制备呋咱并苯并咪唑及其晶型的方法
阅读：584发布：2023-03-02
专利汇可以提供制备呋咱并苯并咪唑及其晶型的方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 提供了用于制备具有式(I)的化合物和其药学上可接受的盐的方法，该方法包括使具有式(II)的化合物脱保护，其中每个R3独立地表示叔烷基基团，优选地其中每个R3是叔丁基。本发明还提供了可用于制备具有式(I)的化合物的中间体和用于制备这些中间体的方法。另外，本发明提供了具有式(I)的化合物的二氯化物盐的多晶型及其在 治疗 增殖性病症中的用途。，下面是制备呋咱并苯并咪唑及其晶型的方法专利的具体信息内容。
1.一种用于制备具有式I的化合物或其药学上可接受的盐的方法
该方法包括使具有式II的化合物脱保护
其中每个R3独立地表示叔烷基基团。
2.根据权利要求1所述的方法，其中每个R3是叔丁基。
3.根据权利要求1或权利要求2所述的方法，其中该方法包括通过以下方式制备具有式II的化合物的步骤：使具有式III的化合物
其中R1表示离去基团；并且
其中每个R3独立地表示叔烷基基团；
与具有式IV的化合物反应
4.根据权利要求3所述的方法，其中R1表示氯、溴、碘或磺酸酯。
5.根据权利要求3所述的方法，其中R1表示氯。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中每个R3是叔丁基。
7.根据权利要求3至6中任一项所述的方法，其中该方法另外包括通过以下方式制备具有式III的其中R1表示氯的化合物的步骤：使具有式V的化合物
其中R2表示OH；并且
其中每个R3独立地表示叔烷基基团
与具有式VI的化合物反应
1a
其中R 表示氯。
8.一种用于制备具有式II的化合物的方法，该方法包括使具有式III的化合物与具有式IV的化合物反应，如权利要求3至7中任一项所定义的。
9.根据权利要求8所述的方法，其中R1是氯。
10.一种用于制备具有式III的、其中R1表示氯的化合物的方法，该方法包括使具有式V的化合物与具有式VI的化合物反应，如权利要求7所定义的。
11.根据权利要求7至10中任一项所述的方法，其中使具有式V的化合物与具有式VI的化合物在二环己基碳二亚胺(DCC)的存在下反应。
12.根据权利要求7至10中任一项所述的方法，其中使具有式V的化合物与具有式VI的化合物在2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三磷杂环己烷-2,4,6-三氧化物 的
存在下反应。
13.根据权利要求12所述的方法，其中具有式V的化合物与具有式VI的化合物在
的存在下反应，以通过一锅反应产生具有式III的化合物。
14.根据权利要求1至7和11至13中任一项所述的方法，该方法包括使具有式II的化合物脱保护并获得作为如权利要求19至25和28至44中任一项所定义的结晶二氯化物盐的具有式I的化合物。
15.具有式II的化合物
其中每个R3独立地表示叔烷基基团。
16.具有式III的化合物
其中R1表示氯、溴、碘或磺酸酯，并且
每个R3独立地表示叔烷基基团。
17.根据权利要求16所述的具有式III的化合物，其中R1表示氯。
18.根据权利要求15所述的具有式II的化合物或根据权利要求16或权利要求17所述的具有式III的化合物，其中每个R3表示叔丁基。
19.具有式I的化合物的结晶二氯化物盐
20.根据权利要求19所述的结晶二氯化物盐，当使用CuKα辐射测量时，该结晶二氯化物盐具有在6.0度2θ(±0.2度2θ)包含峰的X射线粉末衍射图。
21.根据权利要求19所述的结晶二氯化物盐，当使用CuKα辐射测量时，该结晶二氯化物盐具有在6.0、9.4和9.9度2θ(±0.2度2θ)包含峰的X射线粉末衍射图。
22.根据权利要求19所述的结晶二氯化物盐，当使用CuKα辐射测量时，该结晶二氯化物盐具有在6.0、9.4、9.9、10.7、17.4、21.4、25.8和28.4度2θ(±0.2度2θ)包含峰的X射线粉末衍射图。
23.根据权利要求19所述的结晶二氯化物盐，当使用CuKα辐射测量时，该结晶二氯化物盐具有在6.0、9.4、9.9、10.7、11.6、11.9、17.4、21.4、22.4、23.0、24.2、24.6、25.8和28.4度
2θ(±0.2度2θ)包含峰的X射线粉末衍射图。
24.根据权利要求19至23中任一项所述的结晶二氯化物盐，其中该正交晶原始晶胞参数是
25.根据权利要求19至24中任一项所述的结晶二氯化物盐，该结晶二氯化物盐具有在-1 -1
1701、1665、1335、1241、1170、942、924、864、699和628cm (±2cm )处包含峰的IR谱，和/或具有参考TMS的13C CP MAS(14kHz)NMR谱和/或在[D6]-DMSO中的13C NMR谱，这些NMR谱包含下表中的峰：
[a]、[b]、[c]、[d]具有相同上标的信号可以交换。
26.一种用于制备如权利要求19至25中任一项所定义的结晶二氯化物盐的方法，该方法包括以下步骤：从乙腈、甲醇、乙醇、乙酸乙酯、或异丙醇或其混合物，或包含乙腈、甲醇、乙醇、乙酸乙酯和/或异丙醇的溶剂混合物结晶该具有式I的化合物的二氯化物盐。
27.一种用于制备如权利要求19至25中任一项所定义的结晶二氯化物盐的方法，其包括以下步骤：从乙腈、甲醇或乙醇或其混合物，或包含乙腈、甲醇和/或乙醇的溶剂混合物结晶该具有式I的化合物的二氯化物盐。
28.根据权利要求19所述的结晶二氯化物盐，当该结晶盐基本上不含水分时，当使用CuKα辐射测量时，该结晶二氯化物盐具有在3.9度2θ(±0.2度2θ)包含峰的X射线粉末衍射图。
29.根据权利要求19所述的结晶二氯化物盐，当该结晶盐基本上不含水分时，当使用CuKα辐射测量时，该结晶二氯化物盐具有在3.9、7.9和9.7度2θ(±0.2度2θ)包含峰的X射线粉末衍射图。
30.根据权利要求19所述的结晶二氯化物盐，当该结晶盐基本上不含水分时，当使用CuKα辐射测量时，该结晶二氯化物盐具有在3.9、7.9、9.7、11.2和23.9度2θ(±0.2度2θ)包含峰的X射线粉末衍射图。
31.根据权利要求19所述的结晶二氯化物盐，当该结晶盐基本上不含水分时，当使用CuKα辐射测量时，该结晶二氯化物盐具有在3.9、7.9、9.7、11.2、23.9、25.0和25.5度2θ(±
0.2度2θ)包含峰的X射线粉末衍射图。
32.根据权利要求19所述的结晶二氯化物盐，当该结晶盐暴露于100％湿度一段时间以使其不再吸收任何另外的水分时，当使用CuKα辐射测量时，该结晶二氯化物盐具有在2.7度
2θ(±0.2度2θ)包含峰的X射线粉末衍射图。
33.根据权利要求19所述的结晶二氯化物盐，当该结晶盐暴露于100％湿度一段时间以使其不再吸收任何另外的水分时，当使用CuKα辐射测量时，该结晶二氯化物盐具有在2.7、
8.3和9.4度2θ(±0.2度2θ)包含峰的X射线粉末衍射图。
34.根据权利要求19所述的结晶二氯化物盐，当该结晶盐暴露于100％湿度一段时间以使其不再吸收任何另外的水分时，当使用CuKα辐射测量时，该结晶二氯化物盐具有在2.7、
8.3、9.4、14.8和19.7度2θ(±0.2度2θ)包含峰的X射线粉末衍射图。
35.根据权利要求19所述的结晶二氯化物盐，当该结晶盐暴露于100％湿度一段时间以使其不再吸收任何另外的水分时，当使用CuKα辐射测量时，该结晶二氯化物盐具有在2.7、
8.3、9.4、14.8、19.7和24.1度2θ(±0.2度2θ)包含峰的X射线粉末衍射图。
36.根据权利要求19所述的结晶二氯化物盐，当使用CuKα辐射测量时，该结晶二氯化物盐具有在3.6度2θ(±0.2度2θ)包含峰的X射线粉末衍射图。
37.根据权利要求19所述的结晶二氯化物盐，当使用CuKα辐射测量时，该结晶二氯化物盐具有在3.6、4.0和8.1度2θ(±0.2度2θ)包含峰的X射线粉末衍射图。
38.根据权利要求19所述的结晶二氯化物盐，该结晶二氯化物盐具有在3.6、4.0、8.1、
9.4、11.0、21.1和24.5度2θ(±0.2度2θ)包含峰的X射线粉末衍射图。
39.根据权利要求19所述的结晶二氯化物盐，当使用CuKα辐射测量时，该结晶二氯化物盐具有在3.4度2θ(±0.2度2θ)包含峰的X射线粉末衍射图。
40.根据权利要求19所述的结晶二氯化物盐，当使用CuKα辐射测量时，该结晶二氯化物盐具有在3.4、4.0和8.1度2θ(±0.2度2θ)包含峰的X射线粉末衍射图。
41.根据权利要求19所述的结晶二氯化物盐，当使用CuKα辐射测量时，该结晶二氯化物盐具有在3.4、4.0、8.1、11.1、16.5和24.0度2θ(±0.2度2θ)包含峰的X射线粉末衍射图。
42.根据权利要求19所述的结晶二氯化物盐，当使用CuKα辐射测量时，该结晶二氯化物盐具有在3.0度2θ(±0.2度2θ)包含峰的X射线粉末衍射图。
43.根据权利要求19所述的结晶二氯化物盐，当使用CuKα辐射测量时，该结晶二氯化物盐具有在3.0、3.6和9.4度2θ(±0.2度2θ)包含峰的X射线粉末衍射图。
44.根据权利要求19所述的结晶二氯化物盐，当使用CuKα辐射测量时，该结晶二氯化物盐具有在3.0、3.6、9.4、11.1、12.7、15.3、23.6和24.5度2θ(±0.2度2θ)包含峰的X射线粉末衍射图。
45.一种药物组合物，其包含与药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂相组合的、药学上有效量的如权利要求19至25和28至44中任一项所定义的具有式I的化合物的结晶二氯化物盐。
46.如权利要求19至25和28至44中任一项所定义的具有式I的化合物的结晶二氯化物盐，其用于治疗增殖性病症或疾病。
47.如权利要求19至25和28至44中任一项所定义的具有式I的化合物的结晶二氯化物盐在制备用于治疗增殖性病症或疾病的药物中的用途。
48.一种治疗增殖性病症或疾病的方法，该方法包括将治疗有效量的如权利要求19至
25和28至44中任一项所定义的具有式I的化合物的结晶二氯化物盐施用于对其有需要的患者。
49.用于根据权利要求46使用的具有式I的化合物的结晶二氯化物盐、或根据权利要求
47所述的具有式I的化合物的结晶二氯化物盐的用途、或根据权利要求48所述的治疗增殖性病症或疾病的方法，其中该增殖性病症或疾病是选自以下项的肿瘤性疾病：上皮性肿瘤，鳞状细胞瘤，基底细胞瘤，移行细胞乳头状瘤和癌，腺瘤和腺癌，附属器和皮肤附件肿瘤，粘液表皮样肿瘤，囊性肿瘤，粘液性和浆液性肿瘤，导管、小叶和髓质肿瘤，腺泡细胞肿瘤，复杂的上皮性肿瘤，特化性腺肿瘤，副神经节瘤和血管球瘤，痣和黑色素瘤，软组织肿瘤和肉瘤，纤维瘤性肿瘤，粘液瘤性肿瘤，脂肪瘤性肿瘤，肌瘤性肿瘤，复杂的混合和基质肿瘤，纤维上皮性肿瘤，滑膜样肿瘤，间皮肿瘤，生殖细胞肿瘤，滋养细胞肿瘤，中肾瘤，血管瘤，淋巴管瘤，骨性和软骨瘤性肿瘤，巨细胞瘤，杂类骨肿瘤，牙源性肿瘤，神经胶质瘤，神经上皮瘤性肿瘤，脑膜瘤，神经鞘瘤，颗粒细胞瘤和肺泡软组织肉瘤，霍奇金和非霍奇金淋巴瘤，其他淋巴网状组织肿瘤，浆细胞瘤，肥大细胞瘤，免疫增殖性疾病，白血病，杂类骨髓增殖性病症，淋巴增殖性病症以及骨髓增生异常综合征。
50.用于根据权利要求46使用的具有式I的化合物的结晶二氯化物盐、或根据权利要求
47所述的具有式I的化合物的结晶二氯化物盐的用途、或根据权利要求48所述的治疗增殖性病症或疾病的方法，其中该增殖性病症或疾病是癌症。
51.用于根据权利要求46使用的具有式I的化合物的结晶二氯化物盐、或根据权利要求
47所述的具有式I的化合物的结晶二氯化物盐的用途、或根据权利要求48所述的治疗增殖性病症或疾病的方法，其中该增殖性病症或疾病是癌症，其中就累及的身体的器官和部位而言，该癌症选自脑、乳房、子宫颈、卵巢、结肠、直肠(包括结肠和直肠，即结直肠癌)、肺(包括小细胞肺癌、非小细胞肺癌、大细胞肺癌和间皮瘤)、内分泌系统、骨、肾上腺、胸腺、肝、胃、肠(包括胃癌)、胰腺、骨髓、血液恶性肿瘤(例如淋巴瘤、白血病、骨髓瘤或淋巴恶性肿瘤)、膀胱、尿路、肾、皮肤、甲状腺、脑、头、颈、前列腺和睾丸。
52.用于根据权利要求46使用的具有式I的化合物的结晶二氯化物盐、或根据权利要求
47所述的具有式I的化合物的结晶二氯化物盐的用途、或根据权利要求48所述的治疗增殖性病症或疾病的方法，其中该增殖性病症或疾病是选自下组的癌症，该组由以下组成：脑癌、乳腺癌、前列腺癌、子宫颈癌、卵巢癌、胃癌、结直肠癌、胰腺癌、肝癌、脑癌、神经内分泌癌、肺癌、肾癌、血液恶性肿瘤、黑色素瘤和肉瘤。
53.用于根据权利要求46使用的具有式I的化合物的结晶二氯化物盐、或根据权利要求
47所述的具有式I的化合物的结晶二氯化物盐的用途、或根据权利要求48所述的治疗增殖性病症或疾病的方法，其中该增殖性病症或疾病是肿瘤性疾病，该肿瘤性疾病是选自以下的脑肿瘤：神经胶质肿瘤和非神经胶质肿瘤，星形细胞瘤(包括多形性胶质母细胞瘤和未指定的神经胶质瘤)，少突神经胶质瘤，室管膜瘤，脑膜瘤，成血管细胞瘤，听神经瘤，颅咽管瘤，原发性中枢神经系统淋巴瘤，生殖细胞肿瘤，垂体瘤，松果体区肿瘤，原始神经外胚层瘤(PNET)，成神经管细胞瘤，血管周细胞瘤，包括脑膜瘤、脊索瘤和遗传驱动的脑肿瘤的脊髓肿瘤，该遗传驱动的脑肿瘤包括神经纤维瘤病、外周神经鞘瘤和结节性硬化症。
