P2X3和/或P2X2/3化合物和方法
阅读：893发布：2022-02-15
专利汇可以提供P2X3和/或P2X2/3化合物和方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 申请 提供新的化合物和用于制备和使用这些化合物的方法。在一个实施方案中，所述化合物是式(I)的结构，其中R1‑R4如本文所定义。在进一步的实施方案中，这些化合物在用于调节一种或全部的P2X3或P2X2/3受体的方法中是有用的。在另一个实施方案中，通过向患者施用一种或多种这些化合物，这些化合物在 治疗 患者的 疼痛 中是有用的。，下面是P2X3和/或P2X2/3化合物和方法专利的具体信息内容。
1.一种式(IV)结构的化合物：
其中：
R2是任选取代的5-元或6-元杂芳基；
R4是任选取代的5-元或6-元杂芳基；
R5和R6与N一起连接以形成由一个或多个卤素、C1至C6烷基、C1至C6烷氧基、C1至C6羟烷基、C3至C6环烷基、含有1至3个氟原子的C1至C6烷基、C3至C6环烷基-C1至C6烷基、或CONH2任选取代的5-元杂环；
或其药学可接受的盐，
其中所述任选取代的5-元或6-元杂芳基未取代或用选自由以下组成的组的一个或多个取代：卤素、CN、NO2、C1-C6烷基、OH、C1-C6烷氧基、含1-3个氟原子的C1或C6烷基、含1-3个氟原子的C1-C6烷氧基、C1-C6羟烷基、C1-C6烷基硫、C(O)(C1-C6烷基)、C(O)O(C1-C6烷基)、C(O)NH2、C(O)NH(C1-C6烷基)、SO2(C1-C6烷基)、SO2NH(C1-C6烷基)、NHC(O)(C1-C6烷基)、NHSO2(C1-C6烷基)、NH2和NHC(O)NH2。
2.一种式(I)结构的化合物：
其中：
R1是取代的5-元杂芳基；
R2是任选取代的5-元或6-元杂芳基；
R3是H或C1至C6烷基；
R4是任选取代的5-元或6-元杂芳基；
或其药学可接受的盐，
其中任选取代的5-元或6-元杂芳基未取代或被取代，并且
R4中被取代的5-元或6-元杂芳基用选自由以下组成的组的一个或多个取代：卤素、CN、NO2、C1-C6烷基、OH、C1-C6烷氧基、含1-3个氟原子的C1或C6烷基、含1-3个氟原子的C1-C6烷氧基、C1-C6羟烷基、C1-C6烷基硫、C(O)(C1-C6烷基)、C(O)O(C1-C6烷基)、C(O)NH2、C(O)NH(C1-C6烷基)、SO2(C1-C6烷基)、SO2NH(C1-C6烷基)、NHC(O)(C1-C6烷基)、NHSO2(C1-C6烷基)、NH2和NHC(O)NH2，并且
R1和R2中被取代的5-元或6-元杂芳基用选自由以下组成的组的一个或多个取代：卤素、CN、NO2、C1-C6烷基、OH、C1-C6烷氧基、含1-3个氟原子的C1至C6烷基、含1-3个氟原子的C1-C6烷氧基、C1-C6羟烷基、C1-C6烷基硫、C(O)(C1-C6烷基)、C(O)O(C1-C6烷基)、C(O)NH2、C(O)NH(C1-C6烷基)、SO2(C1-C6烷基)、SO2NH(C1-C6烷基)、NHC(O)(C1-C6烷基)、NHSO2(C1-C6烷基)、NH2和NHC(O)NH2。
3.根据权利要求2所述的化合物，其中R2是由一个或多个卤素、氰基、C1至C6烷基或含有
1-3个氟原子的C1至C6烷基取代的杂芳基。
4.根据权利要求2所述的化合物，其中R2是噻唑、噻吩或呋喃。
2
5.根据权利要求2或3所述的化合物，其中R 是由一个或多个卤素、氰基、C1至C6烷基或含有1-3个氟原子的C1至C6烷基取代的噻吩。
6.根据权利要求2所述的化合物，其中R2是2-氯-噻吩、2-甲基-噻吩、2-氰基-噻吩、2-三氟甲基-噻吩、5-甲基-噻唑、2-甲基-噻唑、或2-甲基-呋喃。
7.一种式(I)结构的化合物：
其中：
R1是任选取代的5-元杂芳基或NR5R6；
R2是任选取代的噻吩或任选取代的呋喃；
R3是H或C1至C6烷基；
R4是任选取代的5-元或6-元杂芳基；
5 6
R和R连接以形成任选取代的5-元杂芳基或任选取代的5或6-元杂环；
或其药学可接受的盐，
其中R1中任选取代的杂芳基、R2中任选取代的噻吩和任选取代的呋喃未取代或用选自由以下组成的组的一个或多个取代：卤素、CN、NO2、C1-C6烷基、OH、C1-C6烷氧基、含1至3个氟原子的C1-C6烷基、含1至3个氟原子的C1-C6烷氧基、C1-C6羟烷基、C1-C6烷硫基、C(O)(C1-C6烷基)、C(O)O(C1-C6烷基)、C(O)NH2、C(O)NH(C1-C6烷基)、SO2(C1-C6烷基)、SO2NH(C1-C6烷基)、NHC(O)(C1-C6烷基)、NHSO2(C1-C6烷基)、NH2和NHC(O)NH2，
R4中任选取代的5-元或6-元杂芳基未被取代或用选自由以下组成的组的一个或多个取代：卤素、CN、NO2、C1-C6烷基、OH、C1-C6烷氧基、含1-3个氟原子的C1或C6烷基、含1-3个氟原子的C1-C6烷氧基、C1-C6羟烷基、C1-C6烷基硫、C(O)(C1-C6烷基)、C(O)O(C1-C6烷基)、C(O)NH2、C(O)NH(C1-C6烷基)、SO2(C1-C6烷基)、SO2NH(C1-C6烷基)、NHC(O)(C1-C6烷基)、NHSO2(C1-C6烷基)、NH2和NHC(O)NH2，并且
所述任选取代的5或6-元杂环未被取代或用选自由以下组成的组的一个或多个取代：
卤素、CN、NO2、C1-C6烷基、OH、C1-C6烷氧基、含1至3个氟原子的C1或C6烷基、C1-C6羟烷基、C1-C6烷硫基、C(O)(C1-C6烷基)、C(O)O(C1-C6烷基)、C(O)NH2、C(O)NH(C1-C6烷基)、SO2(C1-C6烷基)、SO2NH(C1-C6烷基)、NHC(O)(C1-C6烷基)、NHSO2(C1-C6烷基)、NH2和NHC(O)NH2。
8.根据权利要求2所述的化合物，其中R1是取代的咪唑、吡唑、四唑或三唑。
9.根据权利要求2所述的化合物，其中R1是由一个或多个含有1-3个氟原子的C1至C6烷基和C1至C6烷基取代的三唑。
10.根据权利要求7所述的化合物，其中R5和R6连接以形成3-甲氧基-吡咯烷、3-甲基-3-甲氧基-吡咯烷、2,5-二甲基-咪唑、5-乙基-吡唑、5-丙基-四唑、5-丙基-四唑、5-异丙基-四唑、5-乙基-四唑、5-甲基-四唑、5-羟甲基-四唑、5-二氟甲基-四唑、5-(2,2,2-三氟乙基)-四唑、5-(1,1-二氟乙基)-四唑、5-二氟甲基-三唑、5-三氟甲基-三唑、5-甲基-三唑、5-异丙基-三唑、5-丙基-三唑、5-乙基-三唑、5-叔丁基-三唑、5-(1,1-二氟乙基)-三唑、5-(2,2,2-三氟乙基)-三唑、3,5-二甲基-1,2,4-三唑、4-甲基-哌啶、4,4-二甲基-哌啶、4,4-二氟-哌啶、4-甲基-4-甲酰胺基-哌啶、4-氟-哌啶、4-三氟甲基-哌啶、4-氟甲基-哌啶、4-甲基-4-甲氧基-哌啶、4-甲氧基-哌啶、或3-甲氧基-哌啶或4-甲酰胺基-哌嗪。
11.一种化合物，其选自由以下组成的组：
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(5-乙基-1,3,4-噁二唑-2-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(2,5-二甲基-1H-咪唑-1-基)-N-((6-甲基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(3,5-二甲基-4H-1,2,4-三唑-4-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(5-(二氟甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(5-(二氟甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-3-(5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-基)-N-((6-甲基吡啶-3-基)甲基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(5-乙基-1H-吡唑-1-基)-N-((6-甲基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)-8-(苯氨基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-3-(5-甲基噻吩-
2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(4-甲基哌啶-1-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(4-氨基甲酰基-4-甲基哌啶-1-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(4-氨基甲酰基哌嗪-1-基)-N-((6-甲基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(1,3,4-噁二唑-2-基)乙基)-8-(5-(二氟甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(5-环丙基-1H-四唑-1-基)-N-((6-甲基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(5-(羟甲基)-1H-四唑-1-基)-N-((6-甲基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(5-(二氟甲基)-1H-四唑-1-基)-N-((6-甲基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(R)-8-(5-(二氟甲基)-1H-四唑-1-基)-N-(1-(3-甲基-1,2,4-噁二唑-5-基)乙基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(N-甲基异丁酰胺基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(5-乙基-1,3,4-噁二唑-2-基)-N-((6-甲基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(5-乙基-1H-1,2,3-三唑-1-基)-N-((6-甲基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺,
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(5-乙基-1H-1,2,3-三唑-1-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(5-乙基-1H-1,2,3-三唑-1-基)-N-((5-甲基吡嗪-2-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(5-环丙基-1H-1,2,3-三唑-1-基)-N-((6-甲基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-
2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)-8-(5-(三氟甲基)-
1H-1,2,3-三唑-1-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(5-(二氟甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-N-((6-甲基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(5-甲基-1H-1,2,3-三唑-1-基)-N-((6-甲基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(5-甲基-1H-1,2,3-三唑-1-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
N-((6-甲基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)-8-(5-(三氟甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(5-(二氟甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-N-((2-甲基嘧啶-5-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(5-(二氟甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-N-((5-甲基吡嗪-2-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(5-乙基-1H-1,2,3-三唑-1-基)-N-((2-甲基嘧啶-5-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(5-环丙基-1H-1,2,3-三唑-1-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(5-(二氟甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-N-((2-甲氧基嘧啶-5-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(5-(二氟甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-N-((6-甲基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-甲基噻唑-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(5-异丙基-1H-1,2,3-三唑-1-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-3-(5-氯噻吩-2-基)-8-(5-(二氟甲基)-1H-
1,2,3-三唑-1-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
N-((2-甲基嘧啶-5-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)-8-(5-(三氟甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(5-异丙基-1H-1,2,3-三唑-1-基)-N-((2-甲基嘧啶-5-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-
2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(5-环丙基-1H-1,2,3-三唑-1-基)-N-((2-甲基嘧啶-5-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-
2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(5-环丙基-1H-1,2,3-三唑-1-基)-N-((2-甲氧基嘧啶-5-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(5-环丁基-1H-1,2,3-三唑-1-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
N-((2-甲氧基嘧啶-5-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)-8-(5-(三氟甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(5-异丙基-1H-1,2,3-三唑-1-基)-N-((6-甲基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-
2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(5-(叔丁基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(5-(二氟甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-N-((2-甲基嘧啶-5-基)甲基)-3-(5-甲基噻唑-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(5-(二氟甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-3-(5-甲基呋喃-2-基)-N-((6-甲基吡啶-3-基)甲基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(5-环丁基-1H-1,2,3-三唑-1-基)-N-((2-甲基嘧啶-5-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-
2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(1,3,4-噁二唑-2-基)乙基)-8-(5-(二氟甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-3-(5-氰基噻吩-2-基)-8-(5-(二氟甲基)-
1H-1,2,3-三唑-1-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)丙基)-8-(5-(二氟甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(5-(二氟甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-3-(5-甲基噻唑-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-8-(5-(二氟甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-N-(2-甲基-1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)丙基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(5-环丁基-1H-1,2,3-三唑-1-基)-N-((2-甲基嘧啶-5-基)甲基)-3-(5-甲基噻唑-
2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
N-((6-甲基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-甲基噻唑-2-基)-8-(5-(三氟甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(5-(叔丁基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-3-(5-甲基噻唑-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)丙基)-8-(5-乙基-1H-1,2,3-三唑-1-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(5-(二氟甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-3-(5-(三氟甲基)噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(5-(二氟甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-3-(5-甲基呋喃-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)丙基)-8-(5-异丙基-1H-1,2,3-三唑-1-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(5-乙基-1H-1,2,3-三唑-1-基)-3-(5-甲基呋喃-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)-8-(5-丙基-1H-1,2,
3-三唑-1-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
N-((2-甲基嘧啶-5-基)甲基)-3-(5-甲基噻唑-2-基)-8-(5-丙基-1H-1,2,3-三唑-1-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(5-(二氟甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-3-(5-甲基呋喃-2-基)-N-((2-甲基嘧啶-5-基)甲基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(5-(二氟甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-N-((2-甲基嘧啶-5-基)甲基)-3-(2-甲基噻唑-5-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)丙基)-8-(5-(叔丁基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
N-((2-甲基嘧啶-5-基)甲基)-3-(5-甲基噻唑-2-基)-8-(5-(三氟甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)丙基)-3-(5-氯噻吩-2-基)-8-(5-异丙基-1H-1,2,
3-三唑-1-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(5-(1,1-二氟乙基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(5-(1,1-二氟乙基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-N-((2-甲基嘧啶-5-基)甲基)-3-(5-甲基噻唑-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(5-(1,1-二氟乙基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-N-((2-甲基嘧啶-5-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-8-(5-乙基-1H-1,2,3-三唑-1-基)-N-(2-甲基-1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)丙基)-
3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(2-甲基-1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)丙基)-8-(5-甲基-1H-1,2,3-三唑-1-基)-
3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(5-乙基-1H-1,2,3-三唑-1-基)-N-((2-甲基嘧啶-5-基)甲基)-3-(5-甲基噻唑-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-3-(5-氯噻吩-2-基)-8-(5-(1,1-二氟乙基)-
1H-1,2,3-三唑-1-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(5-(二氟甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-N-((5-甲基吡嗪-2-基)甲基)-3-(5-甲基噻唑-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(5-(二氟甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-3-(5-甲基呋喃-2-基)-N-((5-甲基吡嗪-2-基)甲基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-3-(5-氯噻吩-2-基)-8-(5-(三氟甲基)-1H-
1,2,3-三唑-1-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
N-((2-甲基嘧啶-5-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)-8-(5-(2,2,2-三氟乙基)-1H-1,
2,3-三唑-1-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)-8-(5-(2,2,2-三氟乙基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
N-((2-甲基嘧啶-5-基)甲基)-3-(5-甲基噻唑-2-基)-8-(5-(2,2,2-三氟乙基)-1H-1,
2,3-三唑-1-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(5-(二氟甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-N-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(R)-8-(5-(二氟甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-N-(1-(2-甲基嘧啶-5-基)乙基)-3-(5-甲基噻唑-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(R)-8-(5-(二氟甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-N-(1-(3-甲基-1,2,4-噁二唑-5-基)乙基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
N-((2-甲氧基嘧啶-5-基)甲基)-3-(5-甲基噻唑-2-基)-8-(5-(三氟甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(5-(1,1-二氟乙基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-N-((6-甲基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-甲基噻唑-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(R)-8-(5-乙基-1H-1,2,3-三唑-1-基)-N-(1-(3-甲基-1,2,4-噁二唑-5-基)乙基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
2-甲基-5-((3-(5-甲基噻吩-2-基)-8-(苯氨基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺基)甲基)吡啶1-氧化物、
N-((1-甲基-2-氧亚基-1,2-二羟基吡啶-4-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)-8-(苯氨基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
N-((6-甲基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)-8-(苯氨基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)-8-(噻唑-2-基氨基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
N-((1-甲基-2-氧亚基-1,2-二羟基吡啶-4-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)-8-(噻唑-2-基氨基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-((4-氟苯基)氨基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-((2-甲氧基苯基)氨基)-3-(5-甲基噻吩-
2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
2-甲基-5-((8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-
6-甲酰胺基)甲基)吡啶1-氧化物、
8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-N-((6-甲基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-N-((1-甲基-2-氧亚基-1,2-二羟基吡啶-4-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-(5-甲基噻吩-
2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-3,8-二(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
N-((S)-1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(3,5-二甲基异恶唑-4-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(1-乙基-1H-吡唑-5-基)-3-(5-甲基噻吩-
2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(1-(环丙基甲基)-1H-吡唑-4-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(1-(2-氟乙基)-1H-吡唑-4-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(3,5-二甲基异恶唑-4-基)-N-((6-甲基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
N-((S)-1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-3-(5-氯噻吩-2-基)-8-(3,5-二甲基异恶唑-
4-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
N-((S)-1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)丙基)-8-(3,5-二甲基异恶唑-4-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
N-((S)-1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(3,5-二甲基异恶唑-4-基)-3-(5-甲基噻唑-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
N-((S)-1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)-N-((2-甲基嘧啶-5-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(1-(2-氨基-2-氧亚基乙基)-1H-吡唑-4-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(1-乙基-1H-吡唑-5-基)-3-(5-甲基噻吩-
2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(4-甲基哌啶-1-基)-N-((6-甲基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(4-甲基哌啶-1-基)-N-((5-甲基吡嗪-2-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
2-甲基-5-((8-(4-甲基哌啶-1-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺基)甲基)吡啶1-氧化物、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-3-(5-氯噻吩-2-基)-8-(4-甲基哌啶-1-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
5-((3-(5-氯噻吩-2-基)-8-(4-甲基哌啶-1-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺基)甲基)-2-甲基吡啶1-氧化物、
5-((8-(环己基氨基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺基)甲基)-
2-甲基吡啶1-氧化物、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(环己基氨基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
5-((8-(4,4-二甲基哌啶-1-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺基)甲基)-2-甲基吡啶1-氧化物、
5-((8-(4,4-二氟哌啶-1-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺基)甲基)-2-甲基吡啶1-氧化物、
5-((8-(环己基氨基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺基)甲基)-
2-(三氟甲基)吡啶1-氧化物、
2-甲基-5-((8-(4-甲基哌啶-1-基)-3-(5-甲基噻唑-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺基)甲基)吡啶1-氧化物、
5-((8-(环己基(甲基)氨基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺基)甲基)-2-甲基吡啶1-氧化物、
5-((8-(4-氟哌啶-1-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺基)甲基)-2-甲基吡啶1-氧化物、
N-((1-甲基-2-氧亚基-1,2-二羟基吡啶-4-基)甲基)-8-(4-甲基哌啶-1-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(4,4-二甲基哌啶-1-基)-3-(5-甲基噻吩-
2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(4,4-二氟哌啶-1-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
2-甲基-5-((3-(5-甲基噻吩-2-基)-8-(4-(三氟甲基)哌啶-1-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺基)甲基)吡啶1-氧化物、
5-((8-(4-(氟甲基)哌啶-1-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺基)甲基)-2-甲基吡啶1-氧化物、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(4-(氟甲基)哌啶-1-基)-3-(5-甲基噻吩-
2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)-8-(4-(三氟甲基)哌啶-1-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(环戊基氨基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(4,4-二氟哌啶-1-基)-3-(4-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(4-氟哌啶-1-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
N-((S)-1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(3-甲氧基吡咯烷-1-基)-3-(5-甲基噻吩-
2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(4-甲氧基-4-甲基哌啶-1-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(4-甲氧基哌啶-1-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
N-((S)-1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(3-甲氧基哌啶-1-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
N-((S)-1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(3-甲氧基-3-甲基吡咯烷-1-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(1H-吡唑-3-基)乙基)-8-(4,4-二氟哌啶-1-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)丙基)-8-(4,4-二氟哌啶-1-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-8-(4,4-二氟哌啶-1-基)-N-(2-甲基-1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)丙基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
3-((8-(4-甲基哌啶-1-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺基)甲基)吡啶1-氧化物、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)丙基)-8-(4-甲氧基哌啶-1-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(4-氨基甲酰基-4-甲基哌啶-1-基)-N-((6-甲基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-
2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(5-异丙基-1H-四唑-1-基)-N-((6-甲基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(5-异丙基-1H-四唑-1-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)-N-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(5-乙基-1H-四唑-1-基)-N-((6-甲基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
N-((6-环丙基吡啶-3-基)甲基)-8-(5-乙基-1H-四唑-1-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(5-环丁基-1H-四唑-1-基)-N-((6-甲基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(5-(环丙基甲基)-1H-四唑-1-基)-N-((6-甲基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-
2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(5-甲基-1H-四唑-1-基)-N-((6-甲基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
N-((6-甲基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)-8-(5-丙基-1H-四唑-1-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(5-异丙基-1H-四唑-1-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)-N-(1-(吡嗪-2-基)乙基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(5-环丁基-1H-四唑-1-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)-N-(1-(吡嗪-2-基)乙基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(5-环丁基-1H-四唑-1-基)-N-((1-甲基-2-氧亚基-1,2-二羟基吡啶-4-基)甲基)-
3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(5-乙基-1H-四唑-1-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)-N-(1-(吡嗪-2-基)乙基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(5-环丁基-1H-四唑-1-基)-N-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(5-环丁基-1H-四唑-1-基)-N-((5-甲基吡嗪-2-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(5-环丁基-1H-四唑-1-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(5-(环丙基甲基)-1H-四唑-1-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(5-环丙基-1H-四唑-1-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(5-(二氟甲基)-1H-四唑-1-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(5-(二氟甲基)-1H-四唑-1-基)-N-((2-甲氧基嘧啶-5-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-
2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-3-(5-氯噻吩-2-基)-8-(5-(二氟甲基)-1H-四唑-1-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)丙基)-8-(5-(二氟甲基)-1H-四唑-1-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(5-(二氟甲基)-1H-四唑-1-基)-N-((2-甲基嘧啶-5-基)甲基)-3-(5-甲基噻唑-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(5-(二氟甲基)-1H-四唑-1-基)-N-((6-甲基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-甲基噻唑-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)丙基)-3-(5-氯噻吩-2-基)-8-(5-(二氟甲基)-1H-四唑-1-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-3-(5-氯噻吩-2-基)-8-(5-环丙基-1H-四唑-
1-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
3-(5-氯噻吩-2-基)-8-(5-(二氟甲基)-1H-四唑-1-基)-N-((2-甲基嘧啶-5-基)甲基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(5-(二氟甲基)-1H-四唑-1-基)-N-((2-甲基嘧啶-5-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(5-乙基-1H-四唑-1-基)-3-(5-甲基噻吩-
2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)-8-(5-丙基-1H-四唑-
1-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(R)-8-(5-(二氟甲基)-1H-四唑-1-基)-N-(1-(5-甲基-1,3,4-噁二唑-2-基)乙基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)-8-(5-(2,2,2-三氟乙基)-1H-四唑-1-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(5-(1,1-二氟乙基)-1H-四唑-1-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(5-(二氟甲基)-1H-四唑-1-基)-3-(5-甲基呋喃-2-基)-N-((2-甲基嘧啶-5-基)甲基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-3-(5-氯噻吩-2-基)-8-(5-(1,1-二氟乙基)-
1H-四唑-1-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
8-(5-(二氟甲基)-1H-四唑-1-基)-N-((5-甲基吡嗪-2-基)甲基)-3-(5-甲基噻唑-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(R)-8-(5-(1,1-二氟乙基)-1H-四唑-1-基)-N-(1-(3-甲基-1,2,4-噁二唑-5-基)乙基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(N-甲基丙酰胺基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺、
(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(N-环丙基丙酰胺基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺，
或其药学上可接受的盐。
12.一种药物组合物，其包括权利要求1-11中任一项所述的化合物和任选的药学可接受的载体。
13.一种包含权利要求1-11中任一项所述的化合物的试剂盒。
14.权利要求1-11中任一项所述的化合物在制备一种用于调控一种或全部P2X3或P2X2/3受体的药物中的用途。
15.根据权利要求14所述的用途，其中所述调控包括抑制。
16.权利要求1-11中任一项所述的化合物在制备一种用于治疗患者疼痛的药物中的用途。
17.一种根据权利要求16所述的用途，其中所述疼痛是感受伤害的、功能失调的、特发性的、神经性的、躯体的、中枢的、内脏的、炎性的或过程性的。
18.根据权利要求16所述的用途，其中所述疼痛由气道，膀胱或内脏器官功能障碍引起。
19.根据权利要求16所述的用途，其中所述疼痛是偏头痛、背痛、颈部疼痛、妇科疼痛、分娩前疼痛、分娩疼痛、骨科疼痛、脑卒中后疼痛、手术后疼痛、疱疹后神经痛、镰状细胞危象、间质性膀胱炎、泌尿道疼痛、牙痛、头痛、伤口疼痛、手术疼痛、缝合、骨折复位疼痛或活组织检查。
20.根据权利要求16所述的用途，其中所述疼痛源于炎症、神经压迫或由组织扩张产生的机械力，所述组织扩张为肿瘤或者肿瘤转移侵入骨或者其它组织的结果。
21.根据权利要求16所述的用途，其中所述疼痛由食管癌、结肠炎、膀胱炎、肠道易激综合症或特发性神经病引起。
22.根据权利要求17所述的用途，其中所述躯体痛包括来自于骨、关节、肌肉、皮肤或结缔组织的疼痛。
23.根据权利要求17所述的用途，其中所述中枢痛包括来自脑外伤、脑卒中或脊髓损伤的疼痛。
24.根据权利要求17所述的用途，其中所述内脏痛包括来自呼吸道、胃肠道、胰腺、尿路或生殖器官的疼痛。
25.根据权利要求17所述的用途，其中所述功能失调性疼痛包括来自风湿性疾病、紧张型头痛、肠道易激症或红斑性肢痛的疼痛。
26.根据权利要求17所述的用途，其中所述感受伤害的疼痛包括来自切割、挫伤、骨折、挤压伤、烧伤、外伤、手术、分娩、扭伤、磕碰、注射、牙处置、皮肤活体组织检查或梗阻的疼痛。
27.根据权利要求17所述的用途，其中所述神经性疼痛包括源自外伤、手术、椎间盘、脊髓损伤、糖尿病、感染带状疱疹、HIV/AIDS、晚期癌症、截肢、腕管综合症、慢性酗酒、暴露于辐射，或者神经毒性治疗剂的非预期的副作用的疼痛。
28.根据权利要求17所述的用途，其中所述炎性疼痛包括源自是关节损伤、肌肉损伤、肌腱损伤、外科手术、感染或关节炎的疼痛。
29.根据权利要求17所述的用途，其中所述过程性疼痛包括来自医疗过程、牙科处置过程或外科手术过程的疼痛。
30.根据权利要求29所述的用途，其中所述过程性疼痛是术后疼痛，其与注射、脓肿引流、外科手术、皮肤病处置、牙科处置过程、眼科处置过程、关节镜检查或整容手术相关。
31.根据权利要求16所述的用途，其中所述疼痛由癌症引起。
32.根据权利要求31所述的用途，其中所述癌症是骨癌。
33.根据权利要求16所述的用途，其中所述药物经口服、肌内、直肠、皮肤、皮下、局部、经皮、舌下、鼻、阴道、硬膜外、鞘内、膀胱内或眼施用于所述患者。
34.权利要求1-11中任一项所述的化合物在制备一种用于调节一个或全部P2X3或P2X2/3通路的药物中的用途。
P2X3和/或P2X2/3化合物和方法
[0001] 优先权申请的交叉引用
[0002] 本申请要求名为P2X3和/或P2X2/3化合物和方法，于2013年12月16日提交的美国临时申请第61/916,499号的提交日的权益，其公开内容通过引文的形式并入本文。
背景技术
