[0001] 本
发明整体上涉及医疗领域并且尤其是
重症监护领域。
[0002] 更具体地，本发明涉及用于确定处于医院重症监护的患者和/或已经遭受产生全身性
炎症反应或SIRS的诸如手术、烧伤、创伤(trauma)……的伤害(insult)的患者，尤其是患有败血症特别是严重败血症的患者，以及优选患有败血性休克的患者的医院内感染的易感性的方法。
[0003] 医院内感染是一个主要的公共健康问题。根据定义，住院患者在病理直接伤害其免疫能
力后或由于其总体状况而常常具有减弱的或受损的免疫防御。这些患者，尤其是那些营养不良或处于较小或较大年龄范围的患者(老人、婴儿)对一般感染并且特别是医院内感染的发作尤其敏感。
[0004] 重症监护病房内的医院内感染的发生率明显高于其他医院病房。医院内感染在该部
门中的高发生率可能是由于几个内在
风险因素的不利组合：患者暴露于侵入性操作(人工通气、
导尿及其它
导管插入术)、患者状况(以及相关的合并症)的严重性和
治疗(多次输注、
镇静治疗)。不过，尽管采取了所有卫生和监测措施(外在风险)并考虑了这些内在风险因素，医院内感染的发生率仍然保持稳定或仅略有下降。
[0005] 因此，为了能够提供个体化医疗和努力使致命结果的额外风险最小化，确定患者的医院内感染的易感性至关重要。
[0006] 就
发明人了解，当前已知与医院内感染易感性的增加相关的唯一免疫学标志物是HLA-DR标志物(人白细胞
抗原-DR)，其在发生医院内感染的患者的单核细胞中的表达(mHLA-DR)降低。但是，由流式细胞术确定的该标志物的表达要求专门的设备(流式细胞仪)，该设备不能从
生物平台获得(专门从事血液学或免疫学的实验室保留使用)并且没有使用规范。因此，不能在常规
基础上进行mHLA-DR的测定。
[0007] 因此，确实需要其它免疫学标志物，通过其可能实现患者医院内感染的易感性的简单、快速预测。鉴定患医院内感染的风险最高的人的能力可以设定更好适应且更好靶向的
预防性治疗。
[0008] 在这一背景下，本发明提供了预测患者发生医院内感染的提高的风险的新的生物标志物，尤其是医院重症监护的患者和/或已经遭受产生全身性炎症反应(SIRS)的伤害(手术、烧伤、创伤……)的患者，尤其是患有败血症特别是严重败血症的患者，并且优选患有败血性休克的患者。因此，确定该生物标志物的表达
水平能够简单、快速的确定患者对医院内感染的易感性并且因此采取必要的预防措施。
[0009] 因此，根据第一方面，本发明的主题是一种确定患者对医院内感染的易感性的方法，包括以下步骤：
[0010] -测定取自所述患者的生物样品或待测样品中sCD127的表达；
[0011] –对sCD127的表达与参考值进行比较之后得出医院内感染的易感性增加的结论。
[0012] 因此，本发明的确定医院内感染的易感性的方法是一种体外或离体(ex vivo)实施的方法。
[0013] sCD127是CD127(一种IL-7受体)的可溶或
血浆形式。CD127或IL-7受体的α链是75kDa的糖蛋白并且是造血生长因子受体超家族的成员。它表达结合有结合CD132(通用γc链)的膜上以形成IL-7受体。该受体在淋巴细胞分化、存活和增殖中起重要作用。CD127由
219个
氨基酸(aa)的胞外部分、25aa的跨膜部分和195aa的胞内部分形成。由编码CD127的mRNA的选择性剪接产生的可溶性/血浆形式(称为sCD127)的存在由Goodwin RG et al.,Cell,1990,23,941–951描述于1990年，但迄今为止其生物学功能仍然不为人知。
[0014] “医院内感染”是指任何感染，主要是细菌但也包括病毒和
真菌，其在患者管理(诊断、治疗、缓解、预防或康复治疗)过程中或之后发生于医疗机构，并且在开始患者管理之时既不存在也不潜伏。当所述感染状态在患者管理开始时并不具体知晓时，至少48小时的时间或者比潜伏期更长的时间通常被接受定义为医院内感染。
