若将皮肤暴露于紫外线下，则皮肤会受到各种影响。即，因紫外 线暴露而在皮肤内产生的活性氧、过氧化脂质等会引发炎症，给皮肤 组织带来很大的损伤。该损伤使皮肤失去润泽或光泽、纹理等，而且 若该影响损及真皮则形成皱纹等，成为光加龄的原因。另外，因紫外 线而产生的活性氧或因其影响而自皮肤细胞释放的各种因素会使黑 素细胞中的酪氨酸酶活性增强。在黑素细胞中酪氨酸被酪氨酸酶氧 化，从而产生影响肤色的黑色素。因此认为，如果紫外线使酪氨酸酶 活化，则黑色素过量生成并被表皮细胞接收，结果使肤色发生变化、 变黑。
因而，为了显示美白效果，抑制黑色素的生成是重要的。以往， 为了防止皮肤的黑化或老人斑、雀斑，保持原本白皙的肌肤，提出了 配合有曲酸、熊果素、对苯二酚苄醚、过氧化氢等的美白化妆料。另 外，为了抑制由紫外线引起的炎症，提出了配合有维生素C等的化妆 料。
配合有熊果素、曲酸、对苯二酚苄醚等的化妆料虽然具有少许淡 化黑色肌肤的效果，但是达不到期望的水平。另外，该化妆料不具有 抑制由紫外线引起的炎症的效果，在皮肤的安全性上有时还存在问 题。配合有维生素C等的化妆料虽然具有美白效果和抗炎效果，但在 效果的程度和稳定性方面存在应该改善的余地。这样，得到炎症抑制 效果、美白效果优异且皮肤安全性高、具有充分的保存稳定性的美白 化妆料就极其困难。
另一方面，已知具双酚(biphenol：ビフエノ—ル)结构的木兰 醇(magnolol)或和厚朴酚(honokiol)等阻碍酪氨酸酶的活性(专利文献 1)。但是，上述双酚化合物由于部分结构具有不饱和键，因此在安全 性、稳定性上存在问题。本发明人等已经发现下述通式(2)所示的双酚 化合物具有黑色素生成抑制效果(专利文献2、非专利文献1)。但是该 双酚化合物溶解性不足而结晶性高，因此当配合到药品、非药品、化 妆品中时，制剂的使用范围有限制。另外，该双酚化合物由于具高极 性，因此还存在向皮肤内部的渗透性差等问题。

式中，R为氢原子或碳原子数为1至8的直链或支链饱和烃基。

在这种状况下，本发明的目的在于开发安全性、稳定性优异、在 各种制剂中的应用范围广、黑色素生成抑制效果高的黑色素生成抑制 剂，提供抑制由紫外线引起的皮肤黑化的美白效果优异的、安全性高 的皮肤化妆料。
鉴于上述状况，作为改良现有技术难点的方法，本发明人等反复 进行深入研究，结果发现：将特定的双酚化合物酰化的酰化双酚化合 物具有优异的黑色素生成抑制效果和安全性，作为黑色素生成抑制剂 具备非常优异的特性；同时该酰化双酚化合物为油状物质，在各种制 剂中的配合特性显著改善。通常已知将双酚化合物酰化时，酰基的碳 链长的酰化双酚化合物为油状物质，但像本申请的酰化双酚化合物这 样，酰基的碳链短的酰化双酚化合物为油状物质的例子是极其罕见 的。
如上所述，本发明人等发现：具有特定结构的酰化双酚化合物作 为黑色素生成抑制剂具有优异的性质，从而提供了具有优异的美白效 果的、稳定性和安全性高的皮肤化妆料。即本申请的第1发明在于： 以下述通式(1)表示的酰化双酚化合物为有效成分的黑色素生成抑制 剂。