[0003] 三磷酸腺苷(ATP)是公认的活细胞初级能量货币，但也以重要的信号分子出现，这种信号分子能通过与任意几个“嘌呤的”膜相关受体分子相互作用形成生理学和病理生理学过程。嘌呤受体家族包括G-蛋白-偶联(GPCR)受体(指定为术语P2Y)和配体门控离子通道(P2X)变体。ATP通过与P2X亚族受体相互作用在传入感觉神经上诱导兴奋效应。当在皮肤、骨和内脏组织中诱导ATP效应，这种过度兴奋的结果可以解读为疼痛；在气道组织中解读为疼痛和/或咳嗽，或当其在膀胱内发生，解读为疼痛和/或失稳。被指定为P2X3和P2X2/3的P2X亚族中两种特别的受体变体，作为特别感兴趣的各种研究的目标而出现：所述研究被设计为测量啮齿动物的感受伤害、气道或膀胱功能，因为通过ATP这些受体的激活能够产生上述不良事件。
[0004] 因此，对于更有潜能和选择性的P2X3/P2X2/3调节剂存在需求。
[0005] 发明概述
[0006] 在一方面，提供式(I)的结构的化合物，其中R1-R4如本文所述，或其药学可接受的盐。
[0007]
[0008] 在另一方面，提供式(II)的结构的化合物，其由式(I)的化合物所涵盖，其中R1、 R2和R4如本文所述，或其药学上可接受的盐。
[0009]
[0010]
[0011] 在进一方面，提供式(III)的结构的化合物，其由式(I)的化合物所涵盖，其中R1、 R2和R4如本文所述，或其药学上可接受的盐或前药。
[0012]
[0013] 在又另一方面，提供式(IV)的结构的化合物，其由式(I)的化合物所涵盖，其中 R2和R4-R6如本文所述，或其药学上可接受的盐。
[0014]
[0015] 在还进一方面，提供组合物并且其含有(i)本文所述的化合物以及(ii)药学可接受的载体。
[0017] 在又进一方面，提供用于调控一种或全部P2X3或P2X2/3受体活性的方法，并包括向有需要的患者施用本文所述的化合物。在一个实施方案中，所述调节是抑制。
[0018] 在进一方面，提供用于调节一种或全部P2X3或P2X2/3通路的方法，并包括向患者施用本文所述的化合物。
[0019] 在仍进一方面，提供用于治疗患者疼痛的方法，并包括向患者施用本文所述的化合物。
[0021] 图1A是循环克隆的质粒pIRESpuro3(Clontech Laboratories Inc.,Mountain View,CA) 图，向所述质粒pIRESpuro3中，大鼠P2X2的蛋白质编码序列被克隆于多克隆位点(MCS) 中的EcoRV-酶切和去磷酸化载体pIRES-puro3。
[0022] 图1B是循环的质粒pCDNA-Hygro(Invitrogen)图，向其中由大鼠脑cDNA通过PCR 扩增的大鼠P2X3编码序列(NCBI登记号：X91167)被克隆。将所得含有大鼠P2X3蛋白质编码序列的PCR产物克隆至多克隆位点(MCS)中的EcoRV-酶切和去磷酸化载体 pCDNA-Hygro。
[0023] 图1C是由含有大鼠P2X3的pCDNA-Hygro产生的载体，然后其被亚克隆至载体的多克隆位点(MCS)的HindIII(5')和XhoI(3')位的pcDNA-5/TO(Invitrogen/Life Technologies)。
[0024] 图2说明了通过完全弗氏佐剂(CFA)的足底注射诱导的炎性热痛觉过敏的大鼠模型中实施例22的化合物的抗痛觉过敏的功效。在用疼痛热刺激辐射期间，热痛觉过敏表现为足部收回时间的减少。在CFA足垫注射48h后，以60mg/kg的剂量施用实施例22的化合物，当分别在给药后1h和2h评估时，实施例22的化合物产生了热痛觉过敏的大的逆转(77％和68％)。
[0025] 图3说明了正在经历自发性疼痛的大鼠模型中实施例22化合物的镇痛功效。以100 mg/kg的剂量通过口灌施用实施例22的化合物，之后30min后，足垫注射稀释的福尔马林溶液。福尔马林引起典型的两相疼痛反应，显示为自发的后肢回缩，以5min时间段计算和记录。实施例22的化合物使对福尔马林的第二相回缩反应减弱-与镇痛作用的状况一致。
[0026] 图4说明内脏疼痛的小鼠模型中实施例22的化合物的镇痛功效。在腹膜内注射稀释的醋酸溶液前30min，以3个剂量水平(20、40和60mg/kg)口灌施用实施例22的化合物。当注射入腹腔后，醋酸在腹部引起有独特的伸缩反应，假设至少一只后肢反映内脏痛反应。当在总15min醋酸注射后评估时，实施例22的化合物产生清楚的剂量相关的疼痛反应降低。相对于载体对照组显示出统计学显著性，该统计学显著性使用单因素ANOVA，随后是 Dunnett多重比较试验进行。
[0027] 图5说明了通过CFA的足底注射诱导的炎性热痛觉过敏的大鼠模型中实施例38的化合物的抗痛觉过敏的功效。在用疼痛热刺激辐射期间，热痛觉过敏表现为足部收回时间的减少。在CFA足垫注射48h后，以60mg/kg的剂量施用实施例38的化合物，当在给药后1h 评估时，实施例38的化合物产生了热痛觉过敏的大的逆转(50％)。
[0028] 图6说明了通过CFA的足底注射诱导的炎性热痛觉过敏的大鼠模型中实施例52的化合物的抗痛觉过敏的功效。在用疼痛热刺激辐射期间，热痛觉过敏表现为足部收回时间的减少。在CFA足垫注射48h后，以60mg/kg的剂量施用实施例52的化合物，当在给药后1h 评估时，实施例52的化合物产生了热痛觉过敏的大的逆转(39％)。
[0029] 发明详述
[0030] 本文所讨论的是能够调节一种或全部P2X3或P2X2/3通路的新化合物。可使用这些化合物治疗由一种或全部P2X3或P2X2/3通路调节异常所引起的疾病。
[0031] 本文所讨论的化合物具有式(I)的结构。
[0032]
[0033] 在该结构中，R1是任选取代的杂芳基或NR5R6。在一方面，R1是任选取代的杂芳基。在一个实施方案中，R1是任选取代的杂芳基。在另一个实施方案中，R1是由一个或多个卤素、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C3-C6环烷基-C1-C6烷基、C1-C6羟烷基、C1-C6烷氧基、含有1-3个氟原子的C1-C6烷基或CH2CONH2取代的杂芳基。在进一步的实施方案中，R1是噁二唑、吡唑、噻吩或异恶唑。在又另一个实施方案中，R1是由一个或多个C1-C6烷基取代的噁二唑、由一个或多个C1-C6烷基取代的吡唑、由一个或多个C3-C6环烷基-C1-C6烷基取代的吡唑、由一个或多个含有1-3个氟原子的C1-C6烷基取代的吡唑、由一个或多个 CH2CONH2基团取代的吡唑、由一个或多个C1-C6烷基取代的噻吩或由一个或多个C1-C6烷基取代的异恶唑。在仍进一步的实施方案中，R1是由一个C1-C6烷基取代的噁二唑、由一个C1-C6烷基取代的吡唑、由一个C3-C6环烷基-C1-C6烷基取代的吡唑、由一个含有1个氟原子的C1-C6烷基取代的吡唑、由一个或多个CH2CONH2基团取代的吡唑、由一个C1-C6烷基取代的噻吩、或由一个或两个C1-C6烷基取代的异恶唑。在另一个实施方案中，R1是由一个乙基取代的噁二唑、由一个CH3或CH2CH3取代的吡唑、由一个-CH2-环丙基取代的吡唑、由一个CH2CH2F取代的吡唑、由一个或多个CH2CONH2基团取代的吡唑、由一个 CH3取代的噻吩或由两个CH3取代的异恶唑。在又另一个实施方案中，R1是2-乙基-1,3,4- 噁二唑、1-甲基-吡唑、1-乙基-吡唑、1-环丙基甲烷-吡唑、1-氟代乙烷-吡唑、1-甲酰胺基甲基-吡唑、2-甲基-噻吩或3,5-二甲基-异恶唑。
[0034] 在另一方面，R1是NR5R6。在一个实施方案中R5和R6独立地选自H、任选取代的C1-C6烷基、C3或C6环烷基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基和CO(C1-C6烷基)。在进一步的实5 6 5 6
施方案中，R 和R是任选取代的苯基。在另一个实施方案中，R 和R是由氟取代的苯基或C1-C6烷氧基。在又进一步的实施方案中，一个或全部R5和R6是任选取代的噻唑。在还另一个实施方案中，一个或全部R5和R6是任选取代的C1-C6烷基或C3-C6环烷基。在进一步的实施方案中，一个或全部R5和R6是4-氟-苯基或2-甲氧基-苯基。在另一个实施方案中，R5和R6连接以形成由一个或多个卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6羟烷基、 C3-C6环烷基、C3-C6环烷基-C1-C6烷基、含有1-3个氟原子的C1-C6烷基或CONH2任选取代的5或6-元杂环。在进一步的实施方案中，R5和R6连接以形成杂芳基。在仍进一步的实施方案中，R5和R6连接以形成任选取代的5或6-元杂环。在又另一个实施方案中，R5和 R6连接以形成任选取代的吡咯烷、咪唑、吡
5 6
唑、四唑、三唑、哌啶和哌嗪。在另一个实施方案中，R 和R连接以形成由一个或多个C1-C6烷基或C1-C6烷氧基任选取代的吡咯烷。在另一个实施方案中，R5和R6连接以形成由一个或多个C1-C6烷基取代的咪唑。在还另一个实施方案中，R5和R6连接以形成由一个或多个C1-C6烷基取代的吡唑。在又另一个实施方案中，R5和R6连接以形成由一个或多个C3-C6环烷基、C1-C6烷基、C1-C6羟烷基、含有 1-3个氟原子的C1-C6烷基和C3-C6环烷基-C1-C6烷基取代的四唑。在进一步的实施方案中， R5和R6连接以形成由一个或多个C3-C6环烷基、含有1-3个氟原子的C1-C6烷基和C1-C6烷基取代的三唑。在另一个实施方案中，R5和R6连接以形成由一个或多个C1-C6烷氧基、卤素、含有1-3个氟原子的C1-C6烷基、C1-C6烷基或CONH2取代的哌啶。在又另一个实施方案中，R5和R6连接以形成由CONH2取代的哌嗪。在还进一步的实施方案中，R5和R6连接以形成3-甲氧基-吡咯烷、3-甲基-3-甲氧基-吡咯烷、2,5-二甲基-咪唑、5-乙基-吡唑、
5-丙基-四唑、5-环丙基-四唑、5-丙基-四唑、5-异丙基-四唑、5-乙基-四唑、5-环丁基-四唑、 5-环丙基甲基-四唑、5-甲基-四唑、5-羟甲基-四唑、5-二氟甲基-四唑、5-(2,2,2-三氟乙基)- 四唑、5-(1,1-二氟乙基)-四唑、5-环丙基-三唑、5-二氟甲基-三唑、5-三氟甲基-三唑、5-甲基-三唑、5-异丙基-三唑、5-丙基-三唑、5-乙基-三唑、5-叔丁基-三唑、5-环丁基-三唑、5-(1,1- 二氟乙基)-三唑、5-(2,2,2-三氟乙基)-三唑、3,5-二甲基-1,2,4-三唑、4-甲基-哌啶、4,4-二甲基-哌啶、4,4-二氟-哌啶、4-甲基-4-甲酰胺基-哌啶、4-氟-哌啶、4-三氟甲基-哌啶、4-氟甲基-哌啶、4-甲基-4-甲氧基-哌啶、4-甲氧基-哌啶、3-甲氧基-哌啶或
4-甲酰胺基-哌嗪。
施方案中，R 和R是任选取代的苯基。在另一个实施方案中，R 和R是由氟取代的苯基或C1-C6烷氧基。在又进一步的实施方案中，一个或全部R5和R6是任选取代的噻唑。在还另一个实施方案中，一个或全部R5和R6是任选取代的C1-C6烷基或C3-C6环烷基。在进一步的实施方案中，一个或全部R5和R6是4-氟-苯基或2-甲氧基-苯基。在另一个实施方案中，R5和R6连接以形成由一个或多个卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6羟烷基、 C3-C6环烷基、C3-C6环烷基-C1-C6烷基、含有1-3个氟原子的C1-C6烷基或CONH2任选取代的5或6-元杂环。在进一步的实施方案中，R5和R6连接以形成杂芳基。在仍进一步的实施方案中，R5和R6连接以形成任选取代的5或6-元杂环。在又另一个实施方案中，R5和 R6连接以形成任选取代的吡咯烷、咪唑、吡
5 6
唑、四唑、三唑、哌啶和哌嗪。在另一个实施方案中，R 和R连接以形成由一个或多个C1-C6烷基或C1-C6烷氧基任选取代的吡咯烷。在另一个实施方案中，R5和R6连接以形成由一个或多个C1-C6烷基取代的咪唑。在还另一个实施方案中，R5和R6连接以形成由一个或多个C1-C6烷基取代的吡唑。在又另一个实施方案中，R5和R6连接以形成由一个或多个C3-C6环烷基、C1-C6烷基、C1-C6羟烷基、含有 1-3个氟原子的C1-C6烷基和C3-C6环烷基-C1-C6烷基取代的四唑。在进一步的实施方案中， R5和R6连接以形成由一个或多个C3-C6环烷基、含有1-3个氟原子的C1-C6烷基和C1-C6烷基取代的三唑。在另一个实施方案中，R5和R6连接以形成由一个或多个C1-C6烷氧基、卤素、含有1-3个氟原子的C1-C6烷基、C1-C6烷基或CONH2取代的哌啶。在又另一个实施方案中，R5和R6连接以形成由CONH2取代的哌嗪。在还进一步的实施方案中，R5和R6连接以形成3-甲氧基-吡咯烷、3-甲基-3-甲氧基-吡咯烷、2,5-二甲基-咪唑、5-乙基-吡唑、
5-丙基-四唑、5-环丙基-四唑、5-丙基-四唑、5-异丙基-四唑、5-乙基-四唑、5-环丁基-四唑、 5-环丙基甲基-四唑、5-甲基-四唑、5-羟甲基-四唑、5-二氟甲基-四唑、5-(2,2,2-三氟乙基)- 四唑、5-(1,1-二氟乙基)-四唑、5-环丙基-三唑、5-二氟甲基-三唑、5-三氟甲基-三唑、5-甲基-三唑、5-异丙基-三唑、5-丙基-三唑、5-乙基-三唑、5-叔丁基-三唑、5-环丁基-三唑、5-(1,1- 二氟乙基)-三唑、5-(2,2,2-三氟乙基)-三唑、3,5-二甲基-1,2,4-三唑、4-甲基-哌啶、4,4-二甲基-哌啶、4,4-二氟-哌啶、4-甲基-4-甲酰胺基-哌啶、4-氟-哌啶、4-三氟甲基-哌啶、4-氟甲基-哌啶、4-甲基-4-甲氧基-哌啶、4-甲氧基-哌啶、3-甲氧基-哌啶或
4-甲酰胺基-哌嗪。
[0035] R2是任选取代的芳基、任选取代的杂芳基、C1-C6烷基或S-C1至C6烷基。在一个实施方案中，R2是任选取代的芳基。在另一个实施方案中，R2是任选取代的苯基。在进一步的实施方案中，R2是由一个或多个C1-C6烷基取代的苯基。在又另一个实施方案中，R2是由一个CH3取2 2
代的苯基。在还另一个实施方案中，R是2-甲苯基或3-甲苯基。在进一步的实施方案中，R 是C1-C6烷基。在另一个实施方案中，R2是丁基。在还进一步的实施方案中， R2是-S-(C1-C6烷基)。在又另一个实施方案中，R2是-SCH2CH2CH3。在进一步的实施方案中，R2是任选取代的杂芳基。在还另一个实施方案中，R2是由一个或多个卤素、氰基、C1-C6烷基或含有1-3个氟原子的C1-C6烷基取代的杂芳基。在又进一步的实施方案中，R2是噻唑、噻吩或呋喃。在另一个实施方案中，R2是由C1-C6烷基取代的噻唑。在还进一步的实施方案中，R2是由一个或多个卤素、氰基、C1-C6烷基或含有1-3个氟原子的C1-C6烷基取代的噻吩。在又另一个实施方案中，R2是由C1-C6烷基取代的呋喃。在进一步的实施方案中，R2是2-氯-噻吩、2-甲基-噻吩、2-氰基-噻吩、2-三氟甲基-噻吩、5-甲基-噻唑、2-甲基- 噻唑或2-甲基-呋喃。
代的苯基。在还另一个实施方案中，R是2-甲苯基或3-甲苯基。在进一步的实施方案中，R 是C1-C6烷基。在另一个实施方案中，R2是丁基。在还进一步的实施方案中， R2是-S-(C1-C6烷基)。在又另一个实施方案中，R2是-SCH2CH2CH3。在进一步的实施方案中，R2是任选取代的杂芳基。在还另一个实施方案中，R2是由一个或多个卤素、氰基、C1-C6烷基或含有1-3个氟原子的C1-C6烷基取代的杂芳基。在又进一步的实施方案中，R2是噻唑、噻吩或呋喃。在另一个实施方案中，R2是由C1-C6烷基取代的噻唑。在还进一步的实施方案中，R2是由一个或多个卤素、氰基、C1-C6烷基或含有1-3个氟原子的C1-C6烷基取代的噻吩。在又另一个实施方案中，R2是由C1-C6烷基取代的呋喃。在进一步的实施方案中，R2是2-氯-噻吩、2-甲基-噻吩、2-氰基-噻吩、2-三氟甲基-噻吩、5-甲基-噻唑、2-甲基- 噻唑或2-甲基-呋喃。
[0036] R3是H或C1-C6烷基。在一个实施方案中，R3是H。在另一个实施方案中，R3是C1-C6烷基。
[0037] R4是任选取代的杂芳基。在一个实施方案中，R4是任选取代的三唑、任选取代的吡啶、任选取代的吡啶酮、任选取代的噁二唑、任选取代的吡嗪或任选取代的嘧啶。在另一个实施方案中，R4是由C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C1-C6烷氧基或C1-C6三氟烷基任选取代的杂芳4
基。在进一步的实施方案中，R 是由一个或多个C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C1-C6烷氧基或C1-C6三氟烷基任选取代的吡啶。在又另一个实施方案中，R4是吡啶，并且所述吡啶的氮原子连接至O-原子。在还进一步的实施方案中，R4是由一个或多个C1-C6烷基取代的吡嗪。在另一个实施方案中，R4是由一个或多个C1-C6烷基或C1-C6烷氧基取代的嘧啶。在又进一步的实施方案
4 4
中，R 是由一个或多个C1-C6烷基取代的吡啶酮。在还另一个实施方案中，R是1,2,4-三唑、
2-甲基-吡啶、2-甲氧基-吡啶、1-氧亚基-吡啶、1-氧亚基-2-甲基- 吡啶、1-氧亚基-2-三氟甲基-吡啶、2-三氟甲基-吡啶、2-环丙基-吡啶、1,3,4-噁二唑、1,2,4- 噁二唑、3-甲基-1,
2,4-噁二唑、2-甲基-1,3,4-噁二唑、2-甲基-吡嗪、2-甲基-嘧啶、2-甲氧基- 嘧啶或1-甲基-吡啶酮。
基。在进一步的实施方案中，R 是由一个或多个C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C1-C6烷氧基或C1-C6三氟烷基任选取代的吡啶。在又另一个实施方案中，R4是吡啶，并且所述吡啶的氮原子连接至O-原子。在还进一步的实施方案中，R4是由一个或多个C1-C6烷基取代的吡嗪。在另一个实施方案中，R4是由一个或多个C1-C6烷基或C1-C6烷氧基取代的嘧啶。在又进一步的实施方案
4 4
中，R 是由一个或多个C1-C6烷基取代的吡啶酮。在还另一个实施方案中，R是1,2,4-三唑、
2-甲基-吡啶、2-甲氧基-吡啶、1-氧亚基-吡啶、1-氧亚基-2-甲基- 吡啶、1-氧亚基-2-三氟甲基-吡啶、2-三氟甲基-吡啶、2-环丙基-吡啶、1,3,4-噁二唑、1,2,4- 噁二唑、3-甲基-1,
2,4-噁二唑、2-甲基-1,3,4-噁二唑、2-甲基-吡嗪、2-甲基-嘧啶、2-甲氧基- 嘧啶或1-甲基-吡啶酮。
[0038] 在一个实施方案中，化合物是式(II)的结构，其中R1、R2和R4如上所定义。
[0039]
[0040] 在另一个实施方案中，化合物是式(III)的结构，其中R1、R2和R4如上所定义。
[0041]
[0042] 在进一步的实施方案中，化合物是式(IV)的结构，其中R2和R4-R6如上所定义。
[0043]
[0044] 代表性的“药学可接受的盐”包括但不限于酸或碱的那些。在一个实施方案中，药用盐从可溶于水的和不溶于水的盐中选择。所述盐可以是选自例如乙酸、丙酸、乳酸、柠檬酸、酒石酸、琥珀酸、富马酸、马来酸、丙二酸、扁桃酸、苹果酸、邻苯二甲酸、盐酸、氢溴酸、磷酸、硝酸、硫酸、甲磺酸、萘磺酸、苯磺酸、甲苯磺酸、三氟乙酸和樟脑磺酸的酸的盐。所述盐可以是选自例如钾、钠、钙、铵的碱的盐。在一些实施方案中，本发明的组合物可含有药学可接受的盐和本发明化合物的游离碱形式。
[0045] 本发明的化合物也可以是式(I)的前药。式(I)的化合物的前药可使用本领域普通技术人员已知的各种方法制备。参见例如Rautio,Nature Reviews Drug Discovery,7:255-270 (2008)和Ettmayer,J.Med.Chem.,47:2393-2404(2004)，其通过引文的形式并入本文。在药物含有羟基部分的情况下，预期将乙酰基和其他酯类似物用作前药。参见例如Beaumont, Current Drug Metabolism,4:461-485(2003)，其通过引文的形式并入本文。在药物含有胺部分的情况下，预期前药含有酰胺和氨基甲酸酯。参见例如Simplício,Molecules,13:519-547 (2008)，其通过引文的形式并入本文。作为特定的实例，对于胺可使用(烷氧基羰基氧基)烷基氨基甲酸酯，(酰氧基)烷基氨基甲酸酯和(oxodioxolenyl)烷基氨基甲酸酯作为有效的前药策略。参见例如Li,Bioorg.Med.Chem.Lett.、7:2909-2912(1997)；Alexander,J.Med.Chem., 34:78-81(1991)；Alexander,J.Med.Chem.,31:318-322(1988)和Alexander,J.Med.Chem., 39:480-486(1996)，其全部通过引文的形式并入本文。
[0046] 本发明所述的一些化合物拥有一个或多个手性中心。因此，每个化合物的公开包括其单独的对映异构体以及对映异构体的混合物。当在化合物中存在多个手性中心时，也提供化合物中手性中心的每种可能的组合，及其可能的对映异构体和非对映异构体的混合物。旨在涵盖结构所有的手性、非对映异构和外消旋形式，除非特别表示具体的立体化学或异构形式。本领域熟知如何制备光学活性形式，例如通过外消旋形式的分解或通过从光学活性起始材料合成。
[0047] 在本发明所述的化合物中使用以下限定。通常，给定基团中存在的碳原子数被指定为“Cx-Cy”，其中x和y分别为上限和下限。本发明的限定中所使用的碳数指碳骨架和碳分支，但不包括取代基的碳数，例如烷氧基取代基等等。除非另外指出，未明确在本文中定义的取代基的命名法是通过从左到右命名官能团的末端部分和朝向连接点的相邻官能团确定。如本文所使用的，“任选取代的”意指任选取代的基团的至少1个氢原子已被替换。
[0048] “烷基”是指可为直链或支链的烃链。在一个实施方案中，烷基含有1-6(包含)个碳原子。在另一个实施方案中，烷基含有1-5(包含)个碳原子。在进一步的实施方案中，烷基含有1-4(包含)个碳原子。在又另一个实施方案中，烷基含有1-3(包含)个碳原子。在还进一步的实施方案中，烷基含有1-2(包含)个碳原子。是烃链的烷基基团的实例包括但不限于甲基、乙基、丙基、丁基、戊基和己基，其中预期这些实例的所有异构体。
[0049] 烷基基团也可由环烷基自由基组成或含有环烷基自由基，即“碳环”或“环烷基”。碳环的实例包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基等。在一个实施方案中，碳环为3- 至6-元。在另一个实施方案中，碳环为3-至5-元环。在进一步的实施方案中，碳环为4-至 6-元。在还进一步的实施方案中，碳环为3-至4-元，即环丙基或环丁基。除非具体指出，烷基基团是非取代的，即它们仅含有碳和氢原子。然而，当烷基基团或碳环被取代，其以术语“任选取代的”或“取代的”为开头。烷基基团或碳环的任选取代基包括，不限于：卤素、 CN、NO2、C1-C6烷基、OH、C1-C6烷氧基、C1-C6烷氧基-C1-C6烷氧基、C1-C6烷氧基-C1-C6烷基-C1-C6烷氧基、杂环基氧基、C1-C6烷基硫、芳基、杂环、杂芳基、C(O)(C1-C6烷基)、C(O)(杂环)、C(O)O(C1-C6烷基)、C(O)NH2、C(O)NH(C1-C6烷基)、C(O)N(C1-C6烷基)(C1-C6烷基)、SO2(C1-C6烷基)、SO2(C2-C6炔基)、SO2NH(C1-C6烷基)、SO2(杂环)、NHC(O)(C1-C6烷基)、NHSO2(C1-C6烷基)、N(C1-C6烷基)SO2(C1-C6烷基)、NH2、NH(芳基)、N(C1-C6烷基)(C1-C6烷基)和NHC(O)NH2。
[0050] “烷氧基”指 O(烷基)，其中烷基是任选取代的，并在上文定义。在一个实施方案中，烷氧基含有1-6(包含)个碳原子或介于其之间的整数或范围。在另一个实施方案中，烷氧基含有1-5(包含)个碳原子或介于其之间的范围。在进一步的实施方案中，烷氧基含有 1-4(包含)个碳原子。在还进一步的实施方案中，烷氧基含有1-3(包含)个碳原子。在还进一步的实施方案中，烷氧基含有1或2个碳原子。烷氧基的实例包括但不限于甲氧基、乙氧基、丙氧基和丁氧基。烷氧基基团的烷基按上文对于“烷基”所定义的可未取代或取代。
[0051] “芳基”指含有碳原子的芳香族烃基团。在一个实施方案中，芳基含有6-10个碳原子，即6-、7-、8-、9-或10-元。在另一个实施方案中，芳基是芳香族或部分芳香族双环基团。在进一步的实施方案中，芳基为苯基。在另一实施方案中，芳基为萘基(诸如α-萘基或β- 萘基)、1,2,3,4-四氢萘基或二氢茚基。芳基可以是未取代的或由一个或多个基团取代，所述基团包括不限于：卤素、NO2、C1-C6烷基、OH、C1-C6烷氧基、C1-C6烷氧基-C1-C6烷氧基、C1-C6烷氧基-C1-C6烷氧基-C1-C6烷氧基、杂环基氧基、C1-C6烷基硫、芳基、杂环、杂芳基、C(O)(C1-C6烷基)、C(O)(杂环)、C(O)O(C1-C6烷基)、C(O)NH2、C(O)NH(C1-C6烷基)、 C(O)N(C1-C6烷基)(C1-C6烷基)、SO2(C1-C6烷基)、SO2(C2-C6炔基)、SO2NH(C1-C6烷基)、 SO2(杂环)、NHSO2(C1-C6烷基)、N(C1-C6烷基)SO2(C1-C6烷基)、NH2、NH(芳基)或NHC(O)NH2。
[0052] “卤素”指F、Cl、Br及I。
[0053] 术语“杂原子”指硫、氮或氧原子。“杂芳基”指含有至少一个环杂原子的单环芳香族5- 或6-元环。在一个实施方案中，杂芳基含有1-5个(包括)碳原子或介于其之间的整数或范围。在另一个实施方案中，杂芳基含有2-5个(包括)碳原子。在进一步的实施方案中，杂芳基含有3-5个(包括)碳原子。在还进一步的实施方案中，杂芳基含有4-5个(包括) 碳原子。“杂芳基”也指双环芳香环体系，其中如上所述的杂芳基基团稠合至至少一个其他的环部分。在一个实施方案中，苯基稠合至5-或6-元单环杂芳基以形成双环杂芳基。在另一个实施方案中，环烷基稠合至单环杂芳基以形成双环杂芳基。在进一步的实施方案中，双环杂芳基是稠合至5-或6-元单环杂芳基的吡啶。在还进一步的实施方案中，杂芳环在环中具有1个或2个碳原子。在还进一步的实施方案中，杂芳环具有1个氮原子和1个氧原子。在还进一步的实施方案中，杂芳环具有1个氮原子和1个硫原子。杂芳基基团的实例包括不限于：呋喃、噻吩、吲哚、氮杂吲哚、恶唑、噻唑、异恶唑、异噻唑、咪唑、吡啶、吡啶酮、吡唑、嘧啶、吡嗪、哒嗪、吡咯、噁二唑如1,3,4-噁二唑、三唑如1,2,4-三唑、四唑、苯并恶唑、苯并噻唑、苯并呋喃、苯并异恶唑、苯并咪唑、氮杂苯并咪唑、吲唑、喹唑啉、喹啉和异喹啉。杂芳基可以是未取代的或由一个或多个基团取代的，所述基团包括不限于：卤素、CN、NO2、C1-C6烷基、OH、C1-C6烷氧基、C3-C8环烷基、C1-C6烷氧基-C1-C6烷氧基、C1-C6烷氧基-C1-C6烷氧基-C1-C6烷氧基、含有1-3个氟原子的C1或C6烷基、含有1-3个氟原子的C1-C6烷氧基、C3-C6环烷基-C1-C6烷基、C1-C6羟烷基、杂环基氧基、 C1-C6烷基硫、芳基、杂环、杂芳基、C(O)(C1-C6烷基)、C(O)(杂环)、C(O)O(C1-C6烷基)、 C(O)NH2、C(O)NH(C1-C6烷基)、C(O)N(C1-C6烷基)(C1-C6烷基)、SO2(C1-C6烷基)、SO2(C2-C6炔基)、SO2NH(C1-C6烷基)、SO2(杂环)、NHC(O)(C1-C6烷基)、NHSO2(C1-C6烷基)、N(C1-C6烷基)SO2(C1-C6烷基)、NH2、NH(芳基)、N(C1-C6烷基)(C1-C6烷基)和NHC(O)NH2。
[0054] “杂环”指至少一个环原子是杂原子的单环或双环基团。杂环可以是饱和或部分饱和的。在一个实施方案中，杂环含有3-7个(包含)碳原子或介于其之间的整数或范围。在另一个实施方案中，杂环含有4-7个(包含)碳原子。在进一步的实施方案中，杂环含有4-6 个(包含)碳原子。在还进一步的实施方案中，杂环含有5-6个(包含)碳原子。杂环的实例包括但不限于：氮丙啶、环氧乙烷、硫杂丙环、吗啉、硫代吗啉、吡咯啉、吡咯烷、氮杂环庚烷(azepane)、二氢呋喃、四氢呋喃、二氢噻吩、四氢噻吩、二硫戊环、哌啶、 1,2,3,6-四氢吡啶-1-基、四氢吡喃、吡喃、硫杂环己烷(thiane)、硫杂环己烯(thiine)、哌嗪、高哌嗪、恶嗪、氮杂环癸烷(azecane)、四氢喹啉、全氢异喹、5,6-二氢-4H-1,3-恶嗪-2- 基、2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷、2,5-二氮杂双环[2.2.2]辛烷、3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷、 3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷、6-氧杂-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷、7-氧杂-2,5-二氮杂双环[2.2.2] 辛烷、2,7-二氧杂-5-氮杂双环[2.2.2]辛烷、2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚烷-5-基、2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.2]辛烷、3,6-二氧杂-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷、3-氧杂-6-氮杂双环[3.1.1]庚烷、3- 氧杂-8-氮杂双环[3.2.1]辛-8-基、5,7-二氧杂-2-氮杂双环[2.2.2]辛烷、6,8-二氧杂-3-氮杂双环 [3.2.1]辛烷、6-氧杂-3-氮杂双环[3.1.1]庚烷、8-氧杂-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷-5-基、6-氮杂双环[3.2.1]辛-6-基、8-氮杂双环[3.2.1]辛-8-基、3-氧杂-7,9-二氮杂双环[3.3.1]壬-9-基、9-氧杂-3-氮杂双环[3.3.1]壬-3-基、3-氧杂-9-氮杂双环[3.3.1]壬-9- 基、3,7-二氧杂-9-氮杂双环[3.3.1]壬-9-基、3,4-二氢-2H-1,4-苯并恶嗪-7-基、噻嗪、二噻烷和二氧六环。在另一个实施方案中，杂环包含1或2个氮原子。在进一步的实施方案中，杂环包含1或2个氮原子和3至6个碳原子。在又另一个实施方案中，杂环包含1或2个氮原子、3至6个碳原子和1个氧原子。在还进一步的实施方案中，杂环为5-至8-元的。在还进一步的实施方案中，杂环为5-元的。在还进一步的实施方案中，杂环为6-元的。在还进一步的实施方案中，杂环为8-元的。杂环可以是未经取代的或经一个或多个基团取代的，所述基团包括，不限于：卤素、CN、NO2、C1-C6烷基、OH、C1-C6烷氧基、C1-C6烷氧基-C1-C6烷氧基、C1-C6烷氧基-C1-C6烷氧基-C1-C6烷氧基、C1-C6羟烷基、C3-C6环烷基、含有1-3个氟原子的C1-C6烷基、C3-C6环烷基-C1-C6烷基、杂环基氧基、C1-C6烷基硫、芳基、杂环、杂芳基、C(O)(C1-C6烷基)、C(O)(杂环)、C(O)O(C1-C6烷基)、C(O)NH2、 C(O)NH(C1-C6烷基)、C(O)N(C1-C6烷基)(C1-C6烷基)、SO2(C1-C6烷基)、SO2(C2-C6炔基)、 SO2NH(C1-C6烷基)、SO2(杂环)、NHC(O)(C1-C6烷基)、NHSO2(C1-C6烷基)、N(C1-C6烷基)SO2(C1-C6烷基)、NH2、NH(芳基)、N(C1-C6烷基)(C1-C6烷基)和NHC(O)NH2。
[0055] “烷基氨基”指NH或N基团，基团的氮原子分别连接至1个或2个烷基取代基，其中烷基是任选取代的并在上文定义。烷基氨基通过基团的氮原子键联。在一个实施方案中，烷基氨基至 NH(烷基)。在另一个实施方案中，烷基氨基指 N(烷基)(烷基)，即“二烷基氨基”。在进一步的实施方案中，烷基氨基指 N(C1-C6烷基)(C1-C6烷基)。在还进一步的实施方案中，烷基氨基指 N(烷基)(杂环)。在还进一步的实施方案中，烷基氨基指 N(烷基)(芳基)。在还进一步的实施方案中，烷基氨基指 N(烷基)(杂芳基)。在还进一步的实施方案中，烷基氨基指 N(烷基)(烯基)。当氮原子键合至两个烷基基团，每个烷基基团可独立地选择。在还进一步的实施方案中，氮原子上的两个烷基基团可以与它们连接至的氮连在一起以形成3-至4-元含氮杂环，其中杂环碳原子中的多至2个碳原子可被N(H)、N(C1-C6烷基)、N(芳基)、N(杂芳基)、O、S(O)或S(O)2取代。烷基氨基的实施例包括但不限于N(CH3)2、 N(CH2CH3)(CH3)、N(CH2CH3)2、N(CH2CH2CH3)2、N(CH2CH2CH2CH3)2和N(CH(CH3)2)(CH3)。
[0056] “芳基氨基”指NH或N基团，基团的氮原子分别连接至1或2个芳基取代基，其中芳基是任选取代的并在上文中定义。芳基氨基通过基团中的氮原子键联。在一个实施方案中，芳基氨基指 NH(芳基)。在另一个实施方案中，芳基氨基指 NH(芳基)(芳基)，即“二芳基氨基”。当氮原子键联至两个芳基基团，每个芳基可独立地选择。
[0057] “烷基羰基氨基”指 NHC(O)(烷基)或 N(烷基)C(O)(烷基)，其中烷基基团是独立定义的，并且如上所述是独立地任选取代的。烷基羰基氨基的实例包括但不限于：CH3CONH、 CH3CH2CONH、CH3CH2CH2CONH和CH3CH(CH3)CONH。
[0058] “酯”指通过碳原子键联的 C(O)O(烷基)。烷基按如上所述定义和任选取代。酯的实例包括不限于：C(O)OCH3、C(O)O(CH2CH3)、C(O)O(CH2CH2CH3)和C(O)(O)(CH2CH2CH2CH3)。
[0059] “脲(urea)”指含有 NHC(O)NH 的基团，其中氮原子中的一个键联至烷基或杂芳基基团。烷基或杂芳基按如上所述定义和任选取代。脲的实例包括不限于NHC(O)NHCH3、NHC(O)NHCH2CH3、NHC(O)NHCH2CH2CH3和NHC(O)NHCH2CH2CH2CH3。
[0060] “烷基氨基羰基”指 C(O)NH(烷基)或 C(O)N(烷基)(烷基)，其中烷基基团是独立定义的，并且如上所述是独立地任选取代的。烷基氨基羰基的实例包括但不限于：CH3NHCO、 CH3CH2NHCO、CH3CH2CH2NHCO和CH3CH(CH3)NHCO。
[0061] 注意的是术语“一个”或“一种”指一个/一种或多个/多种。同样的，术语“一个/一种”、“一个/一种或多个/多种”以及“至少一个/一种”在本文中可交换使用。
[0062] 词语“包含(comprise/comprises/comprising)”解释为包括而非排除。词语“由…组成 (consist/consisting)”及其变化形式解释为排除而非包括。
[0063] 除另有说明，否则如本文所使用的，术语“约”意指，从给定参考10％的变化。
[0066] 如本文所使用的，术语“疾病”、“障碍”和“病状”可交换使用，以表明个体中的异常状态。
[0068] 本文所描述的药物组合物包括式(I)的化合物(其在本文中使用，包括式(II-IV)的化合物，任选地和其他药学惰性或非活性成分)。在一个实施方案中，药学惰性或非活性成分是一种或多种药学可接受的载体或赋形剂。同样预期的是将式(I)的化合物与一种或多种治疗剂组合，所述治疗剂即如下所述的活性成分。在进一步的实施方案中，式(I)的化合物与一种或多种惰性/非活性成分和一种或多种治疗剂组合。
[0069] 本发明的药物组合物包含例如在个体疼痛治疗中，对于调控P2X3或P2X2/3有效的量的式(I)的化合物。特别地，式(I)的化合物达到治疗效果的剂量将取决于如下因素：例如制剂、药物的药理学功效、患者的年龄、重量和性别、治疗的病症、患者症状的严重程度、具体的式(I)的化合物、递送途径和患者的响应模式。还预期的是式(I)的化合物的治疗和剂量可以单位剂量形式使用，本领域普通技术人员将相应地调剂单位剂量形式以反映相对活性水平。对于欲采用的特定剂量(以及每天给药的次数)的确定在普通医师的判断内，并可对特定情况由剂量滴定加以改变以产生治疗效果。此外，本领域普通技术人员能够计算由于组合物组分或稀释的改变带来的组合物中的任意一种化合物的有效量的任意改变。在一个实施方案中，组合物可被稀释2-倍。在另一个实施方案中，组合物可被稀释4-倍。在进一步的实施方案中，组合物可被稀释8-倍。
[0070] 在一个实施方案中，治疗有效的量是约0.0001％至约25％w/v(即,制剂每mL药物的重量)。在另一个实施方案中，治疗有效的量是小于约20％w/v、约15％w/v、约10％w/v、约5％w/v或约1％w/v。在另一个实施方案中，治疗有效的量是约0.0001％至约10％w/v。在进一步的实施方案中，治疗有效的量是约0.005至约5％w/v。在还进一步的实施方案中，治疗有效的量是约0.01至约5％w/v。在还进一步的实施方案中，治疗有效的量是约0.01％ w/v、约0.05％w/v、约0.1％w/v、约0.2％w/v、约0.3％w/v、约0.4％w/v、约0.5％w/v、约0.6％w/v、约0.7％w/v、约0.8％w/v、约0.9％w/v、约1％w/v、约2％w/v、约3％w/v、约4％w/v或约5％w/v。在一个实施方案中，式(I)的化合物的治疗有效的量是约0.2％w/v。在另一个实施方案中，治疗有效的量是约0.5％w/v。
[0071] 因此，式(I)的化合物的治疗有效的量可以是基于70kg哺乳动物(例如人)个体，每剂约1mg至约1000mg。在另一个实施方案中，治疗有效的量为每剂约2mg至约250mg。在进一步的实施方案中，治疗有效的量为约5mg至约100mg。在又进一步的实施方案中，治疗有效的量为约25mg至50mg、约20mg、约15mg、约10mg、约5mg、约1mg、约 0.1mg、约0.01mg、约0.001mg。
[0072] 治疗有效的量可按定期安排提供(即，基于每天、每周、每月或每年)，或通过变化给药天数、周数、月数等按照不定期安排提供。可选择地，施用的治疗有效的量可变化。在一个实施方案中，首次剂量的治疗有效的量高于一种或多种后续剂量的治疗有效的量。在另一个实施方案中，首次剂量的治疗有效的量低于一种或多种后续剂量的治疗有效的量。可在各种时期内施用相等的剂量，所述各种时期包括但不限于：约每2小时、约每6小时、约每8小时、约每12小时、约每24小时、约每36小时、约每48小时、约每72小时、约每周、约每两周、约每三周、约每个月、约每2个月、约每3个月和约每6个月。对应于完整疗程的剂量的数目和频率将根据健康保健从业者的判断确定。本文所述的治疗有效的量指在给定时期内给药的总量，即，若施用多于一种式(I)的化合物，则治疗有效的量对应给药总量。
[0073] 式(I)的化合物可由任意途径给药，其中考虑已选择的任意途径所针对的特定病状。式(I)的化合物可按以下方式递送：经口、通过注射、吸入(包括经口、鼻内和气管内)、经眼、经皮(通过简单的被动扩散的制剂，或通过使用，例如离子电渗疗法、微针产生的微孔、射频消融等促进递送)、血管内、皮肤、皮下、肌内、舌下、颅内、硬膜外、经直肠、经膀胱和经阴道等。
[0074] 在一个实施方案中，可通过注射(包括显微注射、经皮或局部)施用式(I)的化合物。在一个实施方案中，式(I)的化合物的量为制备的约0.05％w/w至约10％w/w，取决于给药途径。在一个实施方案中，式(I)的化合物以约0.1％w/w至约3％w/w的浓度存在。这些组合物也可含有稳定化剂、抗菌剂、缓冲剂，并可在不同剂量单元的安瓿或瓶中制造。当用于眼时，式(I)的化合物的量可以为约0.05％w/w至约2.5％w/w。用于注射或输注的组合物可以制备为水性悬浮液或溶液。
[0075] 当用于真皮麻醉时，式(I)的化合物的量可以为约0.1％w/w至约10％w/w。但用于非眼、局部(例如口服，经鼻，直肠，尿道，阴道)给药时，式(I)的化合物的量可以为约0.5％w/w至约5％w/w。当用于注射时，式(I)的化合物的量可以为约0.25％w/w至约 3％w/w用于注射。当用于输注时(例如用于硬膜外、脊椎麻醉或局部麻醉)，式(I)的化合物的量可以为约0.1％w/w至约3％w/w。
[0076] 在一个实施方案中，可向眼局部施用例如为溶液、悬浮液或软膏的式(I)的化合物。可使用的眼部配伍的载体的实例包括，不限于，水溶液，例如含有眼部配伍防腐剂、表面活性剂，缓冲剂，和粘度调节剂的盐溶液、油溶液或软膏。这些组合物也可含有稳定剂、抗菌剂，并可制造为不同的适用于眼给药剂量单位。也可使用可溶的或不溶的药物惰性物质。
[0077] 在另一个实施方案中，可通过注射施用式(I)的化合物。用于注射或输注的溶液可被制备为水溶液。在一个实施方案中，式(I)的化合物以约0.1％w/w至约3％w/w的浓度存在。这些溶液还可含有稳定化剂、抗菌剂、缓冲剂，并可被制造于不同剂量单位的安瓿或瓶中。
[0078] 在进一步的实施方案中，可通过直肠施用式(I)的化合物。用于直肠给药的剂量单位可以以药膏或栓剂的形式制备，所述药膏或栓剂含有与中性脂肪基质一起于混合物中的式 (I)的化合物，或他们可以明胶-直肠胶囊的形式制备，所述胶囊中含有与例如植物油或石蜡油一起于混合物中的式(I)的化合物。含有至少一种式(I)的化合物的药膏、栓剂或乳膏对于治疗痔疮是有用的。
[0079] 在又另一个实施方案中，式(I)的化合物可经皮肤给药。已知各种经皮递送系统。为了在这些系统中使用，式(I)的化合物可以与各种赋形剂混合，所述赋形剂可包括例如， pH调节剂、防腐剂和/或渗透增强剂以形成溶液、药膏、乳膏、洗液或凝胶。这样的组分可构成经皮递送体系的成分(“贴剂”等。)。
[0080] 可选择允许或帮助本发明的化合物穿过真皮层并到达目标区域(例如肌肉组织或神经周围间隙)的经皮递送系统。这样的系统可包括具有皮肤渗透增强剂的制剂。皮肤渗透增强剂的实例包括物理增强剂(超声、离子电渗疗法、电穿孔、磁导入、微针)、囊、微粒系统(脂质体、囊泡、传递体、微乳剂、固体脂质纳米粒子)，和化学增强剂(亚砜、氮酮、二醇、链烷醇、萜烯等)。化学增强剂的其他实例包括，例如，丙二醇、聚乙二醇、异丙醇、乙醇、油酸、N-甲基吡咯烷酮，其增加皮肤对化合物的渗透性，并允许化合物穿过皮肤渗透至更深的组织中。对于其他化学增强剂的实例见，Sagie&Kohane“,Prolonged Sensory Selective Nerve Blockade”,PNAS,2010(8):3740 3745,2010,其通过引文的形式并入本文。
[0081] 作为进一步的实施方案，式(I)的化合物可通过直接滴注至膀胱和/或膀胱上皮滴注。在一个实施方案中，配制含有式(I)的化合物的药物组合物和一种或多种载体或赋形剂用于滴注。例如，式(I)的化合物可作为溶液滴注。在进一步的实例中，滴注的化合物可作为缓释剂置入膀胱或膀胱上皮中。对于该目的可使用各种缓释剂，其包括，不限于：溶液、悬浮液、凝胶或其它含有贮液囊的固体剂型、药物包覆材料、药物浸渍材料、脂质体药物制剂等。
[0082] 含有式(I)化合物的药物组合物可单独调配或与一或多种医药载体及/或赋形剂一起调配以用于给药。药物载体的量系根据式(I)化合物的溶解性及化学性质、所选给药途径及标准药理学规范加以确定。药学载体可为固体或液体且可包括固体载体/基质与液体载体/ 基质两者。已知多种适合的液体载体并且可以由本领域技术人员容易地选择。这样的载体可包括例如二甲基亚砜(DMSO)、生理盐水、缓冲生理盐水、环糊精、羟丙基环糊精(HPβCD)、正十二基-β-D-麦芽糖苷(DDM)及其混合物。类似地，本领域普通技术人员已知多种固体 (刚性或可挠性)载体及赋形剂。这样的载体还设计为以便在注射入膀胱中时经受状态转换(例如液体至凝胶、液体至固体、凝胶至固体)；本领域普通技术人员已知这样的材料。这样的载体还可包含例如包含热弹性聚合物的膜，其限定含有固体或液体组合物的贮液囊。这样的载体亦可包含热弹性聚合物基质，其中包埋有含有式(I)的化合物的组合物。
[0083] 式(I)的化合物还可连同其他膜稳定剂(局部麻醉剂)一起施用，例如以形成低共熔混合物。
[0084] 尽管式(I)的化合物可单独施用，但其也可在一或多种生理兼容性药学载体的存在下施用。载体可呈干燥或液体形式且必须为药学上可接受的。液体药物组合物可为无菌溶液或悬浮液。当利用液体载体时，它们可以为无菌液体。液体载体可被用于制备溶液、悬浮液、乳液、糖浆及酏剂。在一个实施例中，将式(I)的化合物溶解于液体载体中。在另一实施例中，将式(I)的化合物悬浮于液体载体中。制剂领域普通技术人员将能够根据给药途径选择适合的液体载体。或者，式(I)的化合物可调配于固体载体中。在一个实施例中，组合物可被压成单位剂型，即片剂或囊片。在另一实施例中，可将组合物加入单位剂型，即胶囊。在进一步的实施方案中，组合物可经配制作为粉末形式给药。固体载体可执行多种功能，即可执行两种或两种以上下述赋形剂的功能。举例而言，固体载体也可充当调味剂、润滑剂、增溶剂、悬浮剂、填充剂、助流剂、压制助剂、黏合剂、崩解剂或包封材料。在一个实施方案中，固体载体充当润滑剂、增溶剂、悬浮剂、黏合剂、崩解剂或包封材料。在另一实施方案中，载体包含限定至少含有至少一种呈固体或液体组合物形式的式(I)的化合物的贮液囊的热弹性聚合物。在另一实施方案中，这样的载体包含热弹性聚合物基质，在其中包埋了本文所述的组合物。
[0086] 在一个实施方案中，本文描述的组合物任选地含有一种或多种载体和一种或多种赋形剂，和一种或多种式(I)的化合物。适当的赋形剂的实例包括不限于：表面活性剂、佐剂、抗氧化剂、黏合剂、缓冲剂、包覆剂、着色剂、压制助剂、稀释剂、崩解剂、乳化剂(例如聚氧乙烯脂肪酸酯)、润肤剂、包封材料、填充剂、调味剂、助流剂、粒化剂、润滑剂、金属螯合剂、渗透调控剂、pH值调节剂(例如氢氧化钠)、防腐剂、增溶剂、吸附剂、稳定剂、甜味剂(例如糖精)、表面活性剂、悬浮剂、糖浆、增稠剂(如聚羧乙烯 (carboxypolymethylene)或羟丙基甲基纤维素)、渗透增强剂(例如羟基聚乙氧基十二烷、 DMSO、DMAC、DDM等)或黏度调控剂(例如增加黏度的聚合物)。参见例如“Handbook of Pharmaceutical Excipients”，第5版，Rowe，Sheskey及Owen编，APhA Publications(Washington， DC)，2005年12月14日中所述的赋形剂，该手册通过引文的形式并入本文。
[0088] 在另一实施方案中，组合物可以作为气溶胶使用，即，口服或鼻内。对于该施用途径，组合物被配制用于与气体或液化推进剂一起在加压气溶胶容器中使用，所述推进剂例如二氯二氟甲烷、二氧化碳、氮、丙烷等。还提供了以一次或多次驱动的定量剂的递送。
[0089] 在另一实施方案中，组合物可以通过缓和释放递送装置施用。如本文使用的，“缓和释放”指例如在至少约8小时(例如，延长的递送)到至少约12小时(例如，持续递送)的时段受控的式(I)的化合物的递送。这种装置还可以允许立即释放(例如，在低于约1小时或小于约2小时内达到治疗水平)。本领域普通技术人员已知适合的缓和释放递送装置。为了在这种缓和释放递送装置中使用，如本文所述配制式(I)的化合物。
[0090] 合适的缓和释放递送装置包括药物洗脱植入体。这样的植入物可包含热弹性聚合物基质，例如二氧化硅或乙烯乙烯基醋酸基质，其中包埋了一种或者多种式(I)的化合物，以及任选一种或多种赋形剂。参见，例如US专利第7,736,665号和美国专利公开第 2011/0280922号，其公开的内容通过引文的形式合并入本文。其他药物洗脱植入物可包含“渗透泵”或其他机械装置，一旦该机械装置被植入受试者中，即在装置内建立渗透压，通过该渗透压，包含于该装置内的包含一种或多种式(I)的化合物(任选以及一种或多种赋形剂)的溶液(例如通过植入物壁或者通过一个或多个孔)被挤出。参见例如美国专利第 5,035,891和6,464,688号，其公开的内容通过引文的形式合并入本文。
[0091] 其他药物洗脱植入物可包含水凝胶，例如聚甲基丙烯酸酯基聚合物(例如美国专利第 5,292,515号和第5,266,325号，其公开的内容通过引文的形式并人本文中)；或热弹性聚合物，例如聚氨酯(例如美国专利第7,858,110号和第7,842,303号，其公开的内容通过引文的形式并人本文中)，其限定含有包含一中或多种式(I)的化合物，以及任选一种或多种赋形剂的固体或液体组合物的贮液囊。其他药物洗脱植入物可包含生物可降解或生物可侵蚀聚合物及至少一种或多种式(I)的化合物任选一种或多种赋形剂。参见例如美国专利第 4,906,474号和5,633,002号，其公开的内容通过引文的形式并人本文中。
[0092] 也可用通过插入至膀胱或皮肤的内窥镜使用的装置通过将包含一种或多种这样的化合物的组合物注射至膀胱组织中(例如至尿道上皮或固有肌层(muscularis propria)中)实现式(I)化合物的缓和释放。例如，如美国专利公开第US-2011/0046600中所述，其所披露的内容通过引文的方式并入，可通过针或无针装置将一种或多种式(I)化合物注射至膀胱组织。适当的无针注射装置包括JetTouchTM平台(American Medical Systems；Minnetonka, Minnesota)。注射化合物可形成储藏处(depot)，在某些实施方案中，一种或多种式(I) 化合物可被封装至生物可降解或生物可侵蚀聚合物中，例如，如美国专利第5,
480,656号和第6,036,976号所述，其公开的内容通过引文的形式并入本文。
480,656号和第6,036,976号所述，其公开的内容通过引文的形式并入本文。
[0093] 也可通过滴注包含一种或多种式(I)化合物和例如一旦滴注如膀胱或当与膀胱尿道上皮接触后即凝固或凝胶化以涂布至少一部分膀胱壁的材料的组合物，实现式(I)化合物的缓和释放。可将一种或多种式(I)的化合物从固化或胶化的材料中洗提。参见，例如美国专利第6,894,071号、第5,575,815号和第6,039,967号，其公开的内容通过引文的形式并入本文。
[0094] 在另一个实施方案中，可以透皮施用组合物，即，通过使用药物洗脱贴片。在一个实施方案中，贴片是“离子电渗”透皮贴片，其中使用简单或更复杂的(例如微处理器控制的) (例如使用车载电池)电流，递送一种或多种药物。在另一个实施方案中，贴片是“微针”透皮贴片，其包含用本发明药物组合物涂覆或者含有(以可溶或不可溶的形式的)本发明药物组合物的微针。参见例如美国专利第7,798,987号和第7,537,795号，其公开内容通过引文的形式并入本文。微针可以自身是可溶或不可溶的，参见，例如Sullivan，“Dissolving Polymer Microneedle Patches for Influenza Vaccination”，Nature Medicine，16:915 920(2010 年7月18日在线出版)和Lee，“Dissolving Microneedle Patch for
Transdermal Delivery of Human Growth Hormone”，Small,7(4):531 539(2011年1月4日在线出版)中描述的“微针”技术，其通过引文的形式并入本文。其他适当的透皮递送系统包括Sintov，“Radiofrequency-Driven Skin Microchanneling as a New Way for Electrically Assisted Transdermal Delivery of Hydrophilic Drugs”，Controlled Release 89:311-320(2003)和US专利第7,558,625号中描述的射频消融系统，其公开的内容通过引文的形式并入本文。
Transdermal Delivery of Human Growth Hormone”，Small,7(4):531 539(2011年1月4日在线出版)中描述的“微针”技术，其通过引文的形式并入本文。其他适当的透皮递送系统包括Sintov，“Radiofrequency-Driven Skin Microchanneling as a New Way for Electrically Assisted Transdermal Delivery of Hydrophilic Drugs”，Controlled Release 89:311-320(2003)和US专利第7,558,625号中描述的射频消融系统，其公开的内容通过引文的形式并入本文。
[0095] 用于施用式(I)化合物的透皮贴片的其他实例包括美国专利第5,411,738和5,827,528 号以及Prausnitz与Langer，“Transdermal drug delivery”，Nature Biotechnology，26(11): 1261-1268，2006年11月中描述的那些，通过引文的形式并入本文。在一个实施方案中，通过适当的粘合剂将贴片应用至皮肤上，其在原位保持至少一小时。在进一步的实施方案中，贴片在原位保持约1小时，并且每周更换，持续总计约2或约3小时的佩戴时间。在另一实施方案中，贴片在原位保持约2小时。在进一步的实施方案中，贴片在原位保持约 3小时。在仍另一个实施方案中，贴片在原位保持约4小时。在仍另一个实施方案中，贴片在原位保持更长或更短的时段。
