一种抑菌组合物及其在清洁产品中的应用 |
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申请号 | CN202011477943.5 | 申请日 | 2020-12-15 | 公开(公告)号 | CN112516028A | 公开(公告)日 | 2021-03-19 |
申请人 | 科里思特(福建)生物科技有限公司; | 发明人 | 林雅琳; 郑美大; 郑伯欣; 刘明刚; | ||||
摘要 | 本 发明 涉及一种抑菌组合物,其由以下 质量 百分比的成分组成:蛇床果提取物10%~25%、苦参根提取物10%~25%、细叶益母草提取物10%~25%、黄檗树皮提取物10%~25%、野菊花提取物10%~25%。本发明提供的抑菌组合物采用了天然 植物 成分,不含化学合成的物质,无毒、无 副作用 ,安全健康,无刺激,其可以直接用于人体或宠物 皮肤 /毛发,还可以用于制备或者直接加入到洗手液、香皂、止痒露、沐浴露、洗发露、香波等清洁产品中,为个人清洁护理或者宠物毛发清洁带来便捷、安全和有效的杀菌效果,有效 预防 细菌/ 真菌 交叉感染。此外,本发明提供的抑菌洗手液蕴含多种 植物提取 物, 泡沫 细腻丰富、易冲洗,不仅可以高效抑菌,还能快速 去污 、安全环保、温和不刺激。 | ||||||
权利要求 | 1.一种抑菌组合物,其特征在于,其由以下质量百分比的成分组成: |
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说明书全文 | 一种抑菌组合物及其在清洁产品中的应用技术领域[0001] 本发明涉及一种抑菌组合物及其在清洁产品中的应用,属于日化产品技术领域。 背景技术[0002] 随着人们生活水平的提高,个人卫生越来越多地被消费者所认识和重视,抗菌护肤的个人护理品也成为了人们的必需品,如具有抗菌功能的香皂、药皂、洗手液、沐浴液、香波等清洁产品。其中,洗手液已经成了家家户户常备的清洁用品。洗手液以清洁手部卫生为主,主要分为普通洗手液、消毒洗手液和重油污洗手液。普通洗手液仅有单一功效,只能起到清洁去污的作用;消毒洗手液则具有抗菌、抑菌或杀菌的功效。然而,目前这些清洁产品的抑菌活性成分还主要是一些化学合成的抑菌剂和杀菌剂,对人体皮肤具有较大的危害。这些化学物质会刺激皮肤,若长期使用,容易造成皮肤粗糙、皴裂、脱皮和敏感。 [0003] 我国正处于城市化发展的高峰,城市环境污染问题日益突出。人口密集,工业集中,大量消耗化石燃料,使许多城市空气质量恶化。在这种环境下,并伴随着消费者日益增长的清洁意识,消费者在注重产品功能的同时还会非常注重人与自然的和谐。因此,在香皂、药皂、洗手液、沐浴液、香波等清洁产品中加入天然原料替代化学杀菌物质是更加安全、更加环保的选择,这些天然活性成分将起到降低刺激、滋润皮肤、抗菌、抑菌、以及提供天然的香气和色泽的作用。公开号为CN109453086A和CN111588664A的中国专利申请均公开了植物提取组合物及其在抑菌类清洁产品中的应用,并取得了明显的效果。 [0004] 因此,寻找安全、无毒、高效的天然杀菌物质是具有抗菌功能的日化产品的发展方向。 发明内容[0005] 本发明的目的在于提供一种安全健康、无刺激,可以直接用于人体或宠物皮肤/毛发的抑菌组合物,及其在清洁产品中的应用。 [0006] 为了实现本发明的目的,本发明的第一方面提供了一种抑菌组合物,其由以下质量百分比的成分组成: [0007] 蛇床果提取物10%~25%、苦参根提取物10%~25%、细叶益母草提取物10%~25%、黄檗树皮提取物10%~25%、野菊花提取物10%~25%。 [0008] 作为一种优选的实施方式,所述抑菌组合物由以下质量百分比的成分组成: [0009] 蛇床果提取物20%、苦参根提取物20%、细叶益母草提取物20%、黄檗树皮提取物20%、野菊花提取物20%。 [0010] 本发明的第二方面提供了本发明第一方面所述的抑菌组合物的如下任一应用: [0011] (1)在抑制细菌和/或真菌中的应用; [0012] (2)在制备抑制细菌和/或真菌的清洁产品中的应用; [0013] 其中,所述清洁产品为洗手液、香皂、止痒露、沐浴露、洗发露或宠物香波; [0014] 所述细菌包括金黄色葡萄球菌和大肠杆菌中的至少一种;所述真菌为白色念珠菌。 [0015] 作为一种优选的实施方式,所述抑菌组合物的用量为≥2.5%(w/w)。 [0016] 本发明的第三方面提供了一种抑菌洗手液,其包括本发明第一方面所述的抑菌组合物作为有效成分。 [0017] 作为一种优选的实施方式,所述抑菌组合物的含量为≥2.5%(w/w)。 [0018] 作为一种优选的实施方式,所述抑菌洗手液还包括以下质量百分比的组分: [0024] 作为一种优选的实施方式,所述保湿剂为甘油。 [0026] 作为一种优选的实施方式,所述缓释剂为EDTA‑2Na。 [0027] 作为一种优选的实施方式,所述着色剂为柠檬黄、日落黄、亮蓝色素、深蓝色素、紫色素、红色素中的一种。 [0028] 区别于现有技术,本发明具有以下有益效果: [0029] 1、本发明提供了一种抑菌组合物,通过科学配伍,利用蛇床果提取物、苦参根提取物、细叶益母草提取物、黄檗树皮提取物和野菊花提取物之间的协同增效作用,对常见大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌等病原菌有明显的抑制作用,有效保障了人们的卫生健康。 [0030] 2、本发明提供的抑菌组合物采用了天然植物成分,不含化学合成的物质,无毒、无副作用,安全健康,无刺激,可以直接用于人体或宠物皮肤/毛发。 [0031] 3、本发明提供的抑菌组合物可以用于制备或者直接加入到洗手液、香皂、止痒露、沐浴露、洗发露、香波等清洁产品中,为个人清洁护理带来了便捷、安全和有效的杀菌效果。 具体实施方式[0033] 为详细说明技术方案的技术内容、构造特征、所实现目的及效果,以下结合具体实施例详予说明。 [0034] 下述实施例中的实验方法,如无特殊说明,均为常规方法。下述实施例中所用的原料、辅料、试剂及器材等,如无特殊说明,均可从商业途径获得。以下实施例中的定量试验,均设置三次重复实验,数据为三次重复实验的平均值或平均值±标准差。 [0035] 首先,对本发明实施例中涉及的原料、试剂及其制备方法等进行说明。 [0037] 苦参根提取物,具有清热燥湿、利尿解热、祛风止肤痒、苦味健胃、驱虫杀菌、消炎止痒之功效,且其能够提高组合物的稳定性,降低防腐剂的添加量。 [0039] 黄檗树皮提取物,是芸香料植物黄柏或黄檗的干燥树皮中提取的活性成分,具有抗炎、杀菌功效。 [0040] 野菊花提取物,是菊科植物野菊(Chrysanthemum indicum L.)、北野菊(C.borealeMak.)或岩香菊(C.lavandulaefolium(Fisch.)Mak.)的头状花序的提取物,具有抗菌、抗病毒和免疫调节作用。 [0042] 各植物抑菌成分:蛇床果提取物、苦参根提取物、细叶益母草提取物、黄檗树皮提取物、野菊花提取物均采购自湖州佳美生物化学制品有限公司。 [0043] 细菌测试片:金黄色葡萄球菌测试片(6491):用于金黄色葡萄球菌的菌落计数,购自明尼苏达矿务及制造业公司。 [0044] 培养基的制备: [0045] (1)营养琼脂培养基的制备:分别称取牛肉膏3.0g、蛋白胨10.0g、琼脂粉15.0g、氯化钠5.0g置于1000mL烧杯中,加无菌水1000mL使其溶解,煮沸,冷却至60℃,用1mol/L氢氧化钠或1mol/L盐酸将pH值调节为7.2~7.4,分装到250mL三角瓶中,塞上透气塞子,121℃高压灭菌20min,冷藏备用。 [0046] (2)营养肉汤培养基的制备:分别称取牛肉膏3.0g、蛋白胨10.0g、氯化钠5.0g置于1000mL烧杯中,加无菌水1000mL使其溶解,煮沸,冷却至60℃,用1mol/L氢氧化钠或1mol/L盐酸将pH值调节为7.2~7.4,分装到250mL或500mL三角瓶或者10mL或25mL试管中,塞上透气塞子,121℃高压灭菌20min,冷藏备用。 [0047] (3)金黄色葡萄球菌显色培养基:用于金黄色葡萄球菌的平板菌落计数,购自广东环凯微生物科技有限公司。 [0049] (5)沙氏葡萄糖液体培养基(SDB):用于白色念珠菌的培养,购自广东环凯微生物科技有限公司。 [0050] (6)结晶紫中性红胆盐琼脂(VRBA):用于大肠菌群的平板菌落计数,购自广东环凯微生物科技有限公司。 [0051] 试验菌悬液的制备: [0052] 本发明实施例中以金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌以及白色念珠菌作为试验菌。 [0053] (1)金黄色葡萄球菌(CICC10384)试验菌悬液的制备:取冻干菌种管,在无菌操作下打开,用无菌吸管吸取0.5mL液体培养基于管中将冻干菌粉全部溶解。取营养肉汤培养基5.0mL~10mL/试管,滴入少许菌种悬液,置于37℃培养箱中培养24h,用接种环取第一代培养的菌悬液,划线接种于斜面试管中,于37℃培养箱中培养24h即为第3代培养物。取菌种新鲜培养物,吸取5mL无菌水加入斜面试管中,反复吹吸,洗下菌苔,随后将洗液移至另一支无 6 菌试管中,用电动混合器混匀,即得金黄色葡萄球菌悬液(菌体浓度为1.0×10 ~1.0× 7 10CFU/mL)。 [0054] (2)大肠埃希氏菌(CICC10389)试验菌悬液的制备:在无菌操作下,用接种环挑取一环冻干菌粉,加入营养肉汤培养基(500mL的三角瓶)中混合均匀,于37℃条件下静置培养24h;用接种环将培养好的菌悬液划线于已凝固的无菌营养琼脂培养基平板上,置于37℃生化培养箱中培养24h;用接种环挑取单菌落,加入新的营养肉汤培养基中混合均匀,置于37 6 7 ℃条件下静置培养24h,得到大肠埃希氏菌悬液(菌体浓度为1.0×10~1.0×10CFU/mL)。 [0055] (3)白色念珠菌(ATCC10231)试验菌悬液的制备:在无菌操作下,用接种环挑取一环冻干菌粉,加入沙氏葡萄糖液体培养基(500mL的三角瓶)中混合均匀,于28℃条件下静置培养24h;用接种环将培养好的菌悬液划线于已凝固的无菌马铃薯葡萄糖琼脂培养基平板上,置于28℃生化培养箱中培养24h;用接种环挑取单菌落,加入新的沙氏葡萄糖液体培养6 基中混合均匀,置于28℃条件下静置培养24h,得到白色念珠菌悬液(菌体浓度为1.0×10 7 ~1.0×10CFU/mL)。 [0057] 接着,通过具体实施例对本发明进行详细说明,但是本发明并不限定于以下的实施方式。 [0058] 实验例1抑菌组合物中植物抑菌成分及其配比的探究 [0059] 为了探究各植物抑菌成分的有效添加量及最佳配比,做了如下对比实验。各实验组的组分及配比如表1所示。 [0060] 分别以金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌和白色念珠菌作为试验菌。