[0015] 本发明的“全身性炎症反应”或“SIRS”是指与以下条件中的至少两个相关的反应：
温度>38℃或<36℃、心率>90/分钟；呼吸
频率>20/分钟或paCO2<32mmHg；
白细胞计数>
3 3
12.000/mm或<4.000/mm(Bone et al.,Chest,1992,1644–1655)。
[0016] 本发明的“sCD127”是指IL-7受体的可溶形式或循环形式(也称为血浆或血清形式)，也被称为IL-7受体的α链或IL7R或IL7R-α或IL7RA或CDW127，并且尤其是如Goodwin et al,Cell,1990,23,941–951所述的以及由Crawley et al,Journal of Immunology,2010,184,4679–4687所分析的。
[0017] 特别地，根据本发明的sCD127的参考核酸序列优选下列：ENSG00000168685,HPRD–ID:00893核苷酸序列:NM_002185.2,Vega基因:OTTHUMG00000090791。
[0018] 根据本发明的sCD127的参考蛋白序列还优选下列：NP_002176XP_942460；版本:NP_002176.2GI:28610151。
[0019] 用本发明所述方法测试的样品是取自期望确定医院内感染易感性的患者的生物样品。特别地，所述生物样品是选自那些可能含有sCD127标志物的样品。
[0020] 本发明对重症监护住院治疗的患者和/或已经遭受产生全身性炎症反应或SIRS诸如手术、烧伤、创伤……的伤害的患者提供特别优选的应用。因此，用于本发明所述方法的生物样品优选取自重症监护住院治疗的患者和/或已经遭受产生全身性炎症反应(SIRS)的伤害(手术、烧伤、创伤……)的患者，尤其是取自患有败血症的患者，尤其是严重败血症，并且尤其是取自患有败血性休克的患者。在特别优选的方式中，用于本发明所述方法的生物样品取自患有败血性休克的患者。
[0021] 根据第一优选实施方案，本发明的所述方法可以确定患者的医院内感染的易感性，即当证明与第一参考值相比测试样品中具有sCD127过表达时，得出医院内感染的风险增加的结论。
[0022] “过表达”是指统计学上显著增加的表达水平。
[0023] 在该实施方案中，第一参考值可以对应于在取自下述的患者的生物样品中测定的sCD127的表达水平：所述患者是已知没有发生医院内感染的处于重症监护住院治疗和/或已经遭受产生全身性炎症反应(SIRS)的诸如手术、烧伤、创伤……的伤害的患者，尤其是已知没有发生医院内感染的患有败血症的患者，并且优选已知没有发生医院内感染的患有败血性休克的患者。在这种情况下，形成所述第一参考值的sCD127表达的这种测定优选平行进行，即与来自要确定医院内感染易感性的患者的样品的sCD127表达的测定同时进行，尽管所参考样品的获取早于测试样品的获取。
[0024] 第一参考样品还可以对应于取自以下患者的样品集中测定的sCD127表达水平的平均值：所述患者是已知没有发生医院内感染的处于重症监护住院治疗和/或已经遭受产生全身性炎症反应(SIRS)的诸如手术、烧伤、创伤……的伤害的患者，尤其是已知没有发生医院内感染的患有败血症的患者，以及优选已知没有发生医院内感染的患有败血性休克的患者。在这种情况下，形成第一参考值的这种sCD127表达的测定优选在来自要确定医院内感染易感性的患者的样品的sCD127表达的测定之前进行，尽管要收集的参考样品的获取早于测试样品的获取。
[0025] 在该第一优选实施方案中，并且尤其是为了确定患有败血性休克的患者的医院内感染的易感性，待测样品中以及任选的用于获取第一参考值的生物样品(即，当第一参考值从生物样品获取时)中sCD127表达的测定在败血性休克后10天之内或第10天(D10)进行，优选在败血性休克后7天之内或第7天(D7)进行，更优选在败血性休克后4天之内或第4天(D4)进行，以及尤其是在败血性休克后3天之内或第3天(D3)进行。