[0096] 还考虑施用式(I)化合物与其他药物或治疗剂。在一个实施方案中，式(I)化合物与其他药剂或治疗剂组合在单一组合物中。在其他实施方案中，式(I)化合物可以与其他式 (I)化合物或下文描述的其他药物或治疗剂分立的一种或多种制剂施用。
[0097] 在一个实施方案中，当与TRPV1受体活化剂组合时，本发明的化合物可用于调控P2X3或P2X2/3(例如治疗疼痛)。本文所使用的术语“TRPV1受体活化剂”指活化疼痛感受器或痒觉感受器上的TRPV1受体，并允许至少一种电压门控离子(例如钠或钙)通道抑制剂进入的任何试剂或刺激物。在一个实施方案中，TRPVl受体活化剂包括但不限于辣椒素、二氢辣椒素和降二氢辣椒素、利多卡因、阿替卡因、普鲁卡因、丁卡因、甲哌卡因(mepivicaine)、布比卡因、丁香酚、樟脑、克霉唑、阿瓦尼(arvanil)(N-花生四烯酸香兰素)、大麻素、 2-氨基乙氧基二苯基硼酸酯(2APB)、AM404、树脂毒素、佛波醇12-苯基乙酸酯13-乙酸酯20-高香草酸酯(PPAHV)、奥伐尼(NE19550)、OLDA(N-油酰多巴胺)、N-花生酰基多巴胺(NADA)，6'-碘代树脂毒素(6'IRTX)、氯8N-酰基乙醇胺、脂肪氧合酶衍生物(例如12-过氧化氢二十碳四烯酸)、抑制剂半胱氨酸结(ICK)肽(香草毒素)、MSKl 95(N[2-(3,4- 二甲基苄基)-3-(新戊酰基氧基)丙基]-2-[4-(2-氨基乙氧基)-3-甲氧基苄基]乙酰胺)、JYL79(N [2-(3,4-二甲基苄基)-3-(新戊酰基氧基)丙基]-N'-(4-羟基-3-甲氧基苄基)硫脲)、羟基-α-山椒醇 (sanshool)、2-氨基乙氧基二苯基硼酸酯、10-姜烯酚(shogaol)、油酰基姜辣素、油酰基姜烯酚、SU200(N-(4-叔丁基苄基)-N'-(4-羟基-3-甲氧基苄基)硫脲)香草壬酰胺和四氢异喹啉的脂肪酰胺。在另一个实施方案中，TRPVl受体活化剂是利多卡因、安搏律定(aprindine)、苯佐卡因、布他卡因、可卡因、二丁卡因、恩卡尼(encainide)、美西律、奥昔卡因(羟乙卡因)、丙胺卡因、丙美卡因、普鲁卡因胺、正乙酰基普鲁卡因胺、氯普鲁卡因(nesacaine、 nescaine)、达克罗宁、依替卡因、左布比卡因、罗哌卡因、环美卡因、二甲卡因(拉罗卡因)、丙氧卡因、三甲卡因和氨丁卡因(sympocaine)。在进一步的实施方案中，TRPV1受体活化剂是利多卡因。在另一个实施方案中，TRPV1活化剂可以是清洁剂或表面活性剂，其实例可见于通常使用的卫生制品例如肥皂和洗发水(例如月桂基磺酸钠)中。参见，Lilja，“Surfactant Induced TRPV1 activity-A Novel Mechanism for Eye
Irritation？”Technological Sciences，99(1):174 180,2007，其通过引文的形式并入本文中。在另一个实施方案中，TRPV1 受体活化剂是(被认为活化TRPV1受体的)热或炎症。
Irritation？”Technological Sciences，99(1):174 180,2007，其通过引文的形式并入本文中。在另一个实施方案中，TRPV1 受体活化剂是(被认为活化TRPV1受体的)热或炎症。
[0098] 在一个实施方案中，TRPV1受体活化剂的治疗有效量为约0.0001％至约10％w/v。本领域普通技术人员将易于理解所述的治疗有效量是基于TRPV1受体活化剂的游离碱。通过使用该信息及本领域技术，将能够确定用于本文的组合物和方法的对应的TRPV1受体活化剂盐的量。在另一个实施方案中，治疗有效的量小于约10％w/v、约9％w/v、约8％w/v、约
7％w/v、约6％w/v、约5％w/v、约4％w/v、约3％w/v、约2％w/v或约1％w/v。在另一个实施方案中，治疗有效的量为约0.1％至约5％w/v。在进一步的实施方案中，治疗有效的量为约0.5至约3％w/v。在又另一个实施方案中，治疗有效的量为约0.5至约2％w/v。在另一个实施方案中，治疗有效的量的TRPV1受体活化剂为约2％w/v。在另一个实施方案中，治疗有效的量为约1％w/v。在进一步的实施方案中，治疗有效的量为约0.5％w/v。
7％w/v、约6％w/v、约5％w/v、约4％w/v、约3％w/v、约2％w/v或约1％w/v。在另一个实施方案中，治疗有效的量为约0.1％至约5％w/v。在进一步的实施方案中，治疗有效的量为约0.5至约3％w/v。在又另一个实施方案中，治疗有效的量为约0.5至约2％w/v。在另一个实施方案中，治疗有效的量的TRPV1受体活化剂为约2％w/v。在另一个实施方案中，治疗有效的量为约1％w/v。在进一步的实施方案中，治疗有效的量为约0.5％w/v。
[0099] 因此，基于70kg哺乳动物受试者，TRPV1受体活化剂的治疗有效量可为约0.001mg 至约100mg每剂。在另一个实施方案中，治疗有效量为约0.1mg至约25mg每剂。在进一步的实施方案中，治疗有效量为约1mg至约5mg。在又进一步的实施方案中，治疗有效量为约0.1mg、约0.5mg、约1mg、约2mg、约3mg、约4mg、约5mg、约6mg、约7mg或约8mg。
[0100] 本文还提供含有式(I)化合物与利多卡因的组合物。在一个实施方案中，组合物含有约0.01％至约1％w/v的式(I)化合物和约0.1％至约5％w/v的利多卡因。在另一个实施方案中，组合物含有约0.1％至约0.7％w/v的式(I)化合物和约1％至约3％w/v的利多卡因。在进一步的实施方案，组合物含有约0.2％至约0.5％w/v的式(I)化合物和约1％至约3％w/v 的利多卡因。在又另一个实施方案中，组合物含有约0.2％至约0.5％w/v的式(I)化合物和约2％w/v的利多卡因。在还另一个实施方案，组合物含有约0.2％w/v的式(I)化合物和约2％w/v的利多卡因。在另一个实施方案，组合物含有约0.5％w/v的式(I)化合物和约2％w/v的利多卡因。如上所讨论的，这些组合物可进一步稀释。在一个实施方案中，这些组合物可稀释2倍。在另一个实施方案中，这些组合物可稀释4倍。
[0101] 还考虑用于下述药物组合物和方法的是电压门控离子通道抑制剂。在一个实施方案中，电压门控离子通道是钠或钙离子通道。在进一步的实施方案中，电压门控纳通道抑制剂包括但不限于QX-314、N-甲基-普鲁卡因(QX-222)、N-辛基-胍、9-氨基吖啶和巴夫龙 (pancuronium)。在另一个实施方案中，电压门控钙通道抑制剂包括但不限于D-890(季甲氧基维拉帕米)和CERMl1888(季苄普地尔)。在进一步的实施方案中，电压门控离子通道抑制剂可以与式(I)化合物组合，所述电压门控离子通道抑制剂例如利鲁唑、美西律、苯妥英、卡马西平、普鲁卡因、妥卡尼、丙胺卡因、双异丙吡胺、苄环烷、奎尼定、溴苄胺、利法利嗪、拉莫三嗪、氟桂利嗪、阿替卡因、布比卡因、甲哌卡因、氟司必林、奥芬那君、芬苯扎胺、苄普地尔、呱咪清、五氟利多、氟司必林、丙哌维林、丙吡胺、美沙酮、托特罗定、曲地铵盐、苄吡二胺、吡拉明、溴苯那敏、氯苯那敏、右氯苯那敏、卡比沙明、醋酸左旋乙酰美沙酮、戈洛帕米、维拉帕米、地伐帕米、噻帕米、依莫帕米、达克罗宁、普莫卡因、拉莫三嗦、米贝地尔、加巴喷丁、氨氯吡嗪脒、地尔硫、硝苯地平、尼莫地平、尼群地平、可卡因、美西律、普罗帕酮、奎尼定、奥昔卡因、阿替卡因、利鲁唑、苄环烷、利法利嗪和士的宁。
[0102] 电压门控离子通道的膜渗透抑制剂还可以与式(I)化合物组合用于本文描述的组合物、组合或方法。在一个实施方案中，电压门控离子通道的膜渗透抑制剂包括但不限于可卡因、卡马西平、丙吡胺、拉莫三嗪、普鲁卡因胺、苯妥英、奥卡因平、托吡酯、唑尼沙胺、丁卡因、氨基苯甲酸乙酯、丙胺卡因、磷酸丙吡胺、乙酸哌氟酰胺、美西律、普罗帕酮、葡糖酸奎尼定、聚半乳糖醛酸奎尼定、氯普鲁卡因、狄步卡因、达克罗宁、甲哌卡因、普莫卡因、普鲁卡因、丁卡因、奥昔卡因、丙胺卡因、左布比卡因、布比卡因、利多卡因、吗拉西嗪、妥卡尼、丙美卡因、罗哌卡因、硫酸奎尼定、恩卡尼、罗哌卡因、依替卡因、吗拉西嗪、奎尼定、恩卡尼、氟卡尼、妥卡尼、磷苯妥英、氯普鲁卡因、达克罗宁、L-(-)-l- 丁基-2',6'-哌啶甲酰胺和普莫卡因。
[0103] 此外，可用于治疗疼痛的一种或多种试剂，即镇痛剂，可以与本发明组合结合用于本文描述的方法、组合物和试剂盒。这种试剂包括但不限于非甾体抗炎药(NSAID)、阿片类物质、三环类抗抑郁剂、胺转运蛋白抑制剂和抗惊厥剂(例如加巴喷丁类)。
[0104] 当以注射溶液使用时，式(I)化合物可以与血管收缩剂(例如肾上腺素或加压素)一起施用。
[0105] 当用于输注或作为区域镇痛剂或止痒剂使用时，式(I)化合物可以与葡萄糖或右旋糖组合。
[0106] 此外，式(I)化合物可以与增稠剂组合以形成胶状物，或者还可以含有穿透增强剂，用于局部或皮肤应用，例如泌尿生殖系统局部过程。
[0107] 用于口和咽局部麻醉的喷雾剂可以含有式(I)化合物、糖精和/或醇。
[0108] 式(I)化合物可以被配制为软膏，用于施用至可及的黏膜。
[0109] 本文还提供包含所述的式(I)化合物或组合物的药物制剂的方案、试剂盒或包装。试剂盒可以被组织以指示在每个指定时间服用的单制剂或制剂组合。
[0110] 试剂盒可进一步包含配制用于递送途径的式(I)化合物的包装或容器。适当地，试剂盒包含剂量说明书和有关式(I)化合物的插页。任选地，试剂盒还可以进一步包含监测产品局部或循环水平的说明书和进行这种分析的材料，包括例如试剂、孔板、容器、标记物或标签等。这种试剂盒容易以适合治疗适应症的方式包装。例如，试剂盒还可以包含贴片、喷雾泵或其他递送装置的使用说明书。考虑适应症和递送途径，这样的试剂盒中包括的其他适当组成部分对于本领域技术人员是显而易见的，且可含有润滑剂、防腐溶液及局部麻醉剂以帮助置放传递装置。
[0111] 本文描述的式(I)化合物或组合物可以是单剂或用于连续或周期不连续施用。对于连续施用，包装或试剂盒可以包括每种剂量单位(例如，溶液、洗剂、片剂、丸剂、药物洗脱单元/贴片或上述或药物递送中使用的其他单位)的式(I)化合物和任选用于少于每天、每天、每周或每月，持续预定时长或按照处方施用的说明书。当式(I)化合物以不连续方式周期递送时，包装或试剂盒可以包括在不递送式(I)化合物的时期的安慰剂。当随时间改变组合物浓度、组合物组分浓度或组合物内式(I)化合物或剂的相对比率时，包装或试剂盒可以包含提供所需变化的一系列剂量单位。
[0112] 本领域己知许多包装或试剂盒用于分配药剂以周期口服使用。在一个实施方案中，包装具有每个时期的指示器。在另一个实施方案中，包装是箔或泡罩包装、标记的安瓿、小瓶或瓶。
[0113] 试剂盒的包装工具本身可以是适合施用的，例如吸入器、注射器、吸液管、滴管、导管、膀胱镜、套管针、套管、压力弹射装置或其他这样的设备，制剂可以从中应用至身体的受影响区域，例如肺、注射入受试者，递送至膀胱组织或者甚至应用至试剂的其他组分并与之混合。
[0114] 这些试剂盒的一种或多种组分还可以干燥或冻干形式提供。当试剂或组分以干燥形式提供时，一般通过添加适当溶剂来重构。设想溶剂还可以提供于另一包装中。
[0115] 试剂盒还可包括用于商业销售的密封包含小瓶或其他适当包装工具的工具，例如在其中保持小瓶的注射或吹塑成型的塑料容器。不论包装的数目和类型和如上讨论的，试剂盒还可以包括单独的仪器或与单独的仪器一起包装，所述单独的仪器用于辅助组合物在动物身体内的注射/施用或布置。这种仪器可以是吸入器、注射器、吸液管、钳、量勺、滴管、导管、膀胱镜、套管针、套管、压力弹射装置或任何这样的医疗批准的递送工具。
[0116] 在一个实施方案中，提供试剂盒并包含式(I)化合物。式(I)化合物可以存在或不存在一种或多种上述载体或赋形剂。试剂盒可以任选包含用于向具有疼痛的受试者施用式(I) 化合物的说明书。
[0117] 在进一步的实施方案中，提供试剂盒并包含第二剂量单位的式(I)化合物和第三剂量单位的一种或多种上述载体或赋形剂。试剂盒可以任选包含用于向具有疼痛的受试者施用式(I)化合物的说明书。
[0118] 式(I)化合物也可在施用额外的治疗剂或非药物相关治疗之前、与之同时或在其之后施用。在一个实施例中，式(I)化合物可连同神经刺激，例如经皮电神经刺激(TENS) 或骶神经刺激一起使用。
[0119] 本文所述的化合物在调控或者调节与P2X3和/或P2X2/3通路相关的病症上是有用的。如本文所使用的术语“调控”、“调节”或其变化可替换使用，并指式(I)化合物抑制或降低生物通路一种或多种组分的活性的能力。在一个实施方案中，“调控”指P2X3活性的抑制。在另一个实施方案中，“调控”指P2X2/3活性的抑制。在进一步的实施方案中，调控指P2X3和P2X2/3活性的双抑制。
[0120] 因此，本发明的方法、组合物和试剂盒可被用于治疗由多种病症导致的疼痛。本文所使用的术语“疼痛”包括所有类型的疼痛。在一个实施方案中，疼痛可以是急性的或慢性的。在另一个实施方案中，疼痛可以是感受伤害性、功能障碍性、特发性、神经性、躯体性、中枢性、内脏性、炎性和/或过程性的。例如，疼痛可以来自偏头痛、背痛、颈痛、妇科疼痛、产前疼痛或产痛、骨痛、脑卒中后疼痛、手术后疼痛或过程性疼痛、疱疹后神经痛、镰状细胞危象、间质性膀肮炎、泌尿疼痛(例如尿道炎)、牙痛、头痛、来自创伤或医疗过程的疼痛，所述医疗过程例如手术(例如囊肿切除术或者髋、膝盖或其他关节置换)、缝合、处置骨折、活检等。疼痛还可以在癌症患者中发生，其可能是由于多种原因导致，例如炎症、神经压迫和由于肿瘤侵入和肿瘤转移入骨或其他组织导致的组织膨胀引起的机械力。在一个实施方案中，癌症是骨癌。
[0121] 在一个实施方案中，疼痛是神经性疼痛，例如疱疹后神经痛。在另一个实施方案中，疼痛是炎性疼痛。在另一个实施方案中，疼痛是感受伤害性疼痛。在另一个实施方案中，疼痛是过程性疼痛。在另一个实施方案中，疼痛由食道癌、结肠炎、膀胱炎、肠易激综合征、结肠炎或特发性神经病引起。在又另一个实施方案中，疼痛由气道，膀胱或内脏器官功能障碍引起。
[0122] “躯体疼痛”包括来自骨、关节、肌肉、皮肤或结缔组织的疼痛。
[0123] “中枢疼痛”包括由于脑创伤、脑卒中或脊柱损伤引起的疼痛。
[0124] “内脏疼痛”包括来自内脏器官的疼痛，所述内脏器官例如呼吸道或胃肠道和胰腺、尿道和生殖器。在一个实施方案中，内脏疼痛源自器官囊的肿瘤涉及。在另一个实施方案中，内脏疼痛源自中空内脏的阻塞。在另一个实施方案中，内脏疼痛源自膀肮炎或反流性食管炎的炎症。
[0125] “特发性疼痛”指没有潜在原因的疼痛，或者指由未确诊的病症引起的疼痛。
[0126] “功能障碍性疼痛”指在不存在有害剌激、组织损伤或神经系统损伤下出现的疼痛。在一个实施方案中，功能障碍性疼痛源自风湿性病症，例如关节炎和纤维肌痛综合症、紧张型头痛、肠易激症和红斑性肢痛病。
[0127] “感受伤害性疼痛”包括由威胁或实际损伤身体组织的伤害性剌激引起的疼痛。在一个实施方案中，感受伤害性疼痛源自切伤、撞伤、骨折、挤压伤、烧伤、外伤、手术、分娩、扭伤、撞击、注射、牙科过程、皮肤活检或梗阻。在另一个实施方案中，感受伤害性疼痛位于皮肤、肌肉骨骼系统或内部器官。
[0128] “神经性疼痛”是源于由周围或中枢系统损伤造成的这些系统感觉输入的异常加工的疼痛。在一个实施方案中，神经性疼痛是慢性和非恶性的。在一个实施方案中，神经性疼痛是由于外伤、手术、椎间盘突出、脊髓损伤、糖尿病、带状疱疹(shingles)感染、HIV/AIDS、晚期癌症、截肢(例如乳房切除术)、腕管综合征、慢性酗酒、暴露于放射和神经毒性治疗剂(例如某些抗HIV和化疗药物)的非预期副作用。在另一实施方案中，神经性疼痛可以描述为“烧灼的”、“电击的”、“麻刺”或“刺痛”。
[0129] 短语“炎性疼痛”包括源自由许多因素引起的炎症的疼痛。在一个实施方案中，炎性疼痛的发生源于组织损伤或炎症。在另一个实施方案中，炎性疼痛源于于损伤(包括关节、肌肉和脏损伤)、外科手术、感染和/或关节炎。
[0130] “过程疼痛"包括指源自医疗过程的疼痛。医疗过程可以包括任何类型的医疗、牙科或手术过程。在一个实施方案中，过程疼痛是手术后的。在另一个实施方案中，疼痛与以下有关：注射、脓肿引流、手术、皮肤病、牙科过程、眼科过程、关节镜和其他医疗仪器的使用和/或整容手术。
[0131] “偏头痛”是归因于神经支配大脑的脑膜的感觉纤维的激活的头痛。
[0132] 术语“治疗”(treat、treating)或其任何变化表示包括用于修复患者或受试者的健康问题或病症的疗法。在一个实施方案中，可以永久或在一段短时间内消除健康问题或病症。在另一个实施方案中，健康问题或病症的严重度，或者健康问题或病症的一种或多种症状特征的严重度可以被永久或在一段短时间内减轻。疼痛治疗的效力可以使用任何标准的疼痛指数，例如本文描述的那些来确定，或者可以基于患者主观疼痛来确定。如果有报道疼痛减轻，或者对应该引起疼痛的剌激的反应减少，则认为患者被“治疗”。
[0133] 为了测量本文描述的方法、组合物或试剂盒的任何一个的效力，可以使用测量指数。可用于对于测量与肌肉骨骼、免疫炎性和神经疾患相关的疼痛的指数包括视觉模拟量表 (VAS)、Likert量表、分类疼痛量表、描述符、Lequesne指数、WOMAC指数和AUSCAN 指数，其中每一个均是本领域所熟知的。这样的指数可用于测量疼痛、功能、僵硬或其他变量。
[0134] 用于测量与间质性膀胱炎相关的疼痛的指标包括间质性膀胱炎症状指标(ICSI)、间质性膀胱炎问题指标(ICPI)、疼痛-尿急-尿频计分(PUF)、Wisconsin症状量表(UWI)及视觉模拟量表(VAS)，诸如Likert量表及其他类别的疼痛量表。
[0135] 视觉模拟量表(VAS)提供了一维量的量度。VAS一般利用距离表示，例如以规律距离间隔(例如十个1cm间隔)画出的虚线标记的线图。例如，可以要求患者通过选择最佳对应于疼痛感觉的线上的点来对疼痛的感觉分级，其中线的一端对应于“无疼痛”(0cm的刻度)，而线的另一端对应于“无法忍受的疼痛”。该步骤提供了获得关于患者如何经历疼痛的定量信息的简单且快速的方法。VAS量表及其用途描述于例如美国专利第6,709,406和 6,432,937号中，其相关公开内容通过引用并入本文。
[0136] 相似地，Likert量表提供了一维量的量度。通常，Likert量表具有范围从低值(例如， 0，表示无疼痛)至高值(例如，7，表示极度疼痛)的分立整数值。要求经历疼痛的患者选择低值和高值之间的数字来代表经历的疼痛程度。Likert量表及其用途描述于美国专利第 6,623,040和6,766,319号中，其相关公开内容通过引用并入本文。
[0137] Lequesne指数和Western Ontario和McMaster Universities(WOMAC)骨关节炎(OA) 指数使用自填问卷评价OA患者的膝盖和髋部的疼痛、功能和僵硬。WOMAC涵盖膝盖和髋部两者，而针对膝盖有一个Lequesne问卷，针对髋部有一个独立问卷。这些问卷是有用的，因为它们包含与VAS或Likert量表对比的更多信息内容。己经在OA中，包括在手术环境中(例如，膝盖和髋关节形成术)广泛验证了WOMAC指数和Lequesne指数问卷。它们的量度特征没有显著差异。
[0138] AUSCAN(澳大利亚加拿大手关节炎)指数采用有效的、可靠的且响应性的患者自报告的问卷。在一种情况下，该问卷包含三个维度内的15个问题(疼痛，5个问题；僵硬， 1个问题；和身体功能，9个问题)。AUSCAN指数可以利用例如Likert或VAS量级。
[0139] O'Leary-Sant计分及IC问题指标为用于测量下尿路症状的自填指标。
[0140] 疼痛-尿急-尿频症状量表为对尿功能障碍、骨盆疼痛及与性交相关的症状的平衡评估，且常结合同膀胱内氯化钾使用。
[0141] UWI使用关于尿频、尿急、夜尿症及疼痛的七个IC相关问题。
[0142] 可用于测量疼痛的其他适当的指数包括疼痛描述量表(PDS)、语言描述量表(VDS)、数字疼痛强度量表(NPIS)、神经性疼痛量表(NPS)、神经性疼痛症状目录(NPSI)、目前疼痛目录(PPI)、老年疼痛测量(GPM)、McGill疼痛问卷(MPQ)、平均疼痛强度(描述差异量表)、数字疼痛量表(NPS)总体评价评分(GES)短期McGill疼痛问卷、Minnesota 多相个人目录、疼痛谱和多维疼痛目录、儿童健康问卷和儿童评估问卷。
[0143] 在一个实施方案中，本文所描述的治疗方法包括向患者施用式(I)的化合物。可在施用式(I)的化合物前、与之同时或之后，向患者施用额外的任选的试剂，例如如上所述用于组合的那些。
[0144] 许多体内分析和动物模型对于评估化合物通过抑制内部钠通道来抑制疼痛的能力是有用的。这些模型可以或可以不涉及通过物理、机械或化学(例如，辣椒素)方式诱导疼痛来开放(活化)TRPV1通道。适合的模型的实例包括例如描述于以下的那些：Binshtok, Anesthesiology,2009年7月,111(1):127-137；Reis,Anesthesiology,2009年7月,111(1): 122-126；Gerner,Anesthesiology,2008年11月,109(5):872-878；和Binshtok,Nature,
2007年 10月,449:607-610,the use of isolated bladder detrusor muscle
preparations(Witte, Naunyn-Schmeideberg's Arch.Pharmacol.2011,384:555-563)、measurement of voiding frequency and volume in freely moving animals(Clouse,
2012,Urology 79:1410e1-1410e6)、 measurement of bladder urodynamics using cystometry in anesthetized animals(Shimizu,2000, British Journal of
Pharmacology 131:610-616)，其通过引文的形式并入本文。然而，出于对本领域普通技术人员显而易见的许多原因，可提供允许鉴定具有性质的化合物的体外分析。本文描述了几种这样的体外分析。
2007年 10月,449:607-610,the use of isolated bladder detrusor muscle
preparations(Witte, Naunyn-Schmeideberg's Arch.Pharmacol.2011,384:555-563)、measurement of voiding frequency and volume in freely moving animals(Clouse,
2012,Urology 79:1410e1-1410e6)、 measurement of bladder urodynamics using cystometry in anesthetized animals(Shimizu,2000, British Journal of
Pharmacology 131:610-616)，其通过引文的形式并入本文。然而，出于对本领域普通技术人员显而易见的许多原因，可提供允许鉴定具有性质的化合物的体外分析。本文描述了几种这样的体外分析。
[0145] 在一个实施方案中，开发了能够识别测试化合物非特异性与hTRPV1介导的进入的基于改良的 (荧光成像读板器)的分析系统。有利地，分析系统利用hTRPV1通道的热活化开放，随后评估内部钠通道阻断。该分析允许永久带电的化合物通过开放的 hTRPV1通道选择性进入，并且化合物抑制相同细胞的细胞质侧的钠通道的功效可以被评估和定量。
[0146] 改良的 分析利用了功能性表达hTRPV1的细胞。如本文使用的，术语“功能表达”包括表达人类TRPV1蛋白并响应于天然开放该通道的刺激的那些细胞，所述刺激包括例如本文描述的热(例如，加热)或化学(例如，辣椒素、利多卡因等)方式。适合的分析可包括本文描述的钙或膜电位分析(例如实施例49)。然而，其他功能分析是本领域已知的(例如，电压钳电生理学，例如Binshtok，Nature449(4)607-610,2007使用的)。
[0147] 适合的细胞可以被选择用于表达顺式或反式TRPV1，并且使用己知技术构建。在一个实施方案中，选择成神经细胞瘤细胞株例如N1El15[CRL-2263J或ND7/23[ECACC目录代码：92090903]来表达hTRPV1。然而，可以选择另一种成神经细胞瘤细胞系，例如IMR-32 [CRL-127J]；Neuro-2a[CRL-131]；NB41A3[CRL-147]；B104-1-1[CRL-1887]；SK-N-AS [CRL-2137]；SK-N-F1[CRL-2142]；SK-N-DZ[CRL-2149]；SH-SY5Y[CRL-2266]；BE(2)-M17 [CRL-
2267]；BE(2)-C[CRL-2268]；MC-IXC[CRL-2270]；SK-N-BE(2)(CRL-2271)；CHP-212 (CRL-
2273]；B35[CRL-2754]，其可从American Type Culture Collection(美国典型培养物保藏中心)，Manassas，Virginia(US)获得。还可以选择其他细胞株。
2267]；BE(2)-C[CRL-2268]；MC-IXC[CRL-2270]；SK-N-BE(2)(CRL-2271)；CHP-212 (CRL-
2273]；B35[CRL-2754]，其可从American Type Culture Collection(美国典型培养物保藏中心)，Manassas，Virginia(US)获得。还可以选择其他细胞株。
[0148] 对于如何制造细胞的增殖描述，大体参见例如Sambrook,Molecular Cloning:A Laboratory Manual,Cold Spring Harbor Press,Cold Spring Harbor,NY(US)2001。在一个实施方案中，可以使用Sambrook中的使用野生型(wt)或重组hTRPV1编码序列的技术制备稳定细胞株。例如，本文详细描述了一种这样的细胞株的制备(参见实施例32)。另一种细胞株的制备描述于国际专利公开号WO2007/0066068中； 方法可以用于根据生产商方案(Gibco)将TRPV1和hTRPV1转染入人类胚胎肾细胞(HEK293)。为了产生永久表达细胞株，可以在含有遗传霉素(0.6mg/mL)的培养基(含有10％FCS、100U/mL 青霉素、100μg/mL链霉素和250ng/mL两性霉素B的DMEM)中亚克隆wt-TRPV1转染的HEK细胞，并繁殖两周以允许选择。为了获得TRPV1永久表达单细胞株，转染的细胞可以铺板于96孔板(每孔l个细胞)，并且随后通过测量细胞内钙的增加来测试单细胞生长的集落的辣椒素响应。通过三轮进一步的单细胞克隆选取选择的最终克隆，以确保细胞株衍生自单细胞。该方法学的变化对于本领域技术人员是显而易见的。在另一个实施方案中，可以从稳定细胞株选择细胞来表达反式hTRPV1，例如从病毒载体或另一适当的遗传元素中。
[0149] 以下实施例仅为说明而并非意在限制本发明。实施例
[0150] 除非另有提及，所有的原料均购自商业可购的常规供应商。对于CDCl3溶解的化合物，使用三甲基硅烷(TMS)作为内标记录1H-NMR谱。对于DMSO-d6和CD3OD溶解的化合物，分别在δ2.5和3.3ppm处校准仪器。化学位移值以δ(百万分率)引用。
[0151] 对于LCMS分析，使用LCMS/MS API 2000(Applied Biosystem)仪器。柱包括：
[0152] 柱U:YMC，4.6×50mm，5μ
[0153] 柱V: C18柱，4.6×50mm，5μ
[0154] 柱W: Extend C18柱，4.6×50mm，5μ
[0155] 柱X: NX C18柱，4.6×50mm，5μ
[0156] 柱Y: C18柱，4.6×50mm，5μ
[0157] 柱Z: 柱，4.6×50mm，5μ
[0158] 洗脱液(溶剂)通常包括(酸性或碱性缓冲作为水相)：
[0159] A通道:(i)0.05％于水中的甲酸；
[0160] (ii)10mM于水中的醋酸铵；或
[0161] (iii)0.05％于水中的TFA。
[0162] B通道:乙腈(有机相)。
[0163] 检测器为双波：220和260nm下的UV测量。
[0164] LCMS梯度为以下之一：
[0165] 1.LCMS反应监测和最终化合物分析法(对于一般极性化合物)
[0166] 梯度条件： 5min运行时间
[0167] 时间程序： P1：10mM于水/乙腈中的醋酸铵，
[0168] Q1：0.05％于水/乙腈中的TFA，
[0169] R1：0.05％于水/乙腈中的甲酸。
[0170] 梯度将乙腈从10％改变至90％至10％。
[0171] 流速： 1.2mL/min。
[0172] 2.在12min运行内的LCMS反应监测和最终化合物分析法(对于洗脱相近的化合物)：
[0173] 梯度条件： 12min运行时间
[0174] 时间程序： P2:10mM于水/乙腈中的醋酸铵，
[0175] Q2:0.05％于水/乙腈中的TFA，
[0176] R2:0.05％于水/乙腈中的甲酸。
[0177] 梯度将乙腈从5％改变至90％至5％。
[0178] 流速： 1.0mL/min。
[0179] 3.HPLC方法开发后的LCMS-梯度条件依据HPLC。
[0180] 使用以下得到质谱数据：
[0182] 去簇电压： 10-70V取决于化合物的离子化
[0183] 质量范围： 100-800amu
[0184] 扫描类型： Q1
[0185] 极性： +/-ve
[0187] 离子喷雾电压：对于+ve模式为+5500，对于-ve模式为-4500
[0188] 质量源温度： 200℃
[0189] 中间体制备—化合物合成几乎未使用中间体，所述化合物通过作为实施例在下文中列出的以下十六(16)条路线合成。
[0190] 制备1：1-吡嗪-2-基-乙胺
[0191]
[0192] 向化合物I(2g；16.4mmol；1当量)于甲醇(20mL)中的搅拌溶液加入醋酸铵(12.6 g；164mmol；10当量)和氰基硼氢化钠(1g；16.4mmol；1当量)，将所得混合物在23℃搅拌17h。将混合物用水(50mL)淬灭，并用乙酸乙酯(2×200mL)萃取有机成分。用水和卤水洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，过滤在真空中移除溶剂以得到粗化合物，其通过用10％MeOH/CH2Cl2洗脱的硅胶柱(230-400目)色谱纯化，得到标题化合物 (0.8g，40％)。1H NMR(CDCl3)δ8.60(s，1H)，8.49(m，1H)，8.43(d，1H，J＝2Hz)， 4.20(m，1H)，1.45(d，3H，J＝
7Hz)。
7Hz)。
[0193] 制备2：4-氨甲基-1-甲基-1H-吡啶-2-酮
[0194]
[0195] 步骤1：4-氰基-1-甲基-1H-吡啶-2-酮
[0196] 向化合物I(0.25g；2.08mmol；1当量)于DMF(5mL)的搅拌溶液中加入氢化钠 (0.12g；3.12mmol；1.5当量)，并将所得混合物在0℃搅拌10分钟。然后向混合物中加入碘甲烷(0.4mL；6.25mmol；3当量)并将所得混合物在23℃搅拌2h。用水(50mL) 稀释混合物，并用乙酸乙酯萃取有机成分(2×200mL)。用水和卤水洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，过滤并在真空中移除溶剂以得到标题化合物(0.18g，67％)。1H NMR (DMSO-d6)δ7.93(d，1H，J＝7Hz)，7.00(s，1H)，6.52(dd，1H，J＝2，7Hz)，3.45 (s，3H)。
[0197] 步骤2：4-氨甲基-1-甲基-1H-吡啶-2-酮
[0198] 向化合物II(1.67g；11.9mmol；1当量)于甲醇(80mL)的搅拌溶液中加入浓HCl (1mL)，随后为10％Pd/C(1.6g)，将所得混合物在Parr高压釜中于50psi的压力下在氢气气氛中搅拌4h。将混合物通过 床过滤，用甲醇洗涤，在真空下移除滤液的溶剂以得到标题化合物(2g，92％)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.55(brs，1H)，7.72(d，1H，J ＝7Hz)，6.46(s，1H)，6.31(dd，1H，J＝2，7Hz,)，3.86(m，2H)，3.40(s，3H)。
[0199] 制备3：6-甲基-1-氧基吡啶-3-基)甲胺盐酸盐
[0200]
[0201] 步骤1：6-甲基-烟酸甲酯
[0202] 向化合物I(40g；290mmol；1当量)于甲醇(0.75L)的搅拌溶液中加入硫酸(40mL)，并将所得混合物加热回流17小时。然后将混合物蒸发至干，使用饱和的冰-冷NaHCO3水溶液和固体NaHCO3将pH调节至7。使用乙酸乙酯(3×500mL)从水层萃取有机组分，并用卤水洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥、过滤并在真空下移除溶剂以得到为米白色固体的标题化合物(33g，75％)。1H NMR(CDCl3)δ9.06(s，1H)，8.13(dd，1H， J＝2，8Hz)，7.20(d，1H，J＝8Hz)，3.89(s，3H)，2.58(s，3H)。LCMS：m/z＝152.4 [M+H]+，RT＝2.36分钟，(程序P1，柱W)。
[0203] 步骤2：(6-甲基-吡啶-3-基)甲醇
[0204] 在-5℃，向化合物II(21g；140mmol；1当量)于干THF(150mL)的搅拌溶液中逐滴加入于THF(210mL；210mmol；1.5当量)中的1M LiAlH4溶液，加入完毕后在23℃搅拌2h。将混合物冷却至-10℃，并用十水合硫酸钠和乙酸乙酯淬灭直至停止冒泡。通过 垫过滤混合物，蒸发滤液至干以得到标题化合物(17g，100％)。1H NMR(DMSO-d6) δ8.37(s，1H)，7.59(dd，1H，J＝2，8Hz)，7.19(d，1H，J＝8Hz)，5.22(t，1H，J＝ 6Hz)，4.47(d，2H，J＝6Hz)，2.45(s，3H)。
[0205] 步骤3：甲磺酸(6-甲基-吡啶-3-基)甲酯
[0206] 向化合物III(25g；200mmol；1当量)于CH2Cl2(0.5L)的搅拌溶液中逐滴加入TEA (42.5mL；300mmol；1.5当量)和甲磺酰氯(23.5mL；300mmol；1.5当量)并将所得混合物在23℃搅拌1h。将混合物用水(100mL)稀释，并用CH2Cl2(2×200mL)萃取有机组分。用水和卤水洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，过滤，在真空下移除溶剂以得到标题化合物(41g，100％)。
[0207] 步骤4：3-叠氮甲基-6-甲基吡啶
[0208] 向化合物IV(43g；0.21mol；1当量)于干DMF(150mL)的搅拌溶液中加入叠氮化钠(139g；2.13mol；10当量)并将所得混合物在23℃搅拌17h。使用水(500mL)淬灭所述混合物，并用乙酸乙酯(2×200mL)萃取有机组分。使用水和卤水洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，过滤然后在真空下浓缩以得到为粗材料的化合物(31.6g，100％)。
[0209] 步骤5：(6-甲基-吡啶-3-基)甲基胺
[0210] 向化合物V(8g；50mmol；1当量)于THF(250mL)和水(5.7mL)的搅拌溶液中加入三苯基膦(28g；100mmol；2当量)，并将所得混合物加热回流4h。将混合物蒸发至干以得到粗材料。通过用10％MeOH/CH2Cl2洗脱的柱色谱纯化粗产品以得到标题化合物(3 g，46％)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.36(s，1H)，7.61(dd，1H，J＝2，8Hz)，7.16(d， 1H，J＝8Hz)，3.67(s，2H)，+2.49(s，3H)。LCMS：m/z＝123.0[M+H]，RT＝0.45分钟,(程序R1，柱X)。
[0211] 步骤6：N-(6-甲基-吡啶-3-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯
[0212] 向化合物VI(0.75g；6mmol；1当量)于干CH2Cl2(10mL)的搅拌溶液中加入TEA (2.59mL；18mmol；3当量)、boc酸酐(1.55mL；6mmol；1.1当量)并将所得混合物在 23℃搅拌17h。用水(50mL)稀释混合物，并用二氯甲烷(2×100mL)萃取有机组分。使用水和卤水洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，过滤，并在真空下浓缩以得到标题化合物(1.36g，
100％)。1H NMR(CDCl3)δ8.39(s，1H)，7.51(d，J＝8Hz，1H)， 7.10(d，J＝8Hz，1H)，4.84(brs，
1H)，4.27(d，J＝4Hz，2H)，2.52(s，3H)，1.44 (s，9H)；LCMS：m/z＝222.8[M+H]+，RT＝2.69分钟,(程序P1，柱W)。
100％)。1H NMR(CDCl3)δ8.39(s，1H)，7.51(d，J＝8Hz，1H)， 7.10(d，J＝8Hz，1H)，4.84(brs，
1H)，4.27(d，J＝4Hz，2H)，2.52(s，3H)，1.44 (s，9H)；LCMS：m/z＝222.8[M+H]+，RT＝2.69分钟,(程序P1，柱W)。
[0213] 步骤7：N-(6-甲基-1-氧基-吡啶-3-基甲基)氨基甲酸丁酯
[0214] 向化合物VII(1.36g；6mmol；1当量)于氯仿(30mL)的搅拌溶液中加入间氯过氧苯甲酸(1.32g；7mmol；1.25当量)和2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚(6mg；0.3mmol；0.05 当量)，并将所得混合物加热回流2天。用水(50mL)稀释混合物并用二氯甲烷(2×100mL) 萃取有机组分。使用水和卤水洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，过滤，并在真空下浓缩以得到标题化合物(1.1g，76％)。1H NMR(CDCl3)δ8.21(s，1H)，7.19(d，1H， J＝8Hz)，7.11(d，1H，J＝8Hz)，5.00(brs，1H)，4.24(d，2H，J＝5Hz)，2.48(s， 3H)，1.47(s，9H)。LCMS：m/z＝239.0[M+H]+，RT＝2.06分钟,(程序P1，柱W)。
[0215] 步骤8：(6-甲基-1-氧基-吡啶-3-基)甲胺盐酸盐
[0216] 向化合物VIII(1.1g；4mmol；1当量)于1,4-二氧六环(5mL)的搅拌溶液中加入于1,4-二氧六环(20mL)中的4M HCl，并将所得混合物在23℃搅拌4h。在真空下移除溶剂以得到标题化合物(0.71g，89％)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.50(m，3H)，7.57(d， 1H，J＝8Hz)，7.48(d，
1H，J＝8Hz,)，4.02(q，2H，J＝11Hz)，2.38(s，3H)。LCMS： m/z＝139.0[M+H]+，RT＝0.45分钟,(程序P1，柱W)。
1H，J＝8Hz,)，4.02(q，2H，J＝11Hz)，2.38(s，3H)。LCMS： m/z＝139.0[M+H]+，RT＝0.45分钟,(程序P1，柱W)。
[0217] 以下胺也通过使用以上涉及的步骤制备：
[0218]
[0219] 制备4：(2-甲氧基嘧啶-5-基)甲胺盐酸盐
[0220]
[0221] 步骤1：5-氰基-2-甲氧基嘧啶
[0222] 向反应管中搅拌的化合物I(5g；26mmol；1当量)的DMF(80mL)溶液中加入氰化锌(5g；53mmol；2当量)，并用氩气将所得混合物除气5min。然后向混合物中加入 Pd(PPh3)4(5g；5.20mmol；0.2当量)，并用氩气将所得混合物再除气5min。将反应管密封，并在115℃加热3h。通过 垫过滤混合物，并用饱和的NaHCO3水溶液，随后用卤水洗涤滤液。然后于无水Na2SO4上干燥有机层并挥发至干以得到粗材料。通过用50％ EtOAc/己烷洗脱的硅胶(100-200目)柱色谱纯化粗产品，以得到标题化合物(3.5g，100％)。1H NMR(DMSO-d6)δ9.11(s，2H)，4.00(s，3H)。LCMS：m/z＝136.0[M+H]+，RT＝ 1.74分钟,(程序P1，柱V)。
[0223] 步骤2：N-((2-甲氧基-嘧啶-5-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯
[0224] 在0℃下，向化合物II(4.5g；33.3mmol；1当量)于甲醇(230mL)的搅拌溶液中加入六水合氯化镍(3.15g；13.3mmol；0.4当量)和boc酸酐(14.4g；66.66mmol；2当量)。然后向混合物分批加入粉末NaBH4(8.7g；233mmol；7当量)，并在23℃搅拌17h。将混合物蒸发至干，用水稀释，并用乙酸乙酯(2×100mL)萃取有机组分。用卤水洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，过滤，并在真空下移除溶剂以得到干残余物，通过使用2-5％甲醇/二氯甲烷作为洗脱剂的硅胶(230-400目)柱色谱纯化该残余物以得到标题化合物(3.8g，48％)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.46(s，2H)，4.06(d，2H，J＝6Hz)，3.88 (s，3H)，1.36(s，9H)。LCMS：m/z＝240.0+[M+H]，RT＝2.67分钟,(程序P1，柱W)。
[0225] 步骤3：2-甲氧基嘧啶-5-基)甲胺盐酸盐
[0226] 向化合物III(4g；28.98mmol；1当量)于1,4-二氧六环(20mL)的搅拌溶液中加入于1,4-二氧六环(30mL)中的4M HCl，并将混合物在23℃搅拌4h。在真空下移除溶剂以得到标题化合物(2.8g，95％)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.73(s，2H)，4.03(m，2H)， 3.89(s，3H)。LCMS：m/z＝140.0[M+H]+，RT＝0.59分钟,(程序P1，柱V)。
[0227] 制备5：(2-环丙基吡啶-5-基)甲胺盐酸盐
[0228]
[0229] 步骤1：2-环丙基-5-氰基吡啶
[0230] 向反应管中的化合物I(0.5g；3.62mmol；1当量)于甲苯(20mL)和水(1mL)的搅拌溶液中加入环丙基硼酸(0.46g；5.43mmol；1.5当量)，并用氩气将所得混合物除气5 min。然后向混合物中加入K3PO4(2.7g；12.7mmol；3.5当量)、Pd(OAc)2(0.04g；0.18 mmol；0.05当量)、三环己基膦(0.10g；0.36mmol；0.1当量)并用氩气将所得混合物再除气5min，然后将反应管密封，并在110℃加热3h。通过 垫过滤混合物并用饱和 NaHCO3水溶液，随后是卤水洗涤滤液。然后于无水Na2SO4上干燥有机层并蒸发至干以得到粗材料产物。通过用5-30％EtOAc/己烷洗脱的硅胶(100-200目)柱色谱纯化粗材料以得到标题化合物(0.28g，56％)。1H NMR(CDCl3)δ8.67(s，1H)，7.75(dd，1H，J＝2， 8Hz)，7.23(m，1H)，2.06(m，1H)，1.09(m，
4H)。
4H)。
[0231] 步骤2：(2-环丙基吡啶-5-基)甲胺盐酸盐
[0232] 向化合物II(1.5g；11.11mmol；1当量)于甲醇(80mL)的搅拌溶液中加入浓盐酸 (1mL)，随后是10％Pd/C(1.6g)，并在Parr高压釜中于50psi的压力下在氢气气氛中搅拌4h。通过 垫过滤混合物，用甲醇洗涤，并在真空下从滤液中移除溶剂以得到标题化合物(1.2g，78％)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.33(s，1H)，7.64(dd，1H，J＝2，8Hz)， 7.27(d，1H，J＝
8Hz)，1.89(m，1H)，0.92(m，4H)。
8Hz)，1.89(m，1H)，0.92(m，4H)。
[0233] 制备6：1-(2-甲基-嘧啶-5-基)-乙胺
[0234]
[0235] 步骤1：3,3-二甲氧基-2-甲氧羰基-1-丙烯-1-醇钠盐
[0236] 向化合物I(50g；337mmol；1当量)于1,2-二甲氧基乙烷(0.2L)的搅拌溶液中加入甲酸甲酯(50mL；809mmol；2.4当量)，并将混合物冷却至-5℃。分批向混合物中加入氢化钠(60％于矿物油中，17.5g；438mmol；1.3当量)并将所得混合物在50℃搅拌直至停止冒泡。然后使混合物在23℃搅拌17h。过滤混合物，收集固体残余物，用乙醚洗涤并在减压下干燥以得到为米白色固体的标题化合物(63g，100％)。1H NMR(CD3OD)δ8.88 (s，1H)，8.54(s，1H)，5.30(s，1H)，3.51(s，3H)，3.30(s，6H)。
[0237] 步骤2：2-甲基嘧啶-5-羧酸甲酯
[0238] 向化合物II(60g；340mmol；1当量)于干DMF(1L)的搅拌溶液中加入盐酸乙脒 (38.6g；409mmol；1.2当量)，并将所得混合物在100℃加热3h。用水(500mL)淬灭混合物，并用乙酸乙酯(2×200mL)萃取有机组分。用水和卤水洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干1
燥，过滤并在真空下浓缩以得到标题化合物(27g，53％)。H NMR(CDCl3) δ9.13(s，2H)，3.93(s，3H)，2.77(s，3H)。
燥，过滤并在真空下浓缩以得到标题化合物(27g，53％)。H NMR(CDCl3) δ9.13(s，2H)，3.93(s，3H)，2.77(s，3H)。
[0239] 以下胺也遵循制备3，步2-5的步骤由化合物III合成。
[0240]
[0241] 制备7：(S)-1-(4H-[1,2,4]-三唑-3-基)乙胺盐酸盐
[0242]
[0243] 步骤1：(S)-(E)-苄基(1-(((二甲胺)亚甲基)胺)-1-氧亚基丙烷-2-基)氨基甲酸酯
[0244] 向(S)-苄基(1-氨基-1-氧亚基丙烷-2-基)氨基甲酸酯I(20g，90mmol)中加入DMF-DMA (100mL)，并将所得混合物在40℃加热40min。用乙酸乙酯稀释混合物，并用水和卤水洗涤。于硫酸钠上干燥有机层，过滤并在减压下浓缩以得到化合物II(粗)。
[0245] 步骤2：[(S)-1-(4H-[1,2,4]-三唑-3-基)乙基]氨基甲酸苄酯
[0246] 向化合物II(粗)于干DMF(109mL)的搅拌溶液中加入肼(1M于THF中的溶液) (135mL,135mmol)，并将所得混合物在100℃加热1.5h。将混合物用乙酸乙酯稀释，并用水和卤水洗涤。于无水硫酸钠上干燥有机层，过滤并在减压下浓缩已得到粗产物。通过用 15-20％丙酮/CH2Cl2洗脱的硅胶色谱纯化粗产物，以得到为白色固体的化合物III(5g，41％， 2步)。1H NMR(DMSO-d6)δ13.7(s，1H)，8.43(s，1H)，7.83(s，1H)，7.35-7.30(m， 5H)，5.01-
4.98(m，2H)，4.80(brs，1H)，1.40(s，3H)。LCMS：m/z＝246.8[M+H]+， RT＝2.51min(程序P1，柱V)。手性SFC：99.07％(210nm)，RT 12.54min(流动相：A： ACN，B：MeOH)
4.98(m，2H)，4.80(brs，1H)，1.40(s，3H)。LCMS：m/z＝246.8[M+H]+， RT＝2.51min(程序P1，柱V)。手性SFC：99.07％(210nm)，RT 12.54min(流动相：A： ACN，B：MeOH)
[0247] 步骤3：(S)-1-(4H-[1,2,4]-三唑-3-基)乙胺盐酸盐
[0248] 向化合物III(1g；4.06mmol；1当量)于HCl(4M于1,4-二氧六环，20mL)的搅拌溶液中加入10％Pd/C(1g)并将所得混合物于60psi下氢气气氛中搅拌16h。通过 垫过滤混合物并将滤液蒸发至干以得到化合物IV(0.6g，100％)。1H NMR(DMSO-d6)δ 8.71(brs，3H)，8.65(s，1H)，4.48(m，1H)，1.55(d，3H，J＝6Hz,)。LCMS：m/z＝ 113.2[M+H]+，RT＝0.47分钟,(程序P1，柱W)。手性SFC：99.07％(210nm)，RT 12.54 min(流动相：A：ACN，B：MeOH)。
[0249] 制备8：(S)-2-甲基-1-(4H-[1,2,4]三唑-3-基)-丙胺
[0250]
[0251] 步骤1：((S)-1-氨基甲酰-2-甲基-丙基)-氨基甲酸苄酯
[0252] 在0℃下向化合物I(10g，39.84mmol，1当量)于DMF(100mL)的搅拌溶液中加入DIPEA(19.7mL，119.5mmol，3当量)和HATU(18.17g，47.8mmol，1.2当量)，并将所得混合物搅拌15min。向混合物中加入氯化铵(10.7g，199.2mmol，5当量)并将所得混合物在23℃搅拌另外16h。将混合物倒入冰冷水(500mL)中，用EtOAc(3×500mL) 萃取有机组分，并用氯化铵水溶液和卤水洗涤合并的有机层。于无水硫酸钠上干燥有机层，过滤并浓缩至干。从乙醇中将粗产物重结晶以得到为米白色固体的标题化合物(9.8g，98％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ7.35(m，6H)，7.12(d，1H，J＝9Hz)，7.01(s，1H)， 5.03(s，2H)，3.80(t，1H，J＝8Hz)，1.95(m，
1H)，0.85(m，6H)。LCMS：m/z＝251.2 [M+H]+，RT＝2.81分钟,(程序P1，柱Y)。
1H)，0.85(m，6H)。LCMS：m/z＝251.2 [M+H]+，RT＝2.81分钟,(程序P1，柱Y)。
[0253] 步骤2：((S)-2-甲基-1-硫代氨基甲酰-丙基)-氨基甲酸苄酯
[0254] 在23℃向化合物II(5.5g，22mmol，1当量)于干CH2Cl2(100mL)的搅拌溶液中加入劳森试剂(5.5g，13.2mmol，0.7当量)，并将混合物加热回流2-3h。将混合物冷却至室温，并在真空下浓缩以得到粗材料，通过以1.5％MeOH/CH2Cl2洗脱的使用硅胶(100-200 目)的重力柱色谱纯化该粗材料，以得到为米白色固体的标题化合物(1.8g，31％)。1H NMR (400MHz，DMSO-d6)δ9.63(s，1H)，9.21(s，1H)，7.32(m，5H)，7.13(d，1H，J＝ 9Hz)，5.03(s，2H)，4.03(m，1H)，2.06(m，1H)，0.95(m，6H)。LCMS：m/z＝267.2 [M+H]+，RT＝3.10分钟,(程序P1，柱Y)。
[0255] 步骤3：[(S)-2-甲基-1-(4H-[1,2,4]三唑-3-基)-丙基]-氨基甲酸苄酯
[0256] 向化合物III(1.8g；6.7mmol；1当量)于乙醇(80mL)的搅拌溶液中加入甲酸肼(2 g；33mmol；5当量)、氯化汞(II)(2.38g；8.7mmol；1.3当量)，并用氩气将混合物除气15min，然后在23℃搅拌17h。然后通过 试剂将混合物过滤，并将滤液蒸发至干。用EtOAc(200mL)稀释残余物，并用20％的碳酸钠水溶液洗涤。然后在无水硫酸钠上干燥有机层，过滤并在减压下浓缩以提供粗化合物。将粗材料溶解于乙醇(100mL)中并加热回流17h。将混合物在真空下浓缩以提供粗化合物，通过以3％MeOH/CH2Cl2洗脱的硅胶(100-200目)重力柱色谱纯化该粗化合物，以得到为白色固体的标题化合物(1.4g， 74％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ13.76(brs，1H)，8.44(s，1H)，7.51(m，1H)， 7.34(m，5H)，5.03(m，2H)，4.51(m，1H)，2.12(m，1H)，0.90(m，3H)，0.79(m， 3H)。
[0257] 步骤4：(S)-2-甲基-1-(4H-[1,2,4]三唑-3-基)-丙胺
[0258] 向化合物IV(0.5g；1.84mmol；1当量)于EtOH的搅拌溶液中，用氩气除气，加入 10％Pd/C(1.5g)和于二氧六环中的HCl(4.0M solution，10mL)，并将所得混合物在Parr 振动器中于50psi压力下在氢气气氛中于23℃搅拌10h。将混合物通过 试剂过滤，并将
1
