作为多巴胺和5－羟色胺神经传递调节剂的新的二取代的苯基哌啶类
阅读：932发布：2020-10-16
专利汇可以提供作为多巴胺和5－羟色胺神经传递调节剂的新的二取代的苯基哌啶类专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 涉及对中枢神经系统障碍具有 治疗 作用的化合物，并且特别是新的式(1)4－(邻位，间位－二取代的苯基)－1－烷基哌啶类，其中R1、R2和R3如所定义的。，下面是作为多巴胺和5－羟色胺神经传递调节剂的新的二取代的苯基哌啶类专利的具体信息内容。
1.通式1的化合物及其药物上可接受的盐：
其中：
R1选自-CN、-OCF3、-OCHF2、-SCF3、-SCHF2、-CF3、F、Cl、-CH3 和-OCH3组成的组；
R2选自F、Cl、Br和CH3组成的组；
R3选自C1-C3烷基和烯丙基组成的组，
条件是当R1为CN或CF3时，R3仅可以为C1-C2烷基。
2.权利要求1的化合物，其中R1选自CN、CF3、Cl和F组成的 组。
3.权利要求1-2中任一项的化合物，其中R1选自F、Cl和CF3 组成的组。
4.权利要求1-3中任一项的化合物，其中R2选自F和Cl组成 的组。
5.权利要求1-4中任一项的化合物，其中R2为F且R3选自正- 丙基和乙基组成的组。
6.权利要求1的化合物，选自下列化合物组成的组：
4-(3-氟-2-甲基苯基)-1-丙基哌啶，
1-乙基-4-(3-氟-2-甲基苯基)哌啶，
1-烯丙基-4-(3-氟-2-甲基苯基)哌啶，
4-(2，3-二氟苯基)-1-丙基哌啶，
4-(2，3-二氟苯基)-1-乙基哌啶，
1-烯丙基-4-(2，3-二氟苯基)哌啶，
4-(2-氯-3-氟苯基)-1-丙基哌啶，
4-(2-氯-3-氟苯基)-1-乙基哌啶，
1-烯丙基-4-(2-氯-3-氟苯基)哌啶，
1-乙基-4-[2-甲基-3-(三氟甲基)苯基]哌啶，
1-乙基-4-[2-氟-3-(三氟甲基)苯基]哌啶，
4-[2-氯-3-(三氟甲基)苯基]-1-乙基哌啶，
4-(3-氯-2-甲基苯基)-1-丙基哌啶，
4-(3-氯-2-甲基苯基)-1-乙基哌啶，
1-烯丙基-4-(3-氯-2-甲基苯基)哌啶，
4-(3-氯-2-氟苯基)-1-丙基哌啶，
4-(3-氯-2-氟苯基)-1-乙基哌啶，
1-烯丙基-4-(3-氯-2-氟苯基)哌啶，
4-(2，3-二氯苯基)-1-丙基哌啶，
4-(2，3-二氯苯基)-1-乙基哌啶，
1-烯丙基-4-(2，3-二氯苯基)哌啶，
4-[3-(二氟甲氧基)-2-甲基苯基]-1-丙基哌啶，
4-[3-(二氟甲氧基)-2-甲基苯基]-1-乙基哌啶，
1-烯丙基-4-[3-(二氟甲氧基)-2-甲基苯基]哌啶，
4-[3-(二氟甲氧基)-2-氟苯基]-1-丙基哌啶，
4-[3-(二氟甲氧基)-2-氟苯基]-1-乙基哌啶，
1-烯丙基-4-[3-(二氟甲氧基)-2-氟苯基]哌啶，
4-[2-氯-3-(二氟甲氧基)苯基]-1-丙基哌啶，
4-[2-氯-3-(二氟甲氧基)苯基]-1-乙基哌啶，
1-烯丙基-4-[2-氯-3-(二氟甲氧基)苯基]哌啶，
4-[2-甲基-3-(三氟甲氧基)苯基]-1-丙基哌啶，
1-乙基-4-[2-甲基-3-(三氟甲氧基)苯基]哌啶，
1-烯丙基-4-[2-甲基-3-(三氟甲氧基)苯基]哌啶，
4-[2-氟-3-(三氟甲氧基)苯基]-1-丙基哌啶，
1-乙基-4-[2-氟-3-(三氟甲氧基)苯基]哌啶，
1-烯丙基-4-[2-氟-3-(三氟甲氧基)苯基]哌啶，
4-[2-氯-3-(三氟甲氧基)苯基]-1-丙基哌啶，
4-[2-氯-3-(三氟甲氧基)苯基]-1-乙基哌啶，
1-烯丙基-4-[2-氯-3-(三氟甲氧基)苯基]哌啶，
3-(1-乙基哌啶-4-基)-2-甲基苄腈，
3-(1-乙基哌啶-4-基)-2-氟苄腈，
2-氯-3-(1-乙基哌啶-4-基)苄腈，
4-[2-氟-3-(三氟甲基)苯基]-1-甲基哌啶，
2-氯-3-(1-甲基哌啶-4-基)苄腈，
4-[2-氯-3-(三氟甲基)苯基]-1-甲基哌啶，
2-氟-3-(1-甲基哌啶-4-基)苄腈。
7.权利要求1的化合物，选自下列化合物组成的组：
4-(2，3-二氟苯基)-1-丙基哌啶，
4-(2，3-二氟苯基)-1-乙基哌啶，
1-烯丙基-4-(2，3-二氟苯基)哌啶，
4-(2-氯-3-氟苯基)-1-丙基哌啶，
4-(2-氯-3-氟苯基)-1-乙基哌啶，
1-烯丙基-4-(2-氯-3-氟苯基)哌啶，
4-[2-氯-3-(三氟甲基)苯基]-1-乙基哌啶，
4-(3-氯-2-氟苯基)-1-丙基哌啶，
4-(3-氯-2-氟苯基)-1-乙基哌啶，
1-烯丙基-4-(3-氯-2-氟苯基)哌啶，
4-(2，3-二氯苯基)-1-丙基哌啶，
4-(2，3-二氯苯基)-1-乙基哌啶，
1-烯丙基-4-(2，3-二氯苯基)哌啶，
4-[3-(二氟甲氧基)-2-氟苯基]-1-丙基哌啶，
4-[3-(二氟甲氧基)-2-氟苯基]-1-乙基哌啶，
1-烯丙基-4-[3-(二氟甲氧基)-2-氟苯基]哌啶，
4-[2-氯-3-(二氟甲氧基)苯基]-1-丙基哌啶，
4-[2-氯-3-(二氟甲氧基)苯基]-1-乙基哌啶，
1-烯丙基-4-[2-氯-3-(二氟甲氧基)苯基]哌啶，
4-[2-氟-3-(三氟甲氧基)苯基]-1-丙基哌啶，
1-乙基-4-[2-氟-3-(三氟甲氧基)苯基]哌啶，
1-烯丙基-4-[2-氟-3-(三氟甲氧基)苯基]哌啶，
4-[2-氯-3-(三氟甲氧基)苯基]-1-丙基哌啶，
4-[2-氯-3-(三氟甲氧基)苯基]-1-乙基哌啶，
1-烯丙基-4-[2-氯-3-(三氟甲氧基)苯基]哌啶，
3-(1-乙基哌啶-4-基)-2-氟苄腈，
2-氯-3-(1-乙基哌啶-4-基)苄腈，
4-[2-氟-3-(三氟甲基)苯基]-1-甲基哌啶，
2-氯-3-(1-甲基哌啶-4-基)苄腈，
4-[2-氯-3-(三氟甲基)苯基]-1-甲基哌啶，
2-氟-3-(1-甲基哌啶-4-基)苄腈。
8.如下通式的中间体化合物：
其中R1、R2和R3如权利要求1中所定义。
9.权利要求8的中间体化合物，其中R1选自-CN、-OCF3、-OCHF2、 -SCF3、-SCHF2、-CF3、F、Cl、-CH3和-OCH3组成的组。
10.权利要求8-9中任一项的中间体化合物，其中R1选自CF3、F 和Cl组成的组。
11.权利要求8-10中任一项的中间体化合物，其中R2选自F和 Cl组成的组。
12.权利要求8-11中任一项的中间体化合物，其中R3选自正-丙 基和乙基组成的组。
13.权利要求8-12中任一项的中间体化合物，其中R2为F且R3 选自正-丙基和乙基组成的组。
14.如下通式的中间体：
其中R1和R2如权利要求1中所定义。
15.权利要求14的中间体化合物，其中R1选自-CN、-OCF3、-OCHF2、 -SCF3、-SCHF2、-CF3、F、Cl、-CH3和-OCH3组成的组。
16.权利要求14-15中任一项的中间体化合物，其中R1选自CF3、 F和Cl组成的组。
17.权利要求14-16中任一项的中间体化合物，其中R2选自F和 Cl组成的组。
18.通式1化合物或其药物上可接受的盐在制备用于治疗中枢神 经系统障碍的药物活性制剂中的应用：
其中：
R1选自-CN、-OCF3、-OCHF2、-SCF3、-SCHF2、-CF3、F、Cl、-CH3 和-OCH3组成的组；
R2选自F、Cl、Br和CH3组成的组；
R3选自C1-C3烷基和烯丙基组成的组，
条件是当R1为CN或CF3时，R3仅可以为C1-C2烷基。
19.权利要求18的应用，其中R1选自CN、CF3、Cl和F组成的组。
20.权利要求18-19中任一项的应用，其中R1选自CF3、F和Cl 组成的组。
21.权利要求18-20中任一项的应用，其中R2选自F和Cl组成 的组。
22.权利要求18-21中任一项的应用，其中R3选自正-丙基和乙 基组成的组。
23.权利要求18-22中任一项的应用，其中R2为F且R3选自正- 丙基和乙基组成的组。
24.权利要求18-23中任一项的应用，其中R1为F，R2为F且R3 选自正-丙基和乙基组成的组。
25.药物组合物，其包含权利要求1-7中任一项的化合物和一种 或多种药物上可接受的载体或稀释剂。
26.权利要求25的药物组合物，用于治疗中枢神经系统障碍。
27.权利要求25的药物组合物，用于治疗选自帕金森氏病、帕金 森综合征、运动障碍(包括L-DOPA诱导的运动障碍)、张力障碍、抽搐、 震颤和亨廷顿舞蹈病组成的组的运动失调。
28.权利要求25的药物组合物，用于治疗选自医源性和非-医源 性精神病和幻觉症组成的组的病症。
29.权利要求25的药物组合物，用于治疗选自精神分裂症和精神 分裂症样障碍和双相性精神障碍组成的组的病症。
30.权利要求25的药物组合物，用于治疗选自情感障碍和焦虑 症、抑郁症和强迫观念与行为障碍组成的组的病症。
31.权利要求25的药物组合物，用于治疗选自孤独性谱群疾病、 ADHD、脑性麻痹、吉勒德拉图雷综合征组成的组的神经发育障碍和选 自痴呆和与年龄相关的认知缺损组成的组的神经变性障碍。
32.权利要求25的药物组合物，用于治疗选自睡眠障碍、性功能 障碍、进食障碍、肥胖和头痛以及其它特征在于肌紧张增加的病症中 的疼痛组成的组的病症。
33.权利要求25的药物组合物，用于改善因创伤、炎症、感染、 肿瘤、血管、含氧量低或代谢原因诱导的脑损伤或对外源性化学物质 的毒性反应诱导的脑损伤后的运动功能、认知功能和相关情绪紊乱， 其中外源性化学物质选自滥用物质、药物化合物、环境毒素组成的组。
34.权利要求25的药物组合物，用于治疗与物质滥用相关的障 碍。
35.权利要求25的药物组合物，用于治疗阿尔茨海默氏病或相关 痴呆症。
36.治疗中枢神经系统障碍的方法，该方法包括给予患有这类障 碍的哺乳动物、包括人治疗有效量的权利要求1-7中任一项的化合物。
37.权利要求36的方法，用于治疗权利要求26-35中的一或多项 定义的障碍。
发明领域
本发明涉及多巴胺和5-羟色胺神经传递的新调节剂，且更具体地 说，本发明涉及新的4-(邻位，间位二取代的苯基)-1-烷基哌啶类及其 应用。
发明背景
多巴胺为脑中的神经递质。由于在上世纪50年代形成的这一发 现，所以深入研究了多巴胺在脑中的功能。迄今为止，充分确立多巴 胺在脑功能的几个方面中是必需的，包括运动、认知、感觉、情感和 自主功能(例如食欲调节、体温、睡眠)。因此，调节多巴胺能功能可 以有益于治疗影响脑功能的广泛障碍。实际上，在中枢多巴胺受体上 直接或间接起作用的药物常用于治疗神经和精神障碍，例如帕金森氏 病和精神分裂症。然而，目前可利用的多巴胺能药物可能存在严重的 副作用。例如，已知多巴胺拮抗剂诱导运动(锥体外系副作用；EPS) 和精神副作用(例如快感缺失、烦躁不安和认知损伤)，并且已知多巴 胺激动剂诱导运动障碍和精神病(Goodman和Gilman’s The Pharmacological Basis of Therapeutics，第9版/McGraw-Hill，USA. 第18章，407-416页，第22章，509-512页，p515-516)。许多研 究人员为改善多巴胺能药物的功效和减少副作用所采取的手段在于开 发对特异性多巴胺受体亚型具有选择性或具有区域选择性的新型多巴 胺受体配体。通过脑的多巴胺系统起作用的另一类化合物为多巴胺能 稳定剂，已知它们用于治疗神经和精神障碍(A.Ekesbo，PhD Thesis， Uppsala University，Sweden：“多巴胺能变性的功能结果；使用多 巴胺系统的新型稳定剂的临床和实验研究”：Ekesbo等，(-)-OSU6162 抑制帕金森氏病猴子模型中左旋多巴-诱导的运动障碍-Neuroreport， 8，2567，1997；Tedroff等.“患有亨廷顿舞蹈病的患者使用 (-)-OSU6162后在运动功能上的长效作用”-Neurology，22； 53：1605-6，1999；Gefvert O.等，(-)-OSU6162诱导单剂量后抗精神 病作用的快速发作。双盲安慰剂-对照的初步研究-Scandinavian Society for Psychopharmacology，41st Annual Meeting， Copenhagen Denmark Nordic Journal of Psychiatry 54/293-94，2000年4月： Carlsson等，Annu.Rev. Pharmacol.Toxicol.，41，237，2001； Carlsson等.Current Medicinal Chemistry，11，267，2004)。
称作多巴胺-5-羟色胺系统稳定剂的另一种多巴胺能化合物以及 部分DA D2受体激动剂为目前提出的抗精神病化合物阿立哌唑(Burris 等，Pharm.Exp.Ther，vol.302，381，2002)。此外，称作多巴胺 能稳定剂的化合物描述在WO01/46145、WO01/46146、Pettersson等 中。“一种新型多巴胺能稳定剂ACR16的开发”-Society for Neuroscience 32nd Annual Meeting，Abstract 2002，Vol.28 part 1 1028，Orlando USA 2002和Nyberg等(“新型多巴胺稳定剂的功 效和耐受性：在第12届BIENNIAL WINTER WORKSHOP ON SCHIZOPHRENIA 上对患有精神分裂症患者的随机化安慰剂-对照的附加研究，2004年2 月7-13日，Davos，Switzerland)。
作为如WO01/46145、W001/46146和Pettersson等，2002所述的 多巴胺能稳定剂特征的典型药理学作用可以概括为：1)哺乳动物脑升 多巴胺能投射的末端区中多巴胺更新增加；2)在其它未治疗的大鼠中 没有或仅有弱的行为作用；和3)抑制大鼠中由精神兴奋剂或拟精神 病化合物诱导的行为作用。在本发明中，其被称作多巴胺能稳定剂特 性。
本发明涉及治疗患有CNS病症的哺乳动物的领域，其中症状可以 受到多巴胺能功能影响，其中治疗包括给予所述的哺乳动物具有多巴 胺稳定剂特性并且对5-羟色胺神经传递具有额外作用用量的新型化 合物。
现有技术的描述
已经在先报导了属于取代的4-苯基-N-烷基哌啶类和哌嗪类的化 合物。在这些化合物中，某些在CNS中无活性，某些显示出5-羟色胺 能或混合的5-羟色胺能/多巴胺能药理学特性，而某些为对多巴胺受 体具有高度亲合力的完全或部分多巴胺受体激动剂或拮抗剂。
Costall等，European J.Pharm.31，94，(1975)和Mewshaw等， Bioorg.Med.Chem.Lett.，8，295，(1998)报导了作为取代的4-苯 基-哌嗪类的化合物，其中大部分为2-、3-或4-OH苯基取代的并且显 示出DA自身受体激动剂特性。Fuller R.W.等在J.Pharmacol.Exp. Therapeut.218，636，(1981)中披露了取代的哌嗪类(例如1-(间-三 氟-甲基苯基)哌嗪)，据报导它们作为5-羟色胺激动剂起作用并且抑 制5-羟色胺再摄取。Fuller R.W.等在Res.Commun.Chem.Pathol. Pharmacol.29，201，(1980)中披露了使用1-(对-氯苯酚)-哌嗪对大 鼠脑中5-羟基吲哚乙酸浓度的可比性的(comparative)作用。Fuller R. W.等在Res.Commun.Chem.Pathol.Pharmacol.17，551，(1977) 中披露了使用1-(对-氯苯酚)-哌嗪对大鼠脑中3，4-二羟基-苯基乙酸 浓度的可比性的作用。
Boissier J.等在Chem Abstr.61：10691c中披露了二取代的哌 嗪类。据报导这些化合物为抗肾上腺素药、抗高血压药、巴比妥酸盐 增效剂和中枢神经系统镇静剂。
已经将大量不同取代的哌嗪类公布为5-HT1A受体上的配体，例 如，Glennon R.A.等J.Med.Chem.，31，1968，(1988)，Mokrosz，J. 等Arch.Pharm.(Weinheim)328，143-148(1995)，和van Steen B.J.， J.Med.Chem.，36，2751，(1993)，Dukat M.-L.，J.Med.Chem.，39， 4017，(1996)。
GB2027703中披露了作为止痛药和精神调节剂的取代的苯基哌嗪 类。GB1560271中披露了对位-取代的间-三氟甲基苯基哌嗪类及其在 CNS和心血管病症中的治疗应用。US4202898中披露了用于治疗焦虑和 抑郁症的取代的苯基哌嗪类。US3326916中披露了用于治疗焦虑和相 关精神疾病的不同N-烷基取代的4-(3-三氟甲基-苯基)-哌嗪类。 WO9811068中披露了作为选择性多巴胺D4配体的取代的哌嗪类，它们 可用于治疗焦虑、抑郁症、精神分裂症、强迫观念、帕金森氏病、迟 发性运动障碍、恶心和胃肠道病症。
已知大量4-苯基哌啶衍生物。EP0369887中披露了用于治疗焦虑 的取代的4-(间-三氟甲基苯基)-1，2，3，6-四氢吡啶类。WO00/03713 中披露了通过使用取代的1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氢吡啶类治疗 精神分裂症和其它多巴胺系统机能障碍的方法。
US4415736中披露了4-(2，3-二甲氧基-苯基)-1-甲基-4-哌啶醇 作为合成中间体。
Glennon等(US专利6,057,371)要求保护用于治疗于σ受体相关 的CNS病症的方法，包括给予芳基胺类，包括芳基哌啶类，它们未被 取代或在芳基环上被单-取代。这些化合物表现出对σ受体的高度结合 亲合力。WO91/095954中描述了术语″高度亲合力″，它用以指在Weber 等在Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)83：8784-8788)中所述的对3H-DTG 的试验中表现出小于100nM的IC50的化合物。特别地，WO 91/095954 中披露了涉及如下发现的组合物：″某些苯基烷基-胺、氨基四氢萘、 哌嗪、哌啶和相关衍生物对σ受体具有高度结合力并且对PCP和DA 受体具有令人意外的低度结合力″(参见11页，33-36行)。
WO 91/095954和WO 93/00313中均要求化合物对σ受体具有高度 结合亲合力并且未披露这些化合物在没有σ受体亲合力存在下具有药 理学活性。此外，研究精神分裂症患者中σ受体配体特性的临床研究 尚未产生抗精神病活性的证据，也没有在任意其它CNS病症中具有活 性的证据。最广泛研究的选择性σ受体拮抗剂中的两种BW234U(林卡 唑)和BMY14802在精神分裂症患者的临床研究中均告失败(Borison等， 1991，Psychopharmacol Bull 27(2)：103-106；Gewirtz等，1994， Neuropsychopharmacology 10：37-40)。
此外，已知具有通式II(WO 01/46145)和III(WO 01/46146)的化合 物具有多巴胺能稳定剂特性。
通式II 通式III
在通式II中；
X特别为CH，R1选自OSO2CF3、OSO2CH3、SOR3、SO2R3、COR3、CN、NO2、 CONHR3、CF3(条件是X为CH或C)、F、Cl、Br、I(其中R3如下指定) 组成的组；
R2选自C1-C4烷基、烯丙基、CH2SCH3、CH2CH2OCH3、CH2CH2CH2F、CH2CF3、 3，3，3-三氟丙基、4，4，4-三氟丁基或-(CH2)-R4(其中R4如下指定)组成 的组；
R3选自C1-C3烷基、CF3或N(R2)2组成的组；
R4选自C3-C6环烷基、2-四氢呋喃、3-四氢呋喃组成的组。
在通式III中；
X特别为CH，R1选自OSO2CF3、OSO2CH3、SOR7、SO2R7、COR7、CN、 NO2、CONHR3、CF3、F、Cl、Br、I(其中R3如下指定)、3-噻吩、2-噻吩、 3-呋喃、2-呋喃组成的组；
R2选自F、Cl、Br、I、CN、CF3、CH3、OCH3、OH、NH2组成的组；
R3和R4独立为H或C1-C4烷基；
R5选自C1-C4烷基、烯丙基、CH2SCH3、CH2CH2OCH3、CH2CH2CH2F、CH2CF3、 3，3，3-三氟丙基、4，4，4-三氟丁基或-(CH2)-R6组成的组；
R6选自C3-C6环烷基、2-四氢呋喃、3-四氢呋喃组成的组；
R7选自C1-C3烷基、CF3或N(R4)2组成的组。
然而，WO01/46145(通式II)中仅披露了芳基环的单-取代，而未 举例说明邻位-取代。WO01/46146中未披露芳基环的2，3-二取代，并 且可以看出备选的取代模式(例如3，4-二取代，其中4-位上为卤素) 并非与本发明中披露的2，3-二取代具有相同的功效。此外，在 WO01/46146和WO01/46145中均没有教导可以获得对5-羟色胺神经传 递具有额外作用的化合物。
发明概述
本发明的目的在于提供尤其是用于治疗中枢神经系统障碍的具有 作为多巴胺能稳定剂的增加的功效和对5-羟色胺神经传递具有额外 的作用的新的药物活性化合物。
