剂包括5～15份保护性载体；更优选地，所述微生物制剂包括5～12份保护性载体；更进一步优选地，所述微生物制剂包括8～11份保护性载体。和/或 [0012] 优选地，所述枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌枯草亚种tc‑4(Bacillus subtilis subsp.subtilis tc‑4)，于2023年04月17日保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏编号为CCTCC NO：M 2023541。和/或 [0013] 优选地，所述酿酒酵母菌为酿酒酵母高酒酵母YY(Saccharomyces cerevisiae高酒酵母YY)，于2021年02月01日保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏编号为CCTCC NO：M 2021171；或所述酿酒酵母菌为酿酒酵母d8.8(Saccharomyces cerevisiae d8.8)，其于2017年03月29日保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏编号为CCTCC NO： M2017148；更优选地，所述酿酒酵母菌为酿酒酵母高酒酵母YY(Saccharomyces cerevisiae高酒酵母YY)，于2021年02月01日保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏编号为 CCTCC NO：M 2021171。 [0014] 和/或 [0015] 优选地，其中，所述增效载体包括酵母代谢物；更优选地，所述酵母代谢物是以糖蜜为原料经发酵生产提取酵母后的代谢产物；更进一步优选地，所述糖蜜包括甜菜糖蜜；和/或，更优选地，以酵母代谢物干重计，所述酵母代谢物中黄腐酸的含量为15％～30％；更进一步优选地，以酵母代谢物干重计，所述酵母代谢物中甜菜碱的含量为6％～15％。和/或[0016] 优选地，所述保护性载体包括选自由海藻糖、玉米淀粉和凹凸棒石组成的物质组 中的一种或两种以上；更优选地，所述保护性载体包括玉米淀粉和/或凹凸棒石。 [0017] 优选地，所述微生物制剂中枯草芽孢杆菌的有效活菌数为40亿～250亿CFU/g；更优选地，所述微生物制剂中枯草芽孢杆菌的有效活菌数为40亿～200亿CFU/g。和/或 [0018] 优选地，所述微生物制剂中酿酒酵母菌的有效活菌数8亿～60亿CFU/g；更优选地，所述微生物制剂中酿酒酵母菌的有效活菌数8亿～40亿CFU/g。 [0019] 和/或 [0020] 优选地，所述枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌菌粉，其制备方法包括如下步骤： [0021] 步骤1：枯草芽孢杆菌的活化； [0023] 步骤3：将种子液接入发酵培养基中进行培养，得到发酵液，经过干燥得到枯草芽孢杆菌菌粉； [0024] 更优选地，步骤1中，以活化所用的培养基的质量计，活化所用的培养基包括蛋白胨0.5％～1.5％，牛肉膏0.1％～0.5％，氯化钠0.3％～0.7％和琼脂1.5％～2％，其余为 水；进一步优选地，活化所用的培养基包括蛋白胨1％，牛肉膏0.3％，氯化钠0.5％和琼脂 1.5％～2％，其余为水；和/或 [0025] 更优选地，步骤1中，培养的温度为35～39℃；和/或，培养的时间为21～27h；和/或[0026] 进一步优选地，将培养后的枯草芽孢杆菌进一步活化； [0027] 更进一步优选地，以活化所用的培养基的质量计，活化所用的培养基包括蛋白胨0.5％～1.5％，牛肉膏0.1％～0.5％，氯化钠0.3％～0.7％和琼脂1.5％～2％，其余为水； 最优选地，活化所用的培养基包括蛋白胨1％，牛肉膏0.3％，氯化钠0.5％和琼脂1.5％～ 2％，其余为水；和/或 [0028] 优选地，进一步活化的培养的温度为35～39℃；和/或，培养的时间为21～27h；和/或， [0029] 更优选地，步骤2中，以培养基总质量计，培养基包括0.5％～1.5％蛋白胨、0.1％～0.5％牛肉粉、0.3％～0.7％氯化钠和0.05％～0.15％葡萄糖，其余为水；更进一步优选地，培养基包括1％蛋白胨、0.3％牛肉粉、0.5％氯化钠和0.1％葡萄糖，其余为水；和/或，培养的温度为35～39℃；和/或，培养的时间为10～15h；和/或，转速为100～200rpm；和/或[0030] 更优选地，步骤3中，以培养基总质量计，培养基包括3％～5％玉米粉、3％～5％豆粕粉、0.05％～0.15％硫酸镁和0.05％～0.15％氯化钙，其余为水；更优选地，培养基包括4％玉米粉、4％豆粕粉、0.1％硫酸镁和0.1％氯化钙，其余为水；和/或，培养的温度为35～ 39℃；和/或，培养的时间为15～20h；和/或，通气量20～50L/min；和/或，罐压0.2～0.5个标准大气压。和/或优选地，所述酿酒酵母菌为酿酒酵母菌菌粉，其制备方法包括如下步骤： [0031] 步骤1：酿酒酵母菌的活化； [0032] 步骤2：将活化后的酿酒酵母菌接入培养基中进行培养，得到种子液； [0033] 步骤3：将种子液接入发酵培养基中进行培养，得到发酵液，经过分离和干燥，得到酿酒酵母菌菌粉； [0034] 更优选地，步骤1中，以活化所用的培养基总质量计，活化所用的培养基包括胨0.5％～1.5％、葡萄糖1.5％～2.5％、酵母浸出粉0.1％～1％和琼脂1.1～1.7％，其余为 水；更优选地，活化所用的培养基包括胨1％、葡萄糖2％、酵母浸出粉0.5％和琼脂1.4％，其余为水；和/或，培养的温度为28～32℃；和/或，培养的时间为21～27h；和/或， [0035] 更优选地，步骤2中，将活化后的酿酒酵母菌接入一级种子液所用的培养基中进行培养，得到一级种子液；然后，将一级种子液接种到二级种子液所用的培养基中进行培养得到二级种子液(也称为种子液)；更优选地，一级种子液的培养条件为：培养的温度为28～32℃；和/或，培养的时间为12～18h；和/或，更优选地，一级种子液所用培养基的组成为：每升水包括蔗糖90～110g、酵母浸粉18～22g、硫酸镁0.5～1.5g和硫酸锌0.5～1.5g；更进一步优选地，一级种子液所用培养基的组成为：每升水包括蔗糖100g、酵母浸粉20g、硫酸镁1g和硫酸锌1g；和/或，更优选地，二级种子液的培养条件为：以培养基的体积计，一级种子液的接种量为1％～3％；和/或，培养的温度为28～32℃；和/或，培养的时间为12～18h；和/或，二级种子液所用培养基包括甜菜糖蜜；和/或， [0036] 更优选地，步骤3中，以培养基的体积计，种子液的接种量为1％～3％；和/或，所述培养基包括甜菜糖蜜；和/或，培养的温度为28～32℃；和/或，培养的时间为12～18h。 [0037] 第二方面，本发明提供了一种适用于盐碱土的微生物制剂的制备方法，包括如下步骤： [0038] 将增效载体，枯草芽孢杆菌，酿酒酵母菌和保护性载体混合得到微生物制剂。 [0039] 优选地，一种适用于盐碱土的微生物制剂，其通过上述适用于盐碱土的微生物制剂的制备方法制备得到。 [0040] 第三方面，本发明提供了一种适用于盐碱土的微生物制剂在改良盐碱土壤中的应用。 [0041] 优选地，所述适用于盐碱土的微生物制剂的施用量为10～20kg/hm2；和/或 [0044] 第四方面，本发明提供了一种适用于盐碱土的微生物制剂在促进农作物生长和/或提升农作物耐盐碱性中的应用。 [0045] 优选地，所述农作物为豆科农作物。和/或 [0046] 优选地，所述适用于盐碱土的微生物制剂的施用量为10～20kg/hm2。和/或 [0047] 优选地，微生物制剂滴灌或冲施使用，适用于作物的幼苗生长期。 [0048] 第五方面，本发明提供了一种改良盐碱土壤的组合物，所述改良盐碱土壤的组合物包括上述适用于盐碱土的微生物制剂。 [0049] 优选地，所述改善盐碱土壤包括提升土壤肥力、降低土壤碱性和/或降低土壤电导率。 [0050] 第六方面，本发明提供了一种促进农作物生长和/或提升农作物耐盐碱性的组合物，所述促进农作物生长和/或提升农作物耐盐碱性的组合物包括上述适用于盐碱土的微 生物制剂。 [0051] 本发明的有益效果 [0052] (1)本发明通过枯草芽孢杆菌和酿酒酵母菌协同，并结合增效载体和保护性载体，使得到的微生物制剂具有优异的改善盐碱土壤的作用，具体体现在提升土壤肥力、降低土 壤碱性和降低土壤电导率。 [0053] (2)本发明提供的微生物制剂还具有促进农作物生长，以及提升农作物抗盐碱性的作用。尤其适用于豆类农作物，在豆类农作物中具有更优异的效果。 [0054] (3)本发明中，尤其是采用枯草芽孢杆菌枯草亚种tc‑4和酿酒酵母高酒酵母YY与保护性载体和增效载体结合得到的微生物制剂，并通过调控上述四种组分的含量配比，各 组分之间协同增效，使其具有更优异的改善盐碱土壤的作用，且对农作物也具有更优异的 促生作用和抗逆作用。 [0055] (4)本发明提供的微生物制剂对作物安全，对环境安全，减少化学类物质的投入，降低了环保压力。 [0056] (5)本发明提供的微生物菌剂的制备工艺简单易操作，且成本较低，更适于工业化生产。 [0057] 菌种保藏信息 [0058] 本发明中，枯草芽孢杆菌枯草亚种tc‑4(Bacillus subtilis subsp.subtilis tc‑4)，于2023年04月17日保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏编号为CCTCC NO： M 2023541，保藏地址：中国，武汉，武汉大学，邮政编码：430072；电话：(027)68754052。所述枯草芽孢杆菌枯草亚种tc‑4公开在申请号为202311624023.5的中国专利中。 [0059] 本发明中，所述酿酒酵母高酒酵母YY(Saccharomyces cerevisiae高酒酵母YY)，于2021年02月01日保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏编号为CCTCC NO：M 2021171，保藏地址：中国，武汉，武汉大学，邮政编码：430072；电话：(027)68754052。所述酿酒酵母高酒酵母YY公开在申请号为202110342874.5的中国专利中。 [0060] 本发明中，所述酿酒酵母d8.8(Saccharomyces cerevisiae d8.8)，于2017年03月29日保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏编号为CCTCCNO：M2017148，保藏地址： 中国，武汉，武汉大学，邮政编码：430072；电话：(027)68754052。所述酿酒酵母d8.8公开在申请号为201710519421.9的中国专利中。 附图说明 [0061] 图1为实施例制备得到的微生物制剂的促生效果评价图。 [0062] 图2为实施例制备得到的微生物制剂的抗逆效果评价图。 具体实施方式[0063] 如上所述，本发明的目的在于提供一种适用于盐碱土的微生物制剂及其制备方法和应用。 [0064] 本发明中，第一个目的是提供一种适用于盐碱土的微生物制剂，以重量份计，其包括：4～25份枯草芽孢杆菌，4～30份酿酒酵母菌，40～85份增效载体和5～20份保护性载体；其中，所述增效载体包括选自由酵母代谢物、矿源腐殖酸和氨基酸粉组成的物质组中的一 种或两种以上；所述保护性载体包括选自由麦芽糊精、海藻糖、玉米淀粉和凹凸棒石组成的物质组中的一种或两种以上。 [0065] 优选地，所述微生物制剂包括4～25份枯草芽孢杆菌，例如，可以为含4～22份、4～21份、4～15份或4～6份枯草芽孢杆菌。所述枯草芽孢杆菌优选为枯草芽孢杆菌枯草亚种 tc‑4。例如，在一些实施方式中，所述微生物制剂包括4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、 16、17、18、19、20、21、22、23、24或25份，或者含处于上述任意2个具体数值作为端点构成的数值范围内的枯草芽孢杆菌，优选为枯草芽孢杆菌菌粉，更优选为枯草芽孢杆菌枯草亚种 tc‑4菌粉(其是通过枯草芽孢杆菌枯草亚种tc‑4制备得到的菌粉)；和/或者， [0066] 优选地，所述微生物制剂包括4～30份酿酒酵母菌，例如，可以为含4～25份、4～22份、4～21份、4～15份或4～6份酿酒酵母菌。