一种利用荧光蛋白作为荧光探针测量电离辐射下细胞氧化胁迫损伤的方法
专利汇可以提供一种利用荧光蛋白作为荧光探针测量电离辐射下细胞氧化胁迫损伤的方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 公开了一种利用 荧光 蛋白作为荧光探针测量 电离 辐射 下细胞 氧 化胁迫损伤的方法，利用荧光蛋白选择 定位 表达在对 电离辐射 敏感的亚细胞结构上，对电离辐射产生自由基含量进行定量化的测量，从而通过直接观测蛋白荧光强度变化推测电离辐射对细胞具体部位的损伤，本发明发射的荧光易于检测，灵敏度高，荧光性质稳定，在较大的pH范围内也能正常发光，对高温、去垢剂、盐、 有机 溶剂 和大多数普通酶具有较强抗性，对细胞无毒害，不受 假阳性 干扰，构建载体方便，表达没有种属、组织和 位置 特异性。，下面是一种利用荧光蛋白作为荧光探针测量电离辐射下细胞氧化胁迫损伤的方法专利的具体信息内容。
1.一种利用荧光蛋白作为荧光探针测量电离辐射下细胞氧化胁迫损伤的方法，其特征在于包括下列步骤：
(1)利用一般分子生物学融合蛋白表达的方法或商业化的试剂对细胞中的电离辐射产生氧化胁迫敏感的细胞器进行荧光蛋白靶向定位标记；
(2)对特异性表达荧光蛋白的细胞的电离辐照处理；
(3)利用激光共聚焦显微镜、流式细胞仪、荧光光谱仪对线粒体内荧光蛋白的荧光强度进行实时、定量分析。
2.根据权利要求1所述的利用荧光蛋白作为荧光探针测量电离辐射下细胞氧化胁迫损伤的方法，其特征在于所述的荧光蛋白选择定位表达在对电离辐射敏感的亚细胞结构上，对电离辐射产生自由基含量进行定量化的测量，从而通过直接观测蛋白荧光强度变化推测电离辐射对细胞具体部位的损伤。
一种利用荧光蛋白作为荧光探针测量电离辐射下细胞氧化
胁迫损伤的方法
技术领域
背景技术
因此，准确和定量测量辐射反应中ROS作用是解决问题的关键技术之一。利用荧光探针可能成为一种有效的手段，因为它可以实时、高灵敏、定性和定量检测ROS的含量；比如，美国Invitrogen公司就可以提供各种在体外(in Vitro)鉴别自由基的荧光探针。进一步，利用荧光探针检测活体组织或细胞在电离辐射过程中生成的ROS这方面现在也有一些有益
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的尝试；比如，朱茂祥等利用荧光探针的方法探测了 Coγ射线照射诱发BEP2D细胞内ROS水平提高，得到初步的剂量效应关系。但是，目前测量细胞内ROS的各种光谱探针还存在许多不足，如易被光萃灭，易发生自氧化或被氧化，非特异性定位标记及自身参与生物体反应生成ROS等。如何避免上述缺点，从而在细胞中实现对辐射引发的ROS产生和变化的检测，特别是对细胞中各个细胞器进行特异性定位标记、甚至能确定和识别DNA或蛋白质具体位点，即寻求一种荧光性质高效、灵敏、稳定、准确追踪细胞辐射氧化胁迫产生ROS的荧光探针，并建立其荧光强度和ROS的定量化的关系，正是本发明的意义和目的所在。
发明内容
这就证明GFP荧光强度确实可作为ROS含量的定量化指标。
附图说明
具体实施方式
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