已经在大鼠试验中发现本发明的物质优先对脑中的多巴胺能系统 起作用。它们对脑中的生化指数产生具有多巴胺拮抗剂特征的作用。 然而，本发明的物质在宽剂量范围内未表现出或仅表现出有限的对自 发运动的抑制作用。此外，本发明的物质可以诱导轻度的行为活动， 特别是当基线自发能力活动较低时。然而，本发明中的物质抑制由精 神兴奋剂和拟精神病药诱导的行为活动。此外，本发明的化合物可以 增加5-羟色胺在不同脑区域、包括皮质区域中的水平。
发明详述
本发明涉及新的为游离碱或其药物上可接受的盐形式的4-(邻位， 间位二取代的苯基)-1-烷基哌啶类、含有所述化合物的药物组合物和 所述化合物在疗法中的应用。
本发明特别涉及通式1的化合物及其药物上可接受的盐：
其中：
R1选自-CN、-OCF3、-OCHF2、-SCF3、-SCHF2、-CF3、F、Cl、-CH3 和-OCH3组成的组；
R2选自F、Cl、Br和CH3组成的组；
R3选自C1-C3烷基和烯丙基组成的组，
条件是当R1为CN或CF3时，R3仅可以为C1-C2烷基。
本文所用的术语C1-C3烷基指的是含有1-3个碳原子的烷基。将不 同的碳部分定义如下：烷基指的是脂族烃基，诸如甲基、乙基和正- 丙基。术语“烯丙基"指的是基团-CH2-CH＝CH2。
这类芳基环上包括两个取代基-一个在2-位上，而另一个在3-位 上的化合物-增加了其在调节多巴胺神经传递中的功效。这些2，3-二 取代的化合物与单-取代或3，4-二取代的化合物相比在功效上空前的 增加说明于表1和3中。
表1：全身给予测试化合物后对大鼠纹状体中DOPAC(3，4-二羟基 苯基乙酸)增加的估计ED50值。就方法和统计学计算而言参见附带的试 验。
对比例
*在ED50估计值中，最大作用限于对照的350-400％。**在ED50估 计值中，将最大作用设定至对照的200％(对这些化合物而言，这是能 够实现的DOPAC的最大增加)。***未测定；ED50值不能计算，因为在 给予100μmol/kg后，化合物没有达到足够高的DOPAC水平。
本发明的一个目的在于提供用于治疗应用的新化合物，且更具体 的说，提供用于调节哺乳动物脑、包括人脑中的多巴胺能系统的新化 合物。
本发明的另一个目的在于提供口服给药后具有治疗作用的化合 物。
本发明在第一个实施方案中涉及4-(邻位，间位二取代的苯 基)-1-烷基哌啶类：
及其药物上可接受的盐，其中R1、R2、R3如上述所定义。
在该组化合物中，R1优选自CN、CF3、F和Cl组成的组。更优选 R1选自F、Cl和CF3组成的组。
在一个实施方案中，R2选自F和Cl组成的组。在另一个实施方案 中，R3选自甲基、乙基和正-丙基组成的组(条件是R1不为CF3或CN)。 本发明尤其优选的化合物为这类化合物，其中R2为F且R3选自乙基或 正-丙基组成的组。
优选的结构为：
4-(3-氟-2-甲基苯基)-1-丙基哌啶，
1-乙基-4-(3-氟-2-甲基苯基)哌啶，
1-烯丙基-4-(3-氟-2-甲基苯基)哌啶，
4-(2，3-二氟苯基)-1-丙基哌啶，
4-(2，3-二氟苯基)-1-乙基哌啶，
1-烯丙基-4-(2，3-二氟苯基)哌啶，
4-(2-氯-3-氟苯基)-1-丙基哌啶，
4-(2-氯-3-氟苯基)-1-乙基哌啶，
1-烯丙基-4-(2-氯-3-氟苯基)哌啶，
1-乙基-4-[2-甲基-3-(三氟甲基)苯基]哌啶，
1-乙基-4-[2-氟-3-(三氟甲基)苯基]哌啶，
4-[2-氯-3-(三氟甲基)苯基]-1-乙基哌啶，
4-(3-氯-2-甲基苯基)-1-丙基哌啶，
4-(3-氯-2-甲基苯基)-1-乙基哌啶，
1-烯丙基-4-(3-氯-2-甲基苯基)哌啶，
4-(3-氯-2-氟苯基)-1-丙基哌啶，
4-(3-氯-2-氟苯基)-1-乙基哌啶，
1-烯丙基-4-(3-氯-2-氟苯基)哌啶，
4-(2，3-二氯苯基)-1-丙基哌啶，
4-(2，3-二氯苯基)-1-乙基哌啶，
1-烯丙基-4-(2，3-二氯苯基)哌啶，
4-[3-(二氟甲氧基)-2-甲基苯基]-1-丙基哌啶，
4-[3-(二氟甲氧基)-2-甲基苯基]-1-乙基哌啶，
1-烯丙基-4-[3-(二氟甲氧基)-2-甲基苯基]哌啶，
4-[3-(二氟甲氧基)-2-氟苯基]-1-丙基哌啶，
4-[3-(二氟甲氧基)-2-氟苯基]-1-乙基哌啶，
1-烯丙基-4-[3-(二氟甲氧基)-2-氟苯基]哌啶，
4-[2-氯-3-(二氟甲氧基)苯基]-1-丙基哌啶，
4-[2-氯-3-(二氟甲氧基)苯基]-1-乙基哌啶，
1-烯丙基-4-[2-氯-3-(二氟甲氧基)苯基]哌啶，
4-[2-甲基-3-(三氟甲氧基)苯基]-1-丙基哌啶，
1-乙基-4-[2-甲基-3-(三氟甲氧基)苯基]哌啶，
1-烯丙基-4-[2-甲基-3-(三氟甲氧基)苯基]哌啶，
4-[2-氟-3-(三氟甲氧基)苯基]-1-丙基哌啶，
1-乙基-4-[2-氟-3-(三氟甲氧基)苯基]哌啶，
1-烯丙基-4-[2-氟-3-(三氟甲氧基)苯基]哌啶，
4-[2-氯-3-(三氟甲氧基)苯基]-1-丙基哌啶，
4-[2-氯-3-(三氟甲氧基)苯基]-1-乙基哌啶，
1-烯丙基-4-[2-氯-3-(三氟甲氧基)苯基]哌啶，
3-(1-乙基哌啶-4-基)-2-甲基苄腈，
3-(1-乙基哌啶-4-基)-2-氟苄腈，
2-氯-3-(1-乙基哌啶-4-基)苄腈，
4-[2-氟-3-(三氟甲基)苯基]-1-甲基哌啶，
2-氯-3-(1-甲基哌啶-4-基)苄腈，
4-[2-氯-3-(三氟甲基)苯基]-1-甲基哌啶，
2-氟-3-(1-甲基哌啶-4-基)苄腈。
最优选的结构为：
4-(2，3-二氟苯基)-1-丙基哌啶，
4-(2，3-二氟苯基)-1-乙基哌啶，
1-烯丙基-4-(2，3-二氟苯基)哌啶，
4-(2-氯-3-氟苯基)-1-丙基哌啶，
4-(2-氯-3-氟苯基)-1-乙基哌啶，
1-烯丙基-4-(2-氯-3-氟苯基)哌啶，
4-[2-氯-3-(三氟甲基)苯基]-1-乙基哌啶，
4-(3-氯-2-氟苯基)-1-丙基哌啶，
4-(3-氯-2-氟苯基)-1-乙基哌啶，
1-烯丙基-4-(3-氯-2-氟苯基)哌啶，
4-(2，3-二氯苯基)-1-丙基哌啶，
4-(2，3-二氯苯基)-1-乙基哌啶，
1-烯丙基-4-(2，3-二氯苯基)哌啶，
4-[3-(二氟甲氧基)-2-氟苯基]-1-丙基哌啶，
4-[3-(二氟甲氧基)-2-氟苯基]-1-乙基哌啶，
1-烯丙基-4-[3-(二氟甲氧基)-2-氟苯基]哌啶，
4-[2-氯-3-(二氟甲氧基)苯基]-1-丙基哌啶，
4-[2-氯-3-(二氟甲氧基)苯基]-1-乙基哌啶，
1-烯丙基-4-[2-氯-3-(二氟甲氧基)苯基]哌啶，
4-[2-氟-3-(三氟甲氧基)苯基]-1-丙基哌啶，
1-乙基-4-[2-氟-3-(三氟甲氧基)苯基]哌啶，
1-烯丙基-4-[2-氟-3-(三氟甲氧基)苯基]哌啶，
4-[2-氯-3-(三氟甲氧基)苯基]-1-丙基哌啶，
4-[2-氯-3-(三氟甲氧基)苯基]-1-乙基哌啶，
1-烯丙基-4-[2-氯-3-(三氟甲氧基)苯基]哌啶，
3-(1-乙基哌啶-4-基)-2-氟苄腈，
2-氯-3-(1-乙基哌啶-4-基)苄腈，
4-[2-氟-3-(三氟甲基)苯基]-1-甲基哌啶，
2-氯-3-(1-甲基哌啶-4-基)苄腈，
4-[2-氯-3-(三氟甲基)苯基]-1-甲基哌啶，
2-氟-3-(1-甲基哌啶-4-基)苄腈。
本发明还涉及用于合成通式1的化合物的中间体化合物。一种这 类中间体化合物具有如下结构：
其中R1、R2、R3如上述所定义。
在该子结构中，R1优选自-CN、-OCF3、-OCHF2、-SCF3、-SCHF2、-CF3、 F、Cl、-CH3和-OCH3组成的组。更优选R1选自F、Cl和CF3组成的组。 此外，R2优选自F和Cl组成的组。所关注的中间体化合物为这类化合 物，其中R3选自正-丙基和乙基组成的组。最关注的中间体化合物为 这类化合物，其中R2为F且R3选自正-丙基和乙基组成的组。
合成具有通式1的化合物中的另一种中间体具有如下通式：
其中R1和R2如上述所定义。
所关注的这类中间体化合物为这类化合物，其中R1选自-CN、 -OCF3、-OCHF2、-SCF3、-SCHF2、-CF3、F、Cl、-CH3和-OCH3组成的组。 所关注的进一步的这类中间体化合物为这类化合物，其中R1选自CF3、 F和Cl组成的组。另外，R2可以选自F和Cl组成的组。
本发明还涉及通式1的化合物在制备用于治疗中枢神经系统障碍 的药物组合物中的应用。本发明涉及治疗中枢神经系统障碍的方法， 通过按照附图1给予患有这类病症的哺乳动物、包括人治疗活性量的 化合物来进行。本发明还涉及治疗本文命名的任意障碍的方法，通过 按照附图1给予患有这类障碍的哺乳动物、包括人治疗活性量的化合 物来进行。
本发明的化合物具有多巴胺调节特性并且它们及其药物组合物用 于治疗中枢神经系统障碍，包括精神和神经障碍。特别地，这些化合 物及其药物组合物可以用于治疗因直接或间接原因导致的多巴胺能系 统机能障碍的CNS病症。
本发明的化合物和组合物可以用于改善所有形式的精神病，包括 精神分裂症和精神分裂症样和双相性精神障碍以及药物诱发的精神障 碍。还可以治疗医源性和非-医源性精神病和幻觉症。
还可以使用本发明的化合物和组合物治疗情感障碍和焦虑症、抑 郁症和强迫观念与行为障碍。
对多巴胺能系统具有调节作用的化合物还可以用于改善运动和认 知功能并且用于治疗于衰老、神经变性(例如痴呆和与年龄相关的认知 缺损)和发育障碍(诸如孤独性谱群疾病(Autism spectrum disorders)、ADHD、脑性麻痹、吉勒德拉图雷综合征)以及脑损伤后 相关的情绪障碍。这类脑损伤可以由创伤、炎症、感染、肿瘤、血管、 含氧量低或代谢原因或对外源性化学物质的毒性反应诱导，其中外源 性化学物质选自滥用物质、药物化合物、环境毒素组成的组。
本发明的化合物和药物组合物还可以用于通常首先在婴儿、儿童 或青少年中以及在冲动控制障碍中诊断的行为障碍。
它们还可以用于治疗物质滥用病症以及特征在于误用食物的病 症。它们进一步用于治疗选自睡眠障碍、性功能障碍、进食障碍、肥 胖和头痛以及特征在于肌紧张增加的疾病中的疼痛组成的组的疾病。
神经适应症包括使用所述化合物及其药物组合物改善帕金森病和 相关的帕金森综合征中的精神和运动功能、运动障碍(包括L-DOPA诱 导的运动障碍)和张力障碍。它们还可以用于改善不同原因的抽搐和震 颤。此外，它们可以用于缓解特征在于肌紧张增加的病症中的疼痛。
它们还可以用于治疗亨廷顿舞蹈病和其它运动失调以及药物诱发 的运动失调。也可以使用本发明的化合物治疗多动腿和相关病症以及 发作性睡眠。
本发明的化合物及其药物组合物可以用于治疗阿尔茨海默氏病或 相关痴呆症。
已经证实本发明的化合物显示出具有改善的功效的多巴胺能稳定 剂特性。它们对脑中的生化指数具有多巴胺拮抗剂特征的作用，例如 产生多巴胺代谢物浓度的增加。
本发明的化合物在宽剂量范围内未表现出或仅表现出有限的对自 发运动的作用(表2)。
表2.本发明化合物对药物-稚鼠中的自发活动的作用。在给药后 即刻将动物置于活动计量器中并且将自发活动记录60分钟(计数/60 分钟±SEM)。
另一方面，优选的物质减少了因直接或间接的多巴胺能激动剂、 即d-苯丙胺和同源物(表3)诱导的活动增加并且已经发现它们比对比 实施例更为有效。
表3.本发明化合物对苯丙胺-诱导的运动过度减少的作用。还包 括来自现有技术的对比实施例。就方法和统计学计算而言参见附带的 试验。
因此，本发明的化合物表现出具有改善功效(表1和3中所示)的 多巴胺能稳定剂特性(表1-3中所示)。由于得知多巴胺涉及大量CNS 功能和目前可利用的对多巴胺系统起作用的药物的临床缺点，可以证 实本发明中提供的新型多巴胺能调节剂在治疗于CNS机能障碍相关的 几种病症中就功效和副作用而言优于目前已知的多巴胺能化合物。
据估计本发明的化合物在大鼠中显示出的口服生物利用度为15％ 或15％以上。
这些化合物由此适合于制备口服给药的药物。现有技术中没有教 导如何获得具有多巴胺稳定剂特性(表1-表3)与对脑中多巴胺系统 具有改善功效的化合物。
药理学
获得了CNS中多巴胺能神经传递在精神和神经疾病中紊乱的证 据。在许多情况中，例如在精神分裂症、帕金森氏病、亨廷顿氏病、 双相性精神障碍和痴呆中，基于拮抗或激动多巴胺受体的药物疗法是 有用的，但并非最佳。近年来，已经在寻求用于多巴胺受体亚型(D1、 D2、D3、D4、D5)的新和选择性化合物方面进行了许多尝试，目的在于 改善功效并且减少副作用。
本发明基于与多巴胺系统的相互作用而为新的治疗剂提供了另一 种机理。本发明提供了化合物，作为其主要特征，它们具有对脑中多 巴胺能系统的稳定作用。它们还具有增加不同脑区域、优选额前皮质 中的5-羟色胺水平的特性。
用于本发明的动物模型的描述
本发明的化合物对脑神经化学具有与在多巴胺D2受体上的拮抗 剂相似的作用(即在皮质、纹状体和缘脑区域中多巴胺代谢物DOPAC 的剂量依赖性增加)。本发明的化合物未表现出或仅表现出有限的对自 发运动的作用。在某些条件下，它们可以诱导行为活动。这种行为活 动是有限的，未达到直接或间接多巴胺能激动剂诱导的活性显著增加。 然而，优选的物质减少了由间接多巴胺能激动剂d-苯丙胺诱导的活动 增加。在使用d-苯丙胺治疗后的活动增加为多巴胺能过度 (hyperdopaminergia)的标准模型(表3)。在该模型中，多巴胺能神 经传递因全身给予足够高地产生自发活动较大增加剂量的d-苯丙胺 而得到增加。化合物拮抗这种活动过度的能力反映出抗-多巴胺能特 性，这些特性为多巴胺能稳定剂特性的组成部分。此外，对d-苯丙胺 诱导的活动过度的拮抗作用广泛用作抗精神病活性的标准试验(参见 Psychopharmacology 4th Generation of progress Chapter 68，p 793-795)。还发现本发明的化合物比已知的多巴胺拮抗剂更为有效。
另一种抗精神病活性的动物模型基于给予谷氨酸拮抗剂MK-801。 谷氨酸拮抗剂(即NMDA拮抗剂)可以诱导人的精神病(参见 Psychopharmacology，4th Generation of progress Chapter 101，p. 1205和1207)并且诱导动物的行为异常。因此，可以使用基于实验诱 发的谷氨酸能低下状态的行为模型测定药物影响精神分裂症和精神病 状态的能力。在该研究中，NMDA拮抗剂MK-801(0.7mg/kg静脉内)用 于产生大鼠显示出异常活动过度行为的谷氨酸能低下状态。本发明的 化合物以剂量依赖性方式逆转由MK-801诱导的行为异常(参见表4)。
已知脑的多巴胺能系统与其它递质系统发生强烈相互作用(参见 Psychopharmacology，4th Generation of progress，Chapter 101， 1208-1209页)。这类相互作用可以解释多巴胺能稳定剂对谷氨酸拮抗 剂MK-801诱导的行为异常的强有力的作用，不过，这些异常并非主要 基于多巴胺能传递改变或因多巴胺能传递改变导致。
表4.来自本发明的化合物对MK-801预治疗大鼠自发活动的作用 (0.7mg/kg腹膜内，给予测试化合物前90分钟)。在给测试化合物后 即刻将动物置于活动计量器中并且记录给药后30-60分钟之间的自 发活动(计数/30分钟±SEM)。
对皮质区域中5-羟色胺水平的作用
5-羟基色胺(5-HT，5-羟色胺)在上世纪50年代中在脑中被检测 到。在过去的数十年中，研究涉及抑郁症病因学中的脑单胺类。尽管 早期证据更趋向于儿茶酚胺系统中的机能障碍，但是更近来的证据涉 及到5-羟色胺能机制的观点，其中“5-羟色胺学说”为抑郁症神经基 础中的任何解释中最广泛被接受的(Dursun，Blackburn等2001)。
证据提示，单胺类、包括5-羟色胺的活性在抑郁症中下降。所有 有效的药物治疗剂以及抑郁症治疗的其它形式均改变单胺递质的功能 (Owens 2004)。目前存在几线证据，它们提示抗抑郁症疗法通过增加 5-羟色胺能系统的活性缓解抑郁症(Carlsson，Fuxe等1968；Lapin 和Oxenkrug 1969；Elhwuegi 2004)。5-羟色胺选择性再摄取抑制剂 (SSRIs)为最广泛开据处方的抗抑郁药。药物通过减少其再摄取优先增 加5-羟色胺活性可有效地治疗抑郁症这一发现成为5-羟色胺在调节 情绪中的重要性方面最令人注目的证据(Fuller 1995；Dursun， Blackburn等2001)。
微量渗析技术(Ungerstedt，Herrera-Marschitz等1982)为用于 测定神经递质胞外水平的充分确立的技术(Ungerstedt 1991)。微量渗 析技术用于测定药物对单胺递质的作用。附图(附图1-4)表示一种确 立的抗抑郁药(西酞普兰)以及本发明中要求保护的三个化合物(实施 例3、5，和6)对皮质中5-HT的作用。就确立的抗抑郁药和本发明的新 化合物而言，给出皮质中的5-HT增加的结果，由此我们证实本发明中 的实施例3、实施例5和实施例6为抗抑郁药。
缩写表：
NA：去甲肾上腺素，NM：去甲3-甲氧基肾上腺素 (normetanephrine)；DA：多巴胺，3-MT：3-甲氧酪胺；5-HT：5-羟 色胺(5-羟基色胺)。
附图1.西酞普兰5mg/kg皮下皮质
在0时注射(皮下)西酞普兰。该图中描述的值代表与基线值相比 的对照的(control)百分比。在唤醒和自由活动的大鼠中进行微量渗 析。误差-条＝SEM(Error-bars＝SEM)
附图2.实施例3，50mol/kg皮下额前皮质(pf.)胺类n：1-2
在0时注射(皮下)实施例3。该图中描述的值代表与基线值相比 的对照的百分比。在唤醒和自由活动的大鼠中进行微量渗析。误差- 条＝SEM
附图3.实施例5，50mol/kg皮下额前皮质胺类n：1-2
在0时注射(皮下)实施例5。该图中描述的值代表与基线值相比 的对照的百分比。在唤醒和自由活动的大鼠中进行微量渗析。误差- 条＝SEM
附图4.实施例6，50μmol/kg皮下额前皮质胺类n：1-2
在0时注射(皮下)实施例6。该图中描述的值代表与基线值相比 的对照的百分比。在唤醒和自由活动的大鼠中进行微量渗析。误差- 条＝SEM
正如通过微量渗析测定的，与5-HT相比，某些抗抑郁药对皮质中 去甲肾上腺素和多巴胺的胞外水平具有主要作用。所有临床有效类的 抗抑郁药的常见特性为升高皮质内的多巴胺和去甲肾上腺素水平 (Tanda，Carboni等.1994；Millan，Lejeune等.2000)。已经证 实临床有效的抗抑郁药米氮平(mirtazapine)(米氮平(remeron)) 可显著增加皮质中的胞外去甲肾上腺素和多巴胺(参见附图5，Devoto， Flore等.2004)。我们证实本发明要求保护的化合物(实施例3、5和 6)因升高皮质中的5-HT水平而作为抗抑郁药起作用。因为本发明要求 保护的化合物升高皮质中的多巴胺和去甲肾上腺素水平，所以我们的 权利要求中进一步强化了这一点，即它们作为抗抑郁药起作用(参见本 发明中的附图2-4，实施例3、5和6)。
附图5.10mg/kg皮下米氮平皮质
在0时注射(皮下)米氮平。该图中描述的值代表与基线值相比的 对照的百分比。在唤醒和自由活动的大鼠中进行微量渗析。误差-条 ＝SEM
参考文献：
Carlsson，A.，K.Fuxe和U.Ungerstedt(1968)。″5-羟基色 胺对中枢5-羟基色胺神经元的作用″-J Pharm Pharmacol 20(2)： 150-1。
Dursun，S.M.，J.R.Blackburn和S.P.Kutcher(2001)。″ 研究抑郁症的5-羟色胺能学说的手段：桥接突触缝隙″-Med Hypotheses 56(2)：235-43。
Elhwuegi，A.S.(2004)。″中枢单胺及其在重度抑郁症中的作用″ -Prog Neuropsychopharmacol Biol Psychiatry 28(3)：435-51。
Fuller，R.W.(1995)。″5-羟色胺再摄取抑制剂：在临床疗法 和实验室研究中的应用″-Prog Drug Res 45：167-204。
Lapin，I.P.和G.F.Oxenkrug(1969)。″中枢血清素能过程作 为抗抑郁作用的可能决定因素的强化″-Lancet 1(7586)：132-6。
Owens，M.J.(2004)。″抗抑郁药的选择性：从抑郁症的单胺学说 到SSRI变革和超越″-J Clin Psychiatry 65 Suppl 4：5-10。
Ungersted t，U.(1991)。微量渗析-原则和在动物和人的研究中的 应用″-J.Int.Med.230：365-373。
Ungerstedt，U.，M.Herrera-Marschitz，U.Jungnelius，L. Stahle，U.Tossman和T.Zetterstr_m(1982)。“合并了行为记录 和脑透析的研究中反映出的多巴胺突出机制”-Advances in Dopamine Research.M.Kohksa.Oxford，Perganon Press.37：219-231。
Devoto，P.，G.Flore，L.Pira，G.Longu和G.L.Gessa(2004)。 ″米氮平-诱导的多巴胺和去甲肾上腺素从中层前额和枕部皮质中的去 甲肾上腺素能神经元中的共同释放″-Eur J Pharmaco l487(1-3)： 105-11.
