[0001] 本发明属于日常眼睛保健技术领域，尤其是涉及一种含天然活性物质的隐形眼镜保养液及其制备方法及其应用。

[0002] 随着现代文化生活节奏的加快，人们的生活方式和工作条件的改变，用眼的时间越来越多，越来越多的人因为视力下降选择隐形眼镜，但隐形眼镜容易引起眼睛疲劳、干燥等。已有的隐形眼镜保养液大多选用较温和的润湿成分，减少对眼睛的刺激性。天然活性成分来源于植物、动物以及微生物中，为生命活动所需要成分。添加天然活性成分的隐形眼镜保养液可以保护神经细胞特别是大脑细胞、视神经细胞，湿润角膜、营养泪膜、抗眼疲劳效果明显。现在市场上所售添加天然活性成分的隐形眼镜保养液较少。含有天然活性物质的隐形眼镜保养液将成为关注热点。

[0003] 目前，隐形眼镜覆盖在角膜表面、磨损角膜、影响角膜的透氧，长时间配戴，容易引发干眼现象，导致眼酸痒、异物感、多眼屎、干涩感、眼睛烧灼且视物模糊等症状。润眼液是一种含有透明质酸等高保湿润眼因子，对眼部干涩具有滋润作用，不会对眼睛产生刺激的产品，对因配戴隐形眼镜而出现的不适症状具有很好的缓解作用。目前市场上的润眼液产品均以保湿润滑剂、表面活性剂、螯合剂及防腐剂等配以生理盐水配伍组成，多以羟丙基甲基纤维素和医用透明质酸钠为主要成份，利用这些高分子生物材料的粘弹特性和保湿作用，注重眼部的湿润。尽管润眼液产品市场有了长足成长，但长期配戴隐形眼睛造成的眼干，眼涩的问题仍然未能很好解决，功能性营养化润眼液产品成为近年来各大厂商研制的重点。

[0004] 神经酸，即顺‑15‑二十四碳烯酸(Cis‑15‑Tatracosanic Acid)，是一种超长链单不饱和脂肪酸，最早从鲨鱼脑组织中分离出来。神经酸是大脑神经细胞和神经组织的核心天然成分，是迄今为止世界上发现的能促进受损神经组织修复和再生的特效物质，尤其是大脑细胞、视神经细胞、周围神经细胞生长、再发育和维持的必需“高级营养素”，对提高脑神经的活跃程度，修复神经纤维、防止脑神经衰老有很大作用。据目前已有的报导，神经酸是大脑白质的结构性成分，摄入后可以合成神经节苷脂、鞘磷脂和脑苷脂，修复神经元细胞生物膜结构，有利于降低脂褐素的含量，进而提高细胞活力，增强免疫力、延缓衰老。同时神经酸还可以促进大脑发育和认知功能。神经酸在人体内很难通过自身合成，因此必须通过外物摄取来补充。

[0005] β‑胡萝卜素(C40H56)是类胡萝卜素之一，是一种橘黄色的脂溶性化合物，它是自然界中最普遍存在也是最稳定的天然色素。β‑胡萝卜素具有良好的护眼功能。β‑胡萝卜素是维生素A的前体物质，一分子的β‑胡萝卜素在体内酶的催化下可转化为两分子的维生素A，当体内的维生素A达到需求量时，β‑胡萝卜素则不会继续转化，从而保证人体不会因维生素A过量而中毒。视网膜上的视杆细胞含有视紫质而具有暗视觉的功能。适量的β‑胡萝卜素能促进视紫质达到正常含量，从而避免了缺少维生素A所致的暗视野适应迟钝，也避免暗视野之后出现强光对眼睛所造成的损害。此外，还可以预防夜盲症、干眼症、角膜溃疡症以及角膜软化症。

[0006] 2020年，华熙生物科技股份有限公司曾提供一种包含功效成分(维生素A、维生素E、维生素B、牛磺酸、叶黄素、β‑胡萝卜素)的眼部护理组合物配方，能够加速角膜损伤的修复，抗疲劳效果显著，对虹膜充血、肿胀的恢复时间快。2022年，深圳中科欣扬生物科技有限公司公开了一种添加了功效成分(维生素A、维生素B、维生素E、牛磺酸、叶黄素、β‑胡萝卜素)的隐形眼镜护理液配方，可以有效缓解佩戴隐形眼镜时眼睛干涩疲劳，同时具有保护眼表细胞、抵御自由基、预防白内障提高视力等功效。在这两项发明技术中虽然都添加了β‑胡萝卜素，但其都不是配方中的主要成分，且并未具体说明其溶解方法，β‑胡萝卜素在上述两项技术的有益效果中并未发挥主要作用。

