技术领域
[0001] 本
发明属于医疗器械领域，涉及一种壳聚糖基抗菌创口贴。
背景技术
[0002] 壳聚糖(Chitosan)是甲壳素(Chitin)部分或全部脱已酰基后的产物。壳聚糖是阳离子
聚合物，带正电，电荷
密度高，可以与大量阴离子聚合物形成不溶于
水的
复合材料，在
生物材料领域有很大的应用潜
力。在低pH值下(低于6)，壳聚糖的
氨基将质子化，使壳聚糖带正电。在高pH值下(高于6.5)，壳聚糖将去质化，化学性质活跃。且在高pH值下，壳聚糖能共聚形成
纤维或网状结构(如膜或凝胶)(Biomacromolecules，2005，6(6)：2881-2894.)
[0003] 壳聚糖在生物体内通过溶菌酶的作用可以分解，具有生物可将解性。壳聚糖具有优异的
生物相容性，兼有高等动物组织中胶原质和高等
植物组织中
纤维素两者的生物功能，对动、植物都具有良好的适应性，与生物体的
亲和性能体现在细胞水平上，产生
抗原的可能性很小，壳聚糖有助于创伤修复，无毒，植入体内几乎没有排异反应，并且能够促进血管生成(Biomaterials，2005，26(30)：5983-5990)。
[0004] 壳聚糖有丰富的氨基，可以在温和的条件下进行化学改性，以促进其生物活性和力学性能。壳聚糖因其具有的独特性能引起人们的广泛关注，其应用范围涉及工业、农业、医疗卫生、食品保健、日用化工、环保、印染以及功能膜材料等诸多领域(Polyners，2000，46(1)：1-27)。
[0005] 许多研究者将壳聚糖用于
皮肤替代物材料，因为壳聚糖对于
伤口愈合具有很多优点，如
止血作用、
加速组织再生和刺激
成纤维细胞合成胶原(Biomaterials，2001，22(4)：331-336)。Ueno等研究表明
棉花态的壳聚糖可以加速伤口愈合，主要通过增进多形核白细胞在伤口
位置的渗透，是快速伤口愈合的必要修复材料，复合了基本的成纤维细胞生长因子(bFGF)的壳聚糖可以加速愈合速率(Journal of Biomedical Materials Resesrch Part A，2003，64A(1)：177-181.)。Howling等研究表明高度脱乙酰的壳聚糖比甲壳素和低度脱乙酰的壳聚糖生物活性更好，这与壳聚糖和阴离子
葡萄糖(GAG)的静电相互作用相关，取决于壳聚糖的脱乙酰度和pH环境(Biomaterials，2001，22(22)：2959-2966).GAG在身体里分布广泛，结合与调控多种细胞因子和成长因子。进一步的研究重点是将壳聚糖与其他材料复合，以达到伤口的快速愈合。Yan等制备了壳聚糖与海藻酸的聚
电解质复合膜。
这种可降解的壳聚糖/海藻酸聚
电解质复合膜对pH变化表现出极大的
稳定性，因此作为降解可控的膜比单纯的壳聚糖或海藻酸膜更有效(Chemical￡Pharmaceutical Bulletin，
2000，48(7)：941-946)。这种聚电解质复合膜在大鼠模型里能促进切口伤口的加速愈合。
[0006] 壳寡糖(chitooligosaccharide)是壳聚糖经降解后聚合度为2-10的低聚产物，其
水溶性好，容易被吸收利用，在人体内100％吸收且生物活性比壳聚糖更高。与壳聚糖一样具有抑制
肿瘤细胞的生长，增强
机体免疫力，强化肝功能，防止胃溃疡，降低血糖、血脂血压，
吸附肝固醇，具备抑制
炎症反应(Biochemical Biophysical Research Communications358(2007)954-959)，且随浓度加大其抗菌活性增强，高浓度时有杀菌作用(Bioorganic￡Medicinal Letters，2008，18：5774-5776)。
发明内容
[0007] 本发明的目的在于提供一种新型抗菌的创口贴，可用于野外创伤及时止血抢救、手术止血。
[0008] 本发明的创口贴，由壳聚糖、壳寡糖和增强高分子组成，其中壳聚糖和壳寡糖占总
质量的85％以上，优选为85-95％。
[0009] 其中，增强高分子选自海藻酸钠、葡聚糖、透明质酸和
胶原蛋白中的一种或几种。