设置实验组1~13:在无菌操作下,分别吸取1mL的试验菌悬液,分别加入98mL的营养肉汤培养基,混合均匀,再分别加入1mL实验组1~13的植物抑菌剂,得到实验组1~13,每组设置3个平行进行重复实验。同时设置空白对照组:吸取1mL的细菌繁殖体悬液,加入98mL的营养肉汤培养基,混合均匀,再加入1mL无菌水,同样设置3个平行。 [0061] 吸取各实验组和对照组的样液(或用生理盐水作适当的稀释后,取其中2‑3个稀释度的稀释液)1mL,置于灭菌平板内,每个样液接种三个灭菌平板。用凉至40℃~45℃的琼脂培养基(金黄色葡萄球菌对应的组别采用金黄色葡萄球菌显色培养基,大肠埃希氏菌对应的组别采用VRBA培养基,白色念珠菌对应的组别采用PDA培养基)作倾注,绕8字混合均匀,待培养基凝固后倒扣平板于37℃培养箱内培养(白色念珠菌对应的组别置于28℃培养箱内培养),24h后观察菌落生长情况,并计算抑菌效果。实验结果如表2所示,抑菌程度用“+”、“—”表示。 [0062] 表1植物抑菌成分的组分及配比 [0063] [0064] 表2各组混合培养物的抑菌程度 [0065] [0066] 注:表中数据为三次重复实验的平均值;—表示抑菌率为<0;+表示抑菌率为75%~85%;++表示抑菌率为86%~95%;+++表示抑菌率为96%~98%;++++表示抑菌率为99%~100%。 [0067] 抑菌率的计算公式: [0068] [0069] 式中:X——抑菌率,%; [0070] A——空白组共培养后平均菌落数; [0071] B——实验组共培养后平均菌落数。 [0072] 上述结果表明,单一的植物提取物能够抑制金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、白色念珠菌的繁殖和生长,但其抑制效果有限。通过本发明将几种抑制效果优良的植物提取物结合起来,相比于单一的植物提取物抑菌效果更佳,起到了协同增效作用,可以有效保障人们或宠物的卫生健康。 [0073] 实验例2抑菌组合物有效抑菌用量的探究 [0074] 为了探究抑菌组合物的有效抑菌用量,采用实验例1中的实验组10的抑菌组合物进行如下的对比实验。 [0075] 1、实验组:以无菌水作为稀释液,各组分按质量分数计: [0076] ①0.5%抑菌组合物:0.5%抑菌组合物加入99.5%无菌水; [0077] ②1%抑菌组合物:1%抑菌组合物加入99%无菌水; [0078] ③1.5%抑菌组合物:1.5%抑菌组合物加入98.5%无菌水; [0079] ④2%抑菌组合物:2%抑菌组合物加入98%无菌水; [0080] ⑤2.5%抑菌组合物:2.5%抑菌组合物加入97.5%无菌水; [0081] ⑥3%抑菌组合物:3%抑菌组合物加入97%无菌水; [0082] ⑦3.5%抑菌组合物:3.5%抑菌组合物加入96.5%无菌水; [0083] ⑧4%抑菌组合物:4%抑菌组合物加入96%无菌水; [0084] ⑨4.5%抑菌组合物:4.5%抑菌组合物加入95.5%无菌水; [0085] ⑩5%抑菌组合物:5%抑菌组合物加入95%无菌水。 [0086] 2、具体操作: [0087] 以金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌和白色念珠菌为试验菌。设置实验组1~10:在无菌操作下,分别吸取1mL的试验菌悬液,分别加入98mL的营养肉汤培养基,混合均匀,再分别加入1mL实验组①~⑩的试剂,得到实验组①~⑩,每组设置3个平行进行重复实验。同时设置空白对照组:吸取1mL的细菌繁殖体悬液,加入98mL的营养肉汤培养基,混合均匀,再加入1mL无菌水,同样设置3个平行。 [0088] 吸取各实验组和对照组的样液(或用生理盐水作适当的稀释后,取其中2‑3个稀释度的稀释液)1mL,置于灭菌平板内,每个样液接种三个灭菌平板。用凉至40℃~45℃的琼脂培养基(金黄色葡萄球菌对应的组别采用金黄色葡萄球菌显色培养基,大肠埃希氏菌对应的组别采用VRBA培养基,白色念珠菌对应的组别采用PDA培养基)作倾注,绕8字混合均匀,待培养基凝固后倒扣平板于37℃培养箱内培养(白色念珠菌对应的组别置于28℃培养箱内培养),24h后观察菌落生长情况,并计算抑菌效果。实验结果如表3所示,抑菌程度用“+”、“—”表示。 [0089] 表3各组混合培养物的抑菌程度 [0090] [0091] 注:表中数据为三次重复实验的平均值;—表示抑菌率为<0;+表示抑菌率为75%~85%;++表示抑菌率为86%~95%;+++表示抑菌率为96%~98%;++++表示抑菌率为99%~100%;抑菌率的计算公式和实验例1中的相同。 [0092] 上述结果表明,使用2.5%以上的抑菌组合物,其抑菌率大于86%;并且使用量在3%~4%(w/w)时,抑菌率即可达到96%~100%。可见,本发明的抑菌组合物的有效抑菌用量为≥2.5%(w/w)。在以下实施例中,以3%抑菌组合物的添加量作为示例性说明。 [0093] 实施例1抑菌沐浴露的制备 [0094] 本实施例给出了一种抑菌沐浴露,其组分按质量分数计为:脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠AES 16%、烷醇酰胺65013%、椰油酰胺丙基甜菜碱CAB‑355%、乙二胺四乙酸二钠(EDTA‑2Na)0.05%、柠檬酸0.05%、珠光片1.6%、氯化钠0.8%、纯化水72.5%、香精0.1%、抑菌组合物3%(含有20%蛇床果提取物、20%苦参根提取物、20%细叶益母草提取物、20%黄檗树皮提取物以及20%野菊花提取物)。 [0095] 抑菌沐浴露的制备方法:纯化水加热到85℃,依次加入氯化钠、EDTA‑2Na、柠檬酸,使原料充分溶解后,加入脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠AES、椰油酰胺丙基甜菜碱CAB‑35、烷醇酰胺6501,搅拌溶解后,将温度调整到75℃,加入珠光片,搅拌均匀,通入冷却水,缓慢冷却到45℃,加入香精和抑菌组合物,搅拌均匀,继续冷却到38℃。取样检验合格后灌装为抑菌沐浴露成品。 [0096] 实施例2抑菌香皂的制备 [0097] 本实施例给出了一种抑菌香皂,其组分按质量分数计为:纯化水2%、EDTA‑2Na 0.1%、叔丁基羟基苯甲醚BHA 0.02%、香精1%、钛白粉0.4%、抑菌组合物3%(含有20%蛇床果提取物、20%苦参根提取物、20%细叶益母草提取物、20%黄檗树皮提取物以及20%野菊花提取物),余量为皂基。 [0098] 抑菌香皂的制备方法:将纯化水、EDTA‑2Na、叔丁基羟基苯甲醚香精、以及抑菌组合物混合、搅拌溶解均匀,得到混合液;将钛白粉与皂基混合均匀,得到混合物;然后混合液喷入混合物中,拌和均匀,经过三辊研磨机研磨均匀后,再经过压条、切块、打印等操作,即可制得抑菌香皂。取样检验合格后灌装为抑菌香皂成品。 [0099] 实施例3抑菌宠物香波的制备 [0100] 本实施例给出了一种抑菌宠物香波,其组分按质量分数计为:抑菌组合物3%(含有20%蛇床果提取物、20%苦参根提取物、20%细叶益母草提取物、20%黄檗树皮提取物以及20%野菊花提取物)、烷基糖苷8.0‑%、椰油酰胺丙基甜菜碱10%、椰子油脂肪酸二乙醇酰胺12%、烷基二甲基聚硅氧烷1.2%、伊维菌素2.5%、氯化钠1.5%、柠檬酸1.0%、EDTA‑2Na 0.5%、香精1%,余量为纯化水。 [0101] 抑菌宠物香波的制备方法:向50℃的纯化水中加入配比量的烷基糖苷、椰油酰胺丙基甜菜碱、椰子油脂肪酸二乙醇酰胺,搅拌条件下进行乳化得混合液A;向混合液A中加入配比量的烷基二甲基聚硅氧烷,于40℃温度条件下搅拌混合均匀得到混合液B;向混合液B中加入配比量的伊维菌素、抑菌组合物,混合均匀后,得到混合溶液C;向混合液C中加入配比量的乙二胺四乙酸二钠、柠檬酸、氯化钠和香精,混合均匀。取样检验合格后灌装为抑菌宠物香波成品。 [0102] 实施例4抑菌洗手液的制备 [0103] 本实施例给出了一种抑菌洗手液,其组分按质量分数计为:月桂醇聚醚硫酸酯钠10%、椰油酰胺丙基甜菜碱2%、月桂基羟基磺基甜菜碱1%、月桂醇硫酸酯铵4%、椰油酰甘氨酸钾2%、柠檬酸0.01%、纯化水74.39%、植物提取物3%(含有20%蛇床果提取物、20%苦参根提取物、20%细叶益母草提取物、20%黄檗树皮提取物以及20%野菊花提取物)、苯氧乙醇0.35%、EDTA‑2Na 0.05%、香精0.2%、氯化钠2%、甘油1%。 [0104] 抑菌洗手液的制备方法:在搅拌条件下,将月桂醇聚醚硫酸酯钠、月桂醇硫酸酯铵、椰油酰胺丙基甜菜碱、月桂基羟基磺基甜菜碱、椰油酰甘氨酸钾、柠檬酸、纯化水搅拌、溶解均匀;接着,加入抑菌组合物、苯氧乙醇、EDTA‑2Na、香精、氯化钠、甘油,搅拌、溶解均匀。充分搅拌均匀后过滤出料,将半成品密封后放置陈化间,陈化时间为48h。同时取样检测半成品的感官指标、理化指标、微生物指标等,检验合格后再进行灌装、包装。 [0105] 在本实施例中,未加入着色剂,在实际生产过程中,可根据需要具体选择是否添加着色剂或者其他类型的添加剂。例如,所述着色剂可以为柠檬黄、日落黄、亮蓝色素、深蓝色素、紫色素、红色素中的任意一种。 [0106] 实验例3清洁产品的发泡性能测试 [0107] 1、试验材料 [0108] 实施例1~4的清洁产品、纯化水。 [0109] 2、试验方法 [0110] 采用搅动法测试泡沫体积:称取0.5g样品(实施例1~4的清洁产品中的任意一种)于100mL量筒中,加入20mL纯化水,用玻璃棒均匀搅拌100次,于1min时读取泡沫体积值,重复三次,取平均值。 [0111] 3、测试结果 [0112] 表4清洁产品的发泡性能测试结果 [0113] 组别 实施例1 实施例2 实施例3 实施例4泡沫体积值 66mL 63mL 68mL 65mL [0114] 按上述方法进行测试后,各实施例清洁产品的泡沫体积均达到63mL以上,发泡性能良好。 [0115] 实验例4清洁产品的抑菌效果测试 [0116] 1、对金黄色葡萄球菌的抑制效果 [0117] 在无菌操作下,吸取金黄色葡萄球菌悬液1mL接种于79mL营养肉汤培养基中,混合均匀,再加入20mL清洁产品,作为实验组;另取1mL金黄色葡萄球菌悬液接种于79mL营养肉汤培养基中,加入20mL无菌水作为空白对照组,混合均匀。 [0118] 共培养前的菌落计数:采用3M测试片法,对共培养前的两组混合培养物中金黄色葡萄球菌的菌数进行测定。计数方式:吸取样液(或用生理盐水作适当的稀释后,取其中2‑3个稀释度的稀释液)1mL,置于测试片内,每个样液接种三片3M测试片,然后于37℃培养箱内培养,48h后进行菌落计数。 [0119] 共培养后的菌落计数:将实验组和对照组的混合培养物放置于37℃、200r/min恒温震荡箱中培养,24h后测定共培养后两组混合培养物中金黄色葡萄球菌的菌数。计数方式:吸取样液(或用生理盐水作适当的稀释后,取其中2‑3个稀释度的稀释液)1mL,置于测试片内,每个样液接种三片3M测试片,然后于37℃培养箱内培养,48h后进行菌落计数。 [0120] 表5清洁产品对金黄色葡萄球菌的抑制效果 [0121] [0122] 抑菌率的计算公式: [0123] [0124] 式中:X——抑菌率,%; [0125] A——对照组共培养后平均菌落数; [0126] B——实验组共培养后平均菌落数。 [0127] 2、对大肠埃希氏菌的抑制效果 [0128] 在无菌操作下,吸取大肠埃希氏菌悬液1mL接种于79mL营养肉汤培养基中,混合均匀,再加入20mL清洁产品,作为实验组;另取1mL大肠埃希氏菌悬液接种于79mL营养肉汤培养基中,加入20mL无菌水作为空白对照组,混合均匀。 [0129] 共培养前的菌落计数:用平板计数法测定共培养前两组混合培养物中大肠埃希氏菌的菌数。计数方式:吸取样液(或用生理盐水作适当的稀释后,取其中2‑3个稀释度的稀释液)1mL,置于灭菌平板内,每个样液接种三个灭菌平板。用凉至40℃~45℃的VRBA培养基作倾注,绕8字混合均匀,待培养基凝固后倒扣平板于37℃培养箱内培养,48h后进行菌落计数。 [0130] 共培养后的菌落计数:将实验组和对照组的混合培养物放置于37℃条件下静置培养,24h后测定共培养后两组混合培养物中大肠埃希氏菌的菌数。计数方式与共培养前菌落计数的方式相同。 [0131] 表6清洁产品对大肠埃希氏菌的抑制效果 [0132] [0133] 3、对白色念珠菌的抑制效果 [0134] 在无菌操作下,吸取白色念珠菌悬液1mL接种于79mL营养肉汤培养基中,混合均匀,再加入20mL清洁产品,作为实验组;另取1mL白色念珠菌悬液接种于79mL营养肉汤培养基中,加入20mL无菌水作为空白对照组,混合均匀。 [0135] 共培养前的菌落计数:用平板计数法测定共培养前两组混合培养物中白色念珠菌的菌数。计数方式:吸取样液(或用生理盐水作适当的稀释后,取其中2‑3个稀释度的稀释液)1mL,置于灭菌平板内,每个样液接种三个灭菌平板。用凉至40℃~45℃的PDA培养基作倾注,绕8字混合均匀,待培养基凝固后倒扣平板于28℃培养箱内培养,48h后进行菌落计数。 [0136] 共培养后的菌落计数:将实验组和对照组的混合培养物放置于28℃条件下静置培养,24h后测定共培养后两组混合培养物中白色念珠菌的菌数。计数方式与共培养前菌落计数的方式相同。 [0137] 表7清洁产品对白色念珠菌的抑制效果 [0138] [0139] 实验例5清洁产品的刺激性、过敏性测试 [0140] 将160只小白鼠均分为4组,每组40只,在每只小白鼠背部的相同位置均剪取相同大小的毛发并露出表皮;在每只小白鼠的去毛位置均匀涂抹等量沐浴露。其中,第一组小白鼠涂抹实施例1制备的抑菌沐浴露;第2组小白鼠涂抹实施例2制备的抑菌香皂;第3组小白鼠涂抹实施例3制备的抑菌宠物香波;第4组小白鼠涂抹实施例4制备的抑菌洗手液。涂抹2h后水洗,将涂抹部位与未涂抹部位的皮肤状态进行比较,观察各组小白鼠涂抹部位皮肤有无出现发红、起疹、起泡现象。 [0141] 经观察,各组试验小白鼠涂抹部位均未出现发红、起疹、起泡现象,说明采用本发明提供的抑菌组合物制备的沐浴露、香皂、宠物香波、洗手液均较为温和、无刺激性和过敏反应,不会引起皮肤不良反应。 [0142] 本发明提供的抑菌组合物的应用并不限于以上实施形式,其还可以直接加入到洗手液、香皂、止痒露、沐浴露、洗发露、香波等清洁产品中,为个人清洁护理或者宠物毛发清洁带来便捷、安全和有效的杀菌效果,有效预防细菌交叉感染。 [0143] 本发明提供的清洁产品并不限于以上洗手液、香皂、沐浴露、香波,其还可以是任何包含本发明提供的抑菌组合物的清洁产品。 |