Millan，M.J.，F.Lejeune和A.Gobert(2000)。″前额皮质中 的5-羟色胺能、多巴胺能和去甲肾上腺素能传递的交互自身受体和异 身受体对照″-J Psychopharmacol 14(2)：114-38。
Tanda，G.，E.Carboni，R.Frau和G.Di Chiara(1994)。″额 前皮质中胞外多巴胺的增加：具有抗抑郁潜能的药物特征？″- Psychopharmacology(Berl)115(1-2)：285-8。
多巴胺能稳定剂的治疗应用
要求保护的本发明提供了化合物，作为其主要特征，它们对脑中 的多巴胺能系统具有稳定作用。这些化合物用于治疗CNS病症，其中 症状可以受到多巴胺能功能的影响。在支持这一主张的论断中，请参 见下列参考文献：
*在支持精神分裂症和精神病的论断中，申请人参照了 Psychopharmacology 4th Generation of progress Chapter 26，p. 295-301；
*帕金森病(Psychopharmacology 4th Generation of progress Chapter 26，p295，Chapter 1479-1482)；
*焦虑症(Psychopharmacology 4th Generation of progress Chapter 21，p.227和237，Chapter 111，p.1317-1318和1320)；
*情感障碍(Psychopharmacology 4th Generation of progress Chapter 80，p.921-928；和
*物质滥用(Psychopharmacology 4th Generation of progress Chapter 25，p.283和292，Chapter 66，p.759-760，Chapter 147， p.1725(另外参见Nisell等，″大鼠伏核中全身烟碱-诱导的多巴胺释 放受腹侧被盖区中烟碱性受体调节-Synapse(1994)16：36-44)。 Chapter 149，p.1745-1747和1751-1752)。人滥用药物优先增加自 由活动大鼠中脑边缘系统中的突触多巴胺浓度-Di Chiara等Proc Natl Acad Sci USA 85，274，1988。作为联想性学习障碍的药瘾。 伏核壳/扩大的扁桃体多巴胺的作用-Ann N.Y. Acad Sci 877，461， 1999。
正如这些参考文献中证实的，本领域将主张的情况视为涉及多巴 胺能神经传递的疾病。
此外，广泛认为与多巴胺能神经传递的药理作用用于治疗几种 CNS病症，一般并不认为它们由多巴胺能神经传递中的破坏直接导致， 例如，因运动功能中涉及多巴胺而可以使用多巴胺能药治疗亨廷顿舞 蹈病和其它运动失调的症状-(参见Psychopharmacology 4th Generation of progress，Chapter 26，p.295-301)。同样，已知 可以使用与多巴胺能传递发生相互作用的活性剂治疗认知障碍(参见 Psychopharmacology 4th Generation of progress Chapters 25，p. 292，Chapter 120，p.1417和1420，Chapter 123，p.1447和1452 和1455-1457)、孤独症(参见Psychopharmacology 4th Generation of progress Chapter 142，p.1653和1661)、注意力缺乏活动过度症(参 见Psychopharmacology 4th Generation of progress Chapter 141， p.1643和1649-1650)、性功能障碍(see Psychopharmacology 4th Generation of progress Chapters 65，p.743-746和Chapter 22， p.245和254)和进食障碍(参见Psychopharmacology 4th Generation of progress Chapters 137，p.1600，Chapter 138，p.1609-1610 和1612)。因此，上述参考文献支持了本发明可以用于治疗这类疾病 的论点。
制备方法
可以按照如下所述的方案1-3制备本发明的化合物。然而，本发 明并不限于这些方法。还可以如对现有技术中结构相关的化合物所述 制备这些化合物。可以按照标准操作步骤1，2或如制备实施例中所述进 行反应。用于本申请中所述方法的原料为已知的或易于通过常规方法 由商购原料制备。
本领域技术人员可以理解，为了以备选形式-并且在某些情况中以 更便利的方式获得本发明化合物，可以按照不同顺序进行上述各工艺 步骤和/或在整个途径中在不同阶段进行各个反应(即可以用特定的反 应对不同中间体进行化学转化成为与上文有关的那些)。
方案1
方案2
方案3
方案1-3中的取代基如下：Z为离去基团，G1为R1或可以转化成 R1的基团，G2为R2或可以转化成R2的基团，A为烷基、氢或保护基。 X、R1、R2和R3如上文所定义。
参考文献：
1.Comprehensive Organic Transformations：A Guide to Functional Group Preparatiohs Richard C.Larock，1999年10月 22日Wiley-VCH，ISBN：0471190314
2.March′s Advanced Organic Chemistry：Reactions， Mechanisms，and structure，5th Edition.Michael B.Smith，Jerry March，2001年1月15日Wiley-Interscience，ISBN：0471585890
本文所用的术语“患者”指的是需要本发明治疗的个体。
本文所用的术语“治疗”涉及治愈或缓解疾病或病症的治疗和为 预防疾病或病症发生而进行的治疗。可以以紧急或长期方式进行治疗。
本文提及的任意通式或名称意在包括所有立体和旋光异构体和外 消旋物及其任意比例的混合物。可以通过本领域技术人员众所周知的 标准方法，例如色谱法或分级结晶活动各种异构体。例如，可以通过 立体选择性合成将顺式/反式混合物分离成各立体异构体。可以通过分 离其混合物，例如通过分级结晶、拆分或HPLC分离对映体或非对映体。 或者，可以借助手性试剂衍生化进行分离。可以通过在不使立体化学 完整性丢失的条件下由立体化学纯的原料进行立体选择性合成来制备 立体异构体。所有的立体异构体均包括在本发明范围内。
可以通过标准方法分离任意纯度水平的本发明化合物并且可以通 过本领域技术人员公知的常规方式，诸如蒸馏、重结晶和色谱进行纯 化。
本发明涉及含有本发明化合物的药物组合物及其在治疗CNS病症 中的应用。有机酸和无机酸可以用于形成本发明化合物的无毒性的药 物上可接受的酸加成的盐。本发明化合物的合适的酸加成的盐包括形 成的药物上可接受的盐，诸如甲苯磺酸盐、甲磺酸盐、富马酸盐、盐 酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硝酸盐、乙酸盐、乳酸盐、柠檬酸盐、 酸式柠檬酸盐、酒石酸盐、酒石酸氢盐、脂族、脂环族、芳族或杂环 羧酸盐、琥珀酸盐、马来酸盐、富马酸盐、葡糖酸盐、乙醇酸盐、糖 二酸盐、抗坏血酸盐、乙酸盐、丙酸盐、苯甲酸盐、丙酮酸盐、扑酸 盐[即1，1′-亚甲基-双-(2-羟基-3-萘甲酸盐)]、磷酸盐、酸式磷酸盐、 硫酸盐或硫酸氢盐。这些盐易于通过本领域中公知的方法制备。还应 理解本发明的化合物可以以溶剂化和非溶剂化形式存在，诸如，例如 水合形式。
包括本发明化合物的药物组合物还可以包括用于有利于生产药物 制剂或给予该制剂的物质。这类物质为本领域技术人员众所周知并且 例如可以为药物上可接受的辅剂、载体和防腐剂。
在临床实践中，一般通过口服、直肠或注射给予本发明的化合物， 给药形式为药物制剂，它们包括作为游离碱或药物上可接受的无毒性 酸加成的盐的活性成分与药物上可接受的载体，所述的无毒性的酸加 成的盐诸如盐酸盐、乳酸盐、乙酸盐或氨基磺酸盐。所述的载体可以 为固体、半固体或液体制剂。通常活性物质占制剂重量的0.1-99％， 更具体地说对于注射用制剂为重量的0.5-20％，并且对于适合于口服 给药制剂为重量的0.2-50％。
为了生产含有本发明化合物的口服应用单位剂型的药物制剂，可 以将选择的化合物与固体赋形剂混合，例如乳糖；蔗糖；山梨醇；甘 露糖醇；淀粉，诸如马铃薯淀粉、玉米淀粉或支链淀粉；纤维素衍生 物；粘合剂，诸如明胶或聚乙烯吡咯烷酮；和润滑剂，诸如硬脂酸镁、 硬脂酸钙、聚乙二醇、蜡、石蜡等，且然后压制成片剂。如果需要包 衣片，那么可以用可以含有例如阿拉伯树胶、明胶、滑石粉、二氧化 钛等的浓糖溶液给片芯(如上所述制备)包衣。或者，可以使用本领域 技术人员公知的溶于易挥发性有机溶剂或有机溶剂混合物的聚合物给 片剂包衣。可以将染料加入到这些包衣层中以易于区分含有不同活性 物质或不同量活性化合物的片剂。
为了制备软胶囊，可以将活性物质与例如植物油或聚乙二醇混合。 硬明胶胶囊可以含有使用所提到的片剂赋形剂的活性物质颗粒，所述 的片剂赋形剂例如乳糖、蔗糖、山梨醇、甘露糖醇、淀粉(例如马铃薯 淀粉、玉米淀粉或支链淀粉)、纤维素衍生物或明胶。此外，可以将药 物的液体或半固体填充入硬明胶胶囊。
适合于口服给药的片剂和胶囊剂的实例如下所示：
片剂I mg/片
化合物 100
乳糖Ph.Eur 182.75
交联羧甲基纤维素钠 12.0
玉米淀粉糊(5％w/v糊) 2.25
硬脂酸镁 3.0
片剂II mg/片
化合物 50
乳糖Ph.Eur 223.75
交联羧甲基纤维素钠 6.0
玉米淀粉 15.0
聚乙烯吡咯烷酮(5％w/v糊) 2.25
硬脂酸镁 3.0
片剂III mg/片
化合物 1.0
乳糖Ph.Eur 93.25
交联羧甲基纤维素钠 4.0
玉米淀粉糊(5％w/v糊) 0.75
硬脂酸镁 1.0
胶囊 mg/胶囊
化合物 10
乳糖Ph.Eur 488.5
镁 1.5
用于直肠应用的单位剂型可以为溶液或混悬液或可以制备成包括 活性物质与中性脂肪基质的混合物的栓剂或包括活性物质与植物油或 液体石蜡的混合物的直肠明胶胶囊形式。用于口服应用的液体制剂可 以为糖浆剂或混悬液形式，例如含有约0.2％-约20％重量的本文所述 的活性物质的溶液，其余物质为糖和乙醇、说、甘油和丙二醇的混合 物。可选地，这类液体制剂可以含有着色剂、矫味剂、糖精和作为增 稠剂的羧甲基纤维素或本领域技术人员公知的其它赋形剂。
可以制备活性物质的水溶性药物上可接受的盐的水溶液形式的通 过注射进行非肠道应用的溶液，优选浓度为0.5％-约10％重量。这些 溶液还可以含有稳定剂和/或缓冲剂并且可以便利地制成不同剂量单 位的安瓿。对待治疗的患者使用和给药对本领域技术人员而言显而易 见。
为了鼻内给药或通过吸入给药，可以以溶液、干粉或混悬液形式 递送本发明的化合物。可以通过由患者挤压或泵压的泵式喷雾器容器 或通过来自使用合适的抛射剂的挤压容器或喷雾器的喷雾剂进行给 药，所述的抛射剂例如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、 二氧化碳或其它合适的气体。还可以通过干粉吸入装置给予作为合并 了载体物质(例如糖)的细粉或作为微球的本发明的化合物。吸入、泵 式喷雾或喷雾剂可以为单剂量或多剂量。可以通过递送测定量的活性 化合物的阀门控制剂量。
还可以以控释制剂的形式给予本发明的化合物。使化合物以所需 速率释放以便保护恒定药理活性的维持所需的时间期限。这类剂型在 预定时间期限过程对身体提供药物且由此将治疗范围内的药物水平维 持长于常规非控释制剂的时间期限。还可以将化合物配制成控释制剂， 其中使活性化合物靶向释放。例如，通过制剂的pH敏感性使化合物的 释放限于消化系统的特定区域。这类制剂为本领域技术人员众所周知。
根据所治疗的障碍和患者和给药途径的不同，可以给予不同剂量 的组合物。给药取决于与吸收性相关的功效以及给药频率和途径。可 以将这类剂量每天给予1次、2次或3次或3次以上。可以对受试者 给予的本发明化合物的剂量范围在0.01mg-500mg/kg体重/天，不 过，必需根据所治疗受试者的体重、性别和情况、所治疗的疾病状态 和选择的特定给药途径的不同进行改变。然而，剂量水平在0.1mg- 10mg/kg体重/天的范围，最理想的是将单剂量或分次剂量用于人体 以便治疗疾病。或者，剂量水平使得可以获得0.1nM-10μM化合物 的血清浓度。
在下文的实施例中进一步解释本发明，但这些实施例绝非用来限 定本发明的范围。
实施例1：
1-乙基-4-[2-氟-3-(三氟甲氧基)苯基]哌啶
按照实施例8制备：4-[2-氟-3-(三氟甲氧基)苯基]哌啶(0.70g， 2.66mmol)，乙腈(4ml)，碳酸钾(0.92g，6.65mmol)，1-碘乙烷 (0.275ml，2.93mmol)。产率：0.7g.MS m/z(相对强度，70eV) 291(M+，14)，290(10)，277(15)，276(bp)，193(8)。
实施例2：
4-[2-氟-3-(三氟甲氧基)苯基]-1-丙基-哌啶
将-[2-氟-3-(三氟甲氧基)苯基]-1-丙基-1，2，3，6-四氢-吡啶 (0.55g，1.8mmol)，钯/碳(0.09g)、盐酸(0.5ml，浓)在甲醇(30 ml)中的混合物在氢气环境中和50psi下氢化15小时。将该混合物通 过C盐垫过滤并且浓缩滤液且蒸发至干而得到0.55g粗产物。通过快 速色谱法纯化(异辛烷/乙酸乙酯，1∶1)而得到标题化合物0.22 g(40％)。将胺转化成盐酸盐并且从乙醇/乙醚中重结晶：M.p.221-222 ℃。MS m/z(相对强度，70eV)305(M+，3)，277(14)，276(bp)，233(6) 193(8)。
实施例3：
4-[2-氟-3-(三氟甲基)苯基]-1-乙基哌啶
按照实施例2制备：1-乙基-4-[2-氟-3-(三氟甲基)苯 基]-1，2，3，6-四氢吡啶(3.1g，11.3mmo1)，钯/碳(0.3g)，盐酸 (1.5ml，浓)，甲醇(30ml)。产率：2.3g(74％)。将胺转化成盐酸 盐并且从乙醇/乙醚中重结晶：M.p.235-237℃。MS m/z(相对强度，70 eV)275(M+，12)，261(16)，260(bp)，177(10) 84(13)。
实施例4：
3-(1-乙基哌啶-4-基)-2-氟苄腈
向3-(1-乙基哌啶-4-基)-2-氟苯甲酰胺(0.46g，1.83mmol)在 干燥N，N-二甲基甲酰胺(4ml)增加的溶液中加入新蒸馏的磷酰三氯 (phosphoryl trichloride)(0.42ml，4.57mmol)并且将该反应混合 物搅拌1小时。将该溶液倾倒在冰上并且通过添加碳酸钠水溶液(10％， 50ml)使其碱化。加入乙酸乙酯(50ml)并且分离各相。用乙酸乙酯 (2×50ml)提取水相。用乙酸乙酯提取水相并且干燥合并的有机相 (MgSO4)且在减压下蒸发而得到油状物。通过快速色谱法纯化(乙酸乙 酯/甲醇，1∶1)而得到标题化合物：0.32g(75％)。将胺转化成草酸盐 并且从乙醇/乙醚中重结晶：M.p.156-158℃。MS m/z(相对强度，70eV) 232(M+，12)，218(14)，217(bp)，147(10)，134(13)。
实施例5：
4-(2，3-二氟苯基)-1-丙基哌啶
按照实施例2制备：4-(2，3-二氟苯基)-1-丙基-l，2，3，6-四氢吡 啶(3.35g，14.1mmol)，甲醇(30ml)，钯/碳(0.8g)和盐酸(1.5ml， 浓)。产率：1.29g(38％)。将胺转化成盐酸盐并且从乙醇/乙醚中重结 晶：M.p.237-238℃。MS m/z(相对强度，70eV)239(M+，4)，211(13)， 210(bp)，127(20)70(38)。
实施例6：
4-(2，3-二氯苯基)-1-丙基哌啶
将4-(2，3-二氯苯基)-1-丙基-1，2，3，6-四氢吡啶(0.4g，1.48 mmol)、氧化铂(0.05g)和盐酸(0.1ml，浓)在甲醇(30ml)中的混合 物在氢气环境中和50psi下氢化1小时。将该混合物通过C盐垫过滤 并且浓缩滤液且蒸发至干而得到0.4g标题化合物，为盐酸盐(87％)。 从乙醇/乙醚中重结晶：M.p.265-267℃。MS m/z(相对强度，70eV) 271(M+，4)，243(66)，242(bp)，164(9)115(17)。
实施例7：
4-(2，3-二氯苯基)-1-甲基哌啶
将4-(2，3-二氯苯基)哌啶(20mg，0.064mmol)、1，2-二氯乙烷 (1ml)、冰醋酸(4mg，0.064mmol)、低聚甲醛(2mg，0.066mmol) 和三乙酰氧基硼氢化钠(20mg，0.092mmol)的混合物在环境温度下搅 拌15小时。MS m/z(相对强度，70eV)244(M+，68)，243(54)，242(bp)， 208(61)，115(29)。
实施例8：
4-(2，3-二氯苯基)-1-乙基哌啶
向4-(2，3-二氯苯基)哌啶(10mg)在乙腈(2ml)中的溶液中加入 碳酸钾(10mg)和1-碘乙烷(5mg)并且将该混合物在微波辐射环境中 的密封试管内加热至140℃下400s。MS m/z(相对强度，70eV)258(M+， 11)，257(18)，256(14)，244(66)，242(bp)。
实施例9：
4-(2，3-二氟苯基)-1-甲基哌啶
向4-(2，3-二氟苯基)哌啶(0.2g，1.01mmol)在乙腈(10ml)中 的溶液中加入碳酸钾(0.28g，2.0mmol)和1-碘甲烷(0.06ml，1.0 mmol)并且将该混合物在环境温度下搅拌1小时。MS m/z(相对强度，70 eV)211(M+，78)，210(bp)，2140(8)，127(12)，97(11)。
实施例10：
4-(2，3-二氟苯基)-1-乙基哌啶
向4-(2，3-二氟苯基)哌啶(0.41g，2.08mmol)在乙腈(4ml)中 的溶液中加入碳酸钾(0.57g，4.16mmol)和1-碘乙烷(0.163ml，2.12 mmol)并且将该混合物在微波辐射环境中的密封试管内加热至120℃ 下1200s。加入水(50m1)并且用乙酸乙酯(3×40m1)提取该混合物。 干燥合并的有机相(MgSO4)，过滤并且蒸发至干。通过快速色谱法纯化 油状残余物(乙酸乙酯/甲醇，1∶1)而得到标题化合物(0.31g)。MS m/z(相对强度，70eV)225(M+，20)，224(14)，211(13)，210(bp)， 127(8)。
实施例11
4-[2-氟-3-(三氟甲基)苯基]-1-甲基哌啶
按照实施例2制备：4-[2-氟-3-(三氟甲基)苯基]-1-甲基 -1，2，3，6-四氢吡啶(0.59g，2.28mmol)，甲醇(30ml)，钯/碳(0.07 g)和盐酸(0.1ml，浓)。产率：0.43g.将胺转化成盐酸盐并且从乙 醇/乙醚中重结晶：M.p.260-261℃。MS m/z(相对强度，70eV)261(M+， 69)，260(bp)，242(9)，97(12)70(37)。
实施例13：
4-[3-(二氟甲氧基)-2-氟苯基]-1-乙基哌啶
通过线性管(liner)向3-(1-乙基哌啶-4-基)-2-氟苯酚(0.43g， 1.9mmol))在异丙醇(5ml)和氢氧化钠水溶液(30％，5ml)中的溶液 中加入氯二氟甲烷气体1分钟。将该混合物加热至65℃并且使氯二氟 甲烷再持续发泡30分钟。加入水(50ml)并且用乙酸乙酯(3×50ml) 提取该混合物。干燥合并的有机相(MgSO4)，过滤并且蒸发至干。MS m/z(相对强度，70eV)273(M+，14)，272(13)，259(12)，258(bp)， 84(13)。
下面的制备中描述了用于上述实施例的中间体的合成。
制备1：
4-[2-氟-3-(三氟甲基)苯基]-1，2，3，6-四氢吡啶
按照制备4制备：4-[2-氟-3-(三氟甲基)苯基]-4-羟基哌啶-1- 甲酸叔丁酯(8.5g，23.4mmol)，多磷酸(30ml)。产率：4.2g.MS m/z(相对强度，70eV)245(M+，bp)，244(52)，177(45)，147(99)， 82(96)。
制备2：
4-[2-氟-3-(三氟甲基)苯基]哌啶
按照实施例2制备：4-[2-氟-3-(三氟甲基)苯基]-1，2，3，6-四氢 吡啶(4.2g，17.1mmol)，甲醇(20ml)，钯/碳(0.42g)和盐酸(0.2 ml，浓)。产率：1.8g.MS m/z(相对强度，70eV)247(M+，22)，190(8)， 177(5)，169(7)56(bp)。