[0007] 发明目的：针对现有中存在的问题，本发明提供了一种含天然活性物质的隐形眼镜保养液，添加了具有营养神经、抗疲劳功能的组分，新增了营养神经、抗疲劳功能，对于配戴隐形眼镜引起的眼干涩、眼疲劳等症状，有很好的缓解作用。

[0008] 本发明还提供所述含天然活性物质的隐形眼镜保养液的制备方法和应用。

[0009] 技术方案：为了实现上述目的，本发明所述一种含天然活性物质的隐形眼镜保养液，按重量份包含神经酸0.01～1.2份、β‑胡萝卜素0～0.3份、保湿润滑剂0.05～10份、防腐剂0～0.5份、缓冲剂0.1～8.0份、渗透压调节剂6.0～11.0份、表面活性剂0～10份、螯合剂0.1～5.0份、助溶剂0.1～9.0份、纯化水1000份。

[0010] 作为优选，所述神经酸和β‑胡萝卜素质量比为4:1。

[0011] 其中，所述保湿润滑剂为羟丙基甲基纤维素、透明质酸钠、依克多因、聚乙烯醇、聚乙二醇和右旋糖酐中的任意一种或多种。

[0012] 其中，所述防腐剂为聚亚己基双胍、聚季铵盐、亚氯酸钠和几丁糖中的任意一种或多种。

[0013] 其中，所述表面活性剂为四丁酚醛、泊洛沙姆、硫代甜菜碱中的任意一种或多种。

[0014] 其中，所述缓冲剂包含磷酸二氢钠和磷酸氢二钠、氨丁三醇和盐酸、硼酸‑硼砂中的任意一种或多种。

[0015] 其中，所述渗透压调节剂为氯化钠、氯化钾和硫酸钾中的任意一种或两种。

[0016] 其中，所述螯合剂为乙二胺四乙酸二钠和柠檬酸钠中的任意一种或两种。

[0017] 其中，所述助溶剂为吐温、丙二醇、β‑环糊精中的任意一种。

[0018] 本发明所述的含天然活性物质的隐形眼镜保养液的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

[0019] (1)称取助溶剂加纯化水溶解；

[0020] (2)将天然活性物质神经酸、或者神经酸和β‑胡萝卜素加纯化水，超声分散，滴加至助溶剂的水溶液中，25～50℃下搅拌至完全溶解；

[0021] (3)将保湿润滑剂在30～75℃下搅拌至完全溶解，冷却至室温后，加至步骤(2)的溶液中；

[0022] (4)向步骤(3)溶液中逐步加入防腐剂、缓冲剂、表面活性剂、渗透压调节剂、离子螯合剂，在室温下搅拌，直至完全溶解；

[0023] (5)溶液过滤除菌保存。

[0024] 作为优选，所述含天然活性物质的隐形眼镜保养液的制备方法包括如下步骤：

[0025] S1：称取助溶剂0.1～9.0份，加纯化水溶解于烧杯中，将天然活性物质成分神经酸0.01～1.2份和β‑胡萝卜素0～0.3份，加纯化水超声分散于烧杯中，滴加至助溶剂水溶液中，搅拌，温度控制在25～50℃，搅拌速度100～800r/min；

[0026] S2：称取保湿润滑剂0.05～10份，加纯化水置于烧杯中，30～75℃下搅拌至完全溶解，搅拌速度500～1000r/min，冷却至室温后，将其加至S1中的溶液，混合均匀；

[0027] S3：向上述水溶液中逐步加入防腐剂0～0.5份、表面活性剂0～10份、缓冲剂0.1～8.0份、渗透压调节剂6.0～11.0份、螯合剂0.1～5.0份，搅拌直至完全溶解；

[0028] S4：溶液过滤除菌保存。

[0029] 本发明所述的防护型隐形眼镜保养液在制备具有持久保湿滋润隐形眼镜保养液产品中的应用。

[0030] 本发明首次将神经酸组分添加到隐形眼镜保养液中，增加了营养神经和抗疲劳的功能，并通过大量实验，完成了神经酸和其他组分的复配研究，得到了符合国标要求的隐形眼镜保养液。同时，本发明将神经酸和β‑胡萝卜素两者复配使用，产生了显著的协同增效作用。进一步地，本发明中采用预先加入增溶剂溶解神经酸和β‑胡萝卜素，后与其他组分混溶的工艺，解决了神经酸和β‑胡萝卜素水溶性差的问题，本发明首次提出了上述特定增溶剂的种类选择和溶解方法。