54.用于根据权利要求46使用的具有式I的化合物的结晶二氯化物盐、或根据权利要求
47所述的具有式I的化合物的结晶二氯化物盐的用途、或根据权利要求48所述的治疗增殖性病症或疾病的方法，其中该增殖性病症或疾病是肿瘤性疾病，该肿瘤性疾病是多形性胶质母细胞瘤。
55.用于根据权利要求50至54中任一项使用的具有式I的化合物的结晶二氯化物盐、或根据权利要求50至54中任一项所述的具有式I的化合物的结晶二氯化物盐的用途、或根据权利要求50至54中任一项所述的治疗增殖性病症或疾病的方法，其中该待治疗的癌症是实体瘤。
56.用于根据权利要求46至55中任一项使用的具有式I的化合物的结晶二氯化物盐、或根据权利要求46至55中任一项所述的具有式I的化合物的结晶二氯化物盐的用途、或根据权利要求46至55中任一项所述的治疗增殖性病症或疾病的方法，其中对增殖性病症或疾病的该治疗是对人的增殖性病症或疾病的治疗。
57.用于根据权利要求46至56中任一项使用的具有式I的化合物的结晶二氯化物盐、或根据权利要求46至56中任一项所述的具有式I的化合物的结晶二氯化物盐的用途、或根据权利要求46至56中任一项所述的治疗增殖性病症或疾病的方法，其中该具有式I的化合物的结晶二氯化物盐是如权利要求20至25中任一项所定义的。
58.用于根据权利要求46至56中任一项使用的具有式I的化合物的结晶二氯化物盐、或根据权利要求46至56中任一项所述的具有式I的化合物的结晶二氯化物盐的用途、或根据权利要求46至56中任一项所述的治疗增殖性病症或疾病的方法，其中该具有式I的化合物的结晶二氯化物盐是如权利要求28至44中任一项所定义的。
制备呋咱并苯并咪唑及其晶型的方法
[0001] 本发明涉及可用于制备某些可用于治疗增殖性病症的化合物的方法，以及可用于该方法的中间体。本发明还涉及如本文所述的具有式I的化合物的结晶盐、其制备方法、其药物组合物、以及其在治疗增殖性病症和疾病中的用途。
[0002] WO 2011/012577、WO 2012/098207、WO 2012/098203、WO 2012/113802、WO 2012/130887、WO 2015/173341和WO 2017/068182描述了具有以下结构(在此指定为式I)的化合物及其在治疗增殖性病症如癌症中的用途，以及其制备方法。
[0003]
[0004] 该化合物是具有活性部分的前药，该活性部分在下文示为具有式B的化合物。
[0005]
[0006] WO 2011/012577描述了产生具有式I化合物的方法，其中使用苄氧基氨基甲酸酯基团来保护赖氨酸部分上的氨基基团。现在已经发现使用其他氨基甲酸酯保护基团，特别是使用氨基甲酸叔丁酯(BOC)而不是苄氧基氨基甲酸酯保护基团为商业生产带来出人意料的优点。
[0007] 另外，当根据WO 2011/012577中描述的通用程序合成时，作为二氯化物盐的具有式I的化合物被作为无定形固体分离。现已发现具有式I的化合物的二氯化物盐可以以晶型分离，从而为药物加工提供优势。
[0008] 在第一方面，本发明提供了制备具有式I的化合物或其药学上可接受的盐的方法[0009]
[0010] 该方法包括使具有式II的化合物脱保护
[0011]
[0012] 其中每个R3独立地表示叔烷基基团。
[0013] 具有式II的化合物可以通过以下方式来制备：使具有式III的化合物
[0014]
[0015] 其中R1表示离去基团；并且
[0016] 其中每个R3独立地表示叔烷基基团；
[0017] 与具有式IV的化合物反应
[0018]
[0019] 具有式III的化合物(其中R1表示氯)可以通过以下方式来制备：使具有式V的化合物
[0020]
[0021] 其中R2表示OH；并且
[0022] 其中每个R3独立地表示叔烷基基团；
[0023] 与具有式VI的化合物反应
[0024]
[0025] 其中R1a表示氯。
[0026] 在另一个方面，本发明提供了用于制备具有式II的化合物的方法，该方法包括使具有式III的化合物与具有式IV的化合物反应。
[0027] 在另一个方面，本发明提供了用于制备具有式III的化合物(其中R1表示氯)的方法，该方法包括使具有式V的化合物与具有式VI的化合物反应。
[0028] 在另一个方面，本发明提供了具有式II的化合物。
[0029] 在另一个方面，本发明提供了具有式III的化合物。
[0030] R1表示离去基团，其可由具有式IV的化合物的苯并咪唑氮原子选择性取代。此类离去基团包括氯；溴；碘；活化的OH基团，例如磺酸酯(如甲磺酸酯、三氟甲磺酸酯、甲苯磺酸酯、乙磺酸酯、苯磺酸酯)；羰基，例如三氟乙酸酯；其他的反应性酯，例如硝酸酯和高氯酸酯、硝基苯基醚、亚磷酸烷基酯和磷酸烷基酯。优选地，R1是氯、溴或磺酸酯，更优选是溴或氯，最优选是氯。
[0031] 每个R3独立地表示叔烷基基团，例如，-C(R4)3，其中每个R4独立地表示C1-C8烷基。优选地，每个R4独立地表示甲基、乙基或丙基，更优选是甲基。最优选地，每个R3表示叔丁基。
[0032] 在一个实施例中，每个R3表示叔丁基并且R1表示氯、溴或磺酸酯。
[0033] 在另一个实施例中，每个R3表示叔丁基并且R1表示氯。
[0034] 步骤1：氨基化合物VI用氨基甲酸烷基酯保护的化合物V的酰化
[0035] 方案1
[0036]
[0037] 伯胺酰化形成酰胺的合适的反应条件是本领域技术人员熟知的。该反应通常涉及用合适的活化剂“活化”羧酸，参见例如，Montalbetti等人,Tetrahedron[四面体]61(2005),10827-10852。通常从羧酸形成酰胺可以通过酰基卤、酰叠氮、酰基咪唑、酐、或活性酯如芳族酯或磷酸酯进行。该反应可以经由包括以下的两个步骤进行：羧酸的活化，随后与酰胺偶联；或取决于试剂，通过一锅法进行。
[0038] 合适的酰基卤包括酰基氯、酰基氟和酰基溴，其中酰基氯通常是优选的。用于形成酰氯的合适试剂包括亚硫酰氯、草酰氯、三氯化磷、三氯氧磷、五氯化磷、氰尿酰氯、特戊酰氯和氯甲酸异丙酯。用于形成酰基氟的合适试剂包括在吡啶存在下的氰尿酰氟和在胡宁氏碱存在下的N,N-四甲基氟甲脒六氟磷酸盐(TFFH)，并且用于形成酰基溴的合适试剂包括1-溴-N,N-三甲基-1-丙烯基胺。
[0040] 用于形成活性酯的合适的试剂包括鏻试剂例如苯并三唑-1-基-氧基-三-(二甲基氨基)-鏻六氟磷酸盐(BOP)或苯并三唑-1-基-氧基-三-吡咯烷基-鏻六氟磷酸盐脲盐例如O-(1H-苯并三唑-1-基)-N,N,N’N’-四甲基脲六氟磷酸盐(HBTU)、
其四氟硼酸盐等效物(TBTU)或吡啶鎓类似物(HATU)，和2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三磷杂环己烷-2,4,6-三氧化物
其四氟硼酸盐等效物(TBTU)或吡啶鎓类似物(HATU)，和2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三磷杂环己烷-2,4,6-三氧化物
[0041] 肼通常用于形成酰叠氮并且羰基二咪唑(CDI)通常用于形成酰基咪唑。
[0042] 优选的活化剂是DIC、DCC和
[0043] 该反应可以包括助剂例如4-(N,N-二甲基氨基)吡啶(DMAP)或羟基苯并三唑。例如，当使用酐或 作为活化剂时，DMAP也可以包含在反应中并且可以改善转化，特别是当使用混合酐时。通常，技术人员能够确定助剂是否有用，并且选择合适的替代物。
[0044] 该反应可以在合适的溶剂中进行，通常是有机溶剂，包括酮(例如丙酮、甲基乙基酮(2-丁酮)或环己酮)、四氢呋喃(THF)或2-甲基四氢呋喃、甲酰胺(例如二甲基甲酰胺(DMF))、卤代烷(例如二氯甲烷(DCM))、酯(例如乙酸乙酯)、醚(例如二异丙醚(DIPE))、芳香族溶剂(例如对二甲苯和甲苯)、或其混合物。在本发明的上下文中，优选的是该溶剂是乙酸乙酯/DIPE、DMF、甲苯或DCM。通常，本领域技术人员能够选择合适的溶剂。
[0045] 在一个优选的实施例中，该活化剂是DCC，优选地其中该溶剂是DCM，任选地以DMAP作为助剂。在另一个优选的实施例中，该活化剂是 优选地其中该溶剂是甲苯，任选地以DMAP作为助剂。
[0046] 该反应可以在一种合适的碱例如2,4,6-三甲基吡啶(TMP)、或叔胺(例如二异丙基乙胺(DIPEA)或三乙胺(TEA))的存在或不存下进行。当该活化剂是酐例如DCC时，碱是任选的，在另一方面，当该活化剂是鏻试剂例如 时，碱的存在可以是有益的，并且在这种情况下，该碱优选是TEA。
[0047] 当该活化剂是酐例如DCC时，该反应通常通过两个步骤(活化和偶联)进行。通常来自第一步骤的反应产物例如通过过滤处理以除去所得的脲。在第一步骤中，反应通常在环境温度下进行，但可以是例如-20℃至溶剂的沸点。优选地该温度是-10℃至50℃，更优选15℃至25℃。换言之，该温度通常至少是-20℃，优选地至少-10℃，更优选地至少15℃。该温度将不会高于该溶剂的沸点并且优选地是高至50℃，更优选地是高至25℃。达到所需转化水平所需的时间将取决于使用的温度而变化，例如从15分钟高至几小时。在第二个步骤中，温度和反应时间的可能性范围与第一步骤相同。通常压力是环境压力。
[0048] 当该活化剂是鏻试剂例如 时，该反应可以通过一锅反应进行。这可以导致处理成本的降低，并且因此从商业生产的角度来看是有利的。一般而言，该反应在如下温度下进行，例如，-20℃至20℃，例如至少-20℃，例如高至20℃。当不使用助剂时，该反应优选地在该范围的较低端进行，这样可以提高反应选择性，例如在-20℃至0℃，优选地-15℃至-5℃，更优选地约-10℃进行。换言之，该温度通常至少是-20℃，优选至少-15℃。同样地，该温度通常是高至0℃，优选高至-5℃。当使用助剂例如DMAP时，该反应优选地在该范围的较高端例如在0℃至20℃，优选5℃至15℃，更优选约10℃进行。换言之，该温度通常至少是0℃，优选至少5℃。同样地，该温度通常是高至20℃，更优选高至15℃。达到所需转化水平所需的时间将取决于使用的温度而变化，并且可能会在例如从1小时到24小时之间变化。当使用助剂时，反应时间通常会更短，而且当不使用助剂时，反应时间通常会更长。通常压力是环境压力。
[0049] 具有式V和VI的化合物是可商购的。具有式V的化合物具有CAS登记号2483-69-8(R2是OH，R3是叔丁基)。具有式VI的化合物具有CAS登记号2631-71-2(R1a是氯)和23442-14-0(R1a是溴)。
[0050] 步骤2：在化合物III上的离去基团R1被化合物IV的苯并咪唑部分的亲核取代[0051] 方案2
[0052]
[0053] 要注意的是，由于分子内偶联，难以根据方案1通过化合物VI与化合物V的偶联制备具有式III的化合物(其中R1不是氯)。然而，具有式III的化合物(其中R1是溴)可以通过溴化，根据WO 2011/012577中例如实例1中描述的方法来制备。同样地，技术人员可以使用标准技术制备具有式III的化合物(其中R1是离去基团例如碘、活化的OH基团、羰基反应性酯、硝基苯基醚、烷基亚磷酸酯和烷基磷酸酯)。
[0054] 离去基团R1被具有式IV的化合物亲核取代的合适反应条件是本领域技术人员熟知的。
[0055] 该反应通常在合适的碱的存在下进行，尽管也可以使用中性条件，并且在一些情况下也可以使用酸性条件。碱性条件是优选的，其中该碱通常是无机碱例如碳酸盐，优选碳酸钾。要注意的是，亲核碱的使用可能导致腈基的不希望的水解，除非仔细控制条件并因此优选的是非亲核碱。一般而言，技术人员能够确定碱是否有用，选择合适的碱，并找到适宜的温和碱性条件以最小化并优选避免水解腈基。
[0056] 该反应可以在合适的碱，通常为有机碱，优选非质子溶剂(例如丙酮、DMSO或DMF，优选DMF)中进行。
[0057] 这些反应参数可以被本领域技术人员优化，但是通常该温度是例如25℃至45℃，优选35℃至42℃，例如通常是至少25℃，优选至少35℃，例如通常高至45℃，优选高至42℃。达到所需转化水平所需的时间将取决于使用的温度而变化，其可以是例如1小时至24小时。
使用较高温度时转化通常会更快。通常压力是环境压力。
使用较高温度时转化通常会更快。通常压力是环境压力。
[0058] 具有式IV的化合物可以使用WO 2011/012577和WO 2004/103994中描述的方法来获得。
[0059] 步骤3：裂解化合物II的氨基甲酸酯保护基团以获得化合物I
[0060] 方案3
[0061]
[0062] 具有式II的化合物的脱保护涉及除去-C(＝O)OR3保护基团以留下伯胺基团而不改变该分子的任何其他部分。用于从伯胺基团除去氨基甲酸酯保护基团(包括叔丁基氨基甲酸酯)的合适的条件和试剂详细地描述于保护基团手册“Greene's Protective Groups in Organic Synthesis[有机合成中的格林氏保护基团]”,第五版Peter G.M.Wuts(John Wiley&Sons,Inc.[约翰威利父子公司],美国新泽西州霍博肯,2014)。鉴于本领域的广泛知识，技术人员能够选择合适的条件、溶剂和试剂来进行该脱保护步骤。
[0063] 通常该反应包括能够裂解羰基-氮键的亲核试剂。
[0064] 通常在酸性条件下进行脱保护，但是在上述手册中也描述了合适的非酸性条件。合适的酸包括盐酸、三氟乙酸、碘化三甲基甲硅烷、溴化锌，优选盐酸。脱保护可以通过氨基甲酸酯的水解而发生，尽管在无水条件下的脱保护也在上述手册中进行了描述。