滤液蒸发至干以得到为米白色固体的标题化合物(0.23g，90％)。H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ8.10(brs，3H)，7.86(s，1H)，7.56(s，1H)，3.52(m，1H)，2.10(m， 1H)，0.94(m，6H)。
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滤液蒸发至干以得到为米白色固体的标题化合物(0.23g，90％)。H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ8.10(brs，3H)，7.86(s，1H)，7.56(s，1H)，3.52(m，1H)，2.10(m， 1H)，0.94(m，6H)。
[0259] 制备9：(R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-乙胺盐酸盐
[0260]
[0261] 步骤1：[(R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-乙基]-氨基甲酸叔丁酯
[0262] 在23℃向化合物I(3g，15.9mmol，1当量)于DMF(15mL)的搅拌溶液中加入TEA(6.7mL，47.6mmol，3当量)、N-羟基乙脒盐酸盐(1.5g，20.6mmol，1.3当量)和 T3P(50％于乙酸乙酯中，7mL，23.8mmol，1.5当量)，并将所得混合物在110℃加热3h。将混合物冷却至室温，并用水淬灭。用乙酸乙酯(2×200mL)萃取有机组分，并用卤水洗涤合并的萃取物。于无水硫酸钠上干燥有机层，过滤并在真空下浓缩至干。通过以10-50％ EtOAc/己烷洗脱的硅胶(100-200目)重力柱色谱纯化粗产物以得到为黏稠液体的标题化合物(3g，83％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ5.06(m，1H)，2.38(s，3H)，1.43(s， 9H)。
[0263] 步骤2：(R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-乙胺盐酸盐
[0264] 在0℃下向化合物II(3g；13.2mmol；1当量)于1,4-二氧六环(15mL)的搅拌溶液中于30min的时间逐滴加入于1,4-二氧六环(53mL)中的4M HCl，并将所得混合物在 23℃搅拌24h。将混合物在真空下浓缩以得到为米白色的标题化合物(2.1g，100％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.02(brs，3H)，4.86(q，1H，J＝7Hz)，2.39(s，3H)， 1.60(d，3H，J＝7Hz)。分析手性HPLC色谱图显示化合物非手性纯。
[0265] 制备10：(R)-1-(5-甲基-[1,3,4]噁二唑-2-基)-乙胺三氟乙酸盐
[0266]
[0267] 步骤1：(R)-2-氨基-丙酸甲酯
[0268] 在0℃下向化合物I(10g，112.24mmol，1当量)于甲醇(160mL)的搅拌溶液中加入亚硫酰氯(16.3mL，224.5mmol，2当量)并将所得混合物在23℃搅拌10h。将混合物在减压下浓缩并用冰冷碳酸氢钠溶液(300mL)稀释。用EtOAc(3×300mL)萃取有机组分，并用卤水洗涤合并的萃取物。于无水硫酸钠上干燥有机相，过滤并在真空下浓缩以得到以得到为半固体材料的粗标题化合物(17.9g，15.6g，100％)。1H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ8.56(brs，3H)，4.05(m，1H)，3.73(s，3H)，1.41(d，3H，J＝7Hz)。
[0269] 步骤2：(R)-2-叔-丁氧羰基氨基-丙酸甲酯
[0270] 在0℃下向化合物II(16.0g，114.7mmol，1当量)于CH2Cl2(60mL)的搅拌溶液中加入TEA(48.1mL，344.1mmol，3当量)和BOC-酸酐(30g 137.6mmol，1.2当量) 并将所得混合物在23℃搅拌16h。将混合物倒入冰冷水(500mL)中，用EtOAc(2×300 mL)萃取，并用卤水洗涤合并的萃取物。于无水硫酸钠上干燥有机层，过滤并浓缩至干以得到为米白色固体的粗标题化合物(20.0g 72％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ7.25 (d，1H，J＝7Hz)，3.99(m，1H)，3.30(s，3H)，1.37(m，9H)，1.22(d，3H，J＝7Hz)。
[0271] 步骤3：((R)-肼基羰基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯
[0272] 向反应管中的化合物III(10g；41.84mmol；1当量)于THF(30mL)的搅拌溶液中加入水合肼(6.08mL；125.52mmol；3当量)。将反应管密封并在110℃加热10h。将混合物在真空下浓缩得到为米白色固体的粗标题化合物(11g，100％)。1H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ8.98(brs，1H)，7.10(brs，1H)，6.82(d，1H，J＝7Hz)，6.48(brs，1H)， 4.11(m，1H)，1.30(m，9H)，1.10(m，3H)。
[0273] 步骤4：{(R)-1-[1-乙氧基-(E)-亚乙基-肼基羰基]-乙基}-氨基甲酸叔丁酯[0274] 将化合物IV(2.5g；9.16mmol；1当量)于三乙基原乙酸酯(10.4mL；55mmol；6 当量)的溶液加热回流2-3h。将混合物倒至冰冷水(100mL)，并用EtOAc(2×100mL) 萃取有机组分，并用卤水洗涤合并的萃取物。于无水硫酸钠上干燥有机层，过滤并在真空下浓缩以得到为棕色固体的粗标题化合物(3.6g，100％)。
[0275] 步骤5：[(R)-1-(5-甲基-[1,3,4]噁二唑-2-基)-乙基]-氨基甲酸叔丁酯
[0276] 将化合物V(3.5g，12.8mmol，1当量)于醋酸(7.3mL，128mmol，10当量)的溶液在搅拌下于60℃加热5h。将混合物在真空下浓缩以移除醋酸，并用冰冷碳酸氢钠溶液中和残余物。用EtOAc(2×200mL)萃取有机组分，并用卤水洗涤合并的萃取物。于无水硫酸钠上干燥有机层，过滤并在真空下浓缩，以得到为棕色固体的标题化合物(0.65g， 23％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ7.56(d，1H，J＝8Hz)，4.82(m，1H)，2.46 (s，3H)，4.40(m，12H)。
[0277] 步骤6：(R)-1-(5-甲基-[1,3,4]噁二唑-2-基)-乙胺三氟乙酸盐
[0278] 向化合物VI(0.5g，2.2mmol，1当量)于CH2Cl2(10mL)的溶液中加入三氟乙酸 (0.4mL，4.4mmol，2当量)，并将所得混合物在23℃搅拌18h。在减压下浓缩混合物以移除三氟乙酸，并用己烷洗涤残余物以得到为棕色固体的标题化合物(0.28g，100％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.72(brs，3H)，4.18(m，1H)，2.54(s，3H)，1.56(d， 3H，J＝7Hz)。
[0279] 制备11：2-[4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂戊硼烷-2-基)-吡唑-1-基]-乙酰胺
[0280]
[0281] 向反应管(150mL)中的化合物I(5g，25.7mmol；1当量)于乙腈的溶液中加入溴乙酰胺(5.68g，41.2mmol；1.6当量)和碳酸铯(33.5g，102mmol；4当量)，将反应管密封并在90℃加热3h。将混合物冷却至室温，并通过 垫过滤，将滤液在真空下浓缩以得到为粗产1
物的标题化合物(4.2g，65％)，其未进行进一步的纯化而被直接用于下一步。H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ7.67(d，1H，J＝2Hz)，7.57(m，1H)，7.48(brs， 1H)，7.42(s，1H)，4.76(s，2H)，0.89(s，12H)
物的标题化合物(4.2g，65％)，其未进行进一步的纯化而被直接用于下一步。H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ7.67(d，1H，J＝2Hz)，7.57(m，1H)，7.48(brs， 1H)，7.42(s，1H)，4.76(s，2H)，0.89(s，12H)
[0282] 制备12：5,5,5-三氟-3-氧亚基-戊酸甲酯的合成
[0283]
[0284] 在0℃下，向米氏酸(5g，34.7mmol；1当量)于干CH2Cl2(5mL)的搅拌溶液中加入吡啶(3.07mL；38.2mmol；1.1当量)随后是3,3,3-三氟丙酰氯I(5.5g；38.2mmol； 1.1当量)，并使所得混合物在0℃搅拌1h。然后将反应的温度升至23℃并继续搅拌另外 2h。在减压下浓缩混合物以移除挥发物，将所得膏状材料溶解于甲醇，并在80℃加热5h。将混合物冷却至室温，在减压下浓缩并用氯化铵水溶液稀释。用EtOAc萃取有机组分，用 1N HCl溶液和卤水洗涤。于无水硫酸钠上干燥有机层，过滤并浓缩至干以得到为粗产物的标题化合物(3.1g，50％)，其未进行进一步的纯化而被直接用于下一步。1H NMR(DMSO-d6) δ3.87(m，2H)，3.70(s，3H)，3.64(s，3H)。
[0285] 制备13：4,4-二氟-3-氧亚基-戊酸甲酯
[0286]
[0287] 在-78℃下，向二异丙胺于干THF(150mL)的搅拌溶液中加入正丁基锂(2.3M于己烷中，161mL；370.9mmol；2当量)使所得混合物在0℃搅拌40min。将混合物冷却至-78℃，逐滴加入于干THF中的乙酸乙酯，并继续在-78℃搅拌1h。缓慢地向混合物中加入于干 THF中的化合物I(23g；185.4mmol；1当量)，并将所得混合物在-78℃搅拌另外1h。使混合物在23℃搅拌16h。用氯化铵水溶液(200mL)淬灭混合物，并用EtOAc(2×700mL) 萃取有机组分。用1N HCl溶液、卤水洗涤合并的有机层，并于无水硫酸钠上干燥，然后过滤。然后在减压下浓缩滤液以得到为粗材料的标题化合物(23g，75％)，其未经纯化直接被用于下一步。1H NMR(DMSO-d6)δ4.21(m，4H)，3.93(s，4H)，2.17(s，2H)，1.77 (t，3H)，1.187(m，6H)。
[0288] 制备14：三丁基-(5-甲基-噻吩-2-基)锡烷
[0289]
[0290] 向冷却至-78℃的2-溴-5-甲基噻吩I(6g，33.9mmol，1eq)于干THF(60mL)的搅拌溶液中加入正BuLi(14.7mL，2.3M于THF，1当量)，并将所得混合物在-78℃搅拌45min。向混合物中加入三丁基氯化锡(11g，33.9mmol，1当量)，并使所得混合物在-78℃搅拌另外1h。然后用氯化铵水溶液稀释混合物，并用CH2Cl2(2×50mL)萃取有机组分。用水和卤水洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，过滤并浓缩至干以得到粗三丁基-(5- 甲基-噻吩-2-基)锡烷(13.1g)，其未经任何纯化直接被用于后续反应。1H NMR(CDCl3)δ 6.95(d，1H，J＝3Hz)，6.87(d，1H，J＝2Hz)，2.53(s，3H)，1.54(m，6H)，1.30 (m，6H)，1.06(m，6H)，0.88(m，9H)。
[0291] 以下化合物也遵循相同的策略制备。
[0292]
[0293] 制备15：三丁基-(5-甲基-呋喃-2-基)-锡烷
[0294]
[0295] 向冷却至-78℃的2-甲基呋喃I(3g，36.5mmol，1当量)于干THF(20mL)的搅拌溶液中加入正-丁基锂(15.9mL，2.3M于THF中，1当量)，并将所得混合物在0℃搅拌 1h。然后将混合物冷却至-78℃，并加入三丁基氯化锡(11.9g，36.5mmol，1当量)，并使所得混合物在23℃搅拌18h。然后用饱和氯化铵水溶液稀释混合物，用乙酸乙酯(2×50mL) 萃取有机组分。用水、卤水洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，过滤并浓缩至干以得到为粗产物的标题化合物(4.5g)，其未经任何纯化直接被用于下一反应。1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ6.43(d，1H，J＝3Hz)，5.97(d，1H，J＝3Hz)，2.32(s，3H)，1.70- 1.40-1.28(m，6H)，1.32(m，12H)，0.91(m，9H)。
[0296] 制备16：8-(环丙基-丙酰-氨基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸乙酯
[0297]
[0298] 化合物IV遵循实施例8中描述的实验步骤制备。使用实施例20中描述的一般步骤，将化合物VIa转化至实施例188。
[0299] 步骤3a：8-环丙基氨基-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸乙酯
[0300] 向反应管中的化合物IV(1.5g；5.57mmol；1当量)的搅拌的甲苯溶液中加入环丙胺 (0.47g；8.36mmol；1.5当量)，并用氩气将所得混合物除气5min，随后加入Cs2CO3(2.72 g；8.36mmol；1.5当量)、Pd2(dba)3(0.25g；0.28mmol；0.05当量)和4,5-双二苯基膦-9,9- 二甲基氧杂蒽(xantphos)(0.32g；0.56mmol；0.1当量)。然后用氩气将混合物再除气5min，而后密封反应管，并加热至110℃2h。通过 垫过滤混合物并用饱和的NaHCO3水溶液，随后是卤水洗涤滤液。然后于无水Na2SO4上干燥有机层，过滤并蒸发至干以得到粗材料。通过以
20％EtOAc/乙烷洗脱的硅胶(100-200目)柱色谱纯化粗产品，以得到为淡棕色固体的标题化合物(0.31g，23％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.35(s，1H)，7.54 (s，1H)，7.50(s，1H)，6.95(s，1H)，5.51(s，1H)，4.39(q，2H，J＝7Hz)，2.59(m， 1H)，1.40(t，3H，J＝7Hz)，0.83(m，2H)，
0.64(m，2H)。LCMS：m/z＝246.2[M+]， RT＝3.13分钟,(程序P1，柱V)。
20％EtOAc/乙烷洗脱的硅胶(100-200目)柱色谱纯化粗产品，以得到为淡棕色固体的标题化合物(0.31g，23％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.35(s，1H)，7.54 (s，1H)，7.50(s，1H)，6.95(s，1H)，5.51(s，1H)，4.39(q，2H，J＝7Hz)，2.59(m， 1H)，1.40(t，3H，J＝7Hz)，0.83(m，2H)，
0.64(m，2H)。LCMS：m/z＝246.2[M+]， RT＝3.13分钟,(程序P1，柱V)。
[0301] 步骤4a：8-(环丙基-丙酰-氨基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸乙酯
[0302] 向化合物Va(1g，4.08mmol，1当量)于干THF(50mL)的溶液中加入吡啶(0.67mL， 8.16mmol，2当量)并丙酰氯(0.73mL，8.16mmol，2当量)，并将所得混合物在氩气气氛下搅拌加热回流17h。将混合物冷却至室温并用饱和碳酸氢钠水溶液(100mL)淬灭，用乙酸乙酯(2×200mL)萃取有机组分。用卤水(100mL)洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，过滤并在减压下浓缩滤液以产生粗化合物。通过用5％甲醇/二氯甲烷洗脱的CombiflashTM色谱纯化粗产物，以得到为灰色固体的标题化合物(0.83g，68％)。1H NMR (400MHz，CDCl3)δ8.87(s，1H)，7.69(s，2H)，7.47(s，1H)，4.40(q，2H，J＝7Hz)， 3.35(m，1H)，2.47(m，2H)，1.40(t，
3H，J＝7Hz)，1.12(t，3H，J＝7Hz)，0.81 (m，2H)，0.63(m，2H)。LCMS：m/z＝302.2[M+]，RT＝
2.75分钟,(程序P1，柱W)。
3H，J＝7Hz)，1.12(t，3H，J＝7Hz)，0.81 (m，2H)，0.63(m，2H)。LCMS：m/z＝302.2[M+]，RT＝
2.75分钟,(程序P1，柱W)。
[0303] 实施例1：(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(5-乙基-1,3,4-噁二唑-2-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺
[0304]
[0305] 步骤1：2-氨基烟酸乙酯
[0306] 在60℃下，向化合物I(10g；72mmol；1当量)于乙醇(150mL)的搅拌溶液中逐滴加入亚硫酰氯(15.7mL；217mmol；3当量)，并将所得混合物加热回流17h。将混合物蒸发至干，并通过加入冰-冷饱和的NaHCO3水溶液和固体NaHCO3将pH调节至7。使用乙酸乙酯(3×500mL)从水层萃取有机组分，并用卤水溶液洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，过滤，并在真空下移除溶剂以得到为米白色固体的标题化合物(8g，66％)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.20(m，1H)，8.05(m，1H)，7.13(s，2H)，6.62(m，1H)， 4.28(q，2H，J＝7Hz)，1.30(t，3H，J＝7Hz)。
[0307] 步骤2：2-氨基-5-溴烟酸乙酯
[0308] 在0℃，向化合物II(15g；90.36mmol；1当量)于干THF(150mL)的搅拌溶液中分批加入NBS(16g；90.36mmol；1当量)，并将所得混合物在23℃搅拌18h。将混合物倒入冰-冷饱和NaHCO3水溶液，并用乙酸乙酯(3×200mL)萃取有机组分。然后用卤水溶液洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，过滤并蒸发至干以得到为米白色固体的标题化合物(22g，100％)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.29(d，1H，J＝3Hz)，8.12(d，1H， J＝2Hz)，7.31(s，2H)，4.29(q，
2H，J＝7Hz)，1.30(t，3H，J＝7Hz)。LCMS：m/z ＝245.0[M+]，247.0[M+2]，RT＝3.34分钟,(程序P1，柱W)。
2H，J＝7Hz)，1.30(t，3H，J＝7Hz)。LCMS：m/z ＝245.0[M+]，247.0[M+2]，RT＝3.34分钟,(程序P1，柱W)。
[0309] 步骤3：6-溴-咪唑并[1,2-a]吡啶-8-羧酸乙酯
[0310] 向化合物III(22g；90mmol；1当量)于乙醇(500mL)的搅拌溶液中逐滴加入碳酸氢钠(13g；179mmol；2当量)和氯乙醛溶液(～50％水溶液，60mL；449mmol；5当量)，并将混合物加热回流8h。然后将混合物蒸发至干，并使用冰-冷饱和的NaHCO3水溶液和固体NaHCO3将pH调节至7。使用乙酸乙酯(3×700mL)从水层萃取有机组分，并用卤水洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，过滤并在真空下移除溶剂以得到干残余物，其通过使用10-50％乙酸乙酯/己烷的硅胶(230-400目)柱色谱纯化，以得到为棕色固体的标题化合物(14.5g，60％)。1H NMR(DMSO-d6)δ9.16(s，1H)，8.02(s，1H)，7.84 (s，1H)，7.70(s，1H)，4.38(q，2H，J＝
7Hz)，1.30(t，3H，J＝7Hz)。LCMS：m/z ＝268.8[M+]，270.8[M+2]，RT＝2.77分钟,(程序P1，柱Y)。
7Hz)，1.30(t，3H，J＝7Hz)。LCMS：m/z ＝268.8[M+]，270.8[M+2]，RT＝2.77分钟,(程序P1，柱Y)。
[0311] 步骤4：6-溴-咪唑并[1,2-a]吡啶-8-羧酸酰肼
[0312] 向化合物IV(5g；18.6mmol；1当量)于乙醇(50mL)的搅拌溶液中加入水合肼(9.3 g；186mmol；10当量)，并将所得混合物加热回流5h。将混合物冷却，过滤并用己烷洗涤固体1
残余物，并在减压下干燥以得到为白色固体的标题化合物(4.5g，95％)。H NMR (DMSO-d6)δ
10.91(s，1H)，9.13(d，1H，J＝2Hz)，8.07(s，1H)，7.96(d，1H，J＝ 2Hz)，7.74(s，1H)4.86(s，
2H)。
残余物，并在减压下干燥以得到为白色固体的标题化合物(4.5g，95％)。H NMR (DMSO-d6)δ
10.91(s，1H)，9.13(d，1H，J＝2Hz)，8.07(s，1H)，7.96(d，1H，J＝ 2Hz)，7.74(s，1H)4.86(s，
2H)。
[0313] 步骤5：6-溴-咪唑并[1,2-a]吡啶-8-羧酸N'-丙酰-酰肼
[0314] 在0℃向化合物V(4.5g；17.6mmol；1当量)于干CH2Cl2(50mL)的搅拌溶液中逐滴加入TEA(7.6mL；52.9mmol；3当量)和丙酰氯并使所得混合物在23℃搅拌2h。将混合物倒入饱和的冰冷NaHCO3水溶液，并用乙酸乙酯(3×250mL)萃取有机组分。用卤水洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，过滤并在真空下移除溶剂以得到干残余物，其通过使用0-5％甲醇/二氯甲烷为洗脱剂的硅胶(230-400目)柱色谱纯化，以得到为米白色固体的标题化合物(1.2g，23％)。1H NMR(DMSO-d6)δ11.97(d，1H，J＝4Hz)， 10.73(d，1H，J＝4Hz)，9.19(d，1H，J＝2Hz)，8.10(s，1H)，8.01(d，1H，J＝2Hz)， 7.77(s，1H)，2.27(q，2H，J＝8Hz)，1.07(t，3H，J＝8Hz)。LCMS：m/z＝311.0[M+]， 313.0[M+2]，RT＝2.29分钟,(程序P1，柱W)。
[0315] 步骤6：6溴-8-(5-乙基-[1,3,4]噁二唑-2-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶
[0316] 将化合物VI(1.2g；3.8mmol；1当量)于干POCl3(20mL)的搅拌溶液加热回流2h。将混合物蒸发至干，并用饱和NaHCO3水溶液稀释。用乙酸乙酯(3×100mL)萃取有机组分并用卤水洗涤合并的萃取物，于无水硫酸钠上干燥，过滤并在真空下浓缩以得到干残余物。通过使用0-5％甲醇/二氯甲烷为洗脱剂的硅胶(230-400目)柱色谱纯化粗材料，以得到为浅棕色固体的标题化合物(0.6g，53％)。1H NMR(DMSO-d6)δ9.18(s，1H)，8.09 (s，1H)，7.99(s，1H)，7.76(s，1H)，3.32(s，3H)，3.02(q，2H)，1.36(t，3H)。 LCMS：m/z＝293.0[M+]，295.0[M+
2]，RT＝2.46分钟,(程序P1，柱W)。
2]，RT＝2.46分钟,(程序P1，柱W)。
[0317] 步骤7：8-(5-乙基-[1,3,4]噁二唑-2-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸甲酯[0318] 向化合物VII(0.6g；2.1mmol；1当量)于甲醇(20mL)的溶液中加入二异丙基乙胺(1.05mL；6.0mmol；3当量)，并用氩气将所得溶液除气5min，随后为加入PdCl2(dppf) (0.16g；0.21mmol；0.1当量)。然后再用氩气将混合物除气5min，并在反应釜中于50psi 压力和一氧化碳气氛下加热至90℃16h。通过 垫过滤混合物，并用饱和NaHCO3水溶液，随后是卤水洗涤滤液，。于无水Na2SO4上干燥有机层，并最终蒸发至干以得到粗材料。通过用0-10％甲醇/二氯甲烷作为洗脱剂洗脱的硅胶(100-200目)柱色谱纯化粗产物，以得到为浅棕色固体的标题化合物(0.3g，55％)。LCMS：m/z＝272.8[M+H]+，RT＝ 2.46分钟,(程序P1，柱Y)。
[0319] 步骤8：3-溴-8-(5-乙基-[1,3,4]噁二唑-2-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸甲酯[0320] 在0℃，向化合物VIII(0.32g；1.17mmol；1当量)于干THF(15mL)的搅拌溶液中分批加入NBS(0.12g；0.71mmol；0.6当量)，并将混合物搅拌30min。将混合物倒入冰-冷饱和的NaHCO3水溶液中，并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取有机组分。然后用卤水洗涤有机层，于无水硫酸钠上干燥，过滤并蒸发至干以得到粗材料。通过用0-5％甲醇/二氯甲烷洗脱的硅胶(100-200目)柱色谱纯化粗产物，以得到为棕色固体的标题化合物(0.21g， 51％)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.94(s，1H)，8.36(s，1H)，8.04(s，1H)，3.97(s，3H)， 3.03(q，2H，J＝8Hz)，1.36(t，3H)。LCMS：m/z＝350.8[M+]，352.8[M+2]，RT＝2.70 分钟,(程序P1，柱Y)。
[0321] 步骤9：8-(5-乙基-[1,3,4]噁二唑-2-基)-3-(5-甲基-噻吩-2-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸甲酯
[0322] 向反应管中的化合物IX(0.21g；0.6mmol；1当量)于干甲苯的搅拌溶液中加入化合物VIa(0.27g；0.72mmol；1.2当量)，并用氩气将所得混合物除气5min。然后向混合物中加入Pd(PPh3)4(0.06g；0.06mmol；0.1当量)，并用氩气将混合物进一步除气5min。密封反应管，并在搅拌下于115℃加热4h。通过 垫过滤混合物，并用饱和的NaHCO3水溶液，随后是卤水洗涤滤液。于无水Na2SO4上干燥有机层，将溶剂蒸发至干以得到粗材料。通过用0-5％甲醇/二氯甲烷洗脱的硅胶(230-400目)柱色谱纯化粗产物，以得到标题化合物(0.22g，100％)，其未经进一步纯化被直接用于下一步which was used for the next步骤。LCMS：
m/z＝368.8[M+H]+，RT＝3.07分钟,(程序P1，柱Y)。
m/z＝368.8[M+H]+，RT＝3.07分钟,(程序P1，柱Y)。
[0323] 步骤10：8-(5-乙基-[1,3,4]噁二唑-2-基)-3-(5-甲基-噻吩-2-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸
[0324] 在0℃向化合物X(0.26g，0.7mmol，1当量)于THF:甲醇(12mL，3:2:1)的溶液中加入一水合氢氧化锂(0.09g，2.12mmol，3当量)水溶液(1mL)，并将所得混合物在 23℃搅拌3h。在减压下移除混合物的溶剂，并用水稀释残余物，并用1N HCl酸化以将pH 调节为3。过滤沉淀的固体，并在真空下干燥残余物以得到标题化合物(0.12g，48％)。1H NMR(DMSO-d6)δ9.08(s，1H)，8.37(s，1H)，7.94(s，1H)，7.36(d，1H，J＝4Hz)， 7.03(m，1H)，3.03(q，2H，J＝8Hz)，
2.56(s，3H)，1.36(t，3H，J＝8Hz)。LCMS： m/z＝355.0[M+H]+，RT＝2.06分钟,(程序P1，柱V)。
2.56(s，3H)，1.36(t，3H，J＝8Hz)。LCMS： m/z＝355.0[M+H]+，RT＝2.06分钟,(程序P1，柱V)。
[0325] 步骤11：(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(5-乙基-1,3,4-噁二唑-2-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺
[0326] 在0℃，向化合物XI(80mg，0.22mmol，1当量)于DMF(5mL)的搅拌溶液中加入DIPEA(0.12mL，0.7mmol，3当量)和HATU(0.10g，0.3mmol，1.2当量)并使所得混合物搅拌15min。向混合物中加入(S)-1-(4H-[1,2,4]三唑-3-基)-乙胺盐酸盐(0.101g， 0.7mmol，3当量)，并将所得混合物在23℃搅拌另外16h。在真空下从混合物中移除溶剂，并用EtOAc稀释残余物，用饱和的碳酸氢钠水溶液、氯化铵水溶液和卤水洗涤。于无水硫酸钠上干燥有机相，过滤并浓缩至干。通过用0-5％甲醇/CH2Cl2洗脱的硅胶(230-400目) 柱色谱纯化粗产物，以得到为1
米白色固体的标题化合物(4mg，4％)。H NMR(DMSO-d6) δ13.86(s，1H)，9.39(s，1H)，9.19(s，1H)，8.53(s，1H)，7.65(s，1H)，7.75(m， 1H)，7.43(d，1H，J＝4Hz)，7.04(d，1H，J＝3Hz)，
5.36(m，1H)，3.05(q，2H， J＝8Hz)，2.55(s，3H)，1.56(d，3H，J＝7Hz)，1.38(t，3H，J＝8Hz)。
LCMS：m/z ＝449.2[M+H]+，RT＝2.76分钟,(程序P1，柱V)。
米白色固体的标题化合物(4mg，4％)。H NMR(DMSO-d6) δ13.86(s，1H)，9.39(s，1H)，9.19(s，1H)，8.53(s，1H)，7.65(s，1H)，7.75(m， 1H)，7.43(d，1H，J＝4Hz)，7.04(d，1H，J＝3Hz)，
5.36(m，1H)，3.05(q，2H， J＝8Hz)，2.55(s，3H)，1.56(d，3H，J＝7Hz)，1.38(t，3H，J＝8Hz)。
LCMS：m/z ＝449.2[M+H]+，RT＝2.76分钟,(程序P1，柱V)。
[0327] 实施例2：8-(2,5-二甲基-1H-咪唑-1-基)-N-((6-甲基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-2-基) 咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺
[0328]
[0329] 步骤1：6-溴咪唑并-[1,2-a]吡啶-8-基胺
[0330] 向化合物I(50g；0.26mol；1当量)于乙醇(2L)的搅拌溶液中逐滴加入碳酸氢钠 (46g；0.53mol；2当量)和氯乙醛溶液(～50％水溶液，86mL；0.66mol；2.5当量)，并将所得混合物加热回流17h。然后将混合物蒸发至干，并使用冰-冷饱和NaHCO3水溶液和固体NaHCO3将pH调节至7。使用乙酸乙酯(3×1000mL)从水层萃取有机组分，并用卤水洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，过滤并在真空下移除溶剂以得到干残余物，其通过用10-50％乙酸乙酯/己烷作为洗脱剂的硅胶(230-400目)柱色谱纯化，以得到为棕色固体的标题化合物(40g，71％)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.04(s，1H)，7.77(s，1H)， 7.44(s，1H)，6.31(s，1H)，5.99(s，2H)。LCMS：m/z＝212.0[M+]，214.0[M+2]，RT ＝2.55分钟,(程序P1，柱V)。
[0331] 步骤2：8-氨基-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸甲酯
[0332] 向化合物II(10g；47mmol；1当量)于甲醇(200mL)的溶液中加入二异丙基乙胺 (41mL；236mmol；5当量)，并用氩气将所得混合物除气5min。向混合物中加入PdCl2(dppf) (4g；4.72mmol；0.1当量)，并用氮气将所得溶液另外除气5min，然后在90℃，50psi 一氧化碳压力下在高压釜中加热16h。通过 垫过滤混合物，并用饱和NaHCO3水溶液，随后是卤水洗涤滤液。然后于无水Na2SO4上干燥有机层，并蒸发至干以得到粗材料。通过用0-10％甲醇/二氯甲烷作为洗脱剂洗脱的的硅胶(100-200目)柱色谱纯化粗产物，以得到为淡棕色固体的标题化合物(5g，55％)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.57(s，1H)， 7.97(s，1H)，7.5135(s，1H)，6.67(s，1H)，5.86(s，2H)，3.84(s,3H)。LCMS：m/z ＝191.8[M+H]+，RT＝2.03分钟,(程序P1，柱V)。
[0333] 步骤3：8-[双-(叔-丁氧基羰基)氨基]-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸甲酯
[0334] 在0℃向化合物III(3g；15.6mmol；1当量)于干THF(200mL)的搅拌溶液中逐滴加入TEA(6.52mL；46mmol；3当量)、boc酸酐(4.32mL，18.8mmol；1.2当量)，和催化剂量的DMAP，并将所得混合物加热回流17h。用水稀释混合物(300mL)，并用乙酸乙酯(3×200mL)萃取有机组分。用卤水洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，过滤并在真空下移除溶剂以得到干残余物，其通过用10-50％乙酸乙酯/己烷作为洗脱剂的硅胶(230-400目)柱色谱纯化，以得到为固体的标题化合物(2.9g，49％)。1H NMR(DMSO-d6) δ9.36(s，1H)，8.15(s，1H)，7.67(s，1H)，7.50(s，1H)，3.89(s，3H)，1.33(s， 18H)。LCMS：m/z＝391.8[M+H]+，RT＝3.18分钟,(程序P1，柱Y)。
[0335] 步骤4：3-溴-8-[双-(叔-丁氧酰)氨基]-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸甲酯
[0336] 在0℃向化合物IV(2.88g；7.3mmol；1当量)于干THF(80mL)的搅拌溶液中分批加入NBS(1.31g；7.3mmol；1当量)，并将所得混合物在0℃搅拌30min。然后将混合物的温度缓慢升至23℃并将混合物搅拌2h。将混合物倒入冰-冷饱和的NaHCO3水溶液中，并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取有机组分。然后用卤水洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，过滤并在真空下浓缩以得到干残余物，其通过用10-50％乙酸乙酯/己烷作为洗脱剂的硅胶(230-400目)柱色谱纯化，以得到为固体的标题化合物(3.46g，100％)as a solid。1H NMR(DMSO-d6)δ8.79(s，1H)，7.88(s，1H)，7.68(s，1H)，3.93(s，3H)，1.34 (s，18H)。LCMS：m/z＝469.8[M+]，
471.8[M+2]，RT＝3.54分钟,(程序P1，柱Y)。
471.8[M+2]，RT＝3.54分钟,(程序P1，柱Y)。
[0337] 步骤5：8-氨基-3-溴-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸甲酯
[0338] 在0℃向化合物V(3.5g；7.4mmol；1当量)于甲醇(50mL)的搅拌溶液中于30min 的时间逐滴加入4M甲醇盐酸(100mL)，并将所得混合物在23℃搅拌24h。将混合物倒入冰-冷饱和NaHCO3水溶液，并用乙酸乙酯(3×500mL)萃取有机组分。用卤水洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，过滤并在真空下浓缩以得到为固体的标题化合物(2g， 100％)。LCMS：m/z＝269.8[M+]，271.8[M+2]，RT＝2.91分钟,(程序P1，柱Y)。
[0339] 步骤6：3-溴-8-[1-二甲基氨基-乙亚基氨基]-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸甲酯[0340] 将化合物VI(0.42g；2.19mmol；1当量)于二甲基乙酰胺二甲基乙缩醛(1.5mL) 的搅拌溶液加热回流1h。将混合物蒸发至干以得到标题化合物(0.74g，100％)。LCMS： m/z＝339.0[M+]，341.0[M+2]，RT＝2.69分钟,(程序P1，柱W)。
[0341] 步骤7：3-溴-8-(2,5-二甲基-咪唑-1-基)-咪唑并-[1,2-a]吡啶-6-羧酸甲酯[0342] 在0℃向化合物VII(0.73g；2.15mmol；1当量)中逐滴加入HCl水溶液，随后是炔丙基胺(1.18g；21.53mmol；10当量)，并将所得混合物在0℃搅拌30min。然后将温度提升至100℃并搅拌另外3h。将混合物冷却至室温，并用冰-冷饱和的NaHCO3水溶液稀释，并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取有机组分。然后用卤水洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，过滤并浓缩至干。通过用0-5％甲醇/CH2Cl2洗脱的硅胶(230-400目)柱色谱纯化粗产物，以得到为1
棕色固体的标题化合物(0.38g，51％)。H NMR(CDCl3)δ8.99 (s，1H)，7.72(s，2H)，6.82(s，
1H)，4.01(s，3H)，2.20(s，3H)，2.00(s，3H)。 LCMS：m/z＝349.0[M+]，351.0[M+2]，RT＝2.79分钟,(程序P1，柱Y)。
棕色固体的标题化合物(0.38g，51％)。H NMR(CDCl3)δ8.99 (s，1H)，7.72(s，2H)，6.82(s，
1H)，4.01(s，3H)，2.20(s，3H)，2.00(s，3H)。 LCMS：m/z＝349.0[M+]，351.0[M+2]，RT＝2.79分钟,(程序P1，柱Y)。
[0343] 步骤8：8-(2,5-二甲基-咪唑-1-基)-3-(5-甲基-噻吩-2-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸甲酯
[0344] 向反应管中的化合物(0.38g；1.08mmol；1当量)的搅拌干甲苯溶液中加入化合物 VIa(0.63g；1.63mmol；1.5当量)，并用氩气将所得混合物除气5min。向混合物中加入 Pd(PPh3)4(0.12g；0.1mmol；0.1当量)，重复进行用氩气额外地除气5min。密封反应管并在115℃加热4h。通过 垫过滤混合物，并用饱和NaHCO3溶液、随后是卤水洗涤滤液。然后于无水Na2SO4上干燥有机层，过滤并在真空下移除溶剂以得到粗材料。通过用 0-5％甲醇/CH2Cl2洗脱的硅胶(230-400目)柱色谱纯化，以得到为浅棕色固体的标题化合物(0.18g，46％)。1H NMR(DMSO-d6)δ9.09(s，1H)，7.89(s，1H)，7.74(s，1H)，7.43(d，1H，J＝3Hz,)，7.04(d，1H，J＝3Hz)，6.71(s，1H)，3.91(s，3H)，2.56 (s，3H)，2.10(s，3H)，1.96(s，3H)。LCMS：m/z＝366.8[M+H]+，RT＝3.04分钟,(程序P1，柱W)。
[0345] 步骤9：8-(2,5-二甲基-咪唑-1-基)-3-(5-甲基-噻吩-2-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸
[0346] 在0℃，向化合物IX(0.18g，0.5mmol，1当量)于THF:甲醇:H2O(15mL，3:2:1) 的溶液中加入一水合氢氧化铝(0.062g，1.5mmol，3当量)于水(1mL)的溶液，并将所得混合物在23℃搅拌3h。在减压下移除溶剂，并将残余物用水稀释，用1N HCl酸化以将pH调节至3。通过过滤收集沉淀的固体，并在真空下干燥以得到标题化合物(0.15g， 88％)。1H NMR(DMSO-d6)δ9.83(s，1H)，9.09(s，1H)，7.89(s，1H)，7.74(s，1H)， 7.43(d，1H，J＝3Hz)，7.04(d，1H，J＝
3Hz)，6.71(s，1H)，2.50(s，3H)，2.10(s， 3H)，1.96(s，3H)。LCMS：m/z＝353.0[M+H]+，RT＝
2.03分钟,(程序P1，柱Y)。
3Hz)，6.71(s，1H)，2.50(s，3H)，2.10(s， 3H)，1.96(s，3H)。LCMS：m/z＝353.0[M+H]+，RT＝
2.03分钟,(程序P1，柱Y)。
[0347] 步骤10：8-(2,5-二甲基-1H-咪唑-1-基)-N-((6-甲基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-2-基) 咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺
[0348] 在0℃，向化合物X(0.07g，0.2mmol，1当量)于CH2Cl2(5mL)的搅拌溶液中加入DIPEA(0.1mL，0.6mmol，3当量)和HATU(0.092g，0.24mmol，1.2当量)并将所得混合物搅拌15min。向混合物中加入C-(6-甲基-吡啶-3-基)-甲胺(0.048g，0.30mmol， 1.5当量)并使所得混合物在23℃搅拌另外16h。在真空下从混合物中移除溶剂，并用EtOAc 稀释残余物，用饱和的碳酸氢钠水溶液、氯化铵水溶液和卤水洗涤。于无水硫酸钠上干燥有机层，过滤并浓缩至干。通过用0-5％甲醇/CH2Cl2洗脱的硅胶(230-400目)柱色谱纯化粗产物，以得到为米白色固体的标题化合物(0.01g，11％)。1H NMR(DMSO-d6)δ9.30 (t，1H，J＝6Hz)，9.11(s，1H)，
8.44(s，1H)，7.85(d，2H，J＝8Hz)，7.64(dd， 1H，J＝2，8Hz)，7.43(d，1H，J＝3Hz,)，7.21(d，
1H，J＝8Hz)，7.03(d，1H，J＝ 3Hz)，6.71(s，1H)，4.48(d，2H，J＝6Hz)，2.55(s，3H)，2.42(s，
3H)，2.11(s， 3H)，1.97(s，3H)。LCMS：m/z＝457.2[M+H]+，RT＝2.96分钟,(程序P1，柱Y)。
8.44(s，1H)，7.85(d，2H，J＝8Hz)，7.64(dd， 1H，J＝2，8Hz)，7.43(d，1H，J＝3Hz,)，7.21(d，
1H，J＝8Hz)，7.03(d，1H，J＝ 3Hz)，6.71(s，1H)，4.48(d，2H，J＝6Hz)，2.55(s，3H)，2.42(s，
3H)，2.11(s， 3H)，1.97(s，3H)。LCMS：m/z＝457.2[M+H]+，RT＝2.96分钟,(程序P1，柱Y)。
[0349] 实施例3：(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(3,5-二甲基-4H-1,2,4-三唑-4-基)-3-(5- 甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺
[0350]
[0351] 化合物VI依照实施例2描述的实验步骤制备。
[0352] 步骤6：3-溴-8-(3,5-二甲基-[1,2,4]三唑-4-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸甲酯
[0353] 将化合物VI(0.6g；2.22mmol；1当量)于二甲基乙酰胺二甲基乙缩醛(6mL)的溶液在搅拌下加热回流1h。将混合物蒸发至干，将残余物冷却至0℃后，逐滴加入HCl(1mL)，随后是乙酸肼(0.98g；13.33mmol；6当量)，并将所得混合物在0℃搅拌30min。然后将温度提升至130℃，继续搅拌另外2h。将混合物冷却至室温，并用冰-冷饱和的NaHCO3水溶液稀释，用乙酸乙酯(3×50mL)萃取有机组分。然后用卤水洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥并浓缩至干。通过使用0-5％甲醇/CH2Cl2洗脱的硅胶(230-400目)柱色谱纯化粗产物，以得到为棕色固体的标题化合物(0.34g，44％)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.90 (s，1H)，8.03(s，1H)，7.94(s，1H)，3.94(s，3H)，2.14(s，6H)。LCMS：m/z＝350.0 [M+]，352.0[M+2]，RT＝2.42分钟,(程序P1，柱Y)。
[0354] 步骤7：8-(3,5-二甲基-[1,2,4]三唑-4-基)-3-(5-甲基-噻吩-2-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸甲酯
[0355] 向反应管中搅拌的化合物VII(0.34g；0.97mmol；1当量)的干DMF溶液中加入化合物VIa(0.57g；1.46mmol；1.5当量)，并用氩气将所得混合物除气5min。向混合物中加入Pd(PPh3)4(0.12g；0.09mmol；0.1当量)，并重复用氩气除气约5min，然后密封反应管，并在130℃加热4h。用冰冷水将混合物淬灭，并用EtOAc萃取有机组分。用饱和的碳酸氢钠水溶液，氯化铵水溶液和卤水洗涤有机层。于无水硫酸钠上干燥有机层，过滤并浓缩至干。通过用0-5％甲醇/CH2Cl2洗脱的硅胶(100-200目)柱色谱纯化粗产物，以得到为米白色固体的标题化合物(0.29g，80％)。LCMS：m/z＝368.0[M+H]+，RT＝2.97分钟,(程序P1，柱Y)。
[0356] 步骤8：8-(3,5-二甲基-[1,2,4]三唑-4-基)-3-(5-甲基-噻吩-2-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸
[0357] 在0℃向化合物VIII(0.29g，0.79mmol，1当量)于THF:甲醇:H2O(15mL，3:2:1) 的溶液中加入于水(1mL)中的一水合氢氧化锂溶液(0.1g，2.37mmol，3当量)，并将所得混合物在23℃搅拌30min。在减压下移除溶剂，并用水稀释残余物，用1N HCl酸化以将pH调节至3，并用EtOAc萃取有机组分。于无水硫酸钠上干燥有机层，过滤并浓缩至干以得到为米白色固体的标题化合物(0.28g，99％)。1H NMR(DMSO-d6)δ9.11(s， 1H)，8.01(s，1H)，7.91(s，1H)，7.41(d，1H，J＝4Hz)，7.03(m，1H)，2.25(s， 6H)。LCMS：m/z＝354.2[M+H]+，RT＝2.08分钟,(程序P1，柱Y)。
[0358] 步骤9：(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(3,5-二甲基-4H-1,2,4-三唑-4-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺
[0359] 在23℃向化合物IX(0.3g，0.85mmol，1当量)于DMF(50mL)的搅拌溶液中加入TEA(0.8mL，4.25mmol，5当量)、T3P(0.4mL，1.30mmol，1.5当量)和(S)-1-(4H-[1,2,4] 三唑-3-基)-乙胺盐酸盐(0.15g，1.30mmol，1.5当量)，然后将所得混合物在130℃加热 4h。用冰冷水将混合物淬灭，并用EtOAc萃取有机组分。用饱和的碳酸氢钠水溶液、氯化铵水溶液和卤水洗涤有机层。于无水硫酸钠上干燥有机层，过滤并浓缩至干。首先通过用 0-10％甲醇/CH2Cl2洗脱的硅胶(100-200目)柱色谱纯化，再通过制备TLC纯化粗产物，以得到为米白色固体的标题化合物(0.015g，4％)。1H NMR(DMSO-d6)δ13.86(d，1H， J＝2.4Hz)，9.16(m，2H)，8.48(s，1H)，8.04(s，1H)，7.86(s，1H)，7.43(s，1H)， 7.04(s，1H)，5.33(m，1H)，2.55(s，
3H)，2.20(s，6H)，1.55(m，3H)。LCMS： m/z＝448.2[M+H]+，RT＝2.45分钟,(程序P1，柱Y)。
3H)，2.20(s，6H)，1.55(m，3H)。LCMS： m/z＝448.2[M+H]+，RT＝2.45分钟,(程序P1，柱Y)。
[0360] 实施例4：(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(5-(二氟甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-3-(5- 甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺
[0361]
[0362] 步骤1：6-溴-咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基胺
[0363] 向化合物I(50g；0.26mol；1当量)于乙醇(2L)的搅拌溶液中，逐滴加入碳酸氢钠(46g；0.53mol；2当量)和氯乙醛溶液(～50％水溶液，86mL；0.66mol；2.5当量) 并将所得混合物加热回流17h。将混合物蒸发至干，并使用冰-冷饱和的NaHCO3水溶液和固体NaHCO3将pH调节至7。使用乙酸乙酯(3×1000mL)从水层萃取有机组分并用卤水洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，过滤并在真空下移除溶剂以得到干残余物，其通过使用10-50％乙酸乙酯/己烷作为洗脱剂的硅胶(230-400目)柱色谱纯化以得到为棕色固体的标题化合物(40g，71％)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.04(s，1H)，7.77(s，1H)， 7.44(s，1H)，6.31(s，1H)，5.99(s，2H)。
LCMS：m/z＝212.0[M+]，214.0[M+2]，RT ＝2.55分钟,(程序P1，柱V)。
LCMS：m/z＝212.0[M+]，214.0[M+2]，RT ＝2.55分钟,(程序P1，柱V)。
[0364] 步骤2：8-氨基-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸甲酯
[0365] 向化合物II(10g；47.2mmol；1当量)于甲醇(200mL)的溶液中加入二异丙基乙胺(41mL；236mmol；5当量)，并用氩气将所得溶液除气5min。向混合物中加入PdCl2(dppf) (4g；4.72mmol；0.1当量)并再用氩气将所得溶液另外除气5min。然后将溶液在高压釜中在90℃于50psi一氧化碳压力下加热16h。通过 垫过滤混合物并用饱和NaHCO3水溶液随后是卤水洗涤滤液。然后于Na2SO4上干燥有机层，过滤并蒸发至干以得到粗材料。通过用
0-10％甲醇/二氯甲烷作为洗脱剂洗脱的硅胶(100-200目)柱色谱纯化粗材料，以得到为浅棕色固体的标题化合物(5g，55％)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.57(s，1H)，7.97 (s，1H)，7.51(s，
