技术领域
[0001] 本
发明属于
微生物实验器具技术领域，涉及一种培养基瓶，具体指一种用于制备血琼脂平板的培养基瓶。
背景技术
[0002] 血琼脂培养基是一种含有脱
纤维动物血（一般用兔血或羊血）的
牛肉膏蛋白胨培养基，除含有培养细菌所需要的各种营养外，还能提供辅酶（如V因子）、血红素（X因子)等特殊生长因子，在微生物试验中常用于培养、分离和保存对营养要求苛刻的某些病原微生物；此外，还可用于测定细菌的溶血作用。鉴于某些细菌对血琼脂培养基配制的苛刻要求，如培养基灭菌后需在45℃左右保温，按照比例加入无菌脱纤维
绵羊血，充分混匀后，倾注灭菌培养皿即可。若
温度太高，则制备的血平板
颜色会发黑，势必影响试验结果或不易观察细菌的溶血圈，因此一定要冷却到所需温度才能添加羊血。由于商业血琼脂培养基
费用过于昂贵，且所用培养基存在配制时间过长、受保质期限制等问题，往往不能满足实验室标准要求。为确保实验结果不受琼脂平板配制的时间影响，节约试验成本，为此，实验室常需大量人工倾倒自制血琼脂培养基。目前，血琼脂培养基的制备一般均采用玻璃锥形瓶，需先将配好的培养基溶液倒入锥形瓶中，121℃高压灭菌15分钟，冷却至50 55℃，无菌操作加入5% 10% (V/~ ~
V)预温至37℃的无菌脱纤维羊血，充分混匀，倾注无菌平皿，即可。但在试验操作过程中常存在以下问题：（1）在将培养基与脱纤维羊血充分混匀的过程中，常会产生大量的
泡沫漂浮于混匀培养基的液面上，以往常通过静置或加温去除泡沫，但是随着操作时间的延长及培养基温度的下降，培养基成分易出现分布不均，甚至出现
凝固的现象，再次混匀则又会产生大量泡沫，泡沫去除率较低；在倾注无菌平皿时，漂浮于液面的泡沫即随培养基一起倾入平皿中，培养基凝固后，其表面往往会形成较多大小不一的凹坑（泡沫破裂引起），无法制备出试验要求所需的光滑、平整的培养基表面，在后续划线接种、涂布操作中，常出现划伤琼脂表面的现象，影响试验结果的准确性。（2）在倾注操作过程中，一般是左手负责拿取灭菌平皿，右手持瓶不断混匀操作，以进一步保证培养基和鲜血达到最佳混和状态。由于琼脂培养基倾注时需要保持50℃左右的温度，在倒板倾注过程中，倾注平皿的量需快速、准确，若倾注时间过长，则随着温度的降低，锥形瓶内的琼脂和脱纤维羊血将产生分布不均的现象，导致琼脂平板间营养成分不均，不能满足实验条件的统一性，拉大实验结果的差异。（3）目前采用锥形瓶加
硅胶塞和
锡纸封口进行培养基的灭菌消毒，消毒后存在封口易漏气破裂等问题。而采用普通具塞
试剂瓶，由于
瓶口无透气设计，在高压灭菌过程中需松开瓶口进行灭菌消毒，易造成培养基溢出、污染高压
蒸汽灭菌锅的内置仓及夹
水层等隐患。另外，普通具塞试剂瓶的瓶口大小、倾斜
角度及瓶盖设计不符合人体工程学设计要求，在操作中存在使用不便的问题。（4）传统玻璃锥形瓶瓶身存在不易抓持的问题，加之锥形瓶经高压灭菌后，从高压锅取出时其瓶身温度过烫，增加了抓持难度，容易烫伤手，不易操作，增加倾注、分装血平板的时间；而倾注时瓶体温度需控制在50 55℃范围内，由于操作
进程缓慢，常使得锥形~
瓶内未倒完的培养基接近凝固，需要重新加热、融化后再次倾注血平板，由此，增加了培养基污染的几率，导致倾注的平板培养基温度不一致，容易造成培养基试验结果重复平行的差异性较大。（5）如果瓶体内配制的培养基量过多，在起初倾倒平板时，不易控制倒入每个培养皿的量，倾倒培养基时瓶口易产生回流，易造成污染，操作费时费