[0065] 该反应可以在合适的溶剂中进行，通常为有机溶剂例如非质子溶剂(优选丙酮或四氢呋喃)。
[0066] 该温度可以是在-20℃和该溶剂的沸点之间，例如0℃至50℃。通常，该温度是例如20℃至30℃，例如至少20℃，例如高至30℃。达到所需转化水平所需的时间将取决于使用的温度而变化，并且可以是例如高至25小时。通常压力是环境压力。
[0067] 具有式I的化合物可以根据WO 2011/012577中描述的方法转化成具有式I的化合物的药学上可接受的盐。这些盐是例如作为酸加成盐形成，优选与有机或无机酸形成。适合的无机酸是例如氢卤酸(诸如盐酸)、硫酸、或磷酸。适合的有机酸是例如羧酸、膦酸、硫酸或氨基磺酸，例如乙酸、丙酸、辛酸、癸酸、十二烷酸、乙醇酸、乳酸、富马酸、琥珀酸、己二酸、庚二酸、辛二酸、壬二酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、氨基酸(诸如谷氨酸或天冬氨酸)、马来酸、羟基马来酸、甲基马来酸、环己烷羧酸、金刚烷羧酸、苯甲酸、水杨酸、4-氨基水杨酸、邻苯二甲酸、苯乙酸、扁桃酸、肉桂酸、甲烷-或乙烷-磺酸、2-羟基乙烷磺酸、乙烷-1,2-二磺酸、苯磺酸、2-萘磺酸、1,5-萘-二磺酸、2-甲基苯磺酸、3-甲基苯磺酸或4-甲基苯磺酸、甲基硫酸、乙基硫酸、十二烷基硫酸、N-环己基氨基磺酸、N-甲基-氨基磺酸、N-乙基-氨基磺酸或N-丙基-氨基磺酸、或其他的有机质子酸(诸如抗坏血酸)。
[0068] 优选的药学上可接受的盐是氯化物盐，特别是具有式I的化合物的二氯化物盐。
[0069] 本发明的方法还可以包括适用时使用具有式II、III、IV、V和VI的化合物的盐，并且对具有式II、III、IV、V和VI的化合物的提及包括其盐。
[0070] 在WO 2011/012577中描述了用于产生具有式I的化合物的方法，其中苄基酯基团被用于保护赖氨酸部分上的胺基团。披露的本方法提供了具有约90％(面积)纯度、约81％对映体过量(ee)和约50％产率的具有式I的化合物，如对比实例1中所示。出人意料的是，现在已经发现，通过使用叔丁氧基羰基酯来保护氨基，可以以高纯度和显著更高产率获得具有式I的化合物。
[0071] 表1：数据比较
[0072] 产率 纯度 光学纯度对比实例1 50％ 90％-91％ 81％ee
实例3 83％ 99.6％ >99.6％ee
实例3 83％ 99.6％ >99.6％ee
[0073] 还发现具有式II的化合物可以在一锅反应中脱保护并作为二氯化物盐结晶成有利的晶型(在此称为“晶型E”)。这可以通过进行以下的脱保护步骤来实现：使用HCl和甲醇作为溶剂，随后在0℃至10℃、优选3℃至8℃、更优选约5℃搅拌。换言之，该温度通常为至少0℃，优选至少3℃。同样地，该温度通常高至10℃，优选高至8℃。
[0075] 晶型E
[0076] 具有用于将二氯化物盐配制成固体配制品以施用于患者施用于患者的有利物理性质的一种多晶型是在此称为“晶型E”的多晶型。已经发现晶型E在常温下示出高的多晶型稳定性(参见实例5a)，它表现出高达85％RH的化合物的1％吸水率(参见实例5f)和良好的溶解性(参见实例5g)。许多其他多晶型(包括实例中描述的晶型F和晶型G)未示出多晶型稳定性并且通常不易用于药物加工。
[0077] 因此，在一个实施例中，当使用CuKα辐射测量时，具有式I的化合物的结晶盐(晶型E)具有在6.0度2θ(±0.2度2θ)包含峰的XRPD图。优选地，具有式I的化合物的结晶二氯化物盐(晶型E)具有在6.0、9.4和9.9度2θ(±0.2度2θ)包含峰的XRPD图。更优选地，具有式I的化合物的结晶盐(晶型E)具有在6.0、9.4、9.9、10.7、17.4、21.4、25.8和28.4度2θ(±0.2度2θ)包含峰的XRPD图。甚至更优选地，具有式I的化合物的结晶盐(晶型E)具有在6.0、9.4、9.9、10.7、11.6、11.9、17.4、21.4、22.4、23.0、24.2、24.6、25.8和28.4度2θ(±0.2度2θ)包含峰的XRPD图。
[0078] 优选地，正交晶原始晶胞参数被定义为
[0079] 具有式I的化合物的结晶二氯化物盐(晶型E)也可以使用IR和/或固态NMR数据结合一个或多个XRPD峰来确认。在这种情况下，该结晶二氯化物盐(晶型E)优选地具有在1701、1665、1335、1241、1170、942、924、864、699和628cm-1(±2cm-1)包含峰的IR谱，这些峰被鉴定为将晶型E与其他的多晶型区别的峰。同样地，该结晶二氯化物盐优选地具有参考外部四甲基硅烷(TMS)标准测量的13C CP MAS(14kHz)NMR谱和/或参考([D6]DMSO，内标)的在[D6]-DMSO中的13C NMR谱，如在下表(表5)中所示。
[0080] 在另一个实施例中，具有式I的化合物的结晶二氯化物盐(晶型E)通过以下来表征：在6.0度2θ(±0.2度2θ)包含峰的XRPD图以及以上IR谱峰。在另一个实施例中，晶型E以如下来表征：在6.0度2θ(±0.2度2θ)包含峰的XRPD图，以及以上IR谱峰，和/或下表(表5)中的两组NMR谱峰的至少一个。在另一个实施例中，晶型E以如下来表征：在6.0、9.4和9.9度2θ(±0.2度2θ)包含峰的XRPD图，以及以上IR谱峰，和/或下表(表5)的两组NMR谱峰中的至少一个。在另一个实施例中，晶型E以如下来表征：在6.0、9.4、9.9、10.7、17.4、21.4、25.8和28.4度2θ(±0.2度2θ)包含峰的XRPD图，以及以上的IR谱峰，和/或下表(表5)的两组NMR谱峰中的至少一个。在另一个实施例中，晶型E以如下来表征：在6.0、9.4、9.9、10.7、11.6、
11.9、17.4、21.4、22.4、23.0、24.2、24.6、25.8和28.4度2θ(±0.2度2θ)包含峰的XRPD图，以及以上的IR谱峰，和/或下表(表5)的两组NMR谱峰中的至少一个。
11.9、17.4、21.4、22.4、23.0、24.2、24.6、25.8和28.4度2θ(±0.2度2θ)包含峰的XRPD图，以及以上的IR谱峰，和/或下表(表5)的两组NMR谱峰中的至少一个。
[0081] 同样地，上述涉及表征晶型E的不同方式的任何实施例可以以任何组合相互组合。
[0082] 晶型E可以通过冷却结晶例如伴随搅拌从2-丁酮/甲醇、1,4-二噁烷/甲醇或乙酸乙酯/甲醇的混合物中制备。它也可以通过使具有式I的化合物在醇如甲醇、乙醇或2-丙醇、乙酸乙酯或乙腈或这些溶剂的混合物中浆化来获得。也可以由溶剂混合物获得，该溶剂混合物由上述溶剂之一和另一种溶剂例如醚(例如叔丁基甲基醚、1,4-二噁烷)、酮(例如2-丁酮)或卤烃(例如1,2-二氯乙烷)构成。它也可以由具有式I的化合物(游离碱)通过在合适的溶剂中用氯化氢处理而获得。转化时间取决于温度，并且通常温度越高，结晶越快。例如，在室温下可能需要几天，有时高至两周，而在回流时，结晶可以在几个小时内完成。
[0083] 在另一个方面，本发明提供了用于制备具有式I的化合物的结晶盐(晶型E)的方法，该方法包括以下步骤：从溶剂中结晶具有式I的化合物的二氯化物盐的步骤，其中所述溶剂是乙腈、甲醇、乙醇、乙酸乙酯、异丙醇或其混合物，或包含乙腈、甲醇、乙醇、乙酸乙酯和/或异丙醇的溶剂混合物。优选地，该溶剂是乙腈、甲醇、或乙醇或其混合物，或包含乙腈、甲醇和/或乙醇的溶剂混合物。优选的溶剂混合物是乙腈、甲醇和乙醇中的两者或三者的混合物，以及甲醇和甲基叔丁基醚、甲醇和甲苯、甲醇和乙腈、甲醇和2-丁酮、甲醇和二噁烷、以及甲醇和乙酸乙酯的混合物。更优选的溶剂混合物是乙腈、甲醇和乙醇中的两者或三者的混合物，以及甲醇和甲基叔丁基醚、甲醇和甲苯、以及甲醇和乙腈的混合物。在一个实施例中，该溶剂是乙腈或包含乙腈的溶剂混合物。在另一个实施例中，该溶剂是甲醇或包含甲醇的溶剂混合物。在另一个实施例中，该溶剂是乙醇或包含乙醇的溶剂混合物。在另一个实施例中，该溶剂是乙腈、甲醇或乙醇或其混合物。
[0084] 该方法可包括将溶剂和作为二氯化物盐的具有式I的化合物组合并使具有式I的化合物的二氯化物盐例如通过使混合物静置而结晶的步骤。可替代地，该方法可包括将溶剂和作为游离碱的具有式I的化合物与盐酸一起组合并使具有式I的化合物的二氯化物盐例如通过使混合物静置而结晶的步骤。
[0085] 在另一个方面，本发明提供了一种药物组合物，其包含与一种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂相组合的、药学上有效量的具有式I的化合物的结晶二氯化物盐(晶型E)。
[0086] 在另一个方面，本发明提供了用于治疗增殖性病症或疾病的、具有式I的化合物的结晶二氯化物盐(晶型E)。
[0087] 在另一个方面，本发明提供了具有式I的化合物的晶体二氯化物盐(晶型E)在制备用于治疗增殖性病症或疾病的药物中的用途。
[0088] 在另一个方面，本发明提供了治疗增殖性病症或疾病的方法，该方法包括将具有式I的化合物的结晶二氯化物盐(晶型E)施用于对其有需要的施用于对其有需要的患者。
[0089] 系统A+M
[0090] 可以用于将二氯化物盐配制成固体配制品以施用于患者的另一种晶型是此处称为“系统A+M”的晶型。
[0091] 具有式I的化合物的二氯化物盐的这种晶型(系统A+M)是不常见的，其在于它具有吸收水并以可逆且可预测的方式改变其多晶型的能力。在这个意义上说，晶型是一种多晶型系统，其取决于多晶型系统所暴露的湿度展现出特定的多晶型。具体而言，多晶型系统在0和100％相对湿度(RH)下展现出特定的多晶型(除非另有说明，所有相对湿度的提及均指
1atm/25℃的相对湿度)，两种极端之间具有连续的可再现多晶型。虽然系统A+X展现出不同的多晶型(水合物)，但系统本身已被发现是多晶型稳定的，其在于多晶型变化是可逆的和可预测的。另外它示出了良好的溶解性(参见实例8d)。许多其他多晶型(包括实例中描述的晶型F和晶型G)未示出多晶型稳定性并且通常不易用于药物加工。
1atm/25℃的相对湿度)，两种极端之间具有连续的可再现多晶型。虽然系统A+X展现出不同的多晶型(水合物)，但系统本身已被发现是多晶型稳定的，其在于多晶型变化是可逆的和可预测的。另外它示出了良好的溶解性(参见实例8d)。许多其他多晶型(包括实例中描述的晶型F和晶型G)未示出多晶型稳定性并且通常不易用于药物加工。
[0092] 多晶型系统可以通过使晶型经历零湿度直到晶型基本上不含水分来识别。然后晶型将展现在此称为晶型A0的多晶型。可替代性，多晶型系统可以通过使晶型经受高湿度(≥95％Rh)直到多晶型不再吸收任何进一步的水分来识别。然后该晶型将展现在此称为混合物A2+M11的多晶型，其为两种多晶型A2和M11的混合物。其他多晶型和晶型混合物存在于这两种极端形式之间，取决于晶型内存在的水分量。
[0093] 因此，在一个实施例中，本发明提供了具有式I的化合物的结晶二氯化物盐(晶型A0)，当该结晶盐基本上不含水分时，当使用CuKα辐射测量时，该结晶二氯化物盐具有在3.9度2θ(±0.2度2θ)包含峰的XRPD图。优选地，具有式I的化合物的结晶二氯化物盐(晶型A0)具有在3.9、7.9和9.7度2θ(±0.2度2θ)包含峰的XRPD图。更优选地，具有式I的化合物的结晶二氯化物盐(晶型A0)具有在3.9、7.9、9.7、11.2和23.9度2θ(±0.2度2θ)包含峰的XRPD图。甚至更优选地，具有式I的化合物的结晶二氯化物盐(晶型A0)具有在3.9、7.9、9.7、11.2、23.9、25.0和25.5度2θ(±0.2度2θ)包含峰的XRPD图。
[0094] “基本上无水分”是指例如零或可忽略的水分，例如0.1％水分(w/w)或更低，优选零水分。这可以通过在约195℃将晶型加热例如至少2.5h或更长时间(例如至少4h)来实现。
[0095] 在另一个实施例中，本发明提供了具有式I的化合物的结晶二氯化物盐(混合物A2+M11)，当该结晶盐被暴露于100％湿度中一段时间以使其不再吸收任何另外的水分时，当使用CuKα辐射测量时，该结晶二氯化物盐具有在2.7度2θ(±0.2度2θ)包含峰的XRPD图。优选地，具有式I的化合物的结晶二氯化物盐(混合物A2+M11)具有在2.7、8.3和9.4度2θ(±0.2度2θ)包含峰的XRPD图。更优选地，具有式I的化合物的结晶二氯化物盐(混合物A2+M11)具有在2.7、8.3、9.4、14.8和19.7度2θ(±0.2度2θ)包含峰的XRPD图。甚至更优选地，具有式I的化合物的结晶二氯化物盐(混合物A2+M11)具有在2.7、8.3、9.4、14.8、19.7和24.1度2θ(±0.2度2θ)包含峰的XRPD图。
[0096] 使晶型经受高湿度(≥95％RH)直至多晶型不再吸收任何进一步的水分可能需要使晶型在25℃经受≥95％RH至少一周或甚至更长时间，例如2周或更长。
[0097] 在中等水平的湿度下在该系统中的三种常见的多晶型在本文中被称为混合物A1+M1(其通常以约1％至约20％Rh存在)、混合物A1+M4(通常为约10％至约50％Rh)、和晶型M3+M5(通常为约50％至约90％RH)。