1H)，6.67(s，1H)，5.86(s，2H)，3.84(s，3H)。LCMS：m/z＝191.8 [M+H]+，RT＝2.03分钟,(程序P1，柱V)。
0-10％甲醇/二氯甲烷作为洗脱剂洗脱的硅胶(100-200目)柱色谱纯化粗材料，以得到为浅棕色固体的标题化合物(5g，55％)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.57(s，1H)，7.97 (s，1H)，7.51(s，
1H)，6.67(s，1H)，5.86(s，2H)，3.84(s，3H)。LCMS：m/z＝191.8 [M+H]+，RT＝2.03分钟,(程序P1，柱V)。
[0366] 步骤3：8-叠氮-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸甲酯
[0367] 在0℃向化合物III(10g；52.36mmol；1当量)于干THF(600mL)的搅拌溶液中逐滴加入叔丁基亚硝酸酯(32mL；230mmol；4.4当量)和叠氮三甲基硅烷(16mL，115 mmol，2.2当量)0℃，并将所得混合物在23℃搅拌17h。将混合物蒸发至干以得到粗材料，其通过用0-50％乙酸乙酯/己烷作为洗脱剂洗脱的硅胶(100-200目)柱色谱纯化，以得到为浅棕色固体的标题化合物(9g，80％)。1H NMR(DMSO-d6)δ9.17(s，1H)，8.19 (s，1H)，7.71(s，1H)，7.11(s，1H)，
3.87(s，3H)。LCMS：m/z＝218.2[M+H]+，RT ＝2.69分钟,(程序P1，柱V)。
3.87(s，3H)。LCMS：m/z＝218.2[M+H]+，RT ＝2.69分钟,(程序P1，柱V)。
[0368] 步骤4：8-(5-二氟甲基-4-乙氧基羰基l-[1,2,3]三唑-1-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸甲酯
[0369] 向DBU(25mL；166mmol；1.2当量)于干DMF:THF(1L；1:1)的搅拌溶液中缓慢加入4,4-二氟-3-氧亚基-丁酸乙酯(22mL；207mmol；1.5当量)并将所得混合物在23℃搅拌30min。
然后将混合物冷却至0℃并逐滴加入化合物IV(30g；138.2mmol；1当量) 于DMF:THF中的溶液，并使混合物在23℃搅拌17h。用水(1L)稀释混合物，并用乙酸乙酯(3×700mL)萃取有机组分。用卤水洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，过滤并在真空下移除溶剂以得到干残余物，其通过用10-50％乙酸乙酯/己烷作为洗脱剂的硅胶 (230-400目)柱色谱进行色谱纯化，以得到为固体的标题化合物(32g，65％)。1H NMR (DMSO-d6)δ9.65(s，1H)，8.33(s，
1H)，8.10(s，1H)，7.74(s，1H)，7.46(m，1H)， 4.43(q，J＝7Hz，2H)，3.96(s，3H)，1.36(t，J＝
7Hz，3H)。LCMS：m/z＝365.8[M+H]+， RT＝2.97分钟,(程序P1，柱Y)。
然后将混合物冷却至0℃并逐滴加入化合物IV(30g；138.2mmol；1当量) 于DMF:THF中的溶液，并使混合物在23℃搅拌17h。用水(1L)稀释混合物，并用乙酸乙酯(3×700mL)萃取有机组分。用卤水洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，过滤并在真空下移除溶剂以得到干残余物，其通过用10-50％乙酸乙酯/己烷作为洗脱剂的硅胶 (230-400目)柱色谱进行色谱纯化，以得到为固体的标题化合物(32g，65％)。1H NMR (DMSO-d6)δ9.65(s，1H)，8.33(s，
1H)，8.10(s，1H)，7.74(s，1H)，7.46(m，1H)， 4.43(q，J＝7Hz，2H)，3.96(s，3H)，1.36(t，J＝
7Hz，3H)。LCMS：m/z＝365.8[M+H]+， RT＝2.97分钟,(程序P1，柱Y)。
[0370] 步骤5：3-溴-8-(5-二氟甲基-4-乙氧基羰基-[1,2,3]三唑-1-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸甲酯
[0371] 在0℃向化合物V(10g；27.4mmol；1当量)于干THF(150mL)的搅拌溶液中分批加入NBS(7.4g；41.1mmol；1.5当量)，并将所得混合物在0℃搅拌30min。将混合物倒入冰-冷饱和的NaHCO3水溶液中，并用乙酸乙酯(3×500mL)萃取有机组分。然后用卤水洗涤有机层，于无水硫酸钠上干燥并在真空下移除溶剂以得到干残余物，其通过用 10-50％乙酸乙酯/己烷作为洗脱剂的硅胶(230-400目)重力柱进行色谱纯化，以得到为固体的标题化合物(10g，82％)。1H NMR(DMSO-d6)δ9.00(s，1H)，8.27(s，1H)，7.96 (s，1H)，7.44(m，1H)，4.43(q，2H，J＝5Hz)，3.96(s，3H)，1.35(t，3H，J＝7Hz)。LCMS：m/z＝443.8[M+]，445.8[M+2]，RT＝3.20分钟,(程序P1，柱Y)。
[0372] 步骤6：3-溴-8-(4-羧基-5-二氟甲基-[1,2,3]三唑-1-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸
[0373] 在0℃向化合物VI(7g，15.8mmol，1当量)于THF:甲醇:H2O(115mL，3:2:1)的溶液中加入一水合氢氧化锂(2g，47.3mmol，3当量)于水的(1mL)溶液，并将所得混合物在23℃搅拌3h。在减压下移除溶剂并用水洗涤残余物，用1N HCl酸化以将pH调节至3。通过过滤收集沉淀的固体并在真空下干燥以得到标题化合物(5g，80％)。1H NMR (DMSO-d6)δ14.01(s，2H)，
8.97(s，1H)，8.19(s，1H)，7.93(s，1H)，7.46(m， 1H)。LCMS：m/z＝402.0[M+]，403.8[M+2]，RT＝0.84分钟,(程序P1，柱Y)。
8.97(s，1H)，8.19(s，1H)，7.93(s，1H)，7.46(m， 1H)。LCMS：m/z＝402.0[M+]，403.8[M+2]，RT＝0.84分钟,(程序P1，柱Y)。
[0374] 步骤7：3-溴-8-(5-二氟甲基-[1,2,3]三唑-1-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸[0375] 将化合物VII(5g；12.4mmol；1当量)在200℃加热1h以得到标题化合物(3.5g； 80％)。1H NMR(DMSO-d6)δ14.01(s，1H)，8.96(s，1H)，8.43(s，1H)，8.15(s， 1H)，7.94(s，
1H)，7.38(m，1H)。LCMS：m/z＝357.8[M+]，359.8[M+2]，RT＝1.71 分钟,(程序P1，柱Y)。
1H)，7.38(m，1H)。LCMS：m/z＝357.8[M+]，359.8[M+2]，RT＝1.71 分钟,(程序P1，柱Y)。
[0376] 步骤8：3-溴-8-(5-二氟甲基-[1,2,3]三唑-1-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸[(S)-1-(4H-[1,2,4] 三唑-3-基)-乙基]-胺
[0377] 在0℃向化合物VIII(2g，5.6mmol，1当量)于DMF(20mL)的搅拌溶液中加入 DIPEA(3mL，16.8mmol，3当量)和HATU(3.2g，8.40mmol，1.5当量)并将所得混合物搅拌15min。向混合物中加入(S)-1-(4H-[1,2,4]三唑-3-基)-乙胺盐酸盐(0.94g，8.40mmol， 1.2当量)并使所得混合物在23℃搅拌另外16h。在真空下从混合物中移除溶剂，并用EtOAc 稀释残余物。用饱和碳酸氢钠水溶液，氯化铵水溶液和卤水洗涤有机层。于无水硫酸钠上干燥有机层，过滤并浓缩至干。通过用0-5％甲醇/CH2Cl2洗脱的硅胶(230-400目)柱色谱纯化粗产物，以得到为棕色固体的标题化合物(1g，49％)。1H NMR(DMSO-d6)δ13.94 (d，1H)，9.48(dd，1H，J＝
8Hz)，9.36(d，1H)，8.45(d，2H)，8.29(d，1H，J＝12 Hz)，7.93(m，1H)，7.52(m，1H)，5.35(q，
1H，J＝8Hz)，1.55(d，3H，J＝7Hz)。 LCMS：m/z＝452.2[M+]，454.2[M+2]，RT＝2.40分钟,(程序P1，柱Y)。
8Hz)，9.36(d，1H)，8.45(d，2H)，8.29(d，1H，J＝12 Hz)，7.93(m，1H)，7.52(m，1H)，5.35(q，
1H，J＝8Hz)，1.55(d，3H，J＝7Hz)。 LCMS：m/z＝452.2[M+]，454.2[M+2]，RT＝2.40分钟,(程序P1，柱Y)。
[0378] 步骤9：(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(5-(二氟甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-3-(5- 甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺
[0379] 向搅拌的反应管中的化合物IX(0.7g；1.55mmol；1当量)的干DMF溶液中加入化合物VIa(0.9g；2.32mmol；1.5当量)并用氩气将所得混合物除气5min。向混合物中加入Pd(PPh3)4(0.2g；0.15mmol；0.1当量)并重复用氩气额外除气约5min。密封反应管并在115℃加热4h。通过 垫过滤混合物，并用饱和NaHCO3水溶液随后是卤水洗涤滤液。然后于Na2SO4上干燥有机层，过滤并在真空下移除溶剂以得到粗材料。通过用0-5％甲醇/CH2Cl2洗脱的硅胶(230-400目)柱色谱纯化粗产物，以得到为浅棕色固体的标题化合物(0.29g，40％)。1H NMR(DMSO-d6)δ13.56(s，1H)，9.20(s，1H)，9.00(d，1H)， 8.32(s，1H)，8.23(s，
1H)，7.85(s，1H)，7.41(m，3H)，7.03(s，1H)，5.37(q， 1H)，2.50(s，3H)，1.60(s，3H)。LCMS：
m/z＝470.2[M+H]+，RT＝2.87分钟,(程序 P1，柱Y)。
1H)，7.85(s，1H)，7.41(m，3H)，7.03(s，1H)，5.37(q， 1H)，2.50(s，3H)，1.60(s，3H)。LCMS：
m/z＝470.2[M+H]+，RT＝2.87分钟,(程序 P1，柱Y)。
[0380] 实施例5：8-(5-(二氟甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-3-(5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-基)-N-((6-甲基吡啶-3-基)甲基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺
[0381]
[0382] 化合物VIII依照为实施例4中描述的实验步骤制备。
[0383] 步骤8：3-溴-8-(5-二氟甲基-[1,2,3]三唑-1-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸(6-甲基-吡啶-3- 基甲基)-胺
[0384] 在23℃向化合物VIII(1g，2.8mmol，1当量)于DMF(10mL)的搅拌溶液中加入 DIPEA(5mL，26mmol，8当量)和HATU(1.6g，4.20mmol，1.5当量)，并将所得混合物搅拌15min。向混合物中加入C-(6-甲基-吡啶-3-基)-甲基胺(520mg，4.20mmol，1.5当量)并使所得混合物在23℃搅拌额外16h。用冰冷水(100mL)将混合物淬灭，并用EtOAc (2×400mL)萃取有机组分。
用饱和的碳酸氢钠水溶液、氯化铵水溶液和卤水洗涤有机层。于无水硫酸钠上干燥有机层，过滤并浓缩至干。通过用0-4％甲醇/CH2Cl2洗脱的硅胶 (100-200目)柱色谱纯化粗残余物，以得到为棕色固体的标题化合物(0.73g，57％)。1H NMR (DMSO-d6)δ9.51(t，1H，J＝6Hz)，
9.11(s，1H)，8.46(m，2H)，8.23(s，1H)，7.93 (s，1H)，7.65(dd，1H，J＝8，2Hz)，7.39(t，1H，J＝54Hz)，7.23(d，1H，J＝8Hz)， 4.52(d，2H，J＝5.6Hz)，2.44(s，3H)。LCMS：m/z＝462.0[M+]，464.2[M+2]，RT＝2.80 分钟,(程序P1，柱Y)。
用饱和的碳酸氢钠水溶液、氯化铵水溶液和卤水洗涤有机层。于无水硫酸钠上干燥有机层，过滤并浓缩至干。通过用0-4％甲醇/CH2Cl2洗脱的硅胶 (100-200目)柱色谱纯化粗残余物，以得到为棕色固体的标题化合物(0.73g，57％)。1H NMR (DMSO-d6)δ9.51(t，1H，J＝6Hz)，
9.11(s，1H)，8.46(m，2H)，8.23(s，1H)，7.93 (s，1H)，7.65(dd，1H，J＝8，2Hz)，7.39(t，1H，J＝54Hz)，7.23(d，1H，J＝8Hz)， 4.52(d，2H，J＝5.6Hz)，2.44(s，3H)。LCMS：m/z＝462.0[M+]，464.2[M+2]，RT＝2.80 分钟,(程序P1，柱Y)。
[0385] 步骤9：8-(5-(二氟甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-3-(5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-基)-N-((6-甲基吡啶-3-基)甲基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺
[0386] 向反应管中搅拌的化合物IX(50mg；0.11mmol；1当量)的干DMF溶液中加入2- 溴-5-甲基-[1,3,4]噻二唑(20mg；0.11mmol；1当量)，六甲基二锡(50mg；0.16mmol； 1.5当量)，并用氩气将所得混合物除气5min。向混合物中加入Pd(PPh3)4(10mg；0.01mmol； 0.1当量)并重复用氩气额外除气约5min，密封反应管然后在130℃加热2h。用冰冷水将混合物淬灭(50mL)，并用EtOAc萃取有机组分(2×150mL)。用饱和的碳酸氢钠水溶液、氯化铵水溶液和卤水洗涤合并的有机层。于无水硫酸钠上干燥有机层，过滤并浓缩至干。首先通过用0-2％甲醇/CH2Cl2洗脱的硅胶(100-200目)柱色谱纯化，再使用制备TLC进一步纯化粗产物，以得到为米白色的标题化合物(20mg，13％)。1H NMR(DMSO-d6)δ10.27 (s，1H)，9.47(t，1H，J＝
6Hz)，8.53(s，1H)，8.49(s，1H)，8.45(m，2H)，7.66 (dd，1H，J＝8，2Hz)，7.41(t，1H，J＝
53Hz)，7.23(d，1H，J＝8Hz)，4.53(d，2H， J＝6Hz)，2.84(s，3H)，2.44(s，3H)。LCMS：m/z＝
482.2[M+H]+，RT＝2.94分钟,(程序P1，柱Y)。
6Hz)，8.53(s，1H)，8.49(s，1H)，8.45(m，2H)，7.66 (dd，1H，J＝8，2Hz)，7.41(t，1H，J＝
53Hz)，7.23(d，1H，J＝8Hz)，4.53(d，2H， J＝6Hz)，2.84(s，3H)，2.44(s，3H)。LCMS：m/z＝
482.2[M+H]+，RT＝2.94分钟,(程序P1，柱Y)。
[0387] 实施例6：8-(5-乙基-1H-吡唑-1-基)-N-((6-甲基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺
[0388]
[0389] 步骤1：6-溴-咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基胺
[0390] 向化合物I(50g；0.26mol；1当量)于乙醇(2L)的搅拌溶液中逐滴加入碳酸氢钠 (46g；0.53mol；2当量)和氯乙醛溶液(～50％水溶液，86mL；0.66mol；2.5当量)，并将所得混合物加热回流17h。然后将混合物蒸发至干，并使用冰-冷的饱和NaHCO3水溶液和NaHCO3固体将pH调节至7。使用乙酸乙酯(3×1000mL)从水层萃取有机组分并用卤水洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，并在真空下移除溶剂以得到干残余物，其通过使用10-50％乙酸乙酯/己烷作为洗脱剂的硅胶(230-400目)柱色谱纯化，以得到为棕色固体的标题化合物(40g，71％)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.04(s，1H)，7.77(s，1H)， 7.44(s，1H)，6.31(s，1H)，5.99(s，2H)。LCMS：m/z＝212.0[M+]，214.0[M+2]，RT ＝2.55分钟,(程序P1，柱V)。
[0391] 步骤2：8-氨基-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸甲酯
[0392] 向化合物II(10g；47.2mmol；1当量)于甲醇(200mL)的溶液中加入二异丙基乙胺(41mL；236mmol；5当量)，并用氩气将所得混合物除气5min。向混合物中加入 PdCl2(dppf)(4g；4.7mmol；0.1当量)，并用氩气将所得混合物另外除气5min，然后在高压釜中在90℃于50psi的一氧化碳压力下加热16h。通过 垫过滤混合物，并用饱和的NaHCO3水溶液随后是卤水洗涤滤液。然后于无水Na2SO4上干燥有机层，过滤并蒸发至干以得到粗材料。通过用0-10％甲醇/二氯甲烷作为洗脱剂洗脱的硅胶(100-200目)柱色谱纯化粗产物，以得到为浅棕色固体的标题化合物(5g，55％)。1H NMR(DMSO-d6) δ8.57(s，1H)，7.97(s，1H)，7.5135(s，1H)，6.67(s，1H)，5.86(s，2H)，3.84(s， 3H)。LCMS：m/z＝191.8[M+H]+，RT＝2.03分钟,(程序P1，柱V)。
[0393] 步骤3：8-[双-(叔-丁氧基羰基)氨基]-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸甲酯
[0394] 在0℃向化合物III(3g；15.6mmol；1当量)于干THF(200mL)的搅拌溶液中逐滴加入TEA(6.52mL；46mmol；3当量)、boc酸酐(4.32mL，18.8mmol；1.2当量)以及催化剂量的DMAP，并将所得混合物加热回流17h。用水(300mL)稀释混合物并用乙酸乙酯(3×200mL)萃取有机组分。用卤水洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，过滤并在真空下移除溶剂以得到干残余物，其通过使用10-50％乙酸乙酯/己烷作为洗脱剂的硅胶(230-400目)柱色谱纯化，以1
得到为固体的标题化合物(2.9g，49％)。H NMR(DMSO-d6) δ9.36(s，1H)，8.15(s，1H)，7.67(s，1H)，7.50(s，1H)，3.89(s，3H)，1.33(s， 18H)。LCMS：m/z＝391.8[M+H]+，RT＝3.18分钟,(程序P1，柱Y)。
得到为固体的标题化合物(2.9g，49％)。H NMR(DMSO-d6) δ9.36(s，1H)，8.15(s，1H)，7.67(s，1H)，7.50(s，1H)，3.89(s，3H)，1.33(s， 18H)。LCMS：m/z＝391.8[M+H]+，RT＝3.18分钟,(程序P1，柱Y)。
[0395] 步骤4：3-溴-8-[双-(叔-丁氧基羰基)氨基]-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸甲酯[0396] 在0℃向化合物IV(2.88g；7.3mmol；1当量)于干THF(80mL)的搅拌溶液中分批加入NBS(1.31g；7.3mmol；1当量)，并将所得混合物在0℃搅拌30min。将混合物的温度缓慢升至23℃，并将混合物搅拌2h。将混合物倒入冰-冷饱和的NaHCO3水溶液中，并用乙酸乙酯(3×
50mL)萃取有机组分。然后用卤水洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，并在真空下浓缩以得到干残余物，其通过使用10-50％乙酸乙酯/己烷作为洗脱剂的硅胶(230-400目)柱色谱纯化以得到为固体的标题化合物(3.46g，100％)。1H NMR (DMSO-d6)δ8.79(s，1H)，7.88(s，1H)，7.68(s，1H)，3.93(s，3H)，1.34(s，18H)。 LCMS：m/z＝469.8[M+]，471.8[M+2]，RT＝
3.54分钟,(程序P1，柱Y)。
50mL)萃取有机组分。然后用卤水洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，并在真空下浓缩以得到干残余物，其通过使用10-50％乙酸乙酯/己烷作为洗脱剂的硅胶(230-400目)柱色谱纯化以得到为固体的标题化合物(3.46g，100％)。1H NMR (DMSO-d6)δ8.79(s，1H)，7.88(s，1H)，7.68(s，1H)，3.93(s，3H)，1.34(s，18H)。 LCMS：m/z＝469.8[M+]，471.8[M+2]，RT＝
3.54分钟,(程序P1，柱Y)。
[0397] 步骤5：8-氨基-3-溴-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸甲酯
[0398] 在0℃向化合物V(3.5g；7.4mmol；1当量)于甲醇(50mL)的搅拌溶液中于30min 的时间逐滴加入4M甲醇HCl(100mL)，并将所得溶液在23℃搅拌24h。将混合物倒入冰-冷饱和的NaHCO3溶液中并用乙酸乙酯(3×500mL)萃取有机组分。用卤水洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，并在真空下浓缩以得到为固体的标题化合物(2g，100％)。 LCMS：m/z＝269.8[M+]，271.8[M+2]，RT＝2.91分钟,(程序P1，柱Y)。
[0399] 步骤6：3-溴-8-肼基-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸甲酯
[0400] 将搅拌的于浓HCl(7mL)中的化合物VI(0.7g；2.5mmol；1当量)的冷却(-10℃) 溶液中加入亚硝酸钠水溶液(0.35g；5.1mmol；2当量)并将所得混合物在-10℃搅拌1h。然后加入脱水氯化锡(1.69g；7.51mmol；3当量)，并使所得混合物在23℃搅拌1h。用冰-冷饱和的NaHCO3水溶液和NaHCO3固体处理混合物以将pH调节为7。用乙酸乙酯(3 ×500mL)萃取水相并用卤水洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，过滤并在真空下浓缩以得到干残余物，其通过使用10-50％乙酸乙酯/己烷作为洗脱剂的硅胶(230-400目) 柱色谱纯化以得到为米白色固体的标题化合物(0.3g，43％)。LCMS：m/z＝285.0[M+]， 286.8[M+2]，RT＝2.69分钟,(程序P1，柱Y)。
[0401] 步骤7：3-溴-8-(3-乙氧基羰基-5-乙基-吡唑-1-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸甲酯
[0402] 向化合物VII(0.3g；1mmol；1当量)于乙醇的搅拌溶液中加入2-[1-二甲基氨基-甲亚基]-3-氧亚基-丙酸乙酯(0.41g；2.1mmol；2当量)，并将所得混合物加热回流4h。将混合物冷却至室温，加入冰-冷饱和的NaHCO3水溶液，并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取有机组分。然后用卤水洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥并浓缩至干。通过用0-5％甲醇/CH2Cl2洗脱的硅胶(230-400目)柱色谱纯化，以得到标题化合物(0.32g，73％)。LCMS： m/z＝421.0[M+]，423.0[M+2]，RT＝3.30分钟,(程序P1，柱Y)。
[0403] 步骤8：8-(3-乙氧基羰基-5-乙基-吡唑-1-基)-3-(5-甲基-噻吩-2-基)-咪唑并[1,2-]吡啶-6- 羧酸甲酯
[0404] 向反应管中的搅拌的化合物VIII(0.4g；0.91mmol；1当量)的干DMF溶液中加入化合物VIa(0.53g；1.3mmol；1.5当量)并用氩气将所得混合物除气5min。向混合物中加入Pd(PPh3)4(0.1g；0.09mmol；0.1当量)并重复用氩气额外除气约5min。密封反应管并在115℃加热4h。通过 垫过滤混合物，并用饱和NaHCO3水溶液随后是卤水洗涤滤液。然后于Na2SO4上干燥有机层，过滤并在真空下移除溶剂以得到粗材料。通过用 0-50％乙酸乙酯/己烷洗脱的硅胶(230-400目)柱色谱纯化粗产物，以得到标题化合物(0.25 g，61％)。1H NMR(DMSO-d6)δ9.12(s，1H)，8.09(s，1H)，7.90(s，1H)，7.85(s， 1H)，7.43(d，1H，J＝3Hz)，7.05(d，1H)，4.37(q，2H，J＝7Hz)，4.28(q，2H，J ＝7Hz)，2.82(q，2H，J＝1Hz)，2.56(s，3H)，1.30(m，6H)，1.00(t，3H，J＝7Hz)。 LCMS：m/z＝439.0[M+H]+，RT＝3.56分钟,(程序P1，柱Y)。
[0405] 步骤9：8-(3-羧基-5-乙基-吡唑-1-基)-3-(5-甲基-噻吩-2-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸
[0406] 在0℃向化合物IX(0.25g，0.5mmol，1当量)于THF:甲醇:H2O(15mL，3:2:1)的溶液中加入一水合氢氧化锂(46mg，1.1mmol，3当量)于水(1mL)的溶液，并将所得混合物在23℃搅拌3h。在减压下移除溶剂，并用水稀释残余物，用1N HCl酸化以将pH 调节至3。通过过滤收集沉淀的固体并在真空下干燥以得到标题化合物(0.2g，87％)。1H NMR(DMSO-d6)δ9.11(s，1H)，8.04(s，1H)，7.89(s，1H)，7.80(s，1H)，7.42(d， 1H，J＝3Hz)，7.03(d，1H，J＝3Hz)，2.87(q，2H，J＝7Hz)，2.56(s，3H)，0.88 (t，3H，J＝7Hz)。LCMS：m/z＝397.0[M+H]+，RT＝
1.57分钟,(程序P1，柱Y)。
1.57分钟,(程序P1，柱Y)。
[0407] 步骤10：8-(5-乙基-吡唑-1-基)-3-(5-甲基-噻吩-2-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸
[0408] 将化合物X(0.17g；0.42mmol；1当量)在200℃加热1h以得到标题化合物(0.13g； 86％)。
[0409] 步骤11：8-(5-乙基-1H-吡唑-1-基)-N-((6-甲基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺
[0410] 向化合物XI(0.15g，0.42mmol，1当量)于CH2Cl2:DMF(1:5，20mL)的搅拌溶液中加入DIPEA(0.22mL，1.2mmol，3当量)和HATU(0.2g，0.54mmol，1.3当量)，并将所得混合物在0℃搅拌15min。向混合物中加入C-(6-甲基-吡啶-3-基)-甲基胺(0.13g， 0.85mmol，2当量)，并使所得混合物在23℃搅拌另外16h。在真空下从混合物中移除溶剂，将残余物用EtOAc稀释，用饱和碳酸氢钠水溶液、氯化铵水溶液和卤水洗涤。于无水硫酸钠上干燥有机层，过滤并浓缩至干。通过用0-10％甲醇/CH2Cl2洗脱的硅胶(230-400 目)柱色谱纯化粗产物以得到为米白色固体的标题化合物(30mg，16％)。1H NMR(DMSO-d6) δ9.37(t，1H，J＝6Hz)，9.10(d，1H，J＝1Hz)，8.42(d，1H，J＝2Hz)，7.90(d， 1H，J＝1Hz)，7.84(s，1H)，7.68(d，1H，J＝1Hz)，7.63(dd，1H，J＝2，8Hz)，7.43(d，1H，J＝4Hz)，7.22(d，1H，J＝8Hz)，7.03(d，1H，J＝3Hz)，6.35(s，1H)， 4.48(d，2H，J＝6Hz)，2.62(q，2H，J＝8Hz)，2.55(s，3H)，2.50(s，3H)，1.11(t， 3H，J＝8Hz)。LCMS：m/z＝457.0[M+H]+，RT＝3.21分钟,(程序P1，柱Y)。
[0411] 实施例7：(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)-8-(苯氨基)咪唑并 [1,2-a]吡啶-6-甲酰胺
[0412]
[0413] 步骤1：6-氨基-烟酸乙酯
[0414] 在60℃向化合物I(150g；108.5mmol；1当量)于乙醇(1.5L)的搅拌溶液中逐滴加入亚硫酰氯(236mL；325mmol；3当量)，并将所得混合物加热回流17h。将混合物蒸发至干，并使用冰-冷饱和的NaHCO3水溶液和固体NaHCO3将pH调节至7。用乙酸乙酯 (3×500mL)从水相中萃取有机组分，并用卤水洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，并在真空下移除溶剂以得到为米白色固体的标题化合物(152g，84％)。1H NMR(CDCl3) δ8.71(s，1H)，7.99(d，1H，J＝12Hz)，6.45(d，1H，J＝8Hz)，4.95(s，2H)，4.31 (q，2H，J＝8Hz)；1.35(t，3H，J＝8Hz)。LCMS：m/z＝167.3[M+H]+，RT＝2.32分钟, (程序P1，柱Y)。
[0415] 步骤2：6-氨基-5-碘-烟酸乙酯
[0416] 向碘(55g，219mmol，1.4当量)于乙醇(1L)的搅拌溶液中加入硫酸银(48.7g， 312mmol，2当量)，5min后加入化合物II(26g；156.4mmol；1当量)，并将所得混合物在23℃搅拌24h。将混合物蒸发至干，并用20％硫代硫酸钠水溶液稀释。用乙酸乙酯(3× 1000mL)从水相中萃取有机组分，并用卤水洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥并在真空下移除溶剂以得到为棕色固体的标题化合物(45g，100％)。
[0417] 步骤3：8-碘-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸乙酯
[0418] 向化合物III(45g；154mmol；1当量)于乙醇(2L)的搅拌溶液中逐滴加入碳酸氢钠(25.9g；308mmol；2当量)和氯乙醛溶液(～50％水溶液，121mL；770mmol；5当量)，并将所得混合物加热回流18h。然后将混合物蒸发至干，并使用冰-冷饱和的NaHCO3水溶液和固体NaHCO3将pH调节至7。用乙酸乙酯(3×500mL)从水相萃取有机组分，并用卤水洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥并在真空下移除溶剂以得到干残余物，其通过使用10-50％乙酸乙酯/己烷作为洗脱剂的硅胶(230-400目)柱色谱纯化，以得到为棕色固体的标题化合物1
(40g，83％)。H NMR(DMSO-d6)δ9.34(s，1H)，8.27(s，1H)， 8.05(s，1H)，7.71(s，1H)，4.35(q，2H，J＝7Hz)，1.34(t，3H，J＝7Hz)。LCMS： m/z＝317.0[M+H]+，RT＝2.96分钟,(程序P1，柱Y)。
(40g，83％)。H NMR(DMSO-d6)δ9.34(s，1H)，8.27(s，1H)， 8.05(s，1H)，7.71(s，1H)，4.35(q，2H，J＝7Hz)，1.34(t，3H，J＝7Hz)。LCMS： m/z＝317.0[M+H]+，RT＝2.96分钟,(程序P1，柱Y)。
[0419] 步骤4：3-溴-8-碘-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸乙酯
[0420] 在0℃向化合物IV(30g；95mmol；1当量)于干THF(200mL)的搅拌溶液中分批加入NBS(16.8g；94.9mmol；1当量)，并将所得混合物在23℃搅拌1h。将混合物倒入冰-冷饱和的NaHCO3水溶液，并用乙酸乙酯(3×500mL)萃取有机组分。然后用卤水洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，过滤并在真空下移除溶剂以得到干残余物。通过使用10-50％乙酸乙酯/己烷作为洗脱剂的硅胶(230-400目)柱色谱纯化以得到为棕色固体的化合物(38g，100％)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.75(s，1H)，8.16(s，1H)，7.93(s， 1H)，4.39(q，2H，J＝7Hz)，
1.36(t，3H，J＝7Hz)。LCMS：m/z＝395.0[M+]，397.0 [M+2]，RT＝3.35分钟,(程序P1，柱Y)。
1.36(t，3H，J＝7Hz)。LCMS：m/z＝395.0[M+]，397.0 [M+2]，RT＝3.35分钟,(程序P1，柱Y)。
[0421] 步骤5：3-溴-8-苯基氨基-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸乙酯
[0422] 向反应管中的搅拌的化合物V(1g；2.55mmol；1当量)的1,4-二氧六环溶液中加入苯胺(280mg；3.03mmol；1.2当量)，并用氩气将所得混合物除气5min，随后加入K2CO3 (1.05g；7.59mmol；3当量)、Pd(OAc)2(57mg；0.25mmol；0.1当量)、4,5-双二苯基膦 -9,9-二甲基氧杂蒽(0.46g；0.51mmol；0.2当量)。然后将混合物再用氩气除气5min，密封反应管并在110℃加热5h。通过 垫过滤混合物，并用饱和NaHCO3水溶液随后是卤水洗涤滤液。然后于无水Na2SO4上干燥有机层并蒸发至干以得到粗材料。通过用5-30％ EtOAc/己烷洗脱的硅胶(100-200目)柱色谱纯化粗产物，以得到标题化合物(1.5g，82％)。 LCMS：m/z＝
360.2[M+]，362.0[M+2]，RT＝3.84分钟,(程序P1，柱W)。
360.2[M+]，362.0[M+2]，RT＝3.84分钟,(程序P1，柱W)。
[0423] 步骤6：3-(5-甲基-噻吩-2-基)-8-苯基氨基-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸乙酯[0424] 向反应管中的搅拌的化合物VI(0.75g；2.1mmol；1当量)的干甲苯溶液中加入化合物VIa(0.96g；2.5mmol；1.2当量)并用氩气将所得混合物除气5min。向混合物中加入 Pd(PPh3)4(0.24g；0.21mmol；0.1当量)，并用氩气将所得混合物额外除气5min。密封反应管并在115℃加热4h。通过 垫过滤混合物，并用饱和的NaHCO3水溶液随后是卤水洗涤滤液，并于无水Na2SO4上干燥有机层，过滤并蒸发至干以得到粗材料。通过用50％ EtOAc/己烷洗脱的硅胶(230-400目)柱色谱纯化粗产物以得到为浅棕色固体的标题化合物 (0.48g，61％)。1H NMR(CDCl3)δ8.63(s，1H)，7.63(s，1H)，7.42(m，1H)，7.38 (d，2H，J＝7Hz)，7.34(d，2H，J＝8Hz)，7.20(m，1H)，6.86(m，1H)，6.68(d， 2H，J＝8Hz),4.38(q，2H，J＝7Hz)，2.57+
(s，3H)1.37(t，3H，J＝7Hz)。LCMS： m/z＝378.2[M+H]，RT＝4.20分钟,(程序P1，柱W)。
(s，3H)1.37(t，3H，J＝7Hz)。LCMS： m/z＝378.2[M+H]，RT＝4.20分钟,(程序P1，柱W)。
[0425] 步骤7：3-(5-甲基-噻吩-2-基)-8-苯基氨基-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸
[0426] 在0℃向化合物VII(0.48g，1.27mmol，1当量)于THF:甲醇:H2O(12mL，3:2:1) 的溶液中加入一水合氢氧化锂(0.161g，3.81mmol，3当量)于水中(1mL)的溶液，并将所得混合物在23℃搅拌3h。在减压下移除溶剂并用水稀释残余物，用1N HCl酸化以将 pH调节至3。通过过滤收集沉淀的固体并在真空下干燥以得到标题化合物(0.38g，86％)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.44(s，1H)，8.26(s，1H)，7.69(s，1H)，7.41(m，1H)，7.35 (m，4H)，7.23(d，1H，J＝4Hz)，
6.98(m，2H)，2.54(s，3H)。LCMS：m/z＝350.0[M+H] +，RT＝2.71分钟,(程序P1，柱W)。
6.98(m，2H)，2.54(s，3H)。LCMS：m/z＝350.0[M+H] +，RT＝2.71分钟,(程序P1，柱W)。
[0427] 步骤8：(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)-8-(苯基氨基)咪唑并 [1,2-a]吡啶-6-甲酰胺
[0428] 在0℃向化合物VIII(0.38g，1.1mmol，1当量)于DMF(10mL)的搅拌溶液中加入DIPEA(0.6mL，3.3mmol，3当量)和HATU(0.49g，1.3mmol，1.2当量)，并使所得混合物搅拌15min。向混合物中加入(S)-1-(4H-[1,2,4]三唑-3-基)-乙胺盐酸盐(0.48g，3.3 mmol，3当量),并使所得混合物在23℃搅拌另外16h。在真空下从混合物中移除溶剂，并用EtOAc稀释残余物，然后用饱和碳酸氢钠水溶液、氯化铵水溶液和卤水洗涤。将有机相于无水硫酸钠上干燥，过滤并浓缩至干。通过用0-5％甲醇/CH2Cl2洗脱的硅胶(230-400 目)柱色谱纯化以得到为棕色固体的标题化合物(0.18g，38％)。1H NMR(DMSO-d6)δ13.78 (m，1H)，9.14-9.00(m，
1H)，8.50(m，3H)，7.86(s，1H)，7.40(d，1H，J＝6Hz)， 7.35(m，6H)，7.01(m，2H)，5.29(m，+
1H)，2.54(s，3H)，1.53(m，3H)。LCMS： m/z＝444.0[M+H]，RT＝3.00分钟,(程序P1，柱Y)。
1H)，8.50(m，3H)，7.86(s，1H)，7.40(d，1H，J＝6Hz)， 7.35(m，6H)，7.01(m，2H)，5.29(m，+
1H)，2.54(s，3H)，1.53(m，3H)。LCMS： m/z＝444.0[M+H]，RT＝3.00分钟,(程序P1，柱Y)。
[0429] 实施例8：(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-3-(5-甲基噻吩-2- 基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺
[0430]
[0431] 步骤1：6-氨基-烟酸乙酯
[0432] 在60℃向化合物I(150g；108.5mmol；1当量)于乙醇(1.5L)的搅拌溶液中逐滴加入亚硫酰氯(236mL；325mmol；3当量)，并将所得混合物加热回流17h。将混合物蒸发至干，并使用冰冷饱和的NaHCO3水溶液和固体NaHCO3将pH调节至7。用乙酸乙酯(5 ×1000mL)从水相中萃取有机组分并用卤水洗涤有机层，于无水硫酸钠上干燥，过滤，并在真空下移除溶剂以得到为米白色固体的标题化合物(152g，84％)。1H NMR(CDCl3)δ 8.71(s，1H)，7.99(d，1H，J＝12Hz)，6.45(d，1H，J＝8Hz)，4.95(s，2H)，4.31 (q，2H，J＝8Hz)，1.35(t，3H，J＝8Hz)。LCMS：
m/z＝167.3[M+H]+，RT＝2.32分钟,(程序P1，柱Y)。
m/z＝167.3[M+H]+，RT＝2.32分钟,(程序P1，柱Y)。
[0433] 步骤2：6-氨基-5-溴-烟酸乙酯
[0434] 在0℃向化合物II(50g；30.1mmol；1当量)于干THF(500mL)的搅拌溶液中分批加入NBS(53.6g；30.1mmol；1当量)，并将所得混合物在23℃搅拌17h。将混合物倒入冰-冷饱和的NaHCO3水溶液中，并用乙酸乙酯(3×1000mL)萃取有机组分。然后用卤水洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥并蒸发至干以得到为米白色固体的标题化合物(71g，96％)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.49(s，1H)，8.07(s，1H)，7.15(s，2H)， 4.22(q，2H，J＝8Hz)，1.30(t，3H，J＝8Hz)。LCMS：m/z＝245[M+]，247[M+2]， RT＝2.97分钟,(程序P1，柱W)。
[0435] 步骤3：8-溴-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸乙酯
[0436] 向化合物III(80g；32.6mmol；1当量)于乙醇(1L)的搅拌溶液中逐滴加入碳酸氢钠(54.83g；65.2mmol；2当量)和氯乙醛溶液(～50％水溶液，212mL；163.2mmol；5 当量)，并将所得混合物加热回流17h。然后将混合物蒸发至干，并使用冰-冷饱和的NaHCO3水溶液和固体NaHCO3将pH调节至7。用乙酸乙酯(3×500mL)从水相中萃取有机组分并用卤水洗涤有机层，于无水硫酸钠上干燥，过滤并在真空下移除溶剂以得到干残余物，其通过使用10-50％乙酸乙酯/己烷作为洗脱剂的硅胶(230-400目)柱色谱纯化，以得到为棕色固体的标题化合物(55g，63％)。1H NMR(DMSO-d6)δ9.33(s，1H)，8.24(s，1H)， 7.84(s，1H)，7.73(s，1H)，4.34(q，2H，J＝8Hz)，1.34(t，3H，J＝8Hz)。LCMS： m/z＝268.8[M+]，270.8[M+2]，RT＝2.90分钟,(程序P1，柱W)。
[0437] 步骤4：8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸乙酯
[0438] 向反应管中的化合物IV(1g；3.73mmol；1当量)于甲苯:乙醇(20mL；7:3)的搅拌溶液中加入1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂戊硼烷-2-基)-1H-吡唑(0.93g；4.47 mmol；1.2当量)，并用氩气将所得溶液除气5min，随后加入Cs2CO3(3.03g；9.32mmol； 2.5当量)、Pd(PPh3)4(0.43g；0.37mmol；0.1当量)。然后再用氩气将混合物除气5min，密封反应管，并在115℃加热3h。通过 垫过滤混合物，并用饱和的NaHCO3水溶液随后是卤水洗涤滤液。然后于无水Na2SO4上干燥有机层，过滤并蒸发至干以得到粗材料。通过用50％EtOAc/己烷洗脱的硅胶(100-200目)柱色谱纯化粗产物，以得到标题化合物 (1.2g，60％)。1H NMR(CDCl3)δ8.79(s，1H)，8.62(s，1H)，8.12(s，1H)，7.90(s， 1H)，7.69(s，1H)，7.66(s，1H)，4.40(q，2H，J＝7Hz)，3.98(s，3H)，1.40(t， 3H，J＝7Hz)。LCMS：m/z＝271.0[M+H]+，RT＝
2.83分钟,(程序P1，柱W)。
2.83分钟,(程序P1，柱W)。
[0439] 步骤5：3-溴-8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸乙酯[0440] 在0℃向化合物V(0.8g；2.90mmol；1当量)于干THF(20mL)的搅拌溶液中分批加入NBS(520mg；2.9mmol；1当量)，并将所得混合物在0℃搅拌30min。将混合物倒入冰-冷饱和的NaHCO3水溶液中，并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取有机组分。然后用卤水洗涤合并的有机层，1
于无水硫酸钠上干燥并蒸发至干以得到为米白色固体的标题化合物 (0.5g，50％)。H NMR(DMSO-d6)δ8.75(s，1H)，8.64(s，1H)，8.36(s，1H)，7.97 (s，1H)，7.93(s，1H)，4.40(q，2H，J＝7Hz)，3.94(s，3H)，1.38(t，3H，J＝7Hz)。 LCMS：m/z＝349.0[M+]，351.0[M+2]，RT＝3.28分钟,(程序P1，柱Y)。
于无水硫酸钠上干燥并蒸发至干以得到为米白色固体的标题化合物 (0.5g，50％)。H NMR(DMSO-d6)δ8.75(s，1H)，8.64(s，1H)，8.36(s，1H)，7.97 (s，1H)，7.93(s，1H)，4.40(q，2H，J＝7Hz)，3.94(s，3H)，1.38(t，3H，J＝7Hz)。 LCMS：m/z＝349.0[M+]，351.0[M+2]，RT＝3.28分钟,(程序P1，柱Y)。
[0441] 步骤6：8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-3-(5-甲基-噻吩-2-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸乙酯
[0442] 向反应管中的化合物VI(0.5g；1.49mmol；1当量)于干甲苯的搅拌溶液中加入化合物VIa(0.63g；1.64mmol；1.1当量)，并用氩气将所得混合物除气5min。向混合物中加入Pd(PPh3)4(0.17g；0.14mmol；0.1当量)，并用氩气再将所得混合物除气约5min。密封反应管，并在115℃加热4h。通过 垫过滤混合物，并用饱和的NaHCO3水溶液随后是卤水洗涤滤液。然后于无水Na2SO4上干燥有机层，过滤并在真空下移除溶剂以得到粗材料。通过用50％EtOAc/己烷洗脱硅胶(230-400目)柱色谱纯化粗产物，以得到标题化合物(0.32g，63％)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.87(s，1H)，8.78(s，1H)，8.37(s，1H)， 7.94(s，1H)，7.90(s，1H)，7.34(d，1H，J＝4Hz)，7.02(d，1H，J＝3Hz)，4.38(q， 2H，J＝7Hz)，3.95(s，3H)，2.56(s，3H)，1.35(t，
3H，J＝7Hz)。LCMS：m/z＝367.0 [M+H]+，RT＝3.58分钟,(程序P1，柱Y)。
3H，J＝7Hz)。LCMS：m/z＝367.0 [M+H]+，RT＝3.58分钟,(程序P1，柱Y)。
[0443] 步骤7：8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-3-(5-甲基-噻吩-2-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸
[0444] 在0℃向化合物VII(0.25g，0.68mmol，1当量)于THF:甲醇:H2O(12mL，3:2:1) 的溶液中加入一水合氢氧化锂(57mg，1.30mmol，2当量)于水(1mL)中的溶液，并将所得混合物在23℃搅拌3h。在减压下移除溶剂并用水洗涤残余物，用1N HCl酸化以将 pH调节至3。通过过
1
滤收集沉淀的固体并在真空干燥以得到标题化合物(0.2g，100％)。H NMR(DMSO-d6)δ8.87(s，1H)，8.77(s，1H)，8.35(s，1H)，7.96(s，1H)，7.91 (s，1H)，7.34(d，1H，J＝4Hz)，7.01(d，
1H，J＝3Hz)，3.94(s，3H)，2.56(s，3H)。 LCMS：m/z＝339.0[M+H]+，RT＝2.43分钟,(程序P1，柱W)。
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滤收集沉淀的固体并在真空干燥以得到标题化合物(0.2g，100％)。H NMR(DMSO-d6)δ8.87(s，1H)，8.77(s，1H)，8.35(s，1H)，7.96(s，1H)，7.91 (s，1H)，7.34(d，1H，J＝4Hz)，7.01(d，
1H，J＝3Hz)，3.94(s，3H)，2.56(s，3H)。 LCMS：m/z＝339.0[M+H]+，RT＝2.43分钟,(程序P1，柱W)。
[0445] 步骤8：(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-3-(5-甲基噻吩-2- 基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺
[0446] 在0℃向化合物VIII(0.2g，0.59mmol，1当量)于DMF(10mL)的搅拌溶液中加入DIPEA(0.3mL，1.70mmol，3当量)和HATU(0.26g，0.71mmol，1.2当量)，并使所得混合物在23℃搅拌15min。向混合物中加入(S)-1-(4H-[1,2,4]三唑-3-基)-乙胺盐酸盐 (0.10g，0.71mmol，1.2当量)并将所得混合物在23℃搅拌另外的16h。在真空下从混合物中移除溶剂，用EtOAc稀释残余物，并用饱和的碳酸氢钠水溶液、氯化铵水溶液和卤水洗涤。将有机相于于无水硫酸钠上干燥，过滤并浓缩至干。通过用0-5％甲醇/CH2Cl2洗脱的硅胶(230-400目)柱色谱纯化粗产物，以得到为棕色固体的标题化合物(0.07g，30％)。1H NMR(DMSO-d6)δ
13.85(m，1H)，9.20(m，1H)，8.87(d，1H，J＝16Hz)，8.75 (s，1H)，8.49(s，1H)，8.34(s，1H)，
8.16(d，1H，J＝8Hz)，7.86(m，1H)，7.37 (s，1H)，7.01(s，1H)，5.35(m，1H)，3.96(s，3H)，
2.54(s，3H)，1.58(m，3H)。 LCMS：m/z＝433.2[M+H]+，RT＝2.78分钟,(程序P1，柱V)。
13.85(m，1H)，9.20(m，1H)，8.87(d，1H，J＝16Hz)，8.75 (s，1H)，8.49(s，1H)，8.34(s，1H)，
8.16(d，1H，J＝8Hz)，7.86(m，1H)，7.37 (s，1H)，7.01(s，1H)，5.35(m，1H)，3.96(s，3H)，
2.54(s，3H)，1.58(m，3H)。 LCMS：m/z＝433.2[M+H]+，RT＝2.78分钟,(程序P1，柱V)。
[0447] 实施例9：(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-3-丁基-8-(4-甲基哌啶-1-基)咪唑并[1,2-a] 吡啶-6-甲酰胺
[0448]
[0449] 步骤1：6-氨基-烟酸乙酯
