4-氨基喹唑啉在雌蚊生殖防制中的应用专利检索-化学不育剂专利检索查询-专利查询网

4-氨基喹唑啉在雌蚊生殖防制中的应用

专利类型	发明公开	法律事件	公开; 实质审查;
专利有效性	实质审查	当前状态	实质审查
申请号	CN202411436841.7	申请日	2024-10-15
公开(公告)号	CN119318343A	公开(公告)日	2025-01-17
申请人	南京医科大学;	申请人类型	学校
发明人	周丹; 王鑫; 储睿欣; 沈波; 孙艳; 卜思微; 刘进;	第一发明人	周丹
权利人	南京医科大学	权利人类型	学校
当前权利人	南京医科大学	当前权利人类型	学校
省份	当前专利权人所在省份：江苏省	城市	当前专利权人所在城市：江苏省南京市
具体地址	当前专利权人所在详细地址：江苏省南京市江宁区龙眠大道101号	邮编	当前专利权人邮编：211166
主IPC国际分类	A01N43/54	所有IPC国际分类	A01N43/54 ; A01P7/04 ; A01P23/00
专利引用数量	0	专利被引用数量	0
专利权利要求数量	10	专利文献类型	A
专利代理机构	南京天华专利代理有限责任公司	专利代理人	吴爽; 徐冬涛;
摘要	本发明公开了4‑ 氨基喹唑啉在雌蚊生殖防制中的应用，本发明将4‑氨基喹唑啉粉剂溶于二甲基亚砜(DMSO) 溶剂中，再与葡萄糖溶液成比例混合，通过口饲雌性成蚊的方法抑制雌蚊卵巢发育从而降低其产卵量。本发明开拓了现有药物4‑氨基喹唑啉的新用途，通过直接抑制雌性成蚊生殖势能进而控制蚊种群数量，为我国当前蚊虫化学杀虫剂普遍耐药的现状提供新的解决方法。
权利要求	1.4‑氨基喹唑啉在蚊虫防制中的应用。 2.4‑氨基喹唑啉在制备蚊虫防制的药物或杀虫剂中的应用。 3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，4‑氨基喹唑啉的分子式为C8H7N3，结构式为 4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述药物或杀虫剂中4‑氨基喹唑啉可抑制雌性成蚊卵巢发育，并减少其产卵量。 5.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述蚊虫为双翅目蚊科库蚊属淡色库蚊。 6.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述药物或杀虫剂以4‑氨基喹唑啉为有效成分，有效浓度为25～400mg/L。 7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，随着4‑氨基喹唑啉浓度的升高，雌蚊生殖能力受抑制作用越显著。 8.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述药物或杀虫剂以DMSO为溶剂，再与1～ 10％的葡萄糖溶液成比例混合，采用口饲方式喂养羽化后雌蚊。 9.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述药物或杀虫剂还包括其他防制蚊虫的药物或试剂或其他相关活性成分。 10.一种蚊虫防制的方法，其特征在于，采用4‑氨基喹唑啉或含有4‑氨基喹唑啉的药物或杀虫剂通过糖诱饵的方式施用于蚊媒病疫区。
说明书全文	4‑氨基喹唑啉在雌蚊生殖防制中的应用技术领域 [0001] 本发明属于蚊媒防制技术领域，具体涉及4‑氨基喹唑啉在雌蚊生殖防制中的应用。背景技术 [0002] 蚊是一种吸血昆虫，在吸血过程中可将携带的病原体混入唾液注入并感染宿主，传播疟疾、登革热、寨卡病毒病、基孔肯雅热、乙型脑炎、丝虫病等多种蚊媒病。蚊媒病约占全球所有传染病的17％，每年夺去70多万人的生命，严重威胁人类健康，给全球公共卫生带来巨大挑战。我国幅员辽阔，气候适宜，植被丰富，蚊媒种类繁多且种群密度高，蚊媒病随时可能暴发流行，因此加强蚊媒病防制工作迫在眉睫。 [0003] 由于大部分蚊媒病缺乏疫苗和针对性的特效药物，蚊媒防制成为控制蚊媒病的重要手段。