[0098] 因此，在另一个实施例中，本发明提供了具有式I的化合物的结晶二氯化物盐(混合物A1+M1)，当使用CuKα辐射测量时，该结晶二氯化物盐具有在3.6度2θ(±0.2度2θ)包含峰的XRPD图。优选地，具有式I的化合物的结晶二氯化物盐(混合物A1+M1)具有在3.6、4.0和8.1度2θ(±0.2度2θ)包含峰的XRPD图。更优选地，具有式I的化合物的结晶二氯化物盐(混合物A1+M1)具有在3.6、4.0、8.1、9.4、11.0、21.1和24.5度2θ(±0.2度2θ)包含峰的XRPD图。
[0099] 同样地，在另一个实施例中，本发明提供了具有式I的化合物的结晶二氯化物盐(混合物A1+M4)，当使用CuKα辐射测量时，该结晶二氯化物盐具有在3.4度2θ(±0.2度2θ)包含峰的XRPD图。优选地，具有式I的化合物的结晶二氯化物盐(混合物A1+M4)具有在3.4、4.0和8.1度2θ(±0.2度2θ)包含峰的XRPD图。更优选地，具有式I的化合物的结晶二氯化物盐(混合物A1+M4)具有在3.4、4.0、8.1、11.1、16.5和24.0度2θ(±0.2度2θ)包含峰的XRPD图。
[0100] 同样地，在另一个实施例中，本发明提供了具有式I的化合物的结晶二氯化物盐(晶型M3+M5)，当使用CuKα辐射测量时，该结晶二氯化物盐具有在3.0度2θ(±0.2度2θ)包含峰的XRPD图。优选地，具有式I的化合物的结晶二氯化物盐(晶型M3+M5)具有在3.0、3.6和9.4度2θ(±0.2度2θ)包含峰的XRPD图。更优选地，具有式I的化合物的结晶二氯化物盐(晶型M3+M5)具有在3.0、3.6、9.4、11.1、12.7、15.3、23.6和24.5度2θ(±0.2度2θ)包含峰的XRPD图。
[0101] 在中等湿度水平下的系统内的其他多晶型以及系统的分离组分的表征在实例中被描述和表征。要注意的是，晶型F和G不是系统A+M的一部分，但会在单个组分的分离过程中发生。
[0102] 以上描述的涉及表征系统A+M的不同方式的任何实施例可以以任何组合相互组合。
[0103] 在另一个方面，本发明提供了一种药物组合物，其包含与一种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂相组合的、药学上有效量的具有式I的化合物的结晶二氯化物盐(系统A+M)。
[0104] 在另一个方面，本发明提供了用于治疗增殖性病症或疾病的、具有式I的化合物的结晶二氯化物盐(系统A+M)。
[0105] 在另一个方面，本发明提供了具有式I的化合物的晶体二氯化物盐(系统A+M)在制备用于治疗增殖性病症或疾病的药物中的用途。
[0106] 在另一个方面，本发明提供了治疗增殖性病症或疾病的方法，该方法包括将具有式I的化合物的结晶二氯化物盐(系统A+M)施用于对其有需要的患者。
[0107] 如在此在治疗疾病或病症的上下文中所使用的术语“治疗”总体上涉及人或动物(例如在兽医应用)的治疗和疗法，其中获得一些希望的治疗效果，例如，抑制疾病或病症的进展，并且包括降低进展的速率、停止进展的速率、缓解疾病或病症的症状、改善疾病或病症、以及治愈疾病或病症。也包括作为预防措施的治疗(即，预防)。例如，用于尚未发展出所述疾病或病症、但处于发展所述疾病或病症风险的患者，被术语“治疗”涵盖。例如，治疗包括癌症的预防、降低癌症发病率、缓解癌症症状等。
[0109] 如本领域技术人员熟知的，具有式I的化合物或其药学上可接受的衍生物可以药物组合物的形式施用。适合的组合物和剂量例如披露于WO 2004/103994 A1第35-39页中，该专利通过引用明确地结合在此。组合物可以经鼻、经颊、经直肠、口服或通过胃肠外施用。肠胃外施用包括例如静脉内、肌内和皮下施用温血动物，尤其是人。更具体地，优选用于静脉内施用或口服施用的组合物。如果适用的话，组合物包含活性成分和一种或多种药学上可接受的赋形剂。药学上可接受的赋形剂包括本领域技术人员已知的稀释剂、载体和助流剂等。用于口服施用的组合物的实例包括但不限于：含有1mg活性成分、98mg稀释剂例如甘露醇和1mg助流剂例如硬脂酸镁或5mg活性成分、94mg稀释剂例如甘露醇和1mg助流剂例如硬脂酸镁的硬胶囊。例如，对于静脉内施用，活性成分可以被冻干并且在施用之前立即用合适的稀释剂例如盐溶液重构。
[0110] 具有式I的化合物或其药学上可接受的衍生物可以单独或与一种或多种其他治疗剂组合施用。可能的组合疗法可采取以下形式：固定组合，或者本发明的化合物与交错或彼此独立施用的一种或多种其他治疗剂的施用，或者固定组合与一种或多种其他治疗剂的组合施用。
[0111] 除此之外或另外地，具有式I的化合物或其药学上可接受的衍生物可以与化学疗法(细胞毒性疗法)、靶向疗法、内分泌疗法、生物制剂、放射疗法、免疫疗法、手术介入或这些疗法的组合结合施用以用于肿瘤疗法。如上所述，在其他治疗策略的背景下长期疗法与辅助疗法同样可行。其他可能的疗法是在肿瘤消退之后维持患者状态的疗法或甚至例如在处于风险中的患者中的化学预防疗法。
[0112] 根据式(I)的化合物可以用于人或动物体的预防或尤其是治疗性处理，特别是用于治疗增殖性疾病或病症，例如肿瘤性疾病。此类肿瘤性疾病的实例包括但不限于：上皮性肿瘤，鳞状细胞瘤，基底细胞瘤，移行细胞乳头状瘤和癌，腺瘤和腺癌，附属器和皮肤附件肿瘤，粘液表皮样肿瘤，囊性肿瘤，粘液性和浆液性肿瘤，导管、小叶和髓质肿瘤，腺泡细胞肿瘤，复杂的上皮性肿瘤，特化性腺肿瘤，副神经节瘤和血管球瘤，痣和黑色素瘤，软组织肿瘤和肉瘤，纤维瘤性肿瘤，粘液瘤性肿瘤，脂肪瘤性肿瘤，肌瘤性肿瘤，复杂的混合和基质肿瘤，纤维上皮性肿瘤，滑膜样肿瘤，间皮肿瘤，生殖细胞肿瘤，滋养细胞肿瘤，中肾瘤，血管瘤，淋巴管瘤，骨性和软骨瘤性肿瘤，巨细胞瘤，杂类骨肿瘤，牙源性肿瘤，神经胶质瘤，神经上皮瘤性肿瘤，脑膜瘤，神经鞘瘤，颗粒细胞瘤和肺泡软组织肉瘤，霍奇金和非霍奇金淋巴瘤，其他淋巴网状组织肿瘤，浆细胞瘤，肥大细胞瘤，免疫增殖性疾病，白血病，杂类骨髓增殖性病症，淋巴增殖性病症以及骨髓增生异常综合征。
[0113] 在一个尤其优选的实施例中，该疾病是癌症。就累及的身体的器官和部位而言，癌症的实例包括但不限于：脑、乳房、子宫颈、卵巢、结肠、直肠(包括结肠和直肠，即结直肠癌)、肺(包括小细胞肺癌、非小细胞肺癌、大细胞肺癌和间皮瘤)、内分泌系统、骨、肾上腺、胸腺、肝、胃、肠(包括胃癌)、胰腺、骨髓、血液恶性肿瘤(例如淋巴瘤、白血病、骨髓瘤或淋巴恶性肿瘤)、膀胱、尿路、肾、皮肤、甲状腺、脑、头、颈、前列腺和睾丸。
[0114] 优选地，该癌症选自下组，该组由以下组成：脑癌(例如胶质母细胞瘤)、乳腺癌、前列腺癌、子宫颈癌、卵巢癌、胃癌、结直肠癌、胰腺癌、肝癌、脑癌、神经内分泌癌、肺癌、肾癌、血液恶性肿瘤、黑色素瘤和肉瘤。
[0115] 在一个实施例中，待治疗的癌症是肿瘤，优选实体瘤。
[0116] 在另一个实施例中，该肿瘤性疾病是脑肿瘤，例如，脑瘤，该脑肿瘤包括但不限于神经胶质肿瘤和非神经胶质肿瘤，星形细胞瘤(包括多形性胶质母细胞瘤和未指定的神经胶质瘤)，少突神经胶质瘤，室管膜瘤，脑膜瘤，成血管细胞瘤，听神经瘤，颅咽管瘤，原发性中枢神经系统淋巴瘤，生殖细胞肿瘤，垂体瘤，松果体区肿瘤，原始神经外胚层瘤(PNET)，成神经管细胞瘤，血管周细胞瘤，包括脑膜瘤、脊索瘤和遗传驱动的脑肿瘤的脊髓肿瘤，该遗传驱动的脑肿瘤包括神经纤维瘤病、外周神经鞘瘤和结节性硬化症。优选地，脑肿瘤是指胶质母细胞瘤(还称为多形性胶质母细胞瘤)。
[0117] 剂量可以在很宽的范围内变化，并且当然将在每个特定情况下适合个体要求。通常，在口服施用的情况下，每人约10mg至1000mg具有通式I的化合物的日剂量应该是合适的，尽管也可以在必要时超出或减少上述上限。
[0118] 术语“具有式I的化合物的二氯化物盐”和“具有式I的化合物的二盐酸盐”可互换使用，并且均指具有式I的化合物的2xHCl盐。
[0119] 本文引用了许多出版物以更全面地描述和披露本发明和本发明所属领域的现状。这些参考文献各自通过引用以其全文在此结合入本披露中，其程度如同每个单独的参考文献特定地并且单独地指明为通过引用而结合。
[0121] 图1
[0122] 图1示出了NMR分配的原子编号。
[0123] 图2
[0124] 图2示出了具有式I的化合物的二氯化物盐的晶型E在室温下的X射线粉末衍射(XRPD)衍射图。
[0125] 图3
[0126] 图3示出具有式I的化合物的二氯化物盐的晶型E的Pawley(WPPD)计算的图形表示。呈现了全粉末图分解计算的图形表示，其中上面的线示出来自高分辨率XRPD的观察数据。黑色中线表示计算出的粉末图，并且图的最底部的黑色棒状表示具有h、k、l指数的峰值位置。灰色底线表示计算的与(基线校正的)观察点之间的差异。
[0127] 图4
[0128] 图4示出了具有式I的化合物的二氯化物盐的晶型E的热重分析(TGA)，其具有在约130℃(±2℃)和276℃(±2℃)处的吸热峰。
[0129] 图5
[0130] 图5示出了具有式I的化合物的二氯化物盐的晶型E的差示扫描量热法(DSC)，其具有在约130℃(±2℃)和276℃(±2℃)处的吸热峰值以及高于这个温度的分解。
[0131] 图6
[0132] 图6示出了使用温度廓线25→200→25℃；10℃/min的加热速率和快速冷却的具有式I的化合物的二氯化物盐的晶型E的循环DSC。吸热(130℃±2℃)表明固体-固体转变，这是可逆的(冷却时在97℃±2℃放热)。
[0133] 图7
[0134] 图7示出了具有式I的化合物的二氯化物盐在180℃的结晶高温晶型E1的XRPD衍射图。
[0135] 图8
[0136] 图8示出了具有式I的化合物的二氯化物盐的晶型E的具有式I的化合物的FTIR谱。
[0137] 图9
[0138] 图9示出了具有式I的化合物的二氯化物盐的晶型E的FTIR谱在1830cm-1与400cm-1之间的放大。
[0139] 图10
[0140] 图10示出了具有式I的化合物的二氯化物盐的晶型E的魔角旋转固态碳13{质子去耦}核磁共振(13C{1H}MAS-NMR)谱。
[0141] 图11
[0143] 图12
[0144] 图12示出了晶型A0的XRPD衍射图。
[0145] 图13
[0146] 图13示出了晶型A1的XRPD衍射图。
[0147] 图14
[0148] 图14示出了混合物A1+M1的XRPD衍射图。
[0149] 图15
[0150] 图15示出了混合物A1+M4的XRPD衍射图。
[0151] 图16
[0152] 图16示出了混合物M3+M5的XRPD衍射图。
[0153] 图17
[0154] 图17示出了混合物A2+M4的XRPD衍射图。
[0155] 图18
[0156] 图18示出了混合物A2+M11的XRPD衍射图。
[0157] 图19
[0158] 图19示出了以下的XRPD衍射图的叠加图(从下到上)：F：晶型A1+M4，E：在40℃75％RH(M3+M5)1周后，D：在40℃/75％RH(M3+M5)2.5周后，C：在40℃/75％RH(M5)4周后，B：在40℃/75％RH 4周后和25℃/95％RH(A2+M4)2天后，A：40℃/75％RH 4周后和25℃/95％RH(A2+M11)1周后。
[0159] 图20
[0160] 图20示出了晶型A2的XRPD衍射图。
[0161] 图21
[0162] 图21示出了混合物A2+A3的XRPD衍射图。
[0163] 图22
[0164] 图22示出了晶型M1的XRPD衍射图。
[0165] 图23
[0166] 图23示出了晶型M2的XRPD衍射图。
[0167] 图24
[0168] 图24示出了晶型M3+M5的XRPD衍射图。
[0169] 图25
[0170] 图25示出了晶型M4的XRPD衍射图。
[0171] 图26
[0172] 图26示出了晶型M5的XRPD衍射图。
[0173] 图27
[0174] 图27示出了晶型M8的XRPD衍射图。
[0175] 图28
[0176] 图28示出了晶型M9的XRPD衍射图。
[0177] 图29
[0178] 图29示出了混合物M10+M4的XRPD衍射图。
[0179] 图30
[0180] 图30示出了晶型M11的XRPD衍射图。
[0181] 图31
[0182] 图31示出了晶型M12的XRPD衍射图。
[0183] 图32
[0184] 图32示出了晶型M13的XRPD衍射图。
[0185] 图33
[0186] 图33示出了晶型F的XRPD衍射图。
[0187] 图34
[0188] 图34示出了晶型G的XRPD衍射图。
[0189] 图35
[0190] 图35示出了具有式I的化合物的等温(24.9℃)动态蒸汽吸附测量，呈现相对样品重量(％)对相对湿度。起始形式为混合物A1+M4，并且湿度廓线为0→95→0％RH，每步阶为10％RH，直至每步阶达到质量平衡。95％RH时最大质量变化为34％。没有观察到滞后现象。
[0191] 图36
[0193] 图37
[0194] 图37A示出了晶型A1+M4的热力学pH依赖性溶解度。图37B示出了晶型A2+M11的热力学pH依赖性溶解度。
[0195] 图38
[0196] 图38示出了根据WO 2011/012577的方法产生的并且描述于WO 2011/012577的第36页最后一段中的具有式I的化合物的二氯化物盐的XRPD衍射图。上部的XRPD图是来自储存在5℃的样品，下部XRPD图是来自储存在-60℃的样品。