[0026] 根据第二优选实施方案，本发明的方法可以确定患者的医院内感染的易感性，即当与第二参考值比较时测试样品中测定的sCD127的表达没有显著降低时，得出发生医院内感染的风险增加或医院内感染的易感性增加的结论。在特别优选的方式中，当与第二参考值比较时测试样品中测定的sCD127的表达没有降低大于25％，尤其没有降低大于20％时，得出发生医院内感染的风险增加的结论。
[0027] 该第二参考值可以对应于在来自先前采集的所述相同患者的生物样品中，即在测试样品之前采集的生物样品中，所测定的sCD127的表达水平。“在先”或“之前”是指更早时或在采集(或获取)测试样品之前。
[0028] 在该第二优选实施方案中，并且尤其是为了确定患有败血性休克的患者的医院内感染的易感性，测试样品中sCD127表达的测定在败血性休克后第10天或大约第10天(D10)进行，优选在败血性休克后第7天或大约第7天(D7)进行，更优选在败血性休克后第4天或大约第4天(D4)进行。
[0029] 在先取样在败血性休克后48h内或第48h并且在所述待测样品获取之前至少24h进行，并且优选在先取样在败血性休克后48h内或第48h进行并且所述测试样品在在先取样之后48h内或在在先取样之后第48h获取。
[0030] 因此，在所有的情况下，在真正测定测试样品中sCD127表达之前，本发明的所述方法可以包括在先获得参考值，而不论其是第一参考值还是第二参考值，在所测试的样品中所检测到的表达水平会相对该参考值进行比较从而可以得出获取测试样品的患者是否具有发生医院内感染的增加的风险的结论。
[0031] 因此，无论是否在先或同时获取第一参考值或第二参考值，相对于这些参考值，可以比较测试样品中测定的sCD127表达值。
[0032] 在其中实施本发明所述方法的样品，本发明也称为测试样品，可以是人或动物来源的，并优选人来源的。
[0033] 因此，测试样品可以具有不同类型。特别地，该样品是选自例如以下的生物液体：血液、
全血(如通过静脉途径收集液体，即含有白细胞和红细胞、血小板和血浆的液体)、血清、血浆和
支气管肺泡灌洗液。
[0034] 优选地，取自所述患者的测试样品是血浆或血清样品。
[0035] 由其可以确定参考值(无论是第一参考值还是第二参考值)的样品也被称为“参考样品”，其可以具有不同类型并且尤其是如前针对测试样品所述的生物类型(生物液体)。有利的是，这些生物样品是与测试样品相同的类型或至少是形成用于检测和/或定量sCD127表达的参考的相容类型。
[0036] 特别地，为了获得第一参考值，这些样品优选获取自具有相同特征或多数共同特征的人，尤其是相同性别和/或相似或相同年龄和/或种族起源的作为期望确定医院内感染易感性的受试者或患者。在这种情况下，参考样品还可以由任何样品形成，而无论其是否是生物学样品，所述样品之前被校准含有平均sCD127值，其对应于由取自以下的患者的样品的集合中所测定的水平，所述患者是已知没有发生医院内感染的处于重症监护住院治疗和/或已经遭受产生全身性炎症反应(SIRS)的诸如手术、烧伤、创伤……的伤害的患者，尤其是已知没有发生医院内感染的患有败血症的患者，并且优选已知没有发生医院内感染的患有败血性休克的患者。在这种情况下以及根据一个特别优选的变体，所述参考样品是取自已知没有发生医院内感染的患有败血性休克的一个或多个患者。
[0037] 特别地，为了获得第二参考值，所示参考样品是取自所述相同患者的生物样品，即，来自期望确定医院内感染易感性并从其获取测试样品的患者，该参考样品是在先样品，即，在测试样品之前的较早时间获取的生物样品。
