| 专利类型 | 发明公开 | 法律事件 | 公开; 实质审查; |
| 专利有效性 | 实质审查 | 当前状态 | 实质审查 |
| 申请号 | CN202311468239.7 | 申请日 | 2023-11-07 |
| 公开(公告)号 | CN117487795A | 公开(公告)日 | 2024-02-02 |
| 申请人 | 北京世纪阿姆斯生物工程有限公司; | 申请人类型 | 企业 |
| 发明人 | 魏浩; 吴书凤; 王莹; 邓祖科; 金晶; 张鑫鹏; 车欣宇; 周士龙; | 第一发明人 | 魏浩 |
| 权利人 | 北京世纪阿姆斯生物工程有限公司 | 权利人类型 | 企业 |
| 当前权利人 | 北京世纪阿姆斯生物工程有限公司 | 当前权利人类型 | 企业 |
| 省份 | 当前专利权人所在省份：北京市 | 城市 | 当前专利权人所在城市：北京市平谷区 |
| 具体地址 | 当前专利权人所在详细地址：北京市平谷区中关村科技园区平谷园兴谷A区M2—8号—2 | 邮编 | 当前专利权人邮编：101200 |
| 主IPC国际分类 | C12N11/14 | 所有IPC国际分类 | C12N11/14 ; C12N11/02 ; A01N63/22 ; A01P3/00 ; C12R1/07 |
| 专利引用数量 | 0 | 专利被引用数量 | 0 |
| 专利权利要求数量 | 10 | 专利文献类型 | A |
| 专利代理机构 | 北京维正专利代理有限公司 | 专利代理人 | 张兵兵; |
| 摘要 | 本 申请 涉及 微 生物 应用的技术领域，具体公开了一种微生物菌剂及其制备方法和应用。该微生物菌剂包括载体以及负载于所述载体的保藏编号为CGMCC No.25171的沙福芽孢杆菌 发酵 液；所述载体选自 腐殖酸 粉、 硅 藻土、 生物炭 、凹凸棒粉、珍珠岩和蛭石中的任意一种或多种。本申请提供的微生物菌剂能够改善和防控花生白绢病、番茄枯萎病以及 马 铃薯疮痂病，同时能够长期保持菌剂内的有效活菌数，从而能够有效降低 农作物 疾病 的发生。 | ||
| 权利要求 | 1.一种微生物菌剂，其特征在于，所述微生物菌剂包括载体以及负载于所述载体的保藏编号为CGMCC No.25171的沙福芽孢杆菌发酵液；所述载体选自腐殖酸粉、硅藻土、生物炭、凹凸棒粉、珍珠岩和蛭石中的任意一种或多种。 |
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| 说明书全文 | 一种微生物菌剂及其制备方法和应用技术领域[0001] 本申请涉及微生物应用的技术领域，更具体地说，涉及一种微生物菌剂及其制备方法和应用。 背景技术[0002] 对于农作物疾病的防控措施主要有轮作、深耕、培育抗性品种以及使用化学药剂等。然而，上述防控方式均治标不治本，并且长时间使用化学药剂，还会导致田间土壤受到化学药剂的污染，造成农产品质量和产量均下降，甚至还会出现农产品的安全性问题。 [0003] 利用微生物菌剂防控农作物疾病是一直以来农业绿色发展迫切需要解决的难题。因此，需要获得更多种类和数量的生防菌株和微生物菌剂，以致力于满足农作物健康生长、农作物产量稳定和农业长久绿色发展的需求。 发明内容 [0004] 本申请提供一种微生物菌剂及其制备方法和应用。本申请提供的微生物菌剂能够改善和防控花生白绢病、番茄枯萎病以及马铃薯疮痂病，同时能够长期保持菌剂内的有效活菌数，从而能够有效降低农作物疾病的发生。 [0005] 第一方面，本申请提供一种微生物菌剂，采用如下的技术方案： [0006] 一种微生物菌剂，所述微生物菌剂包括载体以及负载于所述载体的保藏编号为CGMCC No.25171的沙福芽孢杆菌发酵液；所述载体选自腐殖酸粉、硅藻土、生物炭、凹凸棒粉、珍珠岩和蛭石中的任意一种或多种。 [0007] 本申请的微生物菌剂包括载体和沙福芽孢杆菌两部分。通过载体和沙福芽孢杆菌各自对农作物致病菌的作用以及两者协配后对农作物致病菌的作用，来降低农作物疾病的发生。 [0008] 本申请中，载体可以是能够负载微生物的颗粒物质。一方面，微生物负载在载体上，其作为微生物作用于农田、农作物或致病菌的媒介，通过微生物与农作物致病菌在微生态系统中形成竞争关系，或者利用微生物在微生态系统中抑制农作物致病菌的生长，从而阻碍农作物致病菌的生长和繁殖，进而降低农作物疾病的发生，即通过阻断农作物疾病的发生途径来改善和防控农作物疾病的发生。另一方面，由于其自身的吸附作用，载体可以直接将农作物致病菌吸附在其主体上，从而减少农作物致病菌与农田、农作物的接触和联系，进而降低农作物疾病的发生，即通过阻断农作物疾病的源头来改善和防控农作物疾病的发生。 [0009] 本申请中的沙福芽孢杆菌(Bacillus safensis)于2022年6月23日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.25171。该菌株营养细胞呈杆状、圆端，多数为单个或成短链排列，革兰氏阳性菌。最佳生长温度为30℃，最高生长温度为40℃，最低生长温度为15℃，好氧菌。在营养琼脂培养基30℃培养48h的菌落呈透明色，表面光滑湿润，边缘有褶皱。该菌株对花生白绢病、番茄枯萎病以及马铃薯疮痂病具有较好的防控效果。 [0010] 本申请利用载体和保藏编号为CGMCC No.25171的沙福芽孢杆菌组成的微生物菌剂，在载体和保藏编号为CGMCC No.25171的沙福芽孢杆菌两者的共同作用下，能够显著提高对农作物致病菌的防控效果，进而本申请的微生物菌剂对农作物致病菌的防控效果远大于单独使用载体和单独使用保藏编号为CGMCC No.25171的沙福芽孢杆菌时对农作物致病菌的防控效果。 [0011] 可选地，所述载体为腐殖酸粉。 [0012] 可选地，所述载体为硅藻土。 [0013] 可选地，所述载体为生物炭。 [0014] 可选地，所述载体为凹凸棒粉。 [0015] 可选地，所述载体为珍珠岩。 [0016] 可选地，所述载体为蛭石。 [0017] 可选地，所述载体包括生物炭和腐殖酸粉。 [0018] 可选地，所述载体包括生物炭和硅藻土。 [0019] 可选地，所述载体包括生物炭和凹凸棒粉。 [0020] 可选地，所述载体包括生物炭和珍珠岩。 [0021] 可选地，所述载体包括生物炭和蛭石。 [0022] 可选地，所述载体包括腐殖酸粉和硅藻土。 [0023] 可选地，所述载体包括腐殖酸粉和凹凸棒粉。 [0024] 可选地，所述载体包括腐殖酸粉和珍珠岩。 [0025] 可选地，所述载体包括腐殖酸粉和蛭石。 [0026] 可选地，所述载体中，所述腐殖酸粉和所述生物炭的重量比为(0.2‑5)：1。 [0027] 可选地，所述载体中，所述腐殖酸粉和所述生物炭的重量比为(2‑5)：1。 [0028] 可选地，所述载体中，所述腐殖酸粉和所述生物炭的重量比为(3‑4)：1。 [0029] 在一个具体的实施方式中，所述载体中，所述腐殖酸粉和所述生物炭的重量比可以为0.2：1、0.25：1、0.3：1、0.5：1、1：1、2：1、3：1、4：1、5：1。 [0030] 可选地，所述载体的粒度为120‑250μm。 [0031] 可选地，所述载体的粒度为150‑210μm。 [0032] 在一个具体的实施方式中，所述载体的粒度可以为120μm、150μm、180μm、210μm、250μm。 [0033] 在一些具体的实施方式中，所述载体的粒度可以为120‑150μm、120‑180μm、120‑210μm、150‑180μm、150‑210μm、150‑250μm、180‑210μm、180‑250μm、210‑250μm。 [0034] 可选地，所述微生物菌剂中沙福芽孢杆菌的有效活菌数为0.2‑10亿/g。 [0035] 可选地，所述微生物菌剂中沙福芽孢杆菌的有效活菌数为2‑3亿/g。 [0036] 可选地，所述载体和所述沙福芽孢杆菌发酵液的重量比为(5‑15)：1；所述发酵液中沙福芽孢杆菌的浓度为40‑60亿/ml。 [0037] 可选地，所述载体和所述沙福芽孢杆菌发酵液的重量比为(8‑12)：1。 [0038] 在一个具体的实施方式中，所述载体和所述沙福芽孢杆菌发酵液的重量比可以为5：1、8：1、10：1、12：1、15：1。 [0039] 在一些具体的实施方式中，所述载体和所述沙福芽孢杆菌发酵液的重量比可以为(5‑8)：1、(5‑10)：1、(5‑12)、(8‑10)：1、(8‑15)：1、(10‑12)：1、(10‑15)：1、(12‑15)：1。 [0041] 本申请中，生物炭可以是秸秆炭、竹炭和果壳炭中的任意一种或多种。 [0042] 可选地，秸秆炭可以是玉米秸秆、小麦秸秆、水稻秸秆中的任意一种或多种。 [0043] 第二方面，本申请提供一种微生物菌剂的制备方法，采用如下的技术方案： [0044] 一种微生物菌剂的制备方法，所述制备方法具体包括以下步骤： [0045] 将烘干、灭菌后的载体与保藏编号为CGMCC No.25171的沙福芽孢杆菌发酵液均匀混合，获得微生物菌剂。 [0046] 第三方面，本申请提供一种微生物菌剂在改善和防控农作物疾病领域中的应用。 [0047] 可选地，所述微生物菌剂中有效活菌数为0.65‑4亿/g时，将上述微生物菌剂按照20‑120kg/亩的施加量施加于需要防控农作物致病菌的农田。 [0048] 第四方面，本申请提供一种微生物菌剂在改善和防控花生白绢病、番茄枯萎病以及马铃薯疮痂病领域中的应用。 [0049] 可选地，所述微生物菌剂对花生白绢病的防控效果能够达到75.21％，对番茄枯萎病的防控效果能够达到61.48％，对马铃薯疮痂病的防控效果能够达到64.05％。 [0050] 综上所述，本申请具有以下有益效果： [0051] 1.本申请提供的微生物菌剂能够改善和防控花生白绢病、番茄枯萎病以及马铃薯疮痂病。 [0052] 2.本申请提供的微生物菌剂能够长期保持菌剂内的有效活菌数，从而能够有效降低农作物疾病的发生。 [0053] 3.本申请的微生物菌剂对番茄枯萎病致病菌的防控效果能够达到75.21％，对番茄枯萎病的防控效果能够达到61.48％，对马铃薯疮痂病的防控效果能够达到64.05％。 具体实施方式[0054] 本申请提供了一种微生物菌剂及其制备方法和应用。本申请提供的微生物菌剂能够改善和防控花生白绢病、番茄枯萎病以及马铃薯疮痂病，同时能够长期保持菌剂内的有效活菌数，从而能够有效降低农作物疾病的发生。 [0055] 关于微生物菌剂： [0056] 微生物菌剂包括载体以及负载于所述载体的保藏编号为CGMCC No.25171的沙福芽孢杆菌发酵液；所述载体选自腐殖酸粉、硅藻土、生物炭、凹凸棒粉、珍珠岩和蛭石中的任意一种或多种。 [0057] 其中，微生物菌剂中沙福芽孢杆菌的有效活菌数为0.2‑10亿/g； [0058] 进一步地，载体包括腐殖酸粉和生物炭。再进一步地，载体中腐殖酸粉和生物炭的重量比为(0.2‑5)：1。载体的粒度为120‑250μm。 [0059] 载体和沙福芽孢杆菌发酵液的重量比为(5‑15)：1；所述发酵液中沙福芽孢杆菌的浓度为40‑60亿/ml。 [0060] 关于微生物菌剂的制备方法： [0061] 微生物菌剂的制备方法具体包括以下步骤： [0062] 将烘干、灭菌后的载体与保藏编号为CGMCC No.25171的沙福芽孢杆菌发酵液均匀混合，获得微生物菌剂。 [0063] 此外，本申请提供了上述微生物菌剂的应用。 [0064] 上述微生物菌剂在改善和防控农作物疾病，尤其是改善和防控花生白绢病、番茄枯萎病以及马铃薯疮痂病。 [0065] 为使本申请的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本申请实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。基于本申请的实施例，本领域技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例，都属于本申请保护的范围。 [0066] 实施例 [0067] 实施例1‑32 [0068] 实施例1‑32分别提供了一种微生物菌剂。其中，各实施例的不同之处具体如表1所示。 [0069] 上述实施例的不同之处具体如下： [0070] 实施例1‑6的不同之处在于：载体的类型。 [0071] 实施例7‑14与实施例3的不同之处在于：载体为混合型载体。 [0072] 实施例14‑22的不同之处在于：混合型载体中两者的混合比例。 [0073] 实施例23‑26与实施例16的不同之处在于：载体的粒度。 [0074] 实施例27‑30与实施例16的不同之处在于：载体和沙福芽孢杆菌发酵液的重量比。 [0075] 实施例31‑32与实施例16的不同之处在于：载体中生物炭的类型。 [0076] 上述微生物菌剂的制备方法具体包括以下步骤： [0077] (1)载体的处理：用80目筛子(180μm)将载体过筛，获得一定粒度的颗粒，并将其烘干后，置于121℃下高温灭菌1h，获得烘干、灭菌后的载体，备用。 [0078] (2)发酵液的制备： [0079] 将‑80℃保存的沙福芽孢杆菌3次活化后转接于酵母浸粉培养基(培养基配方为：酵母浸粉4‑6％、葡萄糖10‑20％、无机盐1‑3％、纯净水配制)培养，培养至对数期，作为种子液，利用酵母浸粉培养基(pH为7)进行三级连续发酵，发酵接种量为1％(体积比)，转速为 180rpm，在35℃条件下培养分阶段培养：第0‑30h，通风量：罐体装液量＝1.4：1；在第30h时将通风量与罐体装液量比例转为0.8：1，30h后维持在通风量：罐体装液量＝0.8：1，发酵 36h，待芽孢率达到90％以上，下罐，获得沙福芽孢杆菌发酵液，将获得的发酵液的菌液浓度调整至120亿/ml。 [0080] (3)菌剂的制备 [0081] 将烘干、灭菌后的载体与保藏编号为CGMCC No.25171的沙福芽孢杆菌发酵液按照表1中的重量比混合，机器搅拌30min，搅拌速率为60次/min，使得载体和发酵液混合均匀，获得微生物菌剂，制得的微生物菌剂中的有效活菌数如表1所示。 [0082] 表1实施例1‑32提供的微生物菌剂 [0083] [0084] 性能检测结果一 [0085] 以实施例1‑32提供的微生物菌剂作为检测对象，将其置于25℃的避光环境下，干燥，分别在不同时间(0d、7d、15d、30d、60d、90d、180d下检测微生物菌剂中有效菌含量(平板菌落计数法)。 [0086] 检测结果如表1所示。 [0087] 由表1可知，本申请的微生物菌剂在不同时间条件下有效活菌数与载体的类型有关。当微生物菌剂中有效活菌数较高时，则微生物菌剂对农作物致病菌具有更好的防控效果。当微生物菌剂中有效活菌数降低时，则微生物菌剂对农作物致病菌的防控效果也会降低。因此，需要尽量保证微生物菌剂的有效活菌数。 [0088] 通过对比实施例1‑4的检测结果可知，当载体为生物炭时，制得的微生物菌剂中有效活菌数的初始含量大于12亿/g，但180d时微生物菌剂中有效活菌数为7.16亿/g。但当载体为腐殖酸粉或硅藻土时，180d时微生物菌剂中有效活菌数均大于7.16亿/g。