[0197] 实例
[0198] 实例1-具有式III的化合物的合成
[0199] 实例1a：具有式III(R1＝Cl，R3＝叔丁基)的化合物通过用DCC活化的合成[0200] 在室温下，将在水(280mL)中的磷酸(85％，57mL)溶液添加至N2,N6-双(叔-丁氧基羰基)-L-赖氨酸二环己基胺盐(438g，0.831mol，2.5当量)在二异丙醚(DIPE，1L)中的悬浮液中并且搅拌直到固体溶解。将有机相用磷酸(85％，20mL)和水(160mL)的混合物洗涤，然后用水(4×160mL)洗涤。经无水硫酸钠干燥后，浓缩双(叔-丁氧基羰基)-L-赖氨酸(游离酸)的溶液。将浓缩物用二氯甲烷(DCM，421mL)稀释。在室温中添加二环己基碳二亚胺(88.5g，0.429mol，1.25当量)在DCM(100mL)中的溶液并且将反应混合物搅拌15min。将所得的悬浮液过滤，将饼用DCM(3×50mL)洗涤。将4-氨基苯甲酰甲基氯化物(56.2g，0.331mol，1.0当量)添加至合并的滤液中并且将混合物搅拌4h。滤除不溶物，并且将滤液在真空下浓缩。将浓缩物用4-甲基-2-戊酮(MIBK，279mL)稀释，加热至约45℃。边冷却边添加庚烷(836mL)。将悬浮液冷却至10℃，搅拌并且过滤。将固体用MIBK/庚烷和庚烷洗涤并且干燥。
将粗产物从MIBK/庚烷结晶并且干燥以提供119.4g标题化合物(72％)，纯度为≥99.5％，以及≥99％ee。
将粗产物从MIBK/庚烷结晶并且干燥以提供119.4g标题化合物(72％)，纯度为≥99.5％，以及≥99％ee。
[0201] 实例1b：具有式III的化合物(R1＝Cl，R3＝叔丁基)通过用 活化的合成
[0202] 将N2,N6-双(叔丁氧基羰基)-L-赖氨酸(85％w/w，216g，531mmol，1.5当量)溶解在甲苯(1500g)中。添加在甲苯(600g)中的4-氨基苯甲酰甲基氯化物(60g，354mmol，1.0当量)和4-(二甲基氨基)吡啶(DMAP，4.32g，35.4mmol，0.1当量)的溶液。将混合物冷却至-15℃至-10℃。添加三乙胺(143g，1.42mol，4.0当量)，随后经2h在-15℃至-10℃添加2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三磷杂环己烷-2,4,6-三氧化物( 495g的50％的在甲苯中的溶液，778mmol，2.2当量)在甲苯(360g)中的溶液。将混合物搅拌17h并且升温至约-5℃。
添加水(1524g)并且在室温下分离相。将有机相用盐酸(pH 1.0)洗涤，然后用盐酸(pH＝
0.5，5％w/w乙醇)和用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤。将溶液过滤并且允许其静置。将悬浮液在
30℃-35℃，50mbar浓缩，冷却至约20℃并且搅拌。将固体过滤，用甲苯洗涤并且干燥以提供
138.5g的标题化合物(79％)，纯度为99.3％，以及≥99％ee。
添加水(1524g)并且在室温下分离相。将有机相用盐酸(pH 1.0)洗涤，然后用盐酸(pH＝
0.5，5％w/w乙醇)和用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤。将溶液过滤并且允许其静置。将悬浮液在
30℃-35℃，50mbar浓缩，冷却至约20℃并且搅拌。将固体过滤，用甲苯洗涤并且干燥以提供
138.5g的标题化合物(79％)，纯度为99.3％，以及≥99％ee。
[0203] 实例2-具有式II的化合物(R3是叔丁基)的合成
[0204] 将3-{[4-(1H-苯并咪唑-2-基)-1,2,5-噁二唑-3-基]氨基}丙腈(47g，185mmol，1.00当量)溶解于DMF(1.6L)中。添加N-[4-(2-氯乙酰基)苯基]-N2,N6-二-Boc-L-赖氨酸酰胺(98g，197mmol，1.06当量)和碳酸钾(49.5g，358mmol，1.94当量)。将混合物加热至40℃持续5h。在0-5℃将悬浮液过滤并且将滤液添加至氯化铵水溶液(2.5％w/w，7L)中。将悬浮液过滤并且将固体干燥。将粗产物悬浮在THF(188mL)和水(100mL)中。在回流(约65℃)下添加甲醇(3.4L)。将该悬浮液搅拌1小时并冷却至室温。过滤产物，用甲醇洗涤固体并干燥。将固体在THF(188mL)和甲醇(3.4L)中加热至回流，并且在2h内冷却至约10℃。将悬浮液过滤，用甲醇洗涤并且干燥以提供121g的标题化合物(91％)，纯度为99.8％。
[0206] 将具有式II(R3是叔丁基)(119g，166.4mmol，1.00当量)的化合物悬浮在四氢呋喃(785mL)中并且加热至30℃。在3h内添加水性盐酸(30％w/w，170g)。将混合物搅拌48h，冷却至10℃，并且添加四氢呋喃(785mL)。将所得的悬浮液过滤，将饼用四氢呋喃洗涤并且在高至55℃干燥以提供95.8g(97.8％)粗产物。在约43℃将粗产物(75g)溶解在水(75mL)和四氢呋喃(112mL)中。在约40℃添加四氢呋喃(2.85L)并且将悬浮液在约50℃搅拌1小时。冷却至10℃后，将产物过滤，用四氢呋喃洗涤并且在约50℃干燥以提供68g的纯化的产物。将纯化的产物(67g)溶解在水(201mL)中并且将所得的溶液过滤。将水蒸发。将产物进一步在高至
50℃干燥以给出62.9g的标题化合物(83％)，纯度为99.6％。
50℃干燥以给出62.9g的标题化合物(83％)，纯度为99.6％。
[0207] 对比实例1(根据WO 2011/012577)
[0208] S-{5-苄氧羰基氨基-5-[4-(2-{2-[4-(2-氰乙基氨基)呋咱-3-基]-苯并咪唑-1-1-基}-乙酰基)-苯基氨基甲酰基]-戊基}-氨基甲酸苄酯在THF/MeOH/HCl的混合物中用氢气在Pd/C 10％的存在下氢化约5h。在处理、色谱分析和盐形成后，产生具有式I的化合物的二盐酸化物，纯度为90％-91％，81％ee(产率：50％)。
[0209] 实例4-具有式I的化合物的结晶二氯化物盐(晶型E)的制备
[0210] 下面的一些实例描述了使用晶种制备晶型E。添加晶种的主要目的是加速形成多晶型。应认为在没有晶种的情况下，该实例仍然会产生晶型E。要注意的是，实例4d、4f、4g、4h、4i和4k不使用晶种，实例4l、4m、4n、4o和4p也是如此。
[0211] 通过浆液结晶
[0212] 实例4a：从甲醇/甲基-叔丁基醚(MTBE)
[0213] 在65℃，将0.20g的具有式I的化合物溶解在8mL甲醇中，将该溶液过滤。添加10mg晶型E的晶种并且将混合物经30min搅拌。经2h-3h，逐滴添加12mL MTBE，将获得的混合物冷却至5℃-15℃并且在5℃-15℃搅拌约40h。将混合物过滤并且将饼在真空下干燥，以提供0.18g的固体晶型E。
[0214] 实例4b：从甲醇/乙腈
[0215] 在30℃-45℃，将4g具有式I的化合物(混合物A1+M1)溶解在40mL甲醇中。将溶液过滤并且将200mg晶型E的晶种填充至溶液中。搅拌后，形成了悬浮液，将其经约15h加热至回流并且浓缩至12mL。添加20mL乙腈，将悬浮液缓慢地冷却至0-10℃并且过滤。将饼在约50℃在真空下干燥，提供3.4g固体的晶型E。
[0216] 实例4c：从甲醇/甲苯
[0217] 在30℃-45℃，将2g具有式I的化合物(混合物A1+M1)溶解在20mL甲醇中和来自最后一批的母液中。将溶液过滤，用100mg晶型E接种并且逐滴添加至50mL的热甲苯(80℃-90℃)中。将所得的悬浮液浓缩(蒸馏出约20mL)，进一步加热至沸点并且然后缓慢冷却至0-10℃。将悬浮液过滤并且将饼在50℃真空干燥，以给出1.5g的晶型E。
[0218] 实例4d：从甲醇(室温浆液)
[0219] 将65g的具有式I的化合物(混合物A1+M1)溶解在485mL甲醇中并且在15℃-25℃搅拌。将溶液搅拌持续约14天。在搅拌过程中，形成了悬浮液。将悬浮液过滤，将饼用甲醇洗涤并且在约50℃真空干燥，以提供46g的晶型E。
[0220] 实例4e：从甲醇(回流的浆液)
[0221] 在30℃-45℃，将2g的具有式I的化合物(混合物A1+M4)溶解在20mL甲醇中。将溶液过滤，用晶型E接种并且回流持续约15h。将悬浮液浓缩至约10mL的体积，冷却至0-10℃并且过滤。将饼在50℃真空干燥，以给出1.37g的晶型E。
[0222] 实例4f：从乙醇
[0223] 将5g的具有式I的化合物(混合物A1+M1)在100mL乙醇中回流持续总计11h。将混合物冷却至室温，过滤并且将饼在45℃真空干燥，以提供4.45g的晶型E。
[0224] 实例4g：从乙腈，回流
[0225] 将15g的具有式I的化合物(混合物A1+M1)在300mL的乙腈中回流持续总计11h。将悬浮液冷却至室温并且过滤，并且将饼在65℃真空干燥，以提供13g的晶型E。
[0226] 实例4h：从乙酸乙酯，浆液在室温(RT)和50℃
[0227] 将20.4mg的具有式I的化合物(混合物A1+M1)在1mL的乙酸乙酯中在室温搅拌持续两周。之后将样品离心，并且分离固体和母液。潮湿的固体被分析为晶型E和晶型F的混合物，呈小多晶型。将潮湿的固体在室温真空(5mbar)干燥约18h并且分析为晶型E。
[0228] 将28.4mg的具有式I的化合物(混合物A1+M1)在1mL的乙酸乙酯中在约50℃搅拌持续两周。之后将样品离心，并且分离固体和母液。潮湿的固体被分析为晶型E和F的混合物，呈小多晶型。将潮湿的固体在室温真空(5mbar)干燥约18h并且分析为晶型E。
[0229] 实例4i：从2-丙醇
[0230] 将27.5mg的具有式I的化合物(混合物A1+M1)在0.9mL的2-丙醇中在50℃搅拌持续约两周。之后将样品离心，并且分离固体和母液。潮湿的固体被分析为晶型E。将潮湿的固体在室温真空(5mbar)干燥约18h并且分析为晶型E。
[0231] 实例4j：从乙酸乙酯
[0232] 将19.8mg的具有式I的化合物(混合物A1+M1)在0.6mL的乙酸乙酯中在20℃搅拌约两周。之后将样品离心，并且分离固体和母液。潮湿的固体被分析为晶型E。将潮湿的固体在40℃/75％RH进一步处理2天并且分析为晶型E。
[0233] 实例4k：从乙腈，20℃
[0234] 将18.0mg的具有式I的化合物(晶型A1+M1)在0.6mL的乙腈中在20℃搅拌约两周。之后将样品离心，并且分离固体和母液。潮湿的固体被分析为晶型E。将潮湿的固体在40℃/
75％RH进一步处理2天并且分析为晶型E。
75％RH进一步处理2天并且分析为晶型E。
[0235] 在第二次试验中，该潮湿的固体是18.0mg的具有式I的化合物，将其在0.6mL的乙腈中在20℃搅拌约两周。之后将样品离心，并且分离固体和母液。潮湿的固体被分析为晶型E。将潮湿的固体在室温真空(5mbar)干燥约18h并且分析为晶型E。
[0236] 实例4l从乙腈，50℃
[0237] 将18.0mg的具有式I的化合物(晶型A1+M1)在0.6mL的乙腈中在50℃搅拌约两周。之后将样品离心，并且分离固体和母液。潮湿的固体被分析为晶型E。将潮湿的固体在40℃/
75％RH进一步处理2天并且分析为晶型E。
75％RH进一步处理2天并且分析为晶型E。
[0238] 通过冷却结晶
[0239] 实例4m：从2-丁醇/甲醇
[0240] 将35.5mg的具有式I的化合物(混合物A1+M1)添加至1.2mL的2-丁醇/甲醇的混合物中，产生浆液，将该浆液在约60℃搅拌一小时。之后，将样品在60℃保持1小时并且允许其冷却至约5℃，冷却速率为约1℃/h。将样品保持在约5℃持续约24h。将潮湿的固体过滤并分析为晶型E。
[0241] 实例4n：从4-二噁烷/甲醇
[0242] 将32.5mg的具有式I的化合物(混合物A1+M1)添加在0.5mL的甲醇/1,4-二噁烷的混合物中，产生浆液，将该浆液在约60℃搅拌一小时。之后，将样品在60℃保持1小时并且允许其冷却至约5℃，冷却速率为约1℃/h。将样品保持在约5℃持续约24h。将潮湿的固体过滤并分析为晶型E。
[0243] 实例4o：从乙酸乙酯/甲醇
[0244] 将32.5mg的具有式I的化合物(混合物A1+M1)添加至0.75mL的乙酸乙酯/甲醇的混合物中，产生浆液，将该浆液在约60℃搅拌一小时。之后，将样品在约60℃保持一小时并且允许其冷却至约5℃，冷却速率为约1℃/h。将样品保持在约5℃持续约24h。将潮湿的固体过滤并分析为晶型E。
[0245] 具有式II的化合物的一锅脱保护和结晶
[0246] 实例4p
[0247] 将0.5g的具有式II的化合物(R3是叔丁基)悬浮在5mL甲醇中。在20℃-25℃添加2.4摩尔当量的在MeOH中的HCl，并且在约5℃将悬浮液搅拌约9天。将悬浮液过滤并且将获得的饼在真空下干燥以提供0.3g的晶型E。
[0248] 从游离碱结晶
[0249] 实例4q
[0250] 将76g的具有式I的化合物的二氯化物盐(混合物A1+M4)溶解在280mL水和280mL甲醇的混合物中。在10℃-15℃，将溶液添加至24.2g碳酸钾、140mL水和140mL甲醇的溶液中。将反应混合物在室温搅拌约2小时。将悬浮液过滤，将饼用甲醇洗涤，并且在350mL的水和