[0031] 目前隐形眼镜保养液产品中还没有添加营养神经、抗疲劳功能的组分的先例，更没有添加神经酸的先例，本发明首次将神经酸引入隐形眼镜保养液体系，在满足产品的常规性能要求(如澄清度、粘度、pH值、渗透压、防腐率、生物安全性)的同时，又新增了对于配戴隐形眼镜引起的眼干涩、眼疲劳等症状，有很好的缓解作用功效。

[0032] 此外，由于神经酸和β‑胡萝卜素两个组分的水溶性都不好，要将其加入一个水溶液体系中，就需要解决其溶解性的问题，而且还要解决两个组分与其他组分的复配稳定性的问题，本发明采用加入特定的助溶剂的方法解决两个新组分的水溶性问题，既要保证新组分能够溶解，又要确保助溶剂的安全性，以及与保养液复配的稳定性，还要保证新组分的功效能够得以体现，这也需要做大量的实验进行助溶剂的筛选和溶解条件的筛选。

[0033] 另外，由于隐形眼镜保养液配方中有不少大分子组分，尤其是保湿润滑剂，大多是大分子组分；而且还有一些组分在高温条件下是不稳定的，因此隐形眼镜保养液产品只能用过滤除菌的工艺进行产品的灭菌，这就对组分的溶解性和溶解工艺提出了要求。大分子的、水溶性不好的组分不能与小分子的、易溶解的组分一起溶解，必须根据各组分的溶解性和稳定性进行分批溶解，而溶解的工艺也需要做大量实验去验证，既要保证溶解性，又要保证组分的稳定性，本发明提出了不同组分分步溶解的工艺，且对每一步的溶解条件进行了特定设计，而现有隐形眼镜保养液制备工艺大多是所有组分一起溶解。

[0034] 本发明的所有制备工艺都简单、易行，未采用复杂的工艺和昂贵的设备，都能在现有隐形眼镜保养液生产线上实现，易于产业化。

[0035] 进一步，在特定的体系下，本发明中研究发现，同时添加神经酸和β‑胡萝卜素，且二者的质量比例在4:1时，可以显著提升持久保湿滋润的作用，并且对于长时间配戴隐形眼镜引起的眼干涩等症状，更加有效的缓解作用。

[0036] 本发明所述的隐形眼镜保养液可通过对眼球的保湿润滑对干眼症起到一定的缓解和改善作用，同时可以有效的抗疲劳，使得护理和保养后的隐形眼镜配戴更加舒适。

[0037] 有益效果：与现有技术相比，本发明具有如下优点：

[0038] (1)本发明制备的添加天然活性物质神经酸和β‑胡萝卜素的隐形眼镜保养液，具有修复疏通受损的眼神经纤维、并可促进神经细胞再生的双重功效，对于配戴隐形眼镜引起的眼干涩、眼疲劳等症状，有很好的缓解作用。同时在特定体系和配比下，本发明中添加的神经酸和β‑胡萝卜素起到了显著协同增效的效果，具有修复疏通受损的眼神经纤维、并可促进神经细胞再生的双重功效，对于配戴隐形眼镜引起的眼干涩、眼疲劳等症状，更加显著的缓解作用。