力，制备的血平板难以达到统一标准要求，在进行比对培养的实验时不能满足要求，目前对此尚无较好的解决办法。
发明内容
[0003] 针对上述技术问题，本发明提供了一种用于制备血琼脂平板的培养基瓶，能快速高效去除混匀培养基液面的大量泡沫，确保血琼脂培养基
质量的同时提高了操作效率，瓶体结构设计合理，便于实验操作和实验参数控制。
[0004] 本发明通过以下技术方案来实现上述目的：
[0005] 一种用于制备血琼脂平板的培养基瓶，包括瓶体，瓶体外壁设有刻度线，所述瓶体上端设有分别向左右两侧倾斜的加样瓶嘴和倾倒瓶嘴，所述倾倒瓶嘴设有内置塞芯和密封盖，其中塞芯与倾倒瓶嘴内壁实现无缝密封插装，塞芯下端设有双层、上凸的弧面滤网，塞芯上端通过
螺纹与密封盖旋紧固定；所述加样瓶嘴配置有盖面均布透气孔的透气盖，透气盖与加样瓶嘴通过螺纹旋紧固定。
[0006] 作为本案的优化方案，所述塞芯为中空圆柱状结构，由上端倾注口、中端凸出部和下端口三部分组成一体式结构；其中，下端口内侧设有与其固连为一体的滤网，下端口外壁设有硅胶螺旋口，塞芯通过硅胶螺旋口与倾倒瓶嘴内壁实现密封插装；所述中端凸出部的外径大于倾倒瓶嘴的口径，且其下端面与倾倒瓶嘴的瓶口边沿紧密
接触；所述上端倾注口外壁设有塞芯螺纹，其与密封盖通过螺纹旋紧固定。
[0007] 作为本案的优化方案，所述瓶体外壁配套设有可拆装式
隔热套。
[0008] 作为本案的优化方案，所述隔热套为硅胶制成的矩形片状结构，隔热套的竖直两侧边对应设有粘接条，通过粘接条将隔热套裹覆在瓶体外壁。
[0009] 作为本案的优化方案，所述透气盖盖面设有呈同心圆状排布的透气孔，透气盖内侧设有防菌滤膜和带弧度的环形硅胶
垫圈，防菌滤膜通过环形硅胶垫圈
支撑固定，透气盖内
侧壁设有螺纹，外侧壁设有竖条状的防滑凸条。
[0010] 作为本案的优化方案，所述密封
盖顶部内侧设有带弧度的圆形硅胶垫圈，密封盖内侧壁设有螺纹，外侧壁设有竖条状的防滑凸条。
[0011] 作为本案的优化方案，所述加样瓶嘴的
中轴线与水平面间的夹角为40-60°，倾倒瓶嘴的中轴线与水平面间的夹角为40-70°。
[0012] 作为本案的优化方案，所述瓶体下部呈长方体结构，上部左右两侧向内对应倾斜呈斜坡状，斜坡坡面上分别设置加样瓶嘴和倾倒瓶嘴。
[0013] 作为本案的优化方案，所述瓶体斜坡坡面与水平面间的夹角设为30-50°。
[0014] 作为本案的优化方案，所述瓶体采用
硼硅玻璃制成，塞芯主体采用聚丙烯或聚
碳酸酯制成，密封盖和透气盖均采用酚
醛树脂制成。
[0015] 本发明的有益效果是：
[0016] （1）通过设置带有双层滤网结构的塞芯，可有效滤除瓶体内液态鲜
血培养基表面因快速摇匀所产生的大量泡沫，确保倾注的血琼脂培养基凝固后形成光滑、平整、一致的表面；塞芯的三段式结构设计，
密封性好，贴合紧密不滴漏；
[0017] （2）瓶体上部的倾斜面及两侧倾斜式加样口和倾倒口的设计，结构设计合理，符合人体工程学设计要求，便于培养基配制过程中添加或吸取各种试剂，使得取液或加样操作更为顺手、便捷，避免器皿间触碰造成污染；并有效控制和掌握倾倒入平皿中的培养基的量，不易产生回流现象，方便倾注，提高倾注的准确率和成功率；
[0018] （3）瓶体外壁设置隔热套，一方面便于操作人员拿取、抓持温度较高的瓶体，避免烫伤；另一方面起到保温的效果，延长了培养基瓶维持在最佳温度范围内的时间，利于混匀、倾倒瓶体内培养基和羊血的操作，为倾注、分装争取了时间，使得倾注平板时培养基的温度保持一致，提高了培养基制备的成功率；