式中，R1、R2为氢原子或碳原子数为2～10的酰基，优选为氢原 子或碳原子数为2～8的酰基，其中R1、R2不同时为氢原子；
R3、R4为氢原子或碳原子数为1～8的直链或支链饱和烃基，优 选为氢原子或碳原子数为1～5的直链或支链饱和烃基，较优选为丙 基。
本申请的第2发明在于：以配合上述黑色素生成抑制剂为特征的 皮肤化妆料。关于本发明的上述目的通过以上述具有特定结构的酰化 双酚化合物为有效成分的黑色素生成抑制剂以及配合有上述酰化双 酚化合物作为有效成分的皮肤化妆料来达成。
发明效果
关于本发明的以特定结构的酰化双酚化合物为有效成分的黑色 素生成抑制剂不仅作为本来目的的黑色素生成抑制效果优异，而且无 皮肤刺激等、安全性也优异。另外，该酰化双酚化合物为油状物质， 稳定性优异，容易在各种制剂中应用，同时经皮吸收性也优异。因此 配合了该酰化双酚化合物的皮肤化妆料可发挥优异的美白效果，安全 性也优异，可以提供广泛的剂型。
附图说明
图1是制备例1的单乙酰物的1H-NMR图谱。
图2是制备例1的二乙酰物的1H-NMR图谱。
图3是制备例2的二丙酰物的1H-NMR图谱。
图4是制备例3的单辛酰物的1H-NMR图谱。
图5是由制备例1～3得到的各酰基物、比较例1中使用的丙基 双酚以及代表性溶剂的IOB值作出的有机概念图，○表示丙基双酚的 IOB值；△表示单乙酰物的IOB值；□表示二乙酰物的IOB值；× 表示二丙酰物的IOB值；*表示单辛酰物的IOB值；●表示表2所列 举的代表性溶剂的IOB的值。
图6是制备例1的单乙酰物的黑色素生成抑制曲线。
图7是制备例1的二乙酰物的黑色素生成抑制曲线。