[0450] 在60℃向化合物I(150g；1.08mol；1当量)于乙醇(1.5L)的搅拌溶液中逐滴加入亚硫酰氯(236mL；3.25mol；3当量)，并将所得混合物加热回流17h。将混合物蒸发至干，并使用冰-冷饱和的NaHCO3水溶液和固体NaHCO3将残余物的pH调节至7。用乙酸乙酯(5×1000mL)从水相中萃取有机组分，并用卤水溶液洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，过滤，并在真空下移除溶剂以得到为米白色固体的标题化合物(152g，84％)。1H NMR(CDCl3)δ8.71(s，1H)，7.99(d，1H，J＝8Hz)，6.45(d，1H，J＝8Hz)，4.95 (s，2H)，4.31(q，2H，J＝8Hz)；1.35(t，+
3H，J＝8Hz)。LCMS：m/z＝167.3[M+H]， RT＝2.32分钟,(程序P1，柱Y)。
3H，J＝8Hz)。LCMS：m/z＝167.3[M+H]， RT＝2.32分钟,(程序P1，柱Y)。
[0451] 步骤2：6-氨基-5-溴-烟酸乙酯
[0452] 在0℃向化合物II(50g；301mmol；1当量)于干THF(500)的搅拌溶液中分批加入NBS(53.6g；301mmol；1当量)，并将混合物在23℃搅拌17h。将混合物倒入冰-冷饱和的NaHCO3水溶液中，并用乙酸乙酯(3×1000mL)从水相中萃取有机组分。然后用卤水洗涤有机层，于无水硫酸钠上干燥，过滤并蒸发至干以得到为米白色固体的标题化合物(71g，96％)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.49(s，1H)，8.07(s，1H)，7.15(s，2H)， 4.22(q，2H，J＝8Hz,)，1.30(t，J＝8Hz，3H)。LCMS：m/z＝245[M+]，247[M+2]， RT＝2.97分钟,(程序P1，柱W)。
[0453] 步骤3：8-溴-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸乙酯
[0454] 向化合物III(80g；326mmol；1当量)于乙醇(1L)的搅拌溶液中逐滴加入碳酸氢钠(54.8g；652mmol；2当量)和氯乙醛溶液(～50％水溶液，212mL；1.63mol；5当量)，并将混合物加热回流17h。然后将混合物蒸发至干，并使用饱和的冰-冷NaHCO3水溶液和固体NaHCO3将pH调节至7。用乙酸乙酯(3×1000mL)从水相中萃取有机组分并用卤水洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，过滤并在真空下移除溶剂以得到干残余物，其通过使用10-50％乙酸乙酯/己烷的(230-400目)柱色谱纯化，以得到为棕色固体的标题化合物(55g，63％)。1H NMR(DMSO-d6)δ9.33(s，1H)，8.24(s，1H)，7.84(s，1H)， 7.73(s，1H)，4.34(q，2H，J＝8Hz)，1.34(t，3H，J＝12Hz)。LCMS：m/z＝268.8[M+]， 270.8[M+2]，RT＝2.90分钟,(程序P1，柱W)。
[0455] 步骤4：8-(4-甲基-哌啶-1-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸乙酯
[0456] 向反应管中的搅拌的化合物IV(1g；3.71mmol；1当量)的1,4-二氧六环溶液中加入 4-甲基哌啶(0.73g；7.43mmol；2当量)，并用氩气将所得混合物除气5min，随后加入 Cs2CO3(1.81g；5.56mmol；1.5当量)、Pd2(dba)3(0.16g；0.018mmol；0.05当量)和4,5- 双二苯基膦-
9,9-二甲基氧杂蒽(0.21g；0.37mmol；0.1当量)。然后用氩气再将混合物除气5min，然后密封反应管并在115℃加热5h。通过 垫过滤混合物，并用饱和的 NaHCO3水溶液随后是卤水洗涤滤液。然后于Na2SO4上干燥有机层并蒸发至干以得到粗材料。通过用50％EtOAc/己烷洗脱的硅胶(100-200目)柱色谱纯化粗产物，以得到为浅棕色固体的标题化合物(0.25g，
1
23％)。H NMR(DMSO-d6)δ8.84(s，1H)，8.03(s，1H)， 7.55(s，1H)，6.75(s，1H)，4.31(m，4H)，
2.73(q，2H，J＝8Hz)，1.73(d，2H，J ＝12Hz)，1.56(m，1H)，1.3(m，5H)，0.9(t，3H，J＝4Hz)。
LCMS：m/z＝288[M+H] +，RT＝3.56分钟,(程序P1，柱W)。
9,9-二甲基氧杂蒽(0.21g；0.37mmol；0.1当量)。然后用氩气再将混合物除气5min，然后密封反应管并在115℃加热5h。通过 垫过滤混合物，并用饱和的 NaHCO3水溶液随后是卤水洗涤滤液。然后于Na2SO4上干燥有机层并蒸发至干以得到粗材料。通过用50％EtOAc/己烷洗脱的硅胶(100-200目)柱色谱纯化粗产物，以得到为浅棕色固体的标题化合物(0.25g，
1
23％)。H NMR(DMSO-d6)δ8.84(s，1H)，8.03(s，1H)， 7.55(s，1H)，6.75(s，1H)，4.31(m，4H)，
2.73(q，2H，J＝8Hz)，1.73(d，2H，J ＝12Hz)，1.56(m，1H)，1.3(m，5H)，0.9(t，3H，J＝4Hz)。
LCMS：m/z＝288[M+H] +，RT＝3.56分钟,(程序P1，柱W)。
[0457] 步骤5：3-((E)-丁-1-烯基)-8-(4-甲基-哌啶-1-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸乙酯
[0458] 在密封管中向化合物V(0.15g；0.52mmol；1当量)于乙酸乙酯(2mL)的搅拌溶液中加入醋酸钠(0.17g；2mmol；4当量)和丁醛(butaraldehyde)(0.46mL；5.22mmol；10当量)，并将混合物在150℃加热4h。将混合物倒入冰-冷饱和的NaHCO3水溶液中，并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取有机组分。用卤水洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，过滤并蒸发至干以得到粗材料。通过用50％EtOAc/己烷洗脱的硅胶(230-400目)柱色谱纯化粗产物以得到标题化合物(0.12g，70％)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.60(s，1H)，7.75 (s，1H)，6.90-6.70(m，2H)，
6.45-6.20(m，1H)，4.40-4.38(m，4H)，2.73(t，2H，J ＝10Hz)，2.31-2.24(m，2H)，1.75(m，
2H)，1.56-1.48(m，3H)，1.12(t，3H，J＝4Hz)， 0.97-0.95(m，3H)，0.81-0.79(m，3H)。LCMS：
m/z＝343.2[M+H]+，RT＝2.44分钟,(程序P1，柱Y)。
6.45-6.20(m，1H)，4.40-4.38(m，4H)，2.73(t，2H，J ＝10Hz)，2.31-2.24(m，2H)，1.75(m，
2H)，1.56-1.48(m，3H)，1.12(t，3H，J＝4Hz)， 0.97-0.95(m，3H)，0.81-0.79(m，3H)。LCMS：
m/z＝343.2[M+H]+，RT＝2.44分钟,(程序P1，柱Y)。
[0459] 步骤6：3-丁基-8-(4-甲基-哌啶-1-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸乙酯
[0460] 向化合物VI(0.12g；0.36mmol；1当量)于干甲醇的搅拌溶液中加入10％Pd/C(40 mg)，并将所得混合物在氢气气氛下搅拌2h。通过 垫过滤混合物，并将滤液蒸发至干，以得到标题化合物(0.115g，92％)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.36(s，1H)，7.36(s， 1H)，6.77(s，1H)，4.40-4.25(m，4H)，2.88(t，2H，J＝8Hz)，2.75(t，2H，J＝10Hz)， 1.75-1.64(m，4H)，
1.56(m，2H)，1.45-1.38(m，3H)，1.32(t，3H，J＝4Hz)，0.97-0.95 (m，3H)，0.81-0.79(m，
3H)。LCMS：m/z＝344.6[M+H]+，RT＝2.55分钟,(程序P1，柱Y)。
1.56(m，2H)，1.45-1.38(m，3H)，1.32(t，3H，J＝4Hz)，0.97-0.95 (m，3H)，0.81-0.79(m，
3H)。LCMS：m/z＝344.6[M+H]+，RT＝2.55分钟,(程序P1，柱Y)。
[0461] 步骤7：3-丁基-8-(4-甲基-哌啶-1-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸
[0462] 在0℃向化合物VII(0.11g，0.32mmol，1当量)于THF:甲醇:H2O(9mL，3:2:1) 的溶液中加入一水合氢氧化锂(45mg，0.96mmol，3当量)于水(0.5mL)中的溶液，并将所得混合物在23℃搅拌3h。在减压下移除溶剂并用水稀释残余物，用1N HCl酸化以将 pH调节至3。用乙酸乙酯(3×50mL)从水相中萃取有机组分。用卤水洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，过滤并蒸发至干以得到标题化合物(0.07g，70％)。1H NMR (DMSO-d6)δ8.53(s，1H)，7.66(s，1H)，7.12(s，1H)，3.93(m，2H)，2.93(t，2H，J＝15Hz)，2.75(t，2H，J＝12Hz)，1.80-1.74(m，4H)，1.60(m，1H)，1.45-1.32(m， 4H)，0.97-0.90(m，6H)。LCMS：m/z＝316.2[M+H]+，RT＝2.60分钟,(程序P1，柱Y)。
[0463] 步骤8：(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-3-丁基-8-(4-甲基哌啶-1-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺
[0464] 在0℃向化合物VIII(40mg，0.12mmol，1当量)于CH2Cl2(10mL)的搅拌溶液中加入DIPEA(0.06mL，0.38mmol，3当量)和HATU(58mg，0.15mmol,1.2当量)，并使所得混合物搅拌15min。向混合物中加入(S)-1-(4H-[1,2,4]三唑-3-基)-乙胺盐酸盐(0.022g， 0.15mmol，
1.2当量)并将所得混合物在23℃搅拌另外16h。在真空下从混合物中移除溶剂，用EtOAc稀释残余物，并用饱和碳酸氢钠水溶液、氯化铵水溶液和卤水洗涤。分离有机相，于无水硫酸钠上干燥，过滤并浓缩至干。通过用0-5％甲醇/CH2Cl2洗脱的硅胶(230-400 目)柱色谱纯化
1
粗产物，以得到为米白色固体的标题化合物(0.015g，30％)。H NMR (DMSO-d6)δ13.83(m，
1H)，8.86(m，1H)，8.44(m，2H)，7.87(s，1H)，7.34(m， 1H)，6.86(s，1H)，5.34(m，1H)，4.32(m，2H)，2.85(t，2H，J＝7Hz)，2.71(t， 2H，J＝11Hz)，1.73(m，4H)，1.55(m，4H)，1.44-1.32(m，4H)，0.97-0.90(m，6H)。 LCMS：m/z＝409.6[M+H]+，RT＝2.60分钟,(程序R1，柱Y)。
1.2当量)并将所得混合物在23℃搅拌另外16h。在真空下从混合物中移除溶剂，用EtOAc稀释残余物，并用饱和碳酸氢钠水溶液、氯化铵水溶液和卤水洗涤。分离有机相，于无水硫酸钠上干燥，过滤并浓缩至干。通过用0-5％甲醇/CH2Cl2洗脱的硅胶(230-400 目)柱色谱纯化
1
粗产物，以得到为米白色固体的标题化合物(0.015g，30％)。H NMR (DMSO-d6)δ13.83(m，
1H)，8.86(m，1H)，8.44(m，2H)，7.87(s，1H)，7.34(m， 1H)，6.86(s，1H)，5.34(m，1H)，4.32(m，2H)，2.85(t，2H，J＝7Hz)，2.71(t， 2H，J＝11Hz)，1.73(m，4H)，1.55(m，4H)，1.44-1.32(m，4H)，0.97-0.90(m，6H)。 LCMS：m/z＝409.6[M+H]+，RT＝2.60分钟,(程序R1，柱Y)。
[0465] 实施例10：(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(4-甲基哌啶-1-基)-3-(丙硫基)咪唑并 [1,2-a]吡啶-6-甲酰胺
[0466]
[0467] 步骤1：6-氨基-烟酸乙酯
[0468] 在60℃向化合物I(150g，1.08mol；1当量)于乙醇(1.5L)的搅拌溶液中逐滴加入亚硫酰氯(236mL；3.25mol；3当量)并将所得混合物加热回流17h。然后将混合物蒸发至干，并使用冰-冷饱和的NaHCO3水溶液和固体NaHCO3将残余物的pH调节至7。使用乙酸乙酯(5×1000mL)从水相中萃取有机组分，并用卤水溶液洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，过滤，并在真空下移除溶剂以得到为米白色固体的标题化合物(152g， 84％)。1H NMR(CDCl3)δ8.71(s，1H)，7.99(d，1H，J＝12Hz)，6.45(d，1H，J＝8 Hz)，4.95(s，2H)，4.31(q，
2H，J＝8Hz)，1.35(t，3H，J＝8Hz)。LCMS：m/z＝167.3 [M+H]+，RT＝2.32分钟,(程序P1，柱Y)。
2H，J＝8Hz)，1.35(t，3H，J＝8Hz)。LCMS：m/z＝167.3 [M+H]+，RT＝2.32分钟,(程序P1，柱Y)。
[0469] 步骤2：6-氨基-5-溴-烟酸乙酯
[0470] 在0℃向化合物II(50g；301mmol；1当量)于干THF(500mL)的搅拌溶液中分批次加入NBS(53.6g；301mmol；1当量)，并将混合物在23℃搅拌17h。将混合物倒入冰-冷饱和的NaHCO3水溶液，并用乙酸乙酯(3×1000mL)萃取。然后用卤水溶液洗涤合并的有机物，于无水硫酸钠上干燥，过滤并蒸发至干以得到为米白色固体的标题化合物(71 g，96％)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.49(s，1H)，8.07(s，1H)，7.15(s，2H)，4.22(q， 2H，J＝8Hz)，1.30(t，3H，J＝8Hz)。LCMS：m/z＝245[M+]，247[M+2]，RT＝2.97 分钟,(程序P1，柱W)。
[0471] 步骤3：8-溴-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸乙酯
[0472] 向化合物III(80g；326mmol；1当量)和碳酸氢钠(54.83g；652mmol；2当量)于乙醇(1L)的搅拌溶液中逐滴加入氯乙醛溶液(～50％水溶液，212mL；1.6mol；5当量) 并将所得混合物加热回流17h。然后将混合物蒸发至干，并使用冰-冷饱和的NaHCO3水溶液和固体NaHCO3将pH调节至7。用乙酸乙酯(3×1000mL)从水相中萃取有机组分，并用卤水洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，过滤并在真空下移除溶剂以得到干残余物，通过使用10-50％乙酸乙酯/己烷作为洗脱剂的硅胶(230-400目)柱色谱纯化，以得到为棕色固体的标题化合物(55g，63％)。1H NMR(DMSO-d6)δ9.33(s，1H)，8.24(s， 1H)，7.84(s，1H)，7.73(s，1H)，
4.34(q，2H，J＝8Hz)，1.34(t，3H，J＝12Hz)。 LCMS：m/z＝268.8[M+]，270.8[M+2]，RT＝2.90分钟,(程序P1，柱W)。
4.34(q，2H，J＝8Hz)，1.34(t，3H，J＝12Hz)。 LCMS：m/z＝268.8[M+]，270.8[M+2]，RT＝2.90分钟,(程序P1，柱W)。
[0473] 步骤4：8-(4-甲基-哌啶-1-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸乙酯
[0474] 向反应管中搅拌的化合物IV(1g；3.71mmol；1当量)的1,4-二氧六环溶液中加入 4-甲基哌啶(0.73g；7.43mmol；2当量)，并用氩气将所得混合物除气5min。向混合物中加入Cs2CO3(1.81g；5.56mmol；1.5当量)、Pd2(dba)3(0.16g；0.018mmol；0.05当量)、 4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(0.21g；0.37mmol；0.1当量)并用氩气将所得混合物另外除气
5min，并密封反应管。然后将混合物加热至115℃并搅拌5h。通过 垫过滤混合物，并用饱和的NaHCO3水溶液随后是卤水洗涤滤液。然后于无水Na2SO4上干燥有机层并蒸发至干以得到粗材料。通过用50％EtOAc/己烷洗脱的硅胶(100-200目)柱色谱纯化粗产物，以得到为浅棕色固体的标题化合物(0.25g，23％)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.84 (s，1H)，8.03(s，1H)，7.55(s，1H)，6.75(s，1H)，4.31(m，4H)，2.73(q，2H，J ＝8Hz)，1.73(d，2H，J＝12Hz)，1.56(m，
1H)，1.3(m，5H)，0.9(t，3H，J＝4Hz)。 LCMS：m/z＝288[M+H]+，RT＝3.56分钟,(程序P1，柱W)。
5min，并密封反应管。然后将混合物加热至115℃并搅拌5h。通过 垫过滤混合物，并用饱和的NaHCO3水溶液随后是卤水洗涤滤液。然后于无水Na2SO4上干燥有机层并蒸发至干以得到粗材料。通过用50％EtOAc/己烷洗脱的硅胶(100-200目)柱色谱纯化粗产物，以得到为浅棕色固体的标题化合物(0.25g，23％)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.84 (s，1H)，8.03(s，1H)，7.55(s，1H)，6.75(s，1H)，4.31(m，4H)，2.73(q，2H，J ＝8Hz)，1.73(d，2H，J＝12Hz)，1.56(m，
1H)，1.3(m，5H)，0.9(t，3H，J＝4Hz)。 LCMS：m/z＝288[M+H]+，RT＝3.56分钟,(程序P1，柱W)。
[0475] 步骤5：3-溴-8-(4-甲基-哌啶-1-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸乙酯
[0476] 在0℃向化合物V(1.6g；5.5mmol；1当量)于干THF(30mL)的搅拌溶液中分批加入NBS(0.99g；5.5mmol；1当量)，并将所得混合物在0℃搅拌30min。将混合物倒入冰-冷饱和的NaHCO3水溶液中，并用乙酸乙酯(3×500mL)萃取有机组分。然后用卤水洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，过滤并蒸发至干以得到为米白色固体的标题化合物(1.7g，83％)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.34(s，1H)，7.75(s，1H)，6.87(s，1H)， 4.35(m，4H)，2.79(q，2H，J＝12Hz)，1.73(d，2H，J＝12Hz)，1.58(s，1H)，1.3 (m，5H)，0.95(t，3H，J＝4Hz)。LCMS：m/z＝366.2[M+]，368.2[M+2]，RT＝2.51分钟,(程序P1，柱W)。
[0477] 步骤6：8-(4-甲基-哌啶-1-基)-3-丙基磺酰基-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸乙酯[0478] 向反应管中搅拌的化合物VI(0.15g；0.40mmol；1当量)的1,4-二氧六环溶液中加入丙硫醇(73mg；0.81mmol；2当量)，并用氩气将混合物除气5min。向混合物中加入 Cs2CO3(195mg；0.6mmol；1.5当量)、Pd2(dba)3(18mg；0.02mmol；0.05当量)、4,5- 双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(23mg；0.04mmol；0.1当量)，用氩气将所得混合物另外除气5min，并密封反应管。然后将混合物加热至115℃并搅拌5h。通过 垫过滤混合物，并用饱和的NaHCO3水溶液随后是卤水洗涤滤液。然后于无水Na2SO4上干燥有机层，过滤并蒸发至干以得到粗材料。通过用50％EtOAc/己烷洗脱的硅胶(100-200目)柱色谱纯化粗产物，以得到标题化合物(0.14g，91％)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.63(s，1H)， 7.80(s，1H)，6.89(s，1H)，4.37(q，2H，J＝4Hz)，4.33(m，2H)，2.78(t，2H，J＝ 12Hz)，2.69(m，2H)，1.76(m，2H)，1.60(m，1H)，1.42-
1.39(m，7H)，0.96(d， 3H，J＝6Hz,)，0.83(t，3H，J＝7Hz)。LCMS：m/z＝375.8[M+H]+，RT＝
2.97分钟,(程序P1，柱W)。
1.39(m，7H)，0.96(d， 3H，J＝6Hz,)，0.83(t，3H，J＝7Hz)。LCMS：m/z＝375.8[M+H]+，RT＝
2.97分钟,(程序P1，柱W)。
[0479] 步骤7：8-(4-甲基-哌啶-1-基)-3-丙基磺酰基-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸[0480] 在0℃向化合物VII(150mg，0.41mmol，1当量)于THF:甲醇:H2O(12mL，3:2:1) 的溶液中加入一水合氢氧化锂(34mg，0.83mmol，2当量)于水(0.5mL)中的溶液，并将所得混合物在23℃搅拌3h。在减压下移除溶剂并用水稀释残余物，用1N HCl酸化以将 pH调节至3。通过过滤收集固体沉淀物，并在真空下干燥以得到标题化合物(0.11g，79％)。1H NMR(DMSO-d6)δ13.30(s，1H)，8.63(s，1H)，7.79(s，1H)，6.91(s，1H)，4.27 (d，2H，J＝12Hz)，2.77(t，2H，J＝8Hz)，2.66(t，2H，J＝8Hz)，1.73(d，2H，J＝ 12Hz)，1.58(m，1H)，1.40-1.47(m，2H)，1.35-
1.27(m，2H)，0.95-0.91(m，6H)。 LCMS：m/z＝334[M+H]+，RT＝2.64分钟,(程序P1，柱W)。
1.27(m，2H)，0.95-0.91(m，6H)。 LCMS：m/z＝334[M+H]+，RT＝2.64分钟,(程序P1，柱W)。
[0481] 步骤8：(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(4-甲基哌啶-1-基)-3-(丙硫基)咪唑并[1,2-a] 吡啶-6-甲酰胺
[0482] 在0℃向化合物VIII(0.05g，0.14mmol，1当量)于CH2Cl2(10mL)的搅拌溶液中加入DIPEA(0.075mL，0.42mmol，3当量)和HATU(0.069g，0.18mmol，1.3当量)，并使混合物搅拌15min。向混合物中加入(S)-1-(4H-[1,2,4]三唑-3-基)-乙胺盐酸盐(0.025g， 0.17mmol，
1.2当量)并使所得混合物在23℃搅拌另外16h。在真空下从混合物中移除溶剂，用EtOAc稀释，并用饱和碳酸氢钠水溶液、氯化铵水溶液和卤水洗涤。于无水硫酸钠上干燥有机层，过滤并浓缩至干以得到粗产物。通过用0-5％甲醇/CH2Cl2洗脱的硅胶 (230-400目)柱色谱纯化粗材料，以得到标题化合物(0.015g，23％)。1H NMR(CDCl3) δ11.79(s，1H)，8.52(s，1H)，
8.04(s，1H)，7.72(s，1H)，6.85(s，1H)，6.70(s， 1H)，5.46(q，1H，J＝8Hz)，4.19(d，2H，J＝
12Hz)，2.79(t，2H，J＝12Hz)，2.56 (t，2H，J＝8Hz)，1.78(d，4H，J＝4Hz)，1.53-1.46(m，
5H)，1.0-0.93(m，6H)。LCMS： m/z＝428.4[M+H]+，RT＝3.15分钟,(程序P1，柱W)。
1.2当量)并使所得混合物在23℃搅拌另外16h。在真空下从混合物中移除溶剂，用EtOAc稀释，并用饱和碳酸氢钠水溶液、氯化铵水溶液和卤水洗涤。于无水硫酸钠上干燥有机层，过滤并浓缩至干以得到粗产物。通过用0-5％甲醇/CH2Cl2洗脱的硅胶 (230-400目)柱色谱纯化粗材料，以得到标题化合物(0.015g，23％)。1H NMR(CDCl3) δ11.79(s，1H)，8.52(s，1H)，
8.04(s，1H)，7.72(s，1H)，6.85(s，1H)，6.70(s， 1H)，5.46(q，1H，J＝8Hz)，4.19(d，2H，J＝
12Hz)，2.79(t，2H，J＝12Hz)，2.56 (t，2H，J＝8Hz)，1.78(d，4H，J＝4Hz)，1.53-1.46(m，
5H)，1.0-0.93(m，6H)。LCMS： m/z＝428.4[M+H]+，RT＝3.15分钟,(程序P1，柱W)。
[0483] 实施例11：(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(4-甲基哌啶-1-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基) 咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺
[0484]
[0485] 步骤1：6-氨基-烟酸乙酯
[0486] 在60℃向化合物I(150g；1.09mol；1当量)于乙醇(1.5L)的搅拌溶液中逐滴加入亚硫酰氯(236mL；3.26mol；3当量)，并将所得混合物加热回流17h。将混合物蒸发至干，并使用冰-冷饱和的NaHCO3水溶液和固体NaHCO3将pH调节至7。用乙酸乙酯(5 ×1000mL)从水相中萃取有机组分，并用卤水洗涤有机层，于无水硫酸钠上干燥，过滤并在真空下移除溶剂，以得到为米白色固体的标题化合物(152g，84％)。1H NMR(CDCl3)δ 8.71(s，1H)，7.99(d，1H，J＝12Hz)，6.45(d，1H，J＝8Hz)，4.95(s，2H)，4.31(q， 2H，J＝8Hz)，1.35(t，3H，J＝12Hz,)。LCMS：m/z＝167.3[M+H]+，RT＝2.32分钟, (程序P1，柱Y)。
[0487] 步骤2：6-氨基-5-溴-烟酸乙酯
[0488] 在0℃向化合物II(50g；301mmol；1当量)于干THF(500mL)的搅拌溶液中分批加入NBS(53.6g；301mmol；1当量)，并将所得混合物在23℃搅拌17h。将混合物倒入冰-冷饱和的NaHCO3水溶液中，并用乙酸乙酯(3×1000mL)萃取有机组分。然后用卤水溶液洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，浓缩并蒸发至干，以得到为米白色固体的标题化合物(71g，96％)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.49(s，1H)，8.07(s，1H)，7.15 (s，2H)，4.22(q，2H，J＝8Hz)，1.30(t，3H，J＝8Hz)。LCMS：m/z＝245[M+]，247 [M+2]，RT＝2.97分钟,(程序P1，柱W)。
[0489] 步骤3：8-溴-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸乙酯
[0490] 向化合物III(80g；326mmol；1当量)于乙醇(1L)的搅拌溶液中逐滴加入碳酸氢钠(54.8g；652mmol；2当量)和氯乙醛水溶液(～50％水溶液，212mL；1.63mol；5当量)，并将混合物加热回流17h。然后将混合物蒸发至干，并使用冰-冷饱和的NaHCO3水溶液和固体NaHCO3将残余物的pH调节至7。用乙酸乙酯(3×1000mL)从水相中萃取有机组分，并用卤水洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥并过滤。将滤液在真空下浓缩，以得到干残余物，其通过使用10-50％乙酸乙酯/己烷作为洗脱剂的硅胶(230-400目)柱色谱纯化，以得到为棕色固体的标题化合物(55g，63％)。1H NMR(DMSO-d6)δ9.33(s， 1H)，8.24(s，1H)，7.84(s，1H)，7.73(s，1H)，4.34(q，2H，J＝8Hz)，1.34(t，3H， J＝8Hz)。LCMS：m/z＝268.8[M+]，270.8[M+
2]，RT＝2.90分钟,(程序P1，柱W)。
2]，RT＝2.90分钟,(程序P1，柱W)。
[0491] 步骤4：8-(4-甲基-哌啶-1-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸乙酯
[0492] 向反应管中搅拌的化合物IV(1g；3.71mmol；1当量)的1,4-二氧六环溶液中加入 4-甲基哌啶(0.73g；7.43mmol；2当量)，并用氩气将所得混合物除气5min，随后加入Cs2CO3 (1.81g；5.56mmol；1.5当量)、Pd2(dba)3(0.16g；0.018mmol；0.05当量)和4,5-双二苯基膦-
9,9-二甲基氧杂蒽(0.21g；0.37mmol；0.1当量)。然后用氩气再将混合物除气5min，密封反应管，并在115℃加热5h。通过 垫过滤混合物，并用饱和的NaHCO3水溶液随后是卤水洗涤滤液。然后于无水Na2SO4上干燥有机层，过滤并蒸发至干以得到粗材料。通过用50％EtOAc/己烷洗脱的硅胶(100-200目)柱色谱纯化，以得到为浅棕色固体的标题化合物
1
(0.25g，23％)。H NMR(DMSO-d6)δ8.84(s，1H)，8.03(s，1H)，7.55(s， 1H)，6.75(s，1H)，4.31(m，4H)，2.73(q，2H，J＝8Hz)，1.73(d，2H，J＝12Hz)， 1.56(m，1H)，1.3(m，5H)，0.9(t，3H，J＝4Hz)。LCMS：m/z＝288[M+H]+，RT＝3.56 分钟,(程序P1，柱W)。
9,9-二甲基氧杂蒽(0.21g；0.37mmol；0.1当量)。然后用氩气再将混合物除气5min，密封反应管，并在115℃加热5h。通过 垫过滤混合物，并用饱和的NaHCO3水溶液随后是卤水洗涤滤液。然后于无水Na2SO4上干燥有机层，过滤并蒸发至干以得到粗材料。通过用50％EtOAc/己烷洗脱的硅胶(100-200目)柱色谱纯化，以得到为浅棕色固体的标题化合物
1
(0.25g，23％)。H NMR(DMSO-d6)δ8.84(s，1H)，8.03(s，1H)，7.55(s， 1H)，6.75(s，1H)，4.31(m，4H)，2.73(q，2H，J＝8Hz)，1.73(d，2H，J＝12Hz)， 1.56(m，1H)，1.3(m，5H)，0.9(t，3H，J＝4Hz)。LCMS：m/z＝288[M+H]+，RT＝3.56 分钟,(程序P1，柱W)。
[0493] 步骤5：3-溴-8-(4-甲基-哌啶-1-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸乙酯
[0494] 在0℃向化合物(1.6g；5.5mmol；1当量)于干THF(30mL)的搅拌溶液中分批加入NBS(0.99g；5.5mmol；1当量)，并将所得混合物在0℃搅拌30min。将混合物倒入冰-冷饱和的NaHCO3水溶液中，并用乙酸乙酯(3×500mL)萃取有机组分。然后用卤水溶液洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，过滤并蒸发至干以得到为米白色固体的标题化合物(1.7g，83％)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.34(s，1H)，7.75(s，1H)，6.87(s， 1H)，4.35(m，4H)，2.79(q，2H，J＝12Hz)，1.73(d，2H，J＝12Hz)，1.58(s，1H)， 1.3(m，5H)，0.95(t，3H，J＝4Hz)。LCMS：m/z＝
366.2[M+]，368.2[M+2]，RT＝2.51 分钟,(程序P1，柱W)。
366.2[M+]，368.2[M+2]，RT＝2.51 分钟,(程序P1，柱W)。
[0495] 步骤6：8-(4-甲基-哌啶-1-基)-3-(5-甲基-噻吩-2-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸乙酯
[0496] 向反应管中的化合物VI(1g；2.7mmol；1当量)于干甲苯的搅拌溶液中加入化合物 VIa(1.58g；4mmol；1.5当量)，并用氩气将所得混合物除气5min。向混合物中加入Pd(PPh3)4 (0.31g；0.27mmol；0.1当量)，并用氩气再将所得混合物除气5min。密封反应管，并将混合物于搅拌下在115℃加热4h。然后通过 垫将混合物过滤，并用饱和的NaHCO3水溶液随后是卤水洗涤滤液。然后于无水Na2SO4上干燥有机层，过滤并蒸发至干以得到粗材料。通过用50％EtOAc/己烷洗脱的硅胶(230-400目)柱色谱纯化粗产物，以得到为浅棕色固体的标题化合物(0.8g，80％)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.57(s，1H)，7.72(s，1H)， 7.27(d，1H，J＝4Hz)，6.98(d，1H，J＝2Hz)，6.85(s，1H)，4.3(m，4H)，2.79(q， 2H，J＝12Hz)，2.53(s，3H)，1.75(d，+
2H，J＝8Hz)，1.58(s，1H)，1.32(m，5H)， 0.96(d，3H)。LCMS：m/z＝384[M+H] ，RT＝4.50分钟,(程序P1，柱Y)。
2H，J＝8Hz)，1.58(s，1H)，1.32(m，5H)， 0.96(d，3H)。LCMS：m/z＝384[M+H] ，RT＝4.50分钟,(程序P1，柱Y)。
[0497] 步骤7：8-(4-甲基-哌啶-1-基)-3-(5-甲基-噻吩-2-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸
[0498] 在0℃向化合物VII(0.8g，2.08mmol，1当量)于THF:甲醇:H2O(12mL，3:2:1) 的溶液中加入一水合氢氧化锂(0.175g，4.1mmol，2当量)于水(1mL)中的溶液，并将所得混合物在23℃搅拌3h。在减压下移除溶剂，并用水稀释残余物，用1N HCl酸化以将pH调节至3。通过过滤收集沉淀固体，并在真空下干燥以得到标题化合物(0.74g，100％)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.55(s，1H)，7.68(s，1H)，7.23(d，1H，J＝3Hz)，6.97(d， 1H，J＝2Hz)，6.94(s，1H)，4.27(d，
2H，J＝12Hz)，2.76(m，2H)，2.52(s，3H)， 1.74(d，2H，J＝8Hz)，1.67(m，1H)，1.37(m，2H)；
0.96(m，3H)。LCMS：m/z＝356.3 [M+H]+，RT＝2.69分钟,(程序P1，柱Y)。
2H，J＝12Hz)，2.76(m，2H)，2.52(s，3H)， 1.74(d，2H，J＝8Hz)，1.67(m，1H)，1.37(m，2H)；
0.96(m，3H)。LCMS：m/z＝356.3 [M+H]+，RT＝2.69分钟,(程序P1，柱Y)。
[0499] 步骤8：(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(4-甲基哌啶-1-基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺
[0500] 在0℃向化合物VIII(0.2g，0.56mmol，1当量)于DMF(10mL)的搅拌溶液中加入DIPEA(0.3mL，1.6mmol，3当量)和HATU(0.27g，0.72mmol，1.3当量)，并使所得混合物搅拌15min。向混合物中加入(S)-1-(4H-[1,2,4]三唑-3-基)-乙胺盐酸盐(0.1g，0.67 mmol，1.2当量)，并使所得混合物在23℃搅拌另外16h。在真空下从混合物中移除溶剂，用EtOAc稀释残余物，并用饱和的碳酸氢钠水溶液、氯化铵水溶液和卤水洗涤。将有机层于无水硫酸钠上干燥，过滤并弄浓缩至干。通过用0-5％甲醇/CH2Cl2洗脱的硅胶(230-400 目)柱色谱纯化粗产物，以得到为棕色固体的标题化合物(0.12g，48％)。1H NMR(CDCl3) δ8.46(s，1H)，8.00(s，1H)，7.62(s，1H)，7.04(d，1H，J＝2Hz)，6.82(m，2H)， 6.61(s，1H)，5.42(m，1H)，4.15(m，
2H)，2.77(t，2H，J＝12Hz)，2.48(s，3H)， 1.75(m，5H)，1.52(m，3H)，0.99(d，3H，J＝8Hz)。
+
LCMS：m/z＝450.0[M+H]，RT ＝3.20分钟,(程序P1，柱W)。
2H)，2.77(t，2H，J＝12Hz)，2.48(s，3H)， 1.75(m，5H)，1.52(m，3H)，0.99(d，3H，J＝8Hz)。
+
LCMS：m/z＝450.0[M+H]，RT ＝3.20分钟,(程序P1，柱W)。
[0501] 实施例12：(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(4-氨基甲酰基-4-甲基哌啶-1-基)-3-(5- 甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺
[0502]
[0503] 化合物IV依照为实施例11描述的实验步骤制备。
[0504] 步骤4：8-(4-苄氧基羰基-4-甲基-哌啶-1-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸乙酯[0505] 向反应管中的化合物IV(1g；3.71mmol；1当量)的搅拌的1,4-二氧六环(40mL) 溶液中加入4-甲基-哌啶-4-羧酸苄酯(1.5g；5.6mmol；1.5当量)，并用氩气将所得混合物除气5min，随后加入Cs2CO3(3.63g；11.15mmol；3当量)、Pd2(dba)3(0.17g；0.019mmol；0.05当量)和4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(0.21g；0.37mmol；0.1当量)。然后用氩气再将混合物除气5min，密封反应管，并在130℃加热5h。通过 垫过滤混合物，用水(200mL)稀释滤液，并用乙酸乙酯(200mL)萃取有机组分。用饱和NaHCO3水溶液、卤水洗涤有机层，然后于Na2SO4上干燥并过滤。然后在减压下浓缩滤液，以得到粗材料，其通过用50％EtOAc/己烷洗脱的CombiflashTM色谱纯化，以得到为浅棕色固体的标题化合物(0.33g，23％)。1H NMR(CDCl3)δ8.52(s，1H)，7.59(s，1H)，7.55(s，1H)， 7.33(m，5H)，6.91(s，1H)，5.16(s，2H)，
4.37(q，2H，J＝7Hz)，3.92(m，2H)， 3.06(t，2H，J＝10Hz)，2.34(d，2H，J＝14Hz)，1.77(m，
2H)，1.39(t，3H，J＝7Hz)， 1.29(s，3H)。LCMS：m/z＝422.2[M+H]+，RT＝3.77分钟,(程序P1，柱W)。
4.37(q，2H，J＝7Hz)，3.92(m，2H)， 3.06(t，2H，J＝10Hz)，2.34(d，2H，J＝14Hz)，1.77(m，
2H)，1.39(t，3H，J＝7Hz)， 1.29(s，3H)。LCMS：m/z＝422.2[M+H]+，RT＝3.77分钟,(程序P1，柱W)。
[0506] 步骤5：8-(4-苄氧基羰基-4-甲基-哌啶-1-基)-3-溴-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸乙酯
[0507] 在0℃向化合物V(1g；2.37mmol；1当量)于干THF(20mL)的搅拌溶液中分批加入NBS(0.29g；1.66mmol；0.7当量)，并将所得混合物在0℃搅拌5min。将混合物倒入冰-冷饱和的NaHCO3水溶液中，并用乙酸乙酯(3×100mL)萃取有机组分。然后用卤水溶液洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，过滤并蒸发至干以得到为米白色固体的标题化合物(0.67g，56％)。1H NMR(CDCl3)δ8.48(s，1H)，7.57(s，1H)，7.33(m， 5H)，6.99(s，1H)，5.16(s，2H)，
4.40(q，2H，J＝7Hz)，3.90(m，2H)，3.06(t，2H， J＝11Hz)，2.34(d，2H，J＝13Hz)，1.77(m，
2H)，1.41(t，3H，J＝7Hz)，1.29(s， 3H)。LCMS：m/z＝500.2[M+]，502.4[M+2]，RT＝4.06分钟,(程序P1，柱V)。
4.40(q，2H，J＝7Hz)，3.90(m，2H)，3.06(t，2H， J＝11Hz)，2.34(d，2H，J＝13Hz)，1.77(m，
2H)，1.41(t，3H，J＝7Hz)，1.29(s， 3H)。LCMS：m/z＝500.2[M+]，502.4[M+2]，RT＝4.06分钟,(程序P1，柱V)。
[0508] 步骤6：8-(4-苄氧基羰基-4-甲基-哌啶-1-基)-3-(5-甲基-噻吩-2-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6- 羧酸乙酯
[0509] 向反应管中的化合物VI(0.67g；1.34mmol；1当量)于干DMF(5mL)的搅拌溶液中加入化合物VIa(0.66g；1.60mmol；1.2当量)，并用氩气将所得混合物除气5min。然后向混合物中加入Pd(PPh3)4(0.15g；0.13mmol；0.1当量)，并再用氩气除气5min。密封反应管，并将混合物于搅拌下在140℃加热4h。通过 垫过滤混合物，并将滤液用乙酸乙酯(200mL)和水(200mL)稀释。用水(200mL)和卤水洗涤有机层，然后于无水Na2SO4上干燥并过滤。在真空下蒸发滤液以得到粗材料，其通过用50％EtOAc/己烷洗脱的 色谱纯化，以得到为浅棕色固体的标题化合物(0.65g，94％)。1H NMR (CDCl3)δ8.71(s，1H)，7.63(s，1H)，7.34(m，5H)，7.06(d，1H，J＝4Hz)，6.96(s， 1H)，6.84(d，1H，J＝4Hz)，5.17(s，2H)，4.38(q，2H，J＝7Hz)，3.92(m，2H)， 3.07(t，2H，J＝10Hz)，2.55(s，3H)，2.35(d，2H，J＝14Hz)，1.77(m，
2H)，1.38 (t，3H，J＝7Hz)，1.30(s，3H)。LCMS：m/z＝518.4[M+H]+，RT＝4.31分钟,(程序P1，柱V)。
2H)，1.38 (t，3H，J＝7Hz)，1.30(s，3H)。LCMS：m/z＝518.4[M+H]+，RT＝4.31分钟,(程序P1，柱V)。
[0510] 步骤7：8-(4-羧基-4-甲基-哌啶-1-基)-3-(5-甲基-噻吩-2-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸乙酯
[0511] 向化合物VII(0.65g；1.25mmol；1当量)于干甲醇的搅拌溶液中加入10％Pd/C(650 mg)，并将所得混合物在氢气气氛压力下搅拌15h。通过 垫过滤混合物，并将滤液浓1
缩至干以得到标题化合物(0.45g，85％)。H NMR(DMSO-d6)δ8.58(s，1H)，7.74 (s，1H)，7.28(d，1H，J＝3Hz)，7.00(m，1H)，6.87(s，1H)，4.32(q，2H，J＝7Hz)， 4.15(m，1H)，3.92(m，2H)，
2.87(t，2H，J＝7Hz)，2.54(s，3H)，2.33(m，2H)， 1.70(m，2H)，1.37(m，3H)，1.30(s，3H)。
LCMS：m/z＝428.2[M+H]+，RT＝2.96分钟,(程序P1，柱W)。
缩至干以得到标题化合物(0.45g，85％)。H NMR(DMSO-d6)δ8.58(s，1H)，7.74 (s，1H)，7.28(d，1H，J＝3Hz)，7.00(m，1H)，6.87(s，1H)，4.32(q，2H，J＝7Hz)， 4.15(m，1H)，3.92(m，2H)，
2.87(t，2H，J＝7Hz)，2.54(s，3H)，2.33(m，2H)， 1.70(m，2H)，1.37(m，3H)，1.30(s，3H)。
LCMS：m/z＝428.2[M+H]+，RT＝2.96分钟,(程序P1，柱W)。
[0512] 步骤8：8-(4-氨基甲酰基-4-甲基-哌啶-1-基)-3-(5-甲基-噻吩-2-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6- 羧酸乙酯
[0513] 在0℃向化合物VIII(0.45g，1.05mmol，1当量)于DMF(5mL)的搅拌溶液中加入DIPEA(0.54mL，3.16mmol，3当量)和HATU(0.48g，1.26mmol，1.2当量)，并将所得混合物搅拌15min。向混合物中加入氯化铵(0.17g，3.16mmol，3当量)，并使所得混合物在23℃搅拌另外
18h。用水将混合物淬灭，并用乙酸乙酯(3×100mL)萃取有机组分并用卤水洗涤。将合并的有机层于无水硫酸钠上干燥，过滤并弄浓缩至干以得到粗材料，其通过用0-5％甲醇/CH2Cl2洗脱的CombiflashTM色谱纯化以得到为棕色固体的标题化合物(0.28g，63％)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.57(s，1H)，7.73(s，1H)，7.28(d，1H， J＝4Hz)，7.24(m，1H)，7.00(m，1H)，6.91(brs，1H)，6.85(s，1H)，4.33(q，J＝11 Hz，2H)，3.87(m，2H)，3.20(t，J＝10Hz，2H)，2.54(s，
3H)，2.14(m，2H)，1.55 (m，2H)，1.31(m，3H)，1.16(s，3H)。LCMS：m/z＝427.2[M+H]+，RT＝
3.27分钟,(程序P1，柱V)。
18h。用水将混合物淬灭，并用乙酸乙酯(3×100mL)萃取有机组分并用卤水洗涤。将合并的有机层于无水硫酸钠上干燥，过滤并弄浓缩至干以得到粗材料，其通过用0-5％甲醇/CH2Cl2洗脱的CombiflashTM色谱纯化以得到为棕色固体的标题化合物(0.28g，63％)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.57(s，1H)，7.73(s，1H)，7.28(d，1H， J＝4Hz)，7.24(m，1H)，7.00(m，1H)，6.91(brs，1H)，6.85(s，1H)，4.33(q，J＝11 Hz，2H)，3.87(m，2H)，3.20(t，J＝10Hz，2H)，2.54(s，
3H)，2.14(m，2H)，1.55 (m，2H)，1.31(m，3H)，1.16(s，3H)。LCMS：m/z＝427.2[M+H]+，RT＝
3.27分钟,(程序P1，柱V)。
[0514] 步骤9：8-(4-氨基甲酰基-4-甲基-哌啶-1-基)-3-(5-甲基-噻吩-2-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6- 羧酸
[0515] 在0℃向化合物IX(0.28g，0.9mmol，1当量)于THF:甲醇:H2O(14mL，5:1:1)的溶液中加入一水合氢氧化锂(0.108g，2.6mmol，3当量)于水(1mL)中的溶液，并将所得混合物在23℃搅拌2h。在减压下移除有机溶剂，并用水稀释残余物，用6N HCl酸化以将pH调节至3。通过过滤收集沉淀固体，并将固体在真空下干燥以得到标题化合物(0.20 g，76％)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.52(s，1H)，7.66(s，1H)，7.22(m，2H)，6.90(m， 3H)，3.77(m，2H)，3.18(m，2H)，
2.53(s，3H)，2.15(m，2H)，1.55(m，2H)，1.16 (s，3H)。LCMS：m/z＝399.0[M+H]+，RT＝2.08分钟,(程序P1，柱W)。
2.53(s，3H)，2.15(m，2H)，1.55(m，2H)，1.16 (s，3H)。LCMS：m/z＝399.0[M+H]+，RT＝2.08分钟,(程序P1，柱W)。
[0516] 步骤10：(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(4-氨基甲酰基-4-甲基哌啶-1-基)-3-(5- 甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺
[0517] 在23℃向化合物X(0.1g，0.25mmol，1当量)于DMF(5mL)的搅拌溶液中加入 TEA(2mL，0.4mmol，3当量)、(S)-1-(4H-[1,2,4]三唑-3-基)-乙胺盐酸盐(0.06g，0.4mmol， 1.5当量)的DMF(2mL)溶液和T3P(0.2mL，0.4mmol，1.5当量)，并将所得混合物搅拌16h。用水将混合物淬灭，并用10％甲醇/二氯甲烷(2×200mL)萃取有机组分。用卤水洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，过滤并弄浓缩至干。通过用0-10％甲醇/CH2Cl2 (于8％初始化合物)洗脱的硅胶(100-200目)柱色谱纯化粗残余物以得到为米白色固体的标题化合物1
(0.012g，10％)。H NMR(DMSO-d6-80℃)δ13.61(brs，1H)，8.77(s，1H)， 8.54(s，1H)，8.14(brs，1H)，7.64(s，1H)，7.26(s，1H)，6.96(s，2H)，6.78(brs， 2H)，5.34(m，1H)，3.86(m，
2H)，3.36(m，2H)，2.54(s，3H)，2.17(m，2H)，1.63 (m，2H)，1.57(m，3H)，1.21(s，3H)。LCMS：
m/z＝493.4[M+H]+，RT＝2.60分钟,(程序P1，柱V)。
(0.012g，10％)。H NMR(DMSO-d6-80℃)δ13.61(brs，1H)，8.77(s，1H)， 8.54(s，1H)，8.14(brs，1H)，7.64(s，1H)，7.26(s，1H)，6.96(s，2H)，6.78(brs， 2H)，5.34(m，1H)，3.86(m，
2H)，3.36(m，2H)，2.54(s，3H)，2.17(m，2H)，1.63 (m，2H)，1.57(m，3H)，1.21(s，3H)。LCMS：
m/z＝493.4[M+H]+，RT＝2.60分钟,(程序P1，柱V)。
[0518] 实施例13：8-(4-氨基甲酰基哌嗪-1-基)-N-((6-甲基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-2-基) 咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺
[0519]
[0520] 用与方案28中制备化合物IX相似的方法合成化合物Ixb，将步骤4中的4-甲基吡啶替换为N-BOC哌嗪，将步骤8中的嘧三唑胺类似物替换为吡啶胺类似物。随后进行步骤A 和步骤B以合成化合物XIb.