[0039] (2)本发明制备工艺简单，原料充足，易于产业化。

[0040] (3)本发明制备的隐形眼镜保养液的生物安全性能高，无细胞毒性。

[0041] (4)采用了特殊制备工艺，解决了神经酸和β‑胡萝卜素难溶的问题。

[0042] 以下结合实施例对本发明作进一步说明。

[0043] 下述实施例中所使用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂家建议的条件。

[0044] 其中：神经酸厂商是麦克林(Macklin)，货号为N913270‑1g；β‑胡萝卜素厂商是希恩思，货号为C‑34600‑25g；β‑环糊精厂商是Adamas，货号为81437A；吐温‑80厂商是TCI，货号为TCI‑T2533‑25G；丙二醇厂商是麦克林(Macklin)，货号为P967315‑500g；羟丙基甲基纤维素厂商是Sigma‑Aldrich，货号为09963‑500G；聚乙二醇2000厂商是Greagent，货号为G41713L；依克多因厂商是TCI，货号为TCI‑E1372‑1G；透明质酸钠厂商是Meryer，货号为M76444‑5G；聚亚己基双胍厂商是RUIBIO，货号为JP7861；亚氯酸钠厂商是Adamas，货号为82680A；泊洛沙姆厂商是西亚试剂，货号为C297211‑250g；乙二胺四乙酸二钠厂商是Greagent，货号为G73260A；柠檬酸钠厂商是阿拉丁，货号为S189183‑100g；氨丁三醇(三(羟甲基)氨基甲烷)厂商是麦克林(Macklin)，货号为T822117‑500g；盐酸厂商是南京化试，货号为C0680110125，密度：1.18；硼酸厂商是Aladdin/阿拉丁，货号为Aladdin#B431188‑
100g；硼砂厂商是Sigma‑Aldrich，货号为71997‑100G；磷酸二氢钠厂商是Meryer，货号为M88289‑10G；磷酸氢二钠厂商是Meryer，货号为M25522‑25G；氯化钾厂商是Adamas，货号为
80636BD；氯化钠厂商是Adamas，货号为81793CC；聚乙烯醇1788厂商为Aladdin/阿拉丁，货号为P105124‑500g；硫代甜菜碱厂商是源叶，货号为源叶#S72505‑1g；右旋糖酐厂商是MERCK，货号为00895‑100MG；硫酸钾厂商是Greagent，货号为G82822A；聚季铵盐‑1厂商是麦克林(Macklin)，货号为P909278‑25g；几丁糖厂商是南京都莱生物技术有限公司，货号为C0060；四丁酚醛厂商是Aladdin/阿拉丁，货号为T100874‑1g；纯化水厂商是娃哈哈。以上原料采用其他厂家市售均可。

[0045] 以下实施例中各原料均按重量份计算

[0046] 实施例1

[0047] 1、称取8.0份吐温80加入400份纯化水溶解于烧杯。

[0048] 2、将神经酸1.0份、β‑胡萝卜素0.2份加200份纯化水超声分散于烧杯，缓慢加至吐温80水溶液中，45℃下搅拌至完全溶解，搅拌速度为700r/min。

[0049] 3、称取8.0份羟丙基甲基纤维素加纯化水400份置于烧杯中，35℃下搅拌至完全溶解，搅拌速度为900r/min，冷却至室温后，将其加至步骤2的溶液中，混合均匀。

[0050] 4、向步骤3的溶液中逐步加入氨丁三醇和盐酸(质量比5：1)4.0份、氯化钠8.0份、乙二胺四乙酸二钠0.1份，搅拌至完全溶解。

[0051] 5、溶液过滤除菌保存。

[0052] 对比例1

[0053] 1、称取8.0份羟丙基甲基纤维素加纯化水1000份置于烧杯中，35℃下搅拌至完全溶解，搅拌速度为900r/min，冷却至室温。

[0054] 2、向步骤1中的溶液逐步加入氨丁三醇和盐酸(质量比5：1)4.0份、氯化钠8.0份、乙二胺四乙酸二钠0.1份，搅拌至完全溶解。

[0055] 3、溶液过滤除菌保存。

[0056] 实施例2

[0057] 1、称取6.0份β‑环糊精加入400份纯化水溶解于烧杯。

[0058] 2、将神经酸1.0份加200份纯化水超声分散于烧杯，缓慢加至β‑环糊精水溶液中，40℃下搅拌至完全溶解，搅拌速度为600r/min。

[0059] 3、称取6.0份透明质酸钠加纯化水400份置于烧杯中，30℃下搅拌至完全溶解，搅拌速度为800r/min，冷却至室温后，将其加至步骤2的溶液中，混合均匀。

[0060] 4、向步骤3的溶液中逐步加入四丁酚醛1.0份、聚亚己基双胍0.15份、硼酸和硼砂(质量比6：1)8.0份、氯化钾9.0份、柠檬酸钠1.0份，搅拌至完全溶解。

[0061] 5、溶液过滤除菌保存。

[0062] 对比例2

[0063] 1、称取6.0份透明质酸钠加纯化水1000份置于烧杯中，30℃下搅拌至完全溶解，搅拌速度为800r/min，冷却至室温。

[0064] 2、向步骤1中的溶液逐步加入四丁酚醛1.0份、聚亚己基双胍0.15份、硼酸和硼砂(质量比6：1)8.0份、氯化钾9.0份、柠檬酸钠1.0份，搅拌至完全溶解。

[0065] 3、溶液过滤除菌保存。

[0066] 实施例3

[0067] 1、称取9.0份丙二醇加入400份纯化水溶解于烧杯。

[0068] 2、将神经酸1.2份、β‑胡萝卜素0.3份加200份纯化水超声分散于烧杯，缓慢加至丙二醇水溶液中，50℃下搅拌至完全溶解，搅拌速度为500r/min。