以下，对本发明的实施方案进行详述。本发明中使用的通式(1) 表示的酰化双酚化合物利用公知的化学合成方法可以容易地合成。例 如可以通过利用J.C.Pew等的方法(Journal of Organic Chemistry，第 28卷，1048页，1963年)将可获取的试药4-丙基苯酚进行二聚合后， 在吡啶的存在下使其与脂肪酸酐或酰氯反应来进行制备。另外，其精 制方法可以使用柱色谱法或蒸馏法。
可以向皮肤化妆料中配合本发明的以酰化双酚化合物为有效成 分的黑色素生成抑制剂。以皮肤化妆料的总量为基准，酰化双酚化合 物的配合量优选为0.001～10.0质量％(以下简记为％)，较优选为 0.01～5.0％。当配合量不足该下限时，作为本发明目的的效果不充分； 另一方面，即使配合量超过上限，也未见与该增加部分相称的效果的 提高，因此不理想。特别是本发明中使用的酰化双酚化合物在乙醇或 多元醇等水溶性有机溶剂中的溶解度变高，因此本发明的皮肤化妆料 可以是化妆水等水性化妆料。当为水性化妆料时，以化妆料的总量为 基准，酰化双酚化合物的配合量优选为0.01～8.0％，较优选为0.1～ 5.0％。另外，以化妆料的总量为基准，水溶性有机溶剂的配合量优选 为1～40％，较优选为5～20％。尚需说明的是，其中水溶性有机溶剂 是指与水具有互溶性的溶剂，具体可以列举出：低级醇或多元醇。水 溶性有机溶剂优选为选自乙醇、丙醇、异丙醇、丁醇中的低级醇中的 1种以上及/或选自乙二醇、二甘醇、三甘醇、聚乙二醇、丙二醇、二 丙二醇、聚丙二醇、甘油、一缩二丙三醇、聚甘油、异戊二醇、1，3- 丁二醇中的多元醇中的1种以上，较优选为IOB值在1～7范围内、 优选为2～5范围内的有机溶剂(关于IOB值见下述)。
在本发明的皮肤化妆料中，除了配合以酰化双酚化合物为有效成 分的黑色素生成抑制剂以外，还可以配合以往公知的各种黑色素生成 抑制剂、美白剂、抗氧化剂等。另外，即使并用本申请的酰化双酚化 合物所相关的酰化前的双酚化合物，只要在不损及本申请发明效果的 范围内就没有任何问题。
本发明的皮肤化妆料一般用作在皮肤上涂抹的形式的化妆料，此 外还可以用作入浴剂。剂型可以考虑作成：通常使用的水溶液、W/O 型或O/W型乳剂、使用适当的赋形剂等做成颗粒剂以及粉末、片剂 等，具体可以列举出：膏、乳液、化妆水、敷剂(pack)、凝胶(gel)、 贴剂(stick)、薄片(sheet)、糊剂(cataplasm)等。例如，当该皮肤化妆料 为乳液等时，可以通过将油相和水相分别加热溶解、再乳化分散并冷 却的通常的方法来进行制备。
尚需说明的是，本发明的皮肤化妆料可以适当配合化妆品界惯用 的化妆料基材，制成上述所需的剂型。以化妆料的总量为基准，化妆 料基材的配合量优选为90～99.999％，更优选为95～99.99％。上述化 妆料基材除了水、上述水溶性有机溶剂以外，还可以列举出：油脂、 蜡、烃、高级脂肪酸、高级醇、酯类；硅酮油、焦油系色素、氧化铁 等着色颜料；对羟基苯甲酸酯类等防腐剂；脂肪酸皂、十六烷基硫酸 钠等阴离子性表面活性剂；聚氧乙烯烷基醚、聚氧乙烯脂肪酸酯、聚 氧乙烯多元醇脂肪酸酯、聚氧乙烯固化蓖麻油、多元醇脂肪酸酯、聚 甘油脂肪酸酯等非离子性表面活性剂；四烷基铵盐等阳离子性表面活 性剂；甜菜碱型、磺基甜菜碱型、磺基氨基酸(sulfoamino acid)型、 N-硬脂酰基-L-谷氨酸钠等两性离子型表面活性剂；卵磷脂、溶血磷 脂胆碱等天然系表面活性剂；明胶、酪蛋白、淀粉、阿拉伯胶、刺梧 桐树胶、愈疮胶、刺槐豆胶、黄耆胶、温桲种子、果胶、卡拉胶、海 藻酸钠等天然高分子；甲基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、 羧甲基纤维素钠、乙基纤维素等半合成高分子；聚乙烯醇、聚乙烯甲 基醚以及聚乙烯醇-聚乙二醇接枝共聚物、聚乙烯吡咯烷酮、聚丙烯 酸钠、羧乙烯聚合物、聚氧化乙烯系聚合物等合成高分子；占吨胶等 增粘剂；氧化钛等颜料；二丁基羟基甲苯等抗氧化剂等，可以在不损 及本发明目的的范围内适当配合上述化妆料基材。
实施例
以下，根据实施例、制备例和比较例来详细说明本发明。尚需说 明的是，本发明并不受限于此。
制备例1
向5.0g用作化妆品原料的2，2’-二羟基-5，5’-二正丙基联苯(以下 简称为「丙基双酚」)中加入无水四氢呋喃，在冰冷下搅拌。再依次 加入1.0ml吡啶、6.0g乙酰氯，4小时后按照常法进行后处理，得到 5.2g粗产物。
利用使用关东化学公司制硅胶60N(100-210μm)的硅胶柱色谱法 [流动相：乙酸乙酯/正己烷(1：5)]分离得到的产物，得到均为淡黄色 油状物的3.0g单乙酰物和1.9g二乙酰物。
利用1H-NMR(400MHz，CDCl3)对所得到的丙基双酚的单乙酰物 和二乙酰物，进行确认(图1、图2)。所得到的NMR信号如下所示。
(单乙酰物)

[δ(ppm)；0.94(m，6H)、1.63(m，4H)、1.99(s，3H)、2.51(t，J＝7.5Hz， 2H)、2.59(t，J＝7.5Hz，2H)、5.29(s，1H)、6.85(d，J＝8.1Hz，1H)、 6.93(s，1H)、7.02(s，1H)、7.05(d，7.7Hz，1H)、7.19(m，2H)]
(二乙酰物)