制备3：
4-[2-氟-3-(三氟甲氧基)苯基]-1-丙基哌啶-4-醇
向在氮气环境中和-78℃的1-氟-2-(三氟甲氧基)苯(1.22g， 6.77mmol)在干燥四氢呋喃(30ml)中的溶液中滴加二异丙基氨基锂 (在己烷中2.5M，3.0ml，7.45mmol)。将该混合物搅拌1小时，此 后滴加新蒸馏的4-丙基-1-哌啶酮(0.96g，6.77mmol)在干燥四氢呋 喃(20ml)中的溶液。将所得混合物在-78℃下搅拌30分钟且然后使其 达到环境温度。加入水(100ml)并且用乙酸乙酯(3×100ml)提取该混 合物。干燥合并的有机相(MgSO4)，过滤并且蒸发至干。通过快速色谱 法纯化油状残余物(乙酸乙酯/甲醇，1∶1)而得到标题化合物(0.83g)。 MS m/z(相对强度，70eV)321(M+，5)，293(14)，292(bp)，274(25)， 207(10)。
制备4：
4-[2-氟-3-(三氟甲氧基)苯基]-1-丙基-1，2，3，6-四氢吡啶
将4-[2-氟-3-(三氟甲氧基)苯基]-1-丙基-哌啶-4-醇(0.83g， 2.6mmol)和多磷酸(10ml)的混合物在100℃下加热2小时。将该混 合物倾倒在冰上并且用5M氢氧化钠碱化。用乙酸乙酯(3×100ml)提 取该混合物并且干燥合并的有机相(MgSO4)，过滤并且蒸发至干而得到 标题化合物(0.62g)。MS m/z(相对强度，70eV)303(M+，24)，275(14)， 274(bp)，147(7)，133(6)。
制备5：
4-[2-氟-3-(三氟甲基)苯基]-1-乙基哌啶-4-醇
向在氮气环境中和-7 8℃的3-溴-2-氟三氟甲苯(5.0g，20.6mmol) 在干燥四氢呋喃(50ml)中的溶液中滴加正-丁基锂(在己烷中2.5M， 9.0ml，22.5mmol)。将该混合物搅拌1小时，此后滴加新蒸馏的4- 丙基-1-哌啶酮(2.6g，20.6mmol)在干燥四氢呋喃(30ml)中的溶液。 将所得混合物在-78℃下搅拌30分钟且然后使其达到环境温度。加入 水(100ml)并且用乙酸乙酯(3×100ml)提取该混合物。干燥合并的有 机相(MgSO4)，过滤并且蒸发至干。通过快速色谱法纯化油状残余物(乙 酸乙酯/甲醇，1∶1)而得到标题化合物。产率：4.0g.MS m/z(相对强 度，70eV)291(M+，18)，277(15)，276(bp)，258(37)，191(27)。
制备6：
4-[2-氟-3-(三氟甲基)苯基]-1-乙基-1，2，3，6-四氢吡啶
按照制备4制备：4-[2-氟-3-(三氟甲基)苯基]-1-乙基哌啶-4- 醇(3.3g，11.3mmol)，盐酸(10ml，浓)。产率：3.1g.MS m/z(相 对强度，70eV)273(M+，65)，272(32)，258(bp)，147(24)，110(22)。
制备7：
3-溴-2-氟苯甲酸
向在氮气环境中和-78℃下的1-溴-2-氟苯(6.0g，34.3mmol)在 干燥四氢呋喃(50ml)中的溶液中加入二异丙基氨基锂(在己烷中2.5 M，18.8ml，37.7mmol)。将该混合物搅拌50分钟且然后倾倒在碎固 体二氧化碳上。使该反应混合物达到环境温度并且加入碳酸钠水溶液 (10％，50ml)。首先用乙醚(2×100ml)洗涤水相，然后通过添加盐酸 水溶液使其酸化。用乙酸乙酯(2×50ml)提取酸化的水相并且干燥合并 的有机相(MgSO4)且蒸发至干而得到标题化合物(4.24g)。
制备8：
3-溴-2-氟苯甲酰胺
向3-溴-2-氟苯甲酸(3.77g，17.2mmol)在干燥四氢呋喃(200ml) 中的溶液中加入三乙胺(4.77ml，34.4mmol)和亚硫酰氯(1.69ml， 21.5 mmol)。将该反应混合物搅拌1小时且然后用在甲醇中的氨(10ml， 饱和)猝灭。再搅拌1小时后，蒸发该混合物并且通过快速色谱法纯化 粗产物(乙酸乙酯/异辛烷1∶1)而得到标题化合物(1.76g)。MS m/z(相 对强度，70eV)219(M+，26)，217(M+，26)，203(62)，201(70)， 94(bp)。
制备9：
2-氟-3-吡啶-4-基苯甲酰胺
向在氮气环境中的3-溴-2-氟苯甲酰胺(1.2g，5.5mmol)、1-吡 啶基-4-硼酸(0.74g，6.05mmol)和碳酸钠(0.98g，12.0mmol)在 甲苯/乙醇(1∶1，60ml)中的混合物中加入钯四(palladium tetrakis)(0.57g，10mol％)。将该混合物在回流状态下加热48小 时，冷却至环境温度并且在此后加入水(50ml)和乙酸乙酯(100ml)。 蒸发有机层并且用乙酸乙酯(2×50ml)提取水相。将合并的有机相蒸发 至干且溶于盐酸水溶液(10％，50ml)。用乙醚(2×40ml)洗涤该溶液， 用氢氧化钠(2M)碱化并且用乙酸乙酯(2×50ml)提取。干燥合并的有 机相(MgS04)并且蒸发至干而得到标题化合物(0.47g)。MS m/z(相对 强度，70eV)216(M+，76)，200(bp)，172(20)，145(18)，125(19)。
制备10：
3-(1-乙基-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-2-氟苯甲酰胺
向净的2-氟-3-吡啶-4-基-苯甲酰胺(0.94g，4.34mmol)中加入 1-碘丙烷(5ml)并且将所得混合物在100℃下加热2小时。在减压下 蒸发过量的1-碘丙烷并且加入乙醇(40ml)。将该混合物冷却至-20℃ 并且分部分加入硼氢化钠(1.25g，34.8mmol)。将所得混合物搅拌1 小时，此后加入碳酸钠水溶液(10％，50ml)。用乙酸乙酯(3×100ml) 提取水相并且干燥合并的有机相(MgSO4)，过滤并且蒸发至干。通过快 速色谱法纯化残余物(乙酸乙酯/甲醇，1∶1)而得到标题化合物(0.75 g)。MS m/z(相对强度，70eV)248(M+，bp)，247(37)，233(99)， 146(22)，110(41)。
制备11：
3-(1-乙基哌啶-4-基)-2-氟苯甲酰胺
按照实施例2制备：3-(1-乙基-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-2-氟苯 甲酰胺(0.75g，3.0mmol)，甲醇(20ml)，钯/碳(0.2g)和盐酸(0.2 ml，浓)。产率：0.57g。MS m/z(相对强度，70eV)250(M+，48)， 249(26)，236(34)，235(bp)，109(30)。
制备12：
4-(2，3-二氟苯基)-1-丙基哌啶-4-醇
按照制备5制备：1-溴-2，3-二氟苯5.0g，25.9mmol)，干燥 乙醚(100ml)，正-丁基锂(在己烷中2.5M，11.4ml，28.5mmol)，4- 丙基-1-哌啶酮(3.65g，25.9mmol)。产率：6.43g。MS m/z(相对 强度，70eV)255(M+，4)，226(bp)，208(32)，141(17)，127(16)。
制备13：
4-(2，3-二氟苯基)-1-丙基-1，2，3，6-四氢吡啶
按照制备4制备：4-(2，3-二氟苯基)-1-丙基哌啶-4-醇(6.43g， 25.2mmol)，三氟乙酸(40ml)。产率：3.35g。MS m/z(相对强度，70 eV)237(M+，26)，209(14)，208(bp)，151(20)，127(23)。
制备14：
4-(2，3-二氯苯基)吡啶
按照制备9制备：1-溴-2，3-二氯苯(1.5g，6.6mmol)，甲苯(30 ml)，乙醇(30ml)，1-吡啶基-4-硼酸(1.0g)，碳酸钠(1.4g)，钯 四(0.45g)。产率：1.0g。MS m/z(相对强度，70eV)225(M+，69)， 223(M+，bp)，188(27)，153(33)，126(30)。
制备15：
4-(2，3-二氯苯基)-1-丙基-1，2，3，6-四氢吡啶
按照制备10制备：4-(2，3-二氯苯基)吡啶(1.0g，4.46mmol)， 1-碘丙烷(6ml)，乙醇(60ml)，硼氢化钠(1.5g，44mmol)。产率： 0.45g。MS m/z(相对强度，70eV)271(M+，16)，269(M+，28)，242(62)， 240(bp)，127(11)。
制备16：
4-(2，3-二氯苯基)-4-羟基哌啶-1-甲酸甲酯
按照制备5：1-溴-2，3-二氯苯(1.0g，4.4mmol)，四氢呋喃(40 ml)，正-丁基锂(在己烷中2.5M，1.9ml，4.8mmol)，4-boc-1-吡 啶酮(0.9g，4.4mmol)。产率：0.7g。MS m/z(相对强度，70eV)347(M+， 1)，345(M+，2)，273(17)，271(24)，57(bp)。
制备17：
4-(2，3-二氯苯基)-1，2，3，6-四氢吡啶
按照制备4：叔丁基-4-(2，3-二氯苯基)-4-羟基哌啶-1-甲酸酯 (3.0g，8.7mmol)，三氟乙酸(30ml)。产率：0.88g。MS m/z(相 对强度，70eV)229(63)，228(M+，36)，227(bp)，163(53)，82(85)。
制备18：
4-(2，3-二氯苯基)哌啶
将4-(2，3-二氯苯基)-1，2，3，6-四氢吡啶(0.49g，2.15mmol)、 氧化铂(0.11g)和盐酸(0.1ml，浓)在甲醇(30ml)中的混合物在氢 气环境中和50psi下氢化1小时。将该混合物通过C盐垫过滤并且浓 缩滤液且蒸发至干。加入碳酸钠水溶液(10％，50ml)。用乙酸乙酯(3×30 ml)提取水相并且干燥合并的有机相(MgSO4)，过滤并且蒸发至干。产 率：0.17g。MS m/z(相对强度，70eV)230(M+，22)，229(24)，228(35)， 196(30)，194(bp)。
制备19：
4-(2，3-二氟苯基)-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯
按照制备5制备：1-溴-2，3-二氟苯(4.6g，23.8mmol)，四氢 呋喃(50ml)，正-丁基锂(在己烷中2.5M，10.5ml，26.25mmol)， 4-boc-1-吡啶酮(4.98g，24.0mmol)。产率：7.48g。MS m/z(相对 强度，70eV)313(M+，2)，239(36)，195(22)，141(22)，57(bp)。
制备20：
4-(2，3-二氟苯基)-1，2，3，6-四氢吡啶
向叔丁基-4-(2，3-二氟苯基)-4-羟基哌啶-1-甲酸酯(7.48g， 23.9mmol)在甲苯(50ml)中的溶液中加入硫酸(18M，1.33ml，23.9 mmol)并且将该混合物在迪安-斯达克榻分水器中回流。将该混合物倾 倒在冰上并且用氢氧化钠水溶液(15％)减化。用乙酸乙酯(3×50ml)提 取该混合物并且干燥合并的有机相(MgSO4)，过滤并且蒸发至干。通过 快速色谱法纯化残余物(MeOH)而得到标题化合物(2.5g)。MS m/z(相 对强度，70eV)195(M+，bp)，194(42)，166(30)，151(33)，127(35)。
制备21：
4-(2，3-二氟苯基)哌啶
将4-(2，3-二氟苯基)-1，2，3，6-四氢吡啶(2.4g，12.3mmol)、 钯/活性炭(0.5g)和甲酸(2.4ml)在异丙醇(50ml)中的混合物在氢气 环境中和50psi下氢化6小时。将该混合物通过C盐垫过滤并且浓缩 滤液且蒸发至干。加入碳酸钠水溶液(10％，50ml)。用乙酸乙酯(3×60 ml)提取水相并且干燥合并的有机相(MgSO4)，过滤并且蒸发至干。产 率：2.11g.MS m/z(相对强度，70eV)197(M+，bp)，196(53)， 140(11)，127(10)，114(6)。
制备22：
4-[2-氟-3-(三氟甲基)苯基]-1-甲基哌啶-4-醇
按照制备5制备：3-溴-2-氟次苄基三氟(1.38g，5.68mmol)，四 氢呋喃(50ml)，正-丁基锂(在己烷中2.5M，2.3ml，5.68mmol)，4- 乙基-1-吡啶酮(0.68ml，5.68mmol)。产率：1.25g.MS m/z(相对 强度，70eV)277(M+，bp)，276(64)，260(21)，259(72)，258(54)。
制备23：
4-[2-氟-3-(三氟甲基)苯基]-1-甲基-1，2，3，6-四氢吡啶
将4-[2-氟-3-(三氟甲基)苯基]-1-甲基哌啶-4-醇(1.2g，4.33 mmol)在多磷酸(4ml)中的溶液在100℃下加热2小时。将该混合物倾 倒在冰上并且用氢氧化钠水溶液(15％)碱化。用乙酸乙酯(3×50ml)提 取该混合物并且干燥合并的有机相(MgSO4)，过滤并且蒸发至干。通过 快速色谱法纯化残余物(乙酸乙酯/甲醇，1∶1)而得到标题化合物 (0.59g)。MS m/z(相对强度，70eV)259(M+，bp)，258(66)，147(74)， 146(27)，96(52)。
制备24：
4-[2-氟-3-(三氟甲氧基)苯基]-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯
按照制备5制备：1-氟-2-(三氟甲氧基)苯(10g，55.5mmol)，干 燥四氢呋喃(30ml)，二异丙基氨基锂(在己烷中2M，31ml，62mmol) 和4-boc-1-吡啶酮(13.3g，66.6mmol)。产率：11.5g。MS m/z(相 对强度，70eV)379(M+，1)，306(7)，305(14)，261(10)，57(bp)。
制备25：
4-[2-氟-3-(三氟甲氧基)苯基]-1，2，3，6-四氢吡啶
按照制备4制备：4-[2-氟-3-(三氟甲氧基)-苯基]-4-羟基哌啶 -1-甲酸叔丁酯(11.5g，30.3mmol)，多磷酸(15ml)。产率：3.33g。 MS m/z(相对强度，70eV)261(M+，bp)，232(17)，193(24)，147(64)， 82(86)。
制备26：
4-[2-氟-3-(三氟甲氧基)苯基]哌啶
按照实施例2制备：4-[2-氟-3-(三氟甲氧基)苯基]-1，2，3，6-四 氢吡啶(3.33g，12.7mmol)，钯/碳(0.35g)，盐酸(0.5ml，浓)，甲 醇(30ml)。产率：2.68g。MS m/z(相对强度，70eV)263(M+，39)， 262(27)，206(8)，178(7)56(bp)。
制备27：
1-(苄氧基)-3-溴-2-氟苯
向3-溴-2-氟苯酚(1.8g，9.42mmol)在丙酮(25ml)中的溶液中 加入碳酸钠(2.55g，20mmol)并且将该混合物搅拌5分钟。加入苄基 溴(1.2ml，10.3mmol)并且将该反应混合物在回流状态下加热20小 时。加入水(50ml)和乙酸乙酯(50ml)并且分离各相。用乙酸乙酯(2×50 ml)提取水相并且干燥合并的有机相(MgSO4)且在减压下蒸发而得到油 状物。通过快速色谱法纯化残余物(异辛烷/乙酸乙酯，5∶1)而得到标 题化合物(2.8g)。MS m/z(相对强度，70eV)282(M+，2)，280(M+， 2)，163(2)，161(2)，91(bp)。
制备28：
4-[3-(苄氧基)-2-氟苯基]-1-乙基哌啶-4-醇
按照制备5制备：1-(苄氧基)-3-溴-2-氟苯(2.8g，9.96mmol)， 干燥乙醚(100ml)，正-丁基锂(在己烷中2.5M，5.2ml，9.9mmol)， 4-乙基-1-吡啶酮(1.5ml，10.9mmol)。产率：2.1g。MS m/z(相对 强度，70eV)329(M+，30)，314(56)，296(20)，238(59)，91(bp)。
制备29：
3-(1-乙基-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-2-氟苯酚
按照制备4制备：4-[3-(苄氧基)-2-氟苯基]-1-乙基哌啶-4-醇 (1.9g，5.77mmol)。三氟乙酸(5ml)。产率：1.1g。MS m/z(相对 强度，70eV)221(M+，bp)，220(43)，206(95)，163(10)，110(14)。
制备30：
3-(1-乙基哌啶-4-基)-2-氟苯酚
按照实施例2制备：3-(1-乙基-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-2-氟苯 酚(1.1g，4.97mmol)，甲醇(20ml)，钯/碳(0.26g)和盐酸(0.2ml， 浓)。产率：1.1g。MS m/z(相对强度，70eV)223(M+，32)，222(17)， 209(13)，208(bp)84(20)。
制备31：
4-[2-氟-3-(三氟甲基)苯基]-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯
按照制备5制备：1-溴-2-氟-3-(三氟甲基)苯(8.0g，32.9mmol)， 干燥乙醚(100ml)，正-丁基锂(在己烷中2.5M，13ml，32.9 mmol)， 4-boc-1-吡啶酮(7.8g，39.5mmol)。产率：8.5g。MS m/z(相对强 度，70eV)363(M+，2)，289(44)，245(28)，191(23)，57(bp)。
下列试验用于评价本发明的化合物。
体内试验：行为
使用8个Digiscan活动监控器(RXYZM(16)TAO，Omnitech Electronics，Columbus，OH，USA)测量行为活动，该监控器与 Omnitech Difiscan分析仪和安装了数字接口插板的Apple Macintosh 计算机(NBDIO-24，National Instruments，USA)连接。每个活动监 控器由安装了光束传感器的四方金属框架(W×L＝40cm×40cm)组成。 在测量行为活动的过程中，将大鼠放入透明的丙烯酸笼(W×L×H， 40×40×30cm)中，随后将其置于活动监控器中。给每个活动监控器安 装三排红外光束传感器，每行由16个传感器组成。将两行沿笼底面的 前部和侧面呈90°角放置，并且将第三行置于底部上10cm处以便测 量垂直的活动。光束传感器间隔2.5cm。每个活动监控器固定于含有 弱室光和风扇的相同的声和光减弱箱中。
使用目标定向程序设计存储计算机软件(LabVIEW_，National instruments，Austin，TX，USA)。
在25Hz取样频率下记录并且使用定制存储的LABViewTM应用程序 采集来自每个活动监控器的代表动物每次位置(水平重心和垂直活动) 的行为数据。存储来自每次记录期间的数据并且就移动的距离进行分 析。每次行为记录期限从注射测试化合物后约4分钟开始持续60分钟。 对药物-稚鼠和药物预治疗的大鼠应用相似的行为记录操作步骤。在活 动监控器中的记录期限前10分钟以1.5mg/kg腹膜内的剂量使用d- 苯丙胺对大鼠给予预治疗。在活动监控器中的记录期限前90分钟以 0.7mg/kg腹膜内的剂量使用MK-801对大鼠给予预治疗。将结果表示 为计数/60分钟或计数/30分钟，以任意长度单位计。使用斯氏t-检 验与对照组进行统计学比较。在MK-801或苯丙胺预治疗的动物中，分 别与MK801或d-苯丙胺对照组进行统计学比较。
通过曲线拟合计算苯丙胺-诱导的运动过度减少的ED50值。就大部 分化合物而言，评价基于在一个单一实验中0、11、33和100μmol/kg 皮下剂量范围内与单独实验中的补偿剂量的16只苯丙胺预治疗的动 物。计算基于1小时测量的最后45分钟过程中的距离。将该距离相对 于苯丙胺-对照值校准并且通过最小二乘法极小化对函数“端值-(端值 -对照值)/(1+(剂量/ED50)斜率)”进行拟合。对4种参数配以如下限制： ED50＞0，0.5＜斜率＜3，端值＞0％的对照值。为了评估参数的置信水平， 使用每一测量值的随机均匀分布的均方重量(0-1)将拟合重复100 次。提供的ED50-范围覆盖这些值的95％。
体内试验：神经化学
在行为活动期限后，将大鼠断头处死并且迅速取出其脑且放在冰 冷的培养皿上。剖离并且冷冻每只大鼠的边缘前脑、纹状体、额皮质 和剩余的半球部分。随后对每个脑部分的单胺类及其代谢物进行分析。