[0069] 3、称取10.0份依克多因加纯化水400份置于烧杯中，30℃下搅拌至完全溶解，搅拌速度为500r/min，冷却至室温后，将其加至步骤2的溶液中，混合均匀。

[0070] 4、向步骤3的溶液中逐步加入泊洛沙姆1.0份、硫代甜菜碱1.0份、聚季铵盐‑1 0.05份、磷酸二氢钠和磷酸氢二钠(质量比1：9)6.0份、氯化钠11.0份、乙二胺四乙酸二钠
1.5份，搅拌至完全溶解。

[0071] 5、溶液过滤除菌保存。

[0072] 对比例3

[0073] 1、称取10.0份依克多因加纯化水1000份置于烧杯中，30℃下搅拌至完全溶解，搅拌速度为500r/min，冷却至室温。

[0074] 2、向步骤1中的溶液逐步加入泊洛沙姆1.0份、硫代甜菜碱1.0份、聚季铵盐‑1 0.05份、磷酸二氢钠和磷酸氢二钠(质量比1：9)6.0份、氯化钠11.0份、乙二胺四乙酸二钠
1.5份，搅拌至完全溶解。

[0075] 3、溶液过滤除菌保存。

[0076] 实施例4

[0077] 1、称取3.0份吐温‑80加入400份纯化水溶解于烧杯。

[0078] 2、将神经酸0.2份、β‑胡萝卜素0.3份加200份纯化水超声分散于烧杯，缓慢加至吐温水溶液中，40℃下搅拌至完全溶解，搅拌速度为500r/min。

[0079] 3、称取3.0份聚乙烯醇1788加纯化水400份置于烧杯中，70℃下搅拌至完全溶解，搅拌速度为600r/min，冷却至室温后，将其加至步骤2的溶液中，混合均匀。

[0080] 4、向溶步骤3的液中逐步加入四丁酚醛5.0份、泊洛沙姆4.0份、亚氯酸钠0.2份、几丁糖0.2份、氨丁三醇和盐酸(质量比5：1)3.0份、氯化钠4.0份、氯化钾3.0份、乙二胺四乙酸二钠5.0份，搅拌至完全溶解。

[0081] 5、溶液过滤除菌保存。

[0082] 对比例4

[0083] 1、称取1.0份聚乙烯醇1788加纯化水1000份置于烧杯中，70℃下搅拌至完全溶解，搅拌速度为600r/min，冷却至室温。

[0084] 2、向步骤1中的溶液逐步加入四丁酚醛5.0份、泊洛沙姆4.0份、亚氯酸钠0.2份、几丁糖0.2份、氨丁三醇和盐酸(质量比5：1)3.0份、氯化钠4.0份、氯化钾3.0份、乙二胺四乙酸二钠5.0份，搅拌至完全溶解。

[0085] 3、溶液过滤除菌保存。

[0086] 实施例5

[0087] 1、称取2.5份β‑环糊精加入400份纯化水溶解于烧杯。

[0088] 2、将神经酸0.3份加200份纯化水超声分散于烧杯，缓慢加至β‑环糊精水溶液中，30℃下搅拌至完全溶解，搅拌速度为200r/min。

[0089] 3、称取1.0份聚乙二醇2000、1.0份聚乙烯醇1788加纯化水400份置于烧杯中，70℃下搅拌至完全溶解，搅拌速度为680r/min，冷却至室温后，将其加至步骤2的溶液中，混合均匀。

[0090] 4、向步骤3的溶液中逐步加入硫代甜菜碱7.0份、聚亚己基双胍0.25份、硼酸和硼砂(质量比6：1)5.0份、硫酸钾6.0份、柠檬酸钠3.0份，搅拌至完全溶解。

[0091] 5、溶液过滤除菌保存。

[0092] 对比例5

[0093] 1、称取1.0份聚乙二醇2000、1.0份聚乙烯醇1788加纯化水1000份置于烧杯中，70℃下搅拌至完全溶解，搅拌速度为680r/min，冷却至室温。

[0094] 2、向步骤1中的溶液逐步加入硫代甜菜碱7.0份、聚亚己基双胍0.25份、硼酸和硼砂(质量比6：1)5.0份、硫酸钾6.0份、柠檬酸钠3.0份，搅拌至完全溶解。

[0095] 3、溶液过滤除菌保存。

[0096] 实施例6

[0097] 1、称取0.1份丙二醇加入400份纯化水溶解于烧杯。

[0098] 2、将神经酸0.01份加200份纯化水超声分散于烧杯，缓慢加至丙二醇水溶液中，25℃下搅拌至完全溶解，搅拌速度为100r/min。

[0099] 3、称取0.05份右旋糖酐加纯化水400份置于烧杯中，30℃下搅拌至完全溶解，搅拌速度为500r/min，冷却至室温后，将其加至步骤2的溶液中，混合均匀。

