高纯度鲎素提存方法
专利汇可以提供高纯度鲎素提存方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 涉及提取纯化海洋 生物 活性成分 技术领域，具体的涉及一种高纯度鲎素提存方法。本发明提供的高纯度鲎素提存方法，通过鲎血采集、细胞 破碎 、收集沉淀、收集上清液、 透析 、干燥、初次纯化、二次纯化等工艺对鲎素进行提纯，此高纯度鲎素提取方法工艺简单，无需复杂的设备即可实现高纯度的鲎素提取，所提取的鲎素纯度高达95％以上，充分利用了海洋的宝贵资源，所提取的鲎素可用于生物、医疗、健康、科研等方面，具有积极的经济和社会意义。，下面是高纯度鲎素提存方法专利的具体信息内容。
1.高纯度鲎素提存方法，其特征在于，包括如下步骤：
步骤1，采用心房取血方式对活体鲎进行鲎血采集，同时加入抗凝血剂；
步骤2，将步骤1取得的鲎血与20mmol/L Tris-HCl、pH8.0、含50mmol/L的NaCl缓冲液混合后进行超声波破碎，低温高速离心，收集沉淀；
步骤3，沉淀与含20mmol/L的HCl缓冲液混合均质，将均质液低温高速离心，收集上清液；
步骤4，用截留分子量大于等于1000ku透析袋透析上清液后冷冻干燥，即得鲎素粗品；
步骤5，将步骤4获得的鲎素粗品配置成母液，上样于平衡过的SephadexG-50层析柱，洗脱、收集以核酸蛋白仪于280nm处记录图形，收集最后一个峰形较好的峰，透析后冷冻干燥；
步骤6，二次纯化，将初次纯化后的产品配置成母液，上样于平衡过的CM-Sepharose CL-6B层析柱，洗脱、收集以核酸蛋白仪于280nm处记录图形，收集最后一个峰形较好的峰，透析后冷冻干燥。
2.根据权利要求1所述的高纯度鲎素提存方法，其特征在于：所述步骤1中取血量为活体鲎血量的约1/3。
3.根据权利要求1所述的高纯度鲎素提存方法，其特征在于：所述步骤2中鲎血与缓冲液的比例为1:5。
4.根据权利要求1或3所述的高纯度鲎素提存方法，其特征在于：所述步骤2重复两次操作后，将两次收集的沉淀合并。
5.根据权利要求1所述的高纯度鲎素提存方法，其特征在于：所述步骤3中沉淀与
20mmol/L的HCl缓冲液的比例为1:5。
6.根据权利要求1或5所述的高纯度鲎素提存方法，其特征在于：所述步骤3重复两次操作后，合并上清液。
7.根据权利要求1所述的高纯度鲎素提存方法，其特征在于：所述步骤2、步骤3中高速离心的速率为9000r/min、温度为4℃、离心时间20-25min。
8.根据权利要求1所述的高纯度鲎素提存方法，其特征在于：所述步骤5中，采用
20mmol/L的HCl溶液对Sephadex G-50层析柱洗脱。
9.根据权利要求1所述的高纯度鲎素提存方法，其特征在于：所述步骤6中，采用
20mmol/L的NaAc(pH6.0)的溶液对CM-Sepharose CL-6B层析柱洗脱。
10.根据权利要求8、9所述的高纯度鲎素提存方法，其特征在于：所述洗脱流速为1mL/min。
高纯度鲎素提存方法
技术领域
背景技术
发明内容
具体实施方式
9000r/min、温度为4℃、离心时间20-25min，重复两次操作后，将两次收集的沉淀合并；
5mg/mL收集成一管，收集以核酸蛋白仪于280nm处记录图形，收集最后一个峰形较好的峰，透析后冷冻干燥；
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