350mL的甲醇中浆化。将悬浮液过滤，将饼用70mL的水洗涤并且在45℃真空干燥，以提供65g具有式I的化合物(游离碱)。
350mL的甲醇中浆化。将悬浮液过滤，将饼用70mL的水洗涤并且在45℃真空干燥，以提供65g具有式I的化合物(游离碱)。
[0251] 使1g具有式I的化合物(游离碱)与在甲醇溶液中的盐酸在65℃反应。添加10mg晶型E的晶种，将混合物缓慢冷却至8℃-10℃，搅拌约16h，过滤并且将获得的饼真空干燥以提供0.44g的晶型E。
[0252] 实例5-具有式I的化合物的结晶二氯化物盐(晶型E)的表征
[0253] 实例5a：通过XRPD表征
[0254] 使用高通量XRPD设置获得XRPD图。将板安装在配备有Hi-Star面积检测器的Bruker GADDS衍射仪上。XRPD平台的校准是使用山嵛酸银作为长d-间距，以及刚玉作为短d-间距。数据收集在1.5°和41.5°之间的2θ区域使用单色CuKα辐射在室温进行，这是XRPD图中最独特的部分。每个孔的衍射图收集在两个2θ范围内(第一帧1.5°≤2θ≤21.5°，和第二帧19.5°≤2θ≤41.5°)，每帧曝光时间为90s。没有将背景减除或曲线平滑应用于XRPD图。在XRPD分析过程中使用的载体材料对X射线透明，并且仅轻微有助于背景。
[0255] 图2中示出了室温下具有式I的化合物的二氯化物盐的晶型(晶型E)的XRPD并且其衍射图峰示于表2中。使用P222空间群对高分辨率XRPD图的评价进行编索引。对纯形式的反射强度编索引产生正交晶系，并允许提取晶胞参数。
[0256] 晶体学参数是基于具有式I的化合物的二氯化物盐的晶型的Pawley计算(全粉末图分解，WPPD)。粉末衍射图的峰的所有强度和2θ值可以指定给正交晶原始晶胞(P)，晶胞参数为：该晶型的粉末图还可以以较低对称性索引，例
如单斜的
和若干三斜的。但是，通常应用最高对称性。在这种情况下，最高对称性是正交晶的。计算和测量的衍射图的比较示出了如图3所示的极好的一致性。
如单斜的
和若干三斜的。但是，通常应用最高对称性。在这种情况下，最高对称性是正交晶的。计算和测量的衍射图的比较示出了如图3所示的极好的一致性。
[0257] 表2.具有式I的化合物的二氯化物盐的晶型E的27个最丰富峰的衍射图峰位置、d-间距和相对强度的X射线粉末衍射(XRPD)列表
[0258]
[0259] 与晶型E类似地，测定高温多晶型E1的XRPD，并且衍射图峰(图10)示出在表3中。
[0260] 表3.具有式I的化合物的二氯化物盐的结晶高温晶型E1的衍射图峰位置、d-间距和相对强度的X-射线粉末衍射(XRPD)列表
[0261]
[0262]
[0263] 实例5b：通过差示扫描量热法(DSC)、热重分析(TGA)和变温XRPD的表征
[0264] 热重分析(TGA，图4)示出了大量吸热，其表明在约276℃(±2℃)伴随着分解的熔化事件。在约130℃(±2℃)的少量吸热意味着在熔化之前发生固体-固体向晶型变化的转变，该转变是在高温可逆形成的。这种行为由差示扫描量热法(DSC，图5)以及变温XRPD研究证实。
[0265] 进行循环DSC(图6)以研究在约130℃(±2℃)的吸热的性质。加热至200℃，随后快速冷却至室温(RT)(25℃->200℃->25℃)。冷却后的DSC热分析图示出在约97℃(±2℃)的小量的放热，这意味着固体形式逆转变为晶型E1(XRPD图，图7)。固体的XRPD数据示出25℃固体形式没有变化，这证实了冷却时的放热是固体逆转变。变温(VT)XRPD数据(关于VT XRPD实验细节参见实例8a)证实了上述特性。
[0266] 实例5c：实验热分析(包括DSC、TGA、TGA SDTA、TGA MS)
[0267] 熔融特性由DSC热分析图获得，用热通量DSC822e仪器(Mettler-Toledo GmbH[梅特勒托利多公司]，瑞士)记录。用一小块铟校准了DSC822e的温度和焓(m.p.＝156.6℃；ΔHf＝28.45J.g-1)。将样品密封在标准的40μL铝盘中，以10℃/min的加热速率进行穿针孔并在DSC中从25℃加热至300℃。在测量过程中，使用干燥的N2气，以50mL/min的流速清洗DSC设备。
[0268] 通过热重分析/同时差示温度/热分析(TGA/SDTA)测定由于溶剂或水分损失导致的从晶体中的质量损失。在TGA/SDTA851e仪器(Mettler-Toledo GmbH[梅特勒-托利多有限公司]，瑞士)中加热期间监测样品重量，得出重量对温度曲线。TGA/SDTA851e用铟和铝校准温度。将样品称量到100μL铝坩埚中并密封。将密封件穿针孔并将坩埚以10℃/min的加热速率在TGA中从25℃加热至300℃。使用干燥的N2气吹扫。
[0269] 通过质谱仪Omnistar GSD 301 T2(Pfeiffer Vacuum GmbH[普发真空公司]，德国)分析从TGA样品放出的气体。后者是一种四极杆质谱仪，其可分析0-200amu范围内的质量。
[0270] 实例5d：通过FTIR表征
[0271] 使用配备有ATR探针的Thermo Fischer Scientific FT-IR Nicolet 6700光谱仪记录FT-IR谱。
[0272] FTIR分析证实了具有式I的化合物的结构，其如在表4中详述和在图8中描绘，并且如图9在约1800cm-1与400cm-1之间放大。具有式I的化合物的二氯化物盐的晶型的特征IR振动已被鉴定为1701cm-1、1665cm-1、1335cm-1、1241cm-1、1171cm-1、942cm-1、924cm-1、864cm-1、699cm-1、628cm-1(±2cm-1)。
[0273] 表4.具有式I的化合物的二氯化物盐的晶型的主要IR振动
[0274]
[0275] *若干可能的分配。
[0276] 实例5e：通过固态13C{1H}MAS-NMR表征：
[0277] 在Bruker Avance III 400MHz固态NMR仪器上进行魔角旋转固态碳13核磁共振(13C{1H}MAS-NMR)(见图10)，该仪器配备有宽孔(89mm室温孔)9.4特斯拉磁铁。双共振魔角样品旋转(MAS)探针用于外径为4.0mm的转子尺寸。该探针双倍调谐至观察到的核频率-在本研究中的13C为100.61MHz，1H为400.13MHz。磁场的均匀性是通过在4mm的ZrO2旋转器上的金刚烷样品匀场设置，13C线宽(全宽半最大高度)为小于2Hz。化学位移参考通过使用四甲基硅烷的1H信号(CDCl3中<1％v/v)的取代方法进行，其化学位移设定为0ppm。这是IUPAC推荐的程序。所有的测量都是在MAS旋转器上侧向喷吹另外的氮气流(在5℃1200L/h)下进行的，以进行温度控制。由于MAS空气轴承的摩擦加热，真实的样品温度比此高约15℃。对于魔角样品旋转，旋转频率设置为14kHz。扫描次数为1024次，循环延迟时间为5s，接触时间为2ms，采集时间为33ms，处理参数为tdeff＝0和lb＝5Hz。
[0278] 表5列出了所研究的具有式I的化合物的二氯化物盐的晶型的碳13化学位移。图1描绘了碳13化学位移的NMR分配的原子数。
[0279] 表5.晶型E的13C{1H}MAS-NMR位移(±0.2ppm的13C化学位移)，参考使用四甲基硅1 13
烷的 H信号(TMS<1％v/v，在CDCl3中)的取代方法(其化学位移设置为0ppm)。还示出了 C{1H}NMR位移，参考[D6]-DMSO的液体[D6]-DMSO(其化学位移设置为39.52ppm*)。
烷的 H信号(TMS<1％v/v，在CDCl3中)的取代方法(其化学位移设置为0ppm)。还示出了 C{1H}NMR位移，参考[D6]-DMSO的液体[D6]-DMSO(其化学位移设置为39.52ppm*)。
[0280]
[0281]
[0282] [a]、[b]、[c]、[d]具有相同上标的信号可以交换。
[0283] *H.E.Gottlieb,V.Kotlyar,A.Nudelman J.Org.Chem[有机化学杂志],第62卷,1997,7512-7515
[0284] 实例5f：通过DVS表征
[0285] 不同形式固体材料的吸湿性差异提供了相对湿度增加时其相对稳定性的量度。使用来自Surface Measurement Systems[表面测量系统公司](英国伦敦)的DVS-1系统获得吸湿等温线。在约25℃的恒定温度，相对湿度在吸附-解吸过程中发生变化(见具体实验)。在DVS实验结束时，通过XRPD测量样品。
[0286] 图11描绘了具有式I的化合物的二氯化物盐的晶型E的动态蒸汽吸附(DVS)分析。它示出：高达85％RH的化合物的吸水率为1％并且高达95％RH的化合物的吸水率为约4％。
[0287] 实例5g：溶解度
[0288] 在非缓冲水中以及使用标准Merck 缓冲液进行热力学pH依赖性溶解度测定(Merck 缓冲液pH 3，具有柠檬酸盐和HCl；Merck 缓冲液pH 4，
具有柠檬酸盐和HCl；Merck 缓冲液pH 5，具有柠檬酸盐和NaOH；Merck
缓冲液pH 6，具有柠檬酸盐和NaOH；Merck 缓冲液pH 7，具有磷酸盐；
为了缓冲在pH 4.5，使用pH 4和5的缓冲液的50/50混合物；为了缓冲在pH 5.5，使用pH 5和
6的缓冲液的50/50混合物)。
具有柠檬酸盐和HCl；Merck 缓冲液pH 5，具有柠檬酸盐和NaOH；Merck
缓冲液pH 6，具有柠檬酸盐和NaOH；Merck 缓冲液pH 7，具有磷酸盐；
为了缓冲在pH 4.5，使用pH 4和5的缓冲液的50/50混合物；为了缓冲在pH 5.5，使用pH 5和
6的缓冲液的50/50混合物)。
[0289] 对于每个实验，用多晶型材料、根据目标pH的缓冲溶剂和磁力搅拌棒制备8mL螺旋帽小瓶。每个pH数据点一式三份测定，目标pH为3、4、4.5、5、5.5和7。测量pH(飞世尔pH计(Fisherbrand pH meter Hydrus 400)，在测量之前进行三点校准)并用1M NaOH溶液调节。在搅拌下使混合物在室温下平衡24h。24h后，监测pH并且将浆液以3000rpm离心10min以分离固体和液体并且过滤(0.45微米盘式过滤器)。如有必要，将分离的滤液在样品溶剂中稀释以落入HPLC测试的校准曲线内。具有式I的化合物的浓度通过具有二极管阵列检测分析(HPLC-DAD)的高效液相色谱法测定。校准曲线是从在水/THF/TFA(50/50/0.05v/v/v)的样品溶液中的两种独立制备的具有式I的化合物的储备溶液中获得的。
[0290] 在带有DAD检测器的Agilent 1100上进行280nm波长的HPLC测试。确定了11μg/mL的LOQ，线性度为高至约0.7mg/mL。每个样品稀释到约0.5mg/mL或者如果浓度小于或等于约0.5mg/mL，也作为整值测量。
[0291] 实例6-具有式I的化合物的结晶二氯化物盐(A+M)的制备
[0292] 实例6a：具有式I的化合物的粗二氯化物盐
[0293] 将根据实例2提供的程序制备的111.6g(156mmol)具有式II的化合物(R3是叔丁基)悬浮在738mL的THF中并且加热至约33℃。添加160g的30％水性HCl并且将混合物搅拌约18h。将混合物冷却至约10℃并且添加738mL的THF。将悬浮液过滤，将滤饼用120mL的THF洗涤并且在约40℃真空干燥以提供90g的具有式I的化合物。
[0294] 实例6b：纯化和结晶
[0295] 在约40℃-50℃将具有式I的粗化合物(2.6kg)溶解在水(2.7L)和四氢呋喃(5.5L)中。在约40℃-50℃，缓慢添加四氢呋喃(90L)。将所得的悬浮液搅拌，然后冷却至约10℃并且进一步搅拌。将悬浮液过滤，将滤饼用THF洗涤并且干燥。将所得的固体(2.4kg)溶解在7.3L水中，将溶液过滤并且将过滤器用2.3L的水洗涤。将过滤的溶液和洗涤液在约30℃减压蒸发至干燥。将残余物进一步在50℃减压干燥，以提供2.2kg的呈混合物A1+M1的具有式I的化合物。
[0296] 通常，系统A+M中产生其他晶型的起点是混合物A1+M1(图14)和混合物A1+M4(图15)。图19给出了当混合物A1+M4暴露于气候室条件时观察到的XRPD图的叠加图。在40℃/
75％RH，在1周后以及还在2.5周后观察混合物M3+M5(图24)。在40℃/75％RH处理混合物A1+M4 4周后，观察到晶型M5(图26)。在40℃/75％RH4周后以及在25℃/95％RH 2天后，获得了混合物A2+M4(图17)。在40℃/75％RH 4周后以及在25℃/95％RH 1周后，获得了混合物A2+M11(图18)。
75％RH，在1周后以及还在2.5周后观察混合物M3+M5(图24)。在40℃/75％RH处理混合物A1+M4 4周后，观察到晶型M5(图26)。在40℃/75％RH4周后以及在25℃/95％RH 2天后，获得了混合物A2+M4(图17)。在40℃/75％RH 4周后以及在25℃/95％RH 1周后，获得了混合物A2+M11(图18)。
[0297] 实例7-具有式I的化合物的系统A+M中的结晶二氯化物盐的具体晶型的制备[0298] 晶型A0的制备
[0299] 实例7a
[0300] 通过加热混合物A1+M1持续2.5h至195℃获得了晶型A0(图12，表6)。
[0301] 实例7b
[0302] 通过加热晶型M1持续4h至195℃获得了晶型A0。