[0100] 4、向步骤3的溶液中逐步加入四丁酚醛5.0份、聚季铵盐‑1 0.3份、磷酸二氢钠和磷酸氢二钠(质量比1：9)0.1份、氯化钠10.0份、乙二胺四乙酸二钠2.0份，搅拌至完全溶解。

[0101] 5、溶液过滤除菌保存。

[0102] 对比例6

[0103] 1、称取0.05份右旋糖酐加纯化水1000份置于烧杯中，30℃下搅拌至完全溶解，搅拌速度为500r/min，冷却至室温。

[0104] 2、向步骤1中的溶液逐步加入四丁酚醛5.0份、聚季铵盐‑1 0.3份、磷酸二氢钠和磷酸氢二钠(质量比1：9)0.1份、氯化钠10.0份、乙二胺四乙酸二钠2.0份，搅拌至完全溶解。

[0105] 3、溶液过滤除菌保存。

[0106] 实施例7

[0107] 1、称取7份β‑环糊精加入400份纯化水溶解于烧杯。

[0108] 2、将神经酸0.8份、β‑胡萝卜素0.1份加200份纯化水超声分散于烧杯，缓慢加至β‑环糊精水溶液中，40℃下搅拌至完全溶解，搅拌速度为700r/min。

[0109] 3、称取2.5份右旋糖酐、2.5份透明质酸钠加纯化水400份置于烧杯中，55℃下搅拌至完全溶解，搅拌速度为600r/min，冷却至室温后，将其加至步骤2的溶液中，混合均匀。

[0110] 4、向步骤3的溶液中逐步加入泊洛沙姆5.0份、硫代甜菜碱5.0份、亚氯酸钠0.5份、氨丁三醇和盐酸(质量比5：1)5.5份、氯化钾9.0份、柠檬酸钠4.0份，搅拌至完全溶解。

[0111] 5、溶液过滤除菌保存。

[0112] 对比例7

[0113] 1、称取2.5份右旋糖酐、2.5份透明质酸钠加纯化水1000份置于烧杯中，55℃下搅拌至完全溶解，搅拌速度为600r/min，冷却至室温。

[0114] 2、向步骤1中的溶液逐步加入泊洛沙姆5.0份、硫代甜菜碱5.0份、亚氯酸钠0.5份、氨丁三醇和盐酸(质量比5：1)5.5份、氯化钾9.0份、柠檬酸钠4.0份，搅拌至完全溶解。

[0115] 3、溶液过滤除菌保存。

[0116] 实施例8

[0117] 1、称取9.0份丙二醇加入400份纯化水溶解于烧杯。

[0118] 2、将神经酸1.2份加200份纯化水超声分散于烧杯，缓慢加至丙二醇水溶液中，50℃下搅拌至完全溶解，搅拌速度为800r/min。

[0119] 3、称取10.0份依克多因加纯化水400份置于烧杯中，30℃下搅拌至完全溶解，搅拌速度为1000r/min，冷却至室温后，将其加至步骤2的溶液中，混合均匀。

[0120] 4、向步骤3的溶液中逐步加入泊洛沙姆1.0份、硫代甜菜碱1.0份、聚季铵盐0.05份、磷酸二氢钠和磷酸氢二钠(质量比1：9)6.0份、氯化钠11.0份、乙二胺四乙酸二钠1.5份，搅拌至完全溶解。

[0121] 5、溶液过滤除菌保存。

[0122] 实施例9

[0123] 1、称取9.0份丙二醇加入400份纯化水溶解于烧杯。

[0124] 2、将β‑胡萝卜素0.3份加200份纯化水超声分散于烧杯，缓慢加至丙二醇水溶液中，50℃下搅拌至完全溶解，搅拌速度为800r/min。

[0125] 3、称取10.0份依克多因加纯化水400份置于烧杯中，30℃下搅拌至完全溶解，搅拌速度为1000r/min，冷却至室温后，将其加至步骤2的溶液中，混合均匀。

[0126] 4、向步骤3的溶液中逐步加入泊洛沙姆1.0份、硫代甜菜碱1.0份、聚季铵盐‑1 0.05份、磷酸二氢钠和磷酸氢二钠(质量比1：9)6.0份、氯化钠11.0份、乙二胺四乙酸二钠
1.5份，搅拌至完全溶解。