而当载体为凹凸棒粉时，180d时微生物菌剂中有效活菌数仅为5.16亿/g，有效活菌数随时间的下降速率较快。通过对比实施例5‑6的检测结果可知，当载体为珍珠岩或蛭石时，制得的微生物菌剂中有效活菌数的初始含量在10亿/g以下(小于12亿/g)，且微生物菌剂中有效菌均不能维持到180d，甚至载体为蛭石的微生物菌剂在90d时已经检测不到有效活菌数。 [0089] 基于上述，由于微生物菌剂的有效活菌数直接关系到微生物菌剂对农作物致病菌的防控效果。故有必要进一步筛选合适的载体，以保障微生物菌剂中的有效活菌数，进而提高微生物菌剂的防控效果。 [0090] 通过对比实施例7‑14的检测结果可知，在载体为混合型载体时，实施例14的微生物菌剂在0‑180d内的有效活菌数均大于实施例7‑13的微生物菌剂，说明选择腐殖酸粉和生物炭作为混合型载体，更能够长久保持微生物菌剂内的有效活菌数。 [0091] 因此，为了保证制得的微生物菌剂能够保持较高的有效活菌数，选择腐殖酸粉和生物炭的混合物作为微生物菌剂的载体。 [0092] 另外，通过对比实施例14‑22的检测结果可知，将腐殖酸粉和生物炭的混合比例控制在(2‑5)：1，制得的微生物菌剂在180d时有效活菌数大于10.7亿/g；当将腐殖酸粉和生物炭的混合比例控制在(3‑4)：1，制得的微生物菌剂在180d时有效活菌数大于11亿/g。因此，为了同时兼顾经济效益和防控效果，优选将腐殖酸粉和生物炭的混合比例控制在(3‑4)：1的范围内。 [0093] 通过对比实施例16和实施例23‑26的检测结果可知，当载体的粒度在150‑210μm，制得的微生物菌剂中有效活菌数的初始含量更高，且更能够长久保持微生物菌剂内的有效活菌数。 [0094] 通过对比实施例16和实施例27‑30的检测结果可知，载体和沙福芽孢杆菌发酵液的重量比控制在(5‑15)：1，制得的微生物菌剂在180d的有效活菌数均能够达到5亿/g。当将载体和沙福芽孢杆菌发酵液的重量比控制在(8‑10)：1，制得的微生物菌剂在180d时有效活菌数大于12/g。因此，为了同时兼顾经济效益和防控效果，优选将载体和沙福芽孢杆菌发酵液的重量比控制在(8‑10)：1，的范围内。 [0095] 通过对比实施例16和实施例31‑32的检测结果可知，当载体为生物炭时，具体可以选择果壳炭、竹炭和秸秆炭作为生物炭部分，制得的微生物菌剂在180d内均具有较高的有效活菌数。 [0096] 实施例33‑41 [0097] 实施例33‑41分别提供了一种微生物菌剂。其中，各实施例与实施例16的不同之处：所用沙福芽孢杆菌发酵液的菌浓不同，制得的微生物菌剂中有效活菌数不同，具体如表2所示。 [0098] 对比例 [0099] 对比例1 [0100] 对比例1提供了一种抑制剂。该对比例与实施例16的不同之处：仅包括沙福芽孢杆菌，不包括载体。具体如表2所示。 [0101] 对比例2 [0102] 对比例2提供了一种抑制剂。该对比例与实施例16的不同之处：仅包括载体，不包括沙福芽孢杆菌。具体如表2所示。 [0103] 对比例3‑5 [0104] 对比例3‑5分别提供了一种微生物菌剂。该对比例与实施例16的不同之处：该微生物菌剂为沙福芽孢杆菌发酵液通过喷雾干燥获得的菌粉与载体混合，上述对比例之间的不同之处在于制得的微生物菌剂中有效活菌数不同，具体如表2所示。 [0105] 上述微生物菌剂的制备方法具体包括以下步骤： [0106] (1)载体的处理：用80目筛子(180μm)将载体过筛，获得一定粒度的颗粒，并将其烘干后，置于121℃下高温灭菌1h，获得烘干、灭菌后的载体，备用。 [0107] (2)发酵液的制备： [0108] 将‑80℃保存的沙福芽孢杆菌3次活化后转接于酵母浸粉培养基(培养基配方为：酵母浸粉4‑6％、葡萄糖10‑20％、无机盐1‑3％、纯净水配制)培养，培养至对数期，作为种子液，利用酵母浸粉培养基(pH为7)进行三级连续发酵，发酵接种量为1％(体积比)，转速为 180rpm，在35℃条件下培养分阶段培养：第0‑30h，通风量：罐体装液量＝1.4：1；在第30h时将通风量与罐体装液量比例转为0.8：1，30h后维持在通风量：罐体装液量＝0.8：1，发酵 36h，待芽孢率达到90％以上，下罐，获得沙福芽孢杆菌发酵液，将获得的发酵液的菌液浓度调整至120亿/ml。 [0109] 将沙福芽孢杆菌发酵液进行离心浓缩，再进行喷雾干燥，获得菌粉。喷雾干燥的进风温度为170℃，进料流量为400L/h，雾化压力为0.1Mpa。菌粉中有效活菌数为3.02×11 10 cfu/g，干物质得率为98％。 [0110] (3)菌剂的制备 [0111] 将上述喷雾干燥获得的菌粉按所需求的配比与载体混合，获得微生物菌剂，制得的微生物菌剂中的有效活菌数如表2所示。 [0112] 表2实施例33‑41和对比例1‑5的方案 [0113] [0114] 性能检测结果二 [0115] 以实施例33‑41和对比例1‑5提供的微生物菌剂或抑制剂作为检测对象，按照40kg/亩的施加量加入重茬连作农田中，分别在120d下检测微生物菌剂或抑制剂对农作物致病菌(番茄枯萎病、花生白绢病、马铃薯疮痂病)的防控效果。 [0116] 防控效果的计算方式具体如下： [0117] (1)番茄枯萎病病害分级标准如下： [0118] 0级：植株健康，无病害发生；1级：根基部变褐，叶子健康，根部无明显病斑； [0119] 2级：根部变褐，叶片发黄；3级：根基部褐化腐烂，叶片发黄，根褐变至发黑。 [0120] 病情指数(％)＝∑(各级发病株数×病情级数)/(调查总株数×最高病级数)×100％。 [0121] 防治效果(％)＝(对照病情指数－处理病情指数)/对照病情指数×100％。 [0122] (2)花生白绢病病害分级标准如下： [0123] 0级，无症状；1级，仅茎基部产生病害；2级，染病部位占整株的1/3以下； [0124] 3级，染病部位占整株的2/3以下；4级，植株接近或已经死亡。 [0125] 病情指数(％)＝∑(各级发病株数×病情级数)/(调查总株数×最高病级数)×100％。 [0126] 防治效果(％)＝(对照病情指数－处理病情指数)/对照病情指数×100％。 [0127] (3)马铃薯疮痂病病害分级标准如下： [0128] 0级，无病斑；1级，有1‑2个零星斑点，病斑面积未超过薯皮表面积的1/4； [0129] 2级，薯块表面有3‑5个病斑，占薯皮表面积的1/3‑1/2； [0130] 3级，病斑个数在10个以上，病斑面积大于薯皮表面积的1/2。 [0131] 病情指数(％)＝∑(各病级块茎数×病情级数)/(调查总块茎数×最高病级数)×100％。 [0132] 防治效果(％)＝(对照病情指数－处理病情指数)/对照病情指数×100％。 [0133] 检测结果如表2所示。 [0134] 由表2可知，通过对比实施例33‑41的检测结果，通过利用沙福芽孢杆菌制得的微生物菌剂对番茄枯萎病致病菌、花生白绢病致病菌、马铃薯疮痂病致病菌均具有较好的防控效果。尤其是，利用沙福芽孢杆菌发酵液制得的微生物菌剂，将微生物菌剂中有效活菌数控制在2‑3亿/g，对番茄枯萎病致病菌的防控效果能够达到75.22％，对花生白绢病致病菌的防控效果能够达到61.49％，对马铃薯疮痂病致病菌的防控效果能够达到64.06％。考虑到兼顾经济效益和防控效果，微生物菌剂中有效活菌数控制在2‑2.5亿/g为宜。 [0135] 通过对比实施例37和对比例1、2的检测结果可知，实施例37的微生物菌剂对番茄枯萎病致病菌、花生白绢病致病菌、马铃薯疮痂病致病菌的防控效果，明显高于对比例1包括发酵液的抑制剂和对比例2包括载体的抑制剂对番茄枯萎病致病菌、花生白绢病致病菌、马铃薯疮痂病致病菌的防控效果，并且大于对比例1和对比例2对番茄枯萎病致病菌、花生白绢病致病菌、马铃薯疮痂病致病菌的防控效果之和，说明利用本申请的微生物菌剂，通过载体和沙福芽孢杆菌的协同作用，能够进一步提高对番茄枯萎病致病菌、花生白绢病致病菌、马铃薯疮痂病致病菌的防控效果。 [0136] 通过对比实施例37、40、41和对比例3‑5的检测结果可知，实施例37、40、41利用发酵液和载体制得的微生物菌剂对番茄枯萎病致病菌的防控效果均在75％以上，对花生白绢病致病菌的防控效果均在61％以上，对马铃薯疮痂病致病菌的防控效果均在64％以上。而对比例3‑5利用发酵液喷雾干燥获得的菌粉和载体制得的微生物菌剂对番茄枯萎病致病菌的防控效果最高为66.28％(小于75％)，对花生白绢病致病菌的防控效果最高为54.35％(小于61％)，对马铃薯疮痂病致病菌的防控效果最高为59.21％(小于64％)。因此，说明选择利用发酵液和载体制得的微生物菌剂对番茄枯萎病致病菌、花生白绢病致病菌、马铃薯疮痂病致病菌具有更好的防控效果。这是由于沙福芽孢杆菌发酵液中除了菌自身外，还含有沙福芽孢杆菌的代谢产物，进而制得的微生物菌剂对番茄枯萎病致病菌、花生白绢病致病菌、马铃薯疮痂病致病菌的防控效果更好。而经过喷雾干燥处理的菌粉制得的微生物菌剂中，由于发酵液在喷雾干燥的过程中会导致沙福芽孢杆菌的各种代谢产物损失，故喷雾干燥获得的菌粉中能够起到防控效果的有效成分降低，故利用沙福芽孢杆菌发酵液制得的微生物菌剂对番茄枯萎病致病菌、花生白绢病致病菌、马铃薯疮痂病致病菌的防控效果，更高于利用菌粉制备的微生物菌剂对番茄枯萎病致病菌、花生白绢病致病菌、马铃薯疮痂病致病菌的防控效果。 [0137] 性能检测结果三 [0138] 分别以实施例16提供的微生物菌剂的制备方法和对比例3提供的微生物菌剂的制备方法，制得如表4所示的有效菌含量的微生物菌剂，并将其按照对应的施加量加入重茬连作农田中，分别在120d下检测微生物菌剂对农作物致病菌的防控效果。检测结果如表3所示。 [0139] 表3利用微生物菌剂防控农作物致病菌的方法 [0140] [0141] [0142] 由表3可知，对于利用沙福芽孢杆菌发酵液制备的微生物菌剂中有效活菌数在0.65‑4亿/g时，当施加量控制在20‑120kg/亩进行施用，微生物菌剂对番茄枯萎病致病菌的防控效果能够达到75.21％，对花生白绢病致病菌的防控效果能够达到61.48％，对马铃薯疮痂病致病菌的防控效果能够达到64.05％。考虑到同时兼顾经济效益和防控效果，可以选择利用有效活菌数为1‑4亿/g的微生物菌剂施用量控制在20‑80kg/亩。 [0143] 对于利用沙福芽孢杆菌发酵液喷雾干燥获得的菌粉制备的微生物菌剂中有效活菌数在1.65‑5亿/g时，当施加量控制在40‑120kg/亩进行施用，微生物菌剂对番茄枯萎病致病菌的防控效果能够达到66.21％，对花生白绢病致病菌的防控效果能够达到54.32％，对马铃薯疮痂病致病菌的防控效果能够达到59.24％。 [0144] 由上述可知，相比利用沙福芽孢杆菌发酵液喷雾干燥获得的菌粉制备的微生物菌剂，利用沙福芽孢杆菌发酵液制备的微生物菌剂对番茄枯萎病致病菌、花生白绢病致病菌、马铃薯疮痂病致病菌的防控效果更佳。 [0145] 最后应说明的是：以上实施例仅用以说明本申请的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本申请进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本申请各实施例技术方案的精神和范围。 |
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