[0019] （4）透气盖内透气孔和防菌滤膜的设计，使得高温消毒时蒸汽能够流通而细菌不能，达到无菌存储目的，且灭菌后能使瓶体内部自然、迅速降压，防止培养基溢出瓶口；
[0020] （5）密封盖顶端内侧设置密封硅胶垫圈，密封盖与塞芯通过螺纹密封连接，进一步确保高压灭菌过程中培养基不会溢出瓶口；
[0021] （6）结构合理，操作便捷，具有较好的市场前景和经济效益，适于推广应用。
附图说明
[0022] 图1为本发明制备血琼脂平板培养基瓶的结构示意图；
[0023] 图2为本发明制备血琼脂平板培养基瓶的整体结构示意图；
[0024] 图3为本发明制备血琼脂平板培养基瓶中塞芯的结构示意图；
[0025] 图4为本发明制备血琼脂平板培养基瓶中透气盖的俯视图；
[0026] 图5为本发明制备血琼脂平板培养基瓶中密封盖的俯视图；
[0027] 图6为本发明制备血琼脂平板培养基瓶中隔热套的结构示意图；
[0028] 图中：1-瓶体，2-透气盖，3-密封盖，4-塞芯，5-加样瓶嘴，6-倾倒瓶嘴，7-瓶嘴螺纹，8-瓶盖
内螺纹，9-上端倾注口，10-中端凸出部，11-下端口，12-滤网，13-硅胶螺旋口，14-塞芯螺纹，15-内螺纹，16-隔热套，17-刻度线，18-标签，19-透气孔，20-防菌滤膜，21-环形硅胶垫圈，22-防滑凸条，23-圆形硅胶垫圈，24-防滑螺纹，25-粘接条。
具体实施方式
[0029] 下面将结合附图及
实施例对本发明及其效果作进一步阐述。
[0030] 如图1、2所示，一种用于制备血琼脂平板的培养基瓶，包括瓶体1，所述瓶体1上端设有分别向左右两侧倾斜的加样瓶嘴5和倾倒瓶嘴6，倾倒瓶嘴6设有配套的内置塞芯4和密封盖3；其中塞芯4与倾倒瓶嘴6内壁实现无缝密封插装，塞芯4下端设有双层、上凸的弧面滤网12，塞芯4上端通过螺纹与密封盖3旋紧固定；加样瓶嘴5配置有盖面均布透气孔19的透气盖2，加样瓶嘴5上端外壁设有瓶嘴螺纹7，透气盖2内侧壁设有瓶盖内螺纹8，透气盖2与加样瓶嘴5通过瓶嘴螺纹7和瓶盖内螺纹8旋紧固定。
[0031] 优选地，如图3 所示，塞芯4是由上端倾注口9、中端凸出部10和下端口11三部分组成一体式中空圆柱状结构；塞芯4的长度设为6.5-8.0 cm，内径设为2.4-3.2 cm。其中，下端口11长度设为3.0-3.5 cm，下端口11内侧设有与其固连为一体的双层、向上凸的弧面滤网12，滤网12可有效滤除瓶体内液态鲜血培养基表面因快速摇匀所产生的大量泡沫，确保倾注的血琼脂培养基凝固后形成光滑、平整的表面；下端口11外壁设有硅胶螺旋口13，塞芯4通过硅胶螺旋口13与倾倒瓶嘴6内壁实现密封插装，密封性好，贴合紧密不滴漏。中端凸出部10的外径设为3.8-4.2 cm，长度设为2.0-3.0 cm，其外径大于倾倒瓶嘴6的口径，且其下端面与倾倒瓶嘴6的瓶口边沿紧密接触，可控制塞芯4插入倾斜瓶嘴6的深度。上端倾注口9的长度设为2.0-2.5 cm，上端倾注口9外侧壁设有塞芯螺纹14，密封盖3内侧壁设有瓶盖内螺纹15，密封盖3与塞芯4通过塞芯螺纹14和瓶盖内螺纹15旋紧固定，当密封盖3与塞芯螺纹
14旋紧固定后，能完全实现无漏点接触，具有安全防漏效果。
[0032] 优选的，所述加样瓶嘴5为圆柱状结构，瓶嘴的长度设为3.0-3.5 cm，直径为3.6-4.0 cm，加样瓶嘴5的中轴线与水平面间的夹角为40-60°，有利于培养基配制过程中添加各种试剂，以及灭菌后在超净