[0038] 在本发明中，术语“测定表达”是指体外或离体测定。该术语还旨在表示sCD127在蛋白水平的检测和定量。为此，可以采用本领域技术人员公知的任何检测和/或定量方法用于实施本发明，而不论是否确定sCD127蛋白的存在和/或测定其表达。作为测定sCD127蛋白的表达的方法的例子，尤其可提及的方法可见Crawley et al,Journal of Immunology,2010,184,4679–4687。
[0039] 特别地，sCD127表达水平的测定采用允许直接或间接确定其存在和/或定量其表达水平的sCD127特异性工具或
试剂进行。
[0040] 在这些能够检测和/或定量sCD127的工具或试剂中，具体可以提及的为特异性多克隆或单克隆
抗体，优选单克隆抗体，或其
片段或衍生物，例如，“单链”抗体Sv。
[0041] 在这些工具或试剂中，尤其优选的是那些特异于IL-7受体的可溶性形式的，即不识别该受体的不溶性细胞/膜形式的CD127。采用同时识别IL-7受体的可溶性形式sCD127和细胞形式CD127的工具或试剂也是可能的，前提是可能通过其他方法区分这两种形式，例如所分析样品的类型(例如血浆或血清对比于含有细胞的生物样品或全血)。
[0042] 当在蛋白水平进行sCD127的检测和/或定量时，可以采用如免疫印迹、ELISA、RIA、IRMA、FIA、CLIA、ECL、流式细胞术或免疫细胞学的标准技术。
[0043] 在特别有利的方式中，在蛋白水平测定sCD127的表达，且优选采用ELISA技术。
[0044] 根据本发明以及尤其是该特别的实施方案中，优选采用单克隆或多克隆抗sCD127的抗体，尤其是单克隆抗sCD127的抗体，测定sCD127的表达水平。例如，具体可以提及的是由Beckman 供货的人R34.34单克隆抗sCD127的抗体或由R&D 供货的多克隆抗sCD127的抗体。
[0045] 所有如前所述的涉及sCD127表达的测定的
指征和偏好无差别地应用，而不论是用于测试样品中或参考样品中所述表达的测定。
[0046] 根据第二方面，本发明的进一步的主题是sCD127表达体外或离体的测定用于确定患者的医院内感染的易感性的用途。
[0047] 优选地，该用途对确定下述患者的医院内感染的易感性尤其有利：所述患者是重症监护住院治疗和/或已经遭受产生全身性炎症反应或SIRS的诸如手术、烧伤、创伤……的伤害的患者，尤其是患有败血症的患者，尤其是严重败血症，以及优选患有败血性休克的患者。优选地，本发明的用途可以确定患有败血性休克的患者的医院内感染的易感性。
[0048] 此外，对于根据本发明的所述用途，优选在蛋白水平测定sCD127的表达，并且尤其是采用ELISA技术。
[0049] 特别地，可以采用单克隆或多克隆抗sCD127的抗体以及优选单克隆抗sCD127的抗体测定sCD127的表达。如前所述的抗体也可以用于本发明的该第二方面。
[0050] 更广泛地，上述涉及所述方法及其组合的所有优选的实施方案也形成本发明的所述用途的优选的实施方案。
[0051] 根据第三方面，本发明的进一步的主题是用于生物样品中sCD127表达的体外或离体测定的
试剂盒，包括：
[0052] –可以测定所述生物样品中sCD127表达的特异性工具或试剂；以及[0053] -阳性标准样品，其为用于校准含有sCD127的量对应于来自已知发生医院内感染的患者的样品集合中所测定的平均量的样品，和/或阴性标准样品，其为用于校准含有sCD127的量对应于来自已知没有发生医院内感染的患者的样品集合中所测定的平均量的样品。
[0054] 因此，本发明的试剂盒包括可以测定所述生物样品中和至少一种标准样品中sCD127表达的特异工具或试剂。
[0055] 特别地，本发明的试剂盒可以确定患者的医院内感染的易感性，并且尤其是患有败血性休克的患者。
[0056] 优选地，所述能够测定生物样品中sCD127表达且包含在本发明的试剂盒中的所述特异工具或试剂能够检测和/或定量sCD127的表达，而不论是在蛋白水平还是在sCD127活性水平，优选在蛋白水平。