所述酿酒酵母菌优选为酿酒酵母高酒酵母YY。例如，在一些实施方式中，所述微生物制剂包括4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、 18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30份，或者含处于上述任意2个具体数值作为端点构成的数值范围内的酿酒酵母菌，优选为酿酒酵母菌菌粉，更优选为酿酒酵母高酒酵母 YY菌粉(其是通过Saccharomyces cerevisiae高酒酵母YY制备得到的菌粉)；和/或者， [0067] 优选地，所述微生物制剂包括40～85份增效载体，例如，可以为含50～85份、55～85份、70～85份、75～85份或77～83份增效载体。所述增效载体包括选自由酵母代谢物、矿源腐殖酸和氨基酸粉组成的物质组中的一种或两种以上；优选酵母代谢物。例如，在一些实施方式中，所述微生物制剂包括40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、 56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、 81、82、83、84或85份，或者含处于上述任意2个具体数值作为端点构成的数值范围内的增效载体，优选为酵母代谢物；和/或者， [0068] 优选地，所述微生物制剂包括5～20份保护性载体，例如，可以为含5～18份份、5～16份、5～13份、5～11份或7～13份保护性载体。所述保护性载体包括选自由麦芽糊精、海藻糖、玉米淀粉和凹凸棒石组成的物质组中的一种或两种以上；优选玉米淀粉和/或凹凸棒 石。例如，在一些实施方式中，所述微生物制剂包括5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、 18、19或20份，或者含处于上述任意2个具体数值作为端点构成的数值范围内的保护性载 体，优选为玉米淀粉和/或凹凸棒石。 [0069] 本发明中，所述增效载体是指可以促进菌剂发挥作用，一定程度上减少了菌剂的添加量，同时与其他组分协同发挥作用的一类载体。所述增效载体包括酵母代谢物、矿源腐殖酸和氨基酸粉中的一种或两种以上；优选地，所述增效载体为酵母代谢物。所述酵母代谢物是以糖蜜为原料经发酵生产提取酵母后的代谢产物；优选地，所述糖蜜包括甜菜糖蜜。最优选酵母代谢物是因为酵母代谢物含有甜菜碱等抗逆因子，还含有黄腐酸等土壤养护因子 成分，协同菌剂改善土壤环境、增强植物抗性和增产提质。更优选地，酵母代谢物含有15％～30％的黄腐酸和/或6％～15％的甜菜碱。 [0070] 本发明中，所述保护性载体是指可以提高微生物制剂中活菌的存活率，延长菌剂保质期的一类载体。在一些具体实施方式中，所述保护性载体选自麦芽糊精、海藻糖、玉米淀粉和凹凸棒石中的一种或两种以上。选用麦芽糊精、海藻糖、玉米淀粉和/或凹凸棒石作为增效载体是因为其可有效地改善土壤碱性，优化土壤的理化性质，减少土壤水分的损失。 其中，优选地，所述保护性载体为玉米淀粉和/或凹凸棒石，是因为其成本低廉，且对微生物制剂中的活菌的保护效果更显著。 [0071] 本发明中，所述枯草芽孢杆菌含有休眠体芽孢，能帮助菌体渡过不良环境，产生促生类物质IAA，促进植物生长，产生抗逆类物质，提升植物对不良环境的抵抗力。所述酿酒酵母菌含大量的海藻糖、葡聚糖、甘露寡糖、促生物质IAA、抗逆物质水杨酸和茉莉酸等物质，提升酵母菌体本身和应用植物的抗逆性。枯草芽孢杆菌和酿酒酵母菌这两种菌自身抗逆性强，能够在盐碱环境中存活，共同产生促生和抗逆物质，两种菌协同作用提升了植物在盐碱环境中的生长性能，并能产生多糖类物质，来改良土壤结构。 [0072] 本发明中，采用枯草芽孢杆菌枯草亚种tc‑4和酿酒酵母高酒酵母YY与保护性载体和增效载体结合得到的微生物制剂，并通过调控上述四种组分的含量配比，各组分之间协 同增效，使其具有优异的改善盐碱土壤的作用，且对农作物具有优异的促生作用和抗逆作 用，且各组分的含量和/或组分的种类在优选的范围内取得的效果更好，在更优选的范围 内，对盐碱土壤的改善程度以及对农作物的促生和抗逆作用可以进一步提升。优选地，本发明的微生物制剂尤其适用于豆类作物，施用在豆类作物中具有更优异的效果。 [0073] 本发明的第二个目的是提供一种微生物制剂的制备方法，其包括如下步骤：依次投入增效载体，枯草芽孢杆菌菌粉，酿酒酵母菌粉和保护性载体，在混料仓内混合5～8min，得到微生物制剂。 [0074] 优选地，所述枯草芽孢杆菌菌粉的制备方法包括如下步骤： [0075] 步骤1：将枯草芽孢杆菌接种在包括蛋白胨0.5％～1.5％，牛肉膏0.1％～0.5％，氯化钠0.3％～0.7％、琼脂1.5％～2％和水的培养基中，在温度为35～39℃下培养21～ 27h；将得到的单菌落接种在在包括蛋白胨0.5％～1.5％，牛肉膏0.1％～0.5％，氯化钠 0.3％～0.7％、琼脂1.5％～2％和水的培养基中，在温度为35～39℃下继续培养21～27h，得到活化后的枯草芽孢杆菌； [0076] 步骤2：将活化后的枯草芽孢杆菌的单菌落接种在包括0.5％～1.5％蛋白胨、0.1％～0.5％牛肉粉、0.3％～0.7％氯化钠、0.05％～0.15％葡萄糖和水的培养基中，在温度35～39℃和转速为100～200rpm下培养10～15h，得到种子液； [0077] 步骤3：将种子液全部接种量接种在包括3％～5％玉米粉、3％～5％豆粕粉、0.05％～0.15％硫酸镁、0.05％～0.15％氯化钙和水的培养基中，在温度为35～39℃，通气量为20～50L/min和罐压为0.2～0.5个标准大气压的条件下培养15～20h，得到发酵液。将 发酵液经过喷雾干燥即为枯草芽孢杆菌粉。 [0078] 和/或，优选地，所述酿酒酵母菌菌粉的制备方法包括如下步骤： [0079] 步骤1：将酿酒酵母菌接种在包括胨0.5％～1.5％、葡萄糖1.5％～2.5％、酵母浸出粉0.1％～1％、琼脂1.1％～1.7％和水的培养基中，在温度为28～32℃下培养21～27h； [0080] 步骤2：将活化后的酿酒酵母菌接入每升水包括蔗糖90～110g、酵母浸粉18～22g、硫酸镁0.5～1.5g和硫酸锌0.5～1.5g的一级种子液所用培养基中进行培养，培养的温度为28～32℃，培养的时间为12～18h，得到一级种子液；然后，以培养基的体积计，将一级种子液按照体积百分比为1％～3％的接种量接种到含有甜菜糖蜜的二级种子液所用培养基中 进行培养，培养的温度为28～32℃，培养的时间为12～18h，得到二级种子液(也称为种子 液)； [0081] 步骤3：以培养基的体积计，将种子液按照体积百分比为1％～3％的接种量接入含有甜菜糖蜜的发酵培养基中进行培养，在温度为28～32℃下培养12～18h，得到发酵液，经过分离和转鼓挤压干燥，得到酿酒酵母菌菌粉。 [0082] 本发明中，第三个目的是提供一种适用于盐碱土的微生物制剂在改良盐碱土壤、促进农作物生长和/或提升豆科农作物耐盐碱性中的应用。微生物制剂滴灌或冲施使用，适 2 用于作物的幼苗生长期，施用量为10～20kg/hm。 [0084] 表1实验材料及出售商 [0085] [0086] 本发明中，所述NA平板即为购买得到的营养琼脂NA，以质量百分比计，营养琼脂NA包括其含有蛋白胨1％，牛肉膏0.3％，氯化钠0.5％，琼脂1.5％，其余为水。所述NB培养基为购买得到的营养肉汤NB，以质量百分比计，营养肉汤NB包括1％蛋白胨、0.3％牛肉粉、0.5％氯化钠，0.1％葡萄糖，其余为水。所述YPD平板即为购买得到的YPD琼脂(酵母浸出粉胨葡萄糖培养基)，以质量百分比计，YPD琼脂包括胨1％、葡萄糖2％、酵母浸出粉0.5％和琼脂1.4％，其余为水。 [0087] 本发明对甜菜糖蜜的来源不做任何限定，可以采用任意商购的或自制的甜菜糖蜜均可用于本发明中。优选地，本发明人经研究发现，只要商购或自制的甜菜糖蜜的甜菜碱含量≥3wt％即可用在本发明中；更优选地，甜菜糖蜜中甜菜碱的含量为3wt％～8wt％。在一些具体实施方式中，所述甜菜糖蜜来自中粮糖业。 [0088] 本发明中，酵母代谢物包括酵母多糖(以β‑葡聚糖+甘露聚糖计)≥2.5％，黄腐酸≥15％，甜菜碱≥6％，中量元素(Ca+Mg)≥1％，总养分(N、P2O5和K2O)≥10％，有机质含量≥15％，水不溶物≤5％。 [0089] 在一些具体实施方式中，本发明对酵母代谢物的来源不做任何的限定，可以采用任意商购的或自制的酵母代谢物均可用于本发明中。具体地，本发明人经研究发现，只要商购或自制的酵母代谢物的甜菜碱含量≥6％和黄腐酸≥15％即可用在本发明中。 [0091] 更优选地，所述酵母代谢物还包括钙4％～5.5％，镁0.1％～1％，钠7％～8％，β‑葡聚糖1％～2％，甘露聚糖2％～3％，腐殖酸2％～3％，钾13～15％，磷0.1％～1％，硫3％～4％，氯离子15～18％，和/或水解氨基酸9％～13％。 [0092] 本发明中，购买自伊犁福邦新农业有限公司的酵母代谢物的检测成分如下表2所示： [0093] 表2酵母代谢物的检测成分 [0094] [0095] [0096] [0097] 本发明中，甘露聚糖的检测方法包括如下步骤： [0098] 样品处理：准确称取400mg(精确至0.1mg)样品放入一个20mL的耐热玻璃制的带螺帽的小试管中，加入6.0mL盐酸(37％)，小心的将小瓶盖紧后用旋涡混合器混合，得到均一的悬浮液。将小瓶放入30℃水浴中处理45min，每15min用旋涡混合器振荡混合一次。然后将悬浮物定量的转移到200mL杜氏瓶中，用约100mL～120mL的水，分几次洗涤小试管，洗涤液并入杜氏瓶中。将杜氏瓶放入高压灭菌锅，121℃下处理60min。取出后冷却，用氢氧化钠溶液将溶液调pH到6～7，然后定容至200mL。使用0.45微米孔径的醋酸纤维素膜过滤备用。 [0099] 色谱条件：采用纯水做为流动相，流速为0.5mL/min，柱温80℃，待仪器基线平稳后再进样。 [0100] 标准曲线的绘制：吸取甘露糖标准溶液(1g/L，称取甘露糖0.2500g，用纯水定容至250mL)1、2、3、4、5mL到10mL容量瓶中，用高纯水定容到刻度，得到甘露糖为100、200、300、 400、500mg/L的标准系列。在上述色谱条件下准确进样20μL，得到色谱峰面积和标准物质量浓度之间的回归方程，绘制标准曲线。 [0101] 样品及对照品的测定：在同样的色谱条件下，将处理好的样品注入色谱仪中，记录各色谱峰的保留时间和峰面积。用糖标样色谱峰的保留时间定性，用糖标样色谱峰的峰面积来定量。 [0102] 结果计算：甘露聚糖的含量按下式计算： [0103] [0104] 式中： [0105] X‑‑‑样品中甘露聚糖的含量，％； [0106] A‑‑‑根据样品溶液的峰面积，在标准曲线上查得的样品溶液甘露糖的含量，mg/L； [0107] m‑‑‑称取样品的质量，g； [0108] 0.2‑‑‑样品对照品处理后定容的体积，L； [0109] 0.9‑‑‑将甘露糖换算成甘露聚糖的系数。 [0110] 本发明中，酵母浸粉中总氮含量≥9.0％、氨基氮含量≥3.0％、灰分含量≤15％、氯化钠含量≤2％和水分含量≤6％。在一些具体实施方式中，本发明对酵母浸粉的来源不做任何的限定，可以采用任意商购的或自制的酵母浸粉均可用于本发明中。具体地，本发明人经研究发现，只要商购或自制的酵母浸粉的总氮含量≥9.0％和/或氨基氮含量≥3.0％ 即可用在本发明中。优选地，酵母浸粉的总氮含量为9％～15％，和/或氨基氮含量3％～ 5％。 [0111] 优选地，以酵母浸粉的重量计，所述酵母浸粉包括微量元素41000～42000mg/kg。更优选地，所述微量元素包括钾32760～32770mg/kg、钠5836～5846mg/kg、钙533～543mg/kg和镁2029～2039mg/kg。