目前蚊媒防制策略主要包括以下四种方法：1、环境防制：通过改造土地、水体或植被环境从而清除蚊虫孳生地；2、物理防制：主要通过使用纱门、纱窗、蚊帐、防蚊帽和驱虫网等方法，减少宿主与蚊虫的接触；3、生物防制：近年来以苏云金杆菌(Bt)、球形芽孢杆菌(Bs)和沃尔巴克氏体较为常见，但成本高，较难大规模实施；4、化学防制：通过空间喷洒化学杀虫剂消灭室内、外蚊虫。目前常见的化学杀虫剂主要包括有机磷类、氨基甲酸酯类和拟除虫菊酯类。凭借高效迅速、使用便捷等优点，化学防制一直是蚊媒综合防制策略中的主要方法。传统化学杀虫剂的长期广泛使用却导致蚊抗药性的产生和发展，因此亟待开发与传统化学杀虫剂之间没有交互抗性的新型杀虫剂。雌蚊的高生殖力有利于维持种群数量从而发挥高效病媒的作用，因此降低雌蚊生殖势能被认为是一种应用前景广阔的蚊媒防制策略。 [0004] 4‑氨基喹唑啉为灰白色粉末状有机化合物，微溶于水，可溶于有机溶剂。其制备方法是利用还原剂(如亚硫酸钠、亚硫酸氢钠或亚砜)对硝基喹唑啉进行还原反应，而后通过结晶提纯后获得。4‑氨基喹唑啉类衍生物结构和氯喹相似，副作用小，可用作治疗和预防疟疾。其发挥抗疟作用的确切机制尚不清楚，可能是4‑氨基喹啉类抗疟药在疟原虫酸性细胞器中不断积累，通过维持较高浓度进而抑制疟原虫的生长；或者4‑氨基喹啉抗疟药会阻止RNA合成和DNA复制等细胞功能，从而导致疟原虫的死亡。现今，以4‑氨基喹唑啉为核心研发了诸多新衍生物，可抑制血管内皮生长因子受体‑2(VEGFR‑2)酪氨酸激酶和磷脂酰肌醇‑3(PI3Ka)等激酶活性，已广泛用于肺癌、乳腺癌、结肠癌、前列腺癌等肿瘤靶标治疗。 [0005] 检索未发现4‑氨基喹唑啉在蚊虫防制领域的应用。发明内容 [0006] 针对现有技术问题的不足，本发明的目的在于提供4‑氨基喹唑啉在雌蚊生殖防制中的应用。本发明提出了一种4‑氨基喹唑啉的新用途，为现有的蚊媒防制提供一种新策略，有助于解决传统化学杀虫剂的抗药性问题。 [0007] 本发明解决其技术问题采用的技术方案是： [0008] 第一方面，本发明保护4‑氨基喹唑啉(4‑Aminoquinazoline)在蚊虫防制中的应用。 [0009] 第二方面，本发明保护4‑氨基喹唑啉(4‑Aminoquinazoline)在制备蚊虫防制的药物或杀虫剂中的应用。 [0010] 在具体的实施方案中，所述4‑氨基喹唑啉的分子式为C8H7N3，结构式为 [0011] 在具体的实施方案中，所述药物或杀虫剂中4‑氨基喹唑啉可抑制雌蚊生殖，具体表现为可以抑制雌性成蚊卵巢发育，并减少其产卵量。 [0012] 在具体的实施方案中，所述蚊虫为双翅目蚊科库蚊属淡色库蚊。 [0013] 在具体的实施方案中，所述药物或杀虫剂以4‑氨基喹唑啉为有效成分，有效浓度为25～400mg/L。 [0014] 在具体的实施方案中，随着4‑氨基喹唑啉浓度的升高，雌蚊生殖能力受抑制作用越显著。 [0015] 在具体的实施方案中，所述药物或杀虫剂以DMSO为溶剂，再与1～10％优选5％的葡萄糖溶液成比例混合，采用口饲方式喂养羽化后雌蚊。 [0016] 在具体的实施方案中，所述药物或杀虫剂可采用如下方法制备：称取4‑氨基喹唑啉灰白色粉末，并加入DMSO后搅拌溶解制成灭蚊剂/杀虫剂。 [0017] 在具体的实施方案中，所述灭蚊剂/杀虫剂，以4‑氨基喹唑啉为主要活性成分，以DMSO为溶剂将4‑氨基喹唑啉配制成10mg/mL的母液，使用时再用5％葡萄糖溶液稀释成浓度为25～400mg/L的溶液，具体如25mg/L、50mg/L、100mg/L、200mg/L、400mg/L的溶液等。 [0018] 其中，10mg/mL 4‑氨基喹唑啉母液的配制：称取50mg 4‑氨基喹唑啉粉末放入提前灭菌过的烧杯中，向烧杯中加入DMSO后放到磁力搅拌机上搅拌溶解30min，最后定容至5mL，配成5mL 10mg/mL的母液，分装冻存备用。 [0019] 后续，以高压灭菌过的5％葡萄糖溶液为溶剂，将10mg/mL的4‑氨基喹唑啉母液分别定容至不同工作浓度即可。 [0020] 在具体的实施方案中，所述药物或杀虫剂还包括其他防制蚊虫的药物或试剂或其他相关活性成分。 [0021] 第二方面，本发明保护一种蚊虫防制的方法，所述方法采用4‑氨基喹唑啉或含有4‑氨基喹唑啉的药物或杀虫剂通过糖诱饵的方式施用于蚊媒病疫区。 [0022] 有益效果：与现有技术相比，本发明具有如下优点： [0023] (1)本发明将现有药物4‑氨基喹唑啉用于蚊媒防制，开拓了该药的新用途。 [0024] (2)糖水是成蚊生长发育和繁衍子代等生命活动的重要食物。本发明是由4‑氨基喹唑啉、DMSO和葡萄糖水制成，该糖诱饵配方原料简单易得，制备工艺简单，且吸引蚊吸食。 [0025] (3)本发明4‑氨基喹唑啉、DMSO和葡萄糖溶液制成的药剂，400mg/L、200mg/L、100mg/L、50mg/L、25mg/L均可对蚊虫繁殖产生很好的抑制效果，同时随着使用浓度的升高，雌蚊的卵巢体积明显减小、卵巢中卵泡数量明显降低、产卵量下降更加显著，但卵孵化率却无显著差异。 [0026] (4)本发明4‑氨基喹唑啉通过降低雌蚊生殖从而抑制种群数量，解决传统化学杀蚊剂的抗药性问题，可作为新型复合灭蚊剂或其他杀蚊剂的助剂和佐剂。附图说明 [0027] 图1为不同浓度4‑氨基喹唑啉在产卵前(48h PBM)对雌蚊卵巢发育的影响，其中，图1中的A图为WT组，图1中的B图为Control组，图1中的C图为4‑氨基喹唑啉浓度为25mg/L组，图1的D图为4‑氨基喹唑啉浓度为50mg/L组，图1中的E图为4‑氨基喹唑啉浓度为100mg/L组，图1中的F图为4‑氨基喹唑啉浓度为200mg/L组，图1中的G图为4‑氨基喹唑啉浓度为400mg/L组。(N＝10，P<0.05，P<0.01，P<0.001，*P<0.0001)。 [0028] (放大倍数2.5x10)。 [0029] 图2为不同浓度4‑氨基喹唑啉在产卵前(48h PBM)对雌蚊卵泡数量的影响。(N＝10， [0030] P<0.05，P<0.01，P<0.001，P<0.001，*P<0.0001)。 [0031] 图3为不同浓度4‑氨基喹唑啉对雌蚊卵筏形态的影响，其中，图3中的A图为WT组，图3中的B图为Control组，图3中的C图为4‑氨基喹唑啉浓度为25mg/L组，图3的D图为4‑氨基喹唑啉浓度为50mg/L组，图3中的E图为4‑氨基喹唑啉浓度为100mg/L组，图3中的F图为4‑氨基喹唑啉浓度为200mg/L组，图3中的G图为4‑氨基喹唑啉浓度为400mg/L组。(N＝30，P<0.05，P<0.01，P<0.001，**P<0.0001)。(放大倍数2.5x10)。 [0032] 图4为不同浓度4‑氨基喹唑啉对雌蚊产卵量的影响。(N＝30，P<0.05，P<0.01，[0033] P<0.001，**P<0.0001)。 [0034] 图5为不同浓度4‑氨基喹唑啉对蚊卵孵化率的影响。(N＝30，ns为无统计学差异,P<0.05，P<0.01，P<0.0001，*P<0.0001)。具体实施方式 [0035] 以下结合具体的实施例对本发明的技术方案和技术效果做进一步说明和阐释，但本发明并不限于这些具体实施方式。所用试剂或者仪器设备未注明生产厂商的，均视为可以通过市场购买的常规产品。 [0036] 1、蚊虫及饲料： [0037] 本发明使用的淡色库蚊收集于山东省唐口县，后在本实验室传代饲养，实验前未接触过任何杀虫剂或有毒物质。饲养条件：温度28～30℃，相对湿度50％～70％，每日的光暗比为14h：10h。 [0038] 1～4龄幼虫使用高压过的鼠粮研磨粉喂养，成蚊使用5％葡萄糖溶液喂养。 [0039] 成年雌雄蚊交配后使用ICR品系小鼠新鲜血液吸血传代。 [0040] 2、4‑氨基喹唑啉母液的配制 [0041] (1)4‑氨基喹唑啉(CAS：15018‑66‑3)，别名：喹唑啉‑4‑胺、4‑喹唑啉胺，分子式：C8H7N3，分子量：145.16，熔点：274‑275℃，沸点：328.3℃，储存条件：2‑8℃，性状：灰白色晶体粉末状。 [0042] (2)二甲基亚砜(Dimethyl sulfoxide)：分子量：78.13，室温保存。 [0043] (3)5％葡萄糖溶液：称取50g葡萄糖粉末溶于灭菌水定容至1000mL，将配制好的5％葡萄糖溶液高压灭菌备用。 [0044] 称取100mg 4‑氨基喹唑啉粉末(Macklin，Q841658)，溶于DMSO(Sigma，472301)中，使其充分混匀，定容至10mL，配制成10mg/mL母液。