[δ(ppm)；0.94(t，J＝7.5Hz，6H)、1.65(q，J＝7.5Hz，4H)、1.99(s， 6H)、2.59(t，J＝7.2Hz，4H)、7.03(d，J＝8.3Hz，2H)、7.10(s，2H)、 7.17(d，J＝8.3Hz，2H)]
制备例2
依照制备例1，同样向2.2g丙基双酚中加入无水四氢呋喃，在冰 冷下搅拌。再依次加入0.5ml吡啶、约3.5ml丙酰氯，4小时后按照 常法进行后处理，得到2.2g粗产物。
利用使用了关东化学公司制硅胶60N(100-210μm)的硅胶柱色谱 法[流动相：乙酸乙酯/正己烷(1：4)]分离得到的粗产物，得到1.47g 无色油状物质二丙酰物。
利用1H-NMR(400MHz，CDCl3)对得到的丙基双酚的二丙酰物进 行确认(图3)。所得到的NMR的信号如下所示。
(二丙酰物)

[δ(ppm)；0.93(t，J＝7.2Hz，6H)、0.98(t，J＝7.6Hz，6H)、1.64(q， J＝7.2Hz，4H)、2.28(q，J＝7.2Hz，4H)、2.59(t，J＝7.2Hz，4H)、7.02(d， J＝8.4Hz，2H)、7.08(s，2H)、7.16(dd，J＝2.0，8.0Hz，2H)]
制备例3
依照制备例1，同样向1.0g丙基双酚中加入无水四氢呋喃，在冰 冷下搅拌。再依次加入0.5ml吡啶、约2.5ml辛酰氯，4小时后按照 常法进行后处理，得到1.5g粗产物。
利用使用了关东化学公司制硅胶60N(100-210μm)的硅胶柱色谱 法[流动相：乙酸乙酯/正己烷(1：10)]分离得到的粗产物，得到1.25g 淡黄色油状物质单辛酰物。
利用1H-NMR(400MHz，CDCl3)对所得到的丙基双酚的单辛酰物 进行确认(图4)。得到的NMR信号如下所示。
(单辛酰物)

[δ(ppm)；0.85-0.97(m，9H)、1.14-1.26(m，8H)、1.41(q，J＝7.2Hz， 2H)、1.58-1.69(m，4H)、2.27(t，J＝7.2Hz，2H)、2.49-2.63(m，4H)、 6.87-6.91(m，2H)、7.02-7.07(m，2H)、7.23-7.25(m，2H)]
实施例1(溶解度试验法)
为了调查制备例1～3得到的各酰基物在水和有机溶剂中的溶解 度，实施以下试验。分别称取0.1g各样品，精确加入1ml水或有机 溶剂。用试管混合器(VORTEX)搅拌后，在室温下静置，目视观察状 态。完全溶解评价为○，一半左右溶解评价为△，几乎未溶解评价为 ×。尚需说明的是，比较例1是将各制备例的原材料丙基双酚合并来 进行评价。结果如表1所示。
[表1]

从上述结果可观察到：与比较例1相比，制备例1～3得到的各 酰基物在高极性溶剂甲醇、低极性溶剂己烷中的溶解性分别有所增 加。
IOB(inorganic-organic balance)值是表示有机化合物亲水性的数 值，数值越大亲水性越高。作为计算方法，可以根据「有机概念图- 基础与应用」(甲田善生着(1984)三共出版)等中记载的有机性、无机 性表来计算有机性值(OV)、无机性值(IV)，以IOB值＝无机性值/有机 性值来进行计算。制备例1～3得到的各酰基物和比较例1中使用的 丙基双酚以及代表性溶剂的OV、IV和IOB值如表2所示。
[表2]