通过HPLC分离和电化学检测对脑组织中的单胺递质物质(NA(去 甲肾上腺素)、DA(多巴胺)、5-HT(5-羟色胺))及它们的胺(NM(去甲变 肾上腺素(normethanephrine))、3-MT(3-甲氧酪胺))和酸 (DOPAC(3，4-二羟基苯基乙酸)、5-HIAA(5-羟基吲哚乙酸)、HVA(高香 草酸))代谢物进行定量。
分析方法基于专用于胺类或酸类的两种色谱分离。两种色谱系统 共用带有10-孔阀门的普通自动注射器和用于在两个系统上同时注射 的两个试样环。两种系统均安装了反相柱(Luna C18(2)，dp 3μm， 50*2mm i.d.，Phenomenex)，并且在玻璃炭精电极(MF-1000， Bioanalytical Systems，Inc.)上的两个电位处进行电化学检测。柱 流出液经T形连接流向检测池或废物出口。该步骤通过两个螺丝管阀 门进行，它们可以封闭废物或检测器出口。通过防止色谱前端达到检 测器，可以获得较好的检测条件。用于酸性系统的含水流动相(0.4ml/ 分钟)含有柠檬酸14mM、柠檬酸钠10mM、MeOH15％(v/v)和EDTA 0.1 mM。相对于Ag/AgCl参比物的检测电位为0.45和0.60V。用于胺系统 的含水离子配对流动相(0.5ml/分钟)含有柠檬酸5mM、柠檬酸钠10 mM、MeOH 9％(v/v)、MeCN 10.5％v/v)、癸磺酸0.45mM和EDTA 0.1 mM。相对于Ag/AgCl参比物的检测电位为0.45和0.65V。
通过曲线拟合计算纹状体中DOPAC增加的ED50值。就大部分化合 物而言，评价基于在一个单一实验中0、3.7、11、33和100μmol/kg 皮下剂量范围内的20只动物。将DOPAC水平相对于对照进行校准并且 通过最小二乘法极小化对函数“端值-(端值-对照值)/(1+(剂量/ED50) 斜率)”进行拟合。对4种参数配以如下限制：ED50＞0，0.5＜Slope＜3，350＜ 端值＜400或端值＝200％的对照值(参见表1)。为了评估参数的置信水 平，使用每一测量值的随机均匀分布的均方重量(0-1)将拟合重复 100次。提供的ED50-范围覆盖这些值的95％。
微量渗析
在整个实验过程中使用体重为220-320g的雄性Sprague-Dawley 大鼠。在实验前使动物分组寄居，每个笼中有5只动物，可以自由饮 水和摄食。使动物在手术和用于实验前到达后寄居至少1周。每只大 鼠仅使用1次进行微量渗析。
我们使用了I-成形探针(Santiago和Westerink 1990)的改进版 (Waters，Lofberg等.1994)。我们使用的透析膜为AN69聚丙烯腈/ 甲磺酸钠(sodiummethalylsulfonate)共聚物(HOSPAL；o.d./i.d. 310/220μm：Gambro，Lund，Sweden)。在背侧纹状体中，我们使用 探针接触3mm长的透析膜并且在额前皮质中相应的长度为2.5mm。 在异氟烷吸入麻醉下对大鼠进行手术操作，同时将其固定入Kopf定向 性仪器。相对于前卤计算纵坐标；背侧纹状体AP+1，ML±2.6，DV -6.3；Pf皮质，AP+3,2，8°ML±1,2，DV-4,0，按照(Paxinos 和Watson 1986)。在定向性指导下使透析探针定位于钻孔中并且用 phosphatine牙粘固粉粘固。
在透析实验前使大鼠分别寄居在笼中48小时，使它们从手术中恢 复并且将在下列实验过程中与麻醉药的药物相互作用的风险减少到最 低限度。在该期限过程中，大鼠可以自由摄食和饮水。在实验的当天， 通过旋臂(swiwel)将大鼠与微量灌注泵连接并且将其再放置(replace) 于可以在其受限范围内自由活动的笼中。灌注介质为含有按mmol/l 计的如下物质的林格溶液：NaCl；140，CaCl2；1.2，KCl；3.0，MgCl2； 1.0和抗坏血酸；0.04，按照(Moghaddam和Bunney 1989)。将该泵 设定至2μl/分钟的灌注速度并且每隔20分钟采集40μl样品。
将30μl各样品注入色谱仪。在带有串连固定的(2μl和20μl)试 样环管的10-孔注射器(Valco C10W)上同时在两个环上加载各脑透析 液样品。当阀门开启到注射状态时，20μl样品的主要部分被导入反 相离子对系统中以便进行多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NA)、去甲变肾 上腺素(normetanephrine)(NM)、3-甲氧基酪胺(3-MT)和5-羟色胺(5- 羟基色胺，5-HT)测定(大环)，而少量(2μl，来自小环)被引导在反相 注上以便对酸性单胺代谢物3，4-二-羟基苯基乙酸(DOPAC)、高香草酸 (HVA)和5-羟基吲哚乙酸(5-HIAA)进行色谱。两种EC检测器产生的电 流被转化成数字数据并且在PC上使用Chromelion软件(Dionex， Sunnyvale，California)进行评价。该方法的样品移交时间为4.5分 钟并且一般同时在系统上分析两次平行实验。在实验后，将大鼠与灌 注泵解除连接并且断头处死。迅速取出其脑并且固定入Neo-固定溶液 (Kebo-lab，Sweden)以便随后进行探针定位的检查。在G_teborg， Sweden的Animal Ethics Committee批准了应用于这些实验的操作步 骤。
Moghaddam，B.和B.S.Bunney(1989)。″微量渗析灌注溶液的离 子组成改变纹状体多巴胺的药理学反应和基础流出″-J.Neurochem. 53：652-654。
Paxinos，G.和C.Watson(1986)。定向性协调中的大鼠脑(The Rat Brain in Stereotaxic Coordinates).New York，Academic Press。
Santiago，M.和B.H.C.Westerink(1990)。″不同类型的大脑 内微量渗析探针记录的体内多巴胺释放的表征″- Naunyn-Schmiedeberg s Arch.Pharmacol.342：407-414。
Waters，N.，L.Lofberg，S.Haadsma-Svensson，K.Svensson， C.Sonesson和A.Carlsson(1994)。″多巴胺D2和D3受体拮抗剂在 多巴胺释放、体内受体取代和行为中的差别作用″-J Neural Transm Gen Sect 98(1)：39-55。
体内试验：口服生物利用度
在植入动脉和静脉导管后24小时进行实验。以12.5μmol/kg口 服或使用静脉导管以5μmol/kg静脉内给予测试化合物，n＝3/组。然 后在给予测试化合物后0、3、9、27、60、120、180、240、300和360 分钟的6小时过程中取动脉血样。将口服生物利用度计算为每只大鼠 口服给药后获得的AUC(曲线下的面积)与静脉内给药后获得的AUC之 比。按照下列方式计算参数AUC：
AUC：从0时到log/线性梯形法计算的最终测定的浓度之间血浆 浓度与时间关系曲线下的面积。
通过液相色谱法-质谱法(LC-MS)(Hewlett-Packard 1100MSD Series)测定测试化合物的水平。LC-MS组件包括四元泵系统、真空脱 气器、恒温自动采样器、恒温柱隔室、二极管阵列检测器和API-ES 喷雾室。使用HP ChemStation rev.A.06.03.系统进行数据处理。仪 器设定：MSD模式：选择的离子监测(SIM)MSD极性：正气体温度：350 ℃干燥气体：13,01/分钟喷雾器气体：50psig毛细管电压：5000 V Fragmentor电压：70V。
分析柱：Zorbax eclipse XDB-C8(4.6*150mm，5μm)，在20℃ 下。流动相为乙酸(0,03％)(溶剂A)和乙腈(溶剂B)。流动相的流速为 0,8ml/分钟。以12％的溶剂B开始等度洗脱4,5分钟，然后在4,5分 钟内使线性增加到60％。
提取操作步骤：用水将血浆样品(0,25-0.5ml)稀释至1ml并且 加入60pmol(100μl)内标(-)-OSU6241。通过添加25μl饱和Na2CO3 将pH调节至11。在混合后，用4ml二氯甲烷通过振摇20分钟提取 样品。在离心后将有机层转入小试管并且在氮气流中蒸发至干。然后 将残余物溶于120μl流动相(乙酸(0,03％)：乙腈，95∶5)以便进行 LC-MS分析(注射10μl)。对每一实施例监测选择的离子(MH+)，并且 对(-)-OSU6241((3-[3-(乙基磺酰基)苯基]-1-丙基哌啶)监测MH+ 296。
通过向空白血浆样品中添加适量的测试化合物制备1-500pmol 范围内的标准曲线。
体外试验：大鼠肝微体中的代谢稳定性
如F_rlin(1980)在Tox Appl Pharm.54(3)420-430中所述分离 大鼠肝微体，其中做最低限度的修改，例如，在匀化前加入3mL/g 肝的含有0.15M KCl的pH7.4的0.1M Na/K*PO4缓冲液(缓冲液1)， 将匀化物离心20分钟而非15分钟，将上清液以100.000g而非 105.000g超速离心并且将来自超速离心的沉淀物重新悬浮于1mL/g 肝的在缓冲剂1中的20％v/v 87％甘油中。
将在水中稀释的1μL的0.2或1mM测试物质和10μL 20mg/mL 大鼠肝微体与149μL 37℃的缓冲液1混合，并且通过添加40μL 4.1 mg/mL NADPH启动反应。在37℃下的加热块(LAB-LINE，MULTI-BLOK Heater或lab4you，700rpm的TS-100 Thermo振荡器)中温育0或 15分钟后，通过添加100μL纯乙腈终止反应。然后通过在4℃下排 除以10.000g离心(Heraeus，Biofuge fresco)10分钟后的沉淀物除 去蛋白质沉淀。使用HPLC-MS(Hewlett-Packard 1100MSD Series)与 使用0.03％甲酸和乙腈作为流动相(梯度)的Zorbax SB-C18柱 (2.1*150mm，5μm)或使用0.03％乙酸和乙腈作为流动相(梯度)的 Zorbax Eclipse XDB-C18(3*75mm，3.5μm)分析测试化合物。将15 分钟更新率turnover计算作为15分钟后消除的测试化合物分数，表 示为1分钟水平的百分比，即100*[0分钟时的测试化合物浓度-15分 钟时的浓度/0分钟时的浓度。
如F_rlin(1980)中所述进行肝微体的制备，在Crespi et Stresser(2000)和Renwick等(2001)中涉及了与肝微体一起温育的方 案。
参考文献
Crespi C L，和DM Stressser(2000)。“用于基于代谢的药物- 药物相互作用的荧光筛选”-J.Pharm.Tox.Meth.44.325-331
F_rlin L.(1980)，“Clophen A50，3-甲基胆蒽、孕烯诺龙-16aq- 腈和苯巴比妥对不同龄和性别的虹鳟鱼(salmo gairdneri)中肝微粒 体细胞色素P-450-依赖性单加氧酶系统的作用”-Tox Appl Pharm. 54(3)420-430。
Renwick，AB等.(2001)，“人肝CYP同种型对2，5-双(三氟甲 基)-7-苄氧基-4-三氟甲基香豆素的代谢：对CYP3A4选择性的证据”， Xenobiotica 31(4)：187-204。
称作多巴胺-5-羟色胺系统稳定剂的另一种多巴胺能化合物以及 部分DA D2受体激动剂为目前提出的抗精神病化合物阿立哌唑(Burris 等，Pharm.Exp.Ther，vol.302，381，2002)。此外，称作多巴胺 能稳定剂的化合物描述在WO01/46145、WO01/46146、Pettersson等 中。“一种新型多巴胺能稳定剂ACR16的开发”-Society for Neuroscience 32nd Annual Meeting，Abstract 2002，Vol.28 part 1 1028，Orlando USA 2002和Nyberg等(“新型多巴胺稳定剂的功 效和耐受性：在第12届BIENNIAL WINTER WORKSHOP ON SCHIZOPHRENIA 上对患有精神分裂症患者的随机化安慰剂-对照的附加研究，2004年2 月7-13日，Davos，Switzerland)。
作为如WO01/46145、W001/46146和Pettersson等，2002所述的 多巴胺能稳定剂特征的典型药理学作用可以概括为：1)哺乳动物脑升 多巴胺能投射的末端区中多巴胺更新增加；2)在其它未治疗的大鼠中 没有或仅有弱的行为作用；和3)抑制大鼠中由精神兴奋剂或拟精神 病化合物诱导的行为作用。在本发明中，其被称作多巴胺能稳定剂特 性。
本发明涉及治疗患有CNS病症的哺乳动物的领域，其中症状可以 受到多巴胺能功能影响，其中治疗包括给予所述的哺乳动物具有多巴 胺稳定剂特性并且对5-羟色胺神经传递具有额外作用用量的新型化 合物。
现有技术的描述
已经在先报导了属于取代的4-苯基-N-烷基哌啶类和哌嗪类的化 合物。在这些化合物中，某些在CNS中无活性，某些显示出5-羟色胺 能或混合的5-羟色胺能/多巴胺能药理学特性，而某些为对多巴胺受 体具有高度亲合力的完全或部分多巴胺受体激动剂或拮抗剂。
Costall等，European J.Pharm.31，94，(1975)和Mewshaw等， Bioorg.Med.Chem.Lett.，8，295，(1998)报导了作为取代的4-苯 基-哌嗪类的化合物，其中大部分为2-、3-或4-OH苯基取代的并且显 示出DA自身受体激动剂特性。Fuller R.W.等在J.Pharmacol.Exp. Therapeut.218，636，(1981)中披露了取代的哌嗪类(例如1-(间-三 氟-甲基苯基)哌嗪)，据报导它们作为5-羟色胺激动剂起作用并且抑 制5-羟色胺再摄取。Fuller R.W.等在Res.Commun.Chem.Pathol. Pharmacol.29，201，(1980)中披露了使用1-(对-氯苯酚)-哌嗪对大 鼠脑中5-羟基吲哚乙酸浓度的可比性的(comparative)作用。Fuller R. W.等在Res.Commun.Chem.Pathol.Pharmacol.17，551，(1977) 中披露了使用1-(对-氯苯酚)-哌嗪对大鼠脑中3，4-二羟基-苯基乙酸 浓度的可比性的作用。
Boissier J.等在Chem Abstr.61：10691c中披露了二取代的哌 嗪类。据报导这些化合物为抗肾上腺素药、抗高血压药、巴比妥酸盐 增效剂和中枢神经系统镇静剂。
已经将大量不同取代的哌嗪类公布为5-HT1A受体上的配体，例 如，Glennon R.A.等J.Med.Chem.，31，1968，(1988)，Mokrosz，J. 等Arch.Pharm.(Weinheim)328，143-148(1995)，和van Steen B.J.， J.Med.Chem.，36，2751，(1993)，Dukat M.-L.，J.Med.Chem.，39， 4017，(1996)。
GB2027703中披露了作为止痛药和精神调节剂的取代的苯基哌嗪 类。GB1560271中披露了对位-取代的间-三氟甲基苯基哌嗪类及其在 CNS和心血管病症中的治疗应用。US4202898中披露了用于治疗焦虑和 抑郁症的取代的苯基哌嗪类。US3326916中披露了用于治疗焦虑和相 关精神疾病的不同N-烷基取代的4-(3-三氟甲基-苯基)-哌嗪类。 WO9811068中披露了作为选择性多巴胺D4配体的取代的哌嗪类，它们 可用于治疗焦虑、抑郁症、精神分裂症、强迫观念、帕金森氏病、迟 发性运动障碍、恶心和胃肠道病症。
已知大量4-苯基哌啶衍生物。EP0369887中披露了用于治疗焦虑 的取代的4-(间-三氟甲基苯基)-1，2，3，6-四氢吡啶类。WO00/03713 中披露了通过使用取代的1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氢吡啶类治疗 精神分裂症和其它多巴胺系统机能障碍的方法。
US4415736中披露了4-(2，3-二甲氧基-苯基)-1-甲基-4-哌啶醇 作为合成中间体。
Glennon等(US专利6,057,371)要求保护用于治疗于σ受体相关 的CNS病症的方法，包括给予芳基胺类，包括芳基哌啶类，它们未被 取代或在芳基环上被单-取代。这些化合物表现出对σ受体的高度结合 亲合力。WO91/095954中描述了术语″高度亲合力″，它用以指在Weber 等在Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)83：8784-8788)中所述的对3H-DTG 的试验中表现出小于100nM的IC50的化合物。特别地，WO 91/095954 中披露了涉及如下发现的组合物：″某些苯基烷基-胺、氨基四氢萘、 哌嗪、哌啶和相关衍生物对σ受体具有高度结合力并且对PCP和DA 受体具有令人意外的低度结合力″(参见11页，33-36行)。
WO 91/095954和WO 93/00313中均要求化合物对σ受体具有高度 结合亲合力并且未披露这些化合物在没有σ受体亲合力存在下具有药 理学活性。此外，研究精神分裂症患者中σ受体配体特性的临床研究 尚未产生抗精神病活性的证据，也没有在任意其它CNS病症中具有活 性的证据。最广泛研究的选择性σ受体拮抗剂中的两种BW234U(林卡 唑)和BMY14802在精神分裂症患者的临床研究中均告失败(Borison等， 1991，Psychopharmacol Bull 27(2)：103-106；Gewirtz等，1994， Neuropsychopharmacology 10：37-40)。
此外，已知具有通式II(WO 01/46145)和III(WO 01/46146)的化合 物具有多巴胺能稳定剂特性。
通式II 通式III
在通式II中；
X特别为CH，R1选自OSO2CF3、OSO2CH3、SOR3、SO2R3、COR3、CN、NO2、 CONHR3、CF3(条件是X为CH或C)、F、Cl、Br、I(其中R3如下指定) 组成的组；
R2选自C1-C4烷基、烯丙基、CH2SCH3、CH2CH2OCH3、CH2CH2CH2F、CH2CF3、 3，3，3-三氟丙基、4，4，4-三氟丁基或-(CH2)-R4(其中R4如下指定)组成 的组；
R3选自C1-C3烷基、CF3或N(R2)2组成的组；
R4选自C3-C6环烷基、2-四氢呋喃、3-四氢呋喃组成的组。
在通式III中；
X特别为CH，R1选自OSO2CF3、OSO2CH3、SOR7、SO2R7、COR7、CN、 NO2、CONHR3、CF3、F、Cl、Br、I(其中R3如下指定)、3-噻吩、2-噻吩、 3-呋喃、2-呋喃组成的组；
R2选自F、Cl、Br、I、CN、CF3、CH3、OCH3、OH、NH2组成的组；
R3和R4独立为H或C1-C4烷基；
R5选自C1-C4烷基、烯丙基、CH2SCH3、CH2CH2OCH3、CH2CH2CH2F、CH2CF3、 3，3，3-三氟丙基、4，4，4-三氟丁基或-(CH2)-R6组成的组；
R6选自C3-C6环烷基、2-四氢呋喃、3-四氢呋喃组成的组；
R7选自C1-C3烷基、CF3或N(R4)2组成的组。
然而，WO01/46145(通式II)中仅披露了芳基环的单-取代，而未 举例说明邻位-取代。WO01/46146中未披露芳基环的2，3-二取代，并 且可以看出备选的取代模式(例如3，4-二取代，其中4-位上为卤素) 并非与本发明中披露的2，3-二取代具有相同的功效。此外，在 WO01/46146和WO01/46145中均没有教导可以获得对5-羟色胺神经传 递具有额外作用的化合物。
发明概述
本发明的目的在于提供尤其是用于治疗中枢神经系统障碍的具有 作为多巴胺能稳定剂的增加的功效和对5-羟色胺神经传递具有额外 的作用的新的药物活性化合物。
已经在大鼠试验中发现本发明的物质优先对脑中的多巴胺能系统 起作用。它们对脑中的生化指数产生具有多巴胺拮抗剂特征的作用。 然而，本发明的物质在宽剂量范围内未表现出或仅表现出有限的对自 发运动的抑制作用。此外，本发明的物质可以诱导轻度的行为活动， 特别是当基线自发能力活动较低时。然而，本发明中的物质抑制由精 神兴奋剂和拟精神病药诱导的行为活动。此外，本发明的化合物可以 增加5-羟色胺在不同脑区域、包括皮质区域中的水平。
发明详述
本发明涉及新的为游离碱或其药物上可接受的盐形式的4-(邻位， 间位二取代的苯基)-1-烷基哌啶类、含有所述化合物的药物组合物和 所述化合物在疗法中的应用。
本发明特别涉及通式1的化合物及其药物上可接受的盐：
其中：