工作台的狭小空间中使用移液枪等器具进行样品吸取，使得加样及取液操作更为便捷，避免移液枪触及瓶口内侧而起交叉污染。如图4所示，加样瓶嘴5上配置的透气盖2直径设为4.0-4.5 cm，透气盖2盖面设有呈同心圆状排布的透气孔19，透气盖2内侧设有防菌滤膜20和带弧度的环形硅胶垫圈21，防菌滤膜20可更换，并通过环形硅胶垫圈21支撑固定，透气盖2内侧壁设有螺纹，外侧壁设有竖条状的防滑凸条22。防菌滤膜20有利于在高温消毒时蒸汽能够流通而细菌不能通过，达到防菌目的，并且灭菌后瓶体1内部能自然迅速降压，防止培养基溢出瓶体1，便于灭菌后无菌储存，更好的起到防菌、防污染目的，防滑凸条22可增加拧开透气盖2时的
摩擦力，方便瓶盖的开启操作。
[0033] 优选的，所述倾倒瓶嘴6为圆柱状结构，瓶嘴的长度设为3.0-3.5 cm，直径为3.0-3.4 cm，倾倒瓶嘴6中轴线与水平面间的夹角为40-70°。瓶嘴倾斜角度的设计符合人体工程力学，具有操作方便、易于倾注平皿及控制流量的便利性。如图5 所示，倾倒瓶嘴6上配置的密封盖3直径设为3.4-4.0 cm，密封盖3顶部内侧设有带弧度的圆形硅胶垫圈23，密封盖3内侧壁设有螺纹，外侧壁设有竖条状的防滑凸条22。
[0034] 如图6 所示，瓶体1外壁配套设有可拆装式隔热套16，隔热套16优选由隔热、透明的硅胶材质制成的矩形片状结构，隔热套16的竖直两侧边对应设有粘接条25，两粘接条所在面相反（即一个粘接条25在
正面，另一粘接条25在
反面），隔热套16包覆在瓶体1的外壁上，并由两侧的粘接条25相互粘接固定。在具体操作时，由于高压灭菌后的瓶体1温度较高，单个隔热套16不能满足隔热要求，故隔热套16可以设置多层，依次包覆在瓶体1的外壁上；当然，也可将单个隔热套16设置较厚，以达到更高的隔热效果，隔热套16的尺寸与瓶体1的尺寸相适配，只要能够保证其紧密贴合在瓶体1外壁上即可。
[0035] 优选的，所述瓶体1外壁设有刻度线17和记录用的标签18，刻度线17的最小分度值为50 mL，在琼脂培养基倾注过程中，使得倾注培养皿的量准确，操作快速，进而保证琼脂平板间的营养均匀一致，瓶体1的容积范围设为500-800 mL。瓶体1下部呈长方体结构，长度设为9.0-10 cm，宽度设为6.5-7.5 cm，高度设为9-12 cm；瓶体1上部左右两侧向内对应倾斜呈斜坡状，斜坡的高度设为4.0-5.0 cm，且斜坡坡面与水平面间的夹角设为30-50°，坡面上分别设置加样瓶嘴5和倾倒瓶嘴6。瓶体1的厚度设计为便于操作者倾注平板时拿取、抓持瓶身中部以防滑脱，瓶体1占用空间小，可便于多个培养基瓶同时进行高压灭菌处理；瓶体上部的倾斜面及两侧倾斜式加样口和倾倒口的设计，符合人体工程学设计要求，便于培养基配制过程中添加或吸取动物血液及各种试剂，特别是在超净工作台的狭小空间中，在使用较长的刻度吸管或移液器进行无菌加样、取样的操作中尤为适合，取液或加样操作更为顺手、便捷，可避免移液枪枪杆触及瓶口内侧而造成的污染；其次，可有效控制和掌握倾倒入平皿中的培养基的量，不易产生回流现象，方便倾注，提高倾注的准确率和成功率，省时、高效。瓶体1底部内凹，底部外缘周设计有防滑螺纹24，内凹设计可避免瓶体1附着粘附于工作
台面，增加瓶体1移动的流畅性，螺纹24可增加放置的
稳定性，避免滑脱桌面，确保安全。所述瓶体1采用硼硅玻璃制成，塞芯4主体采用聚丙烯（PP）或聚碳酸酯（PC）制成，所述瓶盖（透气盖2和密封盖3）均采用