[0303] 晶型A1的制备
[0304] 实例7c
[0305] 通过允许晶型A0在环境条件下静置持续约11天获得了晶型A1(图13，表7)。
[0306] 实例7d
[0307] 通过在以下溶剂系统中对混合物A1+M1冷却结晶获得了晶型A1：水和甲醇/水(50:50)。将80μL各自的溶剂添加至约4mg的混合物A1+M1中。将温度升高至60℃并且在60℃保持
60min。以20℃/min的冷却速率冷却至20℃后，在搅拌下使混合物维持在20℃持续24h。通过真空(5mbar)下的溶剂蒸发获得晶型F。将晶型F暴露于40℃/75％RH的气候室条件下67h，产生晶型A1。
60min。以20℃/min的冷却速率冷却至20℃后，在搅拌下使混合物维持在20℃持续24h。通过真空(5mbar)下的溶剂蒸发获得晶型F。将晶型F暴露于40℃/75％RH的气候室条件下67h，产生晶型A1。
[0308] 实例7e
[0309] 通过在甲醇中对混合物A1+M1冷却结晶获得了晶型A1。
[0310] 将80μL的甲醇添加至约4mg的混合物A1+M1中。将温度升高至60℃并且在60℃保持60min。以20℃/min的冷却速率冷却至2℃后，在搅拌下使混合物维持在2℃持续24h。通过真空(5mbar)下的溶剂蒸发获得晶型F。将晶型F暴露于40℃/75％RH的气候室条件下67h，产生晶型A1。
[0311] 混合物A1+M1的制备
[0312] 图14和表19中描绘了XRPD衍射图。
[0313] 实例7f
[0314] 将23.2mg的具有式I的化合物，即混合物A1+M4添加在0.60mL的乙醚中，产生浆液，将该浆液在20℃搅拌两周。之后，将样品离心，通过过滤分离液体，并将固体部分在真空下干燥(5mbar)。对固体分析并发现其为混合物A1+M1。
[0315] 实例7g
[0316] 将22.7mg的具有式I的化合物，即混合物A1+M4添加至0.60mL的叔丁基甲基醚中，产生浆液，将该浆液在20℃搅拌两周。之后，将样品离心，通过过滤分离液体，并将固体部分在真空下干燥(5mbar)。对固体分析并发现其为混合物A1+M1。
[0317] 混合物A1+M4的制备
[0318] 图15和表20中描绘了XRPD衍射图。
[0319] 实例7h
[0320] 通过将20mg混合物A1+M1暴露于至少40％RH持续至少3min来形成混合物A1+M4。
[0321] 实例7i
[0322] 在20℃，将23.2mg的混合物A1+M1浆化于0.60mL的乙醚中持续两周。通过离心和过滤分离得到的潮湿的固体，并分析且发现为混合物A1+M4。
[0323] 实例7j
[0324] 在20℃将22.7mg的混合物A1+M1浆化于0.60mL的叔丁基甲基醚中持续两周。通过离心和过滤分离得到的潮湿的固体，并分析且发现为混合物A1+M4。
[0325] 实例7k
[0326] 在20℃将24.2mg的混合物A1+M1浆化于0.60mL的正庚烷中持续两周。通过离心和过滤分离得到的潮湿的固体，并分析且发现为混合物A1+M4。
[0327] 实例7l
[0328] 在20℃，将18.9mg的混合物A1+M1浆化于0.60mL的甲苯中持续两周。通过离心和过滤分离得到的潮湿的固体，并分析且发现为混合物A1+M4。
[0329] 实例7m
[0330] 在50℃将18.9mg的混合物A1+M1浆化于0.40mL的二异丙醚中持续两周。通过离心和过滤分离得到的潮湿的固体，并分析且发现为混合物A1+M4。
[0331] 实例7n
[0332] 在50℃将22.8mg的混合物A1+M1浆化于0.40mL的正庚烷中持续两周。通过离心和过滤分离得到的潮湿的固体，并分析且发现为混合物A1+M4。
[0333] 实例7o
[0334] 在50℃，将24.9mg的混合物A1+M1浆化于0.40mL的甲苯中持续两周。通过离心和过滤分离得到的潮湿的固体，并分析且发现为混合物A1+M4。
[0335] 混合物A1+M4+M5的制备
[0336] 实例7p
[0337] 通过将混合物A1+M4暴露于60％至80％RH约3min来形成混合物A1+M4+M5。
[0338] 混合物A2+M4的制备
[0339] 图17和表21中描绘了XRPD衍射图。
[0340] 实例7q
[0341] 在40℃/75％RH储存混合物A1+M4持续4周和在25℃/95％RH储存2天后，获得了混合物A2+M4。
[0342] 混合物M3+M5的制备
[0343] 图16和表11中描绘了XRPD衍射图。
[0344] 实例7r
[0345] 在40℃/75％RH储存混合物A1+M4持续1周和2.5周之间的时间后观察到混合物M3+M5。
[0346] 混合物A2+M11的制备
[0347] 图18和表22中描绘了XRPD衍射图。
[0348] 实例7s
[0349] 在40℃75％RH储存混合物A1+M4持续4周和在25℃/95％RH储存1周后获得了混合物A2+M11(图19)。
[0350] 晶型A2的制备
[0351] 图20和表20中描绘了XRPD衍射图。
[0352] 实例7t
[0353] 通过在以下所有不同的溶剂系统中对混合物A1+M1冷却结晶获得了晶型A2：1,4-二噁烷/水(50:50)、异丙醇/水(50:50)、乙腈/水(50:50)、乙醇/水(50:50)、异丙醇、和丙酮/水(50:50)。将80μL各自的溶剂添加至约4mg的混合物A1+M1中。将温度升高至60℃并且在60℃保持60min。以20℃/min的冷却速率冷却至20℃后，在搅拌下使混合物维持在20℃持续24h。通过真空(5mbar)下的溶剂蒸发获得晶型F。将晶型F暴露于40℃/75％RH的气候室条件下67h，产生晶型A2。
[0354] 实例7u
[0355] 通过在以下溶剂系统中对混合物A1+M1冷却结晶获得了晶型A2：甲醇和乙醇。将80μL各自的溶剂添加至约4mg的混合物A1+M1中。将温度升高至60℃并且在60℃保持60min。以20℃/min的冷却速率冷却至20℃后，在搅拌下使混合物维持在20℃持续24h。通过真空(5mbar)下的溶剂蒸发获得晶型G。将晶型G暴露于40℃/75％RH的气候室条件下67h，产生晶型A2。
[0356] 晶型M1的制备
[0357] 图22和表9中描绘了XRPD衍射图。
[0358] 实例7v
[0359] 通过在以下所有不同的溶剂系统中对混合物A1+M1冷却结晶获得了晶型M1：水、1,4-二噁烷/水(50:50)、乙酸乙酯/二甲亚砜(50:50)、异丙醇/水(50:50)、乙腈/水(50:50)、乙醇/水(50:50)和四氢呋喃/水(50:50)。将80μL各自的溶剂添加至约4mg的混合物A1+M1中。将温度升高至60℃并且在60℃保持60min。以2℃/min的冷却速率冷却至2℃后，在搅拌下使混合物维持在2℃持续24h。通过真空(5mbar)下的溶剂蒸发获得晶型F。将晶型F暴露于
40℃/75％RH的气候室条件下67h，产生晶型M1。
40℃/75％RH的气候室条件下67h，产生晶型M1。
[0360] 实例7w
[0361] 通过在以下不同的溶剂系统中对混合物A1+M1冷却结晶获得了晶型M1：对二甲苯/甲醇(50:50)和2-丁酮/甲醇(50:50)。将80μL各自的溶剂添加至约4mg的混合物A1+M1中。将温度升高至60℃并且在60℃保持60min。以2℃/min的冷却速率冷却至2℃后，在搅拌下使混合物维持在2℃持续24h。通过真空(5mbar)下的溶剂蒸发获得晶型G。将晶型G暴露于40℃/75％RH的气候室条件下67h，产生晶型M1。
[0362] 实例7x
[0363] 通过在以下不同的溶剂系统中对混合物A1+M1冷却结晶获得了晶型M1：四氢呋喃/甲醇(50:50)和2四氢呋喃/乙酸乙酯(50:50)。将80μL各自的溶剂添加至约4mg的混合物A1+M1中。将温度升高至60℃并且在60℃保持60min。以20℃/min的冷却速率冷却至20℃后，在搅拌下使混合物维持在20℃持续24h。通过真空(5mbar)下的溶剂蒸发获得晶型G。将晶型G暴露于40℃/75％RH的气候室条件下67h，产生晶型M1。
[0364] 实例7y
[0365] 通过在以下所有不同的溶剂系统中对混合物A1+M1冷却结晶获得了晶型M1：乙腈/水(50:50)、四氢呋喃/水(50:50)、甲醇/水(50:50)、丙酮/水(50:50)、2丁酮/水(50:50)、乙酸乙酯/甲醇(50:50)和四氢呋喃/甲醇(50:50)。将80μL各自的溶剂添加至约4mg的混合物A1+M1中。将温度升高至60℃并且在60℃保持60min。以20℃/min的冷却速率冷却至2℃后，在搅拌下使混合物维持在2℃持续24h。通过真空(5mbar)下的溶剂蒸发获得晶型F。将晶型F暴露于40℃/75％RH的气候室条件下67h，产生晶型M1。
[0366] 晶型M2的制备
[0367] 从混合物A1+M4，通过用反溶剂添加进行碰撞结晶(crash-crystallisation)获得晶型M2(图23，表10)。
[0368] 实例7z
[0369] 在所有以下不同的溶剂系统中，通过用混合物A1+M1的反溶剂添加进行碰撞结晶获得晶型M2：溶剂：1-丁醇/水(9.6:90.4v/v)和每个反溶剂：乙腈、2-丁酮、四氢呋喃或乙酸乙酯。储备溶液在200μL溶剂中制备，具有式I的化合物的浓度在过滤之前平衡24小时后在环境温度下达到饱和，或具有170mg/mL的截留浓度。
[0370] 对于每个实验，将反溶剂添加到每个溶剂小瓶中，溶剂与反溶剂比例为1:0.25。在不发生沉淀的情况下，该比率增加到1:1，并且如果再次没有发生沉淀，则该比例增加到1:4(对于所有晶型M2制剂)，在添加之间等待60min的时间(直至第三次添加)。由于没有足够的固体沉淀分离，样品保持在5℃三天。没有出现沉淀。将溶剂在200mbar蒸发至干。
[0371] 使用不同的溶剂系统，获得了不同的中间体多晶型，即非晶型(来自反溶剂乙腈、2-丁酮)、晶型M1(四氢呋喃)和混合物F+M1(乙酸乙酯)。将测量板在加速老化条件(40℃/
75％RH)下储存65h后，所有这些样品都转化为多晶型M2。
75％RH)下储存65h后，所有这些样品都转化为多晶型M2。
[0372] 晶型M4的制备
[0373] 从混合物A1+M4，主要通过在pH 4下的浆液试验获得了晶型M4(图25，表12)。
[0374] 实例7aa
[0375] 将151.4mg的具有式I的化合物(混合物A1+M4)悬浮在600μL的pH 4缓冲液(Merck缓冲液pH 4，具有柠檬酸盐和HCl)中。初始pH是约3.2。15min后，将pH用25μL 0.1M NaOH调节至约4.1。2h-4h后，将pH调节至3.8。添加10μL 0.1M NaOH和200μL的pH 4缓冲液。将浆液在室温搅拌24h(包括添加次数)。获得的浆液示出约pH 4.0。使用1微米盘式过滤器进行过滤。获得呈滤饼的晶型M4。
[0376] 实例7bb
[0377] 将198.3mg的混合物A1+M4悬浮在1000μL的pH 4缓冲液(Merck 缓冲液pH 4，具有柠檬酸盐和HCl)中。初始pH是约2.9。15min后，将pH用50μL 0.1M NaOH调节至约
3.8。将浆液在室温搅拌24h(包括添加次数)。获得了约pH 3.8的浑浊的溶液。使用1微米盘式过滤器进行过滤。获得呈滤饼的晶型M4。
3.8。将浆液在室温搅拌24h(包括添加次数)。获得了约pH 3.8的浑浊的溶液。使用1微米盘式过滤器进行过滤。获得呈滤饼的晶型M4。
[0378] 实例7cc
[0379] 将245.4mg的混合物A1+M4悬浮在1000μL的pH4缓冲液(Merck 缓冲液pH 4，具有柠檬酸盐和HCl)中。初始pH是约3.1。15min后，将pH用50μL 0.1M NaOH调节至约3.9。
将浆液搅拌30-45分钟并将pH调节至约3.9。添加10μL的0.1M NaOH以产生约pH 4.1。将浆液在室温搅拌24h(包括添加次数)。获得的浆液示出约pH 4.0。使用0.2μm离心过滤器进行过滤。获得呈滤饼的晶型M4。
将浆液搅拌30-45分钟并将pH调节至约3.9。添加10μL的0.1M NaOH以产生约pH 4.1。将浆液在室温搅拌24h(包括添加次数)。获得的浆液示出约pH 4.0。使用0.2μm离心过滤器进行过滤。获得呈滤饼的晶型M4。
[0380] 晶型M5的制备
[0381] 图26和表13中描绘了XRPD衍射图。
[0382] 实例7dd
[0383] 通过在40℃/75％RH储存具有式I的化合物即混合物A1+M1或A1+M4持续4周获得了晶型M5。
[0384] 晶型M8的制备
[0385] 从混合物A1+M4，主要通过在pH 7.5下的浆液试验获得了晶型M8(图27，表14)。要注意的是，这些实验使用含有替代性反离子的缓冲液。尽管不能完全忽视在多晶型中存在的痕量反离子，但在XRPD衍射图中没有可见的可归因于这些无机物质的衍射峰(无机物通常在高2θ角才清晰可见并且通常是非常尖锐的峰)。
[0386] 实例7ee
[0387] 将Merck 缓冲液pH 7(具有磷酸盐)和Merck 缓冲液pH 8(具有硼酸盐和HCl)以1:1(v/v)的比例混合以给出具有pH 7.5的缓冲液。通过将26.9mg的混合物A1+M4添加至5.0mL的上述pH 7.5缓冲液中制备悬浮液。所得的pH是约7.3。15min后，将pH用10μL 0.1M NaOH调节至约pH7.4。将混合物在室温下搅拌24h(包括添加次数)。获得了pH约7.5的浆液。使用1微米盘式过滤器进行过滤。获得呈滤饼的晶型M8。