更进一步优选地，所述微量元素包括钾32767.33mg/kg、钠 5841.92mg/kg、钙538.71mg/kg和镁2034.06mg/kg。 [0112] 和/或，优选地，以酵母浸粉的重量计，所述酵母浸粉包括维生素5000～6000ppm；更优选地，所述酵母浸粉包括维生素B1的含量为2～3ppm(检测方法：GB5009.84‑2016食品安全国家标准食品中维生素B1的测定第一法高效液相色谱法)，维生素B2的含量为38～ 44ppm(检测方法：GB5009.85—2016食品安全国家标准食品中维生素B2的测定第一法高效 液相色谱法)，维生素B5的含量为78～84ppm(检测方法：GB 5009.210‑2023食品安全国家标准食品中泛酸的测定第三法微生物法)，维生素B6的含量为10～13ppm(检测方法：GB 5009.154‑2023食品安全国家标准食品中维生素B6的测定第三法高效液相色谱‑荧光检测 法)，维生素B7的含量为4～7ppm(检测方法：GB 5009.259‑2023食品安全国家标准食品中生物素的测定第二法微生物法)，维生素B9的含量为23～27ppm(检测方法：GB 5009.211‑2022食品安全国家标准食品中叶酸的测定)，维生素B12的含量为0.15～0.25μg/100g(检测方 法：GB 5009.285‑2022食品安全国家标准食品中维生素B12的测定第一法液相色谱法)，胆碱的含量为3010～3025ppm(检测方法：GB 5413.20‑2022食品安全国家标准婴幼儿食品和 乳品中胆碱的测定第三法液相色谱‑串联质谱法)，肌醇的含量为2010～2020ppm(检测方 法：GB 5009.270‑2023食品安全国家标准食品中肌醇的测定第一法气相色谱法)，和/或烟酸的含量为310～325ppm(检测方法：GB 5009.89‑2023食品安全国家标准食品中烟酸和烟 酰胺的测定第一法高效液相色谱法)。更进一步优选地，所述酵母浸粉包括：维生素B1的含量为2.6ppm，维生素B2的含量为41.6ppm，维生素B5的含量为81.3ppm，维生素B6的含量为 11.5ppm，维生素B7的含量为5.79ppm，维生素B9的含量为25.1ppm，维生素B12的含量为0.21μg/100g，胆碱的含量为3017ppm，肌醇的含量为2016ppm，和/或烟酸的含量为318ppm。 [0113] 和/或，优选地，以酵母浸粉的重量计，所述酵母浸粉包括57％～61％的水解氨基酸。更优选地，所述酵母浸粉包括59.16％的水解氨基酸。 [0114] 本发明中，土壤中可利用总养分的含量为水解性氮、有效磷和速效钾的总含量，其中水解性氮含量的测定参照中华人民共和国林业行业标准LY/T1228‑2015森林土壤氮的测定中的水解性氮的测定；有效磷含量的测定参照中华人民共和国农业行业标准NY/ T1121.7‑2014土壤检测地7部分：土壤中有效磷的测定；速效钾含量的测定参照中华人民共和国农业行业标准NY/T889‑2004土壤速效钾和缓效钾含量的测定。土壤中有机质含量的测定参照中华人民共和国农业行业标准NY/T 1121.6‑2006土壤检测第6部分：土壤有机质的 测定。土壤中电导率参照中华人民共和国国家环境保护标准HJ 802‑2017土壤电导率的测 定电极法。土壤中可溶性盐浓度采用电导率仪进行测试。土壤pH参照中华人民共和国农业 行业标准NY/T 1121.2‑2006土壤检测第2部分：土壤pH的测定。 [0115] 为了更好地理解本发明的技术方案，下面结合具体实施例对本发明的技术方案进行详细说明。 [0116] 实施例1 [0117] (1)一种适用于盐碱土的微生物制剂的配方 [0118] 一种适用于盐碱土的微生物制剂，以重量份计，其包括80份酵母代谢物、5份枯草芽孢杆菌菌粉、5份酿酒酵母菌菌粉和10份玉米淀粉。其中，酵母代谢物中黄腐酸的含量为 26.12％，甜菜碱的含量为11.9％。 [0119] 其中，所述枯草芽孢杆菌菌粉中的枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌枯草亚种tc‑4(Bacillus subtilis subsp.subtilis tc‑4)，于2023年04月17日保藏于中国典型培养物 保藏中心(CCTCC)，保藏编号为CCTCC NO：M 2023541，保藏地址：中国，武汉，武汉大学，邮政编码：430072；电话：(027)68754052。所述枯草芽孢杆菌枯草亚种tc‑4公开在申请号为 202311624023.5的中国专利中。 [0120] 所述枯草芽孢杆菌菌粉的制备方法包括如下步骤： [0121] 步骤1：使用接种环蘸取在温度为‑80℃下甘油冻存保藏的枯草芽孢杆菌枯草亚种tc‑4菌液，在NA平板(即购买得到的营养琼脂NA)上进行划线培养，在温度为37℃下培养 24h，获得单菌落。挑取单菌落继续在NA平板上划线培养，在温度为37℃下培养24h，获得活化的枯草芽孢杆菌tc‑4。 [0122] 步骤2：接种环挑取一个完整的单菌落，接入装有200mL的NB培养基的三角瓶中，置摇床中，在温度为37℃下震荡培养12h，转速为160r/min，获得种子液。 [0123] 步骤3：先向30L的发酵罐中装入液体培养基15L，所述液体培养基的制备方法包括：以培养基的总质量计，加入4％玉米粉、4％豆粕粉、0.1％硫酸镁和0.1％氯化钙，然后再加自来水至15L，调节pH为7，在温度为121℃下高温高压灭菌30min。然后将步骤2得到的 200mL种子液全部转接进入30L发酵罐中进行发酵培养，培养条件为：通气量20～50L/min，罐压0.2～0.5个标准大气压，在温度为37℃下通风发酵17～19h。最后，将发酵液经过喷雾干燥即为枯草芽孢杆菌粉。 [0124] 其中，所述酿酒酵母菌菌粉中的酿酒酵母菌为酿酒酵母高酒酵母YY，即Saccharomyces cerevisiae高酒酵母YY，于2021年02月01日保藏于中国典型培养物保藏中 心(CCTCC)，保藏编号为CCTCC NO：M 2021171，保藏地址：中国，武汉，武汉大学，邮政编码： 430072；电话：(027)68754052。所述酿酒酵母高酒酵母YY公开在申请号为202110342874.5的中国专利中。 [0125] 所述酿酒酵母菌菌粉的制备方法包括如下步骤： [0126] 步骤1：使用接种环蘸取在温度为‑80℃下甘油冻存保藏的酿酒酵母高酒酵母YY(即Saccharomyces cerevisiae高酒酵母YY)菌液，在YPD琼脂培养基上进行平板划线，在温度30℃下培养24h后获得单菌落。 [0127] 步骤2：接种环挑取一个完整的单菌落，接种到一级种子液所用培养基中进行培养，在温度为30℃下培养15h，得到酵母菌一级种子液。所述一级种子液所用培养基的制备方法包括：将蔗糖100g、酵母浸粉20g、硫酸镁1g和硫酸锌1g溶解于1L水中，用浓硫酸调节pH为4.8。 [0128] 以培养基的体积计，将酵母菌一级种子液按照1％～3％的接种量接种到二级种子液所用培养基中进行培养，在温度为30℃下培养15h，用分离机对培养液进行分离，取沉淀物用水洗涤后得到酵母菌种子液(也称为二级种子液)。其中，所述二级种子液所用培养基 的制备方法包括：取甜菜糖蜜8L，用浓硫酸调节pH为5.5。 [0129] 步骤3：以培养基的体积计，将酵母菌种子液按照1％～3％的接种量接种到发酵罐中进行发酵，在温度为30℃下发酵15h，得到酵母液。其中，发酵罐中的培养基的制备方法包括如下步骤：取甜菜糖蜜，用浓硫酸调节pH为5.5。使用分离机对酵母液进行分离，取沉淀物用水进行洗涤，再经过转鼓挤压干燥即为酿酒酵母菌粉。 [0130] (2)一种适用于盐碱土的微生物制剂的制备方法 [0131] 一种适用于盐碱土的微生物制剂的制备方法，其包括如下步骤： [0132] 向混料仓投入上述酵母代谢物，枯草芽孢杆菌菌粉，酿酒酵母菌菌粉，和玉米淀粉，混合5～8min，得到微生物制剂。 [0133] 实施例2 [0134] (1)一种适用于盐碱土的微生物制剂的配方 [0135] 一种适用于盐碱土的微生物制剂，以重量份计，其包括40份酵母代谢物、20份枯草芽孢杆菌菌粉、13份酿酒酵母菌菌粉、5份玉米淀粉和10份凹凸棒石。其中，酵母代谢物中黄腐酸的含量为26.12％，甜菜碱的含量为11.9％。 [0136] 其中，所述枯草芽孢杆菌菌粉中的枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌枯草亚种tc‑4(Bacillus subtilis subsp.subtilis tc‑4)。枯草芽孢杆菌菌粉的制备方法和实施例1中的枯草芽孢杆菌菌粉的制备方法相同。 [0137] 其中，所述酿酒酵母菌菌粉中的酿酒酵母菌为酿酒酵母高酒酵母YY(Saccharomyces cerevisiae高酒酵母YY)。酿酒酵母菌菌粉的制备方法和实施例1中的酿 酒酵母菌菌粉的制备方法相同。 [0138] (2)一种适用于盐碱土的微生物制剂的制备方法 [0139] 一种适用于盐碱土的微生物制剂的制备方法，其包括如下步骤： [0140] 向混料仓投入上述酵母代谢物，枯草芽孢杆菌菌粉，酿酒酵母菌菌粉，玉米淀粉和凹凸棒石，混合5～8min，得到微生物制剂。 [0141] 实施例3 [0142] (1)一种适用于盐碱土的微生物制剂的配方 [0143] 一种适用于盐碱土的微生物制剂，以重量份计，其包括60份酵母代谢物、13份枯草芽孢杆菌菌粉、20份酿酒酵母菌菌粉和5份玉米淀粉。其中，酵母代谢物中黄腐酸的含量为26.12％，甜菜碱的含量为11.9％。 [0144] 其中，所述枯草芽孢杆菌菌粉中的枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌枯草亚种tc‑4(Bacillus subtilis subsp.subtilis tc‑4)。枯草芽孢杆菌菌粉的制备方法和实施例1中的枯草芽孢杆菌菌粉的制备方法相同。 [0145] 其中，所述酿酒酵母菌菌粉中的酿酒酵母菌为酿酒酵母高酒酵母YY(Saccharomyces cerevisiae高酒酵母YY)。酿酒酵母菌菌粉的制备方法和实施例1中的酿 酒酵母菌菌粉的制备方法相同。 [0146] (2)一种适用于盐碱土的微生物制剂的制备方法 [0147] 一种适用于盐碱土的微生物制剂的制备方法，其包括如下步骤： [0148] 向混料仓投入上述酵母代谢物，枯草芽孢杆菌菌粉，酿酒酵母菌菌粉和玉米淀粉，混合5～8min，得到微生物制剂。 [0149] 实施例4 [0150] (1)一种适用于盐碱土的微生物制剂的配方 [0151] 一种适用于盐碱土的微生物制剂，以重量份计，其包括80份酵母代谢物、25份枯草芽孢杆菌菌粉、30份酿酒酵母菌菌粉和10份玉米淀粉。其中，酵母代谢物中黄腐酸的含量为26.12％，甜菜碱的含量为11.9％。 [0152] 其中，所述枯草芽孢杆菌菌粉中的枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌枯草亚种tc‑4(Bacillus subtilissubsp.subtilis tc‑4)。枯草芽孢杆菌菌粉的制备方法和实施例1中 的枯草芽孢杆菌菌粉的制备方法相同。 [0153] 其中，所述酿酒酵母菌菌粉中的酿酒酵母菌为酿酒酵母高酒酵母YY(Saccharomyces cerevisiae高酒酵母YY)。酿酒酵母菌菌粉的制备方法和实施例1中的酿 酒酵母菌菌粉的制备方法相同。 [0154] (2)一种适用于盐碱土的微生物制剂的制备方法 [0155] 一种适用于盐碱土的微生物制剂的制备方法，其包括如下步骤： [0156] 向混料仓投入上述酵母代谢物，枯草芽孢杆菌菌粉，酿酒酵母菌菌粉和玉米淀粉，混合5～8min，得到微生物制剂。 [0157] 实施例5 [0158] (1)一种适用于盐碱土的微生物制剂的配方 [0159] 一种适用于盐碱土的微生物制剂，以重量份计，其包括80份酵母代谢物、5份枯草芽孢杆菌菌粉、5份酿酒酵母菌菌粉和10份麦芽糊精。其中，酵母代谢物中黄腐酸的含量为 26.12％，甜菜碱的含量为11.9％。 [0160] 其中，所述枯草芽孢杆菌菌粉中的枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌枯草亚种tc‑4(Bacillus subtilis subsp.subtilis tc‑4)。