R1选自-CN、-OCF3、-OCHF2、-SCF3、-SCHF2、-CF3、F、Cl、-CH3 和-OCH3组成的组；
R2选自F、Cl、Br和CH3组成的组；
R3选自C1-C3烷基和烯丙基组成的组，
条件是当R1为CN或CF3时，R3仅可以为C1-C2烷基。
本文所用的术语C1-C3烷基指的是含有1-3个碳原子的烷基。将不 同的碳部分定义如下：烷基指的是脂族烃基，诸如甲基、乙基和正- 丙基。术语“烯丙基"指的是基团-CH2-CH＝CH2。
这类芳基环上包括两个取代基-一个在2-位上，而另一个在3-位 上的化合物-增加了其在调节多巴胺神经传递中的功效。这些2，3-二 取代的化合物与单-取代或3，4-二取代的化合物相比在功效上空前的 增加说明于表1和3中。
表1：全身给予测试化合物后对大鼠纹状体中DOPAC(3，4-二羟基 苯基乙酸)增加的估计ED50值。就方法和统计学计算而言参见附带的试 验。
对比例
*在ED50估计值中，最大作用限于对照的350-400％。**在ED50估 计值中，将最大作用设定至对照的200％(对这些化合物而言，这是能 够实现的DOPAC的最大增加)。***未测定；ED50值不能计算，因为在 给予100μmol/kg后，化合物没有达到足够高的DOPAC水平。
本发明的一个目的在于提供用于治疗应用的新化合物，且更具体 的说，提供用于调节哺乳动物脑、包括人脑中的多巴胺能系统的新化 合物。
本发明的另一个目的在于提供口服给药后具有治疗作用的化合 物。
本发明在第一个实施方案中涉及4-(邻位，间位二取代的苯 基)-1-烷基哌啶类：
及其药物上可接受的盐，其中R1、R2、R3如上述所定义。
在该组化合物中，R1优选自CN、CF3、F和Cl组成的组。更优选 R1选自F、Cl和CF3组成的组。
在一个实施方案中，R2选自F和Cl组成的组。在另一个实施方案 中，R3选自甲基、乙基和正-丙基组成的组(条件是R1不为CF3或CN)。 本发明尤其优选的化合物为这类化合物，其中R2为F且R3选自乙基或 正-丙基组成的组。
优选的结构为：
4-(3-氟-2-甲基苯基)-1-丙基哌啶，
1-乙基-4-(3-氟-2-甲基苯基)哌啶，
1-烯丙基-4-(3-氟-2-甲基苯基)哌啶，
4-(2，3-二氟苯基)-1-丙基哌啶，
4-(2，3-二氟苯基)-1-乙基哌啶，
1-烯丙基-4-(2，3-二氟苯基)哌啶，
4-(2-氯-3-氟苯基)-1-丙基哌啶，
4-(2-氯-3-氟苯基)-1-乙基哌啶，
1-烯丙基-4-(2-氯-3-氟苯基)哌啶，
1-乙基-4-[2-甲基-3-(三氟甲基)苯基]哌啶，
1-乙基-4-[2-氟-3-(三氟甲基)苯基]哌啶，
4-[2-氯-3-(三氟甲基)苯基]-1-乙基哌啶，
4-(3-氯-2-甲基苯基)-1-丙基哌啶，
4-(3-氯-2-甲基苯基)-1-乙基哌啶，
1-烯丙基-4-(3-氯-2-甲基苯基)哌啶，
4-(3-氯-2-氟苯基)-1-丙基哌啶，
4-(3-氯-2-氟苯基)-1-乙基哌啶，
1-烯丙基-4-(3-氯-2-氟苯基)哌啶，
4-(2，3-二氯苯基)-1-丙基哌啶，
4-(2，3-二氯苯基)-1-乙基哌啶，
1-烯丙基-4-(2，3-二氯苯基)哌啶，
4-[3-(二氟甲氧基)-2-甲基苯基]-1-丙基哌啶，
4-[3-(二氟甲氧基)-2-甲基苯基]-1-乙基哌啶，
1-烯丙基-4-[3-(二氟甲氧基)-2-甲基苯基]哌啶，
4-[3-(二氟甲氧基)-2-氟苯基]-1-丙基哌啶，
4-[3-(二氟甲氧基)-2-氟苯基]-1-乙基哌啶，
1-烯丙基-4-[3-(二氟甲氧基)-2-氟苯基]哌啶，
4-[2-氯-3-(二氟甲氧基)苯基]-1-丙基哌啶，
4-[2-氯-3-(二氟甲氧基)苯基]-1-乙基哌啶，
1-烯丙基-4-[2-氯-3-(二氟甲氧基)苯基]哌啶，
4-[2-甲基-3-(三氟甲氧基)苯基]-1-丙基哌啶，
1-乙基-4-[2-甲基-3-(三氟甲氧基)苯基]哌啶，
1-烯丙基-4-[2-甲基-3-(三氟甲氧基)苯基]哌啶，
4-[2-氟-3-(三氟甲氧基)苯基]-1-丙基哌啶，
1-乙基-4-[2-氟-3-(三氟甲氧基)苯基]哌啶，
1-烯丙基-4-[2-氟-3-(三氟甲氧基)苯基]哌啶，
4-[2-氯-3-(三氟甲氧基)苯基]-1-丙基哌啶，
4-[2-氯-3-(三氟甲氧基)苯基]-1-乙基哌啶，
1-烯丙基-4-[2-氯-3-(三氟甲氧基)苯基]哌啶，
3-(1-乙基哌啶-4-基)-2-甲基苄腈，
3-(1-乙基哌啶-4-基)-2-氟苄腈，
2-氯-3-(1-乙基哌啶-4-基)苄腈，
4-[2-氟-3-(三氟甲基)苯基]-1-甲基哌啶，
2-氯-3-(1-甲基哌啶-4-基)苄腈，
4-[2-氯-3-(三氟甲基)苯基]-1-甲基哌啶，
2-氟-3-(1-甲基哌啶-4-基)苄腈。
最优选的结构为：
4-(2，3-二氟苯基)-1-丙基哌啶，
4-(2，3-二氟苯基)-1-乙基哌啶，
1-烯丙基-4-(2，3-二氟苯基)哌啶，
4-(2-氯-3-氟苯基)-1-丙基哌啶，
4-(2-氯-3-氟苯基)-1-乙基哌啶，
1-烯丙基-4-(2-氯-3-氟苯基)哌啶，
4-[2-氯-3-(三氟甲基)苯基]-1-乙基哌啶，
4-(3-氯-2-氟苯基)-1-丙基哌啶，
4-(3-氯-2-氟苯基)-1-乙基哌啶，
1-烯丙基-4-(3-氯-2-氟苯基)哌啶，
4-(2，3-二氯苯基)-1-丙基哌啶，
4-(2，3-二氯苯基)-1-乙基哌啶，
1-烯丙基-4-(2，3-二氯苯基)哌啶，
4-[3-(二氟甲氧基)-2-氟苯基]-1-丙基哌啶，
4-[3-(二氟甲氧基)-2-氟苯基]-1-乙基哌啶，
1-烯丙基-4-[3-(二氟甲氧基)-2-氟苯基]哌啶，
4-[2-氯-3-(二氟甲氧基)苯基]-1-丙基哌啶，
4-[2-氯-3-(二氟甲氧基)苯基]-1-乙基哌啶，
1-烯丙基-4-[2-氯-3-(二氟甲氧基)苯基]哌啶，
4-[2-氟-3-(三氟甲氧基)苯基]-1-丙基哌啶，
1-乙基-4-[2-氟-3-(三氟甲氧基)苯基]哌啶，
1-烯丙基-4-[2-氟-3-(三氟甲氧基)苯基]哌啶，
4-[2-氯-3-(三氟甲氧基)苯基]-1-丙基哌啶，
4-[2-氯-3-(三氟甲氧基)苯基]-1-乙基哌啶，
1-烯丙基-4-[2-氯-3-(三氟甲氧基)苯基]哌啶，
3-(1-乙基哌啶-4-基)-2-氟苄腈，
2-氯-3-(1-乙基哌啶-4-基)苄腈，
4-[2-氟-3-(三氟甲基)苯基]-1-甲基哌啶，
2-氯-3-(1-甲基哌啶-4-基)苄腈，
4-[2-氯-3-(三氟甲基)苯基]-1-甲基哌啶，
2-氟-3-(1-甲基哌啶-4-基)苄腈。
本发明还涉及用于合成通式1的化合物的中间体化合物。一种这 类中间体化合物具有如下结构：
其中R1、R2、R3如上述所定义。
在该子结构中，R1优选自-CN、-OCF3、-OCHF2、-SCF3、-SCHF2、-CF3、 F、Cl、-CH3和-OCH3组成的组。更优选R1选自F、Cl和CF3组成的组。 此外，R2优选自F和Cl组成的组。所关注的中间体化合物为这类化合 物，其中R3选自正-丙基和乙基组成的组。最关注的中间体化合物为 这类化合物，其中R2为F且R3选自正-丙基和乙基组成的组。
合成具有通式1的化合物中的另一种中间体具有如下通式：
其中R1和R2如上述所定义。
所关注的这类中间体化合物为这类化合物，其中R1选自-CN、 -OCF3、-OCHF2、-SCF3、-SCHF2、-CF3、F、Cl、-CH3和-OCH3组成的组。 所关注的进一步的这类中间体化合物为这类化合物，其中R1选自CF3、 F和Cl组成的组。另外，R2可以选自F和Cl组成的组。
本发明还涉及通式1的化合物在制备用于治疗中枢神经系统障碍 的药物组合物中的应用。本发明涉及治疗中枢神经系统障碍的方法， 通过按照附图1给予患有这类病症的哺乳动物、包括人治疗活性量的 化合物来进行。本发明还涉及治疗本文命名的任意障碍的方法，通过 按照附图1给予患有这类障碍的哺乳动物、包括人治疗活性量的化合 物来进行。
本发明的化合物具有多巴胺调节特性并且它们及其药物组合物用 于治疗中枢神经系统障碍，包括精神和神经障碍。特别地，这些化合 物及其药物组合物可以用于治疗因直接或间接原因导致的多巴胺能系 统机能障碍的CNS病症。
本发明的化合物和组合物可以用于改善所有形式的精神病，包括 精神分裂症和精神分裂症样和双相性精神障碍以及药物诱发的精神障 碍。还可以治疗医源性和非-医源性精神病和幻觉症。
还可以使用本发明的化合物和组合物治疗情感障碍和焦虑症、抑 郁症和强迫观念与行为障碍。
对多巴胺能系统具有调节作用的化合物还可以用于改善运动和认 知功能并且用于治疗于衰老、神经变性(例如痴呆和与年龄相关的认知 缺损)和发育障碍(诸如孤独性谱群疾病(Autism spectrum disorders)、ADHD、脑性麻痹、吉勒德拉图雷综合征)以及脑损伤后 相关的情绪障碍。这类脑损伤可以由创伤、炎症、感染、肿瘤、血管、 含氧量低或代谢原因或对外源性化学物质的毒性反应诱导，其中外源 性化学物质选自滥用物质、药物化合物、环境毒素组成的组。
本发明的化合物和药物组合物还可以用于通常首先在婴儿、儿童 或青少年中以及在冲动控制障碍中诊断的行为障碍。
它们还可以用于治疗物质滥用病症以及特征在于误用食物的病 症。它们进一步用于治疗选自睡眠障碍、性功能障碍、进食障碍、肥 胖和头痛以及特征在于肌紧张增加的疾病中的疼痛组成的组的疾病。
神经适应症包括使用所述化合物及其药物组合物改善帕金森病和 相关的帕金森综合征中的精神和运动功能、运动障碍(包括L-DOPA诱 导的运动障碍)和张力障碍。它们还可以用于改善不同原因的抽搐和震 颤。此外，它们可以用于缓解特征在于肌紧张增加的病症中的疼痛。
它们还可以用于治疗亨廷顿舞蹈病和其它运动失调以及药物诱发 的运动失调。也可以使用本发明的化合物治疗多动腿和相关病症以及 发作性睡眠。
本发明的化合物及其药物组合物可以用于治疗阿尔茨海默氏病或 相关痴呆症。
已经证实本发明的化合物显示出具有改善的功效的多巴胺能稳定 剂特性。它们对脑中的生化指数具有多巴胺拮抗剂特征的作用，例如 产生多巴胺代谢物浓度的增加。
本发明的化合物在宽剂量范围内未表现出或仅表现出有限的对自 发运动的作用(表2)。
表2.本发明化合物对药物-稚鼠中的自发活动的作用。在给药后 即刻将动物置于活动计量器中并且将自发活动记录60分钟(计数/60 分钟±SEM)。
另一方面，优选的物质减少了因直接或间接的多巴胺能激动剂、 即d-苯丙胺和同源物(表3)诱导的活动增加并且已经发现它们比对比 实施例更为有效。
表3.本发明化合物对苯丙胺-诱导的运动过度减少的作用。还包 括来自现有技术的对比实施例。就方法和统计学计算而言参见附带的 试验。
因此，本发明的化合物表现出具有改善功效(表1和3中所示)的 多巴胺能稳定剂特性(表1-3中所示)。由于得知多巴胺涉及大量CNS 功能和目前可利用的对多巴胺系统起作用的药物的临床缺点，可以证 实本发明中提供的新型多巴胺能调节剂在治疗于CNS机能障碍相关的 几种病症中就功效和副作用而言优于目前已知的多巴胺能化合物。
据估计本发明的化合物在大鼠中显示出的口服生物利用度为15％ 或15％以上。
这些化合物由此适合于制备口服给药的药物。现有技术中没有教 导如何获得具有多巴胺稳定剂特性(表1-表3)与对脑中多巴胺系统 具有改善功效的化合物。
药理学
获得了CNS中多巴胺能神经传递在精神和神经疾病中紊乱的证 据。在许多情况中，例如在精神分裂症、帕金森氏病、亨廷顿氏病、 双相性精神障碍和痴呆中，基于拮抗或激动多巴胺受体的药物疗法是 有用的，但并非最佳。近年来，已经在寻求用于多巴胺受体亚型(D1、 D2、D3、D4、D5)的新和选择性化合物方面进行了许多尝试，目的在于 改善功效并且减少副作用。
本发明基于与多巴胺系统的相互作用而为新的治疗剂提供了另一 种机理。本发明提供了化合物，作为其主要特征，它们具有对脑中多 巴胺能系统的稳定作用。它们还具有增加不同脑区域、优选额前皮质 中的5-羟色胺水平的特性。
用于本发明的动物模型的描述
本发明的化合物对脑神经化学具有与在多巴胺D2受体上的拮抗 剂相似的作用(即在皮质、纹状体和缘脑区域中多巴胺代谢物DOPAC 的剂量依赖性增加)。本发明的化合物未表现出或仅表现出有限的对自 发运动的作用。在某些条件下，它们可以诱导行为活动。这种行为活 动是有限的，未达到直接或间接多巴胺能激动剂诱导的活性显著增加。 然而，优选的物质减少了由间接多巴胺能激动剂d-苯丙胺诱导的活动 增加。在使用d-苯丙胺治疗后的活动增加为多巴胺能过度 (hyperdopaminergia)的标准模型(表3)。在该模型中，多巴胺能神 经传递因全身给予足够高地产生自发活动较大增加剂量的d-苯丙胺 而得到增加。化合物拮抗这种活动过度的能力反映出抗-多巴胺能特 性，这些特性为多巴胺能稳定剂特性的组成部分。此外，对d-苯丙胺 诱导的活动过度的拮抗作用广泛用作抗精神病活性的标准试验(参见 Psychopharmacology 4th Generation of progress Chapter 68，p 793-795)。还发现本发明的化合物比已知的多巴胺拮抗剂更为有效。
另一种抗精神病活性的动物模型基于给予谷氨酸拮抗剂MK-801。 谷氨酸拮抗剂(即NMDA拮抗剂)可以诱导人的精神病(参见 Psychopharmacology，4th Generation of progress Chapter 101，p. 1205和1207)并且诱导动物的行为异常。因此，可以使用基于实验诱 发的谷氨酸能低下状态的行为模型测定药物影响精神分裂症和精神病 状态的能力。在该研究中，NMDA拮抗剂MK-801(0.7mg/kg静脉内)用 于产生大鼠显示出异常活动过度行为的谷氨酸能低下状态。本发明的 化合物以剂量依赖性方式逆转由MK-801诱导的行为异常(参见表4)。
已知脑的多巴胺能系统与其它递质系统发生强烈相互作用(参见 Psychopharmacology，4th Generation of progress，Chapter 101， 1208-1209页)。这类相互作用可以解释多巴胺能稳定剂对谷氨酸拮抗 剂MK-801诱导的行为异常的强有力的作用，不过，这些异常并非主要 基于多巴胺能传递改变或因多巴胺能传递改变导致。
表4.来自本发明的化合物对MK-801预治疗大鼠自发活动的作用 (0.7mg/kg腹膜内，给予测试化合物前90分钟)。在给测试化合物后 即刻将动物置于活动计量器中并且记录给药后30-60分钟之间的自 发活动(计数/30分钟±SEM)。
对皮质区域中5-羟色胺水平的作用
5-羟基色胺(5-HT，5-羟色胺)在上世纪50年代中在脑中被检测 到。在过去的数十年中，研究涉及抑郁症病因学中的脑单胺类。尽管 早期证据更趋向于儿茶酚胺系统中的机能障碍，但是更近来的证据涉 及到5-羟色胺能机制的观点，其中“5-羟色胺学说”为抑郁症神经基 础中的任何解释中最广泛被接受的(Dursun，Blackburn等2001)。
证据提示，单胺类、包括5-羟色胺的活性在抑郁症中下降。所有 有效的药物治疗剂以及抑郁症治疗的其它形式均改变单胺递质的功能 (Owens 2004)。目前存在几线证据，它们提示抗抑郁症疗法通过增加 5-羟色胺能系统的活性缓解抑郁症(Carlsson，Fuxe等1968；Lapin 和Oxenkrug 1969；Elhwuegi 2004)。5-羟色胺选择性再摄取抑制剂 (SSRIs)为最广泛开据处方的抗抑郁药。药物通过减少其再摄取优先增 加5-羟色胺活性可有效地治疗抑郁症这一发现成为5-羟色胺在调节 情绪中的重要性方面最令人注目的证据(Fuller 1995；Dursun， Blackburn等2001)。
微量渗析技术(Ungerstedt，Herrera-Marschitz等1982)为用于 测定神经递质胞外水平的充分确立的技术(Ungerstedt 1991)。微量渗 析技术用于测定药物对单胺递质的作用。附图(附图1-4)表示一种确 立的抗抑郁药(西酞普兰)以及本发明中要求保护的三个化合物(实施 例3、5，和6)对皮质中5-HT的作用。就确立的抗抑郁药和本发明的新 化合物而言，给出皮质中的5-HT增加的结果，由此我们证实本发明中 的实施例3、实施例5和实施例6为抗抑郁药。
缩写表：
NA：去甲肾上腺素，NM：去甲3-甲氧基肾上腺素 (normetanephrine)；DA：多巴胺，3-MT：3-甲氧酪胺；5-HT：5-羟 色胺(5-羟基色胺)。
附图1.西酞普兰5mg/kg皮下皮质
在0时注射(皮下)西酞普兰。该图中描述的值代表与基线值相比 的对照的(control)百分比。在唤醒和自由活动的大鼠中进行微量渗 析。误差-条＝SEM(Error-bars＝SEM)
附图2.实施例3，50mol/kg皮下额前皮质(pf.)胺类n：1-2
在0时注射(皮下)实施例3。该图中描述的值代表与基线值相比 的对照的百分比。在唤醒和自由活动的大鼠中进行微量渗析。误差- 条＝SEM
附图3.实施例5，50mol/kg皮下额前皮质胺类n：1-2
在0时注射(皮下)实施例5。该图中描述的值代表与基线值相比 的对照的百分比。在唤醒和自由活动的大鼠中进行微量渗析。误差- 条＝SEM
附图4.实施例6，50μmol/kg皮下额前皮质胺类n：1-2
在0时注射(皮下)实施例6。该图中描述的值代表与基线值相比 的对照的百分比。在唤醒和自由活动的大鼠中进行微量渗析。误差- 条＝SEM
正如通过微量渗析测定的，与5-HT相比，某些抗抑郁药对皮质中 去甲肾上腺素和多巴胺的胞外水平具有主要作用。所有临床有效类的 抗抑郁药的常见特性为升高皮质内的多巴胺和去甲肾上腺素水平 (Tanda，Carboni等.1994；Millan，Lejeune等.2000)。已经证 实临床有效的抗抑郁药米氮平(mirtazapine)(米氮平(remeron)) 可显著增加皮质中的胞外去甲肾上腺素和多巴胺(参见附图5，Devoto， Flore等.2004)。我们证实本发明要求保护的化合物(实施例3、5和 6)因升高皮质中的5-HT水平而作为抗抑郁药起作用。因为本发明要求 保护的化合物升高皮质中的多巴胺和去甲肾上腺素水平，所以我们的 权利要求中进一步强化了这一点，即它们作为抗抑郁药起作用(参见本 发明中的附图2-4，实施例3、5和6)。
附图5.10mg/kg皮下米氮平皮质
在0时注射(皮下)米氮平。该图中描述的值代表与基线值相比的 对照的百分比。在唤醒和自由活动的大鼠中进行微量渗析。误差-条 ＝SEM
参考文献：
Carlsson，A.，K.Fuxe和U.Ungerstedt(1968)。″5-羟基色 胺对中枢5-羟基色胺神经元的作用″-J Pharm Pharmacol 20(2)： 150-1。
Dursun，S.M.，J.R.Blackburn和S.P.Kutcher(2001)。″ 研究抑郁症的5-羟色胺能学说的手段：桥接突触缝隙″-Med Hypotheses 56(2)：235-43。
Elhwuegi，A.S.(2004)。″中枢单胺及其在重度抑郁症中的作用″ -Prog Neuropsychopharmacol Biol Psychiatry 28(3)：435-51。
Fuller，R.W.(1995)。″5-羟色胺再摄取抑制剂：在临床疗法 和实验室研究中的应用″-Prog Drug Res 45：167-204。
Lapin，I.P.和G.F.Oxenkrug(1969)。″中枢血清素能过程作 为抗抑郁作用的可能决定因素的强化″-Lancet 1(7586)：132-6。
Owens，M.J.(2004)。″抗抑郁药的选择性：从抑郁症的单胺学说 到SSRI变革和超越″-J Clin Psychiatry 65 Suppl 4：5-10。
Ungersted t，U.(1991)。微量渗析-原则和在动物和人的研究中的 应用″-J.Int.Med.230：365-373。
Ungerstedt，U.，M.Herrera-Marschitz，U.Jungnelius，L. Stahle，U.Tossman和T.Zetterstr_m(1982)。“合并了行为记录 和脑透析的研究中反映出的多巴胺突出机制”-Advances in Dopamine Research.M.Kohksa.Oxford，Perganon Press.37：219-231。
Devoto，P.，G.Flore，L.Pira，G.Longu和G.L.Gessa(2004)。 ″米氮平-诱导的多巴胺和去甲肾上腺素从中层前额和枕部皮质中的去 甲肾上腺素能神经元中的共同释放″-Eur J Pharmaco l487(1-3)： 105-11.