[0521] 步骤A：3-(5-甲基-噻吩-2-基)-8-哌嗪-1-基-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸[(S)-1-(1H-[1,2,4] 三唑-3-基)-乙基]-胺
[0522] 向IXb(240mg，0.44mmol，1当量)于CH2Cl2(8mL)的溶液中加入TFA(0.33mL， 4.4mmol，10当量)，并将所得混合物在23℃搅拌16h。将混合物在真空下浓缩以移除TFA 并用水稀释。加入NaHCO3水溶液，并用5％MeOH/CH2Cl2萃取有机组分。于无水Na2SO4上干燥有机层，过滤并在减压下浓缩以得到为米白色固体的标题化合物(140mg，72％)。1H NMR(DMSO-d6)δ9.24(t，1H，J＝5Hz)，8.60(s，1H)，8.42(s，1H)，7.69(s， 1H)，7.62-7.60(m，1H)，7.30(d，1H，J＝3Hz)，7.21-7.20(m，1H)，6.99-6.97(m， 2H)，4.45(d，2H，J＝5Hz)，3.57(s，4H)，
3.02(s，4H)，2.53(s，3H)，2.43(s，3H)。 LCMS：m/z＝447.3[M+H]+，RT＝2.54分钟,(程序P1，柱V)。
3.02(s，4H)，2.53(s，3H)，2.43(s，3H)。 LCMS：m/z＝447.3[M+H]+，RT＝2.54分钟,(程序P1，柱V)。
[0523] 步骤B：8-(4-氨基甲酰基哌嗪-1-基)-N-((6-甲基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺
[0524] 在23℃向Xb(80mg，0.18mmol，1当量)于THF(5mL)的溶液中加入TMS-异氰酸酯(0.05ml，0.36mmol，2当量)，并将所得混合物搅拌4h。然后将混合物用NaHCO3水溶液稀释，并用15％MeOH/CH2Cl2萃取有机相，于无水硫酸钠上干燥，过滤并在减压下浓缩。通过用17％MeOH/CH2Cl2洗脱的快速CombiflashTM色谱使用硅胶柱纯化粗残余物，以得到为米白色固体的标题化合物(14mg，16％)。1H NMR(DMSO-d6)δ9.20(t，1H，J＝6Hz)，8.60(s，1H)，8.42(s，1H)，7.70(s，1H)，7.62-7.60(m，1H)，7.30(d，1H， J＝3Hz)，7.22-7.20(m，1H)，6.98(m，2H)，
4.46(d，2H，J＝6Hz)，3.51(s，8H)， 2.53(s，3H)，2.43(s，3H)。LCMS：m/z＝490.2[M+H]+，RT＝2.65分钟,(程序P1，柱 W)。
4.46(d，2H，J＝6Hz)，3.51(s，8H)， 2.53(s，3H)，2.43(s，3H)。LCMS：m/z＝490.2[M+H]+，RT＝2.65分钟,(程序P1，柱 W)。
[0525] 实施例14：(S)-N-(1-(1,3,4-噁二唑-2-基)乙基)-8-(5-(二氟甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-3-(5- 甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺
[0526]
[0527] 步骤1：6-溴-咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基胺
[0528] 向化合物I(50g；0.26mol；1当量)于乙醇(2L)的搅拌溶液中逐滴加入碳酸氢钠 (46g；0.53mol；2当量)和氯乙醛溶液(～50％水溶液，86mL；0.66mol；2.5当量)，并将所得混合物加热回流for 17h。将混合物蒸发至干，使用冰-冷饱和的NaHCO3水溶液和固体NaHCO3将pH调节至7。用乙酸乙酯(3×1000mL)从水相中萃取有机组分并用卤水洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，并在真空下移除溶剂以得到干残余物，其通过使用10-50％乙酸乙酯/己烷作为洗脱剂的硅胶(230-400目)柱色谱纯化，以得到为棕色固体的标题化合物(40g，71％)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.04(s，1H)，7.77(s，1H)， 7.44(s，1H)，6.31(s，1H)，5.99(s，2H)。LCMS：m/z＝212.0[M+]，214.0[M+2]，RT ＝2.55分钟,(程序P1，柱V)。
[0529] 步骤2：8-氨基-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸甲酯
[0530] 向化合物II(10g；47.20mmol；1当量)于甲醇(200mL)的溶液中加入二异丙基乙胺(41mL；236mmol；5当量)，并用氩气将所得混合物除气5min。向混合物中加入 PdCl2(dppf)(4g；4.72mmol；0.1当量)，并用氩气将所得混合物另外除气5min，然后在高压釜中于90℃在50psi一氧化碳压力下加热16h。通过 垫过滤混合物，并用饱和的NaHCO3水溶液随后是卤水洗涤滤液。然后于无水Na2SO4上干燥有机层，过滤并蒸发至干以得到粗材料。通过用
0-10％甲醇/二氯甲烷作为洗脱剂洗脱的硅胶(100-200目)柱色谱纯化，以得到为浅棕色固
1
体的标题化合物(5g，55％)。H NMR(DMSO-d6)δ8.57 (s，1H)，7.97(s，1H)，7.51(s，1H)，6.67(s，1H)，5.86(s，2H)，3.84(s，3H)。LCMS： m/z＝191.8[M+H]+，RT＝2.03分钟,(程序P1，柱V)。
0-10％甲醇/二氯甲烷作为洗脱剂洗脱的硅胶(100-200目)柱色谱纯化，以得到为浅棕色固
1
体的标题化合物(5g，55％)。H NMR(DMSO-d6)δ8.57 (s，1H)，7.97(s，1H)，7.51(s，1H)，6.67(s，1H)，5.86(s，2H)，3.84(s，3H)。LCMS： m/z＝191.8[M+H]+，RT＝2.03分钟,(程序P1，柱V)。
[0531] 步骤3：8-叠氮基-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸甲酯
[0532] 在0℃向化合物III(10g；52.36mmol；1当量)于干THF(600mL)的搅拌溶液中逐滴加入叔丁基亚硝酸酯(32mL；230mmol；4.4当量)和叠氮基三甲基硅烷(16mL， 115mmol，2.20当量)，并将所得混合物在23℃搅拌17h。将混合物蒸发至干，以得到粗材料，其通过用0-50％乙酸乙酯/己烷作为洗脱剂洗脱的硅胶(100-200目)柱色谱纯化以得到为浅棕色固体的标1
题化合物(9g，80％)。H NMR(DMSO-d6)δ9.17(s，1H)，8.19 (s，1H)，7.71(s，1H)，7.11(s，
1H)，3.87(s，3H)。LCMS：m/z＝218.2[M+H]+，RT＝ 2.69分钟,(程序P1，柱V)。
题化合物(9g，80％)。H NMR(DMSO-d6)δ9.17(s，1H)，8.19 (s，1H)，7.71(s，1H)，7.11(s，
1H)，3.87(s，3H)。LCMS：m/z＝218.2[M+H]+，RT＝ 2.69分钟,(程序P1，柱V)。
[0533] 步骤4：8-(5-二氟甲基-4-乙氧基羰基-[1,2,3]三唑-1-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸甲酯
[0534] 在23℃向DBU(25mL；166mmol；1.2当量)于干DMF:THF(1000mL；1:1)的搅拌溶液中缓慢加入4,4-二氟-3-氧亚基-丁酸乙酯(22mL；207.3mmol；1.5当量)，并将混合物搅拌30min。然后将混合物冷却至0℃并逐滴加入化合物IV(30g；138.2mmol；1 当量)的DMF:THF(200ml，1:1)溶液，并使所得混合物在23℃搅拌17h。将混合物用水(1000mL)稀释并用乙酸乙酯(3×500mL)萃取有机组分。将合并的有机层用卤水洗涤，于无水硫酸钠上干燥，过滤并在真空下移除溶剂以得到干残余物，其通过使用10-50％乙酸乙酯/己烷作为洗脱剂的硅胶(230-400目)柱色谱纯化，以得到为固体的标题化合物 (32g，65％)。1H NMR(DMSO-d6)δ9.65(s，1H)，8.33(s，1H)，8.10(s，1H)，7.74 (s，1H)，7.46(m，1H)，4.43(q，2H，J＝7Hz)，3.96(s，
3H)，1.36(t，3H，J＝7Hz)。 LCMS：m/z＝365.8[M+H]+，RT＝2.97分钟,(程序P1，柱Y)。
3H)，1.36(t，3H，J＝7Hz)。 LCMS：m/z＝365.8[M+H]+，RT＝2.97分钟,(程序P1，柱Y)。
[0535] 步骤5：3-溴-8-(5-二氟甲基-4-乙氧基羰基-[1,2,3]三唑-1-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸甲酯
[0536] 在0℃向化合物V(10g；27.4mmol；1当量)于干THF(150mL)的搅拌溶液中分批加入(7.4g；41.1mmol；1.5当量)，并将所得混合物在0℃搅拌30min。将混合物倒入冰-冷饱和的NaHCO3水溶液中，并用乙酸乙酯(3×500mL)萃取有机组分。然后用卤水洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，并在真空下移除溶剂以得到干残余物，其通过使用10-50％乙酸乙酯/己烷作为洗脱剂的硅胶(230-400目)重力柱纯化，以得到为固体的标题化合物(10g，82％)。1H NMR(DMSO-d6)δ9.00(s，1H)，8.27(s，1H)，7.96 (s，1H)，7.44(m，1H)，4.43(q，2H，J＝7Hz)，3.96(s，3H)，1.35(t，3H，J＝7Hz)。 LCMS：m/z＝443.8[M+]，445.8[M+2]，RT＝3.20分钟,(程序P1，柱Y)。
[0537] 步骤6：8-(5-二氟甲基-4-乙氧羰基-[1,2,3]三唑-1-基)-3-(5-甲基-噻吩-2-基)-咪唑并[1,2-a] 吡啶-6-羧酸甲酯
[0538] 向反应管中搅拌的化合物VI(0.5g；1.13mmol；1当量)的DMF溶液中加入化合物 VIa(0.7g；1.70mmol；1.5当量)，并用氩气将所得混合物除气5min。向混合物中加入 Pd(PPh3)4(0.13g；0.11mmol；0.1当量)，并重复用氩气除气约5min。密封反应管，并在 115℃加热4h。通过 垫过滤混合物，并用饱和的NaHCO3水溶液随后是卤水洗涤滤液。然后于无水Na2SO4上干燥有机层，过滤并在真空下移除溶剂以得到粗材料。通过用 0-5％甲醇/CH2Cl2洗脱的硅胶(230-400目)柱色谱纯化粗产品以得到为浅棕色固体的标题化合物(0.25g，50％)。1H NMR(DMSO-d6)δ9.18(s，1H)，8.21(s，1H)，7.93(s， 1H)，7.47(m，2H)，7.05(s，1H)，4.44(q，2H，J＝7Hz)，3.93(s，3H)，2.56(s，3H)， 1.37(t，3H，J＝7Hz)。LCMS：m/z＝461.8[M+H]+，RT＝3.56分钟,(程序P1，柱Y)。
[0539] 步骤7：8-(4-羧基-5-二氟甲基-[1,2,3]三唑-1-基)-3-(5-甲基-噻吩-2-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶 -6-羧酸
[0540] 在0℃向化合物VII(0.5g，1.10mmol，1当量)于THF:甲醇:H2O(55mL，3:2:1) 的溶液中加入一水合氢氧化锂(0.14g，3.25mmol，3当量)于水(5mL)中的溶液，并将所得混合物在23℃搅拌3h。在减压下移除溶剂，并用水稀释残余物，用1N HCl酸化以将pH调节至3。通过过滤收集沉淀固体，并在真空下干燥以得到标题化合物(0.35g，70％)。
[0541] 步骤8：8-(5-二氟甲基-[1,2,3]三唑-1-基)-3-(5-甲基-噻吩-2-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸
[0542] 将化合物VIII(0.35g；0.83mmol；1当量)在200℃加热1h以得到标题化合物(0.31 g，95％)。
[0543] 步骤9：N'-((S)-2-{[8-(5-二氟甲基-[1,2,3]三唑-1-基)-3-(5-甲基-噻吩-2-基)-咪唑并[1,2-a] 吡啶-6-羰基]-氨基}-丙酰基)-肼羧酸叔丁酯
[0544] 在0℃向化合物IX(0.31g，0.83mmol，1当量)于DMF(30mL)的搅拌溶液中加入DIPEA(0.5mL，2.50mmol，3当量)和HATU(0.47g，1.24mmol，1.5当量)，并将所得混合物搅拌15min。向混合物中加入(S)-1-(4H-[1,2,4]三唑-3-基)-乙胺盐酸盐(0.25g， 1.24mmol，1.5当量)，并使所得混合物在23℃搅拌另外16h。在真空下从混合物中移除溶剂，并用EtOAc稀释残余物。用饱和碳酸氢钠水溶液、氯化铵水溶液和卤水洗涤有机层。将有机层于无水硫酸钠上干燥，过滤并弄浓缩至干。通过用0-5％甲醇/CH2Cl2洗脱的硅胶 (230-400目)柱色谱纯化以得到为棕色固体的标题化合物(0.3g，65％)。1H NMR(DMSO-d6) δ9.76(s，1H)，9.21(s，
1H)，9.07(d，1H，J＝7Hz)，8.78(s，1H)，8.46(s，1H)， 8.28(s，1H)，7.90(s，1H)，7.47(m，
2H)，7.06(s，1H)，4.57(m，1H)，2.56(s，3H)， 1.37(m，12H)。LCMS：m/z＝561.2[M+H]+，RT＝
3.20分钟,(程序P1，柱Y)。
1H)，9.07(d，1H，J＝7Hz)，8.78(s，1H)，8.46(s，1H)， 8.28(s，1H)，7.90(s，1H)，7.47(m，
2H)，7.06(s，1H)，4.57(m，1H)，2.56(s，3H)， 1.37(m，12H)。LCMS：m/z＝561.2[M+H]+，RT＝
3.20分钟,(程序P1，柱Y)。
[0545] 步骤10：8-(5-二氟甲基-[1,2,3]三唑-1-基)-3-(5-甲基-噻吩-2-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸((S)-1-肼基羰基-乙基)-胺
[0546] 在0℃向化合物X(0.3g；0.53mmol；1当量)于1,4-二氧六环(20mL)的搅拌溶液中于30min的时间逐滴加入于1,4-二氧六环(10mL)中的4M HCl，并将所得混合物在 23℃搅拌
24h。在真空蒸发挥发性物质，以得到为固体的标题化合物(0.2g，80％)。1H NMR (DMSO-d6)δ
11.26(s，1H)，10.40(brs，3H)，9.26(d，1H，J＝6Hz)，9.22(s，1H)， 8.47(s，1H)，8.29(s，
1H)，7.93(s，1H)，7.47(m，2H)，7.06(s，1H)，4.57(m，1H)， 2.56(s，3H)，1.43(d，3H，J＝
7Hz)。LCMS：m/z＝461.4[M+H]+，RT＝2.80分钟,(程序P1，柱Y)。
24h。在真空蒸发挥发性物质，以得到为固体的标题化合物(0.2g，80％)。1H NMR (DMSO-d6)δ
11.26(s，1H)，10.40(brs，3H)，9.26(d，1H，J＝6Hz)，9.22(s，1H)， 8.47(s，1H)，8.29(s，
1H)，7.93(s，1H)，7.47(m，2H)，7.06(s，1H)，4.57(m，1H)， 2.56(s，3H)，1.43(d，3H，J＝
7Hz)。LCMS：m/z＝461.4[M+H]+，RT＝2.80分钟,(程序P1，柱Y)。
[0547] 步骤11：(S)-N-(1-(1,3,4-噁二唑-2-基)乙基)-8-(5-(二氟甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-3-(5- 甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺
[0548] 在0℃向化合物XI(0.18g；0.40mmol；1当量)于乙酸(16mL)的搅拌溶液中逐滴加入原甲酸三乙酯(0.5mL，2.40mmol，6当量)，并将所得混合物加热回流2h。将混合物倒入冰-冷饱和的NaHCO3水溶液中，并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取有机组分。然后用卤水洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，并在真空下浓缩以得到干残余物，其通过使用0-5％甲醇/二氯甲烷作为洗脱剂的硅胶(230-400目)柱色谱纯化，以得到为固体的标题化合物(0.11g，60％)。1H NMR(DMSO-d6)δ9.50(d，1H，J＝7Hz)，9.20(s，1H)， 8.46(s，1H)，8.25(s，1H)，7.91(s，1H)，7.45(m，3H)，7.05(d，1H，J＝1Hz)，5.48 (m，1H)，2.56(s，3H)，1.64(d，3H，J＝7Hz)。
LCMS：m/z＝471.0[M+H]+，RT＝3.08 分钟,(程序P1，柱Y)。
LCMS：m/z＝471.0[M+H]+，RT＝3.08 分钟,(程序P1，柱Y)。
[0549] 实施例15：(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(4-甲基哌啶-1-基)-3-(邻甲苯基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺
[0550]
[0551] 步骤1：6-氨基-烟酸乙酯
[0552] 在60℃向化合物I(150g；1.09mol；1当量)于乙醇(1.5L)的搅拌溶液中逐滴加入亚硫酰氯(236mL；3.26mol；3当量)，并将所得混合物加热回流17h。将混合物蒸发至干，并使用冰-冷饱和的NaHCO3水溶液和固体NaHCO3将pH调节至7。用乙酸乙酯(5 ×1000mL)从水相中萃取有机组分，并用卤水洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，过滤并在真空下移除溶剂以得到为米白色固体的标题化合物(152g，84％)。1H NMR(CDCl3) δ8.71(s，1H)，7.99(d，1H，J＝12Hz)，6.45(d，1H，J＝8Hz)，4.95(s，2H)，4.31 (q，2H，J＝8Hz)；1.35(t，3H，J＝
8Hz)。LCMS：m/z＝167.3[M+H]+，RT＝2.32分钟, (程序P1，柱Y)。
8Hz)。LCMS：m/z＝167.3[M+H]+，RT＝2.32分钟, (程序P1，柱Y)。
[0553] 步骤2：6-氨基-5-溴-烟酸乙酯
[0554] 在0℃向化合物II(50g；301mmol；1当量)于干THF(500mL)的搅拌溶液中分批加入NBS(53.6g；301mmol；1当量)，并将所得混合物在23℃搅拌17h。将混合物倒入冰-冷饱和的NaHCO3水溶液中，并用乙酸乙酯(3×1000mL)萃取有机组分。然后用卤水溶液洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥并蒸发至干，以得到为米白色固体的化合物(71g，96％)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.49(s，1H)，8.07(s，1H)，7.15(s，2H)，4.22 (q，2H，J＝8Hz)，1.30(t，3H，J＝8Hz)。LCMS：m/z＝245[M+]，247[M+2]，RT＝2.97 分钟,(程序P1，柱W)。
[0555] 步骤3：8-溴-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸乙酯
[0556] 向化合物III(80g；326mmol；1当量)于乙醇(1L)的搅拌溶液中逐滴加入碳酸氢钠(54.8g；652mmol；2当量)和氯乙醛水溶液(～50％水溶液，212mL；1.63mol；5当量)并将混合物加热回流17h。然后将混合物蒸发至干，并使用冰-冷饱和的NaHCO3水溶液和固体NaHCO3将pH调节至7。用乙酸乙酯(3×1000mL)从水相中萃取有机组分并用卤水洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥。在真空下从有机层中移除溶剂以得到干残余物，其通过使用10-50％乙酸乙酯/己烷作为洗脱剂的硅胶(230-400目)柱色谱纯化，以得到为棕色固体的标题化合物(55g，63％)。1H NMR(DMSO-d6)δ9.33(s，1H)，8.24 (s，1H)，7.84(s，1H)，7.73(s，1H)，4.34(q，2H，J＝8Hz)，1.34(t，3H，J＝8Hz)。 LCMS：m/z＝268.8[M+]，270.8[M+2]，RT＝2.90分钟,(程序P1，柱W)。
[0557] 步骤4：8-(4-甲基-哌啶-1-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸乙酯
[0558] 向反应管中搅拌的化合物IV(1g；3.71mmol；1当量)的1,4-二氧六环溶液中加入 4-甲基哌啶(0.73g；7.43mmol；2当量)，并用氩气将所得混合物除气5min，随后加入Cs2CO3 (1.81g；5.56mmol；1.5当量)、Pd2(dba)3(0.16g；0.018mmol；0.05当量)和4,5-双二苯基膦-
9,9-二甲基氧杂蒽(0.21g；0.37mmol；0.1当量)。然后用氩气再将混合物除气5min，，密封反应管，并在115℃加热5h。通过 垫过滤混合物，并用饱和的NaHCO3水溶液随后是卤水洗涤滤液。然后收集有机层，并于无水Na2SO4上干燥，过滤并蒸发至干以得到粗材料。通过用
50％EtOAc/己烷洗脱的硅胶(100-200目)柱色谱纯化，以得到为棕色固体的标题化合物(0.25g，23％)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.84(s，1H)，8.03(s，1H)， 7.55(s，1H)，6.75(s，1H)，4.31(m，4H)，2.73(q，2H，J＝8Hz)，1.73(d，2H，J＝ 12Hz)，1.56(m，1H)，1.3(m，5H)，0.9(t，3H，J＝4Hz)。LCMS：m/z＝288[M+H]+， RT＝3.56分钟,(程序P1，柱W)。
9,9-二甲基氧杂蒽(0.21g；0.37mmol；0.1当量)。然后用氩气再将混合物除气5min，，密封反应管，并在115℃加热5h。通过 垫过滤混合物，并用饱和的NaHCO3水溶液随后是卤水洗涤滤液。然后收集有机层，并于无水Na2SO4上干燥，过滤并蒸发至干以得到粗材料。通过用
50％EtOAc/己烷洗脱的硅胶(100-200目)柱色谱纯化，以得到为棕色固体的标题化合物(0.25g，23％)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.84(s，1H)，8.03(s，1H)， 7.55(s，1H)，6.75(s，1H)，4.31(m，4H)，2.73(q，2H，J＝8Hz)，1.73(d，2H，J＝ 12Hz)，1.56(m，1H)，1.3(m，5H)，0.9(t，3H，J＝4Hz)。LCMS：m/z＝288[M+H]+， RT＝3.56分钟,(程序P1，柱W)。
[0559] 步骤5：3-溴-8-(4-甲基-哌啶-1-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸乙酯
[0560] 在0℃向化合物V(1.6g；5.5mmol；1当量)于干THF(30mL)的搅拌溶液中分批加入NBS(0.99g；5.5mmol；1当量)，并将所得混合物在0℃搅拌30min。将混合物倒入冰-冷饱和的NaHCO3水溶液中，并用乙酸乙酯(3×500mL)萃取有机组分。然后用卤水溶液洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥并蒸发至干，以得到为米白色固体的标题化合物(1.7g，83％)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.34(s，1H)，7.75(s，1H)，6.87(s，1H)， 4.35(m，4H)，2.79(q，2H，J＝
12Hz)，1.73(d，2H，J＝12Hz)，1.58(s，1H)，1.3 (m，5H)，0.95(t，3H，J＝4Hz)。LCMS：m/z＝
366.2[M+]，368.2[M+2]，RT＝2.51分钟,(程序P1，柱W)。
12Hz)，1.73(d，2H，J＝12Hz)，1.58(s，1H)，1.3 (m，5H)，0.95(t，3H，J＝4Hz)。LCMS：m/z＝
366.2[M+]，368.2[M+2]，RT＝2.51分钟,(程序P1，柱W)。
[0561] 步骤6：8-(4-甲基-哌啶-1-基)-3-邻甲苯基-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸乙酯[0562] 向化合物VI(0.6g；1.63mmol；1当量)于甲苯:乙醇(7:3，20mL)的搅拌溶液中加入化合物VIa(0.33g；2.45mmol；1.5当量)，并用氩气将所得混合物除气5min。然后向混合物中加入Pd(PPh3)4(0.18g；0.16mmol；0.1当量)，用氩气将混合物另外除气5min，然后于搅拌下在115℃加热4h。通过 垫过滤混合物，并用饱和的NaHCO3水溶液随后是卤水洗涤滤液。然后于无水Na2SO4上干燥有机层，过滤并蒸发至干以得到粗材料。通过用50％EtOAc/己烷洗脱的硅胶(230-400目)柱色谱纯化粗产物以得到为浅棕色固体的标题化合物(0.3g，55％)。1H NMR(DMSO-d6)δ7.93(s，1H)，7.65(s，1H)，7.47 (d，2H，J＝3Hz)，7.40(d，2H，J＝
3Hz)，6.83(s，1H)，4.36(d，2H，J＝12Hz)，4.28 (q，2H，J＝7Hz)，2.81(t，2H，J＝11Hz)，2.10(s，3H)，1.77(d，2H，J＝12Hz)， 1.60(m，1H)，1.36(m，2H)，1.25(t，3H，J＝7Hz)，0.98(d，3H，J＝6Hz)。LCMS： m/z＝378.4[M+H]+，RT＝4.11分钟,(程序P1，柱Y)。
3Hz)，6.83(s，1H)，4.36(d，2H，J＝12Hz)，4.28 (q，2H，J＝7Hz)，2.81(t，2H，J＝11Hz)，2.10(s，3H)，1.77(d，2H，J＝12Hz)， 1.60(m，1H)，1.36(m，2H)，1.25(t，3H，J＝7Hz)，0.98(d，3H，J＝6Hz)。LCMS： m/z＝378.4[M+H]+，RT＝4.11分钟,(程序P1，柱Y)。
[0563] 步骤7：8-(4-甲基-哌啶-1-基)-3-邻甲苯基-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸
[0564] 在0℃向化合物VII(0.34g，0.90mmol，1当量)于THF:甲醇:H2O(12mL，3:2:1) 的溶液中加入一水合氢氧化锂(0.75g，1.80mmol，2当量)于水(1mL)中的溶液，并将所得混合物在23℃搅拌3h。在减压下移除溶剂，并用水稀释残余物，然后用1N HCl 酸化以将pH调节至3。通过过滤收集沉淀固体，并在真空下干燥以得到标题化合物(0.28 g，88％)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.15(s，1H)，8.02(s，1H)，7.55-7.37(m，4H)，7.34 (s，1H)，3.83(d，2H，J＝
11Hz)，2.86(t，2H，J＝11Hz)，2.18(s，3H)，1.78(d，2H， J＝12Hz)，1.62(m，1H)，1.48(m，
2H)，1.00(d，3H，J＝6Hz)。LCMS：m/z＝350.0[M+H] +，RT＝2.80分钟,(程序P1，柱Y)。
11Hz)，2.86(t，2H，J＝11Hz)，2.18(s，3H)，1.78(d，2H， J＝12Hz)，1.62(m，1H)，1.48(m，
2H)，1.00(d，3H，J＝6Hz)。LCMS：m/z＝350.0[M+H] +，RT＝2.80分钟,(程序P1，柱Y)。
[0565] 步骤8：(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(4-甲基哌啶-1-基)-3-(邻甲苯基)咪唑并 [1,2-a]吡啶-6-甲酰胺
[0566] 在0℃向化合物VIII(0.05g，0.14mmol，1当量)于CH2Cl2(10mL)的搅拌溶液中加入DIPEA(0.07mL，0.42mmol，3当量)和HATU(0.06g，0.18mmol，1.3当量)，并使所得混合物搅拌15min。向混合物中加入(S)-1-(4H-[1,2,4]三唑-3-基)-乙胺盐酸盐(0.02g， 0.17mmol，
1.2当量)，并使所得混合物在23℃搅拌另外16h。在真空下从混合物中移除溶剂，用EtOAc稀释残余物，并用饱和的碳酸氢钠水溶液、氯化铵水溶液和卤水洗涤。将有机层于无水硫酸钠上干燥，过滤并弄浓缩至干。通过用0-5％甲醇/CH2Cl2洗脱的硅胶 (230-400目)柱色谱纯
1
化，以得到为棕色固体的标题化合物(0.02g，40％)。H NMR (DMSO-d6)(100℃)δ13.78(brs，
1H)，8.54(s，1H)，7.93(s，1H)，7.53-7.37(s，1H)， 7.37(m，4H)，6.92(s，1H)，5.30(m，1H)，
4.42(d，2H，J＝12Hz)，2.88(t，2H，J ＝11Hz)，1.81(s，3H)，1.79(d，2H，J＝12Hz)，1.55(m，
1H)，1.43(d，3H，J＝12Hz)， 1.39(m，2H)，1.02(d，3H，J＝5Hz)。LCMS：m/z＝444.4[M+H]+，RT＝3.03分钟,(程序P1，柱V)。
1.2当量)，并使所得混合物在23℃搅拌另外16h。在真空下从混合物中移除溶剂，用EtOAc稀释残余物，并用饱和的碳酸氢钠水溶液、氯化铵水溶液和卤水洗涤。将有机层于无水硫酸钠上干燥，过滤并弄浓缩至干。通过用0-5％甲醇/CH2Cl2洗脱的硅胶 (230-400目)柱色谱纯
1
化，以得到为棕色固体的标题化合物(0.02g，40％)。H NMR (DMSO-d6)(100℃)δ13.78(brs，
1H)，8.54(s，1H)，7.93(s，1H)，7.53-7.37(s，1H)， 7.37(m，4H)，6.92(s，1H)，5.30(m，1H)，
4.42(d，2H，J＝12Hz)，2.88(t，2H，J ＝11Hz)，1.81(s，3H)，1.79(d，2H，J＝12Hz)，1.55(m，
1H)，1.43(d，3H，J＝12Hz)， 1.39(m，2H)，1.02(d，3H，J＝5Hz)。LCMS：m/z＝444.4[M+H]+，RT＝3.03分钟,(程序P1，柱V)。
[0567] 实施例16：8-(5-环丙基-1H-四唑-1-基)-N-((6-甲基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-2-基) 咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺
[0568]
[0569] 步骤1：叔-丁基-(3-硝基-吡啶-2-基)-胺
[0570] 向化合物I(20g，127mmol，1当量)于N-甲基-2-吡咯烷(100mL，1.04mol，8.2 当量)的溶液中加入叔丁胺(100mL，950mmol，7.5当量)，并将所得混合物在60℃搅拌5h。将混合物倒入冰-冷1N HCl水溶液(500mL)中，并用乙酸乙酯(3×300mL)萃取有机组分。用饱和碳酸氢钠水溶液(400mL)和卤水(2×300mL)洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，过滤并在减压下浓缩以得到粗化合物。通过使用2％乙酸乙酯/己烷的硅胶(100-200目)柱色谱纯化，以得到为黄色黏稠液体的标题化合物(18g，73％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.48(dd，1H，J＝1，4Hz)，8.41(dd，1H，J＝2，8Hz)， 8.20(brs，1H)，6.76(dd，1H，J＝4，8Hz)，1.51(s，9H)。
[0571] 步骤2：2-叔-丁胺-3-氨基吡啶
[0572] 向用氩气除气的化合物II(18g，92.3mmol，1当量)于乙醇(300mL)的溶液中加入10％Pd/C(12g)，并用氩气将所得混合物另外除气15min。将反应容器连接至Parr振动器，并在50psi氢气气氛下搅拌16h。通过 垫过滤混合物，并在真空下浓缩滤液以得到为深棕色固体的标题化合物(13g，85％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ7.36 (dd，1H，J＝1，5Hz)，
6.65(dd，1H，J＝2，7Hz)，6.29(dd，1H，J＝5，7Hz)，4.80 (s，1H)，4.66(s，2H)，1.41(s，9H)。
LCMS：m/z＝166.4[M+H]，RT＝0.79分钟；(程序R1，柱Y)。
6.65(dd，1H，J＝2，7Hz)，6.29(dd，1H，J＝5，7Hz)，4.80 (s，1H)，4.66(s，2H)，1.41(s，9H)。
LCMS：m/z＝166.4[M+H]，RT＝0.79分钟；(程序R1，柱Y)。
[0573] 步骤3：环丙烷羧酸(2-叔-丁胺-吡啶-3-基)-胺
[0574] 在0℃向化合物III(7g，42.4mmol，1当量)于THF(300mL)的溶液中逐滴加入 DIPEA(22.2mL，127.2mmol，3当量)，并将所得混合物搅拌10min。然后逐滴加入环丙烷羰酰氯(3.9mL，42.4mmol，1当量)，并将所得混合物在0℃搅拌1.5h。将混合物用冰-冷水(200mL)稀释，并用乙酸乙酯(3×100mL)萃取有机组分。用卤水(150mL) 洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，过滤并在减压下浓缩以提供粗化合物。通过使用20％乙酸乙酯/己烷的硅胶(100-200目)柱色谱纯化，以得到为棕色固体的标题化合物 (8g，81％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.50(s，1H)，7.85(d，1H，J＝4Hz)， 7.46(d，1H，J＝7Hz)，6.50(dd，1H，J＝5，8Hz)，5.22(s，1H)，1.89-1.76(m，1H)， 1.42(s，9H)，0.85-0.75(m，4H)。LCMS：m/z＝234.2[M+H]，RT＝3.09分钟；(程序 P1，柱Y)。
[0575] 步骤4：叔-丁基-[3-(5-环丙基-四唑-1-基)-吡啶-2-基]-胺
[0576] 在0℃向化合物IV(8.0g，34.3mmol，1当量)于乙腈(240mL)的搅拌溶液中加入[0577] To a stirred solution of化合物IV(8.0g，34.3mmol，1当量)于乙腈(240mL)was added 叠氮化钠(44g，686mmol，20当量)。在0℃向混合物中加入四氯化硅(12mL，103mmol， 3当量)。加入完毕后，将混合物在90℃搅拌9h。将混合物倒入冰冷水，并分批加入固体 NaHCO3以将pH调节至8。然后将所得混合物用 塞过滤，并收集滤液。用乙酸乙酯 (500mL)萃取有机组分并用卤水(300mL)洗涤。于无水硫酸钠上干燥有机层，并在真空下浓缩以提供粗化合物。通过使用10％乙酸乙酯/己烷的硅胶(100-200目)柱色谱纯化粗材料，以得到为棕色黏性固体的粗标题化合物(8g)。LCMS：m/z＝259.2[M+H]，RT＝ 3.52分钟；(程序P1，柱Y)。
[0578] 步骤5：[5-溴-3-(5-环丙基-四唑-1-基)-吡啶-2-基]-叔-丁基-胺
[0579] 在0℃向化合物V(8g，31mmol，1当量)于THF(300mL)的搅拌溶液中以小批次加入N-溴代琥珀酰亚胺(5g，27.9mmol，0.9当量)。加入完毕后，将混合物在23℃搅拌2h。然后将混合物在真空下浓缩，并用碳酸氢钠水溶液(200mL)稀释残余物以将pH 调节至8。用乙酸乙酯(2×200mL)萃取有机组分，用卤水(150mL)洗涤，于无水硫酸钠上干燥，并在减压下浓缩以得到粗化合物。通过使用10％乙酸乙酯/己烷的硅胶(100-200 目)柱色谱纯化粗材料以得到为米白色固体的化合物(5.8g，50％)。1H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ8.36(d，1H，J＝2Hz)，7.90(d，1H，J＝2Hz)，5.89(s，1H)，1.82-1.76 (m，1H)，1.37(s，9H)，1.14-1.06(m，4H)。
LCMS：m/z＝337.5[M+]，RT＝3.72分钟； (程序P1，柱V)。
LCMS：m/z＝337.5[M+]，RT＝3.72分钟； (程序P1，柱V)。
[0580] 步骤6：5-溴-3-(5-环丙基-四唑-1-基)-吡啶-2-基-胺
[0581] 在0℃于搅拌下，向化合物VI(5.8g，17.2mmol，1当量)于甲醇(150mL)的溶液中逐滴加入6N HCl(150mL)。加入后，将混合物加热回流2h。将混合物在真空下浓缩，并用饱和碳酸氢钠水溶液稀释残余物以将pH调节至8。用10％MeOH/CH2Cl2(3×200mL) 萃取有机组分。用卤水(200mL)洗涤将合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，并在减压下浓缩以得到为米白色固体的标题化合物(4.6g，95％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6) δ8.28(d，1H，J＝2Hz)，7.98(d，1H，J＝2Hz)，6.58(s，2H)，1.84-1.77(m，1H)， 1.11-1.06(m，4H)。LCMS：m/z＝281.0[M+]，283.2[M+2]，RT＝2.69分钟；(程序P1，柱V)。
[0582] 步骤7：6-氨基-5-(5-环丙基-四唑-1-基)-烟酸甲酯
[0583] 向化合物VII(4.6g，16.4mmol，1当量)于甲醇(140mL)的溶液中加入DIPEA(18.6 mL，106.4mmol，6.5当量)，并将所得混合物于Parr高压釜容器中在氩气下除气。10min 后，加入PdCl2(dppf)。向混合物中加入CH2Cl2(1.6g，2mmol，0.12当量)，并继续用氩气另外除气10min。在Parr高压釜中，将混合物于90℃50psi CO气压力下搅拌16h。通过 垫过滤混合物，并将滤液在真空下浓缩，以得到粗产物。通过使用5％ MeOH/CH2Cl2的硅胶(100-200目)柱色谱纯化以得到为米白色固体的标题化合物(3.8g， 89％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.72(d，1H，J＝2Hz)，8.08(d，1H，J＝2Hz)， 7.24(brs，2H)，3.80(s，3H)，1.83-1.75(m，
1H)，1.08-1.06(m，4H)。LCMS：m/z＝261.4 [M+H]，RT＝2.44分钟；(程序R1，柱Y)。
1H)，1.08-1.06(m，4H)。LCMS：m/z＝261.4 [M+H]，RT＝2.44分钟；(程序R1，柱Y)。
[0584] 步骤8：8-(5-环丙基-四唑-1-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸甲酯
[0585] 向化合物VIII(3.8g，14.6mmol，1当量)于乙醇(140mL)的搅拌溶液中加入碳酸氢钠(12.4g，146mmol，10当量)、55％氯乙醛的水溶液(38mL，584mmol，40当量)，并将所得混合物加热回流16h。通过 垫过滤混合物，并将滤液在减压下浓缩。用冰 -冷水(100mL)稀释残余物，并用乙酸乙酯(2×100mL)和5％MeOH/CH2Cl2(50mL) 萃取有机组分。用卤水(150mL)洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥并在真空下浓缩。通过用10％MeOH/CH2Cl2的硅胶(100-200目)柱色谱纯化粗材料，以得到为棕色粘性固体的标题化合物(7g，不纯)，其被用于下一步。LCMS：m/z＝285.2[M+H]，RT＝2.42 分钟；(程序P1，柱W)
[0586] 步骤9：3-溴-8-(5-环丙基-四唑-1-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸甲酯
[0587] 在0℃向化合物IX(7g不纯)于THF(300mL)的搅拌溶液中分批加入N-溴代琥珀酰亚胺(3.1g，17.3mmol，0.7当量)。加入完毕后，将混合物在23℃搅拌1.5h。将混合物在减压下浓缩，并用碳酸氢钠水溶液稀释，以将pH调节至8。用乙酸乙酯(2×150mL) 萃取有机组分并用卤水(150mL)洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥并在真空下浓缩以得到粗化合物。通过使用20％EtOAc/己烷的硅胶(100-200目)柱色谱纯化粗材料以得到为棕色粘性固体的标题化合物(4g，75％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.98 (d，1H，J＝1Hz)，8.24(d，1H，J＝
1Hz)，7.98(s，1H)，3.96(s，3H)，1.99-1.94(m， 1H)，1.10-1.04(m，4H)。LCMS：m/z＝363.1[M+]，365.0[M+2]，RT＝3.33分钟；(程序R1，柱Y)。
1Hz)，7.98(s，1H)，3.96(s，3H)，1.99-1.94(m， 1H)，1.10-1.04(m，4H)。LCMS：m/z＝363.1[M+]，365.0[M+2]，RT＝3.33分钟；(程序R1，柱Y)。
[0588] 步骤10：3-溴-8-(5-环丙基-四唑-1-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸
[0589] 向化合物X(4g，11mmol，1当量)于THF(200mL)的溶液中逐滴加入LiOH·H2O (1.4g，33mmol，3当量)的水溶液，随后加入甲醇(6mL)，并将混合物在23℃搅拌2h。在真空下移除溶剂，并用水(100mL)稀释固体残余物。用EtOAc(50mL)洗涤水层，并向水相中加入柠檬酸的饱和水溶液，调剂pH至1。然后用10％MeOH/CH2Cl2(100mL) 从水层中萃取有机组分，于无水硫酸钠上干燥，过滤，并在减压下浓缩以得到为深棕色固体的标题化合物(3.5g，91％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ13.87(brs，1H)，8.96 (d，1H，J＝1Hz)，8.18(d，1H，J＝
1Hz)，7.97(s，1H)，1.99-1.96(m，1H)，1.10-1.04 (m，4H)。LCMS：m/z＝349.0[M+]，351.0[M+
2]，RT＝2.77分钟；(程序R1，柱Y)。
1Hz)，7.97(s，1H)，1.99-1.96(m，1H)，1.10-1.04 (m，4H)。LCMS：m/z＝349.0[M+]，351.0[M+
2]，RT＝2.77分钟；(程序R1，柱Y)。
[0590] 步骤11：3-溴-8-(5-环丙基-四唑-1-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸(6-甲基-吡啶-3-基甲基)- 胺
[0591] 在0℃氩气下，向化合物XI(1g，2.86mmol，1当量)于DMF(100mL)的溶液中加入HATU(1.41g，3.72mmol，1.3当量)和DIPEA(4mL)。10min后，向混合物中加入C-(6-甲基-吡啶-3-基)-甲胺(524mg，4.3mmol，1.5当量)的DMF溶液并将所得混合物在23℃搅拌16h。用冰冷水(50mL)稀释混合物，并用乙酸乙酯(2×50mL)和10％ MeOH/CH2Cl2(50mL)萃取有机组分。用卤水(100mL)洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，过滤，并在减压下浓缩以得到粗化合物。通过用9％MeOH/CH2Cl2洗脱100-200 目硅胶的快速CombiflashTM色谱纯化粗产物，以得到为橘黄色固体的标题化合物(660mg， 52％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.48(t，1H，J＝5Hz)，9.13(s，1H)，8.47(s， 1H)，8.25(s，1H)，7.94(s，1H)，7.67(d，1H，J＝8Hz)，7.23(d，
1H，J＝8Hz)，4.53 (d，2H，J＝5Hz)，2.44(s，3H)，2.02-1.93(m，1H)，1.11-1.01(m，4H)。
LCMS：m/z＝ 453.2[M+]，455.0[M+2]，RT＝2.13分钟；(程序R1，柱Y)
1H，J＝8Hz)，4.53 (d，2H，J＝5Hz)，2.44(s，3H)，2.02-1.93(m，1H)，1.11-1.01(m，4H)。
LCMS：m/z＝ 453.2[M+]，455.0[M+2]，RT＝2.13分钟；(程序R1，柱Y)
[0592] 步骤12：8-(5-环丙基-1H-四唑-1-基)-N-((6-甲基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺
[0593] 向反应管中的用氩气除气的化合物XII(650mg，1.44mmol，1当量)的DMF(30mL) 溶液中加入化合物VIa(832mg，2.2mmol，1.5当量)，并用氩气将所得混合物除气10min，再加入Pd(PPh3)4(162mg，0.14mmol，0.1当量)。完成用氩气另外除气15min后，密封反应管，然后在120℃加热4h。通过 垫过滤混合物，并将滤液在减压下浓缩已提供固体残余物。然后用EtOAc(2×100mL)和10％MeOH/CH2Cl2(100mL)萃取有机组分，并用卤水(100mL)洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，过滤并浓缩以提供粗化合物。通过用4％MeOH/CH2Cl2洗脱TM
100-200目硅胶的快速Combiflash 色谱纯化粗产物，以得到为米白色固体的标题化合物(400mg，59％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6) δ9.39(m，1H)，9.22(s，1H)，8.44(s，1H)，8.21(s，
1H)，7.91(s，1H)，7.64(d， 1H，J＝8Hz)，7.46(d，1H，J＝3Hz)，7.21(d，1H，J＝8Hz)，7.05(d，
1H，J＝3Hz)， 4.50(d，2H，J＝6Hz)，2.56(s，3H)，2.44(s，3H)，2.06-1.96(m，1H)，1.11-1.06+
(m， 4H)。LCMS：m/z＝471.0[M+H]，RT＝6.07分钟；(程序R1，柱Y)。
100-200目硅胶的快速Combiflash 色谱纯化粗产物，以得到为米白色固体的标题化合物(400mg，59％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6) δ9.39(m，1H)，9.22(s，1H)，8.44(s，1H)，8.21(s，
1H)，7.91(s，1H)，7.64(d， 1H，J＝8Hz)，7.46(d，1H，J＝3Hz)，7.21(d，1H，J＝8Hz)，7.05(d，
1H，J＝3Hz)， 4.50(d，2H，J＝6Hz)，2.56(s，3H)，2.44(s，3H)，2.06-1.96(m，1H)，1.11-1.06+
(m， 4H)。LCMS：m/z＝471.0[M+H]，RT＝6.07分钟；(程序R1，柱Y)。
[0594] 实施例17：8-(5-(羟甲基)-1H-四唑-1-基)-N-((6-甲基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-2- 基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺
[0595]
[0596] 按方案32中讨论的制备化合物III。
[0597] 步骤1：醋酸(2-叔-丁胺-吡啶-3-基氨基甲酰基)-甲酯
[0598] 在0℃向化合物III(3g，18.2mmol，1当量)于CH2Cl2(100mL)的溶液中逐滴加入DIPEA(9.52mL，54.5mmol，3当量)，并将所得混合物搅拌10min。然后向混合物中逐滴加入乙酰氧基乙酰氯(1.95mL，18.2mmol，1当量)于CH2Cl2(5mL)的溶液，并在0℃继续搅拌3h。将混合物用冰-冷水(50mL)稀释，并用CH2Cl2(2×70mL)萃取有机组分。将合并的有机层用卤水(100mL)洗涤，于无水硫酸钠上干燥并在减压下浓缩至获得粗化合物。通过使用30％乙酸乙酯/己烷的硅胶(100-200目)柱色谱纯化粗材料以获得为棕色固体的标题化合物(3g，60％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.39(s， 1H)，7.90(d，1H，J＝5Hz)，7.36(d，1H，J＝7Hz)，
6.52(dd，1H，J＝5，7Hz)，5.10 (s，1H)，4.66(s，2H)，2.12(s，3H)，1.41(s，9H)。LCMS：m/z＝
266.0[M+H]，RT＝1.20 分钟；(程序R1，柱Y)。
6.52(dd，1H，J＝5，7Hz)，5.10 (s，1H)，4.66(s，2H)，2.12(s，3H)，1.41(s，9H)。LCMS：m/z＝
266.0[M+H]，RT＝1.20 分钟；(程序R1，柱Y)。
[0599] 步骤2：醋酸1-(2-叔-丁胺-吡啶-3-基)-1H-四唑-5-基甲酯
[0600] 在0℃向化合物IV(3g，11.3mmol，1当量)于乙腈(100mL)的搅拌溶液中加入叠氮化钠(7.35g，113mmol，10当量)和四氯化硅(3.9mL，33.9mmol，3当量)，并将所得混合物在90℃搅拌16h。将混合物倒入冰冷水中，并分批加入固体NaHCO3以调节 pH至8。将所得混合物通过 垫过滤，并收集滤液。用乙酸乙酯(200mL)萃取有机组分并用卤水(100mL)洗涤。将有机层于无水硫酸钠上干燥，过滤并在真空下浓缩提供为米白色粘性固体的粗标题化合物(4g)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.27(dd，1H， J＝2，5Hz)，7.54(dd，1H，J＝2，8Hz)，6.71(dd，1H，J＝5，8Hz)，5.56(s，1H)， 5.28(s，2H)，1.91(s，3H)，1.38(s，9H)。LCMS：m/z＝291.1[M+H]，RT＝3.82分钟；(程序R1，柱Y)。
[0601] 步骤3：醋酸1-(5-溴-2-叔-丁胺-吡啶-3-基)-1H-四唑-5-基甲酯
[0602] 在0℃于搅拌下向化合物V(4g，13.8mmol，1当量)于THF(100mL)的溶液中以小批量加入N-溴代琥珀酰亚胺(2.2g，12.4mmol，0.9当量)。加入完成后，将混合物在 23℃搅拌2h。将混合物在真空下浓缩，并用碳酸氢钠水溶液稀释残余物以将pH调节至8。用乙酸乙酯(2×
100mL)萃取有机组分，用卤水(100mL)洗涤合并的提取物，于无水硫酸钠上干燥，过滤，并在减压下浓缩以得到粗化合物。通过使用20％乙酸乙酯/己烷的硅胶(100-200目)柱色谱纯化粗材料，以得到为棕色固体的标题化合物(3.0g，72％，两步)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ
8.37(d，1H，J＝2Hz)，7.89(d，1H，J＝2Hz)， 5.88(s，1H)，5.30(s，2H)，1.93(s，3H)，1.36(s，
9H)。LCMS：m/z＝371.0[M+2]， RT＝4.11分钟；(程序R1，柱Y)。
100mL)萃取有机组分，用卤水(100mL)洗涤合并的提取物，于无水硫酸钠上干燥，过滤，并在减压下浓缩以得到粗化合物。通过使用20％乙酸乙酯/己烷的硅胶(100-200目)柱色谱纯化粗材料，以得到为棕色固体的标题化合物(3.0g，72％，两步)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ
8.37(d，1H，J＝2Hz)，7.89(d，1H，J＝2Hz)， 5.88(s，1H)，5.30(s，2H)，1.93(s，3H)，1.36(s，
9H)。LCMS：m/z＝371.0[M+2]， RT＝4.11分钟；(程序R1，柱Y)。
[0603] 步骤4：醋酸1-(2-氨基-5-溴-吡啶-3-基)-1H-四唑-5-基甲酯
[0604] 在23℃向化合物VI(3g，8.13mmol，1当量)于CH2Cl2(100mL)的搅拌溶液中逐滴加入三氟乙酸(100mL)，并将所得混合物在23℃搅拌16h。将混合物冷却至0℃，并用饱和的碳酸氢钠水溶液稀释，以将pH调节至8。用CH2Cl2(2×70mL)萃取有机组分，并用卤水(75mL)洗涤合并的萃取物。将有机层于无水硫酸钠上干燥，过滤，并在减压下浓缩以得到为米白色固体的标题化合物(1.7g，68％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6) δ8.29(d，1H，J＝2Hz)，7.94(d，1H，J＝2Hz)，6.60(s，2H)，5.32(s，2H)，1.93(s， 3H)。LCMS：m/z＝313.0[M+]，315.2[M+2]，RT＝3.09分钟；(程序R1，柱Y)。
[0605] 步骤5：醋酸1-(6-溴-咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基)-1H-四唑-5-基甲酯
[0606] 向化合物VII(1.7g，5.4mmol，1当量)于乙醇(100mL)的搅拌溶液中加入碳酸氢钠(4.6g，54mmol，10当量)和55％的氯乙醛水溶液(26mL，216mmol，40当量)，并将所得混合物加热回流16h。通过 垫过滤混合物，并将滤液在减压下浓缩。将滤液用冰-冷水(100mL)稀释，并用乙酸乙酯(2×70mL)和5％MeOH/CH2Cl2(75mL) 萃取有机组分。用卤水(100mL)洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥并在真空下浓缩。通过使用10％MeOH/CH2Cl2的硅胶(100-200目)柱色谱纯化粗材料，以得到为棕色粘性固体的标题化合物(1.4g，