[0057] 根据一个特别优选的实施方案，本发明的试剂盒含有单克隆或多克隆抗sCD127的抗体，并且尤其是单克隆抗体。
[0058] 另一个阳性标准样品还可以是取自已知发生医院内感染的患者的样品。相似地，另一个阴性标准样品还可以是取自已知没有发生医院内感染的患者的样品。无论对于阳性还是阴性标准，该类标准样品优选取自重症监护住院治疗的和/或已经遭受产生全身性炎症反应(SIRS)的诸如手术、烧伤、创伤……的伤害的患者的一个或多个患者，尤其是患有败血症的一个或多个患者并且优选来自一个患有败血性休克的患者。例如，所述试剂盒可以含有取自下述一个或多个患者的阴性标准样品：所述患者是已知没有发生医院内感染的重症监护住院治疗和/或已经遭受产生全身性炎症反应(SIRS)的诸如手术、烧伤、创伤……的伤害的患者，尤其是已知没有发生医院内感染的患有败血性休克的患者。
[0059] 优选地，所述试剂盒包括阳性标准样品和阴性标准样品两者，并且尤其是每个均选自如上所述校准的样品中。
[0060] 本发明还涵盖本发明的试剂盒实施本发明的方法的用途，并且尤其是确定患者的医院内感染的易感性，尤其是重症监护住院治疗和/或已经遭受产生全身性炎症反应(SIRS)的诸如手术、烧伤、创伤……的伤害的患者，尤其是患有败血症的患者，尤其是严重败血症，并且优选患有败血性休克的患者。优选地，本发明的所述试剂盒的用途可以确定患有败血性休克的患者的医院内感染的易感性。
[0061] 上述涉及方法及其组合的所有优选的实施方案也形成本发明的试剂盒及其用途的优选的实施方案。
[0062] 其他多个特征将根据下文并参考所附
附图而显而易见，并且附图作为非限制性的例子是为了示例本发明主题的实施方案，其中：
[0063] -图1显示在患有败血性休克的35个患者中在第1-2天(1-2)和第3-4天(3-4)以及在30个健康志愿者“HV”(A)中的IL-7血浆浓度，以及这些结果在“NS”和“S”患者组(图1B)和“NI”和“无NI”患者组(图1C)之间的比较。
[0064] **p<0.005vs.“HV”–Mann Whitney U–检验；
[0065] -图2显示在患有败血性休克的35个患者中在第1-2天和第3-5天以及在30个健康志愿者“HV”中的T CD4+细胞(图2A)和T CD8+细胞(图2B)中的CD127表达。
[0066] p<0.05vs“. HV”–Mann Whitney U–检验；§p<0.05–在同一患者组内时间的趋势–Wilcoxon paired t–检验。
[0067] -图3显示在患有败血性休克的35个患者中在第1-2天和第3-4天，以及在30个健康志愿者(图3A)中的sCD127血浆浓度以及这些结果在“NS”或“S”患者组(图3B)和“NI”或“无NI”患者组(图3C)之间的比较。
[0068] #p<0.05##p<0.005vs“.无NI”–Mann Whitney U–检验；§p<0.05§§p<0.005–在同一患者组内时间的趋势–Wilcoxon paired t–检验。
[0069] -图4显示在患有败血性休克的35个患者中在第1-2天和第3-4天，以及在30个健康志愿者中作为每个患者组的“NI”或“无NI”的HLA-DR标志物的表达。
[0070] 方法
[0071] IL-7血浆浓度的测定
[0072] 用由Bio–Rad(Bio–Plex Pro Cytokine,细胞因子和生长因子分析：BioPlexPro Reagent试剂盒,Bio–Rad #171–304070和SinglePlex IL–7)供货的采用LUMINEXTM技术的试剂盒按照供应商的指导测定IL-7血浆浓度。
[0073] IL-7受体(CD127)的细胞表达的测定