Millan，M.J.，F.Lejeune和A.Gobert(2000)。″前额皮质中 的5-羟色胺能、多巴胺能和去甲肾上腺素能传递的交互自身受体和异 身受体对照″-J Psychopharmacol 14(2)：114-38。
Tanda，G.，E.Carboni，R.Frau和G.Di Chiara(1994)。″额 前皮质中胞外多巴胺的增加：具有抗抑郁潜能的药物特征？″- Psychopharmacology(Berl)115(1-2)：285-8。
多巴胺能稳定剂的治疗应用
要求保护的本发明提供了化合物，作为其主要特征，它们对脑中 的多巴胺能系统具有稳定作用。这些化合物用于治疗CNS病症，其中 症状可以受到多巴胺能功能的影响。在支持这一主张的论断中，请参 见下列参考文献：
*在支持精神分裂症和精神病的论断中，申请人参照了 Psychopharmacology 4th Generation of progress Chapter 26，p. 295-301；
*帕金森病(Psychopharmacology 4th Generation of progress Chapter 26，p295，Chapter 1479-1482)；
*焦虑症(Psychopharmacology 4th Generation of progress Chapter 21，p.227和237，Chapter 111，p.1317-1318和1320)；
*情感障碍(Psychopharmacology 4th Generation of progress Chapter 80，p.921-928；和
*物质滥用(Psychopharmacology 4th Generation of progress Chapter 25，p.283和292，Chapter 66，p.759-760，Chapter 147， p.1725(另外参见Nisell等，″大鼠伏核中全身烟碱-诱导的多巴胺释 放受腹侧被盖区中烟碱性受体调节-Synapse(1994)16：36-44)。 Chapter 149，p.1745-1747和1751-1752)。人滥用药物优先增加自 由活动大鼠中脑边缘系统中的突触多巴胺浓度-Di Chiara等Proc Natl Acad Sci USA 85，274，1988。作为联想性学习障碍的药瘾。 伏核壳/扩大的扁桃体多巴胺的作用-Ann N.Y. Acad Sci 877，461， 1999。
正如这些参考文献中证实的，本领域将主张的情况视为涉及多巴 胺能神经传递的疾病。
此外，广泛认为与多巴胺能神经传递的药理作用用于治疗几种 CNS病症，一般并不认为它们由多巴胺能神经传递中的破坏直接导致， 例如，因运动功能中涉及多巴胺而可以使用多巴胺能药治疗亨廷顿舞 蹈病和其它运动失调的症状-(参见Psychopharmacology 4th Generation of progress，Chapter 26，p.295-301)。同样，已知 可以使用与多巴胺能传递发生相互作用的活性剂治疗认知障碍(参见 Psychopharmacology 4th Generation of progress Chapters 25，p. 292，Chapter 120，p.1417和1420，Chapter 123，p.1447和1452 和1455-1457)、孤独症(参见Psychopharmacology 4th Generation of progress Chapter 142，p.1653和1661)、注意力缺乏活动过度症(参 见Psychopharmacology 4th Generation of progress Chapter 141， p.1643和1649-1650)、性功能障碍(see Psychopharmacology 4th Generation of progress Chapters 65，p.743-746和Chapter 22， p.245和254)和进食障碍(参见Psychopharmacology 4th Generation of progress Chapters 137，p.1600，Chapter 138，p.1609-1610 和1612)。因此，上述参考文献支持了本发明可以用于治疗这类疾病 的论点。
制备方法
可以按照如下所述的方案1-3制备本发明的化合物。然而，本发 明并不限于这些方法。还可以如对现有技术中结构相关的化合物所述 制备这些化合物。可以按照标准操作步骤1，2或如制备实施例中所述进 行反应。用于本申请中所述方法的原料为已知的或易于通过常规方法 由商购原料制备。
本领域技术人员可以理解，为了以备选形式-并且在某些情况中以 更便利的方式获得本发明化合物，可以按照不同顺序进行上述各工艺 步骤和/或在整个途径中在不同阶段进行各个反应(即可以用特定的反 应对不同中间体进行化学转化成为与上文有关的那些)。
方案1
方案2
方案3
方案1-3中的取代基如下：Z为离去基团，G1为R1或可以转化成 R1的基团，G2为R2或可以转化成R2的基团，A为烷基、氢或保护基。 X、R1、R2和R3如上文所定义。
参考文献：
1.Comprehensive Organic Transformations：A Guide to Functional Group Preparatiohs Richard C.Larock，1999年10月 22日Wiley-VCH，ISBN：0471190314
2.March′s Advanced Organic Chemistry：Reactions， Mechanisms，and structure，5th Edition.Michael B.Smith，Jerry March，2001年1月15日Wiley-Interscience，ISBN：0471585890
本文所用的术语“患者”指的是需要本发明治疗的个体。
本文所用的术语“治疗”涉及治愈或缓解疾病或病症的治疗和为 预防疾病或病症发生而进行的治疗。可以以紧急或长期方式进行治疗。
本文提及的任意通式或名称意在包括所有立体和旋光异构体和外 消旋物及其任意比例的混合物。可以通过本领域技术人员众所周知的 标准方法，例如色谱法或分级结晶活动各种异构体。例如，可以通过 立体选择性合成将顺式/反式混合物分离成各立体异构体。可以通过分 离其混合物，例如通过分级结晶、拆分或HPLC分离对映体或非对映体。 或者，可以借助手性试剂衍生化进行分离。可以通过在不使立体化学 完整性丢失的条件下由立体化学纯的原料进行立体选择性合成来制备 立体异构体。所有的立体异构体均包括在本发明范围内。
可以通过标准方法分离任意纯度水平的本发明化合物并且可以通 过本领域技术人员公知的常规方式，诸如蒸馏、重结晶和色谱进行纯 化。
本发明涉及含有本发明化合物的药物组合物及其在治疗CNS病症 中的应用。有机酸和无机酸可以用于形成本发明化合物的无毒性的药 物上可接受的酸加成的盐。本发明化合物的合适的酸加成的盐包括形 成的药物上可接受的盐，诸如甲苯磺酸盐、甲磺酸盐、富马酸盐、盐 酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硝酸盐、乙酸盐、乳酸盐、柠檬酸盐、 酸式柠檬酸盐、酒石酸盐、酒石酸氢盐、脂族、脂环族、芳族或杂环 羧酸盐、琥珀酸盐、马来酸盐、富马酸盐、葡糖酸盐、乙醇酸盐、糖 二酸盐、抗坏血酸盐、乙酸盐、丙酸盐、苯甲酸盐、丙酮酸盐、扑酸 盐[即1，1′-亚甲基-双-(2-羟基-3-萘甲酸盐)]、磷酸盐、酸式磷酸盐、 硫酸盐或硫酸氢盐。这些盐易于通过本领域中公知的方法制备。还应 理解本发明的化合物可以以溶剂化和非溶剂化形式存在，诸如，例如 水合形式。
包括本发明化合物的药物组合物还可以包括用于有利于生产药物 制剂或给予该制剂的物质。这类物质为本领域技术人员众所周知并且 例如可以为药物上可接受的辅剂、载体和防腐剂。
在临床实践中，一般通过口服、直肠或注射给予本发明的化合物， 给药形式为药物制剂，它们包括作为游离碱或药物上可接受的无毒性 酸加成的盐的活性成分与药物上可接受的载体，所述的无毒性的酸加 成的盐诸如盐酸盐、乳酸盐、乙酸盐或氨基磺酸盐。所述的载体可以 为固体、半固体或液体制剂。通常活性物质占制剂重量的0.1-99％， 更具体地说对于注射用制剂为重量的0.5-20％，并且对于适合于口服 给药制剂为重量的0.2-50％。
为了生产含有本发明化合物的口服应用单位剂型的药物制剂，可 以将选择的化合物与固体赋形剂混合，例如乳糖；蔗糖；山梨醇；甘 露糖醇；淀粉，诸如马铃薯淀粉、玉米淀粉或支链淀粉；纤维素衍生 物；粘合剂，诸如明胶或聚乙烯吡咯烷酮；和润滑剂，诸如硬脂酸镁、 硬脂酸钙、聚乙二醇、蜡、石蜡等，且然后压制成片剂。如果需要包 衣片，那么可以用可以含有例如阿拉伯树胶、明胶、滑石粉、二氧化 钛等的浓糖溶液给片芯(如上所述制备)包衣。或者，可以使用本领域 技术人员公知的溶于易挥发性有机溶剂或有机溶剂混合物的聚合物给 片剂包衣。可以将染料加入到这些包衣层中以易于区分含有不同活性 物质或不同量活性化合物的片剂。
为了制备软胶囊，可以将活性物质与例如植物油或聚乙二醇混合。 硬明胶胶囊可以含有使用所提到的片剂赋形剂的活性物质颗粒，所述 的片剂赋形剂例如乳糖、蔗糖、山梨醇、甘露糖醇、淀粉(例如马铃薯 淀粉、玉米淀粉或支链淀粉)、纤维素衍生物或明胶。此外，可以将药 物的液体或半固体填充入硬明胶胶囊。
适合于口服给药的片剂和胶囊剂的实例如下所示：
片剂I mg/片
化合物 100
乳糖Ph.Eur 182.75
交联羧甲基纤维素钠 12.0
玉米淀粉糊(5％w/v糊) 2.25
硬脂酸镁 3.0
片剂II mg/片
化合物 50
乳糖Ph.Eur 223.75
交联羧甲基纤维素钠 6.0
玉米淀粉 15.0
聚乙烯吡咯烷酮(5％w/v糊) 2.25
硬脂酸镁 3.0
片剂III mg/片
化合物 1.0
乳糖Ph.Eur 93.25
交联羧甲基纤维素钠 4.0
玉米淀粉糊(5％w/v糊) 0.75
硬脂酸镁 1.0
胶囊 mg/胶囊
化合物 10
乳糖Ph.Eur 488.5
镁 1.5
用于直肠应用的单位剂型可以为溶液或混悬液或可以制备成包括 活性物质与中性脂肪基质的混合物的栓剂或包括活性物质与植物油或 液体石蜡的混合物的直肠明胶胶囊形式。用于口服应用的液体制剂可 以为糖浆剂或混悬液形式，例如含有约0.2％-约20％重量的本文所述 的活性物质的溶液，其余物质为糖和乙醇、说、甘油和丙二醇的混合 物。可选地，这类液体制剂可以含有着色剂、矫味剂、糖精和作为增 稠剂的羧甲基纤维素或本领域技术人员公知的其它赋形剂。
可以制备活性物质的水溶性药物上可接受的盐的水溶液形式的通 过注射进行非肠道应用的溶液，优选浓度为0.5％-约10％重量。这些 溶液还可以含有稳定剂和/或缓冲剂并且可以便利地制成不同剂量单 位的安瓿。对待治疗的患者使用和给药对本领域技术人员而言显而易 见。
为了鼻内给药或通过吸入给药，可以以溶液、干粉或混悬液形式 递送本发明的化合物。可以通过由患者挤压或泵压的泵式喷雾器容器 或通过来自使用合适的抛射剂的挤压容器或喷雾器的喷雾剂进行给 药，所述的抛射剂例如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、 二氧化碳或其它合适的气体。还可以通过干粉吸入装置给予作为合并 了载体物质(例如糖)的细粉或作为微球的本发明的化合物。吸入、泵 式喷雾或喷雾剂可以为单剂量或多剂量。可以通过递送测定量的活性 化合物的阀门控制剂量。
还可以以控释制剂的形式给予本发明的化合物。使化合物以所需 速率释放以便保护恒定药理活性的维持所需的时间期限。这类剂型在 预定时间期限过程对身体提供药物且由此将治疗范围内的药物水平维 持长于常规非控释制剂的时间期限。还可以将化合物配制成控释制剂， 其中使活性化合物靶向释放。例如，通过制剂的pH敏感性使化合物的 释放限于消化系统的特定区域。这类制剂为本领域技术人员众所周知。
根据所治疗的障碍和患者和给药途径的不同，可以给予不同剂量 的组合物。给药取决于与吸收性相关的功效以及给药频率和途径。可 以将这类剂量每天给予1次、2次或3次或3次以上。可以对受试者 给予的本发明化合物的剂量范围在0.01mg-500mg/kg体重/天，不 过，必需根据所治疗受试者的体重、性别和情况、所治疗的疾病状态 和选择的特定给药途径的不同进行改变。然而，剂量水平在0.1mg- 10mg/kg体重/天的范围，最理想的是将单剂量或分次剂量用于人体 以便治疗疾病。或者，剂量水平使得可以获得0.1nM-10μM化合物 的血清浓度。
在下文的实施例中进一步解释本发明，但这些实施例绝非用来限 定本发明的范围。
实施例1：
1-乙基-4-[2-氟-3-(三氟甲氧基)苯基]哌啶
按照实施例8制备：4-[2-氟-3-(三氟甲氧基)苯基]哌啶(0.70g， 2.66mmol)，乙腈(4ml)，碳酸钾(0.92g，6.65mmol)，1-碘乙烷 (0.275ml，2.93mmol)。产率：0.7g.MS m/z(相对强度，70eV) 291(M+，14)，290(10)，277(15)，276(bp)，193(8)。
实施例2：
4-[2-氟-3-(三氟甲氧基)苯基]-1-丙基-哌啶
将-[2-氟-3-(三氟甲氧基)苯基]-1-丙基-1，2，3，6-四氢-吡啶 (0.55g，1.8mmol)，钯/碳(0.09g)、盐酸(0.5ml，浓)在甲醇(30 ml)中的混合物在氢气环境中和50psi下氢化15小时。将该混合物通 过C盐垫过滤并且浓缩滤液且蒸发至干而得到0.55g粗产物。通过快 速色谱法纯化(异辛烷/乙酸乙酯，1∶1)而得到标题化合物0.22 g(40％)。将胺转化成盐酸盐并且从乙醇/乙醚中重结晶：M.p.221-222 ℃。MS m/z(相对强度，70eV)305(M+，3)，277(14)，276(bp)，233(6) 193(8)。
实施例3：
4-[2-氟-3-(三氟甲基)苯基]-1-乙基哌啶
按照实施例2制备：1-乙基-4-[2-氟-3-(三氟甲基)苯 基]-1，2，3，6-四氢吡啶(3.1g，11.3mmo1)，钯/碳(0.3g)，盐酸 (1.5ml，浓)，甲醇(30ml)。产率：2.3g(74％)。将胺转化成盐酸 盐并且从乙醇/乙醚中重结晶：M.p.235-237℃。MS m/z(相对强度，70 eV)275(M+，12)，261(16)，260(bp)，177(10) 84(13)。
实施例4：
3-(1-乙基哌啶-4-基)-2-氟苄腈
向3-(1-乙基哌啶-4-基)-2-氟苯甲酰胺(0.46g，1.83mmol)在 干燥N，N-二甲基甲酰胺(4ml)增加的溶液中加入新蒸馏的磷酰三氯 (phosphoryl trichloride)(0.42ml，4.57mmol)并且将该反应混合 物搅拌1小时。将该溶液倾倒在冰上并且通过添加碳酸钠水溶液(10％， 50ml)使其碱化。加入乙酸乙酯(50ml)并且分离各相。用乙酸乙酯 (2×50ml)提取水相。用乙酸乙酯提取水相并且干燥合并的有机相 (MgSO4)且在减压下蒸发而得到油状物。通过快速色谱法纯化(乙酸乙 酯/甲醇，1∶1)而得到标题化合物：0.32g(75％)。将胺转化成草酸盐 并且从乙醇/乙醚中重结晶：M.p.156-158℃。MS m/z(相对强度，70eV) 232(M+，12)，218(14)，217(bp)，147(10)，134(13)。
实施例5：
4-(2，3-二氟苯基)-1-丙基哌啶
按照实施例2制备：4-(2，3-二氟苯基)-1-丙基-l，2，3，6-四氢吡 啶(3.35g，14.1mmol)，甲醇(30ml)，钯/碳(0.8g)和盐酸(1.5ml， 浓)。产率：1.29g(38％)。将胺转化成盐酸盐并且从乙醇/乙醚中重结 晶：M.p.237-238℃。MS m/z(相对强度，70eV)239(M+，4)，211(13)， 210(bp)，127(20)70(38)。
实施例6：
4-(2，3-二氯苯基)-1-丙基哌啶
将4-(2，3-二氯苯基)-1-丙基-1，2，3，6-四氢吡啶(0.4g，1.48 mmol)、氧化铂(0.05g)和盐酸(0.1ml，浓)在甲醇(30ml)中的混合 物在氢气环境中和50psi下氢化1小时。将该混合物通过C盐垫过滤 并且浓缩滤液且蒸发至干而得到0.4g标题化合物，为盐酸盐(87％)。 从乙醇/乙醚中重结晶：M.p.265-267℃。MS m/z(相对强度，70eV) 271(M+，4)，243(66)，242(bp)，164(9)115(17)。
实施例7：
4-(2，3-二氯苯基)-1-甲基哌啶
将4-(2，3-二氯苯基)哌啶(20mg，0.064mmol)、1，2-二氯乙烷 (1ml)、冰醋酸(4mg，0.064mmol)、低聚甲醛(2mg，0.066mmol) 和三乙酰氧基硼氢化钠(20mg，0.092mmol)的混合物在环境温度下搅 拌15小时。MS m/z(相对强度，70eV)244(M+，68)，243(54)，242(bp)， 208(61)，115(29)。
实施例8：
4-(2，3-二氯苯基)-1-乙基哌啶
向4-(2，3-二氯苯基)哌啶(10mg)在乙腈(2ml)中的溶液中加入 碳酸钾(10mg)和1-碘乙烷(5mg)并且将该混合物在微波辐射环境中 的密封试管内加热至140℃下400s。MS m/z(相对强度，70eV)258(M+， 11)，257(18)，256(14)，244(66)，242(bp)。
实施例9：
4-(2，3-二氟苯基)-1-甲基哌啶
向4-(2，3-二氟苯基)哌啶(0.2g，1.01mmol)在乙腈(10ml)中 的溶液中加入碳酸钾(0.28g，2.0mmol)和1-碘甲烷(0.06ml，1.0 mmol)并且将该混合物在环境温度下搅拌1小时。MS m/z(相对强度，70 eV)211(M+，78)，210(bp)，2140(8)，127(12)，97(11)。
实施例10：
4-(2，3-二氟苯基)-1-乙基哌啶
向4-(2，3-二氟苯基)哌啶(0.41g，2.08mmol)在乙腈(4ml)中 的溶液中加入碳酸钾(0.57g，4.16mmol)和1-碘乙烷(0.163ml，2.12 mmol)并且将该混合物在微波辐射环境中的密封试管内加热至120℃ 下1200s。加入水(50m1)并且用乙酸乙酯(3×40m1)提取该混合物。 干燥合并的有机相(MgSO4)，过滤并且蒸发至干。通过快速色谱法纯化 油状残余物(乙酸乙酯/甲醇，1∶1)而得到标题化合物(0.31g)。MS m/z(相对强度，70eV)225(M+，20)，224(14)，211(13)，210(bp)， 127(8)。
实施例11
4-[2-氟-3-(三氟甲基)苯基]-1-甲基哌啶
按照实施例2制备：4-[2-氟-3-(三氟甲基)苯基]-1-甲基 -1，2，3，6-四氢吡啶(0.59g，2.28mmol)，甲醇(30ml)，钯/碳(0.07 g)和盐酸(0.1ml，浓)。产率：0.43g.将胺转化成盐酸盐并且从乙 醇/乙醚中重结晶：M.p.260-261℃。MS m/z(相对强度，70eV)261(M+， 69)，260(bp)，242(9)，97(12)70(37)。
实施例13：
4-[3-(二氟甲氧基)-2-氟苯基]-1-乙基哌啶
通过线性管(liner)向3-(1-乙基哌啶-4-基)-2-氟苯酚(0.43g， 1.9mmol))在异丙醇(5ml)和氢氧化钠水溶液(30％，5ml)中的溶液 中加入氯二氟甲烷气体1分钟。将该混合物加热至65℃并且使氯二氟 甲烷再持续发泡30分钟。加入水(50ml)并且用乙酸乙酯(3×50ml) 提取该混合物。干燥合并的有机相(MgSO4)，过滤并且蒸发至干。MS m/z(相对强度，70eV)273(M+，14)，272(13)，259(12)，258(bp)， 84(13)。
下面的制备中描述了用于上述实施例的中间体的合成。
制备1：
4-[2-氟-3-(三氟甲基)苯基]-1，2，3，6-四氢吡啶
按照制备4制备：4-[2-氟-3-(三氟甲基)苯基]-4-羟基哌啶-1- 甲酸叔丁酯(8.5g，23.4mmol)，多磷酸(30ml)。产率：4.2g.MS m/z(相对强度，70eV)245(M+，bp)，244(52)，177(45)，147(99)， 82(96)。
制备2：
4-[2-氟-3-(三氟甲基)苯基]哌啶
按照实施例2制备：4-[2-氟-3-(三氟甲基)苯基]-1，2，3，6-四氢 吡啶(4.2g，17.1mmol)，甲醇(20ml)，钯/碳(0.42g)和盐酸(0.2 ml，浓)。产率：1.8g.MS m/z(相对强度，70eV)247(M+，22)，190(8)， 177(5)，169(7)56(bp)。
制备3：
4-[2-氟-3-(三氟甲氧基)苯基]-1-丙基哌啶-4-醇
向在氮气环境中和-78℃的1-氟-2-(三氟甲氧基)苯(1.22g， 6.77mmol)在干燥四氢呋喃(30ml)中的溶液中滴加二异丙基氨基锂 (在己烷中2.5M，3.0ml，7.45mmol)。将该混合物搅拌1小时，此 后滴加新蒸馏的4-丙基-1-哌啶酮(0.96g，6.77mmol)在干燥四氢呋 喃(20ml)中的溶液。将所得混合物在-78℃下搅拌30分钟且然后使其 达到环境温度。加入水(100ml)并且用乙酸乙酯(3×100ml)提取该混 合物。干燥合并的有机相(MgSO4)，过滤并且蒸发至干。通过快速色谱 法纯化油状残余物(乙酸乙酯/甲醇，1∶1)而得到标题化合物(0.83g)。 MS m/z(相对强度，70eV)321(M+，5)，293(14)，292(bp)，274(25)， 207(10)。
制备4：
4-[2-氟-3-(三氟甲氧基)苯基]-1-丙基-1，2，3，6-四氢吡啶
将4-[2-氟-3-(三氟甲氧基)苯基]-1-丙基-哌啶-4-醇(0.83g， 2.6mmol)和多磷酸(10ml)的混合物在100℃下加热2小时。将该混 合物倾倒在冰上并且用5M氢氧化钠碱化。用乙酸乙酯(3×100ml)提 取该混合物并且干燥合并的有机相(MgSO4)，过滤并且蒸发至干而得到 标题化合物(0.62g)。MS m/z(相对强度，70eV)303(M+，24)，275(14)， 274(bp)，147(7)，133(6)。
制备5：
4-[2-氟-3-(三氟甲基)苯基]-1-乙基哌啶-4-醇
向在氮气环境中和-7 8℃的3-溴-2-氟三氟甲苯(5.0g，20.6mmol) 在干燥四氢呋喃(50ml)中的溶液中滴加正-丁基锂(在己烷中2.5M， 9.0ml，22.5mmol)。将该混合物搅拌1小时，此后滴加新蒸馏的4- 丙基-1-哌啶酮(2.6g，20.6mmol)在干燥四氢呋喃(30ml)中的溶液。 将所得混合物在-78℃下搅拌30分钟且然后使其达到环境温度。加入 水(100ml)并且用乙酸乙酯(3×100ml)提取该混合物。干燥合并的有 机相(MgSO4)，过滤并且蒸发至干。通过快速色谱法纯化油状残余物(乙 酸乙酯/甲醇，1∶1)而得到标题化合物。产率：4.0g.MS m/z(相对强 度，70eV)291(M+，18)，277(15)，276(bp)，258(37)，191(27)。
制备6：
4-[2-氟-3-(三氟甲基)苯基]-1-乙基-1，2，3，6-四氢吡啶
按照制备4制备：4-[2-氟-3-(三氟甲基)苯基]-1-乙基哌啶-4- 醇(3.3g，11.3mmol)，盐酸(10ml，浓)。产率：3.1g.MS m/z(相 对强度，70eV)273(M+，65)，272(32)，258(bp)，147(24)，110(22)。
制备7：
3-溴-2-氟苯甲酸
向在氮气环境中和-78℃下的1-溴-2-氟苯(6.0g，34.3mmol)在 干燥四氢呋喃(50ml)中的溶液中加入二异丙基氨基锂(在己烷中2.5 M，18.8ml，37.7mmol)。将该混合物搅拌50分钟且然后倾倒在碎固 体二氧化碳上。使该反应混合物达到环境温度并且加入碳酸钠水溶液 (10％，50ml)。首先用乙醚(2×100ml)洗涤水相，然后通过添加盐酸 水溶液使其酸化。用乙酸乙酯(2×50ml)提取酸化的水相并且干燥合并 的有机相(MgSO4)且蒸发至干而得到标题化合物(4.24g)。
制备8：
3-溴-2-氟苯甲酰胺
向3-溴-2-氟苯甲酸(3.77g，17.2mmol)在干燥四氢呋喃(200ml) 中的溶液中加入三乙胺(4.77ml，34.4mmol)和亚硫酰氯(1.69ml， 21.5 mmol)。将该反应混合物搅拌1小时且然后用在甲醇中的氨(10ml， 饱和)猝灭。再搅拌1小时后，蒸发该混合物并且通过快速色谱法纯化 粗产物(乙酸乙酯/异辛烷1∶1)而得到标题化合物(1.76g)。MS m/z(相 对强度，70eV)219(M+，26)，217(M+，26)，203(62)，201(70)， 94(bp)。
制备9：
2-氟-3-吡啶-4-基苯甲酰胺
向在氮气环境中的3-溴-2-氟苯甲酰胺(1.2g，5.5mmol)、1-吡 啶基-4-硼酸(0.74g，6.05mmol)和碳酸钠(0.98g，12.0mmol)在 甲苯/乙醇(1∶1，60ml)中的混合物中加入钯四(palladium tetrakis)(0.57g，10mol％)。将该混合物在回流状态下加热48小 时，冷却至环境温度并且在此后加入水(50ml)和乙酸乙酯(100ml)。 蒸发有机层并且用乙酸乙酯(2×50ml)提取水相。将合并的有机相蒸发 至干且溶于盐酸水溶液(10％，50ml)。用乙醚(2×40ml)洗涤该溶液， 用氢氧化钠(2M)碱化并且用乙酸乙酯(2×50ml)提取。干燥合并的有 机相(MgS04)并且蒸发至干而得到标题化合物(0.47g)。MS m/z(相对 强度，70eV)216(M+，76)，200(bp)，172(20)，145(18)，125(19)。
制备10：
3-(1-乙基-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-2-氟苯甲酰胺