已知在有机概念图上，一般当从原点引通过化合物的IOB值的同 比率线时，在该线上而且离该化合物近的位置或者即使不在同一条线 而在与该比率线方向接近的比率线上，占据临近位置的溶剂是最佳溶 解该化合物的溶剂。由表2所示的制备例1～3得到的各酰基物、比 较例1中使用的丙基双酚以及代表性溶剂的IOB值作成有机概念图 (图5)。
比较例1的丙基双酚对甲醇、正己烷的溶解性低。本申请化合物 的酰基物，虽然认为其IOB值较比较例1低，在概念图上其在有机溶 剂中的溶解性增加、在甲醇中的溶解性降低，但是如溶解度试验结果 所示，其不仅在正己烷中的溶解性增加，而且相对于甲醇也可以得到 优异的溶解性。
以制备例1得到的丙基双酚的单乙酰物和二乙酰物为试样，进行 下述黑色素生成抑制试验。
实施例2、3；比较例2、3(黑色素生成抑制试验)
使用含10vol％牛胎儿血清的MEM培养基，将B16黑色素瘤细 胞以104个/well的浓度接种在12孔板上，进行24小时前培养。前培 养后，将培养基与在配合有2mmol/L茶碱的上述培养基中又配合了预 定浓度的试样化合物的培养基交换，培养72小时。先用10vol％三氯 醋酸对细胞进行处理，接着用乙醇/二乙醚(1:1，vol/vol)对细胞进行处 理。再将细胞溶解在含有10vol％二甲基亚砜的1mol/L氢氧化钠水溶 液中，测定OD475，将该值作为黑色素量的指标。之后，使用Coomasie Plus Protein Assay Reagent Kit(PIERCE公司制)对溶解液的总蛋白质 质量进行定量，计算每蛋白质质量的黑色素量。以不配合试样化合物 时的情况作为对照，计算相对于对照的黑色素生成抑制率(％)。试验 结果如表3所示。
[表3]

由表3可知，本发明相关的酰化双酚化合物显示出浓度依赖性显 著的黑色素生成抑制效果。
另外，根据黑色素生成抑制试验的结果制作本发明制备例1的丙 基双酚的单乙酰物和二乙酰物的黑色素生成抑制曲线(图6、图7)。由 该抑制曲线求出推测黑色素生成被抑制了50％的浓度值、IC50值。制 备例1的单乙酰物的IC50值为7.0(μg/ml)、二乙酰物的IC50值为 6.5(μg/ml)。
并且，以各制备例的原材料即丙基双酚(比较例2)和熊果素(比较 例3)为试样进行上述黑色素生成抑制试验，利用相同方法求出IC50 值。IC50值分别为4.0(μg/ml)、20(μg/ml)。
实施例4、比较例4(紫外线色素沉着抑制试验)
通过使用了有色豚鼠的下述紫外线色素沉着抑制试验来评价本 发明的酰化双酚化合物的紫外线色素沉着抑制效果。试验动物使用试 验开始时为6周龄的A-1系豚鼠，每组8只。
1.紫外线照射和色素沉着评价方法
除去豚鼠背部皮肤上的毛，设定4cm2(2×2cm)的试验部位，照射 UVB区域紫外线。1次照射量最少为红斑量的约1.5倍，在试验的第 1天、第4天和第7天进行照射。色素沉着以皮肤亮度(L*值)和皮肤 亮度下降(ΔL*值)为指标进行评价。皮肤亮度使用色彩色差计 CR-300(minoluta公司制)来测定。
2.试样与实验方法
以丙二醇/乙醇/水(20：63：17)为基质，制备配合有0.5％根据制 备例1得到的丙基双酚单乙酰物的试样(实施例4)。在初次紫外线照 射后涂抹0.1ml上述试样，1日1次、连续涂抹两周。作为对照，则 同样涂抹仅有基质的试样(比较例4)。在紫外线注射前和照射两周后 测定皮肤亮度，评价涂抹试样所产生的对豚鼠紫外线色素沉着的效 果。
评价结果如表4所示。在本试验系统中，L*值越大同时ΔL*值的 绝对值越小，表明越抑制了紫外线色素沉着。由本试验结果可知：本 发明的作为黑色素生成抑制剂的制备例1的丙基双酚的单乙酰物具 有抑制由紫外线引起的色素沉着的效果。
[表4]