[0127] 5、溶液过滤除菌保存。

[0128] 实施例10

[0129] 1、渗透压测试

[0130] 对实施例1‑9及对比例1‑7进行渗透压测试，使用仪器为上海医大FM‑8P冰点渗透压计，测试结果详见表1。

[0131] 2、pH测试

[0132] 对实施例1‑9及对比例1‑7进行pH测试，使用仪器为梅特勒托利多pH测试仪，测试结果详见表1。

[0133] 3、粘度测试

[0134] 对实施例1‑9及对比例1‑7进行粘度测试，使用仪器为精天NDJ‑8S数字式粘度计，测试结果详见表1。

[0135] 4、细胞毒性实验

[0136] 将L929小鼠成纤维细胞置于37℃、5％ CO2的培养箱中培养至对数生长期，按1.05
×10个/ml的浓度将细胞接种到96孔板上，每孔加入100μL细胞液，在37℃、5％ CO2的培养箱中培养24小时。待细胞完全粘附后，弃去原培养基，加入100μL含有不同体积浓度(10％、
15％)实施例1‑9和对比例1‑7制备产品的培养基，以二甲基砜(DMSO)为阳性对照，PBS为阴性对照，培养24小时。孵育结束后，弃去上层液体，并在每孔中加入20ul噻唑蓝(MTT)，继续培养4h。培养结束后，弃去上层液体，每孔加入100ul DMSO，用酶标仪在490nm波长处检测每孔的吸光值(OD值)。细胞增殖率(RGR)＝OD(样品)/OD(空白)，按YY0719.7‑2011要求，RGR值均大于80％则表明样品无细胞毒性。实验例1‑9及对比例1‑7的测试结果如表1所示。

[0137] 表1实施例1‑9和对比例1‑7的理化参数及细胞毒性测试结果

[0138]样品名称 渗透压(mosm/kg) pH 粘度(mPa·s) 细胞增殖率
实施例1 288 7.03 2.17 103.59％
对比例1 286 7.07 2.11 97.87％
实施例2 305 7.12 2.41 100.78％
对比例2 308 7.13 2.35 98.56％
实施例3 330 7.00 3.09 104.73％
对比例3 326 6.98 2.97 101.25％
实施例4 273 6.95 2.98 89.44％
对比例4 276 6.87 2.84 91.70％
实施例5 263 6.90 2.56 95.54％
对比例5 265 6.95 2.54 93.48％
实施例6 320 6.83 2.09 91.08％
对比例6 319 6.85 2.07 92.84％
实施例7 308 6.96 3.15 91.08％
对比例7 304 7.02 2.89 89.79％
实施例8 308 7.01 2.53 98.73％
实施例9 278 6.83 2.78 90.52％
阴性对照 ‑ ‑ ‑ 96.34％
阳性对照 ‑ ‑ ‑ 2.63％

[0139] 表1的数据结果表明，本发明所制隐形眼镜保养液渗透压在260‑330mOsm/Kg之间，pH在6.8‑7.2之间，粘度在2.1‑3.2之间，符合YY0719.2‑2009标准要求。

[0140] 本发明方法制备的隐形眼镜保养液RGR值均大于85％，证明其不具有潜在细胞毒性。

[0141] 实施例10

[0142] 防腐实验

[0143] 防腐实验中所用的细菌包括绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌，真菌包括白色念珠菌和黑曲霉。所有试验菌在琼脂斜面培养基上培养。用无菌的PBS收集每种培养菌，后用离心法洗涤培养菌，再用分光光度法测定混悬液的光密度值来估算每种菌液的近似浓度。

[0144] 取样品管54支，每管加入样品(实施例2‑9和对比例2‑7)10ml，将细菌(绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌)、真菌(白色念珠菌和黑曲霉)分别接入样品管中，使其菌液浓5 6
度在1.0×10CFU/mL‑1.0×10CFU/mL之间，每种样品每种菌种接种3管为一组。保证接种菌的体积不超过样品体积的1％，充分混合使接种菌完全分散。将样品管放入培养箱中培养，细菌的培养温度为35℃，真菌的培养温度为25℃。

[0145] 在培养第14天时，每管取1.0mL接种样品测定活菌数，同组样品数据取平均值。第4 5
14天取样后，对每个样品进行再接种，使菌液浓度为1.0×10CFU/mL‑l.0×10CFU/mL。在第
28天时，每管取1.0mL接种样品测定活菌数。按照YY0719.4‑2009标准要求，对于细菌(绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌)，在第14天时，每种试验菌杀菌率不小于99.9％；14天再接种后，在第28天时，每种试验菌的浓度应再减少，杀菌率不小于99.9％。对于真菌(白色念珠菌和黑曲菌)，在14天时，每种试验菌每毫升恢复生长菌数应保持或低于其初始浓度；14天再接种后，第在28天，每种试验菌的浓度应保持或低于再接种后各试验菌的浓度，其结果如表2所示。