[0010] 上述创口贴是由以下方法制备的，包括如下步骤：
[0011] (1).取去离子水配制乙酸或
盐酸溶液；
[0012] (2).取步骤(1)配制的乙酸或盐
酸溶液用作
溶剂，溶解壳聚糖，得到壳聚糖溶液。
[0013] (3).向步骤(2)制备得到的溶液中加入壳寡糖，搅拌至完全溶解，制备得到壳聚糖-壳寡糖混合溶液；
[0014] (4).取去离子水溶解增强高分子，制备得到用于创口贴增强的高分子溶液；
[0015] (5).将步骤(3)制备得到的壳聚糖-壳寡糖混合溶液与步骤(4)制备得到的增强高分子溶液混合，搅拌15min，随后
超声波分散，制备得到均匀混合溶液；
[0016] (6).将步骤(5)制备的混合溶液采用
现有技术的方法加工成型，干燥，裁剪或加工成不同尺寸的创伤用吸水垫、止血棉或
止血带，封装，灭菌。
[0017] 更优选的，本发明所述的创口贴的制备过程如下：
[0018] (1).取去离子水配制pH＝6的盐酸或乙酸溶液，待用；
[0019] (2).取步骤(1)配制的乙酸或盐酸溶液用作溶剂，溶解壳聚糖，得到壳聚糖溶液，壳聚糖终浓度为4％～10％(m/v)；
[0020] (3).向步骤(2)制备得到的溶液中加入壳寡糖，搅拌至完全溶解，制备得到壳聚糖-壳寡糖混合溶液，壳寡糖终浓度为0.1％～3％(m/v)；
[0021] (4).取去离子水，溶解增强高分子，制备得到用于创口贴增强的高分子溶液，增强高分子的终浓度在0.1～2％(m/v)；
[0022] (5).将步骤(3)制备得到的壳聚糖-壳寡糖溶液与步骤(4)制备得到的增强高分子溶液按照体积比2～10∶1混合，搅拌15min，然后
超声波分散，制备得到均匀混合溶液；
[0023] (6).将步骤(5)制备的混合溶液采用现有技术的方法加工成型，干燥，裁剪或加工成不同尺寸的创伤用吸水垫、止血棉或止血带，封装，灭菌。
[0024] 以上材料都具有良好的生物相容性，为现有技术，已经广泛应用于组织工程，医疗器械或医药创口贴等领域。
[0025] 壳聚糖(chitosan)是由几丁质(chitin)经过脱乙酰作用得到的，化学名称为β-(1，4)-2-氨基-2-脱
氧-D-葡萄糖，分子式(C6H11NO4)n。壳聚糖的制备方法参见中国
专利公开文献CN102702385A、CN102585035A、CN102492057A、CN103045676A等，整体引用作为参考。
[0026] 壳寡糖也叫壳聚寡糖，也称几丁寡糖，学名β-1，4-寡糖-葡萄糖胺，当壳聚糖降解后分子链节数n在2～10之间的低聚糖称为壳寡糖，它的生物活性最有效的是n＝6的壳寡糖。壳寡糖的制备方法参见中国专利公开文献CN101343333A、CN1803849A、CN1654483A等，整体引用作为参考。
[0027] 海藻酸钠(Sodium alginate，NaAlg)由海藻酸的钠盐组成，分子量为216，分子式为(C6H7NaO6)n，微溶于水。一般的，海藻酸钠是采用干的或湿的海草(藻)经碾碎、水洗除杂、强
碱水萃取、澄清得粗海藻酸盐溶液，经氯化
钙沉淀得带色的海藻酸钙，经脱色、脱味后用酸处理，除去可溶性杂质得海藻酸沉淀，与
碳酸钠作用得海藻酸钠，再经干燥、
粉碎、过筛得海藻酸钠粉末。海藻酸钠的制备方法参见中国专利公开文献CN101717454A、CN101831002A等，整体引用作为参考。
[0028] 葡聚糖是一种多糖，又称右旋糖酐，由数个葡萄糖分子聚合而成。分子式为[C6H10O5]n。葡聚糖的制备方法参见中国专利公开文献CN102167753A、CN102153669A、CN102108372A、CN101560269A等，整体引用作为参考。
[0029] 透明质酸(Hyaluronic acid，简称HA，俗称玻尿酸)是一种酸性粘多糖，分子式为(C14H20NNaO11)n，透明质酸的制备方法参见中国专利公开文献CN102154405A、CN101649337A、CN101418049A、CN102124120A等，整体引用作为参考。