(美白实用试验方法)
以20名在夏日太阳光下暴露3小时(每天1.5小时，2天)的受试 者的前腕屈侧部皮肤为对象，自暴露于太阳光下之日起在左前腕屈侧 部皮肤上涂抹试样、自暴露于太阳光下之日起在右前腕屈侧部皮肤上 涂抹基质，早晚各1次，连续涂抹13周。尚需说明的是，评价以与 基质涂抹部位相比在试样涂抹部位确认到美白效果的受试者的人数 来表示。
实施例5、比较例5(皮肤洗剂)
在表5的原料组成中，配合表6所记载的有效成分作为(B)成分， 制备皮肤洗剂，实施上述美白实用试验。
·制备方法
将B成分均匀溶解于C成分中，之后将A成分与C成分均匀混 合搅拌、分散，然后填充到容器中。
[表5]

[表6]

·特性
实施美白实用试验的结果记载在表6中。如表6所示，作为本发 明的皮肤化妆料的实施例5清楚地显示出良好的结果。尚需说明的 是，没有出现皮肤刺激反应或皮肤过敏反应的受试者。
实施例6、比较例6(护肤膏)
在表7的原料组成中，配合表8所记载的有效成分作为(B)成分， 制备护肤膏，实施上述美白实用试验。
·制备方法
将A成分与混合有B成分的混合物分别均匀加热溶解，使温度 达到80℃。然后，向其中注入C成分进行乳化后，一边搅拌一边冷 却至30℃。
[表7]

[表8]

特性
实施美白实用试验的结果记载在表8中。如表8所示，作为本发 明的皮肤化妆料的实施例6清楚地显示出良好的结果。尚需说明的 是，没有出现皮肤刺激反应或皮肤过敏反应的受试者。
实施例7、比较例7(皮肤洗液)
在表5的原料组成中配合表9所记载的有效成分作为(B)成分， 与实施例4同样制备皮肤洗液，实施上述美白实用试验。
[表9]

·特性
实施美白实用试验的结果记载在表9中。如表9所示，作为本发 明的皮肤化妆料的实施例7清楚地显示出良好的结果。尚需说明的 是，没有出现皮肤刺激反应或皮肤过敏反应的受试者。
实施例8、比较例8(护肤膏)
在表7的原料组成中配合表10记载的有效成分作为(B)成分，与 实施例6同样制备护肤膏，实施上述美白实用试验。
[表10]

·特性
实施美白实用试验的结果记载在表10中。如表10所示，作为本 发明的皮肤化妆料的实施例8清楚地显示出良好的结果。尚需说明的 是，没有出现皮肤刺激反应或皮肤过敏反应的受试者。
实施例9、比较例9(护肤膏)
在表7的原料组成中配合表11所记载的有效成分作为(B)成分， 与实施例6同样制备护肤膏，实施上述美白实用试验。
[表11]

特性
实施美白实用试验的结果记载在表11中。如表11所示，作为本 发明的皮肤化妆料的实施例9清楚地显示出良好的结果。尚需说明的 是，没有出现皮肤刺激反应或皮肤过敏反应的受试者。
产业实用性
如上所述，本发明的黑色素生成抑制剂，其黑色素产生抑制效果 优异、无皮肤刺激，作为油状物质其稳定性、经皮吸收性也优异。根 据本发明可以提供具有优异的美白效果、安全性高的各种剂型的皮肤 化妆料。
虽然本发明已以优选实施例揭露如上，然其并非用以限定本发 明，任何熟习此技艺者，在不脱离本发明的精神和范围内，可做一些 变动和修饰，因此本发明的保护范围应当以所附的权利要求范围为 准。
专利文献1：日本特开平4-82814号公报。
专利文献2：日本专利第2719300号说明书。
非专利文献1：横田朋宏、佐佐木稔著，「厚朴木脂素(magnolignan) 的酪氨酸酶成熟阻碍作用及其美白效果」，Fragrance Journal，第34 卷第2号，80～83页，2006年。