再用5％葡萄糖溶液稀释成不同浓度口饲雌蚊。 [0045] 3、测定4‑氨基喹唑啉在不同浓度下对蚊生殖能力的影响 [0046] 取250μL上述4‑氨基喹唑啉母液，加入6.00mL 5％葡萄糖溶液，配制成400mg/L工作液。 [0047] 取250μL上述4‑氨基喹唑啉母液，加入12.25mL 5％葡萄糖溶液，配制成200mg/L工作液。 [0048] 取250μL上述4‑氨基喹唑啉母液，加入24.75mL 5％葡萄糖溶液，配制成100mg/L工作液。 [0049] 取250μL上述4‑氨基喹唑啉母液，加入49.75mL 5％葡萄糖溶液，配制成50mg/L工作液。 [0050] 取250μL上述4‑氨基喹唑啉母液，加入99.75mL 5％葡萄糖溶液，配制成25mg/L工作液。 [0051] 用上述工作液口饲羽化0h的成年雌蚊，直至产卵。WT组为仅口饲5％葡萄糖的空白对照组，Control组为二甲基亚砜(DMSO)和5％葡萄糖溶液混合物的实验对照组，不同浓度的4‑氨基喹唑啉处理组为4‑氨基喹唑啉、DMSO和5％葡萄糖溶液以不同比例配成的混合物的实验组。 [0052] 解剖吸血后48h(48h PBM)雌蚊的卵巢，在OLMPUS相差倒置显微镜下观察各组卵巢形态的改变，并计算卵泡数量(N＝10)。 [0053] 羽化3天，雌雄蚊充分交配后，给予血食，吸血后72h(72h PBM)观察各组雌蚊产卵量。 [0054] 在OLMPUS相差倒置显微镜下计数每个卵筏中的蚊卵数量(N＝30)，将卵筏放回实验室正常饲养，待幼虫孵化，计数1龄幼虫，并计算孵化率(N＝30)。 [0055] 结果如下： [0056] 1、4‑氨基喹唑啉对产卵前雌蚊卵巢和卵泡的影响 [0057] 如图1所示，相较于WT组和Control组，实验组雌蚊在48h PBM时卵巢体积明显减小。 [0058] 如图2所示，在48h PBM时，WT组雌蚊卵泡数量为196.1±10.2，对照组201.8±21.7，25mg/L处理组卵泡数量135.7±13.9，50mg/L处理组卵泡数量131.2±11.4，100mg/L处理组卵泡数量108.3±16.8，200mg/L处理组卵泡数量87.9±15.1，400mg/L处理组卵泡数量86.8±18.1(图2，P<0.0001、P<0.001、P<0.01)。 [0059] 以上结果提示4‑氨基喹唑啉降低雌蚊繁殖力可能是通过抑制卵巢发育实现的，卵巢中卵泡数量明显减少。在低浓度(25mg/L)时已有较好的抑制效果，随着4‑氨基喹唑啉浓度的增高对蚊卵巢的抑制效果有明显的提升。 [0060] 2、4‑氨基喹唑啉对蚊产卵量的影响 [0061] 如图3所示，相比于WT组和Control组，实验组卵筏形态明显减小。 [0062] 如图4所示，在72h PBM时，WT组雌蚊产卵量为194.1±24.6，对照组190.83±23.3，25mg/L处理组产卵量121.4±23.7，50mg/L处理组产卵量105.8±28.2，100mg/L处理组产卵量75.5±28.9，200mg/L处理组产卵量63.5±26.2，400mg/L处理组产卵量62±19.6(图 4，*P<0.0001、P<0.001、*P<0.01)。 [0063] 以上结果提示4‑氨基喹唑啉处理后的雌蚊产卵量降低，且随着4‑氨基喹唑啉浓度的增高，雌蚊产卵量降低得越明显。 [0064] 3、4‑氨基喹唑啉对蚊卵孵化率的影响 [0065] 如图5所示，WT组雌蚊孵化率为94.4％±4.4％，对照组孵化率94.3％±4.6％，25mg/L处理组孵化率94.2％±5.2％，50mg/L处理组孵化率95.1％±4.2％，100mg/L处理组孵化率95.2％±3.0％，200mg/L处理组孵化率95.7％±3.8％，400mg/L处理组孵化率 88.9％±2.5％(图5)。 [0066] 上述结果提示4‑氨基喹唑啉处理后的蚊卵孵化率不受影响。 [0067] 本发明的保护内容不局限于以上实施例。在不背离发明构思的精神和范围下，本领域技术人员能够想到的变化和优点都被包括在本发明中，并且以所附的权利要求为保护范围。

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