[0030] 胶原蛋白(Collagen)是一种生物性高分子物质，由胶原纤维经过部分降解后得到的具有较好水溶性的
蛋白质。
水解胶原蛋白执行QB2732-2005国家标准。胶原蛋白的制备方法参见中国专利公开文献CN102964444A、CN102675456A、CN102146117A、CN102094056A等，整体引用作为参考。
[0031] 技术效果
[0032] 本发明的创新之处不仅在于原料的组配及用量，而且在于本发明所述制备方法。
[0033] 本发明方法制备的创口贴，不同于一般的纱布，该创口贴具备良好的促凝血功能且不含任何凝血剂，具备良好的弹性，能适合用于各种创口表面，血流遇到该创口贴后，能迅速降低并
凝固，能迅速高效地控制严重出血，减少伤口处理时间，为局部止血提供了一种高效手段。该创口贴容易从伤口去除，不需要清创处理。
[0034] 本发明方法制备的创口贴具备良好的抗菌性能，对绝大多数菌类都有显著的抑制作用，如金黄色葡糖球菌、肠球菌、鲍曼不动杆菌、表皮葡萄球菌、绿脓杆菌、弗氏
柠檬酸杆菌、阴沟肠杆菌、
变形链球菌、
肺炎链球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯氏菌、化脓性链球菌、猪霍乱沙
门氏菌，大肠杆菌、嗜食单胞菌、柯氏柠檬酸杆菌、奇异变形杆菌，变形杆菌、卡他莫拉菌、艰难菌等，
接触该创口贴，菌数量能成指数级的减少。
[0035] 本发明方法制备的创口贴，微观结构均一，在扫描电镜下观察到材料内部和表面具有均一的微孔结构，呈微小的多孔海绵状。单位质量水吸附能力为复合材料自身质量的40～50倍，单位质量血液的吸附能力为复合材料自身质量的40～50倍，pH值范围为6.0～7.5。比传统的止血棉止血效果更强。
[0036] 本发明方法制备的创口贴进行了血液的凝固试验，血液的凝血时间约20-30秒。创口贴适用于用环氧乙烷
蒸汽或Y射线并参照相关国际标准对其进行灭菌。
[0037] 本发明的创口贴还具有稳定性好，保质期长，安全性高，制备工艺简单，
治疗效果好等诸多优点。具体实施方式：
[0038] 下面将结合
实施例进一步阐明本发明的内容，但这些实施例属于本发明的保护范围。
[0039] 实施例1、创口贴。
[0040] (1).配制溶解壳聚糖的溶剂。取去离子水配制pH＝6的盐酸溶液，待用。
[0041] (2).配制4％壳聚糖溶液。取1升pH＝6的盐酸溶液，溶解40g壳聚糖，得到4％(m/v)壳聚糖溶液。
[0042] (3).配制壳聚糖-壳寡糖混合溶液。然后向步骤(2)制备得到的溶液中加入5g的壳寡糖，搅拌至完全溶解，制备得到1升的壳聚糖-壳寡糖混合溶液，壳聚糖浓度为4％(m/v)，壳寡糖浓度为0.5％(m/v)。
[0043] (4).增强高分子溶液的制备。取1升去离水，溶解5g的海藻酸钠，制备得到用于创口贴增强的高分子溶液，海藻酸钠溶液的浓度为0.5％(m/v)
[0044] (5).制备加工创口贴用的混合溶液。将步骤(3)制备得到壳聚糖-壳寡糖溶液与步骤(4)制备得到的增强高分子溶液按照8∶1混合，搅拌15min，然后超声波分散，制备得到均匀混合溶液。
[0045] (6).将步骤(5)制备的混合溶液加工成型，干燥，裁剪或加工成不同尺寸的创伤用吸水垫、止血棉或止血带，封装，灭菌。
[0046] 实施例2、创口贴
[0047] (1).配制溶解壳聚糖的溶剂。取去离子水配制pH＝6的乙酸溶液，待用。
[0048] (2).配制10％壳聚糖溶液。取1升pH＝6的盐酸溶液，溶解100g壳聚糖，得到10％(m/v)壳聚糖溶液。
[0049] (3).配制壳聚糖-壳寡糖混合溶液。然后向步骤(2)制备得到的溶液中加入1g的壳寡糖，搅拌至完全溶解，制备得到1升的壳聚糖-壳寡糖混合溶液，壳聚糖浓度为10％(m/v)，壳寡糖浓度为0.1％(m/v)。
[0050] (4).增强高分子溶液的制备。取1升去离水，溶解10g的葡聚糖，制备得到用于创口贴增强的高分子溶液，海藻酸钠溶液的浓度为1％(m/v)