[0074] 简言之，50μl全血在5μl结合有藻红蛋白-德克萨斯红(ECD)的抗CD4抗体(Beckman Coulter#6604727)或5μl结合有ECD的抗CD8抗体(Beckman Coulter#737659)和10μl结合有藻红蛋白(PE)缀合的抗CD127抗体(Beckman Coulter#IM1980U)存在下在黑暗中室温孵育15分钟。然后用低渗裂解法裂解红细胞并且通过自动裂解将细胞固定于TQ-Prep自动系统+ +
(Beckman Coulter)上。用流式细胞术测定T CD4或CD8淋巴细胞的表面上CD127的膜表达。
[0075] 通过ELISA分析IL-7受体的可溶性形式(sCD127)
[0076] 包被
[0077] 制备500ml水中含有0.8g Na2CO3、1.4g NaHCO3、0.1g NaN3的包被缓冲液。
[0078] 将稀释于包被缓冲液的100μl捕获抗体(Ab)(小鼠单克隆抗体抗CD127，人，R34.34，Beckman )沉积(deposited)于测定板的每个孔中([Ab]＝8μg/mL)。然后盖上板4℃孵育过夜。
[0079] 然后，吸出孔的内容物并且孔用至少300μL的0.05％PBS–Tween20洗涤缓冲液洗涤3次。每次洗涤后小心的去除所有液体。最后一次洗涤之后，板翻过来扣到吸水纸上以去除所有的痕量的缓冲液。
[0080] 封闭
[0081] 非特异性固定采用每孔150μL封闭缓冲液封闭(10％胎
牛血清(FBS)/0.05％PBS–Tween20)，并且使板37℃孵育1h。
[0082] 然后，再次吸出孔的内容物并且孔用至少300μL的0.05％PBS–Tween20洗涤缓冲液洗涤3次。每次洗涤后小心的去除所有液体。最后一次洗涤之后，板翻过来扣到吸水纸上以去除所有的痕量的缓冲液。
[0083] 样品和标准品
[0084] 用稀释于含有5％FCS稀释缓冲液的PBS中的重组人IL–7Rα/CD127Fc嵌合体(R&D Systems–目录号：306–IR)获得标准范围，如以下表1所示并根据C.Janot–Sardet et al.Journal of Immunological Methods,2010,28,115–123。
[0085] 表1
[0086]
[0087] 100μL样品或标准品(浓度为60ng/ml和10ng/ml的CD127Fc嵌合体的临用配制型溶液的试样)加至每孔并且使板37℃孵育1h。
[0088] 然后，吸出孔的内容物并且孔用至少300μL的0.05％PBS–Tween20洗涤缓冲液洗涤3次。每次洗涤后小心的去除所有液体。最后一次洗涤之后，板翻过来扣到吸水纸上以去除所有的痕量的缓冲液。
[0089] 检测抗体
[0090] 100μL稀释于PBS/5％FBS的检测抗体(用1mL 1％TBS-BSA重配的生物素化多克隆抗CD127山羊抗体，R&D )加至每孔([Ab]＝200ng/mL)，并且板37℃孵育1h。
[0091] 然后，吸出孔的内容物并且孔用至少300μL的0.05％PBS–Tween20洗涤缓冲液洗涤3次。每次洗涤后小心的去除所有液体。最后一次洗涤之后，板翻过来扣到吸水纸上以去除所有的痕量的缓冲液。
[0092] 检测
[0093] 100μL链霉亲和素-HRP加至每孔([链霉亲和素–HRP]＝8μL/mL)。盖上板室温孵育30min。
[0094] 然后，再次吸出孔的内容物并且孔用至少300μL的0.05％PBS–Tween20洗涤缓冲液洗涤3次。每次洗涤后小心的去除所有液体。最后一次洗涤之后，板翻过来扣到吸水纸上以去除所有的痕量的缓冲液。在该洗涤步骤，在吸出之前孔用洗涤缓冲液浸渍1-2min。
[0095] 两瓶TMB显色底物溶液(3,3′,5,5′–四甲基联苯胺，bioMérieux #XX7LF1UC)体积/体积混合。每孔沉积100μL该底物溶液。盖上板室温孵育30min。
[0096] 最后，于450nm通过吸光度测定进行读板。
[0097] 测定HLA-DR的单核细胞表达
[0098] 通过流式细胞术技术采用直接EDTA