酚醛树脂制成，上述材质均可满足高压蒸汽灭菌及反复使用的试验要求，瓶体1和塞芯4采用透明度高的材料制成，有利于操作人员观察瓶体1内培养基的状态，便于观察、控制添加/吸取培养基及试剂的体积，方便倾注操作及控制倾注平板的培养基流量。
[0036] 具体地，本发明的培养基瓶体尺寸结构具体如下，瓶体下部长方体长×宽×高分别为10 cm×7.0 cm×9.0 cm，上端斜坡结构的高度为4.5 cm，斜坡坡面与水平面的夹角为40°，瓶体1容积为600 mL，加样瓶嘴5的长度为3.3 cm，开口直径为3.8 cm，加样瓶嘴5的中轴线与水平面间的夹角为50°，倾倒瓶嘴6长度为3.3 cm，开口直径为3.2 cm，倾倒瓶嘴6的中轴线与水平面间的夹角为50°，塞芯4的长度为7.3 cm，中空内径为2.8 cm，其中上端倾注口9长度为2.3 cm，中端凸出部10长度及外径分别为1.8 cm和4.0 cm，下端口11长度为3.2 cm，透气盖2直径为4.2 cm，高度为3.0 cm，密封盖3直径为3.6 cm，高度为2.4 cm。
[0037] 本发明在进行血琼脂培养基制备时，主要按照以下步骤进行：
[0038] 按照实验要求，将所需干粉培养基、试剂及规定量双蒸水通过加样瓶嘴5加入瓶体内，初步溶解混匀，将塞芯4插入倾倒瓶嘴6，分别旋紧密封盖3和透气盖2，进行高压蒸汽灭菌。灭菌过程中，高温蒸汽可通过透气孔19进入瓶体达到消毒灭菌效果；灭菌后期，高压蒸汽灭菌锅内逐渐泄压，通过透气孔19使得瓶体内气压与外界气压同时下降，瓶体内的培养基不会因瓶体内气压过高而溢出。防菌滤膜20还能使灭菌后的药液保持无菌状态，达到无菌储存的目的。灭菌结束，排除余汽，泄压至零，将瓶体取出，放入超净工作台内，待瓶体温度降至50 55℃范围内，围绕瓶体粘和好隔热套16（可根据瓶体内培养基的温度粘合不同层~数的隔热套）。拧开透气盖2，在培养基内无菌加入5% 10% (V/V)的无菌脱纤维羊血，拧紧透~
气盖2，缓慢旋转瓶体，手动混匀培养基与脱纤维羊血。待混匀一致后，旋开密封塞3，进行血琼脂培养基的倾注、分装，塞芯4内的双弧面滤网12，能有效滤除瓶体内液态鲜血培养基表面因快速摇匀所产生的大量泡沫，确保倾注的血琼脂培养基凝固后形成光滑、平整的表面，避免了静置或加温去除泡沫效率低，培养基易出现分布不均、凝固的现象，确保血琼脂培养质量的同时提高了工作效率。
[0039] 本发明可滤除瓶体内液态鲜血培养基表面因旋转混匀所产生的大量泡沫，同时可进一步保证培养基和鲜血达到最佳混匀状态，泡沫去除快速、高效，确保倾注的血琼脂培养基凝固后形成光滑、平整一致的表面。由于在规定的温度范围内进行倒板倾注，且倾注平皿的量快速、准确，由此避免了瓶体内的琼脂和脱纤维羊血产生分布不均的现象，琼脂平板间营养成分易达到均匀一致的统一标准，提高倾注的准确率和成功率，为后续试验结果的准确性提供了技术保障。其次，其瓶口大小、倾斜角度及瓶盖设计合理，方便了液体培养基的高温高压灭菌消毒工作，便于在超净工作台内进行无菌加样或吸液操作，方便倾注，避免回流现象的产生，省时、高效，能够更好地完成细菌固体、半固体培养基的配置和分装，从而减轻、简化实验室人员的工作量。
[0040] 以上实施例仅是示例性的，并不会局限本发明，应当指出对于本领域的技术人员来说，在本发明所提供的技术启示下，所做出的其它等同变型和改进，均应视为本发明的保护范围。