枯草芽孢杆菌菌粉的制备方法和实施例1中的枯草芽孢杆菌菌粉的制备方法相同。 [0161] 其中，所述酿酒酵母菌菌粉中的酿酒酵母菌为酿酒酵母高酒酵母YY(Saccharomyces cerevisiae高酒酵母YY)。酿酒酵母菌菌粉的制备方法和实施例1中的酿 酒酵母菌菌粉的制备方法相同。 [0162] (2)一种适用于盐碱土的微生物制剂的制备方法 [0163] 一种适用于盐碱土的微生物制剂的制备方法，其包括如下步骤： [0164] 向混料仓投入上述酵母代谢物，枯草芽孢杆菌菌粉，酿酒酵母菌菌粉和玉米淀粉，混合5～8min，得到微生物制剂。 [0165] 实施例6 [0166] 与实施例1相比，将由枯草芽孢杆菌枯草亚种tc‑4制备得到的枯草芽孢杆菌菌粉替换为商购得到的枯草芽孢杆菌粉(粉状，商品名称：枯草芽孢杆菌，出售厂家：山东蔚蓝生物科技有限公司)。具体如下： [0167] (1)一种适用于盐碱土的微生物制剂的配方 [0168] 一种适用于盐碱土的微生物制剂，以重量份计，其包括80份酵母代谢物、5份枯草芽孢杆菌菌粉(商购得到)、5份酿酒酵母菌菌粉和10份玉米淀粉。其中，酵母代谢物中黄腐酸的含量为26.12％，甜菜碱的含量为11.9％。 [0169] 其中，所述枯草芽孢杆菌菌粉为商购得到的枯草芽孢杆菌粉，出售厂家：山东蔚蓝生物科技有限公司。 [0170] 其中，所述酿酒酵母菌菌粉中的酿酒酵母菌为酿酒酵母高酒酵母YY(Saccharomyces cerevisiae高酒酵母YY)。酿酒酵母菌菌粉的制备方法和实施例1中的酿 酒酵母菌菌粉的制备方法相同。 [0171] (2)一种适用于盐碱土的微生物制剂的制备方法 [0172] 一种适用于盐碱土的微生物制剂的制备方法，其包括如下步骤： [0173] 向混料仓投入上述酵母代谢物，枯草芽孢杆菌菌粉(商购得到)，酿酒酵母菌菌粉和玉米淀粉，混合5～8min，得到微生物制剂。 [0174] 实施例7 [0175] 与实施例4相比，将酿酒酵母菌菌粉中由酿酒酵母高酒酵母YY(Saccharomyces cerevisiae高酒酵母YY)替换为酿酒酵母d8.8(Saccharomyces cerevisiae d8.8)，其于 2017年03月29日保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏编号为CCTCC NO： M2017148，保藏地址：中国，武汉，武汉大学，邮政编码：430072，电话：(027)68754052。所述酿酒酵母d8.8公开在申请号为201710519421.9的中国专利中。具体如下： [0176] (1)一种适用于盐碱土的微生物制剂的配方 [0177] 一种适用于盐碱土的微生物制剂，以重量份计，其包括80份酵母代谢物，25份枯草芽孢杆菌菌粉，30份酿酒酵母菌菌粉和10份玉米淀粉。其中，酵母代谢物中黄腐酸的含量为26.12％，甜菜碱的含量为11.9％。 [0178] 其中，所述枯草芽孢杆菌菌粉中的枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌枯草亚种tc‑4(Bacillus subtilissubsp.subtilis tc‑4)。枯草芽孢杆菌菌粉的制备方法和实施例1中 的枯草芽孢杆菌菌粉的制备方法相同。 [0179] 其中，所述酿酒酵母菌菌粉中的酿酒酵母菌为酿酒酵母d8.8(Saccharomyces cerevisiae d8.8)。 [0180] 所述酿酒酵母菌菌粉的制备方法包括如下步骤： [0181] 步骤1：使用接种环蘸取在温度为‑80℃下甘油冻存保藏的酿酒酵母d8.8菌液，在YPD琼脂上进行划线，在温度为30℃下培养24h后获得单菌落。 [0182] 步骤2：接种环挑取一个完整单菌落，接种到一级种子液所用培养基中进行培养，在温度为30℃下培养15h，得到酵母菌一级种子液。所述一级种子液所用培养基的制备方法包括：蔗糖100g、酵母浸粉20g、硫酸镁1g和硫酸锌1g溶解于1L水中，用浓硫酸调节pH为4.8。 [0183] 以培养基的体积计，将酵母菌一级种子液按照1％～3％的接种量接种到二级种子液所用培养基中进行培养，在温度为30℃下培养15h，用分离机对培养液进行分离，取沉淀物用水洗涤后得到酵母菌种子液(也称为二级种子液)。其中，所述二级种子液所用的培养 基的制备方法包括：取甜菜糖蜜8L，用浓硫酸调节pH为5.5。 [0184] 步骤3：以培养基的体积计，将酵母菌种子液按照1％～3％的接种量接种到发酵罐中进行发酵，在温度30℃下发酵15h，得到酵母液。其中，发酵罐中的培养基的制备方法包括如下步骤：取甜菜糖蜜，用浓硫酸调节pH为5.5。使用分离机对酵母液进行分离，取沉淀物用水进行洗涤，再经过转鼓挤压干燥即为酿酒酵母菌菌粉。 [0185] (2)一种适用于盐碱土的微生物制剂的制备方法 [0186] 一种适用于盐碱土的微生物制剂的制备方法，其包括如下步骤： [0187] 向混料仓投入上述酵母代谢物，枯草芽孢杆菌菌粉，酿酒酵母菌菌粉(菌种为：酿酒酵母d8.8)和玉米淀粉，混合5～8min，得到微生物制剂。 [0189] 稳定性的评价包括如下步骤：将实施例制备得到的微生物制剂在室内常温保存，采用编织袋加内薄膜袋保存，由内至外依次是内薄膜袋和编织袋，取样测定保存12个月的 数据，每个月检测一次，参照中华人民共和国农业行业标准NY/T 2321‑2013微生物肥料产品检验规程中的平板计数法，测定有效活菌数，计算保存一年的存活率和变异系数(即CV 值)，计算方法如下： [0190] [0191] 其中，X为存活率，单位为％，A为将制备得到的微生物制剂保存12个月的有效活菌数，单位为亿CFU/g；B为制备得到的微生物制剂初始的有效活菌数(初始的有效活菌数是指保存时间为0个月的微生物制剂)，单位为亿CFU/g。 [0192] [0193] 其中，CV为变异系数，单位为％，SD为有效活菌数12个月的标准偏差；Mean为有效活菌数12个月的月平均值。 [0194] 表3实施例制备得到的微生物制剂的稳定性指标结果 [0195] [0196] 由上表3可知，实施例1‑7制备得到的微生物制剂中，枯草芽孢杆菌存活率达到75％以上，CV值在15％以内；酿酒酵母菌存活率达到59％以上，CV值在15.1％以内。其中，实施例4‑7制备得到的微生物制剂中，枯草芽孢杆菌存活率为75.0％～79.9％，CV值为10.9％～13.7％，酿酒酵母菌存活率为59.5％～72.9％，CV值为11.8％～15.1％，说明实施例4‑7制备得到的微生物制剂的稳定性好。实施例1‑3制备得到的微生物制剂中，枯草芽孢杆菌存活率为85.0％～88.3％，CV值为8.9％～9.6％(小于10％)，酿酒酵母菌存活率为73.6％～ 84.0％，CV值为9.3％～9.8％(小于10％)，枯草芽孢杆菌和酿酒酵母菌的有效活菌数数据 波动更小，说明其得到的微生物菌剂的稳定性更好。以上数据说明各原料组分及其含量在 优选的范围内，能取得更优异的技术效果。 [0197] 应用例2：肥力实验 [0198] 实验样品：实施例1‑7制备得到的的微生物制剂样品。 [0200] 将试验地块划分出八个大小一致的小区，每个小区面积为30m2，底肥为常规施肥(复合肥和有机肥)。在大豆种植前期(7～8月份)，将实施例1‑7制备得到的7个实验样品以 1000g/亩的施用量分两次灌根施用，在大豆收获后取土样进行理化性质分析。 [0201] 表4土壤盐碱理化性质的结果数据 [0202] [0203] 表4中，CK表示对照组，即只常规施肥，不添加本发明的微生物制剂，其余的条件和实施例相同。 [0204] 由上表4可知，相较于CK，添加本发明的微生物制剂后，总养分和有机质的含量均有提升，电导率、可溶性盐含量和pH值也均有下降，这说明本发明的微生物制剂具有提升土壤肥力和改善土壤碱性的效果。其中，实施例4‑7中，总养分提升了5.90％～10.69％，有机质提升了2.06％～7.94％，电导率下降了0.61％～2.03％，可溶性盐含量下降了3.22％～ 9.68％，pH值下降了2.76％～6.28％，以上数据说明实施例4‑7制备得到的微生物制剂具有提升土壤肥力和改良盐碱性土壤的作用。实施例1‑3中，总养分提升了16.01％～21.30％，有机质提升了8.35％～12.37％，电导率下降了1.09％～22.29％，可溶性盐含量下降了 6.45％～15.81％，pH值下降了7.72％～10.80％，以上数据说明实施例1‑3制备得到的微生物制剂具有更优异的提升土壤肥力和改良土壤盐碱性的作用。以上数据说明各原料组分及 其含量在优选的范围内，能取得更优异的技术效果。 [0205] 应用例3：促生实验 [0206] 实验样品：实施例1‑7制备得到的微生物制剂样品。 [0207] 实验方法：采用盆栽法，在大豆出苗2cm时进行灌根处理。设置对照组CK，对照组采用清水处理，7个处理组分别采用实施例1‑制备得到的微生物制剂样品进行处理，每个处理组设置三个重复。称取实施例制备得到的微生物制剂实验样品2g，稀释500倍，每盆取200mL实验样品溶液进行灌根，间隔7d后重复处理，14d后统计相关生长数据，具体数据如表5和图1所示。 [0208] 表5大豆促生实验的结果数据 [0209] 项目 大豆茎长/cmCK 9.23±0.64 实施例1 13.13±0.95 实施例2 12.05±1.12 实施例3 12.53±1.08 实施例4 11.53±0.62 实施例5 10.40±0.9 实施例6 9.60±1.12 实施例7 10.00±1.05 [0210] 图1和表5为施用实施例1‑7制备得到的微生物制剂后的大豆茎长结果。如图1和表5所示，施用本发明实施例制备得到的微生物制剂后，均有利于提升大豆的茎长。其中，实施例1‑3组的大豆的茎长为12.05～13.13cm，相较于空白对照组CK增加了30.55％～42.25％，大于30％；实施例4‑7组的大豆的茎长为9.60～11.53cm，相较于空白对照组CK增加了 4.00％～24.92％。以上数据说明，实施例1‑3组相对实施例4‑7组，对于大豆茎长的促生效果更显著；这表明各原料组分及其含量在优选的范围内，能取得更优异的技术效果。 [0211] 应用例4：抗逆实验 [0212] 实验样品：实施例1‑7制备得到的微生物制剂样品。 [0213] 实验方法：采用盆栽法，在大豆幼苗期灌根实验，设置两个对照组分别为清水对照组CK1和盐水对照组CK2，7个处理组分别采用实施例1‑7制备得到的微生物制剂样品进行处理，每个处理组设置三个重复。除清水对照组CK1外，盐水对照组CK2和实施例1‑7组均在大豆出苗2cm时用200mL的0.6％盐水灌根处理1次。称取实施例制备得到的微生物制剂实验样品2g，稀释500倍，每盆取200mL实验样品溶液进行灌根，间隔7d后重复处理，14d统计生长数据，具体数据如表6和图2所示。 [0214] 表6大豆抗逆实验的结果数据 [0215]项目 大豆茎长/cm CK1 8.25±0.50 CK2 4.07±0.76 实施例1 9.60±0.49 实施例2 8.28±0.22 实施例3 8.58±0.48 实施例4 7.70±0.24 实施例5 8.00±0.26 实施例6 7.70±0.79 实施例7 7.60±0.17 [0216] 图2和表6为模拟盐碱土中施用实施例1‑7制备得到的微生物制剂后的大豆的茎长。如图2和表6所示，施用本发明实施例制备得到的微生物制剂后，均有利于提升在盐碱土中生长的大豆的茎长。其中，实施例1‑3组的大豆的茎长为8.28～9.60cm，相较于盐水对照组CK2增加了103.44％～135.87％，与清水对照组CK1长势一致，实施例1组更优于清水对照组CK1。实施例4‑7组的大豆的茎长为7.60～8.00cm，相较于盐水对照组CK2增加了86.73％～96.56％，与清水对照组CK1长势相当。以上数据说明，实施例1‑3组相对实施例4‑7组，对于在盐碱土中生长的大豆的促生效果更显著，抗逆效果更优异；这表明各原料组分及其含 量在优选的范围内，能取得更优异的技术效果。 |
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