染色的全血进行测定。
[0099] 以下两种抗体用50μL全血孵育(室温并在黑暗中30分钟)：
[0100] -5μL结合有
荧光素的抗CD14抗体(Beckman Coulter Immunotech–Ref.:IM0645)，可以鉴定白细胞中的单核细胞；
[0101] -10μL结合有藻红蛋白的抗HLA-DR抗体(Becton Dickinson–Ref.:347401)，可以量化细胞表面上的HLA-DR表达。
[0102] 然后去除红细胞：通过加入1ml裂解溶液(由Becton Dickinson供货，参考号349202)，1:10稀释，室温并在黑暗中15分钟。
[0103] 然后在流式细胞仪(FC500–Beckman Coulter)上分析细胞。
[0104] 结果用阳性细胞％表示，阳性
阈值由同型对照(小鼠IgG2a PE Becton Dickinson–Ref.:349053)定义。
[0105] 结果
[0106] 血浆样品取自败血性休克后第1-2天(D1-2)和第3-4天(D3-4)的患有败血性休克的35个患者并且然后储存(回顾性队列)。测定不同参数或标志物如IL-7和sCD127血浆浓度，以及T CD4+细胞上CD127表达，以及单核细胞上HLA-DR表达。由于败血性休克收入重症监护后第28天，35个患者中13个患者没有存活(“NS”)即37％而22个患者存活(“S”)。6个患者发生医院内感染(“NI”)即17％，而29个患者仍然没有发生任何医院内感染(“无NI”)。
[0107] 在30个健康志愿者(HV)中进行相同的测定。
[0108] 在这些不同的志愿者群或患者群中采用Mann Whitney U–检验比较所获得的结果，并集中于附图1-4。
[0109] 这些结果显示，与没有发生任何医院内感染的患者相比，在发生二级医院内感染的患者中，IL-7血浆浓度显著降低(D1-2)，但D3-4没有显著降低(图1C)，而在存活患者“S”或非存活患者“NS”之间保持不变。
[0110] 此外，IL-7受体(CD127)的细胞表达在败血性休克后维持(图2A和2B)，并且在存活患者“S”和非存活患者“NS”或“NI”或“无NI”患者之间没有任何差异(结果未显示)。
[0111] 于败血性休克开始时所观察到的I-7受体的可溶性形式或sCD127的血浆浓度的轻微提高不是统计学上显著的并随时间推移返回到“正常”值(图3A)。
[0112] 另一方面，虽然在存活患者“S”和非存活患者“NS”之间sCD127的血浆浓度保持不变(图3B)，与没有发生医院内感染的“无NI”患者相比，在发生医院内感染的“NI”患者中观察到sCD127血浆浓度的显著提高(图3C)。
[0113] 还观察到，与没有发生医院内感染的“无NI”患者相反，在发生医院内感染的“NI”患者中sCD127的血浆浓度不随时间推移而改变(图3C)。
[0114] 通过比较，与
现有技术中所明确确定的相反，在同一患者队列上对现有技术标志物HLA-DR表达的研究不能证明该标志物在发生医院内感染的“NI”患者和没有发生医院内感染的“无NI”患者之间的降低。
[0115] 这个差异可能与本发明所研究的队列的大小有关(其小于现有技术研究中所分析的队列)，其可证明与HLA-DR比较sCD127标志物的针对性。与本发明所研究的队列的大小无关，所述结果显示根据本发明的sCD127的表达的研究提示患者的医院内感染的易感性。
[0116] 由此可见，所有这些结果表明sCD127表达的测定是确定患者医院内感染易感性的有用的免疫学标志物，并且尤其是重症监护住院治疗和/或已经遭受产生全身性炎症反应(SIRS)的伤害(手术、烧伤、创伤……)的患者，并且尤其是患有败血症的患者，尤其是严重败血症，以及优选患有败血性休克的患者。
[0117] 本发明不限制于所述和所示例的
实施例，原因是可以在不背离本发明的范围的情况下做出各种修饰。