向净的2-氟-3-吡啶-4-基-苯甲酰胺(0.94g，4.34mmol)中加入 1-碘丙烷(5ml)并且将所得混合物在100℃下加热2小时。在减压下 蒸发过量的1-碘丙烷并且加入乙醇(40ml)。将该混合物冷却至-20℃ 并且分部分加入硼氢化钠(1.25g，34.8mmol)。将所得混合物搅拌1 小时，此后加入碳酸钠水溶液(10％，50ml)。用乙酸乙酯(3×100ml) 提取水相并且干燥合并的有机相(MgSO4)，过滤并且蒸发至干。通过快 速色谱法纯化残余物(乙酸乙酯/甲醇，1∶1)而得到标题化合物(0.75 g)。MS m/z(相对强度，70eV)248(M+，bp)，247(37)，233(99)， 146(22)，110(41)。
制备11：
3-(1-乙基哌啶-4-基)-2-氟苯甲酰胺
按照实施例2制备：3-(1-乙基-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-2-氟苯 甲酰胺(0.75g，3.0mmol)，甲醇(20ml)，钯/碳(0.2g)和盐酸(0.2 ml，浓)。产率：0.57g。MS m/z(相对强度，70eV)250(M+，48)， 249(26)，236(34)，235(bp)，109(30)。
制备12：
4-(2，3-二氟苯基)-1-丙基哌啶-4-醇
按照制备5制备：1-溴-2，3-二氟苯5.0g，25.9mmol)，干燥 乙醚(100ml)，正-丁基锂(在己烷中2.5M，11.4ml，28.5mmol)，4- 丙基-1-哌啶酮(3.65g，25.9mmol)。产率：6.43g。MS m/z(相对 强度，70eV)255(M+，4)，226(bp)，208(32)，141(17)，127(16)。
制备13：
4-(2，3-二氟苯基)-1-丙基-1，2，3，6-四氢吡啶
按照制备4制备：4-(2，3-二氟苯基)-1-丙基哌啶-4-醇(6.43g， 25.2mmol)，三氟乙酸(40ml)。产率：3.35g。MS m/z(相对强度，70 eV)237(M+，26)，209(14)，208(bp)，151(20)，127(23)。
制备14：
4-(2，3-二氯苯基)吡啶
按照制备9制备：1-溴-2，3-二氯苯(1.5g，6.6mmol)，甲苯(30 ml)，乙醇(30ml)，1-吡啶基-4-硼酸(1.0g)，碳酸钠(1.4g)，钯 四(0.45g)。产率：1.0g。MS m/z(相对强度，70eV)225(M+，69)， 223(M+，bp)，188(27)，153(33)，126(30)。
制备15：
4-(2，3-二氯苯基)-1-丙基-1，2，3，6-四氢吡啶
按照制备10制备：4-(2，3-二氯苯基)吡啶(1.0g，4.46mmol)， 1-碘丙烷(6ml)，乙醇(60ml)，硼氢化钠(1.5g，44mmol)。产率： 0.45g。MS m/z(相对强度，70eV)271(M+，16)，269(M+，28)，242(62)， 240(bp)，127(11)。
制备16：
4-(2，3-二氯苯基)-4-羟基哌啶-1-甲酸甲酯
按照制备5：1-溴-2，3-二氯苯(1.0g，4.4mmol)，四氢呋喃(40 ml)，正-丁基锂(在己烷中2.5M，1.9ml，4.8mmol)，4-boc-1-吡 啶酮(0.9g，4.4mmol)。产率：0.7g。MS m/z(相对强度，70eV)347(M+， 1)，345(M+，2)，273(17)，271(24)，57(bp)。
制备17：
4-(2，3-二氯苯基)-1，2，3，6-四氢吡啶
按照制备4：叔丁基-4-(2，3-二氯苯基)-4-羟基哌啶-1-甲酸酯 (3.0g，8.7mmol)，三氟乙酸(30ml)。产率：0.88g。MS m/z(相 对强度，70eV)229(63)，228(M+，36)，227(bp)，163(53)，82(85)。
制备18：
4-(2，3-二氯苯基)哌啶
将4-(2，3-二氯苯基)-1，2，3，6-四氢吡啶(0.49g，2.15mmol)、 氧化铂(0.11g)和盐酸(0.1ml，浓)在甲醇(30ml)中的混合物在氢 气环境中和50psi下氢化1小时。将该混合物通过C盐垫过滤并且浓 缩滤液且蒸发至干。加入碳酸钠水溶液(10％，50ml)。用乙酸乙酯(3×30 ml)提取水相并且干燥合并的有机相(MgSO4)，过滤并且蒸发至干。产 率：0.17g。MS m/z(相对强度，70eV)230(M+，22)，229(24)，228(35)， 196(30)，194(bp)。
制备19：
4-(2，3-二氟苯基)-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯
按照制备5制备：1-溴-2，3-二氟苯(4.6g，23.8mmol)，四氢 呋喃(50ml)，正-丁基锂(在己烷中2.5M，10.5ml，26.25mmol)， 4-boc-1-吡啶酮(4.98g，24.0mmol)。产率：7.48g。MS m/z(相对 强度，70eV)313(M+，2)，239(36)，195(22)，141(22)，57(bp)。
制备20：
4-(2，3-二氟苯基)-1，2，3，6-四氢吡啶
向叔丁基-4-(2，3-二氟苯基)-4-羟基哌啶-1-甲酸酯(7.48g， 23.9mmol)在甲苯(50ml)中的溶液中加入硫酸(18M，1.33ml，23.9 mmol)并且将该混合物在迪安-斯达克榻分水器中回流。将该混合物倾 倒在冰上并且用氢氧化钠水溶液(15％)减化。用乙酸乙酯(3×50ml)提 取该混合物并且干燥合并的有机相(MgSO4)，过滤并且蒸发至干。通过 快速色谱法纯化残余物(MeOH)而得到标题化合物(2.5g)。MS m/z(相 对强度，70eV)195(M+，bp)，194(42)，166(30)，151(33)，127(35)。
制备21：
4-(2，3-二氟苯基)哌啶
将4-(2，3-二氟苯基)-1，2，3，6-四氢吡啶(2.4g，12.3mmol)、 钯/活性炭(0.5g)和甲酸(2.4ml)在异丙醇(50ml)中的混合物在氢气 环境中和50psi下氢化6小时。将该混合物通过C盐垫过滤并且浓缩 滤液且蒸发至干。加入碳酸钠水溶液(10％，50ml)。用乙酸乙酯(3×60 ml)提取水相并且干燥合并的有机相(MgSO4)，过滤并且蒸发至干。产 率：2.11g.MS m/z(相对强度，70eV)197(M+，bp)，196(53)， 140(11)，127(10)，114(6)。
制备22：
4-[2-氟-3-(三氟甲基)苯基]-1-甲基哌啶-4-醇
按照制备5制备：3-溴-2-氟次苄基三氟(1.38g，5.68mmol)，四 氢呋喃(50ml)，正-丁基锂(在己烷中2.5M，2.3ml，5.68mmol)，4- 乙基-1-吡啶酮(0.68ml，5.68mmol)。产率：1.25g.MS m/z(相对 强度，70eV)277(M+，bp)，276(64)，260(21)，259(72)，258(54)。
制备23：
4-[2-氟-3-(三氟甲基)苯基]-1-甲基-1，2，3，6-四氢吡啶
将4-[2-氟-3-(三氟甲基)苯基]-1-甲基哌啶-4-醇(1.2g，4.33 mmol)在多磷酸(4ml)中的溶液在100℃下加热2小时。将该混合物倾 倒在冰上并且用氢氧化钠水溶液(15％)碱化。用乙酸乙酯(3×50ml)提 取该混合物并且干燥合并的有机相(MgSO4)，过滤并且蒸发至干。通过 快速色谱法纯化残余物(乙酸乙酯/甲醇，1∶1)而得到标题化合物 (0.59g)。MS m/z(相对强度，70eV)259(M+，bp)，258(66)，147(74)， 146(27)，96(52)。
制备24：
4-[2-氟-3-(三氟甲氧基)苯基]-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯
按照制备5制备：1-氟-2-(三氟甲氧基)苯(10g，55.5mmol)，干 燥四氢呋喃(30ml)，二异丙基氨基锂(在己烷中2M，31ml，62mmol) 和4-boc-1-吡啶酮(13.3g，66.6mmol)。产率：11.5g。MS m/z(相 对强度，70eV)379(M+，1)，306(7)，305(14)，261(10)，57(bp)。
制备25：
4-[2-氟-3-(三氟甲氧基)苯基]-1，2，3，6-四氢吡啶
按照制备4制备：4-[2-氟-3-(三氟甲氧基)-苯基]-4-羟基哌啶 -1-甲酸叔丁酯(11.5g，30.3mmol)，多磷酸(15ml)。产率：3.33g。 MS m/z(相对强度，70eV)261(M+，bp)，232(17)，193(24)，147(64)， 82(86)。
制备26：
4-[2-氟-3-(三氟甲氧基)苯基]哌啶
按照实施例2制备：4-[2-氟-3-(三氟甲氧基)苯基]-1，2，3，6-四 氢吡啶(3.33g，12.7mmol)，钯/碳(0.35g)，盐酸(0.5ml，浓)，甲 醇(30ml)。产率：2.68g。MS m/z(相对强度，70eV)263(M+，39)， 262(27)，206(8)，178(7)56(bp)。
制备27：
1-(苄氧基)-3-溴-2-氟苯
向3-溴-2-氟苯酚(1.8g，9.42mmol)在丙酮(25ml)中的溶液中 加入碳酸钠(2.55g，20mmol)并且将该混合物搅拌5分钟。加入苄基 溴(1.2ml，10.3mmol)并且将该反应混合物在回流状态下加热20小 时。加入水(50ml)和乙酸乙酯(50ml)并且分离各相。用乙酸乙酯(2×50 ml)提取水相并且干燥合并的有机相(MgSO4)且在减压下蒸发而得到油 状物。通过快速色谱法纯化残余物(异辛烷/乙酸乙酯，5∶1)而得到标 题化合物(2.8g)。MS m/z(相对强度，70eV)282(M+，2)，280(M+， 2)，163(2)，161(2)，91(bp)。
制备28：
4-[3-(苄氧基)-2-氟苯基]-1-乙基哌啶-4-醇
按照制备5制备：1-(苄氧基)-3-溴-2-氟苯(2.8g，9.96mmol)， 干燥乙醚(100ml)，正-丁基锂(在己烷中2.5M，5.2ml，9.9mmol)， 4-乙基-1-吡啶酮(1.5ml，10.9mmol)。产率：2.1g。MS m/z(相对 强度，70eV)329(M+，30)，314(56)，296(20)，238(59)，91(bp)。
制备29：
3-(1-乙基-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-2-氟苯酚
按照制备4制备：4-[3-(苄氧基)-2-氟苯基]-1-乙基哌啶-4-醇 (1.9g，5.77mmol)。三氟乙酸(5ml)。产率：1.1g。MS m/z(相对 强度，70eV)221(M+，bp)，220(43)，206(95)，163(10)，110(14)。
制备30：
3-(1-乙基哌啶-4-基)-2-氟苯酚
按照实施例2制备：3-(1-乙基-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-2-氟苯 酚(1.1g，4.97mmol)，甲醇(20ml)，钯/碳(0.26g)和盐酸(0.2ml， 浓)。产率：1.1g。MS m/z(相对强度，70eV)223(M+，32)，222(17)， 209(13)，208(bp)84(20)。
制备31：
4-[2-氟-3-(三氟甲基)苯基]-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯
按照制备5制备：1-溴-2-氟-3-(三氟甲基)苯(8.0g，32.9mmol)， 干燥乙醚(100ml)，正-丁基锂(在己烷中2.5M，13ml，32.9 mmol)， 4-boc-1-吡啶酮(7.8g，39.5mmol)。产率：8.5g。MS m/z(相对强 度，70eV)363(M+，2)，289(44)，245(28)，191(23)，57(bp)。
下列试验用于评价本发明的化合物。
体内试验：行为
使用8个Digiscan活动监控器(RXYZM(16)TAO，Omnitech Electronics，Columbus，OH，USA)测量行为活动，该监控器与 Omnitech Difiscan分析仪和安装了数字接口插板的Apple Macintosh 计算机(NBDIO-24，National Instruments，USA)连接。每个活动监 控器由安装了光束传感器的四方金属框架(W×L＝40cm×40cm)组成。 在测量行为活动的过程中，将大鼠放入透明的丙烯酸笼(W×L×H， 40×40×30cm)中，随后将其置于活动监控器中。给每个活动监控器安 装三排红外光束传感器，每行由16个传感器组成。将两行沿笼底面的 前部和侧面呈90°角放置，并且将第三行置于底部上10cm处以便测 量垂直的活动。光束传感器间隔2.5cm。每个活动监控器固定于含有 弱室光和风扇的相同的声和光减弱箱中。
使用目标定向程序设计存储计算机软件(LabVIEW_，National instruments，Austin，TX，USA)。
在25Hz取样频率下记录并且使用定制存储的LABViewTM应用程序 采集来自每个活动监控器的代表动物每次位置(水平重心和垂直活动) 的行为数据。存储来自每次记录期间的数据并且就移动的距离进行分 析。每次行为记录期限从注射测试化合物后约4分钟开始持续60分钟。 对药物-稚鼠和药物预治疗的大鼠应用相似的行为记录操作步骤。在活 动监控器中的记录期限前10分钟以1.5mg/kg腹膜内的剂量使用d- 苯丙胺对大鼠给予预治疗。在活动监控器中的记录期限前90分钟以 0.7mg/kg腹膜内的剂量使用MK-801对大鼠给予预治疗。将结果表示 为计数/60分钟或计数/30分钟，以任意长度单位计。使用斯氏t-检 验与对照组进行统计学比较。在MK-801或苯丙胺预治疗的动物中，分 别与MK801或d-苯丙胺对照组进行统计学比较。
通过曲线拟合计算苯丙胺-诱导的运动过度减少的ED50值。就大部 分化合物而言，评价基于在一个单一实验中0、11、33和100μmol/kg 皮下剂量范围内与单独实验中的补偿剂量的16只苯丙胺预治疗的动 物。计算基于1小时测量的最后45分钟过程中的距离。将该距离相对 于苯丙胺-对照值校准并且通过最小二乘法极小化对函数“端值-(端值 -对照值)/(1+(剂量/ED50)斜率)”进行拟合。对4种参数配以如下限制： ED50＞0，0.5＜斜率＜3，端值＞0％的对照值。为了评估参数的置信水平， 使用每一测量值的随机均匀分布的均方重量(0-1)将拟合重复100 次。提供的ED50-范围覆盖这些值的95％。
体内试验：神经化学
在行为活动期限后，将大鼠断头处死并且迅速取出其脑且放在冰 冷的培养皿上。剖离并且冷冻每只大鼠的边缘前脑、纹状体、额皮质 和剩余的半球部分。随后对每个脑部分的单胺类及其代谢物进行分析。
通过HPLC分离和电化学检测对脑组织中的单胺递质物质(NA(去 甲肾上腺素)、DA(多巴胺)、5-HT(5-羟色胺))及它们的胺(NM(去甲变 肾上腺素(normethanephrine))、3-MT(3-甲氧酪胺))和酸 (DOPAC(3，4-二羟基苯基乙酸)、5-HIAA(5-羟基吲哚乙酸)、HVA(高香 草酸))代谢物进行定量。
分析方法基于专用于胺类或酸类的两种色谱分离。两种色谱系统 共用带有10-孔阀门的普通自动注射器和用于在两个系统上同时注射 的两个试样环。两种系统均安装了反相柱(Luna C18(2)，dp 3μm， 50*2mm i.d.，Phenomenex)，并且在玻璃炭精电极(MF-1000， Bioanalytical Systems，Inc.)上的两个电位处进行电化学检测。柱 流出液经T形连接流向检测池或废物出口。该步骤通过两个螺丝管阀 门进行，它们可以封闭废物或检测器出口。通过防止色谱前端达到检 测器，可以获得较好的检测条件。用于酸性系统的含水流动相(0.4ml/ 分钟)含有柠檬酸14mM、柠檬酸钠10mM、MeOH15％(v/v)和EDTA 0.1 mM。相对于Ag/AgCl参比物的检测电位为0.45和0.60V。用于胺系统 的含水离子配对流动相(0.5ml/分钟)含有柠檬酸5mM、柠檬酸钠10 mM、MeOH 9％(v/v)、MeCN 10.5％v/v)、癸磺酸0.45mM和EDTA 0.1 mM。相对于Ag/AgCl参比物的检测电位为0.45和0.65V。
通过曲线拟合计算纹状体中DOPAC增加的ED50值。就大部分化合 物而言，评价基于在一个单一实验中0、3.7、11、33和100μmol/kg 皮下剂量范围内的20只动物。将DOPAC水平相对于对照进行校准并且 通过最小二乘法极小化对函数“端值-(端值-对照值)/(1+(剂量/ED50) 斜率)”进行拟合。对4种参数配以如下限制：ED50＞0，0.5＜Slope＜3，350＜ 端值＜400或端值＝200％的对照值(参见表1)。为了评估参数的置信水 平，使用每一测量值的随机均匀分布的均方重量(0-1)将拟合重复 100次。提供的ED50-范围覆盖这些值的95％。
微量渗析
在整个实验过程中使用体重为220-320g的雄性Sprague-Dawley 大鼠。在实验前使动物分组寄居，每个笼中有5只动物，可以自由饮 水和摄食。使动物在手术和用于实验前到达后寄居至少1周。每只大 鼠仅使用1次进行微量渗析。
我们使用了I-成形探针(Santiago和Westerink 1990)的改进版 (Waters，Lofberg等.1994)。我们使用的透析膜为AN69聚丙烯腈/ 甲磺酸钠(sodiummethalylsulfonate)共聚物(HOSPAL；o.d./i.d. 310/220μm：Gambro，Lund，Sweden)。在背侧纹状体中，我们使用 探针接触3mm长的透析膜并且在额前皮质中相应的长度为2.5mm。 在异氟烷吸入麻醉下对大鼠进行手术操作，同时将其固定入Kopf定向 性仪器。相对于前卤计算纵坐标；背侧纹状体AP+1，ML±2.6，DV -6.3；Pf皮质，AP+3,2，8°ML±1,2，DV-4,0，按照(Paxinos 和Watson 1986)。在定向性指导下使透析探针定位于钻孔中并且用 phosphatine牙粘固粉粘固。
在透析实验前使大鼠分别寄居在笼中48小时，使它们从手术中恢 复并且将在下列实验过程中与麻醉药的药物相互作用的风险减少到最 低限度。在该期限过程中，大鼠可以自由摄食和饮水。在实验的当天， 通过旋臂(swiwel)将大鼠与微量灌注泵连接并且将其再放置(replace) 于可以在其受限范围内自由活动的笼中。灌注介质为含有按mmol/l 计的如下物质的林格溶液：NaCl；140，CaCl2；1.2，KCl；3.0，MgCl2； 1.0和抗坏血酸；0.04，按照(Moghaddam和Bunney 1989)。将该泵 设定至2μl/分钟的灌注速度并且每隔20分钟采集40μl样品。
将30μl各样品注入色谱仪。在带有串连固定的(2μl和20μl)试 样环管的10-孔注射器(Valco C10W)上同时在两个环上加载各脑透析 液样品。当阀门开启到注射状态时，20μl样品的主要部分被导入反 相离子对系统中以便进行多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NA)、去甲变肾 上腺素(normetanephrine)(NM)、3-甲氧基酪胺(3-MT)和5-羟色胺(5- 羟基色胺，5-HT)测定(大环)，而少量(2μl，来自小环)被引导在反相 注上以便对酸性单胺代谢物3，4-二-羟基苯基乙酸(DOPAC)、高香草酸 (HVA)和5-羟基吲哚乙酸(5-HIAA)进行色谱。两种EC检测器产生的电 流被转化成数字数据并且在PC上使用Chromelion软件(Dionex， Sunnyvale，California)进行评价。该方法的样品移交时间为4.5分 钟并且一般同时在系统上分析两次平行实验。在实验后，将大鼠与灌 注泵解除连接并且断头处死。迅速取出其脑并且固定入Neo-固定溶液 (Kebo-lab，Sweden)以便随后进行探针定位的检查。在G_teborg， Sweden的Animal Ethics Committee批准了应用于这些实验的操作步 骤。
Moghaddam，B.和B.S.Bunney(1989)。″微量渗析灌注溶液的离 子组成改变纹状体多巴胺的药理学反应和基础流出″-J.Neurochem. 53：652-654。
Paxinos，G.和C.Watson(1986)。定向性协调中的大鼠脑(The Rat Brain in Stereotaxic Coordinates).New York，Academic Press。
Santiago，M.和B.H.C.Westerink(1990)。″不同类型的大脑 内微量渗析探针记录的体内多巴胺释放的表征″- Naunyn-Schmiedeberg s Arch.Pharmacol.342：407-414。
Waters，N.，L.Lofberg，S.Haadsma-Svensson，K.Svensson， C.Sonesson和A.Carlsson(1994)。″多巴胺D2和D3受体拮抗剂在 多巴胺释放、体内受体取代和行为中的差别作用″-J Neural Transm Gen Sect 98(1)：39-55。
体内试验：口服生物利用度
在植入动脉和静脉导管后24小时进行实验。以12.5μmol/kg口 服或使用静脉导管以5μmol/kg静脉内给予测试化合物，n＝3/组。然 后在给予测试化合物后0、3、9、27、60、120、180、240、300和360 分钟的6小时过程中取动脉血样。将口服生物利用度计算为每只大鼠 口服给药后获得的AUC(曲线下的面积)与静脉内给药后获得的AUC之 比。按照下列方式计算参数AUC：
AUC：从0时到log/线性梯形法计算的最终测定的浓度之间血浆 浓度与时间关系曲线下的面积。
通过液相色谱法-质谱法(LC-MS)(Hewlett-Packard 1100MSD Series)测定测试化合物的水平。LC-MS组件包括四元泵系统、真空脱 气器、恒温自动采样器、恒温柱隔室、二极管阵列检测器和API-ES 喷雾室。使用HP ChemStation rev.A.06.03.系统进行数据处理。仪 器设定：MSD模式：选择的离子监测(SIM)MSD极性：正气体温度：350 ℃干燥气体：13,01/分钟喷雾器气体：50psig毛细管电压：5000 V Fragmentor电压：70V。
分析柱：Zorbax eclipse XDB-C8(4.6*150mm，5μm)，在20℃ 下。流动相为乙酸(0,03％)(溶剂A)和乙腈(溶剂B)。流动相的流速为 0,8ml/分钟。以12％的溶剂B开始等度洗脱4,5分钟，然后在4,5分 钟内使线性增加到60％。
提取操作步骤：用水将血浆样品(0,25-0.5ml)稀释至1ml并且 加入60pmol(100μl)内标(-)-OSU6241。通过添加25μl饱和Na2CO3 将pH调节至11。在混合后，用4ml二氯甲烷通过振摇20分钟提取 样品。在离心后将有机层转入小试管并且在氮气流中蒸发至干。然后 将残余物溶于120μl流动相(乙酸(0,03％)：乙腈，95∶5)以便进行 LC-MS分析(注射10μl)。对每一实施例监测选择的离子(MH+)，并且 对(-)-OSU6241((3-[3-(乙基磺酰基)苯基]-1-丙基哌啶)监测MH+ 296。
通过向空白血浆样品中添加适量的测试化合物制备1-500pmol 范围内的标准曲线。
体外试验：大鼠肝微体中的代谢稳定性
如F_rlin(1980)在Tox Appl Pharm.54(3)420-430中所述分离 大鼠肝微体，其中做最低限度的修改，例如，在匀化前加入3mL/g 肝的含有0.15M KCl的pH7.4的0.1M Na/K*PO4缓冲液(缓冲液1)， 将匀化物离心20分钟而非15分钟，将上清液以100.000g而非 105.000g超速离心并且将来自超速离心的沉淀物重新悬浮于1mL/g 肝的在缓冲剂1中的20％v/v 87％甘油中。
将在水中稀释的1μL的0.2或1mM测试物质和10μL 20mg/mL 大鼠肝微体与149μL 37℃的缓冲液1混合，并且通过添加40μL 4.1 mg/mL NADPH启动反应。在37℃下的加热块(LAB-LINE，MULTI-BLOK Heater或lab4you，700rpm的TS-100 Thermo振荡器)中温育0或 15分钟后，通过添加100μL纯乙腈终止反应。然后通过在4℃下排 除以10.000g离心(Heraeus，Biofuge fresco)10分钟后的沉淀物除 去蛋白质沉淀。使用HPLC-MS(Hewlett-Packard 1100MSD Series)与 使用0.03％甲酸和乙腈作为流动相(梯度)的Zorbax SB-C18柱 (2.1*150mm，5μm)或使用0.03％乙酸和乙腈作为流动相(梯度)的 Zorbax Eclipse XDB-C18(3*75mm，3.5μm)分析测试化合物。将15 分钟更新率turnover计算作为15分钟后消除的测试化合物分数，表 示为1分钟水平的百分比，即100*[0分钟时的测试化合物浓度-15分 钟时的浓度/0分钟时的浓度。
如F_rlin(1980)中所述进行肝微体的制备，在Crespi et Stresser(2000)和Renwick等(2001)中涉及了与肝微体一起温育的方 案。
参考文献
Crespi C L，和DM Stressser(2000)。“用于基于代谢的药物- 药物相互作用的荧光筛选”-J.Pharm.Tox.Meth.44.325-331
F_rlin L.(1980)，“Clophen A50，3-甲基胆蒽、孕烯诺龙-16aq- 腈和苯巴比妥对不同龄和性别的虹鳟鱼(salmo gairdneri)中肝微粒 体细胞色素P-450-依赖性单加氧酶系统的作用”-Tox Appl Pharm. 54(3)420-430。
Renwick，AB等.(2001)，“人肝CYP同种型对2，5-双(三氟甲 基)-7-苄氧基-4-三氟甲基香豆素的代谢：对CYP3A4选择性的证据”， Xenobiotica 31(4)：187-204。
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