75％)，其被用于下一步骤。1H NMR(400MHz，DMSO-d6) δ9.24(d，1H，J＝1Hz)，8.16(s，1H)，
8.02(d，1H，J＝2Hz)，7.70(s，1H)，5.45(s， 2H)，1.84(s，3H)。LCMS：m/z＝337.0[M+]，339.0[M+2]，RT＝2.94分钟；(程序R1，柱Y)
75％)，其被用于下一步骤。1H NMR(400MHz，DMSO-d6) δ9.24(d，1H，J＝1Hz)，8.16(s，1H)，
8.02(d，1H，J＝2Hz)，7.70(s，1H)，5.45(s， 2H)，1.84(s，3H)。LCMS：m/z＝337.0[M+]，339.0[M+2]，RT＝2.94分钟；(程序R1，柱Y)
[0607] 步骤6：8-(5-羟甲基-四唑-1-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸甲酯
[0608] 向化合物VIII(1.4g，4.15mmol，1当量)于甲醇(100mL)的溶液中加入DIPEA(5 mL，27mmol，6.5当量)，并用氩气将所得混合物除气10min。然后向混合物中加入 PdCl2(dppf)和CH2Cl2(408mg，0.5mmol，0.12当量)，并用氩气将所得混合物另外除气10 min。然后将混合物于Parr高压釜中在90℃于50psi压力的CO气氛下搅拌16h。通过 垫过滤混合物，并将滤液在真空下浓缩，以得到粗产物。通过使用5％MeOH/CH-2Cl2的硅胶(100-200目)柱色谱纯化粗材料以得到为米白色固体的标题化合物(0.8g，71％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ
9.62(s，1H)，8.34(s，1H)，8.04(s，1H)，7.94-7.85 (m，1H)，7.77(s，1H)，4.82(d，2H，J＝
6Hz)，3.93(s，3H)。LCMS：m/z＝275.4[M +H]，RT＝2.44分钟；(程序R1，柱Y)。
9.62(s，1H)，8.34(s，1H)，8.04(s，1H)，7.94-7.85 (m，1H)，7.77(s，1H)，4.82(d，2H，J＝
6Hz)，3.93(s，3H)。LCMS：m/z＝275.4[M +H]，RT＝2.44分钟；(程序R1，柱Y)。
[0609] 步骤7：8-(5-乙酰氧基甲基-四唑-1-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸甲酯[0610] 在0℃向化合物IX(0.8g，2.92mmol，1当量)于CH2Cl2(50mL)的搅拌溶液中逐滴加入TEA(0.82mL，5.84mmol，2当量)，并将所得混合物搅拌15min。向混合物中加乙酰氯(0.42mL，5.84mmol，2当量)，并将所得混合物在23℃搅拌2h。将混合物在减压下浓缩并用水稀释(30mL)。用乙酸乙酯萃取有机组分(2×20mL)，并用卤水(30mL) 洗涤合并的萃取物。将有机层于无水硫酸钠上干燥，过滤，并在减压下浓缩以得到为米白色固体的粗标题化合物(1.2g)。LCMS：m/z＝317.2[M+H]，RT＝2.76分钟；(程序R1，柱Y)。
[0611] 步骤8：8-(5-乙酰氧基甲基-四唑-1-基)-3-(5-甲基-噻吩-2-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸甲酯
[0612] 在0℃向化合物X(1.2g，3.8mmol，1当量)于THF(100mL)的搅拌溶液中分批加入N-溴代琥珀酰亚胺(0.61g，3.4mmol，0.9当量)在0℃，并将所得混合物在在23℃搅拌1.5h。将混合物在减压下浓缩，并用碳酸氢钠水溶液稀释，调节pH至8。用乙酸乙酯(2×50mL)萃取有机组分，并用卤水(70mL)洗涤合并的萃取物，于无水硫酸钠上干燥，过滤并在真空下浓缩以得到粗化合物。通过使用20％EtOAc/己烷的硅胶(100-200 目)柱色谱纯化粗材料，以得到1
为青黄色固体的标题化合物(0.8g，69％)。H NMR(400 MHz，DMSO-d6)δ9.00(s，1H)，8.26(s，
1H)，7.99(s，1H)，5.41(s，2H)，3.97(s， 3H)，1.87(s，3H)。LCMS：m/z＝395.1[M+]，397.0[M+
2]，RT＝3.31分钟；(程序R1，柱Y)。
为青黄色固体的标题化合物(0.8g，69％)。H NMR(400 MHz，DMSO-d6)δ9.00(s，1H)，8.26(s，
1H)，7.99(s，1H)，5.41(s，2H)，3.97(s， 3H)，1.87(s，3H)。LCMS：m/z＝395.1[M+]，397.0[M+
2]，RT＝3.31分钟；(程序R1，柱Y)。
[0613] 步骤9：8-(5-乙酰氧基甲基-四唑-1-基)-3-溴-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸甲酯[0614] 向反应管中的用氩气除气的化合物XI(0.8g，2.02mmol，1当量)的DMF(50mL) 溶液中加入化合物VIa(1.17g，3.03mmol，1.5当量)，并用氩气将所得混合物除气10min。向混合物中加入Pd(PPh3)4(0.23g，0.2mmol，0.1当量)，并用氩气将所得混合物另外除气 15min。然后将反应管密封，并在120℃加热4h。通过 垫过滤混合物，并将滤液在减压下浓缩以提供固体残余物。然后用EtOAc(2×50mL)和10％MeOH/CH2Cl2(50mL) 萃取有机组分，并用卤水(100mL)洗涤合并的萃取物。将有机层于无水硫酸钠上干燥，过滤并浓缩以提供粗化合物。通过用4％MeOH/CH2Cl2洗脱100-200目硅胶的快速 CombiflashTM色谱纯化粗产物以得到为米白色固体的标题化合物(0.64g，75％)。1H NMR (400MHz，DMSO-d6)δ9.17(d，1H，J＝1Hz)，8.20(s，1H)，7.97(s，1H)，4.45(d， 1H，J＝4Hz)，7.06(d，1H，J＝3Hz)，5.44(s，2H)，
3.94(s，3H)，2.57(s，3H)，1.89 (s，3H)。LCMS：m/z＝413.0[M+H]，RT＝3.73分钟；(程序R1，柱Y)。
3.94(s，3H)，2.57(s，3H)，1.89 (s，3H)。LCMS：m/z＝413.0[M+H]，RT＝3.73分钟；(程序R1，柱Y)。
[0615] 步骤10：8-(5-羟甲基-四唑-1-基)-3-(5-甲基-噻吩-2-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸
[0616] 向化合物XII(0.64g，1.55mmol，1当量)于THF(50mL)的溶液中逐滴加入LiOH·H2O (0.2g，4.66mmol，3当量)的水溶液，随后加入甲醇(3mL)，并将所得混合物在23℃搅拌2h。在真空下移除混合物的溶剂，并用水(40mL)稀释固体残余物。用EtOAc(30mL) 洗涤水层，并向水部分加入柠檬酸的饱和水溶液，调节pH至1。然后用10％MeOH/CH2Cl2 (100mL)从水层中萃取有机组分，于无水硫酸钠上干燥，过滤，并在减压下浓缩以得到为棕色固体的标题化合物(0.35g，63％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.30(brs，1H)， 9.15(s，1H)，8.08(s，1H)，7.95(s，1H)，7.44(d，1H，J＝3Hz)，7.05(s，1H)，5.79-5.69 (m，1H)，4.85(d，2H，J＝5Hz)，2.57(s，3H)。LCMS：m/z＝357.2[M+H]，RT＝3.04 分钟；(程序R1，柱W)
[0617] 步骤11：8-(5-(羟甲基)-1H-四唑-1-基)-N-((6-甲基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-2-基) 咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺
[0618] 在0℃于氩气气氛下，向化合物XIII(0.35g，0.98mmol，1当量)于DMF(30mL) 的溶液中加入HATU(0.48g，1.27mmol，1.3当量)和DIPEA(2mL)。10分钟后，加入 C-(6甲基吡啶-3-基)-甲胺(0.18g，1.47mmol，1.5当量)的DMF溶液，并将所得混合物在23℃搅拌16h。用冰冷水(30mL)稀释混合物，并用乙酸乙酯(2×50mL)和10％ MeOH/CH2Cl2(50mL)萃取有机组分。用卤水(80mL)洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，过滤，并在减压下浓缩以得到粗化合物。通过使用9％MeOH/CH2Cl2洗脱100-200 目硅胶的快速CombiflashTM色谱纯化粗产物以得到为米白色固体的标题化合物(0.25g， 55％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.46-
9.38(m，1H)，9.21(s，1H)，8.45(s，1H)， 8.18(s，1H)，7.90(s，1H)，7.68-7.63(m，1H)，7.46(d，1H，J＝3Hz)，7.26-7.20(m，1H)，7.05(d，1H，J＝3Hz)，5.80-5.70(m，1H)，4.87(d，2H，J＝
5Hz)，4.50(d，2H， J＝5Hz)，2.56(s，3H)，2.44(s，3H)。LCMS：m/z＝461.2[M+H]+，RT＝2.30分钟；(程序R1，柱W)。
9.38(m，1H)，9.21(s，1H)，8.45(s，1H)， 8.18(s，1H)，7.90(s，1H)，7.68-7.63(m，1H)，7.46(d，1H，J＝3Hz)，7.26-7.20(m，1H)，7.05(d，1H，J＝3Hz)，5.80-5.70(m，1H)，4.87(d，2H，J＝
5Hz)，4.50(d，2H， J＝5Hz)，2.56(s，3H)，2.44(s，3H)。LCMS：m/z＝461.2[M+H]+，RT＝2.30分钟；(程序R1，柱W)。
[0619] 实施例18：8-(5-(二氟甲基)-1H-四唑-1-基)-N-((6-甲基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-2- 基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺
[0620]
[0621] 步骤1：6-溴-咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基胺
[0622] 向化合物I(10g，53mmol，1当量)于乙醇(200mL)的溶液中加入碳酸氢钠(8.92 g，106mmol，2当量)和氯乙醛(8.6mL，133mmol，2.5当量)，并将所得混合物在120℃搅拌16h。将混合物过滤，并在真空下浓缩滤液，以得到固体残余物。然后用水(200mL) 洗涤残余物，并用乙酸乙酯(800mL)萃取有机组分，于无水硫酸钠上干燥，过滤并在减压下移除溶剂以提供TM
粗化合物。通过使用以2％MeOH/CH2Cl2洗脱100-200目硅胶的快速 Combiflash 色谱纯化粗产物以得到为棕色固体的标题化合物(6g，53％)。1H NMR(400 MHz，DMSO-d6)δ8.05(d，1H，J＝2Hz)，7.77(d，1H，J＝1Hz)，7.41(d，1H，J＝1 Hz)，6.30(d，1H，J＝2Hz)，5.98(s，2H)。
LCMS：m/z＝213.6[M+2]，RT＝0.79分钟； (程序R1，柱Y)。
粗化合物。通过使用以2％MeOH/CH2Cl2洗脱100-200目硅胶的快速 Combiflash 色谱纯化粗产物以得到为棕色固体的标题化合物(6g，53％)。1H NMR(400 MHz，DMSO-d6)δ8.05(d，1H，J＝2Hz)，7.77(d，1H，J＝1Hz)，7.41(d，1H，J＝1 Hz)，6.30(d，1H，J＝2Hz)，5.98(s，2H)。
LCMS：m/z＝213.6[M+2]，RT＝0.79分钟； (程序R1，柱Y)。
[0623] 步骤2：8-氨基-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸甲酯
[0624] 向化合物II(6g，28mmol，1当量)于甲醇(100mL)的溶液中加入DIPEA(26mL， 140mmol，5当量)并用氩气将所得混合物除气10min，然后加入PdCl2(dppf)。加入CH2Cl2 (2.3g，2.8mol，0.1当量)。重复用氩气除气10min，并将反应容器连接至Parr高压釜，在90℃
50psi CO气氛下搅拌16h。通过 垫过滤混合物，并将滤液在真空下浓缩，以得到固体残余物。然后用水(100mL)洗涤残余物，并用乙酸乙酯(800mL)萃取有机组分，于无水硫酸钠上干燥并在减压下移除溶剂以提供粗化合物。通过使用40％EtOAc/ 己烷洗脱100-200目硅胶的快速CombiflashTM色谱纯化粗产物以得到为米白色固体的标题化合物(3.5g，65％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.57(d，1H，J＝1Hz)，7.97(s， 1H)，7.51(s，1H)，6.67(d，1H)，5.87(s，2H)，3.84(s，3H)。LCMS：m/z＝191.8[M +H]，RT＝0.78分钟；(程序R1，柱Y)。
50psi CO气氛下搅拌16h。通过 垫过滤混合物，并将滤液在真空下浓缩，以得到固体残余物。然后用水(100mL)洗涤残余物，并用乙酸乙酯(800mL)萃取有机组分，于无水硫酸钠上干燥并在减压下移除溶剂以提供粗化合物。通过使用40％EtOAc/ 己烷洗脱100-200目硅胶的快速CombiflashTM色谱纯化粗产物以得到为米白色固体的标题化合物(3.5g，65％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.57(d，1H，J＝1Hz)，7.97(s， 1H)，7.51(s，1H)，6.67(d，1H)，5.87(s，2H)，3.84(s，3H)。LCMS：m/z＝191.8[M +H]，RT＝0.78分钟；(程序R1，柱Y)。
[0625] 步骤3：8-(2,2-二氟-乙酰氨基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸甲酯
[0626] 在氮气气氛下，向化合物III(4g，20mmol，1当量)、二氟乙酸(17.16mL，272mmol， 13当量)和TEA(8.82mL，62.8mmol，3当量)于DMF(100mL)的溶液中逐滴加入 T3P(16mL，
26.8mmol，1.3当量，并将混合物在回流下搅拌5h。然后用水(100mL) 稀释混合物，并用乙酸乙酯(800mL)萃取有机组分。用卤水(300mL)洗涤有机层，于无水硫酸钠上干燥，过滤，并在减压下移除溶剂以提供粗化合物。通过使用35％EtOAc/ 己烷洗脱100-200目硅胶的快速CombiflashTM色谱纯化粗产物，以得到为灰色固体的标题化合物(3g，53％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.09(s，1H)，9.19(d，1H，J＝ 1Hz)，8.40(d，1H，J＝1Hz)，8.18(d，1H，J＝1Hz)，7.72(d，1H，J＝1Hz)，6.79-6.16 (m，1H)，3.90(s，3H)。LCMS：m/z＝269.7[M+H]，RT＝2.40分钟；(程序R1，柱W)。
26.8mmol，1.3当量，并将混合物在回流下搅拌5h。然后用水(100mL) 稀释混合物，并用乙酸乙酯(800mL)萃取有机组分。用卤水(300mL)洗涤有机层，于无水硫酸钠上干燥，过滤，并在减压下移除溶剂以提供粗化合物。通过使用35％EtOAc/ 己烷洗脱100-200目硅胶的快速CombiflashTM色谱纯化粗产物，以得到为灰色固体的标题化合物(3g，53％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.09(s，1H)，9.19(d，1H，J＝ 1Hz)，8.40(d，1H，J＝1Hz)，8.18(d，1H，J＝1Hz)，7.72(d，1H，J＝1Hz)，6.79-6.16 (m，1H)，3.90(s，3H)。LCMS：m/z＝269.7[M+H]，RT＝2.40分钟；(程序R1，柱W)。
[0627] 步骤4：8-(5-二氟甲基-四唑-1-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸甲酯
[0628] 路线1
[0629] 向化合物IV(3g，11.15mmol，1当量)于乙腈(100mL)的溶液中加入叠氮化钠(29 g，446.1mmol，40当量)，并将所得混合物冷却至0℃。加入四氯化硅(13mL，111.5mmol， 10当量)，并将所得混合物在90℃搅拌9h。将混合物倒入冰冷水中，分批加入NaHCO3以将pH调节至8。然后将所得混合物通过 垫过滤并收集滤液。然后在用水(100mL) 洗涤后，以乙酸乙酯(400mL)萃取有机组分。然后将有机层于无水硫酸钠上干燥，过滤并在减压下移除溶剂以提供粗化合物。通过使用40％EtOAc/己烷洗脱100-200目硅胶的快速CombiflashTM色谱纯化粗产物，以得到为棕色粘性固体的标题化合物(1g，30％)。1H NMR (400MHz，DMSO-d6)δ
9.66(d，1H，J＝1Hz)，8.36(s，1H)，8.26(d，1H，J＝1Hz)， 7.77(d，1H，J＝1Hz)，7.60(t，1H，J＝51Hz)，3.94(s，3H)。LCMS：m/z＝295.1[M +H]，RT＝3.11分钟；(程序R1，柱Y)。
9.66(d，1H，J＝1Hz)，8.36(s，1H)，8.26(d，1H，J＝1Hz)， 7.77(d，1H，J＝1Hz)，7.60(t，1H，J＝51Hz)，3.94(s，3H)。LCMS：m/z＝295.1[M +H]，RT＝3.11分钟；(程序R1，柱Y)。
[0630] 路线2
[0631]
[0632] 8-(2,2-二氟-硫代乙酰氨基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸甲酯V
[0633] 向化合物IV(26.5g，98.5mmol，1当量)于1,4-二氧六环(1.4L)的溶液中加入六甲基二硅氧烷(84.19mL，394mmol，4当量)和五硫化二磷(21.89g，98.5mmol，1当量)，并将混合物在搅拌下回流6-8h。将混合物冷却至室温，用饱和的碳酸氢钠水溶液淬灭以调节pH至8。然后在用水(1L)洗后，以乙酸乙酯(2L)萃取有机组分。然后将有机层于无水硫酸钠上干燥，并在减压下移除溶剂以得到粗化合物。用乙醇洗涤粗品，以得到为棕色固体的化合物V(21g，75％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.31(s，1H)， 8.57(s，1H)，8.21(s，1H)，7.73(t，J＝
95Hz，1H)，6.67(m，1H)，5.87(m，1H)， 3.90(s，3H)；LCMS：m/z＝286.0[M+H]，RT＝2.58分钟；
(程序P1，柱Y)。
95Hz，1H)，6.67(m，1H)，5.87(m，1H)， 3.90(s，3H)；LCMS：m/z＝286.0[M+H]，RT＝2.58分钟；
(程序P1，柱Y)。
[0634] 8-(5-二氟甲基-四唑-1-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸甲酯VI
[0635] 在0℃向化合物V(21g，73.6mmol，1当量)于THF(300mL)的溶液中加入醋酸汞(II)(46.96g，147mmol，2当量)和三甲基叠氮基硅烷(24.3mL，184mmol，2.5当量)，并将混合物在0℃搅拌1h。用饱和的氯化铵水溶液淬灭混合物，过滤并收集滤液。在用水(1L)洗涤后，然后用乙酸乙酯(1L)萃取滤液中的有机组分。然后将有机层于无水硫酸钠上干燥，并在减压下移除溶剂以得到粗化合物。用乙醇洗涤粗化合物以得到为米白色固体的化合物V(21g，
97％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.66(s，1H)， 8.35(s，1H)，8.26(s，1H)，7.77(s，1H)，7.60(t，J＝52Hz，1H)，3.93(s，3H)； LCMS：m/z＝295.1[M+H]，RT＝2.77分钟；(程序P1，柱V)。
97％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.66(s，1H)， 8.35(s，1H)，8.26(s，1H)，7.77(s，1H)，7.60(t，J＝52Hz，1H)，3.93(s，3H)； LCMS：m/z＝295.1[M+H]，RT＝2.77分钟；(程序P1，柱V)。
[0636] 步骤5：3-溴-8-(5-二氟甲基-四唑-1-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸甲酯[0637] 化合物V(1g，3.4mmol，1当量)于THF(100mL)的溶液中加入N-溴代琥珀酰胺 (0.6g，3.4mmol，1当量)，并将所得混合物在23℃搅拌3h。在减压下移除混合物的挥发性物质，并用碳酸氢钠溶液稀释残余物以调节pH至8。用水(50mL)洗涤后，以乙酸乙酯(150mL)萃取有机组分。将有机层于无水硫酸钠上干燥，过滤并在减压下移除溶剂以提供粗化合物。通过用30％EtOAc/己烷洗脱100-200目硅胶的快速CombiflashTM色谱纯化粗产物，以得到为棕色固体的标题化合物(0.8g，63％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6) δ9.01(d，1H，J＝1Hz)，8.40(d，1H，J＝1Hz)，7.99(s，1H)，7.56(t，1H，J＝51Hz)， 3.97(s，3H)。LCMS：m/z＝372.9[M+]，375.0[M+2]，RT＝3.52分钟；(程序R1，柱Y)。
[0638] 步骤6：3-溴-8-(5-二氟甲基-四唑-1-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸甲酯[0639] 向化合物VI(0.8g，2.14mmol，1当量)于THF(50mL)和MeOH(4mL)的溶液中加入LiOH·H2O(0.27g，6.42mmol，3当量)的水溶液，并将所得混合物在23℃搅拌1 h。在真空下移除混合物中的溶剂，并用水(50mL)稀释固体残余物。用EtOAc(30mL) 洗涤残余物，并用柠檬酸酸化水层，将pH调节至1。然后用10％MeOH/CH2Cl2(100mL) 萃取有机组分，于无水硫酸钠上干燥，过滤并在减压下浓缩以提供为棕色固体的标题化合物(0.5g，66％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.95(s，1H)，8.98(d，1H，J＝1Hz,)， 8.35(d，1H，J＝1Hz,)，7.97(s，1H)，7.56(t，1H，J＝47Hz)。LCMS：m/z＝359.0[M+]， 361.1[M+2]，RT＝3.03分钟；(程序R1，柱Y)。
[0640] 步骤7：3-溴-8-(5-二氟甲基-四唑-1-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-胺
[0641] 在0℃于氩气气氛下，向化合物VII(0.5g，1.39mmol，1当量)于DMF(50mL) 的溶液中加入HATU(0.7g，1.8mmol，1.3当量)和DIPEA(0.74mL，4.17mmol，3当量)。加入C-(6甲基吡啶-3-基)-甲胺(0.25g，2.09mmol，1.5当量)的DMF溶液，并将所得混合物在23℃搅拌16h。将混合物用冰水(40mL)稀释，并用EtOAc(2×50mL)和 10％MeOH/CH2Cl2(50mL)萃取有机组分，并用卤水(50mL)洗涤合并的萃取物。将有机层于无水硫酸钠上干燥，过滤并在减压下浓缩以提供粗化合物。通过用5％MeOH/CH2Cl2洗脱100-200目硅胶的快速Combiflash色谱纯化粗产物以得到为橘色固体的化合物(0.4g， 62％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.53(t，1H，J＝6Hz)，9.18(s，1H)，8.47(s， 1H)，8.37(s，1H)，7.94(s，1H)，7.70-7.44(m，2H)，7.23(d，1H，J＝8Hz)，4.53(d，2H，J＝5Hz)，2.45(s，3H)。LCMS：m/z＝463.0[M+]，465.0[M+2]，RT＝1.94分钟；(程序R1，柱W)。
[0642] 步骤8：8-(5-(二氟甲基)-1H-四唑-1-基)-N-((6-甲基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-甲基噻吩-2-基) 咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺
[0643] 向反应管中以氩气除气的化合物VIII(0.4g，0.86mmol，1当量)的DMF(20mL) 溶液中加入化合物VIa(0.50g，1.29mmol，1.5当量)，并用氩气将所得混合物除气10min，随后加入Pd(PPh3)4(0.1g，0.086mmol，0.1当量)。进一步用氩气另外除气15min，密封反应管然后在120℃加热5h。通过 垫过滤混合物，并将滤液在减压下浓缩以提供固体残余物。然后用EtOAc(2×40mL)和10％MeOH/CH2Cl2(50mL)萃取有机组分，并用卤水(50mL)洗涤合并的萃取物。将有机层于无水硫酸钠上干燥，过滤并浓缩以提供粗化合物。通过用4％MeOH/CH2Cl2洗脱100-200目硅胶的快速Combiflash色谱纯化粗产物，以得到为米白色固体的标题化合物(0.18g，44％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6) δ9.45-9.36(m，1H)，9.21(s，1H)，8.42(s，1H)，
8.30(s，1H)，7.88(s，1H)，7.73-7.46 (m，3H)，7.19(d，1H，J＝8Hz)，7.03(s，1H)，4.48(d，
2H，J＝5Hz)，2.53(s，3H)， 2.41(s，3H)。LCMS：m/z＝481.0[M+H]+，RT＝2.80分钟；(程序R1，柱W)。
8.30(s，1H)，7.88(s，1H)，7.73-7.46 (m，3H)，7.19(d，1H，J＝8Hz)，7.03(s，1H)，4.48(d，
2H，J＝5Hz)，2.53(s，3H)， 2.41(s，3H)。LCMS：m/z＝481.0[M+H]+，RT＝2.80分钟；(程序R1，柱W)。
[0644] 实施例19：(R)-8-(5-(二氟甲基)-1H-四唑-1-基)-N-(1-(3甲基1,2,4-噁二唑-5-基)乙基) -3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺
[0645]
[0646] 化合物VI依照为实施例18描述的实验步骤制备。
[0647] 步骤6：8-(5-二氟甲基-四唑-1-基)-3-(5-甲基-噻吩-2-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸甲酯
[0648] 向用氩气除气的化合物VI(1.8g，4.82mmol，1当量)的甲苯-DMF(10:1，170mL) 溶液中加入化合物VIa(2.80g，7.23mmol，1.5当量)，并在加入Pd(PPh3)4(0.55g，0.48mmol， 0.1当量)前用氩气将所得混合物除气10分钟。进一步用氩气另外除气15min并将所得混合物在120℃搅拌30min。只要TLC显示存在起始材料，就继续加热，并以15分钟的间隔持续用TLC监控。1h后，当发现起始材料完全消耗，使混合物冷却至室温，并通过 过滤。将滤液在减压下浓缩，以提供固体残余物，用EtOAc(2×100mL)从其中萃取有机组分。用卤水(100mL)洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥并浓缩以提供粗固体化合物。用20％EtOAc/己烷(2×50mL)，随后是戊烷(2×50mL)洗涤粗固体材料，并在真空下干燥残余物，以得到纯产物。通过用20％EtOAc/己烷洗脱100-200目硅胶的快速 CombiflashTM色谱纯化合并的有机洗涤物，以得到纯产物，其与固体残余物合并以提供为黄色固体的标题化合物
1
(1.4g，74％)。H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.18(s，1H)，8.35 (s，1H)，7.96(s，1H)，7.61(t，
1H，J＝51Hz)，7.46(d，1H，J＝3Hz)，7.06(d，1H， J＝3Hz)，3.94(s，3H)，2.57(s，3H)。LCMS：
m/z＝391.1[M+H]，RT＝3.46分钟；(程序P1，柱V)
1
(1.4g，74％)。H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.18(s，1H)，8.35 (s，1H)，7.96(s，1H)，7.61(t，
1H，J＝51Hz)，7.46(d，1H，J＝3Hz)，7.06(d，1H， J＝3Hz)，3.94(s，3H)，2.57(s，3H)。LCMS：
m/z＝391.1[M+H]，RT＝3.46分钟；(程序P1，柱V)
[0649] 步骤7：8-(5-二氟甲基-四唑-1-基)-3-(5-甲基-噻吩-2-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸
[0650] 向化合物VII(0.6g，1.54mmol，1当量)于THF(60mL)的溶液中加入饱和LiOH·H2O (0.19g，4.61mmol，3当量)水溶液，并将所得混合物在10℃搅拌10min。然后向混合物中加入MeOH(2mL)，以将混合物制成均相溶液，并继续在23℃搅拌另外2h。在真空下移除混合物中的溶剂，并用水稀释固体残余物并用EtOAc洗涤。用柠檬酸将水层酸化，调节pH至1，并用20％MeOH/CH2Cl2(2×30mL)萃取有机组分。将合并的有机层然后用卤水洗涤，于无水硫酸钠上干燥，过滤并在减压下浓缩以提供为棕色固体的标题化合物 (0.45g，78％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ13.88(brs，1H)，9.18(s，1H)，8.30 (s，1H)，7.95(s，1H)，7.61(t，1H，J＝51Hz,)，7.45(d，1H，J＝3Hz)，7.05(d，1H， J＝3Hz)，2.57(s，3H)。LCMS：m/z＝376.9[M+H]，RT＝2.52分钟；(程序P1，柱V)
[0651] 步骤8：(R)-8-(5-(二氟甲基)-1H-四唑-1-基)-N-(1-(3-甲基-1,2,4-噁二唑-5-基)乙基)-3-(5- 甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺
[0652] 在0℃于氩气气氛下向化合物VIII(0.15g，0.4mmol，1当量)于DMF(10mL)的搅拌溶液中加入HATU(0.2g，0.52mmol，1.3当量)和DIPEA(0.7mL)，10分钟后加入 1-(3甲基[1,2,4]噁二唑-5-基)-乙胺(0.76g，0.6mmol，1.5当量)，并将所得混合物在23℃搅拌16h。用冰水稀释混合物，并用EtOAc和10％MeOH/CH2Cl2萃取有机组分，然后用卤水洗涤。将有机层于无水硫酸钠上干燥，过滤并在减压下浓缩以得到粗化合物，其通过用5％MeOH/CH2Cl2洗脱100-
200目硅胶的快速CombiflashTM色谱纯化，以得到为米白色固体的标题化合物。通过用手性HPLC纯化拆分外消旋化合物，以得到为淡黄色固体的纯 (R)-对映异构体(0.10g，5.2％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.60(d，1H，J＝7Hz)， 9.25(s，1H)，8.36(s，1H)，7.92(s，1H)，
7.63(t，1H，J＝51Hz)，7.49(d，1H，J＝ 3Hz)，7.07(m，1H)，5.46-5.33(m，1H)，2.56(s，3H)，
2.33(s，3H)，1.62(d，3H， J＝7Hz)。LCMS：m/z＝486.3[M+H]+，RT＝3.31分钟；(程序P1，柱V)。
200目硅胶的快速CombiflashTM色谱纯化，以得到为米白色固体的标题化合物。通过用手性HPLC纯化拆分外消旋化合物，以得到为淡黄色固体的纯 (R)-对映异构体(0.10g，5.2％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.60(d，1H，J＝7Hz)， 9.25(s，1H)，8.36(s，1H)，7.92(s，1H)，
7.63(t，1H，J＝51Hz)，7.49(d，1H，J＝ 3Hz)，7.07(m，1H)，5.46-5.33(m，1H)，2.56(s，3H)，
2.33(s，3H)，1.62(d，3H， J＝7Hz)。LCMS：m/z＝486.3[M+H]+，RT＝3.31分钟；(程序P1，柱V)。
[0653] 实施例20：(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(N-甲基异丁酰胺基)-3-(5-甲基噻吩-2- 基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺
[0654]
[0655] 化合物III依照为实施2描述的实验步骤制备。
[0656] 步骤3：8-异丁酰氨基-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸甲酯
[0657] 向化合物III(2g，10.47mmol，1当量)于干THF(50mL)的溶液中加入吡啶(1.6mL， 20.94mmol，2当量)和异丁酰氯(2.2mL，20.94mmol，2当量)，并将所得混合物在0℃于氩气气氛下搅拌1h。用水将混合物淬灭(100mL)，并用乙酸乙酯(2×200mL)萃取有机组分。用卤水(100mL)洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，过滤，并将滤液在减压下浓缩以提供粗化合物。通过用35％EtOAc/己烷洗脱的CombiflashTM色谱纯化粗产物，以得到为灰色固体的标题化合物(1g，37％)。1H NMR(DMSO-d6)δ9.97(s，1H)， 9.06(s，1H)，8.45(s，1H)，8.13(s，
1H)，7.66(s，1H)，3.88(s，3H)，3.02(m，1H)， 1.11(d，6H，J＝7Hz)。LCMS：m/z＝261.9[M+H]+，RT＝2.90分钟,(程序P1，柱Y)。
1H)，7.66(s，1H)，3.88(s，3H)，3.02(m，1H)， 1.11(d，6H，J＝7Hz)。LCMS：m/z＝261.9[M+H]+，RT＝2.90分钟,(程序P1，柱Y)。
[0658] 步骤4：8-(异丁酰基甲基氨基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸甲酯
[0659] 在0℃向化合物IV(1g；3.83mmol；1当量)于干DMF(10mL)的搅拌溶液中分批加入氢化钠(60％于矿物油中，0.13g；5.74mmol；1.5当量)并将所得的混合物在0℃搅拌5min。向混合物中加入碘甲烷(0.47mL；7.66mmol；2当量)并在0℃继续搅拌2h。然后缓慢将混合物的温度升至23℃，并将混合物另外搅拌2h。用水将混合物淬灭(100mL) 并用乙酸乙酯(2×200mL)萃取有机组分。用卤水(100mL)洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，过滤并在减压下移除溶剂以提供为固体的粗化合物(0.8g，76％)。粗产物未经进一步纯化，直接用于下一步骤。。1H NMR(DMSO-d6)δ9.37(s，1H)，8.20(s， 1H)，7.71(s，1H)，7.62(s，1H)，3.90(s，
3H)，3.21(s，3H)，2.30(m，1H)，0.90(m， 6H)。LCMS：m/z＝276.2[M+]，RT＝2.40分钟,(程序P1，柱V)。
3H)，3.21(s，3H)，2.30(m，1H)，0.90(m， 6H)。LCMS：m/z＝276.2[M+]，RT＝2.40分钟,(程序P1，柱V)。
[0660] 步骤5：3-溴-8-(异丁酰基甲基氨基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸甲酯
[0661] 在0℃向化合物V(0.8g，2.9mmol，1当量)于THF(20mL)的搅拌溶液中加入 N-溴代琥珀酰胺(0.51g，2.9mmol，1当量)，并将所得混合物搅拌30min。用水(100mL) 将混合物淬灭，并用乙酸乙酯(2×200mL)萃取有机组分。用卤水(100mL)洗涤合并的有机层，于无水硫酸钠上干燥，过滤并在减压下移除溶剂，以提供粗化合物。通过用30％ EtOAc/己烷洗脱100-200目硅胶的快速色谱纯化粗产品，以得到为棕色固体的标题化合物 (1g，98％)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.77(s，1H)，7.91(s，1H)，7.77(s，1H)，3.93 (s，3H)，3.21(s，3H)，2.38(m，
1H)，090(m，6H)。LCMS：m/z＝354.0[M+]，356.0 [M+2]，RT＝2.86分钟；(程序P1，柱V)。
1H)，090(m，6H)。LCMS：m/z＝354.0[M+]，356.0 [M+2]，RT＝2.86分钟；(程序P1，柱V)。
[0662] 步骤6：8-(异丁酰基甲基氨基)-3-(5-甲基-噻吩-2-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸甲酯
[0663] 向反应管中搅拌的化合物VI(1g；2.82mmol；1当量)的干DMF溶液中加入化合物 VIa(1.6g；4.23mmol；1.5当量)，并用氩气将所得混合物除气5min。向混合物中加入 Pd(PPh3)4(0.32g；0.28mmol；0.1当量)，并重复用氩气除气约5min，然后密封反应管，并在140℃加热2h。将混合物冷却至室温，用水(100mL)淬灭，并用乙酸乙酯(2×200 mL)萃取有机组分。用水(200mL)、卤水洗涤合并的有机层，并于无水Na2SO4上干燥，然后过滤。在真空下蒸发滤液以得到粗材料，其通过用0-50％乙酸乙酯/己烷洗脱的硅胶 (230-400目)柱色谱纯化，以得到为米白色固体的标题化合物(0.95g，91％)。1H NMR (DMSO-d6)δ8.98(s，1H)，7.89(s，1H)，7.72(s，1H)，7.38(d，1H，J＝3Hz,)，7.03 (d，1H，J＝3Hz)，3.90(s，3H)，3.23(s，3H)，
2.55(s，3H)，2.50(m，1H)，0.93(m， 6H)。LCMS：m/z＝372.4[M+]，RT＝3.24分钟,(程序P1，柱V)。
2.55(s，3H)，2.50(m，1H)，0.93(m， 6H)。LCMS：m/z＝372.4[M+]，RT＝3.24分钟,(程序P1，柱V)。
[0664] 步骤7：8-(异丁酰基甲基氨基)-3-(5-甲基-噻吩-2-基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸
[0665] 在23℃向化合物VII(0.95g，2.56mmol，1当量)于THF:甲醇:H2O(40mL，5:1:1) 的溶液中加入一水合氢氧化锂(0.16g，3.84mmol，1.5当量)于水(5mL)中的溶液，并将所得混合物在23℃搅拌1h。在减压下移除有机溶剂，并用水稀释残余物，并用6N HCl 酸化以调节pH至约5-6。通过过滤收集沉淀固体，并将固体在真空下干燥以得到为米白色固体的标题化合物(0.8g，82％)。1H NMR(DMSO-d6)δ13.5(brs，1H)，8.97(s，1H)， 7.88(s，1H)，7.69(s，1H)，7.37(d，1H，J＝4Hz)，7.02(s，1H)，3.23(s，3H)，2.55 (s，3H)，2.50(m，1H)，0.93(m，
6H)。LCMS：m/z＝358.0[M+]，RT＝2.35分钟,(程序P1，柱Y)。
6H)。LCMS：m/z＝358.0[M+]，RT＝2.35分钟,(程序P1，柱Y)。
[0666] 步骤8：(S)-N-(1-(4H-1,2,4-三唑-3-基)乙基)-8-(N-甲基异丁酰胺)-3-(5-甲基噻吩-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酰胺
[0667] 在23℃向化合物VIII(0.18g，0.50mmol，1eq)于DMF(2mL)的搅拌溶液中加入 TEA(0.21mL，1.51mmol，3当量)、(S)-1-(4H-[1,2,4]三唑-3-基)-乙胺盐酸盐(0.09g，0.60 mmol；1.2当量)的DMF(2mL)溶液和T3P(0.23mL，0.75mmol，1.5当量)，并将所得混合物在120℃搅拌2h。将混合物冷却至室温，并用水淬灭。用乙酸乙酯(2×100mL) 萃取有机组分，并用卤水洗涤合并的萃取物。将有机层于无水硫酸钠上干燥，过滤并弄浓缩至干以提供粗材料，其通过用0-5％甲醇/CH2Cl2洗脱的硅胶(100-200目)柱色谱纯化，以得到为米白色固体的标题化合物(0.12g，53％)。1H NMR(DMSO-d6)δ13.85(brs，1H)， 9.13(brs，1H)，9.01(s，1H)，8.48(s，1H)，7.84(m，2H)，7.40(m，1H)，7.02(s， 1H)，5.32(m，1H)，3.17(s，3H)，2.54(s，
3H)，2.43(m，1H)，1.55(m，3H)，0.95 (m，6H)。LCMS：m/z＝452.3[M+]，RT＝2.61分钟,(程序P1，柱V)。
3H)，2.43(m，1H)，1.55(m，3H)，0.95 (m，6H)。LCMS：m/z＝452.3[M+]，RT＝2.61分钟,(程序P1，柱V)。
[0668] 表1
[0669]
[0670]
[0671]
[0672]
[0673]
[0674]
[0675]
[0676]
[0677]
[0678]
[0679]
[0680]
[0681]
[0682]
[0683]
[0684]
[0685]
[0686]
[0687]
[0688]
[0689]
[0690]
[0691]
[0692]
[0693] 实施例189：体外研究
[0694] A.克隆
[0695] 使用表达人或大鼠P2X3或P2X2/3受体的细胞进行FLIPR分析 表达hP2X3(Cat# 6188)和hP2X2/3(Cat#6179)的重组细胞购自Chantest Corp。Rat P2X2(NCBI登记号：
U14414)通过PCR从PC12 cDNA(大鼠肾上腺髓质细胞株)扩增。将含有大鼠P2X2蛋白质编码序列的PCR产物克隆至多克隆位点(MCS)中的EcoRV-酶切的和去磷酸化的载体pIRES-puro3。见，图1A。
U14414)通过PCR从PC12 cDNA(大鼠肾上腺髓质细胞株)扩增。将含有大鼠P2X2蛋白质编码序列的PCR产物克隆至多克隆位点(MCS)中的EcoRV-酶切的和去磷酸化的载体pIRES-puro3。见，图1A。
[0696] Rat P2X3(NCBI登记号：X91167)通过PCR从大鼠脑cDNA扩增。将获得的含有大鼠P2X3蛋白质编码序列的PCR产物克隆至多克隆位点(MCS)中EcoRV-酶切的和去磷酸化的载体pCDNA-Hygro(图1B)。然后将克隆至pcDNA-Hygro的大鼠P2X3亚克隆至 pcDNA-5/TO，其位于载体的多克隆位点(MCS)中的HindIII(5')和XhoI(3')位点(图 1C)。
[0697] 将所有产生重组载体DNA的构建体用于序列测定后细胞株的转染和增殖。
[0698] B.表达rP2X2/3的重组TRex293细胞和表达rP2X3的CHO-TRex细胞的发育
[0699] 使用 2000(Invitrogen)转染试剂，在未用抗生素、无血清下，使用超螺旋构建体(使用QIAGEN试剂盒纯化)进行转染。将DNA构建体，pIRES-Puro3中的大鼠 P2X2和pCDNA5/TO中的大鼠P2X3共转染为TRex293细胞，以增殖rP2X2/3稳定株。使用50μg/mL潮霉素(Invitrogen)和0.5μg/mL嘌呤霉素(Fermentek)用于选择rP2X2/3的稳定克隆。将pCDNA5/TO DNA构建体中的大鼠P2X3转染为CHO-TRex细胞以增殖rP2X3 稳定株，并使用500μg/mL潮霉素(Invitrogen)作为选择抗生素。然后将转染的稳定集群进行功能验证，并且通过稀释克隆纯化适于分析的强健的克隆体。
[0700] C.分析策略
[0701] (i)用于筛选化合物的细胞内钙分析策略
[0702] 将含有6×106个细胞(人P2X3-HEK/人P2X2/3-TRex293/大鼠P2X2/3-TRex293/大鼠 P2X3 TRex-CHO)的冷冻小瓶在37℃的水浴中解冻。将细胞在50mL离心管中悬浮于20mL 各细胞铺板培养基中(组成见附录)。借助于台盼蓝染法(Trypan Blue dye)检查细胞活性。通过洗涤，将细胞铺板于黑色384-孔清澈见底的由无菌多聚-D-赖氨酸包覆的板中，以使每个孔在30μL细胞铺板培养基中含有10,000个细胞(对于hP2X3每孔15,000个)。将板于 37℃在5％CO2培养箱中培养24h。
[0703] 转天，在分析之前，通过倾倒和温和轻敲从每孔中移除细胞铺板培养基。向每孔中加入30μL FLIPR钙4染料溶液。将板在37℃培养45min(hP2X3为60min)。然后将板置于384孔FLIPR中用于分析之前，先在室温平衡15分钟。
[0704] 将化合物溶解于DMSO，并以2mM的起始浓度依照11个点半对数(3.16倍)稀释进行连续稀释。将将在进行分析前将稀释物与分析缓冲剂混合。
[0705] 借助于FLIPR向分析就绪的细胞板的各孔中加入化合物，捕获荧光读取5min，以观察化合物任何可能的激动性能。然后将板在室温下培养15min。在各激动剂的EC75浓度下刺激细胞，并通过FLIPR另外捕获5min的荧光读取。将化合物存在下的荧光读取的不同与对照孔(没有化合物的孔)比较，以计算化合物的抑制能力。使用Graph pad Prism软件确定化合物的IC50值。
[0706] (ii)hP2X3-HEK和hP2X2/3-TRex293细胞的细胞铺板培养基
[0707] ·DMEM/F12(1:1)HAM培养基(Invitrogen；Cat#11039)
[0708] ·1X NEAA(Invitrogen；Cat#11140)
[0709] ·25mM HEPES(Invitrogen；Cat#15630)
[0710] ·1mM丙酮酸钠(Invitrogen；Cat#11360)
[0711] ·10％四环素阴性FBS(PAA；Cat#A15-209)
[0712] ·1μg/mL强力霉素(Clontech；Cat#63131)[仅用于hP2X2/3-TRex293 细胞][0713] (iii)rP2X2/3-TRex293细胞的细胞铺板培养基
[0714] ·DMEM培养基(Invitrogen；Cat#11965)
[0715] ·25mM HEPES(Invitrogen；Cat#15630)
[0716] ·10％四环素阴性FBS(PAA；Cat#A15-209)
[0717] ·1μg/mL强力霉素(Clontech；Cat#63131)
[0718] (iv)rP2X3-CHOTRex cells细胞的细胞铺板培养基
[0719] ·F-12营养混合物(HAM)1X(Invitrogen；Cat#11765)
[0720] ·1X GlutamaxTM(Invitrogen；Cat#35050)
[0721] ●10％四环素阴性FBS(PAA；Cat#A15-209)
[0722] ●1μg/mL强力霉素(Clontech；Cat#63131)
[0723] (v)分析缓冲液组成
[0724] ●HBSS(Invitrogen Cat#14025)
[0725] ●20mM HEPES(Invitrogen Cat#15630)
[0726] ●0.01％F127(Sigma Cat#P2443)
[0727] ●1.8mM CaCl2(Sigma Cat#C5080)
[0728] ●pH调节至7.4
[0729] (vi)染料溶液组成
[0730] ●1X FLIPR钙4染料于分析缓冲剂中(Molecular devices Cat#R8141
[0731] ●1.8mM丙磺舒(Sigma Cat#P8761)
[0732] ●pH调节至7.4
[0733] 来自对于实施例1-188的P2X3和P2X2/3FLIPR分析的数据示出于表2中。
[0734] 表2
[0735]
[0736]
[0737]
[0738]
[0739] A：IC50＝1-100nM
[0740] B：IC50＝>100-1000nM
[0741] C：IC50＝>1000-10,000nM
[0742] D：IC50>10,000nM
[0743] 实施例190：大鼠体内热性痛觉过敏(Hargreaves试验)研究
[0744] 研究中包括了年轻成年年龄组的雄性Sprague Dawley大鼠，体重范围180-200g。将动物用任意的食物和水于12h明/暗循环下饲养。在研究开始之前，使大鼠适应
Hargreaves 装置观察室的环境两天，每天两次，一次45-60min。在每次测试之前，也让动物适应装置 15-30min。依照改进的Hargreaves法(1988,"A new and sensitive method for measuring thermal nociception in cutaneous hyperalgesia",疼痛32:77-88)使用大鼠足底测试(Ugo Basile，意大利)评估热性痛觉过敏。
Hargreaves 装置观察室的环境两天，每天两次，一次45-60min。在每次测试之前，也让动物适应装置 15-30min。依照改进的Hargreaves法(1988,"A new and sensitive method for measuring thermal nociception in cutaneous hyperalgesia",疼痛32:77-88)使用大鼠足底测试(Ugo Basile，意大利)评估热性痛觉过敏。
[0745] 将大鼠暴露于直接应用至大鼠后爪足底区域之下的移动红外热源中，用于缩爪潜伏 (PWL)值的测量。缩爪潜伏(PWL)被定义为大鼠从热源移开其后爪的以秒计的时间。仪器33％的IR被用于测量PWL。将未治疗爪显示8-14秒基础响应的动物包括于研究中。使用20秒作为截止点，以防止组织损伤。
[0746] 依照对热刺激(先前描述的PWL测量)的基础读出PWL值，在轻微异氟烷麻醉下，向动物的右后(同侧的)爪的足底表面皮下注射50μL的完全弗式佐剂(CFA-1mg/mL悬浮剂-Sigma，USA，Cat#F5881)。使用1mL注射器和26g1/2-英寸针头进行注射。每次注射前将CFA悬浮剂充分混合。在将针头从爪移除后立即向注射位置施加10s的微压，以防止任何佐剂油从注射位置泄漏。然后将大鼠返回它们的住所以恢复，并养于软垫上。
[0747] 转天(天1)在CFA注射20-22h后，记录动物的PWL。取三次读数的平均值作为CFA 基础读出之前和之后每只动物同侧爪的PWL记录。CFA注射后在天1具有≤6秒PWL值的动物被认为是痛觉过敏的，依照单盲策略其被随机选入治疗组和进一步测试阶段。
[0748] 在测试阶段，在口服配量的CE测试制品、载体(20％聚乙二醇、1％TweenTM80、79％水)和萘普生(阳性对照)后1h评估PWL。见，例如图2(实施例22的化合物)、图5 (实施例38的化合物)和图6(实施例52的化合物)。
[0749] 通过单因素ANOVA，随后通过测试后Dunnett多重比较进行统计学分析。将治疗后的 PWL值与治疗前PWL值比较，p<0.05被认为是统计学显着的。每组包括8只动物。
[0750] 实施例191：大鼠中福尔马林诱导的疼痛(自动化伤害感受分析仪测试)
[0751] 研究中包括了年轻成年年龄组的雄性Sprague Dawley大鼠，体重范围200-250g。将动物用任意的食物和水于12h明/暗循环下饲养。在研究日开始之前，使动物适应自动化伤害感受分析仪(ANA)观察室的环境两天，每天两次，一次45-60min。在研究日，将金属带粘至每只入组研究的动物的右后爪的足底面，并在塑料观察室中保持10-15min。在用测试化合物或载体(20％聚乙二醇、1％TweenTM80、79％水)口服治疗后0.5或1h，在动物中进行福尔马林注射。动物的福尔马林注射通过用50μL的2.5％福尔马林(由甲醛溶液新鲜制备，Sigma，USA，Cat#F8775)皮下注射至右后爪背面完成。注射后立即将动物放回它们各自的ANA记录室。使用ANA运动分析软件记录每只动物在福尔马林注射后1-60min 的退缩计数数据。福尔马林注射后，以2期进行研究，早期从0min延伸至10min，第二期从11min延伸至
60min。于5min的时间仓内收集数据，将每仓数据相加得一期的总计数。见，例如，图3(实施例22的测试化合物)。
60min。于5min的时间仓内收集数据，将每仓数据相加得一期的总计数。见，例如，图3(实施例22的测试化合物)。
[0752] 使用未配对t检验进行统计学分析。在治疗组和载体组的总计数间进行比较，p<0.05 被认为是统计学显着的。通常在每个测试制品和载体治疗组中使用8只动物。
[0753] 实施例192：小鼠中醋酸诱导的扭体试验
[0754] 研究中包括30-40g的swiss albino小鼠。在口服施用载体或试验制品对照后，以10 mL/kg的注射体积，给予小鼠0.7％v/v醋酸溶液的腹膜内注射。通常，以20和60mg/kg 之间的剂量施用试验制品。将小鼠单个放入玻璃室内。施用醋酸后，计数在这些动物中产生的扭体的数目15min。用于计数目的，通过腹部拉伸以及同时拉伸至少一只后肢指示扭体。见，例如图4。
[0755] 通过单因素ANOVA，随后通过Dunnett多重比较测试进行统计学分析。将治疗组和载体的扭体总数进行比较，p<0.05被认为是统计学显着的。每组包括6只动物。
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