[0388] 实例7ff
[0389] 制备了16.4mg的混合物A1+M4在5.0mL的上述pH 7.5缓冲液中的悬浮液。初始pH是约7.5。将所得的混合物在室温下搅拌24h。获得了约pH 7.4的浆液。使用1微米盘式过滤器进行过滤。获得呈滤饼的晶型M8。
[0390] 晶型M9的制备
[0391] 从混合物A1+M4，主要通过在pH 4.5至5.5的范围内的浆液试验获得了晶型M9(图28，表15)。要注意的是，这些实验使用含有替代性反离子的缓冲液。尽管不能完全忽视在多晶型中存在的痕量反离子，但在XRPD衍射图中没有可见的可归因于这些无机物质的衍射峰(无机物通常在高2θ角才清晰可见并且通常是非常尖锐的峰)。
[0392] 实例7gg
[0393] 将150.5mg的混合物A1+M4悬浮在5.0mL的Merck 缓冲液(pH 5，含有柠檬酸和NaOH)中。初始pH是约4.2。15min后，将pH用70μL 0.1M NaOH调节至约pH 4.9。将混合物在室温下搅拌24h(包括添加次数)。获得了约pH 5.1的浆液。使用1微米盘式过滤器进行过滤。获得呈滤饼的晶型M9。
[0394] 实例7hh
[0395] 将32mg的混合物A1+M4悬浮在5.0mL的Merck 缓冲液(pH 5，含有柠檬酸和NaOH)中。初始pH是约5.0。将混合物在室温下搅拌24h(包括添加次数)。获得了约pH 5.0的浆液。使用1微米盘式过滤器进行过滤。获得呈滤饼的晶型M9。
[0396] 实例7ii
[0397] 将Merck 缓冲液pH 5(含有柠檬酸盐和NaOH)与Merck 缓冲液pH 6(含有柠檬酸盐和NaOH)以1:1(v/v)的比例混合以产生pH 5.5的缓冲液。将34mg的具有式I的化合物(混合物A1+M4)悬浮在5.0mL的上述pH 5.5缓冲液中。初始pH是约5.6。将混合物在室温下搅拌24h(包括添加次数)。获得了约pH 5.5的浆液。使用1微米盘式过滤器进行过滤。获得呈滤饼的晶型M9。
[0398] 晶型M11的制备
[0399] 在过饱和实验中通过将pH从3改变为7，从混合物A1+M4和晶型E获得了晶型M11(图30，表16)。要注意的是，这些实验使用含有替代性反离子的缓冲液。尽管不能完全忽视在多晶型中存在的痕量反离子，但在XRPD衍射图中没有可见的可归因于这些无机物质的衍射峰(无机物通常在高2θ角才清晰可见并且通常是非常尖锐的峰)。
[0400] 实例7kk
[0401] 将约210mg的晶型E悬浮在1.00mL Merck 缓冲液pH 3(含有柠檬酸盐和HCl)中并且添加20μL 0.1M NaOH。过滤该饱和溶液(0.2μm离心过滤器)。在通过添加270μL的0.1M NaOH调节至pH 7之前将溶液保持在室温下持续24h。出现固体沉淀。用0.2μm离心过滤器过滤悬浮液并获得呈滤饼的晶型M11。当使用350μL的0.1M NaOH将pH调节至pH 7时，使用未过滤的溶液获得相同的结果。
[0402] 实例7ll
[0403] 将约420mg的混合物A1+M4悬浮在1.00mL pH 3缓冲液中并且添加40μL的0.1M NaOH。过滤饱和溶液(0.2μm离心过滤器)并在室温下保持24h，之后通过添加300μL的0.1M NaOH调节至pH 7。出现固体沉淀。用0.2μm离心过滤器过滤悬浮液并获得呈滤饼的晶型M11。当使用350μL的0.1M NaOH将pH调节至pH 7时，使用未过滤的溶液获得相同的结果。
[0404] 晶型M12的制备
[0405] 在约pH 7的不同的浆液实验中从混合物A1+M4观察到晶型M12(图31，表17)。要注意的是，这些实验使用含有替代性反离子的缓冲液。尽管不能完全忽视在多晶型中存在的痕量反离子，但在XRPD衍射图中没有可见的可归因于这些无机物质的衍射峰(无机物通常在高2θ角才清晰可见并且通常是非常尖锐的峰)。
[0406] 实例7mm
[0407] 将约30mg的混合物A1+M4或晶型E悬浮在5.0mL的Merck 缓冲液pH 7(含有磷酸盐)中。初始pH是约6.9。搅拌15min后，将pH用10μL 0.1M NaOH调节至约7.0。将混合物在室温下搅拌24h(包括添加次数)。获得了约pH 7.0的浆液。使用0.45微米盘式过滤器进行过滤。获得呈滤饼的晶型M12。
[0408] 晶型M13的制备
[0409] 在过饱和实验中通过将pH从3改变为5从混合物A1+M4和晶型E中获得了晶型M13(图32，表18)。要注意的是，这些实验使用含有替代性反离子的缓冲液。尽管不能完全忽视在多晶型中存在的痕量反离子，但在XRPD衍射图中没有可见的可归因于这些无机物质的衍射峰(无机物通常在高2θ角才清晰可见并且通常是非常尖锐的峰)。
[0410] 实例7nn
[0411] 将约210mg的晶型E悬浮在1.0mL Merck 缓冲液pH 3(含有柠檬酸盐和HCl)中并且添加20μL 0.1M NaOH。过滤饱和溶液(0.2μm离心过滤器)并在室温下保持24h，之后通过添加约50μL的0.1M NaOH调节至pH 5。出现固体沉淀。用0.2μm离心过滤器过滤悬浮液并获得呈滤饼的晶型M13。当使用70μL的0.1M NaOH将pH调节至pH 5时，使用未过滤的溶液获得相同的结果。
[0412] 实例7oo
[0413] 将约410mg的混合物A1+M4悬浮在1.00mL Merck 缓冲液pH 3(含有柠檬酸盐和HCl)中并且添加40μL 0.1M NaOH。过滤饱和溶液(0.2μm离心过滤器)并在室温下保持24h，之后通过添加60μL的0.1M NaOH调节至pH 5。出现固体沉淀。用0.2μm离心过滤器过滤悬浮液并获得呈滤饼的晶型M13。当使用80μL的0.1M NaOH将pH调节至pH 5时，使用未过滤的溶液获得相同的结果。
[0414] 注意：尽管晶型F和G在上述实例中在A+M系统内在制备一些多晶型时作为中间体形式描述，但溶剂显现在其物理稳定性中起重要作用。根据所使用的溶剂，晶型F和G可以是溶剂化的或无水形式。
[0415] 实例8-具有式I的化合物的结晶二氯化物盐(A+M)的表征
[0416] 实例8a：通过XRPD表征
[0417] 如在实例5a中描绘的进行XRPD分析。这些包括在A+M系统中自然产生的混合物、以及如所述的经分离的特定A或M多晶型的XRPD峰。数据包括了多晶型A0、A1、A2、M1、M2、M3+M5、M4、M5、M8、M9、M10+M4、M11、M12、M13以及常观察的混合物A1+M4、A2+M4和A2+M11。也观察到晶型M6和M7，但仅作为与不是A+M系统的一部分的其他多晶型的混合物。
[0418] 表6.晶型A0的XRPD峰位置的列表。
[0419]
[0420] 表7.晶型A1的XRPD峰位置的列表。
[0421]
[0422] 表8.晶型A2的XRPD峰位置的列表。
[0423]
[0424] 表9.晶型M1的XRPD峰位置的列表。
[0425]
[0426] 表10.晶型M2的XRPD峰位置的列表。
[0427]
[0428] 表11.混合物M3+M5的XRPD峰位置的列表。
[0429]
[0430] 表12.晶型M4的XRPD峰位置的列表。
[0431]
[0432] 表13.晶型M5的XRPD峰位置的列表。
[0433]
[0434] 表14.晶型M8的XRPD峰位置的列表。
[0435]
[0436]
[0437] 表15.晶型M9的XRPD峰位置的列表。
[0438]
[0439] 表16.晶型M11的XRPD峰位置的列表。
[0440]
[0441] 表17.晶型M12的XRPD峰位置的列表。
[0442]
[0443]
[0444] 表18.晶型M13的XRPD峰位置的列表。
[0445]
[0446] 表19.混合物A1+M1的XRPD峰位置的列表。
[0447]
[0448]
[0449] 表20.混合物A1+M4的XRPD峰位置的列表。
[0450]
[0451] 表21.混合物A2+M4的XRPD峰位置的列表。
[0452]
[0453] 表22.混合物A2+M11的XRPD峰位置的列表。
[0454]
[0455] 表23.晶型F的XRPD峰位置的列表。
[0456]
[0457] 表24.晶型G的XRPD峰位置的列表。
[0458]
[0459]
[0460] 实例8b：实验高分辨率X射线粉末衍射(包括可变湿度和变温XRPD实验)
[0461] 对于可变湿度(VH)和变温(VT)实验，使用ANSYCO HT室，安装在用布喇格-布伦塔诺几何(Bragg-Brentano geometry)设计并配备LynxEye固态检测器的D8 Advance系统衍射仪(Bruker[布鲁克公司])内。用于收集数据的辐射是由锗晶体单色化的CuKα1将材料放置在安装于室内的固定样品架上。
[0462] VH-XRPD：湿度局部施加，从10％变化到70％(露点)。在4°-30°(2θ)范围内收集图，VH-XRPD的步阶为0.0145°(2θ)，每步阶测量时间为1.2秒。在每个步阶的湿度稳定后60秒启动数据收集(每个RH值的数据收集时间约40min)。所有图均在室温下采集，约295K。
[0463] VT-XRPD：温度变化率为10℃/min，在每个温度开始数据收集之前的平衡时间为8min。在以下范围收集图：4°-34.5°(2θ)，步阶为0.0107°(2θ)并且每步阶的测量时间为1秒(针对T＝25℃、50℃、80℃、100℃和110℃)或1.5sec(针对T＝40℃、60℃、115℃-180℃)。每个温度的数据收集时间为48min或70min，这取决于每步阶的测量时间。
[0464] 将晶型A1+M4在40℃/75％RH放置于气候室实验4周，然后在25℃/95％RH储存两周。在此研究期间，最初晶型A1+M4在1周后转变为M3+M5，在4周后转变为晶型M5，并且在4周和2天后转变为晶型A2+M4，最后才转变为晶型A2+M11(图19)。
[0465] 实例8c：通过DVS表征
[0466] 有关实验细节，请参见实例5f。图35描绘了具有式I的化合物的二氯化物盐的结晶系统A+M的DVS分析。它示出：高达85％RH的化合物的吸水率为约22％并且高达95％RH的化合物的吸水率为低于约34％。
[0467] 实例8d：溶解度
[0468] 如实例5g针对晶型E所述，测定了晶型A1+M4的热力学pH依赖性溶解度，除了目标pH为1、2、3(两种不同的缓冲液)、4、4.5、5、5.5、6、6.5、7.5、8、9.5、10.5、11.5和12.5。另外使用的缓冲液是Merck 缓冲液pH 1(具有甘氨酸和HCl)；Merck 缓冲液pH 2(具有柠檬酸盐和HCl)；Merck 缓冲液pH 8(具有硼酸盐和HCl)；Merck
缓冲液pH 9(具有硼酸、KCl和NaOH)；Merck 缓冲液pH 10(具有硼酸、
KCl和NaOH)；Merck 缓冲液pH 11(具有硼酸、KCl和NaOH)；Merck 缓冲
液pH 12(具有磷酸盐和NaOH)；Merck 缓冲液pH 13(具有KCl和NaOH)；针对不具有HCl的pH 3的第二缓冲液，将80.3mL的柠檬酸(21.01g一水合柠檬酸在1L去离子水中)与
19.7mL的0.2M磷酸氢二钠(35.6g在1L去离子水中)混合。为了在pH 6.5缓冲，使用pH 6和7的缓冲液的50/50混合物；为了缓冲在pH 7.5，使用pH 7和8的缓冲液的50/50混合物；为了缓冲在pH 9.5，使用pH 9和10的缓冲液的50/50混合物；为了缓冲在pH 10.5，使用pH 10和
11的缓冲液的50/50混合物；为了缓冲在pH 11.5，使用pH 11和12的缓冲液的50/50混合物；
为了缓冲在pH 12.5，使用pH 12和13的缓冲液的50/50混合物。确定了约8ug/mL的LOQ。
缓冲液pH 9(具有硼酸、KCl和NaOH)；Merck 缓冲液pH 10(具有硼酸、
KCl和NaOH)；Merck 缓冲液pH 11(具有硼酸、KCl和NaOH)；Merck 缓冲
液pH 12(具有磷酸盐和NaOH)；Merck 缓冲液pH 13(具有KCl和NaOH)；针对不具有HCl的pH 3的第二缓冲液，将80.3mL的柠檬酸(21.01g一水合柠檬酸在1L去离子水中)与
19.7mL的0.2M磷酸氢二钠(35.6g在1L去离子水中)混合。为了在pH 6.5缓冲，使用pH 6和7的缓冲液的50/50混合物；为了缓冲在pH 7.5，使用pH 7和8的缓冲液的50/50混合物；为了缓冲在pH 9.5，使用pH 9和10的缓冲液的50/50混合物；为了缓冲在pH 10.5，使用pH 10和
11的缓冲液的50/50混合物；为了缓冲在pH 11.5，使用pH 11和12的缓冲液的50/50混合物；
为了缓冲在pH 12.5，使用pH 12和13的缓冲液的50/50混合物。确定了约8ug/mL的LOQ。
[0469] 对晶型A2+M11的热力学pH依赖性溶解度如实例5g针对晶型E所述(除了确定18μg/mL的LOQ)进行测定。
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