[0146] 表2实施例2‑9及对比例2‑7防腐实验结果

[0147]

[0148]

[0149]

[0150] 表2的数据结果表明，实施例2‑9和对比例2‑7在其开封后使用14天、28天未有常见有害微生物生长，符合YY0719.4‑2009标准要求。

[0151] 实施例11

[0152] 疗效试验

[0153] 1、胆碱能受体拮抗剂诱发干眼症模型：健康新西兰大白兔24只，雌、雄各半，随即分为模型对照组、自制保养液组及市售润眼液组(博士伦润洁玻璃酸钠滴眼液)各3只。每天8点、11点、14点和18点皮下注射氢溴酸东莨菪碱注射液2.0mg/次，共三天。第4天评价各组家兔的眼部干燥症状，确定达到干眼症标准。从第5天开始模型对照组、自制保养液组及市售润眼液组分别左眼滴生理盐水、实施例1、2、3、8、9及对比例1、2、3、博士伦润洁玻璃酸钠滴眼液，2滴/次，6次/天，右眼不做处理。并于给润眼液后第0天、3天、7天、14天、21天、28天观察模型兔双眼泪液分泌量。

[0154] 2、泪液分泌试验(Schirmer test)：泪液分泌试验共分为Sit‑Ⅰ和Sit‑Ⅱ两个部分。

[0155] Sit‑Ⅰ试验：将新西兰大白兔置于中等亮度和湿度的室内环境，背光检查，0.5％盐酸丙美卡因表面麻醉剂点眼两滴，细棉签吸除积存结膜囊的泪液，用泪液分泌滤纸进行测试。以5×35mm滤纸一条，在首端5mm处反折，轻巧地置于下睑中外部1/3交界处地睑结膜上，试纸前缘接近下睑睫毛后缘，轻轻的闭合兔眼，5分钟后取出纸条，取出2分钟后测量滤纸湿润部分试纸长度(不包括反折)，反复测3次，取平均值记为滤纸湿润长度(mm)，结果如表3所示。

[0156] Sit‑Ⅱ试验：用一棉棒沿鼻腔颞侧壁向上插入鼻腔，再放一张滤纸(方法同Sit I试验)，5min后将滤纸取出，观察滤纸湿润长度(mm)，结果如表4所示。

[0157] 表3Schirmer test‑SitⅠ滤纸湿润长度

[0158]

[0159]

[0160] 表4Schirmer test‑SitⅡ滤纸湿润长度

[0161]

[0162] 表3和表4的数据结果表明，实施例1、2、3、8、9可通过对眼球的保湿润滑对干眼症起到一定的缓解和改善作用，且缓解效果优于市售产品和对比例1、2、3。进一步地，实施例3的结果明显优于实施例1、2、8、9可以看出，当体系中同时添加神经酸和β‑胡萝卜素，且二者的质量比例在4:1时，可以显著增强抗眼干的效果，说明特定的神经酸和β‑胡萝卜素联用可以起到协同增效的效果。

[0163] 实施例12

[0164] 抗疲劳试验

[0165] 选取新西兰大白兔24只，将其分为生理盐水对照组、实施例组(3组)、对比例组(3组)和市售品组，每组3只，各组家兔的基本状况无显著差异。用强度为3000‑50001iuX的光线照射，光照时间为5天，每天6小时，然后对每组左右眼分别滴加生理盐水、实施例1、2、3及对比例1、2、3、博士伦润洁玻璃酸钠滴眼液，2滴/次，每天5次，直至疲劳症状消失。每天观察兔眼各项疲劳指标变化，并记录症状恢复时间，结果如表5所示。

[0166] 表5抗疲劳实验结果

[0167]

[0168] 根据表5结果，实施例1、2、3、8、9保养液的抗疲劳效果显著，恢复时间快，明显好于生理盐水对照，也优于对比例1、2、3和市售对照品，而且实施例3保养液的效果最佳。进一步地，实施例3的结果明显优于实施例1、2、8、9可以看出，当体系中同时添加神经酸和β‑胡萝卜素，且二者的质量比例在4:1时，可以显著增强抗疲劳试验的效果，说明特定的神经酸和β‑胡萝卜素联用可以起到协同增效的效果。