一种复方抑菌精油及其应用 |
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| 申请号 | CN202310814946.0 | 申请日 | 2023-07-05 | 公开(公告)号 | CN117084952A | 公开(公告)日 | 2023-11-21 |
| 申请人 | 海南大学; | 发明人 | 赵莹; 吴文滔; 周卫娟; 李高宇; 赵霞; 王文娜; 王健; 宋希强; | ||||
| 摘要 | 本 发明 公开了一种复方抑菌精油，所述复方抑菌精油包含石碌含笑精油、 艾 叶精油、茉莉精油和/或石碌含笑纯露。所述复方抑菌精油以石碌含笑精油为主要成分，将多种组分进行复配，达到了显著的协同增效作用；该复方抑菌精油对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌和 铜 绿假单胞菌都具有较为显著的抑菌能 力 。利用所述复方抑菌精油制备得到的抑菌手工皂使用时 去污 能力强，皂体 稳定性 好，同时还具有长效抑菌的功能。 | ||||||
| 权利要求 | 1.一种复方抑菌精油，其特征在于，所述复方抑菌精油包含石碌含笑精油、艾叶精油、茉莉精油和/或石碌含笑纯露。 |
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| 说明书全文 | 一种复方抑菌精油及其应用技术领域[0001] 本发明涉及医用材料技术领域，具体地，涉及一种复方抑菌精油及其应用。 背景技术[0002] 随着社会日新月异的发展，市场上的日用清洁品的种类也日益繁多，如护手霜、洁面乳、护肤乳以及各种香皂等，虽然这些清洁品具有较高的清洁能力和浓郁香气，但通常会在这些清洁品中添加一些化学物质(如对氯间二甲苯酚、三氯生和三氯卡班)以起到抑菌的效果，但这些化学物质对人体有一定的伤害。为了解决上述问题，许多研究人员通过在手工皂中添加不同植物精油等活性成分，天然植物精油对细菌和真菌都具有一定的抑菌能力，但大部分的精油都不具备广谱抗菌性，如要达到良好的抑菌效果，往往需要在不同的植物精油之间复配或者将植物精油与其他抗菌物质结合使用，通过综合不同精油的功效和植物精油复配的相互作用，在起到清洁的同时，使手工皂具备良好的抑菌效果。 [0003] 石碌含笑(Micheliashiluensis Chunet Y.F.Wu)是木兰科含笑属的一种热带及亚热带常绿乔木，是国家二级保护植物，海南特有种。石碌含笑具有优美塔形树冠，叶色四季苍绿亮泽，花朵洁白，气味芳香且花期长，具有优异的观赏价值。石碌含笑叶片含有多种生物活性物质，如生物碱、黄酮和挥发性油，采用其叶片进行萃取能够提炼出较多的浓稠状精油，该浓稠状精油分子量低且易挥发，因此易被人体吸收并起到美容护肌的作用。 [0004] 现行标准下，通常将抑菌直径大于7mm的物质认定为具备抑菌能力([1]马金璞,施生玲,张钰璇等.超声微波协同萃取法提取兰州苦水玫瑰精油及抑菌活性的研究[J/OL].中国粮油学报:1‑10[2023‑06‑17].https://doi.org/10.20048/j.cnki.issn.1003‑0174.000256.；[2]杨丽华,李德艳,左仙会等.芳香白珠茎叶精油成分分析及抑菌和抗氧化活性研究[J].保山学院学报,2023,42(02):93‑100.)，单一植物精油无法对日常常见的菌株起到良好的抑菌效果；因此常将各种精油复配使用，但复配精油中的各个组分的比例尤为重要，不同精油之间的比例变化会导致精油的效果发生显著改变。 发明内容[0005] 本发明的目的是为了克服现有技术的上述不足，提供一种复方抑菌精油及其应用。 [0006] 本发明的第一目的是提供一种复方抑菌精油。 [0007] 本发明的第二目的是提供上述复方抑菌精油在制备抑菌产品中的应用。 [0008] 本发明的第三目的是提供一种抑菌手工皂。 [0009] 本发明的第四目的是提供一种抑菌手工皂的制备方法。 [0010] 为了实现上述目的，本发明是通过以下方案予以实现的： [0011] 一种复方抑菌精油，所述复方抑菌精油包含石碌含笑精油、艾叶精油、茉莉精油和/或石碌含笑纯露。 [0012] 优选地，所述石碌含笑纯露通过将石碌含笑叶片和/或石碌含笑花进行水蒸气蒸馏法提取得到。 [0013] 更优选地，所述石碌含笑纯露通过将石碌含笑叶片进行水蒸气蒸馏法提取得到。 [0014] 优选地，所述石碌含笑精油、艾叶精油、茉莉精油和/或石碌含笑纯露的质量比为0.5～0.8：0.1～0.3：0.1～0.25：4。 [0015] 更优选地，所述石碌含笑精油、艾叶精油、茉莉精油和/或石碌含笑纯露的质量比为0.5：0.1：0.1：4。 [0016] 其中，石碌含笑精油、艾叶精油和茉莉精油均通过超临界CO2流体萃取技术萃取得到；石碌含笑精油为深黄色，精油中富含的石竹烯具有抗病毒活性，其成分中的植醇能够用于制备或合成维生素E和维生素K1，具有抗氧化、抗菌、抗炎、抗辐射、降血糖和降血压多种生物活性。 [0017] 艾叶精油中的桉油精又称1,8‑桉叶油素，被广泛应用于医药、配制牙膏香精或调味品中，具有抗菌、抗炎、杀虫、镇痛和促进透皮吸收的作用；其含有的β‑石竹烯具有局部麻醉作用和治疗结肠炎作用；α‑松油醇具有刺激胰岛素的能力，能够降低血糖，促进激素的吸收。 [0018] 茉莉精油呈现透明白色，具有天然的抗菌、止痛、抗真菌、利尿、防腐、解毒和抗痉挛作用。 [0019] 本发明所述复方抑菌精油以石碌含笑精油为主要成分，将四种组分进行复配，起到协同增效的作用，有效加强了精油的抑菌能力，不仅对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌和铜绿假单胞菌均能达到优异的抑菌效果，而且对人体皮肤安全无害。 [0021] 优选地，所述抑菌产品为抗大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌和/或铜绿假单胞菌的产品。 [0022] 更优选地，所述抑菌产品为手工皂、沐浴露、洗发水和/或洗手液。 [0023] 本发明还请求保护一种抑菌手工皂，所述抑菌手工皂含有上述任一所述的复方抑菌精油。 [0024] 优选地，以质量份数计，包括： [0025] 0.5～0.8份石碌含笑精油、0.1～0.3份艾叶精油、0.1～0.25份茉莉精油、4～5份石碌含笑纯露、1～2份荷荷芭油、0.2～0.6份维生素E、3.2～5份橄榄油和/或75～120份皂基。 [0026] 更优选地，以质量份数计，包括： [0027] 0.6份石碌含笑精油、0.15份艾叶精油、0.2份茉莉精油、4份石碌含笑纯露、1份荷荷芭油、0.4份维生素E、3.8份橄榄油和/或90份皂基。 [0028] 优选地，所述抑菌为抗大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌和/或铜绿假单胞菌。 [0029] 本发明还请求保护一种抑菌手工皂的制备方法，包括以下步骤： [0030] S1.将石碌含笑精油、艾叶精油、茉莉精油、石碌含笑纯露、橄榄油、荷荷芭油和维生素E混合，充分混匀后得到复合精油； [0031] S2.将皂基置于55～60℃水浴加热至完全溶解后，与步骤S1得到的复合精油充分混合，冷却后即得抑菌手工皂； [0032] 所述石碌含笑精油、艾叶精油、茉莉精油、石碌含笑纯露、橄榄油、荷荷芭油、维生素E和皂基的质量比为0.5～0.8：0.1～0.3：0.1～0.25：4：3.2～5：1：0.2～0.6：75～120。 [0033] 优选地，所示石碌含笑纯露的制备方法为：将新鲜石碌含笑叶片和水按照质量比为1：7～10加入纯露机中，将水加热至沸腾并保持3～4h，接着收集提取物即得。 [0034] 与现有技术相比，本发明具有以下有益效果： [0035] 本发明提供了一种复方抑菌精油，所述复方抑菌精油包含石碌含笑精油、艾叶精油、茉莉精油和/或石碌含笑纯露。所述复方抑菌精油以石碌含笑精油为主要成分，将多种组分进行复配，达到了显著的协同增效作用；该复方抑菌精油对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌和铜绿假单胞菌都具有较为显著的抑菌能力。利用所述复方抑菌精油制备得到的抑菌手工皂使用时去污能力强，皂体稳定性好，同时还具有长效抑菌的功能。 具体实施方式[0036] 下面结合具体实施例对本发明作出进一步地详细阐述，所述实施例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。下述实施例中所使用的试验方法如无特殊说明，均为常规方法；所使用的材料、试剂等，如无特殊说明，为可从商业途径得到的试剂和材料。 [0037] 试验菌株：大肠杆菌(ATCC25922)、金黄色葡萄球菌(ATCC27217)、白色念珠菌(ATCC10231)和铜绿假单胞菌(ATCC9027)。 [0038] 实施例1一种抑菌手工皂 [0039] 1、精油及纯露的制备 [0040] (1)石碌含笑精油的提取 [0041] 采用超临界CO2流体萃取法进行精油萃取，具体如下：将100g干燥的石碌含笑叶片粉碎，过50mm目筛，过筛后装入无纺袋中并置于萃取釜中，在温度为30℃，气压为8MPa，CO2流速为4L/min的条件下萃取120min，使用棕色玻璃瓶收集萃取得到的精油，即为初始精油，将初始精油与甘油按照质量比为1：4稀释后即为石碌含笑精油。 [0042] 将干燥的石碌含笑叶片分别替换为干燥的茉莉花花苞和干燥的艾叶，按照上述方法进行萃取，得到茉莉精油和艾叶精油。 [0043] (2)石碌含笑纯露的提取 [0044] 采用水蒸气蒸馏法提取石碌含笑纯露，具体步骤如下： [0045] S1.将250g的新鲜石碌含笑叶片清洗干净后装入洁净的布袋中，按照质量比为1：7将新鲜石碌含笑叶片和水加入纯露机中； [0046] S2.将纯露机中的液体加热至沸腾后，保持沸腾3h，接着收集提取物即得石碌含笑纯露。 [0047] 2、抑菌手工皂的制备 [0048] 将0.5g步骤1制备得到的石碌含笑精油、0.1g步骤1制备得到的艾叶精油、0.2g步骤1制备得到的茉莉精油、4g步骤1制备得到的石碌含笑纯露、1g的的荷荷芭油、3.2g的橄榄油和0.04g的维生素E置于10mL离心管中，混合均匀并置于涡旋混合器振荡1min，得到复合精油1。 [0049] 将75g的皂基装入烧杯并置于55℃水浴中加热至皂基完全溶解，接着将完全溶解的皂基与复合精油1在55℃水浴中充分混合均匀，倒入模具中，待冷却后即得抑菌手工皂1。 [0050] 实施例2一种抑菌手工皂 [0051] 按照实施例1步骤1所示方法提取石碌含笑精油、茉莉精油、艾叶精油和石碌含笑纯露。 [0052] 将0.6g的石碌含笑精油、0.15g的艾叶精油、0.2g的茉莉精油、1g的荷荷芭油、4g的石碌含笑纯露、3.8g的橄榄油和0.04g的维生素E置于10mL的离心管中，混合均匀并置于涡旋混合器振荡1min，得到复合精油2。 [0053] 将90g的皂基装入烧杯并置于60℃水浴中加热至皂基完全溶解，接着将完全溶解的皂基与复合精油2在60℃水浴中充分混合均匀，导入模具中，待冷却后即得抑菌手工皂2。 [0054] 实施例3一种抑菌手工皂 [0055] 按照实施例1步骤1所示方法提取石碌含笑精油、茉莉精油、艾叶精油和石碌含笑纯露。 [0056] 将0.7g的石碌含笑精油、0.2g的艾叶精油、0.2g的茉莉精油、1g的荷荷芭油、4g的石碌含笑纯露、4.4g的橄榄油和0.04g的维生素E置于10mL的离心管中，混合均匀并置于涡旋混合器振荡1min，得到复合精油3。 [0057] 将105g的皂基装入烧杯并置于60℃水浴中加热至皂基完全溶解，接着将完全溶解的皂基与复合精油3在60℃水浴中充分混合均匀，导入模具中，待冷却后即得抑菌手工皂3。 [0058] 实施例4一种抑菌手工皂 [0059] 按照实施例1步骤1所示方法提取石碌含笑精油、茉莉精油、艾叶精油和石碌含笑纯露。 [0060] 将0.8g的石碌含笑精油、0.25g的艾叶精油、0.2g的茉莉精油、1g的荷荷芭油、4g的石碌含笑纯露、5g的橄榄油和0.04g的维生素E置于10mL的离心管中，混合均匀并置于涡旋混合器振荡1min，得到复合精油4。 [0061] 将120g的皂基装入烧杯并置于60℃水浴中加热至皂基完全溶解，接着将完全溶解的皂基与复合精油4在60℃水浴中充分混合均匀，导入模具中，待冷却后即得抑菌手工皂4。 [0062] 对比例1一种精油手工皂 [0063] 按照实施例2所示方法制备精油手工皂1，区别在于：复合精油5不含有石碌含笑精油，并且艾叶精油、茉莉精油和石碌含笑纯露的总质量为4.95g(质量比为3：4：80)，其余组分用量不变。 [0064] 对比例2一种精油手工皂 [0065] 按照实施例2所示方法制备精油手工皂2，区别在于：复合精油6不含有艾叶精油，并且石碌含笑精油、茉莉精油和石碌含笑纯露的总质量为4.95g(质量比为3：1：20)，其余组分用量不变。 [0066] 对比例3一种精油手工皂 [0067] 按照实施例2所示方法制备精油手工皂3，区别在于：复合精油7不含有茉莉精油，并且石碌含笑精油、艾叶精油和石碌含笑纯露的总质量为4.95g(质量比为12：3：80)，其余组分用量不变。 [0068] 对比例4一种精油手工皂 [0069] 按照实施例2所示方法制备精油手工皂4，区别在于：复合精油8的制备过程中，茉莉精油质量为0.6g，维生素E质量为0.06g，其余组分及各组分用量相同。 [0070] 将90g的皂基装入烧杯并置于60℃水浴中加热至皂基完全溶解，接着将完全溶解的皂基与复合精油8在60℃水浴中充分混合均匀，导入模具中，待冷却后即得精油手工皂4。 [0071] 对比例5一种精油手工皂 [0072] 按照实施例2所示方法制备精油手工皂5，区别在于：复合精油9的制备过程中，茉莉精油质量为0.2g，维生素E质量为0.02g，其余组分及各组分用量相同。 [0073] 将90g的皂基装入烧杯并置于60℃水浴中加热至皂基完全溶解，接着将完全溶解的皂基与复合精油9在60℃水浴中充分混合均匀，导入模具中，待冷却后即得精油手工皂5。 [0074] 测试例1手工皂质量评价 [0075] 1、测定方法 [0076] 按照国家标准QB/T 2485‑2008对实施例2制备得到的抑菌手工皂2、实施例4制备得到抑菌手工皂4、对比例2制备得到的精油手工皂2和对比例5制备得到的精油手工皂5进行感官指标和理化指标测定。 [0077] 2、实验结果 [0078] (1)感官评测结果 [0079] 实施例2制备得到的抑菌手工皂2、实施例4制备得到抑菌手工皂4、对比例2制备得到的精油手工皂2和对比例5制备得到的精油手工皂5的皂型稳定，色泽洁白均匀且无明显杂质，符合标准要求。 [0080] 实施例2制备得到的抑菌手工皂2、实施例4制备得到抑菌手工皂4、对比例2制备得到的精油手工皂2和对比例5制备得到的精油手工皂5的香气稳定，自然清新且无不良异味，符合规定香型。 [0081] (2)理化指标测定结果 [0082] 理化指标测定结果如表1所示。 [0083] 表1理化性能指标测定结果 [0084]检验项目 指标(Ⅱ型) 抑菌手工皂和精油手工皂检验结果 总有效物含量/％ ≥53 合格 总游离碱(以NaOH)/％ ≤0.30 合格 游离苛性碱(以NaOH)/％ ≤0.10 合格 氯化物含量(以NaCL)/％ ≤1.0 合格 a 五氧化二磷含量/％ ≤1.1 合格 [0085] 结果显示，实施例2制备得到的抑菌手工皂2、实施例4制备得到抑菌手工皂4、对比例2制备得到的精油手工皂2和对比例5制备得到的精油手工皂5均符合香皂的国家标准。 [0086] 测试例2抑菌实验测试 [0087] 1、实验方法 [0088] 分别测试复合精油以及手工皂对于大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌和铜绿假单胞菌的抑菌能力，具体如下： [0089] (1)圆盘扩散法测试复合精油抑菌能力 [0090] 将白色念珠菌用沙氏葡萄糖琼脂培养基培养，将大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌分别用LB培养基培养，培养结束后收集菌株利用离心机重悬后，将各个菌株对6 8 应的菌液稀释至1.6×10 ～1.6×10CFU/mL，得到大肠杆菌菌液、金黄色葡萄球菌菌液、白色念珠菌菌液和铜绿假单胞菌菌液。 [0091] 以检测实施例1中的复方精油1对于大肠杆菌的抑菌能力为例，具体如下： [0092] 将灭菌后的沙氏葡萄糖琼脂培养基和灭菌后的LB琼脂培养基注入直径为9cm的培养皿中，待培养基凝固后，得到测试培养基。 [0093] 吸取100μL的大肠杆菌菌液均匀涂抹于测试培养基中，接着用镊子夹取三片高温灭菌后直径为6mm的滤纸片平贴于测试培养基上；实验组设置为将实施例1中得到的复合精油1使用0.45μm微孔滤膜过滤并灭菌后，取10μL滴加到其中一片滤纸片上； [0094] 阳性对照组设置为将10μL的抗生素溶液(青霉素钠盐，10mg/mL)滴加到其中一片滤纸片上；阴性对照组设置为将10μL过滤灭菌后的Tween‑80溶液(1％，w/w)滴加到其中一片滤纸片上。 [0095] 待滤纸片液体被测试培养基充分吸收后，在37℃下培养24h后测定抑菌圈直径，共设置3个重复的测试培养基，取平均值即为复合精油1对大肠杆菌的抑菌直径。 [0096] 将100μL的大肠杆菌菌液分别替换成金黄色葡萄球菌菌液、白色念珠菌菌液和铜绿假单胞菌菌液，按照上述方法进行测试，得到复合精油1对金黄色葡萄球菌、白色念珠菌和铜绿假单胞菌的抑菌直径；其中测定对白色念珠菌的抑菌能力时，待滤纸片液体被充分吸收后，需将培养基于28℃倒置培养48h。 [0097] 将复合精油1分别替换成实施例2～实施例4中的复合精油2～复合精油4、对比例1～对比例5的复方精油5～复方精油9以及实施例1步骤1提取得到的石碌含笑精油、艾叶精油和茉莉精油，按照上述方法进行检测，分别检测各个精油对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌和铜绿假单胞菌的抑菌直径。 [0098] (2)洗手抑菌测试 [0099] 以11名志愿者作为测试对象，进行洗手抑菌测试： [0100] 以使用实施例1制备的抑菌手工皂1为例，进行检测，随机选取1名志愿者，使用灭菌的无纺布擦拭志愿者的双手，将擦拭后的无纺布放入含有LB液体培养基的10mL离心管中，在37℃恒温培养箱中培养24h后，使用紫外分光光度计记录细菌数目并计算细菌浓度。 [0101] 接着志愿者使用实施例1制备得到的抑菌手工皂1清洗双手，清洗结束后在0h、1h、2h、3h和4h分别用不同的灭菌后的无纺布擦拭双手，将每个时间段对应的无纺布分别放入含有LB液体培养基的不同的10mL离心管中，在37℃恒温培养箱中培养24h后，使用紫外分光光度计记录细菌数目并计算细菌浓度。 [0102] 以细菌浓度的变化反映手工皂的抑菌功效。 [0103] 将实施例1制备的抑菌手工皂1分别替换为实施例2～实施例4中的抑菌手工皂2～抑菌手工皂4、对比例1～对比例5的精油手工皂1～精油手工皂5，并且更换志愿者进行测试，分别记录各个手工皂对应的使用后的细菌数目并计算细菌浓度。 [0104] 空白对照组设置为使用清水洗手测试相应细菌数目并计算细菌浓度；阳性对照组设置为使用市售抑菌皂(QB/T2486‑2008 I型)洗手测试相应细菌数目并计算细菌浓度。 [0105] 2、实验结果 [0106] (1)圆盘扩散法测定复合精油的抑菌能力的结果如表2所示。 [0107] 表2复合精油的抑菌直径(mm) [0108] [0109] [0110] 注：抑菌圈精确度为0.01mm。 [0111] 根据表2结果显示：实施例1～实施例4中的复合精油1～复合精油4对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌和铜绿假单胞菌均具有一定的抑菌功能，尤其对金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的抑菌效果更为显著。复合精油1～复合精油4的抑菌效果相较于单方精油(石碌含笑精油、艾叶精油或茉莉精油)的抑菌效果，不仅保留了单方精油对单一菌种的抑制性，还使精油的抑菌能力进一步提升，同时能够抑制多种菌株。 [0112] (2)抑菌手工皂1～抑菌手工皂4的洗手抑菌测试的结果如表3，精油手工皂1～精油手工皂5以及空白对照组和阳性对照组的洗手抑菌测试结果表4所示。 [0113] 表3抑菌手工皂1～抑菌手工皂4的洗手抑菌测试结果(×107CFU/mL) [0114]时间 抑菌手工皂1 抑菌手工皂2 抑菌手工皂3 抑菌手工皂4 洗手前 1.771193 1.728502 1.308158 1.798403 0h 1.183963 1.072184 1.004004 1.130044 1h 1.149748 1.297837 1.10027 1.171641 2h 1.368051 1.503787 1.200727 1.148497 3h 1.576033 1.625762 1.320199 1.255459 4h 1.829053 1.633268 1.463441 1.463441 [0115] 表4精油手工皂1～精油手工皂5以及空白对照组和阳性对照组的洗手抑菌测试结7 果(×10CFU/mL) [0116] [0117] [0118] 根据表3和表4结果显示，随着洗手后时间的增加，使用清水和市售抑菌皂进行洗手的志愿者，手上的细菌数量在一定时间段会明显增加。 [0119] 抑菌测试开始阶段(洗手前～0h)，抑菌手工皂2、抑菌手工皂4、精油手工皂2、精油手工皂3和精油手工皂5都能清洗和抑制大量细菌，清洗后的细菌浓度远远低于使用清水清洗和使用市售抑菌皂清洗；而抑菌手工皂3、精油手工皂1、精油手工皂4、市售抑菌皂和清水清洗的抑菌效果较弱，清洗后细菌浓度下降不明显。 [0120] 在0～1h时，除精油手工皂1和清水清洗外，其余组别的志愿者的手细菌浓度没有明显上升；在1～4h时，仅有抑菌手工皂4和精油手工皂4能够保持较好的抑菌效果；当时间为清洗后4h时，使用精油手工皂4的志愿者的组别的细菌浓度出现显著上升，而使用抑菌手工皂1～抑菌手工皂4的志愿者的组别的细菌浓度保持在相对降低的水平。 [0121] 结果说明：本发明实施例1～实施例4制备得到的抑菌手工皂1～抑菌手工皂4不仅具备优异的抑菌效果，并且还能实现长效抑菌。 |
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