[0051] (5).制备加工创口贴用的混合溶液。将步骤(3)制备得到壳聚糖-壳寡糖溶液与步骤(4)制备得到的增强高分子溶液按照4∶1混合，搅拌15min，然后超声波分散，制备得到均匀混合溶液。
[0052] (6).将步骤(5)制备的混合溶液加工成型，干燥，裁剪或加工成不同尺寸的创伤用吸水垫、止血棉或止血带，封装，灭菌。
[0053] 实施例3、创口贴
[0054] (1).配制溶解壳聚糖的溶剂。取去离子水配制pH＝6的盐酸溶液，待用。
[0055] (2).配制7％壳聚糖溶液。取1升pH＝6的盐酸溶液，溶解70g壳聚糖，得到7％(m/v)壳聚糖溶液。
[0056] (3).配制壳聚糖-壳寡糖混合溶液。然后向步骤(2)制备得到的溶液中加入10g的壳寡糖，搅拌至完全溶解，制备得到1升的壳聚糖-壳寡糖混合溶液，壳聚糖浓度为7％(m/v)，壳寡糖浓度为1％(m/v)。
[0057] (4).增强高分子溶液的制备。取1升去离水，溶解15g的透明质酸，制备得到用于创口贴增强的高分子溶液，海藻酸钠溶液的浓度为1.5％(m/v)
[0058] (5).制备加工创口贴用的混合溶液。将步骤(3)制备得到壳聚糖-壳寡糖溶液与步骤(4)制备得到的增强高分子溶液按照10∶1混合，搅拌15min，然后超声波分散，制备得到均匀混合溶液。
[0059] (6).将步骤(5)制备的混合溶液加工成型，干燥，裁剪或加工成不同尺寸的创伤用吸水垫、止血棉或止血带，封装，灭菌。
[0060] 实施例4、创口贴
[0061] (1).配制溶解壳聚糖的溶剂。取去离子水配制pH＝6的盐酸溶液，待用。
[0062] (2).配制4％壳聚糖溶液。取1升pH＝6的盐酸溶液，溶解40g壳聚糖，得到4％(m/v)壳聚糖溶液。
[0063] (3).配制壳聚糖-壳寡糖混合溶液。然后向步骤(2)制备得到的溶液中加入30g的壳寡糖，搅拌至完全溶解，制备得到1升的壳聚糖-壳寡糖混合溶液，壳聚糖浓度为4％(m/v)，壳寡糖浓度为3％(m/v)。
[0064] (4).增强高分子溶液的制备。取1升去离水，溶解20g的胶原蛋白，制备得到用于创口贴增强的高分子溶液，海藻酸钠溶液的浓度为2％(m/v)
[0065] (5).制备加工创口贴用的混合溶液。将步骤(3)制备得到壳聚糖-壳寡糖溶液与步骤(4)制备得到的增强高分子溶液按照10∶1混合，搅拌15min，然后超声波分散，制备得到均匀混合溶液。
[0066] (6).将步骤(5)制备的混合溶液加工成型，干燥，裁剪或加工成不同尺寸的创伤用吸水垫、止血棉或止血带，封装，灭菌。
[0067] 实施例5、创口贴
[0068] (1).配制溶解壳聚糖的溶剂。取去离子水配制pH＝6的乙酸溶液，待用。
[0069] (2).配制10％壳聚糖溶液。取1升pH＝6的盐酸溶液，溶解100g壳聚糖，得到10％(m/v)壳聚糖溶液。
[0070] (3).配制壳聚糖-壳寡糖混合溶液。然后向步骤(2)制备得到的溶液中加入1g的壳寡糖，搅拌至完全溶解，制备得到1升的壳聚糖-壳寡糖混合溶液，壳聚糖浓度为10％(m/v)，壳寡糖浓度为0.1％(m/v)。
[0071] (4).增强高分子溶液的制备。取1升去离水，溶解20g的海藻酸钠和葡聚糖混合物，制备得到用于创口贴增强的高分子溶液，海藻酸钠溶液的浓度为2％(m/v)[0072] (5).制备加工创口贴用的混合溶液。将步骤(3)制备得到壳聚糖-壳寡糖溶液与步骤(4)制备得到的增强高分子溶液按照2∶1混合，搅拌15min，然后超声波分散，制备得到均匀混合溶液。
[0073] (6).将步骤(5)制备的混合溶液加工成型，干燥，裁剪或加工成不同尺寸的创伤用吸水垫、止血棉或止血带，封装，灭菌。
[0074] 实施例6、创口贴
[0075] (1).配制溶解壳聚糖的溶剂。取去离子水配制pH＝6的乙酸溶液，待用。
[0076] (2).配制10％壳聚糖溶液。取1升pH＝6的盐酸溶液，溶解100g壳聚糖，得到10％(m/v)壳聚糖溶液。
[0077] (3).配制壳聚糖-壳寡糖混合溶液。然后向步骤(2)制备得到的溶液中加入1g
